ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療用としてのヌクレオシドアリールホスホロアミデート
本発明はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ阻害剤の前駆体である構造式（Ｉ）：
のヌクレオシドアリールホスホロアミデートを提供する。これらの化合物はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製阻害剤の前駆体であり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療用として有用である。これらはＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤の前駆体として、ＨＣＶ複製阻害剤の前駆体として及び／又はＣ型肝炎感染症の治療用として特に有用である。本発明はこのようなヌクレオシドアリールホスホロアミデートを単独で含有する医薬組成物又はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症、特にＨＣＶ感染症に対して活性な他の物質と共に含有する医薬組成物についても記載する。本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデート（Ｉ）によるＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼの阻害方法、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製の阻害方法及び／又はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療方法も開示する。
のヌクレオシドアリールホスホロアミデートを提供する。これらの化合物はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製阻害剤の前駆体であり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療用として有用である。これらはＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤の前駆体として、ＨＣＶ複製阻害剤の前駆体として及び／又はＣ型肝炎感染症の治療用として特に有用である。本発明はこのようなヌクレオシドアリールホスホロアミデートを単独で含有する医薬組成物又はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症、特にＨＣＶ感染症に対して活性な他の物質と共に含有する医薬組成物についても記載する。本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデート（Ｉ）によるＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼの阻害方法、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製の阻害方法及び／又はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療方法も開示する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はヌクレオシドアリールホスホロアミデート、その合成及びＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ阻害剤の前駆体としてのその使用に関する。本発明の化合物はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製阻害剤の前駆体であるため、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療に有用である。これらはＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤の前駆体として、ＨＣＶ複製阻害剤の前駆体として、及びＣ型肝炎感染症の治療用として特に有用である。
【背景技術】
【０００２】
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染症は肝硬変や肝細胞癌等の慢性肝疾患につながる重要な健康上の問題であり、感染者は相当数に及び、世界人口の２〜１５％と推定される。米国疾病対策センター（Ｕ．Ｓ．Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ）によると、米国だけで４５０万人が感染していると推定される。世界保健機構（Ｗｏｒｌｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ）によると、全世界の感染者数は２億人を上回り、毎年少なくとも３〜４００万人が感染している。感染者の約２０％からはウイルスが消えるが、残りの感染者は終生ＨＣＶを保有し続ける。慢性感染者の１０〜２０％は肝臓を破壊する肝硬変又は癌を最終的に発症する。このウイルス性疾患は、汚染した血液及び血液製剤、汚染した注射針により非経口感染し又は性感染し、感染母体又はキャリヤー母体からその子孫へと垂直感染する。ＨＣＶ感染症の現行治療法は、組換えインターフェロンαの単独使用又はヌクレオシドアナログリバビリンとの併用による免疫療法に限られており、臨床効果も限られている。更に、ＨＣＶのワクチンは確立されていない。従って、慢性ＨＣＶ感染症を有効に抑制する改良型治療剤が緊急に必要とされている。ＨＣＶ感染症治療の最新技術はその開示内容全体が参照により本明細書に組み込む以下の刊行物に記載されており、これらの刊行物を参照されたい：Ｂ．Ｄｙｍｏｃｋら，“Ｎｏｖｅｌ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，”Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，１１：７９−９６（２０００）；Ｈ．Ｒｏｓｅｎら，“Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ：ｃｕｒｒｅｎｔ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ ａｎｄ ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ ｆｏｒ ｆｕｔｕｒｅ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ，”Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｔｏｄａｙ，５：３９３−３９９（１９９９）；Ｄ．Ｍｏｒａｄｐｏｕｒら，“Ｃｕｒｒｅｎｔ ａｎｄ ｅｖｏｌｖｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ，”Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．Ｈｅｐａｔｏｌ．，１１：１１８９−１２０２（１９９９）；Ｒ．Ｂａｒｔｅｎｓｃｈｌａｇｅｒ，“Ｃａｎｄｉｄａｔｅ Ｔａｒｇｅｔｓ ｆｏｒ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｔｈｅｒａｐｙ，”Ｉｎｔｅｒｖｉｒｏｌｏｇｙ，４０：３７８−３９３（１９９７）；Ｇ．Ｍ．Ｌａｕｅｒ ａｎｄ Ｂ．Ｄ．Ｗａｌｋｅｒ，“Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，”Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３４５：４１−５２（２００１）；Ｂ．Ｗ．Ｄｙｍｏｃｋ，“Ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，”Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ｄｒｕｇｓ，６：１３−４２（２００１）；及びＣ．Ｃｒａｂｂ，“Ｈａｒｄ−Ｗｏｎ Ａｄｖａｎｃｅｓ Ｓｐａｒｋ Ｅｘｃｉｔｅｍｅｎｔ ａｂｏｕｔ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ，”Ｓｃｉｅｎｃｅ：５０６−５０７（２００１）。
【０００３】
ＨＣＶ治療のアプローチとしてはウイルスセリンプロテイナーゼ（ＮＳ３プロテアーゼ）、ヘリカーゼ、及びＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ（ＮＳ５Ｂ）の阻害やワクチンの開発等の各種のアプローチが取られている。
【０００４】
ＨＣＶビリオンは、エンベロープをもつプラス鎖ＲＮＡウイルスであり、約３，０１０アミノ酸のポリプロテインをコードする約９６００塩基の単一オリゴリボヌクレオチドゲノム配列からなる。ＨＣＶ遺伝子の蛋白産物は構造蛋白質Ｃ、Ｅ１及びＥ２と、非構造蛋白質ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ及びＮＳ４Ｂ、並びにＮＳ５Ａ及びＮＳ５Ｂから構成される。非構造（ＮＳ）蛋白質はウイルス複製の触媒機構を提供すると考えられている。ＮＳ３プロテアーゼはＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼであるＮＳ５Ｂをポリプロテイン鎖から遊離させる。ＨＣＶ ＮＳ５ＢポリメラーゼはＨＣＶの複製サイクルにおいて鋳型として機能する１本鎖ウイルスＲＮＡから２本鎖ＲＮＡを合成するために必要である。従って、ＮＳ５ＢポリメラーゼはＨＣＶ複製複合体の必須成分であるとみなされる［Ｋ．Ｉｓｈｉら，“Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ ＮＳ５Ｂ Ｐｒｏｔｅｉｎ：Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｉｔｓ ＲＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ＲＮＡ Ｂｉｎｄｉｎｇ，”Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，２９：１２２７−１２３５（１９９９）及びＶ．Ｌｏｈｍａｎｎら，“Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔｉｃ Ａｎａｌｙｓｅｓ ｏｆ ＮＳ５Ｂ ＲＮＡ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ＲＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ，”Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，２４９：１０８−１１８（１９９８）参照］。ＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害は、２本鎖ＨＣＶ ＲＮＡの形成を防止するので、ＨＣＶ特異的抗ウイルス治療の開発の魅力的なアプローチとなる。
【０００５】
ＨＣＶ感染症の治療用として有望なＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤の開発については、Ｍ．Ｐ．Ｗａｌｋｅｒら，“Ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ｃａｎｄｉｄａｔｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ，”Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｒｕｇｓ．１２：１２６９−１２８０（２００３）及びＰ．Ｈｏｆｆｍａｎｎら，“Ｒｅｃｅｎｔ ｐａｔｅｎｔｓ ｏｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ（１９９９−２００２），”Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ．１３：１７０７−１７２３（２００３）に記載されている。ＨＣＶポリメラーゼに対するプリンリボヌクレオシドの活性はＡ．Ｅ．Ｅｌｄｒｕｐら．“Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−Ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｏｆ Ｐｕｒｉｎｅ Ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ ｆｏｒ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＨＣＶ ＲＮＡ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ＲＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ，”Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４７：２２８３−２２９５（２００４）により報告されている。ＨＣＶ治療用の治療アプローチとして、ＨＣＶポリメラーゼ阻害剤としての構造的に多様なヌクレオシド誘導体が引き続き必要とされている。
【０００６】
本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートはＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製、特にＨＣＶ複製の強力な阻害剤の前駆体であることが今般判明した。前記ホスホロアミデートはＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ、特にＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害剤である対応するヌクレオシド５’−三リン酸誘導体に変換されるそのヌクレオシド５’−リン酸（ヌクレオチド）誘導体にインビボ変換される。本発明のヌクレオシドホスホロアミデートはＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症、特にＨＣＶ感染症を治療するために有用である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｂ．Ｄｙｍｏｃｋら，“Ｎｏｖｅｌ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，”Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，１１：７９−９６（２０００）
【非特許文献２】Ｈ．Ｒｏｓｅｎら，“Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ：ｃｕｒｒｅｎｔ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ ａｎｄ ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ ｆｏｒ ｆｕｔｕｒｅ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ，”Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｔｏｄａｙ，５：３９３−３９９（１９９９）
【非特許文献３】Ｄ．Ｍｏｒａｄｐｏｕｒら，“Ｃｕｒｒｅｎｔ ａｎｄ ｅｖｏｌｖｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ，”Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．Ｈｅｐａｔｏｌ．，１１：１１８９−１２０２（１９９９）
【非特許文献４】Ｒ．Ｂａｒｔｅｎｓｃｈｌａｇｅｒ，“Ｃａｎｄｉｄａｔｅ Ｔａｒｇｅｔｓ ｆｏｒ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｔｈｅｒａｐｙ，”Ｉｎｔｅｒｖｉｒｏｌｏｇｙ，４０：３７８−３９３（１９９７）
【非特許文献５】Ｇ．Ｍ．Ｌａｕｅｒ ａｎｄ Ｂ．Ｄ．Ｗａｌｋｅｒ，“Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，”Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３４５：４１−５２（２００１）
【非特許文献６】Ｂ．Ｗ．Ｄｙｍｏｃｋ，“Ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，”Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ｄｒｕｇｓ，６：１３−４２（２００１）
【非特許文献７】Ｃ．Ｃｒａｂｂ，“Ｈａｒｄ−Ｗｏｎ Ａｄｖａｎｃｅｓ Ｓｐａｒｋ Ｅｘｃｉｔｅｍｅｎｔ ａｂｏｕｔ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ，”Ｓｃｉｅｎｃｅ：５０６−５０７（２００１）
【非特許文献８】Ｋ．Ｉｓｈｉら，“Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ ＮＳ５Ｂ Ｐｒｏｔｅｉｎ：Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｉｔｓ ＲＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ＲＮＡ Ｂｉｎｄｉｎｇ，”Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，２９：１２２７−１２３５（１９９９）
【非特許文献９】Ｖ．Ｌｏｈｍａｎｎら，“Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔｉｃ Ａｎａｌｙｓｅｓ ｏｆ ＮＳ５Ｂ ＲＮＡ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ＲＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ，”Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，２４９：１０８−１１８（１９９８）
【非特許文献１０】Ｍ．Ｐ．Ｗａｌｋｅｒら，“Ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ｃａｎｄｉｄａｔｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ，”Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｒｕｇｓ．１２：１２６９−１２８０（２００３）
【非特許文献１１】Ｐ．Ｈｏｆｆｍａｎｎら，“Ｒｅｃｅｎｔ ｐａｔｅｎｔｓ ｏｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ（１９９９−２００２），”Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ．１３：１７０７−１７２３（２００３）
【非特許文献１２】Ａ．Ｅ．Ｅｌｄｒｕｐら．“Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−Ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｏｆ Ｐｕｒｉｎｅ Ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ ｆｏｒ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＨＣＶ ＲＮＡ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ＲＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ，”Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４７：２２８３−２２９５（２００４）。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
従って、本発明の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ阻害剤の前駆体、特にＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤の前駆体として有用なヌクレオシドアリールホスホロアミデートを提供することである。
【０００９】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製阻害剤の前駆体、特にＣ型肝炎ウイルス複製阻害剤の前駆体として有用なヌクレオシドアリールホスホロアミデートを提供することである。
【００１０】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療、特にＨＣＶ感染症の治療に有用なヌクレオシドアリールホスホロアミデートを提供することである。
【００１１】
本発明の別の目的は医薬的に許容可能なキャリヤーと共に本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートを含有する医薬組成物を提供することである。
【００１２】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ阻害剤の前駆体、特にＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤の前駆体として使用するための本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートを含有する医薬組成物を提供することである。
【００１３】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製阻害剤の前駆体、特にＨＣＶ複製阻害剤の前駆体として使用するための本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートを含有する医薬組成物を提供することである。
【００１４】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療、特にＨＣＶ感染症の治療に使用するための本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートを含有する医薬組成物を提供することである。
【００１５】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス、特にＨＣＶに対して活性な他の物質と共に本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートを含有する医薬組成物を提供することである。
【００１６】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼの阻害方法、特にＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害方法を提供することである。
【００１７】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製の阻害方法、特にＨＣＶ複製の阻害方法を提供することである。
【００１８】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療方法、特にＨＣＶ感染症の治療方法を提供することである。
【００１９】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスに対して活性な他の物質と併用するＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療方法、特にＨＣＶに対して活性な他の物質と併用するＨＣＶ感染症の治療方法を提供することである。
【００２０】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製の阻害用及び／又はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療用医薬、特にＨＣＶ複製の阻害用及び／又はＨＣＶ感染症の治療用医薬として使用するためのヌクレオシドアリールホスホロアミデート及びその医薬組成物を提供することである。
【００２１】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製の阻害用及び／又はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療用医薬、特にＨＣＶ複製の阻害用及び／又はＨＣＶ感染症の治療用医薬の製造における本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデート及びその医薬組成物の使用を提供することである。
【００２２】
以上及び他の目的は以下の詳細な記載から容易に理解されよう。
【課題を解決するための手段】
【００２３】
発明の要旨
本発明は指定立体化学配置の構造式Ｉ：
【００２４】
【化１】
［式中、
Ｂは
【００２５】
【化２】
であり、上記式中、アステリスク（＊）は化合物の残余との結合点を表し；
ｎは０、１又は２であり；
Ｘは結合又はＯであり；
Ａｒはフェニル、ナフチル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、インドリル、キノリニル又はイソキノリニルであり、Ａｒは場合によりハロゲン、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、シアノ、ニトロ、アミノ、カルボキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルキルカルボニル、Ｃ１−４アルキルカルボニルオキシ及びＣ１−４アルキルオキシカルボニルから構成される群から独立して選択される１〜５個の置換基で置換されており；
Ｒ１は水素、メチル又はフルオロメチルであり；
Ｒ２はフルオロ又はＯＲ１０であり；
Ｒ３は水素、Ｃ１−１６アルキルカルボニル、Ｃ２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ１−１０アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルオキシカルボニル及び構造式：
【００２６】
【化３】
のアミノアシル残基から構成される群から選択され；
Ｒ１０は水素、メチル、Ｃ１−１６アルキルカルボニル、Ｃ２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ１−１０アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルオキシカルボニル及び構造式：
【００２７】
【化４】
のアミノアシル残基から構成される群から選択され；
あるいはＲ３とＲ１０はこれらが結合している酸素原子と一緒になって５員環状カーボネート又はアセトニドを形成し；
Ｒ４は水素、Ｃ１−６アルキル、フェニル又はベンジルであり；前記アルキルは場合によりフッ素、ヒドロキシ、メトキシ、アミノ、カルボキシ、カルバモイル、グアニジノ、メルカプト、メチルチオ、１Ｈ−イミダゾリル及び１Ｈ−インドール−３−イルから構成される群から選択される１個の置換基で置換されており；前記フェニル及びベンジルは場合によりハロゲン、ヒドロキシ及びメトキシから構成される群から独立して選択される１〜２個の置換基で置換されており；
Ｒ５は水素又はＣ１−３アルキルであり；
あるいはＲ４とＲ５はこれらが結合している炭素原子と一緒になって３〜６員脂肪族スピロ環状環系を形成し；
Ｒ６はＣ１−１６アルキル、Ｃ２−２０アルケニル、（ＣＨ２）ｎＣ３−６シクロアルキル、フェニル、ベンジル又はアダマンチルであり；前記アルキル、アルケニル、シクロアルキル及びアダマンチルは場合によりアミノ、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ及びＣ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されており；前記フェニル及びベンジルは場合によりハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、Ｃ１−４アルコキシ、トリフルオロメチル及びトリフルオロメトキシから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されており；
Ｒ７は水素、Ｃ１−５アルキル又はフェニルＣ０−２アルキルであり；
Ｒ８は水素、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アシル、ベンゾイル、Ｃ１−４アルキルオキシカルボニル、フェニルＣ０−２アルキルオキシカルボニル、Ｃ１−４アルキルアミノカルボニル、フェニルＣ０−２アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−４アルキルスルホニル又はフェニルＣ０−２アルキルスルホニルであり；
Ｒ９は水素、Ｃ１−８アルキルカルボニル又はＣ１−８アルキルオキシカルボニルであり；
Ｒ１１は水素又はＣ１−３アルキルであり；
あるいはＲ１１はＲ１３と一緒になって式：
【００２８】
【化５】
の環を形成し；
Ｒ１２は水素又はＣ１−３アルキルであり；
Ｒ１３は水素又はＣ１−３アルキルであり；
Ｒ１４は水素、Ｃ１−８アルキル又はＣ１−８アルキルカルボニルである。］の化合物又はその医薬的に許容可能な塩に関する。
【００２９】
式Ｉの化合物はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ、特にＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害剤の前駆体として有用である。これらはＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製、特にＨＣＶ複製の阻害剤の前駆体でもあり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療、特にＨＣＶ感染症の治療に有用である。
【００３０】
本発明のアリールホスホロアミデートは、これらの作用メカニズムに関して限定するものではないが、対応するヌクレオシド５’−一リン酸の前駆体として作用する。内在キナーゼ酵素は５’−一リン酸をＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼの阻害剤であるその５’−三リン酸誘導体に変換する。従って、前記アリールホスホロアミデートはヌクレオシド自体よりも効率的な標的細胞透過を実現し、代謝分解され難く、肝臓等の特定組織を標的とすることができ、その結果、治療指数を高め、抗ウイルス薬の総用量を低減できると考えられる。
【００３１】
上記化合物を単独で含有する医薬組成物又はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス、特にＨＣＶに対して活性な他の物質と共に含有する医薬組成物、加えてＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製の阻害方法及びＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療方法も本発明に含まれる。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
発明の詳細な説明
本発明は上記発明の概要の欄に記載したような構造式Ｉの化合物に関する。式Ｉの化合物はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ阻害剤の前駆体として有用である。これらはＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製阻害剤の前駆体でもあり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療に有用である。
【００３３】
本発明の第１の態様は式Ｉ−Ａ：
【００３４】
【化６】
［式中、全変項は当初に定義した通り（即ち発明の要旨の欄に定義した通り）である。］の化合物又はその医薬的に許容可能な塩である。
【００３５】
本発明の第２の態様は式Ｉ−Ｂ１：
【００３６】
【化７】
（式中、全変項は当初に定義した通りである。）の化合物又はその医薬的に許容可能な塩である。
【００３７】
本発明の第３の態様は式Ｉ−Ｂ２：
【００３８】
【化８】
（式中、全変項は当初に定義した通りである。）の化合物又はその医薬的に許容可能な塩である。
【００３９】
本発明の第４の態様は、
Ｒ３が水素、Ｃ１−１６アルキルカルボニル、Ｃ２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ１−１０アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルオキシカルボニル、及び構造式：
【００４０】
【化９】
のアミノアシル残基から構成される群から選択され；
Ｒ１０が水素、メチル、Ｃ１−１６アルキルカルボニル、Ｃ２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ１−１０アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルオキシカルボニル及び構造式：
【００４１】
【化１０】
のアミノアシル残基から構成される群から選択され；
あるいはＲ３とＲ１０がこれらが結合している酸素原子と一緒になって５員環状カーボネートを形成し；
Ｒ１１が水素又はＣ１−３アルキルであり；他の全変項が当初に定義した通りである、式Ｉ−Ａの化合物又はその医薬的に許容可能な塩である。
【００４２】
本発明の化合物の第５の態様において、Ｒ１がメチル又はフルオロメチルであり、Ｒ２がヒドロキシであり、Ｒ３が水素であり；他の全変項が当初に定義した通りである又は第１、第２、第３もしくは第４の態様に定義した通りである。この態様の１分類において、Ｒ１がメチルである。
【００４３】
本発明の化合物の第６の態様において、Ｒ１がメチル又はフルオロメチルであり、Ｒ２がフルオロであり、Ｒ３が水素であり；他の全変項は当初に定義した通りである又は第１、第２、第３もしくは第４の態様に定義した通りである。この態様の１分類において、Ｒ１がメチルである。
【００４４】
本発明の化合物の第７の態様において、Ｘが結合であり；他の全変項が当初に定義した通りであるか又は上記態様のいずれか１種に定義した通りである。
【００４５】
本発明の化合物の第８の態様において、Ａｒが場合によりハロゲン、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、シアノ、ニトロ、アミノ、カルボキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルキルカルボニル、Ｃ１−４アルキルカルボニルオキシ及びＣ１−４アルキルオキシカルボニルから構成される群から独立して選択される１〜５個の置換基で置換されたフェニルであり；他の全変項が当初に定義した通りであるか又は上記態様のいずれか１種に定義した通りである。この態様の１分類において、Ａｒが置換されていないフェニルである。
【００４６】
本発明の化合物の第９の態様において、Ａｒがインドリルであり；他の全変項が当初に定義した通りである又は上記態様のいずれか１種に定義した通りである。この態様の１分類において、Ａｒが１Ｈ−インドール−５−イルである。
【００４７】
本発明の化合物の第１０の態様において、Ｒ５、Ｒ１１及びＲ１２が各々水素であり、Ｒ４が水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、イソブチル、ｎ−ブチル、２−メチル−１−プロピル、ヒドロキシメチル、フルオロメチル、メルカプトメチル、カルボキシメチル、カルバモイルメチル、１−ヒドロキシエチル、２−カルボキシエチル、２−カルバモイルエチル、２−メチルチオエチル、４−アミノ−１−ブチル、３−アミノ−１−プロピル、３−グアニジノ−１−プロピル、１Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル、フェニル、ベンジル、４−ヒドロキシベンジル及び１Ｈ−インドール−３−イルメチルから構成される群から選択され；他の全変項が当初に定義した通りである又は上記態様のいずれか１種に定義した通りである。この態様の１分類において、Ｒ４がメチル又はベンジルである。この分類のサブ分類において、Ｒ４がメチルである。この分類の別のサブ分類において、Ｒ４がベンジルである。
【００４８】
本発明の化合物の第１１の態様において、Ｘが結合であり、Ｒ６がＣ１−８アルキル、シクロヘキシル又はシクロペンチルであり；他の全変項が当初に定義した通りである又は上記態様のいずれか１種に定義した通りである。この態様の１分類において、Ｒ６がＣ１−４アルキルである。
【００４９】
本発明の化合物の第１２の態様において、Ｘが結合であり、Ａｒがフェニルであり、Ｒ４がメチル又はベンジルであり、Ｒ６がＣ１−４アルキルであり、Ｒ５、Ｒ１１及びＲ１２が各々水素であり；他の全変項が当初に定義した通りである又は上記態様のいずれか１種に定義した通りである。この態様の１分類において、Ｒ１がメチルであり、Ｒ２がヒドロキシであり、Ｒ３が水素である。
【００５０】
本発明の第１３の態様は式ＩＩ−Ａ：
【００５１】
【化１１】
（式中、変項は当初に定義した通りである又は上記態様のいずれか１種に定義した通りである。）の化合物又はその医薬的に許容可能な塩である。
【００５２】
本発明の第１４の態様は式ＩＩ−Ｂ：
【００５３】
【化１２】
（式中、変項は当初に定義した通りである又は上記態様のいずれか１種に定義した通りである。）の化合物又はその医薬的に許容可能な塩である。
【００５４】
本発明の第１５の態様は式ＩＩＩ：
【００５５】
【化１３】
［式中、
Ｒ３はＨであり；
Ｒ１０はＨであり；
あるいはＲ３とＲ１０はこれらが結合している酸素原子と一緒になってアセトニドを形成し；
Ｒ４はＨ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３又はベンジルであり；
Ｒ６はメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）２、３−ペンチル、シクロペンチル、シクロヘプチル又はフェニルであり；
Ｒ１１はＨ又はＣＨ３であり；
Ｒ１３は水素又はＣＨ３であり；
あるいは、Ｒ４がＨであるとき、Ｒ１１とＲ１３は一緒になって式：
【００５６】
【化１４】
の環を形成する。］の化合物又はその医薬的に許容可能な塩である。
【００５７】
本発明の第１６の態様は実施例１〜２２に記載された化合物及びその医薬的に許容可能な塩から構成される群から選択される式Ｉの化合物である。１サブ態様において、該化合物は実施例１〜８に記載された化合物及びその医薬的に許容可能な塩から構成される群から選択される。
【００５８】
本発明の一態様において、本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートは、プラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ阻害剤、プラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製阻害剤の前駆体として及び／又はプラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療用として、有用である。この態様の１分類において、プラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスはフラビウイルス科ウイルス又はピコルナウイルス科ウイルスである。この分類の１サブ分類において、ピコルナウイルス科ウイルスはライノウイルス、ポリオウイルス又はＡ型肝炎ウイルスである。この分類の第２のサブ分類において、フラビウイルス科ウイルスはＣ型肝炎ウイルス、黄熱病ウイルス、デングウイルス、西ナイルウイルス、日本脳炎ウイルス、バンジ（Ｂａｎｚｉ）ウイルス及びウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）から構成される群から選択される。このサブ分類の１サブ分類において、フラビウイルス科ウイルスはＣ型肝炎ウイルスである。
【００５９】
本発明の別の側面は各処置を必要とする哺乳動物におけるＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼの阻害方法、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製の阻害方法及び／又はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療方法として、治療有効量の構造式Ｉの化合物を前記哺乳動物に投与する段階を含む方法に関する。
【００６０】
本発明のこの側面の一態様において、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼはプラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼである。この態様の１分類において、プラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼはフラビウイルス科ウイルスポリメラーゼ又はピコルナウイルス科ウイルスポリメラーゼである。この分類の１サブ分類において、ピコルナウイルス科ウイルスポリメラーゼはライノウイルスポリメラーゼ、ポリオウイルスポリメラーゼ又はＡ型肝炎ウイルスポリメラーゼである。この分類の第２のサブ分類において、フラビウイルス科ウイルスポリメラーゼはＣ型肝炎ウイルスポリメラーゼ、黄熱病ウイルスポリメラーゼ、デングウイルスポリメラーゼ、西ナイルウイルスポリメラーゼ、日本脳炎ウイルスポリメラーゼ、バンジウイルスポリメラーゼ及びウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）ポリメラーゼから構成される群から選択される。このサブ分類の１サブ分類において、フラビウイルス科ウイルスポリメラーゼはＣ型肝炎ウイルスポリメラーゼである。
【００６１】
本発明のこの側面の第２の態様において、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製はプラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製である。この態様の１分類において、プラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製はフラビウイルス科ウイルス複製又はピコルナウイルス科ウイルス複製である。この分類の１サブ分類において、ピコルナウイルス科ウイルス複製はライノウイルス複製、ポリオウイルス複製又はＡ型肝炎ウイルス複製である。この分類の第２のサブ分類において、フラビウイルス科ウイルス複製はＣ型肝炎ウイルス複製，黄熱病ウイルス複製、デングウイルス複製、西ナイルウイルス複製、日本脳炎ウイルス複製、バンジウイルス複製及びウシウイルス性下痢ウイルス複製から構成される群から選択される。このサブ分類の１サブ分類において、フラビウイルス科ウイルス複製はＣ型肝炎ウイルス複製である。
【００６２】
本発明のこの側面の第３の態様において、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症はプラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ウイルス感染症である。この態様の１分類において、プラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症はフラビウイルス科ウイルス感染症又はピコルナウイルス科ウイルス感染症である。この分類の１サブ分類において、ピコルナウイルス科ウイルス感染症はライノウイルス感染症、ポリオウイルス感染症又はＡ型肝炎ウイルス感染症である。この分類の第２のサブ分類において、フラビウイルス科ウイルス感染症はＣ型肝炎ウイルス感染症、黄熱病ウイルス感染症、デングウイルス感染症、西ナイルウイルス感染症、日本脳炎ウイルス感染症、バンジウイルス感染症及びウシウイルス性下痢ウイルス感染症から構成される群から選択される。このサブ分類の１サブ分類において、フラビウイルス科ウイルス感染症はＣ型肝炎ウイルス感染症である。
【００６３】
本明細書全体を通して以下の用語は以下に指定する意味である。
【００６４】
アルキル基は直鎖又は分岐構造の指定長のアルキル基を意味する。このようなアルキル基の例はメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシル、イソヘキシル等である。
【００６５】
「ナフチル」なる用語は１−ナフチル（α−ナフチル）と２−ナフチル（β−ナフチル）の両者を意味する。
【００６６】
「アダマンチル」なる用語は１−アダマンチルと２−アダマンチルの両者を意味する。
【００６７】
「場合により置換されたベンジル」なる用語はフェニル部分が場合により置換された−ＣＨ２−フェニルを意味する。
【００６８】
「アルケニル」なる用語は総炭素原子数２〜２０又はこの範囲内の任意数の直鎖又は分岐鎖アルケン（例えばエテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、オレイル等）を意味する。
【００６９】
「シクロアルキル」なる用語は総炭素原子数３〜８又はこの範囲内の任意数の環状アルカン環（例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル又はシクロオクチル）を意味する。
【００７０】
「アルコキシ」なる用語は指定炭素原子数（例えばＣ１−４アルコキシ）又はこの範囲内の任意数の直鎖又は分岐鎖アルコキシド［例えばメトキシ（ＭｅＯ−）、エトキシ、イソプロポキシ等］を意味する。
【００７１】
「アルキルチオ」なる用語は指定炭素原子数（例えばＣ１−４アルキルチオ）又はこの範囲内の任意数の直鎖又は分岐鎖アルキルスルフィド［例えばメチルチオ（ＭｅＳ−）、エチルチオ、イソプロピルチオ等］を意味する。
【００７２】
「アルキルアミノ」なる用語は指定炭素原子数（例えばＣ１−４アルキルアミノ）又はこの範囲内の任意数の直鎖又は分岐鎖アルキルアミン［例えばメチルアミノ、エチルアミノ、イソプロピルアミノ、ｔ−ブチルアミノ等］を意味する。
【００７３】
「アルキルスルホニル」なる用語は指定炭素原子数（例えばＣ１−６アルキルスルホニル）又はこの範囲内の任意数の直鎖又は分岐鎖アルキルスルホン［例えばメチルスルホニル（ＭｅＳＯ２−）、エチルスルホニル、イソプロピルスルホニル等］を意味する。
【００７４】
「アルキルオキシカルボニル」なる用語は本発明の化合物に存在する指定炭素原子数（例えばＣ１−８アルキルオキシカルボニル）又はこの範囲内の任意数のカルボン酸又はカルバミン酸基の直鎖又は分岐鎖エステル［例えばメチルオキシカルボニル（ＭｅＯＣＯ−）、エチルオキシカルボニル又はブチルオキシカルボニル］を意味する。
【００７５】
「アルキルカルボニル」なる用語は指定炭素原子数（例えばＣ１−８アルキルカルボニル）又はこの範囲内の任意数の直鎖又は分岐鎖アルキルアシル基［例えばメチルオキシカルボニル（ＭｅＯＣＯ−）、エチルオキシカルボニル又はブチルオキシカルボニル］を意味する。
【００７６】
「ハロゲン」なる用語はハロゲン原子であるフッ素、塩素、臭素及びヨウ素を意味する。
【００７７】
結合の末端のアステリスク（「＊」）は化合物の残余との結合点を表す。
【００７８】
「ホスホリル」なる用語は−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２を意味する。
【００７９】
「ジホスホリル」なる用語は構造：
【００８０】
【化１５】
をもつ基を意味する。
【００８１】
「トリホスホリル」なる用語は構造：
【００８２】
【化１６】
をもつ基を意味する。
【００８３】
「５員環状カーボネート環」なる用語はＣ−２及びＣ−３ヒドロキシルをホスゲンや１，１’−カルボニルジイミダゾール等のカルボニル化剤でアシル化することによりヌクレオシドのフラノース環のＣ−２及びＣ−３位に形成される以下の環系：
【００８４】
【化１７】
を意味する。
【００８５】
「アセトニド」なる用語はヌクレオシドのフラノース環のＣ−２及びＣ−３位に形成される以下の環系：
【００８６】
【化１８】
を意味する。
【００８７】
Ｒ３とＲ１０がアミノアシル残基である態様において、式：
【００８８】
【化１９】
におけるＲ７が水素以外の置換基であるとき、アミノアシル残基は不斉中心を含み、個々のＲ及びＳ立体異性体とＲＳジアステレオ異性体混合物を含むものとする。一態様において、不斉炭素の立体配置はＳ−アミノ酸の立体配置に対応し、即ち、式：
【００８９】
【化２０】
に示すような天然α−アミノ酸立体配置に対応する。
【００９０】
「置換」なる用語は指定置換基による多重度の置換を含むものとする。複数の置換基部分を明細書又は特許請求の範囲に記載する場合には、置換化合物は明細書又は特許請求の範囲に記載する置換基部分の１種以上を独立して１個又は複数個使用して置換することができる。
【００９１】
「５’−三リン酸」なる用語は下記一般構造式ＩＶ：
【００９２】
【化２１】
（式中、Ｂ、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は上記に定義した通りである。）をもつ本発明のヌクレオシド化合物の５’−ヒドロキシル基の三リン酸エステル誘導体を意味する。この定義の所定側面において、この用語は式ＩＶ−Ａ及びＩＶ−Ｂ：
【００９３】
【化２２】
の誘導体の一方又は両方を意味する。
【００９４】
「医薬組成物」等における「組成物」なる用語は、活性成分及びキャリヤーを構成する不活性成分を含有する製剤を、加えていずれかの成分の２種類以上の配合、錯化もしくは凝集、成分の１種類以上の解離又は成分の１種類以上の他の型の反応もしくは相互作用により直接に又は間接的に得られるいずれもの製剤を包含するものとする。従って、本発明の医薬組成物は本発明の化合物と医薬的に許容可能なキャリヤーを混合することにより製造されるいずれもの組成物を包含する。
【００９５】
化合物「の投与」及び「を投与する」なる用語は必要とする個体に本発明の化合物又は本発明の化合物のプロドラッグを提供することを意味するものとする。
【００９６】
本発明の別の側面はＨＣＶ感染症を治療するために有用な１種類以上の物質と本発明の化合物の併用によるＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害方法、ＨＣＶ複製の阻害方法又はＨＣＶ感染症の治療方法に関する。ＨＣＶに対して活性なこのような物質としては限定されないが、リバビリン、レボビリン、ビラミジン、ニタゾキサニド、チモシンα１，インターフェロンβ，インターフェロンα、ペグ化インターフェロンα（ペグインターフェロンα）、インターフェロンαとリバビリンの併用剤、ペグインターフェロンαとリバビリンの併用剤、インターフェロンαとレボビリンの併用剤、及びペグインターフェロンαとレボビリンの併用剤が挙げられる。インターフェロンαとしては限定されないが、組換えインターフェロンα２ａ（例えばＨｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅ，Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪから市販されているＲｏｆｅｒｏｎインターフェロン）、ペグ化インターフェロンα２ａ（Ｐｅｇａｓｙｓ（登録商標））、インターフェロンα２ｂ（例えばＳｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐ．，Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪから市販されているＩｎｔｒｏｎ−Ａインターフェロン）、ペグ化インターフェロンα２ｂ（ＰｅｇＩｎｔｒｏｎ（登録商標））、組換えコンセンサスインターフェロン（例えばインターフェロンαｃｏｎ−１）、及び精製インターフェロンα製剤が挙げられる。Ａｍｇｅｎ社からも商品名Ｉｎｆｅｒｇｅｎ（登録商標）として組換えコンセンサスインターフェロンが市販されている。レボビリンはリバビリンのＬエナンチオマーであり、リバビリンと類似の免疫調節活性を示している。ビラミジンはＷＯ０１／６０３７９（譲受人ＩＣＮ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）に開示されているリバビリンの類似体である。本発明のこの方法によると、併用剤の個々の成分を治療期間中の異なる時点で別々に投与してもよいし、分割又は単独併用剤として同時に投与してもよい。従って、本発明はこのような同時又は交互投与の全レジメンを含むものとし、「投与する」なる用語は相応に解釈すべきである。当然のことながら、ＨＣＶ感染症の治療に有用な他の物質と本発明の化合物の併用の範囲は原則として任意のＨＣＶ感染症治療用医薬組成物との任意の併用を含む。本発明の化合物又はその医薬的に許容可能な塩をＨＣＶに対して活性な第２の治療剤と併用する場合には、各化合物の用量は化合物を単独で使用する場合の用量と同一でもよいし、異なる量でもよい。
【００９７】
ＨＣＶ感染症の治療には、ＨＣＶ ＮＳ３セリンプロテアーゼの阻害剤である物質と本発明の化合物を併用投与してもよい。ＨＣＶ ＮＳ３セリンプロテアーゼは必須ウイルス酵素であり、ＨＣＶ複製阻害の優れたターゲットであると記載されている。ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼ阻害剤の基質型及び非基質型両者の阻害剤はＷＯ９８／２２４９６、ＷＯ９８／４６６３０、ＷＯ９９／０７７３３、ＷＯ９９／０７７３４、ＷＯ９９／３８８８８、ＷＯ９９／５０２３０、ＷＯ９９／６４４４２、ＷＯ００／０９５４３、ＷＯ００／５９９２９、ＧＢ２３３７２６２、ＷＯ０２／１８３６９、ＷＯ０２／０８２４４、ＷＯ０２／４８１１６、ＷＯ０２／４８１７２、ＷＯ０５／０３７２１４及び米国特許第６，３２３，１８０号に開示されている。ＨＣＶ複製阻害剤の開発とＨＣＶ感染症治療のターゲットとしてのＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼはＢ．Ｗ．Ｄｙｍｏｃｋ，“Ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，”Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ｄｒｕｇｓ，６：１３−４２（２００１）に記載されている。本発明の化合物と併用可能な特定ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼ阻害剤としてはＢＩＬＮ２０６１、ＶＸ−９５０、ＳＣＨ６、ＳＣＨ７及びＳＣＨ−５０３０３４が挙げられる。
【００９８】
リバビリン、レボビリン及びビラミジンは、細胞内酵素イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ（ＩＭＰＤＨ）の阻害を介してグアニンヌクレオチドの細胞内プールを調節することにより、その抗ＨＣＶ作用を発揮すると思われる。ＩＭＰＤＨは新規グアニンヌクレオチド生合成における生合成経路の律速酵素である。リバビリンは容易に細胞内リン酸化され、一リン酸誘導体はＩＭＰＤＨの阻害剤である。従って、ＩＭＰＤＨの阻害はＨＣＶ複製阻害剤の発見に有用な別のターゲットである。従って、本発明の化合物はＷＯ９７／４１２１１及び０１／００６２２（譲受人Ｖｅｒｔｅｘ）に開示されているＶＸ−４９７等のＩＭＰＤＨ阻害剤；ＷＯ００／２５７８０（譲受人Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）に開示されているような別のＩＭＰＤＨ阻害剤；又はミコフェノール酸モフェチル［Ａ．Ｃ．Ａｌｌｉｓｏｎ ａｎｄ Ｅ．Ｍ．Ｅｕｇｕｉ，Ａｇｅｎｔｓ Ａｃｔｉｏｎ，４４（Ｓｕｐｐｌ．）：１６５（１９９３）参照］と併用投与してもよい。
【００９９】
ＨＣＶ感染症の治療には、抗ウイルス剤アマンタジン（１−アミノアダマンタン）と本発明の化合物を併用投与してもよい［この薬剤の包括的記載についてはＪ．Ｋｉｒｓｃｈｂａｕｍ，Ａｎａｌ．Ｐｒｏｆｉｌｅｓ Ｄｒｕｇ Ｓｕｂｓ．１２：１−３６（１９８３）参照］。
【０１００】
ＨＣＶ感染症の治療には、各々その開示内容全体が本明細書に組み込まれるＲ．Ｅ．Ｈａｒｒｙ−Ｏ’ｋｕｒｕら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，６２：１７５４−１７５９（１９９７）；Ｍ．Ｓ．Ｗｏｌｆｅら，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．，３６：７６１１−７６１４（１９９５）；米国特許第３，４８０，６１３号（１９６９年１１月２５日）；米国特許第６，７７７，３９５号（２００４年８月１７日）；米国特許第６，９１４，０５４号（２００５年７月５日）；ＷＯ０１／９０１２１（２００１年１１月２９日）；ＷＯ０１／９２２８２（２００１年１２月６日）；ＷＯ０２／３２９２０（２００２年４月２５日）；ＷＯ０２／０５７２８７（２００２年７月２５日）；ＷＯ０２／０５７４２５（２００２年７月２５日）；ＷＯ０４／００２４２２（２００４年１月８日）；ＷＯ０４／００２９９９（２００４年１月８日）；ＷＯ０４／００３０００（２００４年１月８日）；ＷＯ０４／００２４２２（２００４年１月８日）；ＵＳ２００５／０１０７３１２；ＵＳ２００５／００９０４６３；ＵＳ２００４／０１４７４６４；及びＵＳ２００４／００６３６５８に開示されている抗ウイルス２’−Ｃ−分岐型リボヌクレオシドと本発明の化合物を併用してもよい。このような２’−Ｃ−分岐型リボヌクレオシドとしては限定されないが、２’−Ｃ−メチルシチジン、２’−フルオロ−２’−Ｃ−メチルシチジン、２’−Ｃ−メチルウリジン、２’−Ｃ−メチルアデノシン、２’−Ｃ−メチルグアノシン及び９−（２−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−２，６−ジアミノプリン；フラノースＣ−２’、Ｃ−３’及びＣ−５’ヒドロキシルの対応するアミノ酸エステル（例えば３’−Ｏ−（Ｌ−バリル）−２’−Ｃ−メチルシチジン二塩酸塩、別称バロピシタビン二塩酸塩ないしＮＭ−２８３及び３’−Ｏ−（Ｌ−バリル）−２’−フルオロ−２’−Ｃ−メチルシチジン）、並びにその５’リン酸誘導体の場合により置換された対応する環状１，３−プロパンジオールエステルが挙げられる。
【０１０１】
ＨＣＶ感染症の治療に、米国特許第６，８６４，２４４号（２００５年３月８日）；ＷＯ０２／５１４２５（２００２年７月４日），譲受人Ｍｉｔｓｕｂｉｓｈｉ Ｐｈａｒｍａ Ｃｏｒｐ．；ＷＯ０１／７９２４６、ＷＯ０２／３２９２０及びＷＯ０２／４８１６５（２００２年６月２０日），譲受人Ｐｈａｒｍａｓｓｅｔ，Ｌｔｄ．；ＷＯ０１／６８６６３（２００１年９月２０日），譲受人ＩＣＮ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ；ＷＯ９９／４３６９１（１９９９年９月２日）；ＷＯ０２／１８４０４（２００２年３月７日），譲受人Ｈｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅ；ＵＳ２００２／００１９３６３（２００２年２月１４日）；ＷＯ０２／１００４１５（２００２年１２月１９日）；ＷＯ０３／０２６５８９（２００３年４月３日）；ＷＯ０３／０２６６７５（２００３年４月３日）；ＷＯ０３／０９３２９０（２００３年１１月１３日）：ＵＳ２００３／０２３６２１６（２００３年１２月２５日）；ＵＳ２００４／０００６００７（２００４年１月８日）；ＷＯ０４／０１１４７８（２００４年２月５日）；ＷＯ０４／０１３３００（２００４年２月１２日）；ＵＳ２００４／００６３６５８（２００４年４月１日）；並びにＷＯ０４／０２８４８１（２００４年４月８日）に開示されているもの等の抗ＨＣＶ特性をもつ他のヌクレオシドと本発明の化合物を併用してもよい。
【０１０２】
一態様において、本発明のヌクレオシド誘導体と併用可能なヌクレオシドＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤は以下の化合物から選択される：４’−アジドシチジン；４−アミノ−７−（２−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン；４−アミノ−７−（２−Ｃ−ヒドロキシメチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン；４−アミノ−７−（２−Ｃ−フルオロメチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン；４−アミノ−５−フルオロ−７−（２−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン；２−アミノ−７−（２−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン；４−アミノ−７−（２−Ｃ，２−Ｏ−ジメチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン；並びにその医薬的に許容可能な塩及びプロドラッグ。
【０１０３】
ＨＣＶ感染症の治療には、各々その開示内容全体が本明細書に参照により組み込まれるＷＯ０１／７７０９１（２００１年１０月１８日）、譲受人Ｔｕｌａｒｉｋ，Ｉｎｃ．；ＷＯ０１／４７８８３（２００１年７月５日）、譲受人Ｊａｐａｎ Ｔｏｂａｃｃｏ，Ｉｎｃ．；ＷＯ０２／０４４２５（２００２年１月１７日）、譲受人Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ；ＷＯ０２／０６２４６（２００２年１月２４日）、譲受人Ｉｓｔｉｔｕｔｏ ｄｉ Ｒｉｃｅｒｃｈｅ ｄｉ Ｂｉｏｌｏｇｉａ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｅ Ｐ．Ａｎｇｅｌｅｔｔｉ Ｓ．Ｐ．Ａ．；ＷＯ０２／２０４９７（２００２年３月３日）；ＷＯ２００５／０１６９２７（特にＪＴＫ００３）、譲受人Ｊａｐａｎ Ｔｏｂａｃｃｏ，Ｉｎｃ．に開示されているもの；及びＨＣＶ−７９６（Ｖｉｒｏｐｈａｒｍａ Ｉｎｃ．）等のＨＣＶポリメラーゼの非ヌクレオシド阻害剤と本発明の化合物を併用してもよい。
【０１０４】
一態様において、本発明のヌクレオシド誘導体と併用可能な非ヌクレオシドＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤は以下の化合物から選択される：１４−シクロヘキシル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−（２−モルホリン−４−イルエチル）−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−３−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−３−メトキシ−６−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；（｛［（１４−シクロヘキシル−３−メトキシ−６−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−イル）カルボニル］アミノ｝スルホニル）酢酸メチル；（｛［（１４−シクロヘキシル−３−メトキシ−６−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−イル）カルボニル］アミノ｝スルホニル）酢酸；１４−シクロヘキシル−Ｎ−［（ジメチルアミノ）スルホニル］−３−メトキシ−６−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボキサミド；３−クロロ−１４−シクロヘキシル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；Ｎ’−（１１−カルボキシ−１４−シクロヘキシル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−インドロ［１，２−ｅ］［１，５］ベンゾキサゾシン−７−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルエタン−１，２−ジアミニウムビス（トリフルオロアセテート）；１４−シクロヘキシル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−インドロ［１，２−ｅ］［１，５］ベンゾキサゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−メチル−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−３−メトキシ−６−メチル−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−３−メトキシ−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−７−オキソ−６−（２−ピペリジン−１−イルエチル）−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−（２−モルホリン−４−イルエチル）−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−［２−（ジエチルアミノ）エチル］−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−（１−メチルピペリジン−４−イル）−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−Ｎ−［（ジメチルアミノ）スルホニル］−７−オキソ−６−（２−ピペリジン−１−イルエチル）−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボキサミド；１４−シクロヘキシル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−Ｎ−［（ジメチルアミノ）スルホニル］−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボキサミド；１４−シクロペンチル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；６−アリル−１４−シクロヘキシル−３−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロペンチル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１３−シクロヘキシル−５−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロフロ［３’，２’：６，７］［１，４］ジアゾシノ［１，８−α］インドール−１０−カルボン酸；１５−シクロヘキシル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−７−オキソ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，１−ａ］［２，６］ベンゾジアゾニン−１２−カルボン酸；１５−シクロヘキシル−８−オキソ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾニン−１２−カルボン酸；１３−シクロヘキシル−６−オキソ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［１，２−ｄ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０−カルボン酸；及びその医薬的に許容可能な塩。
【０１０５】
「医薬的に許容可能」とはキャリヤー、希釈剤又は賦形剤が製剤の他の成分と適合可能でなければならず及びそのレシピエントに有害であってはならないことを意味する。
【０１０６】
医薬的に許容可能なキャリヤーと共に本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートを含有する医薬組成物も本発明に含まれる。本発明の別の例は上記化合物のいずれかと医薬的に許容可能なキャリヤーを配合することにより製造される医薬組成物である。本発明の別の例は上記化合物のいずれかと医薬的に許容可能なキャリヤーを配合する段階を含む医薬組成物の製造方法である。
【０１０７】
ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ、特にＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼを阻害するために有用な医薬組成物として、有効量の本発明の化合物及び医薬的に許容可能なキャリヤーを含有する組成物も本発明に含まれる。ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症、特にＨＣＶ感染症の治療に有用な医薬組成物並びにＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ、特にＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害方法及びＲＮＡ依存性ウイルス複製、特にＨＣＶ複製の治療方法も本発明に含まれる。更に、本発明はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス、特にＨＣＶに対して活性な治療有効量の別の物質と共に治療有効量の本発明の化合物を含有する医薬組成物にも関する。ＨＣＶに対して活性な物質としては限定されないが、リバビリン、レボビリン、ビラミジン、チモシンα１、ＨＣＶ ＮＳ３セリンプロテアーゼの阻害剤、インターフェロンα、ペグ化インターフェロンα（ペグインターフェロンα）、インターフェロンαとリバビリンの併用剤、ペグインターフェロンαとリバビリンの併用剤、インターフェロンαとレボビリンの併用剤、及びペグインターフェロンαとレボビリンの併用剤が挙げられる。インターフェロンαとしては限定されないが、組換えインターフェロンα２ａ（例えばＨｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅ，Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪから市販されているＲｏｆｅｒｏｎインターフェロン）、インターフェロンα２ｂ（例えばＳｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐ．，Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪから市販されているＩｎｔｒｏｎ−Ａインターフェロン）、コンセンサスインターフェロン及び精製インターフェロンα製剤が挙げられる。リバビリンとＨＣＶに対するその活性については、Ｊ．Ｏ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ ａｎｄ Ｓ．Ａ．Ｒａｙｂｕｃｋ，“Ｉｎｏｓｉｎｅ Ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ Ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ：Ｃｏｎｓｉｄｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｋｉｎｅｔｉｃｓ，ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ，”Ａｎｎ．Ｒｅｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，３５：２０１−２１０（２０００）参照。
【０１０８】
本発明の別の側面はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製、特にＨＣＶ複製の阻害用医薬、及び／又はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症、特にＨＣＶ感染症の治療用医薬の製造におけるヌクレオシドアリールホスホロアミデート及びその医薬組成物の使用を提供する。本発明の更に別の側面はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製、特にＨＣＶ複製の阻害用医薬、及び／又はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症、特にＨＣＶ感染症の治療用医薬として使用するためのヌクレオシドアリールホスホロアミデート及びその医薬組成物を提供する。
【０１０９】
本発明の医薬組成物は構造式Ｉの化合物又はその医薬的に許容可能な塩を活性成分として含み、更に医薬的に許容可能なキャリヤーと場合により他の治療成分を含むことができる。
【０１１０】
前記組成物は、経口、直腸、局所、非経口（皮下、筋肉内及び静脈内を含む）、眼球（眼科薬）、肺（鼻腔又は口腔吸入）、又は鼻腔内投与に適した組成物が挙げられるが、いずれかの所定の症例に最適な経路は治療する病態の種類及び重篤度と活性成分の種類によって異なる。組成物は、単位用量形態にすると簡便であり、製薬分野で周知のいずれかの方法により製造することができる。
【０１１１】
実際の使用において、構造式Ｉの化合物を活性成分として慣用医薬配合技術により医薬キャリヤーと混和することができる。キャリヤーは例えば経口又は非経口（静脈内を含む）等の投与に所望される製剤形態に応じて多種多様の形態をとることができる。経口剤形用組成物を製造するには、通常の医薬媒体の任意のものを使用することができ、例えば、懸濁液剤、エリキシル剤及び溶液剤等の経口液体製剤の場合には、水、グリコール、油類、アルコール類、香味剤、防腐剤、着色剤等を使用することができ；あるいは、例えば散剤、ハード及びソフトカプセル剤並びに錠剤等の経口固体製剤の場合には、澱粉、糖類、微結晶セルロース、希釈剤、顆粒化剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤等のキャリヤーを使用することができ、固体経口製剤のほうが液体製剤よりも好ましい。
【０１１２】
投与し易いという理由から、錠剤とカプセル剤が最も有利な経口用量単位形態であり、その場合には当然固体医薬キャリヤーが使用される。所望により、標準水性又は非水性技術により錠剤にコーティングしてもよい。このような組成物及び製剤は少なくとも０．１％の活性成分を含有すべきである。これらの組成物中の活性化合物の百分率は当然のことながら変動させることができ、用量単位の重量の約２％〜約６０％にすると適切である。このような治療に有用な組成物中の活性化合物の量は有効用量が得られるように選択される。活性化合物は例えば滴剤やスプレー等として鼻腔内投与することもできる。
【０１１３】
錠剤、ピル、カプセル等には更に結合剤（例えばトラガカントガム、アラビアガム、コーンスターチ又はゼラチン）、賦形剤（例えばリン酸２カルシウム）、崩壊剤（例えばコーンスターチ、ジャガイモ澱粉、アルギン酸）、滑沢剤（例えばステアリン酸マグネシウム）、及び甘味剤（例えばスクロース、ラクトース又はサッカリン）を添加してもよい。用量単位形態がカプセルである場合には、上記種の材料に加えて脂肪油等の液体キャリヤーを添加してもよい。
【０１１４】
コーティングとして又は用量単位の物理的形状を変えるために他の各種材料を使用してもよい。例えば、錠剤はシェラック、糖又は両者でコーティングしてもよい。シロップ又はエリキシル剤には活性成分以外に、甘味剤としてスクロース、防腐剤としてメチル及びプロピルパラベン、色素並びにフレーバー（例えばチェリー又はオレンジフレーバー）を添加してもよい。
【０１１５】
構造式Ｉの化合物は非経口投与してもよい。ヒドロキシプロピルセルロース等の界面活性剤と適切に混合した水中でこれらの活性化合物の溶液又は懸濁液を製造することができる。グリセロール、液体ポリエチレングリコール及びその油中混合物中で分散液を製造することもできる。通常の保存及び使用条件では、微生物の増殖を防ぐためにこれらの製剤に防腐剤を添加する。
【０１１６】
注射用に適した剤形としては滅菌水溶液又は分散液と、注射用滅菌水溶液又は分散液の即席調製用滅菌粉末が挙げられる。いずれの場合も、剤形は無菌でなければならず、容易に注射針を通過できる程度まで流動性でなければならない。剤形は製造及び保存条件下で安定でなければならず、細菌や真菌等の微生物の汚染作用から保護しなれけばならない。キャリヤーは例えば、水、エタノール、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコール及び液体ポリエチレングリコール）、適切なこれらの混合物及び植物油を含む溶媒又は分散媒体とすることができる。
【０１１７】
哺乳動物、特にヒトに有効用量の本発明の化合物を提供するのに適したいずれの投与経路をも利用することができる。例えば、経口、直腸、局所、非経口、眼球、肺、鼻腔等の経路を利用できる。剤形としては錠剤、トローチ、分散液、懸濁液、溶液、カプセル、クリーム、軟膏、エアゾール等が挙げられる。構造式Ｉの化合物は経口投与することが好ましい。
【０１１８】
ヒトに経口投与する場合、用量範囲は、分割投与にて０．０１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重である。一態様において、この用量範囲は、分割投与にて０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重である。別の態様において、この用量範囲は、分割投与にて０．５〜２０ｍｇ／ｋｇ体重である。経口投与では、治療する患者の症状に用量を合わせるように活性成分１．０〜１０００ｍｇ、特に活性成分１、５、１０、１５、２０、２５、５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、４００、５００、６００、７５０、８００、９００及び１０００ｍｇを含有する錠剤又はカプセルとして組成物を提供することが好ましい。
【０１１９】
使用する活性成分の有効用量は、使用する特定化合物、治療方法、治療する病態及び治療する病態の重篤度により変わり得る。このような用量は当業者が容易に確認することができる。最適治療応答が得られるようにこの用量レジメンを調節することができる。
【０１２０】
本発明の化合物は１個以上の不斉中心を含み、従って、ラセミ化合物及びラセミ混合物、単一エナンチオマー、ジアステレオ異性体混合物及び個々のジアステレオ異性体として存在することができる。Ｒ５が水素であり、構造式Ｉにおいてリン原子に結合したアミノアシル残基におけるＲ４が式：
【０１２１】
【化２３】
中、水素以外の置換基であるとき、このアミノ酸残基は不斉中心を含み、個々のＲ及びＳ立体異性体とＲＳ立体異性体混合物を含むものとする。一態様において、不斉炭素の立体配置はＳ−アミノ酸の立体配置に対応し、即ち、式：
【０１２２】
【化２４】
に示すような天然α−アミノ酸立体配置に対応する。
【０１２３】
構造式Ｉの化合物における四置換リンは別の不斉中心を構成し、本発明の化合物はこのリン原子に両方の立体化学配置を含むものとする。
【０１２４】
本発明は下記構造式：
【０１２５】
【化２５】
に示すような５員フラノース環のβ−Ｄ立体化学配置をもつヌクレオシドアリールホスホロアミデート、即ち５員フラノース環のＣ−１及びＣ−４位の置換基がβ立体化学配置（太線で示す「上向き」方向）をもつヌクレオシドアリールホスホロアミデートを含むものとする。
【０１２６】
本明細書に記載する化合物にはオレフィン二重結合を含むものもあり、特に指定しない限り、Ｅ及びＺ幾何異性体を含むものとする。
【０１２７】
本明細書に記載する化合物にはケト−エノール互変異性体等の互変異性体として存在するものもある。個々の互変異性体とその混合物も構造式Ｉの化合物に含まれる。本発明の化合物に含まれるケト−エノール互変異性体の例を以下に示す。
【０１２８】
【化２６】
【０１２９】
構造式Ｉの化合物は例えば適切な溶媒（例えばメタノール又は酢酸エチル又はその混合物）からの分別結晶や、光学活性固定相を使用するキラルクロマトグラフィーによりその個々のジアステレオ異性体に分離することができる。
【０１３０】
あるいは、光学的に純粋な出発材料又は既知配置の試薬を使用して立体特異的合成により構造式Ｉの化合物のいずれの立体異性体も得ることもできる。
【０１３１】
本発明の化合物は医薬的に許容可能な塩として投与することができる。「医薬的に許容可能な塩」なる用語は無機又は有機塩基と無機又は有機酸を含む医薬的に許容可能な非毒性塩基又は酸から製造される塩を意味する。「医薬的に許容可能な塩」なる用語に含まれる塩基性化合物の塩とは遊離塩基を適切な有機又は無機酸と反応させることにより一般に製造される本発明の化合物の非毒性塩を意味する。本発明の塩基性化合物の代表的な塩として、限定されないが、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、硼酸塩、臭化物、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストル酸塩、エシル酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチル臭化物、メチル硝酸塩、メチル硫酸塩、粘液酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミンアンモニウム塩、オレイン酸塩、蓚酸塩、パモ酸塩（エンボン酸塩）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、硫酸塩、塩基性酢酸塩、琥珀酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、トリエチオジド及び吉草酸塩が挙げられる。更に、本発明の化合物が酸性部分をもつ場合には、適切なその医薬的に許容可能な塩として、限定されないが、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、三価鉄、二価鉄、リチウム、マグネシウム、三価マンガン、二価マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛等の無機塩基から誘導される塩が挙げられる。アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウム及びナトリウム塩が特に好ましい。医薬的に許容可能な非毒性有機塩基から誘導される塩として、第一、第二、及び第三アミン、環状アミン、並びに塩基性イオン交換樹脂（例えばアルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミン等）の塩が挙げられる。
【０１３２】
更に、本発明の化合物にカルボン酸（−ＣＯＯＨ）又はヒドロキシル基が存在する場合には、カルボン酸誘導体の医薬的に許容可能なプロドラッグエステル（例えばメチル、エチル又はピバロイルオキシメチルエステル）又はリボースＣ−２’、Ｃ−３’及びＣ−５’ヒドロキシルのプロドラッグアシル誘導体（例えばＯ−アセチル、Ｏ−ピバロイル、Ｏ−ベンゾイル及びＯ−アミノアシル）を使用することができる。徐放又はプロドラッグ製剤として使用するように生体利用性、組織分布、溶解度及び加水分解特性を改変するための、当分野で公知のエステル及びアシル基が含まれる。予想される誘導体は必要な化合物に容易にインビボ変換可能である。従って、本発明の治療方法において、「投与する」及び「投与」なる用語は具体的に開示する化合物又は具体的に開示しないとしても、ヒト患者を含む哺乳動物に投与後に特定化合物にインビボ変換する化合物にて指定ウイルス感染症を治療することを意味する。適切なプロドラッグ誘導体の従来の選択及び製造法は例えばその開示内容全体を本明細書に参照により組み込む“Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，”Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ編，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８５に記載されている。
【０１３３】
本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートの製造
Ｃ．Ｐｉｅｒｒａら，Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ，Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ ａｎｄ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ，２４：７６７（２００５）又はＪ．Ａ．Ｐｉｃｃｉｒｉｌｌｉら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，６４：７４７（１９９９）により文献に記載されているように２’−Ｃ−メチルシチジンを製造した。２’−デオキシ−２’−フルオロ−２’−Ｃ−メチルシチジンはＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４８：５５０４−５５０８（２００５）に記載されているように製造する。リン酸化反応用のアリールホスホロクロリデートはその開示内容全体を本明細書に参照により組み込む米国特許第６，４５５，５１３号に記載の方法に従って製造した。本発明のアリールホスホロアミデートを生成するためのリン酸化反応は米国特許第６，４５５，５１３号とＣ．ＭｃＧｕｉｇａｎら．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，３６：１０４８（１９９３）に記載の方法に従って実施した。例えば、フェノール又は１−ナフトールをオキシ塩化リンと反応させた後、各種アミノ酸塩と連結させてフェノキシ又は１−ナフチルオキシホスホロクロリデートを得、一般にフラッシュクロマトグラフィーにより精製した後、ｔ−ブチルマグネシウムクロリド等の適切な塩基の存在下でヌクレオシドと連結させた（Ｍ．Ｕｃｈｉｙａｍａら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５８：３７３（１９９３）及びスキーム１参照）。
【０１３４】
一般手順：
すべての溶媒は市販品とし、それ以上精製せずに使用した。反応はオーブン乾燥（１１０℃）したガラス容器で窒素雰囲気下に実施した。有機抽出相を硫酸ナトリウム（Ｎａ２ＳＯ４）で乾燥し、（乾燥剤の濾過後に）ロータリーエバポレーターを減圧下に運転して濃縮した。フラッシュクロマトグラフィーは公開手順（Ｗ．Ｃ．Ｓｔｉｌｌら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，４３：２９２３（１９７８））に従ってシリカゲル又はプレパックカラムを利用する市販フラッシュクロマトグラフィーシステム（Ｂｉｏｔａｇｅ ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｊｏｎｅｓ Ｆｌａｓｈｍａｓｔｅｒ ＩＩ）にて実施した。
【０１３５】
試薬は通常通りに商業的供給業者から直接入手（及び供給状態で使用）する、または、科学文献に報告されている又は当業者に公知である日常的合成段階を使用して容易に製造可能である。
【０１３６】
１Ｈ及び３１Ｐ ＮＭＲスペクトルはＢｒｕｋｅｒ ＡＭシリーズ分光計を周波数３００〜６００ＭＨｚ（報告値）における運転にて記録された。交換不能なプロトン（及び検出される場合には交換可能なプロトン）に対応するシグナルの化学シフト（δ）をテトラメチルシランに対する百万分率（ｐｐｍ）で記録し、残留溶媒ピークを基準として使用して測定する。シグナルは多重度（ｓ，一重線；ｄ，二重線；ｔ，三重線；ｑ，四重線；ｍ，多重線；ｂ，広幅，及びその組み合わせ）；ヘルツ（Ｈｚ）で表したカップリング定数；プロトン数の順に表示する。質量分析（ＭＳ）データをＰｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＡＰＩ １００又はＷａｔｅｒｓ ＭｉｃｒｏＭａｓｓ ＺＱを負（ＥＳ−）又は正（ＥＳ＋）イオン化モードにて運転して取得し、親イオンのみの質量対電荷（ｍ／ｚ）比として結果を報告する。分取規模のＨＰＬＣ分離は２４８７デュアル吸光度検出器を取付けたＷａｔｅｒｓ ２５２５ポンプ、ＵＶ１０００吸収モジュールを取付けたＴＳＰ Ｓｐｅｃｔｒａ ｓｙｓｔｅｍ Ｐ４０００、又は２５２５ポンプモジュールとＭｉｃｒｏｍａｓｓ ＺＭＤ検出器と２５２５採取モジュールを組込んだ自動質量トリガー型Ｗａｔｅｒｓ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓシステムにて実施した。１０〜４０ｍＬ／分の流速を使用していずれも０．１％トリフルオロ酢酸又はギ酸を加えた水とＭｅＣＮの直線勾配で化合物を溶出させた。Ｓｙｍｍｅｔｒｙ Ｃ１８カラム（７μＭ，１９×３００ｍｍ）を固定相として使用した。
【０１３７】
実施例、スキーム及び表では以下の略語を使用する：
ａｑ．：水溶液；Ａｒ：アリール；ａｔｍ：気圧；ＣＣｌ４：四塩化炭素；ＤＣＭ：ジクロロメタン；ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド；ｅｑ．：当量；Ｅｔ３Ｎ：トリエチルアミン；ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル；Ｅｔ２Ｏ：ジエチルエーテル；ｈ：時間；Ｍｅ：メチル；ＭｅＣＮ：アセトニトリル；ＭｅＯＨ：メタノール；ｍｉｎ：分；ＭＳ：質量スペクトル；Ｎ，Ｎ−ＤＭＡ：Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド；ＰＥ：石油エーテル；Ｐｙ：ピリジン；ｑｕａｎｔ．：定量的；ＲＰ−ＨＰＬＣ：逆相高性能液体クロマトグラフィー；ＲＴ：室温；ｓｅｃ：秒；ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸；及びＴＨＦ：テトラヒドロフラン。
【０１３８】
以下、実施例により本発明の化合物の製造に使用する条件を例示する。これらの実施例は如何なる点でも本発明の範囲を限定することを意図するものではなく、そのように解釈すべきではない。本発明のこれら及び他の化合物を製造するために以下の製造手順の条件及び工程の公知変形を使用できることはヌクレオシド及びヌクレオチド合成の当業者に容易に理解されよう。全温度は特に指定しない限り、摂氏である。
【０１３９】
【化２７】
【実施例】
【０１４０】
（実施例１）
５’−Ｏ−［（｛（１Ｓ）−２−［（２，２−ジメチルプロパノイル）オキシ］−１−メチルエチル｝アミノ）（フェノキシ）ホスホリル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
ステップ１：（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−プロピルピバレート
【０１４１】
【化２８】
【０１４２】
市販の［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−メチルエチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．０当量）のＤＣＭ（０．１９Ｍ）溶液に塩化パビロイル（１．１当量）及びＥｔ３Ｎ（１．１当量）を加えた。反応混合物を室温で４８時間撹拌後、水を加え、有機相を分離し、１０％クエン酸水溶液で洗浄した。９２：８ ＰＥ／ＥｔＯＡｃを溶離液として残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製した。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ４．８２（ｂｒ ｓ，１Ｈ），４．３９−４．２５（ｍ，３Ｈ），１．７５（ｓ，９Ｈ），１．５５−１．４５（ｍ，１２Ｈ）。
【０１４３】
ステップ２：（２Ｓ）−２−アミノプロピル−２，２−ジメチルプロパノエート塩酸塩
【０１４４】
【化２９】
【０１４５】
ピバル酸（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−プロピル（１．０当量）のＥｔＯＡｃ（０．６Ｍ）溶液に４Ｎ ＨＣｌのジオキサン溶液（１０当量）を加えた。反応混合物を２．５時間撹拌後、溶媒減圧蒸発させ、得られた固形分をＥｔ２Ｏで洗浄し、乾燥した。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．９３（ｂｒ ｓ，３Ｈ），４．６２（ｄｄ，Ｊ＝１２．２７ ａｎｄ ３．４２Ｈｚ，１Ｈ），４．５１（ｄｄ，Ｊ＝１２．２７ ａｎｄ ６．７４Ｈｚ，１Ｈ），３．９３（ｂｓ，１Ｈ），１．７７（ｄ，Ｊ＝６．８５Ｈｚ，３Ｈ），１．５７（ｓ，９Ｈ）。
【０１４６】
ステップ３：ピバル酸（２Ｓ）−２−｛（クロロ（１−フェノキシ）ホスホリル］アミノ｝プロピル
【０１４７】
【化３０】
【０１４８】
フェニルジクロロジホスフェートのＤＣＭ（０．１２Ｍ）溶液に（２Ｓ）−２−アミノプロピル−２，２−ジメチルプロパノエート塩酸塩（１．０当量）を加えた。−７８℃まで冷却後、Ｅｔ３Ｎ（２．０当量）を原液で加え、反応混合物を室温まで一晩昇温した。全揮発分を除去し、得られた白色固体をＥｔ２Ｏで洗浄し、濾過した。濾液を減圧蒸発させ、ジアステレオ異性体の１：１混合物として無色油状物を得た。３１Ｐ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ １０．０８ ａｎｄ ９．９２ｐｐｍ。
【０１４９】
ステップ４：５’−Ｏ−［（｛（１Ｓ）−２−［（２，２−ジメチルプロパノイル）オキシ］−１−メチルエチル｝アミノ）（フェノキシ）ホスホリル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０１５０】
【化３１】
【０１５１】
２’−Ｃ−メチルシチジンをＴＨＦ（０．０９Ｍ）で希釈した。得られたスラリーを−７８℃まで冷却し、ｔｅｒｔ−ブチルマグネシウムクロリド（ＴＨＦ中１．０Ｍ溶液，２．０当量）を加えた。混合物をすぐに０℃まで昇温し、３０分間撹拌し、再び−７８℃まで冷却後、（２Ｓ）−２−［［クロロ（１−フェノキシ）ホスホリル］アミノ］プロピルピバレート（ＴＨＦ中１．０Ｍ溶液，２．０当量）を滴下した。反応混合物を室温まで一晩昇温し、水の添加によりクエンチした。水相をＥｔＯＡｃで３回抽出し、有機相を合わせてブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。９２：８ ＤＣＭ／ＭｅＯＨを溶離液として粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、得られた白色固体をＤＭＳＯに溶解し、ＲＰ−ＨＰＬＣにより精製した。純ジアステレオ異性体を含有するフラクションを合わせて凍結乾燥し、標記化合物をその白色ＴＦＡ塩として得た。
【０１５２】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．９８（ｄ，Ｊ＝７．９５Ｈｚ，１Ｈ），７．４３−７．２０（ｍ，５Ｈ），６．０２−５．９９（ｍ，２Ｈ），４．５８−４．５１（ｍ，１Ｈ），４．４６−４．３７（ｍ，１Ｈ），４．２２−４．１５（ｍ，１Ｈ），４．０８（ｄｄ，Ｊ＝１０．８４，５．７５Ｈｚ，１Ｈ），３．９３（ｄｄ，Ｊ＝１０．７２，６．５２Ｈｚ，１Ｈ），３．７７（ｄ，Ｊ＝９．２９Ｈｚ，１Ｈ），３．６４−３．５３（ｍ，１Ｈ），１．２２（ｓ，９Ｈ），１．２３−１．１７（ｍ，６Ｈ），ＮＨ２，ＮＨ，２×ＯＨ検出されず，３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．５６；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５５６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５３】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ ８．０２（ｄ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ，１Ｈ），７．４４−７．２２（ｍ，５Ｈ），６．０３−６．００（ｍ，２Ｈ），４．５８−４．５３（ｍ，１Ｈ），４．４３−４．３６（ｍ，１Ｈ），４．２２−４．１５（ｍ，１Ｈ），４．０４（ｄｄ，Ｊ＝１０．９４，５．６４Ｈｚ，１Ｈ），３．９１−３．８１（ｍ，２Ｈ），３．６３−３．５４（ｍ，１Ｈ），１．２３−１．１７（ｍ，１５Ｈ），ＮＨ２，ＮＨ，２×ＯＨ検出されず，３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．６８；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５５６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５４】
（実施例２）
５’−Ｏ−［｛［（１Ｓ）−２−（ブチリルオキシ）−１−メチルエチル］アミノ｝（フェノキシ）ホスホリル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
ステップ１：（２Ｓ）−２−｛［クロロ（１−フェノキシ）ホスホリル］アミノ｝プロピルブチレート
【０１５５】
【化３２】
【０１５６】
実施例１，ステップ３に記載した手順に従い、フェニルジクロロジホスフェートのＤＣＭ（０．１４４Ｍ）溶液を（実施例１，ステップ１及び２に記載したと同一の手順に従って製造した）（２Ｓ）−２−アミノプロピルブチレート塩酸塩（１．０当量）とＥｔ３Ｎ（２．０当量）で処理し、無色油状物状の標記化合物をジアステレオ異性体の１：１混合物として得た。３１Ｐ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１０．１２ ａｎｄ ９．９４。
【０１５７】
ステップ２：５’−Ｏ−［｛［（１Ｓ）−２−（ブチリルオキシ）−１−メチルエチル］アミノ｝（フェノキシ）ホスホリル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０１５８】
【化３３】
【０１５９】
実施例１，ステップ４に記載した手順に従い、２’−Ｃ−メチルシチジンのＴＨＦ（０．０９７Ｍ）溶液を−７８℃まで冷却後、ｔｅｒｔ−ブチルマグネシウムクロリド（ＴＨＦ中１．０Ｍ溶液，２．０当量）を加えた後、（２Ｓ）−２−［［クロロ（１−フェノキシ）ホスホリル］アミノ］プロピルブチレート（ＴＨＦ中１．０Ｍ溶液，２．０当量）を加えた。９２：８ ＤＣＭ：ＭｅＯＨを溶離液として粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、得られた固形分をＤＭＳＯに溶解し、ＲＰ−ＨＰＬＣにより精製し、標記化合物をその白色ＴＦＡ塩として得た。
【０１６０】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．９０（ｄ，Ｊ＝７．７４Ｈｚ，１Ｈ），７．４１−７．２３（ｍ，５Ｈ），６．０３（ｓ，１Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝７．０８Ｈｚ，１Ｈ），４．５９−４．５２（ｍ，１Ｈ），４．４７−４．３６（ｍ，１Ｈ），４．１８−４．１５（ｍ，１Ｈ），４．０２（ｄ，Ｊ＝５．５２Ｈｚ，２Ｈ），３．７７（ｄ，Ｊ＝９．０６Ｈｚ，１Ｈ），３．６３−３．５３（ｍ，１Ｈ），２．３２（ｔ，Ｊ＝７．０８Ｈｚ，２Ｈ），１．６８−１．６０（ｍ，２Ｈ），１．１７−１．１５（ｍ，６Ｈ），０．９５（ｔ，Ｊ＝７．２９Ｈｚ，３Ｈ），ＮＨ２，ＮＨ，２×ＯＨ検出されず。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．７；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１６１】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ ８．０２（ｄ，Ｊ＝７．７４Ｈｚ，１Ｈ），７．４４−７．２２（ｍ，５Ｈ），６．０１（ｓ，１Ｈ），５．９８（ｄ，Ｊ＝７．９８Ｈｚ，１Ｈ），４．５８−４．５３（ｍ，１Ｈ），４．４３−４．３６（ｍ，１Ｈ），４．２１−４．１５（ｍ，１Ｈ），４．０４−３．９０（ｍ，２Ｈ），３．８２（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ），３．６３−３．５２（ｍ，１Ｈ），２．２８（ｔ，Ｊ＝７．２９Ｈｚ，２Ｈ），１．６８−１．５６（ｍ，２Ｈ），１．２１−１．１９（ｍ，６Ｈ），０．９５（ｔ，Ｊ＝７．２９Ｈｚ，３Ｈ），ＮＨ２，ＮＨ，２×ＯＨ検出されず。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．７４；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１６２】
スキーム２に示し、実施例３に例示する手順により本発明の化合物を製造することもできる。
【０１６３】
【化３４】
【０１６４】
（実施例３）
５’−Ｏ−［［［２−（２，２−ジメチル−１−オキソプロポキシ）エチル］アミノ］（フェノキシ）ホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
ステップ１：２’−Ｃ−メチル−２’．３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジン
【０１６５】
【化３５】
【０１６６】
２’−Ｃ−メチルシチジンをアセトン（０．０４Ｍ）で希釈し、ｐ−トルエンスルホン酸と２，２−ジメトキシプロパンを加えた。得られたスラリーを２４時間室温で撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をＭｅＯＨに溶解し、（予め２Ｎ ＮａＯＨとＨ２Ｏで洗浄しておいた）Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ Ａ−２６を加えた。得られた混合物を２時間撹拌した。Ａｍｂｅｒｌｉｔｅを濾別し、溶液を蒸発させた。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９：１）により精製し、白色粉末状の所望生成物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．９６（ｄ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，１Ｈ），６．１８（ｓ，１Ｈ），５．９０（ｄ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，１Ｈ），４．５１−４．４８（ｍ，１Ｈ），４．２８−４．２３（ｍ，１Ｈ），３．８６（ｄｄ，Ｊ＝３．０４ ａｎｄ １２．１２Ｈｚ，１Ｈ），３．７８（ｄｄ，Ｊ＝３．５２ ａｎｄ １２．１２Ｈｚ，１Ｈ），１．５９（ｓ，３Ｈ），１．４３（ｓ，３Ｈ），１．２５（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ２９８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１６７】
ステップ２：５’−Ｏ−［［［２−（２，２−ジメチル−１−オキソプロポキシ）エチル］アミノ］フェノキシホスフィニル］−２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジン
【０１６８】
【化３６】
【０１６９】
２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジンをモレキュラーシーブの存在下にピリジン（０．６７Ｍ）で希釈した。得られた溶液を０℃まで冷却し、ジフェニルホスファイト（８０％，２．０当量）を加え、混合物を１時間０℃で撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をＴＨＦ（０．０８Ｍ）に溶解した。得られた溶液を０℃まで冷却し、Ｅｔ３Ｎ（６．０当量）、ヘキサクロロエタン（ＤＣＭ中０．８Ｍ）及び（実施例１，ステップ２に記載したように製造した）アミノエチル−２，２−ジメチルプロパノエート塩酸塩を加えた。混合物を３０分間０℃で撹拌した後、水の添加によりクエンチした。水相をＥｔＯＡｃで３回抽出し、有機相を合わせてブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９５：５）により精製し、ジアステレオ異性体の混合物として白色固体を得た。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５８１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１７０】
ステップ３：５’−Ｏ−［［［２−（２，２−ジメチル−１−オキソプロポキシ）エチル］アミノ］（フェノキシ）ホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０１７１】
【化３７】
【０１７２】
５’−Ｏ−［［［２−（２，２−ジメチル−１−オキソプロポキシ）エチル］アミノ］フェノキシホスフィニル］−２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジンをＴＦＡ−Ｈ２Ｏ（８：２，０．０９８Ｍ）溶液に溶解した。得られた溶液を３０℃まで昇温し、２０分間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をアセトニトリルに溶解し、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ Ｃ１８，５μｍ，２１．２０×２５０ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ５ｍＭ ＡＭＢＩＣ）により精製した。純ジアステレオ異性体を含有するフラクションを合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０１７３】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ７．５７（ｄ，Ｊ＝７．２６Ｈｚ，１Ｈ），７．４４−７．３８（ｍ，２Ｈ），７．２６−７．１２（ｍ，５Ｈ），５．９６（ｓ，１Ｈ），５．７８−５．６８（ｍ，２Ｈ），５．３３（ｄ，Ｊ＝６．８７Ｈｚ，１Ｈ），５．１（ｓ，１Ｈ），４．４−４．１５（ｍ，２Ｈ），４．０８−３．９２（ｍ，３Ｈ），３．９９−３．５８（ｍ，１Ｈ），３．１７−３．０５（ｍ，２Ｈ），１．１５（ｓ，９Ｈ），０．９６（ｓ，３Ｈ）；３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：５．４２；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１７４】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ７．５７（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ），７．４４−７．３９（ｍ，２Ｈ），７．２６−７．１０（ｍ，５Ｈ），５．９６（ｂｒ ｓ，１Ｈ），５．７０−５．６５（ｍ，２Ｈ），５．３１（ｄ，Ｊ＝７．０８Ｈｚ，１Ｈ），５．１３（ｓ，１Ｈ），４．４２−４．２４（ｍ，２Ｈ），４．０９−３．９２（ｍ，３Ｈ），３．６８−３．５６（ｍ，１Ｈ），３．１２−３．０５（ｍ，２Ｈ），１．１５（ｓ，９Ｈ），０．９８（ｓ，３Ｈ）；３１Ｐ ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：５．６８；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１７５】
（実施例４）
５’−Ｏ−［［［２−（２−メチル−１−オキソプロポキシ）エチル］アミノ］（フェノキシ）ホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０１７６】
【化３８】
［（実施例３，ステップ１に記載したように製造した）２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジン及び（実施例１，ステップ２に記載したように製造した）アミノエチル−２−メチルプロパノエート塩酸塩から出発して］実施例３，ステップ２及びステップ３に記載した手順に従い、粗生成物を得、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ Ｃ１８，５μｍ，２１．２０×２５０ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ５ｍＭ ＡＭＢＩＣ）により精製した。純化合物を含有する画分を合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０１７７】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７１（ｄ，Ｊ＝７．７４Ｈｚ，１Ｈ），７．４３−７．３８（ｍ，２Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），６．０１（ｓ，１Ｈ），５．８４（ｄ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，１Ｈ），４．５６−４．３７（ｍ，２Ｈ），４．１５−４．０８（ｍ，３Ｈ），３．７６（ｄ，Ｊ＝９．１２Ｈｚ，１Ｈ），３．３０−３．２３（ｍ，２Ｈ），２．６１−２．５３（ｍ，１Ｈ），１．１５（ｄ，Ｊ＝６．７２Ｈｚ，６Ｈ），１．１１（ｓ，３Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．６７；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５２７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１７８】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７４（ｄ，Ｊ＝７．７４Ｈｚ，１Ｈ），７．４４−７．３９（ｍ，２Ｈ），７．３−７．２４（ｍ，３Ｈ），６．０７（ｓ，１Ｈ），５．８３（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），４．５７−４．５２（ｍ，１Ｈ），４．４２−４．３６（ｍ，１Ｈ），４．１５−４．０８（ｍ，３Ｈ），３．７８（ｄ，Ｊ＝９．０８Ｈｚ，１Ｈ），３．３０−３．２３（ｍ，２Ｈ），２．５９−２．５２（ｍ，１Ｈ），１．１６−１．１１（ｍ，９Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．７４；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５２７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１７９】
（実施例５）
５’−Ｏ−［｛［（１Ｓ）−１−メチル−２−（２−メチル−１−オキソプロポキシ）エチル］アミノ｝（フェノキシ）ホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０１８０】
【化３９】
【０１８１】
実施例３，ステップ２及び３に記載した手順に従い、粗生成物を得、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ Ｃ１８，５μｍ，２１．２０×２５０ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ５ｍＭ ＡＭＢＩＣ）により精製した。純化合物を含有する画分を合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０１８２】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７１（ｄ，Ｊ＝７．４４Ｈｚ，１Ｈ），７．４５−７．２８（ｍ，２Ｈ），７．３１−７．１９（ｍ，３Ｈ），６．０７（ｓ，１Ｈ），５．８５（ｄ，Ｊ＝７．４４Ｈｚ，１Ｈ），４．５６−４．４．５１（ｍ，１Ｈ），４．４３−４．３８（ｍ，１Ｈ），４．１５−４．１０（ｍ，１Ｈ），４．０６−３．９６（ｍ，２Ｈ），３．７３（ｄ，Ｊ＝９．２４Ｈｚ，１Ｈ），３．６４−３．５４（ｍ，１Ｈ），２．６３−２．５３（ｍ，１Ｈ），１．１８−１．１５（ｍ，９Ｈ），１．１０（ｓ，３Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：４．４６；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１８３】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７３（ｄ，Ｊ＝７．４４Ｈｚ，１Ｈ），７．４３−７．３８（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．２３（ｍ，３Ｈ），６．０７（ｓ，１Ｈ），５．８３（ｄ，Ｊ＝７．４４Ｈｚ，１Ｈ），４．５７−４．５１（ｍ，１Ｈ），４．４２−４．３５（ｍ，１Ｈ），４．１５−４．１１（ｍ，１Ｈ），４．０４−３．９０（ｍ，２Ｈ），３．７９（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ），３．６６−３．５７（ｍ，１Ｈ），２．６０−２．５０（ｍ，１Ｈ），１．２０（ｄ，Ｊ＝６．６６Ｈｚ，３Ｈ），１．１６−１．１３（ｍ，９Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：４．５１；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１８４】
（実施例６）
５’−Ｏ−［｛［（１Ｓ，２Ｓ）−１−［（２，２−ジメチル−１−オキソプロポキシ）メチル］−２−メチルブチル］アミノ｝（フェノキシ）ホスホリル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０１８５】
【化４０】
【０１８６】
実施例３，ステップ２及び３に記載した手順に従い、粗生成物を得、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ Ｃ１８，５μｍ，２１．２０×２５０ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ５ｍＭ ＡＭＢＩＣ）により精製した。純化合物を含有する画分を合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０１８７】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７０（ｄ，Ｊ＝７．４４Ｈｚ，１Ｈ），７．４３−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．２０（ｍ，３Ｈ），６．０７（ｓ，１Ｈ），５．８２（ｄ，Ｊ＝７．４４Ｈｚ，１Ｈ），４．５４（ｄｄ，Ｊ＝３．６３ ａｎｄ １１．４６Ｈｚ，１Ｈ），４．４２−４．３５（ｍ，１Ｈ），４．１４−３．９９（ｍ，３Ｈ），３．７７（ｄ，Ｊ＝９．０６Ｈｚ，１Ｈ），３．４７−３．３７（ｍ，１Ｈ），１．７１−１．５２（ｍ，２Ｈ），１．２５−１．１（ｍ，１Ｈ），１．１９（ｓ，９Ｈ），１．１２（ｓ，３Ｈ），０．９８−０．９（ｍ，６Ｈ），ＮＨ２，ＮＨ，２×ＯＨ検出されず。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．０２；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５９８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１８８】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．６６（ｄ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，１Ｈ），７．４１−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．２１−７．２０（ｍ，３Ｈ），６．０６（ｓ，１Ｈ），５．８４（ｄ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，１Ｈ），４．５５−４．４９（ｍ，１Ｈ），４．４２−４．３７（ｍ，１Ｈ），４．２３−４．１９（ｍ，１Ｈ），４．１３−４．０５（ｍ，２Ｈ），３．７０（ｄ，Ｊ＝９．３２Ｈｚ，１Ｈ），３．４４−３．３７（ｍ，１Ｈ），１．５９−１．５０（ｍ，２Ｈ），１．２３（ｓ，９Ｈ），１．２３−１．１２（ｍ，１Ｈ），１．０８（ｓ，３Ｈ），０．９２−０．８６（ｍ，６Ｈ），ＮＨ２，ＮＨ，２×ＯＨ検出されず。３１Ｐ ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：４．９１；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５９８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１８９】
上記実施例３に詳述した方法に従い、以下の他の実施例（表１参照）を製造した。
【０１９０】
【表１】
【０１９１】
（実施例９）
５’−Ｏ−［［［２−［（１−オキソ−２−プロピルペンチル）オキシ］エチル］アミノ］フェノキシホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０１９２】
【化４１】
［（実施例３，ステップ１に記載したように製造した）２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジン及びアミノエチル−２−プロピルペンタノエート塩酸塩から出発して］実施例３，ステップ２及び３に記載した手順に従い、粗生成物を得、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ Ｃ１８，５μｍ，２１．２０×２５０ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ５ｍＭ ＡＭＢＩＣ）により精製した。純化合物を含有するフラクションを合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０１９３】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．４３−７．１９（ｍ，５Ｈ），６．０７（ｓ，１Ｈ），５．８３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），４．５８−４．５（ｍ，１Ｈ），４．４７−４．３４（ｍ，１Ｈ），４．１８−４．０５（ｍ，３Ｈ），３．７４（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ５ ＩＨ），３．３５−３．２（ｍ，２Ｈ），２．４８−２．３３（ｍ，１Ｈ），１．６６−１．３７（ｍ，４Ｈ），１．３７−１．２３（ｍ，４Ｈ），１．１（ｓ，３Ｈ），０．９５−０．８６（ｍ，６Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．４５；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５８３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９４】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７１（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．４６−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．３３−７．２１（ｍ，３Ｈ），６．０５（ｓ，１Ｈ），５．８１（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），４．５６−４．５０（ｍ，１Ｈ），４．４４−４．３４（ｍ，１Ｈ），４．１８−４．０５（ｍ，３Ｈ），３．７６（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），３．３５−３．２０（ｍ，２Ｈ），２．４６−２．３５（ｍ，１Ｈ），１．６６−１．３７（ｍ，４Ｈ），１．３７−１．２２（ｍ，４Ｈ），１．１２（ｓ，３Ｈ），０．９７−０．８６（ｍ，６Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．５２；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５８３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９５】
（実施例１０）
５’−Ｏ−［［［（１Ｓ）−２−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−（２−メチル−１−オキソプロポキシ）メチル］エチル］アミノ］フェノキシホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０１９６】
【化４２】
［（実施例３，ステップ１に記載したように製造した）２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジン及び（２Ｓ）−２−アミノ−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロピル２−メチルプロパノエート塩酸塩から出発して］実施例３，ステップ２及び３に記載した手順に従い、粗生成物を得、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ Ｃ１８，５μｍ，２１．２０×２５０ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ５ｍＭ ＡＭＢＩＣ）により精製した。純化合物を含有するフラクションを合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０１９７】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５７（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５１（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），７．３６−７．３０（ｍ，３Ｈ），７．２１−７．０４（ｍ，５Ｈ），６．９９−６．９３（ｍ，１Ｈ），６．００（ｓ，１Ｈ），５．７８（ｄ，Ｊ＝７．４７Ｈｚ，１Ｈ），４．２８−４．１０（ｍ，４Ｈ），３．９８−３．９４（ｍ，１Ｈ），３．８４−３．７７（ｍ，１Ｈ），３．６０（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），３．１−２．８９（ｍ，２Ｈ），２．６３−２．５６（ｍ，１Ｈ），１．１８（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ），１．０３（ｓ，３Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：４．１８；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ６５６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９８】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．６（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４−７．３３（ｍ，３Ｈ），７．２３−７．１８（ｍ，３Ｈ），７．１１−６．９７（ｍ，３Ｈ），６．０２（ｓ，１Ｈ），５．７１（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），４．３２−４．２４（ｍ，１Ｈ），４．１１−４．０（ｍ，４Ｈ），３．９９−３．８２（ｍ，１Ｈ），３．６８（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），３．１−２．９５（ｍ，２Ｈ），２．６１−２．５１（ｍ，１Ｈ），１．１６（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６Ｈ），１．０８（ｓ，３Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：４．４３；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ６５６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９９】
（実施例１１）
５’−Ｏ−［［［（２Ｓ）−２−（２−メチル−１−オキソプロポキシ）−１−（フェニルメチル）］エチル］アミノ］フェノキシホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０２００】
【化４３】
［（実施例３，ステップ１に記載したように製造した）２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジン及び（２Ｓ）−２−アミノ−３−フェニルプロピル２−メチルプロパノエート塩酸塩から出発して］実施例３，ステップ２及び３に記載した手順に従い、粗生成物を得、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＳｙｍｍｅｔｒｙ Ｃ１８，５μｍ，１９×３００ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ０．１％ＴＦＡ）により精製した。純化合物を含有するフラクションを合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０２０１】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ９．１８（ｓ ｂｒ，１Ｈ），８．３１（ｓ ｂｒ，１Ｈ），７．７７（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３８−７．１３（ｍ，１０Ｈ），５．９０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），５．８（ｓ，１Ｈ），５．６９（ｔ，Ｊ＝１１．３Ｈｚ，１Ｈ），４．１９−４．０（ｍ，２Ｈ），３．９９−３．９２（ｍ，１Ｈ），３．８６−３．７９（ｍ，２Ｈ），３．５７−３．５（ｍ，２Ｈ），２．８−２．６５（ｍ，２Ｈ），２．５４−２．４１（ｍ，１Ｈ），１．０５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ），１．０（ｓ，３Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ：４．４１；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ６１７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０２】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ９．１２（ｓ ｂｒ，１Ｈ），８．３１（ｓ ｂｒ，１Ｈ），７．７７（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），７．３４−７．０７（ｍ，１０Ｈ），５．９２（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），５．８３（ｓ，１Ｈ），５．７５（ｔ，Ｊ＝１１．３Ｈｚ，１Ｈ），４．２３−４．４（ｍ，２Ｈ），４．２−３．８５（ｍ，３Ｈ），３．５９−３．４７（ｍ，２Ｈ），２．８１−２．６１（ｍ，２Ｈ），２．５４−２．４２（ｍ，１Ｈ），１．０６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ），０．９９（ｓ，３Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ：４．０５；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ６１７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０３】
（実施例１２）
５’−Ｏ−［［［（２Ｓ）−２−（２−メチル−１−オキソプロポキシ）プロピル］アミノ］フェノキシホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０２０４】
【化４４】
［（実施例３，ステップ１に記載したように製造した）２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジン及び（１Ｓ）−２−アミノ−１−メチルエチル２−メチルプロパノエート塩酸塩から出発して］実施例３，ステップ２及び３に記載した手順に従い、粗生成物を得、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＸ−Ｔｅｒｒａ Ｃ１８，５μｍ，５０×１００ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ０．０５％ ＴＦＡ）により精製した。純化合物を含有するフラクションを合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０２０５】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ９．６２（ｂｓ，１Ｈ），８．８６（ｂｓ，１Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．４５−７．０９（ｍ，５Ｈ），６．０２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），５．８０（ｓ，１Ｈ），５．７１−５．５４（ｍ，１Ｈ），４．４５−４．１８（ｍ，２Ｈ），４．１２−３．９８（ｍ，１Ｈ），３．９５−３．７３（ｍ，２Ｈ），３．６６−３．５３（ｍ，１Ｈ），３．４８−３．２８（ｍ，１Ｈ），１．１０−０．９５（ｍ，１２Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：４．４９；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０６】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ９．６３（ｂｓ，１Ｈ），８．８４（ｂｓ，１Ｈ），７．９２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５５−７．１５（ｍ，５Ｈ），６．０２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），５．８２（ｓ，１Ｈ），５．７０−５．５５（ｍ，１Ｈ），４．４５−４．２０（ｍ，２Ｈ），４．１２−４．００（ｍ，１Ｈ），３．９５−３．７５（ｍ，２Ｈ），３．６６−３．５５（ｍ，１Ｈ），３．４８−３．２８（ｍ，１Ｈ），１．１０−０．９５（ｍ，１２Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：４．６７；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０７】
（実施例１３）
５’−Ｏ−［［［（２Ｒ）−２−（２−メチル−１−オキソプロポキシ）プロピル］アミノ］フェノキシホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０２０８】
【化４５】
［（実施例３，ステップ１に記載したように製造した）２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジン及び（１Ｒ）−２−アミノ−１−メチルエチル２−メチルプロパノエート塩酸塩から出発して］実施例３，ステップ２及び３に記載した手順に従い、粗生成物を得、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＸ−Ｔｅｒｒａ Ｃ１８，５μｍ，５０×１００ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ５ｍＭ ＡＭＢＩＣ）により精製した。純化合物を含有するフラクションを合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０２０９】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．２０−７０．８０（ｍ，１Ｈ），７．５０−７．０２（ｍ，５Ｈ），６．１５−５．９３（ｍ，１Ｈ），５．８３（ｍ，１Ｈ），４．５１−４．１７（ｍ，２Ｈ），４．１７−３．９７（ｍ，１Ｈ），３．９７−３．７０（ｍ，２Ｈ），３．６９−３．５２（ｍ，１Ｈ），３．４９−３．３３（ｍ，１Ｈ），１．１６−０．９３（ｍ，１２Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：４．３３；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２１０】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ７．８９（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３４−７．００（ｍ，５Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），５．８３（ｓ，１Ｈ），４．４５−４．３２（ｍ，１Ｈ），４．３２−４．１８（ｍ，１Ｈ），４．０７−３．９７（ｍ，１Ｈ），３．９２−３．７０（ｍ，２Ｈ），３．７０−３．５８（ｍ，１Ｈ），３．４８−３．３１（ｍ，１Ｈ），ＤＭＳＯに隠された１Ｈ，１．０９−０．８７（ｍ，１２Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：４．４８；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２１１】
（実施例１４〜２１）
スキーム２のステップ１及び２に記載し、実施例３のステップ１及び２に例示した手順に従って実施例１４及び１５の化合物を製造した。スキーム２に記載し、上記実施例３に例示した手順に従って実施例１６〜２１の化合物を製造した。
【０２１２】
【表２】
【０２１３】
（実施例２２）
２’−Ｃ−メチル−５’−Ｏ−［［（３Ｒ）−３−（２−メチル−１−オキソプロポキシ）−１−ピロリジニル］フェノキシホスフィニル］シチジン
【０２１４】
【化４６】
【０２１５】
アミノエチル−２，２−ジメチルプロパノエート塩酸塩の代わりにピロリジニル−３−イル−２−メチルプロパノエート塩酸塩を使用した以外は、スキーム２に記載し、実施例３に例示した手順に従って標記化合物を製造した。ＭＳ（Ｍ＋１）＝５５３。
【０２１６】
（生物学的アッセイ）
ＨＣＶ複製の阻害を測定するために使用したアッセイについて以下に記載する。
【０２１７】
Ａ．ＨＣＶ ＲＮＡ複製の阻害アッセイ：
本発明の化合物を、サブゲノムＨＣＶレプリコンを含む培養肝癌（ＨｕＨ−７）細胞中におけるＣ型肝炎ウイルスＲＮＡの複製に作用する能力について評価する。アッセイの詳細を以下に記載する。このレプリコンアッセイはＶ．Ｌｏｈｍａｎｎ，Ｆ．Ｋｏｒｎｅｒ，Ｊ−Ｏ．Ｋｏｃｈ，Ｕ．Ｈｅｒｉａｎ，Ｌ．Ｔｈｅｉｌｍａｎｎ，ａｎｄ Ｒ．Ｂａｒｔｅｎｓｃｈｌａｇｅｒ，“Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａ Ｓｕｂ−ｇｅｎｏｍｉｃ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ ＲＮＡｓ ｉｎ ａ Ｈｅｐａｔｏｍａ Ｃｅｌｌ Ｌｉｎｅ，”Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８５：１１０（１９９９）に記載されているアッセイの変法である。
【０２１８】
プロトコール：
このアッセイはインサイツリボヌクレアーゼ保護シンチレーション近接型プレートアッセイ（ＳＰＡ）である。９６ウェルＣｙｔｏｓｔａｒプレート（Ａｍｅｒｓｈａｍ）中の０．８ｍｇ／ｍＬ Ｇ４１８を添加した培地１００〜２００μＬに、細胞１０，０００〜４０，０００個を撒く。０〜１８時間の時点で１％ＤＭＳＯ中１００μＭまでの各種濃度の化合物を細胞に添加した後、２４〜９６時間培養する。細胞を固定し（２０分，１０％ホルマリン）、透過性を亢進させ（２０分，０．２５％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００／ＰＢＳ）、ＲＮＡウイルスゲノムに含まれる（プラス）鎖ＮＳ５Ｂ（又は他の遺伝子）に相補的な１本鎖３３Ｐ ＲＮＡプローブとハイブリド形成させる（一晩，５０℃）。細胞を洗浄し、ＲＮＡｓｅで処理し、洗浄し、６５℃まで加熱し、Ｔｏｐ−Ｃｏｕｎｔにてカウントする。複製の阻害を毎分カウント（ｃｐｍ）の減少として読取る。
【０２１９】
サブゲノムレプリコンを含むものを選択したヒトＨｕＨ−７肝癌細胞は、ＨＣＶ５’非翻訳領域（ＮＴＲ）、ネオマイシン選択マーカー、ＥＭＣＶ ＩＲＥＳ（内部リボソーム侵入部位）及びＨＣＶ非構造蛋白質ＮＳ３〜ＮＳ５Ｂとそれに続く３’ＮＴＲから構成される細胞質ＲＮＡを保持する。
【０２２０】
複製アッセイで試験した代表的化合物は１００マイクロモル未満のＥＣ５０を示す。例えば、実施例１〜２２の標記化合物を上記レプリコンアッセイで試験した処、下表３に示すようなＥＣ５０であることが判明した。
【０２２１】
【表３】
【０２２２】
Ｂ．細胞内代謝アッセイ：
その１
本発明の化合物がヒト肝癌細胞株に侵入して対応するヌクレオシド５’−一リン酸、二リン酸及び三リン酸に細胞内にて変換される能力についても評価することができる。
【０２２３】
本発明の化合物の細胞内代謝試験のために、ＨｕＨ−７とＨＢＩ１０Ａの２種類の細胞株を使用する。ＨｕＨ−７はヒト肝癌細胞株であり、ＨＢＩ１０ＡはＨＣＶバイシストロン性レプリコンを保持するＨｕＨ−７細胞から誘導されたクローン株を意味する。ＨｕＨ−７細胞を１０％胎仔ウシ血清を加えた完全ダルベッコ改変イーグル培地に撒き、ＨＢＩ１０Ａ細胞をＧ４１８（０．８ｍｇ／ｍＬ）を加えた同一培地に撒き、化合物添加時に細胞が８０％コンフルエントになるように６０ｍｍ培養皿当たり細胞１．５×１０６個の密度とする。トリチウム標識化合物を、細胞培養培地中、２μＭで３又は２３時間温置する。細胞を採取し、リン酸緩衝食塩水で洗浄し、カウントする。次に細胞を７０％メタノール，２０ｍＭ ＥＤＴＡ，２０ｍＭ ＥＧＴＡで抽出し、遠心する。溶解液を乾燥し、インラインβ−ＲＡＭシンチレーション検出器（ＩＮ／ＵＳ Ｓｙｓｔｅｍｓ）に接続したＷａｔｅｒｓ Ｍｉｌｌｅｎｉｕｍシステムでイオン対逆相（Ｃ−１８）ＨＰＬＣを使用して放射性標識ヌクレオチドを分析する。ＨＰＬＣ移動相は（ａ）１０ｍＭリン酸カリウム＋２ｍＭ水酸化テトラブチルアンモニウム及び（ｂ）５０％メタノール＋１０ｍＭリン酸カリウム＋２ｍＭ水酸化テトラブチルアンモニウムから構成される。保持時間を標準に比較することによりピーク同定を行う。ＨｕＨ−７又はＨＢＩ１０Ａ細胞１０６個中に検出されたヌクレオチドのピコモルとして活性を表す。
【０２２４】
その２
本発明の化合物が細胞（ヒト肝癌細胞株，肝細胞）に侵入して三リン酸に細胞内で変換される能力について評価した。本方法では各種の細胞株及び化合物を利用した。化合物を細胞と共に温置後に、サンプルを抽出し、ＨＰＬＣにより定量する。
【０２２５】
細胞は以下のプロトコールに従って作製する。
懸濁細胞：低温保存細胞については、Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｅｄｉｓｏｎ，ＮＪ，ＵＳＡ）による低温保存細胞操作プロトコールに従った。
【０２２６】
新鮮細胞作製については、Ｘｅｎｏｂｉｏｔｉｃａ ２００５，３５（１０３５−５４）；Ｇｉｕｌｉａｎｏ Ｃらに発表されているプロトコールに従った。
【０２２７】
細胞を適切な細胞密度（一般に細胞１０６個／ｍＬ；単一ドナー又は１０人のドナープール）まで肝細胞基礎培地（Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ，ＣＣ−３１９９）に再懸濁し、０．２ｍＬ／ウェルを滅菌９６ウェル丸底アッセイプレート（Ｃｏｓｔａｒ ３７８８）に移した。
【０２２８】
化合物をＤＭＳＯで１０００倍に希釈して加え、温和な回転撹拌により混合し、Ｄｕｂｎｏｆｆ Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ Ｓｈａｋｉｎｇ Ｉｎｃｕｂａｔｏｒ中カルボゲン下に３７℃で温置した。細胞懸濁液のアリコートを各時点で分取し、４℃で２０秒間遠心した。接着細胞株については、約１日前に６ウェル組織培養処理プレート中の適切な培地に細胞を撒き、３７℃／５％ＣＯ２下に温置した。播種から２４時間後に、化合物の１０００倍希釈液で細胞を処理し、適当な時間、３７℃／５％ＣＯ２下に温置した。いずれの場合も、吸引により温置培地を除去した後、細胞を冷７０％ ＭｅＯＨ，２０ｍＭ ＥＤＴＡ及び２０ｍＭ ＥＧＴＡで抽出し、遠心した。溶解液を窒素下に乾燥し、固相抽出により精製し、分析時まで−２０℃で保存した。
【０２２９】
エレクトロスプレーインターフェース（ＥＳＩ）を取付けたＡＰＩ ４０００質量分析計に接続したＡｇｉｌａｎｔ １１００ ＨＰＬＣでＺＩＣ−ＨＩＬＩＣ ＳｅＱｕａｎｔカラム（１００×２．１ｍｍ，５μｍ）を使用して乾燥溶解液を分析した。質量分析計は負イオンエレクトロスプレーモードで運転した。ＨＰＬＣ移動相は溶離液Ａ：水＋０．１％ギ酸、Ｂ：アセトニトリル＋０．１％ギ酸から構成した。保持時間を標準に比較することによりピーク同定を行った。濃度曲線の下の面積（ＡＵＣ，μＭ×ｈ）として活性を表した。
【０２３０】
代表的化合物をヒト肝細胞と共に２時間温置した処、高濃度のヌクレオシド三リン酸を形成することが判明した（表４）。
【０２３１】
【表４】
【０２３２】
本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートの細胞毒性と抗ウイルス特異性も以下のカウンタースクリーニングで評価する。
【０２３３】
Ｃ．カウンタースクリーニング：
本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートがヒトＤＮＡポリメラーゼを阻害する能力は以下のアッセイにて測定され得る。
【０２３４】
ａ．ヒトＤＮＡポリメラーゼα及びβの阻害：
反応条件：
反応容量５０μｌ。
【０２３５】
反応緩衝液成分：
２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ７．５
ウシ血清アルブミン２００μｇ／ｍＬ
１００ｍＭ ＫＣｌ
２ｍＭ β−メルカプトエタノール
１０ｍＭ ＭｇＣｌ２
１．６μＭ ｄＡ，ｄＧ，ｄＣ，ｄＴＴＰ
α−３３Ｐ−ｄＡＴＰ。
【０２３６】
酵素と鋳型：
ギャップを含む魚精子ＤＮＡ鋳型０．０５ｍｇ／ｍＬ
ＤＮＡポリメラーゼα又はβ０．０１Ｕ／μＬ。
【０２３７】
ギャップを含む魚精子ＤＮＡ鋳型の作製：
１Ｍ ＭｇＣｌ２５μＬを活性化魚精子ＤＮＡ（ＵＳＢ ７００７６）５００μＬに加える；
３７℃まで昇温し、６５Ｕ／μＬエキソヌクレアーゼＩＩＩ（ＧｉｂｃｏＢＲＬ１８０１３−０１１）３０μＬを加える；
５分間３７℃で温置する；
６５℃まで１０分間加熱することにより反応を終了する；
２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ７．５で平衡化したＢｉｏ−ｓｐｉｎ ６クロマトグラフィーカラム（Ｂｉｏ−Ｒａｄ ７３２−６００２）に５０〜１００μＬアリコートをロードする；
１，０００×ｇで４分間遠心により溶出させる；
溶出液を貯め、２６０ｎｍの吸光度を測定して濃度を決定する。
【０２３８】
ＤＮＡ鋳型は適当な容量の２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ７．５で希釈し、酵素は２ｍＭ β−メルカプトエタノール及び１００ｍＭ ＫＣｌを加えた適当な容量の２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌで希釈する。鋳型及び酵素をマイクロ遠心管又は９６ウェルプレートにピペットで添加する。夫々酵素希釈用緩衝液と試験化合物溶媒を使用して酵素を含まないブランク反応液及び試験化合物を含まない対照反応液も調製する。上記成分からなる反応緩衝液で反応を開始する。反応液を１時間３７℃で温置する。０．５Ｍ ＥＤＴＡ ２０μＬを添加することにより反応液をクエンチする。クエンチした反応液５０μＬをＷｈａｔｍａｎ ＤＥ８１フィルターディスクにスポットし、風乾する。洗浄液１ｍＬが＜１００ｃｐｍになるまでフィルターディスクを０．３Ｍギ酸アンモニウム（ｐＨ８）１５０ｍＬで反復洗浄する。ディスクを無水エタノール１５０ｍＬで２回洗浄し、無水エーテル１５０ｍＬで１回洗浄し、乾燥し、シンチレーション液５ｍＬ中にてカウントする。
【０２３９】
次式：阻害％＝［１−（試験反応液中のｃｐｍ−ブランク中のｃｐｍ）／（対照反応液中のｃｐｍ−ブランク中のｃｐｍ）］×１００に従って阻害百分率を計算する。
【０２４０】
ｂ．ヒトＤＮＡポリメラーゼγの阻害：
２０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ８），２ｍＭ β−メルカプトエタノール，５０ｍＭ ＫＣｌ，１０ｍＭ ＭｇＣｌ２，及び０．１μｇ／μＬ ＢＳＡを含有する緩衝液中に０．５ｎｇ／μＬ酵素；１０μＭ ｄＡＴＰ，ｄＧＴＰ，ｄＣＴＰ，及びＴＴＰ；２μＣｉ／反応液［α−３３Ｐ］−ｄＡＴＰ並びに０．４μｇ／μＬ活性化魚精子ＤＮＡ（ＵＳ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌから購入）を添加した反応液中にてヒトＤＮＡポリメラーゼγの阻害能を測定することができる。１時間３７℃で反応を進行させ、０．５Ｍ ＥＤＴＡを終濃度１４２ｍＭまで添加することによりクエンチする。アニオン交換フィルター結合とシンチレーションカウントにより生成物形成を定量する。５０μＭまでの化合物を試験する。
【０２４１】
次式：％阻害＝［１−（試験反応液中のｃｐｍ−ブランク中のｃｐｍ）／（対照反応液中のｃｐｍ−ブランク中のｃｐｍ）］×１００に従って阻害百分率を計算する。
【０２４２】
本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートがＨＩＶ感染性とＨＩＶ蔓延を阻害する能力を以下のアッセイで測定する。
【０２４３】
ｃ．ＨＩＶ感染性アッセイ
低バックグラウンドβ−ガラクトシダーゼ（β−ｇａｌ）発現について選択された、ＣＸＣＲ４及びＣＣＲ５の両者を発現するＨｅＬａ Ｍａｇｉ細胞の変異体を用いてアッセイを実施することができる。細胞に４８時間感染させ、組込まれたＨＩＶ−１ ＬＴＲプロモーターからのβ−ｇａｌ産生を化学発光基質（Ｇａｌａｃｔｏｌｉｇｈｔ Ｐｌｕｓ，Ｔｒｏｐｉｘ，Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）で定量する。１００μＭから出発して２倍系列希釈で阻害剤の力価を（２回ずつ）測定し、各濃度の阻害百分率を対照感染と比較計算する。
【０２４４】
ｄ．ＨＩＶ蔓延の阻害
その開示内容全体を本明細書に参照により組み込む米国特許第５，４１３，９９９号（１９９５年５月９日）及びＪ．Ｐ．Ｖａｃｃａら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，９１：４０９６−４１００（１９９４）に記載の方法により本発明の化合物がヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の蔓延を阻害する能力を測定することができる。
【０２４５】
更に、以下のアッセイに記載するようなＭＴＳ細胞アッセイにてサブゲノムＨＣＶレプリコンを含む培養肝癌（ＨｕＨ−７）細胞に対する細胞毒性について本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートをスクリーニングする。ＨｕＨ−７細胞株はＨ．Ｎａｋａｂａｙａｓｈｉら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，４２：３８５８（１９８２）に記載されている。
【０２４６】
ｅ．細胞毒性アッセイ：
懸濁培養については細胞約１．５×１０５個／ｍＬの濃度で３日間温置することにより及び接着培養については５．０×１０４個／ｍＬで３日間温置することにより、適当な培地で細胞培養液を調製することができる。細胞培養液９９μＬを９６ウェル組織培養処理プレートのウェルに移し、試験化合物を１００倍終濃度でＤＭＳＯに溶かした溶液１μＬを加える。プレートを３７℃で５％ＣＯ２下に指定時間温置する。温置時間後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ ９６ Ａｑｕｅｏｕｓ Ｏｎｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ試薬（ＭＴＳ）（Ｐｒｏｍｅｇａ）２０μＬを各ウェルに加え、プレートを３７℃で５％ＣＯ２下に更に３時間まで温置する。プレートを振盪して十分に混合し、プレートリーダーを使用して４９０ｎｍの吸光度を読取る。ＭＴＳ試薬添加の直前に既知細胞数から懸濁培養細胞の標準曲線を作成する。代謝活性細胞はＭＴＳをホルマザンに還元する。ホルマザンは４９０ｎｍにて吸収する。化合物の存在下の４９０ｎｍの吸光度と化合物を加えない細胞中の吸光度とを比較する。
【０２４７】
参考文献：Ｃｏｒｙ，Ａ．Ｈ．ら，“Ｕｓｅ ｏｆ ａｎ ａｑｕｅｏｕｓ ｓｏｌｕｂｌｅ ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ／ｆｏｒｍａｚａｎ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ｃｅｌｌ ｇｒｏｗｔｈ ａｓｓａｙｓ ｉｎ ｃｕｌｔｕｒｅ，”Ｃａｎｃｅｒ Ｃｏｍｍｕｎ．３：２０７（１９９１）。
【０２４８】
他のＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスに対する本発明の化合物の活性を測定するために以下のアッセイを使用することができる。
【０２４９】
ａ．ライノウイルスに対する化合物のインビトロ抗ウイルス活性の測定（細胞変性効果阻害アッセイ）：
アッセイ条件はＳｉｄｗｅｌｌとＨｕｆｆｍａｎの論文“Ｕｓｅ ｏｆ ｄｉｓｐｏｓａｂｌｅ ｍｉｃｒｏｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｐｌａｔｅｓ ｆｏｒ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｎｄ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｓｔｕｄｉｅｓ，”Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．２２：７９７−８０１（１９７１）に記載されている。
【０２５０】
ウイルス：
Ｓｉｄｗｅｌｌ及びＨｕｆｆｍａｎの文献に記載されているようなＫＢ細胞及び培地（０．１％ＮａＨＣＯ３，抗生物質不含）と共に２型ライノウイルス（ＲＶ−２）ＨＧＰ株を使用する。前記ウイルスは、ＡＴＣＣから入手し、軽度急性発熱性上気道疾患の成人男子の咽頭スワブに由来する。９型ライノウイルス（ＲＶ−９）２１１株及び１４型ライノウイルス（ＲＶ−１４）Ｔｏｗ株もＲｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤに所在のＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から入手する。ＲＶ−９はヒト咽頭うがい液に由来し、ＲＶ−１４は上気道疾患の若年成人の咽頭スワブに由来する。これらの両者ウイルスはヒト子宮頸部上皮癌細胞であるＨｅＬａ Ｏｈｉｏ−１細胞（Ｄｒ．Ｆｒｅｄ Ｈａｙｄｅｎ，Ｕｎｉｖ．ｏｆ ＶＡ）と併用する。５％胎仔ウシ血清（ＦＢＳ）と０．１％ＮａＨＣＯ３を添加したＭＥＭ（イーグル最少必須培地）を増殖培地として使用する。全３種のウイルス型の抗ウイルス試験培地は５％ＦＢＳ，０．１％ＮａＨＣＯ３，ゲンタマイシン５０μｇ／ｍＬ，及び１０ｍＭ ＭｇＣｌ２を添加したＭＥＭとした。
【０２５１】
本発明の化合物をアッセイするために使用した最高濃度は２０００μｇ／ｍＬである。試験化合物の約５分後にウイルスをアッセイプレートに添加した。適正な対照も試験する。アッセイプレートを加湿空気と５％ＣＯ２下に３７℃で温置する。形態変化の顕微鏡試験により対照細胞における細胞毒性を観察する。ウイルスＣＰＥデータと毒性対照データの回帰分析により、ＥＤ５０（５０％有効用量）及びＣＣ５０（５０％細胞毒性濃度）を求める。式：ＳＩ＝ＣＣ５０÷ＥＤ５０により選択性指数（ＳＩ）を計算する。
【０２５２】
ｂ．デング、バンジ及び黄熱病に対する化合物のインビトロ抗ウイルス活性の測定（ＣＰＥ阻害アッセイ）
アッセイの詳細は上記ＳｉｄｗｅｌｌとＨｕｆｆｍａｎの文献に記載されている。
【０２５３】
ウイルス：
２型デングウイルスニューギニア株を疾病対策センターから入手する。２種類のアフリカミドリザル腎細胞株を使用してウイルス（ベロ）を培養し、抗ウイルス試験（ＭＡ−１０４）を実施する。感染マウス脳から作製された黄熱病ウイルス１７Ｄ株及び南アフリカの熱病少年の血清から単離されたバンジウイルスＨ３３６株の両株をＡＴＣＣから入手する。ベロ細胞をこれらのウイルスの両者と共にアッセイに使用する。
【０２５４】
細胞及び培地：
ＭＡ−１０４細胞（ＢｉｏＷｈｉｔｔａｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｗａｌｋｅｒｓｖｉｌｌｅ，ＭＤ）及びベロ細胞（ＡＴＣＣ）は５％ＦＢＳと０．１％ＮａＨＣＯ３を添加した抗生物質不含培地１９９中にて使用する。
【０２５５】
デング、黄熱病及びバンジウイルスのアッセイ培地は２％ＦＢＳ，０．１８％ＮａＨＣＯ３及びゲンタマイシン５０μｇ／ｍＬを添加したＭＥＭとする。
【０２５６】
本発明の化合物の抗ウイルス試験をＳｉｄｗｅｌｌとＨｕｆｆｍａｎの文献に従って上記ライノウイルス抗ウイルス試験と同様に実施する。５〜６日後にこれらのウイルスの各々で十分な細胞変性効果（ＣＰＥ）読取値が得られる。
【０２５７】
ｃ．西ナイルウイルスに対する化合物のインビトロ抗ウイルス活性の測定（ＣＰＥ阻害アッセイ）
アッセイの詳細は上記Ｓｉｄｗｅｌｌ及びＨｕｆｆｍａｎの文献に記載されている。カラス脳に由来する西ナイルウイルスニューヨーク株を疾病対策センターから入手する。ベロ細胞を上記のように増殖させ、使用する。試験培地は１％ＦＢＳ，０．１％ＮａＨＣＯ３及びゲンタマイシン５０μｇ／ｍＬを添加したＭＥＭとする。
【０２５８】
本発明の化合物の抗ウイルス試験をライノウイルス活性をアッセイするために使用した方法と同様のＳｉｄｗｅｌｌとＨｕｆｆｍａｎの方法に従って実施することができる。５〜６日後に十分な細胞変性効果（ＣＰＥ）読取値が得られる。
【０２５９】
ｄ．ライノ、黄熱病、デング、バンジ及び西ナイルウイルスに対する化合物のインビトロ抗ウイルス活性の測定（ニュートラルレッド取込みアッセイ）
上記ＣＰＥ阻害アッセイの実施後に、“Ｍｉｃｒｏｔｉｔｅｒ Ａｓｓａｙ ｆｏｒ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ：Ｍｉｃｒｏｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ Ｅｆｆｅｃｔ，”Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．３１：３５−３８（１９７６）に記載されている別の細胞変性検出法を使用することができる。モデルＥＬ３０９マイクロプレートリーダー（Ｂｉｏ−Ｔｅｋ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｉｎｃ．）を使用してアッセイプレートを読取る。上記のようにＥＤ５０とＣＤ５０を計算する。
【０２６０】
（医薬製剤の実施例）
本発明の化合物の経口組成物の一特定態様として、総量５８０〜５９０ｍｇとするに十分な微粉状ラクトース及び実施例１又は実施例２の化合物５０ｍｇを配合し、サイズ０ハードゼラチンカプセルに充填することができる。
【０２６１】
以上、特定態様に関して本発明を記載及び例示したが、当業者に自明の通り、発明の精神と範囲を逸脱せずに種々の変更、変形及び置換が可能である。例えば、治療するヒトの応答はＨＣＶ感染症の重篤度により異なるので、上記のような好適用量以外の有効用量も適用可能である。同様に、観察される薬理応答は選択する特定活性化合物又は医薬キャリヤーの有無や、製剤の型及び使用する投与方法により変動する可能性があり、予想される結果のこのような変動又は相違は本発明の目的と実施に従って予測される。従って、本発明は以下の特許請求の範囲のみに限定され、特許請求の範囲は妥当な範囲で広義に解釈すべきである。
【技術分野】
【０００１】
本発明はヌクレオシドアリールホスホロアミデート、その合成及びＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ阻害剤の前駆体としてのその使用に関する。本発明の化合物はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製阻害剤の前駆体であるため、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療に有用である。これらはＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤の前駆体として、ＨＣＶ複製阻害剤の前駆体として、及びＣ型肝炎感染症の治療用として特に有用である。
【背景技術】
【０００２】
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染症は肝硬変や肝細胞癌等の慢性肝疾患につながる重要な健康上の問題であり、感染者は相当数に及び、世界人口の２〜１５％と推定される。米国疾病対策センター（Ｕ．Ｓ．Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ）によると、米国だけで４５０万人が感染していると推定される。世界保健機構（Ｗｏｒｌｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ）によると、全世界の感染者数は２億人を上回り、毎年少なくとも３〜４００万人が感染している。感染者の約２０％からはウイルスが消えるが、残りの感染者は終生ＨＣＶを保有し続ける。慢性感染者の１０〜２０％は肝臓を破壊する肝硬変又は癌を最終的に発症する。このウイルス性疾患は、汚染した血液及び血液製剤、汚染した注射針により非経口感染し又は性感染し、感染母体又はキャリヤー母体からその子孫へと垂直感染する。ＨＣＶ感染症の現行治療法は、組換えインターフェロンαの単独使用又はヌクレオシドアナログリバビリンとの併用による免疫療法に限られており、臨床効果も限られている。更に、ＨＣＶのワクチンは確立されていない。従って、慢性ＨＣＶ感染症を有効に抑制する改良型治療剤が緊急に必要とされている。ＨＣＶ感染症治療の最新技術はその開示内容全体が参照により本明細書に組み込む以下の刊行物に記載されており、これらの刊行物を参照されたい：Ｂ．Ｄｙｍｏｃｋら，“Ｎｏｖｅｌ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，”Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，１１：７９−９６（２０００）；Ｈ．Ｒｏｓｅｎら，“Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ：ｃｕｒｒｅｎｔ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ ａｎｄ ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ ｆｏｒ ｆｕｔｕｒｅ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ，”Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｔｏｄａｙ，５：３９３−３９９（１９９９）；Ｄ．Ｍｏｒａｄｐｏｕｒら，“Ｃｕｒｒｅｎｔ ａｎｄ ｅｖｏｌｖｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ，”Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．Ｈｅｐａｔｏｌ．，１１：１１８９−１２０２（１９９９）；Ｒ．Ｂａｒｔｅｎｓｃｈｌａｇｅｒ，“Ｃａｎｄｉｄａｔｅ Ｔａｒｇｅｔｓ ｆｏｒ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｔｈｅｒａｐｙ，”Ｉｎｔｅｒｖｉｒｏｌｏｇｙ，４０：３７８−３９３（１９９７）；Ｇ．Ｍ．Ｌａｕｅｒ ａｎｄ Ｂ．Ｄ．Ｗａｌｋｅｒ，“Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，”Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３４５：４１−５２（２００１）；Ｂ．Ｗ．Ｄｙｍｏｃｋ，“Ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，”Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ｄｒｕｇｓ，６：１３−４２（２００１）；及びＣ．Ｃｒａｂｂ，“Ｈａｒｄ−Ｗｏｎ Ａｄｖａｎｃｅｓ Ｓｐａｒｋ Ｅｘｃｉｔｅｍｅｎｔ ａｂｏｕｔ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ，”Ｓｃｉｅｎｃｅ：５０６−５０７（２００１）。
【０００３】
ＨＣＶ治療のアプローチとしてはウイルスセリンプロテイナーゼ（ＮＳ３プロテアーゼ）、ヘリカーゼ、及びＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ（ＮＳ５Ｂ）の阻害やワクチンの開発等の各種のアプローチが取られている。
【０００４】
ＨＣＶビリオンは、エンベロープをもつプラス鎖ＲＮＡウイルスであり、約３，０１０アミノ酸のポリプロテインをコードする約９６００塩基の単一オリゴリボヌクレオチドゲノム配列からなる。ＨＣＶ遺伝子の蛋白産物は構造蛋白質Ｃ、Ｅ１及びＥ２と、非構造蛋白質ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ及びＮＳ４Ｂ、並びにＮＳ５Ａ及びＮＳ５Ｂから構成される。非構造（ＮＳ）蛋白質はウイルス複製の触媒機構を提供すると考えられている。ＮＳ３プロテアーゼはＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼであるＮＳ５Ｂをポリプロテイン鎖から遊離させる。ＨＣＶ ＮＳ５ＢポリメラーゼはＨＣＶの複製サイクルにおいて鋳型として機能する１本鎖ウイルスＲＮＡから２本鎖ＲＮＡを合成するために必要である。従って、ＮＳ５ＢポリメラーゼはＨＣＶ複製複合体の必須成分であるとみなされる［Ｋ．Ｉｓｈｉら，“Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ ＮＳ５Ｂ Ｐｒｏｔｅｉｎ：Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｉｔｓ ＲＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ＲＮＡ Ｂｉｎｄｉｎｇ，”Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，２９：１２２７−１２３５（１９９９）及びＶ．Ｌｏｈｍａｎｎら，“Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔｉｃ Ａｎａｌｙｓｅｓ ｏｆ ＮＳ５Ｂ ＲＮＡ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ＲＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ，”Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，２４９：１０８−１１８（１９９８）参照］。ＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害は、２本鎖ＨＣＶ ＲＮＡの形成を防止するので、ＨＣＶ特異的抗ウイルス治療の開発の魅力的なアプローチとなる。
【０００５】
ＨＣＶ感染症の治療用として有望なＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤の開発については、Ｍ．Ｐ．Ｗａｌｋｅｒら，“Ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ｃａｎｄｉｄａｔｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ，”Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｒｕｇｓ．１２：１２６９−１２８０（２００３）及びＰ．Ｈｏｆｆｍａｎｎら，“Ｒｅｃｅｎｔ ｐａｔｅｎｔｓ ｏｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ（１９９９−２００２），”Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ．１３：１７０７−１７２３（２００３）に記載されている。ＨＣＶポリメラーゼに対するプリンリボヌクレオシドの活性はＡ．Ｅ．Ｅｌｄｒｕｐら．“Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−Ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｏｆ Ｐｕｒｉｎｅ Ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ ｆｏｒ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＨＣＶ ＲＮＡ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ＲＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ，”Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４７：２２８３−２２９５（２００４）により報告されている。ＨＣＶ治療用の治療アプローチとして、ＨＣＶポリメラーゼ阻害剤としての構造的に多様なヌクレオシド誘導体が引き続き必要とされている。
【０００６】
本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートはＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製、特にＨＣＶ複製の強力な阻害剤の前駆体であることが今般判明した。前記ホスホロアミデートはＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ、特にＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害剤である対応するヌクレオシド５’−三リン酸誘導体に変換されるそのヌクレオシド５’−リン酸（ヌクレオチド）誘導体にインビボ変換される。本発明のヌクレオシドホスホロアミデートはＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症、特にＨＣＶ感染症を治療するために有用である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｂ．Ｄｙｍｏｃｋら，“Ｎｏｖｅｌ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，”Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，１１：７９−９６（２０００）
【非特許文献２】Ｈ．Ｒｏｓｅｎら，“Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ：ｃｕｒｒｅｎｔ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ ａｎｄ ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ ｆｏｒ ｆｕｔｕｒｅ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ，”Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｔｏｄａｙ，５：３９３−３９９（１９９９）
【非特許文献３】Ｄ．Ｍｏｒａｄｐｏｕｒら，“Ｃｕｒｒｅｎｔ ａｎｄ ｅｖｏｌｖｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ，”Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．Ｈｅｐａｔｏｌ．，１１：１１８９−１２０２（１９９９）
【非特許文献４】Ｒ．Ｂａｒｔｅｎｓｃｈｌａｇｅｒ，“Ｃａｎｄｉｄａｔｅ Ｔａｒｇｅｔｓ ｆｏｒ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｔｈｅｒａｐｙ，”Ｉｎｔｅｒｖｉｒｏｌｏｇｙ，４０：３７８−３９３（１９９７）
【非特許文献５】Ｇ．Ｍ．Ｌａｕｅｒ ａｎｄ Ｂ．Ｄ．Ｗａｌｋｅｒ，“Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，”Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３４５：４１−５２（２００１）
【非特許文献６】Ｂ．Ｗ．Ｄｙｍｏｃｋ，“Ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，”Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ｄｒｕｇｓ，６：１３−４２（２００１）
【非特許文献７】Ｃ．Ｃｒａｂｂ，“Ｈａｒｄ−Ｗｏｎ Ａｄｖａｎｃｅｓ Ｓｐａｒｋ Ｅｘｃｉｔｅｍｅｎｔ ａｂｏｕｔ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ，”Ｓｃｉｅｎｃｅ：５０６−５０７（２００１）
【非特許文献８】Ｋ．Ｉｓｈｉら，“Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ ＮＳ５Ｂ Ｐｒｏｔｅｉｎ：Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｉｔｓ ＲＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ＲＮＡ Ｂｉｎｄｉｎｇ，”Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，２９：１２２７−１２３５（１９９９）
【非特許文献９】Ｖ．Ｌｏｈｍａｎｎら，“Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔｉｃ Ａｎａｌｙｓｅｓ ｏｆ ＮＳ５Ｂ ＲＮＡ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ＲＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ，”Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，２４９：１０８−１１８（１９９８）
【非特許文献１０】Ｍ．Ｐ．Ｗａｌｋｅｒら，“Ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ｃａｎｄｉｄａｔｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ，”Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｒｕｇｓ．１２：１２６９−１２８０（２００３）
【非特許文献１１】Ｐ．Ｈｏｆｆｍａｎｎら，“Ｒｅｃｅｎｔ ｐａｔｅｎｔｓ ｏｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ（１９９９−２００２），”Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ．１３：１７０７−１７２３（２００３）
【非特許文献１２】Ａ．Ｅ．Ｅｌｄｒｕｐら．“Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−Ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｏｆ Ｐｕｒｉｎｅ Ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ ｆｏｒ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＨＣＶ ＲＮＡ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ＲＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ，”Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４７：２２８３−２２９５（２００４）。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
従って、本発明の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ阻害剤の前駆体、特にＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤の前駆体として有用なヌクレオシドアリールホスホロアミデートを提供することである。
【０００９】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製阻害剤の前駆体、特にＣ型肝炎ウイルス複製阻害剤の前駆体として有用なヌクレオシドアリールホスホロアミデートを提供することである。
【００１０】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療、特にＨＣＶ感染症の治療に有用なヌクレオシドアリールホスホロアミデートを提供することである。
【００１１】
本発明の別の目的は医薬的に許容可能なキャリヤーと共に本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートを含有する医薬組成物を提供することである。
【００１２】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ阻害剤の前駆体、特にＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤の前駆体として使用するための本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートを含有する医薬組成物を提供することである。
【００１３】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製阻害剤の前駆体、特にＨＣＶ複製阻害剤の前駆体として使用するための本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートを含有する医薬組成物を提供することである。
【００１４】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療、特にＨＣＶ感染症の治療に使用するための本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートを含有する医薬組成物を提供することである。
【００１５】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス、特にＨＣＶに対して活性な他の物質と共に本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートを含有する医薬組成物を提供することである。
【００１６】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼの阻害方法、特にＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害方法を提供することである。
【００１７】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製の阻害方法、特にＨＣＶ複製の阻害方法を提供することである。
【００１８】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療方法、特にＨＣＶ感染症の治療方法を提供することである。
【００１９】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスに対して活性な他の物質と併用するＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療方法、特にＨＣＶに対して活性な他の物質と併用するＨＣＶ感染症の治療方法を提供することである。
【００２０】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製の阻害用及び／又はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療用医薬、特にＨＣＶ複製の阻害用及び／又はＨＣＶ感染症の治療用医薬として使用するためのヌクレオシドアリールホスホロアミデート及びその医薬組成物を提供することである。
【００２１】
本発明の別の目的はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製の阻害用及び／又はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療用医薬、特にＨＣＶ複製の阻害用及び／又はＨＣＶ感染症の治療用医薬の製造における本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデート及びその医薬組成物の使用を提供することである。
【００２２】
以上及び他の目的は以下の詳細な記載から容易に理解されよう。
【課題を解決するための手段】
【００２３】
発明の要旨
本発明は指定立体化学配置の構造式Ｉ：
【００２４】
【化１】
［式中、
Ｂは
【００２５】
【化２】
であり、上記式中、アステリスク（＊）は化合物の残余との結合点を表し；
ｎは０、１又は２であり；
Ｘは結合又はＯであり；
Ａｒはフェニル、ナフチル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、インドリル、キノリニル又はイソキノリニルであり、Ａｒは場合によりハロゲン、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、シアノ、ニトロ、アミノ、カルボキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルキルカルボニル、Ｃ１−４アルキルカルボニルオキシ及びＣ１−４アルキルオキシカルボニルから構成される群から独立して選択される１〜５個の置換基で置換されており；
Ｒ１は水素、メチル又はフルオロメチルであり；
Ｒ２はフルオロ又はＯＲ１０であり；
Ｒ３は水素、Ｃ１−１６アルキルカルボニル、Ｃ２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ１−１０アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルオキシカルボニル及び構造式：
【００２６】
【化３】
のアミノアシル残基から構成される群から選択され；
Ｒ１０は水素、メチル、Ｃ１−１６アルキルカルボニル、Ｃ２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ１−１０アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルオキシカルボニル及び構造式：
【００２７】
【化４】
のアミノアシル残基から構成される群から選択され；
あるいはＲ３とＲ１０はこれらが結合している酸素原子と一緒になって５員環状カーボネート又はアセトニドを形成し；
Ｒ４は水素、Ｃ１−６アルキル、フェニル又はベンジルであり；前記アルキルは場合によりフッ素、ヒドロキシ、メトキシ、アミノ、カルボキシ、カルバモイル、グアニジノ、メルカプト、メチルチオ、１Ｈ−イミダゾリル及び１Ｈ−インドール−３−イルから構成される群から選択される１個の置換基で置換されており；前記フェニル及びベンジルは場合によりハロゲン、ヒドロキシ及びメトキシから構成される群から独立して選択される１〜２個の置換基で置換されており；
Ｒ５は水素又はＣ１−３アルキルであり；
あるいはＲ４とＲ５はこれらが結合している炭素原子と一緒になって３〜６員脂肪族スピロ環状環系を形成し；
Ｒ６はＣ１−１６アルキル、Ｃ２−２０アルケニル、（ＣＨ２）ｎＣ３−６シクロアルキル、フェニル、ベンジル又はアダマンチルであり；前記アルキル、アルケニル、シクロアルキル及びアダマンチルは場合によりアミノ、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ及びＣ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されており；前記フェニル及びベンジルは場合によりハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、Ｃ１−４アルコキシ、トリフルオロメチル及びトリフルオロメトキシから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されており；
Ｒ７は水素、Ｃ１−５アルキル又はフェニルＣ０−２アルキルであり；
Ｒ８は水素、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アシル、ベンゾイル、Ｃ１−４アルキルオキシカルボニル、フェニルＣ０−２アルキルオキシカルボニル、Ｃ１−４アルキルアミノカルボニル、フェニルＣ０−２アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−４アルキルスルホニル又はフェニルＣ０−２アルキルスルホニルであり；
Ｒ９は水素、Ｃ１−８アルキルカルボニル又はＣ１−８アルキルオキシカルボニルであり；
Ｒ１１は水素又はＣ１−３アルキルであり；
あるいはＲ１１はＲ１３と一緒になって式：
【００２８】
【化５】
の環を形成し；
Ｒ１２は水素又はＣ１−３アルキルであり；
Ｒ１３は水素又はＣ１−３アルキルであり；
Ｒ１４は水素、Ｃ１−８アルキル又はＣ１−８アルキルカルボニルである。］の化合物又はその医薬的に許容可能な塩に関する。
【００２９】
式Ｉの化合物はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ、特にＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害剤の前駆体として有用である。これらはＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製、特にＨＣＶ複製の阻害剤の前駆体でもあり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療、特にＨＣＶ感染症の治療に有用である。
【００３０】
本発明のアリールホスホロアミデートは、これらの作用メカニズムに関して限定するものではないが、対応するヌクレオシド５’−一リン酸の前駆体として作用する。内在キナーゼ酵素は５’−一リン酸をＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼの阻害剤であるその５’−三リン酸誘導体に変換する。従って、前記アリールホスホロアミデートはヌクレオシド自体よりも効率的な標的細胞透過を実現し、代謝分解され難く、肝臓等の特定組織を標的とすることができ、その結果、治療指数を高め、抗ウイルス薬の総用量を低減できると考えられる。
【００３１】
上記化合物を単独で含有する医薬組成物又はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス、特にＨＣＶに対して活性な他の物質と共に含有する医薬組成物、加えてＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製の阻害方法及びＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療方法も本発明に含まれる。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
発明の詳細な説明
本発明は上記発明の概要の欄に記載したような構造式Ｉの化合物に関する。式Ｉの化合物はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ阻害剤の前駆体として有用である。これらはＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製阻害剤の前駆体でもあり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療に有用である。
【００３３】
本発明の第１の態様は式Ｉ−Ａ：
【００３４】
【化６】
［式中、全変項は当初に定義した通り（即ち発明の要旨の欄に定義した通り）である。］の化合物又はその医薬的に許容可能な塩である。
【００３５】
本発明の第２の態様は式Ｉ−Ｂ１：
【００３６】
【化７】
（式中、全変項は当初に定義した通りである。）の化合物又はその医薬的に許容可能な塩である。
【００３７】
本発明の第３の態様は式Ｉ−Ｂ２：
【００３８】
【化８】
（式中、全変項は当初に定義した通りである。）の化合物又はその医薬的に許容可能な塩である。
【００３９】
本発明の第４の態様は、
Ｒ３が水素、Ｃ１−１６アルキルカルボニル、Ｃ２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ１−１０アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルオキシカルボニル、及び構造式：
【００４０】
【化９】
のアミノアシル残基から構成される群から選択され；
Ｒ１０が水素、メチル、Ｃ１−１６アルキルカルボニル、Ｃ２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ１−１０アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルオキシカルボニル及び構造式：
【００４１】
【化１０】
のアミノアシル残基から構成される群から選択され；
あるいはＲ３とＲ１０がこれらが結合している酸素原子と一緒になって５員環状カーボネートを形成し；
Ｒ１１が水素又はＣ１−３アルキルであり；他の全変項が当初に定義した通りである、式Ｉ−Ａの化合物又はその医薬的に許容可能な塩である。
【００４２】
本発明の化合物の第５の態様において、Ｒ１がメチル又はフルオロメチルであり、Ｒ２がヒドロキシであり、Ｒ３が水素であり；他の全変項が当初に定義した通りである又は第１、第２、第３もしくは第４の態様に定義した通りである。この態様の１分類において、Ｒ１がメチルである。
【００４３】
本発明の化合物の第６の態様において、Ｒ１がメチル又はフルオロメチルであり、Ｒ２がフルオロであり、Ｒ３が水素であり；他の全変項は当初に定義した通りである又は第１、第２、第３もしくは第４の態様に定義した通りである。この態様の１分類において、Ｒ１がメチルである。
【００４４】
本発明の化合物の第７の態様において、Ｘが結合であり；他の全変項が当初に定義した通りであるか又は上記態様のいずれか１種に定義した通りである。
【００４５】
本発明の化合物の第８の態様において、Ａｒが場合によりハロゲン、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、シアノ、ニトロ、アミノ、カルボキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルキルカルボニル、Ｃ１−４アルキルカルボニルオキシ及びＣ１−４アルキルオキシカルボニルから構成される群から独立して選択される１〜５個の置換基で置換されたフェニルであり；他の全変項が当初に定義した通りであるか又は上記態様のいずれか１種に定義した通りである。この態様の１分類において、Ａｒが置換されていないフェニルである。
【００４６】
本発明の化合物の第９の態様において、Ａｒがインドリルであり；他の全変項が当初に定義した通りである又は上記態様のいずれか１種に定義した通りである。この態様の１分類において、Ａｒが１Ｈ−インドール−５−イルである。
【００４７】
本発明の化合物の第１０の態様において、Ｒ５、Ｒ１１及びＲ１２が各々水素であり、Ｒ４が水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、イソブチル、ｎ−ブチル、２−メチル−１−プロピル、ヒドロキシメチル、フルオロメチル、メルカプトメチル、カルボキシメチル、カルバモイルメチル、１−ヒドロキシエチル、２−カルボキシエチル、２−カルバモイルエチル、２−メチルチオエチル、４−アミノ−１−ブチル、３−アミノ−１−プロピル、３−グアニジノ−１−プロピル、１Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル、フェニル、ベンジル、４−ヒドロキシベンジル及び１Ｈ−インドール−３−イルメチルから構成される群から選択され；他の全変項が当初に定義した通りである又は上記態様のいずれか１種に定義した通りである。この態様の１分類において、Ｒ４がメチル又はベンジルである。この分類のサブ分類において、Ｒ４がメチルである。この分類の別のサブ分類において、Ｒ４がベンジルである。
【００４８】
本発明の化合物の第１１の態様において、Ｘが結合であり、Ｒ６がＣ１−８アルキル、シクロヘキシル又はシクロペンチルであり；他の全変項が当初に定義した通りである又は上記態様のいずれか１種に定義した通りである。この態様の１分類において、Ｒ６がＣ１−４アルキルである。
【００４９】
本発明の化合物の第１２の態様において、Ｘが結合であり、Ａｒがフェニルであり、Ｒ４がメチル又はベンジルであり、Ｒ６がＣ１−４アルキルであり、Ｒ５、Ｒ１１及びＲ１２が各々水素であり；他の全変項が当初に定義した通りである又は上記態様のいずれか１種に定義した通りである。この態様の１分類において、Ｒ１がメチルであり、Ｒ２がヒドロキシであり、Ｒ３が水素である。
【００５０】
本発明の第１３の態様は式ＩＩ−Ａ：
【００５１】
【化１１】
（式中、変項は当初に定義した通りである又は上記態様のいずれか１種に定義した通りである。）の化合物又はその医薬的に許容可能な塩である。
【００５２】
本発明の第１４の態様は式ＩＩ−Ｂ：
【００５３】
【化１２】
（式中、変項は当初に定義した通りである又は上記態様のいずれか１種に定義した通りである。）の化合物又はその医薬的に許容可能な塩である。
【００５４】
本発明の第１５の態様は式ＩＩＩ：
【００５５】
【化１３】
［式中、
Ｒ３はＨであり；
Ｒ１０はＨであり；
あるいはＲ３とＲ１０はこれらが結合している酸素原子と一緒になってアセトニドを形成し；
Ｒ４はＨ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３又はベンジルであり；
Ｒ６はメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）２、３−ペンチル、シクロペンチル、シクロヘプチル又はフェニルであり；
Ｒ１１はＨ又はＣＨ３であり；
Ｒ１３は水素又はＣＨ３であり；
あるいは、Ｒ４がＨであるとき、Ｒ１１とＲ１３は一緒になって式：
【００５６】
【化１４】
の環を形成する。］の化合物又はその医薬的に許容可能な塩である。
【００５７】
本発明の第１６の態様は実施例１〜２２に記載された化合物及びその医薬的に許容可能な塩から構成される群から選択される式Ｉの化合物である。１サブ態様において、該化合物は実施例１〜８に記載された化合物及びその医薬的に許容可能な塩から構成される群から選択される。
【００５８】
本発明の一態様において、本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートは、プラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ阻害剤、プラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製阻害剤の前駆体として及び／又はプラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療用として、有用である。この態様の１分類において、プラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスはフラビウイルス科ウイルス又はピコルナウイルス科ウイルスである。この分類の１サブ分類において、ピコルナウイルス科ウイルスはライノウイルス、ポリオウイルス又はＡ型肝炎ウイルスである。この分類の第２のサブ分類において、フラビウイルス科ウイルスはＣ型肝炎ウイルス、黄熱病ウイルス、デングウイルス、西ナイルウイルス、日本脳炎ウイルス、バンジ（Ｂａｎｚｉ）ウイルス及びウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）から構成される群から選択される。このサブ分類の１サブ分類において、フラビウイルス科ウイルスはＣ型肝炎ウイルスである。
【００５９】
本発明の別の側面は各処置を必要とする哺乳動物におけるＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼの阻害方法、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製の阻害方法及び／又はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症の治療方法として、治療有効量の構造式Ｉの化合物を前記哺乳動物に投与する段階を含む方法に関する。
【００６０】
本発明のこの側面の一態様において、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼはプラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼである。この態様の１分類において、プラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼはフラビウイルス科ウイルスポリメラーゼ又はピコルナウイルス科ウイルスポリメラーゼである。この分類の１サブ分類において、ピコルナウイルス科ウイルスポリメラーゼはライノウイルスポリメラーゼ、ポリオウイルスポリメラーゼ又はＡ型肝炎ウイルスポリメラーゼである。この分類の第２のサブ分類において、フラビウイルス科ウイルスポリメラーゼはＣ型肝炎ウイルスポリメラーゼ、黄熱病ウイルスポリメラーゼ、デングウイルスポリメラーゼ、西ナイルウイルスポリメラーゼ、日本脳炎ウイルスポリメラーゼ、バンジウイルスポリメラーゼ及びウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）ポリメラーゼから構成される群から選択される。このサブ分類の１サブ分類において、フラビウイルス科ウイルスポリメラーゼはＣ型肝炎ウイルスポリメラーゼである。
【００６１】
本発明のこの側面の第２の態様において、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製はプラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製である。この態様の１分類において、プラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製はフラビウイルス科ウイルス複製又はピコルナウイルス科ウイルス複製である。この分類の１サブ分類において、ピコルナウイルス科ウイルス複製はライノウイルス複製、ポリオウイルス複製又はＡ型肝炎ウイルス複製である。この分類の第２のサブ分類において、フラビウイルス科ウイルス複製はＣ型肝炎ウイルス複製，黄熱病ウイルス複製、デングウイルス複製、西ナイルウイルス複製、日本脳炎ウイルス複製、バンジウイルス複製及びウシウイルス性下痢ウイルス複製から構成される群から選択される。このサブ分類の１サブ分類において、フラビウイルス科ウイルス複製はＣ型肝炎ウイルス複製である。
【００６２】
本発明のこの側面の第３の態様において、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症はプラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ウイルス感染症である。この態様の１分類において、プラスセンス１本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症はフラビウイルス科ウイルス感染症又はピコルナウイルス科ウイルス感染症である。この分類の１サブ分類において、ピコルナウイルス科ウイルス感染症はライノウイルス感染症、ポリオウイルス感染症又はＡ型肝炎ウイルス感染症である。この分類の第２のサブ分類において、フラビウイルス科ウイルス感染症はＣ型肝炎ウイルス感染症、黄熱病ウイルス感染症、デングウイルス感染症、西ナイルウイルス感染症、日本脳炎ウイルス感染症、バンジウイルス感染症及びウシウイルス性下痢ウイルス感染症から構成される群から選択される。このサブ分類の１サブ分類において、フラビウイルス科ウイルス感染症はＣ型肝炎ウイルス感染症である。
【００６３】
本明細書全体を通して以下の用語は以下に指定する意味である。
【００６４】
アルキル基は直鎖又は分岐構造の指定長のアルキル基を意味する。このようなアルキル基の例はメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシル、イソヘキシル等である。
【００６５】
「ナフチル」なる用語は１−ナフチル（α−ナフチル）と２−ナフチル（β−ナフチル）の両者を意味する。
【００６６】
「アダマンチル」なる用語は１−アダマンチルと２−アダマンチルの両者を意味する。
【００６７】
「場合により置換されたベンジル」なる用語はフェニル部分が場合により置換された−ＣＨ２−フェニルを意味する。
【００６８】
「アルケニル」なる用語は総炭素原子数２〜２０又はこの範囲内の任意数の直鎖又は分岐鎖アルケン（例えばエテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、オレイル等）を意味する。
【００６９】
「シクロアルキル」なる用語は総炭素原子数３〜８又はこの範囲内の任意数の環状アルカン環（例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル又はシクロオクチル）を意味する。
【００７０】
「アルコキシ」なる用語は指定炭素原子数（例えばＣ１−４アルコキシ）又はこの範囲内の任意数の直鎖又は分岐鎖アルコキシド［例えばメトキシ（ＭｅＯ−）、エトキシ、イソプロポキシ等］を意味する。
【００７１】
「アルキルチオ」なる用語は指定炭素原子数（例えばＣ１−４アルキルチオ）又はこの範囲内の任意数の直鎖又は分岐鎖アルキルスルフィド［例えばメチルチオ（ＭｅＳ−）、エチルチオ、イソプロピルチオ等］を意味する。
【００７２】
「アルキルアミノ」なる用語は指定炭素原子数（例えばＣ１−４アルキルアミノ）又はこの範囲内の任意数の直鎖又は分岐鎖アルキルアミン［例えばメチルアミノ、エチルアミノ、イソプロピルアミノ、ｔ−ブチルアミノ等］を意味する。
【００７３】
「アルキルスルホニル」なる用語は指定炭素原子数（例えばＣ１−６アルキルスルホニル）又はこの範囲内の任意数の直鎖又は分岐鎖アルキルスルホン［例えばメチルスルホニル（ＭｅＳＯ２−）、エチルスルホニル、イソプロピルスルホニル等］を意味する。
【００７４】
「アルキルオキシカルボニル」なる用語は本発明の化合物に存在する指定炭素原子数（例えばＣ１−８アルキルオキシカルボニル）又はこの範囲内の任意数のカルボン酸又はカルバミン酸基の直鎖又は分岐鎖エステル［例えばメチルオキシカルボニル（ＭｅＯＣＯ−）、エチルオキシカルボニル又はブチルオキシカルボニル］を意味する。
【００７５】
「アルキルカルボニル」なる用語は指定炭素原子数（例えばＣ１−８アルキルカルボニル）又はこの範囲内の任意数の直鎖又は分岐鎖アルキルアシル基［例えばメチルオキシカルボニル（ＭｅＯＣＯ−）、エチルオキシカルボニル又はブチルオキシカルボニル］を意味する。
【００７６】
「ハロゲン」なる用語はハロゲン原子であるフッ素、塩素、臭素及びヨウ素を意味する。
【００７７】
結合の末端のアステリスク（「＊」）は化合物の残余との結合点を表す。
【００７８】
「ホスホリル」なる用語は−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２を意味する。
【００７９】
「ジホスホリル」なる用語は構造：
【００８０】
【化１５】
をもつ基を意味する。
【００８１】
「トリホスホリル」なる用語は構造：
【００８２】
【化１６】
をもつ基を意味する。
【００８３】
「５員環状カーボネート環」なる用語はＣ−２及びＣ−３ヒドロキシルをホスゲンや１，１’−カルボニルジイミダゾール等のカルボニル化剤でアシル化することによりヌクレオシドのフラノース環のＣ−２及びＣ−３位に形成される以下の環系：
【００８４】
【化１７】
を意味する。
【００８５】
「アセトニド」なる用語はヌクレオシドのフラノース環のＣ−２及びＣ−３位に形成される以下の環系：
【００８６】
【化１８】
を意味する。
【００８７】
Ｒ３とＲ１０がアミノアシル残基である態様において、式：
【００８８】
【化１９】
におけるＲ７が水素以外の置換基であるとき、アミノアシル残基は不斉中心を含み、個々のＲ及びＳ立体異性体とＲＳジアステレオ異性体混合物を含むものとする。一態様において、不斉炭素の立体配置はＳ−アミノ酸の立体配置に対応し、即ち、式：
【００８９】
【化２０】
に示すような天然α−アミノ酸立体配置に対応する。
【００９０】
「置換」なる用語は指定置換基による多重度の置換を含むものとする。複数の置換基部分を明細書又は特許請求の範囲に記載する場合には、置換化合物は明細書又は特許請求の範囲に記載する置換基部分の１種以上を独立して１個又は複数個使用して置換することができる。
【００９１】
「５’−三リン酸」なる用語は下記一般構造式ＩＶ：
【００９２】
【化２１】
（式中、Ｂ、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は上記に定義した通りである。）をもつ本発明のヌクレオシド化合物の５’−ヒドロキシル基の三リン酸エステル誘導体を意味する。この定義の所定側面において、この用語は式ＩＶ−Ａ及びＩＶ−Ｂ：
【００９３】
【化２２】
の誘導体の一方又は両方を意味する。
【００９４】
「医薬組成物」等における「組成物」なる用語は、活性成分及びキャリヤーを構成する不活性成分を含有する製剤を、加えていずれかの成分の２種類以上の配合、錯化もしくは凝集、成分の１種類以上の解離又は成分の１種類以上の他の型の反応もしくは相互作用により直接に又は間接的に得られるいずれもの製剤を包含するものとする。従って、本発明の医薬組成物は本発明の化合物と医薬的に許容可能なキャリヤーを混合することにより製造されるいずれもの組成物を包含する。
【００９５】
化合物「の投与」及び「を投与する」なる用語は必要とする個体に本発明の化合物又は本発明の化合物のプロドラッグを提供することを意味するものとする。
【００９６】
本発明の別の側面はＨＣＶ感染症を治療するために有用な１種類以上の物質と本発明の化合物の併用によるＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害方法、ＨＣＶ複製の阻害方法又はＨＣＶ感染症の治療方法に関する。ＨＣＶに対して活性なこのような物質としては限定されないが、リバビリン、レボビリン、ビラミジン、ニタゾキサニド、チモシンα１，インターフェロンβ，インターフェロンα、ペグ化インターフェロンα（ペグインターフェロンα）、インターフェロンαとリバビリンの併用剤、ペグインターフェロンαとリバビリンの併用剤、インターフェロンαとレボビリンの併用剤、及びペグインターフェロンαとレボビリンの併用剤が挙げられる。インターフェロンαとしては限定されないが、組換えインターフェロンα２ａ（例えばＨｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅ，Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪから市販されているＲｏｆｅｒｏｎインターフェロン）、ペグ化インターフェロンα２ａ（Ｐｅｇａｓｙｓ（登録商標））、インターフェロンα２ｂ（例えばＳｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐ．，Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪから市販されているＩｎｔｒｏｎ−Ａインターフェロン）、ペグ化インターフェロンα２ｂ（ＰｅｇＩｎｔｒｏｎ（登録商標））、組換えコンセンサスインターフェロン（例えばインターフェロンαｃｏｎ−１）、及び精製インターフェロンα製剤が挙げられる。Ａｍｇｅｎ社からも商品名Ｉｎｆｅｒｇｅｎ（登録商標）として組換えコンセンサスインターフェロンが市販されている。レボビリンはリバビリンのＬエナンチオマーであり、リバビリンと類似の免疫調節活性を示している。ビラミジンはＷＯ０１／６０３７９（譲受人ＩＣＮ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）に開示されているリバビリンの類似体である。本発明のこの方法によると、併用剤の個々の成分を治療期間中の異なる時点で別々に投与してもよいし、分割又は単独併用剤として同時に投与してもよい。従って、本発明はこのような同時又は交互投与の全レジメンを含むものとし、「投与する」なる用語は相応に解釈すべきである。当然のことながら、ＨＣＶ感染症の治療に有用な他の物質と本発明の化合物の併用の範囲は原則として任意のＨＣＶ感染症治療用医薬組成物との任意の併用を含む。本発明の化合物又はその医薬的に許容可能な塩をＨＣＶに対して活性な第２の治療剤と併用する場合には、各化合物の用量は化合物を単独で使用する場合の用量と同一でもよいし、異なる量でもよい。
【００９７】
ＨＣＶ感染症の治療には、ＨＣＶ ＮＳ３セリンプロテアーゼの阻害剤である物質と本発明の化合物を併用投与してもよい。ＨＣＶ ＮＳ３セリンプロテアーゼは必須ウイルス酵素であり、ＨＣＶ複製阻害の優れたターゲットであると記載されている。ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼ阻害剤の基質型及び非基質型両者の阻害剤はＷＯ９８／２２４９６、ＷＯ９８／４６６３０、ＷＯ９９／０７７３３、ＷＯ９９／０７７３４、ＷＯ９９／３８８８８、ＷＯ９９／５０２３０、ＷＯ９９／６４４４２、ＷＯ００／０９５４３、ＷＯ００／５９９２９、ＧＢ２３３７２６２、ＷＯ０２／１８３６９、ＷＯ０２／０８２４４、ＷＯ０２／４８１１６、ＷＯ０２／４８１７２、ＷＯ０５／０３７２１４及び米国特許第６，３２３，１８０号に開示されている。ＨＣＶ複製阻害剤の開発とＨＣＶ感染症治療のターゲットとしてのＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼはＢ．Ｗ．Ｄｙｍｏｃｋ，“Ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，”Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ｄｒｕｇｓ，６：１３−４２（２００１）に記載されている。本発明の化合物と併用可能な特定ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼ阻害剤としてはＢＩＬＮ２０６１、ＶＸ−９５０、ＳＣＨ６、ＳＣＨ７及びＳＣＨ−５０３０３４が挙げられる。
【００９８】
リバビリン、レボビリン及びビラミジンは、細胞内酵素イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ（ＩＭＰＤＨ）の阻害を介してグアニンヌクレオチドの細胞内プールを調節することにより、その抗ＨＣＶ作用を発揮すると思われる。ＩＭＰＤＨは新規グアニンヌクレオチド生合成における生合成経路の律速酵素である。リバビリンは容易に細胞内リン酸化され、一リン酸誘導体はＩＭＰＤＨの阻害剤である。従って、ＩＭＰＤＨの阻害はＨＣＶ複製阻害剤の発見に有用な別のターゲットである。従って、本発明の化合物はＷＯ９７／４１２１１及び０１／００６２２（譲受人Ｖｅｒｔｅｘ）に開示されているＶＸ−４９７等のＩＭＰＤＨ阻害剤；ＷＯ００／２５７８０（譲受人Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）に開示されているような別のＩＭＰＤＨ阻害剤；又はミコフェノール酸モフェチル［Ａ．Ｃ．Ａｌｌｉｓｏｎ ａｎｄ Ｅ．Ｍ．Ｅｕｇｕｉ，Ａｇｅｎｔｓ Ａｃｔｉｏｎ，４４（Ｓｕｐｐｌ．）：１６５（１９９３）参照］と併用投与してもよい。
【００９９】
ＨＣＶ感染症の治療には、抗ウイルス剤アマンタジン（１−アミノアダマンタン）と本発明の化合物を併用投与してもよい［この薬剤の包括的記載についてはＪ．Ｋｉｒｓｃｈｂａｕｍ，Ａｎａｌ．Ｐｒｏｆｉｌｅｓ Ｄｒｕｇ Ｓｕｂｓ．１２：１−３６（１９８３）参照］。
【０１００】
ＨＣＶ感染症の治療には、各々その開示内容全体が本明細書に組み込まれるＲ．Ｅ．Ｈａｒｒｙ−Ｏ’ｋｕｒｕら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，６２：１７５４−１７５９（１９９７）；Ｍ．Ｓ．Ｗｏｌｆｅら，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．，３６：７６１１−７６１４（１９９５）；米国特許第３，４８０，６１３号（１９６９年１１月２５日）；米国特許第６，７７７，３９５号（２００４年８月１７日）；米国特許第６，９１４，０５４号（２００５年７月５日）；ＷＯ０１／９０１２１（２００１年１１月２９日）；ＷＯ０１／９２２８２（２００１年１２月６日）；ＷＯ０２／３２９２０（２００２年４月２５日）；ＷＯ０２／０５７２８７（２００２年７月２５日）；ＷＯ０２／０５７４２５（２００２年７月２５日）；ＷＯ０４／００２４２２（２００４年１月８日）；ＷＯ０４／００２９９９（２００４年１月８日）；ＷＯ０４／００３０００（２００４年１月８日）；ＷＯ０４／００２４２２（２００４年１月８日）；ＵＳ２００５／０１０７３１２；ＵＳ２００５／００９０４６３；ＵＳ２００４／０１４７４６４；及びＵＳ２００４／００６３６５８に開示されている抗ウイルス２’−Ｃ−分岐型リボヌクレオシドと本発明の化合物を併用してもよい。このような２’−Ｃ−分岐型リボヌクレオシドとしては限定されないが、２’−Ｃ−メチルシチジン、２’−フルオロ−２’−Ｃ−メチルシチジン、２’−Ｃ−メチルウリジン、２’−Ｃ−メチルアデノシン、２’−Ｃ−メチルグアノシン及び９−（２−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−２，６−ジアミノプリン；フラノースＣ−２’、Ｃ−３’及びＣ−５’ヒドロキシルの対応するアミノ酸エステル（例えば３’−Ｏ−（Ｌ−バリル）−２’−Ｃ−メチルシチジン二塩酸塩、別称バロピシタビン二塩酸塩ないしＮＭ−２８３及び３’−Ｏ−（Ｌ−バリル）−２’−フルオロ−２’−Ｃ−メチルシチジン）、並びにその５’リン酸誘導体の場合により置換された対応する環状１，３−プロパンジオールエステルが挙げられる。
【０１０１】
ＨＣＶ感染症の治療に、米国特許第６，８６４，２４４号（２００５年３月８日）；ＷＯ０２／５１４２５（２００２年７月４日），譲受人Ｍｉｔｓｕｂｉｓｈｉ Ｐｈａｒｍａ Ｃｏｒｐ．；ＷＯ０１／７９２４６、ＷＯ０２／３２９２０及びＷＯ０２／４８１６５（２００２年６月２０日），譲受人Ｐｈａｒｍａｓｓｅｔ，Ｌｔｄ．；ＷＯ０１／６８６６３（２００１年９月２０日），譲受人ＩＣＮ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ；ＷＯ９９／４３６９１（１９９９年９月２日）；ＷＯ０２／１８４０４（２００２年３月７日），譲受人Ｈｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅ；ＵＳ２００２／００１９３６３（２００２年２月１４日）；ＷＯ０２／１００４１５（２００２年１２月１９日）；ＷＯ０３／０２６５８９（２００３年４月３日）；ＷＯ０３／０２６６７５（２００３年４月３日）；ＷＯ０３／０９３２９０（２００３年１１月１３日）：ＵＳ２００３／０２３６２１６（２００３年１２月２５日）；ＵＳ２００４／０００６００７（２００４年１月８日）；ＷＯ０４／０１１４７８（２００４年２月５日）；ＷＯ０４／０１３３００（２００４年２月１２日）；ＵＳ２００４／００６３６５８（２００４年４月１日）；並びにＷＯ０４／０２８４８１（２００４年４月８日）に開示されているもの等の抗ＨＣＶ特性をもつ他のヌクレオシドと本発明の化合物を併用してもよい。
【０１０２】
一態様において、本発明のヌクレオシド誘導体と併用可能なヌクレオシドＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤は以下の化合物から選択される：４’−アジドシチジン；４−アミノ−７−（２−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン；４−アミノ−７−（２−Ｃ−ヒドロキシメチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン；４−アミノ−７−（２−Ｃ−フルオロメチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン；４−アミノ−５−フルオロ−７−（２−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン；２−アミノ−７−（２−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン；４−アミノ−７−（２−Ｃ，２−Ｏ−ジメチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン；並びにその医薬的に許容可能な塩及びプロドラッグ。
【０１０３】
ＨＣＶ感染症の治療には、各々その開示内容全体が本明細書に参照により組み込まれるＷＯ０１／７７０９１（２００１年１０月１８日）、譲受人Ｔｕｌａｒｉｋ，Ｉｎｃ．；ＷＯ０１／４７８８３（２００１年７月５日）、譲受人Ｊａｐａｎ Ｔｏｂａｃｃｏ，Ｉｎｃ．；ＷＯ０２／０４４２５（２００２年１月１７日）、譲受人Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ；ＷＯ０２／０６２４６（２００２年１月２４日）、譲受人Ｉｓｔｉｔｕｔｏ ｄｉ Ｒｉｃｅｒｃｈｅ ｄｉ Ｂｉｏｌｏｇｉａ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｅ Ｐ．Ａｎｇｅｌｅｔｔｉ Ｓ．Ｐ．Ａ．；ＷＯ０２／２０４９７（２００２年３月３日）；ＷＯ２００５／０１６９２７（特にＪＴＫ００３）、譲受人Ｊａｐａｎ Ｔｏｂａｃｃｏ，Ｉｎｃ．に開示されているもの；及びＨＣＶ−７９６（Ｖｉｒｏｐｈａｒｍａ Ｉｎｃ．）等のＨＣＶポリメラーゼの非ヌクレオシド阻害剤と本発明の化合物を併用してもよい。
【０１０４】
一態様において、本発明のヌクレオシド誘導体と併用可能な非ヌクレオシドＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤は以下の化合物から選択される：１４−シクロヘキシル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−（２−モルホリン−４−イルエチル）−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−３−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−３−メトキシ−６−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；（｛［（１４−シクロヘキシル−３−メトキシ−６−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−イル）カルボニル］アミノ｝スルホニル）酢酸メチル；（｛［（１４−シクロヘキシル−３−メトキシ−６−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−イル）カルボニル］アミノ｝スルホニル）酢酸；１４−シクロヘキシル−Ｎ−［（ジメチルアミノ）スルホニル］−３−メトキシ−６−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボキサミド；３−クロロ−１４−シクロヘキシル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；Ｎ’−（１１−カルボキシ−１４−シクロヘキシル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−インドロ［１，２−ｅ］［１，５］ベンゾキサゾシン−７−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルエタン−１，２−ジアミニウムビス（トリフルオロアセテート）；１４−シクロヘキシル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−インドロ［１，２−ｅ］［１，５］ベンゾキサゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−メチル−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−３−メトキシ−６−メチル−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−３−メトキシ−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−７−オキソ−６−（２−ピペリジン−１−イルエチル）−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−（２−モルホリン−４−イルエチル）−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−［２−（ジエチルアミノ）エチル］−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−（１−メチルピペリジン−４−イル）−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−Ｎ−［（ジメチルアミノ）スルホニル］−７−オキソ−６−（２−ピペリジン−１−イルエチル）−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボキサミド；１４−シクロヘキシル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−Ｎ−［（ジメチルアミノ）スルホニル］−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボキサミド；１４−シクロペンチル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；６−アリル−１４−シクロヘキシル−３−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロペンチル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１４−シクロヘキシル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−５，６，７，８−テトラヒドロインドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾシン−１１−カルボン酸；１３−シクロヘキシル−５−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロフロ［３’，２’：６，７］［１，４］ジアゾシノ［１，８−α］インドール−１０−カルボン酸；１５−シクロヘキシル−６−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−７−オキソ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，１−ａ］［２，６］ベンゾジアゾニン−１２−カルボン酸；１５−シクロヘキシル−８−オキソ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，１−ａ］［２，５］ベンゾジアゾニン−１２−カルボン酸；１３−シクロヘキシル−６−オキソ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［１，２−ｄ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０−カルボン酸；及びその医薬的に許容可能な塩。
【０１０５】
「医薬的に許容可能」とはキャリヤー、希釈剤又は賦形剤が製剤の他の成分と適合可能でなければならず及びそのレシピエントに有害であってはならないことを意味する。
【０１０６】
医薬的に許容可能なキャリヤーと共に本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートを含有する医薬組成物も本発明に含まれる。本発明の別の例は上記化合物のいずれかと医薬的に許容可能なキャリヤーを配合することにより製造される医薬組成物である。本発明の別の例は上記化合物のいずれかと医薬的に許容可能なキャリヤーを配合する段階を含む医薬組成物の製造方法である。
【０１０７】
ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ、特にＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼを阻害するために有用な医薬組成物として、有効量の本発明の化合物及び医薬的に許容可能なキャリヤーを含有する組成物も本発明に含まれる。ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症、特にＨＣＶ感染症の治療に有用な医薬組成物並びにＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼ、特にＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害方法及びＲＮＡ依存性ウイルス複製、特にＨＣＶ複製の治療方法も本発明に含まれる。更に、本発明はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス、特にＨＣＶに対して活性な治療有効量の別の物質と共に治療有効量の本発明の化合物を含有する医薬組成物にも関する。ＨＣＶに対して活性な物質としては限定されないが、リバビリン、レボビリン、ビラミジン、チモシンα１、ＨＣＶ ＮＳ３セリンプロテアーゼの阻害剤、インターフェロンα、ペグ化インターフェロンα（ペグインターフェロンα）、インターフェロンαとリバビリンの併用剤、ペグインターフェロンαとリバビリンの併用剤、インターフェロンαとレボビリンの併用剤、及びペグインターフェロンαとレボビリンの併用剤が挙げられる。インターフェロンαとしては限定されないが、組換えインターフェロンα２ａ（例えばＨｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅ，Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪから市販されているＲｏｆｅｒｏｎインターフェロン）、インターフェロンα２ｂ（例えばＳｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐ．，Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪから市販されているＩｎｔｒｏｎ−Ａインターフェロン）、コンセンサスインターフェロン及び精製インターフェロンα製剤が挙げられる。リバビリンとＨＣＶに対するその活性については、Ｊ．Ｏ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ ａｎｄ Ｓ．Ａ．Ｒａｙｂｕｃｋ，“Ｉｎｏｓｉｎｅ Ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ Ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ：Ｃｏｎｓｉｄｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｋｉｎｅｔｉｃｓ，ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ，”Ａｎｎ．Ｒｅｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，３５：２０１−２１０（２０００）参照。
【０１０８】
本発明の別の側面はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製、特にＨＣＶ複製の阻害用医薬、及び／又はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症、特にＨＣＶ感染症の治療用医薬の製造におけるヌクレオシドアリールホスホロアミデート及びその医薬組成物の使用を提供する。本発明の更に別の側面はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製、特にＨＣＶ複製の阻害用医薬、及び／又はＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染症、特にＨＣＶ感染症の治療用医薬として使用するためのヌクレオシドアリールホスホロアミデート及びその医薬組成物を提供する。
【０１０９】
本発明の医薬組成物は構造式Ｉの化合物又はその医薬的に許容可能な塩を活性成分として含み、更に医薬的に許容可能なキャリヤーと場合により他の治療成分を含むことができる。
【０１１０】
前記組成物は、経口、直腸、局所、非経口（皮下、筋肉内及び静脈内を含む）、眼球（眼科薬）、肺（鼻腔又は口腔吸入）、又は鼻腔内投与に適した組成物が挙げられるが、いずれかの所定の症例に最適な経路は治療する病態の種類及び重篤度と活性成分の種類によって異なる。組成物は、単位用量形態にすると簡便であり、製薬分野で周知のいずれかの方法により製造することができる。
【０１１１】
実際の使用において、構造式Ｉの化合物を活性成分として慣用医薬配合技術により医薬キャリヤーと混和することができる。キャリヤーは例えば経口又は非経口（静脈内を含む）等の投与に所望される製剤形態に応じて多種多様の形態をとることができる。経口剤形用組成物を製造するには、通常の医薬媒体の任意のものを使用することができ、例えば、懸濁液剤、エリキシル剤及び溶液剤等の経口液体製剤の場合には、水、グリコール、油類、アルコール類、香味剤、防腐剤、着色剤等を使用することができ；あるいは、例えば散剤、ハード及びソフトカプセル剤並びに錠剤等の経口固体製剤の場合には、澱粉、糖類、微結晶セルロース、希釈剤、顆粒化剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤等のキャリヤーを使用することができ、固体経口製剤のほうが液体製剤よりも好ましい。
【０１１２】
投与し易いという理由から、錠剤とカプセル剤が最も有利な経口用量単位形態であり、その場合には当然固体医薬キャリヤーが使用される。所望により、標準水性又は非水性技術により錠剤にコーティングしてもよい。このような組成物及び製剤は少なくとも０．１％の活性成分を含有すべきである。これらの組成物中の活性化合物の百分率は当然のことながら変動させることができ、用量単位の重量の約２％〜約６０％にすると適切である。このような治療に有用な組成物中の活性化合物の量は有効用量が得られるように選択される。活性化合物は例えば滴剤やスプレー等として鼻腔内投与することもできる。
【０１１３】
錠剤、ピル、カプセル等には更に結合剤（例えばトラガカントガム、アラビアガム、コーンスターチ又はゼラチン）、賦形剤（例えばリン酸２カルシウム）、崩壊剤（例えばコーンスターチ、ジャガイモ澱粉、アルギン酸）、滑沢剤（例えばステアリン酸マグネシウム）、及び甘味剤（例えばスクロース、ラクトース又はサッカリン）を添加してもよい。用量単位形態がカプセルである場合には、上記種の材料に加えて脂肪油等の液体キャリヤーを添加してもよい。
【０１１４】
コーティングとして又は用量単位の物理的形状を変えるために他の各種材料を使用してもよい。例えば、錠剤はシェラック、糖又は両者でコーティングしてもよい。シロップ又はエリキシル剤には活性成分以外に、甘味剤としてスクロース、防腐剤としてメチル及びプロピルパラベン、色素並びにフレーバー（例えばチェリー又はオレンジフレーバー）を添加してもよい。
【０１１５】
構造式Ｉの化合物は非経口投与してもよい。ヒドロキシプロピルセルロース等の界面活性剤と適切に混合した水中でこれらの活性化合物の溶液又は懸濁液を製造することができる。グリセロール、液体ポリエチレングリコール及びその油中混合物中で分散液を製造することもできる。通常の保存及び使用条件では、微生物の増殖を防ぐためにこれらの製剤に防腐剤を添加する。
【０１１６】
注射用に適した剤形としては滅菌水溶液又は分散液と、注射用滅菌水溶液又は分散液の即席調製用滅菌粉末が挙げられる。いずれの場合も、剤形は無菌でなければならず、容易に注射針を通過できる程度まで流動性でなければならない。剤形は製造及び保存条件下で安定でなければならず、細菌や真菌等の微生物の汚染作用から保護しなれけばならない。キャリヤーは例えば、水、エタノール、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコール及び液体ポリエチレングリコール）、適切なこれらの混合物及び植物油を含む溶媒又は分散媒体とすることができる。
【０１１７】
哺乳動物、特にヒトに有効用量の本発明の化合物を提供するのに適したいずれの投与経路をも利用することができる。例えば、経口、直腸、局所、非経口、眼球、肺、鼻腔等の経路を利用できる。剤形としては錠剤、トローチ、分散液、懸濁液、溶液、カプセル、クリーム、軟膏、エアゾール等が挙げられる。構造式Ｉの化合物は経口投与することが好ましい。
【０１１８】
ヒトに経口投与する場合、用量範囲は、分割投与にて０．０１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重である。一態様において、この用量範囲は、分割投与にて０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重である。別の態様において、この用量範囲は、分割投与にて０．５〜２０ｍｇ／ｋｇ体重である。経口投与では、治療する患者の症状に用量を合わせるように活性成分１．０〜１０００ｍｇ、特に活性成分１、５、１０、１５、２０、２５、５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、４００、５００、６００、７５０、８００、９００及び１０００ｍｇを含有する錠剤又はカプセルとして組成物を提供することが好ましい。
【０１１９】
使用する活性成分の有効用量は、使用する特定化合物、治療方法、治療する病態及び治療する病態の重篤度により変わり得る。このような用量は当業者が容易に確認することができる。最適治療応答が得られるようにこの用量レジメンを調節することができる。
【０１２０】
本発明の化合物は１個以上の不斉中心を含み、従って、ラセミ化合物及びラセミ混合物、単一エナンチオマー、ジアステレオ異性体混合物及び個々のジアステレオ異性体として存在することができる。Ｒ５が水素であり、構造式Ｉにおいてリン原子に結合したアミノアシル残基におけるＲ４が式：
【０１２１】
【化２３】
中、水素以外の置換基であるとき、このアミノ酸残基は不斉中心を含み、個々のＲ及びＳ立体異性体とＲＳ立体異性体混合物を含むものとする。一態様において、不斉炭素の立体配置はＳ−アミノ酸の立体配置に対応し、即ち、式：
【０１２２】
【化２４】
に示すような天然α−アミノ酸立体配置に対応する。
【０１２３】
構造式Ｉの化合物における四置換リンは別の不斉中心を構成し、本発明の化合物はこのリン原子に両方の立体化学配置を含むものとする。
【０１２４】
本発明は下記構造式：
【０１２５】
【化２５】
に示すような５員フラノース環のβ−Ｄ立体化学配置をもつヌクレオシドアリールホスホロアミデート、即ち５員フラノース環のＣ−１及びＣ−４位の置換基がβ立体化学配置（太線で示す「上向き」方向）をもつヌクレオシドアリールホスホロアミデートを含むものとする。
【０１２６】
本明細書に記載する化合物にはオレフィン二重結合を含むものもあり、特に指定しない限り、Ｅ及びＺ幾何異性体を含むものとする。
【０１２７】
本明細書に記載する化合物にはケト−エノール互変異性体等の互変異性体として存在するものもある。個々の互変異性体とその混合物も構造式Ｉの化合物に含まれる。本発明の化合物に含まれるケト−エノール互変異性体の例を以下に示す。
【０１２８】
【化２６】
【０１２９】
構造式Ｉの化合物は例えば適切な溶媒（例えばメタノール又は酢酸エチル又はその混合物）からの分別結晶や、光学活性固定相を使用するキラルクロマトグラフィーによりその個々のジアステレオ異性体に分離することができる。
【０１３０】
あるいは、光学的に純粋な出発材料又は既知配置の試薬を使用して立体特異的合成により構造式Ｉの化合物のいずれの立体異性体も得ることもできる。
【０１３１】
本発明の化合物は医薬的に許容可能な塩として投与することができる。「医薬的に許容可能な塩」なる用語は無機又は有機塩基と無機又は有機酸を含む医薬的に許容可能な非毒性塩基又は酸から製造される塩を意味する。「医薬的に許容可能な塩」なる用語に含まれる塩基性化合物の塩とは遊離塩基を適切な有機又は無機酸と反応させることにより一般に製造される本発明の化合物の非毒性塩を意味する。本発明の塩基性化合物の代表的な塩として、限定されないが、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、硼酸塩、臭化物、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストル酸塩、エシル酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチル臭化物、メチル硝酸塩、メチル硫酸塩、粘液酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミンアンモニウム塩、オレイン酸塩、蓚酸塩、パモ酸塩（エンボン酸塩）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、硫酸塩、塩基性酢酸塩、琥珀酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、トリエチオジド及び吉草酸塩が挙げられる。更に、本発明の化合物が酸性部分をもつ場合には、適切なその医薬的に許容可能な塩として、限定されないが、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、三価鉄、二価鉄、リチウム、マグネシウム、三価マンガン、二価マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛等の無機塩基から誘導される塩が挙げられる。アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウム及びナトリウム塩が特に好ましい。医薬的に許容可能な非毒性有機塩基から誘導される塩として、第一、第二、及び第三アミン、環状アミン、並びに塩基性イオン交換樹脂（例えばアルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミン等）の塩が挙げられる。
【０１３２】
更に、本発明の化合物にカルボン酸（−ＣＯＯＨ）又はヒドロキシル基が存在する場合には、カルボン酸誘導体の医薬的に許容可能なプロドラッグエステル（例えばメチル、エチル又はピバロイルオキシメチルエステル）又はリボースＣ−２’、Ｃ−３’及びＣ−５’ヒドロキシルのプロドラッグアシル誘導体（例えばＯ−アセチル、Ｏ−ピバロイル、Ｏ−ベンゾイル及びＯ−アミノアシル）を使用することができる。徐放又はプロドラッグ製剤として使用するように生体利用性、組織分布、溶解度及び加水分解特性を改変するための、当分野で公知のエステル及びアシル基が含まれる。予想される誘導体は必要な化合物に容易にインビボ変換可能である。従って、本発明の治療方法において、「投与する」及び「投与」なる用語は具体的に開示する化合物又は具体的に開示しないとしても、ヒト患者を含む哺乳動物に投与後に特定化合物にインビボ変換する化合物にて指定ウイルス感染症を治療することを意味する。適切なプロドラッグ誘導体の従来の選択及び製造法は例えばその開示内容全体を本明細書に参照により組み込む“Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，”Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ編，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８５に記載されている。
【０１３３】
本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートの製造
Ｃ．Ｐｉｅｒｒａら，Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ，Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ ａｎｄ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ，２４：７６７（２００５）又はＪ．Ａ．Ｐｉｃｃｉｒｉｌｌｉら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，６４：７４７（１９９９）により文献に記載されているように２’−Ｃ−メチルシチジンを製造した。２’−デオキシ−２’−フルオロ−２’−Ｃ−メチルシチジンはＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４８：５５０４−５５０８（２００５）に記載されているように製造する。リン酸化反応用のアリールホスホロクロリデートはその開示内容全体を本明細書に参照により組み込む米国特許第６，４５５，５１３号に記載の方法に従って製造した。本発明のアリールホスホロアミデートを生成するためのリン酸化反応は米国特許第６，４５５，５１３号とＣ．ＭｃＧｕｉｇａｎら．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，３６：１０４８（１９９３）に記載の方法に従って実施した。例えば、フェノール又は１−ナフトールをオキシ塩化リンと反応させた後、各種アミノ酸塩と連結させてフェノキシ又は１−ナフチルオキシホスホロクロリデートを得、一般にフラッシュクロマトグラフィーにより精製した後、ｔ−ブチルマグネシウムクロリド等の適切な塩基の存在下でヌクレオシドと連結させた（Ｍ．Ｕｃｈｉｙａｍａら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５８：３７３（１９９３）及びスキーム１参照）。
【０１３４】
一般手順：
すべての溶媒は市販品とし、それ以上精製せずに使用した。反応はオーブン乾燥（１１０℃）したガラス容器で窒素雰囲気下に実施した。有機抽出相を硫酸ナトリウム（Ｎａ２ＳＯ４）で乾燥し、（乾燥剤の濾過後に）ロータリーエバポレーターを減圧下に運転して濃縮した。フラッシュクロマトグラフィーは公開手順（Ｗ．Ｃ．Ｓｔｉｌｌら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，４３：２９２３（１９７８））に従ってシリカゲル又はプレパックカラムを利用する市販フラッシュクロマトグラフィーシステム（Ｂｉｏｔａｇｅ ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｊｏｎｅｓ Ｆｌａｓｈｍａｓｔｅｒ ＩＩ）にて実施した。
【０１３５】
試薬は通常通りに商業的供給業者から直接入手（及び供給状態で使用）する、または、科学文献に報告されている又は当業者に公知である日常的合成段階を使用して容易に製造可能である。
【０１３６】
１Ｈ及び３１Ｐ ＮＭＲスペクトルはＢｒｕｋｅｒ ＡＭシリーズ分光計を周波数３００〜６００ＭＨｚ（報告値）における運転にて記録された。交換不能なプロトン（及び検出される場合には交換可能なプロトン）に対応するシグナルの化学シフト（δ）をテトラメチルシランに対する百万分率（ｐｐｍ）で記録し、残留溶媒ピークを基準として使用して測定する。シグナルは多重度（ｓ，一重線；ｄ，二重線；ｔ，三重線；ｑ，四重線；ｍ，多重線；ｂ，広幅，及びその組み合わせ）；ヘルツ（Ｈｚ）で表したカップリング定数；プロトン数の順に表示する。質量分析（ＭＳ）データをＰｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＡＰＩ １００又はＷａｔｅｒｓ ＭｉｃｒｏＭａｓｓ ＺＱを負（ＥＳ−）又は正（ＥＳ＋）イオン化モードにて運転して取得し、親イオンのみの質量対電荷（ｍ／ｚ）比として結果を報告する。分取規模のＨＰＬＣ分離は２４８７デュアル吸光度検出器を取付けたＷａｔｅｒｓ ２５２５ポンプ、ＵＶ１０００吸収モジュールを取付けたＴＳＰ Ｓｐｅｃｔｒａ ｓｙｓｔｅｍ Ｐ４０００、又は２５２５ポンプモジュールとＭｉｃｒｏｍａｓｓ ＺＭＤ検出器と２５２５採取モジュールを組込んだ自動質量トリガー型Ｗａｔｅｒｓ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓシステムにて実施した。１０〜４０ｍＬ／分の流速を使用していずれも０．１％トリフルオロ酢酸又はギ酸を加えた水とＭｅＣＮの直線勾配で化合物を溶出させた。Ｓｙｍｍｅｔｒｙ Ｃ１８カラム（７μＭ，１９×３００ｍｍ）を固定相として使用した。
【０１３７】
実施例、スキーム及び表では以下の略語を使用する：
ａｑ．：水溶液；Ａｒ：アリール；ａｔｍ：気圧；ＣＣｌ４：四塩化炭素；ＤＣＭ：ジクロロメタン；ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド；ｅｑ．：当量；Ｅｔ３Ｎ：トリエチルアミン；ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル；Ｅｔ２Ｏ：ジエチルエーテル；ｈ：時間；Ｍｅ：メチル；ＭｅＣＮ：アセトニトリル；ＭｅＯＨ：メタノール；ｍｉｎ：分；ＭＳ：質量スペクトル；Ｎ，Ｎ−ＤＭＡ：Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド；ＰＥ：石油エーテル；Ｐｙ：ピリジン；ｑｕａｎｔ．：定量的；ＲＰ−ＨＰＬＣ：逆相高性能液体クロマトグラフィー；ＲＴ：室温；ｓｅｃ：秒；ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸；及びＴＨＦ：テトラヒドロフラン。
【０１３８】
以下、実施例により本発明の化合物の製造に使用する条件を例示する。これらの実施例は如何なる点でも本発明の範囲を限定することを意図するものではなく、そのように解釈すべきではない。本発明のこれら及び他の化合物を製造するために以下の製造手順の条件及び工程の公知変形を使用できることはヌクレオシド及びヌクレオチド合成の当業者に容易に理解されよう。全温度は特に指定しない限り、摂氏である。
【０１３９】
【化２７】
【実施例】
【０１４０】
（実施例１）
５’−Ｏ−［（｛（１Ｓ）−２−［（２，２−ジメチルプロパノイル）オキシ］−１−メチルエチル｝アミノ）（フェノキシ）ホスホリル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
ステップ１：（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−プロピルピバレート
【０１４１】
【化２８】
【０１４２】
市販の［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−メチルエチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．０当量）のＤＣＭ（０．１９Ｍ）溶液に塩化パビロイル（１．１当量）及びＥｔ３Ｎ（１．１当量）を加えた。反応混合物を室温で４８時間撹拌後、水を加え、有機相を分離し、１０％クエン酸水溶液で洗浄した。９２：８ ＰＥ／ＥｔＯＡｃを溶離液として残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製した。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ４．８２（ｂｒ ｓ，１Ｈ），４．３９−４．２５（ｍ，３Ｈ），１．７５（ｓ，９Ｈ），１．５５−１．４５（ｍ，１２Ｈ）。
【０１４３】
ステップ２：（２Ｓ）−２−アミノプロピル−２，２−ジメチルプロパノエート塩酸塩
【０１４４】
【化２９】
【０１４５】
ピバル酸（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−プロピル（１．０当量）のＥｔＯＡｃ（０．６Ｍ）溶液に４Ｎ ＨＣｌのジオキサン溶液（１０当量）を加えた。反応混合物を２．５時間撹拌後、溶媒減圧蒸発させ、得られた固形分をＥｔ２Ｏで洗浄し、乾燥した。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．９３（ｂｒ ｓ，３Ｈ），４．６２（ｄｄ，Ｊ＝１２．２７ ａｎｄ ３．４２Ｈｚ，１Ｈ），４．５１（ｄｄ，Ｊ＝１２．２７ ａｎｄ ６．７４Ｈｚ，１Ｈ），３．９３（ｂｓ，１Ｈ），１．７７（ｄ，Ｊ＝６．８５Ｈｚ，３Ｈ），１．５７（ｓ，９Ｈ）。
【０１４６】
ステップ３：ピバル酸（２Ｓ）−２−｛（クロロ（１−フェノキシ）ホスホリル］アミノ｝プロピル
【０１４７】
【化３０】
【０１４８】
フェニルジクロロジホスフェートのＤＣＭ（０．１２Ｍ）溶液に（２Ｓ）−２−アミノプロピル−２，２−ジメチルプロパノエート塩酸塩（１．０当量）を加えた。−７８℃まで冷却後、Ｅｔ３Ｎ（２．０当量）を原液で加え、反応混合物を室温まで一晩昇温した。全揮発分を除去し、得られた白色固体をＥｔ２Ｏで洗浄し、濾過した。濾液を減圧蒸発させ、ジアステレオ異性体の１：１混合物として無色油状物を得た。３１Ｐ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ １０．０８ ａｎｄ ９．９２ｐｐｍ。
【０１４９】
ステップ４：５’−Ｏ−［（｛（１Ｓ）−２−［（２，２−ジメチルプロパノイル）オキシ］−１−メチルエチル｝アミノ）（フェノキシ）ホスホリル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０１５０】
【化３１】
【０１５１】
２’−Ｃ−メチルシチジンをＴＨＦ（０．０９Ｍ）で希釈した。得られたスラリーを−７８℃まで冷却し、ｔｅｒｔ−ブチルマグネシウムクロリド（ＴＨＦ中１．０Ｍ溶液，２．０当量）を加えた。混合物をすぐに０℃まで昇温し、３０分間撹拌し、再び−７８℃まで冷却後、（２Ｓ）−２−［［クロロ（１−フェノキシ）ホスホリル］アミノ］プロピルピバレート（ＴＨＦ中１．０Ｍ溶液，２．０当量）を滴下した。反応混合物を室温まで一晩昇温し、水の添加によりクエンチした。水相をＥｔＯＡｃで３回抽出し、有機相を合わせてブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。９２：８ ＤＣＭ／ＭｅＯＨを溶離液として粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、得られた白色固体をＤＭＳＯに溶解し、ＲＰ−ＨＰＬＣにより精製した。純ジアステレオ異性体を含有するフラクションを合わせて凍結乾燥し、標記化合物をその白色ＴＦＡ塩として得た。
【０１５２】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．９８（ｄ，Ｊ＝７．９５Ｈｚ，１Ｈ），７．４３−７．２０（ｍ，５Ｈ），６．０２−５．９９（ｍ，２Ｈ），４．５８−４．５１（ｍ，１Ｈ），４．４６−４．３７（ｍ，１Ｈ），４．２２−４．１５（ｍ，１Ｈ），４．０８（ｄｄ，Ｊ＝１０．８４，５．７５Ｈｚ，１Ｈ），３．９３（ｄｄ，Ｊ＝１０．７２，６．５２Ｈｚ，１Ｈ），３．７７（ｄ，Ｊ＝９．２９Ｈｚ，１Ｈ），３．６４−３．５３（ｍ，１Ｈ），１．２２（ｓ，９Ｈ），１．２３−１．１７（ｍ，６Ｈ），ＮＨ２，ＮＨ，２×ＯＨ検出されず，３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．５６；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５５６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５３】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ ８．０２（ｄ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ，１Ｈ），７．４４−７．２２（ｍ，５Ｈ），６．０３−６．００（ｍ，２Ｈ），４．５８−４．５３（ｍ，１Ｈ），４．４３−４．３６（ｍ，１Ｈ），４．２２−４．１５（ｍ，１Ｈ），４．０４（ｄｄ，Ｊ＝１０．９４，５．６４Ｈｚ，１Ｈ），３．９１−３．８１（ｍ，２Ｈ），３．６３−３．５４（ｍ，１Ｈ），１．２３−１．１７（ｍ，１５Ｈ），ＮＨ２，ＮＨ，２×ＯＨ検出されず，３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．６８；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５５６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５４】
（実施例２）
５’−Ｏ−［｛［（１Ｓ）−２−（ブチリルオキシ）−１−メチルエチル］アミノ｝（フェノキシ）ホスホリル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
ステップ１：（２Ｓ）−２−｛［クロロ（１−フェノキシ）ホスホリル］アミノ｝プロピルブチレート
【０１５５】
【化３２】
【０１５６】
実施例１，ステップ３に記載した手順に従い、フェニルジクロロジホスフェートのＤＣＭ（０．１４４Ｍ）溶液を（実施例１，ステップ１及び２に記載したと同一の手順に従って製造した）（２Ｓ）−２−アミノプロピルブチレート塩酸塩（１．０当量）とＥｔ３Ｎ（２．０当量）で処理し、無色油状物状の標記化合物をジアステレオ異性体の１：１混合物として得た。３１Ｐ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１０．１２ ａｎｄ ９．９４。
【０１５７】
ステップ２：５’−Ｏ−［｛［（１Ｓ）−２−（ブチリルオキシ）−１−メチルエチル］アミノ｝（フェノキシ）ホスホリル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０１５８】
【化３３】
【０１５９】
実施例１，ステップ４に記載した手順に従い、２’−Ｃ−メチルシチジンのＴＨＦ（０．０９７Ｍ）溶液を−７８℃まで冷却後、ｔｅｒｔ−ブチルマグネシウムクロリド（ＴＨＦ中１．０Ｍ溶液，２．０当量）を加えた後、（２Ｓ）−２−［［クロロ（１−フェノキシ）ホスホリル］アミノ］プロピルブチレート（ＴＨＦ中１．０Ｍ溶液，２．０当量）を加えた。９２：８ ＤＣＭ：ＭｅＯＨを溶離液として粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、得られた固形分をＤＭＳＯに溶解し、ＲＰ−ＨＰＬＣにより精製し、標記化合物をその白色ＴＦＡ塩として得た。
【０１６０】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．９０（ｄ，Ｊ＝７．７４Ｈｚ，１Ｈ），７．４１−７．２３（ｍ，５Ｈ），６．０３（ｓ，１Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝７．０８Ｈｚ，１Ｈ），４．５９−４．５２（ｍ，１Ｈ），４．４７−４．３６（ｍ，１Ｈ），４．１８−４．１５（ｍ，１Ｈ），４．０２（ｄ，Ｊ＝５．５２Ｈｚ，２Ｈ），３．７７（ｄ，Ｊ＝９．０６Ｈｚ，１Ｈ），３．６３−３．５３（ｍ，１Ｈ），２．３２（ｔ，Ｊ＝７．０８Ｈｚ，２Ｈ），１．６８−１．６０（ｍ，２Ｈ），１．１７−１．１５（ｍ，６Ｈ），０．９５（ｔ，Ｊ＝７．２９Ｈｚ，３Ｈ），ＮＨ２，ＮＨ，２×ＯＨ検出されず。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．７；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１６１】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ ８．０２（ｄ，Ｊ＝７．７４Ｈｚ，１Ｈ），７．４４−７．２２（ｍ，５Ｈ），６．０１（ｓ，１Ｈ），５．９８（ｄ，Ｊ＝７．９８Ｈｚ，１Ｈ），４．５８−４．５３（ｍ，１Ｈ），４．４３−４．３６（ｍ，１Ｈ），４．２１−４．１５（ｍ，１Ｈ），４．０４−３．９０（ｍ，２Ｈ），３．８２（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ），３．６３−３．５２（ｍ，１Ｈ），２．２８（ｔ，Ｊ＝７．２９Ｈｚ，２Ｈ），１．６８−１．５６（ｍ，２Ｈ），１．２１−１．１９（ｍ，６Ｈ），０．９５（ｔ，Ｊ＝７．２９Ｈｚ，３Ｈ），ＮＨ２，ＮＨ，２×ＯＨ検出されず。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．７４；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１６２】
スキーム２に示し、実施例３に例示する手順により本発明の化合物を製造することもできる。
【０１６３】
【化３４】
【０１６４】
（実施例３）
５’−Ｏ−［［［２−（２，２−ジメチル−１−オキソプロポキシ）エチル］アミノ］（フェノキシ）ホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
ステップ１：２’−Ｃ−メチル−２’．３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジン
【０１６５】
【化３５】
【０１６６】
２’−Ｃ−メチルシチジンをアセトン（０．０４Ｍ）で希釈し、ｐ−トルエンスルホン酸と２，２−ジメトキシプロパンを加えた。得られたスラリーを２４時間室温で撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をＭｅＯＨに溶解し、（予め２Ｎ ＮａＯＨとＨ２Ｏで洗浄しておいた）Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ Ａ−２６を加えた。得られた混合物を２時間撹拌した。Ａｍｂｅｒｌｉｔｅを濾別し、溶液を蒸発させた。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９：１）により精製し、白色粉末状の所望生成物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．９６（ｄ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，１Ｈ），６．１８（ｓ，１Ｈ），５．９０（ｄ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，１Ｈ），４．５１−４．４８（ｍ，１Ｈ），４．２８−４．２３（ｍ，１Ｈ），３．８６（ｄｄ，Ｊ＝３．０４ ａｎｄ １２．１２Ｈｚ，１Ｈ），３．７８（ｄｄ，Ｊ＝３．５２ ａｎｄ １２．１２Ｈｚ，１Ｈ），１．５９（ｓ，３Ｈ），１．４３（ｓ，３Ｈ），１．２５（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ２９８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１６７】
ステップ２：５’−Ｏ−［［［２−（２，２−ジメチル−１−オキソプロポキシ）エチル］アミノ］フェノキシホスフィニル］−２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジン
【０１６８】
【化３６】
【０１６９】
２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジンをモレキュラーシーブの存在下にピリジン（０．６７Ｍ）で希釈した。得られた溶液を０℃まで冷却し、ジフェニルホスファイト（８０％，２．０当量）を加え、混合物を１時間０℃で撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をＴＨＦ（０．０８Ｍ）に溶解した。得られた溶液を０℃まで冷却し、Ｅｔ３Ｎ（６．０当量）、ヘキサクロロエタン（ＤＣＭ中０．８Ｍ）及び（実施例１，ステップ２に記載したように製造した）アミノエチル−２，２−ジメチルプロパノエート塩酸塩を加えた。混合物を３０分間０℃で撹拌した後、水の添加によりクエンチした。水相をＥｔＯＡｃで３回抽出し、有機相を合わせてブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９５：５）により精製し、ジアステレオ異性体の混合物として白色固体を得た。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５８１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１７０】
ステップ３：５’−Ｏ−［［［２−（２，２−ジメチル−１−オキソプロポキシ）エチル］アミノ］（フェノキシ）ホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０１７１】
【化３７】
【０１７２】
５’−Ｏ−［［［２−（２，２−ジメチル−１−オキソプロポキシ）エチル］アミノ］フェノキシホスフィニル］−２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジンをＴＦＡ−Ｈ２Ｏ（８：２，０．０９８Ｍ）溶液に溶解した。得られた溶液を３０℃まで昇温し、２０分間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をアセトニトリルに溶解し、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ Ｃ１８，５μｍ，２１．２０×２５０ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ５ｍＭ ＡＭＢＩＣ）により精製した。純ジアステレオ異性体を含有するフラクションを合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０１７３】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ７．５７（ｄ，Ｊ＝７．２６Ｈｚ，１Ｈ），７．４４−７．３８（ｍ，２Ｈ），７．２６−７．１２（ｍ，５Ｈ），５．９６（ｓ，１Ｈ），５．７８−５．６８（ｍ，２Ｈ），５．３３（ｄ，Ｊ＝６．８７Ｈｚ，１Ｈ），５．１（ｓ，１Ｈ），４．４−４．１５（ｍ，２Ｈ），４．０８−３．９２（ｍ，３Ｈ），３．９９−３．５８（ｍ，１Ｈ），３．１７−３．０５（ｍ，２Ｈ），１．１５（ｓ，９Ｈ），０．９６（ｓ，３Ｈ）；３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：５．４２；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１７４】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ７．５７（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ），７．４４−７．３９（ｍ，２Ｈ），７．２６−７．１０（ｍ，５Ｈ），５．９６（ｂｒ ｓ，１Ｈ），５．７０−５．６５（ｍ，２Ｈ），５．３１（ｄ，Ｊ＝７．０８Ｈｚ，１Ｈ），５．１３（ｓ，１Ｈ），４．４２−４．２４（ｍ，２Ｈ），４．０９−３．９２（ｍ，３Ｈ），３．６８−３．５６（ｍ，１Ｈ），３．１２−３．０５（ｍ，２Ｈ），１．１５（ｓ，９Ｈ），０．９８（ｓ，３Ｈ）；３１Ｐ ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：５．６８；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１７５】
（実施例４）
５’−Ｏ−［［［２−（２−メチル−１−オキソプロポキシ）エチル］アミノ］（フェノキシ）ホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０１７６】
【化３８】
［（実施例３，ステップ１に記載したように製造した）２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジン及び（実施例１，ステップ２に記載したように製造した）アミノエチル−２−メチルプロパノエート塩酸塩から出発して］実施例３，ステップ２及びステップ３に記載した手順に従い、粗生成物を得、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ Ｃ１８，５μｍ，２１．２０×２５０ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ５ｍＭ ＡＭＢＩＣ）により精製した。純化合物を含有する画分を合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０１７７】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７１（ｄ，Ｊ＝７．７４Ｈｚ，１Ｈ），７．４３−７．３８（ｍ，２Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），６．０１（ｓ，１Ｈ），５．８４（ｄ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，１Ｈ），４．５６−４．３７（ｍ，２Ｈ），４．１５−４．０８（ｍ，３Ｈ），３．７６（ｄ，Ｊ＝９．１２Ｈｚ，１Ｈ），３．３０−３．２３（ｍ，２Ｈ），２．６１−２．５３（ｍ，１Ｈ），１．１５（ｄ，Ｊ＝６．７２Ｈｚ，６Ｈ），１．１１（ｓ，３Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．６７；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５２７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１７８】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７４（ｄ，Ｊ＝７．７４Ｈｚ，１Ｈ），７．４４−７．３９（ｍ，２Ｈ），７．３−７．２４（ｍ，３Ｈ），６．０７（ｓ，１Ｈ），５．８３（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），４．５７−４．５２（ｍ，１Ｈ），４．４２−４．３６（ｍ，１Ｈ），４．１５−４．０８（ｍ，３Ｈ），３．７８（ｄ，Ｊ＝９．０８Ｈｚ，１Ｈ），３．３０−３．２３（ｍ，２Ｈ），２．５９−２．５２（ｍ，１Ｈ），１．１６−１．１１（ｍ，９Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．７４；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５２７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１７９】
（実施例５）
５’−Ｏ−［｛［（１Ｓ）−１−メチル−２−（２−メチル−１−オキソプロポキシ）エチル］アミノ｝（フェノキシ）ホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０１８０】
【化３９】
【０１８１】
実施例３，ステップ２及び３に記載した手順に従い、粗生成物を得、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ Ｃ１８，５μｍ，２１．２０×２５０ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ５ｍＭ ＡＭＢＩＣ）により精製した。純化合物を含有する画分を合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０１８２】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７１（ｄ，Ｊ＝７．４４Ｈｚ，１Ｈ），７．４５−７．２８（ｍ，２Ｈ），７．３１−７．１９（ｍ，３Ｈ），６．０７（ｓ，１Ｈ），５．８５（ｄ，Ｊ＝７．４４Ｈｚ，１Ｈ），４．５６−４．４．５１（ｍ，１Ｈ），４．４３−４．３８（ｍ，１Ｈ），４．１５−４．１０（ｍ，１Ｈ），４．０６−３．９６（ｍ，２Ｈ），３．７３（ｄ，Ｊ＝９．２４Ｈｚ，１Ｈ），３．６４−３．５４（ｍ，１Ｈ），２．６３−２．５３（ｍ，１Ｈ），１．１８−１．１５（ｍ，９Ｈ），１．１０（ｓ，３Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：４．４６；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１８３】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７３（ｄ，Ｊ＝７．４４Ｈｚ，１Ｈ），７．４３−７．３８（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．２３（ｍ，３Ｈ），６．０７（ｓ，１Ｈ），５．８３（ｄ，Ｊ＝７．４４Ｈｚ，１Ｈ），４．５７−４．５１（ｍ，１Ｈ），４．４２−４．３５（ｍ，１Ｈ），４．１５−４．１１（ｍ，１Ｈ），４．０４−３．９０（ｍ，２Ｈ），３．７９（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ），３．６６−３．５７（ｍ，１Ｈ），２．６０−２．５０（ｍ，１Ｈ），１．２０（ｄ，Ｊ＝６．６６Ｈｚ，３Ｈ），１．１６−１．１３（ｍ，９Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：４．５１；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１８４】
（実施例６）
５’−Ｏ−［｛［（１Ｓ，２Ｓ）−１−［（２，２−ジメチル−１−オキソプロポキシ）メチル］−２−メチルブチル］アミノ｝（フェノキシ）ホスホリル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０１８５】
【化４０】
【０１８６】
実施例３，ステップ２及び３に記載した手順に従い、粗生成物を得、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ Ｃ１８，５μｍ，２１．２０×２５０ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ５ｍＭ ＡＭＢＩＣ）により精製した。純化合物を含有する画分を合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０１８７】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７０（ｄ，Ｊ＝７．４４Ｈｚ，１Ｈ），７．４３−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．２０（ｍ，３Ｈ），６．０７（ｓ，１Ｈ），５．８２（ｄ，Ｊ＝７．４４Ｈｚ，１Ｈ），４．５４（ｄｄ，Ｊ＝３．６３ ａｎｄ １１．４６Ｈｚ，１Ｈ），４．４２−４．３５（ｍ，１Ｈ），４．１４−３．９９（ｍ，３Ｈ），３．７７（ｄ，Ｊ＝９．０６Ｈｚ，１Ｈ），３．４７−３．３７（ｍ，１Ｈ），１．７１−１．５２（ｍ，２Ｈ），１．２５−１．１（ｍ，１Ｈ），１．１９（ｓ，９Ｈ），１．１２（ｓ，３Ｈ），０．９８−０．９（ｍ，６Ｈ），ＮＨ２，ＮＨ，２×ＯＨ検出されず。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．０２；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５９８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１８８】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．６６（ｄ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，１Ｈ），７．４１−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．２１−７．２０（ｍ，３Ｈ），６．０６（ｓ，１Ｈ），５．８４（ｄ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，１Ｈ），４．５５−４．４９（ｍ，１Ｈ），４．４２−４．３７（ｍ，１Ｈ），４．２３−４．１９（ｍ，１Ｈ），４．１３−４．０５（ｍ，２Ｈ），３．７０（ｄ，Ｊ＝９．３２Ｈｚ，１Ｈ），３．４４−３．３７（ｍ，１Ｈ），１．５９−１．５０（ｍ，２Ｈ），１．２３（ｓ，９Ｈ），１．２３−１．１２（ｍ，１Ｈ），１．０８（ｓ，３Ｈ），０．９２−０．８６（ｍ，６Ｈ），ＮＨ２，ＮＨ，２×ＯＨ検出されず。３１Ｐ ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：４．９１；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５９８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１８９】
上記実施例３に詳述した方法に従い、以下の他の実施例（表１参照）を製造した。
【０１９０】
【表１】
【０１９１】
（実施例９）
５’−Ｏ−［［［２−［（１−オキソ−２−プロピルペンチル）オキシ］エチル］アミノ］フェノキシホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０１９２】
【化４１】
［（実施例３，ステップ１に記載したように製造した）２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジン及びアミノエチル−２−プロピルペンタノエート塩酸塩から出発して］実施例３，ステップ２及び３に記載した手順に従い、粗生成物を得、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ Ｃ１８，５μｍ，２１．２０×２５０ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ５ｍＭ ＡＭＢＩＣ）により精製した。純化合物を含有するフラクションを合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０１９３】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．４３−７．１９（ｍ，５Ｈ），６．０７（ｓ，１Ｈ），５．８３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），４．５８−４．５（ｍ，１Ｈ），４．４７−４．３４（ｍ，１Ｈ），４．１８−４．０５（ｍ，３Ｈ），３．７４（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ５ ＩＨ），３．３５−３．２（ｍ，２Ｈ），２．４８−２．３３（ｍ，１Ｈ），１．６６−１．３７（ｍ，４Ｈ），１．３７−１．２３（ｍ，４Ｈ），１．１（ｓ，３Ｈ），０．９５−０．８６（ｍ，６Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．４５；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５８３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９４】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７１（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．４６−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．３３−７．２１（ｍ，３Ｈ），６．０５（ｓ，１Ｈ），５．８１（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），４．５６−４．５０（ｍ，１Ｈ），４．４４−４．３４（ｍ，１Ｈ），４．１８−４．０５（ｍ，３Ｈ），３．７６（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），３．３５−３．２０（ｍ，２Ｈ），２．４６−２．３５（ｍ，１Ｈ），１．６６−１．３７（ｍ，４Ｈ），１．３７−１．２２（ｍ，４Ｈ），１．１２（ｓ，３Ｈ），０．９７−０．８６（ｍ，６Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：５．５２；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５８３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９５】
（実施例１０）
５’−Ｏ−［［［（１Ｓ）−２−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−（２−メチル−１−オキソプロポキシ）メチル］エチル］アミノ］フェノキシホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０１９６】
【化４２】
［（実施例３，ステップ１に記載したように製造した）２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジン及び（２Ｓ）−２−アミノ−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロピル２−メチルプロパノエート塩酸塩から出発して］実施例３，ステップ２及び３に記載した手順に従い、粗生成物を得、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ Ｃ１８，５μｍ，２１．２０×２５０ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ５ｍＭ ＡＭＢＩＣ）により精製した。純化合物を含有するフラクションを合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０１９７】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５７（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５１（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），７．３６−７．３０（ｍ，３Ｈ），７．２１−７．０４（ｍ，５Ｈ），６．９９−６．９３（ｍ，１Ｈ），６．００（ｓ，１Ｈ），５．７８（ｄ，Ｊ＝７．４７Ｈｚ，１Ｈ），４．２８−４．１０（ｍ，４Ｈ），３．９８−３．９４（ｍ，１Ｈ），３．８４−３．７７（ｍ，１Ｈ），３．６０（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），３．１−２．８９（ｍ，２Ｈ），２．６３−２．５６（ｍ，１Ｈ），１．１８（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ），１．０３（ｓ，３Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：４．１８；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ６５６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９８】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ ７．６（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４−７．３３（ｍ，３Ｈ），７．２３−７．１８（ｍ，３Ｈ），７．１１−６．９７（ｍ，３Ｈ），６．０２（ｓ，１Ｈ），５．７１（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），４．３２−４．２４（ｍ，１Ｈ），４．１１−４．０（ｍ，４Ｈ），３．９９−３．８２（ｍ，１Ｈ），３．６８（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），３．１−２．９５（ｍ，２Ｈ），２．６１−２．５１（ｍ，１Ｈ），１．１６（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６Ｈ），１．０８（ｓ，３Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ ＣＤ３ＯＤ）δ：４．４３；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ６５６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９９】
（実施例１１）
５’−Ｏ−［［［（２Ｓ）−２−（２−メチル−１−オキソプロポキシ）−１−（フェニルメチル）］エチル］アミノ］フェノキシホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０２００】
【化４３】
［（実施例３，ステップ１に記載したように製造した）２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジン及び（２Ｓ）−２−アミノ−３−フェニルプロピル２−メチルプロパノエート塩酸塩から出発して］実施例３，ステップ２及び３に記載した手順に従い、粗生成物を得、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＳｙｍｍｅｔｒｙ Ｃ１８，５μｍ，１９×３００ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ０．１％ＴＦＡ）により精製した。純化合物を含有するフラクションを合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０２０１】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ９．１８（ｓ ｂｒ，１Ｈ），８．３１（ｓ ｂｒ，１Ｈ），７．７７（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３８−７．１３（ｍ，１０Ｈ），５．９０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），５．８（ｓ，１Ｈ），５．６９（ｔ，Ｊ＝１１．３Ｈｚ，１Ｈ），４．１９−４．０（ｍ，２Ｈ），３．９９−３．９２（ｍ，１Ｈ），３．８６−３．７９（ｍ，２Ｈ），３．５７−３．５（ｍ，２Ｈ），２．８−２．６５（ｍ，２Ｈ），２．５４−２．４１（ｍ，１Ｈ），１．０５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ），１．０（ｓ，３Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ：４．４１；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ６１７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０２】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ９．１２（ｓ ｂｒ，１Ｈ），８．３１（ｓ ｂｒ，１Ｈ），７．７７（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），７．３４−７．０７（ｍ，１０Ｈ），５．９２（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），５．８３（ｓ，１Ｈ），５．７５（ｔ，Ｊ＝１１．３Ｈｚ，１Ｈ），４．２３−４．４（ｍ，２Ｈ），４．２−３．８５（ｍ，３Ｈ），３．５９−３．４７（ｍ，２Ｈ），２．８１−２．６１（ｍ，２Ｈ），２．５４−２．４２（ｍ，１Ｈ），１．０６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ），０．９９（ｓ，３Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ：４．０５；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ６１７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０３】
（実施例１２）
５’−Ｏ−［［［（２Ｓ）−２−（２−メチル−１−オキソプロポキシ）プロピル］アミノ］フェノキシホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０２０４】
【化４４】
［（実施例３，ステップ１に記載したように製造した）２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジン及び（１Ｓ）−２−アミノ−１−メチルエチル２−メチルプロパノエート塩酸塩から出発して］実施例３，ステップ２及び３に記載した手順に従い、粗生成物を得、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＸ−Ｔｅｒｒａ Ｃ１８，５μｍ，５０×１００ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ０．０５％ ＴＦＡ）により精製した。純化合物を含有するフラクションを合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０２０５】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ９．６２（ｂｓ，１Ｈ），８．８６（ｂｓ，１Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．４５−７．０９（ｍ，５Ｈ），６．０２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），５．８０（ｓ，１Ｈ），５．７１−５．５４（ｍ，１Ｈ），４．４５−４．１８（ｍ，２Ｈ），４．１２−３．９８（ｍ，１Ｈ），３．９５−３．７３（ｍ，２Ｈ），３．６６−３．５３（ｍ，１Ｈ），３．４８−３．２８（ｍ，１Ｈ），１．１０−０．９５（ｍ，１２Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：４．４９；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０６】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ９．６３（ｂｓ，１Ｈ），８．８４（ｂｓ，１Ｈ），７．９２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５５−７．１５（ｍ，５Ｈ），６．０２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），５．８２（ｓ，１Ｈ），５．７０−５．５５（ｍ，１Ｈ），４．４５−４．２０（ｍ，２Ｈ），４．１２−４．００（ｍ，１Ｈ），３．９５−３．７５（ｍ，２Ｈ），３．６６−３．５５（ｍ，１Ｈ），３．４８−３．２８（ｍ，１Ｈ），１．１０−０．９５（ｍ，１２Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：４．６７；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０７】
（実施例１３）
５’−Ｏ−［［［（２Ｒ）−２−（２−メチル−１−オキソプロポキシ）プロピル］アミノ］フェノキシホスフィニル］−２’−Ｃ−メチルシチジン
【０２０８】
【化４５】
［（実施例３，ステップ１に記載したように製造した）２’−Ｃ−メチル−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）シチジン及び（１Ｒ）−２−アミノ−１−メチルエチル２−メチルプロパノエート塩酸塩から出発して］実施例３，ステップ２及び３に記載した手順に従い、粗生成物を得、ＲＰ−ＨＰＬＣ（固定相：カラムＸ−Ｔｅｒｒａ Ｃ１８，５μｍ，５０×１００ｍｍ。移動相：アセトニトリル／Ｈ２Ｏ ５ｍＭ ＡＭＢＩＣ）により精製した。純化合物を含有するフラクションを合わせて凍結乾燥し、白色粉末状の標記化合物を得た。
【０２０９】
最初に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．２０−７０．８０（ｍ，１Ｈ），７．５０−７．０２（ｍ，５Ｈ），６．１５−５．９３（ｍ，１Ｈ），５．８３（ｍ，１Ｈ），４．５１−４．１７（ｍ，２Ｈ），４．１７−３．９７（ｍ，１Ｈ），３．９７−３．７０（ｍ，２Ｈ），３．６９−３．５２（ｍ，１Ｈ），３．４９−３．３３（ｍ，１Ｈ），１．１６−０．９３（ｍ，１２Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：４．３３；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２１０】
２番目に溶出するジアステレオ異性体：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ７．８９（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３４−７．００（ｍ，５Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），５．８３（ｓ，１Ｈ），４．４５−４．３２（ｍ，１Ｈ），４．３２−４．１８（ｍ，１Ｈ），４．０７−３．９７（ｍ，１Ｈ），３．９２−３．７０（ｍ，２Ｈ），３．７０−３．５８（ｍ，１Ｈ），３．４８−３．３１（ｍ，１Ｈ），ＤＭＳＯに隠された１Ｈ，１．０９−０．８７（ｍ，１２Ｈ）。３１Ｐ ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：４．４８；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２１１】
（実施例１４〜２１）
スキーム２のステップ１及び２に記載し、実施例３のステップ１及び２に例示した手順に従って実施例１４及び１５の化合物を製造した。スキーム２に記載し、上記実施例３に例示した手順に従って実施例１６〜２１の化合物を製造した。
【０２１２】
【表２】
【０２１３】
（実施例２２）
２’−Ｃ−メチル−５’−Ｏ−［［（３Ｒ）−３−（２−メチル−１−オキソプロポキシ）−１−ピロリジニル］フェノキシホスフィニル］シチジン
【０２１４】
【化４６】
【０２１５】
アミノエチル−２，２−ジメチルプロパノエート塩酸塩の代わりにピロリジニル−３−イル−２−メチルプロパノエート塩酸塩を使用した以外は、スキーム２に記載し、実施例３に例示した手順に従って標記化合物を製造した。ＭＳ（Ｍ＋１）＝５５３。
【０２１６】
（生物学的アッセイ）
ＨＣＶ複製の阻害を測定するために使用したアッセイについて以下に記載する。
【０２１７】
Ａ．ＨＣＶ ＲＮＡ複製の阻害アッセイ：
本発明の化合物を、サブゲノムＨＣＶレプリコンを含む培養肝癌（ＨｕＨ−７）細胞中におけるＣ型肝炎ウイルスＲＮＡの複製に作用する能力について評価する。アッセイの詳細を以下に記載する。このレプリコンアッセイはＶ．Ｌｏｈｍａｎｎ，Ｆ．Ｋｏｒｎｅｒ，Ｊ−Ｏ．Ｋｏｃｈ，Ｕ．Ｈｅｒｉａｎ，Ｌ．Ｔｈｅｉｌｍａｎｎ，ａｎｄ Ｒ．Ｂａｒｔｅｎｓｃｈｌａｇｅｒ，“Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａ Ｓｕｂ−ｇｅｎｏｍｉｃ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ ＲＮＡｓ ｉｎ ａ Ｈｅｐａｔｏｍａ Ｃｅｌｌ Ｌｉｎｅ，”Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８５：１１０（１９９９）に記載されているアッセイの変法である。
【０２１８】
プロトコール：
このアッセイはインサイツリボヌクレアーゼ保護シンチレーション近接型プレートアッセイ（ＳＰＡ）である。９６ウェルＣｙｔｏｓｔａｒプレート（Ａｍｅｒｓｈａｍ）中の０．８ｍｇ／ｍＬ Ｇ４１８を添加した培地１００〜２００μＬに、細胞１０，０００〜４０，０００個を撒く。０〜１８時間の時点で１％ＤＭＳＯ中１００μＭまでの各種濃度の化合物を細胞に添加した後、２４〜９６時間培養する。細胞を固定し（２０分，１０％ホルマリン）、透過性を亢進させ（２０分，０．２５％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００／ＰＢＳ）、ＲＮＡウイルスゲノムに含まれる（プラス）鎖ＮＳ５Ｂ（又は他の遺伝子）に相補的な１本鎖３３Ｐ ＲＮＡプローブとハイブリド形成させる（一晩，５０℃）。細胞を洗浄し、ＲＮＡｓｅで処理し、洗浄し、６５℃まで加熱し、Ｔｏｐ−Ｃｏｕｎｔにてカウントする。複製の阻害を毎分カウント（ｃｐｍ）の減少として読取る。
【０２１９】
サブゲノムレプリコンを含むものを選択したヒトＨｕＨ−７肝癌細胞は、ＨＣＶ５’非翻訳領域（ＮＴＲ）、ネオマイシン選択マーカー、ＥＭＣＶ ＩＲＥＳ（内部リボソーム侵入部位）及びＨＣＶ非構造蛋白質ＮＳ３〜ＮＳ５Ｂとそれに続く３’ＮＴＲから構成される細胞質ＲＮＡを保持する。
【０２２０】
複製アッセイで試験した代表的化合物は１００マイクロモル未満のＥＣ５０を示す。例えば、実施例１〜２２の標記化合物を上記レプリコンアッセイで試験した処、下表３に示すようなＥＣ５０であることが判明した。
【０２２１】
【表３】
【０２２２】
Ｂ．細胞内代謝アッセイ：
その１
本発明の化合物がヒト肝癌細胞株に侵入して対応するヌクレオシド５’−一リン酸、二リン酸及び三リン酸に細胞内にて変換される能力についても評価することができる。
【０２２３】
本発明の化合物の細胞内代謝試験のために、ＨｕＨ−７とＨＢＩ１０Ａの２種類の細胞株を使用する。ＨｕＨ−７はヒト肝癌細胞株であり、ＨＢＩ１０ＡはＨＣＶバイシストロン性レプリコンを保持するＨｕＨ−７細胞から誘導されたクローン株を意味する。ＨｕＨ−７細胞を１０％胎仔ウシ血清を加えた完全ダルベッコ改変イーグル培地に撒き、ＨＢＩ１０Ａ細胞をＧ４１８（０．８ｍｇ／ｍＬ）を加えた同一培地に撒き、化合物添加時に細胞が８０％コンフルエントになるように６０ｍｍ培養皿当たり細胞１．５×１０６個の密度とする。トリチウム標識化合物を、細胞培養培地中、２μＭで３又は２３時間温置する。細胞を採取し、リン酸緩衝食塩水で洗浄し、カウントする。次に細胞を７０％メタノール，２０ｍＭ ＥＤＴＡ，２０ｍＭ ＥＧＴＡで抽出し、遠心する。溶解液を乾燥し、インラインβ−ＲＡＭシンチレーション検出器（ＩＮ／ＵＳ Ｓｙｓｔｅｍｓ）に接続したＷａｔｅｒｓ Ｍｉｌｌｅｎｉｕｍシステムでイオン対逆相（Ｃ−１８）ＨＰＬＣを使用して放射性標識ヌクレオチドを分析する。ＨＰＬＣ移動相は（ａ）１０ｍＭリン酸カリウム＋２ｍＭ水酸化テトラブチルアンモニウム及び（ｂ）５０％メタノール＋１０ｍＭリン酸カリウム＋２ｍＭ水酸化テトラブチルアンモニウムから構成される。保持時間を標準に比較することによりピーク同定を行う。ＨｕＨ−７又はＨＢＩ１０Ａ細胞１０６個中に検出されたヌクレオチドのピコモルとして活性を表す。
【０２２４】
その２
本発明の化合物が細胞（ヒト肝癌細胞株，肝細胞）に侵入して三リン酸に細胞内で変換される能力について評価した。本方法では各種の細胞株及び化合物を利用した。化合物を細胞と共に温置後に、サンプルを抽出し、ＨＰＬＣにより定量する。
【０２２５】
細胞は以下のプロトコールに従って作製する。
懸濁細胞：低温保存細胞については、Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｅｄｉｓｏｎ，ＮＪ，ＵＳＡ）による低温保存細胞操作プロトコールに従った。
【０２２６】
新鮮細胞作製については、Ｘｅｎｏｂｉｏｔｉｃａ ２００５，３５（１０３５−５４）；Ｇｉｕｌｉａｎｏ Ｃらに発表されているプロトコールに従った。
【０２２７】
細胞を適切な細胞密度（一般に細胞１０６個／ｍＬ；単一ドナー又は１０人のドナープール）まで肝細胞基礎培地（Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ，ＣＣ−３１９９）に再懸濁し、０．２ｍＬ／ウェルを滅菌９６ウェル丸底アッセイプレート（Ｃｏｓｔａｒ ３７８８）に移した。
【０２２８】
化合物をＤＭＳＯで１０００倍に希釈して加え、温和な回転撹拌により混合し、Ｄｕｂｎｏｆｆ Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ Ｓｈａｋｉｎｇ Ｉｎｃｕｂａｔｏｒ中カルボゲン下に３７℃で温置した。細胞懸濁液のアリコートを各時点で分取し、４℃で２０秒間遠心した。接着細胞株については、約１日前に６ウェル組織培養処理プレート中の適切な培地に細胞を撒き、３７℃／５％ＣＯ２下に温置した。播種から２４時間後に、化合物の１０００倍希釈液で細胞を処理し、適当な時間、３７℃／５％ＣＯ２下に温置した。いずれの場合も、吸引により温置培地を除去した後、細胞を冷７０％ ＭｅＯＨ，２０ｍＭ ＥＤＴＡ及び２０ｍＭ ＥＧＴＡで抽出し、遠心した。溶解液を窒素下に乾燥し、固相抽出により精製し、分析時まで−２０℃で保存した。
【０２２９】
エレクトロスプレーインターフェース（ＥＳＩ）を取付けたＡＰＩ ４０００質量分析計に接続したＡｇｉｌａｎｔ １１００ ＨＰＬＣでＺＩＣ−ＨＩＬＩＣ ＳｅＱｕａｎｔカラム（１００×２．１ｍｍ，５μｍ）を使用して乾燥溶解液を分析した。質量分析計は負イオンエレクトロスプレーモードで運転した。ＨＰＬＣ移動相は溶離液Ａ：水＋０．１％ギ酸、Ｂ：アセトニトリル＋０．１％ギ酸から構成した。保持時間を標準に比較することによりピーク同定を行った。濃度曲線の下の面積（ＡＵＣ，μＭ×ｈ）として活性を表した。
【０２３０】
代表的化合物をヒト肝細胞と共に２時間温置した処、高濃度のヌクレオシド三リン酸を形成することが判明した（表４）。
【０２３１】
【表４】
【０２３２】
本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートの細胞毒性と抗ウイルス特異性も以下のカウンタースクリーニングで評価する。
【０２３３】
Ｃ．カウンタースクリーニング：
本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートがヒトＤＮＡポリメラーゼを阻害する能力は以下のアッセイにて測定され得る。
【０２３４】
ａ．ヒトＤＮＡポリメラーゼα及びβの阻害：
反応条件：
反応容量５０μｌ。
【０２３５】
反応緩衝液成分：
２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ７．５
ウシ血清アルブミン２００μｇ／ｍＬ
１００ｍＭ ＫＣｌ
２ｍＭ β−メルカプトエタノール
１０ｍＭ ＭｇＣｌ２
１．６μＭ ｄＡ，ｄＧ，ｄＣ，ｄＴＴＰ
α−３３Ｐ−ｄＡＴＰ。
【０２３６】
酵素と鋳型：
ギャップを含む魚精子ＤＮＡ鋳型０．０５ｍｇ／ｍＬ
ＤＮＡポリメラーゼα又はβ０．０１Ｕ／μＬ。
【０２３７】
ギャップを含む魚精子ＤＮＡ鋳型の作製：
１Ｍ ＭｇＣｌ２５μＬを活性化魚精子ＤＮＡ（ＵＳＢ ７００７６）５００μＬに加える；
３７℃まで昇温し、６５Ｕ／μＬエキソヌクレアーゼＩＩＩ（ＧｉｂｃｏＢＲＬ１８０１３−０１１）３０μＬを加える；
５分間３７℃で温置する；
６５℃まで１０分間加熱することにより反応を終了する；
２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ７．５で平衡化したＢｉｏ−ｓｐｉｎ ６クロマトグラフィーカラム（Ｂｉｏ−Ｒａｄ ７３２−６００２）に５０〜１００μＬアリコートをロードする；
１，０００×ｇで４分間遠心により溶出させる；
溶出液を貯め、２６０ｎｍの吸光度を測定して濃度を決定する。
【０２３８】
ＤＮＡ鋳型は適当な容量の２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ７．５で希釈し、酵素は２ｍＭ β−メルカプトエタノール及び１００ｍＭ ＫＣｌを加えた適当な容量の２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌで希釈する。鋳型及び酵素をマイクロ遠心管又は９６ウェルプレートにピペットで添加する。夫々酵素希釈用緩衝液と試験化合物溶媒を使用して酵素を含まないブランク反応液及び試験化合物を含まない対照反応液も調製する。上記成分からなる反応緩衝液で反応を開始する。反応液を１時間３７℃で温置する。０．５Ｍ ＥＤＴＡ ２０μＬを添加することにより反応液をクエンチする。クエンチした反応液５０μＬをＷｈａｔｍａｎ ＤＥ８１フィルターディスクにスポットし、風乾する。洗浄液１ｍＬが＜１００ｃｐｍになるまでフィルターディスクを０．３Ｍギ酸アンモニウム（ｐＨ８）１５０ｍＬで反復洗浄する。ディスクを無水エタノール１５０ｍＬで２回洗浄し、無水エーテル１５０ｍＬで１回洗浄し、乾燥し、シンチレーション液５ｍＬ中にてカウントする。
【０２３９】
次式：阻害％＝［１−（試験反応液中のｃｐｍ−ブランク中のｃｐｍ）／（対照反応液中のｃｐｍ−ブランク中のｃｐｍ）］×１００に従って阻害百分率を計算する。
【０２４０】
ｂ．ヒトＤＮＡポリメラーゼγの阻害：
２０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ８），２ｍＭ β−メルカプトエタノール，５０ｍＭ ＫＣｌ，１０ｍＭ ＭｇＣｌ２，及び０．１μｇ／μＬ ＢＳＡを含有する緩衝液中に０．５ｎｇ／μＬ酵素；１０μＭ ｄＡＴＰ，ｄＧＴＰ，ｄＣＴＰ，及びＴＴＰ；２μＣｉ／反応液［α−３３Ｐ］−ｄＡＴＰ並びに０．４μｇ／μＬ活性化魚精子ＤＮＡ（ＵＳ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌから購入）を添加した反応液中にてヒトＤＮＡポリメラーゼγの阻害能を測定することができる。１時間３７℃で反応を進行させ、０．５Ｍ ＥＤＴＡを終濃度１４２ｍＭまで添加することによりクエンチする。アニオン交換フィルター結合とシンチレーションカウントにより生成物形成を定量する。５０μＭまでの化合物を試験する。
【０２４１】
次式：％阻害＝［１−（試験反応液中のｃｐｍ−ブランク中のｃｐｍ）／（対照反応液中のｃｐｍ−ブランク中のｃｐｍ）］×１００に従って阻害百分率を計算する。
【０２４２】
本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートがＨＩＶ感染性とＨＩＶ蔓延を阻害する能力を以下のアッセイで測定する。
【０２４３】
ｃ．ＨＩＶ感染性アッセイ
低バックグラウンドβ−ガラクトシダーゼ（β−ｇａｌ）発現について選択された、ＣＸＣＲ４及びＣＣＲ５の両者を発現するＨｅＬａ Ｍａｇｉ細胞の変異体を用いてアッセイを実施することができる。細胞に４８時間感染させ、組込まれたＨＩＶ−１ ＬＴＲプロモーターからのβ−ｇａｌ産生を化学発光基質（Ｇａｌａｃｔｏｌｉｇｈｔ Ｐｌｕｓ，Ｔｒｏｐｉｘ，Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）で定量する。１００μＭから出発して２倍系列希釈で阻害剤の力価を（２回ずつ）測定し、各濃度の阻害百分率を対照感染と比較計算する。
【０２４４】
ｄ．ＨＩＶ蔓延の阻害
その開示内容全体を本明細書に参照により組み込む米国特許第５，４１３，９９９号（１９９５年５月９日）及びＪ．Ｐ．Ｖａｃｃａら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，９１：４０９６−４１００（１９９４）に記載の方法により本発明の化合物がヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の蔓延を阻害する能力を測定することができる。
【０２４５】
更に、以下のアッセイに記載するようなＭＴＳ細胞アッセイにてサブゲノムＨＣＶレプリコンを含む培養肝癌（ＨｕＨ−７）細胞に対する細胞毒性について本発明のヌクレオシドアリールホスホロアミデートをスクリーニングする。ＨｕＨ−７細胞株はＨ．Ｎａｋａｂａｙａｓｈｉら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，４２：３８５８（１９８２）に記載されている。
【０２４６】
ｅ．細胞毒性アッセイ：
懸濁培養については細胞約１．５×１０５個／ｍＬの濃度で３日間温置することにより及び接着培養については５．０×１０４個／ｍＬで３日間温置することにより、適当な培地で細胞培養液を調製することができる。細胞培養液９９μＬを９６ウェル組織培養処理プレートのウェルに移し、試験化合物を１００倍終濃度でＤＭＳＯに溶かした溶液１μＬを加える。プレートを３７℃で５％ＣＯ２下に指定時間温置する。温置時間後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ ９６ Ａｑｕｅｏｕｓ Ｏｎｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ試薬（ＭＴＳ）（Ｐｒｏｍｅｇａ）２０μＬを各ウェルに加え、プレートを３７℃で５％ＣＯ２下に更に３時間まで温置する。プレートを振盪して十分に混合し、プレートリーダーを使用して４９０ｎｍの吸光度を読取る。ＭＴＳ試薬添加の直前に既知細胞数から懸濁培養細胞の標準曲線を作成する。代謝活性細胞はＭＴＳをホルマザンに還元する。ホルマザンは４９０ｎｍにて吸収する。化合物の存在下の４９０ｎｍの吸光度と化合物を加えない細胞中の吸光度とを比較する。
【０２４７】
参考文献：Ｃｏｒｙ，Ａ．Ｈ．ら，“Ｕｓｅ ｏｆ ａｎ ａｑｕｅｏｕｓ ｓｏｌｕｂｌｅ ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ／ｆｏｒｍａｚａｎ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ｃｅｌｌ ｇｒｏｗｔｈ ａｓｓａｙｓ ｉｎ ｃｕｌｔｕｒｅ，”Ｃａｎｃｅｒ Ｃｏｍｍｕｎ．３：２０７（１９９１）。
【０２４８】
他のＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスに対する本発明の化合物の活性を測定するために以下のアッセイを使用することができる。
【０２４９】
ａ．ライノウイルスに対する化合物のインビトロ抗ウイルス活性の測定（細胞変性効果阻害アッセイ）：
アッセイ条件はＳｉｄｗｅｌｌとＨｕｆｆｍａｎの論文“Ｕｓｅ ｏｆ ｄｉｓｐｏｓａｂｌｅ ｍｉｃｒｏｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｐｌａｔｅｓ ｆｏｒ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｎｄ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｓｔｕｄｉｅｓ，”Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．２２：７９７−８０１（１９７１）に記載されている。
【０２５０】
ウイルス：
Ｓｉｄｗｅｌｌ及びＨｕｆｆｍａｎの文献に記載されているようなＫＢ細胞及び培地（０．１％ＮａＨＣＯ３，抗生物質不含）と共に２型ライノウイルス（ＲＶ−２）ＨＧＰ株を使用する。前記ウイルスは、ＡＴＣＣから入手し、軽度急性発熱性上気道疾患の成人男子の咽頭スワブに由来する。９型ライノウイルス（ＲＶ−９）２１１株及び１４型ライノウイルス（ＲＶ−１４）Ｔｏｗ株もＲｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤに所在のＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から入手する。ＲＶ−９はヒト咽頭うがい液に由来し、ＲＶ−１４は上気道疾患の若年成人の咽頭スワブに由来する。これらの両者ウイルスはヒト子宮頸部上皮癌細胞であるＨｅＬａ Ｏｈｉｏ−１細胞（Ｄｒ．Ｆｒｅｄ Ｈａｙｄｅｎ，Ｕｎｉｖ．ｏｆ ＶＡ）と併用する。５％胎仔ウシ血清（ＦＢＳ）と０．１％ＮａＨＣＯ３を添加したＭＥＭ（イーグル最少必須培地）を増殖培地として使用する。全３種のウイルス型の抗ウイルス試験培地は５％ＦＢＳ，０．１％ＮａＨＣＯ３，ゲンタマイシン５０μｇ／ｍＬ，及び１０ｍＭ ＭｇＣｌ２を添加したＭＥＭとした。
【０２５１】
本発明の化合物をアッセイするために使用した最高濃度は２０００μｇ／ｍＬである。試験化合物の約５分後にウイルスをアッセイプレートに添加した。適正な対照も試験する。アッセイプレートを加湿空気と５％ＣＯ２下に３７℃で温置する。形態変化の顕微鏡試験により対照細胞における細胞毒性を観察する。ウイルスＣＰＥデータと毒性対照データの回帰分析により、ＥＤ５０（５０％有効用量）及びＣＣ５０（５０％細胞毒性濃度）を求める。式：ＳＩ＝ＣＣ５０÷ＥＤ５０により選択性指数（ＳＩ）を計算する。
【０２５２】
ｂ．デング、バンジ及び黄熱病に対する化合物のインビトロ抗ウイルス活性の測定（ＣＰＥ阻害アッセイ）
アッセイの詳細は上記ＳｉｄｗｅｌｌとＨｕｆｆｍａｎの文献に記載されている。
【０２５３】
ウイルス：
２型デングウイルスニューギニア株を疾病対策センターから入手する。２種類のアフリカミドリザル腎細胞株を使用してウイルス（ベロ）を培養し、抗ウイルス試験（ＭＡ−１０４）を実施する。感染マウス脳から作製された黄熱病ウイルス１７Ｄ株及び南アフリカの熱病少年の血清から単離されたバンジウイルスＨ３３６株の両株をＡＴＣＣから入手する。ベロ細胞をこれらのウイルスの両者と共にアッセイに使用する。
【０２５４】
細胞及び培地：
ＭＡ−１０４細胞（ＢｉｏＷｈｉｔｔａｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｗａｌｋｅｒｓｖｉｌｌｅ，ＭＤ）及びベロ細胞（ＡＴＣＣ）は５％ＦＢＳと０．１％ＮａＨＣＯ３を添加した抗生物質不含培地１９９中にて使用する。
【０２５５】
デング、黄熱病及びバンジウイルスのアッセイ培地は２％ＦＢＳ，０．１８％ＮａＨＣＯ３及びゲンタマイシン５０μｇ／ｍＬを添加したＭＥＭとする。
【０２５６】
本発明の化合物の抗ウイルス試験をＳｉｄｗｅｌｌとＨｕｆｆｍａｎの文献に従って上記ライノウイルス抗ウイルス試験と同様に実施する。５〜６日後にこれらのウイルスの各々で十分な細胞変性効果（ＣＰＥ）読取値が得られる。
【０２５７】
ｃ．西ナイルウイルスに対する化合物のインビトロ抗ウイルス活性の測定（ＣＰＥ阻害アッセイ）
アッセイの詳細は上記Ｓｉｄｗｅｌｌ及びＨｕｆｆｍａｎの文献に記載されている。カラス脳に由来する西ナイルウイルスニューヨーク株を疾病対策センターから入手する。ベロ細胞を上記のように増殖させ、使用する。試験培地は１％ＦＢＳ，０．１％ＮａＨＣＯ３及びゲンタマイシン５０μｇ／ｍＬを添加したＭＥＭとする。
【０２５８】
本発明の化合物の抗ウイルス試験をライノウイルス活性をアッセイするために使用した方法と同様のＳｉｄｗｅｌｌとＨｕｆｆｍａｎの方法に従って実施することができる。５〜６日後に十分な細胞変性効果（ＣＰＥ）読取値が得られる。
【０２５９】
ｄ．ライノ、黄熱病、デング、バンジ及び西ナイルウイルスに対する化合物のインビトロ抗ウイルス活性の測定（ニュートラルレッド取込みアッセイ）
上記ＣＰＥ阻害アッセイの実施後に、“Ｍｉｃｒｏｔｉｔｅｒ Ａｓｓａｙ ｆｏｒ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ：Ｍｉｃｒｏｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ Ｅｆｆｅｃｔ，”Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．３１：３５−３８（１９７６）に記載されている別の細胞変性検出法を使用することができる。モデルＥＬ３０９マイクロプレートリーダー（Ｂｉｏ−Ｔｅｋ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｉｎｃ．）を使用してアッセイプレートを読取る。上記のようにＥＤ５０とＣＤ５０を計算する。
【０２６０】
（医薬製剤の実施例）
本発明の化合物の経口組成物の一特定態様として、総量５８０〜５９０ｍｇとするに十分な微粉状ラクトース及び実施例１又は実施例２の化合物５０ｍｇを配合し、サイズ０ハードゼラチンカプセルに充填することができる。
【０２６１】
以上、特定態様に関して本発明を記載及び例示したが、当業者に自明の通り、発明の精神と範囲を逸脱せずに種々の変更、変形及び置換が可能である。例えば、治療するヒトの応答はＨＣＶ感染症の重篤度により異なるので、上記のような好適用量以外の有効用量も適用可能である。同様に、観察される薬理応答は選択する特定活性化合物又は医薬キャリヤーの有無や、製剤の型及び使用する投与方法により変動する可能性があり、予想される結果のこのような変動又は相違は本発明の目的と実施に従って予測される。従って、本発明は以下の特許請求の範囲のみに限定され、特許請求の範囲は妥当な範囲で広義に解釈すべきである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造式Ｉ：
【化４７】
［式中、
Ｂは
【化４８】
であり、上記式中、アステリスク（＊）は化合物の残余との結合点を表し；
ｎは０、１又は２であり；
Ｘは結合又はＯであり；
Ａｒはフェニル、ナフチル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、インドリル、キノリニル又はイソキノリニルであり、Ａｒは場合によりハロゲン、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、シアノ、ニトロ、アミノ、カルボキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルキルカルボニル、Ｃ１−４アルキルカルボニルオキシ及びＣ１−４アルキルオキシカルボニルから構成される群から独立して選択される１〜５個の置換基で置換されており；
Ｒ１は水素、メチル又はフルオロメチルであり；
Ｒ２はフルオロ又はＯＲ１０であり；
Ｒ３は水素、Ｃ１−１６アルキルカルボニル、Ｃ２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ１−１０アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルオキシカルボニル及び構造式：
【化４９】
のアミノアシル残基から構成される群から選択され；
Ｒ１０は水素、メチル、Ｃ１−１６アルキルカルボニル、Ｃ２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ１−１０アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルオキシカルボニル及び構造式：
【化５０】
のアミノアシル残基から構成される群から選択され；
あるいはＲ３とＲ１０はこれらが結合している酸素原子と一緒になって５員環状カーボネート又はアセトニドを形成し；
Ｒ４は水素、Ｃ１−６アルキル、フェニル又はベンジルであり；前記アルキルは場合によりフッ素、ヒドロキシ、メトキシ、アミノ、カルボキシ、カルバモイル、グアニジノ、メルカプト、メチルチオ、１Ｈ−イミダゾリル及び１Ｈ−インドール−３−イルから構成される群から選択される１個の置換基で置換されており；前記フェニル及びベンジルは場合によりハロゲン、ヒドロキシ及びメトキシから構成される群から独立して選択される１〜２個の置換基で置換されており；
Ｒ５は水素又はＣ１−３アルキルであり；
あるいはＲ４とＲ５はこれらが結合している炭素原子と一緒になって３〜６員脂肪族スピロ環状環系を形成し；
Ｒ６はＣ１−１６アルキル、Ｃ２−２０アルケニル、（ＣＨ２）ｎＣ３−６シクロアルキル、フェニル、ベンジル又はアダマンチルであり；前記アルキル、アルケニル、シクロアルキル及びアダマンチルは場合によりアミノ、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ及びＣ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されており；前記フェニル及びベンジルは場合によりハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、Ｃ１−４アルコキシ、トリフルオロメチル及びトリフルオロメトキシから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されており；
Ｒ７は水素、Ｃ１−５アルキル又はフェニルＣ０−２アルキルであり；
Ｒ８は水素、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アシル、ベンゾイル、Ｃ１−４アルキルオキシカルボニル、フェニルＣ０−２アルキルオキシカルボニル、Ｃ１−４アルキルアミノカルボニル、フェニルＣ０−２アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−４アルキルスルホニル又はフェニルＣ０−２アルキルスルホニルであり；
Ｒ９は水素、Ｃ１−８アルキルカルボニル又はＣ１−８アルキルオキシカルボニルであり；
Ｒ１１は水素又はＣ１−３アルキルであり；
あるいはＲ１１はＲ１３と一緒になって式：
【化５１】
の環を形成し；
Ｒ１２は水素又はＣ１−３アルキルであり；
Ｒ１３は水素又はＣ１−３アルキルであり；
Ｒ１４は水素、Ｃ１−８アルキル又はＣ１−８アルキルカルボニルである。］の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項２】
化合物が式Ｉ−Ａ：
【化５２】
の化合物である、請求項１に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項３】
化合物が式Ｉ−Ｂ１：
【化５３】
の化合物である、請求項１に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項４】
Ｒ３が水素、Ｃ１−１６アルキルカルボニル、Ｃ２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ１−１０アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルオキシカルボニル及び構造式：
【化５４】
のアミノアシル残基から構成される群から選択され；
Ｒ１０が水素、メチル、Ｃ１−１６アルキルカルボニル、Ｃ２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ１−１０アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルオキシカルボニル及び構造式：
【化５５】
のアミノアシル残基から構成される群から選択され；
あるいはＲ３とＲ１０がこれらが結合している酸素原子と一緒になって５員環状カーボネートを形成し；
Ｒ１１が水素又はＣ１−３アルキルである、
請求項２に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項５】
Ｒ１がメチル又はフルオロメチルであり、Ｒ２がヒドロキシであり、Ｒ３が水素である、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項６】
Ｒ１がメチルである、請求項５に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項７】
Ｒ１がメチル又はフルオロメチルであり、Ｒ２がフルオロであり、Ｒ３が水素である、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項８】
Ｒ１がメチルである、請求項７に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項９】
Ｘが結合である、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１０】
Ａｒが場合によりハロゲン、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、シアノ、ニトロ、アミノ、カルボキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルキルカルボニル、Ｃ１−４アルキルカルボニルオキシ及びＣ１−４アルキルオキシカルボニルから構成される群から独立して選択される１〜５個の置換基で置換されたフェニルである、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１１】
Ａｒが未置換のフェニルである、請求項１０に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１２】
Ａｒがインドリルである、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１３】
Ａｒが１Ｈ−インドール−５−イルである、請求項１２に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１４】
Ｒ５、Ｒ１１及びＲ１２が各々水素であり、Ｒ４が水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、イソブチル、ｎ−ブチル、２−メチル−１−プロピル、ヒドロキシメチル、フルオロメチル、メルカプトメチル、カルボキシメチル、カルバモイルメチル、１−ヒドロキシエチル、２−カルボキシエチル、２−カルバモイルエチル、２−メチルチオエチル、４−アミノ−１−ブチル、３−アミノ−１−プロピル、３−グアニジノ−１−プロピル、１Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル、フェニル、ベンジル、４−ヒドロキシベンジル及び１Ｈ−インドール−３−イルメチルから構成される群から選択される、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１５】
Ｒ４がメチル又はベンジルである、請求項１４に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１６】
Ｘが結合であり、Ｒ６がＣ１−８アルキル、シクロヘキシル又はシクロペンチルである、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１７】
Ｒ６がＣ１−４アルキルである、請求項１６に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１８】
Ｘが結合であり、Ａｒがフェニルであり、Ｒ４がメチル又はベンジルであり、Ｒ６がＣ１−４アルキルであり、Ｒ５、Ｒ１１及びＲ１２は各々水素である、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１９】
Ｒ１がメチルであり、Ｒ２がヒドロキシであり、Ｒ３が水素である、請求項１８に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項２０】
化合物が式ＩＩ−Ａ：
【化５６】
の化合物である、請求項３に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項２１】
化合物が式ＩＩ−Ｂ：
【化５７】
の化合物である、請求項２０に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項２２】
化合物が式ＩＩＩ：
【化５８】
［式中、
Ｒ３はＨであり；
Ｒ１０はＨであり；
あるいはＲ３とＲ１０はこれらが結合している酸素原子と一緒になってアセトニドを形成し；
Ｒ４はＨ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３又はベンジルであり；
Ｒ６はメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）２、３−ペンチル、シクロペンチル、シクロヘプチル又はフェニルであり；
Ｒ１１はＨ又はＣＨ３であり；
Ｒ１３は水素又はＣＨ３であり；
あるいは、Ｒ４がＨであるとき、Ｒ１１とＲ１３は一緒になって式：
【化５９】
の環を形成する。］の化合物である、請求項１に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項２３】
実施例１〜２２の標記化合物とその医薬的に許容可能な塩から構成される群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項２４】
請求項１から２３のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩及び医薬的に許容可能なキャリヤーを含有する医薬組成物。
【請求項２５】
哺乳動物におけるＣ型肝炎ウイルス感染症の治療用としての、請求項１から２３のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩の使用。
【請求項２６】
哺乳動物におけるＣ型肝炎ウイルス感染症の治療用医薬の製造における、請求項１から２３のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩の使用。
【請求項１】
構造式Ｉ：
【化４７】
［式中、
Ｂは
【化４８】
であり、上記式中、アステリスク（＊）は化合物の残余との結合点を表し；
ｎは０、１又は２であり；
Ｘは結合又はＯであり；
Ａｒはフェニル、ナフチル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、インドリル、キノリニル又はイソキノリニルであり、Ａｒは場合によりハロゲン、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、シアノ、ニトロ、アミノ、カルボキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルキルカルボニル、Ｃ１−４アルキルカルボニルオキシ及びＣ１−４アルキルオキシカルボニルから構成される群から独立して選択される１〜５個の置換基で置換されており；
Ｒ１は水素、メチル又はフルオロメチルであり；
Ｒ２はフルオロ又はＯＲ１０であり；
Ｒ３は水素、Ｃ１−１６アルキルカルボニル、Ｃ２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ１−１０アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルオキシカルボニル及び構造式：
【化４９】
のアミノアシル残基から構成される群から選択され；
Ｒ１０は水素、メチル、Ｃ１−１６アルキルカルボニル、Ｃ２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ１−１０アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルオキシカルボニル及び構造式：
【化５０】
のアミノアシル残基から構成される群から選択され；
あるいはＲ３とＲ１０はこれらが結合している酸素原子と一緒になって５員環状カーボネート又はアセトニドを形成し；
Ｒ４は水素、Ｃ１−６アルキル、フェニル又はベンジルであり；前記アルキルは場合によりフッ素、ヒドロキシ、メトキシ、アミノ、カルボキシ、カルバモイル、グアニジノ、メルカプト、メチルチオ、１Ｈ−イミダゾリル及び１Ｈ−インドール−３−イルから構成される群から選択される１個の置換基で置換されており；前記フェニル及びベンジルは場合によりハロゲン、ヒドロキシ及びメトキシから構成される群から独立して選択される１〜２個の置換基で置換されており；
Ｒ５は水素又はＣ１−３アルキルであり；
あるいはＲ４とＲ５はこれらが結合している炭素原子と一緒になって３〜６員脂肪族スピロ環状環系を形成し；
Ｒ６はＣ１−１６アルキル、Ｃ２−２０アルケニル、（ＣＨ２）ｎＣ３−６シクロアルキル、フェニル、ベンジル又はアダマンチルであり；前記アルキル、アルケニル、シクロアルキル及びアダマンチルは場合によりアミノ、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ及びＣ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されており；前記フェニル及びベンジルは場合によりハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、Ｃ１−４アルコキシ、トリフルオロメチル及びトリフルオロメトキシから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されており；
Ｒ７は水素、Ｃ１−５アルキル又はフェニルＣ０−２アルキルであり；
Ｒ８は水素、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アシル、ベンゾイル、Ｃ１−４アルキルオキシカルボニル、フェニルＣ０−２アルキルオキシカルボニル、Ｃ１−４アルキルアミノカルボニル、フェニルＣ０−２アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−４アルキルスルホニル又はフェニルＣ０−２アルキルスルホニルであり；
Ｒ９は水素、Ｃ１−８アルキルカルボニル又はＣ１−８アルキルオキシカルボニルであり；
Ｒ１１は水素又はＣ１−３アルキルであり；
あるいはＲ１１はＲ１３と一緒になって式：
【化５１】
の環を形成し；
Ｒ１２は水素又はＣ１−３アルキルであり；
Ｒ１３は水素又はＣ１−３アルキルであり；
Ｒ１４は水素、Ｃ１−８アルキル又はＣ１−８アルキルカルボニルである。］の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項２】
化合物が式Ｉ−Ａ：
【化５２】
の化合物である、請求項１に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項３】
化合物が式Ｉ−Ｂ１：
【化５３】
の化合物である、請求項１に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項４】
Ｒ３が水素、Ｃ１−１６アルキルカルボニル、Ｃ２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ１−１０アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルオキシカルボニル及び構造式：
【化５４】
のアミノアシル残基から構成される群から選択され；
Ｒ１０が水素、メチル、Ｃ１−１６アルキルカルボニル、Ｃ２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ１−１０アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−６シクロアルキルオキシカルボニル及び構造式：
【化５５】
のアミノアシル残基から構成される群から選択され；
あるいはＲ３とＲ１０がこれらが結合している酸素原子と一緒になって５員環状カーボネートを形成し；
Ｒ１１が水素又はＣ１−３アルキルである、
請求項２に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項５】
Ｒ１がメチル又はフルオロメチルであり、Ｒ２がヒドロキシであり、Ｒ３が水素である、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項６】
Ｒ１がメチルである、請求項５に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項７】
Ｒ１がメチル又はフルオロメチルであり、Ｒ２がフルオロであり、Ｒ３が水素である、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項８】
Ｒ１がメチルである、請求項７に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項９】
Ｘが結合である、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１０】
Ａｒが場合によりハロゲン、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、シアノ、ニトロ、アミノ、カルボキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルキルカルボニル、Ｃ１−４アルキルカルボニルオキシ及びＣ１−４アルキルオキシカルボニルから構成される群から独立して選択される１〜５個の置換基で置換されたフェニルである、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１１】
Ａｒが未置換のフェニルである、請求項１０に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１２】
Ａｒがインドリルである、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１３】
Ａｒが１Ｈ−インドール−５−イルである、請求項１２に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１４】
Ｒ５、Ｒ１１及びＲ１２が各々水素であり、Ｒ４が水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、イソブチル、ｎ−ブチル、２−メチル−１−プロピル、ヒドロキシメチル、フルオロメチル、メルカプトメチル、カルボキシメチル、カルバモイルメチル、１−ヒドロキシエチル、２−カルボキシエチル、２−カルバモイルエチル、２−メチルチオエチル、４−アミノ−１−ブチル、３−アミノ−１−プロピル、３−グアニジノ−１−プロピル、１Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル、フェニル、ベンジル、４−ヒドロキシベンジル及び１Ｈ−インドール−３−イルメチルから構成される群から選択される、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１５】
Ｒ４がメチル又はベンジルである、請求項１４に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１６】
Ｘが結合であり、Ｒ６がＣ１−８アルキル、シクロヘキシル又はシクロペンチルである、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１７】
Ｒ６がＣ１−４アルキルである、請求項１６に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１８】
Ｘが結合であり、Ａｒがフェニルであり、Ｒ４がメチル又はベンジルであり、Ｒ６がＣ１−４アルキルであり、Ｒ５、Ｒ１１及びＲ１２は各々水素である、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１９】
Ｒ１がメチルであり、Ｒ２がヒドロキシであり、Ｒ３が水素である、請求項１８に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項２０】
化合物が式ＩＩ−Ａ：
【化５６】
の化合物である、請求項３に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項２１】
化合物が式ＩＩ−Ｂ：
【化５７】
の化合物である、請求項２０に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項２２】
化合物が式ＩＩＩ：
【化５８】
［式中、
Ｒ３はＨであり；
Ｒ１０はＨであり；
あるいはＲ３とＲ１０はこれらが結合している酸素原子と一緒になってアセトニドを形成し；
Ｒ４はＨ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３又はベンジルであり；
Ｒ６はメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）２、３−ペンチル、シクロペンチル、シクロヘプチル又はフェニルであり；
Ｒ１１はＨ又はＣＨ３であり；
Ｒ１３は水素又はＣＨ３であり；
あるいは、Ｒ４がＨであるとき、Ｒ１１とＲ１３は一緒になって式：
【化５９】
の環を形成する。］の化合物である、請求項１に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
【請求項２３】
実施例１〜２２の標記化合物とその医薬的に許容可能な塩から構成される群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項２４】
請求項１から２３のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩及び医薬的に許容可能なキャリヤーを含有する医薬組成物。
【請求項２５】
哺乳動物におけるＣ型肝炎ウイルス感染症の治療用としての、請求項１から２３のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩の使用。
【請求項２６】
哺乳動物におけるＣ型肝炎ウイルス感染症の治療用医薬の製造における、請求項１から２３のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩の使用。
【公表番号】特表２０１０−５１５６８０（Ｐ２０１０−５１５６８０Ａ）
【公表日】平成２２年５月１３日（２０１０．５．１３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５４４８６０（Ｐ２００９−５４４８６０）
【出願日】平成１９年１２月２８日（２００７．１２．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０２６４６８
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０８５５０８
【国際公開日】平成２０年７月１７日（２００８．７．１７）
【出願人】（３９００２３５２６）メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション (924)
【出願人】（５０１２０９４２７）イステイチユート・デイ・リチエルケ・デイ・ビオロジア・モレコラーレ・ピ・アンジエレツテイ・エツセ・ピー・アー (90)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年５月１３日（２０１０．５．１３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年１２月２８日（２００７．１２．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０２６４６８
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０８５５０８
【国際公開日】平成２０年７月１７日（２００８．７．１７）
【出願人】（３９００２３５２６）メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション (924)
【出願人】（５０１２０９４２７）イステイチユート・デイ・リチエルケ・デイ・ビオロジア・モレコラーレ・ピ・アンジエレツテイ・エツセ・ピー・アー (90)
【Ｆターム（参考）】
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