ローズマリーオイルの抽出物、該ローズマリーオイルの抽出物を含有するゴキブリ忌避剤、並びにローズマリーオイルの抽出物を得る方法
【課題】ゴキブリに対して十分な忌避効果があり、且つ持続性のある忌避剤を提供すること。
【解決手段】ローズマリーオイルをクロマトグラフィーにより精製することによって得られる抽出物であって、ローズマリーオイルを吸着剤に吸着させたカラムから、ヘキサンまたはヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒を展開溶媒として用いて溶出した後、残渣をジエチルエーテル、酢酸エチルをそれぞれ展開溶媒として溶出したゴキブリに対する忌避作用を有するローズマリーオイルの抽出物、および該ローズマリーオイルの抽出物を含有するゴキブリ忌避剤とする。
【解決手段】ローズマリーオイルをクロマトグラフィーにより精製することによって得られる抽出物であって、ローズマリーオイルを吸着剤に吸着させたカラムから、ヘキサンまたはヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒を展開溶媒として用いて溶出した後、残渣をジエチルエーテル、酢酸エチルをそれぞれ展開溶媒として溶出したゴキブリに対する忌避作用を有するローズマリーオイルの抽出物、および該ローズマリーオイルの抽出物を含有するゴキブリ忌避剤とする。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ローズマリーオイルの抽出物である特定の分画成分を含有するゴキブリ忌避剤、並びに該ローズマリーオイルの抽出物を得る方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、ゴキブリ等の衛生害虫を忌避するために、ディートやピレスロイド系殺虫剤等が用いられている。ところが、近年このような成分を人が触れやすいところや食品のある付近などで使用するのに抵抗感を持つ傾向が見られる。
【０００３】
そこで、天然物由来のより安全性の高い成分を用いた忌避剤が検討されており、例えば、植物から採取した精油を用いて害虫を忌避することが行われている。具体的には、植物精油を含有する害虫忌避足バンドを人の足に装着する方法や、シソ科に属する植物の精油を含有する衛生害虫忌避薬剤を用いる衛星害虫忌避装置が提案されている（例えば、特許文献１，２参照）。このような害虫忌避剤には、例えば、ラベンダー油、ペパーミント油、バジル油等の植物精油が使用できるとされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００４−５１５６４号公報
【特許文献２】特開２００３−１６４２４８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、植物精油は安全性は高いが忌避効果が十分ではなく、また、持続性に欠けるという欠点があった。そのため十分な忌避効果を得るためには多量に使用する必要があり、入手が難しい、コストが高くなる、など実用面においても問題があった。
そこで、本発明はゴキブリに対して多量に用いなくても十分な忌避効果があり、コストも抑えることができ、且つ持続性のある植物精油、およびゴキブリ忌避剤を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、鋭意研究を行った結果、ローズマリーオイルの分画成分の中でも特定の分画成分がゴキブリの忌避効果が高く、その持続性も高いことを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】
すなわち本発明は、以下の（１）〜（３）によって達成されるものである。
（１）ローズマリーオイルをクロマトグラフィーにより精製することによって得られる抽出物であって、
ローズマリーオイルを吸着剤に吸着させたカラムから、ヘキサンまたはヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒を展開溶媒として用いて溶出した後、残渣をジエチルエーテル、酢酸エチルをそれぞれ展開溶媒として溶出したゴキブリに対する忌避作用を有するローズマリーオイルの抽出物。
（２）上記（１）のローズマリーオイルの抽出物を含有するゴキブリ忌避剤。
（３）ローズマリーオイルを吸着剤に吸着させたカラムから、クロマトグラフィーにより、
（ａ）ヘキサンを展開溶媒として第１分画成分を溶出する工程、
（ｂ）該第１分画成分を採取した残渣から、ヘキサン：ヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒（ヘキサン：ジエチルエーテル（４：１））＝１：１の混合溶媒を展開溶媒として第２分画成分を溶出する工程、
（ｃ）該第２分画成分を採取した残渣から、ヘキサン：ジエチルエーテル＝１：１の混合溶媒を展開溶媒として第３分画成分を溶出する工程、
（ｄ）該第３分画成分を採取した残渣から、ヘキサン：ジエチルエーテル＝１：４の混合溶媒を展開溶媒として第４分画成分を溶出する工程、
（ｅ）該第４分画成分を採取した残渣から、ジエチルエーテルを展開溶媒として第５分画成分を溶出する工程、
（ｆ）該第５分画成分を採取した残渣から、酢酸エチルを展開溶媒として第６分画成分を溶出する工程
により第５分画成分および第６分画成分をそれぞれ採取する、ゴキブリに対する忌避作用を有するローズマリーオイルの抽出物を得る方法。
【発明の効果】
【０００８】
本発明のローズマリーオイルからジエチルエーテル、酢酸エチルをそれぞれ展開溶媒として溶出した抽出物である第５分画成分および第６分画成分には、精製された忌避成分が含有されるため、このローズマリーオイルの抽出物を有効成分とした本発明のゴキブリ忌避剤は、ゴキブリに対する忌避効果が高く、また、その持続性も高いため、使用量を抑えることもできる。また、人体に対して安全性が高いため、様々な場所に適用することができ、特に人が触れやすいところや食品のある付近などでも使用できる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】ローズマリーオイルの第１分画成分のガスクロマトグラムである。
【図２】ローズマリーオイルの第２分画成分のガスクロマトグラムである。
【図３】ローズマリーオイルの第３分画成分のガスクロマトグラムである。
【図４】ローズマリーオイルの第４分画成分のガスクロマトグラムである。
【図５】ローズマリーオイルの第５分画成分のガスクロマトグラムである。
【図６】ローズマリーオイルの第６分画成分のガスクロマトグラムである。
【図７】実施例２、３で使用した実験装置を説明するための図である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
以下、本発明について詳細に説明する。本発明に係るローズマリーオイルの抽出物は、ローズマリーオイルをクロマトグラフィーにより精製することによって得られる抽出物である。
【００１１】
ローズマリー（学名：Rosmarinus officinalis）は地中海沿岸の諸国に広く分布するシソ科の常緑低木であり、ローズマリーオイルは、ローズマリーの葉や花を蒸留して採取される精油であり、淡緑色の液体である。本発明において使用できるローズマリーオイルとしては、例えば、ローズマリー・シネオール、ローズマリー・ベルベノン、ローズマリー・カンファー等を挙げることができる。
【００１２】
ローズマリーオイルは、シリカゲル、アルミナ、ガラスビーズ、ポリマー樹脂、珪藻土等の吸着剤を用いた吸着カラムクロマトグラフィー、液体クロマトグラフィーやガスクロマトグラフィーにより分画することができる。本発明において、操作が簡便且つ多量の試料処理が可能であるという理由からシリカゲルを用いた吸着カラムクロマトグラフィーを使用することが好ましい。
【００１３】
吸着カラムクロマトグラフィーを用いる場合、展開溶媒は極性の低いものから順に用い、複数工程で溶出することが好ましい。溶媒の極性を徐々に高くすることで、低極性物質から高極性物質を順次溶出することができるからである。展開溶媒としては、ヘキサン、ジエチルエーテル、酢酸エチル等が挙げられ、これらの溶媒を混合し、その混ぜる比率によって展開溶媒の極性を変えることができる。
【００１４】
本発明において、ローズマリーオイルを吸着剤に吸着させたカラムから、ヘキサンまたはヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒を展開溶媒として用いて溶出して忌避成分以外の成分を分離した後、残渣をジエチルエーテル、酢酸エチルをそれぞれ展開溶媒として溶出して、忌避成分を精製、濃縮する。
【００１５】
具体的には、まず、シリカゲル等の吸着剤に吸着させたローズマリーオイルを、ヘキサンを展開溶媒としてクロマトグラフィーを利用して第１分画成分を溶出する。次に、第１分画成分を採取した残渣について、ヘキサン：ヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒（ヘキサン：ジエチルエーテル（４：１））＝１：１の混合溶媒を展開溶媒としてクロマトグラフィーで処理して第２分画成分を溶出する。続けて、第２分画成分を採取した残渣について、ヘキサン：ジエチルエーテル＝１：１の混合溶媒を展開溶媒としてクロマトグラフィーで処理して第３分画成分を溶出する。そして、第３分画成分を採取した残渣について、ヘキサン：ジエチルエーテル＝１：４の混合溶媒を展開溶媒としてクロマトグラフィーで処理して第４分画成分を溶出する。前記第１分画成分から第４分画成分には、ローズマリーオイルの芳香成分や抗酸化成分、消臭成分が精製、濃縮されて溶出すると考えられる。
【００１６】
その後、第４分画成分を採取した残渣について、ジエチルエーテルを展開溶媒としてクロマトグラフィーで処理して第５分画成分を溶出する。そして、第５分画成分を採取した残渣について、酢酸エチルを展開溶媒としてクロマトグラフィーで処理して第６分画成分を溶出する。
【００１７】
尚、ヘキサン、ヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒を用いた溶出工程である第１分画成分を得る工程から第４分画成分を得る工程では、極性の低い溶媒に溶けやすい成分から順次溶出することにより、芳香成分や抗酸化成分を分離するものである。展開溶媒はジエチルエーテルの割合が順次多くなるようにして、極性を徐々に高くしている。また、ヘキサン、ヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒を用いた溶出は、任意の工程数を行えば良い。
【００１８】
そして、上記方法により採取した第５分画成分および第６分画成分には、ゴキブリの忌避成分が精製、濃縮されて含有されている。これらの分画成分は溶出原液をそのまま使用しても良いが、適切な方法で濃縮、乾燥して使用したり、適宜な溶媒に溶解して使用することもできる。前記溶媒としては、例えば、アセトン、エタノール、メタノール、パラフィン等が挙げられる。
【００１９】
本発明のゴキブリ忌避剤は、上記方法によりローズマリーオイルをヘキサンとヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒とを用いて不要成分を分離した後に、ジエチルエーテル、酢酸エチルをそれぞれ展開溶媒として溶出した抽出物の少なくとも一方を有効成分とするものである。本発明のゴキブリ忌避剤は、各種製剤として用いることができ、液体や固体等の担体等を用いて、例えば、液剤、ゲル剤、ゾル剤、粒剤、顆粒剤、スプレー剤、シート剤等として製剤化すればよい。これらの製剤を対象空間に設置することにより忌避成分を自然に揮散させたり、または対象空間に直接散布して、対象空間内の空気の移動や対流を利用して忌避成分を対象空間全体に行き渡るようにする。その他にも、ゴキブリ忌避剤をゴキブリの体の少なくとも一部に付着させたり、体表・脚の全体にわたり付着させてもよい。
【００２０】
有効成分である前記ローズマリーオイルの抽出物は、これらの製剤に適する有効量となるようにその配合量や使用量が選択されればよい。例えば、液剤として使用する場合は、有効成分は液剤中、０．０１質量％以上含有させることが好ましく、より好ましくは０．１〜３０質量％配合すると良い。ゲル剤として使用する場合は、有効成分はゲル剤中、０．１質量％以上含有させることが好ましく、より好ましくは０．５〜３０質量％配合すると良い。粒剤として使用する場合は、有効成分は粒剤中、０．１質量％以上含有させることが好ましく、より好ましくは０．５〜３０質量％配合すると良い。前記ローズマリーオイルの抽出物を上記範囲とすることで、十分なゴキブリの忌避効果を得ることができるとともに、その持続性を高めることができる。
尚、有効成分の有効気中濃度としては、０．１μｇ／Ｌ〜１０００μｇ／Ｌが好ましく、１μｇ／Ｌ〜１００μｇ／Ｌがより好ましい。有効成分は、例えば、居室においては、居住者の移動、ドアや窓の開閉等により発生する空気の移動または対流により、有効成分が居室全体に自然に行き渡る。
【００２１】
また、本発明のゴキブリ忌避剤には、その効果を損なわない限り、必要に応じて、その他の成分も配合可能である。例えば、着色剤、紫外線吸収剤、防腐剤、ｐＨ調整剤、酸化防止剤、香料、精油等から選ばれる１種または２種以上を配合することができる。
【００２２】
着色剤としては、例えば、青色１号、緑色２０２号、紫色２０１号等の法定色素、リボフラビン、シソ、クロロフィル等の天然色素等が挙げられる。
【００２３】
紫外線吸収剤としては、例えば、２，４−ジヒドロキシベンゾフェノン等のベンゾフェノン系、２−（２´−ヒドロキシ−５´−メチルフェニル）エンゾトリアゾール等のベンゾトリアゾール系等が挙げられる。
【００２４】
防腐剤としては、例えば、フェノキシエタノール、ベンジルアルコール、パラベン類等が挙げられる。
【００２５】
ｐＨ調整剤としては、例えば、クエン酸、リン酸、炭酸ナトリウム等が挙げられる。
【００２６】
本発明のゴキブリ忌避剤は各種ゴキブリに適用することができ、例えば、チャバネゴキブリ、クロゴキブリ、ワモンゴキブリ、ヤマトゴキブリ、オオゴキブリ、サツマゴキブリ等が挙げられ、中でもチャバネゴキブリ、クロゴキブリに対する忌避作用に優れている。
【実施例】
【００２７】
以下、実施例より本発明のゴキブリ忌避剤をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの例によってなんら制限されるものではない。
【００２８】
（実施例１）
＜ローズマリーオイルの分画＞
分画は、シリカゲルクロマトグラフィーを用いて行った。
液体出口に向けて縮径するクロマトグラフィー用のガラスカラム（内径５０ｍｍ×長さ５００ｍｍ）の液体出口に脱脂綿を詰めた。カラムにヘキサン適量を流し入れた後、縮径部分に海砂を詰めた。
シリカゲル（商品名：シリカゲル６０（球状、粒径６３〜２１０μｍ），関東化学株式会社製）を２００ｇ入れたビーカーに、ヘキサン適量を入れて攪拌した。これを前記カラムにゆっくり流し込み、ヘキサンを流しながら、シリカゲルがカラム内に密に詰まるのを確認した。
ヘキサンがシリカゲル層の下面位置から滴下するようになったところで、ローズマリーオイル（商品名：ROSEMARY OIL，MATIERES PREMIERES ESSENTIELLES社製）１０ｇを流し込みシリカゲルにローズマリーオイルを吸着させた。
【００２９】
ローズマリーオイルが全てシリカゲルに染み込んだのを確認した後、下記の展開溶媒を用いて第１分画成分〜第６分画成分を溶出・分画した（流速４０〜５０ｍＬ／ｍｉｎ）。
（展開溶媒）
第１分画：ヘキサン ３００ｍＬ
第２分画：ヘキサン ３００ｍＬ ＋ ヘキサン：ジエチルエーテル＝４：１ ３００ ｍＬ
第３分画：ヘキサン：ジエチルエーテル＝１：１ ３００ｍＬ
第４分画：ヘキサン：ジエチルエーテル＝１：４ ３００ｍＬ
第５分画：ジエチルエーテル ３００ｍＬ
第６分画：酢酸エチル ３００ｍＬ
【００３０】
上記採取した第１分画成分〜第６分画成分に関して、ガスクロマトグラフィーにより成分組成の解析を行った。解析条件は以下の通りである。また、解析結果を図１〜図６に示す。
（ガスクロマトグラフィーの解析条件）
ガスクロマトグラフ装置：ＧＣ−１４Ｂ（商品名，株式会社島津製作所製）
カラム：ＰＥＧ−２０Ｍ（商品名，ＧＬサイエンス株式会社製）
担体：１０％ Ｕｎｉｐｏｒｔ ＨＰ（商品名，ＧＬサイエンス株式会社製）
カラムサイズ：３．２ｍｍφ×２ｍ
カラム温度：７０℃（１ｍｉｎ）→８℃／ｍｉｎ→２１０℃（５ｍｉｎ）
注入温度（Injection温度）：２４０℃
検出温度（Detection温度）：２４０℃
キャリアガス：窒素：５０ｍＬ／ｍｉｎ、水素：６０ｍＬ／ｍｉｎ
【００３１】
図１〜図６に示したように、図５に示した第５分画成分と図６に示した第６分画成分のガスクロマトグラムには保持時間１０分付近で同様のピークが表われていることがわかった。このことから、本発明の方法により、忌避成分が他の有効成分から単離されたことがわかる。
【００３２】
（実施例２）
＜忌避実験：クロゴキブリ＞
図７に示すように、幅１００ｃｍ×長さ１００ｃｍ×高さ２５ｃｍのケージ１０の四隅に０．８Ｌ容の有底円柱状のプラスチックカップ１〜４を底を上方にして設置した。プラスチックカップには、側面に縦１ｃｍ×横４ｃｍの開口部５をケージ１０の床面と接する側から切り欠いて形成した。
縦１０ｍｍ×横１０ｍｍ×厚さ２ｍｍのパルプ紙に実施例１で得たローズマリーオイルの第１分画成分を１０μｇ滴下し、アルミホイルで覆い、虫針で１０個穴を開けて第１検体を作製した。第２分画成分〜第６分画成分についても同様に行い、第２検体〜第６検体を作製した。
【００３３】
カップ１とカップ３に第１検体Ｓを設置し処理区とし、ケージ１０の略中央には餌６と水７を設置して、ケージ１０内にクロゴキブリの雄雌各２５匹ずつを放った。尚、カップ２とカップ４は無処理区である。
１日毎に第１検体Ｓを処理区から無処理区に移動させ、１日毎に処理区、無処理区内に定着しているゴキブリ数をカウントして下記式により忌避率（％）を算出した。第２検体〜第６検体に関しても同様に行った。尚、試験は各検体につき２回ずつ行い、その結果の平均値を表１に示す。
忌避率（％）＝（無処理区の定着数−処理区の定着数）／無処理区の定着数×１００
【００３４】
【表１】
【００３５】
（実施例３）
＜忌避実験：チャバネゴキブリ＞
幅５０ｃｍ×長さ５０ｃｍ×高さ２５ｃｍのケージ１０を用いた以外は実施例２と同様にして、チャバネゴキブリについて忌避実験を行った。尚、チャバネゴキブリが雄雌各３０匹ずつで試験を行った。結果を表２に示す。
【００３６】
【表２】
【００３７】
表１、２の結果より、第５検体および第６検体は第１検体〜第４検体に比べて忌避効果が高く、しかも持続時間も長いことがわかる。このことから、本発明の方法により分画した第５分画成分および第６分画成分は、ゴキブリに対する忌避効果に優れていることがわかった。
【００３８】
続いて、本発明に係るローズマリーオイルの抽出物を用いたゴキブリ忌避剤の処方例（製剤例１〜８）を示す。尚、製剤例中、ローズマリーオイルの第５分画成分および第６分画成分は、実施例１の方法によりローズマリーオイルをジエチルエーテル、酢酸エチルそれぞれで精製した抽出物である。
【００３９】
＜製剤例１：液剤＞
ローズマリーオイルの第５分画成分 １．０ｇ
ポリエチレン硬化ヒマシ油 ２．０ｇ
エタノール １．０ｇ
イオン水 残 部
合計 １００．０ｇ
【００４０】
＜製剤例２：液剤＞
ローズマリーオイルの第６分画成分 １．０ｇ
ポリエチレン硬化ヒマシ油 ２．０ｇ
エタノール １．０ｇ
イオン水 残 部
合計 １００．０ｇ
【００４１】
＜製剤例３：ゲル剤＞
ローズマリーオイルの第５分画成分 ５．０ｇ
ポリエチレン硬化ヒマシ油 ０．８ｇ
エタノール １．０ｇ
カラギーナン ２．０ｇ
濃グリセリン ０．５ｇ
緑３号 ０．１ｇ
イオン水 残 部
合計 １００．０ｇ
【００４２】
＜製剤例４：ゲル剤＞
ローズマリーオイルの第６分画成分 ５．０ｇ
ポリエチレン硬化ヒマシ油 ０．８ｇ
エタノール １．０ｇ
カラギーナン ２．０ｇ
濃グリセリン ０．５ｇ
緑３号 ０．１ｇ
イオン水 残 部
合計 １００．０ｇ
【００４３】
＜製剤例５：粒剤＞
ローズマリーオイルの第５分画成分 ５．０ｇ
無水ケイ酸 ２．０ｇ
ＢＨＴ ０．００１ｇ
重質炭酸カルシウム 残 部
合計 １００．０ｇ
【００４４】
＜製剤例６：粒剤＞
ローズマリーオイルの第６分画成分 ５．０ｇ
無水ケイ酸 ２．０ｇ
ＢＨＴ ０．００１ｇ
重質炭酸カルシウム 残 部
合計 １００．０ｇ
【００４５】
＜製剤例７：エアゾール剤＞
〔原液〕
ローズマリーオイルの第５分画成分 ５．０ｇ
ネオチオゾール １００．０ｍＬとする
〔噴射剤〕
ＤＭＥ（ジメチルエーテル） ９０．０ｍＬ
ＬＰＧ（液化石油ガス） １１０．０ｍＬ
合計 ３００．０ｍＬ
【００４６】
＜製剤例７：エアゾール剤＞
〔原液〕
ローズマリーオイルの第６分画成分 ５．０ｇ
ネオチオゾール １００．０ｍＬとする
〔噴射剤〕
ＤＭＥ（ジメチルエーテル） ９０．０ｍＬ
ＬＰＧ（液化石油ガス） １１０．０ｍＬ
合計 ３００．０ｍＬ
【産業上の利用可能性】
【００４７】
本発明のゴキブリ忌避剤は、ゴキブリに対する忌避効果が高く、またその持続性も高い。そして、人体に対して害のある物質を含有していないため、人が触れやすいところや食品のある付近などでも安全に使用できる。
【符号の説明】
【００４８】
１〜４ カップ
５ 開口部
６ 餌
７ 水
１０ ケージ
Ｓ 検体
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ローズマリーオイルの抽出物である特定の分画成分を含有するゴキブリ忌避剤、並びに該ローズマリーオイルの抽出物を得る方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、ゴキブリ等の衛生害虫を忌避するために、ディートやピレスロイド系殺虫剤等が用いられている。ところが、近年このような成分を人が触れやすいところや食品のある付近などで使用するのに抵抗感を持つ傾向が見られる。
【０００３】
そこで、天然物由来のより安全性の高い成分を用いた忌避剤が検討されており、例えば、植物から採取した精油を用いて害虫を忌避することが行われている。具体的には、植物精油を含有する害虫忌避足バンドを人の足に装着する方法や、シソ科に属する植物の精油を含有する衛生害虫忌避薬剤を用いる衛星害虫忌避装置が提案されている（例えば、特許文献１，２参照）。このような害虫忌避剤には、例えば、ラベンダー油、ペパーミント油、バジル油等の植物精油が使用できるとされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００４−５１５６４号公報
【特許文献２】特開２００３−１６４２４８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、植物精油は安全性は高いが忌避効果が十分ではなく、また、持続性に欠けるという欠点があった。そのため十分な忌避効果を得るためには多量に使用する必要があり、入手が難しい、コストが高くなる、など実用面においても問題があった。
そこで、本発明はゴキブリに対して多量に用いなくても十分な忌避効果があり、コストも抑えることができ、且つ持続性のある植物精油、およびゴキブリ忌避剤を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、鋭意研究を行った結果、ローズマリーオイルの分画成分の中でも特定の分画成分がゴキブリの忌避効果が高く、その持続性も高いことを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】
すなわち本発明は、以下の（１）〜（３）によって達成されるものである。
（１）ローズマリーオイルをクロマトグラフィーにより精製することによって得られる抽出物であって、
ローズマリーオイルを吸着剤に吸着させたカラムから、ヘキサンまたはヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒を展開溶媒として用いて溶出した後、残渣をジエチルエーテル、酢酸エチルをそれぞれ展開溶媒として溶出したゴキブリに対する忌避作用を有するローズマリーオイルの抽出物。
（２）上記（１）のローズマリーオイルの抽出物を含有するゴキブリ忌避剤。
（３）ローズマリーオイルを吸着剤に吸着させたカラムから、クロマトグラフィーにより、
（ａ）ヘキサンを展開溶媒として第１分画成分を溶出する工程、
（ｂ）該第１分画成分を採取した残渣から、ヘキサン：ヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒（ヘキサン：ジエチルエーテル（４：１））＝１：１の混合溶媒を展開溶媒として第２分画成分を溶出する工程、
（ｃ）該第２分画成分を採取した残渣から、ヘキサン：ジエチルエーテル＝１：１の混合溶媒を展開溶媒として第３分画成分を溶出する工程、
（ｄ）該第３分画成分を採取した残渣から、ヘキサン：ジエチルエーテル＝１：４の混合溶媒を展開溶媒として第４分画成分を溶出する工程、
（ｅ）該第４分画成分を採取した残渣から、ジエチルエーテルを展開溶媒として第５分画成分を溶出する工程、
（ｆ）該第５分画成分を採取した残渣から、酢酸エチルを展開溶媒として第６分画成分を溶出する工程
により第５分画成分および第６分画成分をそれぞれ採取する、ゴキブリに対する忌避作用を有するローズマリーオイルの抽出物を得る方法。
【発明の効果】
【０００８】
本発明のローズマリーオイルからジエチルエーテル、酢酸エチルをそれぞれ展開溶媒として溶出した抽出物である第５分画成分および第６分画成分には、精製された忌避成分が含有されるため、このローズマリーオイルの抽出物を有効成分とした本発明のゴキブリ忌避剤は、ゴキブリに対する忌避効果が高く、また、その持続性も高いため、使用量を抑えることもできる。また、人体に対して安全性が高いため、様々な場所に適用することができ、特に人が触れやすいところや食品のある付近などでも使用できる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】ローズマリーオイルの第１分画成分のガスクロマトグラムである。
【図２】ローズマリーオイルの第２分画成分のガスクロマトグラムである。
【図３】ローズマリーオイルの第３分画成分のガスクロマトグラムである。
【図４】ローズマリーオイルの第４分画成分のガスクロマトグラムである。
【図５】ローズマリーオイルの第５分画成分のガスクロマトグラムである。
【図６】ローズマリーオイルの第６分画成分のガスクロマトグラムである。
【図７】実施例２、３で使用した実験装置を説明するための図である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
以下、本発明について詳細に説明する。本発明に係るローズマリーオイルの抽出物は、ローズマリーオイルをクロマトグラフィーにより精製することによって得られる抽出物である。
【００１１】
ローズマリー（学名：Rosmarinus officinalis）は地中海沿岸の諸国に広く分布するシソ科の常緑低木であり、ローズマリーオイルは、ローズマリーの葉や花を蒸留して採取される精油であり、淡緑色の液体である。本発明において使用できるローズマリーオイルとしては、例えば、ローズマリー・シネオール、ローズマリー・ベルベノン、ローズマリー・カンファー等を挙げることができる。
【００１２】
ローズマリーオイルは、シリカゲル、アルミナ、ガラスビーズ、ポリマー樹脂、珪藻土等の吸着剤を用いた吸着カラムクロマトグラフィー、液体クロマトグラフィーやガスクロマトグラフィーにより分画することができる。本発明において、操作が簡便且つ多量の試料処理が可能であるという理由からシリカゲルを用いた吸着カラムクロマトグラフィーを使用することが好ましい。
【００１３】
吸着カラムクロマトグラフィーを用いる場合、展開溶媒は極性の低いものから順に用い、複数工程で溶出することが好ましい。溶媒の極性を徐々に高くすることで、低極性物質から高極性物質を順次溶出することができるからである。展開溶媒としては、ヘキサン、ジエチルエーテル、酢酸エチル等が挙げられ、これらの溶媒を混合し、その混ぜる比率によって展開溶媒の極性を変えることができる。
【００１４】
本発明において、ローズマリーオイルを吸着剤に吸着させたカラムから、ヘキサンまたはヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒を展開溶媒として用いて溶出して忌避成分以外の成分を分離した後、残渣をジエチルエーテル、酢酸エチルをそれぞれ展開溶媒として溶出して、忌避成分を精製、濃縮する。
【００１５】
具体的には、まず、シリカゲル等の吸着剤に吸着させたローズマリーオイルを、ヘキサンを展開溶媒としてクロマトグラフィーを利用して第１分画成分を溶出する。次に、第１分画成分を採取した残渣について、ヘキサン：ヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒（ヘキサン：ジエチルエーテル（４：１））＝１：１の混合溶媒を展開溶媒としてクロマトグラフィーで処理して第２分画成分を溶出する。続けて、第２分画成分を採取した残渣について、ヘキサン：ジエチルエーテル＝１：１の混合溶媒を展開溶媒としてクロマトグラフィーで処理して第３分画成分を溶出する。そして、第３分画成分を採取した残渣について、ヘキサン：ジエチルエーテル＝１：４の混合溶媒を展開溶媒としてクロマトグラフィーで処理して第４分画成分を溶出する。前記第１分画成分から第４分画成分には、ローズマリーオイルの芳香成分や抗酸化成分、消臭成分が精製、濃縮されて溶出すると考えられる。
【００１６】
その後、第４分画成分を採取した残渣について、ジエチルエーテルを展開溶媒としてクロマトグラフィーで処理して第５分画成分を溶出する。そして、第５分画成分を採取した残渣について、酢酸エチルを展開溶媒としてクロマトグラフィーで処理して第６分画成分を溶出する。
【００１７】
尚、ヘキサン、ヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒を用いた溶出工程である第１分画成分を得る工程から第４分画成分を得る工程では、極性の低い溶媒に溶けやすい成分から順次溶出することにより、芳香成分や抗酸化成分を分離するものである。展開溶媒はジエチルエーテルの割合が順次多くなるようにして、極性を徐々に高くしている。また、ヘキサン、ヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒を用いた溶出は、任意の工程数を行えば良い。
【００１８】
そして、上記方法により採取した第５分画成分および第６分画成分には、ゴキブリの忌避成分が精製、濃縮されて含有されている。これらの分画成分は溶出原液をそのまま使用しても良いが、適切な方法で濃縮、乾燥して使用したり、適宜な溶媒に溶解して使用することもできる。前記溶媒としては、例えば、アセトン、エタノール、メタノール、パラフィン等が挙げられる。
【００１９】
本発明のゴキブリ忌避剤は、上記方法によりローズマリーオイルをヘキサンとヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒とを用いて不要成分を分離した後に、ジエチルエーテル、酢酸エチルをそれぞれ展開溶媒として溶出した抽出物の少なくとも一方を有効成分とするものである。本発明のゴキブリ忌避剤は、各種製剤として用いることができ、液体や固体等の担体等を用いて、例えば、液剤、ゲル剤、ゾル剤、粒剤、顆粒剤、スプレー剤、シート剤等として製剤化すればよい。これらの製剤を対象空間に設置することにより忌避成分を自然に揮散させたり、または対象空間に直接散布して、対象空間内の空気の移動や対流を利用して忌避成分を対象空間全体に行き渡るようにする。その他にも、ゴキブリ忌避剤をゴキブリの体の少なくとも一部に付着させたり、体表・脚の全体にわたり付着させてもよい。
【００２０】
有効成分である前記ローズマリーオイルの抽出物は、これらの製剤に適する有効量となるようにその配合量や使用量が選択されればよい。例えば、液剤として使用する場合は、有効成分は液剤中、０．０１質量％以上含有させることが好ましく、より好ましくは０．１〜３０質量％配合すると良い。ゲル剤として使用する場合は、有効成分はゲル剤中、０．１質量％以上含有させることが好ましく、より好ましくは０．５〜３０質量％配合すると良い。粒剤として使用する場合は、有効成分は粒剤中、０．１質量％以上含有させることが好ましく、より好ましくは０．５〜３０質量％配合すると良い。前記ローズマリーオイルの抽出物を上記範囲とすることで、十分なゴキブリの忌避効果を得ることができるとともに、その持続性を高めることができる。
尚、有効成分の有効気中濃度としては、０．１μｇ／Ｌ〜１０００μｇ／Ｌが好ましく、１μｇ／Ｌ〜１００μｇ／Ｌがより好ましい。有効成分は、例えば、居室においては、居住者の移動、ドアや窓の開閉等により発生する空気の移動または対流により、有効成分が居室全体に自然に行き渡る。
【００２１】
また、本発明のゴキブリ忌避剤には、その効果を損なわない限り、必要に応じて、その他の成分も配合可能である。例えば、着色剤、紫外線吸収剤、防腐剤、ｐＨ調整剤、酸化防止剤、香料、精油等から選ばれる１種または２種以上を配合することができる。
【００２２】
着色剤としては、例えば、青色１号、緑色２０２号、紫色２０１号等の法定色素、リボフラビン、シソ、クロロフィル等の天然色素等が挙げられる。
【００２３】
紫外線吸収剤としては、例えば、２，４−ジヒドロキシベンゾフェノン等のベンゾフェノン系、２−（２´−ヒドロキシ−５´−メチルフェニル）エンゾトリアゾール等のベンゾトリアゾール系等が挙げられる。
【００２４】
防腐剤としては、例えば、フェノキシエタノール、ベンジルアルコール、パラベン類等が挙げられる。
【００２５】
ｐＨ調整剤としては、例えば、クエン酸、リン酸、炭酸ナトリウム等が挙げられる。
【００２６】
本発明のゴキブリ忌避剤は各種ゴキブリに適用することができ、例えば、チャバネゴキブリ、クロゴキブリ、ワモンゴキブリ、ヤマトゴキブリ、オオゴキブリ、サツマゴキブリ等が挙げられ、中でもチャバネゴキブリ、クロゴキブリに対する忌避作用に優れている。
【実施例】
【００２７】
以下、実施例より本発明のゴキブリ忌避剤をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの例によってなんら制限されるものではない。
【００２８】
（実施例１）
＜ローズマリーオイルの分画＞
分画は、シリカゲルクロマトグラフィーを用いて行った。
液体出口に向けて縮径するクロマトグラフィー用のガラスカラム（内径５０ｍｍ×長さ５００ｍｍ）の液体出口に脱脂綿を詰めた。カラムにヘキサン適量を流し入れた後、縮径部分に海砂を詰めた。
シリカゲル（商品名：シリカゲル６０（球状、粒径６３〜２１０μｍ），関東化学株式会社製）を２００ｇ入れたビーカーに、ヘキサン適量を入れて攪拌した。これを前記カラムにゆっくり流し込み、ヘキサンを流しながら、シリカゲルがカラム内に密に詰まるのを確認した。
ヘキサンがシリカゲル層の下面位置から滴下するようになったところで、ローズマリーオイル（商品名：ROSEMARY OIL，MATIERES PREMIERES ESSENTIELLES社製）１０ｇを流し込みシリカゲルにローズマリーオイルを吸着させた。
【００２９】
ローズマリーオイルが全てシリカゲルに染み込んだのを確認した後、下記の展開溶媒を用いて第１分画成分〜第６分画成分を溶出・分画した（流速４０〜５０ｍＬ／ｍｉｎ）。
（展開溶媒）
第１分画：ヘキサン ３００ｍＬ
第２分画：ヘキサン ３００ｍＬ ＋ ヘキサン：ジエチルエーテル＝４：１ ３００ ｍＬ
第３分画：ヘキサン：ジエチルエーテル＝１：１ ３００ｍＬ
第４分画：ヘキサン：ジエチルエーテル＝１：４ ３００ｍＬ
第５分画：ジエチルエーテル ３００ｍＬ
第６分画：酢酸エチル ３００ｍＬ
【００３０】
上記採取した第１分画成分〜第６分画成分に関して、ガスクロマトグラフィーにより成分組成の解析を行った。解析条件は以下の通りである。また、解析結果を図１〜図６に示す。
（ガスクロマトグラフィーの解析条件）
ガスクロマトグラフ装置：ＧＣ−１４Ｂ（商品名，株式会社島津製作所製）
カラム：ＰＥＧ−２０Ｍ（商品名，ＧＬサイエンス株式会社製）
担体：１０％ Ｕｎｉｐｏｒｔ ＨＰ（商品名，ＧＬサイエンス株式会社製）
カラムサイズ：３．２ｍｍφ×２ｍ
カラム温度：７０℃（１ｍｉｎ）→８℃／ｍｉｎ→２１０℃（５ｍｉｎ）
注入温度（Injection温度）：２４０℃
検出温度（Detection温度）：２４０℃
キャリアガス：窒素：５０ｍＬ／ｍｉｎ、水素：６０ｍＬ／ｍｉｎ
【００３１】
図１〜図６に示したように、図５に示した第５分画成分と図６に示した第６分画成分のガスクロマトグラムには保持時間１０分付近で同様のピークが表われていることがわかった。このことから、本発明の方法により、忌避成分が他の有効成分から単離されたことがわかる。
【００３２】
（実施例２）
＜忌避実験：クロゴキブリ＞
図７に示すように、幅１００ｃｍ×長さ１００ｃｍ×高さ２５ｃｍのケージ１０の四隅に０．８Ｌ容の有底円柱状のプラスチックカップ１〜４を底を上方にして設置した。プラスチックカップには、側面に縦１ｃｍ×横４ｃｍの開口部５をケージ１０の床面と接する側から切り欠いて形成した。
縦１０ｍｍ×横１０ｍｍ×厚さ２ｍｍのパルプ紙に実施例１で得たローズマリーオイルの第１分画成分を１０μｇ滴下し、アルミホイルで覆い、虫針で１０個穴を開けて第１検体を作製した。第２分画成分〜第６分画成分についても同様に行い、第２検体〜第６検体を作製した。
【００３３】
カップ１とカップ３に第１検体Ｓを設置し処理区とし、ケージ１０の略中央には餌６と水７を設置して、ケージ１０内にクロゴキブリの雄雌各２５匹ずつを放った。尚、カップ２とカップ４は無処理区である。
１日毎に第１検体Ｓを処理区から無処理区に移動させ、１日毎に処理区、無処理区内に定着しているゴキブリ数をカウントして下記式により忌避率（％）を算出した。第２検体〜第６検体に関しても同様に行った。尚、試験は各検体につき２回ずつ行い、その結果の平均値を表１に示す。
忌避率（％）＝（無処理区の定着数−処理区の定着数）／無処理区の定着数×１００
【００３４】
【表１】
【００３５】
（実施例３）
＜忌避実験：チャバネゴキブリ＞
幅５０ｃｍ×長さ５０ｃｍ×高さ２５ｃｍのケージ１０を用いた以外は実施例２と同様にして、チャバネゴキブリについて忌避実験を行った。尚、チャバネゴキブリが雄雌各３０匹ずつで試験を行った。結果を表２に示す。
【００３６】
【表２】
【００３７】
表１、２の結果より、第５検体および第６検体は第１検体〜第４検体に比べて忌避効果が高く、しかも持続時間も長いことがわかる。このことから、本発明の方法により分画した第５分画成分および第６分画成分は、ゴキブリに対する忌避効果に優れていることがわかった。
【００３８】
続いて、本発明に係るローズマリーオイルの抽出物を用いたゴキブリ忌避剤の処方例（製剤例１〜８）を示す。尚、製剤例中、ローズマリーオイルの第５分画成分および第６分画成分は、実施例１の方法によりローズマリーオイルをジエチルエーテル、酢酸エチルそれぞれで精製した抽出物である。
【００３９】
＜製剤例１：液剤＞
ローズマリーオイルの第５分画成分 １．０ｇ
ポリエチレン硬化ヒマシ油 ２．０ｇ
エタノール １．０ｇ
イオン水 残 部
合計 １００．０ｇ
【００４０】
＜製剤例２：液剤＞
ローズマリーオイルの第６分画成分 １．０ｇ
ポリエチレン硬化ヒマシ油 ２．０ｇ
エタノール １．０ｇ
イオン水 残 部
合計 １００．０ｇ
【００４１】
＜製剤例３：ゲル剤＞
ローズマリーオイルの第５分画成分 ５．０ｇ
ポリエチレン硬化ヒマシ油 ０．８ｇ
エタノール １．０ｇ
カラギーナン ２．０ｇ
濃グリセリン ０．５ｇ
緑３号 ０．１ｇ
イオン水 残 部
合計 １００．０ｇ
【００４２】
＜製剤例４：ゲル剤＞
ローズマリーオイルの第６分画成分 ５．０ｇ
ポリエチレン硬化ヒマシ油 ０．８ｇ
エタノール １．０ｇ
カラギーナン ２．０ｇ
濃グリセリン ０．５ｇ
緑３号 ０．１ｇ
イオン水 残 部
合計 １００．０ｇ
【００４３】
＜製剤例５：粒剤＞
ローズマリーオイルの第５分画成分 ５．０ｇ
無水ケイ酸 ２．０ｇ
ＢＨＴ ０．００１ｇ
重質炭酸カルシウム 残 部
合計 １００．０ｇ
【００４４】
＜製剤例６：粒剤＞
ローズマリーオイルの第６分画成分 ５．０ｇ
無水ケイ酸 ２．０ｇ
ＢＨＴ ０．００１ｇ
重質炭酸カルシウム 残 部
合計 １００．０ｇ
【００４５】
＜製剤例７：エアゾール剤＞
〔原液〕
ローズマリーオイルの第５分画成分 ５．０ｇ
ネオチオゾール １００．０ｍＬとする
〔噴射剤〕
ＤＭＥ（ジメチルエーテル） ９０．０ｍＬ
ＬＰＧ（液化石油ガス） １１０．０ｍＬ
合計 ３００．０ｍＬ
【００４６】
＜製剤例７：エアゾール剤＞
〔原液〕
ローズマリーオイルの第６分画成分 ５．０ｇ
ネオチオゾール １００．０ｍＬとする
〔噴射剤〕
ＤＭＥ（ジメチルエーテル） ９０．０ｍＬ
ＬＰＧ（液化石油ガス） １１０．０ｍＬ
合計 ３００．０ｍＬ
【産業上の利用可能性】
【００４７】
本発明のゴキブリ忌避剤は、ゴキブリに対する忌避効果が高く、またその持続性も高い。そして、人体に対して害のある物質を含有していないため、人が触れやすいところや食品のある付近などでも安全に使用できる。
【符号の説明】
【００４８】
１〜４ カップ
５ 開口部
６ 餌
７ 水
１０ ケージ
Ｓ 検体
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ローズマリーオイルをクロマトグラフィーにより精製することによって得られる抽出物であって、
ローズマリーオイルを吸着剤に吸着させたカラムから、ヘキサンまたはヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒を展開溶媒として用いて溶出した後、残渣をジエチルエーテル、酢酸エチルをそれぞれ展開溶媒として溶出したゴキブリに対する忌避作用を有するローズマリーオイルの抽出物。
【請求項２】
請求項１のローズマリーオイルの抽出物を含有するゴキブリ忌避剤。
【請求項３】
ローズマリーオイルを吸着剤に吸着させたカラムから、クロマトグラフィーにより、
（ａ）ヘキサンを展開溶媒として第１分画成分を溶出する工程、
（ｂ）該第１分画成分を採取した残渣から、ヘキサン：ヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒（ヘキサン：ジエチルエーテル（４：１））＝１：１の混合溶媒を展開溶媒として第２分画成分を溶出する工程、
（ｃ）該第２分画成分を採取した残渣から、ヘキサン：ジエチルエーテル＝１：１の混合溶媒を展開溶媒として第３分画成分を溶出する工程、
（ｄ）該第３分画成分を採取した残渣から、ヘキサン：ジエチルエーテル＝１：４の混合溶媒を展開溶媒として第４分画成分を溶出する工程、
（ｅ）該第４分画成分を採取した残渣から、ジエチルエーテルを展開溶媒として第５分画成分を溶出する工程、
（ｆ）該第５分画成分を採取した残渣から、酢酸エチルを展開溶媒として第６分画成分を溶出する工程
により第５分画成分および第６分画成分をそれぞれ採取する、ゴキブリに対する忌避作用を有するローズマリーオイルの抽出物を得る方法。
【請求項１】
ローズマリーオイルをクロマトグラフィーにより精製することによって得られる抽出物であって、
ローズマリーオイルを吸着剤に吸着させたカラムから、ヘキサンまたはヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒を展開溶媒として用いて溶出した後、残渣をジエチルエーテル、酢酸エチルをそれぞれ展開溶媒として溶出したゴキブリに対する忌避作用を有するローズマリーオイルの抽出物。
【請求項２】
請求項１のローズマリーオイルの抽出物を含有するゴキブリ忌避剤。
【請求項３】
ローズマリーオイルを吸着剤に吸着させたカラムから、クロマトグラフィーにより、
（ａ）ヘキサンを展開溶媒として第１分画成分を溶出する工程、
（ｂ）該第１分画成分を採取した残渣から、ヘキサン：ヘキサン・ジエチルエーテル混合溶媒（ヘキサン：ジエチルエーテル（４：１））＝１：１の混合溶媒を展開溶媒として第２分画成分を溶出する工程、
（ｃ）該第２分画成分を採取した残渣から、ヘキサン：ジエチルエーテル＝１：１の混合溶媒を展開溶媒として第３分画成分を溶出する工程、
（ｄ）該第３分画成分を採取した残渣から、ヘキサン：ジエチルエーテル＝１：４の混合溶媒を展開溶媒として第４分画成分を溶出する工程、
（ｅ）該第４分画成分を採取した残渣から、ジエチルエーテルを展開溶媒として第５分画成分を溶出する工程、
（ｆ）該第５分画成分を採取した残渣から、酢酸エチルを展開溶媒として第６分画成分を溶出する工程
により第５分画成分および第６分画成分をそれぞれ採取する、ゴキブリに対する忌避作用を有するローズマリーオイルの抽出物を得る方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【公開番号】特開２０１１−１２０２８（Ｐ２０１１−１２０２８Ａ）
【公開日】平成２３年１月２０日（２０１１．１．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１５８５０２（Ｐ２００９−１５８５０２）
【出願日】平成２１年７月３日（２００９．７．３）
【出願人】（０００１００５３９）アース製薬株式会社 (191)
【出願人】（０００１６９４６６）高砂香料工業株式会社 (194)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年１月２０日（２０１１．１．２０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年７月３日（２００９．７．３）
【出願人】（０００１００５３９）アース製薬株式会社 (191)
【出願人】（０００１６９４６６）高砂香料工業株式会社 (194)
【Ｆターム（参考）】
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