動物飼料組成物
【課題】動物飼料組成物を提供する。
【解決手段】本発明は、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの活性化合物の混合物と併用される、安息香酸、その誘導体または代謝産物を活性成分として含む、例えば家禽などの動物のための新しい飼料組成物に関する。発明者らは、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの活性化合物の混合物と併用すると、安息香酸のよく知られている機能に加えて、この化合物が有望な生育促進剤として使用できることを発見した。特に発明者らは、適量の安息香酸と相乗効果で併用される植物の異なる部位に存在する化合物の混合物が、全く思いがけないことに、本発明によって探求される、家禽飼料の消化吸収率を改善する、すなわち動物において飼料転換率および／または毎日の体重増加を改善する効果を示すことを実証できた。
【解決手段】本発明は、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの活性化合物の混合物と併用される、安息香酸、その誘導体または代謝産物を活性成分として含む、例えば家禽などの動物のための新しい飼料組成物に関する。発明者らは、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの活性化合物の混合物と併用すると、安息香酸のよく知られている機能に加えて、この化合物が有望な生育促進剤として使用できることを発見した。特に発明者らは、適量の安息香酸と相乗効果で併用される植物の異なる部位に存在する化合物の混合物が、全く思いがけないことに、本発明によって探求される、家禽飼料の消化吸収率を改善する、すなわち動物において飼料転換率および／または毎日の体重増加を改善する効果を示すことを実証できた。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、飼料転換率および／または体重増加および／または腸管内菌叢調節の改善のための、および動物のより良い健康状態のためのチモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの精油化合物の混合物と併用される、安息香酸、その誘導体または代謝産物の使用に関する。
【０００２】
本発明はまた、好ましくはチモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの精油化合物の混合物である少なくとも１つの精油化合物と併用される、好ましくは安息香酸、その誘導体または代謝産物である有機酸を活性成分として含む、動物、特に家禽のための新しい飼料組成物にも関する。
【０００３】
より詳しくは、本発明は、上で定義される組成物の動物飼料または飲用水、あるいは飼料または飲用水添加剤の構成要素としての使用、ならびに組成物、飼料添加剤、それらを含有する飲用水および飼料に関する。
【０００４】
安息香酸は商業的に入手可能であり（例えばスイス国カイゼルオーガストのＤＳＭニュートリショナル・プロダクツ（ＤＳＭ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（Ｋａｉｓｅｒａｕｇｓｔ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ））によって供給されるＶｅｖｏＶｉｔａｌｌ（登録商標）として）、または先行技術でよく知られている工程および方法を使用して、当業者が容易に調製できる。
【０００５】
本発明に従った精油化合物は商業的に入手可能であり、または先行技術でよく知られている工程および方法を使用して、当業者が容易に調製できる。
【０００６】
精油化合物は、混合物中の高度精製形態で、または天然に入手できる植物抽出物または抽出物混合物の形態で使用できる。
【０００７】
本明細書で用いる「抽出物」という用語は、溶剤抽出（「抽出油」としてもまた知られている）、水蒸気蒸留（「精油」としてもまた知られている）または当業者に知られているその他の方法によって得られる組成物を含む。適切な抽出溶剤としては、エタノールなどのアルコールが挙げられる。
【０００８】
本明細書において、「天然」という表現は、天然化合物からなり、天然物からまたは合成を通じて得られる物質と理解されたい。天然物質は、好ましくは上で定義される化合物の少なくとも２つを主成分として、さらに例えばカプサイシン、タンニンまたはカルバクロールなどのその他の精油化合物を含有してもよい。
【０００９】
飼料または飼料組成物という用語は、動物による摂取に適し、またはそれを意図した、あらゆる化合物、調製品、混合物、または組成物を意味する。
【００１０】
動物という用語は、ヒトをはじめとする全ての動物を含む。動物の例は、非反芻動物および反芻動物である。反芻動物としては、例えばヒツジ、ヤギ、および例えば肉牛および乳牛などの雌牛などの畜牛などの動物が挙げられる。特定の実施態様では、動物は非反芻動物である。非反芻動物としては、ウマ、ウサギ、ブタまたは猪（子ブタ、生育期ブタ、および雌豚を含むが、これに限定されるものではない）、およびシチメンチョウ、アヒル、およびニワトリなどの家禽（ブロイラー、産卵鶏を含むが、これに限定されるものではない）が挙げられる。
【００１１】
ＥＰ−Ａ−０ ６８３ ９８５から、安息香酸またはその塩を含む動物飼料組成物を使用して、養豚場における有機廃棄物、特に動物排泄物および厩肥からの悪臭を放つアンモニア排出を最小化できることが知られている。離乳したばかりの子ブタの食餌への安息香酸の添加が、動物の畜産学的性能を改善することがさらに知られている。
【００１２】
動物飼料中の安息香酸の使用の欠点は、望ましくない副作用のために、安息香酸が＞１００００ｍｇ／ｋｇブタ飼料の投与量、および＞５０００ｍｇ／ｋｇ家禽飼料の投与量で使用できないことである。
【００１３】
上で定義される活性化合物の混合物と併用すると、有効性を失うことなく最終動物飼料中の安息香酸およびその塩の投与量範囲を低減できることが、今や意外にも発見された。
【００１４】
さらに発明者らは、安息香酸、その誘導体または代謝産物が、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの活性化合物の混合物と併用すると、上の機能に加えて、有望な生育促進剤として使用できることを発見した。特に発明者らは、適量の安息香酸と相乗効果で併用される植物の異なる部位に存在する化合物の混合物が、全く思いがけないことに、本発明によって探求される、家禽飼料の消化吸収率、または動物の畜産学的性能を改善する効果を示すことを実証できた。
【００１５】
したがって本発明は、動物における飼料転換率または例えば毎日の体重増加（ＤＷＧ）などの体重増加の改善のための、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの活性化合物の混合物と併用される、安息香酸、その誘導体または代謝産物の使用に関する。この態様はまた、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの化合物の混合物を含む組成物と共に、主成分の安息香酸を含む組成物を動物へ同時給餌する方法も包含する。
【００１６】
飼料転換率という用語は、本発明に従った組成物が飼料１ｋｇあたり適切な濃度で動物飼料に添加される第１の処置、および動物飼料への組成物添加なしの第２の処置（対照）を含む生育試験に基づいて判定される。
【００１７】
一般に知られているように、改善されたＦＣＲは対照ＦＣＲよりも低い。特定の実施態様では、ＦＣＲは、対照と比較して少なくとも１．０％または５％改善される（すなわち低下する）。
【００１８】
本発明の第２の態様は、好ましくは動物またはＤＷＧにおける飼料転換率改善のための、安息香酸、その誘導体または代謝産物と、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの化合物との混合物を含む組成物の使用に関する。
【００１９】
本発明者らは、安息香酸と、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの化合物の混合物とを含む飼料組成物が、思いがけない抗菌剤活性、さらに動物の腸管内菌叢を調節する可能性もまた有することを意外にも発見した。
【００２０】
したがって本発明の第３の目的は、動物の腸管内菌叢調節のための、そして抗菌剤としての、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの活性化合物の混合物と併用される、安息香酸、その誘導体または代謝産物の使用を提供することである。
【００２１】
本明細書で用いる「腸管」という用語は、胃腸または消化管（ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ ｔｒａｃｔ）（または消化管（ａｌｉｍｅｎｔａｒｙ ｃａｎａｌ）とも称される）を指し、それは食物を取り込み、それを消化してエネルギーおよび栄養素を抽出し、残る廃棄物を排出する多細胞動物内の臓器システムを指す。
【００２２】
本明細書で用いる腸管内「微生物叢」という用語は、腸管内に生息して、適切な消化を助けおよび／または免疫系機能を支持することによって健康を維持する、天然微生物の培養物を指す。
【００２３】
腸管内微生物叢との関連で、本明細書で用いる「調節する」という用語は、一般に、健康で正常に機能している動物の機能またはその状態を変更し、操作し、修正し、または調整すること、すなわち非治療的な使用を意味する。調節は本発明の組成物に反応する。
【００２４】
抗菌剤活性は、例えば殺菌性、静菌性、殺真菌性、静真菌性、および／または殺ウイルス性であってもよい。「殺菌性」という用語は細菌細胞を死滅させることができ、「静菌性」という用語は細菌生育を阻害でき、すなわち生育中の細菌細胞を阻害でき、「殺真菌性」という用語は真菌細胞を死滅させることができ、「静真菌性」という用語は真菌生育を阻害でき、すなわち生育中の真菌細胞を阻害でき、「殺ウイルス性」という用語はウイルスを不活性化できるものと理解されたい。
【００２５】
以下は本発明に従った組成物によって得られる腸管内微生物叢調節効果の非限定的特定例である（本発明の組成物なしの対照と比較した変化）。
（ｉ）例えば子ブタまたはブロイラーなどの生体内で、サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）種および／またはクロストリジウム・ペルフリンジェンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）が発生する頻度の低下。
（ｉｉ）例えば子ブタまたはブロイラーなどの生体内における、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）および／またはエンテロコッカス・フェカーリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）および／または乳酸桿菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）種および／またはカンピロバクター（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ）種の数の減少。
【００２６】
なおもさらに腸管内微生物叢調節効果との関連で、本発明の組成物は、好ましくは、
（ｉｉｉ）例えば子ブタおよび／またはブロイラーの腸内容物から単離される細菌などの有害微生物の生体外生育に実質的に影響し、例えばそれを低下させる。
【００２７】
本発明の第４の態様は、安息香酸、その誘導体または代謝産物と、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの化合物との混合物を含む、動物飼料組成物または添加剤またはそのためのプレミックスに関する。動物に投与される安息香酸またはその誘導体の量は、動物に給餌される各飼料の総重量を基準にして０．００１〜５％の範囲である。しかし安息香酸またはその誘導体の機能が、排泄物からのアンモニア排出を抑止するために、このような食餌を給餌された動物の排泄物のｐＨを制御することであれば、この量はより多くてもよい。このようなより多くの量は、総動物飼料組成物を基準にして最大で約１０％に適切に制限される。
【００２８】
家禽飼料構想の好ましい実施態様では、安息香酸または安息香酸誘導体は、それが投与される対象の体重１ｋｇあたり５ｍｇ〜体重１ｋｇあたり約８０ｍｇ、好ましくは体重１ｋｇあたり１０ｍｇ〜体重１ｋｇあたり約４０ｍｇの一日投与量を提供するのに十分な量で使用される。
【００２９】
最終動物飼料中の安息香酸またはその誘導体の量は、５０〜１０００ｍｇ／ｋｇ飼料の範囲内、好ましくは１００〜５００の範囲内、最も好ましくは２００〜２５０ｍｇ／ｋｇ飼料の範囲内である。
【００３０】
チモール、オイゲノール、およびピペリンの３つの活性化合物を飼料１ｋｇあたり０．１〜２０ｍｇ（ｐｐｍ）、好ましくは飼料１ｋｇあたり０．３〜１０ｍｇの範囲内の量（投与量範囲）で投与することが目下考察される。
【００３１】
最終家禽飼料中の３つの化合物の特に好ましい投与量の例は、互いに独立して次の範囲内である。
チモール １〜２０ｐｐｍ、好ましくは１〜１０ｐｐｍ；
オイゲノール １〜５ｐｐｍ、例えば２ｐｐｍ；
ピペリン １ｐｐｍまで、好ましくは０．３〜０．５ｐｐｍ。
【００３２】
好ましい飼料添加剤の組成は、場合により、飼料１ｋｇあたり、例えば植物中に見られ、以下からなる群から選択される少なくとも１つの化合物などのその他の化合物を含む。
約１ｍｇまでのプロピリデン、ブチリデン、フタリド（ｐｈｔａｌｉｄｅｓ）、ジンゲロール、ラベンダー油；
約２ｍｇまでのデカ−、ウンデカ−、ドデカラクトン、イオノン、イロン、レソルシノール、ユーカリプトール、メントール、ペパーミント油、α−ピネン；
約３ｍｇまでのリモネン、グアヤコール、アネトール、リナロール、ジヒドロジャスモン酸メチル；
約４ｍｇまでのカルバクロール、プロピオン酸、酢酸または酪酸、ローズマリー油、クローブ油、ゲラニオール、テルピネオール、シトロネロール；
約５ｍｇまでのアミルおよび／またはサリチル酸ベンジル、桂皮アルデヒド、バニリン（ｖａｎｉｌｌｉｎｅ）、植物ポリフェノール（タンニン）；
約５ｍｇまでのターメリック粉末またはウコン抽出物。
【００３３】
これら全ての追加の化合物は、乳化界面活性剤との併用で使用してもよい。
【００３４】
乳化剤は、有利には、例えばエステル化リシノール酸または脂肪酸プロピレングリコールエステルなどの脂肪酸ポリグリセロールエステル、糖−エステルまたは糖−グリセリド、ポリエチレングリコール、レシチンなどのかなり親水性のものから選択できる。
【００３５】
家禽飼料構想の好ましい実施態様では、飼料添加剤は安息香酸とチモール、オイゲノール、およびピペリン混合物とを含み、これらの３化合物は、それが投与される対象の体重１ｋｇあたり０．１ｍｇ〜約１ｍｇのチモールおよびオイゲノール、および０．０２ｍｇ〜約０．０６ｍｇのピペリンの一日投与量を提供するのに十分な量で使用される。
【００３６】
上で例示される家禽飼料への飼料添加剤組成物の組み込みは、実際には濃縮物またはプレミックスを使用して実施される。プレミックスとは、好ましくは１つ以上の微小成分と希釈剤および／またはキャリアとの均一混合物を指す。プレミックスを使用してより多量のミックス中の微小成分の均一分散を促進する。本発明に従ったプレミックスは、固形物（例えば水溶性粉末）または液体として、飼料成分または飲用水に添加できる。
【００３７】
本発明の化合物混合物の他に、本発明の動物飼料添加剤は、少なくとも１つの脂溶性ビタミン、および／または少なくとも１つの水溶性ビタミン、および／または少なくとも１つの極微量のミネラル、および／または少なくとも１つのマクロミネラルを含有する。
【００３８】
さらなる任意の飼料添加剤成分は、例えばβ−カロテン、アスタキサンチン、カンタキサンチン、アポエステル、およびルテインなどのカロテノイドなどの着色剤と、芳香化合物と、安定剤と、抗菌剤ペプチドと、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）と、反応性酸素発生化学種と、および／またはフィターゼ（ＥＣ３．１．３．８または３．１．３．２６）、キシラナーゼ（ＥＣ３．２．１．８）、ガラクタナーゼ（ＥＣ３．２．１．８９）、α−ガラクトシダーゼ（ＥＣ３．２．１．２２）、タンパク質分解酵素（ＥＣ３．４．、ホスホリパーゼＡ１（ＥＣ３．１．１．３２）、ホスホリパーゼＡ２（ＥＣ３．１．１．４）、リゾホスホリパーゼ（ＥＣ３．１．１．５）；ホスホリパーゼＣ（ＥＣ３．１．４．３）、ホスホリパーゼＤ（ＥＣ３．１．４．４）、例えばα−アミラーゼ（ＥＣ３．２．１．１）などのアミラーゼ、および／またはβ−グルカナーゼ（ＥＣ３．２．１．４またはＥＣ３．２．１．６）から選択される少なくとも１つの酵素である。
【００３９】
抗菌剤ペプチド（ＡＭＰ）の例は、ＣＡＰ１８、ロイコシン（Ｌｅｕｃｏｃｉｎ）Ａ、プロテグリン（Ｐｒｏｔｅｇｒｉｎ）−１、タナチン（Ｔｈａｎａｔｉｎ）、デフェンシン、ラクトフェリン、ラクトフェリシン（Ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｃｉｎ）、およびノビスピリン（Ｎｏｖｉｓｐｉｒｉｎ）（Ｒｏｂｅｒｔ Ｌｅｈｒｅｒ、２０００年）、プレクタシン（ｐｌｅｃｔａｓｉｎ）、およびスタチンなどのオビスピリン（Ｏｖｉｓｐｉｒｉｎ）である。
【００４０】
多価不飽和脂肪酸の例は、アラキドン酸、ドコサヘキサエン酸（ｄｏｃｏｓｏｈｅｘａｅｎｏｉｃ ａｃｉｄ）、エイコサペンタエン酸、およびγ−リノール酸などのＣ１８、Ｃ２０、およびＣ２２多価不飽和脂肪酸である。
【００４１】
反応性酸素発生化学種の例は、過ホウ酸塩、過硫酸塩，または過炭酸塩などの化学物質、およびオキシダーゼ、オキシゲナーゼまたはシンセターゼ（ｓｙｎｔｅｔｈａｓｅ）などの酵素である。
【００４２】
通常、脂肪および水溶性ビタミン、ならびに極微量ミネラルが飼料への添加を意図するいわゆるプレミックスの一部を形成するものであるのに対し、マクロミネラルは通常、飼料に別々に添加される。
【００４３】
以下はこれらの構成要素の例の非排他的一覧である。
−脂溶性ビタミンの例は、ビタミンＡ、ビタミンＤ３、ビタミンＥ、および例えばビタミンＫ３などのビタミンＫである。
−水溶性ビタミンの例は、ビタミンＢ１２、ビオチンおよびコリン、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ナイアシン、葉酸、および例えばＣａ−Ｄ−パントテン酸（ｐａｎｔｈｏｔｈｅｎａｔｅ）などのパントテン酸塩（ｐａｎｔｈｏｔｈｅｎａｔｅ）である。
−極微量ミネラルの例は、マンガン、亜鉛、鉄、銅、ヨウ素、セレン、およびコバルトである。
−マクロミネラルの例は、カルシウム、リン、およびナトリウムである。
【００４４】
プレミックスは、例えば家禽飼料１トンあたり、５０〜２００ｇの活性化合物混合物のプロピレングリコール溶液、２０〜１０００ｇの乳化剤、５０〜９００ｇの穀物および副産物、２０〜１００ｇのタンパク質担体（粉乳、カゼインなど）、および５０〜３００ｇのミネラル構成要素（膨張シリカ、飼料品質石灰、ビ−カルシウムリン酸など）を含有できる。
【００４５】
最後に発明者らは、精油化合物と併用される、好ましくは安息香酸である有機酸を含む飼料添加剤組成物が、精油化合物をミネラルキャリア上に吸着させて付着剤および有機酸と混合するならば、安定性、内容均一性、耐性、および飼料原料利用に関して良好な特性を示すことを意外にも発見した。
【００４６】
したがって少なくとも２つの精油化合物と併用される、有機酸、その誘導体または代謝産物を含む飼料添加剤組成物を提供することが本発明の第５の態様であり、精油化合物（群）は、ミネラルキャリア上に吸着されて付着剤および有機酸と混合される。
【００４７】
本発明に従った飼料添加剤組成物の重要な特性は、組成物中に存在する精油がミネラルキャリア上に吸着されることであり、ミネラルキャリアは、好ましくは二酸化ケイ素、アルミニウム、およびケイ酸マグネシウム、およびケイ藻土からなる群に属する。
【００４８】
飼料添加剤組成物の別の重要な特性は、有機酸粒子に精油化合物を吸着させる原因である付着剤が組成物中に存在することであり、付着剤は、好ましくは例えばダイズ油などの植物油、ワックス、糖蜜、ポリエチレングリコール、ペクチン、およびセルロース誘導体からなる群に属する。
【００４９】
本発明の重要なもう１つの特性は、ミネラルキャリア上に吸着される精油化合物が、最後に有機酸粒子表面の付着剤を通じて吸着されることである。
【００５０】
好ましくは、少なくとも１つの精油化合物は、チモール、オイゲノール、ユーカリプトール、メントール、グアヤコール、カルバクロール、ゲラニオール、桂皮アルデヒドバニリン（ｖａｎｉｌｌｉｎｅ）、タンニン、およびピペリンからなる群から選択され、組成物の２％〜５０重量％の量で組成物中に存在する。有機酸は、例えばクエン酸、琥珀酸、安息香酸、フマル酸、Ｌ−アスパラギン酸（Ｌ−ａｓｐａｒａｔｅ）またはＬ−リンゴ酸に由来し、５０％〜９５重量％の量で組成物中に存在する。
【００５１】
このような飼料添加剤組成物の好ましい例は、好ましくはケイ酸塩であるミネラルキャリア上に吸着されるチモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの化合物の混合物を含む。組成物は、植物油および安息香酸とさらに混合される。
【００５２】
別の好ましい本発明の実施態様では、精油化合物は、ミネラルキャリア上への吸着が起きる前に、乳化界面活性剤と混合されもよい。乳化剤は、有利には、例えばエステル化リシノール酸または脂肪酸プロピレングリコールエステルなどの脂肪酸ポリグリセロールエステル、糖−エステルまたは糖−グリセリド、ポリエチレングリコール、レシチンなどの親水性のものから選択できる。
【００５３】
本発明の別の好ましい実施態様では、少なくとも１つの精油化合物または抽出物が組成物の５％〜２０％、より好ましくは５〜１０重量％の量で存在し、好ましくは安息香酸である有機酸が、組成物の８０％〜９０％、より好ましくは８０〜８５重量％の量で組成物中に存在する。
【００５４】
前述のようにチモール、オイゲノール、およびピペリンは商業的に入手可能であり、または先行技術でよく知られている工程および方法を使用して当業者が容易に調製でき、混合物中の高度精製形態で、または天然植物抽出物または抽出混合物形態で使用できる。これは上述の全てのその他精油化合物にも当てはまる。
【００５５】
クエン酸、フマル酸、およびリンゴ酸は、一般に天然に見られ、トリカルボン酸回路（クレブス回路）の中間体である。クレブス回路は、ヒトおよび動物における炭水化物分解およびエネルギー産生のための経路である。これらの有機酸はまた、顕著な反芻胃細菌の生育とも関連付けられている。
【００５６】
アスパラギン酸は非必須アミノ酸であり、肝臓中のその他のアミノ酸から生成できる。アスパラギン酸は、反芻胃および盲腸内微生物の生育のために必要とされる。アスパラギン酸はまた、食餌性タンパク質からの老廃物の適切な排除のために尿素回路においても非常に重要である。
【００５７】
上で定義される飼料添加剤組成物の範囲において、上に列挙する精油および有機酸は、飼料添加剤中で使用される好ましいタイプの化合物を代表するものであるが、精油および有機酸が、飼料添加剤を消費する動物の生育を促進し、および／または飼料変換を改善しさえすれば、組成物はその他のタイプの精油および有機酸から構成されてもよいことに留意すべきである。
【００５８】
最後に、飼料添加剤組成物の動物飼料への組み込みは、実際には上述されるような濃縮物またはプレミックスを使用して実施される。
【００５９】
本明細書で開示される特定の実施態様は、本発明のいくつかの態様の例示を意図するので、本明細書で記述され特許請求される本発明は、これらの実施態様によって範囲を制限されない。あらゆる同等の実施態様は、本発明の範囲内であることが意図される。確かに前述の説明から、当業者には本明細書で示され記述されるものに加えて、本発明の様々な修正が明らかになるであろう。このような修正はまた、添付の特許請求の範囲内であることが意図される。
【００６０】
以下の実施例で本発明をさらに例示する。
【００６１】
［実施例１］
本発明に従った化合物の混合物を含有するブロイラー飼料（「スターター」）は、室温で従来の混合装置を使用して、以下の成分を共に混合して調製できる。
【００６２】
【表１】
【００６３】
［実施例２］
本発明に従った化合物の混合物を含有するブロイラー飼料（「グローワー」）は、室温で従来の混合装置を使用して、以下の成分を共に混合して調製できる。
【００６４】
【表２】
【００６５】
［実施例３：３週間にわたるブロイラー生育性能に対する、少なくともチモール、オイゲノール、おおびピペリンと、安息香酸（ＶｅｖｏＶｉｔａｌｌ）との混合物を含む組成物の異なる組み合わせの効果の評価］
ブロイラーにおいて、生育性能試験を８日目から２９日目にかけて実施した。ニワトリは金網床バタリーケージ内で飼育した。生後１日目から８日目まで、小麦、トウモロコシ、およびダイズミールベースの実験前食餌をニワトリに給餌した。実験期間中（８〜２９日目）は、小麦、ライ麦、およびダイズミール（組成物は表１参照）ベースの食餌をニワトリに給餌した。ニワトリ群は、８、１５、２２、および２９日目に秤量した。中間期の飼料消費を判定し、体重増加および飼料転換率を計算した。
【００６６】
非栄養補給対照処置、および飼料１ｋｇあたり１０ｍｇの抗生物質アビラマイシンを含有する正の対照以外に、安息香酸（ＶｅｖｏＶｉｔａｌｌ）を飼料１ｋｇあたり５００ｍｇで含めた。さらに飼料１ｋｇあたり、２５０ｍｇの安息香酸と５０ｍｇのチモール、オイゲノール、およびピペリンを含む組成物（本明細書ではＴＥＰと略記される）、ならびに５００ｍｇの安息香酸と２５ｍｇのＴＥＰ、または５００ｍｇの安息香酸と５０ｍｇのＴＥＰの組み合わせのいずれかをそれぞれ試験した。
【００６７】
飼料１ｋｇあたり２５０ｍｇの安息香酸と５０ｍｇＴＥＰの併用では、体重増加は対照と比較して４．２％改善された。用量５００ｍｇ／ｋｇのＶｅｖｏＶｉｔａｌｌ単独では、体重増加は対照と比較して３％改善された。飼料１ｋｇあたり５００ｍｇの安息香酸と２５ｍｇのＴＥＰの併用は＋４．８％の体重増加をもたらした。体重増加の最高の改善は、抗生物質アビラマイシン（＋８．７％）、および５００ｍｇの安息香酸と５０ｍｇのＴＥＰ（＋１１．２％）併用で見られた（表２）。飼料変換（ＦＣＲ）では、２５０ｍｇの安息香酸と５０ｍｇのＴＥＰ併用の好ましい効果は、抗生物質アビラマイシンを添加した正の対照と同一範囲であった（負の対照と比較して４．３％）。ＦＣＲの最高の改善は、５００ｍｇの安息香酸と５０ｍｇのＴＥＰ（１０．２％）とを添加した処置で見られた。
【００６８】
本試験の結果は、安息香酸とＴＥＰとの異なる組み合わせが、３週間にわたり小麦、ライ麦、およびダイズミールベースの食餌を給餌されたニワトリの生育性能を改善するのに、効果的であることを実証する。
【００６９】
［実験計画］
【００７０】
【表３】
【００７１】
【表４】
【００７２】
【表５】
【００７３】
［実施例４：本発明に従った組成物の抗菌活性の評価］
グリセロール原液から開始して、３７℃で１０ｍｌのトリプシンダイズブロス（ＴＳＢ、メルク（Ｍｅｒｃｋ））中において２５０ｒｐｍで一晩振盪して、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）およびクロストリジウム・ペルフリンジェンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）の前培養を実施した。これらの前培養をＴＳＢ中で希釈して、およそ４×１０４ｃｆｕ／ｍｌの細菌懸濁液を得た。実施例３で明記されるようなＶｅｖｏＶｉｔａｌｌおよび組成物ＴＥＰを溶解して、細菌懸濁液に添加した。
【００７４】
開始時点でＯＤ５９５ｎｍを測定して、沈殿化合物に起因するあらゆる濁度を考慮した。次にプレートを嫌気生活で湿潤雰囲気内において２００ｒｐｍで振盪し、３７℃で一晩インキュベートした。２４時間後にＯＤ５９５ｎｍを測定して、％阻害を計算した。
【００７５】
結果を図１（クロストリジウム・ペルフリンジェンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ））および図２（大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ））に示し、双方の図の垂直軸は「生育阻害（対照の％）」を示し、双方の図の水平軸は「本発明の全混合物の等価含量として示される化合物含量」を示す。
【００７６】
［実施例５：乾燥飼料添加剤の調製］
５０ｇのケイ藻土をビーカーに入れ、１０ｇのオイゲノールと１ｇのローズマリー油をミネラルに緩慢に滴下して添加し、緩慢に撹拌した。５００ｇの安息香酸をターブラー（ＴＵＲＢＵＬＡ）ミキサーに入れて、６０℃に加温した１０ｇの硬化パーム油を酸上に噴霧して、緩慢に５分間混合した。次に５０ｇの精油含有ミネラルを添加して１０分間混合し、均一の乾燥粉末を得た。
【図面の簡単な説明】
【００７７】
【図１】本発明に従った組成物のクロストリジウム・ペルフリンジェンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）に対する抗菌活性の評価である。
【図２】本発明に従った組成物の大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）に対する抗菌活性の評価である。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、飼料転換率および／または体重増加および／または腸管内菌叢調節の改善のための、および動物のより良い健康状態のためのチモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの精油化合物の混合物と併用される、安息香酸、その誘導体または代謝産物の使用に関する。
【０００２】
本発明はまた、好ましくはチモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの精油化合物の混合物である少なくとも１つの精油化合物と併用される、好ましくは安息香酸、その誘導体または代謝産物である有機酸を活性成分として含む、動物、特に家禽のための新しい飼料組成物にも関する。
【０００３】
より詳しくは、本発明は、上で定義される組成物の動物飼料または飲用水、あるいは飼料または飲用水添加剤の構成要素としての使用、ならびに組成物、飼料添加剤、それらを含有する飲用水および飼料に関する。
【０００４】
安息香酸は商業的に入手可能であり（例えばスイス国カイゼルオーガストのＤＳＭニュートリショナル・プロダクツ（ＤＳＭ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（Ｋａｉｓｅｒａｕｇｓｔ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ））によって供給されるＶｅｖｏＶｉｔａｌｌ（登録商標）として）、または先行技術でよく知られている工程および方法を使用して、当業者が容易に調製できる。
【０００５】
本発明に従った精油化合物は商業的に入手可能であり、または先行技術でよく知られている工程および方法を使用して、当業者が容易に調製できる。
【０００６】
精油化合物は、混合物中の高度精製形態で、または天然に入手できる植物抽出物または抽出物混合物の形態で使用できる。
【０００７】
本明細書で用いる「抽出物」という用語は、溶剤抽出（「抽出油」としてもまた知られている）、水蒸気蒸留（「精油」としてもまた知られている）または当業者に知られているその他の方法によって得られる組成物を含む。適切な抽出溶剤としては、エタノールなどのアルコールが挙げられる。
【０００８】
本明細書において、「天然」という表現は、天然化合物からなり、天然物からまたは合成を通じて得られる物質と理解されたい。天然物質は、好ましくは上で定義される化合物の少なくとも２つを主成分として、さらに例えばカプサイシン、タンニンまたはカルバクロールなどのその他の精油化合物を含有してもよい。
【０００９】
飼料または飼料組成物という用語は、動物による摂取に適し、またはそれを意図した、あらゆる化合物、調製品、混合物、または組成物を意味する。
【００１０】
動物という用語は、ヒトをはじめとする全ての動物を含む。動物の例は、非反芻動物および反芻動物である。反芻動物としては、例えばヒツジ、ヤギ、および例えば肉牛および乳牛などの雌牛などの畜牛などの動物が挙げられる。特定の実施態様では、動物は非反芻動物である。非反芻動物としては、ウマ、ウサギ、ブタまたは猪（子ブタ、生育期ブタ、および雌豚を含むが、これに限定されるものではない）、およびシチメンチョウ、アヒル、およびニワトリなどの家禽（ブロイラー、産卵鶏を含むが、これに限定されるものではない）が挙げられる。
【００１１】
ＥＰ−Ａ−０ ６８３ ９８５から、安息香酸またはその塩を含む動物飼料組成物を使用して、養豚場における有機廃棄物、特に動物排泄物および厩肥からの悪臭を放つアンモニア排出を最小化できることが知られている。離乳したばかりの子ブタの食餌への安息香酸の添加が、動物の畜産学的性能を改善することがさらに知られている。
【００１２】
動物飼料中の安息香酸の使用の欠点は、望ましくない副作用のために、安息香酸が＞１００００ｍｇ／ｋｇブタ飼料の投与量、および＞５０００ｍｇ／ｋｇ家禽飼料の投与量で使用できないことである。
【００１３】
上で定義される活性化合物の混合物と併用すると、有効性を失うことなく最終動物飼料中の安息香酸およびその塩の投与量範囲を低減できることが、今や意外にも発見された。
【００１４】
さらに発明者らは、安息香酸、その誘導体または代謝産物が、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの活性化合物の混合物と併用すると、上の機能に加えて、有望な生育促進剤として使用できることを発見した。特に発明者らは、適量の安息香酸と相乗効果で併用される植物の異なる部位に存在する化合物の混合物が、全く思いがけないことに、本発明によって探求される、家禽飼料の消化吸収率、または動物の畜産学的性能を改善する効果を示すことを実証できた。
【００１５】
したがって本発明は、動物における飼料転換率または例えば毎日の体重増加（ＤＷＧ）などの体重増加の改善のための、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの活性化合物の混合物と併用される、安息香酸、その誘導体または代謝産物の使用に関する。この態様はまた、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの化合物の混合物を含む組成物と共に、主成分の安息香酸を含む組成物を動物へ同時給餌する方法も包含する。
【００１６】
飼料転換率という用語は、本発明に従った組成物が飼料１ｋｇあたり適切な濃度で動物飼料に添加される第１の処置、および動物飼料への組成物添加なしの第２の処置（対照）を含む生育試験に基づいて判定される。
【００１７】
一般に知られているように、改善されたＦＣＲは対照ＦＣＲよりも低い。特定の実施態様では、ＦＣＲは、対照と比較して少なくとも１．０％または５％改善される（すなわち低下する）。
【００１８】
本発明の第２の態様は、好ましくは動物またはＤＷＧにおける飼料転換率改善のための、安息香酸、その誘導体または代謝産物と、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの化合物との混合物を含む組成物の使用に関する。
【００１９】
本発明者らは、安息香酸と、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの化合物の混合物とを含む飼料組成物が、思いがけない抗菌剤活性、さらに動物の腸管内菌叢を調節する可能性もまた有することを意外にも発見した。
【００２０】
したがって本発明の第３の目的は、動物の腸管内菌叢調節のための、そして抗菌剤としての、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの活性化合物の混合物と併用される、安息香酸、その誘導体または代謝産物の使用を提供することである。
【００２１】
本明細書で用いる「腸管」という用語は、胃腸または消化管（ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ ｔｒａｃｔ）（または消化管（ａｌｉｍｅｎｔａｒｙ ｃａｎａｌ）とも称される）を指し、それは食物を取り込み、それを消化してエネルギーおよび栄養素を抽出し、残る廃棄物を排出する多細胞動物内の臓器システムを指す。
【００２２】
本明細書で用いる腸管内「微生物叢」という用語は、腸管内に生息して、適切な消化を助けおよび／または免疫系機能を支持することによって健康を維持する、天然微生物の培養物を指す。
【００２３】
腸管内微生物叢との関連で、本明細書で用いる「調節する」という用語は、一般に、健康で正常に機能している動物の機能またはその状態を変更し、操作し、修正し、または調整すること、すなわち非治療的な使用を意味する。調節は本発明の組成物に反応する。
【００２４】
抗菌剤活性は、例えば殺菌性、静菌性、殺真菌性、静真菌性、および／または殺ウイルス性であってもよい。「殺菌性」という用語は細菌細胞を死滅させることができ、「静菌性」という用語は細菌生育を阻害でき、すなわち生育中の細菌細胞を阻害でき、「殺真菌性」という用語は真菌細胞を死滅させることができ、「静真菌性」という用語は真菌生育を阻害でき、すなわち生育中の真菌細胞を阻害でき、「殺ウイルス性」という用語はウイルスを不活性化できるものと理解されたい。
【００２５】
以下は本発明に従った組成物によって得られる腸管内微生物叢調節効果の非限定的特定例である（本発明の組成物なしの対照と比較した変化）。
（ｉ）例えば子ブタまたはブロイラーなどの生体内で、サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）種および／またはクロストリジウム・ペルフリンジェンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）が発生する頻度の低下。
（ｉｉ）例えば子ブタまたはブロイラーなどの生体内における、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）および／またはエンテロコッカス・フェカーリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）および／または乳酸桿菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）種および／またはカンピロバクター（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ）種の数の減少。
【００２６】
なおもさらに腸管内微生物叢調節効果との関連で、本発明の組成物は、好ましくは、
（ｉｉｉ）例えば子ブタおよび／またはブロイラーの腸内容物から単離される細菌などの有害微生物の生体外生育に実質的に影響し、例えばそれを低下させる。
【００２７】
本発明の第４の態様は、安息香酸、その誘導体または代謝産物と、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの化合物との混合物を含む、動物飼料組成物または添加剤またはそのためのプレミックスに関する。動物に投与される安息香酸またはその誘導体の量は、動物に給餌される各飼料の総重量を基準にして０．００１〜５％の範囲である。しかし安息香酸またはその誘導体の機能が、排泄物からのアンモニア排出を抑止するために、このような食餌を給餌された動物の排泄物のｐＨを制御することであれば、この量はより多くてもよい。このようなより多くの量は、総動物飼料組成物を基準にして最大で約１０％に適切に制限される。
【００２８】
家禽飼料構想の好ましい実施態様では、安息香酸または安息香酸誘導体は、それが投与される対象の体重１ｋｇあたり５ｍｇ〜体重１ｋｇあたり約８０ｍｇ、好ましくは体重１ｋｇあたり１０ｍｇ〜体重１ｋｇあたり約４０ｍｇの一日投与量を提供するのに十分な量で使用される。
【００２９】
最終動物飼料中の安息香酸またはその誘導体の量は、５０〜１０００ｍｇ／ｋｇ飼料の範囲内、好ましくは１００〜５００の範囲内、最も好ましくは２００〜２５０ｍｇ／ｋｇ飼料の範囲内である。
【００３０】
チモール、オイゲノール、およびピペリンの３つの活性化合物を飼料１ｋｇあたり０．１〜２０ｍｇ（ｐｐｍ）、好ましくは飼料１ｋｇあたり０．３〜１０ｍｇの範囲内の量（投与量範囲）で投与することが目下考察される。
【００３１】
最終家禽飼料中の３つの化合物の特に好ましい投与量の例は、互いに独立して次の範囲内である。
チモール １〜２０ｐｐｍ、好ましくは１〜１０ｐｐｍ；
オイゲノール １〜５ｐｐｍ、例えば２ｐｐｍ；
ピペリン １ｐｐｍまで、好ましくは０．３〜０．５ｐｐｍ。
【００３２】
好ましい飼料添加剤の組成は、場合により、飼料１ｋｇあたり、例えば植物中に見られ、以下からなる群から選択される少なくとも１つの化合物などのその他の化合物を含む。
約１ｍｇまでのプロピリデン、ブチリデン、フタリド（ｐｈｔａｌｉｄｅｓ）、ジンゲロール、ラベンダー油；
約２ｍｇまでのデカ−、ウンデカ−、ドデカラクトン、イオノン、イロン、レソルシノール、ユーカリプトール、メントール、ペパーミント油、α−ピネン；
約３ｍｇまでのリモネン、グアヤコール、アネトール、リナロール、ジヒドロジャスモン酸メチル；
約４ｍｇまでのカルバクロール、プロピオン酸、酢酸または酪酸、ローズマリー油、クローブ油、ゲラニオール、テルピネオール、シトロネロール；
約５ｍｇまでのアミルおよび／またはサリチル酸ベンジル、桂皮アルデヒド、バニリン（ｖａｎｉｌｌｉｎｅ）、植物ポリフェノール（タンニン）；
約５ｍｇまでのターメリック粉末またはウコン抽出物。
【００３３】
これら全ての追加の化合物は、乳化界面活性剤との併用で使用してもよい。
【００３４】
乳化剤は、有利には、例えばエステル化リシノール酸または脂肪酸プロピレングリコールエステルなどの脂肪酸ポリグリセロールエステル、糖−エステルまたは糖−グリセリド、ポリエチレングリコール、レシチンなどのかなり親水性のものから選択できる。
【００３５】
家禽飼料構想の好ましい実施態様では、飼料添加剤は安息香酸とチモール、オイゲノール、およびピペリン混合物とを含み、これらの３化合物は、それが投与される対象の体重１ｋｇあたり０．１ｍｇ〜約１ｍｇのチモールおよびオイゲノール、および０．０２ｍｇ〜約０．０６ｍｇのピペリンの一日投与量を提供するのに十分な量で使用される。
【００３６】
上で例示される家禽飼料への飼料添加剤組成物の組み込みは、実際には濃縮物またはプレミックスを使用して実施される。プレミックスとは、好ましくは１つ以上の微小成分と希釈剤および／またはキャリアとの均一混合物を指す。プレミックスを使用してより多量のミックス中の微小成分の均一分散を促進する。本発明に従ったプレミックスは、固形物（例えば水溶性粉末）または液体として、飼料成分または飲用水に添加できる。
【００３７】
本発明の化合物混合物の他に、本発明の動物飼料添加剤は、少なくとも１つの脂溶性ビタミン、および／または少なくとも１つの水溶性ビタミン、および／または少なくとも１つの極微量のミネラル、および／または少なくとも１つのマクロミネラルを含有する。
【００３８】
さらなる任意の飼料添加剤成分は、例えばβ−カロテン、アスタキサンチン、カンタキサンチン、アポエステル、およびルテインなどのカロテノイドなどの着色剤と、芳香化合物と、安定剤と、抗菌剤ペプチドと、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）と、反応性酸素発生化学種と、および／またはフィターゼ（ＥＣ３．１．３．８または３．１．３．２６）、キシラナーゼ（ＥＣ３．２．１．８）、ガラクタナーゼ（ＥＣ３．２．１．８９）、α−ガラクトシダーゼ（ＥＣ３．２．１．２２）、タンパク質分解酵素（ＥＣ３．４．、ホスホリパーゼＡ１（ＥＣ３．１．１．３２）、ホスホリパーゼＡ２（ＥＣ３．１．１．４）、リゾホスホリパーゼ（ＥＣ３．１．１．５）；ホスホリパーゼＣ（ＥＣ３．１．４．３）、ホスホリパーゼＤ（ＥＣ３．１．４．４）、例えばα−アミラーゼ（ＥＣ３．２．１．１）などのアミラーゼ、および／またはβ−グルカナーゼ（ＥＣ３．２．１．４またはＥＣ３．２．１．６）から選択される少なくとも１つの酵素である。
【００３９】
抗菌剤ペプチド（ＡＭＰ）の例は、ＣＡＰ１８、ロイコシン（Ｌｅｕｃｏｃｉｎ）Ａ、プロテグリン（Ｐｒｏｔｅｇｒｉｎ）−１、タナチン（Ｔｈａｎａｔｉｎ）、デフェンシン、ラクトフェリン、ラクトフェリシン（Ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｃｉｎ）、およびノビスピリン（Ｎｏｖｉｓｐｉｒｉｎ）（Ｒｏｂｅｒｔ Ｌｅｈｒｅｒ、２０００年）、プレクタシン（ｐｌｅｃｔａｓｉｎ）、およびスタチンなどのオビスピリン（Ｏｖｉｓｐｉｒｉｎ）である。
【００４０】
多価不飽和脂肪酸の例は、アラキドン酸、ドコサヘキサエン酸（ｄｏｃｏｓｏｈｅｘａｅｎｏｉｃ ａｃｉｄ）、エイコサペンタエン酸、およびγ−リノール酸などのＣ１８、Ｃ２０、およびＣ２２多価不飽和脂肪酸である。
【００４１】
反応性酸素発生化学種の例は、過ホウ酸塩、過硫酸塩，または過炭酸塩などの化学物質、およびオキシダーゼ、オキシゲナーゼまたはシンセターゼ（ｓｙｎｔｅｔｈａｓｅ）などの酵素である。
【００４２】
通常、脂肪および水溶性ビタミン、ならびに極微量ミネラルが飼料への添加を意図するいわゆるプレミックスの一部を形成するものであるのに対し、マクロミネラルは通常、飼料に別々に添加される。
【００４３】
以下はこれらの構成要素の例の非排他的一覧である。
−脂溶性ビタミンの例は、ビタミンＡ、ビタミンＤ３、ビタミンＥ、および例えばビタミンＫ３などのビタミンＫである。
−水溶性ビタミンの例は、ビタミンＢ１２、ビオチンおよびコリン、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ナイアシン、葉酸、および例えばＣａ−Ｄ−パントテン酸（ｐａｎｔｈｏｔｈｅｎａｔｅ）などのパントテン酸塩（ｐａｎｔｈｏｔｈｅｎａｔｅ）である。
−極微量ミネラルの例は、マンガン、亜鉛、鉄、銅、ヨウ素、セレン、およびコバルトである。
−マクロミネラルの例は、カルシウム、リン、およびナトリウムである。
【００４４】
プレミックスは、例えば家禽飼料１トンあたり、５０〜２００ｇの活性化合物混合物のプロピレングリコール溶液、２０〜１０００ｇの乳化剤、５０〜９００ｇの穀物および副産物、２０〜１００ｇのタンパク質担体（粉乳、カゼインなど）、および５０〜３００ｇのミネラル構成要素（膨張シリカ、飼料品質石灰、ビ−カルシウムリン酸など）を含有できる。
【００４５】
最後に発明者らは、精油化合物と併用される、好ましくは安息香酸である有機酸を含む飼料添加剤組成物が、精油化合物をミネラルキャリア上に吸着させて付着剤および有機酸と混合するならば、安定性、内容均一性、耐性、および飼料原料利用に関して良好な特性を示すことを意外にも発見した。
【００４６】
したがって少なくとも２つの精油化合物と併用される、有機酸、その誘導体または代謝産物を含む飼料添加剤組成物を提供することが本発明の第５の態様であり、精油化合物（群）は、ミネラルキャリア上に吸着されて付着剤および有機酸と混合される。
【００４７】
本発明に従った飼料添加剤組成物の重要な特性は、組成物中に存在する精油がミネラルキャリア上に吸着されることであり、ミネラルキャリアは、好ましくは二酸化ケイ素、アルミニウム、およびケイ酸マグネシウム、およびケイ藻土からなる群に属する。
【００４８】
飼料添加剤組成物の別の重要な特性は、有機酸粒子に精油化合物を吸着させる原因である付着剤が組成物中に存在することであり、付着剤は、好ましくは例えばダイズ油などの植物油、ワックス、糖蜜、ポリエチレングリコール、ペクチン、およびセルロース誘導体からなる群に属する。
【００４９】
本発明の重要なもう１つの特性は、ミネラルキャリア上に吸着される精油化合物が、最後に有機酸粒子表面の付着剤を通じて吸着されることである。
【００５０】
好ましくは、少なくとも１つの精油化合物は、チモール、オイゲノール、ユーカリプトール、メントール、グアヤコール、カルバクロール、ゲラニオール、桂皮アルデヒドバニリン（ｖａｎｉｌｌｉｎｅ）、タンニン、およびピペリンからなる群から選択され、組成物の２％〜５０重量％の量で組成物中に存在する。有機酸は、例えばクエン酸、琥珀酸、安息香酸、フマル酸、Ｌ−アスパラギン酸（Ｌ−ａｓｐａｒａｔｅ）またはＬ−リンゴ酸に由来し、５０％〜９５重量％の量で組成物中に存在する。
【００５１】
このような飼料添加剤組成物の好ましい例は、好ましくはケイ酸塩であるミネラルキャリア上に吸着されるチモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの化合物の混合物を含む。組成物は、植物油および安息香酸とさらに混合される。
【００５２】
別の好ましい本発明の実施態様では、精油化合物は、ミネラルキャリア上への吸着が起きる前に、乳化界面活性剤と混合されもよい。乳化剤は、有利には、例えばエステル化リシノール酸または脂肪酸プロピレングリコールエステルなどの脂肪酸ポリグリセロールエステル、糖−エステルまたは糖−グリセリド、ポリエチレングリコール、レシチンなどの親水性のものから選択できる。
【００５３】
本発明の別の好ましい実施態様では、少なくとも１つの精油化合物または抽出物が組成物の５％〜２０％、より好ましくは５〜１０重量％の量で存在し、好ましくは安息香酸である有機酸が、組成物の８０％〜９０％、より好ましくは８０〜８５重量％の量で組成物中に存在する。
【００５４】
前述のようにチモール、オイゲノール、およびピペリンは商業的に入手可能であり、または先行技術でよく知られている工程および方法を使用して当業者が容易に調製でき、混合物中の高度精製形態で、または天然植物抽出物または抽出混合物形態で使用できる。これは上述の全てのその他精油化合物にも当てはまる。
【００５５】
クエン酸、フマル酸、およびリンゴ酸は、一般に天然に見られ、トリカルボン酸回路（クレブス回路）の中間体である。クレブス回路は、ヒトおよび動物における炭水化物分解およびエネルギー産生のための経路である。これらの有機酸はまた、顕著な反芻胃細菌の生育とも関連付けられている。
【００５６】
アスパラギン酸は非必須アミノ酸であり、肝臓中のその他のアミノ酸から生成できる。アスパラギン酸は、反芻胃および盲腸内微生物の生育のために必要とされる。アスパラギン酸はまた、食餌性タンパク質からの老廃物の適切な排除のために尿素回路においても非常に重要である。
【００５７】
上で定義される飼料添加剤組成物の範囲において、上に列挙する精油および有機酸は、飼料添加剤中で使用される好ましいタイプの化合物を代表するものであるが、精油および有機酸が、飼料添加剤を消費する動物の生育を促進し、および／または飼料変換を改善しさえすれば、組成物はその他のタイプの精油および有機酸から構成されてもよいことに留意すべきである。
【００５８】
最後に、飼料添加剤組成物の動物飼料への組み込みは、実際には上述されるような濃縮物またはプレミックスを使用して実施される。
【００５９】
本明細書で開示される特定の実施態様は、本発明のいくつかの態様の例示を意図するので、本明細書で記述され特許請求される本発明は、これらの実施態様によって範囲を制限されない。あらゆる同等の実施態様は、本発明の範囲内であることが意図される。確かに前述の説明から、当業者には本明細書で示され記述されるものに加えて、本発明の様々な修正が明らかになるであろう。このような修正はまた、添付の特許請求の範囲内であることが意図される。
【００６０】
以下の実施例で本発明をさらに例示する。
【００６１】
［実施例１］
本発明に従った化合物の混合物を含有するブロイラー飼料（「スターター」）は、室温で従来の混合装置を使用して、以下の成分を共に混合して調製できる。
【００６２】
【表１】
【００６３】
［実施例２］
本発明に従った化合物の混合物を含有するブロイラー飼料（「グローワー」）は、室温で従来の混合装置を使用して、以下の成分を共に混合して調製できる。
【００６４】
【表２】
【００６５】
［実施例３：３週間にわたるブロイラー生育性能に対する、少なくともチモール、オイゲノール、おおびピペリンと、安息香酸（ＶｅｖｏＶｉｔａｌｌ）との混合物を含む組成物の異なる組み合わせの効果の評価］
ブロイラーにおいて、生育性能試験を８日目から２９日目にかけて実施した。ニワトリは金網床バタリーケージ内で飼育した。生後１日目から８日目まで、小麦、トウモロコシ、およびダイズミールベースの実験前食餌をニワトリに給餌した。実験期間中（８〜２９日目）は、小麦、ライ麦、およびダイズミール（組成物は表１参照）ベースの食餌をニワトリに給餌した。ニワトリ群は、８、１５、２２、および２９日目に秤量した。中間期の飼料消費を判定し、体重増加および飼料転換率を計算した。
【００６６】
非栄養補給対照処置、および飼料１ｋｇあたり１０ｍｇの抗生物質アビラマイシンを含有する正の対照以外に、安息香酸（ＶｅｖｏＶｉｔａｌｌ）を飼料１ｋｇあたり５００ｍｇで含めた。さらに飼料１ｋｇあたり、２５０ｍｇの安息香酸と５０ｍｇのチモール、オイゲノール、およびピペリンを含む組成物（本明細書ではＴＥＰと略記される）、ならびに５００ｍｇの安息香酸と２５ｍｇのＴＥＰ、または５００ｍｇの安息香酸と５０ｍｇのＴＥＰの組み合わせのいずれかをそれぞれ試験した。
【００６７】
飼料１ｋｇあたり２５０ｍｇの安息香酸と５０ｍｇＴＥＰの併用では、体重増加は対照と比較して４．２％改善された。用量５００ｍｇ／ｋｇのＶｅｖｏＶｉｔａｌｌ単独では、体重増加は対照と比較して３％改善された。飼料１ｋｇあたり５００ｍｇの安息香酸と２５ｍｇのＴＥＰの併用は＋４．８％の体重増加をもたらした。体重増加の最高の改善は、抗生物質アビラマイシン（＋８．７％）、および５００ｍｇの安息香酸と５０ｍｇのＴＥＰ（＋１１．２％）併用で見られた（表２）。飼料変換（ＦＣＲ）では、２５０ｍｇの安息香酸と５０ｍｇのＴＥＰ併用の好ましい効果は、抗生物質アビラマイシンを添加した正の対照と同一範囲であった（負の対照と比較して４．３％）。ＦＣＲの最高の改善は、５００ｍｇの安息香酸と５０ｍｇのＴＥＰ（１０．２％）とを添加した処置で見られた。
【００６８】
本試験の結果は、安息香酸とＴＥＰとの異なる組み合わせが、３週間にわたり小麦、ライ麦、およびダイズミールベースの食餌を給餌されたニワトリの生育性能を改善するのに、効果的であることを実証する。
【００６９】
［実験計画］
【００７０】
【表３】
【００７１】
【表４】
【００７２】
【表５】
【００７３】
［実施例４：本発明に従った組成物の抗菌活性の評価］
グリセロール原液から開始して、３７℃で１０ｍｌのトリプシンダイズブロス（ＴＳＢ、メルク（Ｍｅｒｃｋ））中において２５０ｒｐｍで一晩振盪して、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）およびクロストリジウム・ペルフリンジェンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）の前培養を実施した。これらの前培養をＴＳＢ中で希釈して、およそ４×１０４ｃｆｕ／ｍｌの細菌懸濁液を得た。実施例３で明記されるようなＶｅｖｏＶｉｔａｌｌおよび組成物ＴＥＰを溶解して、細菌懸濁液に添加した。
【００７４】
開始時点でＯＤ５９５ｎｍを測定して、沈殿化合物に起因するあらゆる濁度を考慮した。次にプレートを嫌気生活で湿潤雰囲気内において２００ｒｐｍで振盪し、３７℃で一晩インキュベートした。２４時間後にＯＤ５９５ｎｍを測定して、％阻害を計算した。
【００７５】
結果を図１（クロストリジウム・ペルフリンジェンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ））および図２（大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ））に示し、双方の図の垂直軸は「生育阻害（対照の％）」を示し、双方の図の水平軸は「本発明の全混合物の等価含量として示される化合物含量」を示す。
【００７６】
［実施例５：乾燥飼料添加剤の調製］
５０ｇのケイ藻土をビーカーに入れ、１０ｇのオイゲノールと１ｇのローズマリー油をミネラルに緩慢に滴下して添加し、緩慢に撹拌した。５００ｇの安息香酸をターブラー（ＴＵＲＢＵＬＡ）ミキサーに入れて、６０℃に加温した１０ｇの硬化パーム油を酸上に噴霧して、緩慢に５分間混合した。次に５０ｇの精油含有ミネラルを添加して１０分間混合し、均一の乾燥粉末を得た。
【図面の簡単な説明】
【００７７】
【図１】本発明に従った組成物のクロストリジウム・ペルフリンジェンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）に対する抗菌活性の評価である。
【図２】本発明に従った組成物の大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）に対する抗菌活性の評価である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
動物における飼料転換率および／または毎日の体重増加および／または腸管内菌叢調節の改善のための組成物の製造における、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの活性化合物の混合物と併用される安息香酸、その誘導体または代謝産物の使用。
【請求項２】
動物における飼料転換率および／または毎日の体重増加および／または腸管内菌叢調節の改善のための、および／または抗菌剤としての、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの活性化合物の混合物と併用される安息香酸、その誘導体または代謝産物の使用。
【請求項３】
チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの化合物の混合物を含む組成物と共に、安息香酸を主成分として含む組成物を動物へ同時給餌することによって特徴づけられる、請求項２に記載の使用。
【請求項４】
動物が非反芻動物または反芻動物である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項５】
動物が、家禽、ブタ、および畜牛から選択される、請求項４に記載の使用。
【請求項６】
前記混合物が、チモール、オイゲノール、およびピペリンを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項７】
前記混合物が、プロピリデン、ブチリデン、フタリド（ｐｈｔａｌｉｄｅｓ）、ジンゲロール、ラベンダー油、デカ−、ウンデカ−、ドデカラクトン、イオノン、イロン、レソルシノール、ユーカリプトール、メントール、ペパーミント油、α−ピネン、リモネン、グアヤコール、アネトール、リナロール、ジヒドロジャスモン酸メチル、カルバクロール、プロピオン酸、酢酸または酪酸、ローズマリー油、クローブ油、ゲラニオール、テルピネオール、シトロネロール、アミルおよび／またはサリチル酸ベンジル、桂皮アルデヒド、バニリン（ｖａｎｉｌｌｉｎｅ）、植物ポリフェノール、ターメリック粉末、ウコン抽出物からなる群から選択される少なくとも１つの追加の化合物を含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項８】
前記安息香酸またはその誘導体が、それが投与される対象の体重１ｋｇあたり５ｍｇ〜体重１ｋｇあたり約８０ｍｇの一日投与量を提供するのに十分な量で使用される、請求項１〜７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９】
チモール、オイゲノール、およびピペリンが、それが投与される対象の体重１ｋｇあたり０．５ｍｇ〜約１ｍｇのチモールおよびオイゲノール、および０．０２ｍｇ〜約０．０６ｍｇのピペリンの一日投与量を提供するのに十分な量で使用される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１０】
安息香酸、その誘導体または代謝産物と、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの化合物の混合物とを含む、動物飼料組成物または添加剤またはそのためのプレミックス。
【請求項１１】
前記混合物がチモール、オイゲノール、およびピペリンを含む、請求項１０に記載の動物飼料組成物または添加剤またはプレミックス。
【請求項１２】
前記混合物が、プロピリデン、ブチリデン、フタリド（ｐｈｔａｌｉｄｅｓ）、ジンゲロール、ラベンダー油、デカ−、ウンデカ−、ドデカラクトン、イオノン、イロン、レソルシノール、ユーカリプトール、メントール、ペパーミント油、α−ピネン、リモネン、グアヤコール、アネトール、リナロール、ジヒドロジャスモン酸メチル、カルバクロール、プロピオン酸、酢酸または酪酸、アミルおよび／またはサリチル酸ベンジル、桂皮アルデヒド、バニリン（ｖａｎｉｌｌｉｎｅ）、ターメリック粉末からなる群から選択される少なくとも１つの追加の化合物を含む、請求項１０または１１に記載の動物飼料組成物または添加剤またはプレミックス。
【請求項１３】
固形物または液体として飼料成分に、あるいは飲用水に添加できる、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の動物飼料組成物または添加剤またはプレミックス。
【請求項１４】
動物における飼料転換率および／または毎日の体重増加および／または腸管内菌叢調節の改善のための、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の組成物または添加剤またはプレミックスの使用。
【請求項１５】
好ましくは安息香酸である有機酸、および少なくとも１つの精油化合物を含み、精油化合物がミネラルキャリア上に吸着されて付着剤および有機酸と混合される、飼料添加剤組成物。
【請求項１６】
ミネラルキャリアが、ケイ酸、ケイ酸アルミニウム、マグネシウムケイ酸塩、ケイ藻土からなる群に属する、請求項１５に記載の飼料添加剤組成物。
【請求項１７】
付着剤が、植物油、ワックス、糖蜜、ポリエチレングリコール、ペクチン、およびセルロース誘導体からなる群に属する、請求項１５または１６に記載の飼料添加剤組成物。
【請求項１８】
有機酸が、クエン酸、コハク酸、安息香酸、フマル酸、Ｌ−アスパラギン酸（ａｓｐａｒａｔｅ）またはＬ−リンゴ酸に由来し、５０％〜９５重量％の量で組成物中に存在する、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の飼料添加剤組成物。
【請求項１９】
少なくとも１つの精油化合物が、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択され、精油化合物（群）が２％〜５０重量％の総量で組成物中に存在する、請求項１５〜１８のいずれか一項に記載の飼料添加剤組成物。
【請求項２０】
動物によって摂取される飼料成分として存在する、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの活性化合物の混合物と併用される、有効量の安息香酸または安息香酸誘導体を飼料摂取動物に提供するステップを含む、動物において飼料転換率および／または毎日の体重増加および／または腸管内菌叢調節を改善する方法。
【請求項１】
動物における飼料転換率および／または毎日の体重増加および／または腸管内菌叢調節の改善のための組成物の製造における、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの活性化合物の混合物と併用される安息香酸、その誘導体または代謝産物の使用。
【請求項２】
動物における飼料転換率および／または毎日の体重増加および／または腸管内菌叢調節の改善のための、および／または抗菌剤としての、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの活性化合物の混合物と併用される安息香酸、その誘導体または代謝産物の使用。
【請求項３】
チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの化合物の混合物を含む組成物と共に、安息香酸を主成分として含む組成物を動物へ同時給餌することによって特徴づけられる、請求項２に記載の使用。
【請求項４】
動物が非反芻動物または反芻動物である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項５】
動物が、家禽、ブタ、および畜牛から選択される、請求項４に記載の使用。
【請求項６】
前記混合物が、チモール、オイゲノール、およびピペリンを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項７】
前記混合物が、プロピリデン、ブチリデン、フタリド（ｐｈｔａｌｉｄｅｓ）、ジンゲロール、ラベンダー油、デカ−、ウンデカ−、ドデカラクトン、イオノン、イロン、レソルシノール、ユーカリプトール、メントール、ペパーミント油、α−ピネン、リモネン、グアヤコール、アネトール、リナロール、ジヒドロジャスモン酸メチル、カルバクロール、プロピオン酸、酢酸または酪酸、ローズマリー油、クローブ油、ゲラニオール、テルピネオール、シトロネロール、アミルおよび／またはサリチル酸ベンジル、桂皮アルデヒド、バニリン（ｖａｎｉｌｌｉｎｅ）、植物ポリフェノール、ターメリック粉末、ウコン抽出物からなる群から選択される少なくとも１つの追加の化合物を含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項８】
前記安息香酸またはその誘導体が、それが投与される対象の体重１ｋｇあたり５ｍｇ〜体重１ｋｇあたり約８０ｍｇの一日投与量を提供するのに十分な量で使用される、請求項１〜７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９】
チモール、オイゲノール、およびピペリンが、それが投与される対象の体重１ｋｇあたり０．５ｍｇ〜約１ｍｇのチモールおよびオイゲノール、および０．０２ｍｇ〜約０．０６ｍｇのピペリンの一日投与量を提供するのに十分な量で使用される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１０】
安息香酸、その誘導体または代謝産物と、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの化合物の混合物とを含む、動物飼料組成物または添加剤またはそのためのプレミックス。
【請求項１１】
前記混合物がチモール、オイゲノール、およびピペリンを含む、請求項１０に記載の動物飼料組成物または添加剤またはプレミックス。
【請求項１２】
前記混合物が、プロピリデン、ブチリデン、フタリド（ｐｈｔａｌｉｄｅｓ）、ジンゲロール、ラベンダー油、デカ−、ウンデカ−、ドデカラクトン、イオノン、イロン、レソルシノール、ユーカリプトール、メントール、ペパーミント油、α−ピネン、リモネン、グアヤコール、アネトール、リナロール、ジヒドロジャスモン酸メチル、カルバクロール、プロピオン酸、酢酸または酪酸、アミルおよび／またはサリチル酸ベンジル、桂皮アルデヒド、バニリン（ｖａｎｉｌｌｉｎｅ）、ターメリック粉末からなる群から選択される少なくとも１つの追加の化合物を含む、請求項１０または１１に記載の動物飼料組成物または添加剤またはプレミックス。
【請求項１３】
固形物または液体として飼料成分に、あるいは飲用水に添加できる、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の動物飼料組成物または添加剤またはプレミックス。
【請求項１４】
動物における飼料転換率および／または毎日の体重増加および／または腸管内菌叢調節の改善のための、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の組成物または添加剤またはプレミックスの使用。
【請求項１５】
好ましくは安息香酸である有機酸、および少なくとも１つの精油化合物を含み、精油化合物がミネラルキャリア上に吸着されて付着剤および有機酸と混合される、飼料添加剤組成物。
【請求項１６】
ミネラルキャリアが、ケイ酸、ケイ酸アルミニウム、マグネシウムケイ酸塩、ケイ藻土からなる群に属する、請求項１５に記載の飼料添加剤組成物。
【請求項１７】
付着剤が、植物油、ワックス、糖蜜、ポリエチレングリコール、ペクチン、およびセルロース誘導体からなる群に属する、請求項１５または１６に記載の飼料添加剤組成物。
【請求項１８】
有機酸が、クエン酸、コハク酸、安息香酸、フマル酸、Ｌ−アスパラギン酸（ａｓｐａｒａｔｅ）またはＬ−リンゴ酸に由来し、５０％〜９５重量％の量で組成物中に存在する、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の飼料添加剤組成物。
【請求項１９】
少なくとも１つの精油化合物が、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択され、精油化合物（群）が２％〜５０重量％の総量で組成物中に存在する、請求項１５〜１８のいずれか一項に記載の飼料添加剤組成物。
【請求項２０】
動物によって摂取される飼料成分として存在する、チモール、オイゲノール、およびピペリンからなる群から選択される少なくとも２つの活性化合物の混合物と併用される、有効量の安息香酸または安息香酸誘導体を飼料摂取動物に提供するステップを含む、動物において飼料転換率および／または毎日の体重増加および／または腸管内菌叢調節を改善する方法。
【図１】
【図２】
【図２】
【公開番号】特開２００９−１１３２０（Ｐ２００９−１１３２０Ａ）
【公開日】平成２１年１月２２日（２００９．１．２２）
【国際特許分類】
【外国語出願】
【出願番号】特願２００８−１７１０５５（Ｐ２００８−１７１０５５）
【出願日】平成２０年６月３０日（２００８．６．３０）
【出願人】（５０３２２０３９２）ディーエスエム アイピー アセッツ ビー．ブイ． (873)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２１年１月２２日（２００９．１．２２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−１７１０５５（Ｐ２００８−１７１０５５）
【出願日】平成２０年６月３０日（２００８．６．３０）
【出願人】（５０３２２０３９２）ディーエスエム アイピー アセッツ ビー．ブイ． (873)
【Ｆターム（参考）】
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