目的の遺伝子に作動可能に連結された変異ｌａｃオペレーターを含む核酸、上記核酸を含む宿主細胞、および上記目的の遺伝子を発現させるために上記宿主細胞を用いる方法が、本発明において提供される。ｒｅｃＡが媒介するクローニング方法もまた提供される。一実施形態において、上記変異ｌａｃオペレーターは、ＬａｃＩリプレッサータンパク質に対する上昇した親和性を有し得る。上記核酸はプラスミドまたは染色体であり得る。ＬａｃＩリプレッサータンパク質に対するｌａｃオペレーターの親和性は、少なくとも５倍上昇され得る。変異ｌａｃオペレーターの配列は、配列番号：２から配列番号：６の何れか一つを含み得る。目的の遺伝子は、抗体または酵素のような生物学的活性を有するタンパク質をコードし得る。タンパク質はＴ７遺伝子１またはｔｒｆＡであり得る。
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本発明は、ファージパッケージング機構を使用した、標的核酸のクローニングに関する。パッケージング開始部位を、標的ＤＮＡの中に導入することができる。ファージパッケージングシステムの構成要素を標的ＤＮＡと組み合わせて、ファージカプシドの中にＤＮＡをパッケージすることができる。パッケージＤＮＡを使用して、標的核酸のライブラリーを作り出すこともでき、またはそのＤＮＡを配列決定することもできる。例えば、本発明の一実施形態において、核酸を配列決定するための方法が提供され、この方法は、核酸を含むカプシドを提供するステップと、核酸を単離するステップと、核酸を配列決定するステップとを含み得る。 （もっと読む）

本発明の様々な実施形態は、一般的に、プラスミドＤＮＡ調製物ならびにこのような調製物の作製方法および使用方法に関する。一実施形態では、本発明はプラスミドＤＮＡ調製物を提供する。他の実施形態では、プラスミドＤＮＡは、低下した内毒素レベルを含む。このようなプラスミドＤＮＡ調製物の作製方法および使用方法も提供する。一実施形態では、プラスミドＤＮＡは、ａ）多重欠失株細菌においてプラスミドＤＮＡを増殖させるステップと、ｂ）多重欠失株細菌を溶解して溶解物を生成するステップと、ｃ）溶解物からプラスミドＤＮＡの少なくとも一部を単離し、単離プラスミドＤＮＡを精製するステップとを含む方法によって調製される。リポ多糖および／または腸内共通抗原の産生に関与する遺伝子を欠如している多重欠失株細菌も提供する。 （もっと読む）

本発明は、タンパク質の発現特性が改善された宿主細胞に関する。宿主細胞は、１つまたは複数のｒＲＮＡオペロン内に、希少ｔＲＮＡ遺伝子を含む。本発明は特に、ｔＲＮＡをコードする１つまたは複数のポリヌクレオチドを含む１つまたは複数のｒＲＮＡオペロンを有する宿主細胞に関する。本発明の実施形態において、ｔＲＮＡをコードするポリヌクレオチドは、ヒト、酵母に由来してもよく、または宿主細胞のゲノムに由来してもよい。
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