【課題】 ＢＢＢ−特異的タンパク質またはその断片を同定できる方法を提供する。
【解決手段】 脳毛細血管の内皮細胞中のＢＢＢ−特異的タンパク質またはその断片の存在を同定する方法において、脳から単離した新鮮な脳毛細血管の内皮を通常の方法による酵素消化により前精製処理し、得られた消化物を存在する赤血球とアポトーシス細胞を実質的に破壊し脳毛細血管の内皮細胞の少なくとも７０％を生きている状態で維持する溶血性緩衝液で処理し、脳毛細血管の内皮細胞とサブトラクション法に用いる組織からサブトラクション法のｃＤＮＡライブラリーを調製し、一以上のディファレンシャル・ハイブリダイゼーションによりｃＤＮＡのサブトラクション法を実施し、サブトラクション法のｃＤＮＡライブラリーからのクローンを、それら個々の発現型に関するディファレンシャル・ハイブリダイゼーションによって照合し、サブトラクション法のｃＤＮＡライブラリーからのＢＢＢ−特異的タンパク質についてｃＤＮＡ配列を完成し、調査したクローンの発現パターンを、新鮮な培養した脳毛細血管の内皮細胞間で比較し、それにより、ＢＢＢ−特異的タンパク質またはその断片の存在を同定する。 （もっと読む）