病原性配座異性体についてのアッセイ
本発明は、非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料に病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば病原性配座異性体に試薬を結合させる条件下で接触させるステップと；試料中に病原性配座異性体がある場合、試薬へのその結合によって病原性配座異性体の存在を検出するステップと；によって、試料中の非プリオン病原性配座異性体の存在を検出する方法を提供し、病原性配座異性体特異的結合試薬は通例プリオンタンパク質断片に由来して、病原性プリオンタンパク質と優先的に相互作用する。コンフォメーション病を診断する方法も提供される。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
非プリオン病原性配座異性体の存在を検出する方法であって、
前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料に病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、複合体を形成するステップと；
前記試料中に前記非プリオン病原性配座異性体がある場合、前記病原性配座異性体特異的結合試薬へのその結合によって前記非プリオン病原性配座異性体を検出するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬がプリオンタンパク質断片に由来して、病原性プリオンタンパク質と優先的に相互作用する、方法。
【請求項２】
前記非プリオン病原性配座異性体がアミロイド疾患に関連する配座異性体である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記アミロイド疾患が全身性アミロイドーシス、タウオパチー、およびシヌクレイノパチーから成る群より選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記非プリオン病原性配座異性体が、アルツハイマー病、ＡＬＳ、免疫グロブリン関連疾患、血清アミロイドＡ関連疾患、およびＩＩ型糖尿病から成る群より選択される疾患に関連する配座異性体である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記非プリオン病原性配座異性体がアルツハイマー病配座異性体である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記アルツハイマー病配座異性体がアミロイドベータ（Ａβ）タンパク質である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記アルツハイマー病配座異性体がタウタンパク質である、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
前記病原性配座異性体特異的結合試薬が、ＰｒＰ１９−３０（配列番号２４２）、ＰｒＰ２３−３０（配列番号２４３）、ＰｒＰ１００−１１１（配列番号２４４）、ＰｒＰ１０１−１１０（配列番号２４５）、ＰｒＰ１５４−１６５（配列番号２４６）、ＰｒＰ２２６−２３７（配列番号２４７）、配列番号１４、配列番号５０、配列番号６８、
【化３５】
【化３６】
【化３７】
【化３８】
から成る群より選択される化合物に由来する、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記試料が、器官、全血、血液画分、血液成分、血漿、血小板、血清、脳脊髄液（ＣＳＦ）、脳組織、神経系組織、筋肉組織、骨髄、尿、涙、非神経系組織、生検または剖検から成る群より選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記試料が血漿または脳脊髄液を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記プリオンタンパク質断片がＰｒＰ１９−３０（配列番号２４２）、ＰｒＰ２３−３０（配列番号２４３）、ＰｒＰ１００−１１１（配列番号２４４）、ＰｒＰ１０１−１１０（配列番号２４５）、ＰｒＰ１５４−１６５（配列番号２４６）、ＰｒＰ２２６−２３７（配列番号２４７）、配列番号１４、配列番号５０および配列番号６８から成るペプチドの群より選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記プリオンタンパク質断片が、ＰｒＰ１９−３０（配列番号２４２）、ＰｒＰ２３−３０（配列番号２４３）、ＰｒＰ１００−１１１（配列番号２４４）、ＰｒＰ１０１−１１０（配列番号２４５）、配列番号１４、配列番号５０および配列番号６８から成る群より選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記病原性配座異性体特異的結合試薬が、配列番号２４２、配列番号２４３、配列番号２４４、配列番号２４５、配列番号２４６、配列番号２４７、配列番号１４、配列番号５０および配列番号６８から成る群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記病原性配座異性体特異的結合試薬が、配列番号２４２、配列番号２４３、配列番号２４４、配列番号２４５、配列番号１４、配列番号５０および配列番号６８から成る群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記病原性配座異性体特異的結合試薬が、
（ａ）配列番号２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、または２４１；
（ｂ）配列番号２２９、２３０、２３２、２３３、２３７、２３８、２３９、または２４０；
（ｃ）配列番号２３０、２３７、２３８、２３９、または２４０；
（ｄ）配列番号２４０；
（ｅ）
【化３９】
【化４０】
【化４１】
【化４２】
【化４３】
【化４４】
から成る群より選択されるペプトイド試薬を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記病原性配座異性体特異的結合試薬が生理学的ｐＨにおいて少なくとも３の正味の正電荷を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記試薬が生理学的ｐＨにおいて少なくとも４の正味の正電荷を有する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記病原性配座異性体特異的結合試薬が検出可能に標識される、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記試薬がビオチンによって検出可能に標識される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記試薬が固体担体に結合される、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
前記固体担体が、ニトロセルロース、ポリスチレンラテックス、ポリフッ化ビニル、ジアゾ化紙、ナイロン膜、活性化ビーズ、および磁気応答性ビーズから成る群より選択される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
非プリオン病原性配座異性体の存在を検出する方法であって、
前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料に病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、複合体を形成するステップと；
前記複合体にコンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬を、結合を可能にする条件下で接触させるステップと；
前記試料中に前記非プリオン病原性配座異性体がある場合、前記コンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬へのその結合によって、前記非プリオン病原性配座異性体の存在を検出するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬がプリオンタンパク質断片に由来して、病原性プリオンタンパク質と優先的に相互作用する、方法。
【請求項２３】
前記方法が、前記複合体の形成後に非結合試料物質を除去するステップをさらに含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記コンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬が標識抗体である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記非プリオン病原性配座異性体がＡβタンパク質であり、前記コンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬が抗Ａβ抗体である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２６】
非プリオン病原性配座異性体の存在を検出する方法であって、
前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料に病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、第１の複合体を形成するステップと；
非結合試料物質を除去するステップと；
前記非プリオン病原性配座異性体を前記第１の複合体から解離させて、それにより解離された非プリオン病原性配座異性体を提供するステップと；
前記解離された非プリオン病原性配座異性体に第１のコンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬を、結合を可能にする条件下で接触させて、第２の複合体を形成するステップと；
前記試料中に前記非プリオン病原性配座異性体がある場合、前記第２の複合体の形成を検出することによって、前記非プリオン病原性配座異性体の存在を検出するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬がプリオンタンパク質断片に由来して、病原性プリオンタンパク質と優先的に相互作用する、方法。
【請求項２７】
前記第２の複合体の形成が、検出可能に標識された第２のコンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬を使用することによって検出される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記病原性配座異性体特異的試薬が固体担体にカップリングされる、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
前記第１のコンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬が固体担体にカップリングされる、請求項２６に記載の方法。
【請求項３０】
前記非プリオン病原性配座異性体が、前記第１の複合体をチオシアン酸グアニジンに曝露することによって、前記第１の複合体から解離される、請求項２６に記載の方法。
【請求項３１】
前記非プリオン病原性配座異性体が、前記複合体を高ｐＨまたは低ｐＨに曝露することによって、前記第１の複合体から解離される、請求項２６に記載の方法。
【請求項３２】
前記解離後に高ｐＨまたは低ｐＨを中和するステップをさらに含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記非プリオン病原性配座異性体がＡβタンパク質であり、前記コンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬が抗Ａβ抗体である、請求項２６に記載の方法。
【請求項３４】
前記Ａβタンパク質が、前記複合体を高ｐＨ条件に曝露することによって、前記第１の複合体から解離される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記高ｐＨ条件が約８０℃にて約０．１Ｎ ＮａＯＨである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
非プリオン病原性配座異性体の存在を検出する方法であって、
前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料に第１の病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記第１の試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、第１の複合体を形成するステップと；
前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる前記試料に、検出可能な標識を含む第２の病原性配座異性体特異的結合試薬を、前記第１の複合体中の前記非プリオン病原性配座異性体への前記第２の試薬の結合を可能にする条件下で接触させるステップと；
試料中に前記非プリオン病原性配座異性体がある場合、前記第２の試薬へのその結合によって、前記非プリオン病原性配座異性体を検出するステップと；
を含み、前記第１および第２の病原性配座異性体特異的結合試薬がプリオンタンパク質断片に由来して、病原性プリオンタンパク質と優先的に相互作用する、方法。
【請求項３７】
非プリオン病原性配座異性体の存在を検出する方法であって、
（ａ）前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料にコンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、複合体を形成するステップと；
（ｂ）非結合試料物質を除去するステップと；
（ｃ）前記複合体に、検出可能な標識を含む病原性配座異性体特異的結合試薬を、前記非プリオン病原性配座異性体への前記病原性配座異性体特異的結合試薬の結合を可能にする条件下で接触させるステップと；
前記試料中に前記非プリオン病原性配座異性体がある場合、前記病原性配座異性体特異的結合試薬へのその結合によって、前記非プリオン病原性配座異性体を検出するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬がプリオンタンパク質断片に由来して、病原性プリオンタンパク質と優先的に相互作用する、方法。
【請求項３８】
非プリオン病原性配座異性体の存在を検出する方法であって、
病原性配座異性体特異的結合試薬を含む固体担体を提供するステップと；
前記固体担体に検出可能に標識されたリガンドを結合させるステップであって、前記病原性配座異性体特異的結合試薬の前記検出可能に標識されたリガンドに対する結合親和性は、前記試薬の前記非プリオン病原性配座異性体に対する結合親和性よりも弱い、ステップと；
試料に前記固体担体を、前記試料中に存在するときに前記非プリオン病原性配座異性体が前記試薬に結合して前記リガンドを置換するのを可能にする条件下で、結合させるステップと；
前記試薬と前記試料からの前記非プリオン病原性配座異性体との間に形成された複合体を検出するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬がプリオンタンパク質断片に由来して、病原性プリオンタンパク質と優先的に相互作用する、方法。
【請求項３９】
非プリオン病原性配座異性体と非プリオン非病原性配座異性体とを区別する方法であって、
前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料に病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、複合体を形成するステップと；
前記病原性配座異性体の前記試薬への結合によって、前記非プリオン病原性配座異性体と前記非プリオン非病原性配座異性体とを区別するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬がプリオンタンパク質断片に由来して、病原性プリオンタンパク質と優先的に相互作用する、方法。
【請求項４０】
非プリオンコンフォメーション病を診断する方法であって、
非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料に病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、複合体を形成するステップと；
前記試料中に前記非プリオン病原性配座異性体がある場合、前記試薬へのその結合によって、前記非プリオン病原性配座異性体を検出するステップと；
前記非プリオン病原性配座異性体が検出された場合にコンフォメーション病を診断するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬がプリオンタンパク質断片に由来して、病原性プリオンタンパク質と優先的に相互作用する、方法。
【請求項４１】
非プリオン病原性配座異性体の存在を検出する方法であって、
前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料に病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、複合体を形成するステップと；
前記試料中に前記非プリオン病原性配座異性体がある場合、前記病原性配座異性体特異的結合試薬へのその結合によって前記非プリオン病原性配座異性体を検出するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬が配列番号２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、または２４１を含むペプトイド領域を含む、方法。
【請求項４２】
非プリオン病原性配座異性体の存在を検出する方法であって、
前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料に病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、複合体を形成するステップと；
前記試料中に前記非プリオン病原性配座異性体がある場合、前記病原性配座異性体特異的結合試薬へのその結合によって前記非プリオン病原性配座異性体を検出するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬が、
【化４５】
【化４６】
【化４７】
【化４８】
から選択される、方法。
【請求項４３】
病原性アルツハイマー病配座異性体の存在を検出する方法であって、
前記病原性アルツハイマー病配座異性体を含有することが疑われる試料に病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記病原性アルツハイマー病配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、複合体を形成するステップと；
前記複合体にコンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬を、結合を可能にする条件下で接触させるステップと；
前記試料中に前記病原性アルツハイマー病配座異性体がある場合、前記コンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬へのその結合によって、前記病原性アルツハイマー病配座異性体の存在を検出するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬が
【化４９】
である、方法。
【請求項４４】
前記病原性アルツハイマー病配座異性体がＡβタンパク質であり、前記コンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬が抗Ａβ抗体である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記病原性アルツハイマー病配座異性体がタウタンパク質であり、前記コンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬が抗タウ抗体である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４６】
前記病原性配座異性体特異的結合試薬が磁気ビーズにカップリングされる、請求項４３に記載の方法。
【請求項１】
非プリオン病原性配座異性体の存在を検出する方法であって、
前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料に病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、複合体を形成するステップと；
前記試料中に前記非プリオン病原性配座異性体がある場合、前記病原性配座異性体特異的結合試薬へのその結合によって前記非プリオン病原性配座異性体を検出するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬がプリオンタンパク質断片に由来して、病原性プリオンタンパク質と優先的に相互作用する、方法。
【請求項２】
前記非プリオン病原性配座異性体がアミロイド疾患に関連する配座異性体である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記アミロイド疾患が全身性アミロイドーシス、タウオパチー、およびシヌクレイノパチーから成る群より選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記非プリオン病原性配座異性体が、アルツハイマー病、ＡＬＳ、免疫グロブリン関連疾患、血清アミロイドＡ関連疾患、およびＩＩ型糖尿病から成る群より選択される疾患に関連する配座異性体である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記非プリオン病原性配座異性体がアルツハイマー病配座異性体である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記アルツハイマー病配座異性体がアミロイドベータ（Ａβ）タンパク質である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記アルツハイマー病配座異性体がタウタンパク質である、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
前記病原性配座異性体特異的結合試薬が、ＰｒＰ１９−３０（配列番号２４２）、ＰｒＰ２３−３０（配列番号２４３）、ＰｒＰ１００−１１１（配列番号２４４）、ＰｒＰ１０１−１１０（配列番号２４５）、ＰｒＰ１５４−１６５（配列番号２４６）、ＰｒＰ２２６−２３７（配列番号２４７）、配列番号１４、配列番号５０、配列番号６８、
【化３５】
【化３６】
【化３７】
【化３８】
から成る群より選択される化合物に由来する、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記試料が、器官、全血、血液画分、血液成分、血漿、血小板、血清、脳脊髄液（ＣＳＦ）、脳組織、神経系組織、筋肉組織、骨髄、尿、涙、非神経系組織、生検または剖検から成る群より選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記試料が血漿または脳脊髄液を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記プリオンタンパク質断片がＰｒＰ１９−３０（配列番号２４２）、ＰｒＰ２３−３０（配列番号２４３）、ＰｒＰ１００−１１１（配列番号２４４）、ＰｒＰ１０１−１１０（配列番号２４５）、ＰｒＰ１５４−１６５（配列番号２４６）、ＰｒＰ２２６−２３７（配列番号２４７）、配列番号１４、配列番号５０および配列番号６８から成るペプチドの群より選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記プリオンタンパク質断片が、ＰｒＰ１９−３０（配列番号２４２）、ＰｒＰ２３−３０（配列番号２４３）、ＰｒＰ１００−１１１（配列番号２４４）、ＰｒＰ１０１−１１０（配列番号２４５）、配列番号１４、配列番号５０および配列番号６８から成る群より選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記病原性配座異性体特異的結合試薬が、配列番号２４２、配列番号２４３、配列番号２４４、配列番号２４５、配列番号２４６、配列番号２４７、配列番号１４、配列番号５０および配列番号６８から成る群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記病原性配座異性体特異的結合試薬が、配列番号２４２、配列番号２４３、配列番号２４４、配列番号２４５、配列番号１４、配列番号５０および配列番号６８から成る群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記病原性配座異性体特異的結合試薬が、
（ａ）配列番号２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、または２４１；
（ｂ）配列番号２２９、２３０、２３２、２３３、２３７、２３８、２３９、または２４０；
（ｃ）配列番号２３０、２３７、２３８、２３９、または２４０；
（ｄ）配列番号２４０；
（ｅ）
【化３９】
【化４０】
【化４１】
【化４２】
【化４３】
【化４４】
から成る群より選択されるペプトイド試薬を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記病原性配座異性体特異的結合試薬が生理学的ｐＨにおいて少なくとも３の正味の正電荷を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記試薬が生理学的ｐＨにおいて少なくとも４の正味の正電荷を有する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記病原性配座異性体特異的結合試薬が検出可能に標識される、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記試薬がビオチンによって検出可能に標識される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記試薬が固体担体に結合される、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
前記固体担体が、ニトロセルロース、ポリスチレンラテックス、ポリフッ化ビニル、ジアゾ化紙、ナイロン膜、活性化ビーズ、および磁気応答性ビーズから成る群より選択される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
非プリオン病原性配座異性体の存在を検出する方法であって、
前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料に病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、複合体を形成するステップと；
前記複合体にコンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬を、結合を可能にする条件下で接触させるステップと；
前記試料中に前記非プリオン病原性配座異性体がある場合、前記コンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬へのその結合によって、前記非プリオン病原性配座異性体の存在を検出するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬がプリオンタンパク質断片に由来して、病原性プリオンタンパク質と優先的に相互作用する、方法。
【請求項２３】
前記方法が、前記複合体の形成後に非結合試料物質を除去するステップをさらに含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記コンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬が標識抗体である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記非プリオン病原性配座異性体がＡβタンパク質であり、前記コンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬が抗Ａβ抗体である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２６】
非プリオン病原性配座異性体の存在を検出する方法であって、
前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料に病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、第１の複合体を形成するステップと；
非結合試料物質を除去するステップと；
前記非プリオン病原性配座異性体を前記第１の複合体から解離させて、それにより解離された非プリオン病原性配座異性体を提供するステップと；
前記解離された非プリオン病原性配座異性体に第１のコンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬を、結合を可能にする条件下で接触させて、第２の複合体を形成するステップと；
前記試料中に前記非プリオン病原性配座異性体がある場合、前記第２の複合体の形成を検出することによって、前記非プリオン病原性配座異性体の存在を検出するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬がプリオンタンパク質断片に由来して、病原性プリオンタンパク質と優先的に相互作用する、方法。
【請求項２７】
前記第２の複合体の形成が、検出可能に標識された第２のコンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬を使用することによって検出される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記病原性配座異性体特異的試薬が固体担体にカップリングされる、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
前記第１のコンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬が固体担体にカップリングされる、請求項２６に記載の方法。
【請求項３０】
前記非プリオン病原性配座異性体が、前記第１の複合体をチオシアン酸グアニジンに曝露することによって、前記第１の複合体から解離される、請求項２６に記載の方法。
【請求項３１】
前記非プリオン病原性配座異性体が、前記複合体を高ｐＨまたは低ｐＨに曝露することによって、前記第１の複合体から解離される、請求項２６に記載の方法。
【請求項３２】
前記解離後に高ｐＨまたは低ｐＨを中和するステップをさらに含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記非プリオン病原性配座異性体がＡβタンパク質であり、前記コンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬が抗Ａβ抗体である、請求項２６に記載の方法。
【請求項３４】
前記Ａβタンパク質が、前記複合体を高ｐＨ条件に曝露することによって、前記第１の複合体から解離される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記高ｐＨ条件が約８０℃にて約０．１Ｎ ＮａＯＨである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
非プリオン病原性配座異性体の存在を検出する方法であって、
前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料に第１の病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記第１の試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、第１の複合体を形成するステップと；
前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる前記試料に、検出可能な標識を含む第２の病原性配座異性体特異的結合試薬を、前記第１の複合体中の前記非プリオン病原性配座異性体への前記第２の試薬の結合を可能にする条件下で接触させるステップと；
試料中に前記非プリオン病原性配座異性体がある場合、前記第２の試薬へのその結合によって、前記非プリオン病原性配座異性体を検出するステップと；
を含み、前記第１および第２の病原性配座異性体特異的結合試薬がプリオンタンパク質断片に由来して、病原性プリオンタンパク質と優先的に相互作用する、方法。
【請求項３７】
非プリオン病原性配座異性体の存在を検出する方法であって、
（ａ）前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料にコンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、複合体を形成するステップと；
（ｂ）非結合試料物質を除去するステップと；
（ｃ）前記複合体に、検出可能な標識を含む病原性配座異性体特異的結合試薬を、前記非プリオン病原性配座異性体への前記病原性配座異性体特異的結合試薬の結合を可能にする条件下で接触させるステップと；
前記試料中に前記非プリオン病原性配座異性体がある場合、前記病原性配座異性体特異的結合試薬へのその結合によって、前記非プリオン病原性配座異性体を検出するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬がプリオンタンパク質断片に由来して、病原性プリオンタンパク質と優先的に相互作用する、方法。
【請求項３８】
非プリオン病原性配座異性体の存在を検出する方法であって、
病原性配座異性体特異的結合試薬を含む固体担体を提供するステップと；
前記固体担体に検出可能に標識されたリガンドを結合させるステップであって、前記病原性配座異性体特異的結合試薬の前記検出可能に標識されたリガンドに対する結合親和性は、前記試薬の前記非プリオン病原性配座異性体に対する結合親和性よりも弱い、ステップと；
試料に前記固体担体を、前記試料中に存在するときに前記非プリオン病原性配座異性体が前記試薬に結合して前記リガンドを置換するのを可能にする条件下で、結合させるステップと；
前記試薬と前記試料からの前記非プリオン病原性配座異性体との間に形成された複合体を検出するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬がプリオンタンパク質断片に由来して、病原性プリオンタンパク質と優先的に相互作用する、方法。
【請求項３９】
非プリオン病原性配座異性体と非プリオン非病原性配座異性体とを区別する方法であって、
前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料に病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、複合体を形成するステップと；
前記病原性配座異性体の前記試薬への結合によって、前記非プリオン病原性配座異性体と前記非プリオン非病原性配座異性体とを区別するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬がプリオンタンパク質断片に由来して、病原性プリオンタンパク質と優先的に相互作用する、方法。
【請求項４０】
非プリオンコンフォメーション病を診断する方法であって、
非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料に病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、複合体を形成するステップと；
前記試料中に前記非プリオン病原性配座異性体がある場合、前記試薬へのその結合によって、前記非プリオン病原性配座異性体を検出するステップと；
前記非プリオン病原性配座異性体が検出された場合にコンフォメーション病を診断するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬がプリオンタンパク質断片に由来して、病原性プリオンタンパク質と優先的に相互作用する、方法。
【請求項４１】
非プリオン病原性配座異性体の存在を検出する方法であって、
前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料に病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、複合体を形成するステップと；
前記試料中に前記非プリオン病原性配座異性体がある場合、前記病原性配座異性体特異的結合試薬へのその結合によって前記非プリオン病原性配座異性体を検出するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬が配列番号２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、または２４１を含むペプトイド領域を含む、方法。
【請求項４２】
非プリオン病原性配座異性体の存在を検出する方法であって、
前記非プリオン病原性配座異性体を含有することが疑われる試料に病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記非プリオン病原性配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、複合体を形成するステップと；
前記試料中に前記非プリオン病原性配座異性体がある場合、前記病原性配座異性体特異的結合試薬へのその結合によって前記非プリオン病原性配座異性体を検出するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬が、
【化４５】
【化４６】
【化４７】
【化４８】
から選択される、方法。
【請求項４３】
病原性アルツハイマー病配座異性体の存在を検出する方法であって、
前記病原性アルツハイマー病配座異性体を含有することが疑われる試料に病原性配座異性体特異的結合試薬を、存在するならば前記病原性アルツハイマー病配座異性体への前記試薬の結合を可能にする条件下で接触させて、複合体を形成するステップと；
前記複合体にコンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬を、結合を可能にする条件下で接触させるステップと；
前記試料中に前記病原性アルツハイマー病配座異性体がある場合、前記コンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬へのその結合によって、前記病原性アルツハイマー病配座異性体の存在を検出するステップと；
を含み、前記病原性配座異性体特異的結合試薬が
【化４９】
である、方法。
【請求項４４】
前記病原性アルツハイマー病配座異性体がＡβタンパク質であり、前記コンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬が抗Ａβ抗体である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記病原性アルツハイマー病配座異性体がタウタンパク質であり、前記コンフォメーション病タンパク質特異的結合試薬が抗タウ抗体である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４６】
前記病原性配座異性体特異的結合試薬が磁気ビーズにカップリングされる、請求項４３に記載の方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５−１】
【図５−２】
【図５−３】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９（Ａ）】
【図９（Ｂ）】
【図９（Ｃ）】
【図９（Ｄ）】
【図９（Ｅ）】
【図９（Ｆ）】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５Ａ】
【図１５Ｂ】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５−１】
【図５−２】
【図５−３】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９（Ａ）】
【図９（Ｂ）】
【図９（Ｃ）】
【図９（Ｄ）】
【図９（Ｅ）】
【図９（Ｆ）】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５Ａ】
【図１５Ｂ】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【公表番号】特表２０１１−５２０１０８（Ｐ２０１１−５２０１０８Ａ）
【公表日】平成２３年７月１４日（２０１１．７．１４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５０７６２７（Ｐ２０１１−５０７６２７）
【出願日】平成２１年４月２９日（２００９．４．２９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０４２１８５
【国際公開番号】ＷＯ２００９／１３４９４２
【国際公開日】平成２１年１１月５日（２００９．１１．５）
【出願人】（５０４３８９９９１）ノバルティス アーゲー (806)
【公表日】平成２３年７月１４日（２０１１．７．１４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年４月２９日（２００９．４．２９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０４２１８５
【国際公開番号】ＷＯ２００９／１３４９４２
【国際公開日】平成２１年１１月５日（２００９．１１．５）
【出願人】（５０４３８９９９１）ノバルティス アーゲー (806)
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