仔稚魚の飼育方法
【課題】カサゴやオニオコゼ等の種苗生産初期に発生し甚大な被害を招く大量へい死を，抗菌剤を使用することなく，かつ容易に軽減し，生産の安定化，効率化を図り生産性を高める新規の仔稚魚飼育方法を提供する。
【解決手段】安定型ビタミンＣ誘導体（アスコルビン酸リン酸マグネシウム，アスコルビン酸リン酸ナトリウム等）を飼育水の水量に対し２０ｇ／トン，またはポリフェノール（カテキン，アントシアニン，プロアントシアニジン等）を飼育水の水量に対し１８０〜３００ｍｇ／トンの添加量で，連続または断続的に添加することを特徴とする新規の仔稚魚飼育方法。
【解決手段】安定型ビタミンＣ誘導体（アスコルビン酸リン酸マグネシウム，アスコルビン酸リン酸ナトリウム等）を飼育水の水量に対し２０ｇ／トン，またはポリフェノール（カテキン，アントシアニン，プロアントシアニジン等）を飼育水の水量に対し１８０〜３００ｍｇ／トンの添加量で，連続または断続的に添加することを特徴とする新規の仔稚魚飼育方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は，大量へい死を軽減し安定的かつ効率的な種苗生産を行うことを目的とした新規の仔稚魚の飼育方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
食料産業として重要な水産業の持続的発展を図るため、栽培漁業や養殖業などつくり育てる漁業が推進されている。これらの実現に不可欠な稚魚を提供すべく種苗生産は現在、マダイ、ヒラメ、トラフグをはじめ多くの有用魚種を対象に全国で行われている。
【０００３】
一般に魚類、特に海産魚のふ化仔魚は、口も開いていないなど体各部が生理的にも機能的にも非常に未発達な状態で生まれてくるため、飼育初期には餌料の種類、栄養、飼育環境の不適やウイルス、病原性細菌、寄生虫等による感染症などにより大量へい死が発生しやすく、生残率低下による生産中止など深刻な被害に及ぶ場合も少なくない。
【０００４】
このような大量へい死に関する対抗手段として、薬剤（ニフルスチレン酸ナトリウム，オキソリン酸など）を飼育水中に添加し高い生残率を維持する飼育法（特許文献１）が開示されている。
【０００５】
また薬剤を使用せず「ほっとけ飼育」（非特許文献１）や養殖環境改善剤を用いた細菌制御を目的とした飼育法により大量へい死を軽減できることが報告されている（非特許文献２）。
【０００６】
また飼育水にアスコルビン酸を添加することでカサゴの大量へい死を抑制出来ることが報告されている（非特許文献３）。
【０００７】
【特許文献１】特開平８−９８２１
【非特許文献１】栽培漁業シリーズＮｏ．４ ヒラメの種苗生産マニュアル「ほっとけ飼育」による飼育方法，１９９８
【非特許文献２】栽培漁業技術開発研究、３２（１）、５−１３、２００５
【非特許文献３】平成１１年日本水産学会秋季大会講演要旨集，Ｐ７９
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかし、常用的な抗菌剤使用には耐性菌出現の問題があるほか，流水式で飼育を行う場合には飼育水中の薬剤を一定濃度で維持するためには極めて大量の薬剤が必要となり、コストが非常に高いという問題点がある。
【０００９】
また生産された種苗が将来，食用魚として利用されることを考慮すると，無投薬を求める消費者の嗜好と逆行するという問題点もある。
【００１０】
また、ほっとけ飼育は一般的な流水式の飼育法ではなく止水環境により細菌叢を安定させることを特徴とする飼育法であるが，管理がうまくいかない場合には止水であるが故に水質が悪化しやすく，オニオコゼなど水温２５℃以上に達する夏季の生産魚種においては特に水質管理が難しい。
【００１１】
また、養殖環境改善剤はバチルス等の魚介類に毒性のない細菌をゼオライト等の基質に吸着させたもの（再公表：特願平１０−５４２５７８）で，これら細菌を優先させることを目的として使用するが，培養水由来の細菌を大量に含む生物餌料や微細藻類を毎日給与する飼育法では，十分な注意を払っていても特定細菌を安定的に優先させることはそれほど容易ではない。
【００１２】
また、アスコルビン酸は飼育水中では非常に不安定な性質を持ち，さらに分解されたアスコルビン酸によって水中の細菌が増殖することから水質悪化を招きやすく，オニオコゼなど水温２５℃以上に達する夏季の生産魚種の場合は特に水質管理が難しい。
【００１３】
本発明の目的は，抗菌剤を使用することなく、容易に大量へい死を軽減する飼育法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
上記目的を達成するために，発明者らは鋭意研究した結果，本発明の安定型ビタミンＣ誘導体またはポリフェノールの有効量を飼育水に添加する仔稚魚の飼育方法が大量へい死の軽減に有効であることを見出した。
【００１５】
すなわち本発明は、安定型ビタミンＣ誘導体またはポリフェノールの有効量を飼育水に連続または断続的に添加することを特徴とする生産性の高い新規の仔稚魚飼育方法を提供するものである。
【発明の効果】
【００１６】
本発明の飼育方法によれば，基本的な飼育方法を大きく変更する必要がなく、添加物の水溶液を飼育水に添加するというごく簡単な作業のみで、容易に大量へい死を軽減することができ、種苗生産の安定化、効率化が図られ、生産性を高める効果が得られる。
【００１７】
本発明で使用される安定型ビタミンＣ誘導体，ポリフェノールはいずれも従来から化粧品原料，食品添加物として広く使用されているもので，食品としての安全性には全く問題がない点で優れている。
【００１８】
さらにいずれも水溶性が高く，飼育水への添加が容易に行える点で優れている。
【００１９】
また、抗菌剤を使用しないため、耐性菌の出現を危惧する必要はなく、消費者の嗜好にも適合するという点でも優れている。
【００２０】
また、大量へい死により減少した仔魚にかかった生産コストは、生残種苗に上乗せされる。本発明により大量へい死による全滅を回避し、生残率が向上した場合、そのコスト負担は薬剤添加の場合と比較して実用上，充分許容出来る範囲であり，経済的効果は大きい。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】
本発明では，基本的な飼育は一般的な種苗生産方法と同様に飼育を行うことができる。
すなわち水槽の材質はポリエチレン、ポリカーボネイト、コンクリート等、いずれも好適に使用出来る。水槽の規模は３０リットルの小型水槽から１００トン程度の大型水槽まで使用できるが、特に５００リットルから３０トン程度の水槽が好ましい。添加物が飼育水槽内に速やかに拡散するよう注水、エアレーションを配置する。
【００２２】
飼育水は流水とし、換水率は１００〜２００％／日が好ましい。
【００２３】
飼育開始時の受精卵、仔魚の収容密度は飼育水１トン当たり１０００〜３００００尾が可能であるが、特に５０００〜２００００尾が好ましい。餌料はワムシ、アルテミアなどの生物餌料を１日１〜２回給餌し、後に配合飼料を併用する。給餌量は仔魚の成長に応じて順次増加させる。生物餌料の飢餓防止、水中照度の調整、水質安定等の目的で微細藻類、例えばナンノクロロプシスや淡水産クロレラなどを飼育水に添加することができるが、特に濃縮ナンノクロロプシスを１日１回、５０〜１００万ｃｅｌｌｓ／ｍｌの濃度になるよう添加するのが好ましい。
【００２４】
安定型ビタミンＣ誘導体はアスコルビン酸リン酸マグネシウム，アスコルビン酸リン酸ナトリウムなどいずれも好適に使用できるが、特にアスコルビン酸リン酸マグネシウムを使用することが好ましい。
アスコルビン酸リン酸マグネシウムの添加量は水槽の水量に対し１５〜２５ｇ／トン、特に２０ｇ／トンが好ましい。
【００２５】
ポリフェノールはカテキン，アントシアニン，プロアントシアニジン等，いずれを用いても良いが、特にカテキンが好ましい。カテキンとして例えばエピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）などの試薬を利用することが出来るが，入手しやすく、より安価な市販の緑茶抽出物を使用することも出来る。カテキンの添加量は水槽の水量に対し１８０〜３００ｍｇ／トン程度が好ましい。緑茶抽出物を添加する場合は、製品のカテキン濃度から逆算して添加量を決定する。例えば、茶カテキン濃度を約３０％とした市販の緑茶抽出物Ａを用いる場合は１ｇ／トン（カテキン濃度として３００ｍｇ／トン），茶カテキン濃度を約９０％とした市販の緑茶抽出物Ｂを用いる場合は０．２ｇ／トン（カテキン濃度として１８０ｍｇ／トン）が好ましい。
【００２６】
添加は２または３日令頃から大量へい死の発生しやすい時期を過ぎる１０〜１５日令までの期間，隔日もしくは毎日行うと良いが，好ましくは卵または仔魚収容日から毎日，１日１回添加するのが好ましい。本発明に用いられる添加物は必要量をあらかじめ蒸留水に溶解させた水溶液として添加するのが好ましい。添加方法は点滴瓶を用いて０．５〜６時間掛けて滴下する方法、ビーカー等を用いて一度に流し込む方法のいずれを用いても良いが、特に時間を掛けて滴下する場合は、光による変性を防ぐため点滴瓶、チューブ等をアルミホイルで覆って遮光しておくことが好ましい。また添加物ができるだけ速やかに均等に拡散するように、エアレーションの位置に添加することが好ましい。
【実施例】
【００２７】
以下，本発明を実施例により更に詳細に説明するが，本発明は，下記実施例に限定されるものではない。
【００２８】
実施例１ 仔魚の生残率に及ぼす飼育水へのポリフェノール添加効果−１
（供試魚）オニオコゼ
【００２９】
（ポリフェノール）茶ポリフェノールを主成分とする市販の緑茶抽出物ＡおよびＢを使用した。試験区としてＡ添加区およびＢ添加区を各１区と対照区を設けた。試験区には蒸留水１０００ｍｌにＡは０．５ｇ（カテキンとして３００ｍｇ／トン），Ｂは０．１ｇ（カテキンとして１８０ｍｇ／トン）を溶解し卵収容直後から実験終了まで１日１回，点滴瓶を用いて約２時間かけて滴下した。対照区には蒸留水１０００ｍｌを同様の方法で滴下した。
【００３０】
（飼育方法）５００リットル透明ポリカーボネイト水槽４基にふ化直前の受精卵を１万粒ずつ収容した。卵収容時から紫外線照射海水を２００％／日の割合で注水し，排水は４０目のメッシュスクリーンで作成したアンドンを用いて水槽中央からサイフォン方式で行った。水槽中央に直径５０ｍｍの球形エアストーン１個を設置し，飼育水が緩やかに撹拌されるよう弱通気を施した。
飼育水には毎日，自家製濃縮ナンノクロロプシスを飼育水中の細胞数が５０万ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう添加した。餌料系列はワムシ，アルテミア幼生，配合飼料とした。ワムシは市販の栄養強化剤で栄養強化したＬ型ワムシを２日齢から飼育水中の密度で５〜３０個体／ｍｌになるよう給餌した。アルテミアは北米産の卵を脱殻処理して使用し，ふ化後，市販の栄養強化剤で栄養強化した幼生を１０日齢から０．２〜２個体／ｍｌになるよう給餌した。生残尾数の推定は夜間の柱状サンプリング法，すなわち仔魚が比較的均等に分散する２１：００頃に直径４０ｍｍの塩ビパイプにより飼育水とともに仔魚を採取し採取水量と採取尾数から推定する方法により行い，１日齢の生残尾数を１００％として生残率を求めた。結果を表１に示す。
【００３１】
（結果）表１に示したとおり７日齢で生残尾数に明確な差が現れ，１５日齢における生残率は対照区が１５．５％と１７．０％であったのに対し，ＢおよびＡ添加区ではそれぞれ４２．６％，３４．５％と対照区に比べ明らかに高かった。成長については実験区間に顕著な差は見られなかった。
【００３２】
【表１】
【００３３】
実施例２ 仔魚の生残率に及ぼす飼育水へのポリフェノール添加効果−２
（供試魚）オニオコゼ
【００３４】
（ポリフェノール）茶ポリフェノールを主成分とする市販の緑茶抽出物ＡおよびＢを使用した。試験区としてＡ添加区およびＢ添加区を各１区と対照区を設けた。試験区には蒸留水１０００ｍｌにＡは０．５ｇ（カテキンとして３００ｍｇ／トン），Ｂは０．１ｇ（カテキンとして１８０ｍｇ／トン）を溶解し卵収容直後から実験終了まで１日１回，点滴瓶を用いて約２時間かけて滴下した。対照区には蒸留水１０００ｍｌを同様の方法で滴下した。
【００３５】
（飼育方法）５００リットル透明ポリカーボネイト水槽４基にふ化直前の受精卵を１万粒ずつ収容した。卵収容時から紫外線照射海水を２００％／日の割合で注水し，排水は４０目のメッシュスクリーンで作成したアンドンを用いて水槽中央からサイフォン方式で行った。水槽中央に直径５０ｍｍの球形エアストーン１個を設置し，飼育水が緩やかに撹拌されるよう弱通気を施した。
飼育水には毎日，自家製濃縮ナンノクロロプシスを飼育水中の細胞数が５０万ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう添加した。ワムシは市販の栄養強化剤で栄養強化したＬ型ワムシを２日齢から飼育水中の密度で５〜３０個体／ｍｌになるよう給餌した。生残尾数の推定は夜間の柱状サンプリング法，すなわち仔魚が比較的均等に分散する２１：００頃に直径４０ｍｍの塩ビパイプにより飼育水とともに仔魚を採取し採取水量と採取尾数から推定する方法により行い，１日齢の生残尾数を１００％として生残率を求めた。
【００３６】
（結果）表２に示すとおり、対照区の２面で５日齢と７日齢に大量へい死が発生し，それぞれ全滅したため，この時点で実験を打ち切ったが，７日齢における試験区の生残率はＢ添加区で５４．３％，Ａ添加区で８２．８％と，対照区に比べ顕著に高い生残率を示した。一方，成長および摂餌については実験区間に顕著な差は見られなかった。
【００３７】
【表２】
【００３８】
実施例３ 仔魚の生残率に及ぼす飼育水へのポリフェノール添加効果−３
（供試魚）オニオコゼ
【００３９】
（ポリフェノール）茶ポリフェノールを主成分とする市販の緑茶抽出物Ａを使用した。試験区としてＡ添加区と対照区を各１区設定し，Ａ添加区には蒸留水２０００ｍｌにＡを２０ｇ（カテキンとして３００ｍｇ／トン）溶解し，卵収容直後から１８日齢まで１日１回，飼育水槽に直接添加した。対照区には何も添加しなかった。
【００４０】
（飼育方法）２０トンコンクリート円形水槽２基にふ化直前の受精卵を４２．６万粒ずつ収容した。卵収容時からろ過海水を２００％／日の割合で注水し，排水は４０目のメッシュスクリーンを用いて水槽中央から行った。通気は水槽中央の円柱を取り巻くように設置したユニホースから緩やかに行った。飼育水には毎日，自家製濃縮ナンノクロロプシスを飼育水中の細胞数が５０万ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう添加した。餌料系列はワムシ，アルテミア幼生，配合飼料とした。ワムシは市販の栄養強化剤で栄養強化したＬ型ワムシを２日齢から飼育水中の密度で５〜３０個体／ｍｌになるよう給餌した。アルテミアは北米産の卵を脱殻処理して使用し，ふ化後，市販の栄養強化剤で栄養強化した幼生を１０日齢から０．２〜２個体／ｍｌになるよう給餌した。
【００４１】
（結果）対照区およびＡ添加区ともに２日齢から水面に浮上へい死個体が観察され生残尾数が減少し，さらに対照区では７日齢に大量へい死が発生し，ほぼ全滅したため９日齢で飼育を中止した。一方，Ａ添加区では対照区のような大量へい死は観察されず１８日齢から１９日齢にかけて着底前仔魚の移槽を行う際にフィッシュカウンターによる計数を行った。Ａ添加区の１９日齢における生残率は１８．７％であった。なお，これらの仔魚は飼育を継続し２２日齢から３３日齢にかけて平均全長１５．０ｍｍ（１２．１〜１７．１ｍｍ）の稚魚３．６万尾を取り上げた。また９日齢までの両者の成長にはほとんど差がなかった。
【００４２】
【表３】
【００４３】
実施例４ 仔魚の生残率に及ぼす飼育水へのポリフェノール添加効果−４
（供試魚）オニオコゼ
【００４４】
（ポリフェノール）茶ポリフェノールを主成分とする市販の緑茶抽出物Ａを使用した。試験区としてＡ添加区１面と対照区２面を設定し，試験区には蒸留水１０００ｍｌにＡを５ｇ（カテキンとして３００ｍｇ／トン）溶解し，仔魚収容直後から１５日齢まで１日１回，飼育水槽に直接添加した。対照区には蒸留水のみ１０００ｍｌを同様に添加した。
【００４５】
（飼育方法）６トンコンクリート角形水槽（有効水量５トン）３面にふ化仔魚を約４万尾ずつ（３．７〜４．９万尾）収容した。仔魚収容時から紫外線殺菌海水を１００％／日の割合で注水し，排水は４０目のメッシュスクリーンで作成したアンドンを排水口に設置し底面より行った。通気は水槽壁面に沿って底面に対角に設置した長さ１ｍのユニホースから４本から緩やかに行い，水槽内に時計回りの緩やかな回転流を作った。飼育水には毎日，自家製濃縮ナンノクロロプシスを飼育水中の細胞数が１００万ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう添加した。餌料系列はＬ型ワムシ，アルテミア幼生，配合飼料とした。ワムシ，アルテミアは市販の栄養強化剤で栄養強化した。Ｌ型ワムシを１日齢から飼育水中の密度で５〜１５個体／ｍｌになるよう給餌した。アルテミアは北米産の卵を脱殻処理して使用し，５日齢から０．０５〜２個体／ｍｌになるよう給餌した。
【００４６】
（結果）対照区２面はいずれも９〜１０日齢にかけて大量へい死が発生し，ほぼ全滅したが，Ａ添加区では対照区のような大量へい死は観察されず１０日齢における生残率は５５．３％であった。なお，Ａ添加区の仔魚は飼育を継続し１３日齢から２０日齢にかけて全長１０．０〜１５．０ｍｍの稚魚１．５万尾（最終生残率：４１．７％）を取り上げたのに対し，対照区の１面は５０６尾（最終生残率：１．０％）を取り上げるに止まり，試験区で顕著な生残率の向上が見られた。
【００４７】
【表４】
【００４８】
実施例５ 仔魚の生残率に及ぼす飼育水へのポリフェノール添加効果−５
（供試魚）オニオコゼ
【００４９】
（ポリフェノール）茶ポリフェノールを主成分とする市販の緑茶抽出物Ａを使用した。試験区としてＡ添加区１面と対照区２面を設定し，試験区には蒸留水１０００ｍｌにＡを７ｇ（カテキンとして３００ｍｇ／トン）溶解し，仔魚収容直後から１５日齢まで１日１回，飼育水槽に直接添加した。対照区には蒸留水のみ１０００ｍｌを同様に添加した。
【００５０】
（飼育方法）８トンコンクリート角形水槽（有効水量７トン）３面にふ化仔魚を約５万尾ずつ（４．４〜６．２万尾）収容した。仔魚収容時から紫外線殺菌海水を１００％／日の割合で注水し，排水は４０目のメッシュスクリーンで作成したアンドンを排水口に設置し底面より行った。通気は水槽壁面に沿って底面に対角に設置した長さ１ｍのユニホースから４本から緩やかに行い，水槽内に時計回りの緩やかな回転流を作った。飼育水には毎日，自家製濃縮ナンノクロロプシスを飼育水中の細胞数が１００万ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう添加した。餌料系列はＬ型ワムシ，アルテミア幼生，配合飼料とした。ワムシ，アルテミアは市販の栄養強化剤で栄養強化した。Ｌ型ワムシを１日齢から飼育水中の密度で５〜１５個体／ｍｌになるよう給餌した。アルテミアは北米産の卵を脱殻処理して使用し，６日齢から０．０５〜２個体／ｍｌになるよう給餌した。
【００５１】
（結果）対照区２面はいずれも１２日齢に大量へい死が発生し，ほぼ全滅したが、Ａ添加区では対照区のような大量へい死は観察されず１５日齢における生残率は４０．０％と対照区に比べ顕著に高い生残率を示した。
【００５２】
【表５】
【００５３】
実施例６ 仔魚の生残率に及ぼす飼育水への安定型ビタミンＣ誘導体およびポリフェノールの添加効果−６
（供試魚）カサゴ
【００５４】
（安定型ビタミンＣ誘導体）市販のＬ−アスコルビン酸リン酸マグネシウム塩（以下，ＡＰＭと省略）を使用した。
（ポリフェノール）茶ポリフェノールを主成分とする市販の緑茶抽出物ＡおよびＢを使用した。
（試験区）試験区としてＡＰＭ添加区およびＡ添加区，Ｂ添加区を各１区と対照区を設けた。試験区には蒸留水１０００ｍｌにＡＰＭは１０ｇ（２０ｇ／トン），Ａは０．５ｇ（カテキンとして３００ｍｇ／トン），Ｂは０．１ｇ（カテキンとして１８０ｍｇ／トン）を溶解し仔魚収容直後から実験終了まで１日１回，アルミホイルで遮光した点滴瓶を用いて約２時間かけて滴下した。対照区には蒸留水１０００ｍｌを同様の方法で滴下した。
【００５５】
（飼育方法）５００リットル黒色ポリカーボネイト水槽４基に切開法により得た仔魚を２．５万尾ずつ収容した。仔魚収容時から紫外線照射海水を１００％／日の割合で注水し，排水は４０目のメッシュスクリーンで作成したアンドンを用いて水槽中央からサイフォン方式で行った。水槽中央に直径５０ｍｍの球形エアストーン１個を設置し，飼育水が緩やかに撹拌されるよう弱通気を施した。
飼育水には毎日，自家製濃縮ナンノクロロプシスを飼育水中の細胞数が３０万ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう添加した。ワムシは市販の栄養強化剤で栄養強化したＬ型ワムシを２日齢から飼育水中の密度で５〜１０個体／ｍｌになるよう給餌した。生残尾数の推定は夜間の柱状サンプリング法，すなわち仔魚が比較的均等に分散する２１：００頃に直径４０ｍｍの塩ビパイプにより飼育水とともに仔魚を採取し採取水量と採取尾数から推定する方法により行い，０日齢の生残尾数を１００％として生残率を求めた。
【００５６】
（結果）対照区で９日齢に大量へい死が発生し全滅した。表６に示すとおり１０日齢における試験区の生残率はＡＰＭ添加区で７４．２％，Ｂ添加区で６７．０％，Ａ添加区で８３．２％と，対照区に比べ顕著に高い生残率を示した。一方，成長については実験区間に顕著な差は見られなかった。
【００５７】
【表６】
【００５８】
実施例７ 仔魚の生残率に及ぼす飼育水へのポリフェノールの添加効果−７
（供試魚）カサゴ
【００５９】
（ポリフェノール）茶ポリフェノールを主成分とする市販の緑茶抽出物Ａを使用した。試験区としてＡ添加区および対照区を設けた。添加量は２段階を設定し，蒸留水１０００ｍｌにＡを０．５ｇ（カテキンとして３００ｍｇ／トン）および０．１ｇ（カテキンとして１８０ｍｇ／トン）を溶解し仔魚収容直後から実験終了まで１日１回，アルミホイルで遮光した点滴瓶を用いて約２〜６時間かけて滴下した。対照区には蒸留水１０００ｍｌを同様の方法で滴下した。各試験区はそれぞれ２面ずつ設けた。
【００６０】
（飼育方法）５００リットル透明ポリカーボネイト水槽４基に自然産仔により得た仔魚を１．１〜１．３万尾ずつ収容した。仔魚収容時から０．２μｍカートリッジフィルターを通した紫外線照射海水２００％／日の割合で注水し，排水は４０目のメッシュスクリーンで作成したアンドンを用いて水槽中央からサイフォン方式で行った。水槽中央に直径５０ｍｍの球形エアストーン１個を設置し，飼育水が緩やかに撹拌されるよう弱通気を施した。飼育水には毎日，淡水産濃縮クロレラを飼育水中の細胞数が５０万ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう添加した。ワムシは市販の栄養強化剤で栄養強化したＳ型ワムシを０日齢から飼育水中の密度で５個体／ｍｌになるよう給餌した。生残尾数の推定は柱状サンプリング法，すなわち仔魚が比較的均等に分散する２１：００頃に直径４０ｍｍの塩ビパイプにより飼育水とともに仔魚を採取し採取水量と採取尾数から推定する方法により行い，０日齢の生残尾数を１００％として生残率を求めた。
【００６１】
（結果）対照区で７日齢に大量へい死が発生し，生残尾数が大きく減少したが，添加区では大量へい死は発生しなかった。表７に示すとおり７日齢における試験区の生残率は０．５ｇ添加区で７７．９％と６４．０％、０．１ｇ添加区で３５．１％と７２．９％と対照区と比較していずれも顕著に高い生残率を示した。
【００６２】
【表７】
【００６３】
実施例８ 仔魚の生残率に及ぼす飼育水へのポリフェノールの添加効果−８
（供試魚）オニオコゼ
【００６４】
（安定型ビタミンＣ誘導体）市販のＬ−アスコルビン酸リン酸マグネシウム塩（以下，ＡＰＭと省略）を使用した。
（ポリフェノール）茶ポリフェノールを主成分とする市販の緑茶抽出物Ｂを使用した。
（試験区）試験区としてＡＰＭ添加区，Ｂ添加区および対照区を設けた。Ｂ添加区は毎日添加と隔日添加の２区を設定した。各試験区はそれぞれ２面ずつ用意した。蒸留水１０００ｍｌにＡＰＭは１０ｇ，（２０ｇ／トン）Ｂは０．１ｇ（カテキンとして１８０ｍｇ／トン）を溶解し０日齢から実験終了までアルミホイルで遮光した点滴瓶を用いて毎日（隔日添加区は１日おきに）約２〜６時間かけて滴下した。対照区には蒸留水１０００ｍｌを同様の方法で滴下した。
【００６５】
（飼育方法）５００リットル透明ポリカーボネイト水槽８基にふ化直前の受精卵を１万粒ずつ収容した。卵収容時から紫外線照射海水を１００％／日の割合で注水し，排水は４０目のメッシュスクリーンで作成したアンドンを用いて水槽中央からサイフォン方式で行った。水槽中央に直径５０ｍｍの球形エアストーン１個を設置し，飼育水が緩やかに撹拌されるよう弱通気を施した。飼育水には毎日，自家製濃縮ナンノクロロプシスを飼育水中の細胞数が１００万ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう添加した。ワムシは市販の栄養強化剤で栄養強化したＬ型ワムシを２日齢から飼育水中の密度で１０〜１５個体／ｍｌになるよう給餌した。生残尾数の推定は柱状サンプリング法により行い，０日齢の生残尾数を１００％として生残率を求めた。
【００６６】
（結果）対照区で７日齢に大量へい死が発生し生残率が大きく低下した。表８に示すとおり ７日齢における試験区の生残率はＡＰＭ添加区で４０．１％と４４．４％，Ｂ毎日添加区で３３．９％と４６．４％、Ｂ隔日添加区で２０．７％、３６．３％と，いずれも対照区に比べ顕著に高い生残率を示した。隔日添加より毎日添加の方が若干、生残率が高かった。
【００６７】
【表８】
【産業上の利用可能性】
【００６８】
本発明は，人工種苗の安定的、効率的生産を可能とし，水産業における増養殖分野において，貢献度が極めて高い。
【技術分野】
【０００１】
本発明は，大量へい死を軽減し安定的かつ効率的な種苗生産を行うことを目的とした新規の仔稚魚の飼育方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
食料産業として重要な水産業の持続的発展を図るため、栽培漁業や養殖業などつくり育てる漁業が推進されている。これらの実現に不可欠な稚魚を提供すべく種苗生産は現在、マダイ、ヒラメ、トラフグをはじめ多くの有用魚種を対象に全国で行われている。
【０００３】
一般に魚類、特に海産魚のふ化仔魚は、口も開いていないなど体各部が生理的にも機能的にも非常に未発達な状態で生まれてくるため、飼育初期には餌料の種類、栄養、飼育環境の不適やウイルス、病原性細菌、寄生虫等による感染症などにより大量へい死が発生しやすく、生残率低下による生産中止など深刻な被害に及ぶ場合も少なくない。
【０００４】
このような大量へい死に関する対抗手段として、薬剤（ニフルスチレン酸ナトリウム，オキソリン酸など）を飼育水中に添加し高い生残率を維持する飼育法（特許文献１）が開示されている。
【０００５】
また薬剤を使用せず「ほっとけ飼育」（非特許文献１）や養殖環境改善剤を用いた細菌制御を目的とした飼育法により大量へい死を軽減できることが報告されている（非特許文献２）。
【０００６】
また飼育水にアスコルビン酸を添加することでカサゴの大量へい死を抑制出来ることが報告されている（非特許文献３）。
【０００７】
【特許文献１】特開平８−９８２１
【非特許文献１】栽培漁業シリーズＮｏ．４ ヒラメの種苗生産マニュアル「ほっとけ飼育」による飼育方法，１９９８
【非特許文献２】栽培漁業技術開発研究、３２（１）、５−１３、２００５
【非特許文献３】平成１１年日本水産学会秋季大会講演要旨集，Ｐ７９
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかし、常用的な抗菌剤使用には耐性菌出現の問題があるほか，流水式で飼育を行う場合には飼育水中の薬剤を一定濃度で維持するためには極めて大量の薬剤が必要となり、コストが非常に高いという問題点がある。
【０００９】
また生産された種苗が将来，食用魚として利用されることを考慮すると，無投薬を求める消費者の嗜好と逆行するという問題点もある。
【００１０】
また、ほっとけ飼育は一般的な流水式の飼育法ではなく止水環境により細菌叢を安定させることを特徴とする飼育法であるが，管理がうまくいかない場合には止水であるが故に水質が悪化しやすく，オニオコゼなど水温２５℃以上に達する夏季の生産魚種においては特に水質管理が難しい。
【００１１】
また、養殖環境改善剤はバチルス等の魚介類に毒性のない細菌をゼオライト等の基質に吸着させたもの（再公表：特願平１０−５４２５７８）で，これら細菌を優先させることを目的として使用するが，培養水由来の細菌を大量に含む生物餌料や微細藻類を毎日給与する飼育法では，十分な注意を払っていても特定細菌を安定的に優先させることはそれほど容易ではない。
【００１２】
また、アスコルビン酸は飼育水中では非常に不安定な性質を持ち，さらに分解されたアスコルビン酸によって水中の細菌が増殖することから水質悪化を招きやすく，オニオコゼなど水温２５℃以上に達する夏季の生産魚種の場合は特に水質管理が難しい。
【００１３】
本発明の目的は，抗菌剤を使用することなく、容易に大量へい死を軽減する飼育法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
上記目的を達成するために，発明者らは鋭意研究した結果，本発明の安定型ビタミンＣ誘導体またはポリフェノールの有効量を飼育水に添加する仔稚魚の飼育方法が大量へい死の軽減に有効であることを見出した。
【００１５】
すなわち本発明は、安定型ビタミンＣ誘導体またはポリフェノールの有効量を飼育水に連続または断続的に添加することを特徴とする生産性の高い新規の仔稚魚飼育方法を提供するものである。
【発明の効果】
【００１６】
本発明の飼育方法によれば，基本的な飼育方法を大きく変更する必要がなく、添加物の水溶液を飼育水に添加するというごく簡単な作業のみで、容易に大量へい死を軽減することができ、種苗生産の安定化、効率化が図られ、生産性を高める効果が得られる。
【００１７】
本発明で使用される安定型ビタミンＣ誘導体，ポリフェノールはいずれも従来から化粧品原料，食品添加物として広く使用されているもので，食品としての安全性には全く問題がない点で優れている。
【００１８】
さらにいずれも水溶性が高く，飼育水への添加が容易に行える点で優れている。
【００１９】
また、抗菌剤を使用しないため、耐性菌の出現を危惧する必要はなく、消費者の嗜好にも適合するという点でも優れている。
【００２０】
また、大量へい死により減少した仔魚にかかった生産コストは、生残種苗に上乗せされる。本発明により大量へい死による全滅を回避し、生残率が向上した場合、そのコスト負担は薬剤添加の場合と比較して実用上，充分許容出来る範囲であり，経済的効果は大きい。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】
本発明では，基本的な飼育は一般的な種苗生産方法と同様に飼育を行うことができる。
すなわち水槽の材質はポリエチレン、ポリカーボネイト、コンクリート等、いずれも好適に使用出来る。水槽の規模は３０リットルの小型水槽から１００トン程度の大型水槽まで使用できるが、特に５００リットルから３０トン程度の水槽が好ましい。添加物が飼育水槽内に速やかに拡散するよう注水、エアレーションを配置する。
【００２２】
飼育水は流水とし、換水率は１００〜２００％／日が好ましい。
【００２３】
飼育開始時の受精卵、仔魚の収容密度は飼育水１トン当たり１０００〜３００００尾が可能であるが、特に５０００〜２００００尾が好ましい。餌料はワムシ、アルテミアなどの生物餌料を１日１〜２回給餌し、後に配合飼料を併用する。給餌量は仔魚の成長に応じて順次増加させる。生物餌料の飢餓防止、水中照度の調整、水質安定等の目的で微細藻類、例えばナンノクロロプシスや淡水産クロレラなどを飼育水に添加することができるが、特に濃縮ナンノクロロプシスを１日１回、５０〜１００万ｃｅｌｌｓ／ｍｌの濃度になるよう添加するのが好ましい。
【００２４】
安定型ビタミンＣ誘導体はアスコルビン酸リン酸マグネシウム，アスコルビン酸リン酸ナトリウムなどいずれも好適に使用できるが、特にアスコルビン酸リン酸マグネシウムを使用することが好ましい。
アスコルビン酸リン酸マグネシウムの添加量は水槽の水量に対し１５〜２５ｇ／トン、特に２０ｇ／トンが好ましい。
【００２５】
ポリフェノールはカテキン，アントシアニン，プロアントシアニジン等，いずれを用いても良いが、特にカテキンが好ましい。カテキンとして例えばエピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）などの試薬を利用することが出来るが，入手しやすく、より安価な市販の緑茶抽出物を使用することも出来る。カテキンの添加量は水槽の水量に対し１８０〜３００ｍｇ／トン程度が好ましい。緑茶抽出物を添加する場合は、製品のカテキン濃度から逆算して添加量を決定する。例えば、茶カテキン濃度を約３０％とした市販の緑茶抽出物Ａを用いる場合は１ｇ／トン（カテキン濃度として３００ｍｇ／トン），茶カテキン濃度を約９０％とした市販の緑茶抽出物Ｂを用いる場合は０．２ｇ／トン（カテキン濃度として１８０ｍｇ／トン）が好ましい。
【００２６】
添加は２または３日令頃から大量へい死の発生しやすい時期を過ぎる１０〜１５日令までの期間，隔日もしくは毎日行うと良いが，好ましくは卵または仔魚収容日から毎日，１日１回添加するのが好ましい。本発明に用いられる添加物は必要量をあらかじめ蒸留水に溶解させた水溶液として添加するのが好ましい。添加方法は点滴瓶を用いて０．５〜６時間掛けて滴下する方法、ビーカー等を用いて一度に流し込む方法のいずれを用いても良いが、特に時間を掛けて滴下する場合は、光による変性を防ぐため点滴瓶、チューブ等をアルミホイルで覆って遮光しておくことが好ましい。また添加物ができるだけ速やかに均等に拡散するように、エアレーションの位置に添加することが好ましい。
【実施例】
【００２７】
以下，本発明を実施例により更に詳細に説明するが，本発明は，下記実施例に限定されるものではない。
【００２８】
実施例１ 仔魚の生残率に及ぼす飼育水へのポリフェノール添加効果−１
（供試魚）オニオコゼ
【００２９】
（ポリフェノール）茶ポリフェノールを主成分とする市販の緑茶抽出物ＡおよびＢを使用した。試験区としてＡ添加区およびＢ添加区を各１区と対照区を設けた。試験区には蒸留水１０００ｍｌにＡは０．５ｇ（カテキンとして３００ｍｇ／トン），Ｂは０．１ｇ（カテキンとして１８０ｍｇ／トン）を溶解し卵収容直後から実験終了まで１日１回，点滴瓶を用いて約２時間かけて滴下した。対照区には蒸留水１０００ｍｌを同様の方法で滴下した。
【００３０】
（飼育方法）５００リットル透明ポリカーボネイト水槽４基にふ化直前の受精卵を１万粒ずつ収容した。卵収容時から紫外線照射海水を２００％／日の割合で注水し，排水は４０目のメッシュスクリーンで作成したアンドンを用いて水槽中央からサイフォン方式で行った。水槽中央に直径５０ｍｍの球形エアストーン１個を設置し，飼育水が緩やかに撹拌されるよう弱通気を施した。
飼育水には毎日，自家製濃縮ナンノクロロプシスを飼育水中の細胞数が５０万ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう添加した。餌料系列はワムシ，アルテミア幼生，配合飼料とした。ワムシは市販の栄養強化剤で栄養強化したＬ型ワムシを２日齢から飼育水中の密度で５〜３０個体／ｍｌになるよう給餌した。アルテミアは北米産の卵を脱殻処理して使用し，ふ化後，市販の栄養強化剤で栄養強化した幼生を１０日齢から０．２〜２個体／ｍｌになるよう給餌した。生残尾数の推定は夜間の柱状サンプリング法，すなわち仔魚が比較的均等に分散する２１：００頃に直径４０ｍｍの塩ビパイプにより飼育水とともに仔魚を採取し採取水量と採取尾数から推定する方法により行い，１日齢の生残尾数を１００％として生残率を求めた。結果を表１に示す。
【００３１】
（結果）表１に示したとおり７日齢で生残尾数に明確な差が現れ，１５日齢における生残率は対照区が１５．５％と１７．０％であったのに対し，ＢおよびＡ添加区ではそれぞれ４２．６％，３４．５％と対照区に比べ明らかに高かった。成長については実験区間に顕著な差は見られなかった。
【００３２】
【表１】
【００３３】
実施例２ 仔魚の生残率に及ぼす飼育水へのポリフェノール添加効果−２
（供試魚）オニオコゼ
【００３４】
（ポリフェノール）茶ポリフェノールを主成分とする市販の緑茶抽出物ＡおよびＢを使用した。試験区としてＡ添加区およびＢ添加区を各１区と対照区を設けた。試験区には蒸留水１０００ｍｌにＡは０．５ｇ（カテキンとして３００ｍｇ／トン），Ｂは０．１ｇ（カテキンとして１８０ｍｇ／トン）を溶解し卵収容直後から実験終了まで１日１回，点滴瓶を用いて約２時間かけて滴下した。対照区には蒸留水１０００ｍｌを同様の方法で滴下した。
【００３５】
（飼育方法）５００リットル透明ポリカーボネイト水槽４基にふ化直前の受精卵を１万粒ずつ収容した。卵収容時から紫外線照射海水を２００％／日の割合で注水し，排水は４０目のメッシュスクリーンで作成したアンドンを用いて水槽中央からサイフォン方式で行った。水槽中央に直径５０ｍｍの球形エアストーン１個を設置し，飼育水が緩やかに撹拌されるよう弱通気を施した。
飼育水には毎日，自家製濃縮ナンノクロロプシスを飼育水中の細胞数が５０万ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう添加した。ワムシは市販の栄養強化剤で栄養強化したＬ型ワムシを２日齢から飼育水中の密度で５〜３０個体／ｍｌになるよう給餌した。生残尾数の推定は夜間の柱状サンプリング法，すなわち仔魚が比較的均等に分散する２１：００頃に直径４０ｍｍの塩ビパイプにより飼育水とともに仔魚を採取し採取水量と採取尾数から推定する方法により行い，１日齢の生残尾数を１００％として生残率を求めた。
【００３６】
（結果）表２に示すとおり、対照区の２面で５日齢と７日齢に大量へい死が発生し，それぞれ全滅したため，この時点で実験を打ち切ったが，７日齢における試験区の生残率はＢ添加区で５４．３％，Ａ添加区で８２．８％と，対照区に比べ顕著に高い生残率を示した。一方，成長および摂餌については実験区間に顕著な差は見られなかった。
【００３７】
【表２】
【００３８】
実施例３ 仔魚の生残率に及ぼす飼育水へのポリフェノール添加効果−３
（供試魚）オニオコゼ
【００３９】
（ポリフェノール）茶ポリフェノールを主成分とする市販の緑茶抽出物Ａを使用した。試験区としてＡ添加区と対照区を各１区設定し，Ａ添加区には蒸留水２０００ｍｌにＡを２０ｇ（カテキンとして３００ｍｇ／トン）溶解し，卵収容直後から１８日齢まで１日１回，飼育水槽に直接添加した。対照区には何も添加しなかった。
【００４０】
（飼育方法）２０トンコンクリート円形水槽２基にふ化直前の受精卵を４２．６万粒ずつ収容した。卵収容時からろ過海水を２００％／日の割合で注水し，排水は４０目のメッシュスクリーンを用いて水槽中央から行った。通気は水槽中央の円柱を取り巻くように設置したユニホースから緩やかに行った。飼育水には毎日，自家製濃縮ナンノクロロプシスを飼育水中の細胞数が５０万ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう添加した。餌料系列はワムシ，アルテミア幼生，配合飼料とした。ワムシは市販の栄養強化剤で栄養強化したＬ型ワムシを２日齢から飼育水中の密度で５〜３０個体／ｍｌになるよう給餌した。アルテミアは北米産の卵を脱殻処理して使用し，ふ化後，市販の栄養強化剤で栄養強化した幼生を１０日齢から０．２〜２個体／ｍｌになるよう給餌した。
【００４１】
（結果）対照区およびＡ添加区ともに２日齢から水面に浮上へい死個体が観察され生残尾数が減少し，さらに対照区では７日齢に大量へい死が発生し，ほぼ全滅したため９日齢で飼育を中止した。一方，Ａ添加区では対照区のような大量へい死は観察されず１８日齢から１９日齢にかけて着底前仔魚の移槽を行う際にフィッシュカウンターによる計数を行った。Ａ添加区の１９日齢における生残率は１８．７％であった。なお，これらの仔魚は飼育を継続し２２日齢から３３日齢にかけて平均全長１５．０ｍｍ（１２．１〜１７．１ｍｍ）の稚魚３．６万尾を取り上げた。また９日齢までの両者の成長にはほとんど差がなかった。
【００４２】
【表３】
【００４３】
実施例４ 仔魚の生残率に及ぼす飼育水へのポリフェノール添加効果−４
（供試魚）オニオコゼ
【００４４】
（ポリフェノール）茶ポリフェノールを主成分とする市販の緑茶抽出物Ａを使用した。試験区としてＡ添加区１面と対照区２面を設定し，試験区には蒸留水１０００ｍｌにＡを５ｇ（カテキンとして３００ｍｇ／トン）溶解し，仔魚収容直後から１５日齢まで１日１回，飼育水槽に直接添加した。対照区には蒸留水のみ１０００ｍｌを同様に添加した。
【００４５】
（飼育方法）６トンコンクリート角形水槽（有効水量５トン）３面にふ化仔魚を約４万尾ずつ（３．７〜４．９万尾）収容した。仔魚収容時から紫外線殺菌海水を１００％／日の割合で注水し，排水は４０目のメッシュスクリーンで作成したアンドンを排水口に設置し底面より行った。通気は水槽壁面に沿って底面に対角に設置した長さ１ｍのユニホースから４本から緩やかに行い，水槽内に時計回りの緩やかな回転流を作った。飼育水には毎日，自家製濃縮ナンノクロロプシスを飼育水中の細胞数が１００万ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう添加した。餌料系列はＬ型ワムシ，アルテミア幼生，配合飼料とした。ワムシ，アルテミアは市販の栄養強化剤で栄養強化した。Ｌ型ワムシを１日齢から飼育水中の密度で５〜１５個体／ｍｌになるよう給餌した。アルテミアは北米産の卵を脱殻処理して使用し，５日齢から０．０５〜２個体／ｍｌになるよう給餌した。
【００４６】
（結果）対照区２面はいずれも９〜１０日齢にかけて大量へい死が発生し，ほぼ全滅したが，Ａ添加区では対照区のような大量へい死は観察されず１０日齢における生残率は５５．３％であった。なお，Ａ添加区の仔魚は飼育を継続し１３日齢から２０日齢にかけて全長１０．０〜１５．０ｍｍの稚魚１．５万尾（最終生残率：４１．７％）を取り上げたのに対し，対照区の１面は５０６尾（最終生残率：１．０％）を取り上げるに止まり，試験区で顕著な生残率の向上が見られた。
【００４７】
【表４】
【００４８】
実施例５ 仔魚の生残率に及ぼす飼育水へのポリフェノール添加効果−５
（供試魚）オニオコゼ
【００４９】
（ポリフェノール）茶ポリフェノールを主成分とする市販の緑茶抽出物Ａを使用した。試験区としてＡ添加区１面と対照区２面を設定し，試験区には蒸留水１０００ｍｌにＡを７ｇ（カテキンとして３００ｍｇ／トン）溶解し，仔魚収容直後から１５日齢まで１日１回，飼育水槽に直接添加した。対照区には蒸留水のみ１０００ｍｌを同様に添加した。
【００５０】
（飼育方法）８トンコンクリート角形水槽（有効水量７トン）３面にふ化仔魚を約５万尾ずつ（４．４〜６．２万尾）収容した。仔魚収容時から紫外線殺菌海水を１００％／日の割合で注水し，排水は４０目のメッシュスクリーンで作成したアンドンを排水口に設置し底面より行った。通気は水槽壁面に沿って底面に対角に設置した長さ１ｍのユニホースから４本から緩やかに行い，水槽内に時計回りの緩やかな回転流を作った。飼育水には毎日，自家製濃縮ナンノクロロプシスを飼育水中の細胞数が１００万ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう添加した。餌料系列はＬ型ワムシ，アルテミア幼生，配合飼料とした。ワムシ，アルテミアは市販の栄養強化剤で栄養強化した。Ｌ型ワムシを１日齢から飼育水中の密度で５〜１５個体／ｍｌになるよう給餌した。アルテミアは北米産の卵を脱殻処理して使用し，６日齢から０．０５〜２個体／ｍｌになるよう給餌した。
【００５１】
（結果）対照区２面はいずれも１２日齢に大量へい死が発生し，ほぼ全滅したが、Ａ添加区では対照区のような大量へい死は観察されず１５日齢における生残率は４０．０％と対照区に比べ顕著に高い生残率を示した。
【００５２】
【表５】
【００５３】
実施例６ 仔魚の生残率に及ぼす飼育水への安定型ビタミンＣ誘導体およびポリフェノールの添加効果−６
（供試魚）カサゴ
【００５４】
（安定型ビタミンＣ誘導体）市販のＬ−アスコルビン酸リン酸マグネシウム塩（以下，ＡＰＭと省略）を使用した。
（ポリフェノール）茶ポリフェノールを主成分とする市販の緑茶抽出物ＡおよびＢを使用した。
（試験区）試験区としてＡＰＭ添加区およびＡ添加区，Ｂ添加区を各１区と対照区を設けた。試験区には蒸留水１０００ｍｌにＡＰＭは１０ｇ（２０ｇ／トン），Ａは０．５ｇ（カテキンとして３００ｍｇ／トン），Ｂは０．１ｇ（カテキンとして１８０ｍｇ／トン）を溶解し仔魚収容直後から実験終了まで１日１回，アルミホイルで遮光した点滴瓶を用いて約２時間かけて滴下した。対照区には蒸留水１０００ｍｌを同様の方法で滴下した。
【００５５】
（飼育方法）５００リットル黒色ポリカーボネイト水槽４基に切開法により得た仔魚を２．５万尾ずつ収容した。仔魚収容時から紫外線照射海水を１００％／日の割合で注水し，排水は４０目のメッシュスクリーンで作成したアンドンを用いて水槽中央からサイフォン方式で行った。水槽中央に直径５０ｍｍの球形エアストーン１個を設置し，飼育水が緩やかに撹拌されるよう弱通気を施した。
飼育水には毎日，自家製濃縮ナンノクロロプシスを飼育水中の細胞数が３０万ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう添加した。ワムシは市販の栄養強化剤で栄養強化したＬ型ワムシを２日齢から飼育水中の密度で５〜１０個体／ｍｌになるよう給餌した。生残尾数の推定は夜間の柱状サンプリング法，すなわち仔魚が比較的均等に分散する２１：００頃に直径４０ｍｍの塩ビパイプにより飼育水とともに仔魚を採取し採取水量と採取尾数から推定する方法により行い，０日齢の生残尾数を１００％として生残率を求めた。
【００５６】
（結果）対照区で９日齢に大量へい死が発生し全滅した。表６に示すとおり１０日齢における試験区の生残率はＡＰＭ添加区で７４．２％，Ｂ添加区で６７．０％，Ａ添加区で８３．２％と，対照区に比べ顕著に高い生残率を示した。一方，成長については実験区間に顕著な差は見られなかった。
【００５７】
【表６】
【００５８】
実施例７ 仔魚の生残率に及ぼす飼育水へのポリフェノールの添加効果−７
（供試魚）カサゴ
【００５９】
（ポリフェノール）茶ポリフェノールを主成分とする市販の緑茶抽出物Ａを使用した。試験区としてＡ添加区および対照区を設けた。添加量は２段階を設定し，蒸留水１０００ｍｌにＡを０．５ｇ（カテキンとして３００ｍｇ／トン）および０．１ｇ（カテキンとして１８０ｍｇ／トン）を溶解し仔魚収容直後から実験終了まで１日１回，アルミホイルで遮光した点滴瓶を用いて約２〜６時間かけて滴下した。対照区には蒸留水１０００ｍｌを同様の方法で滴下した。各試験区はそれぞれ２面ずつ設けた。
【００６０】
（飼育方法）５００リットル透明ポリカーボネイト水槽４基に自然産仔により得た仔魚を１．１〜１．３万尾ずつ収容した。仔魚収容時から０．２μｍカートリッジフィルターを通した紫外線照射海水２００％／日の割合で注水し，排水は４０目のメッシュスクリーンで作成したアンドンを用いて水槽中央からサイフォン方式で行った。水槽中央に直径５０ｍｍの球形エアストーン１個を設置し，飼育水が緩やかに撹拌されるよう弱通気を施した。飼育水には毎日，淡水産濃縮クロレラを飼育水中の細胞数が５０万ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう添加した。ワムシは市販の栄養強化剤で栄養強化したＳ型ワムシを０日齢から飼育水中の密度で５個体／ｍｌになるよう給餌した。生残尾数の推定は柱状サンプリング法，すなわち仔魚が比較的均等に分散する２１：００頃に直径４０ｍｍの塩ビパイプにより飼育水とともに仔魚を採取し採取水量と採取尾数から推定する方法により行い，０日齢の生残尾数を１００％として生残率を求めた。
【００６１】
（結果）対照区で７日齢に大量へい死が発生し，生残尾数が大きく減少したが，添加区では大量へい死は発生しなかった。表７に示すとおり７日齢における試験区の生残率は０．５ｇ添加区で７７．９％と６４．０％、０．１ｇ添加区で３５．１％と７２．９％と対照区と比較していずれも顕著に高い生残率を示した。
【００６２】
【表７】
【００６３】
実施例８ 仔魚の生残率に及ぼす飼育水へのポリフェノールの添加効果−８
（供試魚）オニオコゼ
【００６４】
（安定型ビタミンＣ誘導体）市販のＬ−アスコルビン酸リン酸マグネシウム塩（以下，ＡＰＭと省略）を使用した。
（ポリフェノール）茶ポリフェノールを主成分とする市販の緑茶抽出物Ｂを使用した。
（試験区）試験区としてＡＰＭ添加区，Ｂ添加区および対照区を設けた。Ｂ添加区は毎日添加と隔日添加の２区を設定した。各試験区はそれぞれ２面ずつ用意した。蒸留水１０００ｍｌにＡＰＭは１０ｇ，（２０ｇ／トン）Ｂは０．１ｇ（カテキンとして１８０ｍｇ／トン）を溶解し０日齢から実験終了までアルミホイルで遮光した点滴瓶を用いて毎日（隔日添加区は１日おきに）約２〜６時間かけて滴下した。対照区には蒸留水１０００ｍｌを同様の方法で滴下した。
【００６５】
（飼育方法）５００リットル透明ポリカーボネイト水槽８基にふ化直前の受精卵を１万粒ずつ収容した。卵収容時から紫外線照射海水を１００％／日の割合で注水し，排水は４０目のメッシュスクリーンで作成したアンドンを用いて水槽中央からサイフォン方式で行った。水槽中央に直径５０ｍｍの球形エアストーン１個を設置し，飼育水が緩やかに撹拌されるよう弱通気を施した。飼育水には毎日，自家製濃縮ナンノクロロプシスを飼育水中の細胞数が１００万ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう添加した。ワムシは市販の栄養強化剤で栄養強化したＬ型ワムシを２日齢から飼育水中の密度で１０〜１５個体／ｍｌになるよう給餌した。生残尾数の推定は柱状サンプリング法により行い，０日齢の生残尾数を１００％として生残率を求めた。
【００６６】
（結果）対照区で７日齢に大量へい死が発生し生残率が大きく低下した。表８に示すとおり ７日齢における試験区の生残率はＡＰＭ添加区で４０．１％と４４．４％，Ｂ毎日添加区で３３．９％と４６．４％、Ｂ隔日添加区で２０．７％、３６．３％と，いずれも対照区に比べ顕著に高い生残率を示した。隔日添加より毎日添加の方が若干、生残率が高かった。
【００６７】
【表８】
【産業上の利用可能性】
【００６８】
本発明は，人工種苗の安定的、効率的生産を可能とし，水産業における増養殖分野において，貢献度が極めて高い。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
種苗生産において安定型ビタミンＣ誘導体またはポリフェノールの有効量を飼育水に連続または断続的に添加することを特徴とする仔稚魚の飼育方法。
【請求項２】
仔稚魚の飼育を流水中で行う請求項１記載の飼育方法。
【請求項３】
前記、安定型ビタミンＣ誘導体がアスコルビン酸リン酸マグネシウムまたはアスコルビン酸リン酸ナトリウムで，かつこれらの添加量が水槽の水量に対し１５〜２５ｇ／トンである請求項１記載の飼育方法
【請求項４】
前記、ポリフェノールがカテキンまたはアントシアニン，プロアントシアニジンで，かつこれらの添加量が水槽の水量に対し１８０〜３００ｍｇ／トンである請求項１記載の飼育方法。
【請求項５】
魚類がカサゴまたはオニオコゼである請求項１記載の飼育方法。
【請求項１】
種苗生産において安定型ビタミンＣ誘導体またはポリフェノールの有効量を飼育水に連続または断続的に添加することを特徴とする仔稚魚の飼育方法。
【請求項２】
仔稚魚の飼育を流水中で行う請求項１記載の飼育方法。
【請求項３】
前記、安定型ビタミンＣ誘導体がアスコルビン酸リン酸マグネシウムまたはアスコルビン酸リン酸ナトリウムで，かつこれらの添加量が水槽の水量に対し１５〜２５ｇ／トンである請求項１記載の飼育方法
【請求項４】
前記、ポリフェノールがカテキンまたはアントシアニン，プロアントシアニジンで，かつこれらの添加量が水槽の水量に対し１８０〜３００ｍｇ／トンである請求項１記載の飼育方法。
【請求項５】
魚類がカサゴまたはオニオコゼである請求項１記載の飼育方法。
【公開番号】特開２００７−２６７６５６（Ｐ２００７−２６７６５６Ａ）
【公開日】平成１９年１０月１８日（２００７．１０．１８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−９６３３１（Ｐ２００６−９６３３１）
【出願日】平成１８年３月３１日（２００６．３．３１）
【出願人】（０００２１４１９１）長崎県 (106)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１９年１０月１８日（２００７．１０．１８）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年３月３１日（２００６．３．３１）
【出願人】（０００２１４１９１）長崎県 (106)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]