【課題】肺水腫の効果的で、そして特異的な治療法の提供。
【解決手段】αｖβ５インテグリン拮抗剤を投与する。該拮抗剤は、ヒト化抗体、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、または（Ｆａｂ’）２を含めた抗体または抗体フラグメントでありうる。

【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願に対する関連文献
本出願は、２００４年４月２日に出願された米国特許仮出願番号第６０／５５９，１７５号の利益を主張し、その開示は、全ての目的のためにここにその全体を参照により組み込む。
【０００２】
連邦政府に支援された研究および開発の下になされた発明に対する権利のための供述
本発明は、国立公衆衛生研究所により授与された認可番号ＨＬ５３９４９号の下に政府支援で行われた。政府は、本発明に所定の権利を有する。
【背景技術】
【０００３】
肺水腫（「ＰＥ」）は、毎年、数百万の人々に影響を及ぼし、そして実質的な罹患および死亡を引起す。ＰＥ患者では、肺胞が肺の毛細血管からの液体であふれ、このことは全身循環への酸素運搬を危険にさらすことになる（非特許文献１）。一連の事象は、低酸素血症、高炭酸ガス血症を起こし、および適切な処置が取られない場合には死に至る。
【０００４】
肺における液体ホメオスタシスを破壊するあらゆる症状および薬剤は、大まかに、心臓性または非心原性PEに分けられうるＰＥを生じうる（例えば、非特許文献２を参照）。例えば、肺炎、敗血性ショック、外傷、嘔吐物の吸引、または化学吸引による、肺損傷の結果として発生しうる、例えば、急性肺損傷／成人（急性）呼吸窮迫症候群すなわち「ＡＲＤＳ」は、しばしば、非心原性PEに関連する。非心原性PEは、肺組織の血管透過性における変化によって特徴づけられ、そしてそれは、肺における液体レベルの増加を導く。心原性PEは、しばしば、左側の心不全により引起され、および心臓発作、心臓弁（僧帽弁または大動脈弁）の漏出または狭窄、または心筋の衰弱および／または硬化のいずれかを生じる心臓のいずれかの疾患（心筋症）の合併症である場合もある。心不全は、増加した圧力を、肺静脈に伝播する。肺静脈における圧力が上昇すると、液体は、空気空間（肺胞）中に押し出される。この液体は、その後、正常な酸素交換に対する障害となり、そして息切れを生じさせる。心原性PEは、肺の液体レベルの増加を導く毛細血管静水圧が増加することによって特徴づけられる。
【０００５】
ＰＥは、例えば、毛細管透過性の変化；感染；吸入したまたは循環している毒素；血管活性物質（例えば、ヒスタミン、キニン）；播種性血管内凝固；免疫学的反応；放射線関連肺炎；尿毒症；溺死寸前；煙の吸入；および急性呼吸窮迫症候群；左心室不全；僧帽弁狭窄；細菌性心内膜症状；肺静脈線維症；肺静脈の起点の先天性的狭窄；肺静脈の閉塞性疾患；液体の過剰注入；低アルブミン血症（例えば、腎性、肝性、栄養、またはたんぱく喪失性腸症から）；高い高度；薬剤過剰投与、ＣＮＳ外傷、クモ膜下出血、肺塞栓症、肺実質疾患、子癇、麻酔、および心肺バイパス手術によって引起される。
【０００６】
ＰＥの徴候としては、例えば、息切れ、速いおよび／または苦しい呼吸、頻拍、高血圧、胸苦しさ、チアノーゼを伴うか、または伴わない冷たい四肢、泡状またはピンク色の痰を伴う咳、呼吸補助筋の過度の使用、ぜん鳴を伴うかまたは伴わない湿ったラ音、およびそれらの組合せが挙げられる。ＰＥを診断する試験は、完全血球算定（ＣＢＣ）、血中尿素窒素（ＢＵＮ）、クレアチニン、および血清タンパク質などの血液試験が挙げられる。尿検査、動脈血液ガス（ＡＢＧ）、胸部Ｘ線、および心電図（ＥＣＧ）、および医師が、診断をＰＥに絞る上で支援するためのすべてが使用される。
【０００７】
心原性PEの治療は、通常、患者を１００％酸素下に置くこと、不安を軽くし、そしてある程度有益な心臓の効果を供するモルヒネ、利尿のためのフロセミド、心筋が送りださなければならない仕事に反する仕事を減らす血管拡張剤、および心臓収縮能を増加させるドプタミン（doputamine）などの変力剤を含む。使用されてきた他の方法は、４つのうちの３つの四肢にした駆血帯を交代して血液量を５００ｍｌ減少させることである。
【非特許文献１】Ｈａｌｌら、ＣＵＲＲＥＮＴ ＴＨＥＲＡＰＹ ＩＮ ＲＥＳＰＩＲＡＴＯＲＹ ＭＥＤＩＣＩＮＥ（Ｒ．Ｃｈｅｒｎｉａｃｋ編、１９８６年)、２２２−２２７頁
【非特許文献２】ＫａｋｏｕｒｏｓおよびＫａｋｏｕｒｏｓ、Ｈｅｌｌｅｎｉｃ Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｌ４４巻：３８５−３９１頁（２００３年）。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
残念ながら、ＰＥについての特異的なまたは満足ゆくまで有効な治療で、利用可能なものはない。したがって、当業界においては、ＰＥについていっそう効果的で、そして特異的な治療法についての必要性がある。本発明は、このおよび他の問題を指向する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、ＰＥなどのαｖβ５インテグリンに関与する疾患を治療または予防するための組成物および方法を提供する。
【００１０】
本発明の１つの実施態様は、哺乳類対象（例えば、ヒト、サルまたはチンパンジーのような霊長類；イヌ科動物またはネコ科動物）におけるＰＥを治療または予防する方法を提供する。
αｖβ５インテグリンの拮抗剤の治療量または予防量を、その対象に投与する。拮抗剤は、例えば、１ｋＤａ未満、０．５ｋＤａ未満、または０．２５ＫＤａ未満の剤でありうる。拮抗剤は、ヒト化抗体、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、または（Ｆａｂ’）２を含めた抗体または抗体フラグメントでありうる。抗体は、ＡＬＵＬＡ、ヒト化ＡＬＵＬＡであり得るか、またはαｖβ５インテグリンに対する特異的結合についてＡＬＵＬＡと競合しうる。投与は、それに限定されないが、静脈内、鼻腔内、または気管支内でありうる。本発明の方法は、ＰＥを有するか、またはＰＥを発現する危険のある個体を治療するために有用である。急性肺損傷および／またはＡＲＤＳおよびまたはＰＥを治療または予防するための第2の治療剤を、対象に投与してもよく、そしてそれに限定されないが、例えば、ＴＧＦβ経路阻害剤、活性化プロテインＣ、ステロイド、ＧＭ−ＣＳＦ、利尿剤、気管支拡張剤、血小板阻害剤、αｖβ５インテグリンに結合する抗体、β５に結合する抗体、αｖβ５インテグリンの第2の拮抗剤、αｖβ６インテグリンの拮抗剤、β２作動薬、または界面活性剤が挙げられる。
【００１１】
本発明の別の実施態様は、αｖβ５インテグリンに対する結合についてＡＬＵＬＡと特異的に競合する抗体を提供する。この実施態様の抗体は、ＡＬＵＬＡそれ自身、ヒト化ＡＬＵＬＡ；例えばＡＬＵＬＡのｓｃＦｖ、Ｆａｂおよび（Ｆａｂ’）2を含めたＡＬＵＬＡのフラグメント、またはαｖβ５インテグリンに対する結合についてＡＬＵＬＡと競合する別の抗体でありうる。本発明は、このような抗体および薬学上許容しうる賦形剤を含む医薬組成物も提供する。医薬組成物は、ＰＥを治療または予防する第2の治療剤（例えば、ＴＧＦβ経路阻害剤、活性化プロテインＣ、ステロイド、ＧＭ−ＣＳＦ、血小板阻害剤、利尿剤、気管支拡張剤、αｖβ５インテグリンに結合する抗体、β５に結合する抗体、αｖβ５インテグリンの第2の拮抗剤、およびαｖβ６インテグリンの拮抗剤）をさらに含んでもよい。または、医薬組成物は、脳梗塞、心筋梗塞、および癌（すなわち、新脈管形成）の治療剤を含めてもよい。
【００１２】
本発明の別の実施態様は、ＰＥを治療するための剤を同定する方法を提供する。いくつかの実施態様では、その方法は、複数の剤をαｖβ５インテグリンと接触させること、αｖβ５インテグリンに対するリガンドの結合に競合する剤を選択すること、およびＰＥにおける選択剤の効果を決定することを含む。ＰＥにおける効果を示す剤は、ＰＥを治療するための剤として認められる。複数の剤は、複数の抗体でありうるか、または１ＫＤａより下でありうる。リガンドは、例えばＡＬＵＬＡを含めた抗体でありうるか、またはビトロネクチン、フィブロネクチン、オステオポンチン、テネイシンCおよびアデノウイルス
ペントンベースでありうる。
【００１３】
本発明の別の実施態様は、ＰＥを治療または予防するためのキットを提供する。キットは、αｖβ５インテグリンの拮抗剤（例えば、ＡＬＵＬＡを含めたモノクローナル抗体、およびαｖβ５インテグリンに対する結合についてＡＬＵＬＡと競合する抗体）および肺水腫を治療するための第2の治療剤（例えば、ＴＧＦβ経路阻害剤、活性化プロテインＣ、ステロイド、ＧＭ−ＣＳＦ、血小板阻害剤、利尿剤、気管支拡張剤、αｖβ５インテグリンに結合する抗体、β５に結合する抗体、αｖβ５インテグリンの第2の拮抗剤、αｖβ６インテグリンの拮抗剤、β２作動薬、または界面活性剤を含む。
【００１４】
本発明のこれらおよび他の実施態様は、続く詳細な説明によってさらに例示される。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】β５^-/-マウスが、肺損傷で誘発されるＰＥから保護されることを示すインビボ実験からの結果を示す。
【図２】β５に特異的に結合する抗体（すなわち、ＡＬＵＬＡ）が、虚血灌流で誘発されたＰＥの重篤度を減じることを示すインビボ実験からの結果を示す。
【図３】β５に特異的に結合する抗体（すなわち、ＡＬＵＬＡ）が、多量の呼気量換気からの肺損傷により誘発される重篤度を減じることを示すインビボ実験からの結果を示す。
【図４】β５に特異的に結合する抗体（すなわち、ＡＬＵＬＡ）が、広範な濃度のαｖβ５インテグリン・リガンドであるビトロネクチンで被覆された皿に対する、αｖβ５インテグリンを発現する細胞の付着を遮断することを示すインビトロ実験からの結果を示す。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
Ｉ．導入
本発明は、αｖβ５インテグリンに結合する剤で、動物を処置することが、ＰＥの徴候を減らすという驚くべき知見に部分的に基づく。さらに詳細には、αｖβ５インテグリンに対するリガンドの結合を遮断することで、ＰＥの重篤度を減じることができる。本発明者らは、αｖβ５インテグリンに結合する抗体が、αｖβ５インテグリンのリガンドであるビトロネクチンの、αｖβ５インテグリンに対する結合を遮断することを示した。本発明者らは、αｖβ５インテグリンに結合する抗体の投与が、ＰＥの重篤度を減じることをさらに示した。したがって、本発明は、αｖβ５の拮抗剤の有効量を、対象に投与することによって、対象におけるＰＥを治療または予防する方法を提供する。
【００１７】
本発明は、「ＡＬＵＬＡ」と称される開示された抗体と競合する抗体、並びにそのような抗体を包含する医薬組成物も提供する。以下の実施例でさらに詳細に説明されるとおり、ＡＬＵＬＡは、αｖβ５インテグリンに結合し、そして哺乳類対象へのＡＬＵＬＡの投与は、対象におけるＰＥの重篤度を減じる。
【００１８】
本発明は、αｖβ５インテグリンと相互作用する剤を特定し、そしてＰＥを治療するそれらの能力についてそれらを試験することによって、ＰＥの治療のための新たな剤を特定する方法も提供する。
【００１９】
ＩＩ．定義
「αｖβ５拮抗剤」は、αｖβ５インテグリン上の利用可能なリガンド結合部位についてαｖβ５リガンドと競合するあらゆる剤である。αｖβ５拮抗剤としては、αｖβ５、β５に特異的に結合する剤、並びに、αｖβ５またはβ５および例えばαｖβ３またはαｖβ６などの少なくとも１つの他のインテグリンに結合する剤が挙げられる。
【００２０】
αｖβ５インテグリンは、中でも細胞−細胞相互作用、細胞−細胞外マトリックス相互作用、および細胞−病原体相互作用を介在する非共有的に結合したα／βヘテロダイマーを含む接着分子のファミリーの一員である。αｖβ５は、β５サブユニットを含有する唯一のインテグリンである。αｖβ５は、ＲＧＤペプチド配列を認識し、そしてビトロネクチンに結合し（例えば、Ｈｙｎｅｓ、Ｃｅｌｌ６９巻：１１−２５頁（１９９２年）を参照）、そして脳梗塞、心筋梗塞、癌（すなわち、新脈管形成）、および眼の新生脈管形成疾患を含めた複数の障害にかかわってきた（例えば、Ｆｒｉｅｄｌａｎｄｅｒら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７０巻（５２４１）：１５００−２頁（１９９５年）；Ｆｒｉｅｄｌａｎｄｅｒら、ＰＮＡＳ ＵＳＡ ９３巻（１８）：９７６４−９頁（１９９６年）；Ｅｌｉｃｉｅｒｉら、Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ． １５７巻（１０：１４９−１５９頁（２００２年）；Ｈｅｂａら、Ｊ．Ｖａｓｃ．Ｒｅｓ．３８巻（３）：２８８−３００頁（２００１年）；Ｓｏｅｋｉら、Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ ９３巻（３）：１６８−７４頁（２０００年）；およびＬｉら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２７０巻（５Ｐｔ２）：Ｈ１８０３−１１（１９９６年）を参照）。αｖおよびβ５は、両方とも、配列決定および特徴づけされた（例えば、それぞれ、Ｈｙｎｅｓ、１９９２年上記、および米国特許第５，５２７，６７９号を参照）。
【００２１】
αｖβ５インテグリン拮抗剤の「治療上の用量」または「治療上有効な量」または「有効量」は、例えば、患者における脳梗塞、心筋梗塞、癌（すなわち新脈管形成）、眼の新生脈管形成疾患、およびＰＥ（例えば、肺での液体貯留、肺性毛細血管静水圧の増加、または息切れ）を含めたαｖβ５インテグリンに関連した疾患の徴候の重篤度を予防、緩和、軽減または減少させる拮抗剤の量である。
【００２２】
用語「抗体」は、抗原に特異的に結合し、認識する免疫グロブリン遺伝子またはそれの機能性フラグメントによりコードされたポリペプチドをいう。認識された免疫グロブリン遺伝子には、カッパ、ラムダ、アルファ、ガンマ、デルタ、イプシロン、およびミュー定常領域遺伝子、並びに無数の免疫グロブリン可変領域遺伝子が含まれる。軽鎖は、カッパまたはラムダのいずれかに分類される。重鎖は、ガンマ、ミュー、アルファ、デルタまたはイプシロンに分類され、そしてそれは、順に、それぞれ、免疫グロブリン分類ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤおよびＩｇＥを定義する。
【００２３】
典型的な免疫グロブリン（抗体）構造単位は、テトラマーを含む。各テトラマーは、２つの同一の対のポリペプチド鎖により構成され、そして各対は、１つの「軽」（約２５ｋＤａ）および１つの「重」鎖（約５０−７０ｋＤａ）を有する。各鎖のＮ末端は、抗原認識に主に関与する約１００から１１０までまたはそれより多くのアミノ酸の可変領域を規定する。したがって、用語「可変重鎖」、「Ｖ_H」または「ＶＨ」は、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖまたはＦａｂを含めた免疫グロブリン重鎖の可変領域をいい、用語「可変軽鎖」、「Ｖ_L」または「ＶＬ」は、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖまたはＦａｂを含めた免疫グロ
ブリン軽鎖の可変領域をいう。
【００２４】
抗体機能性フラグメントの例は、それに限定されないが、完全抗体分子、Ｆｖ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、相補性決定領域（ＣＤＲ）、ＶＬ（軽鎖可変領域）、ＶＨ（重鎖可変領域）、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ）２’およびそれらの、または標的抗原に結合する能力のある免疫グロブリン・ペプチドの機能性部分のいずれかの組合せ等の抗体フラグメントが挙げられる（例えば、ＦＵＮＤＡＭＥＮＴＡＬ ＩＭＭＵＮＯＬＯＧＹ（Ｐａｕｌ編、４版、２００１年を参照）。当業者に認識されるとおり、多様な方法、例えば、ペプシン等の酵素を用いた無傷の抗体の分解、またはデノボ合成により、種々の抗体フラグメントを得ることができる。抗体フラグメントは、しばしば、化学的、または組換えＤＮＡ手法を用いることによるかいずれかで、デノボに合成される。したがって、ここで使用される場合、用語「抗体」は、全抗体の修飾により生成される抗体フラグメントか、または組換えＤＮＡ手法を用いてデノボで合成されるもの（例えば、単鎖Ｆｖ）、またはファージディスプレイライブラリを用いて特定したもの（例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら（１９９０年）Ｎａｔｕｒｅ ３４８巻：５５２頁）のいずれかを含む。用語「抗体」は、二価の、または二重特異性分子、ジアボディー（diabodies）、トリアボディー（triabodies）、およびテトラボディー（tetrabodies）も含む。二価のおよび二重特異性分子は、例えば、Ｋｏｓｔｅｌｎｙら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８巻：１５４７頁（１９９２年）、ＰａｃｋおよびＰｌｕｃｋｔｈｕｎ、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３１巻：１５７９頁（１９９２年）、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒら、ＰＮＡＳ．ＵＳＡ ９０巻：６４４４頁（１９９３年）、Ｇｒｕｂｅｒら、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．：５３６８頁（１９９４年）、Ｚｈｕら、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉ．６巻：７８１頁（１９９７年）、Ｈｕら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５６巻：３０５５頁（１９９６年）、Ａｄａｍｓら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５３巻：４０２６頁（１９９３年）、およびＭｃＣａｒｔｎｅｙら、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．８巻：３０１頁（１９９５年）に記載されている。
【００２５】
「ヒト化」抗体は、ヒトにおける免疫原性が低いまま、非ヒト抗体の反応性を保持する抗体である。これは、例えば、非ヒトＣＤＲ領域を保持し、抗体の残りの部分を、それらのヒト対応物と置換することによって達成されうる。例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、ＰＮＡＳ ＵＳＡ ８１巻：６８５１−６８５５頁（１９８４年）；ＭｏｒｒｉｓｏｎおよびＯｉ、Ａｄｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、４４巻：６５−９２頁（１９８８年）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２３９巻：１５３４−１５３６頁（１９８８年）；Ｐａｄｌａｎ、Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎ．、２８巻：４８９−４９８頁（１９９１年）；Ｐａｄｌａｎ、Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎ．、３１巻（３）：１６９−２１７頁（１９９４年）を参照。
【００２６】
「単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）」または「単鎖抗体」は、ｓｃＦｖ抗体のＶ_HおよびＶ_L領域が、単鎖を有しており、この単鎖が折り返されて、2本鎖の抗体で見られるものに類似の抗原結合部位を作り出しているタンパク質をいう。ｓｃＦｖ抗体を作成する方法は、例えば、Ｗａｒｄら、Ｅｘｐ Ｈｅｍａｔｏｌ．（５）：６６０−４頁（１９９３年）；およびＶａｕｇｈａｎら、Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４巻（３）：３０９−１４頁（１９９６年）に記載されている。単鎖Ｆｖ（ｓｖＦｖ）抗体は、適宜、長さ５０個以内のアミノ酸、一般的には４０個以内のアミノ酸、好ましくは３０個以内のアミノ酸、さらに好ましくは２０個以内のアミノ酸のペプチド・リンカーを含む。いくつかの実施態様では、ペプチド・リンカーは、配列Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ、例えば２、３、４、５、または６配列の鎖状体（concatamer）である。しかし、リンカー内のいくつかのアミノ酸置換が作成できることが好ましい。例えば、バリンは、グリシンに置換できる。追加のペプチド・リンカーおよびその使用は、当業界でよく知られている。例えば、Ｈｕｓｔｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８巻：５８７９頁（１９８８年）；Ｂｉｒｄら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２巻：４２３６頁（１９８８年）；Ｇｌｏｃｋｓｈｕｂｅｒら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２９巻：１３６２頁（１９９０年）；米国特許番号第４，９４６，７７８号、米国特許番号第５，１３２，４０５号およびＳｔｅｍｍｅｒら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １４巻：２５６−２６５頁（１９９３年）を参照。
【００２７】
タンパク質またはペプチドに言及する場合、語句「抗体に特異的に（または選択的に）結合する」とは、タンパク質および他の生体物質の異種集団の存在下でタンパク質の存在を決定する結合反応をいう。したがって、指定されたイムノアッセイ条件下で、特異的抗体は、特定のタンパク質（例えば、αｖβ５インテグリン、β５、またはそれらの一部）に結合し、サンプル中に存在する他のタンパク質とは有意な量の結合をしない。このような条件下で、抗体に対する特異的結合は、特定のタンパク質に対する特異性について選択される抗体を必要としうる。例えば、αｖβ５インテグリンまたはβ５ポリペプチドに対する抗体は、そのタンパク質と特異的に免疫反応性を示すが他のタンパク質には示さない多型変異体を除く抗体を得るために選択することができる。例えばそのタンパク質は、当該の配列に少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％または９９％同一なタンパク質である。
【００２８】
多様なイムノアッセイ・フォーマットは、特定のタンパク質と特異的に免疫反応性である抗体を選択するために使用されうる。例えば、固相ＥＬＩＳＡイムノアッセイ、ウエスタン・ブロット、または免疫組織化学は、タンパク質と特異的に免疫反応性であるモノクローナル抗体を選択するために日常的に使用される。特異的免疫反応性を決定するために使用されうるイムノアッセイ・フォーマットおよび条件の説明についてはＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、コールド・スプリング・ハーバー・パブリケーションズ、ニューヨーク（ＮＹ）（１９８８年）を参照。通常は、特異的または選択的反応は、バックグランドシグナルまたはノイズの少なくとも2倍であり、通常はバックグランドの10から100倍を上回る。
【００２９】
結合について「特異的に競合する」剤は、ポリペプチドへの抗体の特異的結合を減じる。抗原に対する二次抗体の結合が、当業界で知られる競合結合アッセイのいずれかを使用して、一次抗体の存在下で、少なくとも３０％、通常には少なくとも約４０％、５０％、６０％または７５％まで、そしてしばしば、少なくとも約９０％まで減少される場合、一次抗体は、二次抗体の結合を競合的に阻害すると見なされる（例えば、ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ、上記を参照）。
【００３０】
用語「ポリペプチド」、「ペプチド」および「タンパク質」は、アミノ酸残基のポリマーを示すのとほとんど同じ意味で使用される。これらの用語は、１つまたはそれ以上のアミノ酸残基が、対応する天然に生じるアミノ酸の人為的な化学的擬態物であるアミノ酸ポリマー、並びに、天然に生じるアミノ酸ポリマーおよび非天然に生じるアミノ酸ポリマーに使用する。ここで使用される場合、これらの用語は、アミノ酸残基は共有ペプチド結合により連結されている、全長タンパク質（すなわち、抗原）を含めたあらゆる長さのアミノ酸鎖を包含する。
【００３１】
用語「アミノ酸」は、天然に生じる、および合成のアミノ酸、並びに、天然に生じるアミノ酸に類似の方法で機能するアミノ酸類似体およびアミノ酸擬態物をいう。天然に生じるアミノ酸は、遺伝子コードによってコードされるもの、並びに、後に修飾されるアミノ酸であり、例えば、ヒドロキシプロリン、γ−カルボキシグルタミン酸塩、およびＯ−ホスホセリンである。アミノ酸類似体は、天然に生じるアミノ酸と同じ基本的化学構造を有しており、すなわち、水素、カルボキシル基、アミノ基、およびＲ基に結合されるα炭素を有する化合物、例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニン、スルホキシド、メチオニン・メチル・スルホニウムがある。このような類似体は、修飾されたＲ基（例えば、ノルロイシン）または修飾されたペプチド骨格を有するが、天然に生じるアミノ酸と同じ基本的化学構造を保持する。「アミノ酸擬態物」は、アミノ酸の一般的化学構造と異なる構造を有するが、天然に生じるアミノ酸と同様の方法で機能する化合物をいう。
【００３２】
アミノ酸は、一般に知られる三文字表記によるか、またはＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ生化学命名法委員会によって推奨される一文字表記によるかのいずれかによってここに引用されうる。同様に、ヌクレオチドは、それらの一般に認可された一文字コードによって引用されうる。
【００３３】
用語「ペプチド擬態物」および「擬態物」は、本発明のαｖβ５拮抗剤と実質的に同じ構造および機能上の特性を有する合成した化学化合物をいう。ペプチド類似体は、テンプレート・ペプチドに類似の特性を有する非ペプチド薬剤として医薬品業界で一般に使用される。非ペプチド化合物のこれらのタイプは、「ペプチド擬態物（peptide mimetics）」または「ペプチド擬態物（peptidomimetics）」と称される（例えば、Ｆａｕｃｈｅｒｅ
、Ｊ．Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｒｅｓ．１５巻：２９頁（１９８６年）；ＶｅｂｅｒおよびＦｒｅｉｄｉｎｇｅｒ ＴＩＮＳ、３９２頁（１９８５年）；およびＥｖａｎｓら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３０巻：１２２９頁（１９８７年）を参照）。治療上有用なペプチドに構造的に類似するペプチド擬態物（peptide mimetics）は、等価物、または増強された治療上または予防上の効果を生じさせるために使用されうる。一般に、ペプチド擬態物（peptidomimetics）は、αｖβ５リガンドなどの天然に生じるパラダイムポリペプチド（す
なわち、生物学上または薬理学上の活性を示すポリペプチド）に構造的に類似しており、しかし例えば、−ＣＮ２ＮＨ−、−ＣＨ２Ｓ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−（シスおよびトランス）、−ＣＯＣＨ２−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−、および−ＣＨ２ＳＯ−からなる群から選択される連結によって適宜置換される１つまたはそれ以上のペプチド連結を有する。擬態物は、全部が合成された、アミノ酸の非天然の類似体より構成されるか、または部分的に天然のペプチド・アミノ酸と部分的に非天然のアミノ酸の類似体のキメラ分子であるかのいずれかである。擬態物は、その置換が、擬態物の構造および／または活性を実質的に変化させない限り、あらゆる量の天然のアミノ酸同類置換を組み込むことができる。
【００３４】
ここに使用される場合、用語「核酸」および「ポリヌクレオチド」は、ほとんど同じ意味で使用される。用語「ポリヌクレオチド」の使用は、オリゴヌクレオチド（すなわち、短いポリヌクレオチド）を含む。この用語は、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、および天然に生じる変異体をもいい、および例えば、そして限定するものではなく、ホスホロチオエート、ホスホラミデート、メチルホスホネート、キラル−メチルホスホネート、２−Ｏ−メチルリボヌクレオチド、ペプチド核酸（ＰＮＡ）などの合成および／または非天然に生じる核酸（すなわち、核酸類似体または修飾された骨格残基または連結を包含する）をもいう。特に示されない限り、特定の核酸配列は、保存的に修飾されたその変異体（例えば、縮重コドン置換）、および相補的配列、並びに明示された配列も黙示的に包含する。特に、縮重コドン置換は、１つまたはそれ以上の選択した（または全）コドンの第三の位置が、混合塩基および／またはデオキシイノシン残基で置換されている配列を発生させることによって達成されうる（例えば、Ｂａｔｚｅｒら、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．１９巻：５０８１頁（１９９１年）；Ｏｈｔｓｕｋａら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６０巻：２６０５−２６０８頁（１９８５年）；およびＣａｓｓｏｌら（１９９２年）；Ｒｏｓｓｏｌｉｎｉら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｐｒｏｂｅｓ ８巻：９１−９８頁（１９９４年）を参照）。
【００３５】
「ｓｉＲＮＡ」または「ＲＮＡｉ」は、二本鎖ＲＮＡを形成する核酸をいい、この二本鎖RNAは、ｓｉＲＮＡが、遺伝子または標的遺伝子と同じ細胞内で発現する場合、遺伝子
または標的遺伝子の発現を減少または阻害する能力を有するものである（例えば、Ｂａｓｓ、Ｎａｔｕｒｅ、４１１巻、４２８−４２９頁（２００１年）；Ｅｌｂａｓｈｉｒら、Ｎａｔｕｒｅ、４１１巻、４９４−４９８頁（２００１年）；国際公開番号００／４４８９５号；国際公開番号０１／３６６４６号；国際公開番号９９／３２６１９号；国際公開番号００／０１８４６号；国際公開番号０１／２９０５８号；国際公開番号９９／０７４０９号；および国際公開番号００／４４９１４号を参照）。したがって、「ｓｉＲＮＡ」は、相補鎖によって形成される二本鎖ＲＮＡをいう。ハイブリダイズで、二本鎖分子を形成するｓｉＲＮＡの相補的部分は、通常は、実質的または完全な同一性を有している。１つの実施態様では、ｓｉＲＮＡは、標的遺伝子に実質的または完全に同一性を有し、二本鎖ｓｉＲＮＡを形成する核酸をいう。ｓｉＲＮＡの配列は、全長標的遺伝子、またはその部分列に対応しうる。通常は、ｓｉＲＮＡは、少なくとも約１５−５０のヌクレオチドの長さである（例えば、二本鎖ｓｉＲＮＡの各相補的配列は、１５−５０のヌクレオチドの長さであり、そして二本鎖ｓｉＲＮＡは、約１５−５０の塩基対の長さ、好ましくは約、好ましくは約２０−３０の塩基ヌクレオチドの長さ、好ましくは約２０−２５のヌクレオチドの長さ、例えば２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のヌクレオチドの長さである）。
【００３６】
「サイレンシング」または「下方調節」は、標的配列、すなわち、ＲＮＡｉによって標的にされる配列の転写および／または翻訳の検出可能な減少、または干渉するＲＮＡまたは他の核酸配列の不在下で検出される正常なレベルと比較して、標的配列またはタンパク質の量または活性における減少をいう。検出可能な減少は、５％または１０％と同程度に少量であるか、または８０％、９０％または１００％と同程度に多いかでありうる。さらに一般的には、検出可能な減少が、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％または７０％の範囲にある。
【００３７】
ＩＩＩ．αｖβ５の阻害
本発明は、αｖβ５インテグリンに対するリガンドの結合を阻害することによって、ＰＥ、脳梗塞、心筋梗塞、癌（例えば、αｖβ５インテグリン関連新脈管形成を抑制することによって）、および眼の新生血管疾患（例えば、αｖβ５インテグリン関連新脈管形成を抑制することよって）などのαｖβ５インテグリンに関与する疾患を治療または予防する方法を提供する。αｖβ５インテグリン発現またはαｖβ５インテグリンに対するリガンド結合を阻害するあらゆる方法は、本発明の方法によって、αｖβ５インテグリンに関与する疾患を治療するために使用されうる。例えば、αｖβ５インテグリンに特異的に結合する抗体、β５サブユニットに特異的に結合する抗体、αｖβ５インテグリンのリガンド、およびそのリガンドのペプチド、非ペプチドおよびペプチド擬態物類似体は、αｖβ５インテグリンに対する結合を阻害し、それによって、αｖβ５に関与する疾患を治療または予防するために使用することができる。さらに、β５の発現を阻害するポリヌクレオチド（例えば、ｓｉＲＮＡ分子、アンチセンス配列など）は、αｖβ５に関与する疾患を治療または予防するために使用することができる。いくつかの実施態様では、その疾患は、ＰＥである（例えば、心原性および非心原性PEを含めた）。いくつかの実施態様では、ＰＥの治療は、例えば肺繊維症などの下流の障害をも治療または予防する。
【００３８】
Ａ．抗体
本発明の１つの態様によって、αｖβ５インテグリンに、またはαｖβ５インテグリンのβ５サブユニットに特異的に結合する抗体は、例えば、ＰＥ、脳梗塞、心筋梗塞、癌（すなわち、新脈管形成）、および眼の新生血管疾患（すなわち、新脈管形成）を含めた、αｖβ５に関与する疾患を治療または予防するために使用することができる。抗体は、αｖβ５インテグリンに対する、またはαｖβ５インテグリンのβ５サブユニットに対する結合について他のリガンドとも競合しうる。適切な抗体としては、例えば、モノクローナル抗体、ヒト化抗体および抗体フラグメント（すなわち、Ｆｖ、Ｆａｂ、（Ｆａｂ’）₂
、またはｓｃＦｖ）が挙げられる。
【００３９】
いくつかの実施態様では、αｖβ５インテグリンのβ５サブユニットに結合するモノクローナル抗体ＡＬＵＬＡ（２００４年２月１３日に、２０１１０−２２０９バージニア州、マナサス、ユニバーシティー・ブルバード１０８０１（１０８０１ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｂｌｖｄ．Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ２０１１０−２２０９）のＡＴＣＣでなされたＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−５８１７号）は、例えばＰＥ、脳梗塞、心筋梗塞、および癌（すなわち、新脈管形成）、および眼の新生血管疾患（すなわち、新脈管形成）を含めたαｖβ５インテグリンに関与する疾患を治療または予防するために使用される。理論に結び付けられることなく、ＡＬＵＬＡは、肺における血管透過性に対するαｖβ５インテグリンに介在される変化を遮断することによって作用することが仮定される。いくつかの実施態様では、ヒト化ＡＬＵＬＡ、ＡＬＵＬＡフラグメント、またはαｖβ５インテグリン、またはαｖβ５インテグリンのβ５サブユニットに対する結合についてＡＬＵＬＡと競合するモノクローナル抗体を、ＰＥを治療するために使用する。
【００４０】
モノクローナル抗体は、当業者に知られた種々の技術によって得られる。簡潔には、所望の抗原で免疫された動物から得られる脾臓細胞を、通常は骨髄腫細胞を用いた融合によって不死化する（例えば、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６巻：５１１−５１９頁（１９７６年）を参照）。不死化の代替方法としては、エプスタイン・バー・ウイルス（Epstein Barr Virus）、癌遺伝子、またはレトロウイルスを用いた形質転換、または当業界でよく知られた他の方法が挙げられる。単一不死化細胞から生じるコロニーを、抗原についての所望の特異性および親和性の抗体の産生についてスクリーニングし、このような細胞によって産生されるモノクローナル抗体は、脊椎動物宿主の腹膜腔への注入を含めた種々の技術によって強化されうる。あるいは、Ｈｕｓｅら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４６巻：１２７５−１２８１頁（１９８９年）によって概説される一般的プロトコールによって、ヒトＢ細胞から得られるＤＮＡライブラリーをスクリーニングすることによって、モノクローナル抗体またはその結合フラグメントをコードするＤＮＡ配列を単離しうる。
【００４１】
モノクローナル抗体を収集し、そしてイムノアッセイ、例えば、固形支持体に固定された免疫原を用いた固相イムノアッセイで免疫原について滴定する。モノクローナル抗体は、通常、少なくとも約０．１ｍＭ、さらに通常には少なくとも約１μＭ、好ましくは少なくとも約０．１μＭまたはそれより多く、そして最も好ましくは０．０１μＭまたはそれより多くのＫ_dで結合する。
【００４２】
例示的実施態様では、ウサギまたはマウスなどの動物を、αｖβ５ポリペプチド、またはこのようなポリペプチドをコードする核酸構築物で免疫付与する。免疫付与の結果として生じた抗体を、標準方法を使用して単離しうる。
【００４３】
結合フラグメントおよび他の誘導体を含む本発明の免疫グロブリンは、トランスフェクト細胞（例えば、骨髄腫またはハイブリドーマ細胞などの不死化真核生物の細胞）での、またはマウス、ラット、ウサギ、またはよく知られた方法によって抗体を産生する能力のある他の脊椎動物での発現によることを含めた多様な組換えＤＮＡ技術によって容易に産生されうる。ＤＮＡ配列についての適切な起源細胞、および免疫グロブリン発現および分泌のための宿主細胞は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）（カタログ・オブ・セルラインズ・アンド・ハイブリドーマ（Ｃａｔａｌｏｇｕｅ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｌｉｎｅｓ ａｎｄ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ）、５版（１９８５年）、ロックビル、メリーランド（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，Ｍｄ））などの多数の出典から得ることができる。
【００４４】
いくつかの実施態様では、抗体は、ヒト化抗体、すなわち、ヒトにおける免疫原性が低いまま、非ヒト抗体の反応性を保持する抗体である。これは、例えば、非ヒトＣＤＲ領域を保持し、そして抗体の残りの部分を、ヒト対応物と置換することによって達成される。例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、ＰＮＡＳ ＵＳＡ、８１巻：６８５１−６８５５頁（１９８４年）；ＭｏｒｒｉｓｏｎおよびＯｉ、Ａｄｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、４４巻：６５−９２頁（１９８８年）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２３９巻：１５３４−１５３６頁（１９８８年）；Ｐａｄｌａｎ、Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎ．、２８巻：４８９−４９８頁（１９９１年）；Ｐａｄｌａｎ、Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎ．、３１（３）巻：１６９−２１７頁（１９９４年）を参照。抗体をヒト化するための技術は、当業界でよく知られており、例えば、米国特許番号第４，８１６，５６７号；第５，５３０，１０１号；第５，８５９，２０５号；第５，５８５，０８９号；第５，６９３，７６１号；第５，６９３，７６２号；第５，７７７，０８５号；第６，１８０，３７０号；第６，２１０，６７１号；および第６，３２９，５１１号；国際公開番号８７／０２６７１号；欧州特許出願番号第０１７３４９４号；Ｊｏｎｅｓら（１９８６年）Ｎａｔｕｒｅ ３２１巻：５２２頁；およびＶｅｒｈｏｙｅｎら（１９８８年）Ｓｉｃｅｎｃｅ ２３９巻：１５３４頁に記載されている。ヒト化抗体は、さらに、例えばＷｉｎｔｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ（１９９１年）Ｎａｔｕｒｅ ３４９巻：２９３頁に記載されている。例えば、ヒト化免疫グロブリンフレームワーク領域をコードする第一の配列、および所望の免疫グロブリン相補性決定領域をコードする第2の配列セットを包含するポリヌクレオチドは、合成で、または適切なｃＤＮＡとゲノムＤＮＡセグメントを組合わせることによって産生されうる。ヒト定常領域ＤＮＡ配列は、多様なヒト細胞からよく知られた方法によって単離されうる。免疫グロブリンを産生するための本発明のＣＤＲは、αｖβ５インテグリンに特異的に結合する能力のあるモノクローナル抗体（例えば、ＡＬＵＬＡまたはαｖβ５インテグリンに対する特異的結合についてＡＬＵＬＡと競合する抗体）から同様に由来する。
【００４５】
いくつかの場合には、ヒト・フレームワークへのＣＤＲの移送は、ヒト化抗体についての特異性の損失を導く。これらの場合には、復帰突然変異は、その抗体のヒト部分のフレームワーク領域に導入されうる。復帰突然変異を作る方法は、当業界でよく知られており、例えばＣｏら、ＰＮＡＳ ＵＳＡ ８８巻：２２６９−２２７３頁（１９９１年）および国際公開番号９０／０７８６１号に記載されている。
【００４６】
いくつかの実施態様では、抗体は、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）₂、ＦｖまたはｓｃＦｖなどの抗体フラグメントである。化学消化（例えば、パパインまたはペプシン）および組換え方法を含めた当業界で知られるあらゆる手段を使用して、抗体フラグメントを発生させうる。組換え体核酸を単離および作製する方法は、当業者に知られている（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ．Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（２版、１９８９年）；Ａｕｓｕｂｅｌら、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９９５年）を参照）。抗体は、Ｅ．ｃｏｌｉ、他の細菌宿主、酵母、およびＣＯＳ、ＣＨＯ等の種々の高度真核生物の細胞およびヘラ細胞株（HeLa cells lines）骨髄腫細胞株を含めた多様な宿主細胞で発現されうる。
【００４７】
本発明の１つの実施態様は、αｖβ５インテグリンに対する特異的結合についてＡＬＵＬＡと競合する抗体を特定する方法を提供する。
【００４８】
競合結合アッセイは、αｖβ５インテグリンに対する特異的結合についてＡＬＵＬＡと競合する抗体を特定するために使用されうる。当業界で知られる多数の競合的結合アッセイのいずれかを、同じ抗原に対する２つの抗体の間の競合を測定するために使用しうる。簡潔には、別の抗体の結合を阻害する様々な抗体の能力を試験する。例えば、抗体は、サンドイッチＥＬＩＳＡアッセイを使用して、抗体が結合するエピトープによって識別することができる。これは、ウェルの表面を覆う捕捉抗体を使用することによって行われうる。その後、標識した抗原の飽和濃度以下を、捕捉表面に加える。このタンパク質は、特異的抗体：エピトープ相互作用を通して抗体に結合する。洗浄後、検出可能な部分（例えば、ＨＲＰ、そして標識抗体は、検出抗体として定義される）が共有結合で連結した二次抗体をＥＬＩＳＡに添加する。この抗体が、捕捉抗体と同じエピトープを認識する場合、その特定のエピトープがもはや結合できないため、標的タンパク質に結合することはできないであろう。しかし、もしこの二次抗体が、標的タンパク質上の異なるエピトープを認識する場合には、結合することは可能であり、そしてこの結合は、関連の基質を使用して活性のレベル（したがって、結合した抗体）を定量することによって検出されうる。バックグランドは、捕捉および検出抗体の両方として単一抗体を使用することによって規定し、最大のシグナルは、抗原特異的抗体で捕捉し、そしてその抗原の上の標識に対する抗体で検出することによって規定されうる。バックグランドと最大のシグナルを参照として使用して、抗体は、エピトープ特異性を測定するペアワイズ（pair-wise）な手段で評価されうる。
【００４９】
抗原に対する二次抗体の結合が、上記アッセイのいずれかを使用して、一次抗体の存在下で、少なくとも３０％、通常少なくとも約４０％、５０％、６０％または７５％まで、そしてしばしば、少なくとも約９０％まで減じられる場合、一次抗体は、二次抗体の結合を競合的に阻害すると見なされる。
Ｂ．αｖβ５小分子拮抗剤
【００５０】
αｖβ５のいずれかの小分子拮抗剤は、ＰＥを治療または予防するために、本発明の方法によって使用されうる。一般に、小分子は、質量で１０００ダルトン未満であり、そしてしばしば５００ダルトン未満である。
【００５１】
αｖβ５小分子拮抗剤の例としては、例えば、米国公開特許出願番号２０００／４００１９２０６号、２００４／００１９０３７号、２００４／００１９０３５号、２００４／００１８１９２号、２００４／００１００２３号、２００３／０１８１４４０号、２００３／０１７１２７１号、２００３／０１３９３９８号、２００２／００３７８８９号、２００２／００７７３２１号、２００２／００７２５００号、米国特許番号第６，６８３，０５１号、およびＧｏｏｄｍａｎら、Ｊ．Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．４５（５）巻：１０４５−５１頁（２００２年）に記載されるものが挙げられる。
【００５２】
例えば、米国特許公開番号２００４００１９２０６Ａ１に記載されている式Ｉの化合物が、それらの種々な異性体、エナンチオマー、互変異性体、ラセミ体および多形体を含めて使用できる：
【化１】


または薬学上許容できるそれらの塩であって、
ここでＸは、
【化２】


であり、
【００５３】
Ｙは、Ｎ――Ｒ¹、Ｏ、およびＳからなる群から選択される；ｙおよびｚは、０、１、２および３から選択される整数から独立に選択される；Ａは、ＮまたはＣである；Ｒ¹は、Ｈ、アルキル、アリール、ヒドロキシ、アルコキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、アルケニル、アルキニル、アミド、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ハロアルキルカルボニル、ハロアルコキシカルボニル、アルキルチオカルボニル、アリールチオカルボニル、アシルオキシメトキシカルボニル；アルキル（低級アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、ハロアルキル、シアノ、ニトロ、カルボキシル、アミノ、アルコキシ、アリール、またはアリール（１つまたはそれ以上のハロゲン、ハロアルキル、低級アルキル、アルコキシ、シアノ、アルキルスルホニル、アルキルチオ、ニトロ、カルボキシル、アミノ、ヒドロキシル、スルホン酸、スルホンアミド、アリール、縮合アリール、単環複素環、または縮合単環複素環で適宜置換された）から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された）；アリール（ハロゲン、ハロアルキル、ヒドロキシ、低級アルキル、アルコキシ、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、シアノ、ニトロ、アルキルチオ、アルキルスルホニル、スルホン酸、スルホンアミド、カルボキシ誘導体、アミノ、アリール、縮合アリール、単環複素環および縮合単環複素環から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された）、単環複素環類、および単環複素環（ハロゲン、ハロアルキル、低級アルキル、アルコキシ、アミノ、ニトロ、ヒドロキシ、カルボキシル誘導体、シアノ、アルキルチオ、アルキルスルホニル、スルホン酸、スルホンアミド、アリールまたは縮合アリールから選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された）からなる群から選択される；または
【００５４】
Ｒ⁸と一緒になってＲ¹は、低級アルキル、ヒドロキシ、ケト、アルコキシ、ハロ、フェニル、アミノ、カルボキシルまたはカルボキシルエステル、および縮合フェニルからなる群から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された４−１２員二窒素含有複素環を形成するか、または
【００５５】
Ｒ⁸と一緒になってＲ¹は、低級アルキル、フェニルおよびヒドロキシからなる群から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された５員ヘテロ芳香族環を形成するか、またはＲ⁸と一緒になってＲ¹は、フェニル基と融合した５員ヘテロ芳香族環を形成する；
【００５６】
Ｒ⁸（Ｒ¹と一緒にならない場合）およびＲ⁹は、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、アミノ、アルキルアミノ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールアミノ、アミド、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシ、アリールオキシカルボニル、ハロアルキルカルボニル、ハロアルコキシカルボニル、アルキルチオカルボニル、アリールチオカルボニル、アシルオキシメトキシカルボニル、シクロアルキル、ビシクロアルキル、アリール、アシル、ベンゾイル；アルキル（低級アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、ハロアルキル、シアノ、ニトロ、カルボキシル誘導体、アミノ、アルコキシ、チオ、アルキルチオ、スルホニル、アリール、アラルキルから選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された）；アリール（ハロゲン、ハロアルキル、低級アルキル、アルコキシ、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、アルキルチオ、ハロアルキルチオ、チオ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、カルボキシル誘導体、アリールオキシ、アミド、アシルアミノ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリフルオロアルコキシ、トリフルオロメチル、スルホニル、アルキルスルホニル、ハロアルキルスルホニル、スルホン酸、スルホナミド、アリール、縮合アリール、単環複素環、縮合単環複素環；アリール（ハロゲン、ハロアルキル、低級アルキル、アルコキシ、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、アルキルチオ、ハロアルキルチオ、チオ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、カルボキシル誘導体、アリールオキシ、アミド、アシルアミノ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリフルオロアルコキシ、トリフルオロメチルスルホニル、アルキルスルホニル、スルホン酸、スルホンアミド、アリール、縮合アリール、単環複素環、または縮合単環複素環から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された）から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された）、単環複素環；単環複素環（ハロゲン、ハロアルキル、低級アルキル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、ニトロ、ヒドロキシ、カルボキシ誘導体、シアノ、アルキルチオ、アルキルスルホニル、アリール、縮合アリール、単環および二環複素環アルキルから選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された）、−ＳＯ₂Ｒ¹⁰（式中、Ｒ¹⁰は、アルキル、アリールおよび単環複素環からなる群から選択され、全ては、ハロゲン、ハロアルキル、アルキル、アルコキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、アシルアミノ、トリフルオロアルキル、アミド、アルキルアミノスルホニル、アルキルスルホニル、アルキルスルホニルアミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリフルオロメチルチオ、トリフルオロアルコキシ、トルフルオロメチルスルホニル、アリール、アリールオキシ、チオ、アルキルチオ、および単環複素環からなる群から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換される）からなる群から独立に選択される；および
【化３】


（式中、Ｒ¹⁰は、上のとおり定義される）
または
【００５７】
ＮＲ⁸およびＲ⁹は、一緒になって、低級アルキル、カルボキシル誘導体、アリールまたはヒドロキシからなる群から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換される４−１２員環１窒素含有単環または二環を形成し、上記環は、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選択されるヘテロ原子を適宜含有する；
またはＸは、
【化４】


である。
Ｘは、
【化５】


である。
【００５８】
式中、Ｙ¹は、アルキル、シクロアルキル、ビシクロアルキル、アリール、単環複素環；アルキル（適宜アリールで置換された（アリールは、ハロ、ハロアルキル、アルキル、ニトロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アリールまたは縮合アリールからなる群から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換されうる））；アリール（ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アリール、縮合アリール、ニトロ、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、またはアルキルから選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された）、アルキニル、アルケニル、―Ｓ―Ｒ¹¹および−ＯＲ¹¹（式中、Ｒ¹¹は、Ｈ、アルキル、アラルキル、アリール、アルケニル、およびアルキニルからなる群から選択されるか、またはＲ⁸と一緒になってＲ¹¹は、低級アルキル、ヒドロキシ、ケト、フェニル、カルボキシルまたはカルボキシルエステル、および縮合フェニルで適宜置換された４−１２員の一窒素および一硫黄または一酸素含有複素環を形成するか、またはＲ⁸と一緒になってＲ¹¹は、チアゾール、オキサゾール、ベンゾキサゾール、またはベンゾチアオゾールである；Ｒ⁸は、上のとおり定義される）からなる群から選択される；または
【００５９】
Ｙ¹（Ｙ¹が炭素である場合）は、Ｒ⁸と一緒になって、アルキル、アリール、ケトまたはヒドロキシと適宜置換した、４−１２員の一窒素または二窒素含有環を形成する；またはＸは、
【化６】


（式中、Ｒ¹とＲ⁸は、一緒になって、低級アルキル、ヒドロキシ、ケト、フェニル、またはカルボキシル誘導体からなる群から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された、５−８員の二窒素含有複素環を形成し；そしてＲ⁹は、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ハロアルキルカルボニル、ハロアルコキシカルボニル、アルキルチオカルボニル、アリールチオカルボニル、またはアシルオキシメトキシカルボニルからなる群から選択される）であるか；または
【００６０】
Ｘは、
【化７】

【００６１】
（Ｒ¹とＲ⁸は、一緒になって、ヒドロキシ、ケト、フェニル、またはアルキルで適宜置換された５−８員の二窒素含有複素環を形成し；そして、Ｒ⁹は、両方とも、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ハロアルキルカルボニル、ハロアルコキシカルボニル、アルキルチオカルボニル、アリールチオカルボニル、およびアシルオキシメトキシカルボニルからなる群から選択される）
である；
【００６２】
Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴は、Ｈ、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、ハロゲン、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、アシルアミノ、ジアルキルアミノ、シアノ、アルキルチオ、アルキルスルホニル、カルボキシル誘導体、トリハロアセトアミド、アセトアミド、アリール、縮合アリール、シクロアルキル、チオ、単環複素環、縮合単環複素環およびＸ（Ｘは、上のとおり定義される）からなる群から選択される１つまたはそれ以上の置換基から独立に選択される；
【００６３】
Ｒ⁵、Ｒ⁶およびＲ⁷は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、カルボキシル誘導体、ハロアルキル、シクロアルキル、単環複素環；単環複素環（アルキル、ハロゲン、ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、アリール、縮合アリール、ニトロ、アルコキシ、アリールオキシ、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、スルホンアミド、チオ、アルキルチオ、カルボキシル誘導体、アミノ、アミドで適宜置換された）；アルキル（ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオ、アルキルチオ、アルキニル、アルケニル、アルキル、アリールチオ、アルキルスルホキシド、アルキルスルホニル、アリールスルホキシド、アリールスルホニル、シアノ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキルスルホンアミド、アリールスルホンアミド、アシルアミド、カルボキシル誘導体、スルホンアミド、スルホン酸、ホスホン酸誘導体、ホスフィン酸誘導体、アリール、アリールチオ、アリールスルホキシド、またはアリールスルホンの１つまたはそれ以上で適宜置換された）（全ては、ハロ、アルキル、ハロアルキル、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、カルボキシル誘導体、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アミド、アリール、縮合アリール、単環複素環および縮合単環複素環、単環複素環チオ、単環複素環スルホキシド、および単環複素環スルホンで、アリール環に適宜置換され、そしてそれは、ハロ、ハロアルキル、ニトロ、ヒドロキシ、アルコキシ、縮合アリール、またはアルキルで適宜置換されうる）、アルキルカルボニル、ハロアルキルカルボニル、およびアリールカルボニル；アリール（ハロ、ハロアルキル、アルキル、アルコキシ、アリールオキシ、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、アルキルチオ、ハロアルキルチオ、チオ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アシルオキシ、カルボキシル誘導体、カルボキシルアルコキシ、アミド、アシルアミノ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリフルオロアルコキシ、トリフルオロメチルスルホニル、アルキルスルホニル、スルホン酸、スルホンアミド、アリール、縮合アリール、単環複素環および縮合単環複素環で１つまたはそれ以上の位置に適宜置換された）からなる群から選択される１つまたはそれ以上の置換基から独立に選択される。
【００６４】
米国特許公開番号２００４００１９０３７Ａ１に記載されている式ＩＩの化合物もそれらの種々の異性体、エナンチオマー、互変異性体、ラセミ体および多形体を含めて使用することができる：
【化８】

【００６５】
または薬学上許容できるそれらの塩であって
【００６６】
Ｘは、以下からなる群から選択される：
【化９】

【００６７】
Ｙ−Ｚは、−ＣＨ₂ＣＨ₂−または−ＣＯＮＲ³−であり；Ａは、ＯまたはＮＲ¹であり；ｍは、Ｏまたは１であり；Ｒ¹は、水素またはＣ_1-3アルキルであり；各非芳香族環炭素原子は、未置換であるか、または１つまたは２つのＲ²置換基で独立に置換されており、そして各芳香族環炭素原子は、未置換であるか、またはＣ_1-8アルキル、Ｃ_3-8シクロアルキル、Ｃ_3-8シクロヘテロアルキル、Ｃ_3-8シクロアルキル−Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_3-8シクロヘテロアルキル−Ｃ_1-6アルキル、アリール、アリール−Ｃ_1-6アルキル、アミノ、アミノ−Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_1-3アシルアミノ、Ｃ_1-3アシルアミノ−Ｃ_1-6アルキル、（Ｃ_1-6アルキル）_1-2アミノ、Ｃ_3-6シクロアルキル−Ｃ_0-2アミノ、（Ｃ_1-6アルキル）_1-2アミノ−Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_1-6アルコキシ、Ｃ_1-4アルコキシ−Ｃ_1-6アルキル、ヒドロキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル−Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_1-3アルコキシカルボニル、Ｃ_1-3アルコキシカルボニル−Ｃ_1-6アルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシ−Ｃ_1-6アルキル、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロエトキシ、Ｃ_1-8アルキル−Ｓ（Ｏ）_0-2、（Ｃ_1-8アルキル）_0-2アミノカルボニル、Ｃ_1-8アルキルオキシカルボニルアミノ、（Ｃ_1-8アルキル）_1-2アミノカルボニルオキシ、（アリールＣ_1-3アルキル）_1-2アミノ、（アリール）_1-2アミノ、アリール−Ｃ_1-3アルキルスルホニルアミノ、およびＣ_1-8アルキルスルホニルアミノからなる群から選択される１つのＲ²置換基で独立に置換されているか；または同じ非芳香族炭素原子上にあるとき、２つのＲ²置換基は、それらが付着される炭素原子と一緒になって、カルボニル基を形成するか；または２つのＲ²置換基は、それらが付着される炭素原子と一緒に連結して、３から６員までの飽和スピロ−炭素環を形成し；Ｒ³は、水素またはＣ_1-4アルキルであり；Ｒ⁴は、アリール（ここでアリール基は、フェニル、ナフチル、ピリジニル、フリル、チエニル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソキザゾリル、イソチアゾリル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、キノリル、イソキノリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、インドリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾキサゾリル、ジヒドロベンゾフリル、ベンゾ（１，３）ジオキソラニル、ベンゾ（１，４）ジオキサニル、およびキノキサリニルからなる群から選択される）であり；そしてモノ、ジ、およびトリ−置換アリール（ここで、アリールは上で定義されるとおりであり、そして置換基は、独立に、水素、ヒドロキシ、ヒドロキシ−Ｃ_1-6アルキル、ハロゲン、Ｃ_1-8アルキル、Ｃ_3-8シクロアルキル、アリール、アリールＣ_1-3アルキル、アミノ、アミノＣ_1-6アルキル、Ｃ_1-3アシルアミノ、Ｃ_1-3アシルアミノ−Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_1-6アルキルアミノ、ジ（Ｃ_1-6）アルキルアミノ、Ｃ_1-6アルキルアミノ−Ｃ_1-6アルキル、ジ（Ｃ_1-6）アルキルアミノ−Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_1-4アルコキシ、Ｃ_1-4アルキルチオ、Ｃ_1-4アルキルスルフィニル、Ｃ_1-4アルキルスルホニル、Ｃ_1-4アルコキシ−Ｃ_1-6アルキル、ヒドロキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル−Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_1-5アルコキシカルボニル、Ｃ_1-3アルコキシカルボニル−Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_1-5アルキルカルボニルオキシ、シアノ、トリフルオロメチル、１，１，１−トリフルオロエチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロエトキシ、またはニトロであるか；または２つの隣り合った置換基は、それらが付着される炭素原子と一緒になって、連結して、その環の炭素原子が、オキソまたはＣ_1-3アルキルで置換されうるものである、Ｎ、Ｏ、およびＳからなる群から選択される１または２つのヘテロ原子を含有する５または６員飽和または不飽和環を形成し；そしてＲ⁵は、水素またはＣ_1-3アルキルである。
【００６８】
米国特許公開番号２００４００１９０３５Ａ１に記載されている式ＩＩＩの化合物はそれらの種々の異性体、エナンチオマー、互変異性体、ラセミ体および多形体を含め、またはそれらの薬学上許容しうる塩またはエステルを、本発明の方法に使用することができる：
【化１０】

【００６９】
米国特許公開番号２００４００１００２３Ａ１に記載されている式ＩＶの化合物は、それらの種々の異性体、エナンチオマー、互変異性体、ラセミ体および多形体を含め、またはそれらの薬学上許容しうる塩またはエステルを、本発明の方法に使用することができる：
【化１１】

【００７０】
式中、Ｒ¹は、ＯＲまたはＮ（Ｒ）₂であり、Ｒは、Ｈ、Ａ、シクロアルキル、Ａｒ、アリールアルキルまたはＰｏｌであり、互いに独立に、各々の場合にＲ²およびＲ³は、Ｈ、Ａ、Ｈａｌ、ＮＯ₂、ＯＲ、Ｎ（Ｒ）₂、ＣＮ、ＣＯ――Ｒ、ＳＯ₃Ｒ、ＳＯ₂Ｒ、ＮＨ――Ｃ（Ｏ）ＡまたはＳＲであり、Ｒ⁴は、Ｈａｌ、Ｒ、ＯＲ、ＣＮ、Ｎ（Ｒ⁵）₂、またはＮＯ₂により一または二置換されうる、１から４個までのＮ原子を有する単または二環芳香族複素環（ピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、１，３，５−、１，２，４−および１，２，３−トリアジンおよびテトラジンを除く）であり、Ｒ⁵は、ＨまたはＡであり、Ｒ⁶は、ＨａｌまたはＮＯ₂であり、Ａは、１から８個までのＣ原子を有するアルキル（ここで、アルキル基は、Ｒ⁶に一または複数置換されうる、および／またはそれらのアルキル炭素鎖は、――Ｏ――により中断されうる）であり、Ａｒは、未置換、または一、二、または三置換されるアリールであり、シクロアルキルは、３から１５個のＣ原子を有するシクロアルキルであり、Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり、Ｐｏｌは、末端官能基を有しない固相であり、互いに独立に、各場合にｎ、ｍは、１、２、３、４、５または６であり、ｏは、１、２、３または４であり、そしてｐは、１、２、３、４または５である。
【００７１】
米国特許公開番号２００３０１８１４４０Ａ１に記載されている式Ｖの化合物は、それらの種々の異性体、エナンチオマー、互変異性体、ラセミ体および多形体を含め、または薬学上許容できるそれらの塩またはエステルは、本発明の方法に使用することができる：
【化１２】

【００７２】
式中、Ｍは、Ｃ_1-4アルキレン（適宜、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_2-4アルケニル、シクロアルキル（ここで、環炭素原子は、炭素鎖に対する付着の点を形成する）またはアリール（適宜ハロゲンで置換される）から選択される１つの置換基に、炭素鎖内で置換され、そしてＡから選択される１つの置換基に、末端炭素上で置換される）、Ｃ_2-4アルケニレン（Ａから選択される１つの置換基で置換される）、ヘテロサイクレン（heterocyclyene）（適宜、Ａから選択される１つの置換基で置換される）、ヘテロサイクレニレン（heterocyclenylene）（Ａから選択される１つの置換基で置換される）、アリーレン（Ａから選択される１つの置換基で置換される）、（Ｃ_1-4アルキレン）アリール（Ａから選択される１つの置換基で、Ｃ_1-4アルキレン上で置換される）またはアリーレン（Ｃ_1-4）アルキル（Ａから選択される１つの置換基で、アリーレン上に置換される）から選択される；
【００７３】
Ａは、適宜存在し、そしてヘテロアリール、ヘテロサイクリル（heterocyclyl）、Ｒ₃ＨＮ――、（ヘテロアリール）アミノ、（ヘテロサイクリル）アミノ、Ｒ₃ＨＮＣ（＝＝ＮＨ）ー−、Ｒ₃ＨＮＣ（＝＝ＮＨ）ＮＨー−、Ｒ₃ＨＮＣ（＝＝Ｏ）ＮＨ――、Ｒ₃Ｃ（＝＝ＮＨ）ＮＨー−、（ヘテロサイクリル）アミノオキシ、（ヘテロアリール）アミノオキシ、Ｒ₃ＨＮＣ（＝＝ＮＨ）ＮＨＯー−、Ｒ₃Ｃ（＝＝ＮＨ）ＮＨＯー−、Ｒ₃ＨＮＣ（＝＝ＮＨ）ＮＨＣ＝＝Ｏ）ー−、またはＲ₃Ｃ（＝＝ＮＨ）ＮＨＣ（＝＝Ｏ）ー−から選択される；ここでヘテロアリールおよびヘテロサイクリルは、Ｃ_1-Ｃ₄アルキル、Ｃ_1-Ｃ₄アルコキシ、ヘテロアリール（Ｃ_1-Ｃ₄アルキルに適宜置換される）、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、トリハロ（Ｃ_1-Ｃ₄）アルキル、Ｃ_1-Ｃ₄アルキルカルボニル、Ｃ_1-Ｃ₄アルコキシカルボニル、アリール（Ｃ_1-Ｃ₄）アルコキシカルボニル、Ｒ₃ＨＮ−、アミノ（Ｃ_1-Ｃ₄）アルキル、Ｃ_1-Ｃ₄アルキルアミノ（Ｃ_1-4）アルキルまたはジ（Ｃ_1-Ｃ₄アルキル）アミノ（Ｃ_1-Ｃ₄）アルキルから独立に選択される１から５個の置換基に適宜置換され、
【００７４】
ただし、ＡがＨ₂ＮＣ（＝ＮＨ）ＮＨー−である場合、それにより独立に、Ｑが――ＣＨ₂――であるとき、Ｗは、水素でない；
【００７５】
Ｌは、――Ｃ（＝＝Ｏ）ー−、−ーＳＯ₂−ー、−ーＯＣ（＝＝Ｏ）ー−または――ＨＮＣ（＝＝Ｏ）ー−から選択され；Ｒ₁は、水素、Ｃ_1-Ｃ₈アルキルまたはシクロアルキルから選択される；Ｒ₂は、水素またはＣ_1-Ｃ₈アルキルから選択される；Ｒ₃は、水素、Ｃ_1-Ｃ₈アルキル、アリール、アリール（Ｃ_1-Ｃ₈）アルキル、シクロアルキル、ヒドロキシ、シアノまたはニトロから選択される；Ｑは、ー−ＣＨ₂−ー、−ーＣＨ（Ｃ_1-Ｃ₈アルキル）−、−ーＣＨ（Ｃ_2-Ｃ₈アルケニル）−、−ーＣＨ（Ｃ_2-8アルキニル）−、−ーＣＨ（アリール）−（ここでアリールは、Ｃ_1-Ｃ₄アルキル、Ｃ_1-Ｃ₄アルコキシ、−ーＯー−（Ｃ_1-Ｃ₃アルキル）−Ｏー−、ハロゲン、ヒドロキシ、トリハロ（Ｃ_1-Ｃ₃）アルキルまたはトリハロ（Ｃ_1-Ｃ₃）アルコキシ）、−ーＣＨ（ヘテロアリール）−（ここでヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_1-Ｃ₄アルキル、Ｃ_1-Ｃ₄アルコキシ、−ーＯー−（Ｃ_1-Ｃ₃アルキル）−Ｏー−、アミノ、Ｃ_1-Ｃ₄アルキルアミノ、またはジ（Ｃ_1-Ｃ₄）アルキルアミノから選択される置換基に適宜置換される）または−ーＣＨ（アリール（（Ｃ_1-Ｃ₈）アルキル）−から独立に選択される１から５個までの置換基に、適宜置換される）から選択される；Ｗは、水素またはＮ（Ｒ₄）Ｔから選択される；ｒは、０または１から選択される整数である；Ｒ₄は、水素、Ｃ_1-Ｃ₈アルキルまたはＣ_2-Ｃ₆アシルから選択される；Ｔは、Ｒ₅Ｃ（＝＝Ｏ）ー−、Ｒ₅ＯＣ（＝＝Ｏ）ー−またはＲ₅Ｃ（＝＝Ｎー−ＣＮ）ー−から選択される；Ｒ₅は、Ｃ_1-Ｃ₈アルキル、アリール、アリール（Ｃ_1-Ｃ₈）アルキルまたはアミノ（ここで、アミノ基は、Ｃ_1-Ｃ₈アルキルから独立に選択される１つから２つまでの置換基で適宜置換される）から選択される；Ｒ₆は、水素、Ｃ_1-Ｃ₈アルキル、アリール（Ｃ_1-Ｃ₈）アルキル、（Ｒ₇）Ｎ（Ｃ_1-Ｃ₈）アルキル、（Ｒ₈）（Ｒ₇）Ｎ（Ｃ_1-Ｃ₈）アルキルまたは（Ｒ₈）（Ｒ₇）ＮＣ（＝＝Ｏ）−（Ｃ_1-Ｃ₈）アルキルから選択される；そして、Ｒ₇およびＲ₈は、水素、Ｃ_1-Ｃ₈アルキルまたはシクロアルキルから独立に選択される；および薬学上許容しうるそれらの塩。
【００７６】
米国特許公開番号２００３０１３９３９８Ａ１に記載されている式ＶＩの化合物は、それらの種々の異性体、エナンチオマー、互変異性体、ラセミ体および多形体を含め、または薬学上許容しうるそれらの塩またはエステルを本発明の方法に使用することができる：
【化１３】

【００７７】
式中、Ａは、カルボニル、アミノ、カルバモイル、アセトアミド、アセチミド（acetimido）、アミジノ、イミノメチルアミノ、ウレイド、ビウレト（biureto）、ビウレア（biurea）、チオウレイド、グアニジノ、ビグアニド、ビグアニジノ、アミドラゾン、ヒドラゾ、カルバゾイル、セミカルバジド、シクロアルキレン、ヘテロサイクレン（heterocyclene）、アリーレン、およびヘテロアリーレンからなる群から選択される；ここで、アリーレンおよびヘテロアリーレンは、Ｃ_1-Ｃ₈アルキル、Ｃ_1-Ｃ₈アルコキシ、ハロゲン、（ハロ）_1-3（Ｃ_1-Ｃ₈）アルキルおよび（ハロ）_1-3（Ｃ_1-Ｃ₈）アルコキシからなる群から独立に選択される１つから２つまでの追加の置換基で適宜置換される；（Ｂ）は、適宜存在し、そしてＮＨ、ＯおよびＣ（Ｏ）からなる群から選択される；Ｍは、Ｃ_1-Ｃ₆アルキレン、Ｃ_2-Ｃ₆アルケニレン、Ｃ_2-Ｃ₆アルキニレン、およびアリーレンからなる群から選択される；ここで、アリーレンは、Ｃ_1-Ｃ₈アルキル、Ｃ_1-Ｃ₈アルコキシ、ハロゲン、（ハロ）_1-3（Ｃ_1-Ｃ₈）アルキルおよび（ハロ）_1-3（Ｃ_1-Ｃ₈）アルコキシからなる群から独立に選択される１から４個までの追加の置換基で適宜置換される；Ｒ₃は、水素、Ｃ_1-Ｃ₈アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、アリール（Ｃ_1-Ｃ₈）アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリール（Ｃ_1-Ｃ₈）アルキル、アミノ、Ｃ_1-Ｃ₈アルキルアミノ、ジ（Ｃ_1-Ｃ₈）アルキルアミノ、イミノ、イミノメチル、アミジノ、Ｃ_1-Ｃ₈アルキルアミジノ、ジ（Ｃ_1-Ｃ₈）アルキルアミジノ、シクロアルキルアミジノ、ハロゲンおよびヒドロキシからなる群から独立に選択される１つから２つまでの置換基である；ここでシクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、およびアリールアルキルおよびヘテロアリールアルキルのアリールおよびヘテロアリール部分は、Ｃ_1-Ｃ₈アルキル、Ｃ_1-Ｃ₈アルコキシ、アリールおよびハロゲンからなる群から独立に選択される１から２つまでの置換基で適宜置換される；そしてヘテロシクロは、オキソから選択された置換基で適宜置換される；（Ｌ）は、適宜存在し、そしてＮＨ、Ｏ、ＳおよびＣ（Ｏ）からなる群から選択される；Ｙは、単結合により環に連結された２つの置換基、および二重結合により環に連結された１つの置換基にからなる群から選択される；ここで、単結合により環に連結された２つの置換基は、水素、Ｃ_1-Ｃ₈アルキル、Ｃ_1-Ｃ₈アルコキシ、ハロゲン、（ハロ）_1-3（Ｃ_1-Ｃ₄）アルキルおよび（ハロ）_1-3（Ｃ_1-Ｃ₄）アルコキシからなる群から独立に選択される；または、その２つの置換基は、一緒になって、シクロアルキルおよび――Ｏ――（ＣＨ₂）_1-4−Ｏ――からなる群から選択される部分を形成する；そしてここで、二重結合により環に連結された１つの置換基は、Ｓ、Ｏ、Ｃ_1-Ｃ₈アルキリデン、イミノ、（Ｃ_1-Ｃ₄）アルキルイミノ、（ハロ）_1-2メチレンおよび（ハロ）_1-3（Ｃ_2-Ｃ₄）アルキリデンからなる群から選択される；Ｘは、Ｎ、ＮＨ、ＯおよびＳからなる群から選択される；Ｒ₁は、適宜存在し、そして水素、Ｃ_1-Ｃ₈アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル（Ｃ_1-Ｃ₆）アルキル、アリール、アリール（Ｃ_1-Ｃ₆）アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリール（Ｃ_1-Ｃ₆）アルキル、アリールアミノおよびヘテロアリールアミノからなる群から選択される；ここでアリール、ヘテロアリール、およびアリールアルキルおよびヘテロアリールアルキルのアリールおよびヘテロアリール部分は、Ｃ_1-Ｃ₈アルキル、Ｃ_1-Ｃ₈アルコキシ、アリール、アリール（Ｃ_1-Ｃ₈）アルキル、ヘテロアリール、アミノ、Ｃ_1-Ｃ₈アルキルアミノ、ジ（Ｃ_1-Ｃ₈アルキル）アミノ、ヘテロアリールアミノ、イミノ、イミノメチル、スルホニル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、（ハロ）_1-3（Ｃ_1-Ｃ₄）アルキルおよび（ハロ）_1-3（Ｃ_1-Ｃ₄）アルコキシからなる群から独立に選択される１から５つまでの置換基で適宜置換される；Ｅは、ＷおよびＷ’で置換されたＣ_1-Ｃ₄アルキルである；Ｆは、ＵおよびＵ’で置換されたＣ_1-Ｃ₄アルキルである；Ｗ、Ｗ’、ＵおよびＵ’は、水素、Ｃ_1-Ｃ₈アルキル、Ｃ_2-Ｃ₈アルケニル、Ｃ_2-Ｃ₈アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキル（Ｃ_1-Ｃ₄）アルキル、ヘテロシクロ、ヘテロシクロ（Ｃ_1-Ｃ₄）アルキル、アリール、アリール（Ｃ_1-Ｃ₄）アルキル、ビアリール、ヘテロアリール、ヘテロアリール（Ｃ_1-Ｃ₄）アルキル、――Ｎ［（Ｒ₄），Ｔ（Ｒ₅）］およびハロゲンからなる群から独立に選択される；ここでヘテロシクロ、アリール、ビアリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクロ、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキルおよびヘテロアリールアルキルのアリールおよびヘテロアリール部分は、Ｃ_1-Ｃ₄アルキル、Ｃ_1-Ｃ₄アルコキシ、アミノ、Ｃ_1-Ｃ₄アルキルアミノ、ジ（Ｃ_1-Ｃ₄アルキル）アミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロおよびシアノからなる群から独立に選択される１から５つまでの置換基で適宜置換される；または、アリール、ヘテロアリール、およびアリールアルキルおよびヘテロアリールアルキルのアリールおよびヘテロアリール部分の２つの置換基は、一緒になって、シクロアルキル、ヘテロシクロおよび――Ｏ――（ＣＨ₂）_1-4――Ｏ――からなる群から選択される部分を形成する；ただし、Ｗ、Ｗ’、ＵおよびＵ’の内の１つが――Ｎ［（Ｒ₄），Ｔ（Ｒ₅）］から選択される場合、それにより残りのＷ、Ｗ’、ＵおよびＵ’は――Ｎ［（Ｒ₄），Ｔ（Ｒ₅）］から選択できない；Ｒ₄は、水素およびＣ_1-Ｃ₈アルキルからなる群から選択される；Ｔは、アリーレン、カルボニル、カルボキシル、スルホニルおよび――Ｃ（Ｏ）ＮＨ――からなる群から選択される；ここでアリーレンは、Ｃ_1-Ｃ₄アルキル、Ｃ_1-Ｃ₄アルコキシおよびハロゲンからなる群から独立に選択される１から２つまでの追加の置換基で適宜置換される；Ｒ₅は、水素、Ｃ_1-Ｃ₈アルキル、Ｃ_2-Ｃ₈アルケニル、シクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、アリール（Ｃ_1-Ｃ₄）アルキル、アリール（Ｃ_2-Ｃ₄）アルケニル、ビアリール、ビアリール（Ｃ_1-Ｃ₄）アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリール（Ｃ_1-Ｃ₄）アルキル−Ｉおよびアミノからなる群
から選択される；ここでヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、およびアリールアルキル、アリールアルケニル、ビアリール、ビアリールアルキル、およびヘテロアリールアルキルのアリールおよびヘテロアリール部分は、Ｃ_1-Ｃ₄アルキル、Ｃ_1-Ｃ₄アルコキシ、ヘテロシクロ、アリール、アリール（Ｃ_1-Ｃ₄）アルキル、アリールスルホニル、ヘテロアリール、アミノ、Ｃ_1-Ｃ₄アルキルアミノ、ジ（Ｃ_1-Ｃ₄アルキル）アミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、（ハロ）_1-3（Ｃ_1--Ｃ₄）アルキルおよび（ハロ）_1-3（Ｃ_1-Ｃ₄）アルコキシからなる群から独立に選択される１から５つまでの置換基で適宜置換される；または、アリール、ヘテロアリール、およびアリールアルキル、アリールアルケニルおよびヘテロアリールアルキルのアリールおよびヘテロアリール部分の２つの任意の置換基は、一緒になって、シクロアルキル、ヘテロシクロおよび――Ｏ――（ＣＨ₂）_1-4――Ｏ――からなる群から選択される部分を形成する；Ｒ₆は、水素、Ｃ_1-Ｃ₈アルキルおよび（ＣＨ₂）_1-8ＣＯＮ（Ｒ₇）₂からなる群から選択される；そしてＲ₇は、水素、Ｃ_1-Ｃ₈アルキルおよびシクロアルキルからなる群から選択される；および薬学上許容しうるラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマーおよびそれらの塩。
【００７８】
米国特許公開番号２００２００３７８８９Ａ１に記載されている式ＶＩＩの化合物は、それらの種々の異性体、エナンチオマー、互変異性体、ラセミ体および多形体を含め、または薬学上許容しうるそれらの塩またはエステルを本発明の方法に使用することができる：
【化１４】

【００７９】
Ｘは、以下からなる群から選択される。
【化１５】

【００８０】
各Ｒ¹は、独立に、水素またはＣ_1-3アルキルであり、そして各非芳香族環炭素原子は、未置換であるか、または１つまたは２つのＲ²置換基で独立に置換され、そして各芳香族環炭素原子は、未置換であるか、またはＣ_1-8アルキル、Ｃ_3-8シクロアルキル、Ｃ_3-8シクロヘテロアルキル、Ｃ_3-8シクロアルキル−Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_3-8シクロヘテロアルキル−Ｃ_1-6アルキル、アリール、アリール−Ｃ_1-6アルキル、アミノ−Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_1-3アシルアミノ、Ｃ_1-3アシルアミノ−Ｃ_1-6アルキル、アミノ、（Ｃ_1-6アルキル、）_1-2アミノ、Ｃ_3-6シクロアルキル−Ｃ_0-2アミノ、（Ｃ_1-6アルキル）_1-2アミノ−Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_1-6アルコキシ、Ｃ_1-4アルコキシ−Ｃ_1-6アルキル、ヒドロキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル−Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_1-3アルコキシカルボニル、Ｃ_1-3アルコキシカルボニル−Ｃ_1-6アルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシ−Ｃ_1-6アルキル、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロエトキシ、Ｃ_1-8アルキル−Ｓ（Ｏ）_0-2、（Ｃ_1-8アルキル）_0-2アミノカルボニル、Ｃ_1-8アルキルオキシカルボニルアミノ、（Ｃ_1-6アルキル）_1-2アミノカルボニルオキシ、（アリール）_1-2アミノ、アリール−Ｃ_1-3アルキルスルホニルアミノ、およびＣ_1-8アルキルスルホニルアミノからなる群から選択される１つのＲ²置換基で独立に置換される；または同じ非芳香族炭素原子上にあるとき、２つのＲ²置換基は、それらが付着される炭素原子と一緒になって、カルボニル基を形成する；または２つのＲ²置換基は、それらが付着される炭素原子と一緒になって、連結して、３から６員までの飽和スピロ−炭素環を形成する；Ｒ⁴は、アリール（ここで、アリール基は、フェニル、ナフチル、ピリジル、フリル、チエニル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、キノリル、イソキノリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、インドリル、ベンズチアゾリル、ベンゾキサゾリル、ジヒドロベンゾフリル、ベンゾ（１，３）ジオキソラニル、およびベンゾ（１，４）ジオキサニルからなる群から選択される）；および一、二、三置換アリール（ここで、置換基は、独立に、水素、ヒドロキシ、ヒドロキシ−Ｃ_1-6アルキル、ハロゲン、Ｃ_1-8アルキル、Ｃ_3-8シクロアルキル、アリール、アリールＣ_1-3アルキル、アミノ、アミノＣ_1-6アルキル、Ｃ_1-3アシルアミノ、Ｃ_1-3アシルアミノ−Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_1-6アルキルア
ミノ、ジ（Ｃ_1-6）アルキルアミノ、Ｃ_1-6アルキルアミノ−Ｃ_1-6アルキル、ジ（Ｃ_1-6）アルキルアミノ−Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_1-4アルコキシ、Ｃ_1-4アルキルチオ、Ｃ_1-4アルキルスルフィニル、Ｃ_1-4アルキルスルホニル、Ｃ_1-4アルコキシ−Ｃ_1-6アルキル、ヒドロキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル−Ｃ₁₆アルキル、Ｃ_1-5アルコキシカルボニル、Ｃ_1-3アルコキシカルボニル−Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_1-5アルキルカルボニルオキシ、シアノ、トリフルオロメチル、１，１，１−トリフルオロエチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロエトキシ、またはニトロである）である；または２つの隣あう置換基は、それらが付着される炭素原子と一緒に連結して、Ｎ，Ｏ、およびＳからなる群から選択される１または２のヘテロ原子を含有する５員または６員飽和または不飽和環を形成し、その環炭素原子は、オキソまたはＣ_1-3アルキルで置換されうる；そしてＲ³は、水素またはＣ_1-3アルキルである。
【００８１】
米国特許公開番号２００２００７７３２１Ａ１に記載されている式ＶＩＩＩの化合物は、それらの種々の異性体、エナンチオマー、互変異性体、ラセミ体および多形体を含め、または薬学上許容しうるそれらの塩またはエステルを、本発明の方法に使用することができる：
【化１６】

【００８２】
式中、
【化１７】

【００８３】
は、４−８員単環または７−１２員二環である；その環は、適宜飽和または不飽和である；その環は、アルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロゲン、アルコキシアルキル、アミノアルキル、ヒドロキシ、ニトロ、アルコキシ、ヒドロキシアルキル、チオアルキル、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アルキルスルホンアミド、アシル、アシルアミノ、アルキルスルホン、スルホンアミド、アリル、アルケニル、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、アルキニル、カルボキサミド、シアノ、および――（ＣＨ₂）_nＣＯＲ（式中、ｎは、０−２であり、そしてＲは、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルまたはアミノである）からなる群から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換される；
【００８４】
Ａ¹は、下記式の５−９員単環または７−１２員二環複素環であり；
【化１８】

【００８５】
少なくとも１つの窒素原子を含有し、そして適宜、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＳＯ₂、およびＣＯからなる群から選択される１から４個のヘテロ原子を含有し；適宜飽和または不飽和である；１つまたはそれ以上のＲ^kにより適宜置換されるのは、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル、チオアルキル、シアノ、アミノ、アルキルアミノ、ハロアルキル、ハロゲン、アシルアミノ、スルホンアミド、および――ＣＯＲ（式中、Ｒは、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルまたはアミノである）からなる群から選択される；
【００８６】
またはＡ¹は、
【化１９】

【００８７】
式中、Ｙ¹は、Ｎ――Ｒ²、Ｏ、およびＳからなる群から選択される；Ｒ²は、Ｈ；アルキル；アリール；ヒドロキシ；アルコキシ；シアノ；アミド；アルキルカルボニル；アリールカルボニル；アルコキシカルボニル；アリールオキシカルボニル；ハロアルキルカルボニル；ハロアルコキシカルボニル；アルキルチオカルボニル；アリールチオカルボニル；アシルオキシメトキシカルボニルからなる群から選択される；Ｒ²は、Ｒ⁷と一緒になって、低級アルキル、チオアルキル、アルキルアミノ、ヒドロキシ、ケト、アルコキシ、ハロ、フェニル、アミノ、カルボキシルまたはカルボキシルエステルからなる群から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された４−１２員二窒素含有複素環を形成する；またはＲ²は、Ｒ⁷と一緒になって、適宜不飽和でＯ、ＮおよびＳから選択される１つまたはそれ以上のヘテロ原子を含有する４−１２員複素環を形成する；またはＲ²は、Ｒ⁷と一緒になって、アリールまたはヘテロアリール環と縮合した５員ヘテロ芳香族環を形成する；Ｒ⁷（Ｒ²と一緒にならない場合）およびＲ⁸は、Ｈ；アルキル；アラルキル；アミノ；アルキルアミノ；ヒドロキシ；アルコキシ；アリールアミノ；アミド、アルキルカルボニル、アリールカルボニル；アルコキシカルボニル；アリールオキシ；アリールオキシカルボニル；ハロアルキルカルボニル；ハロアルコキシカルボニル；アルキルチオカルボニル；アリールチオカルボニル；アシルオキシメトキシカルボニル；シクロアルキル；ビシクロアルキル；アリール；アシル；ベンゾイル；からなる群から独立に選択される；またはＮＲ⁷およびＲ⁸は一緒になって、低級アルキル、カルボキシル誘導体、アリールまたはヒドロキシから選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換され、そして上記環が、適宜、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選択されるヘテロ原子を含有するものである４−１２員一窒素含有単環または二環を形成する；Ｒ⁵は、Ｈ、およびアルキルからなる群から選択される；
【００８８】
またはＡは、
【化２０】

【００８９】
式中、Ｙは、アルキル；シクロアルキル；ビシクロアルキル；アリール；単環複素環からなる群から選択される；Ｚ₁は、ＣＨ₂、ＣＨ₂Ｏ、Ｏ、ＮＨ、ＮＲ_k、ＣＯ、Ｓ、ＳＯ、ＣＨ（ＯＨ）、およびＳＯ₂からなる群から選択され、ここでＲ_kは、Ｈまたは低級アルキルから選択される；Ｚ₂は、Ｏ、ＳおよびＮからなる群から選択される１つまたはそれ以上のヘテロ原子を含有する１−５炭素リンカーである；または、Ｚ₁−Ｚ₂は、さらに、カルボキサミド、スルホン、オキシム、スルホンアミド、アルケニル、アルキニルまたはアシル基を含みうる；ここでＺ₁−Ｚ₂の炭素および窒素原子は、アルキル、アルコキシ、チオアルキル、アルキルスルホン、アリール、アルコキシアルキル、ヒドロキシ、アルキルアミノ、ヘテロアリール、アルケニル、アルキニル、カルボキシアルキル、ハロゲン、ハロアルキルまたはアシルアミノにより適宜置換される；
【００９０】
式中、Ｚ₂−Ｚ₁は、Ｘ₁置換基に対してパラまたはメタ位で、
【化２１】

【００９１】
に付着される；ｎは、整数０、１または２である；Ｒ^Cは、水素；アルキル；ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、アルコキシ、アミノ、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシアルキル、アミノアルキル、ヒドロキシアルキル、チオアルキル、アルキルアミノ、アリールアミノ、アルキルスルホニルアミノ、アシル、アシルアミノ、スルホニル、スルホンアミド、アリル、アルケニル、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、アルキニル、アルキニルアルキル、カルボキシ、アルコキシカルボニル、カルボキサミド、シアノ、および――（ＣＨ₂）_n−ーＣＯＲ（式中、ｎは、０−２であり、そしてＲは、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルおよびアミノからなる群から選択される；Ｘ₁は、――Ｏ――、ＣＯ、ＳＯ₂、ＮＲ^mおよび（ＣＨＲ^p）_qからなる群から選択される；式中、Ｒ^mは、Ｈまたはアルキルである；Ｒ^pは、Ｈ、アルキル、アルコキシまたはヒドロキシであり、そしてｑは、０または１である；Ｘ₂は、――ＣＨＲ^e――、ＣＯ、ＳＯ₂、Ｏ、ＮＲ^fおよびＳからなる群から選択される；Ｒ^eは、Ｈ、アルキル、ヒドロキシおよびアルコキシからなる群から選択される；Ｒ^fは、Ｈまたはアルキルである；ＸまたはＹは、――ＣＲ^g――または――Ｎ――（式中、Ｒ^gは、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、フルオロ、アルコキシアルキル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、アルキルスルホン、ヘテロアラルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、ヒドロキシアルキル、およびカルボニルアルキルからなる群から選択される）からなる群から独立に選択される；基Ｘー−Ｘ₂−ーＹは、アシル、アルキル、アミノ、エーテル、チオエーテル、スルホン、およびオレフィンからなる群から選択される部分を適宜含有して；
【化２２】

【００９２】
３−８員単環系；または８−１１員二環系を形成し；適宜飽和または不飽和で；単環系は、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１−２個のヘテロ原子を適宜含有する；二環系は、Ｎ、Ｏ、Ｓから選択される１−４個のヘテロ原子を適宜含有するか、またはＳＯ₂またはＣＯ等の基を適宜含有する；そしてアルキル、ハロゲン、シアノ、カルボアルコキシ、ハロアルキル、アルコキシアルキル、アルキルスルホン、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキルまたはアルコキシからなる群から選択される１つまたはそれより多くの置換基で都合により置換される；Ｒ^bは、Ｘ₃−Ｒ^h（式中、Ｘ₃は、Ｏ、ＳおよびＮＲ^j（式中、Ｒ^hおよびＲ^jは、Ｈ、アルキル、アシル、アリール、アラルキルおよびアルコキシアルキルからなる群から独立に選択される）からなる群から選択される；およびｎは、０、１または２である）である。
【００９３】
さらに、米国特許公開番号２００２００７２５００号に記載されている式ＩＸまたは式Ｘの化合物は、それらの種々の異性体、エナンチオマー、互変異性体、ラセミ体および多形体を含め、または薬学上許容しうるそれらの塩またはエステルを本発明の方法に使用することができる：
【化２３】

【００９４】
式中、
Ｘは
【化２４】

【００９５】
Ｙは、Ｎ――Ｒ¹、ＯおよびＳからなる群から選択される；Ａは、ＮまたはＣである；
Ｒ¹は、Ｈ、アルキル、アリール、ヒドロキシ、アルコキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、アルケニル、アルキニル、アミド、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ハロアルキルカルボニル、ハロアルコキシカルボニル、アルキルチオカルボニル、アリールチオカルボニル、アシルオキシメトキシカルボニル；アルキル（低級アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、ハロアルキル、シアノ、ニトロ、カルボキシル、アミノ、アルコキシ、アリール；またはアリール（１つまたはそれ以上のハロゲン、ハロアルキル、低級アルキル、アルコキシ、シアノ、アルキルスルホニル、アルキルチオ、ニトロ、カルボキシル、アミノ、ヒドロキシル、スルホン酸、スルホンアミド、アリール、縮合アリール、単環複素環、または縮合単環複素環から選択される１またはそれ以上の置換基で適宜置換された））；アリール（ハロゲン、ハロアルキル、ヒドロキシ、低級アルキル、アルコキシ、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、シアノ、ニトロ、アルキルチオ、アルキルスルホニル、スルホン酸、スルホンアミド、カルボキシル誘導体、アミノ、アリール、縮合アリール、単環複素環および縮合単環複素環から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された）、単環複素環；および単環複素環（ハロゲン、ハロアルキル、低級アルキル、アルコキシ、アミノ、ニトロ、ヒドロキシ、カルボキシル誘導体、シアノ、アルキルチオ、アルキルスルホニル、スルホン酸、スルホンアミド、アリールまたは縮合アリールから選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された）からなる群から選択される；またはＲ¹は、Ｒ⁸と一緒になって、低級アルキル、ヒドロキシ、ケト、アルコキシ、ハロ、フェニル、アミノ、カルボキシルまたはカルボキシルエステル、および縮合フェニルからなる群から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された４−１２員二窒素含有複素環を形成する；またはＲ¹は、Ｒ⁸と一緒になって、低級アルキル、フェニルおよびヒドロキシから選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された５員ヘテロ芳香族環を形成する；またはＲ¹は、Ｒ⁸と一緒になって、フェニル基で縮合された５員ヘテロ芳香族環を形成する；Ｒ⁸（Ｒ¹と一緒にならない場合）およびＲ⁹は、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、アミノ、アルキルアミノ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールアミノ、アミド、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシ、アリールオキシカルボニル、ハロアルキルカルボニル、ハロアルコキシ−カルボニル、アルキルチオカルボニル、アリールチオカルボニル、アシルオキシメトキシカルボニル、シクロアルキル、ビシクロアルキル、アリール、アシル、ベンゾイル；アルキル（低級アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、ハロアルキル、シアノ、ニトロ、カルボキシル誘導体、アミノ、アルコキシ、チオ、アルキルチオ、スルホニル、アリール、アラルキル、アリール（ハロゲン、ハロアルキル、低級アルキル、アルコキシ、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、アルキルチオ、ハロアルキルチオ、チオ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、カルボキシル誘導体、アリールオキシ、アミド、アシルアミノ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリフルオロアルコキシ、トリフルオロメチル、スルホニル、アルキルスルホニル、ハロアルキルスルホニル、スルホン酸、スルホンアミド、アリール、縮合アリール、単環複素環、縮合単環複素環から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された）から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された）；アリール（ハロゲン、ハロアルキル、低級アルキル、アルコキシ、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、アルキルチオ、ハロアルキルチオ、チオ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、カルボキシル誘導体、アリールオキシ、アミド、アシルアミノ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリフルオロアルコキシ、トリフルオロメチルスルホニル、アルキルスルホニル、スルホン酸、スルホンアミド、アリール、縮合アリール、単環複素環、または縮合単環複素環；単環複素環（ハロゲン、ハロアルキル、低級アルキル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、ニトロ、ヒドロキシ、カルボキシル誘導体、シアノ、アルキルチオ、アルキルスルホニル、アリール、縮合アリール、単環、および二環複素環アルキルから選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された）から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された）；−ＳＯ₂Ｒ¹⁰（式中、Ｒ¹⁰は、アルキル、アリールおよび単環複素環からなる群から選択され、全ては、ハロゲン、ハロアルキル、アルキル、アルコキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、アシルアミノ、トリフルオロアルキル、アミド、アルキルアミノスルホニル、アルキルスルホニル、アルキルスルホニルアミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリフルオロメチルチオ、トリフルオロアルコキシ、トリフルオロメチルスルホニル、アリール、アリールオキシ、チオ、アルキルチオ、および単環複素環から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換される）からなる群から独立に選択される；そして
【化２５】

【００９６】
式中、Ｒ¹⁰は、上のとおり定義される；またはＮＲ⁸およびＲ⁹は、一緒になって、低級アルキル、カルボキシル誘導体、アリールまたはヒドロキシから選択された１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された４−１２員一窒素含有単環または二環を形成し、そして上記環は、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選択されるヘテロ原子を都合により含有する；
または、Ｘは
【化２６】

【００９７】
式中、Ｙ¹は、アルキル、シクロアルキル、ビシクロアルキル、アリール、単環複素環、アルキル（ハロゲン、ハロアルキル、アルキル、ニトロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アリール、または縮合アリールから選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された）；アリール（ハロゲン、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アリール、縮合アリール、ニトロ、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、またはアルキルから選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された）；アルキニル、アルケニル、――Ｓ――Ｒ¹¹および――ＯＲ¹¹（式中、Ｒ¹¹は、Ｈ、アルキル、アラルキル、アリール、アルケニル、およびアルキニルからなる群から選択されるか、またはＲ¹¹は、Ｒ⁸と一緒になって、低級アルキル、ヒドロキシ、ケト、フェニル、カルボキシルまたはカルボキシルエステル、および縮合フェニルで適宜置換された４−１２員一窒素および一硫黄または一酸素含有複素環を形成するか、またはＲ¹¹は、Ｒ⁸と一緒になって、チアゾール、オキサゾール、ベンゾキサゾールまたはベンゾチアゾールである；Ｒ⁸は、上のとおり定義される）からなる群から選択される；またはＹ¹（Ｙ¹が、炭素である場合）は、Ｒ⁸と一緒になって、アルキル、アリール、ケトまたはヒドロキシで適宜置換された４−１２員一窒素または二窒素含有環を形成するか；または
Ｘは、
【化２７】

【００９８】
式中、Ｒ¹およびＲ⁸は、一緒になって、低級アルキル、ヒドロキシ、ケト、フェニル、またはカルボキシル誘導体からなる群から選択される１つまたはそれ以上の置換基で適宜置換された５−８員二窒素含有複素環を形成する；Ｒ⁹は、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ハロアルキル−カルボニル、ハロアルコキシカルボニル、アルキルチオカルボニル、アリールチオカルボニル、またはアシルオキシメトキシカルボニルからなる群から選択されるか；またはＸは、
【化２８】

【００９９】
式中、Ｒ¹およびＲ⁸は、一緒になって、ヒドロキシ、ケト、フェニル、またはアルキルで適宜置換された５−８員二窒素含有複素環を形成し；そしてＲ⁹は、両方とも、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ハロアルキルカルボニル、ハロアルコキシカルボニル、アルキルチオカルボニル、アリールチオカルボニルおよびアシルオキシメトキシカルボニルからなる群から選択される；Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴は、Ｈ、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、ハロゲン、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、アシルアミノ、ジアルキルアミノ、シアノ、アルキルチオ、アルキルスルホニル、カルボキシル誘導体、トリハロアセトアミド、アセトアミド、アリール、縮合アリール、シクロアルキル、チオ、単環複素環、縮合単環複素環、およびＸ（ここでＸは、上のとおり定義される）からなる群から選択される１つまたはそれ以上の置換基から独立に選択される；Ｒ⁵、Ｒ⁶およびＲ⁷は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、カルボキシル誘導体、ハロアルキル、シクロアルキル、単環複素環、単環複素環（アルキル、ハロゲン、ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、アリール、縮合アリール、ニトロ、アルコキシ、アリールオキシ、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、スルホンアミド、チオ、アルキルチオ、カルボキシル誘導体、アミノ、アミド、アルキル（ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオ、アルキルチオ、アルキニル、アルケニル、アルキル、アリールチオ、アルキルスルホキシド、アルキルスルホニル、アリールスルホキシド、アリールスルホニル、シアノ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキルスルホンアミド、アリールスルホンアミド、アシルアミド、カルボキシル誘導体、スルホンアミド、スルホン酸、ホスホン酸誘導体、ホスフィン酸誘導体、アリール、アリールチオ、アリールスルホキシド、またはアリールスルホンの１つまたはそれ以上で適宜置換された）で適宜置換された）；全ては、ハロ、アルキル、ハロアルキル、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、カルボキシル誘導体、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アミド、アリール、縮合アリール、単環複素環および縮合単環複素環、単環複素環チオ、単環複素環スルホキシド、および単環複素環スルホンに、アリール環上で適宜置換され、そしてそれは、ハロ、ハロアルキル、ニトロ、ヒドロキシ、アルコキシ、縮合アリール、またはアルキルで適宜置換されうる；アルキルカルボニル、ハロアルキルカルボニル、およびアリールカルボニル、アリール（ハロ、ハロアルキル、アルキル、アルコキシ、アリールオキシ、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、アルキルチオ、ハロアルキルチオ、チオ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アシルオキシ、カルボキシル誘導体、カルボキシアルコキシ、アミド、アシルアミノ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリフルオロアルコキシ、トリフルオロメチルスルホニル、アルキルスルホニル、スルホン酸、スルホンアミド、アリール、縮合アリール、単環複素環および縮合単環複素環に、１つまたはそれ以上の位置で適宜置換された）からなる群から独立に選択される。
【化２９】

【０１００】
式中、Ｒ₁およびＲ₂は、水素、ヒドロキシアルキル、ハロアルキルおよびハロからなる群から選択される。
【０１０１】
ＧｏｏｄｍａｎらＪ．Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．４５（５）巻：１０４５−５１頁（２００２年）に記載されている式ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、ＸＩＶ、ＸＶ、XVＩ、XVＩＩ、ＸＶＩＩＩ、ＸＩＸ、およびＸＸの化合物は、それらの種々の異性体、エナンチオマー、互変異性体、ラセミ体および多形体を含め、または薬学上許容しうるそれらの塩またはエステルを本発明の方法に使用することができる：
【化３０】

【化３１】


【化３２】

【０１０２】
いくつかの場合には、本発明のαｖβ５拮抗剤は、トリペプチド配列ＲＧＤを包含する。インテグリンのためのリガンドとしてのこのような分子の設計は、例えば、Ｐｉｅｒｓｃｈｂａｃｈｅｒら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．５６巻：１５０−１５４頁（１９９４年）；Ｒｕｏｓｌａｔｉ、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｃｅｌｌ．Ｄｅｖ．Ｂｉｏ．１２巻：６９７−７１５頁（１９９６年）；Ｃｈｏｒｅｖら、Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ ３７巻：３６７−３７５頁（１９９５年）；Ｐａｓｑｕａｌｉｎｉら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１３０巻：１１８９−１１９６頁（１９９５年）；Ｓｍｉｔｈら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９巻：３２７８８−３２７９５頁（１９９４年）；および米国特許番号第５，７８０，４２６号および第６，６８３，０５１号で例示される。
【０１０３】
Ｃ．αｖβ５インテグリンの発現を阻害すること
上記の検討のとおり、本発明は、αｖβ５インテグリンに対するリガンドの結合を遮断することが、ＰＥの重篤度を減じるという驚くべき知見に基づいている。例えば、後述の実施例３で示されるとおり、本発明者らは、β５^-/-マウスが、肺損傷に関連したＰＥを発生しないことを示した。したがって、転写または翻訳レベルで、αｖβ５インテグリン遺伝子の特異的発現に干渉するヌクレオチド配列を、ＰＥを治療または予防するために使用することができる。このアプローチは、例えば、ｓｉＲＮＡを用いたｍＲＮＡの分解を誘発するか、またはｍＲＮＡをアンチセンス核酸でマスキングするかのいずれかによって、特異的に突然変異したｍＲＮＡの転写または翻訳を遮断するｓｉＲＮＡおよび／またはアンチセンス・オリゴヌクレオチドを利用しうる。
【０１０４】
１．ｓｉＲＮＡ
β遺伝子に対応する二本鎖ｓｉＲＮＡは、β５ｍＲＮＡ転写物の分解を誘発することによってαｖβ５インテグリンの転写および／または翻訳をサイレントにし、したがって、αｖβ５インテグリンの発現を予防することによってＰＥを治療または予防するために使用しうる。ｓｉＲＮＡは、一般的には、長さ約５から約１００ヌクレオチド、さらに一般的には、長さ約１０から約５０ヌクレオチド、最も一般的には、長さ約１５から約３０ヌクレオチドである。ｓｉＲＮＡ分子およびそれらを発生させる方法は、例えば、Ｂａｓｓ、２００１年、Ｎａｔｕｒｅ、４１１巻、４２８−４２９頁；Ｅｌｂａｓｈｉｒら、２００１年、Ｎａｔｕｒｅ、４１１巻、４９４−４９８頁；国際公開番号００／４４８９５号；国際公開番号０１／３６６４６号；国際公開番号９９／３２６１９号；国際公開番号００／０１８４６号；国際公開番号０１／２９０５８号；国際公開番号９９／０７４０９号；および国際公開番号００／４４９１４号に記載されている。ｄｓＲＮＡまたはｓｉＲＮＡを転写するＤＮＡ分子（例えば、ヘヤピン二重鎖として）は、ＲＮＡｉも提供する。ｄｓＲＮＡを転写するためのＤＮＡ分子は、米国特許番号第６，５７３，０９９号で、そして米国特許出願公開番号第２００２／０１６０３９３号および第２００３／００２７７８３号およびＴｕｓｃｈｌおよびＢｏｒｋｈａｒｄｔ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｓ、２巻：１５８頁（２００２年）で開示される。例えば、ジーンバンク（Ｇｅｎｂａｎｋ）受託番号：ＡＫ０５４９６８号；ＢＦ５８８７８４号；ＢＥ２０８８２０号；ＢＥ２０７８５９号；またはＢＥ２０６５６７号で示される核酸配列に特異的にハイブリダイズするｄｓＲＮＡオリゴヌクレオチドは、本発明の方法に使用することができる。ＲＮＡ干渉の不在下で検出されるＰＥ徴候に比較して重篤度における減少は、ｓｉＲＮＡの効果をモニターするために使用することができる。
【０１０５】
ｓｉＲＮＡは、ｓｉＲＮＡの注射、吸入、または経口摂取によることを含めて、当業界で知られるあらゆる手段を使用して、対象に送達されうる。ｓｉＲＮＡのための別の適切な送達システムは、例えば、巨大分子複合体、ナノカプセル、ミクロスフィア、ビーズ、および水中油型エマルジョン、ミセル、混合ミセル、およびリポソームを含めた脂質ベースシステムなどのコロイド分散系である。本発明の好ましいコロイド系は、リポソームである。リポソームは、インビトロおよびインビボでの送達ビヒクルとして有用な人工膜小胞体である。核酸は、リポソーム内にＲＮＡおよびＤＮＡを含み、そして生物学上活性な形態で細胞に送出される（Ｆｒａｌｅｙら、Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｃｉ．、６巻：７７、１９８１年）。リポソームは、当業界で知られるいずれかの手段を使用して、特定の細胞型または組織に標的にされうる。
【０１０６】
２．アンチセンス・オリゴヌクレオチド
β５ポリペプチドをコードする核酸配列に特異的にハイブリダイズするアンチセンス・オリゴヌクレオチドは、αｖβ５インテグリンの転写および／または翻訳をサイレントにし、それによりＰＥを治療または予防するためにも使用されうる。例えば、ジーンバンク（Ｇｅｎｂａｎｋ）受託番号：ＢＦ５８８７８４号；ＢＥ２０８８２０号；ＢＥ２０７８５９号；ＢＥ２０６５６７号；ＮＭ＿００２２１３号；ＢＣ００６５４１号；ＮＭ＿１７４６７９号；ＡＦ４６８０５９号；ＡＹ４３４０９０号；ＮＭ＿０１０５８０号；ＢＣ０５８２４６号；ＸＭ＿１４７２３７号；ＡＦ０２２１１１号；ＡＦ０２２１１０号；ＡＦ０４３２５７号；ＡＦ０４３２５６号；およびＳ５８６４４号で示される核酸配列に特異的にハイブリダイズするアンチセンス・オリゴヌクレオチドを、本発明の方法に使用することができる。アンチセンス核酸の不在下で検出される徴候と比較して、ＰＥ徴候の重篤度における減少は、アンチセンス核酸の効果をモニターするために使用することができる。
【０１０７】
アンチセンス核酸は、特異的ｍＲＮＡ分子の少なくとも一部に相補的であるＤＮＡまたはＲＮＡ分子である（例えば、Ｗｅｉｎｔｒａｕｂ、Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ａｍｅｒｉｃａｎ，２６２巻：４０頁（１９９０年）を参照）。一般的には、合成アンチセンス・オリゴヌクレオチドは、通常、１５から２５塩基の間の長さである。アンチセンス核酸は、天然に生じるヌクレオチドまたは例えばホスホロチオエート、メチルホスホネート、および−アノマー糖−ホスフェート、骨格修飾ヌクレオチドなどの修飾ヌクレオチドを包含しうる。
【０１０８】
細胞中で、アンチセンス核酸は、対応のｍＲＮＡにハイブリダイズし、二本鎖分子を形成する。細胞は、二本鎖であるｍＲＮＡを翻訳しないので、アンチセンス核酸は、ｍＲＮＡの翻訳に干渉する。約１５ヌクレオチドのアンチセンス・オリゴマーは、それらが容易に合成され、そして標的ヌクレオチド突然変異体産生細胞に導入されるときに、それより大きい分子より問題を引き起こしにくいために好ましい。遺伝子のインビトロ翻訳を阻害するアンチセンス法の使用は、当業界でよく知られている（Ｍａｒｃｕｓ−Ｓａｋｕｒａ、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、１７２巻：２８９頁（１９８８年））。一般的でないが、ＤＮＡに直接結合するアンチセンス分子を使用しうる。
【０１０９】
αｖβ５インテグリン遺伝子に特異的なアンチセンス・ポリヌクレオチドの送達は、例えば、ポリヌクレオチドの直接注入、吸引、または摂取を含めた当業界で知られるあらゆる手段を使用して達成されうる。さらに、アンチセンス・ポリヌクレオチドは、ここに示されるとおり組換え発現ベクター（例えば、アデノウイルス、ヘルペスウイルス、ワクシニアウイルス、またはレトロウイルスに基づいたウイルスベクター）またはコロイド性分散液系（例えば、リポソーム）を使用して送達されうる。ここに教示されるとおり遺伝子療法として利用されうる種々のウイルスベクターを含む。
【０１１０】
ＩＶ．別のαｖβ５拮抗剤を特定すること
αｖβ５インテグリンの別の拮抗剤を、当業者に周知の方法によって容易に特定しうる。拮抗剤についてスクリーニングするための１つの簡便な方法は、インテグリンの既知リガンドの結合について競合する候補の拮抗剤の能力を測定することを含む。例えば、ビトロネクチン、フィブロネクチン、オステオポンチン、テネイシンｃおよびアデノウイルス・ペントンベースは、αｖβ５インテグリンの候補の拮抗剤を特定する競合アッセイに使用されうるαｖβ５インテグリンの既知リガンドである。アミノ酸配列ＲＧＤを包含する他のポリペプチドは、競合アッセイでも使用されうる。さらに、αｖβ５インテグリンに結合するモノクローナル抗体およびそれのフラグメントを、αｖβ５インテグリンの別の拮抗剤についてスクリーニングするために使用しうる。いくつかの実施態様では、ＡＬＵＡＬおよびαｖβ５に対する結合についてＡＬＵＬＡと競合する抗体を、αｖβ５インテグリンの別の拮抗剤についてスクリーニングするために使用する。
【０１１１】
競合アッセイは、当業界でよく知られている。一般的には、αｖβ５インテグリンのリガンド、またはαｖβ５インテグリンに結合するリガンドについて競合する抗体（例えば、ＡＬＵＡＬ）を標識して、その結果、αｖβ５インテグリンに対する結合における差（例えば、αｖβ５インテグリンについて漸増量の候補の競合リガンドの存在下で）を測定しうる。リガンドは、天然に生じるリガンド並びに合成リガンドでありうる。競合アッセイは、候補の競合相手である拮抗剤の親和性を示す。
【０１１２】
多数の異なるスクリーニング・プロトコールは、細胞で、例えば、哺乳類細胞で、そして特にヒト細胞で、特定の位相のαｖβ５インテグリンの活性または機能のレベルを調節する剤を特定するために利用されうる。一般的用語で、スクリーニング法は、例えば、αｖβ５インテグリンに結合すること、またはαｖβ５インテグリンに特異的な抗体（例えば、ＡＬＵＬＡ）またはリガンド（例えば、ビトロネクチン、フィブロネクチン、オステオポンチン、テネイシンCおよびアデノウイルスペントンベース）が、αｖβ５インテグリンに結合することを妨げることによって、αｖβ５に干渉する剤を特定するために複数の剤をスクリーニングすることを含む。
【０１１３】
そのように特定された剤の内の少なくともいくつかが、αｖβ５インテグリン拮抗剤でありそうな場合、αｖβ５インテグリンに結合する能力のある剤についてスクリーニングすることによって、予備スクリーニングを行いうる。結合アッセイは、通常には、αｖβ５インテグリンを、１つまたはそれより多くの試験剤と接触させ、そしてαｖβ５インテグリンおよび試験剤が結合複合体を形成するのに十分な時間を与えることを含む。いずれの結合複合形成体も多数の確立した分析技術を用いて検出することができる。タンパク結合アッセイには、それに限定されないが、免疫組織化学的結合アッセイ、フローサイトメトリまたは他のアッセイが挙げられる。このようなアッセイで利用されるαｖβ５インテグリンは、自然に発現されるか、クローン化されるか、または合成されうる。
【０１１４】
本発明のスクリーニング法は、インビトロまたは細胞系のアッセイとして行われうる。細胞系のアッセイを、αｖβ５インテグリンが発現されるあらゆる細胞で行うことができる。細胞系のアッセイには、剤結合またはその剤によるαｖβ５インテグリン活性の修飾についてスクリーニングするためのαｖβ５インテグリンを含有する全細胞または細胞分画を含みうる。当業者は、内因性αｖβ５インテグリンを含有しないαｖβ５インテグリンが細胞中で発現されうることをよく理解するであろう。適切な細胞系のアッセイは、例えば、ＤｅＰａｏｌａら、Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ２９巻：１−９頁（２００１年）に記載されている。
【０１１５】
当初にαｖβ５インテグリンと相互作用すると認識された剤は、明白な活性を確認するためにさらに試験されうる。好ましくは、このような研究は、後述の実施例１で示されるとおりＰＥの適切な細胞系または動物モデルで行われる。このような方法の基本的フォーマットは、モデルとしての役割を果たす動物に対する当初のスクリーニングの間に特定されるリード化合物を投与すること、そしてその後、実際に、ＰＥが改善されるかどうかを測定することを含む。有効性を確認する研究で利用される動物モデルは、一般に、いずれかの種類の哺乳類である。適切な動物の特定の例は、それに限定されないが、霊長類（例えば、チンパンジー、サルなど）およびげっ歯類（例えば、マウス、ラット、モルモット、ウサギなど）が挙げられる。
【０１１６】
αｖβ５インテグリンの候補の拮抗剤として試験される剤は、ポリペプチド、糖、核酸または脂質等のあらゆる小化合物、または生物学上の実体でありうる。または、モジュレータは、αｖβ５インテグリンまたはαｖβ５インテグリン・リガンドの遺伝子改変版でありうる。最も頻繁には、水または有機（特に、ＤＭＳＯ系の）溶液に溶解されうる化合物を使用するが、基本的に、あらゆる化合物を、本発明のアッセイで候補のモジュレータまたはリガンドとして使用することができる。アッセイは、一般に平行に行われる（例えば、ロボットアッセイにおけるマイクロタイター平板でのマイクロタイター・フォーマットで）、アッセイ段階を自動化し、そしてアッセイするあらゆる簡便な源から化合物を供給することによって、大きな化合物ライブラリーをスクリーニングするように設計される。
【０１１７】
いくつかの実施態様では、その剤は、１，５００ダルトン未満、そしていくつかの場合には、１，０００、８００、６００、５００、または４００ダルトン未満の分子量を示す。小分子が、高分子量の剤より、経口吸収を含めて、優れた薬理学的特徴と合致した物理化学的特性を示す高い可能性を示すので、比較的小さなサイズの剤が望ましい可能性がある。例えば、透過性および溶解性に基づいた剤として首尾よくいきそうにない剤は、以下のとおりＬｉｐｉｎｓｋｉらによって記載されている：５Ｈより多くの結合ドナー（ＯＨおよびＮＨの総計として表される）を示し、５００を超える分子量を示し、５を越えるＬｏｇＰを示し（または４．１５を越えるＭＬｏｇＰ）；および／または１０Ｈより多くの結合アクセプター（ＮおよびＯの総計として表される）を有する。例えば、Ｌｉｐｉｎｓｋｉら、Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｓ ２３巻：３−２５頁（１９９７年）を参照。生物学的輸送体についての支持体である化合物クラスは、特に規則に対する例外である。
【０１１８】
１つの実施態様では、高処理量スクリーニング法は、大量の候補となる治療化合物（候補となるモジュレータまたはリガンド化合物）を含有するコンビナトリアル化学またはペプチドライブラリーを提供することを含む。その後、このような「コンビナトリアル化学ライブラリー」または「リガンドライブラリー」を、本明細書中で示されるとおり、所望の特徴的活性を表示するライブラリー構成要素（特定の化学種またはサブクラス）を特定する１つまたはそれ以上のアッセイでスクリーニングする。そのように同定された化合物は、標準の「先導化合物」として役割を果たしうるか、またはそれら自身、候補となる、または実際の治療剤として使用されうる。
【０１１９】
コンビナトリアル化学ライブラリーは、試薬のような多数の化学「構築ブロック」を組合わせることによって、化学合成または生物学的合成のいずれかにより生成される多様な化学化合物の集合である。例えば、ポリペプチド・ライブラリー等の線状コンビナトリアル化学ライブラリーは、所定の化合物長（すなわち、ポリペプチド化合物でのアミノ酸の量）について可能な方法毎に化学構築ブロック（アミノ酸）の組を組合わせることによって形成される。化学構築ブロックのこのようなコンビナトリアル混合を通して、数百万の化合物を合成しうる。
【０１２０】
コンビナトリアル化学ライブラリーの作製およびスクリーニングは、当業者に周知である。このようなコンビナトリアル化学ライブラリーとしては、それに限定されないが、ペプチド・ライブラリーがある（例えば、米国特許第５，０１０，１７５号、Ｆｕｒｋａ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｐｒｏｔ．Ｒｅｓ．３７巻：４８７−４９３頁（１９９１年）およびＨｏｕｇｈｔｏｎら、Ｎａｔｕｒｅ３５４巻：８４−８８頁（１９９１年）を参照）。化学的多様性ライブラリーを生じる他の化学も使用しうる。このような化学としては、それに限定されないが、ペプトイド（例えば、ＰＣＴ公開番号ＷＯ９１／１９７３５号）、コード化ペプチド（例えば、ＰＣＴ公開番号ＷＯ９３／２０２４２号）、ランダム・バイオ−オリゴマー（例えば、ＰＣＴ公開番号ＷＯ９２／０００９１号）、ベンゾジアゼピン（例えば、米国特許番号第５，２８８，５１４号）、ヒダントイン、ベンゾジアゼピン、およびジペプチド等のダイバーソマー（diversomer）（Ｈｏｂｂｓら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０巻：６９０９−６９１３頁（１９９３年））、ビニル性ポリペプチド（Ｈａｇｉｈａｒａら、Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１４巻：６５６８頁（１９９２年））、ショ糖骨格（scaffolding）を有する非ペプチド性ペプチ
ド擬態物（Ｈｉｒｓｃｈｍａｎｎら、Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１４巻：９２１７−９２１８頁（１９９２年））、小化合物ライブラリーの類似体有機合成（Ｃｈｅｎら、Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１６巻：２６６１頁（１９９４年））、オリゴカルバメート（Ｃｈｏら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６１巻：１３０３頁（１９９３年））、および／またはペプチジルホスホネート（Ｃａｍｐｂｅｌｌら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５９巻：６５８頁（１９９４年））、核酸ライブラリー（Ａｕｓｕｂｅｌ、ＢｅｒｇｅｒおよびＳａｍｂｒｏｏｋ、全て上記を参照）、ペプチド核酸ライブラリー（米国特許番号第5,539,083号を参照）、抗体ライブラリー（例えば、Ｖａｕｇｈｎら、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１４巻（３）：３０９−３１４頁（１９９６年）およびＰＣＴ／ＵＳ９６／１０２８７号を参照）、カーボハイドレート・ライブラリー（例えば、Ｌｉａｎｇら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２７４巻：１５２０−１５２２頁（１９９６年）および米国特許第５，５９３，８５３号を参照）、小有機分子ライブラリー（例えば、ベンゾジアゼピン、Ｂａｕｍ ＣおよびＥＮ、１月１８日、３３頁（１９９３年）；イソプレノイド、米国特許第５，５６９，５８８号；チアゾリジノンおよびメタチアザノン、米国特許第５，５４９，９７４号；ピロリジン、米国特許第５，５２５，７３５号および第５，５１９，１３４号；モルホリノ化合物、米国特許第５，５０６，３３７号；ベンゾジアゼピン、第５，２８８，５１４号などを参照）が挙げられる。
【０１２１】
コンビナトリアル・ライブラリーの作製のためのデバイスは、市販で入手可能である（例えば、ＥＣＩＳ ＴＭ、アプライド・バイオフェジックス・インク．、トロイ、ニューヨーク（Ｔｒｏｙ，ＮＹ）、ＭＰＳ ３９０ＭＰＳ、アドバンスド・ケム・テック、ケンタッキー州ルイズビル（Ｌｕｉｓｖｉｌｌｅ，ＫＹ）、シンフォニー、レーニン、マサチューセッツ州ウォバーン（Ｗｏｂｕｒｎ，ＭＡ）、４３３Ａ アプライド・バイオシステムズ、カリフォルニア州フォスター・シティー（Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ，ＣＡ）、９０５０プラス、ミリポア、マサチューセッツ州ベッドフォード（Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ））。さらに、数多くのコンビナトリアル・ライブラリーは、それら自身、市販で入手可能である（例えば、ＣｏｍＧｅｎｅｘ、ニュージャージー州プリンストン（Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ。Ｊ．）、トリポス，インク．（Ｔｒｉｐｏｓ，Ｉｎｃ．）、ミズーリー州セントルイス（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）、３ディー・ファーマシューティカルズ（３Ｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ペンシルベニア州エキストン（Ｅｘｔｏｎ，ＰＡ）、マーテック・バイオサイエンシズ（Ｍａｒｔｅｋ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、メリーランド州コロンビア（Ｃｏｌｕｍｂｉａ，ＭＤ）など）。
【０１２２】
Ｖ．治療的処置
上記検討のとおり、本発明は、αｖβ５インテグリンの拮抗剤を包含する組成物も提供する。本発明の組成物は、例えば、ＰＥ、脳梗塞、心筋梗塞、および癌（すなわち、新脈管形成）を含めたαｖβ５インテグリンを含む疾患を治療または予防するために提供されうる。
【０１２３】
１つの実施態様では、本発明の組成物（例えば、ＡＬＵＬＡ、ヒト化ＡＬＵＬＡ、またはＡＬＵＬＡフラグメントを包含する組成物）は、ＰＥを有するか、またはＰＥを発現する危険のある対象でＰＥを治療または予防ために提供されうる。例えば、毒性吸入因子にさらされた対象は、そのような暴露の後に処置されそうであるのに対して、ＰＥの危険にある患者は、予防的および／または治療的に処置されうる。ＰＥの危険ある患者としては、急性吸引を有する患者、細菌性敗血症の徴候を示す患者、その血管培養液が、グラム陽性またはグラム陰性細菌に陽性である患者、膵臓炎を有する患者、または出血性ショックにある患者が挙げられる。
【０１２４】
本発明の組成物は、ある期間（例えば、２、３、４、５、６日または１−３週またはそれより多く）、定期的に（例えば、毎日）投与されうる。
【０１２５】
注射（例えば、静脈内、腹腔内、皮下、筋肉内、または皮内（ｉｎｔｒａｄｅｍａｌ））、吸引、経皮用途、直腸投与、または経口投与を含めて、当業界で知られるあらゆる経路を用いて、本発明の組成物を、哺乳類対象に直接投与して、αｖβ５結合を遮断しうる。
【０１２６】
本発明の医薬組成物は、薬学上許容しうるキャリヤを包含しうる。薬学上許容しうるキャリヤは、投与されるべき特定の組成物によって、並びに、組成物を投与するために使用される特定の方法によって決定される。したがって、本発明の医薬組成物には広範で多様な適切な製剤がある（例えば、レミントンの医薬科学、１７版、１９８９年を参照）。
【０１２７】
本発明の組成物は、単独で、または他の適切な成分と組合わせて、吸入を介して投与されるべきエアロゾル製剤（すなわち、それは、「霧状にされ」うる）にされうる。エアロゾル製剤は、ジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素などの加圧許容性の高圧ガスに入れることができる。
【０１２８】
投与に適切な製剤としては、水性および非水性溶液、等張性滅菌溶液が挙げられ、そしてそれは、抗酸化剤、緩衝液、細菌静止剤、および製剤を等張にさせる溶質；および懸濁剤、溶解化剤、粘度付与剤、安定化剤、および保存剤を含みうる水性および非水性滅菌懸濁液を含みうる。本発明の実施に際して、組成物を、例えば、経口、鼻、局所、静脈、腹腔内、または胸郭内で投与しうる。化合物の製剤は、アンプルおよびバイアルのような単位用量、または複数回用量を封入した容器中に存在しうる。溶液および懸濁液は、先に示した種類の滅菌粉末、顆粒、および錠剤から製造しうる。調節剤も、調製された食品または薬剤の一部として投与されうる。
【０１２９】
経口投与に適切な製剤は、（ａ）水、生理食塩水またはＰＥＧ４００等の希釈剤中に懸濁された有効量の包装された核酸等の液体溶液、（ｂ）液体、固体、顆粒またはゼラチンとして、各々、予め測定された量の活性成分を含有するカプセル、小袋（sachet）または錠剤、（ｃ）適切な液体中の懸濁液、および（ｄ）適切なエマルジョンを包含しうる。錠剤形態としては、１つまたはそれ以上のラクトース、ショ糖、マンニトール、ソルビトール、リン酸カルシウム、トウモロコシ澱粉、ジャガイモ澱粉、微細セルロース、ゼラチン、コロイド性二酸化シリコン、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、および他の賦形剤、着色剤、充填剤、結合剤、希釈剤、緩衝剤、湿潤剤、防腐剤、風味剤、染料、崩壊剤、および薬学上適合しうるキャリヤを含みうる。薬用ドロップ形態は、ショ糖などの風味剤中に活性成分を包含し得て、同様に、トローチは、活性成分、当業界で知られるキャリヤに加えて、ゼラチンおよびグリセリン、またはショ糖およびアカシアエマルジョン、ゲルなどの不活性基材中に活性成分を包含する。
【０１３０】
本発明の内容で、患者に投与される用量は、時間をかけて対象に有益な応答、例えば、肺毛細管静水圧の減少、肺中の液体の減少、肺中の液体蓄積の速度の減少、またはそれらの組み合わせをもたらすのに十分であるべきである。あらゆる患者についての最適な用量レベルは、他の薬剤との可能な組み合わせで、そしてＰＥの重篤度で使用される特定の調節剤の効力、患者の年齢、体重、体力、および食事を含めた多様な因子による。用量サイズは、特定の対象での特定の化合物またはベクターの投与に付随するあらゆる副作用の存在、特性および範囲によっても決定される。
【０１３１】
投与されるべきαｖβ５インテグリンの拮抗剤の有効量の拮抗剤を決定する上で、医師は、拮抗剤の循環する血漿濃度および拮抗剤毒性を評価しうる。一般に、拮抗剤の用量当量は、一般的な対象について約１ｎｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇまでである。
【０１３２】
投与について、αｖβ５インテグリンの拮抗剤は、拮抗剤のＬＤ₅₀、および種々の濃度での拮抗剤の副作用よって決定される、対象の全体的および総合的な健康に適合した速度で投与されうる。投与は、単用量または分割用量を介して達成されうる。
【０１３３】
ＶＩ．組合せ療法
いくつかの実施態様では、αｖβ５インテグリンの拮抗剤は、αｖβ５インテグリンと関連した疾患または障害（例えば、脳梗塞、心筋梗塞、および癌（すなわち、新脈管形成））を治療または予防するための第2の治療剤と併用して投与される。例えば、αｖβ５インテグリンの拮抗剤を、急性肺損傷および／またはＡＲＤＳまたはＰＥを治療または予防するための第2の治療剤と併用して投与しうる。例えば、αｖβ５インテグリンの拮抗剤（例えば、ＡＬＵＬＡ、ヒト化ＡＬＵＬＡ、またはＡＬＵＬＡのフラグメント）を、例えば、利尿剤、気管支拡張剤、麻薬、酸素および選択的止血適用を含めたＰＥのための標準処置のいずれかと併用して投与しうる。さらに、αｖβ５インテグリンの拮抗剤は、急性肺損傷および／またはＡＲＤＳまたはＰＥに関連する代謝経路を標的にする剤と併用して投与されうる。例えば、αｖβ５インテグリンの拮抗剤は、ＴＧＦβ経路阻害剤、活性化プロテインＣ、ステロイド、ＧＭ−ＣＳＦ、血小板阻害剤、β−２作動薬、界面活性剤、αｖβ５インテグリンまたはβ５に特異的に結合する抗体、αｖβ５インテグリンの第2の拮抗剤、αｖβ6インテグリンに特異的に結合する抗体、αｖβ6インテグリンの拮抗剤、トロンビン受容体拮抗剤、抗トロンビン剤、ロー・キナーゼ阻害剤、および例えばここに示されるアンチセンス・オリゴヌクレオチドおよびｓｉＲＮＡを含めたαｖβ５インテグリンの発現を阻害する核酸と併用して投与されうる。適切なＴＧＦβ経路阻害剤としては、例えば、Ｌｉｎｇら、Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．１４巻：３７７−３８８（２００３年）、ＭｃＣｏｒｍｉｃｋら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６３巻：５６９３−５６９９頁（１９９９年）、およびＣｏｒｄｅｉｒｏ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．５巻（２）：１９９−２０３頁（２００３年）に記載されている、例えば、ＴＧＦ−β抗体（ＴＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２、ＴＧＦ−β３を特異的に阻害するもの、またはそれのいずれかの組合せを含めた）；例えば、ＤａＣｏｓｔａ Ｂａｙｆｉｅｌｄ、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．６５巻（３）：７４４−５２頁（２００４年）、Ｌａｐｉｎｇ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３巻（２）：２０４−８頁（２００３年）、Ｌａｐｉｎｇ、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．６２巻（１）：５８−６４頁（２００２年）に記載されている、ＴＧＦ−β受容体ＩＩ型阻害剤またはＴＧＦ−β受容体Ｉ型キナーゼ阻害剤；例えば、Ｐｉｔｔｅｔ、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１０７巻：１５３７−１５４４頁（２００１年）；Ｗａｎｇら、Ｅｘｐ Ｌｕｎｇ Ｒｅｓ．２８巻（６）：４０５−１７頁（２００２年）およびＷａｎｇ、Ｔｈｏｒａｘ ５４巻（９）：８０９−１２頁（１９９９年）に記載されている、溶解性ＴＧＦ−β受容体ＩＩ型；例えば、Ｚｈａｎｇ、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１２１巻（４）：７１３−９頁（２００３年）に記載されている、溶解性潜在関連ペプチド；例えば、Ｃｒａｗｆｏｒｄら、Ｃｅｌｌ ９３巻：１１５９−１１７０頁（１９９８年）、Ｒｉｂｅｒｉｒｏら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４巻：１３５８６−１３５９３頁（１９９９年）、およびＳｃｈｕｌｔｚ−Ｃｈｅｒｒｙら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９巻：２６７７５−２６７８２頁（１９９４年）に記載されている、トロンボスポンジンＩ阻害剤が挙げられる。適切なβ−２作動薬としては、例えば、アルブテロール、ビトルテロール、フォルモテロール、イソプロテレノール、レバルブテロール、メタプロテレノール、ピルブテロール、サルメテロール、およびテルブタリンが挙げられる。適切な界面活性剤としては、Ｔａｅｕｓｃｈら、Ａｃｔａ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｉｎ ２３ 補足版：１１−１５頁（２００２年）に記載されている、例えば、エキソサーフ、インファサーフ、ＫＬ−４、プマクタント、サルバンタ、ベンチキュート、および界面活性剤ＴＡが挙げられる。適切な抗トロンボ剤としては、例えば、ヒルジン、ヒルログ（バイオゲン（Ｂｉｏｇｅｎ））、アルガトロバン（テキサス・バイオテクノロジー）およびエフェガトラン（リリー（Ｌｉｌｌｙ））および米国特許番号第６，５１８，２４４号に記載される化合物が挙げられる。適切なトロンビン受容体拮抗剤は、例えば、米国特許番号第６，５４４，９８２号；第６，５１５，０２３号；第６，４０３，６１２号；第６，３９９，５８１号；および第５，４４６，１３１号に記載されている。適切なロー・キナーゼ阻害剤としては、例えば、Ｔａｓａｋａら、Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２００５年５月１８日に記載されている、例えば、Ｙ−２７６３２；例えば、Ｎｉｓｈｉｋｉｍｉら、Ｊ Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ．２２巻（９）：１７８７−９６頁（２００４年）に記載されてりう［Ｅｐｕｂ印刷前］、ｆａｓｕｄｉ］、１−（５−イソキノリンスルホニル）−ホモピペラジン（ＨＡ−１０７７）、例えばＳａｓａｋｉら、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ．９３巻（２−３）：２２５−３２頁（２００２年）で記載されている（Ｓ）−（＋）−２−メチル−１−［（４−メチル−５−イソキノリン）スルホニル］−ホモピペラジン（Ｈ−１１５２Ｐ）、および例えば、米国特許番号第６，４５１，８２５号および第６，２１８，４１０号および米国特許公開番号２００５００１４７８３号および２００３０１３４７７５号で記載されている追加のロー・キナーゼ阻害剤が挙げられる。
【０１３４】
さらに、αｖβ５インテグリンの拮抗剤は、米国特許公開番号第２００２０１９２１８６号に記載されているアデノウイルス発現ＡＴＰaseと；米国特許公開番号第２００２０００４０４２号に記載されているβ２アドレナリン作動性受容体と；米国特許番号第６，２８４，７５１号に記載されているＶＥＧＦβ拮抗剤と；米国特許番号第５，２３１，１１４号に記載されている脂質過酸化阻害剤と；および例えば、米国特許公開番号第２０００／４００１９２０６号、第２００４／００１９０３７号、第２００４／００１９０３５号、第２００４／００１８１９２号、第２００４／２００４／００１００２３号、第２００３／０１８１４４０号、第２００３／０１７１２７１号、第２００３／０１３９３９８号、第２００２／００３７８８９号、第２００２／００７７３２１号、第２００２／００７２５００号、米国特許第６，６８３，０５１号およびＧｏｏｄｍａｎら、Ｊ．Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．４５巻（５）：１０４５−５１頁（２００２年）に記載されているαｖβ６、αｖβ５、およびαｖβ３インテグリンについての小分子阻害剤と併用して投与しうる。
【０１３５】
αｖβ５インテグリンの拮抗剤（例えば、ＡＬＵＬＡ、ヒト化ＡＬＵＬＡ、またはＡＬＵＬＡのフラグメント）および第2の治療剤は、同時に、または順次投与されうる。例えば、αｖβ５インテグリンの拮抗剤を、最初に、続いて第2の治療剤を投与しうる。または、第2の治療剤を、最初に、続いてαｖβ５インテグリンの拮抗剤を投与しうる。いくつかの場合には、αｖβ５インテグリンの拮抗剤および第2の治療剤を、同一の製剤で投与する。他の場合には、αｖβ５インテグリンの拮抗剤および第2の治療剤を、別個の製剤で投与する。αｖβ５インテグリンの拮抗剤および第2の治療剤を、別個の製剤で投与するとき、それらの投与は、同時または順次に行いうる。
【０１３６】
投与については、対象の主要部および全般的健康に使用されるときに、αｖβ５インテグリンの拮抗剤および第2の治療剤を、拮抗剤および第2の治療剤を組み合わせたＬＤ₅₀、および種々の濃度での拮抗剤および第2の治療剤の副作用によって決定された、対象の全体的および総合的な健康に適合した速度で投与しうる。いくつかの場合には、αｖβ５インテグリンの拮抗剤および第2の治療剤を、サブ治療用量または治療用量で各々投与する。
【０１３７】
ＶＩＩ．キット
本発明は、ＰＥ、脳梗塞、心筋梗塞、および癌（すなわち、新脈管形成）を含めた、αｖβ５インテグリンに関与する疾患を治療または予防するためのキットも提供する。そのキットは、αｖβ５インテグリンの拮抗剤（例えば、ＡＬＵＬＡ、ヒト化ＡＬＵＬＡ、またはＡＬＵＬＡのフラグメントを含めた、例えば、αｖβ５インテグリンに結合する抗体）、およびβ５に結合する抗体（例えば、ＡＬＵＬＡ、ヒト化ＡＬＵＬＡ、またはＡＬＵＬＡのフラグメント）、およびＡＬＵＬＡ）と競合する抗体、およびＰＥを含めたαｖβ５インテグリンに関与する疾患の治療のための第2の治療剤を包含する。適切な第2の治療剤としては、例えば、ＴＧＦβ経路阻害剤、活性化プロテインＣ、ステロイド、ＧＭ−ＣＳＦ、血小板阻害剤、利尿剤；気管支拡張剤、αｖβ５インテグリンまたはβ５に特異的に結合する抗体、αｖβ５インテグリンの第2の拮抗剤、αｖβ６に特異的に結合する抗体、αｖβ６インテグリンの拮抗剤、β２−作動薬、および界面活性剤が挙げられる。キットは、キットを使用するための書面の指示（例えば、マニュアル）も含みうる。
【実施例】
【０１３８】
実施例１：材料および方法
げっ歯類の片肺虚血−ＰＥの再灌流肺損傷モデル：マウスまたはラットが、肺移植、心肺バイパス、肺性血栓内膜摘出術、または重篤なショックを受ける。次に、虚血および再灌流を、それぞれ、３０分および３時間誘発させた。虚血を誘発するために、３０分間、左門を遮断すること（例えば、臍テープで）によって、左開胸を行う。再灌流を誘発するために、肺を、１２ｍｌ／ｋｇの空気の一回呼吸量で再膨張させ、そしてその後、正常な換気を再開する。動物を、３時間後に安楽死させ、そして各肺の透過性を、例えば、肺への標識アルブミン浸出を測定することによって評価し、脈管外肺当量（ＥＶＰＥ）として表された。
【０１３９】
ＰＥのげっ歯類換気誘発肺損傷モデル：マウスまたはラットを、正常（ｋｇ当たり６ｍｌ）または高呼気量（ｋｇ当たり２０ｍｌ）で換気させる。動物に、４時間後、¹²⁵Ｉ標
識アルブミンを注射し、そしてその後、肺は、採取され、そしてＥＶＰＥを測定する。
【０１４０】
脈管外血漿当量（ＥＶＰＥ）の測定：ＥＶＰＥを、例えば、Ｆｒａｎｋら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７８巻（４５）：４３９３９−４３９５０頁（２００３年）に記載されているとおりに測定した。簡潔には、血管トレーサー（例えば、¹²⁵Ｉアルブミン）を、ラットの腹腔内に、肺採取の2時間前に注入する。血液を採取し、そして肺を取り出す。肺および血漿放射線活性を測定する。ヘモグロビン濃度を、肺ホモジネートで、そして血液で測定する。肺血管内放射線活性を、肺中の血液容積により血漿放射線活性計数を増幅することによって計算する。
【０１４１】
抗体：ＡＬＵＬＡを、以下に示すとおりに作成した。Ｗ６／３２；ＨＬＡ Ａ、ＢおよびＣに特異的に結合するマウスモノクローナル抗体Ｗ６／３２を、ＡＴＣＣから得た。ＣＤ−１ ＷＴ；ＣＤ−１に結合するモノクローナル抗体を、ＡＴＣＣから得た。
【０１４２】
実施例２：ＡＬＵＬＡの作成、αｖβ５インテグリンに特異的に結合するマウスモノクローナル抗体
αｖβ５ノックアウト・マウスを、αｖβ５インテグリン配列を包含するポリペプチドを発現する細胞で免疫した。αｖβ５インテグリンを特異的に結合するモノクローナル抗体を、当業界で知られる方法を用いて特定した。さらに詳細には、β５に特異的に結合するＡＬＵＬＡを特定した。ＡＬＵＬＡを、２００４年２月１３日にＡＴＣＣに寄託したが、受託番号：ＰＴＡ−５８１７である。
【０１４３】
実施例３：β5^-/-マウスは、ＰＥに関連した肺損傷を発生しない
β5^-/-マウスおよび野生型マウスを、上記の実施例１で記載したとおり換気させて、肺損傷に関連したＰＥを誘発させ、そしてＥＶＰＥを測定した。野生型マウスと対照的に、β5^-/-マウスは、換気後にＰＥを発生しなかった。これらの結果は、αｖβ５が、ＰＥに関与することを示す。結果は、図１に示される。
【０１４４】
実施例４：β５に特異的に結合するモノクローナル抗体は、虚血再灌流に関連した肺水腫の重篤度を減少させる
虚血再灌流に関連したＰＥでのβ５の役割を決定するために、ラットに、以下の処置を施し、そしてＥＶＰＥ測定を行った：
１．処置なし
２．腹腔内（ｉ．ｐ．）注射、グラム当たり４μｇのＷ６／３２．
３．腹腔内、グラム当たり４μｇのＡＬＵＬＡ
４．虚血再灌流を、上記の実施例１で記載したとおり誘発させた。
５．虚血再灌流を、誘発させ、そしてグラム当たり４μｇのＷ６／３２を腹腔内に注射した。
６．虚血再灌流を、誘発させ、そしてグラム当たり４μｇのＡＬＵＬＡを腹腔内に注射した。
【０１４５】
これらの実験では、抗体は、虚血再灌流の誘発の前に注入した。
【０１４６】
ＡＬＵＬＡでの処置を受けたラットは、対照ラットと比較してＥＶＰＥが減少したこと（すなわち、肺細胞透過性が減少したこと）を示し、これはβ５に特異的に結合するモノクローナル抗体が、ＰＥの重篤度を減じうることを示す。
【０１４７】
結果は、図２に示す。
【０１４８】
実施例５：β５に特異的に結合するモノクローナル抗体は、肺損傷に関連した肺水腫の重篤度を減じる
肺損傷に関連したＰＥでのβ５の役割を決定するために、マウスに、以下の処置を施し、ＥＶＰＥ測定を行った：
１．正常な呼気量およびグラム当たり４μｇのＣＤ−１ ＷＴの腹膜内注射
２．高呼気量およびグラム当たり４μｇのＣＤ−１ ＷＴの腹膜内注射
３．正常な呼気量およびグラム当たり４μｇのＡＬＵＬＡの腹膜内注射
４．高呼気量およびグラム当たり４μｇのＡＬＵＬＡの腹膜内注射
【０１４９】
これらの実験では、抗体は呼気量処置の前に注入した。
【０１５０】
ＡＬＵＬＡでの処置を受けたマウスは、対照マウスに比較してＥＶＰＥが減少したことを示し、これはβ５に特異的に結合するモノクローナル抗体が、ＰＥの重篤度を減じうることを示す。
【０１５１】
したがって、ＡＬＵＬＡは、丸ごとの哺乳類でのインビボの活性を遮断したことが示されたαｖβ５に特異的な初めてのモノクローナル抗体であり、そして急性肺損傷（すなわち、ＰＥ）のモデルにおいて増大した血管透過性、および肺胞浸水の進行を遮断することが最初に示される。
【０１５２】
結果は、図３に示す。
【０１５３】
実施例6：抗体ＡＬＵＬＡは、αｖβ５インテグリンを発現する細胞に対するαｖβ５インテグリン・リガンド、ビトロネクチンの結合を遮断する
αｖβ５インテグリンを発現するＳＷ−４８０細胞を、０μｇ／ｍｌ、０．３μｇ／ｍｌ、１μｇ／ｍｌ、および１０μｇ／ｍｌのＡＬＵＬＡの存在下で、０μｇ／ｍｌ、０．１μｇ／ｍｌ、０．３μｇ／ｍｌ、および１μｇ／ｍｌのビトロネクチンと接触させる。α９β１インテグリンに特異的なモノクローナル抗体（すなわち、Ｙ９Ａ２）を、負の対照として使用する。ＡＬＵＬＡは、細胞に対するαｖβ５インテグリン・リガンド、ビトロネクチンの結合を遮断する。結果は、図４に示す。
【０１５４】
上記の実施例は、本発明を例示するために提供されるが、しかしその範囲を限定するものでない。本発明の他の改変は、当業者に十分に明らかであり、そして付随の請求の範囲に含まれる。ここに引用される全ての刊行物、データベース、特許、特許出願、および受託番号は、全ての目的のためにその全体が参照によりここに組み込まれる。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
αｖβ５インテグリンの拮抗剤の治療量を、対象に投与することを含む、哺乳類対象における肺水腫を治療または予防する方法。
【請求項２】
前記拮抗剤が、１ｋＤａより小さい剤である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記拮抗剤が、抗体である請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記抗体が、ヒト化抗体である請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記抗体が、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、および（Ｆａｂ’）₂からなる群から選択される請求
項３に記載の方法。
【請求項６】
前記抗体が、αｖβ５インテグリンに対する特異的結合についてＡＬＵＬＡ（ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−５８１７号）と競合する請求項３に記載の方法。
【請求項７】
前記抗体が、ＡＬＵＬＡである請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記抗体が、ヒト化ＡＬＵＬＡである請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記投与が、静脈内投与、鼻腔内投与、および気管支内投与からなる群から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記哺乳類が、ヒトである請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記ヒトが、肺水腫を有する請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記ヒトが、肺水腫を発生する危険にある請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
急性肺損傷を治療または予防するための第２の治療剤を、対象にさらに投与することを含む請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記第二の治療剤が、ＴＧＦβ経路阻害剤、活性化プロテインＣ、ステロイド、ＧＭ−ＣＳＦ、血小板阻害剤、利尿剤、気管支拡張剤、αｖβ５インテグリンに結合する抗体、β５に結合する抗体、αｖβ５インテグリンの第2の拮抗剤、αｖβ６インテグリンの拮抗剤、β２作動薬、および界面活性剤からなる群から選択される請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
αｖβ５に対する結合についてＡＬＵＬＡ（ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−５８１７号）と特異的に競合する抗体。
【請求項１６】
前記抗体が、ＡＬＵＬＡである請求項１５に記載の抗体。
【請求項１７】
前記抗体が、ヒト化ＡＬＵＬＡである請求項１５に記載の抗体。
【請求項１８】
前記抗体が、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、および（Ｆａｂ’）₂からなる群から選択される請求項１５に記載の抗体。
【請求項１９】
薬学上許容しうる賦形剤、およびαｖβ５に対する特異的結合についてＡＬＵＬＡ（ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−５８１７号）と競合する抗体を含む医薬組成物。
【請求項２０】
前記抗体が、ＡＬＵＬＡである請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記抗体が、ヒト化ＡＬＵＬＡである請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
急性肺損傷を治療または予防するための第2の治療剤をさらに含む請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
前記第2の治療剤が、ＴＧＦβ経路阻害剤、活性化プロテインＣ、ステロイド、ＧＭ−ＣＳＦ、血小板阻害剤、利尿剤、気管支拡張剤、αｖβ５インテグリンに結合する抗体、β５に結合する抗体、αｖβ５インテグリンの第2の拮抗剤、αｖβ６インテグリンの拮抗剤、β-２作動薬、および界面活性剤からなる群から選択される請求項２２に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
肺水腫を治療するための剤を同定する方法であって、
複数の剤をαｖβ５と接触させること；
αｖβ５インテグリンに対する結合についてαｖβ５インテグリンのリガンドと競合する剤を選択すること；および
選択された前記の剤が、肺水腫に対する効果を有するかどうかを決定して、それにより肺水腫を治療するための剤を特定することを含む方法。
【請求項２５】
前記複数の剤が、複数の抗体である請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記複数の剤が、それぞれ１ＫＤａより小さい請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
前記リガンドが、抗体である請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
前記抗体が、ＡＬＵＬＡである請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記リガンドが、ビトロネクチン、フィブロネクチン、オステオポンチン、テネイシンCおよびアデノウイルスペントンベースからなる群から選択される請求項２４に記載の方法。
【請求項３０】
肺水腫を治療または予防するためのキットであって、
αｖβ５インテグリンの拮抗剤；および
急性肺損傷を治療または予防するための第2の治療剤を含むキット。
【請求項３１】
αｖβ５インテグリンの前記拮抗剤が、モノクローナル抗体である請求項３０に記載のキット。
【請求項３２】
前記モノクローナル抗体が、ＡＬＵＬＡである請求項３１に記載のキット。
【請求項３３】
前記モノクローナル抗体が、ヒト化ＡＬＵＬＡである請求項３１に記載のキット。
【請求項３４】
前記第2の治療剤が、ＴＧＦβ経路阻害剤、活性化プロテインＣ、ステロイド、ＧＭ−ＣＳＦ、血小板阻害剤、利尿剤、気管支拡張剤、αｖβ５インテグリンに結合する抗体、β５に結合する抗体、αｖβ５インテグリンの第2の拮抗剤、αｖβ６インテグリンの拮抗剤、β-２作動薬、および界面活性剤からなる群から選択される請求項３０に記載のキット。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【公開番号】特開２０１３−２８６１１（Ｐ２０１３−２８６１１Ａ）
【公開日】平成２５年２月７日（２０１３．２．７）
【国際特許分類】
【外国語出願】
【出願番号】特願２０１２−１８６１６９（Ｐ２０１２−１８６１６９）
【出願日】平成２４年８月２７日（２０１２．８．２７）
【分割の表示】特願２００７−５０６３３５（Ｐ２００７−５０６３３５）の分割
【原出願日】平成１７年３月３０日（２００５．３．３０）
【出願人】（５０６１１５５１４）ザ　リージェンツ　オブ　ザ　ユニバーシティ　オブ　カリフォルニア (87)
【Ｆターム（参考）】