液体クロマトグラフィー用フィルタ及び液体クロマトグラフィー用カラム
【課題】異物を効率的に捕捉し、かつ、異物詰まりによる圧力上昇がなく、更に、これらの性能を長期にわたって維持できる液体クロマトグラフィー用フィルタを提供する。
【解決手段】外層、内層及び外層が、この順で積層された３層構造からなる液体クロマトグラフィー用フィルタであって、前記外層は、前記内層よりも孔径が大きく、かつ、全体の厚みを１００としたときの厚みの比が、外層：内層：外層＝１０〜４０：２０〜８０：１０〜４０である液体クロマトグラフィー用フィルタ。
【解決手段】外層、内層及び外層が、この順で積層された３層構造からなる液体クロマトグラフィー用フィルタであって、前記外層は、前記内層よりも孔径が大きく、かつ、全体の厚みを１００としたときの厚みの比が、外層：内層：外層＝１０〜４０：２０〜８０：１０〜４０である液体クロマトグラフィー用フィルタ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、異物を効率的に捕捉することができ、かつ、異物が詰まることに起因する圧力上昇がない液体クロマトグラフィー用フィルタ及び該液体クロマトグラフィー用フィルタが装着された液体クロマトグラフィー用カラムに関する。
【背景技術】
【０００２】
液体クロマトグラフィーの試薬の流路には、例えば、試薬類をろ過するフィルタ、試料注入装置から分離カラム部に至る流路に設置されるインラインフィルタ等のフィルタ類が設置されている。これらのフィルタは、移動相中の固形物、不溶性物質、難溶性物質（以下、これらを単に異物ともいう）等を捕捉するため、被測定物質と充填剤との相互作用が行われる前、即ち、分離カラム部より上流側に設置されていることが多く、場合によっては、分離カラム部から充填剤の一部が流出した場合などにこれらの異物が検出部に混入するのを防止するために、分離カラム部から検出部に至る流路、即ち、分離カラム部の下流側に設置されることもあり、さらに、分離カラム部の上流側と下流側の両方に設置されることもある。
【０００３】
このようなフィルタに捕捉される異物としては、例えば、移動相や反応試薬等の試薬類に由来するもの、ポンプ等可動部分に由来するもの、試料に由来するもの等が挙げられるが、異物が分離カラム部中に侵入すると、カラム充填剤の表面や、検出器のセルに吸着して、検体の測定に悪影響を及ぼす可能性があり、また、異物が検出部に侵入すると、測定の精度が低下することから、異物を確実に捕捉するため、様々な液体クロマトグラフィー用フィルタが開発されている。
【０００４】
フィルタの素材としては、従来から金属製、特にステンレス製の繊維を焼結した焼結フィルタが汎用されているが、金属製フィルタは疎水性が高いため、一定の条件下で特定の物質を分析する際に、フィルタ表面に被測定物質が非特異的に吸着してしまうことがあった。このような被測定物質のフィルタへの非特異的吸着を防止するため、例えば、テフロン（登録商標）製、セラミック製等の不活性な材料からなるフィルタを用いることが検討されており、特許文献１では、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）製のフィルタを用いた技術が開示されている。また、特許文献２には、フィルタにブロッキング処理を施した技術も開示されている。
【０００５】
一方、大量の検体を連続測定したり、血液等の異物を多く含む検体を測定したりする条件下では、異物を充分に捕捉できなかったり、異物がフィルタに詰まって圧力が上昇したりして、正確かつ迅速に検体を測定できず、フィルタの性能が不充分となる問題があった。特に、臨床検査のように高い測定精度を要する測定においては、測定値への影響を最小限に止め、かつ、コストの面から頻繁にフィルタを交換しなくても済むように、圧力上昇をできるだけ抑える必要があった。
【０００６】
このようなフィルタへの異物の詰まりによる圧力上昇を防止するため、特許文献３には、孔径の異なる２層構造のフィルタを用いる方法が開示されている。また、特許文献４には、濾紙とフィルタとを組み合わせた２層構造体を用いる方法も開示されている。更に、フィルタを保持するパッキン内の空隙を減らすためにフィルタの形状を改良した技術等が開示されている。
【０００７】
しかしながら、２層構造のフィルタを用いる方法では、必ず孔径の大きい側の層が上流側となるように設置されなければ圧力上昇防止効果が得られず、不注意によりフィルタの設置方向を誤った場合には、全く効果が得られないという問題があった。
【特許文献１】特開２０００−３２１２６１号公報
【特許文献２】特開２０００−１３１３０２号公報
【特許文献３】特開平２−２６２０５４号公報
【特許文献４】特開平５−２０３６３４号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、上記現状に鑑み、異物を効率的に捕捉することができ、かつ、異物が詰まることに起因する圧力上昇が生じ難い液体クロマトグラフィー用フィルタを提供することを目的とする。
【０００９】
また、本発明は、上記液体クロマトグラフィー用フィルタが装着された液体クロマトグラフィー用カラムを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、外層、内層及び外層が、この順で積層された３層構造からなる液体クロマトグラフィー用フィルタであって、上記外層は、上記内層よりも孔径が大きく、かつ、全体の厚みを１００としたときの厚みの比が、外層：内層：外層＝１０〜４０：２０〜８０：１０〜４０である液体クロマトグラフィー用フィルタである。
【００１１】
以下、本発明につき、詳細に説明する。
【００１２】
本発明者らは、鋭意検討の結果、液体クロマトグラフィー用フィルタを、孔径の大きい外層の間に、孔径の小さい内層を有する３層構造とし、かつ、３層の厚みの比を一定の範囲に調製することにより、異物を効率的に捕捉でき、かつ、異物が詰まることに起因する圧力上昇が生じ難く、更に、フィルタの作製時又は使用時に、不注意によってフィルタの方向を間違えることを防止できることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタは、外層、内層及び外層が、この順で積層された３層構造からなるものである。なお、本明細書において、上記外層又は内層は、孔径が実質的に同等と見なせるフィルタの層であり、孔径が同じフィルタを複数貼り合わせたようなものや、孔径が実質的に同等である複数の層を貼り合わせたようなものも含むものとする。但し、孔径が実質的に同等である複数の層を貼り合わせたものを含む場合は、外側の層ほど孔径を大きくするのが好ましい。また、上記外層と内層との間で、孔径の大きさは連続的に変化していてもよいし、不連続的であってもよい。
【００１４】
図１に、本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタの一例を示す。
【００１５】
図１に示すように、液体クロマトグラフィー用フィルタ１は、外層２、内層３及び外層４とからなり、外層２と外層４の間に、外層２及び外層４よりも孔径が小さい内層３が挟持された３層構造となっている。液体クロマトグラフィー用フィルタ１は、このような構造を有していることから、通液方向１又は通液方向２のいずれの通液方向の液体クロマトグラフィー用フィルタとして使用する場合でも、異物を効率的に捕捉でき、かつ、異物が詰まることに起因する圧力上昇を防止できる。従って、液体クロマトグラフィー用フィルタ１は、使用時の不注意によって方向を間違えて設置することを防止できる。
【００１６】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタにおいて、上記外層は、上記内層よりも孔径が大きい。これにより、上記外層で大きな異物を捕捉することができ、上記内層において異物が詰まることに起因する圧力上昇を防止できる。また、本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタでは、孔径が同等である外層の間に内層が挟持されている構造であるため、使用時に液体クロマトグラフィー用フィルタの方向を間違えて設置することがない。
【００１７】
上記外層の孔径の好ましい下限は７μｍ、好ましい上限は２０μｍである。７μｍ未満であると、異物が詰まることによる圧力上昇が発生することがあり、２０μｍを超えると、異物を充分に捕捉できないことがある。より好ましい下限は８μｍ、より好ましい上限は１５μｍである。なお、本明細書において、上記孔径とは、ＩＳＯ４００３に規定されているバブルポイント法によって導出されるものを意味する。
【００１８】
上記外層は、金属製、特にステンレス製、チタン製であることが好ましい。また、上記外層は、上記内層と異なる素材からなるものであってもよく、同一の素材からなるものであってもよい。上記外層と上記内層が異なる素材である場合は、上記外層は、上記内層よりも高い強度を有する素材を用いて作製することが好ましい。上記外層と上記内層が同一の素材である場合は、上記外層は、上記内層よりも直径の大きい繊維等を用いて作製することが好ましい。
【００１９】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタにおいて、上記内層は、上記外層よりも孔径が小さい。これにより、上記外層を通過した異物を効率的に捕捉して、液体クロマトグラフィーの流路に設置された場合に、分離カラム部への異物の流入或いは検出部への異物の流入を防止できる。
【００２０】
上記内層の孔径の好ましい下限は０．１μｍ、好ましい上限は７μｍである。０．１μｍ未満であると、異物が詰まることによる圧力上昇が大きくなることがあり、７μｍを超えると、異物を充分に捕捉できないことがある。より好ましい下限は１μｍ、より好ましい上限は５μｍである。
【００２１】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタの全体の厚みを１００としたときの、上記外層及び上記内層の厚みの比は、外層：内層：外層＝１０〜４０：２０〜８０：１０〜４０である。上記外層の厚みの比が上記範囲よりも小さくなったり、逆に、内層の厚みの比が上記範囲よりも小さくなったりすると、異物を効率的に捕捉できず、結果的に液体クロマトグラフィー用フィルタの寿命が短くなる。従って、上記外層及び上記内層の厚みの比を上記範囲内とすることで、様々な大きさの異物が混在する生体試料の分析の際に、特に優れた効果を発揮する液体クロマトグラフィー用フィルタとすることができる。なお、上記生体試料とは、臨床検査時に測定される試料のことであり、主として血液、血清、血漿、尿等が挙げられる。
【００２２】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタの全体の厚みの、好ましい下限は０．１ｍｍ、好ましい上限は１０ｍｍである。０．１ｍｍ未満であると、捕捉できる異物の絶対量が少ないためにフィルタの寿命が短くなる恐れがある。１０ｍｍを超えると、液の拡散が大きくなることにより、分離能の低下を引き起こす恐れがある。より好ましい下限は０．２ｍｍ、より好ましい上限は３ｍｍである。
【００２３】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタは、全部又は一部に表面処理が施されていることが好ましい。本明細書において表面処理とは、液体クロマトグラフィー用フィルタ表面に化学的処理及び／又は物理的処理を施すことにより、その性質を改変することを意味する。このように表面処理を行うことにより、表面処理をしていない液体クロマトグラフィー用フィルタを使用した場合に非特異吸着等の問題が起こりうる分析条件下であっても、この問題を効果的に回避することができる。
【００２４】
上記液体クロマトグラフィー用フィルタの一部又は全てを化学反応により改変する方法としては特に限定されないが、例えば、加熱や酸等による酸化反応により改変する方法等が挙げられる。上記酸化処理をすることにより、液体クロマトグラフィー用フィルタ表面の一部が改質し、疎水性物質の非特異吸着等を抑制することができる。
【００２５】
また、上記表面処理には、他の物質等を被覆することにより表面の性質を改変することも含まれる。上記他の物質等を被覆する方法としては特に限定されないが、例えば、親水性物質や疎水性物質等の所望の特徴を有する物質を液体クロマトグラフィー用フィルタ表面に被覆させる、いわゆるブロッキング処理等が挙げられる。
【００２６】
上記他の物質としては特に限定されないが、例えば、ウシ血清アルブミン、グロブリン、ラクトフェリン、スキムミルク等のタンパク質やシリコーン、フッ素樹脂等が挙げられる。上記物質を液体クロマトグラフィー用フィルタ表面に被覆させることにより、疎水性物質の非特異吸着を抑制することができる。
【００２７】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタの形状は特に限定されないが、円盤状又は円筒状であることが好ましい。また、本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタが円筒状である場合の直径は特に限定されないが、好ましい下限は１ｍｍ、好ましい上限は２０ｍｍである。１ｍｍ未満であると、捕捉できる異物の絶対量が少ないためにフィルタの寿命が短くなる恐れがある。２０ｍｍを超えると、液の拡散が大きくなることにより、分離能の低下を引き起こす恐れがある。より好ましい下限は２ｍｍ、より好ましい上限は１０ｍｍである。
【００２８】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタの製造方法としては特に限定されず、外層及び内層を別個に作製した後、重ね合わせて３層構造にしてもよく、一度に３層構造を有する液体クロマトグラフィー用フィルタを製造してもよい。また、外層及び内層の孔径は、公知の方法により調整できる。例えば、繊維焼結フィルタの場合には、用いる金属繊維の直径を変えたり、加工時の圧力を変えたりすることによって様々な孔径に調整できる。
【００２９】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタを、液体クロマトグラフィーの流路に設置する場合は、パッキンやホルダに収納して使用することが好ましい。なお、上記パッキンやホルダとしては、液体クロマトグラフィーの流路に設置でき、移動相等が漏れない構造であれば特に制限されない。
【００３０】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタは、生体試料を分析する際の、分離カラム部へ至る流路に設置されるプレフィルタ、或いは分離カラム部から検出部へ至る流路に設置されるカラムエンドフィルタとして使用できる。このような生体試料分析に使用することによって、大量の検体を連続測定したり、血液等の異物を多く含む検体を測定したりする場合にも、異物を効率的に捕捉でき、圧力上昇を防止できる。
【００３１】
また、上記液体クロマトグラフィー用フィルタは、分離カラム部を有する液体クロマトグラフィー用カラムとは別体とし、適宜液体クロマトグラフィーの流路に設置するようにしてもよく、或いは、分離カラム部と一体的なハウジング内に設置し、液体クロマトグラフィー用カラムに組み込んだ構成にしてもよい。
【発明の効果】
【００３２】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタは、液体クロマトグラフィーに用いられた場合に、異物を効率的に捕捉して、プレフィルタとして使用された場合には下流の分離カラム部への異物の流入を防止することができ、また、カラムエンドフィルタとして使用された場合には検出部への異物の流入を防止することができ、かつ、異物が詰まることによる圧力上昇が少ないため、フィルタの交換を行うことなく多数の検体を測定できる。また、これらの性能を長期にわたって維持することができる。更に、使用時の不注意によって、フィルタの方向を間違えて設置することもない。
【００３３】
また、本発明の液体クロマトグラフィー用カラムは、上記液体クロマトグラフィー用フィルタが装着されているので、長期にわたって優れた分離性能を維持することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３４】
本発明を更に詳しく説明するために以下に実施例を挙げるが、本発明はこれらの実施例のみに限定されるものではない。
（実施例１）
孔径が１２μｍのフィルタ層１（外層）、孔径が３μｍのフィルタ層２（内層）及び孔径が１２μｍのフィルタ層３（外層）が、この順に積層された３層構造を有するステンレス製の液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。なお、得られたフィルタのフィルタ層１及び３の厚みは各々０．２５ｍｍ、フィルタ層２の厚みは０．５０ｍｍであり、全体の厚みは１ｍｍであった。また、フィルタの外径は５ｍｍであった。
（実施例２）
フィルタ層１及び３（外層）の厚みを各々０．１５ｍｍ、フィルタ層２（内層）の厚みを０．７０ｍｍとした以外は、実施例１と同様にして、液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。
（実施例３）
フィルタ層１及び３（外層）の厚みを各々０．３５ｍｍ、フィルタ層２（内層）の厚みを０．３０ｍｍとした以外は、実施例１と同様にして、液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。
（実施例４）
フィルタ層１及び３（外層）の厚みを各々０．１０ｍｍ、フィルタ層２（内層）の厚みを０．８０ｍｍとした以外は、実施例１と同様にして、液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。
（実施例５）
フィルタ層１及び３（外層）の厚みを各々０．４０ｍｍ、フィルタ層２（内層）の厚みを０．２０ｍｍとした以外は、実施例１と同様にして、液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。
（比較例１）
孔径が１２μｍのフィルタ層１、孔径が３μｍのフィルタ層２が、積層された２層構造を有するステンレス製の液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。なお、得られたフィルタのフィルタ層１の厚みは０．５０ｍｍ、フィルタ層２の厚みは０．５０ｍｍであり、全体の厚みは１ｍｍであった。また、フィルタの外径は５ｍｍであった。
（比較例２）
孔径が３μｍのフィルタ層１の１層からなるステンレス製の液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。なお、得られたフィルタの全体の厚みは１ｍｍであった。また、フィルタの外径は５ｍｍであった。
（比較例３）
フィルタ層１の孔径を１２μｍとした以外は、比較例２と同様にして、液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。
（比較例４）
フィルタ層１及び３（外層）の厚みを各々０．０５ｍｍ、フィルタ層２（内層）の厚みを０．９０ｍｍとした以外は、実施例１と同様にして、液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。
（比較例５）
フィルタ層１及び３（外層）の厚みを各々０．４５ｍｍ、フィルタ層２（内層）の厚みを０．１０ｍｍとした以外は、実施例１と同様にして、液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。
（評価）
実施例１〜５及び比較例１〜５で得られた液体クロマトグラフィー用フィルタについて、以下の評価を行った。
（１）液体クロマトグラフィー用フィルタ及びメンブランフィルタの圧力上昇の評価
得られた液体クロマトグラフィー用フィルタをＰＥＥＫ製パッキンにはめ込み、流路に接続できるねじ部を設けたＰＥＥＫ製ホルダに装着した後、図２に示す液体クロマトグラフィーに設置した。
【００３５】
図２は、本評価において用いられる液体クロマトグラフィーの一部を示す模式図である。図２に示すように、移動層６は、送液ポンプ７、試料注入装置８及び液体クロマトグラフィー用フィルタ９を介してメンブランフィルタ１０へと送液される。なお、移動相６としてはｐＨ６の５０ｍｍｏｌ／ｌリン酸緩衝液を用い、流速１．５ｍＬ/分で送液した。また、メンブランフィルタ１０は、孔径０．６５μｍのメンブランフィルタを４枚重ねたものであり、液体クロマトグラフィー用フィルタ９を通過したものを捕捉するためのものであって、実際の分析系における分離カラム部の役割をする。
【００３６】
検体としては、ヒト健常人血を界面活性剤を含むｐＨ７のリン酸緩衝液によって２００倍に希釈したものを用い、上記ヒト健常人血を１０００検体連続して測定し、液体クロマトグラフィー用フィルタ及びメンブランフィルタの測定前の圧力値（０ＭＰａ）と１０００検体測定後の圧力値の差を求めた。結果を表１に示す。なお、表１の通液方向は、移動層の流入が、フィルタ層１、２、３の順（実施例１〜５、比較例４、比較例５）及びフィルタ層１、２の順（比較例１）の場合を通液方向１とし、フィルタ層３、２、１の順（実施例１）及びフィルタ層２、１の順（比較例１）の場合を通液方向２とした。
【００３７】
【表１】
表１に示すように、実施例１、２及び３の液体クロマトグラフィー用フィルタは、液体クロマトグラフィー用フィルタ圧力値、メンブランフィルタ圧力値ともに上昇がなかった。また、実施例１の液体クロマトグラフィー用フィルタは、通液方向１及び２の両方向からの通液に対して、圧力値の上昇がなかった。これは、どちらの向きに設置しても異物を充分に捕捉でき、かつ、多量検体測定時においても詰まり等の問題の発生が少ないことを示す。
【００３８】
なお、実施例４及び５の液体クロマトグラフィー用フィルタは、液体クロマトグラフィー用圧力値に若干の上昇があったが１０００検体測定可能なレベルであった。
【００３９】
一方、比較例１の液体クロマトグラフィー用フィルタは、通液方向１の場合にはフィルタ圧力値の上昇はなかったが、通液方向２の場合にはフィルタ圧力値の上昇があった。メンブランフィルタ圧力値の上昇は、両方向ともなかった。これは、比較例１の液体クロマトグラフィー用フィルタは、分離カラム部へ損害を与えないが、通液方向２の場合では、通液方向１に比べて使用できる期間が短いこと意味する。即ち、使用時に液体クロマトグラフィー用フィルタを設置する方向を間違えると、液体クロマトグラフィー用フィルタの寿命が短くなることを意味する。
【００４０】
なお、比較例２、４及び５の液体クロマトグラフィー用フィルタは、液体クロマトグラフィー用フィルタ圧力値は上昇したが、メンブランフィルタ圧力値の上昇はなかった。また、比較例３の液体クロマトグラフィー用フィルタは、液体クロマトグラフィー用フィルタ圧力値の上昇はなかったが、メンブランフィルタの圧力値が上昇した。
（２）Ｈｂの非特異吸着抑制効果の評価
実施例１の液体クロマトグラフィー用フィルタを、０．０１％のウシ血清アルブミンのリン酸緩衝溶液に４０℃で１時間浸漬することによって表面処理を行った。次いで、上記表面処理をした液体クロマトグラフィー用フィルタ及び上記表面処理をしていない液体クロマトグラフィー用フィルタを用いて、液体クロマトグラフィーシステム（島津社製ＬＣ−６Ａシステム）によって、以下の条件でＨｂ回収率試験を行った。
【００４１】
なお、Ｈｂ回収率は、同一検体を１０回測定した場合の後半３検体のピーク面積比の平均値から導出した。上記ピーク面積比は、液体クロマトグラフィー用フィルタをセットしない状態で得られるピーク面積を１００％とした場合の、上記表面処理をした液体クロマトグラフィー用フィルタ又は上記表面処理をしていない液体クロマトグラフィー用フィルタをセットしたときに得られるピーク面積の比である。従って、ピーク面積比が１００％に近い程、液体クロマトグラフィー用フィルタ表面へのＨｂの非特異吸着が抑制されていることを意味する。
【００４２】
移動相：Ａ液＝５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ５）
Ｂ液＝５００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ５）
流速：１．５ｍｌ／分
検出波長：４１５ｎｍ
測定検体： ヒト健常人血（界面活性剤を含むリン酸緩衝液（ｐＨ７）による２００倍希釈品）
【００４３】
【表２】
表２に示すように、上記表面処理をした液体クロマトグラフィー用フィルタの場合は、Ｈｂ回収率が１００％に近い値を示したのに対して、上記表面処理をしていない液体クロマトグラフィー用フィルタの場合は、非常に低い値を示した。これは、上記表面処理をしていない液体クロマトグラフィー用フィルタの場合には、液体クロマトグラフィー用フィルタ表面にＨｂが非特異吸着したためであると考えられる。即ち、非特異吸着が問題とならない検体を測定する場合には特に必要ではないが、非特異吸着が生じるような検体を測定する場合には、表面処理を施すことが非常に効果的であることがわかる。
【産業上の利用可能性】
【００４４】
本発明は、上記現状に鑑み、異物を効率的に捕捉することができ、かつ、異物が詰まることに起因する圧力上昇がない液体クロマトグラフィー用フィルタ及び該液体クロマトグラフィー用フィルタが装着された液体クロマトグラフィー用カラムを提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００４５】
【図１】本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタの一例である。
【図２】本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタを含む液体クロマトグラフィーの一部である。
【符号の説明】
【００４６】
１ 液体クロマトグラフィー用フィルタ
２、４ 外層
３ 内層
５ 液体クロマトグラフィー
６ 移動層
７ 送液ポンプ
８ 試料注入装置
９ 液体クロマトグラフィー用フィルタ
１０ メンブランフィルタ
【技術分野】
【０００１】
本発明は、異物を効率的に捕捉することができ、かつ、異物が詰まることに起因する圧力上昇がない液体クロマトグラフィー用フィルタ及び該液体クロマトグラフィー用フィルタが装着された液体クロマトグラフィー用カラムに関する。
【背景技術】
【０００２】
液体クロマトグラフィーの試薬の流路には、例えば、試薬類をろ過するフィルタ、試料注入装置から分離カラム部に至る流路に設置されるインラインフィルタ等のフィルタ類が設置されている。これらのフィルタは、移動相中の固形物、不溶性物質、難溶性物質（以下、これらを単に異物ともいう）等を捕捉するため、被測定物質と充填剤との相互作用が行われる前、即ち、分離カラム部より上流側に設置されていることが多く、場合によっては、分離カラム部から充填剤の一部が流出した場合などにこれらの異物が検出部に混入するのを防止するために、分離カラム部から検出部に至る流路、即ち、分離カラム部の下流側に設置されることもあり、さらに、分離カラム部の上流側と下流側の両方に設置されることもある。
【０００３】
このようなフィルタに捕捉される異物としては、例えば、移動相や反応試薬等の試薬類に由来するもの、ポンプ等可動部分に由来するもの、試料に由来するもの等が挙げられるが、異物が分離カラム部中に侵入すると、カラム充填剤の表面や、検出器のセルに吸着して、検体の測定に悪影響を及ぼす可能性があり、また、異物が検出部に侵入すると、測定の精度が低下することから、異物を確実に捕捉するため、様々な液体クロマトグラフィー用フィルタが開発されている。
【０００４】
フィルタの素材としては、従来から金属製、特にステンレス製の繊維を焼結した焼結フィルタが汎用されているが、金属製フィルタは疎水性が高いため、一定の条件下で特定の物質を分析する際に、フィルタ表面に被測定物質が非特異的に吸着してしまうことがあった。このような被測定物質のフィルタへの非特異的吸着を防止するため、例えば、テフロン（登録商標）製、セラミック製等の不活性な材料からなるフィルタを用いることが検討されており、特許文献１では、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）製のフィルタを用いた技術が開示されている。また、特許文献２には、フィルタにブロッキング処理を施した技術も開示されている。
【０００５】
一方、大量の検体を連続測定したり、血液等の異物を多く含む検体を測定したりする条件下では、異物を充分に捕捉できなかったり、異物がフィルタに詰まって圧力が上昇したりして、正確かつ迅速に検体を測定できず、フィルタの性能が不充分となる問題があった。特に、臨床検査のように高い測定精度を要する測定においては、測定値への影響を最小限に止め、かつ、コストの面から頻繁にフィルタを交換しなくても済むように、圧力上昇をできるだけ抑える必要があった。
【０００６】
このようなフィルタへの異物の詰まりによる圧力上昇を防止するため、特許文献３には、孔径の異なる２層構造のフィルタを用いる方法が開示されている。また、特許文献４には、濾紙とフィルタとを組み合わせた２層構造体を用いる方法も開示されている。更に、フィルタを保持するパッキン内の空隙を減らすためにフィルタの形状を改良した技術等が開示されている。
【０００７】
しかしながら、２層構造のフィルタを用いる方法では、必ず孔径の大きい側の層が上流側となるように設置されなければ圧力上昇防止効果が得られず、不注意によりフィルタの設置方向を誤った場合には、全く効果が得られないという問題があった。
【特許文献１】特開２０００−３２１２６１号公報
【特許文献２】特開２０００−１３１３０２号公報
【特許文献３】特開平２−２６２０５４号公報
【特許文献４】特開平５−２０３６３４号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、上記現状に鑑み、異物を効率的に捕捉することができ、かつ、異物が詰まることに起因する圧力上昇が生じ難い液体クロマトグラフィー用フィルタを提供することを目的とする。
【０００９】
また、本発明は、上記液体クロマトグラフィー用フィルタが装着された液体クロマトグラフィー用カラムを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、外層、内層及び外層が、この順で積層された３層構造からなる液体クロマトグラフィー用フィルタであって、上記外層は、上記内層よりも孔径が大きく、かつ、全体の厚みを１００としたときの厚みの比が、外層：内層：外層＝１０〜４０：２０〜８０：１０〜４０である液体クロマトグラフィー用フィルタである。
【００１１】
以下、本発明につき、詳細に説明する。
【００１２】
本発明者らは、鋭意検討の結果、液体クロマトグラフィー用フィルタを、孔径の大きい外層の間に、孔径の小さい内層を有する３層構造とし、かつ、３層の厚みの比を一定の範囲に調製することにより、異物を効率的に捕捉でき、かつ、異物が詰まることに起因する圧力上昇が生じ難く、更に、フィルタの作製時又は使用時に、不注意によってフィルタの方向を間違えることを防止できることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタは、外層、内層及び外層が、この順で積層された３層構造からなるものである。なお、本明細書において、上記外層又は内層は、孔径が実質的に同等と見なせるフィルタの層であり、孔径が同じフィルタを複数貼り合わせたようなものや、孔径が実質的に同等である複数の層を貼り合わせたようなものも含むものとする。但し、孔径が実質的に同等である複数の層を貼り合わせたものを含む場合は、外側の層ほど孔径を大きくするのが好ましい。また、上記外層と内層との間で、孔径の大きさは連続的に変化していてもよいし、不連続的であってもよい。
【００１４】
図１に、本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタの一例を示す。
【００１５】
図１に示すように、液体クロマトグラフィー用フィルタ１は、外層２、内層３及び外層４とからなり、外層２と外層４の間に、外層２及び外層４よりも孔径が小さい内層３が挟持された３層構造となっている。液体クロマトグラフィー用フィルタ１は、このような構造を有していることから、通液方向１又は通液方向２のいずれの通液方向の液体クロマトグラフィー用フィルタとして使用する場合でも、異物を効率的に捕捉でき、かつ、異物が詰まることに起因する圧力上昇を防止できる。従って、液体クロマトグラフィー用フィルタ１は、使用時の不注意によって方向を間違えて設置することを防止できる。
【００１６】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタにおいて、上記外層は、上記内層よりも孔径が大きい。これにより、上記外層で大きな異物を捕捉することができ、上記内層において異物が詰まることに起因する圧力上昇を防止できる。また、本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタでは、孔径が同等である外層の間に内層が挟持されている構造であるため、使用時に液体クロマトグラフィー用フィルタの方向を間違えて設置することがない。
【００１７】
上記外層の孔径の好ましい下限は７μｍ、好ましい上限は２０μｍである。７μｍ未満であると、異物が詰まることによる圧力上昇が発生することがあり、２０μｍを超えると、異物を充分に捕捉できないことがある。より好ましい下限は８μｍ、より好ましい上限は１５μｍである。なお、本明細書において、上記孔径とは、ＩＳＯ４００３に規定されているバブルポイント法によって導出されるものを意味する。
【００１８】
上記外層は、金属製、特にステンレス製、チタン製であることが好ましい。また、上記外層は、上記内層と異なる素材からなるものであってもよく、同一の素材からなるものであってもよい。上記外層と上記内層が異なる素材である場合は、上記外層は、上記内層よりも高い強度を有する素材を用いて作製することが好ましい。上記外層と上記内層が同一の素材である場合は、上記外層は、上記内層よりも直径の大きい繊維等を用いて作製することが好ましい。
【００１９】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタにおいて、上記内層は、上記外層よりも孔径が小さい。これにより、上記外層を通過した異物を効率的に捕捉して、液体クロマトグラフィーの流路に設置された場合に、分離カラム部への異物の流入或いは検出部への異物の流入を防止できる。
【００２０】
上記内層の孔径の好ましい下限は０．１μｍ、好ましい上限は７μｍである。０．１μｍ未満であると、異物が詰まることによる圧力上昇が大きくなることがあり、７μｍを超えると、異物を充分に捕捉できないことがある。より好ましい下限は１μｍ、より好ましい上限は５μｍである。
【００２１】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタの全体の厚みを１００としたときの、上記外層及び上記内層の厚みの比は、外層：内層：外層＝１０〜４０：２０〜８０：１０〜４０である。上記外層の厚みの比が上記範囲よりも小さくなったり、逆に、内層の厚みの比が上記範囲よりも小さくなったりすると、異物を効率的に捕捉できず、結果的に液体クロマトグラフィー用フィルタの寿命が短くなる。従って、上記外層及び上記内層の厚みの比を上記範囲内とすることで、様々な大きさの異物が混在する生体試料の分析の際に、特に優れた効果を発揮する液体クロマトグラフィー用フィルタとすることができる。なお、上記生体試料とは、臨床検査時に測定される試料のことであり、主として血液、血清、血漿、尿等が挙げられる。
【００２２】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタの全体の厚みの、好ましい下限は０．１ｍｍ、好ましい上限は１０ｍｍである。０．１ｍｍ未満であると、捕捉できる異物の絶対量が少ないためにフィルタの寿命が短くなる恐れがある。１０ｍｍを超えると、液の拡散が大きくなることにより、分離能の低下を引き起こす恐れがある。より好ましい下限は０．２ｍｍ、より好ましい上限は３ｍｍである。
【００２３】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタは、全部又は一部に表面処理が施されていることが好ましい。本明細書において表面処理とは、液体クロマトグラフィー用フィルタ表面に化学的処理及び／又は物理的処理を施すことにより、その性質を改変することを意味する。このように表面処理を行うことにより、表面処理をしていない液体クロマトグラフィー用フィルタを使用した場合に非特異吸着等の問題が起こりうる分析条件下であっても、この問題を効果的に回避することができる。
【００２４】
上記液体クロマトグラフィー用フィルタの一部又は全てを化学反応により改変する方法としては特に限定されないが、例えば、加熱や酸等による酸化反応により改変する方法等が挙げられる。上記酸化処理をすることにより、液体クロマトグラフィー用フィルタ表面の一部が改質し、疎水性物質の非特異吸着等を抑制することができる。
【００２５】
また、上記表面処理には、他の物質等を被覆することにより表面の性質を改変することも含まれる。上記他の物質等を被覆する方法としては特に限定されないが、例えば、親水性物質や疎水性物質等の所望の特徴を有する物質を液体クロマトグラフィー用フィルタ表面に被覆させる、いわゆるブロッキング処理等が挙げられる。
【００２６】
上記他の物質としては特に限定されないが、例えば、ウシ血清アルブミン、グロブリン、ラクトフェリン、スキムミルク等のタンパク質やシリコーン、フッ素樹脂等が挙げられる。上記物質を液体クロマトグラフィー用フィルタ表面に被覆させることにより、疎水性物質の非特異吸着を抑制することができる。
【００２７】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタの形状は特に限定されないが、円盤状又は円筒状であることが好ましい。また、本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタが円筒状である場合の直径は特に限定されないが、好ましい下限は１ｍｍ、好ましい上限は２０ｍｍである。１ｍｍ未満であると、捕捉できる異物の絶対量が少ないためにフィルタの寿命が短くなる恐れがある。２０ｍｍを超えると、液の拡散が大きくなることにより、分離能の低下を引き起こす恐れがある。より好ましい下限は２ｍｍ、より好ましい上限は１０ｍｍである。
【００２８】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタの製造方法としては特に限定されず、外層及び内層を別個に作製した後、重ね合わせて３層構造にしてもよく、一度に３層構造を有する液体クロマトグラフィー用フィルタを製造してもよい。また、外層及び内層の孔径は、公知の方法により調整できる。例えば、繊維焼結フィルタの場合には、用いる金属繊維の直径を変えたり、加工時の圧力を変えたりすることによって様々な孔径に調整できる。
【００２９】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタを、液体クロマトグラフィーの流路に設置する場合は、パッキンやホルダに収納して使用することが好ましい。なお、上記パッキンやホルダとしては、液体クロマトグラフィーの流路に設置でき、移動相等が漏れない構造であれば特に制限されない。
【００３０】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタは、生体試料を分析する際の、分離カラム部へ至る流路に設置されるプレフィルタ、或いは分離カラム部から検出部へ至る流路に設置されるカラムエンドフィルタとして使用できる。このような生体試料分析に使用することによって、大量の検体を連続測定したり、血液等の異物を多く含む検体を測定したりする場合にも、異物を効率的に捕捉でき、圧力上昇を防止できる。
【００３１】
また、上記液体クロマトグラフィー用フィルタは、分離カラム部を有する液体クロマトグラフィー用カラムとは別体とし、適宜液体クロマトグラフィーの流路に設置するようにしてもよく、或いは、分離カラム部と一体的なハウジング内に設置し、液体クロマトグラフィー用カラムに組み込んだ構成にしてもよい。
【発明の効果】
【００３２】
本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタは、液体クロマトグラフィーに用いられた場合に、異物を効率的に捕捉して、プレフィルタとして使用された場合には下流の分離カラム部への異物の流入を防止することができ、また、カラムエンドフィルタとして使用された場合には検出部への異物の流入を防止することができ、かつ、異物が詰まることによる圧力上昇が少ないため、フィルタの交換を行うことなく多数の検体を測定できる。また、これらの性能を長期にわたって維持することができる。更に、使用時の不注意によって、フィルタの方向を間違えて設置することもない。
【００３３】
また、本発明の液体クロマトグラフィー用カラムは、上記液体クロマトグラフィー用フィルタが装着されているので、長期にわたって優れた分離性能を維持することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３４】
本発明を更に詳しく説明するために以下に実施例を挙げるが、本発明はこれらの実施例のみに限定されるものではない。
（実施例１）
孔径が１２μｍのフィルタ層１（外層）、孔径が３μｍのフィルタ層２（内層）及び孔径が１２μｍのフィルタ層３（外層）が、この順に積層された３層構造を有するステンレス製の液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。なお、得られたフィルタのフィルタ層１及び３の厚みは各々０．２５ｍｍ、フィルタ層２の厚みは０．５０ｍｍであり、全体の厚みは１ｍｍであった。また、フィルタの外径は５ｍｍであった。
（実施例２）
フィルタ層１及び３（外層）の厚みを各々０．１５ｍｍ、フィルタ層２（内層）の厚みを０．７０ｍｍとした以外は、実施例１と同様にして、液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。
（実施例３）
フィルタ層１及び３（外層）の厚みを各々０．３５ｍｍ、フィルタ層２（内層）の厚みを０．３０ｍｍとした以外は、実施例１と同様にして、液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。
（実施例４）
フィルタ層１及び３（外層）の厚みを各々０．１０ｍｍ、フィルタ層２（内層）の厚みを０．８０ｍｍとした以外は、実施例１と同様にして、液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。
（実施例５）
フィルタ層１及び３（外層）の厚みを各々０．４０ｍｍ、フィルタ層２（内層）の厚みを０．２０ｍｍとした以外は、実施例１と同様にして、液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。
（比較例１）
孔径が１２μｍのフィルタ層１、孔径が３μｍのフィルタ層２が、積層された２層構造を有するステンレス製の液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。なお、得られたフィルタのフィルタ層１の厚みは０．５０ｍｍ、フィルタ層２の厚みは０．５０ｍｍであり、全体の厚みは１ｍｍであった。また、フィルタの外径は５ｍｍであった。
（比較例２）
孔径が３μｍのフィルタ層１の１層からなるステンレス製の液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。なお、得られたフィルタの全体の厚みは１ｍｍであった。また、フィルタの外径は５ｍｍであった。
（比較例３）
フィルタ層１の孔径を１２μｍとした以外は、比較例２と同様にして、液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。
（比較例４）
フィルタ層１及び３（外層）の厚みを各々０．０５ｍｍ、フィルタ層２（内層）の厚みを０．９０ｍｍとした以外は、実施例１と同様にして、液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。
（比較例５）
フィルタ層１及び３（外層）の厚みを各々０．４５ｍｍ、フィルタ層２（内層）の厚みを０．１０ｍｍとした以外は、実施例１と同様にして、液体クロマトグラフィー用フィルタを作製した。
（評価）
実施例１〜５及び比較例１〜５で得られた液体クロマトグラフィー用フィルタについて、以下の評価を行った。
（１）液体クロマトグラフィー用フィルタ及びメンブランフィルタの圧力上昇の評価
得られた液体クロマトグラフィー用フィルタをＰＥＥＫ製パッキンにはめ込み、流路に接続できるねじ部を設けたＰＥＥＫ製ホルダに装着した後、図２に示す液体クロマトグラフィーに設置した。
【００３５】
図２は、本評価において用いられる液体クロマトグラフィーの一部を示す模式図である。図２に示すように、移動層６は、送液ポンプ７、試料注入装置８及び液体クロマトグラフィー用フィルタ９を介してメンブランフィルタ１０へと送液される。なお、移動相６としてはｐＨ６の５０ｍｍｏｌ／ｌリン酸緩衝液を用い、流速１．５ｍＬ/分で送液した。また、メンブランフィルタ１０は、孔径０．６５μｍのメンブランフィルタを４枚重ねたものであり、液体クロマトグラフィー用フィルタ９を通過したものを捕捉するためのものであって、実際の分析系における分離カラム部の役割をする。
【００３６】
検体としては、ヒト健常人血を界面活性剤を含むｐＨ７のリン酸緩衝液によって２００倍に希釈したものを用い、上記ヒト健常人血を１０００検体連続して測定し、液体クロマトグラフィー用フィルタ及びメンブランフィルタの測定前の圧力値（０ＭＰａ）と１０００検体測定後の圧力値の差を求めた。結果を表１に示す。なお、表１の通液方向は、移動層の流入が、フィルタ層１、２、３の順（実施例１〜５、比較例４、比較例５）及びフィルタ層１、２の順（比較例１）の場合を通液方向１とし、フィルタ層３、２、１の順（実施例１）及びフィルタ層２、１の順（比較例１）の場合を通液方向２とした。
【００３７】
【表１】
表１に示すように、実施例１、２及び３の液体クロマトグラフィー用フィルタは、液体クロマトグラフィー用フィルタ圧力値、メンブランフィルタ圧力値ともに上昇がなかった。また、実施例１の液体クロマトグラフィー用フィルタは、通液方向１及び２の両方向からの通液に対して、圧力値の上昇がなかった。これは、どちらの向きに設置しても異物を充分に捕捉でき、かつ、多量検体測定時においても詰まり等の問題の発生が少ないことを示す。
【００３８】
なお、実施例４及び５の液体クロマトグラフィー用フィルタは、液体クロマトグラフィー用圧力値に若干の上昇があったが１０００検体測定可能なレベルであった。
【００３９】
一方、比較例１の液体クロマトグラフィー用フィルタは、通液方向１の場合にはフィルタ圧力値の上昇はなかったが、通液方向２の場合にはフィルタ圧力値の上昇があった。メンブランフィルタ圧力値の上昇は、両方向ともなかった。これは、比較例１の液体クロマトグラフィー用フィルタは、分離カラム部へ損害を与えないが、通液方向２の場合では、通液方向１に比べて使用できる期間が短いこと意味する。即ち、使用時に液体クロマトグラフィー用フィルタを設置する方向を間違えると、液体クロマトグラフィー用フィルタの寿命が短くなることを意味する。
【００４０】
なお、比較例２、４及び５の液体クロマトグラフィー用フィルタは、液体クロマトグラフィー用フィルタ圧力値は上昇したが、メンブランフィルタ圧力値の上昇はなかった。また、比較例３の液体クロマトグラフィー用フィルタは、液体クロマトグラフィー用フィルタ圧力値の上昇はなかったが、メンブランフィルタの圧力値が上昇した。
（２）Ｈｂの非特異吸着抑制効果の評価
実施例１の液体クロマトグラフィー用フィルタを、０．０１％のウシ血清アルブミンのリン酸緩衝溶液に４０℃で１時間浸漬することによって表面処理を行った。次いで、上記表面処理をした液体クロマトグラフィー用フィルタ及び上記表面処理をしていない液体クロマトグラフィー用フィルタを用いて、液体クロマトグラフィーシステム（島津社製ＬＣ−６Ａシステム）によって、以下の条件でＨｂ回収率試験を行った。
【００４１】
なお、Ｈｂ回収率は、同一検体を１０回測定した場合の後半３検体のピーク面積比の平均値から導出した。上記ピーク面積比は、液体クロマトグラフィー用フィルタをセットしない状態で得られるピーク面積を１００％とした場合の、上記表面処理をした液体クロマトグラフィー用フィルタ又は上記表面処理をしていない液体クロマトグラフィー用フィルタをセットしたときに得られるピーク面積の比である。従って、ピーク面積比が１００％に近い程、液体クロマトグラフィー用フィルタ表面へのＨｂの非特異吸着が抑制されていることを意味する。
【００４２】
移動相：Ａ液＝５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ５）
Ｂ液＝５００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ５）
流速：１．５ｍｌ／分
検出波長：４１５ｎｍ
測定検体： ヒト健常人血（界面活性剤を含むリン酸緩衝液（ｐＨ７）による２００倍希釈品）
【００４３】
【表２】
表２に示すように、上記表面処理をした液体クロマトグラフィー用フィルタの場合は、Ｈｂ回収率が１００％に近い値を示したのに対して、上記表面処理をしていない液体クロマトグラフィー用フィルタの場合は、非常に低い値を示した。これは、上記表面処理をしていない液体クロマトグラフィー用フィルタの場合には、液体クロマトグラフィー用フィルタ表面にＨｂが非特異吸着したためであると考えられる。即ち、非特異吸着が問題とならない検体を測定する場合には特に必要ではないが、非特異吸着が生じるような検体を測定する場合には、表面処理を施すことが非常に効果的であることがわかる。
【産業上の利用可能性】
【００４４】
本発明は、上記現状に鑑み、異物を効率的に捕捉することができ、かつ、異物が詰まることに起因する圧力上昇がない液体クロマトグラフィー用フィルタ及び該液体クロマトグラフィー用フィルタが装着された液体クロマトグラフィー用カラムを提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００４５】
【図１】本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタの一例である。
【図２】本発明の液体クロマトグラフィー用フィルタを含む液体クロマトグラフィーの一部である。
【符号の説明】
【００４６】
１ 液体クロマトグラフィー用フィルタ
２、４ 外層
３ 内層
５ 液体クロマトグラフィー
６ 移動層
７ 送液ポンプ
８ 試料注入装置
９ 液体クロマトグラフィー用フィルタ
１０ メンブランフィルタ
【特許請求の範囲】
【請求項１】
外層、内層及び外層が、この順で積層された３層構造からなる液体クロマトグラフィー用フィルタであって、前記外層は、前記内層よりも孔径が大きく、かつ、全体の厚みを１００としたときの厚みの比が、外層：内層：外層＝１０〜４０：２０〜８０：１０〜４０であることを特徴とする液体クロマトグラフィー用フィルタ。
【請求項２】
外層の孔径は７〜２０μｍであり、かつ、内層の孔径は０．１〜７μｍであることを特徴とする請求項１記載の液体クロマトグラフィー用フィルタ。
【請求項３】
全体の厚みが０．１〜１０ｍｍであることを特徴とする請求項１又は２記載の液体クロマトグラフィー用フィルタ。
【請求項４】
表面処理が施されていることを特徴とする請求項１、２又は３記載の液体クロマトグラフィー用フィルタ。
【請求項５】
表面処理は、疎水性物質の非特異吸着を抑制するものであることを特徴とする請求項４記載の液体クロマトグラフィー用フィルタ。
【請求項６】
分離カラム部を有する液体クロマトグラフィー用カラムであって、請求項１、２、３、４又は５記載の液体クロマトグラフィー用フィルタが分離カラム部の流路上流側又は流路下流側に装着されていることを特徴とする液体クロマトグラフィー用カラム。
【請求項１】
外層、内層及び外層が、この順で積層された３層構造からなる液体クロマトグラフィー用フィルタであって、前記外層は、前記内層よりも孔径が大きく、かつ、全体の厚みを１００としたときの厚みの比が、外層：内層：外層＝１０〜４０：２０〜８０：１０〜４０であることを特徴とする液体クロマトグラフィー用フィルタ。
【請求項２】
外層の孔径は７〜２０μｍであり、かつ、内層の孔径は０．１〜７μｍであることを特徴とする請求項１記載の液体クロマトグラフィー用フィルタ。
【請求項３】
全体の厚みが０．１〜１０ｍｍであることを特徴とする請求項１又は２記載の液体クロマトグラフィー用フィルタ。
【請求項４】
表面処理が施されていることを特徴とする請求項１、２又は３記載の液体クロマトグラフィー用フィルタ。
【請求項５】
表面処理は、疎水性物質の非特異吸着を抑制するものであることを特徴とする請求項４記載の液体クロマトグラフィー用フィルタ。
【請求項６】
分離カラム部を有する液体クロマトグラフィー用カラムであって、請求項１、２、３、４又は５記載の液体クロマトグラフィー用フィルタが分離カラム部の流路上流側又は流路下流側に装着されていることを特徴とする液体クロマトグラフィー用カラム。
【図１】
【図２】
【図２】
【公開番号】特開２００６−１８９４２７（Ｐ２００６−１８９４２７Ａ）
【公開日】平成１８年７月２０日（２００６．７．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−３５５１５３（Ｐ２００５−３５５１５３）
【出願日】平成１７年１２月８日（２００５．１２．８）
【出願人】（０００００２１７４）積水化学工業株式会社 (5,781)
【公開日】平成１８年７月２０日（２００６．７．２０）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年１２月８日（２００５．１２．８）
【出願人】（０００００２１７４）積水化学工業株式会社 (5,781)
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