本開示は、ピキア属の種によって産生されるインスリンまたはインスリン類似体前駆体分子のＯ−グリコシル化レベルを低下させる方法に関する。本開示は、タンパク質マンノシルトランスフェラーゼ（ＰＭＴ）遺伝子の破壊による、ピキア、特にピキア・パストリスをはじめとするメタノール資化性酵母の遺伝子改変ノックアウト株を提供し、これらの株が低下したグリコシル化を有する異種タンパク質を産生することができるようにする。メタノール資化性酵母を形質転換するための、ＰＭＴ１、ＰＭＴ２、ＰＭＴ４、ＰＭＴ５、およびＰＭＴ６遺伝子のコード配列を含むベクターが本開示によって企図される。本開示のＰＭＴ不活化株は、チャンディーガルのＭＴＣＣに寄託されている。これらの株は、ＰＭＴ１／ＧＳ１１５（ＭＴＣＣ ５５１５）、ＰＭＴ４／ＧＳ１１５（ＭＴＣＣ ５５１６）、ＰＭＴ５／ＧＳ１１５（ＭＴＣＣ ５５１７）およびＰＭＴ６／ＧＳ１１５（ＭＴＣＣ ５５１８）である。 （もっと読む）