【課題】栄養要求性選択マーカーを利用する組換えポリペプチドの産生のための改良発現系、および改良された発現調節による宿主細胞における改良された組換えタンパク質産生法を提供する。
【解決手段】組換えポリペプチドをコードする核酸と、原栄養能を栄養要求性宿主細胞へ回復させる少なくとも１つのポリペプチドをコードする核酸とを含む、核酸構築物を含む細菌発現系で使用するための、栄養要求性シュードモナス（Pseudomonad）細胞。栄養能回復ポリペプチドは、細胞生存に必要な代謝産物の生合成で活性な酵素である、オロトジン−５’−ホスフェートデカルボキシラーゼ、またはΔ１−ピロリン−５−カルボキシラートレダクターゼである。 （もっと読む）

【課題】本発明は、組換えタンパク質又はペプチドの生産レベルを改善する又は宿主細胞において発現される活性組換えタンパク質又はペプチドのレベルを改善するための方法である。
【解決手段】本発明は、組換えタンパク質を発現する細胞の２つの遺伝的プロフィールを比較し、組換えタンパク質発現に応答して上方調節される遺伝子産物の発現を変化させるように前記細胞を修飾する方法である。前記方法は、例えば組換えタンパク質の溶解度を上昇させることによって、タンパク質の生産を改善することができる又はタンパク質の品質を改善することができる。 （もっと読む）

【課題】治療目的のために単離し精製することができる、哺乳動物の組み換え型タンパク質、特にヒト組み換え型タンパク質を生産するための方法を提供する。
【解決手段】本発明は、シュードモナス菌、特にシュードモナス・フルオレッセンス生物内で発現させることによる、哺乳動物の組み換え型タンパク質の改善された生産方法である。本方法は哺乳動物のタンパク質、特にヒトのタンパク質またはヒトに由来するタンパク質の生産を改善し、類似の環境において、公知の発現系、たとえばエシェリキア・コリを凌ぐ。単離された哺乳動物の、特にヒトのタンパク質の生産が改善された方法が提供される。 （もっと読む）

本発明は鱗翅類の昆虫を防除するための方法および植物を含み、前記植物は、昆虫（複数可）による抵抗性の発達を遅らせるか阻止するための、Ｃｒｙ１ＦａおよびＣｒｙ１Ｄａコア毒素含有タンパク質の組合せを含む。 （もっと読む）

ケトール酸レダクトイソメラーゼ酵素は、細菌および酵母におけるイソブタノール生合成経路においてステップとしてインビボで高有効性を示すことが同定された。これらのＫＡＲＩは、分子系統解析によってＳＬＳＬクレードと呼ばれるものと同定されたクレードのメンバーである。
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【課題】有用菌の活性度を高めて、有機物の酸化分解、排水中の難分解性化合物の酸化分解、アンモニア性窒素の酸化等が可能な水処理方法および水処理装置を提供する。
【解決手段】この水処理装置によれば、微生物活性化部５８において、粗大マイクロナノバブルと微小マイクロナノバブルによって活性化した有用微生物を含有したマイクロナノバブル水を、微生物培養槽２７から水配管１４を経由して、接触調整槽２および接触酸化槽９の少なくとも一方に供給する。この活性化された有用微生物および粗大,微小マイクロナノバブルによって、接触調整槽２,接触酸化槽９,循環ポンプ槽１５および放流ポンプ槽２０が構成する水処理部５７の水処理能力を向上させることができる。 （もっと読む）

【課題】規定された構造及び所望の分子量を有する高品質なアルギネート、特に多量の生物学的に活性なアルギネートを多量に生産する安定な源の提供。
【解決手段】培地１Ｌあたり少なくとも１０ｇのアルギネートを生産する、Ｐ．ｆｌｕｏｒｓｃｅｎｓの少なくとも１つの突然変異菌株中において、アルギネート生合成オペロンが、天然に生ずるプロモーターとは異なる誘導可能なプロモーターにより調節され、そして任意に１つ以上のエフェクター遺伝子を含む、前記突然変異菌株。 （もっと読む）

【課題】商業的に実行可能な工業規模の極限酵素発現系を提供する。
【解決手段】シュードモナス菌及び近縁細菌が宿主細胞として使用される極限酵素過剰発現系、それらを使用するための方法及びキット並びにそれらから発現される極限酵素。前記宿主細胞が培地上で発現を可能にする条件下で成長させた場合に、少なくとも１ｇ／Ｌの総生産性で前記極限酵素を生成するように、前記コード配列を過剰発現できることを特徴とする組換え細菌宿主細胞。 （もっと読む）

【課題】迅速且つ簡便にMDRPを検出することを可能にするMDRPスクリーニング培地及びその用途（MDRP検出法）を提供すること。
【解決手段】緑膿菌選択培地にカルバペネム系抗菌薬、フルオロキノロン系抗菌薬及びアミノ配糖体系抗菌薬を添加し、多剤耐性緑膿菌スクリーニング培地を構築する。 （もっと読む）

【課題】 発酵処理が困難であった甲殻類・卵殻他、水産加工残滓、大豆粕、オカラ等を有効利用できる発酵処理による健康食品・飼料・肥料の製造方法を提案する。
【解決手段】水・海水魚介類の消化管より採取した腸内細菌を、乾燥オカラ・米糠の菌床培養し、さらにこれに新たな菌床と既存の環境菌を加えて培養して複合菌体を使用し、発酵処理対象物を第一原料とし、第二原料として、乾燥オカラ、脱脂大豆粕、米糠等の製造目的に対応した材料を選択して混合攪拌し、前記複合発酵菌体群を植え付け、保温性バッチ式発酵機械（発酵槽１）で低温から攪拌発酵処理し、７５〜８５℃に達するまで発酵処理を行う。 （もっと読む）

【課題】ポリヒドロキシアルカン酸（ＰＨＡ）の細胞合成に有用なタンパク質をコードするＤＮＡ配列及びポリヒドロキシアルカノエート（ＰＨＡ）を産生方法を提供する。
【解決手段】脂肪酸のドゥノボ生合成経路のポリヒドロキシアルカン酸（ＰＨＡ）合成が欠失しているが脂肪酸のβ酸化経路のＰＨＡ生合成は阻害されていないＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｐｕｔｉｄａＫＴ２４４０突然変異体の表現型相補性を利用して、ｐｈａＧ遺伝子を担持しているゲノムフラグメントをクローニングした。８８５ｂｐのｐｈａＧ遺伝子は、２９５個のアミノ酸から成る分子量３３，８７６Ｄａのタンパク質をコードしている。脂肪酸のドゥノボ生合成経路のＰＨＡ合成条件下でｐｈａＧの転写誘発が観察されたが、β酸化による脂肪酸分解経路のＰＨＡ合成促進条件下で誘発は全く検出されなかった。ｐｈａＧ遺伝子は細菌及び植物にＰＨＡを産生させるために有用である。 （もっと読む）

本発明は、野生型と比べてより多くのω−アミノカルボン酸、ω−アミノカルボン酸エステル又は、ω−アミノカルボン酸から由来するより多くのラクタムをカルボン酸又はカルボン酸エステルから製造できるように遺伝子工学的に改変された細胞に関する。更に、本発明はω−アミノカルボン酸、ω−アミノカルボン酸エステル、又はω−アミノカルボン酸から由来するラクタムの製法、前記方法により得られたω−アミノカルボン酸、ω−カルボン酸エステル又はω−カルボン酸から由来するラクタム、ω−アミノカルボン酸又はラクタムをベースとするポリアミドの製法、ならびに前記方法により得られるポリアミドに関する。 （もっと読む）

本発明は、シュードモナス（Pseudomonad）起源の細菌細胞において、可溶性組織化ウイルス様粒子（「ＶＬＰ」）をインビボ生産するための改善された方法を提供する。このシュードモナス細胞は、インビボにおける、二十面体ウイルスキャプシドタンパク質（「ＣＰ」）からのＶＬＰの組織化を支持し、モノマー又はコンカテマーとして、ＶＬＰ内に大きい組換えペプチドを封入することを可能にする。本発明は、具体的には、シュードモナス・フルオレッセンス（Pseudomonas fluorescens）細菌系において可溶性ＣＰ融合物を高収量で生産するＣＣＭＶ ＣＰに修飾を導入することによる、可溶性組織化ササゲクロロティックモトルウイルス（「ＣＣＭＶ」）ＶＬＰのインビボ生産のための改善された方法を提供する。続いて、これらの可溶性ＶＬＰは、精製され、ワクチンとして使用され得る。 （もっと読む）

活性抗体断片（Ｆａｂ）の発現の改善は、重鎖定常領域を切断することで達成される。Ｆａｂ断片のＣＨ１ドメインの切断は、シュードモナス・フルオレッセンスにおける可溶性の活性抗体断片の収量を増加させることができる。本発明の別の実施形態は、軽鎖および様々なＣ末端を有する重鎖断片（例えば、異なる長さに切断されたＶＨ−ＣＨ１）の分泌を含む。切断されたＣＨ１領域は、他のＦａｂを作製するための骨格として使用することができる。また、Ｆａｂ断片のκ軽鎖および／またはλ軽鎖ドメインの切断も含まれる。本発明はまた、他のペプチドまたは分子（例えば、毒素、タンパク質、ペプチド、酵素など）と融合したＦａｂ断片の発現も含む。 （もっと読む）

本発明は、改善された収率および／または質で異種タンパク質を産生できる宿主細胞集団を迅速に同定するためのアレイを提供する。このアレイは、タンパク質産生に関与する１つもしくは複数の標的遺伝子の発現が増大するように、タンパク質分解に関与する１つもしくは複数の標的遺伝子の発現が低下するように、またはそれらの両方となるように遺伝子改変されている１つまたは複数の宿主細胞集団を含む。このアレイ内の１つまたは複数の株は、対象とする異種タンパク質をペリプラズム区画に発現することもでき、または外側細胞壁を通して細胞外に異種タンパク質を分泌することもできる。株アレイは、治療用タンパク質、ホルモン、成長因子、細胞外受容体またはリガンド、プロテアーゼ、キナーゼ、血液タンパク質、ケモカイン、サイトカインおよび抗体などを含めた、対象とするいかなるタンパク質の発現改善のスクリーニングにも有用である。 （もっと読む）

宿主細胞における対象タンパク質又はポリペプチドの発現及び／又は分泌を改善するための組成物および方法が提供される。細菌分泌シグナルペプチドについてのコード配列を含む組成物が提供される。コード配列は、宿主細胞における対象タンパク質又はポリペプチドの形質転換及び発現のためのベクター構築物又は発現系において使用することができる。本発明の組成物は、宿主細胞のペリプラズム空間における適切にプロセシングされたタンパク質の蓄積を増大させるため、又は宿主細胞からの適切にプロセシングされたタンパク質の分泌を上昇させるために有用である。特に、分泌シグナルペプチドをコードする単離核酸分子が提供される。加えて、核酸分子に対応するアミノ酸配列が包含される。特に、本発明は、配列番号：２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２及び２４に示すアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列、及び配列番号：１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１及び２３に示すヌクレオチド配列を含む単離核酸分子、並びにその変異体及びフラグメントを提供する。 （もっと読む）

関心対象の組換えポリペプチドを調製するための方法には、宿主細胞の周辺質の中へ関心対象のポリペプチドの分泌をもたらすことのできる組換え発現系で形質転換された宿主細胞を発酵させることが含まれる。関心対象のポリペプチドは、連続的な浸透圧ショックを発酵培地に含まれる宿主細胞に加えることにより周辺質から抽出される。浸透圧によって細胞にショックを与えるための装置には、第１の溶液中の細胞を含有する第１のリザーバおよび第２の溶液を含有する第２のリザーバが含まれ、第１の溶液は第２の溶液よりも高いモル浸透圧濃度を有する。第１および第２の溶液を用いる、浸透圧によって細胞にショックを与える方法も開示される。関心対象の組換えポリペプチドを細胞から単離する方法も開示される。 （もっと読む）

本発明は、本明細書においてDSM-2と呼ばれる新規の遺伝子に関する。この遺伝子は、ストレプトマイセス・セリカラーA3において同定された。DSM-2タンパク質は、PATおよびBARと遠縁である。本発明はまた、DSM-2タンパク質をコードする植物に最適化された遺伝子を提供し、DSM-2は、除草剤グルホシネートおよびビアロホスに対する耐性を植物および植物細胞に賦与するためのトランスジェニック形質として使用され得る。本発明の遺伝子の1つの好ましい使用は、選択マーカーとしての使用である。細菌系における選択マーカーとしてのこの遺伝子の使用は、植物の形質転換の効率を上昇させることができる。唯一の選択マーカーとしてのDSM-2の使用により、クローニング中のさらなる（アンピシリン耐性などの）医療用抗生物質マーカーが不要となる。本発明によれば、様々なその他の使用も可能である。 （もっと読む）

本発明は、緑膿菌からのCpGリッチ DNAを含んでいる組成物に関する。前記組成物は、任意でキュプレドキシンを含む。本発明は、患者の癌および他のコンディションを治療するために有用である緑膿菌からの特定のCpG DNAsを含む。これらの組成物は、任意で薬学的に許容される担体中にある、また任意でキュプレドキシンも含む。本発明は、さらに癌細胞の近くでタンパク質を発現する方法に関する。これらの方法を、癌または他のコンディションに罹患している患者における癌細胞の近くに治療上または診断上のタンパク質を発現するために使用しえる、および患者における癌を診断するために使用しえる。この方法は、緑膿菌（P. aeruginosa）からのアズリンに関する遺伝子を緑膿菌または異種の細胞におけるアズリンまたは異種性のタンパク質のための発現系に使用する。 （もっと読む）

本発明は、広宿主範囲の細菌においてＤＮＡをクローニングするためのクローニングベクターであって、（ｉ） ＲＫ２複製起点ｏｒｉＶ、（ｉｉ） ＲＫ２接合伝達起点ｏｒｉＴ、（ｉｉｉ） ＲＫ２からのｐａｒＤＥ、（ｉｖ） クローニング領域、（ｖ） 該ベクターのわずか１又は２のコピー数での複製を可能にする別の複製起点を含む自己複製人工染色体であり、このベクターはわずか１５ｋｂの大きさであり、ＲＫ２のｔｒｆＡを含有せず、少なくとも１２ｋｂの挿入断片をクローニングすることができるものとし、このベクター内のＲＫ２ ＤＮＡの含量はＲＫ２のわずか１０％であるものとするクローニングベクターを提供する。また、本発明は、上記ローニングベクターを有する宿主細胞及びベクター系を提供する。ＤＮＡをクローニングし、ライブラリを調製する方法並びにメタゲノムクローニングにおけるこのベクター及びＲＫ２レプリコンの使用も提供する。 （もっと読む）