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本発明は、ホスホリパーゼ活性(例えばホスホリパーゼA、B、C及びD活性、パタチン活性、ホスファチジン酸ホスファターゼ(PAP)及び/又は脂質アシルヒドロラーゼ(LAH)活性を含む)を有する新規なポリペプチド、前記ポリペプチドをコードする核酸、前記ポリペプチドと結合する抗体を提供する。これらホスホリパーゼの使用を含む工業的方法(例えば油の脱ガム)及び製品もまた提供される。
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(1)リン酸イオンの存在によって酵素触媒反応が起こり、酸化物を生成するような基質と酸化還元酵素、その他反応に必要とされる物質および酸化型メディエーターを用い、リン酸から還元型メディエーターを発生させ、さらにこれを酸化し、生ずる酸化電流を測定することにより、試料液中のリン酸イオンを測定する方法または(2)リン酸イオンを、リン酸イオンと反応して最終的にβ−D−グルコースを生成する基質と、このβ−D−グルコースを生成するための各反応を触媒する酵素の存在下で反応させてβ−D−グルコースを生成させ、さらに生成したβ−D−グルコースを、酸化還元酵素の存在下で酸化型メディエーターと反応させ、生じた還元型メディエーターをさらに酸化することにより生じた電流を測定する方法および(3)基板上に作用極、対極を備えたセンサにおいて、これらの酵素および試薬が作用極上および/またはその付近に配置されたリン酸イオンセンサ。 (もっと読む)


本発明は、ポリペプチドのメチルトランスフェラーゼ活性を測定するため、およびメチルトランスフェラーゼ活性の調節因子に関してスクリーニングするための方法に関する。本発明はさらに、結腸直腸癌もしくは肝細胞癌を調節因子を用いて予防もしくは治療するための方法または薬学的組成物を提供する。 (もっと読む)


本発明の目的は、複数の酵素活性を同時に効率よく測定することを可能とする酵素チップ、および、該酵素チップを利用した酵素特異的かつ活性依存的な酵素活性測定方法を提供することにある。更に、本発明の目的は、酵素活性を調節可能な物質を、効率よく探索できる高スループットな酵素活性調節物質のスクリーニング方法を提供することにある。そして、本発明は、これらの方法を実施する自動化システムの提供を目的とする。
異なる複数のシステインプロテアーゼを、基板上の複数の異なる位置に各別に配置させた、酵素活性測定用システインプロテアーゼ固定化チップを提供すると共に、アフィニティーラベルを用いてシステインプロテアーゼの生物活性を特異的かつ活性依存的に測定する方法を提供する。 (もっと読む)


本発明は、核酸のメチル化状態、ならびに核酸の断片化および/または標識および/または固定の分析のための方法に関する。より詳細には、本発明は、核酸の断片化および/または標識および/または固定のための方法であって、無塩基部位での標識および/または切断および/または固定を包含する方法に関する。本発明は、メチル化されたヌクレオチドを含むポリヌクレオチドを標識および断片化するための方法を提供し、この方法は(a)このメチル化ヌクレオチドを含むポリヌクレオチドと、このメチル化ヌクレオチドの塩基部分を切断し得る因子とを接触させて無塩基部位を生成する工程;(b)この無塩基部位を含むこのポリヌクレオチドの骨格をこの無塩基部位で切断する工程;(c)この無塩基部位を含むポリヌクレオチドと、この無塩基部位で標識し得る因子とを接触させて、標識されたポリヌクレオチドフラグメントを生成する工程;を包含する。 (もっと読む)


本発明は、一般に、糖化分子を含有する巨大分子の構造分析に関する。この巨大分子は、例えば、タンパク質(プロテオグリカン、糖タンパク質)、脂質に結合するかまたは遊離サッカライドとしてのいずれかで存在する。本発明は、糖化分子についての糖化分子フィンガープリントを決定するための方法であって、脱シアリル化またはN−グリコシダーゼF(PNGアーゼF)を用いた処理により改変されている糖化分子を提供する工程;糖化分子を、複数のサッカライド結合剤を含む基材に添加する工程;サッカライド結合剤に複数で結合した糖化分子を検出する工程;およびサッカライド結合剤への糖化分子の結合に基づき、糖化分子のフィンガープリントを得る工程を包含する方法、を提供する。
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本発明は、迅速かつ簡便で高感度な分析対象物質の検出方法を提供することを目的とし、取り扱うサンプル量が微量の場合であっても、解析結果に定量性が担保される方法を提供することを目的とする。
本発明は、分析対象物質の検出方法において、標識された分析対象物質に由来する信号の強度測定を、当該信号の強度の増加中に経時的に行い、当該信号の強度を時間の関数で表し、当該測定した信号の強度における近似直線の傾きが、それ以前に測定した信号の強度における近似直線の傾きの0.5倍〜1.5倍の範囲内にあるときの信号の強度の定量値を利用する、分析対象物質の検出方法である。 (もっと読む)


環境もしくは細胞の状態が変化することによって量が変化する細胞の、細胞膜に存する細胞膜タンパク質の量を測定するための、方法と組成物を提供する。この方法では、細胞外表面のプロテアーゼ認識部位もしくはこの複数の部位を介してシグナル生産ペプチドと連結した細胞膜タンパク質の融合コンストラクトを持つ細胞を使用する。シグナル産生ペプチドは、細胞膜から放出されると2つ目の酵素断片と結合し活性な酵素を形成することが出来る酵素断片か、もしくは2つの結合部位を持ち、この2つの相補的な結合物質が近くにある時にシグナルが産生されるという点で、その相補的な結合物質は関連している。酵素シグナル生産ペプチドとしては、細胞にプロテアーゼと2番目の酵素の断片と基質を加えることで、細胞膜タンパク質の量と細胞環境におけるこの量の変化の影響について測定することが出来る。同様にして、2つの結合物質とその他の任意の必要な試薬を加えることによりシグナルが生産され、それによって細胞膜タンパク質の量および細胞環境の変化がそのような量に及ぼす影響を測定することが出来る。
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本発明により、プロドラッグの活性化を担う酵素が同定され、プロドラッグとしての候補化合物の同定のために利用される。本発明は、適したプロドラッグとして候補化合物を同定する方法、および治療剤としての適合性について候補化合物をスクリーニングする方法を包含する。この同定する方法は、(a)エステル化ホスホネート基またはエステル化カルボキシル基を有する候補化合物を提供する工程;(b)その候補化合物と、GS−9005エステル加水分解酵素Bを含む抽出物とを接触させ、1以上の代謝化合物を生成させる工程;および(c)その1以上の代謝化合物のうちの少なくとも1つが、候補化合物のエステル化ホスホネート基の代わりにホスホン酸基を有する場合、または候補化合物のエステル化カルボキシル基の代わりにカルボン酸基を有する場合に、その候補化合物を適したプロドラッグとして同定する工程、を包含する。 (もっと読む)


この発明は、生物または物理、化学もしくは生物媒体の全抗ラジカル防御ポテンシャルを生体外で(インビトロ)決定する方法に関する。この方法は、フリーラジカルを細胞溶解の手段として使用し、その細胞溶解を評価することからなり、得られる反応媒体中にフリーラジカル発生体からフリーラジカルを放出する前もしくは後に、細胞物質を加水分解することを特徴としている。この発明方法は、人、動物ならびに植物の健康状態を生体外で追跡し、ストレスを管理し、老化を遅延させるのに有用である。抗ラジカル物質は海綿状脳症に対して特に有用である。 (もっと読む)


本発明は一般に、生物学、分子生物学、化学および生化学の分野に関する。本発明は、Gタンパク質共役受容体(GPCR)およびそのシグナル伝達経路の多数の新規なアッセイを対象とする。GPCR経路における1つまたは複数のステップについてそのようなアッセイを構築する方法が記載される。本発明は、GPCRの機能上の特徴付け、標的検証、受容体の脱オーファン化、高処理能スクリーニング、高容量スクリーニング、薬理学的プロファイリング、および他の創薬適用技術に使用することができる。本アッセイを直接使用して、化合物ライブラリーまたは生体抽出物が受容体のアゴニストまたはアンタゴニストを含むかどうかを評価することができる。アッセイ組成物も提供される。本アッセイの開発が直接的であり、それによってGPCRまたはその同系の経路に作用する新規薬剤および天然リガンドの発見に関する広範、柔軟かつ生物学的に適切な土台が提供されることが示される。
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a)5−メチル化シトシンが未反応にとどまる一方で、非メチル化シトシンがウラシルまたは、シトシンと塩基対の挙動が異なる、その他の塩基に変換されるように、検査すべきDNAと試薬または酵素とを反応させることと、
b)前処理した前記DNAをポリメラーゼと少なくとも一つのプライマーとで増幅し、その5’末端にリンカーを介してプローブを結合することと(スコーピオン・プライマー)、
c)前記プライマー伸張生成物をマトリックス鎖から分離することと、
d)前記プローブが、分子内的に前記プライマー伸張生成物と混成し、そしてその混成が、DNAのメチル化状態に依存して起こることと、
e)前記プローブの混成が起こったか否かを検出することと
を特徴とするDNA中のシトシンのメチル化を検出する方法。 (もっと読む)


本発明は、個体における代謝障害を検出する方法を提供する。この方法は、(a)(i)1種又は複数の代謝の指標となる酵素、及び(ii)1種又は複数の代謝被検体を含有する試料を、該1種又は複数の酵素の1種又は複数の基質と、少なくとも1種の該酵素が対応する基質に作用し少なくとも1種の生成物を生成することが可能であるような条件下で接触し、反応混合物を作成する工程;(b)該反応混合物を、該1種又は複数の酵素が対応する基質に作用する能力を阻害する試薬と接触し、被験試料を作成する工程であり、ここで該1種又は複数の代謝被検体及び該少なくとも1種の生成物は、該試薬中に溶解している工程、並びに、(c)質量分析を用い、該被験試料中に含まれる該1種又は複数の代謝被検体及び該少なくとも1種の生成物の存在又は量を決定する工程を含み、ここで決定された該1種又は複数の代謝被検体及び該少なくとも1種の生成物の存在又は量は、該代謝障害の存在又は非存在に相関している。 (もっと読む)


本発明は、相分配系を利用して酵素活性を評価する方法に関する。さらに、本発明はまた、この相分配系を用いて、例えば、糖尿病、糖尿病関連障害、肥満症、心臓血管疾患、癌および他の疾患もしくは障害の処置に使用することができる化合物をスクリーニングしそして同定する方法にも関する。 (もっと読む)


ヒトSULF遺伝子はβカテニン経路のモジュレーターとして同定されており、したがってこれらは欠陥βカテニン機能に関連する疾患の治療上の標的である。SULFの活性を調節する作用剤を探すためにスクリーニングすることを含む、βカテニンのモジュレーターを同定する方法が提供される。 (もっと読む)


本発明は概して、ホモシステイン検出の分野に関連する。特に、本発明は、サンプル中のホモシステイン存在またはホモシステイン濃度を決定するための方法であって、その方法は以下:Hcy変換生成物およびHcy補基質変換生成物を形成するために、Hcy変換反応中で、Hcyを含むサンプルまたはHcyを含むと推測されるサンプルと、Hcy補基質およびHcy変換酵素とを接触させる工程;ならびに上記サンプル中のHcyの、存在、非存在および/または量を決定するために上記Hcy補基質変換生成物を評価する工程を包含する方法を提供する。同じ原理に基づいてホモシステインをアッセイするためのキットもまた、提供される。
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本発明は、レンチウイルスのVifタンパク質の活性を阻害する物質を特定する方法を提供する。本発明は、細胞内の活性APOBEC3Gの量を増加させる物質を特定する方法を提供する。本発明は、本スクリーニング方法によって特定される物質を提供し、レンチウイルス感染を治療するための方法をさらに提供する。

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ここでは、サーチュインデアセチラーゼタンパク質ファミリ・メンバの活性;p53活性;アポトーシス;細胞及び生物の寿命及び対ストレス感受性、を修飾する方法及び組成物を提供する。例示的な方法は、細胞を、フラボン、スチルベン、フラバノン、イソフラボン、カテキン、カルコン、タンニン又はアントシアニジンなどの活性化化合物;又は、スフィンゴシンなどのスフィンゴリピドなどの阻害性化合物、に接触させるステップを含む。 (もっと読む)


本発明は、生物学的サンプルに入っている興味の持たれる免疫組織化学的エピトープまたは核酸配列をインサイチュ検出する新規な組成物および方法に向けたものであり、これは、酵素標識結合分子と前記興味の持たれるエピトープまたは配列を酸化還元に不活性な還元種および可溶金属イオンの存在下で結合させることで前記金属イオンから金属原子への還元が前記酵素がつなぎ止められている地点または付近で起こり易くすることを含んで成る。ホスファターゼと接触した時に活性化されて還元形態になることで金属イオンに還元を受けさせて不溶な金属にする新規なホスフェート誘導体である還元剤を記述する。 (もっと読む)


本発明は心臓血管障害を有する患者の血漿において高レベルで循環するヒト分泌ポリペプチドを開示する。本発明はまた診断、予後診断および薬剤開発のためのポリペプチド、これらをコードするポリヌクレオチド、およびこれらのポリペプチドに特異的な抗体をも提供する。 (もっと読む)


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