【課題】天然ヒト型化抗体の製造方法の提供。
【解決手段】非ヒト由来の相補性決定領域（CDR）及び天然ヒト抗体由来のフレームワーク領域（FR）を有する免疫原性を低減させた天然ヒト型化抗体の製造方法により得られる抗体。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
非ヒト由来の相補性決定領域（CDR）及び天然ヒト抗体由来のフレームワーク領域（FR）を有する免疫原性を低減させた天然ヒト型化抗体の製造方法であって下記（１）〜（８）の工程を有する方法によって得られた天然ヒト型化抗体を用意し、当該ヒト型化抗体をコードする核酸を宿主細胞に導入し、そして該宿主細胞を培養することを特徴とする、天然ヒト型化抗体の製造方法：
（１）目的とする抗原に対して反応性の非ヒトモノクローナル抗体を用意し、
（２）前記（１）のモノクローナル抗体中のＨ鎖及びＬ鎖それぞれのFRのアミノ酸配列に対して高い同一性を有するヒト抗体のＨ鎖及びＬ鎖それぞれを複数用意し、
（３）前記（２）における１種類のＨ鎖と１種類のＬ鎖のＶ領域のそれぞれ４個のFRで前記（１）の非ヒトモノクローナル抗体の対応するFRを置換して第一のヒト型化抗体を作製し、
（４）前記（３）において作製したヒト型化抗体の抗原への結合性又は抗原の生物活性を中和する能力を測定し、
（５）作製したヒト型化抗体中のＨ鎖とＬ鎖のそれぞれのＶ領域における、少なくとも１つのFR2又はFR3を含む１〜３個のFRを、(２）で用意したヒト抗体の内、(３）で使用したものとは異なるヒト抗体の対応するFRにより置換した後、両者を組合せて第二のヒト型化抗体を作製し、
（６）前記（５）で作製した第二のヒト型化抗体と前記（３）で得た第一のヒト型化抗体とを、抗原に対する結合性、又は抗原の生物活性を中和する能力について比較し、より高い活性を有するヒト型化抗体を選択し、前記（１）における非ヒトモノクローナル抗体と同等の活性を有するヒト型化抗体が得られない場合には、
（７）前記（６）で選択されたヒト型化抗体について、前記（５)〜(６）の段階を更に実施して第三のヒト型化抗体を作製し、前記第二のヒト型化抗体と抗原に対する結合性又は抗原の生物活性を中和する能力について比較し、より高い活性を示すヒト型化抗体を選択し、そして
（８）前記（１）における非ヒトモノクローナル抗体と同等の活性を有するヒト型化抗体が得られるまで前記（７)の段階を反復する。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【公開番号】特開２００８−１６１１９８（Ｐ２００８−１６１１９８Ａ）
【公開日】平成２０年７月１７日（２００８．７．１７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−２９５６８（Ｐ２００８−２９５６８）
【出願日】平成２０年２月８日（２００８．２．８）
【分割の表示】特願２００７−４７０９１（Ｐ２００７−４７０９１）の分割
【原出願日】平成１１年４月２日（１９９９．４．２）
【出願人】（０００００３３１１）中外製薬株式会社 (228)
【Ｆターム（参考）】