高水溶性ｐ−ボロノフェニルアラニン含有組成物
【課題】ｐ−ボロノフェニルアラニンを従来に比べ高濃度で水に溶解させて中性付近のｐＨの水溶液を与えることを可能にする方法、及びそれにより得られる水溶液を提供すること。
【解決手段】ｐ−ボロノフェニルアラニン及びメグルミンを含有してなり、ｐ−ボロノフェニルアラニンに対するメグルミン含有量が、モル比で少なくとも０．８である、中性付近のｐＨを有する水溶液の形態の、又は中性付近のｐＨを有する水溶液を与える乾燥物の形態である、医薬組成物。
【解決手段】ｐ−ボロノフェニルアラニン及びメグルミンを含有してなり、ｐ−ボロノフェニルアラニンに対するメグルミン含有量が、モル比で少なくとも０．８である、中性付近のｐＨを有する水溶液の形態の、又は中性付近のｐＨを有する水溶液を与える乾燥物の形態である、医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ホウ素含有医薬組成物に関し、特に、ホウ素中性子捕捉療法においてホウ素源として使用する、水溶性を高めたホウ素含有組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
１９３０年代に米国で中性子捕捉療法が提唱されて以来（Locher GL. Biological effects and therapeutic possibilities of neutrons. Am J Roentgenol Radium Ther,
1936, 36, 1-13）、中断を伴いながらも、腫瘍の治療におけるホウ素（10Ｂ）中性子捕捉療法の可能性が、動物及びヒトの腫瘍に対する効果の検討、患者に投与するに適した製剤形態、臨床使用に適した小型原子炉（中性子源）の開発というそれぞれの側面において、長年にわたり検討されてきた。
【０００３】
ホウ素中性子捕捉療法（boron neutron capture therapy：ＢＮＣＴ）は、10Ｂ（天然のホウ素の略１／５を占める同位体である）を腫瘍塊に取り込ませておき、腫瘍塊を狙って比較的低エネルギーの中性子（熱中性子又は熱外中性子等）のビームを照射して10Ｂに核反応〔10Ｂ（ｎ，αγ）7Ｌｉ〕を起こさせ、それにより生じたα粒子で腫瘍細胞を破壊する治療方法である。生じたα粒子は線エネルギー付与（linear energy transfer：ＬＥＴ：飛程の単位長さ当りに平均して失うエネルギー）が大きく、生体内での飛程がほぼ癌細胞１個分に相当する５〜１０μｍと非常に短いため、核反応を起こした10Ｂを含有していた細胞及びこれに隣接した細胞のみを破壊する。従って、10Ｂを腫瘍塊に取り込ませておき、これに焦点を当てて身体外部から熱中性子線等を照射すれば、正常細胞を殆ど傷つけることなく癌細胞を確実に破壊することが可能である。ホウ素中性子捕捉療法を用いた治療照射は、米国では１９５０年代から６０年代始めにかけて既に試みられており、日本では、脳腫瘍に対し１９６８年に、悪性黒色種（メラノーマ）に対し１９８７年に、それぞれ治療照射が行われ、その後症例が蓄積されてきた。
【０００４】
ホウ素原子を必要量に患者へ投与にでき、且つ癌細胞に移行させ易くするためには、適切なホウ素含有化合物の水溶液を調製する必要がある。これに適した化合物としてフェニルアラニンのパラ位をジヒドロボリル基で置換した形の構造を有する、ｐ−ボロノフェニルアラニン（以下、「ＢＰＡ」ともいう。）、
【０００５】
【化１】
【０００６】
が知られている。ＢＰＡには、フェニルアラニン部分が天然のＬ−フェニルアラニンと同じ型の立体配置であるＬ−ＢＰＡ、Ｄ型であるＤ−ＢＰＡ、及びラセミ体であるＤＬ−ＢＰＡがあり、これらのうち特にＬ体が、悪性黒色腫等のような腫瘍組織に最も取り込まれ易いとされていることから、主として用いられている。ＢＰＡは、それ単独では生理的ｐＨでの溶解性が極めて乏しい一方、効果的なホウ素中性子捕捉療法のためには多量の10Ｂ（ＢＰＡ換算で例えば、３０ｇ／６０ｋｇ体重）を患者に注入するのが好ましいことが明らかになるにつれ、水に対するＢＰＡの溶解性を改善するために様々な方法が試みられてきた。それらのうち、特に、ＢＰＡと単糖類（特にフルクトース）とを水中で混合し、混合液のｐＨを塩基（水酸化ナトリウム等）により１０まで高めて溶解させてＢＰＡフルクトース錯体を形成させ、酸（塩酸等）で生理的ｐＨ（７．４）に再調整するという方法が知られている（特許文献１参照）。また、ＢＰＡに水、強塩基（水酸化ナトリウム等）、及びフルクトース等の単糖類、二糖類又はソルビトール等のポリオールを加えて塩基性条件下（ｐＨ８〜１０）に錯体水溶液とし、イオン交換媒体で処理してｐＨを約７．３〜７．５に戻すことによりＢＰＡ錯体溶液を製造する方法も知られている（特許文献２参照）。フルクトースは錯体形成により、室温でＢＰＡを約２．６ｗ／ｖ％程度の濃度まで水に溶解させることができ、実際これを用いて、脳腫瘍や中皮腫等の患者で臨床試験が行われ、目覚しく且つ腫瘍選択的な効果が得られつつあり、臨床使用に適した小型の原子炉の開発と相俟って、ホウ素中性子捕捉療法の現実的利用に対する期待が非常に高まっている。
【０００７】
しかしながら、ＢＰＡフルクトース錯体の水溶性は不十分である。すなわち、例えば体重６０ｋｇの患者用にＢＰＡの３０ｇ相当量を室温でフルクトースとの錯体水溶液として調製すると、溶液量は少なくとも１．２Ｌ程度と、極めて大きな液量となる。これを注入することは、患者にとって身体的負担が大きく、また医療機関にとっても、腫瘍塊への中性子照射に先立つ患者への水溶液の点滴静注に長時間要することとなり、不都合である。
【０００８】
また、上記のとおりＢＰＡフルクトース錯体は、ＢＰＡとフルクトースとを水酸化ナトリウム等でアルカリ性に調整した水中で混合して初めて得られ、混合物を十分に撹拌し完全に溶液となったことを確認した上で、ｐＨが中性付近の所定範囲へと再調整される。そのような水溶液を患者に投与し得る製剤として調製するには、ｐＨの調整工程を含む溶解操作全体が厳重な無菌環境下で行われる必要があるが、治療に際し医療機関でそのような煩雑な手順により水溶液を調製することは、現実的に不可能である。一方、ＢＰＡフルクトース錯体の水溶液を凍結乾燥し粉末として医療機関に供給することも考えられるが、ＢＰＡフルクトース錯体の凍結乾燥粉末は、室温で十分量の水に対する溶解速度が極めて遅い（上記特許文献２参照）。このため、ＢＰＡフルクトース錯体の凍結乾燥粉末を医療機関に供給し、用時そこで水溶液へと復元するという使用形態も、現実的でない。従って、ＢＰＡフルクトース錯体は、水溶液の形で製品化され出荷されることとなる。ＢＰＡフルクトース錯体水溶液は、上記のとおり水溶性が不十分であるため水溶液の調製に多量の水を要し、製品化したときの包装液量及び重量が大きくなり、これは輸送や保管のコスト上昇要因となる。
【０００９】
一方、メグルミン、
【００１０】
【化２】
【００１１】
は、塩基性化合物であり、特定の有機ヨウ素造影剤（アミドトリゾ酸、アジピオドン、イオタラム酸、メトリゾ酸、ヨーダミド、イオトロクス酸、ヨードキサム酸、及びイオキサグル酸。）を中和し溶解させる溶解剤として用いられているが、これらの有機ヨウ素造影剤は、何れも２，４，６−トリヨード安息香酸部分を有する酸であり、ＢＰＡのようにアミノ基とカルボキシル基が分子内塩を形成しているタイプの化合物ではない。
【特許文献１】米国特許第５４９２９００号
【特許文献２】米国特許第６１６９０７６号
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
上記背景において、本発明はＢＰＡを従来に比べ高濃度で水に溶解させて中性付近のｐＨの水溶液を与えることを可能にする方法、及びそのような方法で得られる、ＢＰＡを従来に比べ高濃度まで含有し得る中性付近のｐＨの水溶液を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明者等は、上記目的の達成に向けて種々検討した結果、ＢＰＡにメグルミン及び水を加えることにより得られる、アルカリ性の混合液中にＢＰＡが高濃度に溶解して存在できること、及び、この水溶液に酸を加えて中性付近にｐＨを調整してもＢＰＡは高濃度に溶解した状態に留まること、更に、そのようにして中和した水溶液を凍結乾燥して得られる粉末は、水と混合したとき容易に溶解して、元の高濃度にＢＰＡを含んだ水溶液を与えることを見出した。本発明は、これらの発見に基づき更に検討を行って完成させたものである。すなわち、本発明は以下を提供する。
【００１４】
１．ｐ−ボロノフェニルアラニン及びメグルミンを含有してなる、医薬組成物。
２．ｐ−ボロノフェニルアラニンに対するメグルミン含有量が、モル比で少なくとも０．８である、上記１の医薬組成物。
３．中性付近のｐＨを有する水溶液である、上記１又は２の医薬組成物。
４．ｐ−ボロノフェニルアラニンの濃度が、少なくとも３ｗ／ｖ％である、上記３の医薬組成物。
５．ｐ−ボロノフェニルアラニン及びメグルミンを含有してなる乾燥製剤である、上記１又は２の医薬組成物。
６．水を加えて復元したとき中性付近のｐＨの水溶液を与えるものである、上記５の医薬組成物。
７．ホウ素中性子捕捉療法用剤である、上記１ないし６の何れかの医薬組成物。
８．ｐ−ボロノフェニルアラニンがＬ−ｐ−ボロノフェニルアラニンである、上記１ないし７の何れかの医薬組成物。
９．ｐ−ボロノフェニルアラニンとメグルミンとを水中で混合して水溶液とするステップと、該水溶液に酸を加えて中性付近のｐＨに調整するステップとを含むものである、ｐ−ボロノフェニルアラニン含有水溶液の製造方法。
１０．ｐ−ボロノフェニルアラニンに対するメグルミン含有量が、モル比で少なくとも０．８である、上記９の製造方法。
１１．該水溶液中のｐ−ボロノフェニルアラニンの濃度が、少なくとも３ｗ／ｖ％である、上記９又は１０の製造方法。
１２．上記９ないし１１の何れかの製造方法により得られるｐ−ボロノフェニルアラニン含有水溶液を凍結乾燥するステップを更に含んでなるものである、ｐ−ボロノフェニルアラニン含有組成物の製造方法。
１３．ｐ−ボロノフェニルアラニンがＬ−ｐ−ボロノフェニルアラニンである、上記９ないし１２の何れかの製造方法。
【発明の効果】
【００１５】
上記各構成になる本発明は、１０ｗ／ｖ％を超える高濃度のＢＰＡ水溶液を与えることができる。これはＢＰＡフルクトース錯体で得られる濃度２．６ｗ／ｖ％に比し約４倍高濃度であるから、ホウ素中性子捕捉療法において患者に投与されるホウ素含有組成物の液量の大幅な低減（１／４）を可能にする。これは患者の負担を減らし、また点滴時間の短縮及び保管スペースの縮小を通じて医療機関にも好都合である。更に、本発明により得られる医薬組成物は、凍結乾燥等により乾燥物とした後、注射用蒸留水や中性の緩衝液で簡単に溶解して復元することができるから、そのような水を含まない固形製剤の形で医療機関に供給することもでき、それにより輸送コスト、保管コストの抑制も可能となる。また、本発明の水溶液はＢＰＡフルクトース錯体水溶液に比して保存安定性が顕著に高いという利点を有する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
本発明において、ｐ−ボロノフェニルアラニン（ＢＰＡ）としては、そのフェニルアラニン部分の立体配置に関しＤ型、Ｌ型、ＤＬ型の何れの配置のものも用いることができる。但し、癌細胞への取込効率はＬ型の方がＤ型より高いとされている点を考慮すれば、Ｌ型が最も好ましく、次いでＤＬ型が好ましい。
【００１７】
本発明の組成物において、ＢＰＡ量に対するメグルミン量の比率に明確な下限はない。但し、特に高濃度にＢＰＡを溶解させるには、ＢＰＡ量に対するメグルミン量は、好ましくはモル比で０．８以上であり、このときＢＰＡを約７ｗ／ｖ％まで溶解させることができる。より好ましくは、ＢＰＡ量に対するメグルミン量はモル比で１．０であり、このときＢＰＡを約９ｗ／ｖ％まで溶解させることができる。特に好ましくは、ＢＰＡ量に対するメグルミン量はモル比で１．１０以上であり、このときＢＰＡを１０．４ｗ／ｖ％まで溶解させることができる。もっとも、そこまで高くないＢＰＡ濃度（例えば３〜５ｗ／ｖ％）でよい場合には、メグルミン量をこれより減らすこともできる。他方、ＢＰＡを水に高濃度に溶解させるという面においてＢＰＡ量に対するメグルミン量のモル比に明確な上限はないが、過剰にメグルミンを加えても効果は比例しないため、通常モル比２．５までに止めることが好ましい。従って、ＢＰＡ量に対するメグルミン量は、通常は、モル比で０．８〜２．５の範囲で適宜設定すればよく、例えば、１．０〜２．０、１．１０〜１．５等とすればよい。
【００１８】
本発明の水溶液は、ＢＰＡとメグルミンとを水中で混合し、得られたアルカリ性の水溶液に酸を加えて中性付近のｐＨへと調整することにより、簡単に調製することができる。水溶液製造時の温度は特に限定されず、単に室温で行うことができ、ＢＰＡフルクトース錯体溶液の製造時のような加熱（６０℃）を要としない。本発明の水溶液調製後、必要に応じフィルター滅菌を施すことができる。
【００１９】
本発明の水溶液において、「ほぼ中性のｐＨ」とは、ヒト血液の生理的ｐＨ（ｐＨ７．４を中心に変動）の付近であることをいう。本発明のＢＰＡメグルミン水溶液は輸液に混ぜて投与するのが一般的投与方法になると考えられることから、輸液に含まれる緩衝剤による緩衝効果も受けるため、厳密にｐＨ７．４とする必要はなく、例えば、ｐＨ６．０〜ｐＨ８．０などとしてよく、これは本発明における「中性付近のｐＨ」に含まれる。本発明の水性溶液は中性付近で安定性が高く、また中性付近でｐＨの高低は安定性に殆ど影響を及ぼさないことが本発明の完成過程において判明している。従って、本発明の水溶液のｐＨは中性付近において、製品としての使用に便利なように適宜に設定すればよく、例えば、血液の生理的ｐＨにより近いｐＨ６．２〜８．０、又はｐＨ６．５〜７．９、又は更に６．５〜７．７等としてもよいが、そうすることは必須ではない。
【００２０】
本発明の水溶液中のＢＰＡ濃度に特に限定はなく、適宜設定することができる。但し、一般には従来のＢＰＡフルクトース錯体水溶液に比して高い濃度のものとすることが好ましい。それにより患者に投与する水溶液の量を減らすことができるからである。従って、ＢＰＡ濃度として例えば、３．０％以上とすることが好ましい。
【００２１】
ＢＰＡと水及びメグルミンを混合して水溶液とした後にｐＨを中性付近に戻すために添加される酸としては、その目的に適い、且つ医薬品に使用できる酸である限り特に限定はないが、最も一般的に使用される好ましい酸の一つとして、塩酸を挙げることができる。
【００２２】
本発明の医薬組成物は、その安定性（溶解性、保存安定性）に実質的な悪影響を及ぼさない限り、ＢＰＡ、水及びメグルミン以外の成分が含有されることを排除しない。ｐＨ調整に際して添加される酸の共役塩基（塩酸の場合、Ｃｌ-）は含有されることを当然の前提としているが、それ以外にも例えば、ｐＨの調製時の微調整に用いることのできる炭酸水素ナトリウム等のｐＨ調製剤由来の成分を含んでいてもよい。
【００２３】
本発明の医薬組成物は、水溶液の形で製品として供給してもよいが、また、ＢＰＡメグルミン水溶液を乾燥させ、乾燥物を溶解用の包装に封入した固形製剤として供給してもよい。ＢＰＡメグルミン水溶液の乾燥には凍結乾燥を用いるのが便利であるが、それ以外の方法でも注射に適した無菌の製剤が供給できる方法であればよいから、乾燥方法は特に限定されない。凍結乾燥本発明の医薬組成物は、凍結乾燥物の形態でも高い経時的安定性を有しており、用時これに注射用蒸留水を添加して手で振ることにより容易に水溶液の形へと復元できる。
【実施例】
【００２４】
以下、比較例及び実施例を参照して本発明を更に詳細に説明するが、本発明が実施例に限定されることは意図しない。なお以下で使用したＢＰＡは全て、ホウ素全体に対する10Ｂの割合を天然の約２０％から９５％へと濃縮したホウ素を用い常法により合成したもの（ステラケミファ（株）製）であるが、ホウ素の質量数は化学的性質に影響しないから、実施例で得られた結果は10Ｂを何れの比率で含むＢＰＡについても当てはまるものである。
【００２５】
〔比較例１〕ＢＰＡフルクトース水溶液の調製
ＢＰＡフルクトース錯体水溶液を次のとおりにして調製した。事前の検討により、水溶液の総液量は、フルクトースを用いてＢＰＡを室温で完全に水に溶解させることができるほぼ最少の液量（従って室温での調製でほぼ最高のＢＰＡ濃度とし得る液量）となるように。すなわち、Ｌ−ＢＰＡ３０ｇとフルクトース６６．７ｇとを水９００ｍＬに加え、室温にて撹拌しつつ１mol/L水酸化ナトリウム１６６ｍＬを加えて溶解させた（溶解完了時のｐＨ９）。室温で３０分間静置しＢＰＡフルクトース錯体を形成させた後、１mol/L塩酸と炭酸水素ナトリウムによりｐＨ７．２に調整し（総液量１２４０ｍＬ）、次いで０．２２μｍのフィルターで濾過した。得られた水溶液のＢＰＡ濃度は、２．４ｗ／ｖ％である。
【００２６】
〔実施例１〕ＢＰＡメグルミン水溶液の調製
Ｌ−ＢＰＡ３０ｇとメグルミン４２．２ｇとを水に溶かして２５０ｍＬとした（メグルミン／ＢＰＡ＝１．５（モル／モル））。６mol/L塩酸を加えてｐＨ７．０に調整した後、水を加えて総液量３００ｍＬとし、次いで０．２２μｍのフィルターで濾過した。不溶物を含まない完全な水溶液が得られていることが確認された。得られた水溶液のＢＰＡ濃度は、１０ｗ／ｖ％である。
【００２７】
〔比較例２及び実施例２〜９〕
ＢＰＡフルクトース錯体水溶液の調製に際して用いる水酸化ナトリウム水溶液を８mol/Lとし、ｐＨの再調整に用いる塩酸を６mol/Lとした以外、比較例及び実施例１と同様な方法により、表１に示す処方に従って、ＢＰＡフルクトース錯体水溶液及び種々の濃度及び２通りのメグルミン／ＢＰＢ比（モル比、１．５及び２．５）になるＢＰＡメグルミン水溶液を調製した。各水溶液につき、外観性状の確認及びＨＰＬＣによるＢＰＡ濃度の測定の後、安定性加速試験のためガラスバイアルに１ｍＬずつ封入し、遮光下に４０℃にて４週間保存し、外観性状、ｐＨ及びＢＰＡ含量をそれぞれ観察、測定した。結果は、表１及び２に示す。なお、ＨＰＬＣによるＢＰＡの測定には、下記の条件を用いた。
【００２８】
＜ＨＰＬＣ測定条件＞
使用カラム ：Mightysil RP-18 GP 250-4.6（5μm）関東化学（株）
移動相 ：水：アセトニトリル：トリフルオロ酢酸＝800：200：1
カラム温度 ：２５℃付近の一定温度
流速 ：０．５ｍＬ／分
インジェクション量：５μＬ
検出波長（ＵＶ） ：２３２ｎｍ
検出波長（フォトダイオードアレイ検出器：ＰＤＡ） ：２００〜４００ｎｍ
【００２９】
【表１】
【００３０】
【表２】
【００３１】
＜安定性：外観性状＞
表１に示すように、調製時には何れの水溶液も無色澄明であった。４０℃での安定性加速試験中、比較例２のＢＰＡフルクトース錯体水溶液は、試験開始後２週間の時点で澄明ではあったが微黄色に着色しており、その後の観察でも同様であった。実施例２〜９のＢＰＡメグルミン水溶液は、何れも試験開始後２週間の時点では澄明で無色澄明の外観性状を維持しており、試験開始後３週の時点で、澄明のまま無色ないし僅かに黄色を帯びたのみで、４週の時点でも同様であった。外観性状の安定性に関し、メグルミン／ＢＰＡ比の相違（１．５及び２．５）による差は見られなかった。
【００３２】
＜安定性：ｐＨ＞
各水溶液のｐＨの安定性試験結果を表２に示す。比較例２のＢＰＡフルクトース錯体水溶液のｐＨは、試験開始時の７．２０から経時的に一貫して低下し続け、４週間経過時点では６．９７まで低下した。これとは対照的に、同濃度のＢＰＡを含有する実施例２のＢＰＡメグルミン水溶液では経時的なｐＨ低下は見られず、これより高濃度の実施例３〜９の各ＢＰＡメグルミン水溶液についても同様であった。ｐＨの安定性に関し、メグルミン／ＢＰＡ比の相違（１．５及び２．５）による差も見られなかった。
【００３３】
＜安定性：ＢＰＡ含量＞
４０℃４週間保存後の各水溶液中のＢＰＡ含量の時間的推移を、試験開始時の含量に対する残存率として表２に示す。比較例２の水溶液では、ＢＰＡ含量は試験開始時の９６．２％まで低下した。これに対し、実施例２〜９の各水溶液においては、実質的に低下は見られず、ＢＰＡ濃度は安定に維持されていた。
【００３４】
上記のとおり、ＢＰＡメグルミン水溶液は、４０℃保存での外観性状の安定性においてＢＰＡフルクトース錯体より優れている。また、同条件においてＢＰＡフルクトース錯体水溶液のｐＨが経時的に低下するのに対し、ＢＰＡメグルミン水溶液のｐＨは、安定しており低下を示さない。更に、同条件における水溶液中のＢＰＡの安定性については、ＢＰＡフルクトース錯体水溶液ではＢＰＡ含量の明らかな経時的低下が見られるのに対し、ＢＰＡメグルミン水溶液中のＢＰＡ含量には、実質的に低下が見られないことが判明した。これらのことは、ＢＰＡフルクトース水溶液に比して、ＢＰＡメグルミン水溶液の安定性が顕著に高いことを示している。
【００３５】
〔比較例３及び実施例１０〜１５〕
上記と同様な方法により、表３に示す処方に従って、ＢＰＡフルクトース錯体水溶液並びに、ｐＨ６．０、７．０及び８．０で、ＢＰＡを上限濃度付近である１０．４ｗ／ｖ％含有し２通りのメグルミン／ＢＰＢ比（モル比１．５及び２．０）になるＢＰＡメグルミン水溶液を調製した。各水溶液につき、外観性状の確認及びＨＰＬＣによるＢＰＡ濃度の測定の後、安定性苛酷試験のためガラスバイアルに１ｍＬずつ封入し、遮光下に５０℃及び６０の温度条件にて２週間まで保存し、１週毎に、外観性状、ｐＨ及びＢＰＡ含量をそれぞれ観察、測定した。結果を表３及び４に示す。
【００３６】
【表３】
【００３７】
【表４】
【００３８】
＜安定性：外観性状＞
表３から明らかなように、５０℃において、比較例３のＢＰＡフルクトース錯体水溶液（ｐＨ７．２）は、試験開始時の無色から１週間の保存により黄色となり、２週間で褐色となった。これに対し、同様のｐＨの実施例１１及び１４のＢＰＡメグルミン水溶液は、５０℃での１週間の保存後にも無色ないし僅かに黄色を帯びたのみであり、２週間の保存でも微黄色となるに止まった。また、６０℃において、比較例３の水溶液は、１週間の保存により茶褐色となったのに対して、実施例１１及び１４の水溶液は６０℃での１週間の保存でも無色ないし僅かに黄色を帯びたのみであり、２週間の保存でも微黄色ないし黄色となるに止まった。また何れの温度及び保存期間についても、実施例１１及び１４の水溶液の外観性状に差は認められなかった。
【００３９】
ｐＨ６の水溶液については、実施例１０の水溶液（メグルミン／ＢＰＡ＝１．５（モル/モル））では５０℃及び６０℃での１及び２週間の保存で、白色の結晶の析出が僅かに認められたものの、溶液は何れも無色ないし僅かに黄色を帯びたのみであった。同ｐＨの実施例１３の水溶液（メグルミン／ＢＰＡ＝２．０（モル/モル））においては、５０℃及び６０℃での１週間及び２週間の保存で、ｐＨ７の実施例１１及び１４と外観性状は同等であった。
更に、ｐＨ８の水溶液については、実施例１２の水溶液（メグルミン／ＢＰＡ＝１．５（モル／モル））及び実施例１５の水溶液（メグルミン／ＢＰＡ＝２．０（モル/モル））ともに、６０℃での２週間の保存後に白色ないし微黄色の沈着物が僅かに認められたことを除き、ｐＨ７の実施例１１及び１４の水溶液の５０℃及び６０℃での１週間及び２週間の保存後の外観性状と同等であった。
【００４０】
＜安定性：ｐＨ＞
表４に示すとおり、比較例３の水溶液のｐＨは、５０℃２週間の保存では初期値の７．２２から６．５４へと大幅に低下し、また６０℃２週間の保存では６．１２へと更に大きく低下した。これに対し、実施例１１の水溶液のｐＨは、５０℃２週間の保存で初期値の７．０６から７．１７へと、また６０℃２週間の保存で７．１８へと、それぞれ僅かに上昇したに過ぎなかった。また実施例１４の水溶液のｐＨは、５０℃２週間の保存で初期値の７．１９から７．３０へと上昇したに過ぎず、また６０℃２週の保存ではｐＨの変化は認められなかった。
【００４１】
ｐＨ６の水溶液についても、実施例１０の水溶液のｐＨは、５０℃２週間の保存で初期値の５．９９から６．３７へと、また６０℃２週間の保存で６．１８へと、それぞれ幾分上昇するに止まった。また実施例１３の水溶液のｐＨは、５０℃２週間の保存で初期値の６．０２から６．１１へと、また６０℃２週間の保存で５．９６へと、それぞれ僅かに変動するに止まった。
ｐＨ８の水溶液についても、実施例１２の水溶液のｐＨは、５０℃２週間の保存で初期値の８．０５から８．１８へと、また６０℃２週間の保存で８．０７へと、それぞれ僅かに上昇したに止まった。また実施例１５の水溶液のｐＨは、５０℃２週間の保存で初期値の８．１１から８．２２へと、また６０℃２週間の保存で８．０９へと、それぞれ僅かに変動するに止まった。
【００４２】
＜安定性：ＢＰＡ含量＞
また、各水溶液のＢＰＡ含量の経時的推移を、試験開始時の含量に対する残存率として表４に示す。５０℃での１週間及び２週間の保存により、比較例３の水溶液のＢＰＡ残存率は、それぞれ９０．１％、及び７３．８％へと低下したが、これ対し実施例１０〜１５の水溶液のＢＰＡ残存率は、５０℃１週間の保存後に９５〜９８％付近であり、５０℃２週間の保存後もほぼ同等であった。また６０℃での１週間及び２週間の保存により、比較例３の水溶液のＢＰＡ残存率は、それぞれ３５．９％及び２９．４％へと極度に低下したが、実施例１０〜１５の水溶液のＢＰＡ残存率は、６０℃１週間の保存後に８８〜９３％付近、６０℃２週間の保存後に５１〜７５％と、それぞれ比較例３の水溶液の対応する温度条件及び保存期間での残存率に比し顕著に高いレベルにあった。
【００４３】
上記のとおり、５０℃及び６０℃という苛酷な温度条件での安定性試験結果においても、ＢＰＡメグルミン水溶液が、ｐＨ６〜８においてＢＰＡフルクトース錯体水溶液に比して顕著に高い安定性（外観性状、ｐＨ、ＢＰＡ含有量）を有することを示している。
【００４４】
＜実施例１６〜１９＞
表５に示す処方に従って、上記と同様にメグルミン／ＢＰＡ比が１．１０〜１．２５のＢＰＡメグルミン水溶液を調製した。何れの実施例の水溶液も、無色澄明であった。これらの水溶液について５０℃１週間の苛酷試験を行った。その結果、表５に示すように、外観性状、ｐＨ及びＢＰＡ残存率の何れについても、上述のｐＨ７の実施例の各水溶液で見られたのと同等の優れた安定性を示した。
【００４５】
【表５】
【００４６】
＜実施例２０及び２１＞ 凍結乾燥製剤
上記と同様にして、表６に示すＢＰＡメグルミン水溶液を調製し、常法により凍結乾燥させた。その後、凍結乾燥粉末に、元の液量とするに必要な量の蒸留水を加えて振ったところ、容易に溶解して無色透明な水溶液が復元された。このことは、本発明のＢＰＡメグルミン含有組成物は、使用時に水を添加して水溶液とすることを目的とした凍結乾燥粉末の形でも製品として供給できることを示している。
【表６】
【産業上の利用可能性】
【００４７】
本発明は、ホウ素中性子捕捉療法において患者に投与されるホウ素含有組成物の液量を大幅に減少させることができる、高濃度のＢＰＡ水溶液の提供を可能にする。また本発明は、水溶液に比して輸送及び保管にコスト上有利な、ＢＰＡ水溶液を与える凍結乾燥粉末の提供も可能にする。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ホウ素含有医薬組成物に関し、特に、ホウ素中性子捕捉療法においてホウ素源として使用する、水溶性を高めたホウ素含有組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
１９３０年代に米国で中性子捕捉療法が提唱されて以来（Locher GL. Biological effects and therapeutic possibilities of neutrons. Am J Roentgenol Radium Ther,
1936, 36, 1-13）、中断を伴いながらも、腫瘍の治療におけるホウ素（10Ｂ）中性子捕捉療法の可能性が、動物及びヒトの腫瘍に対する効果の検討、患者に投与するに適した製剤形態、臨床使用に適した小型原子炉（中性子源）の開発というそれぞれの側面において、長年にわたり検討されてきた。
【０００３】
ホウ素中性子捕捉療法（boron neutron capture therapy：ＢＮＣＴ）は、10Ｂ（天然のホウ素の略１／５を占める同位体である）を腫瘍塊に取り込ませておき、腫瘍塊を狙って比較的低エネルギーの中性子（熱中性子又は熱外中性子等）のビームを照射して10Ｂに核反応〔10Ｂ（ｎ，αγ）7Ｌｉ〕を起こさせ、それにより生じたα粒子で腫瘍細胞を破壊する治療方法である。生じたα粒子は線エネルギー付与（linear energy transfer：ＬＥＴ：飛程の単位長さ当りに平均して失うエネルギー）が大きく、生体内での飛程がほぼ癌細胞１個分に相当する５〜１０μｍと非常に短いため、核反応を起こした10Ｂを含有していた細胞及びこれに隣接した細胞のみを破壊する。従って、10Ｂを腫瘍塊に取り込ませておき、これに焦点を当てて身体外部から熱中性子線等を照射すれば、正常細胞を殆ど傷つけることなく癌細胞を確実に破壊することが可能である。ホウ素中性子捕捉療法を用いた治療照射は、米国では１９５０年代から６０年代始めにかけて既に試みられており、日本では、脳腫瘍に対し１９６８年に、悪性黒色種（メラノーマ）に対し１９８７年に、それぞれ治療照射が行われ、その後症例が蓄積されてきた。
【０００４】
ホウ素原子を必要量に患者へ投与にでき、且つ癌細胞に移行させ易くするためには、適切なホウ素含有化合物の水溶液を調製する必要がある。これに適した化合物としてフェニルアラニンのパラ位をジヒドロボリル基で置換した形の構造を有する、ｐ−ボロノフェニルアラニン（以下、「ＢＰＡ」ともいう。）、
【０００５】
【化１】
【０００６】
が知られている。ＢＰＡには、フェニルアラニン部分が天然のＬ−フェニルアラニンと同じ型の立体配置であるＬ−ＢＰＡ、Ｄ型であるＤ−ＢＰＡ、及びラセミ体であるＤＬ−ＢＰＡがあり、これらのうち特にＬ体が、悪性黒色腫等のような腫瘍組織に最も取り込まれ易いとされていることから、主として用いられている。ＢＰＡは、それ単独では生理的ｐＨでの溶解性が極めて乏しい一方、効果的なホウ素中性子捕捉療法のためには多量の10Ｂ（ＢＰＡ換算で例えば、３０ｇ／６０ｋｇ体重）を患者に注入するのが好ましいことが明らかになるにつれ、水に対するＢＰＡの溶解性を改善するために様々な方法が試みられてきた。それらのうち、特に、ＢＰＡと単糖類（特にフルクトース）とを水中で混合し、混合液のｐＨを塩基（水酸化ナトリウム等）により１０まで高めて溶解させてＢＰＡフルクトース錯体を形成させ、酸（塩酸等）で生理的ｐＨ（７．４）に再調整するという方法が知られている（特許文献１参照）。また、ＢＰＡに水、強塩基（水酸化ナトリウム等）、及びフルクトース等の単糖類、二糖類又はソルビトール等のポリオールを加えて塩基性条件下（ｐＨ８〜１０）に錯体水溶液とし、イオン交換媒体で処理してｐＨを約７．３〜７．５に戻すことによりＢＰＡ錯体溶液を製造する方法も知られている（特許文献２参照）。フルクトースは錯体形成により、室温でＢＰＡを約２．６ｗ／ｖ％程度の濃度まで水に溶解させることができ、実際これを用いて、脳腫瘍や中皮腫等の患者で臨床試験が行われ、目覚しく且つ腫瘍選択的な効果が得られつつあり、臨床使用に適した小型の原子炉の開発と相俟って、ホウ素中性子捕捉療法の現実的利用に対する期待が非常に高まっている。
【０００７】
しかしながら、ＢＰＡフルクトース錯体の水溶性は不十分である。すなわち、例えば体重６０ｋｇの患者用にＢＰＡの３０ｇ相当量を室温でフルクトースとの錯体水溶液として調製すると、溶液量は少なくとも１．２Ｌ程度と、極めて大きな液量となる。これを注入することは、患者にとって身体的負担が大きく、また医療機関にとっても、腫瘍塊への中性子照射に先立つ患者への水溶液の点滴静注に長時間要することとなり、不都合である。
【０００８】
また、上記のとおりＢＰＡフルクトース錯体は、ＢＰＡとフルクトースとを水酸化ナトリウム等でアルカリ性に調整した水中で混合して初めて得られ、混合物を十分に撹拌し完全に溶液となったことを確認した上で、ｐＨが中性付近の所定範囲へと再調整される。そのような水溶液を患者に投与し得る製剤として調製するには、ｐＨの調整工程を含む溶解操作全体が厳重な無菌環境下で行われる必要があるが、治療に際し医療機関でそのような煩雑な手順により水溶液を調製することは、現実的に不可能である。一方、ＢＰＡフルクトース錯体の水溶液を凍結乾燥し粉末として医療機関に供給することも考えられるが、ＢＰＡフルクトース錯体の凍結乾燥粉末は、室温で十分量の水に対する溶解速度が極めて遅い（上記特許文献２参照）。このため、ＢＰＡフルクトース錯体の凍結乾燥粉末を医療機関に供給し、用時そこで水溶液へと復元するという使用形態も、現実的でない。従って、ＢＰＡフルクトース錯体は、水溶液の形で製品化され出荷されることとなる。ＢＰＡフルクトース錯体水溶液は、上記のとおり水溶性が不十分であるため水溶液の調製に多量の水を要し、製品化したときの包装液量及び重量が大きくなり、これは輸送や保管のコスト上昇要因となる。
【０００９】
一方、メグルミン、
【００１０】
【化２】
【００１１】
は、塩基性化合物であり、特定の有機ヨウ素造影剤（アミドトリゾ酸、アジピオドン、イオタラム酸、メトリゾ酸、ヨーダミド、イオトロクス酸、ヨードキサム酸、及びイオキサグル酸。）を中和し溶解させる溶解剤として用いられているが、これらの有機ヨウ素造影剤は、何れも２，４，６−トリヨード安息香酸部分を有する酸であり、ＢＰＡのようにアミノ基とカルボキシル基が分子内塩を形成しているタイプの化合物ではない。
【特許文献１】米国特許第５４９２９００号
【特許文献２】米国特許第６１６９０７６号
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
上記背景において、本発明はＢＰＡを従来に比べ高濃度で水に溶解させて中性付近のｐＨの水溶液を与えることを可能にする方法、及びそのような方法で得られる、ＢＰＡを従来に比べ高濃度まで含有し得る中性付近のｐＨの水溶液を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明者等は、上記目的の達成に向けて種々検討した結果、ＢＰＡにメグルミン及び水を加えることにより得られる、アルカリ性の混合液中にＢＰＡが高濃度に溶解して存在できること、及び、この水溶液に酸を加えて中性付近にｐＨを調整してもＢＰＡは高濃度に溶解した状態に留まること、更に、そのようにして中和した水溶液を凍結乾燥して得られる粉末は、水と混合したとき容易に溶解して、元の高濃度にＢＰＡを含んだ水溶液を与えることを見出した。本発明は、これらの発見に基づき更に検討を行って完成させたものである。すなわち、本発明は以下を提供する。
【００１４】
１．ｐ−ボロノフェニルアラニン及びメグルミンを含有してなる、医薬組成物。
２．ｐ−ボロノフェニルアラニンに対するメグルミン含有量が、モル比で少なくとも０．８である、上記１の医薬組成物。
３．中性付近のｐＨを有する水溶液である、上記１又は２の医薬組成物。
４．ｐ−ボロノフェニルアラニンの濃度が、少なくとも３ｗ／ｖ％である、上記３の医薬組成物。
５．ｐ−ボロノフェニルアラニン及びメグルミンを含有してなる乾燥製剤である、上記１又は２の医薬組成物。
６．水を加えて復元したとき中性付近のｐＨの水溶液を与えるものである、上記５の医薬組成物。
７．ホウ素中性子捕捉療法用剤である、上記１ないし６の何れかの医薬組成物。
８．ｐ−ボロノフェニルアラニンがＬ−ｐ−ボロノフェニルアラニンである、上記１ないし７の何れかの医薬組成物。
９．ｐ−ボロノフェニルアラニンとメグルミンとを水中で混合して水溶液とするステップと、該水溶液に酸を加えて中性付近のｐＨに調整するステップとを含むものである、ｐ−ボロノフェニルアラニン含有水溶液の製造方法。
１０．ｐ−ボロノフェニルアラニンに対するメグルミン含有量が、モル比で少なくとも０．８である、上記９の製造方法。
１１．該水溶液中のｐ−ボロノフェニルアラニンの濃度が、少なくとも３ｗ／ｖ％である、上記９又は１０の製造方法。
１２．上記９ないし１１の何れかの製造方法により得られるｐ−ボロノフェニルアラニン含有水溶液を凍結乾燥するステップを更に含んでなるものである、ｐ−ボロノフェニルアラニン含有組成物の製造方法。
１３．ｐ−ボロノフェニルアラニンがＬ−ｐ−ボロノフェニルアラニンである、上記９ないし１２の何れかの製造方法。
【発明の効果】
【００１５】
上記各構成になる本発明は、１０ｗ／ｖ％を超える高濃度のＢＰＡ水溶液を与えることができる。これはＢＰＡフルクトース錯体で得られる濃度２．６ｗ／ｖ％に比し約４倍高濃度であるから、ホウ素中性子捕捉療法において患者に投与されるホウ素含有組成物の液量の大幅な低減（１／４）を可能にする。これは患者の負担を減らし、また点滴時間の短縮及び保管スペースの縮小を通じて医療機関にも好都合である。更に、本発明により得られる医薬組成物は、凍結乾燥等により乾燥物とした後、注射用蒸留水や中性の緩衝液で簡単に溶解して復元することができるから、そのような水を含まない固形製剤の形で医療機関に供給することもでき、それにより輸送コスト、保管コストの抑制も可能となる。また、本発明の水溶液はＢＰＡフルクトース錯体水溶液に比して保存安定性が顕著に高いという利点を有する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
本発明において、ｐ−ボロノフェニルアラニン（ＢＰＡ）としては、そのフェニルアラニン部分の立体配置に関しＤ型、Ｌ型、ＤＬ型の何れの配置のものも用いることができる。但し、癌細胞への取込効率はＬ型の方がＤ型より高いとされている点を考慮すれば、Ｌ型が最も好ましく、次いでＤＬ型が好ましい。
【００１７】
本発明の組成物において、ＢＰＡ量に対するメグルミン量の比率に明確な下限はない。但し、特に高濃度にＢＰＡを溶解させるには、ＢＰＡ量に対するメグルミン量は、好ましくはモル比で０．８以上であり、このときＢＰＡを約７ｗ／ｖ％まで溶解させることができる。より好ましくは、ＢＰＡ量に対するメグルミン量はモル比で１．０であり、このときＢＰＡを約９ｗ／ｖ％まで溶解させることができる。特に好ましくは、ＢＰＡ量に対するメグルミン量はモル比で１．１０以上であり、このときＢＰＡを１０．４ｗ／ｖ％まで溶解させることができる。もっとも、そこまで高くないＢＰＡ濃度（例えば３〜５ｗ／ｖ％）でよい場合には、メグルミン量をこれより減らすこともできる。他方、ＢＰＡを水に高濃度に溶解させるという面においてＢＰＡ量に対するメグルミン量のモル比に明確な上限はないが、過剰にメグルミンを加えても効果は比例しないため、通常モル比２．５までに止めることが好ましい。従って、ＢＰＡ量に対するメグルミン量は、通常は、モル比で０．８〜２．５の範囲で適宜設定すればよく、例えば、１．０〜２．０、１．１０〜１．５等とすればよい。
【００１８】
本発明の水溶液は、ＢＰＡとメグルミンとを水中で混合し、得られたアルカリ性の水溶液に酸を加えて中性付近のｐＨへと調整することにより、簡単に調製することができる。水溶液製造時の温度は特に限定されず、単に室温で行うことができ、ＢＰＡフルクトース錯体溶液の製造時のような加熱（６０℃）を要としない。本発明の水溶液調製後、必要に応じフィルター滅菌を施すことができる。
【００１９】
本発明の水溶液において、「ほぼ中性のｐＨ」とは、ヒト血液の生理的ｐＨ（ｐＨ７．４を中心に変動）の付近であることをいう。本発明のＢＰＡメグルミン水溶液は輸液に混ぜて投与するのが一般的投与方法になると考えられることから、輸液に含まれる緩衝剤による緩衝効果も受けるため、厳密にｐＨ７．４とする必要はなく、例えば、ｐＨ６．０〜ｐＨ８．０などとしてよく、これは本発明における「中性付近のｐＨ」に含まれる。本発明の水性溶液は中性付近で安定性が高く、また中性付近でｐＨの高低は安定性に殆ど影響を及ぼさないことが本発明の完成過程において判明している。従って、本発明の水溶液のｐＨは中性付近において、製品としての使用に便利なように適宜に設定すればよく、例えば、血液の生理的ｐＨにより近いｐＨ６．２〜８．０、又はｐＨ６．５〜７．９、又は更に６．５〜７．７等としてもよいが、そうすることは必須ではない。
【００２０】
本発明の水溶液中のＢＰＡ濃度に特に限定はなく、適宜設定することができる。但し、一般には従来のＢＰＡフルクトース錯体水溶液に比して高い濃度のものとすることが好ましい。それにより患者に投与する水溶液の量を減らすことができるからである。従って、ＢＰＡ濃度として例えば、３．０％以上とすることが好ましい。
【００２１】
ＢＰＡと水及びメグルミンを混合して水溶液とした後にｐＨを中性付近に戻すために添加される酸としては、その目的に適い、且つ医薬品に使用できる酸である限り特に限定はないが、最も一般的に使用される好ましい酸の一つとして、塩酸を挙げることができる。
【００２２】
本発明の医薬組成物は、その安定性（溶解性、保存安定性）に実質的な悪影響を及ぼさない限り、ＢＰＡ、水及びメグルミン以外の成分が含有されることを排除しない。ｐＨ調整に際して添加される酸の共役塩基（塩酸の場合、Ｃｌ-）は含有されることを当然の前提としているが、それ以外にも例えば、ｐＨの調製時の微調整に用いることのできる炭酸水素ナトリウム等のｐＨ調製剤由来の成分を含んでいてもよい。
【００２３】
本発明の医薬組成物は、水溶液の形で製品として供給してもよいが、また、ＢＰＡメグルミン水溶液を乾燥させ、乾燥物を溶解用の包装に封入した固形製剤として供給してもよい。ＢＰＡメグルミン水溶液の乾燥には凍結乾燥を用いるのが便利であるが、それ以外の方法でも注射に適した無菌の製剤が供給できる方法であればよいから、乾燥方法は特に限定されない。凍結乾燥本発明の医薬組成物は、凍結乾燥物の形態でも高い経時的安定性を有しており、用時これに注射用蒸留水を添加して手で振ることにより容易に水溶液の形へと復元できる。
【実施例】
【００２４】
以下、比較例及び実施例を参照して本発明を更に詳細に説明するが、本発明が実施例に限定されることは意図しない。なお以下で使用したＢＰＡは全て、ホウ素全体に対する10Ｂの割合を天然の約２０％から９５％へと濃縮したホウ素を用い常法により合成したもの（ステラケミファ（株）製）であるが、ホウ素の質量数は化学的性質に影響しないから、実施例で得られた結果は10Ｂを何れの比率で含むＢＰＡについても当てはまるものである。
【００２５】
〔比較例１〕ＢＰＡフルクトース水溶液の調製
ＢＰＡフルクトース錯体水溶液を次のとおりにして調製した。事前の検討により、水溶液の総液量は、フルクトースを用いてＢＰＡを室温で完全に水に溶解させることができるほぼ最少の液量（従って室温での調製でほぼ最高のＢＰＡ濃度とし得る液量）となるように。すなわち、Ｌ−ＢＰＡ３０ｇとフルクトース６６．７ｇとを水９００ｍＬに加え、室温にて撹拌しつつ１mol/L水酸化ナトリウム１６６ｍＬを加えて溶解させた（溶解完了時のｐＨ９）。室温で３０分間静置しＢＰＡフルクトース錯体を形成させた後、１mol/L塩酸と炭酸水素ナトリウムによりｐＨ７．２に調整し（総液量１２４０ｍＬ）、次いで０．２２μｍのフィルターで濾過した。得られた水溶液のＢＰＡ濃度は、２．４ｗ／ｖ％である。
【００２６】
〔実施例１〕ＢＰＡメグルミン水溶液の調製
Ｌ−ＢＰＡ３０ｇとメグルミン４２．２ｇとを水に溶かして２５０ｍＬとした（メグルミン／ＢＰＡ＝１．５（モル／モル））。６mol/L塩酸を加えてｐＨ７．０に調整した後、水を加えて総液量３００ｍＬとし、次いで０．２２μｍのフィルターで濾過した。不溶物を含まない完全な水溶液が得られていることが確認された。得られた水溶液のＢＰＡ濃度は、１０ｗ／ｖ％である。
【００２７】
〔比較例２及び実施例２〜９〕
ＢＰＡフルクトース錯体水溶液の調製に際して用いる水酸化ナトリウム水溶液を８mol/Lとし、ｐＨの再調整に用いる塩酸を６mol/Lとした以外、比較例及び実施例１と同様な方法により、表１に示す処方に従って、ＢＰＡフルクトース錯体水溶液及び種々の濃度及び２通りのメグルミン／ＢＰＢ比（モル比、１．５及び２．５）になるＢＰＡメグルミン水溶液を調製した。各水溶液につき、外観性状の確認及びＨＰＬＣによるＢＰＡ濃度の測定の後、安定性加速試験のためガラスバイアルに１ｍＬずつ封入し、遮光下に４０℃にて４週間保存し、外観性状、ｐＨ及びＢＰＡ含量をそれぞれ観察、測定した。結果は、表１及び２に示す。なお、ＨＰＬＣによるＢＰＡの測定には、下記の条件を用いた。
【００２８】
＜ＨＰＬＣ測定条件＞
使用カラム ：Mightysil RP-18 GP 250-4.6（5μm）関東化学（株）
移動相 ：水：アセトニトリル：トリフルオロ酢酸＝800：200：1
カラム温度 ：２５℃付近の一定温度
流速 ：０．５ｍＬ／分
インジェクション量：５μＬ
検出波長（ＵＶ） ：２３２ｎｍ
検出波長（フォトダイオードアレイ検出器：ＰＤＡ） ：２００〜４００ｎｍ
【００２９】
【表１】
【００３０】
【表２】
【００３１】
＜安定性：外観性状＞
表１に示すように、調製時には何れの水溶液も無色澄明であった。４０℃での安定性加速試験中、比較例２のＢＰＡフルクトース錯体水溶液は、試験開始後２週間の時点で澄明ではあったが微黄色に着色しており、その後の観察でも同様であった。実施例２〜９のＢＰＡメグルミン水溶液は、何れも試験開始後２週間の時点では澄明で無色澄明の外観性状を維持しており、試験開始後３週の時点で、澄明のまま無色ないし僅かに黄色を帯びたのみで、４週の時点でも同様であった。外観性状の安定性に関し、メグルミン／ＢＰＡ比の相違（１．５及び２．５）による差は見られなかった。
【００３２】
＜安定性：ｐＨ＞
各水溶液のｐＨの安定性試験結果を表２に示す。比較例２のＢＰＡフルクトース錯体水溶液のｐＨは、試験開始時の７．２０から経時的に一貫して低下し続け、４週間経過時点では６．９７まで低下した。これとは対照的に、同濃度のＢＰＡを含有する実施例２のＢＰＡメグルミン水溶液では経時的なｐＨ低下は見られず、これより高濃度の実施例３〜９の各ＢＰＡメグルミン水溶液についても同様であった。ｐＨの安定性に関し、メグルミン／ＢＰＡ比の相違（１．５及び２．５）による差も見られなかった。
【００３３】
＜安定性：ＢＰＡ含量＞
４０℃４週間保存後の各水溶液中のＢＰＡ含量の時間的推移を、試験開始時の含量に対する残存率として表２に示す。比較例２の水溶液では、ＢＰＡ含量は試験開始時の９６．２％まで低下した。これに対し、実施例２〜９の各水溶液においては、実質的に低下は見られず、ＢＰＡ濃度は安定に維持されていた。
【００３４】
上記のとおり、ＢＰＡメグルミン水溶液は、４０℃保存での外観性状の安定性においてＢＰＡフルクトース錯体より優れている。また、同条件においてＢＰＡフルクトース錯体水溶液のｐＨが経時的に低下するのに対し、ＢＰＡメグルミン水溶液のｐＨは、安定しており低下を示さない。更に、同条件における水溶液中のＢＰＡの安定性については、ＢＰＡフルクトース錯体水溶液ではＢＰＡ含量の明らかな経時的低下が見られるのに対し、ＢＰＡメグルミン水溶液中のＢＰＡ含量には、実質的に低下が見られないことが判明した。これらのことは、ＢＰＡフルクトース水溶液に比して、ＢＰＡメグルミン水溶液の安定性が顕著に高いことを示している。
【００３５】
〔比較例３及び実施例１０〜１５〕
上記と同様な方法により、表３に示す処方に従って、ＢＰＡフルクトース錯体水溶液並びに、ｐＨ６．０、７．０及び８．０で、ＢＰＡを上限濃度付近である１０．４ｗ／ｖ％含有し２通りのメグルミン／ＢＰＢ比（モル比１．５及び２．０）になるＢＰＡメグルミン水溶液を調製した。各水溶液につき、外観性状の確認及びＨＰＬＣによるＢＰＡ濃度の測定の後、安定性苛酷試験のためガラスバイアルに１ｍＬずつ封入し、遮光下に５０℃及び６０の温度条件にて２週間まで保存し、１週毎に、外観性状、ｐＨ及びＢＰＡ含量をそれぞれ観察、測定した。結果を表３及び４に示す。
【００３６】
【表３】
【００３７】
【表４】
【００３８】
＜安定性：外観性状＞
表３から明らかなように、５０℃において、比較例３のＢＰＡフルクトース錯体水溶液（ｐＨ７．２）は、試験開始時の無色から１週間の保存により黄色となり、２週間で褐色となった。これに対し、同様のｐＨの実施例１１及び１４のＢＰＡメグルミン水溶液は、５０℃での１週間の保存後にも無色ないし僅かに黄色を帯びたのみであり、２週間の保存でも微黄色となるに止まった。また、６０℃において、比較例３の水溶液は、１週間の保存により茶褐色となったのに対して、実施例１１及び１４の水溶液は６０℃での１週間の保存でも無色ないし僅かに黄色を帯びたのみであり、２週間の保存でも微黄色ないし黄色となるに止まった。また何れの温度及び保存期間についても、実施例１１及び１４の水溶液の外観性状に差は認められなかった。
【００３９】
ｐＨ６の水溶液については、実施例１０の水溶液（メグルミン／ＢＰＡ＝１．５（モル/モル））では５０℃及び６０℃での１及び２週間の保存で、白色の結晶の析出が僅かに認められたものの、溶液は何れも無色ないし僅かに黄色を帯びたのみであった。同ｐＨの実施例１３の水溶液（メグルミン／ＢＰＡ＝２．０（モル/モル））においては、５０℃及び６０℃での１週間及び２週間の保存で、ｐＨ７の実施例１１及び１４と外観性状は同等であった。
更に、ｐＨ８の水溶液については、実施例１２の水溶液（メグルミン／ＢＰＡ＝１．５（モル／モル））及び実施例１５の水溶液（メグルミン／ＢＰＡ＝２．０（モル/モル））ともに、６０℃での２週間の保存後に白色ないし微黄色の沈着物が僅かに認められたことを除き、ｐＨ７の実施例１１及び１４の水溶液の５０℃及び６０℃での１週間及び２週間の保存後の外観性状と同等であった。
【００４０】
＜安定性：ｐＨ＞
表４に示すとおり、比較例３の水溶液のｐＨは、５０℃２週間の保存では初期値の７．２２から６．５４へと大幅に低下し、また６０℃２週間の保存では６．１２へと更に大きく低下した。これに対し、実施例１１の水溶液のｐＨは、５０℃２週間の保存で初期値の７．０６から７．１７へと、また６０℃２週間の保存で７．１８へと、それぞれ僅かに上昇したに過ぎなかった。また実施例１４の水溶液のｐＨは、５０℃２週間の保存で初期値の７．１９から７．３０へと上昇したに過ぎず、また６０℃２週の保存ではｐＨの変化は認められなかった。
【００４１】
ｐＨ６の水溶液についても、実施例１０の水溶液のｐＨは、５０℃２週間の保存で初期値の５．９９から６．３７へと、また６０℃２週間の保存で６．１８へと、それぞれ幾分上昇するに止まった。また実施例１３の水溶液のｐＨは、５０℃２週間の保存で初期値の６．０２から６．１１へと、また６０℃２週間の保存で５．９６へと、それぞれ僅かに変動するに止まった。
ｐＨ８の水溶液についても、実施例１２の水溶液のｐＨは、５０℃２週間の保存で初期値の８．０５から８．１８へと、また６０℃２週間の保存で８．０７へと、それぞれ僅かに上昇したに止まった。また実施例１５の水溶液のｐＨは、５０℃２週間の保存で初期値の８．１１から８．２２へと、また６０℃２週間の保存で８．０９へと、それぞれ僅かに変動するに止まった。
【００４２】
＜安定性：ＢＰＡ含量＞
また、各水溶液のＢＰＡ含量の経時的推移を、試験開始時の含量に対する残存率として表４に示す。５０℃での１週間及び２週間の保存により、比較例３の水溶液のＢＰＡ残存率は、それぞれ９０．１％、及び７３．８％へと低下したが、これ対し実施例１０〜１５の水溶液のＢＰＡ残存率は、５０℃１週間の保存後に９５〜９８％付近であり、５０℃２週間の保存後もほぼ同等であった。また６０℃での１週間及び２週間の保存により、比較例３の水溶液のＢＰＡ残存率は、それぞれ３５．９％及び２９．４％へと極度に低下したが、実施例１０〜１５の水溶液のＢＰＡ残存率は、６０℃１週間の保存後に８８〜９３％付近、６０℃２週間の保存後に５１〜７５％と、それぞれ比較例３の水溶液の対応する温度条件及び保存期間での残存率に比し顕著に高いレベルにあった。
【００４３】
上記のとおり、５０℃及び６０℃という苛酷な温度条件での安定性試験結果においても、ＢＰＡメグルミン水溶液が、ｐＨ６〜８においてＢＰＡフルクトース錯体水溶液に比して顕著に高い安定性（外観性状、ｐＨ、ＢＰＡ含有量）を有することを示している。
【００４４】
＜実施例１６〜１９＞
表５に示す処方に従って、上記と同様にメグルミン／ＢＰＡ比が１．１０〜１．２５のＢＰＡメグルミン水溶液を調製した。何れの実施例の水溶液も、無色澄明であった。これらの水溶液について５０℃１週間の苛酷試験を行った。その結果、表５に示すように、外観性状、ｐＨ及びＢＰＡ残存率の何れについても、上述のｐＨ７の実施例の各水溶液で見られたのと同等の優れた安定性を示した。
【００４５】
【表５】
【００４６】
＜実施例２０及び２１＞ 凍結乾燥製剤
上記と同様にして、表６に示すＢＰＡメグルミン水溶液を調製し、常法により凍結乾燥させた。その後、凍結乾燥粉末に、元の液量とするに必要な量の蒸留水を加えて振ったところ、容易に溶解して無色透明な水溶液が復元された。このことは、本発明のＢＰＡメグルミン含有組成物は、使用時に水を添加して水溶液とすることを目的とした凍結乾燥粉末の形でも製品として供給できることを示している。
【表６】
【産業上の利用可能性】
【００４７】
本発明は、ホウ素中性子捕捉療法において患者に投与されるホウ素含有組成物の液量を大幅に減少させることができる、高濃度のＢＰＡ水溶液の提供を可能にする。また本発明は、水溶液に比して輸送及び保管にコスト上有利な、ＢＰＡ水溶液を与える凍結乾燥粉末の提供も可能にする。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｐ−ボロノフェニルアラニン及びメグルミンを含有してなる、医薬組成物。
【請求項２】
ｐ−ボロノフェニルアラニンに対するメグルミン含有量が、モル比で少なくとも０．８である、請求項１の医薬組成物。
【請求項３】
中性付近のｐＨを有する水溶液である、請求項１又は２の医薬組成物。
【請求項４】
ｐ−ボロノフェニルアラニンの濃度が、少なくとも３ｗ／ｖ％である、請求項３の医薬組成物。
【請求項５】
ｐ−ボロノフェニルアラニン及びメグルミンを含有してなる乾燥製剤である、請求項１又は２の医薬組成物。
【請求項６】
水を加えて復元したとき中性付近のｐＨの水溶液を与えるものである、請求項５の医薬組成物。
【請求項７】
ホウ素中性子捕捉療法用剤である、請求項１ないし６の何れかの医薬組成物。
【請求項８】
ｐ−ボロノフェニルアラニンがＬ−ｐ−ボロノフェニルアラニンである、請求項１ないし７の何れかの医薬組成物。
【請求項９】
ｐ−ボロノフェニルアラニンとメグルミンとを水中で混合して水溶液とするステップと、該水溶液に酸を加えて中性付近のｐＨに調整するステップとを含むものである、ｐ−ボロノフェニルアラニン含有水溶液の製造方法。
【請求項１０】
ｐ−ボロノフェニルアラニンに対するメグルミン含有量が、モル比で少なくとも０．８である、請求項９の製造方法。
【請求項１１】
該水溶液中のｐ−ボロノフェニルアラニンの濃度が、少なくとも３ｗ／ｖ％である、請求項９又は１０の製造方法。
【請求項１２】
請求項９ないし１１の何れかの製造方法により得られるｐ−ボロノフェニルアラニン含有水溶液を凍結乾燥するステップを更に含んでなるものである、ｐ−ボロノフェニルアラニン含有組成物の製造方法。
【請求項１３】
ｐ−ボロノフェニルアラニンがＬ−ｐ−ボロノフェニルアラニンである、請求項９ないし１２の何れかの製造方法。
【請求項１】
ｐ−ボロノフェニルアラニン及びメグルミンを含有してなる、医薬組成物。
【請求項２】
ｐ−ボロノフェニルアラニンに対するメグルミン含有量が、モル比で少なくとも０．８である、請求項１の医薬組成物。
【請求項３】
中性付近のｐＨを有する水溶液である、請求項１又は２の医薬組成物。
【請求項４】
ｐ−ボロノフェニルアラニンの濃度が、少なくとも３ｗ／ｖ％である、請求項３の医薬組成物。
【請求項５】
ｐ−ボロノフェニルアラニン及びメグルミンを含有してなる乾燥製剤である、請求項１又は２の医薬組成物。
【請求項６】
水を加えて復元したとき中性付近のｐＨの水溶液を与えるものである、請求項５の医薬組成物。
【請求項７】
ホウ素中性子捕捉療法用剤である、請求項１ないし６の何れかの医薬組成物。
【請求項８】
ｐ−ボロノフェニルアラニンがＬ−ｐ−ボロノフェニルアラニンである、請求項１ないし７の何れかの医薬組成物。
【請求項９】
ｐ−ボロノフェニルアラニンとメグルミンとを水中で混合して水溶液とするステップと、該水溶液に酸を加えて中性付近のｐＨに調整するステップとを含むものである、ｐ−ボロノフェニルアラニン含有水溶液の製造方法。
【請求項１０】
ｐ−ボロノフェニルアラニンに対するメグルミン含有量が、モル比で少なくとも０．８である、請求項９の製造方法。
【請求項１１】
該水溶液中のｐ−ボロノフェニルアラニンの濃度が、少なくとも３ｗ／ｖ％である、請求項９又は１０の製造方法。
【請求項１２】
請求項９ないし１１の何れかの製造方法により得られるｐ−ボロノフェニルアラニン含有水溶液を凍結乾燥するステップを更に含んでなるものである、ｐ−ボロノフェニルアラニン含有組成物の製造方法。
【請求項１３】
ｐ−ボロノフェニルアラニンがＬ−ｐ−ボロノフェニルアラニンである、請求項９ないし１２の何れかの製造方法。
【公開番号】特開２００８−１００９２５（Ｐ２００８−１００９２５Ａ）
【公開日】平成２０年５月１日（２００８．５．１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−２８２５２４（Ｐ２００６−２８２５２４）
【出願日】平成１８年１０月１７日（２００６．１０．１７）
【出願人】（０００２２８５４５）日本ケミカルリサーチ株式会社 (27)
【出願人】（０００１６２８４７）ステラケミファ株式会社 (81)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年５月１日（２００８．５．１）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１０月１７日（２００６．１０．１７）
【出願人】（０００２２８５４５）日本ケミカルリサーチ株式会社 (27)
【出願人】（０００１６２８４７）ステラケミファ株式会社 (81)
【Ｆターム（参考）】
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