【課題】シアリル転移酵素及び／又はトランスシアリダーゼを含めて、１組の糖転移酵素の異種発現によってシアル酸付加糖タンパク質を産生するように改変されて、ほ乳動物、例えば、ヒト治療用糖タンパク質の製造用宿主系統になる、真核生物宿主細胞を提供する。
【解決手段】シアル酸付加糖タンパク質の産生用ＣＭＰ−シアル酸生合成経路を発現する新規真核生物宿主細胞。ほ乳動物酵素活性を、真核生物宿主細胞中の細胞内区画に首尾よく向け、発現させるのに使用することができる、核酸分子及びコンビナトリアルライブラリー。 （もっと読む）

【課題】酵母における糖タンパク質上のａ−マンノシダーゼ抵抗性グリカンを減少させるか又は排除する方法を提供する。
【解決手段】糖タンパク質上のａ−マンノシダーゼ抵抗性グリカンの減少又は排除は、新たに単離されたβ１，２−マンノシルトランスフェラーゼをコードするＰ．パストリスＡＭＲ２遺伝子の破壊に起因する、グリカンにおけるａ−マンノシダーゼ抵抗性に関する新規の遺伝子、ポリペプチド、抗体、ベクター、及び宿主細胞。 （もっと読む）

【課題】末端β−ガラクトース残基を有すること及びフコース残基及びシアル酸残基を本質的に欠失していることを特徴とするヒト様糖タンパク質を産生する新規下等真核宿主細胞を提供する。治療用糖タンパク質として使用できる、組換え型下等真核宿主細胞における受容体基質への、ＵＤＰ−ガラクトースからのガラクトース残基の転移を触媒するための方法も提供する。
【解決手段】β−ガラクトシルトランスフェラーゼ活性をコード化する単離された核酸分子と、ＵＤＰ−ガラクトース輸送活性、ＵＤＰ−ガラクトースＣ４エピメラーゼ活性又はガラクトキナーゼ活性又はガラクトース−１−リン酸ウリジルトランスフェラーゼをコード化する少なくとも１つの単離された核酸分子とを含む、ヒト様糖タンパク質を産生する組換え型下等真核宿主細胞。 （もっと読む）

【課題】動物細胞（特に、ヒト細胞）により産生される糖タンパク質と同様のグリコシル化タンパク質（糖タンパク質）を産生させる方法および組成物の提供。
【解決手段】単細胞および多細胞の真菌を含む、Ｎ−グリカン含有の高マンノースを通常生成する下等真核生物は、Ｍａｎ_５ＧｌｃＡｃ_２のようなＮ−グリカンまたはヒトグリコシル化経路に沿った他の構造を生成するために改変される。真菌糖タンパク質の所望でない複合体構造の特徴を生成する特定の酵素を発現しない系統、活性が所望される場合に真菌中に存在する条件下で最適な活性を有するかまたは最適な活性が達成される場合に細胞小器官を標的化するかであるように選択される外因性酵素を発現する系統。 （もっと読む）

【課題】Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓオロチン酸−ホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＵＲＡ５）をコードする新規遺伝子が開示される。
【解決手段】宿主ゲノムへの異種配列の安定な遺伝子組み込みが可能な酵母株を作製および選択するための方法もまた提供される。別の局面において、本発明は、Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ ＵＲＡ５遺伝子のコード配列、Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ ＵＲＡ５遺伝子のコード配列の縮重改変体である核酸配列、ならびに関連する核酸配列およびフラグメントからなる群より選択される核酸配列の破壊、欠失、または変異を含む宿主細胞を提供する。 （もっと読む）

【課題】改変された脂質連結オリゴ糖を有する宿主細胞を提供すること。
【解決手段】本発明は、改変された脂質連結オリゴ糖を有する宿主細胞に関する。この脂質連結オリゴ糖は、グリコシルトランスフェラーゼ、糖トランスポーターおよびマンノシダーゼのセットの異種発現によってさらに改変されて、哺乳動物（例えば、ヒト）の治療用糖タンパク質の産生のための宿主系となり得る。このプロセスは、操作された宿主細胞を提供し、この宿主細胞を使用して、グリコシル化に関与する任意の望ましい遺伝子を発現させ得、標的化し得る。改変された脂質連結オリゴ糖を有する宿主細胞が、産生または選択される。 （もっと読む）

【課題】下等真核生物宿主細胞においてヒト−様糖タンパク質を生産する方法を提供する。
【解決手段】下等真核生物において、Ｍａｎα１，３グリコシル結合およびＭａｎα１，６グリコシル結合に対して基質特異性を有するクラス２α−マンノシダーゼを発現することによってヒト−様糖タンパク質を生産する方法。オリゴ糖上のこれらの結合の加水分解は、分泌経路におけるさらなるＮ−グリカンプロセシングのための基質を生じる。細胞中で、Ｍａｎα１，３グリコシド結合およびＭａｎα１，６グリコシド結合のいずれかまたは双方を含むオリゴ糖基質を、該基質のＭａｎα１，３および／またはＭａｎα１，６結合の少なくとも１０％がインビボで加水分解される程度まで加水分解できるマンノシダーゼ酵素活性を発現させる工程を含む、下等真核生物宿主細胞においてヒト−様糖タンパク質を生産する方法。 （もっと読む）

【課題】哺乳動物（例えば、ヒト）治療用糖タンパク質の生成のための宿主株になり得る、修飾オリゴ糖を有する真核生物宿主細胞を提供する。
【解決手段】Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ（ＧｎＴ）ＩＩＩ活性を下等真核生物宿主細胞に導入し、発現させる工程からなる。修飾脂質結合オリゴ糖を有する宿主細胞が作製されるかまたは選択される。操作された宿主細胞において作製されたＮ−グリカンは、バイセクト型Ｎ−グリカン構造を生成するＧｎＴＩＩＩ活性を示し、１種以上の酵素（例えば、グリコシルトランスフェラーゼ、糖トランスポーターおよびマンノシダーゼ）の異種発現によってさらに修飾されて、ヒト様糖タンパク質を生じ得る。 （もっと読む）

【課題】下等真核生物において、Ｍａｎα１，３グリコシル結合およびＭａｎα１，６グリコシル結合に対して基質特異性を有するクラス２α−マンノシダーゼを発現することによってヒト−様糖タンパク質を生産する方法を提供する。
【解決手段】細胞中で、Ｍａｎα１，３グリコシド結合およびＭａｎα１，６グリコシド結合のいずれかまたは双方を含むオリゴ糖基質を、該基質のＭａｎα１，３および／またはＭａｎα１，６結合の少なくとも１０％がインビボで加水分解される程度まで加水分解できるマンノシダーゼ酵素活性を発現させる工程を含む、下等真核生物宿主細胞においてヒト−様糖タンパク質を生産する方法からなる。 （もっと読む）

【課題】改変型オリゴ糖を有する真核生物宿主細胞の提供。
【解決手段】一組のグリコシルトランスフェラーゼ、糖および糖ヌクレオチドトランスポーターの異種発現によってグリコシル化に関与する任意の望ましい遺伝子を発現して標的とするために使用され、哺乳動物の例えばヒト治療糖タンパク質の生成のための宿主株になるようにさらに改変され得る下等真核生物宿主細胞であって、改変型脂質結合型オリゴ糖を有する宿主細胞。その操作された宿主細胞において生成されるＮ−グリカンは、ＧｎＴＩＩＩ活性、ＧｎＴＩＶ活性、ＧｎＴＶ活性、ＧｎＴ ＶＩ活性、またはＧｎＴＩＸ活性を示す。このＮ−グリカンは、二分されかつ／または複数のアンテナを有するＮ−グリカン構造を生じ、１つ以上の酵素、糖、糖ヌクレオチドトランスポーターの異種発現によって、ヒト様糖タンパク質を生じるようにさらに改変される。 （もっと読む）