本発明は、一般的には、植物中の種子貯蔵化合物の存在に関連するタンパク質をコードする核酸配列に関する。より具体的には、本発明は、脂質代謝調節タンパク質をコードするFAD2様核酸配列およびトランスジェニック植物におけるそれら配列の使用に関する。特に、本発明は、脂質代謝関連化合物を操作する方法、ならびに植物および種子中の油レベルを増加させ、脂肪酸組成を変化させる方法に関する。本発明はさらに、これらの新規植物ポリペプチドを用いて、植物の成長を刺激し、ならびに／または種子貯蔵化合物の収量および／もしくは組成を増加させる方法に関する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
X¹X²X³LX⁴X⁵X⁶X⁷LX⁸X⁹PX¹⁰YL(式中、X¹はMではなく、X³はTではなく、X⁶はFではなく、X⁷はVではない)、
GX¹¹X¹²X¹³X¹⁴X¹⁵X¹⁶X¹⁷X¹⁸HX¹⁹X²⁰PX²¹X²²X²³X²⁴X²⁵X²⁶X²⁷X²⁸ER(式中、X¹⁵はGではなく、X²⁰はFではなく、X²¹はNではなく、X²²はAではない)、
HX²⁹X³⁰PX³¹X³²X³³X³⁴X³⁵X³⁶X³⁷X³⁸ER(式中、X³⁰はFではなく、X³¹はNではなく、X³²はAではない)、
LX³⁹X⁴⁰X⁴¹X⁴²X⁴³X⁴⁴X⁴⁵GX⁴⁶X⁴⁷X⁴⁸X⁴⁹X⁵⁰X⁵¹X⁵²YX⁵³X⁵⁴P(式中、X⁴¹はYではなく、X⁴⁵はQではなく、X⁴⁸はSではなく、X⁴⁹はMではなく、X⁵⁰はIではない)、
TX⁵⁵X⁵⁶X⁵⁷X⁵⁸HX⁵⁹X⁶⁰X⁶¹X⁶²X⁶³X⁶⁴X⁶⁵X⁶⁶X⁶⁷X⁶⁸X⁶⁹X⁷⁰X⁷¹T(式中、X⁶⁷はNではない)、および
PX⁷²X⁷³X⁷⁴X⁷⁵X⁷⁶X⁷⁷X⁷⁸X⁷⁹X⁸⁰X⁸¹X⁸²X⁸³X⁸⁴X⁸⁵X⁸⁶(式中、X⁸⁴はWではなく、X⁸⁵はYではなく、X⁸⁶ はVではない)、
からなる群より選択されるアミノ酸配列(式中、Xは、上記で別途定義されていない場合、任意のアミノ酸を意味する)を含む、単離されたポリペプチド。
【請求項２】
AWYT、
PYX⁸⁷YNNPX⁸⁸GRLVHIX⁸⁹VQLTLGWPLYLAX⁹⁰NX⁹¹SGRPYPRFACHFDPYGPIYNDRER、
FISDVGV、
ALX⁹²KLX⁹³SX⁹⁴FGFWWVVRVYGVP、
ILGEYYQFDX⁹⁵TPVAKAT
からなる群より選択されるアミノ酸配列(式中、Xは任意のアミノ酸を意味する)を含む、単離されたポリペプチド。
【請求項３】
請求項１または２に記載のアミノ酸配列を含むタンパク質をコードする単離された核酸配列。
【請求項４】
請求項３に記載の核酸配列によりコードされる単離されたポリペプチド。
【請求項５】
a)配列番号5、配列番号7、配列番号9、配列番号11、配列番号13、配列番号15、配列番号17、配列番号19、配列番号21、配列番号23、配列番号25、配列番号27、配列番号29、配列番号31、配列番号33、または配列番号35に示されるポリヌクレオチド配列と、
b)配列番号6、配列番号8、配列番号10、配列番号12、配列番号14、配列番号16、配列番号18、配列番号20、配列番号22、配列番号24、配列番号26、配列番号28、配列番号30、配列番号32、配列番号34または配列番号36に示されるポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列と、
上記a)またはb)の核酸と少なくとも70％の配列同一性を有するポリヌクレオチド配列と、
上記a)またはb)の核酸と相補的であるポリヌクレオチド配列と、
上記a)またはb)の核酸とストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド配列と、
からなる群より選択されるポリヌクレオチド配列を含む単離された核酸。
【請求項６】
請求項５に記載のポリヌクレオチド配列によりコードされる単離されたポリペプチド。
【請求項７】
単離された核酸が、微生物または植物中で種子貯蔵化合物のモジュレーターとして機能するポリペプチドをコードする、請求項５に記載の単離された核酸。
【請求項８】
単離されたLMPポリペプチド配列が、微生物または植物中で種子貯蔵化合物のモジュレーターとして機能する、請求項６に記載の単離されたポリペプチド。
【請求項９】
請求項３または５に記載の核酸が、種子特異的プロモーター、根特異的プロモーター、および組織非特異的プロモーターからなる群より選択されるプロモーターに機能し得る形で連結されている、該核酸を含む発現ベクター。
【請求項１０】
野生型と比較して種子貯蔵化合物の重量％レベルが改変されたトランスジェニック植物を作製する方法であって、
a. 核酸を含む発現ベクターを植物細胞に導入する第1工程、および
b. 該植物細胞からトランスジェニック植物を生成させる第2工程、
を含み、
ここで、該核酸は該植物中で種子貯蔵化合物のモジュレーターとして機能するポリペプチドをコードし、かつ該核酸は、
a. 配列番号5、配列番号7、配列番号9、配列番号11、配列番号13、配列番号15、配列番号17、配列番号19、配列番号21、配列番号23、配列番号25、配列番号27、配列番号29、配列番号31、配列番号33または配列番号35に示されるポリヌクレオチド配列と、
b. 配列番号6、配列番号8、配列番号10、配列番号12、配列番号14、配列番号16、配列番号18、配列番号20、配列番号22、配列番号24、配列番号26、配列番号28、配列番号30、配列番号32、配列番号34または配列番号36に示されるポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列と、
c. 上記a)またはb)の核酸と少なくとも70％の配列同一性を有するポリヌクレオチド配列と、
d. 上記a)またはb)の核酸と相補的であるポリヌクレオチド配列と、
e. 上記a)またはb)の核酸とストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド配列と、
からなる群より選択されるポリヌクレオチド配列を含む、前記方法。
【請求項１１】
前記核酸が、請求項５のa)またはb)のポリヌクレオチド配列と少なくとも90％の配列同一性を有するポリヌクレオチド配列を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
オレイン酸のレベルが、該植物の野生型品種と比較して、トランスジェニック植物において増加する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
野生型と比較してオレイン酸の重量％のレベルが増加したトランスジェニック植物を作製する方法であって、
植物細胞を、RNA前駆体構築物を用いて形質転換する第1工程、および
該植物細胞からトランスジェニック植物を作製する第2工程、
を含み、
ここで、該構築物は、前駆体マイクロRNA配列をコードするヌクレオチド配列に機能し得るように連結された植物細胞中での発現を駆動するプロモーターを含み、該マイクロRNA前駆体配列をコードするヌクレオチド配列が、
a. 配列番号47に示されるヌクレオチド配列、
b. 上記a)の核酸と少なくとも70％の配列同一性を有するポリヌクレオチド配列、
c. 上記a)の核酸と相補的であるポリヌクレオチド配列、および
d. 上記a)の核酸とストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド配列、
からなる群より選択される、前記方法。
【請求項１４】
前駆体マイクロRNA配列をコードするヌクレオチド配列が、配列番号37に示されるマイクロRNAをコードするヌクレオチド配列が配列番号40に示されるマイクロRNAをコードするヌクレオチド配列により置換されるように遺伝子操作されている、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
配列番号47に示されるヌクレオチド配列、
上記a)の核酸と少なくとも70％の配列同一性を有するポリヌクレオチド配列、
上記a)の核酸と相補的であるポリヌクレオチド配列、
上記a)の核酸とストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド配列、
からなる群より選択されるポリヌクレオチド配列を含む単離された核酸。
【請求項１６】
植物における種子貯蔵化合物の重量％のレベルをモジュレートする方法であって、
a. 核酸を含む発現ベクターを植物細胞に導入する第1工程、および
b. 該植物細胞からトランスジェニック植物を作製する第2工程、
を含み、
ここで、該核酸は該植物中で種子貯蔵化合物のモジュレーターとして機能するポリペプチドをコードし、該核酸は請求項５に記載のポリヌクレオチド配列を含む、前記方法。
【請求項１７】
オレイン酸の重量％のレベルを改変する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
請求項１０、１３または１６に記載の方法により作製されたトランスジェニック植物。
【請求項１９】
オレイン酸重量％のレベルが、該植物の野生型品種と比較してトランスジェニック植物において増加している、請求項１８に記載のトランスジェニック植物。
【請求項２０】
前記植物が、ナタネ、カノーラ、亜麻仁、ダイズ、ヒマワリ、トウモロコシ、オートムギ、ライムギ、オオムギ、コムギ、コショウ、マンジュギク、ワタ、アブラヤシ、ココヤシ、アマ、トウゴマ、テンサイ、イネおよびラッカセイからなる群より選択される、請求項１８に記載のトランスジェニック植物。
【請求項２１】
請求項１８に記載のトランスジェニック植物により生産された種子であって、該植物は、種子貯蔵化合物のモジュレーターとして機能するポリペプチドを発現するものであり、かつ該植物は、該植物の野生型品種と比較して種子貯蔵化合物の改変された重量％レベルについて固定されている、前記種子。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６−１】

【図１６−２】

【図１６−３】

【公表番号】特表２００８−５２３８２１（Ｐ２００８−５２３８２１Ａ）
【公表日】平成２０年７月１０日（２００８．７．１０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５４７０１５（Ｐ２００７−５４７０１５）
【出願日】平成１７年１２月１９日（２００５．１２．１９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００５／０４６０２７
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０７３７８７
【国際公開日】平成１８年７月１３日（２００６．７．１３）
【出願人】（５０１３８３７５０）ビーエーエスエフ　プラント　サイエンス　ゲーエムベーハー (17)
【Ｆターム（参考）】