エーテル型リン脂質の測定方法
【課題】試料中のエーテル型リン脂質の測定方法及び測定用組成物を提供する。
【解決手段】試料中のコリン型のエーテル型リン脂質類の測定方法であって、酵素Ｂを用いて、コリン型のリゾエーテル型リン脂質をコリンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程を含む前記方法を提供する。また、試料中のエタノールアミン型のエーテル型リン脂質類の測定方法であって、酵素Ｂ’を用いて、試料中のエタノールアミン型リゾエーテル型リン脂質を、エタノールアミンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程を含む前記方法を提供する。
【解決手段】試料中のコリン型のエーテル型リン脂質類の測定方法であって、酵素Ｂを用いて、コリン型のリゾエーテル型リン脂質をコリンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程を含む前記方法を提供する。また、試料中のエタノールアミン型のエーテル型リン脂質類の測定方法であって、酵素Ｂ’を用いて、試料中のエタノールアミン型リゾエーテル型リン脂質を、エタノールアミンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程を含む前記方法を提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料中のコリン型のエーテル型リン脂質類の測定方法であって、（ｂ）以下の工程（ｂ１）又は（ｂ２）を行う工程：
（ｂ１）酵素Ｂを用いて、コリン型のリゾエーテル型リン脂質をコリンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程；又は
（ｂ２）酵素Ｂを用いて、コリン型のエーテル型リン脂質をコリンとエーテル型ホスファチジン酸に分解し、コリン型のリゾエーテル型リン脂質をコリンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程；
を含む前記方法。
【請求項２】
試料中のコリン型のエーテル型リン脂質類の測定方法であって、以下の（ａ）〜（ｃ）の工程：
（ａ）酵素Ａを用いて、試料中のコリン型のエーテル型リン脂質をコリン型のリゾエーテル型リン脂質と脂肪酸に分解する工程；
（ｂ）以下の工程（ｂ１）又は（ｂ２）を行う工程：
（ｂ１）酵素Ｂを用いて、コリン型のリゾエーテル型リン脂質をコリンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程；又は
（ｂ２）酵素Ｂを用いて、コリン型のエーテル型リン脂質をコリンとエーテル型ホスファチジン酸に分解し、コリン型のリゾエーテル型リン脂質をコリンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程；及び
（ｃ）工程（ｂ）で得られたコリンの濃度を測定する工程；
を含む前記方法。
【請求項３】
前記試料がホスファチジルコリン及び／又はリゾホスファチジルコリンを含み、前記工程（ｂ）に先立って、以下の工程（ａ１）及び／又は工程（ａ２）：
（ａ１）酵素Ａ１を用いて、ホスファチジルコリンをリゾホスファチジルコリンと脂肪酸に分解する工程；及び／又は
（ａ２）酵素Ａ２を用いて、リゾホスファチジルコリンを分解し、実質的に消去する工程；
を含む、請求項１又は２に記載の測定方法。
【請求項４】
工程（ａ２）が、酵素Ａ２を用いて、リゾホスファチジルコリンをグリセロホスフォコリンと脂肪酸に分解し、実質的に消去する工程である、請求項３に記載の測定方法。
【請求項５】
前記試料がコリンを含み、前記工程（ｂ）に先立って、
（ｐ）試料中のコリンを分解し、実質的に消去する工程
を含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項６】
前記試料がスフィンゴミエリンを含み、前記工程（ｂ）に先立って、
（ｑ）酵素Ｑを用いて、スフィンゴミエリンをセラミドとホスフォリルコリンに分解し、実質的に消去する工程（ただし、酵素Ｑはコリン型のエーテル型リン脂質類に作用しない）
を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項７】
工程（ｑ）が、低濃度界面活性剤の存在下、酵素Ｑを用いて、スフィンゴミエリンをセラミドとホスフォリルコリンに分解し、実質的に消去する工程（ただし、酵素Ｑはコリン型のエーテル型リン脂質類に作用しない）である、請求項６に記載の測定方法。
【請求項８】
前記工程（ａ１）及び（ａ２）の後であって、前記工程（ｂ）に先立って、
（ｒ）グリセロホスフォコリンを分解し、実質的に消去する工程
を含む、請求項３〜７のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項９】
前記工程（ｃ）が、コリンを分解して得られた過酸化水素を定量する方法を用いて行われる、請求項２〜８のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項１０】
前記コリン型のエーテル型リン脂質類が、コリン型のプラズマローゲン類であり、
前記コリン型のリゾエーテル型リン脂質が、コリン型のリゾプラズマローゲンであり、
前記コリン型のエーテル型リン脂質が、コリン型のプラズマローゲンである、
請求項１〜９のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項１１】
試料中のエタノールアミン型のエーテル型リン脂質類の測定方法であって、（ｂ’）以下の工程（ｂ’１）又は（ｂ’２）を行う工程：
（ｂ’１）酵素Ｂ’を用いて、試料中のエタノールアミン型のリゾエーテル型リン脂質を、エタノールアミンとリゾリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程；又は
（ｂ’２）酵素Ｂ’を用いて、エタノールアミン型のエーテル型リン脂質をエタノールアミンとエーテル型ホスファチジン酸に分解し、エタノールアミン型のリゾエーテル型リン脂質をエタノールアミンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程；
を含む前記方法。
【請求項１２】
試料中のエタノールアミン型のエーテル型リン脂質類の測定方法であって、以下の（ａ’）〜（ｃ’）の工程：
（ａ’）酵素Ａ’を用いて、試料中のエタノールアミン型のエーテル型リン脂質をエタノールアミン型のリゾエーテル型リン脂質と脂肪酸に分解する工程；
（ｂ’）以下の工程（ｂ’１）又は（ｂ’２）を行う工程：
（ｂ’１）酵素Ｂ’を用いて、エタノールアミン型のリゾエーテル型リン脂質をエタノールアミンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程；又は
（ｂ’２）酵素Ｂ’を用いて、エタノールアミン型のエーテル型リン脂質をエタノールアミンとエーテル型ホスファチジン酸に分解し、エタノールアミン型のリゾエーテル型リン脂質をエタノールアミンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程；及び
（ｃ’）工程（ｂ’）で得られたエタノールアミンの濃度を測定する工程；
を含む前記方法。
【請求項１３】
前記試料がホスファチジルエタノールアミン及び／又はリゾホスファチジルエタノールアミンを含み、前記工程（ｂ’）に先立って、以下の工程（ａ’１）及び／又は（ａ’２）：
（ａ’１）酵素Ａ’１を用いて、ホスファチジルエタノールアミンをリゾホスファチジルエタノールアミンと脂肪酸に分解する工程；及び／又は
（ａ’２）酵素Ａ’２を用いて、リゾホスファチジルエタノールアミンを分解し、実質的に消去する工程；
を含む、請求項１１又は１２に記載の測定方法。
【請求項１４】
工程（ａ’２）が、酵素Ａ’２を用いて、リゾホスファチジルエタノールアミンをグリセロホスフォエタノールアミンと脂肪酸に分解し、実質的に消去する工程である、請求項１３に記載の測定方法。
【請求項１５】
前記試料がエタノールアミンを含み、前記工程（ｂ’）に先立って、
（ｐ’）試料中のエタノールアミンを分解し、実質的に消去する工程
を含む、請求項１１〜１４のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項１６】
前記工程（ａ’１）及び（ａ’２）の後であって、前記工程（ｂ’）に先立って、
（ｒ’）グリセロホスフォエタノールアミンを分解し、実質的に消去する工程
を含む、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項１７】
前記工程（ａ’）、（ａ’１）、（ａ’２）、（ｂ’）、（ｃ’）、（ｐ’）及び（ｒ’）のいずれか１以上の工程が弱アルカリ性条件下で実施される、請求項１１〜１６のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項１８】
前記工程（ｃ’）が、エタノールアミンを分解して得られた過酸化水素を定量する方法を用いて行われる、請求項１２〜１７のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項１９】
全工程が３０分以内に完了する、請求項１１〜１８のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項２０】
前記エタノールアミン型のエーテル型リン脂質類が、エタノールアミン型のプラズマローゲン類であり、
前記エタノールアミン型のリゾエーテル型リン脂質が、エタノールアミン型のリゾプラズマローゲンであり、
前記エタノールアミン型のエーテル型リン脂質が、エタノールアミン型のプラズマローゲンである、請求項１１〜１９のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項２１】
以下の成分：
（ｉ）ホスファチジルコリンをリゾホスファチジルコリンと脂肪酸に分解する作用を有する酵素；
（ｉｉ）リゾホスファチジルコリンをグリセロホスフォコリンと脂肪酸に分解する作用を有する酵素；
及び
（ｉｉｉ）ホスフォリパーゼＤ（ＰＬＤ）；
を含有する、コリン型のエーテル型リン脂質類測定用組成物。
【請求項２２】
（ｉｖ）コリンオキシダーゼ（ＣＯＤ）；
（ｖ）グリセロホスフォコリンホスフォジエステラーゼ（ＧＰＣＰ）；及び
（ｖｉ）スフィンゴミエリンをセラミドとホスフォリルコリンに分解する作用を有する酵素であって、コリン型のエーテル型リン脂質類に作用しない酵素；
よりなる群から選択されるいずれか１以上の成分をさらに含有する、請求項２１に記載のコリン型のエーテル型リン脂質類測定用組成物。
【請求項２３】
ホスファチジルコリンをリゾホスファチジルコリンと脂肪酸に分解する作用を有する酵素、及び
リゾホスファチジルコリンをグリセロホスフォコリンと脂肪酸に分解する作用を有する酵素を含有する組成物１；並びに
ホスフォリパーゼＤ（ＰＬＤ）を含有する組成物２；
を含む、コリン型のエーテル型リン脂質類測定用キット。
【請求項２４】
前記コリン型のエーテル型リン脂質類が、コリン型のプラズマローゲン類である、請求項２１〜２３のいずれか１項に記載の組成物又はキット。
【請求項２５】
以下の成分：
（ｉ’）ホスファチジルエタノールアミンをリゾホスファチジルエタノールアミンと脂肪酸に分解する作用を有する酵素；
（ｉｉ’）リゾホスファチジルエタノールアミンをグリセロホスフォエタノールアミンと脂肪酸に分解する作用を有する酵素；及び
（ｉｉｉ’）ホスフォリパーゼＤ（ＰＬＤ）
を含有する、エタノールアミン型のエーテル型リン脂質類測定用組成物。
【請求項２６】
さらに以下の成分：
（ｉｖ’）エタノールアミンをアルデヒドとアンモニアと過酸化水素に分解する作用を有する酵素；及び／又は
（ｖ’）グリセロホスフォコリンホスフォジエステラーゼ（ＧＰＣＰ）；
を含有する、請求項２２に記載のエタノールアミン型のエーテル型リン脂質類測定用組成物。
【請求項２７】
ホスファチジルエタノールアミンをリゾホスファチジルエタノールアミンと脂肪酸に分解する作用を有する酵素、及び
リゾホスファチジルエタノールアミンをグリセロホスフォエタノールアミンと脂肪酸に分解する作用を有する酵素
を含有する組成物１’；並びに
ホスフォリパーゼＤ（ＰＬＤ）を含有する組成物２’；
を含む、エタノールアミン型のエーテル型リン脂質類測定用キット。
【請求項２８】
前記エタノールアミン型のエーテル型リン脂質類が、エタノールアミン型のプラズマローゲン類である、請求項２５〜２７のいずれか１項に記載の組成物又はキット。
【請求項２９】
試料中のエーテル型リン脂質類の測定方法であって、以下の（ａ’’）〜（ｃ’’）の工程：
（ａ’’）酵素Ａ’’を用いて、以下の反応で試料中のエーテル型リン脂質をリゾエーテル型リン脂質と脂肪酸に分解する工程；
【化１】
（式中、
Ｒ1は、炭化水素基であり、
Ｒ2は、水素又は炭化水素基であり、
Ｘは、コリン、エタノールアミン、セリン、イノシトール、エタノール又はこれらの誘導体である）
（ｂ’’）以下の工程（ｂ’’１）又は（ｂ’’２）を行う工程：
（ｂ’’１）酵素Ｂ’’を用いて、以下の反応でリゾエーテル型リン脂質を分解する工程；
【化２】
（式中、
Ｒ1は、炭化水素基であり、
Ｘは、コリン、エタノールアミン、セリン、イノシトール、エタノール又はこれらの誘導体である）；又は
（ｂ’’２）酵素Ｂ’’を用いて、上記（ｂ’’１）に示した反応でリゾエーテル型リン脂質を
分解し、以下の反応でエーテル型リン脂質を分解する工程；
【化３】
（式中、
Ｒ1は、炭化水素基であり、
Ｒ2は、水素又は炭化水素基であり、
Ｘは、コリン、エタノールアミン、セリン、イノシトール、エタノール又はこれらの誘導体である）；並びに
（ｃ’’）工程（ｂ’’）で得られたＸの濃度を測定する工程；
（但し、ここで、上記工程（ａ’’）〜（ｃ’’）におけるＸは全て同一である）
を含む、前記方法。
【請求項１】
試料中のコリン型のエーテル型リン脂質類の測定方法であって、（ｂ）以下の工程（ｂ１）又は（ｂ２）を行う工程：
（ｂ１）酵素Ｂを用いて、コリン型のリゾエーテル型リン脂質をコリンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程；又は
（ｂ２）酵素Ｂを用いて、コリン型のエーテル型リン脂質をコリンとエーテル型ホスファチジン酸に分解し、コリン型のリゾエーテル型リン脂質をコリンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程；
を含む前記方法。
【請求項２】
試料中のコリン型のエーテル型リン脂質類の測定方法であって、以下の（ａ）〜（ｃ）の工程：
（ａ）酵素Ａを用いて、試料中のコリン型のエーテル型リン脂質をコリン型のリゾエーテル型リン脂質と脂肪酸に分解する工程；
（ｂ）以下の工程（ｂ１）又は（ｂ２）を行う工程：
（ｂ１）酵素Ｂを用いて、コリン型のリゾエーテル型リン脂質をコリンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程；又は
（ｂ２）酵素Ｂを用いて、コリン型のエーテル型リン脂質をコリンとエーテル型ホスファチジン酸に分解し、コリン型のリゾエーテル型リン脂質をコリンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程；及び
（ｃ）工程（ｂ）で得られたコリンの濃度を測定する工程；
を含む前記方法。
【請求項３】
前記試料がホスファチジルコリン及び／又はリゾホスファチジルコリンを含み、前記工程（ｂ）に先立って、以下の工程（ａ１）及び／又は工程（ａ２）：
（ａ１）酵素Ａ１を用いて、ホスファチジルコリンをリゾホスファチジルコリンと脂肪酸に分解する工程；及び／又は
（ａ２）酵素Ａ２を用いて、リゾホスファチジルコリンを分解し、実質的に消去する工程；
を含む、請求項１又は２に記載の測定方法。
【請求項４】
工程（ａ２）が、酵素Ａ２を用いて、リゾホスファチジルコリンをグリセロホスフォコリンと脂肪酸に分解し、実質的に消去する工程である、請求項３に記載の測定方法。
【請求項５】
前記試料がコリンを含み、前記工程（ｂ）に先立って、
（ｐ）試料中のコリンを分解し、実質的に消去する工程
を含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項６】
前記試料がスフィンゴミエリンを含み、前記工程（ｂ）に先立って、
（ｑ）酵素Ｑを用いて、スフィンゴミエリンをセラミドとホスフォリルコリンに分解し、実質的に消去する工程（ただし、酵素Ｑはコリン型のエーテル型リン脂質類に作用しない）
を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項７】
工程（ｑ）が、低濃度界面活性剤の存在下、酵素Ｑを用いて、スフィンゴミエリンをセラミドとホスフォリルコリンに分解し、実質的に消去する工程（ただし、酵素Ｑはコリン型のエーテル型リン脂質類に作用しない）である、請求項６に記載の測定方法。
【請求項８】
前記工程（ａ１）及び（ａ２）の後であって、前記工程（ｂ）に先立って、
（ｒ）グリセロホスフォコリンを分解し、実質的に消去する工程
を含む、請求項３〜７のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項９】
前記工程（ｃ）が、コリンを分解して得られた過酸化水素を定量する方法を用いて行われる、請求項２〜８のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項１０】
前記コリン型のエーテル型リン脂質類が、コリン型のプラズマローゲン類であり、
前記コリン型のリゾエーテル型リン脂質が、コリン型のリゾプラズマローゲンであり、
前記コリン型のエーテル型リン脂質が、コリン型のプラズマローゲンである、
請求項１〜９のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項１１】
試料中のエタノールアミン型のエーテル型リン脂質類の測定方法であって、（ｂ’）以下の工程（ｂ’１）又は（ｂ’２）を行う工程：
（ｂ’１）酵素Ｂ’を用いて、試料中のエタノールアミン型のリゾエーテル型リン脂質を、エタノールアミンとリゾリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程；又は
（ｂ’２）酵素Ｂ’を用いて、エタノールアミン型のエーテル型リン脂質をエタノールアミンとエーテル型ホスファチジン酸に分解し、エタノールアミン型のリゾエーテル型リン脂質をエタノールアミンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程；
を含む前記方法。
【請求項１２】
試料中のエタノールアミン型のエーテル型リン脂質類の測定方法であって、以下の（ａ’）〜（ｃ’）の工程：
（ａ’）酵素Ａ’を用いて、試料中のエタノールアミン型のエーテル型リン脂質をエタノールアミン型のリゾエーテル型リン脂質と脂肪酸に分解する工程；
（ｂ’）以下の工程（ｂ’１）又は（ｂ’２）を行う工程：
（ｂ’１）酵素Ｂ’を用いて、エタノールアミン型のリゾエーテル型リン脂質をエタノールアミンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程；又は
（ｂ’２）酵素Ｂ’を用いて、エタノールアミン型のエーテル型リン脂質をエタノールアミンとエーテル型ホスファチジン酸に分解し、エタノールアミン型のリゾエーテル型リン脂質をエタノールアミンとリゾエーテル型ホスファチジン酸に分解する工程；及び
（ｃ’）工程（ｂ’）で得られたエタノールアミンの濃度を測定する工程；
を含む前記方法。
【請求項１３】
前記試料がホスファチジルエタノールアミン及び／又はリゾホスファチジルエタノールアミンを含み、前記工程（ｂ’）に先立って、以下の工程（ａ’１）及び／又は（ａ’２）：
（ａ’１）酵素Ａ’１を用いて、ホスファチジルエタノールアミンをリゾホスファチジルエタノールアミンと脂肪酸に分解する工程；及び／又は
（ａ’２）酵素Ａ’２を用いて、リゾホスファチジルエタノールアミンを分解し、実質的に消去する工程；
を含む、請求項１１又は１２に記載の測定方法。
【請求項１４】
工程（ａ’２）が、酵素Ａ’２を用いて、リゾホスファチジルエタノールアミンをグリセロホスフォエタノールアミンと脂肪酸に分解し、実質的に消去する工程である、請求項１３に記載の測定方法。
【請求項１５】
前記試料がエタノールアミンを含み、前記工程（ｂ’）に先立って、
（ｐ’）試料中のエタノールアミンを分解し、実質的に消去する工程
を含む、請求項１１〜１４のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項１６】
前記工程（ａ’１）及び（ａ’２）の後であって、前記工程（ｂ’）に先立って、
（ｒ’）グリセロホスフォエタノールアミンを分解し、実質的に消去する工程
を含む、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項１７】
前記工程（ａ’）、（ａ’１）、（ａ’２）、（ｂ’）、（ｃ’）、（ｐ’）及び（ｒ’）のいずれか１以上の工程が弱アルカリ性条件下で実施される、請求項１１〜１６のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項１８】
前記工程（ｃ’）が、エタノールアミンを分解して得られた過酸化水素を定量する方法を用いて行われる、請求項１２〜１７のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項１９】
全工程が３０分以内に完了する、請求項１１〜１８のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項２０】
前記エタノールアミン型のエーテル型リン脂質類が、エタノールアミン型のプラズマローゲン類であり、
前記エタノールアミン型のリゾエーテル型リン脂質が、エタノールアミン型のリゾプラズマローゲンであり、
前記エタノールアミン型のエーテル型リン脂質が、エタノールアミン型のプラズマローゲンである、請求項１１〜１９のいずれか１項に記載の測定方法。
【請求項２１】
以下の成分：
（ｉ）ホスファチジルコリンをリゾホスファチジルコリンと脂肪酸に分解する作用を有する酵素；
（ｉｉ）リゾホスファチジルコリンをグリセロホスフォコリンと脂肪酸に分解する作用を有する酵素；
及び
（ｉｉｉ）ホスフォリパーゼＤ（ＰＬＤ）；
を含有する、コリン型のエーテル型リン脂質類測定用組成物。
【請求項２２】
（ｉｖ）コリンオキシダーゼ（ＣＯＤ）；
（ｖ）グリセロホスフォコリンホスフォジエステラーゼ（ＧＰＣＰ）；及び
（ｖｉ）スフィンゴミエリンをセラミドとホスフォリルコリンに分解する作用を有する酵素であって、コリン型のエーテル型リン脂質類に作用しない酵素；
よりなる群から選択されるいずれか１以上の成分をさらに含有する、請求項２１に記載のコリン型のエーテル型リン脂質類測定用組成物。
【請求項２３】
ホスファチジルコリンをリゾホスファチジルコリンと脂肪酸に分解する作用を有する酵素、及び
リゾホスファチジルコリンをグリセロホスフォコリンと脂肪酸に分解する作用を有する酵素を含有する組成物１；並びに
ホスフォリパーゼＤ（ＰＬＤ）を含有する組成物２；
を含む、コリン型のエーテル型リン脂質類測定用キット。
【請求項２４】
前記コリン型のエーテル型リン脂質類が、コリン型のプラズマローゲン類である、請求項２１〜２３のいずれか１項に記載の組成物又はキット。
【請求項２５】
以下の成分：
（ｉ’）ホスファチジルエタノールアミンをリゾホスファチジルエタノールアミンと脂肪酸に分解する作用を有する酵素；
（ｉｉ’）リゾホスファチジルエタノールアミンをグリセロホスフォエタノールアミンと脂肪酸に分解する作用を有する酵素；及び
（ｉｉｉ’）ホスフォリパーゼＤ（ＰＬＤ）
を含有する、エタノールアミン型のエーテル型リン脂質類測定用組成物。
【請求項２６】
さらに以下の成分：
（ｉｖ’）エタノールアミンをアルデヒドとアンモニアと過酸化水素に分解する作用を有する酵素；及び／又は
（ｖ’）グリセロホスフォコリンホスフォジエステラーゼ（ＧＰＣＰ）；
を含有する、請求項２２に記載のエタノールアミン型のエーテル型リン脂質類測定用組成物。
【請求項２７】
ホスファチジルエタノールアミンをリゾホスファチジルエタノールアミンと脂肪酸に分解する作用を有する酵素、及び
リゾホスファチジルエタノールアミンをグリセロホスフォエタノールアミンと脂肪酸に分解する作用を有する酵素
を含有する組成物１’；並びに
ホスフォリパーゼＤ（ＰＬＤ）を含有する組成物２’；
を含む、エタノールアミン型のエーテル型リン脂質類測定用キット。
【請求項２８】
前記エタノールアミン型のエーテル型リン脂質類が、エタノールアミン型のプラズマローゲン類である、請求項２５〜２７のいずれか１項に記載の組成物又はキット。
【請求項２９】
試料中のエーテル型リン脂質類の測定方法であって、以下の（ａ’’）〜（ｃ’’）の工程：
（ａ’’）酵素Ａ’’を用いて、以下の反応で試料中のエーテル型リン脂質をリゾエーテル型リン脂質と脂肪酸に分解する工程；
【化１】
（式中、
Ｒ1は、炭化水素基であり、
Ｒ2は、水素又は炭化水素基であり、
Ｘは、コリン、エタノールアミン、セリン、イノシトール、エタノール又はこれらの誘導体である）
（ｂ’’）以下の工程（ｂ’’１）又は（ｂ’’２）を行う工程：
（ｂ’’１）酵素Ｂ’’を用いて、以下の反応でリゾエーテル型リン脂質を分解する工程；
【化２】
（式中、
Ｒ1は、炭化水素基であり、
Ｘは、コリン、エタノールアミン、セリン、イノシトール、エタノール又はこれらの誘導体である）；又は
（ｂ’’２）酵素Ｂ’’を用いて、上記（ｂ’’１）に示した反応でリゾエーテル型リン脂質を
分解し、以下の反応でエーテル型リン脂質を分解する工程；
【化３】
（式中、
Ｒ1は、炭化水素基であり、
Ｒ2は、水素又は炭化水素基であり、
Ｘは、コリン、エタノールアミン、セリン、イノシトール、エタノール又はこれらの誘導体である）；並びに
（ｃ’’）工程（ｂ’’）で得られたＸの濃度を測定する工程；
（但し、ここで、上記工程（ａ’’）〜（ｃ’’）におけるＸは全て同一である）
を含む、前記方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【公開番号】特開２０１２−２１０１７９（Ｐ２０１２−２１０１７９Ａ）
【公開日】平成２４年１１月１日（２０１２．１１．１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−７７３５５（Ｐ２０１１−７７３５５）
【出願日】平成２３年３月３１日（２０１１．３．３１）
【出願人】（３０３０４６２９９）旭化成ファーマ株式会社 (105)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年１１月１日（２０１２．１１．１）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年３月３１日（２０１１．３．３１）
【出願人】（３０３０４６２９９）旭化成ファーマ株式会社 (105)
【Ｆターム（参考）】
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