チャイニーズハムスターからのグリコシルトランスフェラーゼ、および関連方法が記載される。第１の態様では、本発明は、チャイニーズハムスターまたはＣＨＯ細胞のＧｇｔａ１ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列、または例えば本明細書に記載されるＧｇｔａ１活性などの１つ以上のＧｇｔａ１活性を有するその活性部分を含んでなる、単離された核酸分子を特徴とする。一実施形態では、本明細書に記載されるＧｇｔａ１ポリペプチドをコードする単離された核酸分子は、異種性アミノ酸配列に結合しており、例えばそれは例えばエピトープ標識されたＧｇｔａ１などのＧｇｔａ１融合タンパク質をコードする。
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本発明は、哺乳類細胞発現系から発現されたタンパク質において特定のグリカン構造を検出するための方法および材料に関する。本発明は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞集団を、前記細胞によって産生される末端ガラクトース−α−１，３−ガラクトース残基を含有するグリカンを測定することで、評価するための方法であって、ＣＨＯ細胞が、α−ガラクトシルトランスフェラーゼコード配列を発現するよう遺伝子操作されたものではない、方法を提供するものである。
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特に、本開示は、異常修飾グリカン（リン酸化グリカン、硫酸化グリカンおよび／または多アセチル化グリカンなど）を富化、同定および／または定量化する方法を提供するものである。多くの実施形態において、方法が、シアル酸の放出元となったグリカン調製物を提供し、このシアリダーゼ処理グリカン調製物に対して、電荷質量比に基づいてグリカンを分離する分離技法を適用し、少なくとも１つの定量化標準を用いて、荷電した産物を定量化すること含む。 （もっと読む）

誘導体化され易いオリゴ糖の２つ、複数、大部分の、または各位置において保護基を有するオリゴ糖について説明する。そのようなオリゴ糖のコレクション、ライブラリー、ならびにそのようなオリゴ糖を作製および使用する方法についても説明する。一態様では、本開示物は、二糖またはそれより大きいオリゴ糖を特徴とする。オリゴ糖は、予め選択された配列、例えば、誘導体化の予め選択されたパターンを有する糖構造の配列を有することができる。オリゴ糖は、誘導体化の予め選択された複雑なパターン、例えば、硫酸化もしくはアセチル化の予め選択された複雑なパターンを有するオリゴ糖構造の設計および合成を可能にする。
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【課題】不均一な硫酸化多糖類集団の分析およびモニタリング方法。
【解決手段】多糖類を含む組成物試料を分析する方法であって、試料の構造特徴が以下から選択される一つまたは複数の一次産出物を決定することによって提供される方法：a．一つまたは複数の成分糖または二糖の存在または；b．ブロック成分が、複数の糖または多糖で構成される成分である、一つまたは複数のブロック成分の存在または量；c．糖の代表物が、検出可能性を増強するように改変された糖である、一つまたは複数の糖の代表物の存在または量；d．三次元構造の指標、または三次元構造に関連したパラメータの存在または量；およびe．改変された糖が、調製物を作製するために用いられる開始材料に存在するが、調製物を産生する際に変化した糖である、一つまたは複数の改変糖の存在または量。 （もっと読む）

本開示は、Ｎ−グリカンの構造および／または組成を分析するための方法を提供するものである。このような方法は、Ｎ−グリカンを複数のエキソグリコシダーゼで消化することを含むことが多い。いくつかの実施形態では、Ｎ−グリカンを複数のエキソグリコシダーゼで同時に消化する。いくつかの実施形態では、Ｎ−グリカンを複数のエキソグリコシダーゼで逐次的に消化する。いくつかの実施形態では、本開示による方法で、複数のエキソグリコシダーゼで同時に消化したＮ−グリカンの切断産物と、複数のエキソグリコシダーゼで逐次的に消化したＮ−グリカンとを比較することを含む。 （もっと読む）

本開示は、とりわけ、グリカンの混合物における硫酸化グリカンを同定するための方法を提供するものである。さまざまな態様では、本開示は、グリカンの混合物における硫酸化グリカンを同定するための方法を提供するものである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、Ｓ^３４：Ｓ^３２比が約４．５％のイオウの自然発生的な同位体存在度分布を利用して、たとえば硫酸化グリカンの同定、リン酸化グリカンと硫酸化グリカンとの区別および／または１つ以上の他の翻訳後修飾に対する硫酸化量の判断を容易にするものである。 （もっと読む）

本開示は、細胞の細胞表面グリカンを分析することにより、細胞が産生する標的糖タンパク質のグリコシル化を評価するための方法を提供するものである。したがって、本開示は、細胞表面タンパク質のグリコシル化が他のタンパク質のグリコシル化の代用となり得ることを教示するものである。本開示は、ひとつには、細胞によって産生されるタンパク質のグリコシル化に反映される形で、細胞の状態に関する情報を細胞表面グリカンによって得られるという認識に基づくものである。特に、細胞から産生される（かつ任意に分泌される）糖タンパク質のグリコシル化状態に関する情報を細胞表面グリカンによって得られることができることが見いだされている。よって、標的タンパク質のグリコシル化状態に関する情報を得るために、これを細胞から単離する必要がない。
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本発明は、規定の特性を備える糖タンパク質産物を製造するための方法、データベースおよびシステムを提供するものである。本明細書に開示の方法は、規定のグリカン構造および／または規定のグリカンによる機能的特性を備える糖タンパク質を製造できるようにするものである。方法によっては、製造パラメータと所望のグリカン特性との間の相関を含むデータベースの使用に頼っている。このデータベースは、製造プロトコルに取り入れるための製造パラメータを提供できるものである。この方法は、設計された糖タンパク質あるいは、広義には規定のグリカン特性を備える糖タンパク質を製造できるようにするものである。 （もっと読む）

本発明は、前癌状態または早期癌状態と相関するグリコシル化の変化を検出するための超高感度法を提供する。癌は検出が早いほど完全に回復する可能性が増加するので、本発明は、治療上有用な早期検出、診断、病期分類および予後判定の方法を提供する。
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