本発明は、当該分野においてこれまでに教示されていないＲＮＡ５’ポリホスファターゼ酵素の発見、当該酵素を見出す方法、当該酵素の組成物、当該酵素の製造方法、ならびに生物医学的な研究、ヒトおよび非ヒトの診断、治療薬の製造、および他の用途のために当該酵素を使用する種々の方法およびキットに関する。より詳細には、いくつかの実施形態は、生物学的な試料またはインビトロキャップ形成反応から得られた試料を用いる、キャップ形成されているＲＮＡの単離、精製、生成およびアッセイに、ＲＮＡポリホスファターゼを使用する組成物、キットおよび方法を提供する。上記試料はまた、キャップ形成されていないＲＮＡを含有している。他の実施形態は、ＲＮＡポリホスファターゼが分析物特異的なアッセイのためのシグナル増幅酵素を含んでいる、組成物、キットおよび方法を提供する。
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本発明は、５’末端の特定の化学的な部分が異なる所望のクラスのＲＮＡ分子に選択的に５’ライゲーションによりタグを付加するための、ＲＮＡ５’ポリホスファターゼ、ＲＮＡ５’モノホスファターゼ、キャッピング酵素、デキャッピング酵素、核酸に対するピロホスファターゼおよびＲＮＡリガーゼ、ならびに他の酵素を使用する新規な組成物、キットおよび方法を提供する。５’にタグが付加されたＲＮＡ分子は、種々の用途に使用するタグが付加された第一鎖ｃＤＮＡ、二本鎖ｃＤＮＡ、およびセンスＲＮＡまたはアンチセンスＲＮＡを合成するために用いることができる。
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