哺乳類様複合Ｎ−グリカンを含有するかまたは哺乳類グリコシル化経路中の中間体を含有する標的分子を生成するために有用な方法および遺伝子工学的に改変された真菌細胞が、本明細書に記載される。一実施形態において、ＧｌｃＮＡｃＭａｎ_５ＧｌｃＮＡｃ_２ Ｎ−グリカンを含むタンパク質を生成できる真菌細胞を生成する方法が提供され、この方法は、ａ）Ｍａｎ_５ＧｌｃＮＡｃ_２ Ｎ−グリカンを含むタンパク質を生成するように遺伝子工学的に改変された真菌細胞を提供するステップと、ｂ）該細胞に、ＧｌｃＮＡｃトランスフェラーゼＩをコードする核酸を導入するステップとを含む。
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宿主細胞抗原に対して産生された抗体に対する検出可能な交差結合活性を欠くタンパク質および糖タンパク質の、ピチア・パストリス（Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ）における製造方法を記載する。特に、Ｎ−グリカンまたはＯ−グリカンに対するβ―マンノシルトランスフェラーゼ２活性を示さず、Ｎ−グリカンまたはＯ−グリカンに対するβ−マンノシルトランスフェラーゼ１、３および４活性から選択される少なくとも１つの活性を示さない組換えピチア・パストリス（Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ）株を使用して、組換えタンパク質および糖タンパク質を製造する製造方法を記載する。検出可能なα−マンノシダーゼ耐性β−マンノース残基を欠き、したがって、宿主細胞抗原に対する抗体に対する交差結合活性を欠くタンパク質および糖タンパク質を、これらの組換えピチア・パストリス（Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ）株は産生し得る。更に、宿主細胞抗原に対する抗体に対する検出可能な交差結合活性を欠く二シアル酸化ヒトエリスロポエチンの、ピチア・パストリス（Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ）における製造方法を記載する。
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【課題】より効果的なＧ−ＣＳＦ因子の提供。
【解決手段】Ｇ−ＣＳＦ因子にグリコシル基を有する修飾基を共有結合させる方法および該方法により得られる結合体。 （もっと読む）

本発明は、タンパク質化学、生物学、および医学の分野に関する。より具体的に述べると、本発明は、シスチンノット増殖因子スーパーファミリーメンバーのタンパク質模倣体の設計および調製に関する。さらに、本発明は、薬物または予防剤としてのこれらのタンパク質模倣体の使用にも関する。本発明は、免疫原性組成物および/または治療用組成物に用いられることが好ましい、シスチンノット増殖因子スーパーファミリーメンバーのタンパク質模倣体を提供する。 （もっと読む）

【課題】より効果的なＧ−ＣＳＦ因子の提供。
【解決手段】Ｇ−ＣＳＦ因子にグリコシル基を有する修飾基を共有結合させる方法および該方法により得られる結合体。 （もっと読む）

【課題】ＩＬ−２１（例えば、ヒトＩＬ−２１）活性またはレベルのモジュレーターを用いてＴヘルパー（Ｔ_ｈ）細胞の発達および機能を調節する方法および組成物を提供すること。
【解決手段】ＩＬ−２１（例えば、ヒトＩＬ−２１）活性またはレベルのモジュレーターを用いてＴヘルパー（Ｔ_ｈ）細胞の発達および機能を調節する方法および組成物。本発明は、部分的には、サイトカインインターロイキン−２１（ＩＬ−２１）がＴヘルパー（Ｔｈ）細胞のサブセット（Ｔｈ２細胞）によって発現され、そして、Ｔｈ１細胞発生の間に、選択的にインターフェロンγ（ＩＦＮγ）レベルを阻害するという発見に、一部基づく。より具体的には、本明細書において、ＩＬ−２１が、インビトロおよびインビボにおいて生成されたＴｈ２細胞によって優先的に発現されることが、示された。 （もっと読む）

本発明者らは、野生型チャイニーズハムスター卵巣細胞と比較して、例えば機能的ＧｎＴ１の存在下においてタンパク質を高度にシアル化できるチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞であって、前記ＣＨＯ細胞はＲｉｃｉｎｕｓ ｃｏｍｍｕｎｉｓアグルチニンＩ（ＲＣＡ−Ｉ）を用いた選択によって入手できるＣＨＯ細胞を提供する。
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【課題】天然サイトカインの特定混合物の製造方法の提供。
【解決手段】少なくとも一種のマイトジェンを組織培養容器中で固定する工程、好中球及び赤血球を含まないリンパ球の単離された集団を無血清培地中で懸濁させる工程、懸濁されたリンパ球を容器に入れる工程、リンパ球を培養する工程、培地を除去する工程及び培地をサイトカインの収率について特性決定する工程を含むとことを特徴とする天然サイトカイン混合物方法であって、１つの実施形態において、無血清培地がＸ ｖｉｖｏ−１０及びＸ ｖｉｖｏ−１５から選択される、方法。 （もっと読む）

【課題】簡便な操作方法で、長時間にわたり安定して高生産性を維持する連続発酵法によるタンパク質の製造方法の提供。
【解決手段】連続発酵法において、発酵培養液の分離膜に高い透過性と高い細胞阻止率を持ち閉塞しにくい、ポリフッ化ビニリデン系樹脂製等の多孔性膜を用い、低い膜間差圧で濾過処理することにより、微生物が高濃度まで増殖することを可能にし、タンパク質の生産量が向上する連続発酵による、イヌインターフェロンγ等のタンパク質の製造方法。 （もっと読む）

本発明は、脊椎動物細胞内において遺伝的にコードされたアミノ酸の数を拡張する翻訳成分を製造するための組成物および方法を提供する。該成分は、直交化ｔＲＮＡ、直交化アミノアシル−ｔＲＮＡシンテターゼ、ｔＲＮＡ／シンテターゼの直交化対、および非天然アミノ酸を含んでいる。また脊椎動物細胞内において非天然アミノ酸を有するタンパク質、および該タンパク質を製造する方法も提供される。本発明は、脊椎動物細胞内において成長中のポリペプチド鎖に非天然アミノ酸を組み込むために、脊椎動物のタンパク質生合成機構に使用される直交化アミノアシル−ｔＲＮＡシンテターゼ（Ｏ−ＲＳ）と直交化ｔＲＮＡ（Ｏ−ｔＲＮＡ）との対、それらの各成分などの翻訳成分を有する脊椎動物細胞を提供する。 （もっと読む）

【課題】 哺乳類由来の宿主細胞に導入すると、免疫担当細胞においてインターフェロン−γの産生を誘導するポリペプチドを効率的に発現するＤＮＡを提供する。
【解決手段】 特定のアミノ酸配列を有し、免疫担当細胞においてインターフェロン−γの産生を誘導するポリペプチドをコードする染色体ＤＮＡと、その染色体ＤＮＡを哺乳類由来の宿主細胞に導入してなる形質転換体と、その形質転換体を培養する工程と、培養物から当該ポリペプチドを採取する工程を含んでなるポリペプチドの製造方法により解決する。 （もっと読む）

本発明は、シュードモナス種及びシュードモナス種に由来する株によって、天然にコードされないアミノ酸をインビボで取り込むための方法及び組成物を提供する。シュードモナス種及びシュードモナス種に由来する株によって作製される天然にコードされないアミノ酸を有するタンパク質を含む組成物も提供される。 （もっと読む）

本発明は、ヒトインターフェロンガンマの少なくとも1つの活性を有するポリペプチドを特徴とするORFをコードするヒトゲノム中の読みとり枠（ORF）、および該ポリペプチドの変種と断片を含有するこれらに関連する試薬、ならびにコードする核酸、およびこれらに対するリガンドを開示する。本発明は、これらの分子の同定と調製方法、これらを含有する医薬組成物の製造方法、および疾患の診断、予防および治療におけるこれらの使用のための方法を提供する。 （もっと読む）

哺乳類細胞培養を促進する生体異物物質（例えば、血清又は下垂体抽出物）の添加を必要とせずに哺乳類細胞を培養する方法であって、組織工学において使用するための細胞の産生方法及び組換えタンパク質の産生方法を含む方法。 （もっと読む）

【課題】ヒトリンパ球やヒト型ハイブリドーマ細胞等のヒトリンパ球類を用いて、免疫グ
ロブリンやサイトカイン等の免疫調節蛋白質を効率良く製造する方法を提供すること。
【解決手段】
［１］コラーゲンの存在下にヒトリンパ球類を培養することを特徴とする免疫調節蛋白質
の製造方法。
［２］前記ヒトリンパ球類が、ヒトリンパ球およびヒト型ハイブリドーマ細胞からなる群
より選ばれる少なくとも一種であり、
かつ前記免疫調節蛋白質が、免疫グロブリンおよびサイトカインからなる群より選ばれ
る少なくとも一種であることを特徴とする、上記［１］に記載の免疫調節蛋白質の製造方
法。
［３］前記免疫グロブリンが、ＩｇＭ抗体およびＩｇＧ抗体からなる群より選ばれる少な
くとも一種であり、
かつ前記サイトカインが、インターフェロンおよび腫瘍壊死因子からなる群より選ばれる
少なくとも一種であることを特徴とする上記［２］に記載の免疫調節蛋白質の製造方法。 （もっと読む）

本発明者らは、細胞のアポトーシスを仲介することが可能なチャイニーズハムスター（Cricetulus griseus）の配列であって、配列番号１に示されるＦＡＩＭ配列；配列番号２に示されるＦＡＤＤ配列；配列番号３に示されるＰＤＣＤ６配列；および配列番号４に示されるＲｅｑｕｉｅｍ配列から選択される配列を含んでなる、単離されたポリペプチドを提供する。 （もっと読む）

封入体結合タンパク質をコードする遺伝子（ｉｂｐＡ及び／またはｉｂｐＢ）を欠失あるいは増幅させて目的タンパク質を製造する方法を提供する。
本発明は、今まで目的タンパク質の生産への影響について報告されていない大腸菌由来の封入体結合タンパク質をコードする遺伝子（ｉｂｐＡ及び／またはｉｂｐＢ）を用いて目的タンパク質を製造するための２種類の方法を提供する。一つは、ｉｂｐＡ及び／またはｉｂｐＢを欠失させたバクテリアを用いて目的タンパク質の分泌・生産性及び活性を高める方法であり、もう一つは、ｉｂｐＡ及び／またはｉｂｐＢが増幅されたバクテリアを用いて細胞質内に生産される目的タンパク質の生産性を高めると共に、目的タンパク質を水溶性の形ではない不溶性封入体の形で得る方法である。
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シアリル化オリゴサッカリドを有する糖タンパク質を産生するための方法および系を提供する。本発明は、内因性レベルを超えてＣＭＰ−ＳＡＴタンパク質またはそのフラグメントを発現するようにＣＭＰ−シアル酸輸送体（ＣＭＰ−ＳＡＴ）遺伝子で遺伝子操作された細胞を含む。ＣＭＰ−ＳＡＴ発現の増加により、ＣＭＰ−シアル酸のゴルジ装置への輸送が増加し、内因性レベルを超えた糖タンパク質のシアリル化が可能である。特に、本発明の方法および系は、目的の哺乳動物細胞（例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞）における複雑なシアリル化糖タンパク質の産生に有用である。
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