【課題】糖尿病、癌、炎症、神経変性障害および感染等のＰＰＡＲ調節に依存する疾患または状態の治療における、２，４−ジフェニル−１，３−ジオキサンの使用を提供すること。
【解決手段】１，３−ジオキサン誘導体、ならびに糖尿病、癌、炎症、神経変性障害および感染等のＰＰＡＲ調節に依存する疾患または状態の治療におけるそれらの使用が記載される。本発明はまた、ＰＰＡＲ−γ活性の調節に反応性のある疾患または状態、具体的には本明細書中で後述されるＰＰＡＲ−γ反応性疾患または状態のいずれかの治療のための薬物の調製のための、上記で定義されるような化合物の使用に関する。

【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、糖尿病、癌、炎症、神経変性障害および感染等のＰＰＡＲ調節に依存する疾患または状態の治療における、２，４−ジフェニル−１，３−ジオキサンの使用を対象とする。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）は、核内ホルモン受容体である。ＰＰＡＲ受容体は、レチノイドＸ受容体（ＲＸＲとして公知）とのヘテロ二量体の形態でペルオキシソーム増殖因子応答エレメント（ＰＰＲＥ）として公知のＤＮＡ配列の要素に結合することによって、転写を活性化する。３つのサブタイプのヒトＰＰＡＲが同定および記載されている：ＰＰＡＲ−α、ＰＰＡＲ−γおよびＰＰＡＲ−δ（またはＮＵＣＩ）。ＰＰＡＲ−αは主に肝臓中で発現されるが、ＰＰＡＲ−δは遍在する。ＰＰＡＲ−γは、脂肪細胞の分化の制御に関与しており、そこで高度に発現される。これはまた、全身性の脂質恒常性において重要な役割を有する。糖尿病の治療において使用されているチアゾリジンジオンを含んで、ＰＰＡＲの活性を調節する多数の化合物もまた、同定されている。
【０００３】
ＰＰＡＲ−γサブタイプのＤＮＡ配列は、Ｅｌｂｒｅｃｈｔら、ＢＢＲＣ ２２４、４３１−４３７（１９９６）に記載されている。フィブラートおよび脂肪酸を含むペルオキシソーム増殖因子は、ＰＰＡＲの転写活性を活性化する。
【０００４】
ＰＰＡＲが、これらの核内受容体を発現している細胞に関連した多様な疾患または病的状態に密接に関与していることを説明する文献中で、多数の例が提供されている。より具体的には、ＰＰＡＲは、血中のグルコース、コレステロールおよびトリグリセリドレベルを減少させるための方法における薬物標的として有用であり、したがって、インスリン抵抗性、脂質異常症、ならびに肥満およびアテローム性動脈硬化症（Ｄｕｅｚら、２００１年、Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｒｉｓｋ、８、１８５−１８６）、冠動脈疾患およびある種の他の心血管障害を含むシンドロームＸ（「メタボリックシンドロームとも命名されている）（国際公開第９７／２５０４２号、国際公開第９７／１０８１３号、国際公開第９７／２８１４９号、Ｋａｐｌａｎら、２００１年、Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ Ｒｉｓｋ、８、２１１−７も参照のこと）に関連した他の障害の、治療および／または予防のために使用されている。さらに、ＰＰＡＲは、皮膚病（Ｓｍｉｔｈら、２００１年、Ｊ．Ｃｕｔａｎ．Ｍｅｄ．Ｓｕｒｇ．、５、２３１−４３参照）、胃腸疾患（国際公開第９８／４３０８１号）、または糸球体腎炎、糸球体硬化症、ネフローゼ症候群および高血圧性腎硬化症を含む腎疾患等の、ある種の炎症性疾患の治療のための潜在的な標的であると示されている。同様に、ＰＰＡＲは、神経系疾患（ＬａｎｄｒｅｔｈおよびＨｅｎｅｋａ、２００１年、Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ Ａｇｉｎｇ、２２、９３７−４４）もしくは認知症において認知機能を向上させるため、乾癬、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）を治療するため、または骨量減少、例えば骨粗鬆症を予防および治療するために、有用である（例えば、米国特許第５９８１５８６号または米国特許第６２９１４９６号参照）。
【０００５】
したがって、ＰＰＡＲは、治療用化合物の開発のための、興味深い標的である。疾患または病的状態を治療および／または予防するための種々の方法の状況において観察される反応が奨励されているが（例えば、チアゾリジンジオン（ＴＺＤ）クラスの薬物療法、例えば、トログリタゾン、ロシグリタゾンまたはピオグリタゾンは、明らかに、２型糖尿病の患者において、インスリン感受性の向上において重要な役割を果たし；Ｃｈｅｎｇ ｌａｉおよびＬｅｖｉｎｅ、２０００年、Ｈｅａｒｔ Ｄｉｓ．、２、３２６−３３３参照）、それらは、多数の深刻な望ましくない副作用の発生のために（例えば、体重増加、高血圧、心肥大、血液希釈、肝毒性および浮腫；Ｈａｓｋｉｎｓら、２００１年、Ａｒｃｈ Ｔｏｘｉｃｏｌ．、７５、４２５−４３８、Ｙａｍａｍｏｔｏら、２００１年、Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ．、７０、４７１−４８２、Ｓｃｈｅｅｎ、２００１年、Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｍｅｔａｂ．、２７、３０５−３１３、Ｇａｌｅ、２００１年、Ｌａｎｃｅｔ、３５７、１８７０−１８７５、Ｆｏｒｍａｎら、２０００年、Ａｎｎ．Ｉｎｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．、１３２、１１８−１２１ならびにＡｌ Ｓａｌｍａｎら、２０００年、Ａｎｎ．Ｉｎｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．、１３２、１２１−１２４参照）、完全に満足できる治療ではない。結果として、ＰＰＡＲ核内受容体を発現する細胞型と関連した疾患または病的状態の治療および／または予防を可能にする、新規な改良された生成物および／または新規な方法を同定することが望ましい。より具体的には、ＴＺＤ誘導体で見られる副作用のほとんどは前記化合物の完全アゴニスト特性に起因し、したがって、必ずしも完全アゴニストでない新しい化合物を同定することが望ましい。
ある種の４−フェニル−１，３−ジオキサン−５−イルアルケノン酸誘導体は、トロンボキサン受容体アンタゴニストまたはトロンボキサンＡ２合成の阻害剤として記載されている。トロンボキサン受容体は、効力のある血小板の凝集因子であり、血管収縮、ならびに気管支および気管平滑筋収縮に関わってきた（例えば、特許文献１、特許文献２および特許文献３参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】欧州特許出願公開第９４２３９号明細書
【特許文献２】欧州特許出願公開第０２６６９８０号明細書
【特許文献３】米国特許第４８９５９６２号明細書
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
発明の要旨
本発明のある態様は、１，３−ジオキサン誘導体、またはその薬学的に許容され得る塩の治療有効量を投与することを含む、個体においてＰＰＡＲの活性を調節するための方法に関し、誘導体は式：
【０００８】
【化４】

【０００９】
によって表され、
式中：
Ａは２つまでの二重結合を有する、３〜７個の炭素の分枝または直鎖状炭素鎖であり；
ＷはＣＯＯＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＯＳＯ_３Ｈ、またはそれぞれ場合によりＣＯＯＨ、ＯＨもしくはＮＨ_２で置換されている、フェニル、１−もしくは２−ナフチル、ピリジン、フラン、２−メチルピリジンおよびジオキソランからなる群より選択される芳香族基であり；
Ａｒはフェニル、または置換もしくは非置換２−ピリジン、３−ピリジン、チオフェン、フラン、１−ナフチル、２−ナフチル、ビフェニルおよび（４−メトキシフェノキシ）−フェニルから選択される５もしくは６員の複素環式芳香族基であり；
ＲａおよびＲｂは、独立して、水素、２〜６Ｃアルケニル、場合により３つまでのハロゲノ置換基を有する１〜８Ｃアルキル、ペンタフルオロフェニル、アリールもしくはアリール（１〜４Ｃ）アルキルであり、前記アリールもしくはアリール（１〜４Ｃ）アルキル置換基は、場合によりハロゲノ、（１〜６Ｃ）アルキル、分枝もしくは直鎖状（１〜６Ｃ）アルコキシ、（１〜４Ｃ）アルキレンジオキシ、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、（２〜６Ｃ）アルカノイルオキシ、（１〜６Ｃ）アルキルチオ、（１〜６Ｃ）アルカンスルホニル、（１〜６Ｃ）アルカノイルアミノおよび２〜４個の炭素原子のオキサポリメチレンで置換されているか、または、ＲａおよびＲｂは、場合により１または２個の（１〜４Ｃ）アルキル置換基を有する２〜７個の炭素原子のポリメチレンをともに形成する。
【００１０】
２，４−ジフェニル−１，３−ジオキサン誘導体またはその薬学的に許容され得る塩を投与することによって、ＰＰＡＲ反応性疾患または状態を治療するための方法もまた、提供され、誘導体は、式ＩＩ：
【００１１】
【化５】

【００１２】
によって表され、
式中Ｘは、フルオロ、クロロ、ブロモ、トリフルオロメチル、場合により置換されたフェニル、シアノ、メトキシおよびニトロから選択されるか、またはフェニル−Ｘ基は、場合により置換されたクロメン誘導体でもよく；ＹおよびＺは、それぞれ水素またはハロゲノである。
【００１３】
１，３−ジオキサン誘導体、それらの薬学的に許容され得る塩、および式：
【００１４】
【化６】

【００１５】
によって表される誘導体を含む薬学的組成物もまた、本発明によって提供され、
式中：
Ａは２つまでの二重結合を有する３〜７個の炭素の分枝または直鎖状炭素鎖であり；
ＷはＣＯＯＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＯＳＯ_３Ｈ、またはそれぞれ場合によりＣＯＯＨ、ＯＨもしくはＮＨ_２で置換されているフェニル、１−もしくは２−ナフチル、ピリジン、フラン、２−メチルピリジンおよびジオキソランからなる群より選択される芳香族基であり；
Ａｒはフェニル、または置換もしくは非置換２−ピリジン、３−ピリジン、チオフェン、フラン、１−ナフチル、２−ナフチル、ビフェニルおよび（４−メトキシフェノキシ）−フェニルから選択される５もしくは６員の複素環式芳香族基であり；
ＲａはＨであり、Ｒｂは場合によりハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｏ−アリール、アミノまたはＮ−モノアルキルもしくはＮ−ジアルキルまたはＮ−モノアリールもしくはＮ−ジアリール、ニトロ、チオアルキルまたはオキソからなる群より選択される３つの異なる置換基で置換されている、アリール基または複素環である。具体的な目的の化合物は、４（Ｚ）−６−（２−［４−メトキシフェノキシ−ｏ−フェニル］−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキセン酸および４（Ｚ）−６−（２−３−［６−クロロ−４Ｈ−クロメン−４−オン］−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキセン酸、またはＲｂがビフェニルである化合物である。
【００１６】
本発明はまた、ＰＰＡＲ−γ活性の調節に反応性のある疾患または状態、具体的には本明細書中で後述されるＰＰＡＲ−γ反応性疾患または状態のいずれかの治療のための薬物の調製のための、上記で定義されるような化合物の使用に関する。
【００１７】
化合物は、メタボリックシンドローム、肥満、インスリン抵抗性、糖尿病前症、糖尿病、脂質異常症、多発性硬化症、乾癬、アトピー性皮膚炎、喘息および潰瘍性大腸炎等の自己免疫疾患、脂肪肉腫、神経芽細胞腫、膀胱癌、乳癌、結腸癌、肺癌、膵癌および前立腺癌等の癌、炎症、感染、ＡＩＤＳおよび創傷治癒を含む多数の臨床状態の治療または予防のための薬物の調製において有用である。
例えば、本発明は、以下の項目を提供する。
（項目１）
１，３−ジオキサン誘導体、またはその薬学的に許容され得る塩の治療有効量を個体に投与することを含む、個体においてペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）の活性を調節するための方法であって、
前記誘導体は式：
【化１】


によって表され、
式中：
Ａは２つまでの二重結合を有する、３〜７個の炭素の分枝または直鎖状炭素鎖であり；
ＷはＣＯＯＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＯＳＯ_３Ｈ、またはそれぞれ場合によりＣＯＯＨ、ＯＨもしくはＮＨ_２で置換されている、フェニル、１−もしくは２−ナフチル、ピリジン、フラン、２−メチルピリジンおよびジオキソランからなる群より選択される芳香族基であり；
Ａｒはフェニル、または置換もしくは非置換２−ピリジン、３−ピリジン、チオフェン、フラン、１−ナフチル、２−ナフチル、ビフェニルおよび（４−メトキシフェノキシ）−フェニルから選択される５もしくは６員の複素環式芳香族基であり；
ＲａおよびＲｂは、独立して、水素、２〜６Ｃアルケニル、場合により３つまでのハロゲノ置換基を有する１〜８Ｃアルキル、ペンタフルオロフェニル、アリールもしくはアリール（１〜４Ｃ）アルキルであり、前記アリールもしくはアリール（１〜４Ｃ）アルキル置換基は、場合によりハロゲノ、（１〜６Ｃ）アルキル、分枝もしくは直鎖状（１〜６Ｃ）アルコキシ、（１〜４Ｃ）アルキレンジオキシ、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、（２〜６Ｃ）アルカノイルオキシ、（１〜６Ｃ）アルキルチオ、（１〜６Ｃ）アルカンスルホニル、（１〜６Ｃ）アルカノイルアミノおよび２〜４個の炭素原子のオキサポリメチレンで置換されているか、または、ＲａおよびＲｂは、場合により１または２個の（１〜４Ｃ）アルキル置換基を有する２〜７個の炭素原子のポリメチレンをともに形成する、方法。
（項目２）
Ａが３〜７個の炭素の直鎖状炭素鎖であり、ＷがＣＯＯＨである、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記炭素鎖がＣ２−Ｃ３またはＣ３−Ｃ４の間の二重結合を含む、項目２に記載の方法。
（項目４）
Ａｒが２−ＯＨまたは２−ＯＭｅ置換フェニルまたはナフチル基である、項目１〜３のいずれか一項に記載の方法。
（項目５）
ＲａがＨであり、Ｒｂが、それぞれ場合によりハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、アミノ、Ｎ−モノアルキル、Ｎ−ジアルキル、ニトロアルキルまたはチオアルキルで置換されているフェニル、ベンジル、２−または３−または４−ピリジン、フラン、ビフェニル１−ナフチルおよび２−ナフチルからなる群より選択されるアリール基である、項目１〜４のいずれか一項に記載の方法。
（項目６）
前記化合物が、２，４−ジフェニル−１，３−ジオキサン誘導体またはその薬学的に許容され得る塩であり、前記誘導体は式ＩＩ：
【化２】


によって表され、
式中Ｘは、フルオロ、クロロ、ブロモ、トリフルオロメチル、場合により置換されたフェニル、シアノ、メトキシおよびニトロから選択されるか、またはフェニル−Ｘ基は、場合により置換されたクロメン誘導体でもよく；ＹおよびＺは、それぞれ水素またはハロゲノである、項目１に記載の方法。
（項目７）
式ＩＩによって表される前記誘導体中のジオキサン環の２、４および５位の基がシス−相対立体化学を有する、項目５に記載の方法。
（項目８）
Ｘが２−フルオロ、２−クロロ、２−ブロモ、２−シアノ、２−トリフルオロメチル、３−フルオロ、３−クロロ、３−シアノ、３−ニトロ、３−メトキシ、４−クロロ、４−シアノ、４−ニトロおよび４−メトキシから選択され；Ｙが水素またはフルオロであり；Ｚが水素である、項目５または６に記載の方法。
（項目９）
Ｘが２−クロロ、３−クロロ、２−シアノ、４−シアノ、３−ニトロおよび４−ニトロから選択され；ＹおよびＺが水素である、項目７に記載の方法。
（項目１０）
前記誘導体が４（Ｚ）−６−（２−ｏ−クロロフェニル−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキセン酸またはその薬学的に許容され得る塩である、項目８に記載の方法。
（項目１１）
Ａが２つまでの二重結合を有する３〜７個の炭素の分枝または直鎖状炭素鎖であり、
ＷがＣＯＯＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＯＳＯ_３Ｈ、またはそれぞれ場合によりＣＯＯＨ、ＯＨもしくはＮＨ_２で置換されているフェニル、１−もしくは２−ナフチル、ピリジン、フラン、２−メチルピリジンおよびジオキソランからなる群より選択される芳香族基であり；
Ａｒがフェニル、または置換もしくは非置換２−ピリジン、３−ピリジン、チオフェン、フラン、１−ナフチル、２−ナフチル、ビフェニルおよび（４−メトキシフェノキシ）−フェニルから選択される５もしくは６員の複素環式芳香族基であり；
ＲａがＨであり、Ｒｂがアリール基、または場合によりハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｏ−アリール、アミノもしくはＮ−モノアルキルもしくはＮ−ジアルキルもしくはＮ−モノアリールもしくはＮ−ジアリール、ニトロ、チオアルキルもしくはオキソからなる群より選択される３つの異なる置換基で置換されている複素環である、
項目１に記載の方法。
（項目１２）
Ａが１つの二重結合を有する５炭素直鎖状鎖であり、ＷがＣＯＯＨであり、Ａｒがｏ−位でＯＨまたはＯＭｅによって置換されているフェニルであり、Ｒｂが複素環、またはＯ−アリールで置換されているフェニル基である、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
前記誘導体が、４（Ｚ）−６−（２−［４−メトキシフェノキシ−ｏ−フェニル］−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキセン酸またはその薬学的に許容され得る塩である、項目１１に記載の方法。
（項目１４）
前記誘導体が、４（Ｚ）−６−（２−３−［６−クロロ−４Ｈ−クロメン−４−オン］−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキセン酸またはその薬学的に許容され得る塩である、項目１１に記載の誘導体。
（項目１５）
前記誘導体が、アルカリ金属およびアルカリ土類金属塩、アルミニウムおよびアンモニウム塩、ならびに生理学的に許容され得る陽イオンを形成する有機アミンおよび第四級塩基の塩から選択される薬学的に許容され得る塩として存在する、前記項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目１６）
前記方法が、ＰＰＡＲ−γ反応性疾患または状態の予防または治療のためである、項目１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
（項目１７）
前記疾患または状態がインスリン抵抗性である、項目１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
（項目１８）
前記疾患または状態が糖尿病である、項目１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
（項目１９）
前記疾患または状態が、肥満の個体における糖尿病である、項目１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
（項目２０）
前記疾患または状態が、ＰＰＡＲ−γによって媒介される慢性炎症性障害である、項目１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
（項目２１）
前記疾患または状態が炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎またはクローン病である、項目１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
（項目２２）
前記疾患または状態が関節炎、特に関節リウマチ、多発性関節炎および喘息である、項目１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
（項目２３）
前記疾患が眼の炎症または眼乾燥疾患である、項目１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
（項目２４）
前記疾患が皮膚障害、特に乾癬である、項目１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
（項目２５）
前記疾患が高脂血症である、項目１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
（項目２６）
前記疾患または状態が癌である、項目１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
（項目２７）
前記癌が脂肪肉腫、前立腺癌、子宮頸癌、乳癌、多発性骨髄腫、膵癌、神経芽細胞腫または膀胱癌である、項目１〜２６のいずれか一項に記載の方法。
（項目２８）
ＰＰＡＲ媒介性疾患または状態である対象における臨床状態を治療または予防するために有用な薬物組成物を調製するための、項目１〜１４のいずれか一項において定義される化合物の使用。
（項目２９）
糖尿病、癌、炎症、ＡＩＤＳ、メタボリックシンドローム、肥満、糖尿病前症、高血圧および脂質異常症からなる群より選択される臨床状態の治療または予防のための薬物の調製のための、項目２８に記載の化合物の使用。
（項目３０）
１，３−ジオキサン誘導体またはその薬学的に許容され得る塩であって、前記誘導体が式：
【化３】


によって表され、
式中：
Ａは２つまでの二重結合を有する３〜７個の炭素の分枝または直鎖状炭素鎖であり；
ＷはＣＯＯＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＯＳＯ_３Ｈ、またはそれぞれ場合によりＣＯＯＨ、ＯＨもしくはＮＨ_２で置換されているフェニル、１−もしくは２−ナフチル、ピリジン、フラン、２−メチルピリジンおよびジオキソランからなる群より選択される芳香族基であり；
Ａｒはフェニル、または置換もしくは非置換２−ピリジン、３−ピリジン、チオフェン、フラン、１−ナフチル、２−ナフチル、ビフェニルおよび（４−メトキシフェノキシ）−フェニルから選択される５もしくは６員の複素環式芳香族基であり；
ＲａはＨであり、Ｒｂは、アリール基、または場合によりハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｏ−アリール、アミノまたはＮ−モノアルキルもしくはＮ−ジアルキルもしくはＮ−モノアリールもしくはＮ−ジアリール、ニトロ、チオアルキルもしくはオキソからなる群より選択される３つの異なる置換基で置換されている複素環である、誘導体。
（項目３１）
Ａが１つの二重結合を有する５炭素直鎖状鎖であり、ＷがＣＯＯＨであり、Ａｒがｏ−位でＯＨまたはＯＭｅによって置換されているフェニルであり、Ｒｂが、Ｏ−アリールで置換されている複素環またはフェニルである、項目３０に記載の誘導体。
（項目３２）
Ｒｂが（４−メトキシフェノキシ）−フェニルである、項目３１に記載の誘導体。
（項目３３）
前記誘導体が、４（Ｚ）−６−（２−［４−メトキシフェノキシ−ｏ−フェニル］−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキセン酸である、項目３２に記載の誘導体。
（項目３４）
Ｒｂが６−クロロ−４Ｈ−クロメン−４−オンである、項目３１に記載の誘導体。
（項目３５）
前記誘導体が、４（Ｚ）−６−（２−３−［６−クロロ−４Ｈ−クロメン−４−オン］−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキセン酸である、項目３４に記載の誘導体。
（項目３６）
Ｒｂがビフェニルである、項目３１に記載の誘導体。
（項目３７）
項目３０〜項目３６の誘導体の１つ以上を含む、医薬組成物。
（項目３８）
さらなる医薬成分を含む、項目３７に記載の医薬組成物。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】図１は、それぞれ完全アゴニストおよび部分アゴニストのＰＰＡＲ活性化のモデルを説明する。
【図２】図２は、ＰＰＡＲ−δ、ＰＰＡＲαおよびＲｘＲと比較した、ロシグリタゾンおよび４（Ｚ）−６−（２−ｏ−クロロフェニル−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキセン酸によるＰＰＡＲ−γの選択的活性化を説明する。
【図３】図３は、ロシグリタゾンおよび４（Ｚ）−６−（２−ｏ−クロロフェニル−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキセン酸による、全長ＰＰＡＲ−γの活性化を説明する。
【図４】図４は、４（Ｚ）−６−（２−ｏ−クロロフェニル−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキセン酸が全長ＰＰＡＲδトランス活性化に対して効果を有さないことを説明する。
【図５】図５は、部分ＰＰＡＲγ競合アッセイの結果を説明する。
【図６】図６は、ＰＰＡＲγリガンド置換アッセイの結果を説明する。
【図７】図７は、グルコース取り込みアッセイの結果を説明する。
【図８】図８は、化学式ＩＩ〜Ｖを説明する。
【図９】図９は、化学式ＶＩ〜ＶＩＩＩを説明する。
【図１０】図１０は、化学反応スキームＩを説明する。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
定義
一般に、本明細書中で使用される用語は、本発明の理解において薬学、生物学および化学分野の当業者が採用する、それらの標準的な定義を有する。以下の用語は、示される意味を有し、他の用語が本明細書中で提供される場合がある。
アルキル：用語「アルキル」は、一般に１〜２２個の、示された数の炭素原子を有する、一価の飽和脂肪族炭化水素ラジカルをいう。例えば、「１〜８Ｃアルキル」または「１〜８個の炭素のアルキル」または「Ａｌｋ１〜８」は、構造中に１〜８個の炭素を含む任意のアルキル基をいう。アルキルは、直鎖（すなわち直鎖状）または分枝鎖であってもよい。低級アルキルは、１〜６個の炭素のアルキルをいう。低級アルキルラジカルのそれぞれの例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソプロピル、イソブチル、イソペンチル、アミル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｓｅｃ−アミル、ｔｅｒｔ−ペンチル、２−エチルブチル、２，３−ジメチルブチル等が挙げられる。高級アルキルは、７つ以上の炭素のアルキルをいう。これらのものとしては、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシル、ｎ−ドデシル、ｎ−テトラデシル、ｎ−ヘキサデシル、ｎ−オクタデシル、ｎ−エイコシル等とともに、それらの分枝のバリエーションが挙げられる。３〜７個の炭素の直鎖状炭素鎖は鎖長をいい、枝上にあるいかなる炭素も含まない。ラジカルは、場合により置換されていてもよい。
【００２０】
アルケニル：用語「アルケニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有し、示された数の炭素原子を有する、一価の脂肪族炭化水素ラジカルをいう。例えば、「Ｃ２〜６アルケニル」または「１〜６個の炭素のアルケニル」、または「アルケニル１〜６」は、構造中に１〜６個の炭素原子を含むアルケニル基をいう。アルケニルは、直鎖（すなわち、直鎖状）または分枝鎖であってもよい。低級アルケニルは、１〜６個の炭素のアルケニルをいう。低級アルケニルラジカルのそれぞれの例としては、エテニル、１−プロペニル、１−ブテニル、１−ペンテニル、１−ヘキセニル、イソプロペニル、イソブテニル等が挙げられる。高級アルケニルは、７つ以上の炭素のアルケニルをいう。これらのものとしては、１−ヘプテニル、１−オクテニル、１−ノネニル、１−デセニル、１−ドデセニル、１−テトラデセニル、１−ヘキサデセニル、１−オクタデセニル、１−エイコセニル等とともに、それらの分枝のバリエーションが挙げられる。ラジカルは、場合により置換されていてもよい。
【００２１】
アルコキシ：用語「アルコキシ」は、Ｒが本明細書中で定義されるようなアルキルである、式ＲＯ−の一価のラジカルをいう。低級アルコキシは、１〜６個の炭素原子のアルコキシまたは（１〜６）アルコキシをいう。それぞれの低級アルコキシラジカルとしては、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｎ−ペンチルオキシ、ｎ−ヘキシルオキシ、イソプロポキシ、イソブトキシ、イソペンチルオキシ、アミルオキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ペンチルオキシ等が挙げられる。ラジカルは、場合により置換されていてもよい。
【００２２】
アリール：用語「アリール」は、本明細書中で使用される場合、場合により、他に示されない限りは、ヒドロキシ、チオ、シアノ、アルキル、アルコキシ、低級ハロアルコキシ、アルキルチオ、オキソ、ハロゲン、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、ニトロ、アルコキシカルボニル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、およびジアルキルアミノアルキル、チオアルキル、アルキルスルホニル、アリールスルフィニル、アルキルアミノスルホニル、アリールアミノスルホニル、アルキルスルホニルアミノ、アリールスルホニルアミノ、カルバモイル、アルキルカルバモイルおよびジアルキルカルバモイル、アリールカルバモイル、アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノから選択される独立して選択される１つ以上の、好ましくは１または３個の置換基で置換されていてもよい、１つの個々の環、または少なくとも１つの環が天然に芳香族である１つ以上の縮合環からなる、５〜１５個の炭素原子を含む一価の芳香族炭素環ラジカルを示す。あるいは、アリール環の２つの隣接する原子は、メチレンジオキシまたはエチレンジオキシ基で置換されていてもよい。したがって、二環式アリール置換基は、複素環式またはヘテロアリール環に縮合していてもよい。しかしながら、二環式アリール置換基の付着点は、炭素環芳香環上にある。アリールラジカルの例としては、フェニル、ナフチル、ベンジル、ビフェニル、フラニル、ピリジニル、インダニル、アントラキノリル、テトラヒドロナフチル、３，４−メチレンジオキシフェニル、１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−７−イル、１，３ジオキソランラジカル、安息香酸ラジカル、、フラン−２−カルボン酸ラジカル、２−（イソキサゾール−５−イル）酢酸ラジカル、３−ヒドロキシ−２−メチルピリジン−４−カルボン酸ラジカル等が挙げられる。
【００２３】
ハロ：「ハロ」置換基は、クロロ、ブロモ、ヨード、およびフルオロから選択される、一価のハロゲンラジカルである。「ハロゲン化」化合物は、１つ以上のハロ置換基で置換されたものである。
【００２４】
フェニル：「フェニル」は、ベンゼン環からの水素の除去によって形成されたラジカルである。フェニルは、場合により置換されていてもよい。
【００２５】
フェノキシ：「フェノキシ」基は、式ＲＯ−のラジカルであり、式中Ｒはフェニルラジカルである。
【００２６】
ベンジル：「ベンジル」基は、式Ｒ−ＣＨ_２−のラジカルであり、式中Ｒはフェニルラジカルである。
【００２７】
ベンジルオキシ：「ベンジルオキシ」基は、式ＲＯ−のラジカルであり、式中Ｒはベンジルラジカルである。
【００２８】
複素環：「複素環」または「複素環式実体」は、炭素および少なくとも１つの他の元素、一般に窒素、酸素、または硫黄を含む、５または６員閉環の一価のラジカルであり、完全に飽和されているか、部分的に飽和されているか、または不飽和（すなわち、天然に芳香族）でもよい。一般に、複素環は、わずか２つのヘテロ原子を含む。１つのヘテロ原子しか有さない不飽和５員複素環のそれぞれの代表的な例としては、２−または３−ピロリル、２−または３−フラニル、および２−または３−チオフェニルが挙げられる。対応する、部分的に飽和された、または完全に飽和されたラジカルとしては、３−ピロリン−２−イル、２−または３−ピロリンジニル、２−または３−テトラヒドロフラニル、および２−または３−テトラヒドロチオフェニルが挙げられる。２つのヘテロ原子を有するそれぞれの不飽和５員複素環ラジカルの代表としては、イミダゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル等が挙げられる。対応する、完全に飽和された、および部分的に飽和されたラジカルもまた、含まれる。１つのヘテロ原子しか有さない不飽和６員複素環のそれぞれの代表的な例としては、２−、３−、または４−ピリジニル、２Ｈ−ピラニル、および４Ｈ−ピラニルが挙げられる。対応する、部分的に飽和された、または完全に飽和されたラジカルとしては、２−、３−、または４−ピペリジニル、２−、３−、または４−テトラヒドロピラニル等が挙げられる。２つのヘテロ原子を有するそれぞれの不飽和６員複素環ラジカルの代表としては、３−または４−ピリダジニル、２−、４−、または５−ピリミジニル、２−ピラジニル、モルホリノ等が挙げられる。対応する、完全に飽和された、および部分的に飽和されたラジカルもまた含まれ、例えば２−ピペラジンである。複素環式ラジカルは、複素環中の利用可能な炭素原子もしくはヘテロ原子を通じて実体に直接結合しているか、または、メチレンもしくはエチレン等のアルキレン等のリンカーを通じて結合している。複素環は、場合により、アリール基と同じ様式で置換されていてもよい。
【００２９】
場合により置換され：ラジカルが、「場合により置換され」という場合、これは、ラジカルが非置換であるか、またはラジカルの少なくとも１つの−Ｈが除去されており、別の置換基がその場所に挿入されていることを意味する。ラジカルは、場合により、本発明の範囲内に含まれる化合物の調製を有意に妨げず、化合物の生物学的活性に有意に悪影響を与えない位置で、置換基で置換されていてもよい。ラジカルは、場合により、ハロ、低級アルコキシ、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロ低級アルキル、ハロ低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、および低級アルキルカルボニルアミノからなる群より独立して選択されるか、または本明細書中で上述された、１、２、３、４または５個の置換基で置換されていてもよい。
【００３０】
用語「ヒドロキシカルボニル」は、式−Ｃ（Ｏ）ＯＨを有する一価のラジカルである。
【００３１】
用語「低級アルコキシカルボニル」は、式−Ｃ（Ｏ）ＯＡｌｋを有する一価のラジカルであり、ここでＡｌｋは低級アルキルである。
【００３２】
用語「低級アルキルカルボキシルオキシ」は、式−ＯＣ（Ｏ）Ａｌｋの一価のラジカルであり、ここでＡｌｋは低級アルキルである。
【００３３】
本明細書中で使用される場合、「糖」は、単糖、二糖または多糖を意味する。適した単糖としては、ペントース、ヘキソース、またはヘプトース残基が挙げられる。ペントースの非限定的な例としては、アラビノース、リボース、リブロース、キシロース、リキソース、およびキシルロースが挙げられる。ヘキソースの非限定的な例としては、グルコース、ガラクトース、フルクトース、フコース、マンノース、アロース、アルトロース、タロース、イドース、プシコース、ソルボース、およびタガトースが挙げられる。ヘプトースの非限定的な例としては、マンノヘプツロースおよびセドヘプツロースが挙げられる。糖部分は、アミドまたはエステル結合を形成することができる糖環の任意の位置で化合物に連結されていてもよい。好ましい糖類は、β−グリコシル糖類である。
【００３４】
ＰＰＡＲ調節は、天然の状態、すなわち、リガンドなしでの標的遺伝子のＰＰＡＲ依存的転写の基礎レベルを参考にして定義され、ここで、ＰＰＡＲ活性の調節は、ＰＰＡＲ活性を調節することができる化合物の存在下での前記転写の基礎レベルの減少または増大に反映される。一般に、前記転写の増大は、ＰＰＡＲ活性の増強と関連があり、活性化因子またはアゴニストという名前の化合物に関する。反対に、前記転写の減少は、ＰＰＡＲ活性の阻害と関連があり、阻害剤またはアンタゴニストという名前の化合物に関する。部分アゴニストは、標的遺伝子のサブセットのＰＰＡＲ依存的転写を生じるが、他のＰＰＡＲ標的遺伝子に影響を及ぼさない化合物である。部分アゴニストは、生化学的または生理学的観点から見ることができる。部分アゴニストの生化学的見識は、完全アゴニストと競合することができ、完全アゴニストと比べて低いレベルのトランス活性化を有する化合物である。部分アゴニストの生理学的見識は、異なるサブセットの遺伝子の活性化に関する（いくつかの標的遺伝子の完全な活性化があっても、他のＰＰＡＲ標的遺伝子の活性化はなし）。これは、完全アゴニストの生理学的効果のいくつかのみを生じ、これは大いに望ましい。
【００３５】
化合物の「治療有効量」は、それを必要とする対象に投与したときに、治療される状態に対して、経時的に所望の結果を生じる量を意味する。本願において、所望の効果はＰＰＡＲ調節、およびそれと関連する生物学的活性である。
【００３６】
本発明において有用な化合物は、本願中で種々の式によって示される。式を見ることによって、化合物が、しばしばキラル中心、すなわち４つの異なる基が付着している炭素を有し、これらが鏡像異性体として存在する場合があることが明らかであろう。また、いくつかの場合における二重結合の存在によって、化合物は、回転障害を有する。したがって、化合物は幾何異性を示し、すなわち、空間中で原子が方向付けされる様式で、２つの形態は互いに異なる場合がある。二重結合に関して、互いに鏡像でない立体異性体が存在し、ジアステレオマーと呼ばれる。本願中の化合物の命名において、Ｒ，Ｓシステムにおける鏡像異性体の命名において行われるように、二重結合の各末端に付着した２つの基が優先順位番号を提供される化学情報検索サービス機関システムが用いられる。より高い優先順位番号の２つの基が同じ側にある場合、分子はＺ異性体である。（ドイツ語−ｚｕｓａｍｍｅｎ、ともに）。反対の側にある場合、分子はＥである。（ドイツ語−ｅｎｔｇｅｇｅｎ、反対）。式は、単独であれ混合物中であれ、可能性のある鏡像異性体およびジアステレオマーの全てを包含するよう意図されることが、理解されるべきである。
【００３７】
本発明において有用な化合物
本発明は、部分的に、ある種の化合物が少なくとも１つのＰＰＡＲサブタイプ、例えばＰＰＡＲγまたはＰＰＡＲβ／δの活性を調節することができるという発見に基づく。この発見は、かかるＰＰＡＲの機能によって媒介されるヒト等の哺乳動物における状態または疾患を治療するための、これらの化合物の使用につながる。
【００３８】
本発明において有用な化合物は、１，３−ジオキサン誘導体またはその薬学的に許容され得る塩であり、ここで誘導体は、式Ｉ：
【００３９】
【化７】

【００４０】
によって表され、
式中：
Ａは、場合により１または２個の二重結合を含む（それぞれはシスでもトランスでもよい）、３〜７個の炭素の分枝または直鎖状炭素鎖であり、
Ｗは、ＣＯＯＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＯＳＯ_３Ｈ、場合により例えばＣＯＯＨ、ＯＨまたはＮＨ_２で置換されている、フェニル、１−もしくは２−ナフチル、ピリジン、フラン、２−メチルピリジン等の、しかしこれらに限定されない芳香族基；または２位を通して連結された１，３ジオキソラン基であり、
Ａｒは、フェニル、または２−ピリジン、３−ピリジン、チオフェン、フラン、１−ナフチル、２−ナフチル、ビフェニルおよび（４−メトキシフェノキシ）−フェニル等の、しかしこれらに限定されない５または６員の複素環式芳香族基であり、フェニルおよびナフチル部分は場合により、オルト、メタおよび／もしくはパラ位でＯＨまたはＯＭｅで置換されているが、好ましくは、置換されている場合、オルト位においてＯＨまたはＯＭｅで一置換されており、
ＲａおよびＲｂは、独立して、水素、２〜６Ｃアルケニル、場合により３つまでのハロゲノ置換基を有する１〜８Ｃアルキル、ペンタフルオロフェニル、アリールもしくはアリール（１〜４Ｃ）アルキルであり、その最後の２つは場合によりハロゲノ、（１〜６Ｃ）アルキル、分枝もしくは直鎖状（１〜６Ｃ）アルコキシ、（１〜４Ｃ）アルキレンジオキシ、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、（２〜６Ｃ）アルカノイルオキシ、（１〜６Ｃ）アルキルチオ、（１〜６Ｃ）アルカンスルホニル、（１〜６Ｃ）アルカノイルアミノおよび２〜４個の炭素原子のオキサポリメチレンから選択される５つまでの置換基を有するか、またはＲａおよびＲｂは、場合により１または２個の（１〜４Ｃ）アルキル置換基を有する、２〜７個の炭素原子のポリメチレンをともに形成する。
【００４１】
いくつかの実施形態において、Ａは、３〜７個の炭素の直鎖状炭素鎖であり、ＷはＣＯＯＨである。かかる炭素鎖は、例えば、Ｃ２−Ｃ３またはＣ３−Ｃ４の間に二重結合を含んでもよい。
【００４２】
ある実施形態において、ＲａはＨであり、Ｒｂは、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、アミノ、Ｎ−モノアルキル、Ｎ−ジアルキル（分枝または直鎖状）、ニトロおよびチオアルキル（分枝または直鎖状）からなる群より選択される５つまでの異なる置換基を有する、フェニル、ベンジル、２−または３−または４−ピリジン、フラン、ビフェニル、１−または２−ナフチル等の芳香族部分である。
【００４３】
いくつかの実施形態において、誘導体は、２，４−ジフェニル−１，３−ジオキサン誘導体またはその薬学的に許容され得る塩であり、ここで誘導体は、式ＩＩ：
【００４４】
【化８】

【００４５】
によって表され、
式中Ｘは、フルオロ、クロロ、ブロモ、トリフルオロメチル、場合により置換されたフェニル、シアノ、メトキシおよびニトロから選択されるか、またはフェニル−Ｘ基は、場合により置換されたクロメン誘導体であってもよく；ＹおよびＺは、個々に、水素またはハロゲノである。
【００４６】
典型的には、式Ｉによって表される誘導体中のジオキサン環の２、４および５位の基は、シス−相対立体化学を有する。
【００４７】
特に興味深いＸを有するフェニル部分の他の特定の置換基としては、例えば、２−フルオロ−、２−クロロ−、２−ブロモ−、２−シアノ−、２−トリフルオロメチル−、３−フルオロ−、３−クロロ−、３−シアノ−、３−ニトロ−、３−メトキシ−、４−クロロ−、４−シアノ−、４−ニトロ−および４−メトキシ−フェニルが挙げられる。
【００４８】
Ｙについての好ましい置換は、水素またはフルオロであり、Ｚは水素である。
【００４９】
本発明において有用な化合物の好ましい基は、Ｘ^１が２−クロロ、３−クロロ、２−シアノ、４−シアノ、３−ニトロおよび４−ニトロから選択され；ジオキサン環の２、４および５位の基がシス−相対立体化学を有する、式ＩＩＩ（本明細書中に下記で示す）の化合物；ならびにその薬学的に許容され得る塩を含む。
【００５０】
本発明はまた、Ａ、ＷおよびＡｒが上記で定義され、ＲａがＨであり、Ｒｂがアリール部分の１つの炭素原子が１つの酸素もしくは窒素原子で置換されているもの等のアリール基もしくは複素環である、式Ｉの化合物を提供する。かかるアリールおよび複素環基は、場合により、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル（分枝または直鎖状）、Ｏ−アリール、アミノまたはＮ−モノアルキルもしくはＮ−ジアルキル（分枝または直鎖状）またはＮ−モノアリールもしくはＮ−ジアリール、ニトロ、チオアルキル（分枝または直鎖状）またはオキソ（例えば、表ＩＩ中のＳＮ１３）からなる群より選択される３つの異なる置換基で置換されていてもよい。ＲａがＨでありＲｂが複素環、または０−アリールで置換されているフェニル基である式Ｉの化合物が、特にＡｒがｏ−位でＯＨまたはＯＭｅによって置換されたフェニルであり、ＷがＣＯＯＨであり、Ａが１つの二重結合を有する５つの炭素の直鎖である場合、ＰＰＡＲγ調節因子として特に興味深い。かかる化合物の例示的な例としては、ＲａがＨであり、Ｒｂが、４（Ｚ）−６−（２−［４−メトキシフェノキシ−ｏ−フェニル］−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキセン酸等の、フェニルの２もしくはオルト位を通じてジオキサン環に連結された（４−メトキシフェノキシ）−フェニルであるか；またはＲｂが、４（Ｚ）−６−（２−３−［６−クロロ−４Ｈ−クロメン−４−オン］−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキセン酸等の６−クロロ−４Ｈ−クロメン−４−オン（例えば、クロメン部分の３位を通じてジオキサン環に連結されている）であるか；またはＲｂが、ビフェニルの２もしくはオルト位を通じてジオキサン環に連結されたビフェニルである、式Ｉの化合物が挙げられる。したがって、本発明は、単独で、ならびに薬学的担体、および場合によりさらなる治療上活性のある成分と組み合わせて、本実施形態において言及される化合物およびそれらの薬学的に適切な塩を提供する。
【００５１】
式Ｉおよび式ＩＩの化合物が不斉炭素原子を有し、ラセミ形態および光学活性形態で存在および単離することができることが、認識されるであろう。本発明は、ＰＰＡＲ活性を調節することができる、ラセミ形態および任意の光学活性形態の両方（またはそれらの混合物）、ならびにそれらの使用を含み、個々の光学異性体をどのように調製するか（例えば、光学活性な出発物質からの合成、またはラセミ形態のクロマトグラフィー分解によって）および下記で言及される１つ以上のアッセイを用いてどのようにＰＰＡＲ調節特性を判定するかは当該分野で周知である。
【００５２】
文脈から他に明らかでない限りは、本明細書中で言及される化学式は、特定の配置で示されるが、これは、必ずしも、絶対配置に対応しない。
【００５３】
式ＩまたはＩＩの酸の、特定の薬学的に許容され得る塩は、例えば、リチウム、ナトリウムカリウム、マグネシウムおよびカルシウム塩等のアルカリ金属およびアルカリ土類金属塩、アルミニウムおよびアンモニウム塩、ならびにメチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、エチレンジアミン、ピペリジン、モルホリン、ピロリジン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、Ｎ−メチルグルカミン、水酸化テトラメチルアンモニウムおよび水酸化ベンジルトリメチルアンモニウムとの塩等の、生理学的に許容され得る陽イオンを形成する有機アミンおよび第四級塩基の塩である。
【００５４】
式Ｉの化合物は、構造的に類似の化合物の製造のための、当該分野で周知の従来の有機化学の手順によって製造することができる。かかる手順は、例えば、本明細書中に参照によって特に援用される、欧州特許第００９４２３９号、４〜１０頁に提供されており、下記に実施例の項で、Ｘ、ＹおよびＺが本明細書中に上記で定義された意味を有する以下のプロセスによって、説明される。
【００５５】
（Ａ）式ＩＶのアルデヒドを、式Ｒ^１_３Ｐ＝ＣＨ（ＣＨ_２）_２ＣＯ_２⁻Ｍ^＋（式中Ｒ^１が（１〜６Ｃ）アルキルまたはアリール（特にフェニル）であり、Ｍ^＋が陽イオン、例えばリチウム、ナトリウムまたはカリウム陽イオン等のアルカリ金属陽イオンである）のウィティッヒ試薬と反応させる。いくつかの実施形態において、アルデヒドを、Ｐ＝ＣＨ（ＣＨ_２）_ｎＣＯＯ⁻Ｍ^＋（式中ｎ＝０〜４）に変更されている式のウィティッヒ試薬と反応させる。
【００５６】
一般に、プロセスは、二重結合に隣接する置換基が主にシス−相対立体化学を有する、式ＩＩの必要な化合物、すなわち「Ｚ」異性体を生じる。しかしながら、プロセスはまた、所望される場合、クロマトグラフィーまたは結晶化等の従来の手順によって除去することができるトランス−相対立体化学を有する類似化合物を生じる。
【００５７】
合成プロセスは、従来、適した溶媒または希釈剤、例えばベンゼン、トルエンもしくはクロロベンゼン等の芳香族溶媒、１，２−ジメトキシエタン、ｔ−ブチルメチルエーテル、ジブチルエーテルもしくはテトラヒドロフラン等のエーテル、ジメチルスルホキシドもしくはテトラメチレンスルホン、またはかかる溶媒もしくは希釈剤の１つ以上の混合物中で行われる。プロセスは、一般に、例えば−８０℃〜４０℃の範囲の温度で行われるが、従来、室温で、または室温近く、例えば０〜３５℃の範囲で行われている。
【００５８】
（Ｂ）Ｒ^１が保護基、例えば（１〜６Ｃ）アルキル（メチルまたはエチル等）、アシル（アセチル、ベンゾイル、メタンスルホニルまたはｐ−トルエンスルホニル等）、アリル、テトラヒドロピラン−２−イル、トリメチルシリルであり、脱保護される、式Ｖのフェノール誘導体。
【００５９】
用いられる脱保護条件は、保護基Ｒ^１の性質に依存する。したがって、例えば、それがメチルまたはエチルである場合、脱保護は、適した溶媒（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドまたはＮ，Ｎ−ジメチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−２（１Ｈ）−ピリミジノン等）中、例えば５０〜１６０℃の範囲の温度で、ナトリウムチオエトキシド（水素化物およびエタンチオール）とともに加熱することによって行うことができる。あるいは、エチルまたはメチル保護基は、例えば０〜６０℃の範囲の温度で、適した溶媒（テトラヒドロフランまたはメチルｔ−ブチルエーテル等）中でのリチウムジフェニルホスフィドとの反応によって除去することができる。保護基がアシルである場合、これは、例えば、０〜６０℃の温度の範囲で、適した水性溶媒［水性（１〜４Ｃ）アルカノール等）中で、塩基（水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム等）の存在下での加水分解によって除去することができる。保護基がアリルまたはテトラヒドロピラン−２−イルである場合、これは、例えば、トリフルオロ酢酸等の強酸での処理によって除去することができ、これがトリメチルシリルである場合、これは、例えば、従来の手順を用いて、水性テトラブチルフッ化アンモニウムまたはフッ化ナトリウムとの反応によって除去することができる。
【００６０】
（Ｃ）式中Ｑ^１およびＱ^２の一方が水素であり、他方が水素または式−ＣＲａＲｂ．ＯＨ（式中ＲａおよびＲｂは同じまたは異なる（１〜４Ｃ）アルキルである）の基である式Ｖのエリトロ−ジオール誘導体を、式ＶＩＩのベンズアルデヒド誘導体、またはアセタール、ヘミアセタールまたはその水和物と反応させる。
【００６１】
ベンズアルデヒドＶＩＩ［またはその水和物、または（１〜４Ｃ）アルカノール（メタノールまたはエタノール等）とのそのアセタールもしくはヘミアセタール］は、好都合に、過剰に存在してもよい。
【００６２】
反応は、一般に、塩化水素、臭化水素、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸またはｐ−トルエンスルホン酸等の酸触媒の存在下、好都合にトルエン、キシレンまたはエーテル等の適した溶媒または希釈剤、例えばテトラヒドロフラン、ジブチルエーテル、メチルｔ−ブチルエーテルまたは１，２−ジメトキシエタンの存在下、および例えば０〜８０℃の範囲の温度で、行われる。
【００６３】
式中Ｑ^１およびＱ^２がともに水素である式ＶＩの出発物質は、例えば、本明細書中のプロセス（Ａ）と類似した手順によって得られる、ＲａおよびＲｂがともにメチルまたはエチル等のアルキルである式ＶＩＩＩの化合物のジオキサン環の、温和な、酸触媒された、加水分解またはアルコール分解によって、得ることができる。加水分解またはアルコール分解は、通常、溶媒としてアルカノイル（エタノールまたは２−プロパノール等）またはエーテル（テトラヒドロフラン等）中、塩酸等の水性鉱酸を用いて、１０〜８０℃の範囲の温度で行われる。
【００６４】
式中Ｑ^１およびＱ^２の一方が水素であり、他方が式−−ＣＲａＲｂ．ＯＨの基である式ＶＩの出発物質は、上述の、式中Ｑ^１およびＱ^２がともに水素である式ＶＩの出発物質の形成における中間体である。しかしながら、前記中間体は、通常、単離または特徴付けされない。したがって、プロセス（Ｃ）の有用な変更は、酸触媒の存在下で（上記のもののいずれか等）、好都合に例えば１０〜８０℃の範囲の温度で、および場合により適した溶媒または希釈剤（上記のもののいずれか等）の存在下で、式中ＲａおよびＲｂの一方が水素、メチルまたはエチルであり、他方がメチルまたはエチルである式ＶＩＩＩの化合物を、過剰な式ＶＩＩの化合物（またはその水和物、アセタールもしくはヘミアセタール）と反応させることを含む。
【００６５】
上記のプロセスにおける使用のための出発物質は、構造的に関係がある化合物の調製で知られている一般的な有機化学の手順によって生じることができる。したがって、式ＩＶのアルデヒドは、例えば、スキームＩに示される方法によって得ることができる。式Ｖの、保護されたフェノール誘導体は、例えば、式ＩＶのものと類似したアルデヒドを用いるがフェノール基が、例えば脱保護工程（ｉｉ）を欠いたスキームＩの手順を行うことによって生じたアルデヒド等のＲ^１基で保護されている、上記のプロセス（Ａ）に類似した手順を用いることによって、生じることができる。新規である、式ＶＩＩＩの出発物質のものは、欧州特許出願、公開第９４２３９号に記載されているものと類似した手順を用いて得ることができる。
【００６６】
必要なウィティッヒ試薬は、従来の手順によって、例えば対応するハロゲン化ホスホニウムを水素化ナトリウム、リチウムジイソプロピルアミド、カリウムｔ−ブトキシド、ＬｉＨＭＤＳまたはブチルリチウム等の強塩基で処理することによって、得ることができる。それらは、一般に、上記の縮合プロセス（Ａ）を行う直前に、原位置（ｉｎ ｓｉｔｕ）で形成される。
【００６７】
式ＩおよびＩＩの化合物はまた、当該分野で周知の他の従来の手順によって、例えば対応するエステル、アミドまたはニトリルの塩基触媒加水分解によって得ることができることが、理解されるであろう。
【００６８】
式ＩまたはＩＩの化合物の塩が必要とされる場合、これは、生理学的に許容され得る陽イオンを提供する適切な塩基との反応によって、または任意の他の従来の手順によって、得られる。
【００６９】
さらに、式ＩまたはＩＩの化合物の光学活性形態が必要とされる場合、光学活性な出発物質を用いて、前述のプロセスの１つを行ってもよい。あるいは、式ＩＩの化合物のラセミ形態を、光学活性形態の適した有機塩基、例えばエフェドリン、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル（１−フェニルエチル）アンモニウム水酸化物または１−フェニルエチルアミンと反応させ、続いて例えば適した溶媒、例えば（１〜４Ｃ）アルカノールからの分別結晶化によって、このようにして得られた塩のジアステレオ異性体混合物の従来の分離を行い、その後従来の手順を用いて、例えば希塩酸等の水性鉱酸を用いて、酸での処理によって前記式ＩまたはＩＩの化合物の光学活性形態を遊離させてもよい。
【００７０】
また、実施例２９は、どのようにしてキラルクロマトグラフィーによって式ＩおよびＩＩの化合物のラセミ混合物を単離することができるかを説明する。
【００７１】
前述したように、本明細書中に記載されている化合物は、ＰＰＡＲ活性の調節因子である。したがって、上記で概説された構造的特性に加えて、本発明の方法とともに使用されるのに好ましい化合物はまた、ＰＰＡＲアゴニスト、ＰＰＡＲアンタゴニストまたはＰＰＡＲ部分アゴニスト、好ましくはＰＰＡＲ部分アゴニストである。ＰＰＡＲアゴニスト／アンタゴニスト／部分アゴニストとしての機能性を判定するための方法は、「化合物の機能性」の項で、本明細書中で後述される。
【００７２】
化合物の機能性
ＰＰＡＲの活性を調節することができる化合物（本明細書中でＰＰＡＲリガンドとも呼ばれる）は、３つの別個のクラス：完全アゴニスト、部分アゴニスト／部分アンタゴニストに、および完全アンタゴニストに分類することができる。アゴニストおよびアンタゴニストは、それらの結合親和性、指示能力／ＥＣ５０／ＩＣ５０値、および飽和レベルの化合物の存在下で得られる活性のレベル、すなわち有効性によって、特徴付けられる。部分アゴニスト／部分アンタゴニストはまた、その結合親和性、および有効性によって特徴付けられる。部分アゴニスト／部分アンタゴニストは、同族のＰＰＡＲを完全に活性化することができず、競合的様式で受容体由来の完全アゴニストを置換することができ、それによって、トランス活性化のレベルを減少させる。完全および部分アゴニストは、さらに、補助因子の異なる補体を補充することができ、所定のＰＰＡＲサブタイプに対する補充された補助因子の性質は、所定のアゴニストによって活性化された遺伝子のパターンに大いに影響を及ぼす。
【００７３】
ＰＰＡＲのリガンド結合ポケットは、他の核内受容体と比較して大きく、これは、部分的に、ＰＰＡＲに結合することができ、活性化することができる、多種多様な化合物を説明することができる。３つのＰＰＡＲサブタイプの間で、リガンド認識に相当な重複があり、厳密にいうと、サブタイプ特異的リガンドは未だ同定されていない。しかしながら、いくつかの天然および合成リガンドが、高い程度の選択性を示し、今日最も選択的なリガンドは、個々のＰＰＡＲサブタイプを活性化するのに必要な濃度に関して、３桁より大きく異なる。ステロイド核内受容体についてのアゴニストと同様に、用語、選択的ＰＰＡＲ調節因子（ＳＰＰＡＲＭ）が導入されている（本明細書中で、「部分アゴニストまたはアンタゴニスト」とも呼ばれる）。このクラスのリガンドは、ＰＰＡＲ（複数可）への結合の際に異なる組の活性化補助因子の補充につながる異なる構造を導入する、部分アゴニスト／アンタゴニストを含む。原則として、ＳＰＰＡＲＭは、ＰＰＡＲ標的遺伝子のサブセットのみを活性化することができ、それによって、おそらく所望の組の遺伝子の特異的発現を促進する。完全アゴニストおよび部分アゴニストによるＰＰＡＲ活性化のモデルを図１に示す。本発明の好ましい化合物は、部分ＰＰＡＲアゴニストである。
【００７４】
ＰＰＡＲ調節活性は、当該分野で公知の任意の数の方法、またはその適応によって、容易に判定することができる。例えば、ＰＰＡＲ調節活性は、トランス活性化アッセイによって判定することができる。ＰＰＡＲγ調節活性を判定するための、有用なトランス活性化アッセイの非限定的な例は、実施例２１に記載されており、ＰＰＡＲδ調節活性を判定するための、有用なトランス活性化アッセイの非限定的な例は、実施例２２に記載されている。下記の実施例２１は、化合物が、ＰＰＡＲ−ＧＡＬ４（ＤＮＡ結合ドメイン）融合タンパク質をコードする構築物およびＧＡＬ４依存性受容体構築物をコードする構築物でトランスフェクトされた細胞に添加される方法を説明している。異なるＤＮＡ結合ドメインを用いて転写または異なるレポーター遺伝子（例えば、蛍光タンパク質、β−ガラクトシダーゼ、ペルオキシダーゼ、ルシフェラーゼ等）を活性化すること等の、任意の数の可能性のある構築物を用いることができることは、当業者に明らかであろう。どのＰＰＡＲ活性を判定するのが望ましいかに依存して、構築物は好ましくは前記ＰＰＡＲまたはそのリガンド結合ドメインをコードすることは、当業者に明らかであろう。ＰＰＡＲの活性化の際に（すなわち、ＰＰＡＲアゴニストまたは部分アゴニストの存在下で）、ＰＰＡＲは、レポーター構築物を、場合により定量的な様式で、トランス活性化する。
【００７５】
ＰＰＡＲ調節因子はまた、少なくとも１つのＰＰＲＥを含む第二の核酸の制御下で操作可能に、第一の核酸を含むレポーター遺伝子を用いて同定することができる。第一の核酸は、好ましくは、蛍光タンパク質、β−ガラクトシダーゼ、ペルオキシダーゼ、ルシフェラーゼ等のレポータータンパク質をコードする。前記レポーター構築物は、ＰＰＡＲγおよび／またはδ等の１つ以上のＰＰＡＲを発現している細胞に挿入されるべきである。したがって、ＰＰＡＲアゴニストは、第一の核酸の転写を活性化することができる化合物として同定することができる。
【００７６】
本発明の特定の実施形態によると、好ましい化合物は、ＰＰＡＲおよび／またはＰＰＡＲ ＬＢＤアゴニストまたは部分アゴニストである。用語「ＰＰＡＲ ＬＢＤ」は、ＰＰＡＲのリガンド結合ドメインをいう。好ましい実施形態によると、本発明の化合物および組成物が、ＰＰＡＲγおよび／またはＰＰＡＲγＬＢＤアゴニストである。「アゴニスト」によって、細胞内受容体と結合したときに受容体に典型的な反応、例えば転写活性化活性を刺激または増大させる、化合物または組成物が意味される。ある実施形態において、前記アゴニストは、ＰＰＡＲγアゴニスト、すなわち、例えば受容体に対する天然の生理学的リガンドを模倣すること等によって、ＰＰＡＲγ受容体の転写活性を促進、刺激、誘導またはそうでなければ増強する、ＰＰＡＲリガンドである。
【００７７】
前記ＰＰＡＲ調節活性は、本明細書中で上述されたトランス活性化アッセイを用いて判定することができる。適した標準的なアゴニストとしては、ＰＰＡＲγのためのロシグリタゾンおよびＰＰＡＲδのための（４−［３−（２−プロピル−３−ヒドロキシ−４−アセチル）フェノキシ］プロピルオキシフェノキシ−酢酸（Ｌ１６５０４１、市販されている）が挙げられる。標準的なアゴニストより５０％未満のトランス活性化を示す潜在的なアゴニストもまた、特に新しい化合物もしくは活性のある誘導体の開発のために、または部分アゴニストの存在の指標として、有用である場合がある。
【００７８】
好ましい実施形態によると、本明細書中の化合物または組成物は、ＰＰＡＲおよび／またはＰＰＡＲ ＬＢＤ部分アゴニストであり、より具体的には、本発明の化合物および組成物は、ＰＰＡＲγおよび／またはＰＰＡＲγＬＢＤ部分アゴニストである。可能性のある最大効果（すなわち、完全アゴニスト、または参照分子によって生じる最大効果）未満を生じる薬物は、部分アゴニストと呼ばれる。
【００７９】
例えば、本発明の化合物および組成物の部分アゴニスト特性は、完全アゴニストであるロシグリタゾン（アバンディア（商標）、Ｇｌａｘｏ−ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）を参照して定義することができる。これは具体的には、ＰＰＡＲγ部分アゴニストに当てはまる。部分ＰＰＡＲアゴニスト。具体的には、本発明のＰＰＡＲγアゴニストは、所望の治療を受けている患者に対して同様またはよりよい有効性を提供するが、より少ない、患者に有害な望ましくない副作用を有する。例えば、ＳＮ１（ＤＰＤ）は、１０ｍＭで１ｍＭのアバンディアと同じレベルのグルコース取り込みを誘導するが、より低い脂肪細胞分化の結果として、より少ない副作用が予期される。
【００８０】
本発明の化合物および組成物の部分アゴニスト特性はまた、Ｌ１６５０４１（市販されている）を参照して定義することができる。これは具体的には、ＰＰＡＲδ部分アゴニストに当てはまる。例えば、かかるトランス活性化アッセイの１つは、実施例２２に記載されるトランス活性化アッセイである。
【００８１】
ある実施形態において、本発明の化合物は、ＰＰＡＲの活性化に対して選択的であることが好ましい。かかる実施形態において、化合物は、ＲｘＲおよび／またはＲｘＲ ＬＢＤトランス活性化を有意に活性化しないことが好ましく、好ましくは、ＲｘＲ転写は、バックグラウンドレベルの１．５倍未満等、バックグラウンドレベルの２倍より少なく、例えば、バックグラウンドレベルとおよそ等しいか、またはバックグラウンドレベル未満である。ＲｘＲトランス活性化は、例えば実施例２９に記載されているようなＲｘＲトランス活性化アッセイによって判定することができる。バックグラウンドレベルは、リガンドの添加なしでのトランス活性化である。
【００８２】
本発明のある実施形態において、化合物は、ＰＰＡＲアンタゴニストである。「アンタゴニスト」によって、ＰＰＡＲと結合したときに前記ＰＰＡＲに典型的な反応、例えば転写活性を、干渉または減少させる化合物が意味される。一般的な定義として、「ＰＰＡＲアンタゴニスト」は、対応するＰＰＡＲアゴニストの活性を阻害することができるＰＰＡＲリガンドを示す。より一般には、これらのアゴニスト／アンタゴニスト／部分アゴニスト活性は、例えば国際公開第９９／５０６６４号または国際公開第９６／４１０１３号に開示されているもの等の、当業者に広く公知のアッセイによって測定することができる。ＰＰＡＲアンタゴニストの例は、実施例２１に提供される。
【００８３】
本発明の化合物および組成物は、ＰＰＡＲ活性の調節によって影響を及ぼされる状態または疾患を有する患者に投与されたときの、それらの生物学的活性によって、さらに特徴付けられる。本発明の好ましい化合物は、それを必要とする患者において、以下の生物学的実体：グルコース、トリグリセリド、脂肪酸、コレステロール、胆汁酸等の１つ以上を、当該分野で公知の分子（例えば、チアゾリジンジオン）と比較してよりよい、または同等な有効性および能力で、しかしより低い毒性および／またはより少ない望ましくない副作用の発生で、低下させることができる化合物である。具体的には、前記化合物は、好ましくは、脂肪細胞分化および体重増加の、より少ない誘導につながる。かかる化合物は、具体的には、本明細書中の上記のＣ．項に記載された化合物のいずれかであってもよい。脂肪細胞分化を判定するための有用な方法は、本明細書中で下記の実施例２５に記載されている。より具体的には、それらは、インスリン抵抗性（減少した、インスリンが血糖値を低下させる有効性）および／または脂肪生成に対する有益な活性を提供する。ＰＰＡＲγを活性化する多くの化合物（例えばチアゾリジンジオン）が、脂肪細胞分化をさらに誘導し（すなわち、脂肪生成または脂質生成の効果を示す）、したがって、治療される患者において体重増加を生じることが、示されている。したがって、次世代のかかる化合物は、減少した活性を示し、好ましくはかかる活性を欠いていることが、高度に望ましい。これらの活性は、当該分野で広く用いられている方法（実施例５に記載されているもの等）を用いて評価することができる。より具体的には、これらの活性は、ロシグリタゾン等の、当該分野ですでに同定されている分子を参照して評価される。本発明の好ましい実施形態によると、好ましい化合物は、例えばインスリン抵抗性を患っている患者においてグルコースレベルを判定することによって判定することができるインスリン抵抗性に関するロシグリタゾン特性の、少なくとも約５０％、好ましくは少なくとも約６０％、より好ましくは少なくとも約７０％、さらにより好ましくは少なくとも８０％を示す。理想的には、これは１００％以上である。本発明の別の好ましい実施形態によると、好ましい化合物は、脂肪細胞分化に対するロシグリタゾン特性の、約８０％未満、好ましくは約５０％未満、より好ましくは約４０％未満、さらにより好ましくは約３０％未満を示す。理想的には、これは脂肪細胞分化に対するロシグリタゾン特性の２０％未満である。脂肪細胞分化は、例えば、本明細書中に下記で実施例３０に記載されているように判定することができる。非常に好ましい実施形態において、好ましい化合物は、上述の特性の両方を有する。あるいは、化合物は、トランス活性化アッセイで判定すると、少なくともロシグリタゾンのものの５０％の程度まで、ＰＰＡＲ活性を誘導することができ、脂肪細胞分化に対する上述の特性を示す。
【００８４】
血液希釈、浮腫、脂肪細胞分化、または肥満等の望ましくない副作用のインビボでの発生は、例えば欧州特許第１２６７１７１号に記載されている方法を用いて、前記化合物の補助因子補充プロフィールによって影響を受ける場合がある。したがって、本発明のある実施形態において、好ましい化合物は、望ましくない副作用の、低いインビボでの発生を有すると予想される、化合物である。
【００８５】
ＰＰＡＲγ等の核内受容体が、標的遺伝子のプロモーター領域中の同族配列に結合することならびに活性がクロマチンリモデリング、ヒストンおよび補助因子修飾から基本的な転写機構補充の範囲にわたる多数の補助因子複合体を補充することによって、転写活性化または抑制を達成することは、広く認められている（Ｇｌａｓｓ，およびＲｏｓｅｎｆｅｌｄ、２０００年、Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．、１４、１２１−１４１）。これらの補助因子は、かなりの部分まで、核内受容体の作用の特異性を判定することができ、適した変性が特定の細胞反応につながる刺激のネットワーク中でそれらの作用を統合することができる。したがって、時間および細胞型の関数としての、各核内受容体が携わる複数の連携の判定は、転写調節における核内受容体の活性のよりよい理解につながるであろう。例えば、エストロゲン等のある種のホルモンについて、ホルモンに対する反応は、それぞれの核内ホルモン受容体の存在によって、受容体と相互作用する補助因子の存在によるのとほとんど同じ程度まで判定されることが、公知である。種々のＰＰＡＲ補助因子が同定されている。ｐ３００／ＣＢＰ（Ｄｏｗｅｌｌら、１９９７年、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２、３３４３５−３３４３３）、ＳＲＣ−１（Ｏｎａｔｅら、１９９５年、Ｓｃｉｅｎｃｅ
２７０、１３５４−１３５７）、ＴＩＦ２（ＧＲＩＰ−２、Ｃｈａｋｒａｖａｒｔｉら、１９９６年、Ｎａｔｕｒｅ、３８３、９９−１０３）、ＳＲＡ（Ｌａｎｚら、１９９９年、Ｃｅｌｌ、９７、１７−２７）、ＡＩＢ−１（Ａｎｚｉｃｋら、１９９７年、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２７７、９６５−９６８）、ＴＲＡＰ２２０／ＤＲＩＰ２０５（すなわち、ＰＢＰ、Ｚｈｕら、１９９７年、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２、２５５００−２５５０６、Ｒａｃｈｅｚら、１９９９年、Ｎａｔｕｒｅ、３９８、８２４−８２８）、ＰＧＣ−１（Ｐｕｉｇｓｅｒｖｅｒら、１９９８年、Ｃｅｌｌ ９２、８２９−８３９）、ＰＲＩＰ（Ｚｈｕら、２０００年、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２７５、１３５１０−１３５１６）、ＰＧＣ−２（Ｃａｓｔｉｌｌｏら、１９９９年、Ｅｍｂｏ Ｊ、１８、３６７６−３６８７）、ＡＲＡ７０（Ｈｅｉｎｌｅｉｎら、１９９９年、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２７４、１６１４７−１６１５２）、ＲＩＰ１４０（Ｔｒｅｕｔｅｒら、１９９８年、Ｍｏｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ １２、８６４−８８１）等のいくつかの補助因子は、それらの転写活性を増強するが、ＳＭＲＴ（Ｌａｖｉｎｓｋｙら、１９９８年、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９５、２９２０−２９２５）およびＮ−ＣｏＲ（Ｄｏｗｅｌｌら、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２７４、１５９０１−１５９０７）は、それを抑制する。また、ＰＰＡＲγ補助因子ファミリーのメンバー（例えば、１６０−ｋＤａタンパク質（ＳＲＣ−１／ＴＩＦ２／ＡＩＢ−１）、ＣＢＰ／ｐ３００またはＴＲＡＰ２２０／ＤＲＩＰ２０５）は、ＰＰＡＲγと直接相互作用し、リガンド依存的様式で核内受容体トランス活性化機能を促進して、用いられるリガンドによって異なり得る生物学的作用または副作用につながることが、示されている（Ａｄａｍｓら、１９９７年、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．、１００、３１４９−３１５３）。Ｋｏｄｅｒａら、（２０００年、Ｊ
Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．、２７５、３３２０１−３３２０４）は、ＰＰＡＲγと公知の補助因子との間の相互作用が、異なるクラスのＰＰＡＲγリガンド（天然および合成）によって同じ程度に誘導されるかどうかを調べ、ＰＰＡＲγおよび補助因子複合体の全体的な構造が、関与するリガンドによって異なり、異なる生物学的作用を示す特定の組の標的遺伝子プロモーターの活性化を生じる場合があると結論付けた。
【００８６】
ＰＰＡＲ部分アゴニストは、一般に、特定の活性化補助因子補充プロフィールを有し、したがって、特定の活性化補助因子補充プロフィールを有する化合物が好ましい。したがって、特定の実施形態によると、本発明の化合物および組成物は、限定された補助因子（複数可）補充パターンによって、さらに特徴付けられる。好ましい実施形態において、前記パターンは、前記核内受容体の転写活性の調節に対して別個の効果を生じ、特定の代謝プロセスの活性化ならびに望まれない副作用の排除を生じる非常に精密に調整された調節を可能にする。より具体的な実施形態において、本発明の化合物および組成物はさらに、ＰＰＡＲ受容体、より好ましくはＰＰＡＲ受容体ＬＢＤの、補助因子ＴＩＦ２との相互作用を阻害することができる。別の実施形態によると、本発明の化合物および組成物はまた、ＰＰＡＲ受容体、より好ましくはＰＰＡＲ受容体ＬＢＤの、補助因子ＳＲＣ−１との相互作用を増強することができる。好ましくは、前記ＰＰＡＲ受容体はＰＰＡＲγ受容体である。
【００８７】
リガンドによる補助因子補充の阻害および／または増強を測定するための方法は、欧州特許１２６７１７１に詳述されている。
【００８８】
好ましい実施形態において、本発明の化合物は、ＰＰＡＲγに結合したときに、ＴＩＦ２のものより少なくとも１ログ大きく、少なくとも２ログが好ましい、ＥＣ５０で、ＬＢＤへのＳＲＣ１の補充を可能にする。
【００８９】
本発明のある実施形態において、ＰＰＡＲ受容体の天然の生理学的リガンド、特にＰＰＡＲγ受容体のものに対するそれらのアゴニスト、特に部分アゴニスト、またはアンタゴニスト特性のために、好ましい化合物は、ＰＰＡＲ媒介性転写制御およびそれによって生じる付随する生理学的効果の生物学的効果を制御するための医薬品として機能することができる。より具体的には、それらは、細胞生理学を調節して、関連する病理を減少させるか、または予防を提供もしくは増強することができる。
【００９０】
本発明のさらに別の実施形態において、好ましい化合物は、１つより多いＰＰＡＲ、例えばＰＰＡＲγおよびＰＰＡＲδの両方の、アゴニスト（または、好ましくは部分アゴニスト）である化合物である。かかるアゴニストは、例えば本明細書中に記載されているように、それぞれＰＰＡＲγおよびＰＰＡＲδについてのトランス活性化アッセイによって同定することができる。ＰＰＡＲγおよびＰＰＡＲδ活性を判定するための非限定的な有用な方法は、本明細書中で、下記でそれぞれ実施例２６および２７に記載されている。
【００９１】
臨床状態
本発明は、上述の化合物を投与することを含む、臨床状態の治療の方法、ならびに臨床状態の治療のための薬物の調製のための前記化合物の使用に関する。
【００９２】
ＰＰＡＲ活性の調節因子は、体重管理において使用することができる。したがって、ある実施形態における臨床状態は、神経性食欲不振症（本明細書中で「食欲不振」とも省略される）または過食症等の摂食障害である場合がある。本明細書中に上記で開示される化合物はまた、体重を増大または減少させるための、特に体重を減少させるための方法において、使用することができる。臨床状態は、したがって、肥満である場合がある。脂肪症は、脂肪組織の過剰な累積である。最近の調査から、ＰＰＡＲ、具体的にはＰＰＡＲγが、脂肪細胞の遺伝子発現および分化において中心的な役割を果たすことが示されている。ＰＰＡＲγサブタイプは、脂肪細胞分化の活性化に関与するが、肝臓におけるペルオキシソーム増殖の刺激において、それほど重要な役割を果たさない。ＰＰＡＲγの活性化は、典型的には、脂肪細胞特異的遺伝子発現を活性化することによって、脂肪細胞分化に寄与する（Ｌｅｈｍａｎｎ、Ｍｏｏｒｅ、Ｓｍｉｔｈ−Ｏｌｉｖｅｒ、Ｗｉｌｋｉｓｏｎ、Ｗｉｌｌｓｏｎ、Ｋｌｉｅｗｅｒ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７０：１２９５３−１２９５６、１９９５）。したがって、ＰＰＡＲアゴニストを用いて、脂肪組織を獲得することができる。ＰＰＡＲ部分アゴニストは、脂肪組織の過剰な累積の治療において有用な特性について選択することができる。
【００９３】
ある好ましい実施形態において、本発明は、本明細書中に上記で記載されている化合物のいずれかを、それを必要とする個体に投与することによってインスリン抵抗性を治療するための方法に関する。本発明はまた、インスリン抵抗性の治療のための薬物の調製のための、前記化合物のいずれかの使用に関する。また、本発明は、前記化合物を投与することによってインスリン感受性を増大させるための方法、ならびにインスリン感受性を増大させるための薬物の調製のための前記化合物の使用に関する。外傷、手術、または心筋梗塞の後に発生し得るもの等のインスリン感受性における急性および一過性の障害は、本明細書中で教示されるように、治療することができる。
【００９４】
インスリン抵抗性は、多数の臨床状態に関与している。インスリン抵抗性は、減少した、インスリンが広範囲の濃度にわたって生物学的作用を示す能力によって、顕在化される。インスリン抵抗性の初期の間、体は、異常に高い量のインスリンを分泌して、その欠損を補う。血中インスリンレベルは慢性的に高いが、インスリンに対する、活性のある筋細胞の代謝反応障害によって、それらはグルコースを効果的に取り込むことができなくなる。現在、インスリン抵抗性および結果として生じる高インスリン血症はいくつかの臨床状態、例えばメタボリックシンドローム（シンドロームＸとも名付けられている）に寄与する場合があるということが、ますます認識されてきている。メタボリックシンドロームは、高インスリン血症を引き起こす最初のインスリン抵抗性段階、脂質異常症、および減少した糖耐性によって特徴付けられる。メタボリックシンドロームの患者は、心血管疾患および／またはＩＩ型糖尿病を発症する危険性が高いことが示されている。
【００９５】
患者は、以下の基準の少なくとも３つが当てはまるとき、メタボリックシンドロームを患っているといわれる：
−胴の外周によって測定される中心性／腹部肥満（男性で１０２ｃｍより大きく、女性で９４ｃｍより大きい）
−１５０ｍｇ／ｄＬ（１．６９ｍｍｏｌ／Ｌ）以上の空腹時トリグリセリド
−ＨＤＬコレステロール［男性−４０ｍｇ／ｄＬ未満（１．０４ｍｍｏｌ／Ｌ）、女性−５０ｍｇ／ｄＬ（１．２９ｍｍｏｌ／Ｌ）未満］
−１３０／８５ｍｍＨｇ以上の血圧
−１１０ｍｇ／ｄＬ（６．１ｍｍｏｌ／Ｌ）以上の空腹時血糖
インスリン抵抗性はまた、脂質生成に対して負の効果を有し、血流中のＶＬＤＬ（超低密度リポタンパク質）、ＬＤＬ（低密度リポタンパク質）、およびトリグリセリドレベルの増大ならびにＨＤＬ（高密度リポタンパク質）の減少に寄与する。これは、動脈における脂肪の斑の沈着につながる場合があり、これは、経時的に、アテローム性動脈硬化症につながる場合がある。したがって、本発明による臨床状態は、家族性高脂血症等の高脂血症である場合がある。好ましくは、高脂血症は、高コレステロール血症および／または高グリセリド血症によって特徴付けられる。臨床状態はまた、脂質異常症および糖尿病性脂質異常症を含む。本明細書中に含まれる化合物はまた、血清トリグリセリドレベルを低下させるため、またはＨＤＬの血漿レベルを上昇させるために利用することができる。
【００９６】
インスリン抵抗性は、血液中の過剰なインスリンおよびグルコースレベルにつながる場合がある。過剰なインスリンは、腎臓によるナトリウム貯留を増大させる場合があり、したがって、本発明の方法は、腎臓によるナトリウム貯留を減少させるために使用することができる。上昇したグルコースレベルによって、血管および腎臓が損傷を受ける場合がある。したがって、本発明の方法を使用して、血管および腎臓への障害を予防することができる。
【００９７】
本発明の別の実施形態において、臨床状態は、ＰＰＡＲγによって媒介される炎症性障害である。用語「ＰＰＡＲγによって媒介される」によって、ＰＰＡＲγが状態の顕在化において役割を果たすことが理解されるべきである。例えば、ＰＰＡＲγは、急性炎症等の、好中球活性化と関連した炎症において役割を果たさないと考えられる。理論に拘束されることを望むことなく、ＰＰＡＲγのアゴニストは、ＮＦκＢ媒介性転写と直接関連して阻害し、したがって例えば誘導型一酸化窒素合成酵素（ＮＯＳ）およびサイクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）の酵素経路等の種々の炎症反応を調節することによって、効果的な抗炎症薬である場合がある（Ｐｉｎｅｄａ−Ｔｏｒｒａ，Ｉ．ら、１９９９年、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｌｉｐｉｄｏｌｏｇｙ、１０、１５１−９）。
【００９８】
炎症性障害は、例えば眼の炎症（Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２０００年１月２８日、２７５（４）：２８３７−４４）または眼乾燥疾患（Ｊ Ｏｃｕｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ．２００３年１２月、１９（６）：５７９−８７）等、急性でも慢性でもよい。慢性的炎症性障害の例示的な例としては、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、またはクローン病が挙げられる。慢性炎症性障害はまた、関節炎、特に関節リウマチおよび多発性関節炎である場合がある。慢性炎症性障害はまた、炎症性皮膚疾患、特に尋常性ざ瘡、アトピー性皮膚炎、バリアー機能障害を有する皮膚障害、加齢または乾癬、特に乾癬の皮膚の効果である場合がある。慢性炎症性障害はまた、多発性硬化症またはアルツハイマー病等の炎症性神経変性疾患である場合がある。臨床状態はまた、糸球体腎炎、糸球体硬化症、腎炎症候群、および高血圧性腎硬化症を含む、胃腸疾患および腎疾患である場合がある。
【００９９】
本発明の別の実施形態において、臨床状態は、ＰＰＡＲγの活性化に反応性のある癌である。したがって、臨床状態は、例えば、脂肪細胞腫瘍、例えば脂肪腫、線維脂肪腫、脂肪芽細胞腫、脂肪腫症、褐色脂肪腫、血管腫、および／または脂肪肉腫等の、脂肪組織において生じる過形成性または腫瘍性障害等の、ＰＰＡＲ応答性細胞の異常な細胞増殖によって特徴付けられる障害である場合がある。さらに、前立腺、胃、肺および膵臓の、ある種の癌は、ＰＰＡＲγアゴニストでの治療に反応性があることが実証されている。具体的には、ある種の脂肪肉腫、前立腺癌、多発性骨髄腫、および膵癌は、ＰＰＡＲγの活性化に反応性があることが示されているが、少なくともいくつかの結腸直腸癌および乳癌は反応性がない（Ｒｕｍｉら、２００４年、Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃ Ａｇｅｎｔｓ、４：４６５−７７）。他の研究から、他の乳癌および結腸癌、ならびに神経芽細胞腫および傍抗癌が、ＰＰＡＲアゴニストに反応性があることが実証されている。癌の治療のためのＰＰＡＲリガンドの使用は、Ｌｅｖｙ Ｋｏｐｅｌｏｖｉｃｈ、２００２年、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、３５７によって概説されている。
【０１００】
しかしながら、ある型の癌はＰＰＡＲγでの活性化に反応性がある場合があっても、所定の型の全ての癌は反応性がない場合もある。具体的には、ＰＰＡＲγの機能喪失型の変異が癌において頻繁に生じ、かかる癌は、一般に反応性でない。したがって、癌が機能的ＰＰＡＲγを発現することが好ましい。
【０１０１】
臨床状態はまた、ウイルス感染、特にＡＩＤＳまたはＨＩＶによる感染またはＣ型肝炎ウイルスによる感染等の感染である場合がある。また、本発明のＰＰＡＲリガンドは、神経系疾患もしくは認知症における認知機能を向上させるために、または多嚢胞性卵巣症候群を治療するために、または骨量減少、例えば骨粗鬆症を予防および治療するために、有用である場合がある。
【０１０２】
臨床状態はまた、肝疾患、特にＣ型肝炎ウイルスによる感染、またはＣ型肝炎ウイルス感染と関連があるかどうかを問わないが、好ましくはＰＰＡＲ調節に反応性がある、脂肪肝、肝炎、肝臓病変、肝硬変、非アルコール性脂肪性肝炎、もしくは肝癌後である場合がある。
【０１０３】
記載の多くはＰＰＡＲγに関するが、本発明の化合物および方法は、ＰＰＡＲγの調節に限定されない。実際、他のＰＰＡＲサブタイプが疾患において重要な役割を果たすことは、当業者に明らかであろう。例えば、ＰＰＡＲδは、脂肪代謝障害および創傷治癒、具体的には表皮創傷治癒と関連付けられている（Ｓｏｏｎ Ｔａｎら、２００４年、Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔａｒｇｅｔｓ、３９）。したがって、臨床状態はまた、表皮創傷治癒を含む創傷治癒である場合がある。
【０１０４】
インスリン感受性改善薬、例えばグリタゾンは、インスリン抵抗性を治療するために使用されているが、インスリン感受性を増強するが、それらはまた、体重を減少させるよりは増加させる。肥満および肉体的不活発は、インスリン抵抗性を悪化させる。グリタゾン（チアゾリジンジオンまたはＴＺＤ）は、脂肪組織、肝臓、および筋肉においてインスリン感受性を向上させることによって作用する。前記薬剤での治療は、いくつかの糖尿病の動物モデルにおいて試験されており、いかなる低血糖反応の発生もなしに、上昇したグルコース、トリグリセリド、および非エステル型遊離脂肪酸の血漿レベルの完全な矯正を生じる（Ｃｈｅｎｇ ＬａｉおよびＬｅｖｉｎｅ、２０００年、Ｈｅａｒｔ Ｄｉｓ．、２、３２６−３３３）。これらのチアゾリジンジオンの例は、ロシグリタゾン、ピオグリタゾンおよびトログリタゾンである。しかしながら、魅力的な治療効果を提供するが、これらの化合物は、血液希釈（浮腫を含む）、肝毒性、体重増加（増大した脂肪細胞分化からの体脂肪増大、血漿量増大、および心肥大を含む）、中程度だが有意なＬＤＬ−コレステロール増大および貧血を含む多数の深刻な望ましくない副作用を被っている（概説については、Ｌｅｂｏｖｉｔｓ、２００２年、Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｍｅｔａｂ．Ｒｅｓ．Ｒｅｖ、１８、補足２、Ｓ２３−９参照）。実際、糖尿病の多くの利用可能な治療は、体重増加、疾患の長期の管理の高い有意性の問題と関連がある。したがって、肥満、糖尿病ならびに心血管および肝疾患等の一般に関連のある障害の管理において使用することができる、代替的な、より効果的な治療剤の、大きな必要性がある。
【０１０５】
したがって、ある実施形態において、本発明は、本発明の化合物を、
ｉ．肥満および糖尿病を患っている、または
ｉｉ．糖尿病を得る危険性があり、肥満になりつつある、または
ｉｉｉ．肥満を患っており、糖尿病を得る危険性がある、または
ｉｖ．糖尿病を患っており、肥満になる危険性がある
個体に投与することによる、肥満および糖尿病の同時の治療および／または予防に関する。
【０１０６】
本発明はまた、肥満および糖尿病の同時の治療および／または予防のための薬物の調製のための、本発明の化合物の使用に関する。化合物は、本明細書中で上述される化合物のいずれであってもよい。この実施形態の範囲内で、糖尿病は、好ましくは、ＩＩ型糖尿病である。糖尿病を得る危険性がある前記個体は、例えば、本明細書中で上述されているメタボリックシンドロームを患っている個体である場合がある。肥満になる危険性がある前記個体は、例えば、体重増加の副作用を有する抗糖尿病薬での医学的治療下にある個体である場合がある。
【０１０７】
本発明はまた、臨床状態の治療または予防のための薬物の調製のための、上述の特定の化合物のいずれかの使用に関する。臨床状態は、メタボリックシンドローム、脂質異常症、肥満、真性糖尿病、インスリン抵抗性、または上述のインスリン抵抗性と関連する状態のいずれか、高血圧、心血管疾患、冠状動脈再狭窄、自己免疫疾患（喘息、多発性硬化症、乾癬、局所的皮膚炎、および潰瘍性大腸炎等）、癌、炎症、創傷治癒、脂肪代謝障害、肝疾患（Ｃ型肝炎ウイルスによる感染、またはＣ型肝炎ウイルス感染と関連があるかないかを問わず、脂肪肝、肝炎、肝臓病変、肝硬変もしくは肝癌後）、胃腸もしくは腎疾患（糸球体腎炎、糸球体硬化症、腎炎症候群、または高血圧性腎硬化症等）、感染（具体的にはウイルス感染）、認知機能障害（神経系の障害または認知症等）、多嚢胞性卵巣症候群、骨量減少（骨粗鬆症等）ならびにＡＩＤＳからなる群より選択してもよい。
【０１０８】
癌は、任意の癌、例えば以下のもののいずれかである場合がある：癌腫、肉腫、白血病、およびリンパ腫、腫瘍血管新生および転移、骨胃形成症、肝障害、ならびに造血疾患および／または骨髄増殖性疾患。例示的な障害としては、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、膵癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭癌、乳頭状腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原性肺癌、腎細胞癌、肝細胞腫、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胚性癌腫、ウィルムス腺癌、子宮頸癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、グリオーマ、星細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭癌、上皮腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫瘍、乏突起グリオーマ、髄膜腫、メラノーマ、神経芽細胞腫、または網膜芽細胞腫が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、癌は、ＰＰＡＲγの活性化に反応性のある、上述の癌の１つである。
【０１０９】
心血管疾患は、例えば、アテローム発生、アテローム性動脈硬化症もしくはアテローム硬化性障害、血管再狭窄、心筋症、または心筋線維症、または上述の心血管疾患のいずれかである場合がある。
【０１１０】
炎症は、例えば、慢性炎症、好ましくは本明細書中で上述された慢性炎症のいずれかである場合がある。
【０１１１】
真性糖尿病は、複数の病因因子由来の疾患プロセスをいい、上昇した血液中のグルコースのレベル、または高血糖によって特徴付けられる。制御されていない高血糖は、増大した、および早発性の罹患率および死亡率によって特徴付けられる。少なくとも２つの型の真性糖尿病が同定されている：（ｉ）正常な生理学的条件下でグルコース利用を制御するホルモンであるインスリンの完全な欠如の結果である、Ｉ型糖尿病、またはインスリン依存性糖尿病（ＩＤＤＭ）、および（ｉｉ）ＩＩ型糖尿病、またはインスリン非依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）。ＮＩＤＤＭは、いくつかの場合において循環インスリンレベルを増大させることによって対処することができる、複数の病因因子由来の複雑な疾患である。
【０１１２】
医薬製剤および投与の方法
本発明の化合物および組成物に従って、当業者に理解されるように、本明細書中に記載されている化合物の１つ以上を、選択された投与の経路に依存して、種々の形態で哺乳動物に投与してもよい。本発明の組成物は、経口または非経口で投与してもよく、後者の経路は、静脈内および皮下投与を含む。非経口投与は、選択された期間にわたる持続点滴によるものであってもよい。
【０１１３】
注射可能な使用のための形態としては、無菌水溶液または分散および無菌の注射可能溶液または分散の即席の調製のための無菌の粉末が挙げられる。全ての場合において、形態は、無菌でなければならず、容易な注射可能性が存在する程度まで流動性でなければならない。
【０１１４】
患者による投与の容易さのために、経口または他の非侵襲性の投与の様式、例えばパッチ、坐剤等の様式が好ましい。化合物は、不活性な希釈剤もしくは吸収できる食用担体とともに経口投与してもよく、またはハードもしくはソフトシェルゼラチンカプセル中に封入するか、圧縮して錠剤にするか、もしくは食事の食物と直接組み合わせてもよい。経口の治療的投与のために、化合物は、賦形剤と組み合わされ、摂取可能な錠剤、バッカル錠、トローチ、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁液、シロップ、ウェーハ等の形態で使用してもよい。
【０１１５】
１つ以上の本発明の化合物を含む組成物はまた、リポソームと呼ばれるリン脂質ベシクル内に含まれた溶液または乳濁液中で投与してもよい。リポソームは、単層でも多層でもよく、ホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、コレステロール、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ジミリストイルホスファチジルコリンおよびそれらの組み合わせから選択される成分で形成される。多層リポソームは、単層ベシクルと同様の組成の多層ベシクルを含むが、溶液または乳濁液中の化合物が封入される複数の区画を生じるように調製される。また、他の補助剤および修飾物質が、ポリエチレングリコール、または他の物質等のリポソーム製剤中に含まれる場合がある。
【０１１６】
組成物を含むリポソームはまた、それらの送達を標的化するために、リポソームの表面に固定された抗体を有すること等の変更を有してもよい。
【０１１７】
「臨床状態」の項で上述された臨床状態の１つを治療するための、インビボの投与に適した生物学的に適合性のある形態の、対象への投与のための医薬組成物が、本発明のある実施形態にあり、前記方法は、安全で効果的な量の化合物を単独で、または他の薬剤および／もしくは薬学的担体との組み合わせを含む。例えば、フィブラートクラスの薬物、例えばベザフィブラート等の脂質異常症に対して効果的な薬剤を組み合わせて本発明の化合物を用いて、インスリン抵抗性および／または糖尿病を治療することができる。いくつかの他の薬剤の例は、インスリン感受性改善薬、ＰＰＡＲγアゴニスト、グリタゾン、トログリタゾン、ピオグリタゾン、エングリタゾン、ＭＣＣ−５５５、ＢＲＬ ４９６５３、ビグアナイド、メトホルミン、フェンホルミン、インスリン、インスリン模倣剤、スホニル尿素、トルブタミド、グリピジド、α−グルコシダーゼ阻害剤、アカルボース、コレステロール降下薬、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、ロバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、リバスタチン、他のスタチン、シクエストレート、コレスチラミン、コレスチポール、架橋デキストランのジアルキルアミノアルキル誘導体、ニコチニルアルコール、ニコチン酸：ニコチン酸塩、ＰＰＡＲαアゴニスト、フェノフィブリン酸誘導体、ゲムフィブロジル、クロフィブラート、フェノフィブラート、コレステロール吸収の阻害剤、β−シトステロール、アクリルＣｏＡ：コレステロールアシルトランスフェラーゼ阻害剤、メリナミド、プロブコール、ＰＰＡＲδアゴニスト、抗肥満化合物、フェンフルラミン、デクスフェンフルラミン、フェンチラミン、スルビトラミン、オーリスタット、神経ペプチドＹ５阻害剤、β_３アドレナリン受容体アゴニスト、および回腸胆汁酸トランスポーター阻害剤である。
【０１１８】
組成物は、組成物がインビボで有効性を有するので、ヒトおよび動物を含む、かかる治療を必要とする任意の生物に投与することができる。安全で有効、によって、本明細書中で使用される場合、深刻な副作用を避けながら、対象に影響を及ぼす疾患を減少、予防、改善、または治療するために十分な能力を提供することが意味される。安全で有効な量は、対象の年齢、治療される対象の身体的条件、障害の重症度、治療の期間および任意の併用療法の性質に依存して変化し、その決定は、通常の医師の能力の範囲内である。組成物は、本明細書中に記載されているのと同じ一般的な様式で、製剤化および投与される。本発明の化合物は、単独で、または１つ以上のさらなる活性薬剤と組み合わせて、効果的に用いることができる。併用療法は、本発明の化合物および１つ以上のさらなる活性薬剤を含む単一の薬剤の投薬組成物の投与、ならびに本発明の化合物の投与および各活性薬剤をそれぞれ別々に投薬することを含む。例えば、本発明の化合物およびスルホニル尿素、チアゾリジンジオン、ビグアナイド、メグリチニド、インスリンまたはα−グルコシダーゼ阻害剤等のインスリン分泌促進物質を、カプセル剤もしくは錠剤等の単回経口投薬組成物でともに患者に投与するか、または各薬剤を別々の経口投薬で投与することができる。別々の投薬が使用される場合、本発明の化合物および１つ以上のさらなる活性薬剤を、本質的に同時に、すなわち同時または別々に交互の回で、すなわち連続して投与することができ、併用療法は、これら全ての投与計画を含むと理解される。
【０１１９】
本発明の医薬組成物の治療有効量はまた、対象の疾患状態、年齢、性別、および体重、ならびに化合物が対象において所望の反応を誘発する能力等の因子によって変化してもよい。投与計画は、最適な治療反応を提供するよう調節してもよい。例えば、いくつかの分割された用量を毎日投与してもよく、または、治療状況の要求によって示されるように、用量が比例して減少してもよい。
【０１２０】
約４ｍｇ／ｋｇの用量は、哺乳動物に適した最初の投薬量であるようであり、この投薬量は、安全で有効な量を提供するように、必要に応じて調節してもよい。したがって、投薬量は、最初は、典型的には０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．５〜１０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは１〜５ｍｇ／ｋｇである。
【０１２１】
薬学的に許容され得る担体は、本明細書中で使用される場合、１つ以上の適合性のある固体または液体送達系が、対象に投与されたときに非侵害性の生理学的反応を有することを意味する。いくつかの例としては、デンプン、糖、セルロースおよびその誘導体、粉末化トラガカント、麦芽、ゼラチン、コラーゲン、滑石、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、硫酸カルシウム、植物油、ポリオール、寒天、アルギン酸、発熱物質不含水、等張生理食塩水、リン酸バッファー、および医薬製剤において用いられる他の適した非毒性物質が挙げられるが、これらに限定されない。湿潤剤および潤滑剤、錠剤化剤、安定剤、抗酸化剤、ならびに保存料等の等の他の賦形剤もまた、企図される。
【０１２２】
本明細書中に記載されている組成物は、化合物または類似体の有効量が薬学的に許容され得る担体と混合物中で組み合わされるように、対象に投与することができる薬学的に許容され得る組成物の調製のための公知の方法によって調製することができる。適した担体は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、米国ペンシルバニア州イーストン、１９８５年）に記載されている。これに基づいて、組成物は、排他的ではないが、１つ以上の薬学的に許容され得るビヒクルまたは希釈剤と関連した化合物の溶液を含み、適したｐＨを有し、生理学的液体と等浸透圧の緩衝液中に含まれる。
【０１２３】
以下の実施例は、本明細書中の特定の態様を記載して、本発明を説明し、実施例は単に本発明の理解および実施において有用な特定の方法論を提供するだけなので、本発明を限定すると解釈されるべきではない。
【実施例】
【０１２４】
実施例１
４−（Ｚ）−６−（２−ｏ−クロロフェニル−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキセン酸の合成
この実施例は、スキーム２に従って、本明細書中でＤＰＤとも呼ばれる、４−（Ｚ）−６−（２−ｏ−クロロフェニル−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキセン酸の合成を説明する（表ＩＩ中のＳＮ１）。
【０１２５】
スキーム２
【０１２６】
【化９】

【０１２７】
２−メトキシ−パラコン酸の合成（２−３）：２０Ｌの二重ジャケットガラスリアクターに２６０ｇのｏ−メトキシベンズアルデヒド、２８６ｇの無水コハク酸、５７２ｇの無水塩化亜鉛、および２６００ｍＬの無水ＤＣＭを充填した。混合物を撹拌し、２℃に冷却した。５３３ｍＬの量のトリエチルアミンを３０分間にわたって添加した。次いで、混合物を周囲温度で２４時間撹拌させた。１６９０ｍＬの量の２Ｍ ＨＣｌを添加し、次いで２６００ｍＬの酢酸エチルを添加した。混合物を５分間活発に撹拌した。２０００ｍＬの酢酸エチルで水相を抽出した。合わせた有機性抽出物を６５０ｍＬの飽和塩水で洗浄し、次いで３×２６００ｍＬの飽和重炭酸ナトリウムで洗浄した。次いで、合わせた水性抽出物を酢酸エチルで洗浄した。濃ＨＣｌを用いて、水性抽出物をｐＨ２まで酸性化した。黄色の油を分離した。混合物を、２０００ｍＬの酢酸エチルを用いて２回抽出した。有機相を１０００ｍＬの塩水で４回洗浄し、４５℃の加熱浴温度を使用したＢｕｃｈｉ Ｒ２２０ロータバップで蒸発させた。残りの残渣に４０００ｍＬのトルエンを添加した。混合物を１１０℃に加熱した。１Ｌのトルエンを蒸発させて除いた。残りを室温まで冷却させ、４８時間放置し、その間純粋な２−メトキシ−パラコン酸が結晶化した。結晶物質を集め、ろ過し、一定の重量まで、真空オーブン中で、真空中、４５℃で乾燥させた。
【０１２８】
収量：２２０ｇ（４９％）。シス／トランス比：４６／５４
シス−およびトランスラセミメトキシ−パラコン酸から全トランス−２−メトキシパラコン酸への転換（２−４）：１０２０ｇのメトキシパラコン酸を、１７２９ｍＬの濃硫酸および２５７０ｍＬの水の混合物に添加した。混合物を室温で１８時間撹拌させた。３３：６４のシス／トランス比が得られた。次いで、混合物を２．５時間、６０℃に加熱した。１１：８９のシス／トランス比が得られた（ＨＰＬＣによる分析）。次いで、混合物を室温に冷却させ、続いてろ過した。固体物質を酢酸エチル中に再び溶解させ、水および塩水で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、蒸発させた。６：９４のシス／トランス比が得られた。固体物質を熱いトルエンから再結晶化させた。得られた結晶物質を、４０℃で４８時間、真空中で乾燥させた。
【０１２９】
収量：８５５ｇ（８４％）。シス／トランス比：８／９２。融点：１３２〜１３３℃
【０１３０】
【化１０】

【０１３１】
メトキシ−パラコン酸、ラセミ化合物のエステル化（２−５）：１９３ｇのメトキシ−パラコン酸を、６００ｍＬのＴＨＦ中に溶解させた。混合物に、１４５ｇのＣＤＩ（８９９ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加し、混合物を１０分間撹拌した。６５ｍＬの量の無水エタノール（またはメチルエステルを生じるためのメタノール）を添加し、完了するまで（約１２０分間）混合物を撹拌した。酢酸エチルおよび飽和重炭酸ナトリウムを用いて、粗反応混合物を抽出した。有機相を０．５Ｎ ＨＣｌおよび塩水で洗浄した。蒸発の後、１８８ｇの量の所望のエチルエステルが得られた。
【０１３２】
ラセミメトキシ−パラコン酸、エチルエステルの還元（２−６）：ラセミラクトールの調製：５℃で、７００ｍＬのトルエン中の１０５ｇのエチルエステル（３９７ｍｍｏｌ）。３当量のＤＩＢＡＬ−Ｈ（１．１９ｍｏｌ、１．１９Ｌ １Ｍ溶液）を添加した。室温で６０分間撹拌した。メタノールで反応停止させた。２．５Ｌの酢酸エチルを加えた。７００ｍＬの水。水相をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を塩水で洗浄した。クロロホルム／ヘキサンから油状の残渣を蒸発、再結晶化させた。固体をろ過し、真空中で乾燥させた。
【０１３３】
収量：５３ｇ（２３７ｍｍｏｌ、５９％）。
【０１３４】
ラセミジオールのラセミラクトール合成に使用されるウィティッヒ反応（２−８）：１９１ｇの量のカルボキシプロピルトリフェニルホスホニウムブロマイド、１０００ｍＬの無水トルエンおよび１００ｇのカリウムｔ−ブトキシドを、８０℃で３０分間混合した。混合物を室温に冷却した。１８０ｍＬの無水ＴＨＦに予め溶解させた２５ｇの量の精製ラセミラクトール（１１４．５ｍｍｏｌ）を、ゆっくり添加した。反応を６０分間継続させた。粗反応混合物を１５００ｍＬの冷水に注ぎ、３００ｍＬの酢酸エチルを添加した。水相を３００ｍＬの酢酸エチルで再抽出した。次いで、水相を２Ｎ ＨＣｌで酸性化し、３００ｍＬの酢酸エチルを用いて３回抽出した。形成された固体をろ過して除いた。有機相を蒸発させた。蒸発した残渣に、５００ｍＬのジエチルエーテルを添加した。フラスコを１０分間回転させ、固体をろ過して除いた。ろ液を、飽和重炭酸ナトリウム溶液で３回抽出した。次いで、２Ｍ ＨＣｌを用いて水相をｐＨ４まで酸性化した。次いで、水相を、２００ｍＬの酢酸エチルを使用して３回抽出した。有機相を合わせて、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、蒸発させて、４５ｇの物質を生じた。
【０１３５】
カラムクロマトグラフィー：ラセミジオールをシリカゲル（３５ｃｍカラム長、４ｃｍ直径）で精製した。ラセミジオールを最少の酢酸エチルに溶解させ、カラムに適用した。１Ｌの酢酸エチル（６０％）／ヘキサン（４０％）を、容積測定シリンダーに加えた。３００ｍＬのＥｔＯＡｃ／ヘキサンをシリンダーから採取し、カラムに加えた。酢酸エチルを用いて、シリンダー中の残りの７００ｍＬのＥｔＯＡｃ／ヘキサンを１Ｌまで希釈した。次いで、３００ｍＬの新しいＥｔＯＡｃ／ヘキサン溶液をカラムに加え、カラムを通過させた。酢酸エチルを用いて、シリンダー中の残りの７００ｍＬのＥｔＯＡｃ／ヘキサンを、再び１Ｌまで希釈した。次いで、３００ｍＬの新しいＥｔＯＡｃ／ヘキサン溶液をカラムに加え、カラムを通過させた。酢酸エチルを用いて、シリンダー中の残りの７００ｍＬのＥｔＯＡｃ／ヘキサンを、もう１回１Ｌまで希釈した。次いで、３００ｍＬの新しいＥｔＯＡｃ／ヘキサン溶液をカラムに加え、カラムを通過させた。ラセミジオールの純粋な画分を集め、蒸発させて、２６ｇの純粋なラセミジオールを生じた。
【０１３６】
収量：２６ｇ（８８．３ｍｍｏｌ、７９％）
ラセミジオールの、ラセミアセトニドへの転換（２−１０）：２６ｇ（８８ｍｍｏｌ）の精製ジオールを、２６０ｍＬのジメトキシプロパンおよび２６ｍｇのｐ−ＴｓＯＨと混合した。混合物を、周囲温度で一晩撹拌させた。３滴のトリエチルアミンを添加し、混合物を蒸発させた。残りの残渣に１５０ｍＬのヘキサンを添加し、混合物を一晩撹拌した。固体をろ過して除き、乾燥させて２５ｇ（７５ｍｍｏｌ）のラセミアセトニドを生じた。
【０１３７】
収率：８５％
ラセミアセトニドの脱メチル化（２−１２）：１６．７ｇのエタンチオールを、３７５ｍＬのＤＭＰＵ中の２１．５ｇのＮａＨの混合物に添加することによって、水素化ナトリウムおよびエタンチオールの懸濁液を調製した。懸濁液を８０℃に加熱し、周囲温度まで冷却させた。
【０１３８】
１５ｇのラセミアセトニドを７５ｍＬのＤＭＰＵ中に溶解させ、ＥｔＳＨ／ＮａＨの懸濁液に添加した。混合物を１３０℃で２時間加熱した。次いで、反応混合物を氷水に注ぎ、ＤＣＭで抽出した。２Ｎ ＨＣｌを用いて水層を酸性化し、酢酸エチルで抽出した。有機層を塩水で洗浄し、蒸発乾固させた。
【０１３９】
収量：１６．５ｇ（粗）。
【０１４０】
ラセミの調製（２−１４）：２８ｍｍｏｌの量の脱メチル化されたラセミアセトニドを、１５ｍＬの２−クロロベンズアルデヒド、０．５ｇのｐ−ＴｓＯＨ、および６０ｍＬのトルエンと混合した。混合物を２４時間撹拌し、蒸発させた。Ｂｉｏｔａｇｅ Ｈｏｒｉｚｏｎ（登録商標）クロマトグラフィー装置を使用したシリカゲルクロマトグラフィーを用いて、粗反応混合物を精製した。ＤＣＭ（１９）／メタノール（１）を用いて混合物を精製して、蒸発の後に６．５ｇの固体を生じた。
【０１４１】
収量：６．５ｇ（１６．７ｍｍｏｌ、５９％）
スキーム３：表Ｉ（および表ＩＩ）に記載されているＰＰＡＲ調節因子のための合成経路
【０１４２】
【化１１】

【０１４３】
【化１２】

【０１４４】
実施例２
ＰＰＡＲ調節因子２（ＳＮ２、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム３に従う、ＰＰＡＲ調節因子２（ＳＮ２、表ＩＩ）の合成を説明する。実施例１に記載されているような１００ｍｇ（０．３１ｍｍｏｌ）の量のラセミアセトニド（６−［４−（２−ヒドロキシフェニル）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキサン−５−イル］−ヘキス−４−エノン酸）２−１２を、１ｍＬのトルエンおよび１０ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸と混合した。混合物に、２当量（０．６２ｍｍｏｌ、１０８ｍｇ）の２，３−ジクロロベンズアルデヒドを添加した。混合物を２４時間撹拌し、窒素流を用いて蒸発させた。メタノール（１）／ＤＣＭ（１９）を用いて、粗反応混合物をシリカゲルカラムで精製した。純粋な画分をＴＬＣによって同定し、集め、蒸発させ、ＨＰＬＣおよび質量分析よって分析した。
【０１４５】
質量スペクトル（エレクトロスプレー、ネガティブモード）：［Ｍ−Ｈ］−＝４３５
実施例３
ＰＰＡＲ調節因子６（ＳＮ６、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム３に従う、ＰＰＡＲ調節因子６（ＳＮ６、表ＩＩ）の合成を説明する。１００ｍｇ（０．３１ｍｍｏｌ）の量のラセミアセトニドを、１ｍＬのトルエンおよび１０ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸と混合した。混合物に、２当量（０．６２ｍｍｏｌ、７０ｍｇ）のシクロヘキサノンを添加した。混合物を２４時間撹拌し、窒素流を用いて蒸発させた。メタノール（１）／ＤＣＭ（１９）を用いて、粗反応混合物をシリカゲルカラムで精製した。純粋な画分をＴＬＣによって同定し、集め、蒸発させ、ＨＰＬＣおよび質量分析によって分析した。
【０１４６】
質量スペクトル（エレクトロスプレー、ネガティブモード）：［Ｍ−Ｈ］−＝３５９
実施例４
ＰＰＡＲ調節因子８（ＳＮ８、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム３に従う、ＰＰＡＲ調節因子８（ＳＮ８、表ＩＩ）の合成を説明する。
【０１４７】
Ｎ−Ｂｏｃ ４−オキソピペリジンの調製：２ｇの量の４−オキソピペリジンを、２０ｍＬのジオキサン／水に溶解させた。混合物に、２当量の重炭酸ナトリウム、次いで１．０当量のＢｏｃ２Ｏを添加した。混合物を４時間撹拌した。酢酸エチル（１００ｍＬ）を添加した。０．２Ｎ ＨＣｌおよび塩水を用いて、有機相を２回洗浄した。次いで、有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させて、結晶化した油を生じた。１００ｍｇ（０．３１ｍｍｏｌ）の量のラセミアセトニドを、１ｍＬのトルエンおよび１０ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸と混合した。混合物に、２当量（０．６２ｍｍｏｌ）のＮ−Ｂｏｃ−４−オキソピペリジンを添加した。混合物を２４時間撹拌し、窒素流を用いて蒸発させた。メタノール（１）／ＤＣＭ（１９）を用いて、粗反応混合物を微小のシリカゲルカラムで精製した。純粋な画分をＴＬＣによって同定し、集め、蒸発させ、ＨＰＬＣおよび質量分析によって分析した。
【０１４８】
質量スペクトル（エレクトロスプレー、ネガティブモード）：［Ｍ−Ｈ］−＝４６０
本明細書中で、下記で言及される生物学的アッセイは、スピロ−ピペリジン環上に依然として存在するＢｏｃ−保護基を含む反応生成物で行った。
【０１４９】
実施例５
ＰＰＡＲ調節因子９（ＳＮ９、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム３に従う、ＰＰＡＲ調節因子９（ＳＮ９、表ＩＩ）の合成を説明する。
【０１５０】
１−ナフタレンカルボキシアルデヒドの調製 ３．８７ｍＬの量の塩化オキサリル（４４．２４ｍｍｏｌ）を、１００ｍＬのＤＣＭに溶解させた。混合物を−６０℃に冷却した。注射器を用いて、５．６ｍＬの量のＤＭＳＯを滴下した。混合物を１５分間撹拌した。７５ｍＬのＤＣＭ中の５ｇのナフタレン−１−メタノールの溶液を滴下した。反応を、−６０℃で１時間継続させた。２０ｍＬの量のトリエチルアミンを添加した。混合物を１５℃に達させた。混合物を抽出漏斗に移し、水、１Ｍ ＨＣｌ、水および塩水で洗浄した。次いで、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させた。粗生成物は、次の工程においてさらなる精製なしで使用するのに十分純粋であった。
【０１５１】
実施例１に従って調製された１００ｍｇ（０．３１ｍｍｏｌ）の量のラセミアセトニド（上述のような２−１２）を、１ｍＬのトルエンおよび１０ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸と混合した。混合物に、２当量（０．６２ｍｍｏｌ、９７ｍｇ）の１−ナフタレンカルボキシアルデヒドを添加した。混合物を２４時間撹拌し、窒素流を用いて蒸発させた。メタノール（１）／ＤＣＭ（１９）を用いて、粗反応混合物をシリカゲルカラムで精製した。純粋な画分をＴＬＣによって同定し、集め、蒸発させ、ＨＰＬＣおよび質量分析によって分析した。
【０１５２】
質量スペクトル（エレクトロスプレー、ネガティブモード）：［Ｍ−Ｈ］−＝４１７
実施例６
ＰＰＡＲ調節因子１１（ＳＮ１１、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム３に従う、ＰＰＡＲ調節因子１１（ＳＮ１１、表ＩＩ）の合成を説明する。
【０１５３】
１００ｍｇ（０．３１ｍｍｏｌ）の量のラセミアセトニド（実施例１の２−１２）を、１ｍＬのトルエンおよび１０ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸と混合した。混合物に、２当量（０．６２ｍｍｏｌ、６２ｍｇ）のヘキサナールを添加した。混合物を２４時間撹拌し、窒素流を用いて蒸発させた。メタノール（１）／ＤＣＭ（１９）を用いて、粗反応混合物をシリカゲルカラムで精製した。純粋な画分をＴＬＣによって同定し、集め、蒸発させ、ＨＰＬＣおよび質量分析によって分析した。
【０１５４】
質量スペクトル（エレクトロスプレー、ネガティブモード）：［Ｍ−Ｈ］−＝３６１
実施例７
ＰＰＡＲ調節因子１３（ＳＮ１３、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム３に従う、ＰＰＡＲ調節因子１３（ＳＮ１３、表ＩＩ）の合成を説明する。
【０１５５】
１００ｍｇ（０．３１ｍｍｏｌ）の量のラセミアセトニドを、１ｍＬのトルエンおよび１０ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸と混合した。混合物に、２当量（０．６２ｍｍｏｌ、１３０ｍｇ）のｏ−２−オキソ−４ａ，８ａ−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−カルバルデヒドを添加した。混合物を２４時間撹拌し、窒素流を用いて蒸発させた。メタノール（１）／ＤＣＭ（１９）を用いて、粗反応混合物を微小なシリカゲルカラムで精製した。純粋な画分をＴＬＣによって同定し、集め、蒸発させ、ＨＰＬＣおよび質量分析によって分析した。
【０１５６】
質量スペクトル（エレクトロスプレー、ネガティブモード）：［Ｍ−Ｈ］−＝４６９
実施例８
ＰＰＡＲ調節因子１９（ＳＮ１９、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム３に従う、ＰＰＡＲ調節因子１９（ＳＮ１９、表ＩＩ）の合成を説明する。
【０１５７】
１００ｍｇ（０．３１ｍｍｏｌ）の量のラセミアセトニドを、１ｍＬのトルエンおよび１０ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸と混合した。混合物に、２当量（０．６２ｍｍｏｌ、１０３ｍｇ）の２，３−ジメトキシベンズアルデヒドを添加した。混合物を２４時間撹拌し、窒素流を用いて蒸発させた。メタノール（１）／ＤＣＭ（１９）を用いて粗反応混合物をシリカゲルカラムで精製した。純粋な画分をＴＬＣによって同定し、集め、蒸発させ、ＨＰＬＣおよび質量分析によって分析した。
【０１５８】
ＨＰＬＣ：保持時間（グラジエントＡ）：１５．２３、１５．３９分、９５％（異性体の１：１混合物の合計）
質量スペクトル（エレクトロスプレー、ネガティブモード）：［Ｍ−Ｈ］−＝４２７．２
実施例９
ＰＰＡＲ調節因子１４（ＳＮ１４、表ＩＩ）の合成 この実施例は、スキーム３に従う、スキーム３に従う、ＰＰＡＲ調節因子１４（ＳＮ１４、表ＩＩ）の合成を説明する。
【０１５９】
室温で、撹拌された、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中のジオール（０．０８ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）の溶液に、２，６−ジクロロベンズアルデヒド（０．０７ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）およびｐＴＳＡ（３ｍｇ）を添加した。反応混合物を８時間撹拌し、トリエチルアミン（２〜３滴）で反応停止させた後、真空中で濃縮した。残渣を、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（８：２）で希釈したシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィーによって精製して、無色の油として、アセタール（１００ｍｇ、４５％収率）を得た。
【０１６０】
【化１３】

【０１６１】
実施例１０
ＰＰＡＲ調節因子１５（ＳＮ１５、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム３に従う、ＰＰＡＲ調節因子１５（ＳＮ１５、表ＩＩ）の合成を説明する。スキーム−２、実施例１の化合物２−１２（１００ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（５ｍＬ）中に溶解させ、触媒量のｐＴｓＯＨ（５ｍｇ）を室温で添加した。反応混合物を室温で８時間撹拌し続けた。２，３，４，５，６−ペンタフルオロベンズアルデヒド（１５８ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）を反応塊に添加し、もう１回触媒量のｐＴｓＯＨを添加した。反応条件をさらに２４時間維持した。反応の完了後に、乾燥したＥｔ３Ｎを添加して、ｐＨ＝７に調節した。真空下で溶媒を除去し、得られた粗混合物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、最終生成物１５を得た。
【０１６２】
スキーム４：表ＩＩＩ（および表ＩＩ）に記載されている化合物の合成経路
【０１６３】
【化１４】

【０１６４】
【化１５】

【０１６５】
実施例１０
ＰＰＡＲ調節因子２３（ＳＮ２３、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム４に従う、ＰＰＡＲ調節因子２３（ＳＮ２３、表ＩＩ）の合成を説明する。
【０１６６】
ウィティッヒ反応 １０ｇ（２２．５６ｍｍｏｌ）の量のＢｒＰＰｈ_３（ＣＨ_２）_４ＣＯ_２Ｈを、６０ｍＬの乾燥トルエン中の５．０６ｇ（４５ｍｍｏｌ）のＫＯｔＢｕと混合した。混合物を３０分間８０℃に加熱し、周囲温度まで冷却させた。１０ｍＬの無水ＴＨＦ中の１．２６ｇの量のラセミラクトールを添加し、反応を２時間継続させた。スキーム−２の２−８の調製についての後処理。
【０１６７】
収量：３．３ｇ（粗、次の工程で使用する）。
【０１６８】
アセトニドの調製 前の工程で得られたジオールを、４０ｍＬのジメトキシプロパン中に溶解させた。２５ｍｇの量のｐ−ＴｓＯＨを添加し、反応を２４時間撹拌した。１滴のトリエチルアミンを添加し、混合物を蒸発させた。粗混合物を、小さいシリカゲルカラムでろ過した。
【０１６９】
収量：１．６ｇ
アセトニドの脱メチル化 １．９１ｍＬの量のエタンチオール（２５．８３ｍｍｏｌ）を、５０ｍＬのＤＭＰＵと混合した。５１．７ｍｍｏｌの量のＮａＨ（２．０６ｇの、油中の６０％分散）を添加し、混合物を３０分間８０℃に加熱した。混合物を周囲温度まで冷却した。７．５ｍＬのＤＭＰＵ中の１．５ｇのアセトニド（４．３ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、混合物を１２５℃で２時間撹拌した。粗混合物を氷水に注ぎ、２×５０ｍＬのＤＣＭで抽出した。水相を２Ｎ ＨＣｌで酸性化し、次いで、ＥｔＯＡｃで抽出し、最後に塩水で洗浄した。有機相を蒸発させて、１．６ｇのヒドロキシ−アセトニドを生じた。
【０１７０】
２−クロロベンズアルデヒドとの反応 ヒドロキシ−アセトニド（１．６ｇ、粗）を、２ｍＬの２−クロロベンズアルデヒド、８ｍＬの無水トルエン、および５０ｍｇのｐＴｓＯＨと混合した。混合物を２４時間撹拌し、蒸発させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製した。
【０１７１】
質量スペクトル（エレクトロスプレー、ネガティブモード）：［Ｍ−Ｈ］−＝４１５
実施例１１
ＰＰＡＲ調節因子１７（ＳＮ１７、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム４に従う、ＰＰＡＲ調節因子１７（ＳＮ１７、表ＩＩ）の合成を説明する。
【０１７２】
１００ｍｇ（０．３１ｍｍｏｌ）の量のラセミアセトニドを、１ｍＬのトルエンおよび１０ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸と混合した。混合物に、２当量（０．６２ｍｍｏｌ、１２２ｍｇ）の４−フェニルアミノベンズアルデヒドを添加した。混合物を２４時間撹拌し、窒素流を用いて蒸発させた。メタノール（１）／ＤＣＭ（１９）を用いて、粗反応混合物を微小なシリカゲルカラムで精製した。純粋な画分をＴＬＣによって同定し、集め、蒸発させ、ＨＰＬＣおよび質量分析によって分析した。
【０１７３】
ｏ−メトキシパラコン酸のメチルエステルの合成：ａ）撹拌された、乾燥ＤＭＦ（１５０ｍＬ）中の酸（５ｇ、２１．２８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｋ_２ＣＯ_３（２９．２ｇ、２１１．８ｍｍｏｌ）を添加し、次いでヨウ化メチル（６．０１ｇ、４２．３ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、反応混合物を室温で５時間撹拌した。反応混合物を水（１０ｍＬ）、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３０ｍＬ）で希釈し、有機層を分離した。ＣＨ_２Ｃｌ_２（２×１５ｍＬ）で水層を抽出し、合わせた有機相を塩水（２×２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空中で蒸発させて、エステルを得たが、これはさらなる反応において使用するのに十分に純粋であった。（収量：４．３４ｇ、８１．９％）。
【０１７４】
ｂ）撹拌された、乾燥エーテル（６０ｍＬ）中の酸５（１０ｇ、４２．３ｍｍｏｌ）の溶液に、新しく調製したジアゾメタン溶液（２００ｍＬ溶液、１０ｇのニトロソメチル尿素から生じた）を０℃で添加し、室温で３０分間撹拌した。出発物質が完全に消えた後で、エーテルを蒸発させて、エステル６を得て、これを、精製なしで、さらなる反応のために使用した。（収量：９．８ｇ、９８％）。黄色の、粘性のある油
【０１７５】
【化１６】

【０１７６】
実施例１２
ＰＰＡＲ調節因子３４（ＳＮ３４、表ＩＩ）の合成
この実施例は、ＰＰＡＲ調節因子３４（ＳＮ３４、表ＩＩ）の合成を説明する。
【０１７７】
窒素雰囲気下、触媒のｐ−トルエンスルホン酸（約５ｍｇ）の存在下で、乾燥トルエン（２ｍＬ）中のジオール７（０．４ｇ、１．３６ｍｍｏｌ）およびクロロベンズアルデヒドジメチルアセタール（０．２８ｇ、１．６３ｍｍｏｌ）の混合物を一晩撹拌した。出発物質が完全に消えた後で、反応混合物を固体ＮａＨＣＯ３で中和した。溶液を反応混合物から傾しゃし、ロータリーエバポレーターで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、ベンジリデンアセタールを生じた。
【０１７８】
収量：０．３１ｇ（５９％）
【０１７９】
【化１７】

【０１８０】
ＴＨＦ：Ｈ_２Ｏ（４ｍＬ、３：１）中のこの化合物（０．２ｇ、０．４８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬｉＯＨ．Ｈ_２Ｏ（０．３ｇ、７．１５ｍｍｏｌ）、メタノール（０．５ｍＬ）を添加し、室温で一晩撹拌した。反応混合物をＮａＨＳＯ４の飽和水溶液で中和し、ＣＨ２Ｃｌ２（２×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、ロータリーエバポレーターで蒸発させ、粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製した。
【０１８１】
収量：９５ｍｇ（５１％）
【０１８２】
【化１８】

【０１８３】
スキーム−４ａ
【０１８４】
【化１９】

【０１８５】
実施例１３
ＰＰＡＲ調節因子２５（ＳＮ２５、表ＩＩ）の合成
この実施例は、表ＩＩのＰＰＡＲ調節因子２５の合成を説明する。
【０１８６】
エタンチオール（０．７ｍＬ、９．５ｍｍｏｌ）を、撹拌された、乾燥ＤＭＦ（８ｍＬ）中のＮａＨ（０．３８ｇ、９．５ｍｍｏｌ）の懸濁液（油中６０％）に、０〜５℃で添加し、２０〜３０分間撹拌した。温度を維持しながら、乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）中の化合物４ａ−１（０．２５ｇ、０．９５ｍｍｏｌ）を、上述の混合物にゆっくり滴下した。反応塊温度を１２０〜１３０℃に上昇させ、６〜８時間維持した。反応の完了後に、塊を０〜５℃に冷却し、ｐＨ４〜５に調節することによって、１Ｎ ＨＣｌ（１ｍＬ）で反応停止させた。化合物を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出し、水層を分離した。合わせた有機性画分を集め、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム（２ｇ）で乾燥させ、真空で濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、純粋な４ａ−２を得た（酢酸エチル：ヘキサン、２．５：７．５）。
【０１８７】
収量：１５５ｍｇ（６５．６％収率）。
【０１８８】
４ａ−２の化合物（０．１５ｇ、０．６ｍｍｏｌ）を、８：２の比のアセトンおよび水の混合物（１０ｍＬ）中に溶解させた。上述の混合物に、ＯｓＯ_４（触媒量、０．０５Ｍ）およびＮＭＯ（０．１４ｇ、１．２ｍｍｏｌ）を添加し、室温で８〜１０時間撹拌し続けた。反応の進行をＴＬＣによってモニタリングした。反応の完了後に、飽和Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_５溶液（３ｍＬ）によって反応停止させた。溶媒アセトンを真空下で除去し、酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で化合物を抽出した。合わせた有機性画分を集め、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム（２ｇ）で乾燥させ、真空で濃縮した。
【０１８９】
ＴＨＦ：Ｈ_２Ｏ（８：２、１０ｍＬ）混合物中の粗生成物（スキーム中に示されていないジオール）の溶液に、ＮａＩ_４（０．２７ｇ、１．８ｍｍｏｌ）を室温で添加し、１時間撹拌し続けた。反応の完了後に、飽和Ｎａ_２ＳＯ_４溶液（３ｍＬ）で反応停止させた。化合物を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出し、水層を分離した。合わせた有機性画分を集め、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム（２ｇ）で乾燥させ、真空で濃縮した。粗生成物４ａ−３を、さらなる反応のために処理した。
【０１９０】
乾燥ベンゼン（１０ｍＬ）中の化合物４ａ−３の溶液に、Ｃ２−ウィティッヒイリド（０．１５ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を添加した。反応塊を、不活性な条件下、室温で２〜３時間撹拌し続けた。ロータリーエバポレーター中で過剰なベンゼンを除去し、このようにして得られた粗化合物４ａ−５をカラムクロマトグラフィーによる精製に供した。（酢酸エチル：ヘキサン、０．５：９．５）。
【０１９１】
収量：０．１１ｇ ｇ（９５％）
【０１９２】
【化２０】

【０１９３】
ＴＨＦ：Ｈ_２Ｏ（８：２、５ｍＬ）の混合物中の化合物４ａ−５（０．１１ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬｉＯＨ．Ｈ_２Ｏ（０．１ｇ、２．４ｍｍｏｌ）を室温で添加し、８〜１０時間撹拌し続けた。反応の完了後に、ｐＨを４〜５に調節することによって、飽和ＮａＨＳＯ_４溶液（１ｍＬ）によって反応停止させた。化合物を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出し、水層を分離した。合わせた有機性画分を集め、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム（２ｇ）で蒸発させ、真空で濃縮した。粗生成物４ａ−６を、さらなる反応のために処理した。
【０１９４】
化合物４ａ−６（８５ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ中に溶解させ、触媒量のｐＴＳＯＨを室温で添加した。反応混合物を室温で６〜８時間撹拌し続けた。ｏ−クロロベンズアルデヒド（８１ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）を反応塊に添加した。もう１回触媒量のｐＴＳＯＨを添加した。反応条件をさらに５〜６時間維持した。反応の完了後に、ｐＨ＝７に調節することによって、乾燥Ｅｔ_３Ｎを添加した。真空下で溶媒を除去し、得られた粗混合物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、最終生成物２５（表ＩＩ）を得た。（酢酸エチル：ヘキサン、３．５：６．５）。
【０１９５】
収量：３５ｍｇ（３２％）
上述の化合物ＨＰＬＣ純度は７９．２％であり、分取ＨＰＬＣによってこれをさらに精製して、純粋な化合物（９８％純度、１５ｍｇ）を得た。
【０１９６】
【化２１】

【０１９７】
スキーム５：
【０１９８】
【化２２】

【０１９９】
実施例１４
ＰＰＡＲ調節因子３７（ＳＮ３７、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム５に従う、表ＩＩのＰＰＡＲ調節因子３７の合成を説明する。
【０２００】
スキーム５中のマロン酸水素エチル５−２の調製：撹拌された、エタノール（１００ｍＬ）中のマロン酸ジエチル（２０ｇ、０．１２５モル）の溶液に、室温で、時々冷却しながら、エタノール（３０ｍＬ）中の８５％ＫＯＨ（７ｇ、０．１２５モル）の溶液を添加した。２０分後に、混合物を濃ＨＣｌで酸性化し、ろ過した。ろ過ケーキ（ＫＣｌ）をエタノール（５０ｍＬ）で洗浄した。合わせたろ液を濃縮し、残りの液体をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ：８５：１５）に供して、１（１４．７ｇ、８７％）を得た。
【０２０１】
【化２３】

【０２０２】
ケト−エステル５−４の調製：
乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の１４．３４ｇのマグネシウムエトキシド（０．１３モル）の懸濁液に、１０．５ｇのマロン酸水素エチル１ ５−２（０．０８モル）を添加し、９０分間還流した。反応混合物を０℃に冷却し、乾燥ＴＨＦ（２５ｍＬ）中の２−メトキシベンゾイルクロライド２（１４．５９ｇ：０．０８５モル）の溶液を、反応温度が５℃を超えない速度で添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌し、２日間放置した。塩化アンモニウムの飽和溶液を添加し、反応混合物をＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を蒸発させて、油として生成物を得て、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ：９５：５）によって精製して、生成物（４．３３ｇ、２５％収率）を生じた。生成物をスペクトルデータによって確認した。
【０２０３】
【化２４】

【０２０４】
撹拌された、乾燥ＴＨＦ（４０ｍＬ）中の水素化ナトリウム（６０％、０．９ｇ、０．０８モル）の懸濁液に、アセチル化エステル（４．３３ｇ、０．０１９モル）を０〜１０℃で滴下し、１５分間撹拌した。臭化アリル３（２．３０ｇ、０．０１９モル）を室温で反応混合物に添加し、反応混合物を３〜４時間還流した。反応混合物を冷却し、塩化アンモニウム溶液を添加し、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機層を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ｎ−へキサン−ＥｔＯＡｃ：９５：５）によって精製して、４（２．５ｇ、５０％収率）を得た。
【０２０５】
【化２５】

【０２０６】
ジオールの調製（５−７）：
温度が１０℃を超えない速度で、冷却した、乾燥ＴＨＦ（１５ｍＬ）中の水素化ホウ素リチウム（０．８３ｇ、０．０３８モル）の懸濁液に、冷却した、乾燥ＴＨＦ（２５ｍＬ）中のアルキル化ケトエステル４ ５−４（２．５ｇ、０．００９５モル）の溶液を添加した。撹拌を室温で４〜５時間継続し、反応の進行をＴＬＣによってモニタリングした。２Ｎ ＨＣｌの添加によって反応混合物をｐＨ２に酸性化し、水を反応混合物に添加し、ＥｔＯＡｃ（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を塩水、水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を蒸発させて、ジオール５ ５−７（２ｇ、９４％収率）のシスおよびトランス反応混合物を生じ、精製なしで次の工程に進んだ。ＨＰＬＣ：シス７７．３１８％、反応時間２０．２４４分、トランス：２２．６８２％、反応時間２２．３３７分（ＨＰＬＣ条件は、クロマトグラムに関して言及される）。
【０２０７】
アセトニド５−１０の調製：
ジオール５−７（２ｇ、０．００９モル）、２，２−ジメチルプロパン（１５ｍＬ、０．１２モル）、触媒量のｐＴＳＡ（１０ｍｇ）の溶液を、室温で４〜５時間撹拌し、反応の進行をＴＬＣによってモニタリングした。反応混合物をＥｔ_３Ｎで中和した。過剰なＤＭＰを真空下で除去し、油状のシス−トランス混合物をカラムクロマトグラフィーによって分離して、６ｂ ５−１０（０．９２５ｇ、収率４０％）を得た。
【０２０８】
【化２６】

【０２０９】
１，３−ジオキサンアルデヒドの調製（オゾン分解）５−１１：
永続的な青色が生じるまで、Ｏ_３を−７８℃で乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のアセトニド５−１０（０．９３ｇ、０．００４モル）の溶液に通過させた。青色が消えるまで、反応混合物を０℃で撹拌した。ＤＣＭ（５ｍＬ）中のＴＰＰ（１．１ｇ、０．００４３モル）の溶液を、無色の溶液に０℃で添加し、反応混合物を室温まで温め、１時間撹拌した。反応混合物の進行をＴＬＣによってモニタリングした。溶媒を除去し、生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、アルデヒド７（０．５ｇ、収率５４％）を生じた。
【０２１０】
【化２７】

【０２１１】
ウィティッヒ塩５−１２の調製：
乾燥アセトニトリル（５０ｍＬ）中の６−ブロモヘキセン酸（３ｇ、０．０５１２モル）およびトリフェニルホスフィン４．８ｇ、０．０１８モル）の溶液を２０〜２４時間還流し、過剰な溶媒を減圧下で除去して、無色の油を得て、これを乾燥ベンゼンで粉末状にし、乾燥ベンゼンおよびエーテルの連続（３回ずつ）で洗浄した。洗浄手順の間に、減圧下で乾燥する結晶化した物質から、白色の微結晶性粉末としてウィティッヒ塩が提供された（３．６ｇ、５５％収率）。
【０２１２】
２，４−置換（１，３−ジオキサン−５−イル）カルボン酸（ＳＮ３７、表ＩＩ）］（ウィティッヒ生成物）５−１３の調製：
乾燥ＴＨＦ（５ｍＬ）中の水素化ナトリウムの溶液（６０％、０．３６４ｇ、０．０１５２モル）を、撹拌された、乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のウィティッヒ塩８ ５−１２（０．９５ｇ、０．００２モル）の懸濁液に、０℃で、Ｎ_２雰囲気下で添加した。混合物を３０分間撹拌した。次いで、アルデヒド７ ５−１１の溶液（０．５ｇ、０．００１９モル）を添加した。反応を、撹拌しながら３６時間継続させた。反応の完了後に、水を添加し、溶媒を減圧下で除去した。水溶液を酢酸エチルで洗浄し、５％ＨＣＬでｐＨ２まで酸性化し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機性抽出物を飽和塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、蒸発させた。得られた油をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル−７５：２５）によって精製して、ウィティッヒ生成物９ ５−１３（０．２ｇ、３５％収率）を得た。
【０２１３】
【化２８】

【０２１４】
実施例１５
ＰＰＡＲ調節因子３６（ＳＮ３６、表ＩＩ）の合成
この実施例は、表ＩＩのＰＰＡＲ調節因子３６（２，２−ジメチル−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル−カルボン酸）（５−１５）の合成（メトキシ基の脱保護）を説明する：
エタンチオール（０．１３ｇ、０．００２０３モル）を、０℃、Ｎ_２雰囲気下で、撹拌された、ＤＭＰＵ（５ｍＬ）中の水素化ナトリウム（６０％、１ｇ、０．００４１６７モル）の懸濁液に添加した。３０分後に、ＤＭＰＵ中の化合物５−１３（０．０００５５モル）の溶液を添加した。混合物を１２０℃で２〜３時間加熱し、冷却し、氷水に注ぎ、水性混合物をＤＣＭで洗浄した。５％ＨＣｌで水層をｐＨ５まで酸性化し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機性抽出物を飽和塩水で洗浄し、乾燥させ、蒸発させた。得られた油をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル−７５：２５）によって精製して、ウィティッヒ生成物５−１５（０．６ｇ、６６％収率）を得た。
【０２１５】
【化２９】

【０２１６】
実施例１６
ＰＰＡＲ調節因子３５（ＳＮ３５、表ＩＩ）の合成
この実施例は、表ＩＩのＰＰＡＲ調節因子３５（［２，４，５−シス］−２−ｏ−クロロフェニル−４−ｏ−メトキシフェニル−１，３−ジオキサン５−イル）オクテン酸−（スキーム５の５−２０）の合成を説明する。
【０２１７】
２−クロロベンズアルデヒド（５０．４８ｍｇ、０．３５９ｍｍｏｌ）、ｐ−ＴＳＡ（触媒の、５ｍｇ）およびアセトニド化合物５−１５（１３０ｍｇ、０．３５９ｍｍｏｌ）の混合物を、４ｍＬの乾燥トルエン中で２４時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させ、混合物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ：８０：２０）に供して、生成物５−２０（５５ｍｇ、３４．３％収率）を得た。
【０２１８】
【化３０】

【０２１９】
実施例１７
ＰＰＡＲ調節因子３８（ＳＮ３８、表ＩＩ）の合成
この実施例は、表ＩＩのＰＰＡＲ調節因子３８（［２，４，５，−シス］−２−ｏ−クロロフェニル−４−ｏ−メトキシフェニル−１，３−ジオキサン５−イル）オクタン酸（５−２１）の合成を説明する：
５ｍＬの乾燥酢酸エチル中のオレフィン化合物５−１３（１５０ｍｇ、０．４１４ｍｍｏｌ）の溶液に、１０モル％の１０％Ｐｄ−Ｃ（４４ｍｇ）を注意深く添加した。反応混合物をＨ２雰囲気下で１．５〜２時間撹拌させた。反応が完了した後に、混合物をセライトおよびケーキ（Ｐｄ−Ｃ）を通してろ過し、乾燥酢酸エチル（２×５ｍＬ）で洗浄した。合わせたろ液を濃縮し、残りの液体をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ：８０：２０）に供して、生成物５−２１（ＳＮ３８）（８０ｍｇ、５３．０３％収率）を得た。
【０２２０】
【化３１】

【０２２１】
２−クロロベンズアルデヒド（３４．２５ｍｇ、０．２４７ｍｍｏｌ）、ｐ−ＴＳＡ（触媒の、３ｍｇ）およびアセトニド化合物１２ ５−２１（８０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の混合物を、３ｍＬの乾燥トルエン中で２４時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させ、混合物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ：８０：２０）に供して、生成物１３ ５−２２（５０ｍｇ、４５．０９％収率）を得た。
【０２２２】
【化３２】

【０２２３】
ＬＣ−ＭＳ：純度８７．５３％および質量４６４（Ｍ＋１８）。
（実施例１８）
【０２２４】
ＰＰＡＲ調節因子２４（ＳＮ２４、表ＩＩ）の合成
この実施例は、表ＩＩｆのＰＰＡＲ調節因子２４（［２，４，５−シス］−２−ｏ−クロロフェニル−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン５−イル）オクテン酸（５−１７）の合成を説明する。
【０２２５】
２−クロロベンズアルデヒド（４８．４７ｍｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）、ｐ−ＴＳＡ（触媒の、５ｍｇ）およびアセトニド化合物（１２０ｍｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）の混合物を、４ｍＬの乾燥トルエン中で２４時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させ、混合物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ：８０：２０）に供して、生成物５−１７（４０ｍｇ、２７％収率）を得た。
【０２２６】
【化３３】

【０２２７】
ＬＣ−ＭＳ：純度は９４．４３％（２つのジアステレオマー、それぞれ８０．１２＋１４．３１）および質量４４８（Ｍ＋１８）
実施例１９
ＰＰＡＲ調節因子３１（ＳＮ３１、表ＩＩ）の合成
この実施例は、表ＩＩのＰＰＡＲ調節因子３１（［２，４，５−シス］−２−ｏ−クロロフェニル−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン５−イル）オクタン酸の合成を説明する。（５−１９）
３ｍＬの乾燥酢酸エチル中のオレフィン５−１５（６０ｍｇ、０．１７２ｍｍｏｌ）の溶液に、１０モル％（１９ｍｇ、０．０１７２ｍｍｏｌ）の１０％Ｐｄ−Ｃを添加した。反応混合物をＨ_２雰囲気下で８時間撹拌させた。反応が完了した後に、セライトおよびケーキ（Ｐｄ−Ｃ）を通して混合物をろ過し、乾燥酢酸エチル（２×５ｍＬ）で洗浄した。合わせたろ液を濃縮し、残りの液体をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ：８０：２０）に供して、生成物５−１８（４０ｍｇ、６６．２９％収率）を得た。
【０２２８】
【化３４】

【０２２９】
２−クロロベンズアルデヒド（１６ｍｇ、０．１１４ｍｍｏｌ）、ｐ−ＴＳＡ（触媒の、３ｍｇ）およびアセトニド化合物１５ ５−１８（４０ｍｇ、０．１１４ｍｍｏｌ）の混合物を、３ｍＬの乾燥トルエン中で２４時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させ、混合物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ：８０：２０）に供して、生成物１６ ５−１９（２０ｍｇ、４０．２８％収率）を得た。
【０２３０】
【化３５】

【０２３１】
ＬＣ−ＭＳ：純度８５％および質量４５０（Ｍ＋１８）
スキーム６
【０２３２】
【化３６】

【０２３３】
実施例２０
ＰＰＡＲ調節因子３２（ＳＮ３２、表ＩＩ）の合成
この実施例は、表ＩＩのＰＰＡＲ調節因子３２の合成を説明する。
【０２３４】
乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のアルケン６−１０（前述の５−１０）（１．２ｇ、４．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＢＨ_３．ＤＭＳ（０．３４ｇ、４．５）を０℃で添加し、反応混合物を同じ温度で２時間撹拌した。混合物に、３Ｎ ＮａＯＨ（３ｍＬ）および３０％Ｈ_２Ｏ_２（１ｍＬ）を０℃で添加し、室温でさらに１時間撹拌し続けた。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（２×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を減圧下で蒸発させ、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン、２：８）によって精製した。
【０２３５】
収量：０．９ｇ（７０％）
【０２３６】
【化３７】

【０２３７】
６−１２の調製：ＩＢＸ（０．５２５ｇ、１．８７ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＳＯ（１ｍＬ）中に溶解させ、室温で１０分間撹拌し、０℃に冷却した。これに、アルコール６（０．３５ｇ、１．２５ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（９ｍＬ）中、窒素雰囲気下で添加し、室温で１．５時間撹拌した。反応混合物をエーテル（１０ｍＬ）で希釈し、２０分間撹拌し、ろ過した。ろ液を水（２×１０ｍＬ）で洗浄し、エーテル層を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ロータリーエバポレーターで濃縮した。生成物をフィルターカラムによって精製して、アルデヒド６−１２を得た（酢酸エチル：ヘキサン、２：８）。
【０２３８】
収量：３００ｍｇ（８６．４％収率）。
【０２３９】
【化３８】

【０２４０】
６−１４の調製：（３−カルボキシプロピル）トリフェニルホスホニウムブロマイドを真空下、１００℃で２〜３時間乾燥させた。撹拌された、乾燥トルエン（１０ｍＬ）中の（３−カルボキシプロピル）トリフェニルホスホニウムブロマイド（１．４７ｇ、３．４３ｍｍｏｌ）の溶液に、カリウムｔｅｒ−ブトキシド（０．７７４ｇ、６．８９ｍｍｏｌ）を一部ずつ、室温で、不活性な条件下で添加した。混合物を８０℃に加熱し、温度を３０〜４０分間維持した。反応塊を５０℃に冷却し、乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）中のアルデヒド（化合物６−１２）（０．３ｇ、１．０７ｍｍｏｌ）を上述の混合物に滴下した。反応の進行をＴＬＣによってモニタリングした。反応の完了後に、塊を０〜５℃に冷却し、ｐＨ４〜５に調節することによって、１Ｎ ＨＣｌ（１ｍＬ）で反応停止させた。化合物を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出し、水層を分離した。合わせた有機性画分を集め、硫酸ナトリウム（２ｇ）で乾燥させ、真空で濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、純粋な化合物６−１４を得た（酢酸エチル：ヘキサン、２：８）。
【０２４１】
収量：３２５ｍｇ（８６％）。
【０２４２】
【化３９】

【０２４３】
質量：３７１．１（Ｍ^＋＋Ｎａ）。
【０２４４】
６−１６の調製：エタンチオール（０．４４ｇ、７．１７ｍｍｏｌ）を、撹拌された、乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の６０％ＮａＨ（０．２８７ｇ、７．１７ｍｍｏｌ）の懸濁液に０〜５℃で添加し、２０〜３０分間撹拌した。乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）中の化合物８ ６−１４（０．２５ｇ、０．７１ｍｍｏｌ）を、温度を維持しながら上述の混合物にゆっくり滴下した。反応塊温度を１２０〜１３０℃に上昇させ、６〜８時間維持した。反応の完了後に、塊を０〜５℃に冷却し、ｐＨ４〜５に調節することによって、１Ｎ ＨＣｌ（１ｍＬ）で反応停止させた。化合物を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出し、水層を分離した。合わせた有機性画分を集め、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム（２ｇ）で乾燥させ、真空で濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、純粋な６−１６を得た（酢酸エチル：ヘキサン、２．５：７．５）。
【０２４５】
収量：１５５ｍｇ（６５％）。
【０２４６】
化合物６−１６（１３０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（８ｍＬ）中に溶解させ、触媒量のｐＴｓＯＨを室温で添加した。反応混合物を室温で６〜８時間撹拌し続けた。ｏ−クロロベンズアルデヒド（１０９ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）を反応塊に添加し、もう１回触媒量のｐＴｓＯＨを添加した。反応条件をさらに５〜６時間維持した。反応の完了後に、ｐＨ＝７に調節することによって、乾燥Ｅｔ_３Ｎを添加した。溶媒を真空下で除去し、得られた粗混合物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、最終生成物ＳＮ３２（表ＩＩ）６−１９を得た。（酢酸エチル：ヘキサン、３．５：６．５）。
【０２４７】
収量：６５ｍｇ（４０％）。
【０２４８】
カラムクロマトグラフィーの後のＨＰＬＣ純度は、より近い不純物を有して、８０．３％であった。分取ＨＰＬＣによってこれをさらに精製して、９２．４％ＨＰＬＣ純粋化合物（２０ｍｇ得られた）を得た。
【０２４９】
【化４０】

【０２５０】
質量：４１５．１（Ｍ^＋−Ｈ）
ＨＰＬＣ純度：９２．４８％（カラム：水 ノバパック３．９×３００ｍｍ、移動相：７０％ＣＨ_３ＣＮ＋３０％酢酸アンモニウムバッファー、ＲＴ：２．４７２）。
【０２５１】
さらなる類似体を、以下のようにして合成した：化合物６−１４（９０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ：０．２Ｎ ＨＣｌ（１０ｍＬ、９：１）の混合物中に溶解させ、室温で２時間撹拌した。反応の完了後に、混合物を酢酸エチル（２×１０ｍＬ）で抽出し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、ロータリーエバポレーターで蒸発させて、６８ｍｇの粗生成物を得て、これを、精製なしでさらなる反応のために利用した。
【０２５２】
上述の粗化合物（６８ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を、乾燥ＴＨＦ中に溶解させ、この混合物に２−クロロベンズアルデヒド（６１ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）および触媒量のｐＴＳＡ（約４ｍｇ）を室温で添加した。反応混合物を、窒素雰囲気下で、同じ温度で５時間撹拌した。出発物質が消えた後に、混合物を乾燥トリエチルアミンで中和し（ｐＨ＝７に調節することによって）、溶媒を蒸発させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中の２５％酢酸エチル）によって精製して、化合物１１を得た。
【０２５３】
収量：３２ｍｇ（３４％）。
【０２５４】
【化４１】

【０２５５】
質量：４２９．１（Ｍ^＋−Ｈ）
ＨＰＬＣ純度：９７．８４％（カラム：水 ノバパック３．９×３００ｍｍ、移動相：７０％ＣＨ_３ＣＮ＋３０％酢酸アンモニウムバッファー（０．０５％ＡｃＯＨ、ＲＴ：７．４２８）。
【０２５６】
実施例２１
ＰＰＡＲγトランス活性化アッセイ
細胞培養物、プラスミドおよびトランスフェクション
この実施例は、ＰＰＡＲγ調節活性を判定するためのトランス活性化アッセイの例である。
【０２５７】
これらのアッセイにおいて、Ｇａｌ４−ＰＰＡＲγＬＢＤ（Ｈｅｌｌｅｄｉｅら２０００年）、ＵＡＳｘ４−ＴＫ ｌｕｃ（ＣｈｅｎおよびＥｖａｎｓ、１９９５年）およびＣＭＶ−β−ガラクトシダーゼ（市販されている、例えばＣｌｏｎｔｅｃｈ）を用いて、ＰＰＡＲγトランス活性化を示した。ＵＡＳｘ４−ＴＫ−ｌｕｃ受容体構築物（ここでＵＡＳは「上流活性化因子配列」をいう）は、４つのＧａｌ４−応答エレメントを含む。プラスミドＧａｌ４−ＰＰＡＲγＬＢＤは、ＵＡＳに結合することによってＵＡＳｘ４−ＴＫ−ｌｕｃレポータープラスミドをトランス活性化することができるＧａｌ４−ＤＢＤ−ＰＰＡＲγ−ＬＢＤ融合タンパク質（すなわち、ＰＰＡＲγのリガンド結合ドメイン、ＬＢＤに融合したＧａｌ４のＤＮＡ結合ドメイン、ＤＢＤ）をコードする。ＣＭＶ−β−ガラクトシダーゼプラスミド（ここでＣＭＶはサイトメガロウイルスである）は、実験値の正規化のために使用される。
【０２５８】
マウス胎仔線維芽細胞（ＭＥＦ）を、７．５％ＡｍｎｉｏｍａｘサプリメントＣ−１００（Ｇｉｂｃｏ）、７．５％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、２ｍＭグルタミン、６２．５μｇ／ｍｌペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを補充したＡｍｎｉｏＭａｘ基本培地（Ｇｉｂｃｏ）（増殖培地）中で増殖させた。あるいは、ＭＥ３細胞（Ｈａｎｓｅｎら、１９９９年）を、１０％仔ウシ血清（ＣＳ）、６２．５μｇ／ｍｌペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを補充したＤＭＥＭ（増殖培地）中で増殖させた。トランスフェクションの時間に細胞が５０〜７０％コンフルエントになっているように、細胞を、典型的には２４ウェルプレートに、再び播種した。
【０２５９】
製造業者の使用説明書に従ってＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ Ｐｌｕｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）またはＭｅｔａｆｆｅｃｔａｎｅ（Ｂｉｏｎｔｅｘ）を用いて、細胞をＧａｌ４−ＰＰＡＲγＬＢＤ（Ｈｅｌｌｅｄｉｅら２０００年）、ＵＡＳｘ４−ＴＫ ｌｕｃ（ＣｈｅｎおよびＥｖａｎｓ、１９９５年）およびＣＭＶ−β−ガラクトシダーゼ（市販されている、例えばＣｌｏｎｔｅｃｈ）でトランスフェクトした。簡潔にいうと、２４ウェルプレートのウェルあたりに、３０μＬのＤＭＥＭ（血清および抗生物質を含まない）中のＵＡＳｘ４ＴＫｌｕｃ（０．２μｇ）Ｇａｌ４−ＰＰＡＲγＬＢＤ（またはｐＭ−ｈＰＰＡＲγ−ＬＢＤ、０．１μｇ）およびＣＭＶ−β−ガラクトシダーゼ（０．０５μｇ）を、１μＬのメタフェクテネインを含む３０μＬのＤＭＥＭ（血清および抗生物質を含まない）と混合した。混合物を室温で２０分間インキュベートして、核酸−脂質複合体の形成を可能にし、次いで、およそ６０ｍＬを、５０〜６０％コンフルエント細胞を含む各ウェルに添加した。次いで、細胞をＣＯ_２インキュベータ内で、３７℃で６〜１２時間インキュベートし、次いで、培地を、抗生物質および目的の物質（例えば、ＤＭＳＯ中に溶解させた、本明細書中でＤＰＤとも呼ばれる４−（Ｚ）−６−（２−ｏ−クロロフェニル−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキセン酸、または陽性対照としてのロシグリタゾン（アバンディア））を補充した培地、または匹敵する体積のＤＭＳＯ（全細胞培養物体積の＜０．５％）で置換した。ＤＰＤは市販されているか、または、実施例１に従って合成することができる。１２〜２４時間後に細胞を採取し、標準的なプロトコルに従って、ルシフェラーゼおよびβ−ガラクトシダーゼ活性を測定した。
【０２６０】
ＰＰＡＲトランス活性化は、ＤＭＳＯ単独より、ロシグリタゾン（公知のＰＰＡＲγアゴニスト）で４０倍より大きく高く、１０μＭ ４−（Ｚ）−６−（２−ｏ−クロロフェニル−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキセン酸（図２中の「ＤＰＤ」参照）で約１０倍高かった。したがって、４−（Ｚ）−６−（２−ｏ−クロロフェニル−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキセン酸は、ＰＰＡＲγアゴニストである。
【０２６１】
キラルＨＰＬＣによって精製されたＤＰＤ鏡像異性体のいずれかの間に、ＰＰＡＲγトランス活性化活性に違いは見られなかった。
【０２６２】
表ＩＩは、ＤＰＤ（ＳＮ１）の種々の類似体で得られた結果を要約し、それらの活性を比較している。「Ｐ」は、１０μＭのＤＰＤ（表ＩＩ中のＳＮ１）と比較して、１０μＭでの類似したＰＰＡＲγ活性化活性を表し、「Ｐ−」は、１０μＭのＤＰＤと比較して、３０μＭでの試験物質での、同じレベルの活性（すなわち、より能力が低い）を表し、「Ｐ＋」は、「Ｐ」より大きい活性のレベル、および１０μＭのＤＰＤに匹敵する３μＭでの活性のレベル（すなわち、より能力が高い）を表し、「Ｐ＋＋」は、３μＭでは１０μＭのＤＰＤのものよりも高いが１μＭでは１０μＭのＤＰＤのものより低い、活性のレベルを表し、「Ｐ＋＋＋」は、１０μＭのＤＰＤに匹敵する、１μＭでの活性のレベルを表し、「−」は、試験が行われなかったことを意味する。
【０２６３】
このアッセイが、本質的に上述の通りだが、ＰＰＡＲγリガンド結合ドメインでなく全長ヒトＰＰＡＲγで行われる場合、全長ｈＰＰＡＲｇ２の活性化は６４％までのアバンディア陽性対照で見られる（図３）。
【０２６４】
実施例２２
ＰＰＡＲδトランス活性化アッセイ
この実施例は、ＰＰＡＲδ調節活性を判定するためのトランス活性化アッセイを説明する。
【０２６５】
ＤＰＤおよび他のリガンドを、それらがＰＰＡＲδを本質的に実施例１に記載されているようにトランス活性化する能力について試験する。しかしながら、トランス活性化構築物は、ｍＰＰＡＲδＬＢＤであり、ここでＰＰＡＲδリガンド結合ドメインがＰＰＡＲγのものに置き換わり、Ｌ１６５０４１（市販されている）がロシグリタゾンの代わりの選択的ＰＰＡＲδアゴニストとして使用される。用いられた条件下で、Ｌ１６５０４１はＰＰＡＲδトランス活性化を５０倍より大きく増大させることが示されたが、ＤＰＤはトランス活性化の増大を生じないか、わずかしか生じなかった（図２参照）。したがって、ＤＰＤはＰＰＡＲγに対する選択性を示す。
【０２６６】
このアッセイが、本質的に上述の通りだが、ＰＰＡＲδリガンド結合ドメインでなく全長ヒトＰＰＡＲδで行われる場合、全長ｈＰＰＡＲδの活性化、活性化は見られず（図４）、ＰＰＡＲγに対するＤＰＤの選択性が確認された。
【０２６７】
実施例２３
ＰＰＡＲαトランス活性化アッセイ
この実施例は、ＰＰＡＲα調節活性を判定するためのトランス活性化アッセイを説明する。
【０２６８】
ＤＰＤおよび他のリガンドを、それらがＰＰＡＲαをトランス活性化する能力について、本質的に実施例１に記載されているように試験する。しかしながら、トランス活性化構築物はｍＰＰＡＲαＬＢＤであり、ここでＰＰＡＲαリガンド結合ドメインがＰＰＡＲγのものに置き換わり、ＧＷ７６４７（市販されている）をロシグリタゾンの代わりの選択的ＰＰＡＲαアゴニストとして使用する。用いられた条件下で、ＧＷ７６４７は２倍より大きくＰＰＡＲαトランス活性化を増大させることが示されたが、ＤＰＤはトランス活性化を生じなかった（図２参照）。したがって、ＤＰＤはＰＰＡＲγに対する選択性を示す。
【０２６９】
実施例２４
ＲＸＲトランス活性化アッセイ
この実施例は、レチノイン酸Ｘ受容体トランス活性化アッセイを説明する。
【０２７０】
化合物を、それらがＲＸＲをトランス活性化する能力について、本質的に実施例１に記載されているように試験する。しかしながら、トランス活性化構築物はｈＲＸＲαＬＢＤであり、ここでＲＸＲリガンド結合ドメインがＰＰＡＲγのものに置き換わり、｛４−［１−（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）エテニル］安息香酸｝（ＬＧ１０６９、市販されている）を、ロシグリタゾンの代わりの選択的ＲＸＲアゴニストとして使用する。用いられる条件下で、ＬＧ１０６９は５倍より大きくＲＸＲトランス活性化を増大させることが示されるが、ＤＰＤはトランス活性化を生じない（図２参照）。したがって、ＤＰＤは、ここでもＰＰＡＲγに対する選択性を示す。
【０２７１】
実施例２５
脂肪細胞分化アッセイ
この実施例は、脂肪細胞分化を判定するためのアッセイを説明する。化合物を、それらが脂肪細胞分化を誘導するかどうかを調べるため、およびそれらが脂肪細胞分化を阻害するかどうかを調べるために、試験する。
【０２７２】
細胞培養物および分化
ＭＥＦを、７．５％ＡｍｎｉｏｍａｘサプリメントＣ−１００（Ｇｉｂｃｏ）、７．５％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、２ｍＭグルタミン、６２．５μｇ／ｍｌペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを補充したＡｍｎｉｏＭａｘ基本培地（Ｇｉｂｃｏ）（増殖培地）中で増殖させた。コンフルエンスで、ＭＥＦを、ＤＭＳＯ中に溶解させた１μＭのデキサメタゾン（Ｓｉｇｍａ）０．５ｍＭのイソブチルメチルキサンチン（Ｓｉｇｍａ）、５μｇ／ｍｌのインスリン（Ｓｉｇｍａ）および１０μＭの試験化合物を添加した増殖培地中、またはＤＭＳＯ単独の中で、分化に誘導した。続いて、培地に４８時間ごとに、５μｇ／ｍｌのインスリンおよびリガンドを補充した増殖培地またはＤＭＳＯを新たに供給した。
【０２７３】
簡潔にいうと、脂肪細胞分化の誘導因子として化合物を試験するために、典型的には２４ウェルディッシュ中の、１０％仔ウシ血清（ＣＳ）を含むＤＭＥＭ中で、３Ｔ３−Ｌ１をコンフルエンスまで増殖させる。コンフルエンス後２日目（０日目）に、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、１μＭのデキサメタゾンおよび試験化合物（０１、１および１０μＭ）を補充したＤＭＥＭで、細胞を分化するよう誘導する。ＢＲＬ４９６５３（１００％Ｍｅ２ＳＯ中に溶解させた１．０μＭ）を陽性対照として使用する。４８時間後に、細胞に、試験化合物または陽性対照を補充した、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭを再び供給する。４日目から、細胞を、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ中で増殖させ、８日目まで、２日目ごとに交換する。８日目に、後述されるように、細胞をＯｉｌ Ｒｅｄ Ｏで染色する。
【０２７４】
脂肪細胞分化の阻害剤として化合物を試験するために、コンフルエンス後２日目（０日目と名付けられる）まで、３Ｔ３−Ｌ１細胞を上述のように増殖させ、その後、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、１μＭデキサメタゾン（Ｓｉｇｍａ）、０．５ｍＭメチルイソブチルキサンチン（Ｓｉｇｍａ）、１μｇ／ｍｌインスリン（Ｒｏｃｈｅ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ）および試験化合物を含むＤＭＥＭで、細胞を分化するよう誘導する。試験化合物の溶媒の存在下で分化するよう誘導された細胞を、陽性対照として使用する。４８時間後に、細胞に、試験化合物または陽性対照を補充した、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭを新たに供給した。４日目から、細胞を、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ中で増殖させ、８日目まで、２日目ごとに交換する。８日目に、後述されるように、細胞をＯｉｌ Ｒｅｄ Ｏで染色する。
【０２７５】
Ｏｉｌ Ｒｅｄ Ｏ染色
上述のように培養された細胞を、Ｏｉｌ Ｒｅｄ染色のために使用する。ＰＢＳ中でディッシュを洗浄し、細胞を３．７％パラホルムアルデヒド中で１時間固定し、（Ｈａｎｓｅｎら１９９９年）に記載されているようにｏｉｌ ｒｅｄ Ｏで染色した。０．５ｇのＯｉｌ Ｒｅｄ Ｏ（Ｓｉｇｍａ）を１００ｍｌのイソプロパノール中に溶解させることによって、Ｏｉｌ Ｒｅｄ Ｏ溶液ストック溶液を調製する。ストック溶液を水で希釈し（６：４）、続いてろ過することによって、Ｏｉｌ ｒｅｄ Ｏ希釈標準溶液を調製する。
【０２７６】
ＤＰＤは、誘導アッセイにおいて、非常に少ない赤色染色しか誘導しなかった。赤色染色は脂肪細胞の存在の指標であるので、ＤＰＤが脂肪細胞分化を誘導しないことが推測できる。しかしながら、ＤＰＤは、脂肪細胞分化の阻害において有意な効果を示さなかったので、脂肪細胞を阻害しない。表ＩＩは、ＤＰＤ（ＳＮ１）の種々の類似体で得られた結果を要約し、「０」はＤＰＤと類似した結果を表し、「−１」はさらに低い脂肪細胞分化を表し、「＋１」はより大きい脂肪細胞分化を表し（ともにＤＰＤと比較して）、「−」はアッセイされなかったことを表す。
【０２７７】
本質的に上述の通りだがヒト前脂肪細胞を用いて行われたアッセイからも、ＤＭＳＯと同様に、ＤＰＤが非常に少ない赤色染色しか誘導しなかったことが実証された。
【０２７８】
実施例２６
部分アゴニスト対完全アゴニストの同定
この実施例は、部分ＰＰＡＲアゴニストを判定するためのアッセイを説明し、これは医薬品として特に望ましい。
【０２７９】
簡潔にいうと、トランス活性化アッセイを、本質的に実施例１に記載されている通りだが１００ｎＭアバンディア（完全アゴニスト）を、増大する濃度の試験化合物（または対照としての試験化合物なし）とともに、各ウェルに添加して行う。アバンディアによってトランス活性化が減少する化合物は、ＰＰＡＲ部分アゴニストである。結果を図５に示す。
【０２８０】
ＰＰＡＲγ部分アゴニストを、それらがＰＰＡＲγ、例えばこの場合アバンディアに結合することから、公知のＰＰＡＲγアゴニストに置き換わる能力によって、この実施例中で同定する。あるいは、他の公知の完全アゴニスト、例えば３００ｎＭ Ｌ１６５０４１を用いて、本質的に実施例２に記載されている通りにトランス活性化アッセイを用い、ＰＰＡＲδの部分アゴニストを同定することができる。
【０２８１】
実施例２７
部分ＰＰＡＲγアゴニストリガンド置換アッセイ
以下のように、ＰＰＡＲγリガンド結合ポケットへの結合の分析のために、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＰＯＬＡＲＳＣＲＥＥＮ ＰＰＡＲ競合アッセイを用いて、部分ＰＰＡＲγアゴニストを同定するためのさらなるアッセイを行う。
１．２０μＬの２Ｘ試験化合物をキュベットに分注する
２．２０μｌの２ＸＰＰＡＲ−ＬＢＤ／Ｆｌｕｏｒｍｏｎｅ Ｇｒｅｅｎ Ｃｏｍｐｌｅｘを添加して混合する
３．暗黒中で２時間インキュベートする
４．蛍光偏光度を測定する
５．対照として、ロシグリタゾン（アバンディア）を使用する
ＡＶＡＮＤＩＡと比較したＤＰＤでの結果を図６に示す。
【０２８２】
実施例２８
グルコース取り込みアッセイ
この実施例は、ＰＰＡＲγアゴニストとして同定された化合物が、ＰＰＡＲγアゴニストに期待される、細胞アッセイにおける生理学的効果、特にグルコース取り込みに対する効果も生じることを説明する。グルコース取り込みアッセイは、インスリン抵抗性の治療のための化合物の適合性を確立するために重要である。
【０２８３】
簡潔にいうと、３Ｔ３−Ｌ１前脂肪細胞を、コンフルエンスまで１２ウェルプレート中で増殖させる。細胞を、血清不含ＤＭＥＭで洗浄し、１ｍｌの同じ培地とともに３７℃で１〜２時間インキュベートする。次いで、細胞をクレブス・リンガー−Ｈｅｐｅｓ（ＫＲＰ）バッファーで洗浄し、０．９ｍｌのＫＲＰバッファーとともに３７℃で３０分間インキュベートする。０、０．３、１および３ｎＭの終濃度でインスリンを添加し、３７℃で１５分間インキュベートする。１０ｍＭ［^３Ｈ］２−デオキシ−Ｄ−グルコース（１ｍＣｉ／ｌ）を補充した０．１ｍｌのクレブス・リンガーリン酸（ＫＲＰ）バッファーの添加によって、グルコース取り込みを開始する。３７℃で１０分間のインキュベーションの後に、培地を吸引し、プレートを氷冷ＰＢＳで洗浄して、誘導されたグルコース取り込みと終了させる。０．５ｍｌの１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００で細胞を溶解させ、シンチレーションカウンターを用いて放射活性レベルを測定する。結果を図７に示す。
【０２８４】
要約すると、ＤＰＤおよび表ＩＩで言及される多数の類似体は、ＰＰＡＲγアゴニストであると実証されるが、物質１０はＰＰＡＲγアンタゴニストであるようである。物質７および１３は、脂肪細胞分化をあまり引き起こさないか、引き起こさずに、より高い可能性を示すので、特に興味深い類似体である。
【０２８５】
本明細書中で言及される全ての刊行物および特許出願は、個々の刊行物または特許出願が、特に、および個々に参照によって援用されていると示されるのと同じ程度に、参照によって本明細書中に援用される。本発明はここで完全に説明されているが、添付の特許請求の範囲の精神または範囲から逸脱することなく、これに多くの変化および変更を行うことができることが、当業者に明らかであろう。
【０２８６】
【化４２】

【０２８７】
【化４３】

【０２８８】
【化４４】

【０２８９】
【化４５】

【０２９０】
【化４６】

【０２９１】
実施例２９
トロンボキサン受容体活性
この実施例は、物質１の両方の鏡像異性体がＰＰＡＲアゴニスト活性を有するが、一方のみがトロンボキサン受容体アンタゴニストとして作用することを実証する。
【０２９２】
以下の条件下で、キラルクロマトグラフィーによって、ＤＰＤ（表ＩＩ中のＳＮ１）の各鏡像異性体を単離した：
カラム：２５０×４．６ｍｍ Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ５ □ｍ
移動相：８０／２０／０．１ ｎ−ヘプタン／エタノール／トリフルオロ酢酸
流速：１ｍｌ／分
検出：２３０ｎｍでのＵＶ
温度：２５Ｃ
試料を８０／２０ ｎ−ヘプタン／エタノール中に溶解させた。
【０２９３】
鏡像異性体１が最初にキラルカラムで溶出し、鏡像異性体２が２番目にキラルカラム上で溶出した。
【０２９４】
本質的にＨｅｄｂｅｒｇら（１９８８年）Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２４５：７８６−７９２およびＳａｕｓｓｙら（１９８６年）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６１：３０２５−３０２９によって記載されているように、トロンボキサン受容体結合についての放射性リガンド結合アッセイで、鏡像異性体１および２を試験した。鏡像異性体１は潜在的なトロンボキサン受容体結合剤である（ＩＣ５０、０．８４１ｎＭ）とわかったが、鏡像異性体２は結合しないようであった（ＩＣ５０＞１０ｎＭ）。
【０２９５】
トロンボキサン受容体アンタゴニストとして作用する鏡像異性体で、ある種の患者集団を治療することが望ましい場合があり、この場合、鏡像異性体１が投与される（例えば、トロンボキサン受容体アンタゴニストの心血管の利益が同時に望ましい場合）。トロンボキサン受容体に対する効果を有さないことが望ましい場合（例えば、患者がかかる治療を必要としない場合、または患者がすでに異なる治療を受けている場合等の、さらなる心血管効果が必要でない場合）、鏡像異性体２が有益に投与される。
【０２９６】
実施例３０
癌細胞増殖の阻害
この実施例は、癌細胞の増殖に対するＤＰＤの抗増殖性効果を実証し、癌の治療のための、本明細書中に記載されている類似体の有用性を説明する。
【０２９７】
組換えバイオセンサーレポーター活性を安定して発現するよう操作されたヒト子宮頸癌細胞系（ＨｅＬａ）および非癌性細胞系、ＨａＣａＴ（Ｂｏｕｋａｍｐら、１９８８年、Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ １０６（３）：７６１−７７１）を、Ｃａｓｐａ Ｔａｇキット（例えばＣｈｅｍｉｃｏｎから、市販されている）とともに用いた。ハイコンテンツスクリーニング自動フローサイトメーターを用いて、増殖の検出を行った。
【０２９８】
１％ＤＭＳＯに調節された、血清のない細胞培地中で、ＤＰＤ（物質１）を２０μＭまで希釈した。ＨＴＳフローサイトメーター（ＦＡＣＳ Ｃａｌｉｂｕｒ ＨＴＳ、Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｅｎｓｏｎ）のＦＬ２（増殖マーカーの希釈）チャネル中の処理の４８時間後に、９６ウェルプレート中、２連で、細胞事象の検出を行った。１日目に、細胞を９６ウェルプレートに播種した。２日目に細胞をＤＰＤおよび適切な対照で処理し、４日目に分析を行った。
【０２９９】
ＤＰＤは、２０μＭで、ＨｅＬａ細胞の増殖を９０％阻害した。ＤＰＤは、非癌性細胞系ＨａＣａＴに効果を有さず、したがって、ＤＰＤ（表ＩＩ中のＳＮ１）による癌細胞に対する選択的抗増殖性効果が確立された。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
本明細書に記載の発明。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【公開番号】特開２０１３−６０４６５（Ｐ２０１３−６０４６５Ａ）
【公開日】平成２５年４月４日（２０１３．４．４）
【国際特許分類】
【外国語出願】
【出願番号】特願２０１２−２８６４６７（Ｐ２０１２−２８６４６７）
【出願日】平成２４年１２月２８日（２０１２．１２．２８）
【分割の表示】特願２００８−５５０８８０（Ｐ２００８−５５０８８０）の分割
【原出願日】平成１９年１月１８日（２００７．１．１８）
【出願人】（５０８２１７６８５）
【Ｆターム（参考）】