代謝障害の治療
本発明は、ＩＩ型糖尿病及び肥満を含む代謝障害の分野に関する。具体的には、本発明は、ＩＬ−１８アンタゴニスト、特に抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質、特に抗ＩＬ−１８抗体を用いて代謝障害を治療及び／又は予防する方法に関する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＩＩ型糖尿病及び肥満を含む代謝の障害の分野に関する。具体的には、本発明は、ＩＬ−１８アンタゴニスト、特に抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質、特に抗ＩＬ−１８抗体を用いて代謝障害を治療及び／又は予防する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
インターロイキン−１８（ＩＬ−１８）は、ＩＬ−１サイトカインファミリーのメンバーである。ＩＬ１８は、多様な範囲の免疫担当細胞及び間葉系細胞に対して強力な作用を有する多面発現性のサイトカインである（Ｎａｋａｎｉｓｈｅら（２００１年）Ａｎｎ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９：４２３−４２７）。ＩＬ−１８の最も特徴的な生物学的機能は、微生物病原体に対する宿主防御における役割である。ＩＬ−１８は、Ｔｈ１及びＮＫ細胞の活性化及び分化、炎症促進性サイトカインＩＦＮ−γの産生（Ｄｉｎａｒｅｌｌｏ及びＢｏｒａｓｃｈｉ（２００６年）Ｅｕｒ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｎｅｔｗ １７：２２４−５２）、Ｆａｓ及びＦａｓリガンド（ＦａｓＬ）のアップレギュレート、並びに他の炎症促進性メディエーターの増強を通じてウイルス及び他の細胞内病原体に対する先天性免疫及び後天性免疫の両方を刺激する。更に、ＩＬ−１８は、ヒト微小血管内皮細胞の遊走及び管形成についての強力な走化刺激であることが示唆されており（Ｐａｒｋら（２００１年）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６７：１６４４−１６４８）、そして、直接、又は酸化ストレス経路及びマトリックス金属結合タンパク質を通して、内皮機能を変化させるか、あるいは血管平滑筋細胞の遊走及び／又は増殖を誘導することができる。
【０００３】
長さ１９３アミノ酸残基のＩＬ−１８の天然細胞前駆体であるＰｒｏ−ＩＬ−１８は、カスパーゼ−１又はプロテイナーゼ−３によって切断されて、長さ１５６アミノ酸残基の生物学的に活性を有する成熟した１８ｋＤａのタンパク質を生成する（Ｇｈａｙｕｒら（１９９７年）Ｎａｔｕｒｅ ３８６：６１９及びＧｕら（１９９７年）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７５：２０６−２０８）。成熟したＩＬ−１８は、ＩＬ−１８Ｒαサブユニットに結合して、細胞表面上のＩＬ−１８Ｒβを動員する。ＩＬ−１８と異種二量体細胞表面受容体との間の相互作用は、ＴＬＲ及びＩＬ−１受容体等の他のＩＬ−１Ｒファミリーのメンバーと共有されているシグナル伝達経路を誘導する（Ｋａｔｏら（２００３年）Ｎａｔ Ｓｔｒｕｃｔ Ｂｉｏｌ １０：９６６）。ＩＬ−１８は、マクロファージ、樹状細胞、破骨細胞、滑膜線維芽細胞、脂肪細胞及び上皮細胞で発現する。一方、ＩＬ−１８Ｒ受容体は、マクロファージ、リンパ球、好中球、ナチュラルキラー細胞、内皮、上皮及び平滑筋細胞で主に発現する（Ｇｒａｃｉｅ，ら（２００３年）Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ ７３：２１３；Ｎａｋａｎｉｓｈｅら（２００１年）Ａｎｎ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９：４２３−４２７）。インビボにおいて、ＩＬ−１８Ｒ複合体に対するＩＬ−１８の結合は、ＩＬ−１８結合タンパク質（ＩＬ−１８ＢＰ）により調節される。ＩＬ−１８ＢＰは、構成的に発現し、ＩＬ−１８機能の天然阻害剤として作用する。
【０００４】
自己免疫疾患の発現におけるＩＬ−１８の役割についての仮定は、以下の所見によって支持される。ＩＬ−１８は、様々な自己免疫疾患に関連する様々な標的組織で増加し、成人スチル病（ＡＯＳＤ）（血漿及び肝臓）（Ｋａｗａｓｈｉｍａら（２００１年）Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ ４４：５５０−５６０）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）（血漿及び様々な組織）、関節リウマチ（ＲＡ）（血漿及び滑膜）（Ｔａｎａｋａら（２００４年）Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ７４：１６７１−１６７４）、クローン病（血漿及び腸上皮）（Ｐｉｚａｒｒｏら（１９９９年）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６２：６８２９−６８３５）及び乾癬（血漿及び皮膚）（Ｏｈｔａら（２００１年）２９３：３３４−３４２）で最も顕著である。
【０００５】
より最近では、末梢におけるＩＬ−１８レベルが体重及びインスリン抵抗性と相関しており、ＩＬ−１８は、２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）への進行を予測する能力を有することも見出されている（Ｍｕｒｄｏｌｏら（２００８年）Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ Ｍｅｔａｂ ２９５：Ｅ１０９５−Ｅ１１０５；Ｆｉｓｃｈｅｒａら（２００５年）Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １１７：１５２−１６０）。更に、ＩＬ−１８の血中濃度は、肥満及びＴ２ＤＭの多くの共存症の原因として関与していると考えられる。具体的には、ＩＬ−１８の血漿濃度が内膜中膜肥厚と相関し、Ｔ２ＤＭ患者における将来の心血管系イベントを予測することが示されている［Ｙａｍａｇａｍｉら（２００５年）Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ Ｔｈｒｏｍｂ Ｖａｓｃ Ｂｉｏｌ．２５：１４５８−１４６２］。
【０００６】
Ｔ２ＤＭは、例えば、細胞がインスリンに対して適切に応答しない、肝臓のグルコース産生の増加、及びインスリン分泌の減少等の末梢インスリン抵抗性を特徴とする。Ｔ２ＤＭの罹患率は、食習慣の変化（肥満率の上昇）並びにライフスタイルの変化（あまり体を動かさなくなった）ことにより近年著しく上昇しており、流行の域に達している。Ｔ２ＤＭの一次治療は、食事制限、体重管理、及び運動量を増やすことである。しかし、これらのアプローチを用いても血中グルコースレベルを下げることができない場合、患者にメトホルミン等の血糖降下薬を処方したり、インスリン注射が必要になったりする場合もある。Ｔ２ＤＭを制御するために多くの他の治療が用いられており、例えば、ロシグリタゾン等のＰＰＡＲガンマアゴニスト、ＧＬＰ１受容体アゴニスト（例えば、エクセナチド（Ｂｙｅｔｔａ（商標））、リラグルチド（Ｖｉｃｔｏｚａ（商標））及びＰＹＹ受容体アゴニストが挙げられる。
【０００７】
単独であっても又は組合せであっても、市販されているものであっても開発中のものであっても、プラセボと比較して１０％超体重を減少させる抗肥満剤は存在しない。更に、多くの市販薬は、悪心及び嘔吐等の重大な耐容性の問題を抱えている。開発中の小分子及び生物製剤の数は増加している。特に注目すべきことに、フェンテルミンとトピラメートとの組合せであるＱｎｅｘａ（商標）は、プラセボ対照ＰｈＩＩＩ試験において１．６％（４ｌｂ）に対して１１％の体重減少を示したが、依然として著しい副作用を伴っていた。更に、ペプチドの組合せ（グルカゴン／ＧＬＰ−１コアゴニスト、及びＧＬＰ−１／オキシントモジュリンコアゴニスト：Ｍｅｒｃｋ）は、現在、前臨床試験中であり、両方とも有意な体重減少を示すが、依然として副作用を伴う場合がある。
【０００８】
Ｔ２ＤＭとは対照的に、１型糖尿病（Ｔ１ＤＭ）は糖尿病患者の５〜１０％が罹患しており、膵臓のランゲルハンス島におけるβ−細胞が喪失した結果身体がインスリンを産生できなくなることに起因する。Ｔ１ＤＭの患者は、インスリン注射の形態の治療を必要とする。
【０００９】
糖尿病の分野におけるＩＬ−１８アンタゴニストに関する研究は、１型（自己免疫）糖尿病に集中している。例えば、拮抗性のＩＬ−１８結合タンパク質（ＩＬ−１８ＢＰ）は、若年マウスに予防的に投与されたとき、Ｔ１ＤＭの非肥満マウス（ＮＯＤ）モデルにおいて糖尿病の進行を軽減することが示されている。著者らは、β−細胞のアポトーシスに対してＩＬ−１８ＢＰが保護効果を有する可能性について想定している（Ｚａｃｃｏｎｅａ及びＰｈｉｌｌｉｐｓ（２００５年）Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １１５：７４−７９）。更に、ＩＬ−１８ＢＰは、エキソビボのβ−細胞破壊アッセイにおいて、アポトーシスからβ−細胞を保護することが示されている（Ｌｅｗｉｓ及びＤｉｎａｒｅｌｌｏ（２００６年）ＰＮＡＳ １０３：１６８５２−１６８５７）。
【００１０】
ＩＬ−１８は、血清及び末梢組織において著しく増加しており、且つ高脂肪食を与えた肥満マウス（Ｔ２ＤＭモデル）におけるインスリン抵抗性（ＩＲ）の発生と相関していることが示されているが、公開されている文献中にこれらモデルにおけるＩＬ−１８アンタゴニストの影響に関する研究のエビデンスは全く存在しない。
【００１１】
ＩＬ−１８ノックアウトマウスについての研究が行われている。ＩＬ−１８ノックアウトマウスは、食欲が過剰であるので、肥満及びインスリン抵抗性になる。最近のＩＬ−１８ノックアウトマウスの代謝に関する分析では、マウスＩＬ−１８を頭蓋内に投与することによるＩＬ−１８ノックアウトマウスの再構成により、正常な摂食挙動が回復し、次いで、体重が減少し、正常な血糖コントロールが行われるようになることが示されているが、マウスＩＬ−１８を静脈内（ＩＶ）／腹腔内（ＩＰ）に投与してもが認識可能な効果は得られなかった。このデータに照らして、満腹応答の促進におけるＩＬ−１８の作用に関して、直接又は間接的に、標的器官として視床下部が関与する摂食挙動の調節にＩＬ−１８が中心的な役割を果たしていることが示唆されている（Ｚｏｒｉｌｌａら（２００７年）ＰＮＡＳ １０４：１１０９７−１１１０２及びＮａｔｅａ及びＪｏｏｓｔｅｎ（２００６年）Ｎａｔ Ｍｅｄ １２：６５０−６５６）。肥満及びインスリン抵抗性が、これらマウスの摂食亢進の誘導から生じる副次的作用であることが提唱されている。
【００１２】
ＩＬ−１８ノックアウトマウスにおける知見は、ＩＬ−１８レベルの上昇をヒト代謝疾患の重篤度の上昇と関連づけるデータとは逆説的であるので、ヒトにおけるＩＬ−１８の発現増加は代謝疾患の原因ではなく、代償性反応である可能性を示唆することができる。
【００１３】
したがって、ＩＬ−１８の正確な役割、特に代謝疾患に関する役割は、全く明らかになっておらず、代謝疾患のモデル又は病院においてＩＬ−１８についての因果関係は確立されていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】Ｎａｋａｎｉｓｈｅら（２００１年）Ａｎｎ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９：４２３−４２７）
【非特許文献２】Ｄｉｎａｒｅｌｌｏ及びＢｏｒａｓｃｈｉ（２００６年）Ｅｕｒ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｎｅｔｗ １７：２２４−５２
【非特許文献３】Ｐａｒｋら（２００１年）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６７：１６４４−１６４８
【非特許文献４】Ｇｈａｙｕｒら（１９９７年）Ｎａｔｕｒｅ ３８６：６１９
【非特許文献５】Ｇｕら（１９９７年）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７５：２０６−２０８
【非特許文献６】Ｋａｔｏら（２００３年）Ｎａｔ Ｓｔｒｕｃｔ Ｂｉｏｌ １０：９６６
【非特許文献７】Ｇｒａｃｉｅ，ら（２００３年）Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ ７３：２１３
【非特許文献８】Ｋａｗａｓｈｉｍａら（２００１年）Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ ４４：５５０−５６０
【非特許文献９】Ｔａｎａｋａら（２００４年）Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ７４：１６７１−１６７４
【非特許文献１０】Ｐｉｚａｒｒｏら（１９９９年）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６２：６８２９−６８３５
【非特許文献１１】Ｏｈｔａら（２００１年）２９３：３３４−３４２
【非特許文献１２】Ｍｕｒｄｏｌｏら（２００８年）Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ Ｍｅｔａｂ ２９５：Ｅ１０９５−Ｅ１１０５
【非特許文献１３】Ｆｉｓｃｈｅｒａら（２００５年）Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １１７：１５２−１６０
【非特許文献１４】Ｙａｍａｇａｍｉら（２００５年）Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ Ｔｈｒｏｍｂ Ｖａｓｃ Ｂｉｏｌ．２５：１４５８−１４６２
【非特許文献１５】Ｚａｃｃｏｎｅａ及びＰｈｉｌｌｉｐｓ（２００５年）Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １１５：７４−７９
【非特許文献１６】Ｌｅｗｉｓ及びＤｉｎａｒｅｌｌｏ（２００６年）ＰＮＡＳ １０３：１６８５２−１６８５７
【非特許文献１７】Ｚｏｒｉｌｌａら（２００７年）ＰＮＡＳ １０４：１１０９７−１１１０２
【非特許文献１８】Ｎａｔｅａ及びＪｏｏｓｔｅｎ（２００６年）Ｎａｔ Ｍｅｄ １２：６５０−６５６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
これら障害の罹患率を鑑みて、Ｔ２ＤＭ、肥満に関連するＴ２ＤＭ、及び肥満等の代謝疾患の安全且つ改善された治療法及び予防措置が必要とされている。Ｔ２ＤＭに対して有効な薬理学的介入はほとんど存在せず、大部分は、有効性が乏しく且つ重大な耐容性の問題を伴っている。更に、一旦治療を中止すると体重は典型的に再度増加し、多くの場合、既存の治療はβ−細胞の機能低下を防ぐことができず、最終的にはＴ２ＤＭからＴ１ＤＭに切り替わると共にβ−細胞が破壊される。
【００１６】
本発明の目的は、代謝疾患の新規且つ改善された治療法、特に、β−細胞の機能を失わせることなく体重を減少させ、血糖コントロールを改善し、インスリン感受性を高め、結果として疾患の進行を遅らせるＴ２ＤＭの新規治療法を提供することである。本発明の更なる目的は、心臓血管の健康等の他のＴ２ＤＭ共存症を改善することである。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明は、第１の態様では、患者における代謝障害の治療若しくは予防及び／又は患者における血糖コントロールの改善において使用するためのＩＬ１８アンタゴニストを提供する。
【００１８】
本発明は、第２の態様では、治療上有効な量のＩＬ−１８アンタゴニストを代謝障害に罹患している患者に投与することにより、前記患者を治療する方法を提供する。
【００１９】
本発明は、第３の態様では、予防上有効な量のＩＬ−１８アンタゴニストを代謝障害に罹患しやすい患者に投与することにより、このような患者において代謝障害を予防する方法を提供する。
【００２０】
本発明は、第４の態様では、治療上有効な量のＩＬ−１８アンタゴニストを患者に投与することにより、前記患者の血糖コントロールを改善する方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】図１は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＩＬ−６の強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図２】図２は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＪＡＫ２の強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図３】図３は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＳＯＣＳ３の強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図４】図４は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＳＴＡＴ３の強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図５】図５は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＭＣＰ−１（ＣＣＬ２）の強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図６】図６は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＭＣＰ−４（ＣＣＬ１３）の強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図７】図７は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＩＲＳ２の強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図８】図８は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＰＰＡＲガンマの強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図９】図９は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＬＥＰの強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図１０】図１０は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＬＥＰＲの強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
本発明者らは、インスリン抵抗性が炎症性障害であり、且つ免疫系の細胞並びに脂肪組織により合成される炎症性メディエーターがインスリンの調節に関与していると仮定した。本発明者らは、栄養過剰及び肥満が慢性低炎症性状態を導き、これが、炎症マーカーの発現を増加させ、次いで、脂肪組織へのマクロファージの浸潤を増加させる結果となると仮定した。これらマクロファージは、脂肪細胞におけるインスリンシグナル伝達を低下させ、次いで、脂肪分解を増加させ、そして脂肪酸を血液中に放出させる炎症促進性サイトカインを分泌する。脂肪酸は、肝臓及び骨格筋をインスリン抵抗性にし、糖尿病の発現を導く前糖尿病状態の一因となる。
【００２３】
驚くべきことに、本発明者らは、ＩＬ−１８がヒトの血液中のインターロイキン−６（ＩＬ−６）及びその重要なシグナル伝達分子（例えば、ヤヌスキナーゼ２、ＪＡＫ２）の発現を誘導し、本発明のＩＬ１８アンタゴニスト、すなわちＨ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）によりこれら作用を中和し得ることを見出した。
【００２４】
ＩＬ−６は、慢性炎症の重要なメディエーターであり、肥満、インスリン抵抗性及びＴ２ＤＭに関与している。脂肪組織は、血中ＩＬ−６レベルの最高３５％を産生し得る。慢性的に低レベルのＩＬ−６発現の全身的作用は、シグナル伝達性転写因子３（ＳＴＡＴ３）及びサイトカインシグナル抑制因子３（ＳＯＣＳ３）の発現を通してインスリンの機能を阻害することができる。ＪＡＫ２及びＳＴＡＴ３は、ＳＯＣＳ３の発現を増加させ、これにより、インスリン受容体基質（ＩＲＳ；ＩＬ−１８によっても減少する）によるインスリン受容体（ＩＲ）の活性化を防いで、筋肉及び脂肪による血中グルコースの取り込みを減少させ、そして、グリコーゲンの利用能を低下させることができる（Ｋｉｍら（２００９年）Ｖｉｔａｍｉｎｓ ａｎｄ Ｈｏｒｍｏｎｅｓ ８０：６１３−６３３）。
【００２５】
したがって、本発明者らの所見は、ＩＬ−１８アンタゴニストが、健常個体における正常なレベル又は発現に比べてＩＬ−６レベル又はＩＬ−６発現が増加している障害、例えば、Ｔ２ＤＭ、肥満Ｔ２ＤＭ、及び肥満等の代謝障害の有用な治療法であり得ることを初めて示唆するものである。
【００２６】
更に、本発明者らは、ＩＬ−１８アンタゴニストが単球化学誘引性タンパク質（ＭＣＰ−１及びＭＣＰ−４）を含む他の重要な炎症メディエーターをダウンレギュレートすることを示した。これら走化性タンパク質は、遺伝学的に肥満のマウス及び高脂肪食によって肥満が誘導された健常マウスにおいて増加する。肥満被験体の脂肪組織において低度の炎症反応（マクロファージ浸潤）が誘導されることにより、ＭＣＰ−１及びＭＣＰ−４が肥満及びインスリン抵抗性と関連することが示唆されている。
【００２７】
更に、本発明者らは、ＩＬ−１８がヒト血液におけるＩＲＳ２の発現を減少させ、これら作用が、本発明のＩＬ１８アンタゴニスト、すなわちＨ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）により中和され得ることを見出した。
【００２８】
インスリンシグナル伝達は、インスリン受容体基質ＩＲＳ１−４のチロシンリン酸化による対抗制御的なシグナル伝達と協調し、ＩＲＳ−２が栄養素のホメオスタシスにおいて特に重要である。ＩＲＳ−２は、インスリンの代謝及び成長を促進する効果の主なエフェクターであり、膵臓のβ細胞の機能及び生存、並びに主要な栄養感知を促進する（Ｄｏｎｇら，（２００６年）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１１６（１）：１０１−１０４）。マウスにおけるＩＲＳ−２のコンディショナルノックアウトは、食欲、除脂肪体重及び脂肪体重、並びに線形成長が増加し、最終的に糖尿病に進行する。更に、ＩＲＳ−２ノックダウンでは、空腹時高血糖及び空腹時高インスリン、インスリン抵抗性、耐糖能異常、異脂肪血症、及びメタボリック症候群に一致する他の特徴が生じる（Ｔａｎｉｇｕｃｈｉら，（２００５年）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１５（３）：７１８−７２７）。これらデータは、（エキソビボ血液アッセイにより支持される通り、ＩＬ−１８の増加による）ＩＲＳ−２のダウンレギュレートが、ヒトにおける肥満の発現、及びそれに続くＴ２ＤＭへの進行において重要な役割を果たしている可能性があることを示唆する。抗ＩＬ−１８アンタゴニストによりＩＬ−１８の作用をブロックすると、ＩＲＳ−２機能不全を逆行させることができる。
【００２９】
また、発明者らは、抗ＩＬ−１８アンタゴニストが、脂肪組織で高度に発現するオーファン受容体であるＰＰＡＲガンマをアップレギュレートすることを示した。ロシグリタゾン等のＰＰＡＲガンマアゴニストは、インスリン感受性を改善することが示されているので、Ｔ２ＤＭの治療において使用されている。
【００３０】
また、発明者らは、抗ＩＬ−１８アンタゴニストがレプチン及びレプチン受容体をアップレギュレートすることも示した。食欲抑制ホルモンであるレプチン及びレプチン受容体が低レベルであることと肥満とは、多くの証拠により関連づけられている。レプチン抵抗性が肥満を生じさせる可能性があることが示唆されているので、レプチンは、肥満の治療において使用されている。レプチン及びその受容体のアップレギュレートは、肥満被験体及びＴ２ＤＭ患者における食欲抑制、及びそれに続く体重減少における抗ＩＬ−１８アンタゴニストの役割を補助する。
【００３１】
また、驚くべきことに、本発明者らは、ヒト患者におけるＩＬ−１８レベルと血漿グルコースレベルの上昇とが関連していることが示された。したがって、ＩＬ−１８アンタゴニストは、健常個体における正常レベルと比較して血漿グルコースが増加している障害、例えば、Ｔ２ＤＭ、肥満Ｔ２ＤＭ、及び肥満等の代謝障害の有用な治療であり得る。
【００３２】
実際、本発明者らは、肥満ではあるが、他の点では健康なヒトにおけるグルコース及びインスリンを含む様々な代謝パラメータをＨ１Ｌ２が調節していることを別々の研究で示した。
【００３３】
本発明者らの所見に照らして、本発明者らは、肥満及び／又は糖尿病のヒト患者における末梢のＩＬ−１８の機能をブロックし、次いで、低度の炎症を防ぐことにより、血清及び血漿グルコースレベルが低下し、インスリン抵抗性が弱まると予測する。末梢におけるＩＬ−１８作用をブロックすることによって、体重及び脂肪過多に影響を与えることができるはずである。これは、β−細胞の機能に有害な影響を与えることなく、体重に影響を与え且つ血糖コントロールを改善する可能性がある。実際、ＩＬ−１８アンタゴニストは、アポトーシスを減少させることによりβ−細胞の機能に対して直接的保護効果を発揮し得る。更に、心臓血管の共存症に対する好ましい影響も想定される。
【００３４】
本明細書全体にわたって用いられる「血糖コントロール」とは、健常個体でみられる血中グルコースの正常レベルと比較した、糖尿病患者における血中グルコースの典型的なレベル、及び前記患者がこれらレベルを制御する能力を指す。血糖コントロールが乏しいとは、血中グルコースが持続的に正常レベルを上回る高いレベルであることを指し、完全な血糖コントロールとは、血中グルコースレベルが常に正常範囲内であることを指す。
【００３５】
本明細書で使用する「ＩＬ−１８アンタゴニスト」は、ＩＬ−１８の生物活性をある程度阻害又は拮抗する剤である。ＩＬ−１８アンタゴニストとしては、体内から単離された又は組換え技術により作製された（例えば、Ｔａｄｅｋｉｎｉｇ−α（登録商標））内因性ＩＬ−１８結合タンパク質（ＩＬ−１８ＢＰ）等のＩＬ−１８に結合する剤、並びにＩＬ−１８ＢＰ−Ｆｃ融合タンパク質、又はＩＬ−１８の受容体に結合してＩＬ−１８がその生物活性を発揮するのを妨げるアンタゴニストが挙げられる。具体的には、ＩＬ−１８アンタゴニストは、ＩＬ−１８に対して免疫特異的であり且つＩＬ−１８の活性に拮抗する抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質、例えば抗体であると想定される。ＩＬ−１８アンタゴニストの非限定的な例としては、欧州特許第０７１２９３１号明細書、Ｈ１８−１０８（Ｈａｍａｓａｋｉら、２００５）に記載されているＨ１及びＨ２、並びに国際公開第０１／５８９５６号パンフレット、国際公開第２００５／０４７３０７号パンフレット、及び国際公開第２００７／１３７９８４号パンフレットに記載されている抗体が挙げられ、これらは全て参照することにより全体を本明細書に援用する。１つの実施形態では、ＩＬ−１８アンタゴニストは、例えば、単離された又は組み換え技術により作製されたＩＬ−１８ＢＰ、すなわちＩＬ−１８抗原結合タンパク質等のタンパク質である。更なる実施形態では、ＩＬ−１８アンタゴニストは、抗原結合タンパク質である。１つの実施形態では、ＩＬ−１８アンタゴニストは、新規化学物質（ＮＣＥ）ではない。特定の実施形態では、ＩＬ−１８抗原結合タンパク質は、本明細書に開示される抗体Ｈ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）又はその変異体である。
【００３６】
用語「抗ＩＬ−１８」は、それが本発明の抗原結合タンパク質を指すとき、このような抗体がヒトＩＬ−１８の生物活性を中和できることを意味する。しかし、それは、このような抗体が非ヒト霊長類（例えば、アカゲザル及び／又はカニクイザル）のＩＬ−１８及び／又は他の種に存在するＩＬ−１８の形態も更に中和し得ることを除外するものではない。
【００３７】
本明細書で使用する用語「抗体」は、最も広い意味で、免疫グロブリン様ドメインを有する分子を指し、例えば、モノクローナル抗体、組換え型抗体、ポリクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体及びヘテロコンジュゲート抗体；単一可変ドメイン、ドメイン抗体、抗原結合断片、免疫学的に有効な断片、単鎖Ｆｖ、ダイアボディ、Ｔａｎｄａｂｓ（商標）等が挙げられる（別の「抗体」フォーマットの概要については、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ及びＨｕｄｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００５年，２３巻，９号，１１２６−１１３６を参照されたい）。
【００３８】
語句「単一可変ドメイン」とは、異なる可変領域又はドメインとは独立に、抗原又はエピトープに特異的に結合する抗原結合タンパク質の可変ドメイン（例えば、ＶＨ、ＶＨＨ、ＶＬ）を指す。
【００３９】
「ドメイン抗体」又は「ｄＡｂ」は、抗原に結合することができる「単一可変ドメイン」と同一であると考えてよい。単一可変ドメインは、ヒト抗体可変ドメインであってもよいが、げっ歯類（例えば、国際公開第００／２９００４号パンフレットに開示されている）、テンジクザメ及びラクダ科のＶＨＨ ｄＡｂ等の他の種に由来する単一抗体可変ドメインも含む。ラクダ科のＶＨＨは、ラクダ、ラマ、アルパカ、ヒトコブラクダ及びグアナコを含む種に由来する免疫グロブリン単一可変ドメインポリペプチドであり、天然に軽鎖が欠けている重鎖抗体を産生する。このようなＶＨＨドメインは、当技術分野において利用可能な標準技術に従ってヒト化することができ、このようなドメインは「ドメイン抗体」であるとみなされる。本明細書で使用するＶＨとしては、ラクダ科のＶＨＨドメインが挙げられる。
【００４０】
本明細書で使用する用語「ドメイン」は、タンパク質の残りとは無関係な三次構造を有する折り畳みタンパク質構造を指す。一般的に、ドメインは、タンパク質の個別の機能特性に関与しており、多くの場合、タンパク質及び／又はドメインの残りの機能を失うことなく付加、除去、又は他のタンパク質に転移することができる。「単一可変ドメイン」は、抗体可変ドメインに特徴的な配列を含む折り畳みポリペプチドドメインである。したがって、ドメインは、完全な抗体可変ドメイン及び、例えば、抗体可変ドメインに特徴的ではない配列、あるいは切頭されているか又はＮ末端若しくはＣ末端に伸長を含む抗体可変ドメイン、並びに完全長ドメインの結合活性及び特異性を少なくとも保持する可変ドメインの折り畳み断片によって１以上のループが置換されている改変可変ドメインを含む。ドメインは、異なる可変領域又はドメインとは無関係に抗原又はエピトープに結合することができる。
【００４１】
抗原結合断片は、ドメイン等の非抗体タンパク質スカフォールドに１以上のＣＤＲを配置することにより提供することができる。ドメインはドメイン抗体であってもよく、ＣＴＬＡ−４、リポカリン、ＳｐＡ、アフィボディ、アヴィマー、ＧｒｏＥｌ、トランスフェリン、ＧｒｏＥＳ、及びフィブロネクチン／アドネクチンからなる群より選択されるスカフォールドの誘導体であるドメインであってもよく、これらは、天然リガンド以外のＩＬ−１８等の抗原に結合させるためにタンパク質工学に供されている。
【００４２】
抗原結合断片又は免疫学的に有効な断片は、部分的に重鎖又は軽鎖の可変配列を含み得る。断片の長さは、少なくとも５、６、７、８、９、又は１０アミノ酸である。あるいは、断片の長さは、少なくとも１５、少なくとも２０、少なくとも５０、少なくとも７５、又は少なくとも１００アミノ酸である。
【００４３】
抗原結合タンパク質に関連して用いる用語「特異的に結合する」は、抗原結合タンパク質が、他の（例えば、無関係の）タンパク質には全く又は殆ど結合しないがＩＬ−１８には結合することを意味する。
【００４４】
抗体に関連して用いられる用語「免疫特異的」とは、他のタンパク質には全く又は殆ど結合しないが、標的タンパク質（例えば、ヒトＩＬ−１８）には結合する抗体を意味する。しかし、この用語は、所与の種（例えばヒト）における標的タンパク質に対する抗体が、他の種（例えば、非ヒト霊長類）における標的タンパク質の他の形態と交差反応する可能性があるという事実を除外するものではない。
【００４５】
抗原結合タンパク質とＩＬ−１８との相互作用の平衡解離定数（ＫＤ）は、１ｍＭ以下、１００ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、２ｎＭ以下、又は１ｎＭ以下であり得る。あるいは、ＫＤは、５〜１０ｎＭ；又は１〜２ｎＭであってもよい。ＫＤは、１ｐＭ〜５００ｐＭ；又は５００ｐＭ〜１ｎＭであってもよい。結合親和性は、ＢＩＡｃｏｒｅ（商標）により、例えば、一級アミンカップリングによってＣＭ５チップ上にカップリングされたＩＬ−１８を用いて抗原を捕捉し、この表面上に抗体を捕捉することにより測定できる。あるいは、結合親和性は、ＦＯＲＴＥｂｉｏにより、例えば、一級アミンカップリングによってＣＭ５針にカップリングされたＩＬ−１８を用いて抗原を捕捉し、この表面上に抗体を捕捉することにより測定できる。Ｈ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）は、高い親和性（ＫＤ＝３０．３ｐＭ）でヒトＩＬ−１８に結合する。特定の実施形態では、２５℃で測定したとき、本発明の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質及びヒトＩＬ−１８に関する平衡解離定数は、約３０ｐＭ、又は３０ｐＭ未満である。
【００４６】
本明細書で使用する用語「中和する」とは、インビトロ又はインビボにおいて、抗原結合タンパク質の非存在下におけるＩＬ−１８の活性と比較して、本明細書に記載する抗原結合タンパク質の存在下におけるＩＬ−１８の生物活性が低下することを意味する。中和は、ＩＬ−１８がＩＬ−１８受容体に結合するのをブロックする、循環からＩＬ−１８を取り除く、ＩＬ−１８又はＩＬ−１８受容体をダウンレギュレートする、又はエフェクター機能に影響を与えるのうちの１以上に起因し得る。
【００４７】
ＩＬ−１８活性は、エキソビボで刺激された全血におけるインターフェロン−γ（ＩＦＮ−γ）アッセイを用いて間接的に測定することができる。簡潔に述べると、血液３０ｍＬを収集して標準的なクエン酸塩又はヘパリン抗凝血剤に入れ、以下のプロトコールを使用する。治療剤約３μＬを６ウェルプレートのウェルに直接分注する（治療剤は、５０ｎｇ／ｍＬのＩＬ１８及び適切な対照を含むはずである）。各ウェルに全血３ｍＬを添加し、穏やかに振盪することにより混合する。１５分ごとにシェーカー上で穏やかに混合しながら、４時間ＣＯ２インキュベータ内で３７℃にてプレートをインキュベートする。インキュベートの最後に、２．５ｍＬの血液をＰＡＸ管に移し、前記ＰＡＸ管を８〜１０回反転させ、室温で２時間直立した状態で保存する。中期保存するために前記ＰＡＸ管を−２０℃に移す。ＩＦＮ−γレベルは、製造業者のガイドラインに従ってＴａｑＭａｎ又はＥＬＩＳＡ／ＭＳＤのいずれかを使用して測定することができる。
【００４８】
「キメラ抗体」は、アクセプター抗体由来の軽鎖及び重鎖定常領域に会合しているドナー抗体由来の天然に存在する可変領域（軽鎖及び重鎖）を含有する改変抗体の種類を指す。
【００４９】
「ヒト化抗体」は、非ヒトドナー免疫グロブリン由来のＣＤＲを有し、分子の残りの免疫グロブリン由来部分が１以上のヒト免疫グロブリンに由来する改変抗体の種類を指す。更に、フレームワークサポート残基は、結合親和性を保つように変化させることができる（例えば、Ｑｕｅｅｎら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，８６：１００２９−１００３２（１９８９年）、Ｈｏｄｇｓｏｎら，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，９：４２１（１９９１年）を参照されたい）。好適なヒトアクセプター抗体は、ドナー抗体のヌクレオチド及びアミノ酸の配列に対する相同性によって、従来のデータベース、例えば、ＫＡＢＡＴ（登録商標）データベース、Ｌｏｓ Ａｌａｍｏｓデータベース、及びＳｗｉｓｓ Ｐｒｏｔｅｉｎデータベースから選択される抗体であってもよい。（アミノ酸に基づいて）ドナー抗体のフレームワーク領域に対する相同性により特徴付けられるヒト化抗体は、重鎖定常領域及び／又はドナーＣＤＲを挿入するための重鎖可変フレームワーク領域を提供するのに好適であり得る。軽鎖の定常又は可変フレームワーク領域を供与することができる好適なアクセプター抗体は、同様の方法で選択することができる。アクセプター抗体の重鎖及び軽鎖は、同じアクセプター抗体を起源とする必要はないことに留意すべきである。先行技術には、このようなヒト化抗体を産生する幾つかの方法が記載されている。例えば、欧州特許出願公開第０２３９４００号明細書及び欧州特許出願公開第０５４９５１号明細書を参照されたい。１つの実施形態では、本発明の抗体は、ヒト化抗体である。
【００５０】
用語「ヒト抗体」は、ヒト免疫グロブリン遺伝子配列に由来する抗体を指す。これら完全ヒト抗体は、低免疫原性治療抗体の起源として再改変又は脱免疫されたげっ歯類モノクローナル抗体（例えば、ヒト化抗体）に代わるものを提供し、これらは、通常、ファージディスプレイ又はトランスジェニックマウスプラットフォームのいずれかを用いて作製される。１つの実施形態では、本発明の抗体はヒト抗体である。
【００５１】
用語「ＶＨ」及び「ＶＬ」は、それぞれ、抗原結合タンパク質の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を指すために本明細書で用いられる。
【００５２】
「ＣＤＲ」は、抗原結合タンパク質の相補性決定領域のアミノ酸配列として定義される。これらは、免疫グロブリンの重鎖及び軽鎖の超可変領域である。免疫グロブリンの可変部分には３つの重鎖ＣＤＲ及び３つの軽鎖ＣＤＲ（すなわち、ＣＤＲ領域）が存在する。したがって、本明細書で使用する「ＣＤＲ」は、３つの重鎖ＣＤＲ全て、３つの軽鎖ＣＤＲ全て、重鎖及び軽鎖のＣＤＲの全て、又は少なくとも２つのＣＤＲを指す。
【００５３】
本明細書全体にわたって、可変ドメイン配列及び完全長抗体配列におけるアミノ酸残基は、Ｋａｂａｔの番号付け規則に従って番号付けされる。また、本明細書に開示する特定の配列に関連する用語「ＣＤＲ」、「ＣＤＲＬ１」、「ＣＤＲＬ２」、「ＣＤＲＬ３」、「ＣＤＲＨ１」、「ＣＤＲＨ２」、「ＣＤＲＨ３」もＫａｂａｔの番号付け規則に従う。更なる情報については、Ｋａｂａｔら，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，第４版，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ（１９８７年）を参照されたい。
【００５４】
しかし、本明細書全体にわたって可変ドメイン配列及び完全長抗体配列におけるアミノ酸残基にはＫａｂａｔの番号付け規則が使用されるが、可変ドメイン配列及び完全長抗体配列におけるアミノ酸残基について別の番号付け規則が存在することが当業者には明らかであろう。また、例えば、Ｃｈｏｔｈｉａら．（１９８９年）Ｎａｔｕｒｅ ３４２：８７７−８８３に記載の通り、ＣＤＲ配列についての別の番号付け規則も存在する。抗体の構造及びタンパク質の折り畳みは、他の残基をＣＤＲ配列の一部とみなすことを意味する場合があり、当業者にはそのように理解される。
【００５５】
当業者が利用可能なＣＤＲ配列についての他の番号付け規則としては、「ＡｂＭ」法（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｂａｔｈ）及び「ｃｏｎｔａｃｔ」（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ Ｌｏｎｄｏｎ）法が挙げられる。少なくともＫａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ及びｃｏｎｔａｃｔ法のうちの少なくとも２つを用いる最小重複領域が、「最小結合単位」を提供すると定めることができる。最小結合単位は、ＣＤＲの一部であってもよい。
【００５６】
以下の表１は、各ＣＤＲ又は結合単位について各番号付け規則を用いた１つの定義を表す。可変ドメインのアミノ酸配列を番号付けするために表１ではＫａｂａｔの番号付けスキームを使用する。ＣＤＲの定義のうちの一部は、使用される個々の刊行物によって異なる場合があることに留意するべきである。
【表１】
【００５７】
１つの実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、配列番号７及び／又は配列番号１１内に含有されているＣＤＲを含む。１つの実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、以下のＣＤＲ又はその変異体のうちの任意の１以上を含む：ＣＤＲＨ１（配列番号１）、ＣＤＲＨ２（配列番号２）、ＣＤＲＨ３（配列番号３）、ＣＤＲＬ１（配列番号４）、ＣＤＲＬ２（配列番号５）、ＣＤＲＬ３（配列番号６）。１つの実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、ＣＤＲＨ１（配列番号１）、ＣＤＲＨ２（配列番号２）、ＣＤＲＨ３（配列番号３）、ＣＤＲＬ１（配列番号４）、ＣＤＲＬ２（配列番号５）、及びＣＤＲＬ３（配列番号６）を含む。
【００５８】
本明細書に記載するＣＤＲ又は変異体ＣＤＲのうちの１以上は、例えば、ヒト化又はキメラ可変ドメインとして、ヒトフレームワークの状況において存在してもよい。
【００５９】
「ＣＤＲ変異体」は、少なくとも１つのアミノ酸によって改変されたアミノ酸配列を含み、前記改変は、（例えば、１０以下のアミノ酸による）アミノ酸配列の化学的又は部分的変化であり得、この改変により、変異体が未改変配列の生物学的特徴を保持することが可能になる。例えば、前記変異体は、ＩＬ−１８に結合し、中和する機能的変異体である。ＣＤＲアミノ酸配列の部分的変化は、（例えば、１０以下のアミノ酸による）１つ〜幾つかのアミノ酸の欠失又は置換、あるいは１つ〜幾つかのアミノ酸の付加又は挿入、あるいはこれらの組合せによるものであり得る。ＣＤＲ変異体は、アミノ酸配列で、１、２、３、４、５又は６アミノ酸の置換、付加、又は欠失を任意の組合せで含有し得る。ＣＤＲ変異体又は結合単位変異体は、アミノ酸配列で、１、２、又は３アミノ酸の置換、挿入、付加、又は欠失を任意の組合せで含有し得る。アミノ酸残基における置換は、例えば、ある疎水性アミノ酸を別の疎水性アミノ酸に置換する保存的置換であってよい。例えば、ロイシンは、バリン又はイソロイシンで置換することができる。
【００６０】
１つの実施形態では、抗ＩＬ−１８抗体は、以下からなる群より選択される：Ｈ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）、ＡＢＴ−３２５（Ａｂｂｏｔｔ）及び１２５−２Ｈ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）。
【００６１】
ヌクレオチド及びアミノ酸配列について、用語「同一」又は、「配列同一性」は、最適に整列させ、適切に挿入又は欠失したものと比較したときの、２つの核酸又は２つのアミノ酸配列間の同一性の程度を示す。
【００６２】
２つの配列間の同一性パーセントは、２つの配列を最適に整列させるために導入する必要があるギャップの数及び各ギャップの長さを考慮して、配列が共有している同一位置の数の関数である（すなわち、同一性％＝同一位置の数／位置の総数×１００）。下記の通り、数学アルゴリズムを使用して、配列を比較し、２つの配列間の同一性パーセントを求めることができる。
【００６３】
２つのヌクレオチド配列間の同一性パーセントは、ＧＣＧソフトウェアパッケージにおけるＧＡＰプログラムを使用し、ＮＷＳｇａｐｄｎａ．ＣＭＰマトリックス、並びにギャップ重み付け（ｇａｐ ｗｅｉｇｈｔ）４０、５０、６０、７０、又は８０、及び長さ重み付け（ｌｅｎｇｔｈ ｗｅｉｇｈｔ）１、２、３、４、５、又は６を使用して求めることができる。２つのヌクレオチド又はアミノ酸の配列間の同一性パーセントは、ＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれたＥ．Ｍｅｙｅｒｓ及びＷ．Ｍｉｌｌｅｒ（Ｃｏｍｐｕｔ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．，４：１１−１７（１９８８年））のアルゴリズムを使用し、ＰＡＭ１２０重み付け残基表、ギャップ長ペナルティ１２及びギャップペナルティ４を用いて求めることもできる。更に、ＧＣＧソフトウェア・パッケージにおけるＧＡＰプログラムに組み込まれたＮｅｅｄｌｅｍａｎ及びＷｕｎｓｃｈ（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４４−４５３（１９７０年））のアルゴリズムを使用し、Ｂｌｏｓｓｕｍ ６２マトリックス又はＰＡＭ２５０マトリックスのいずれか、並びにギャップ重み付け１６、１４、１２、１０、８、６又は４、及び長さ重み付け１、２、３、４、５、又は６を使用して、２つのアミノ酸配列間の同一性パーセントを求めることができる。
【００６４】
ポリペプチド配列は、本明細書に記載するレファレンスポリペプチド配列（例えば、配列番号７を参照されたい）と同一である、すなわち、１００％同一であってもよく、同一性％が１００％未満、例えば少なくとも５０、６０、７０、７５、８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８又は９９％同一になるように、レファレンス配列と比べて特定の整数以下のアミノ酸の変化を含んでもよい。このような変化は、少なくとも１つのアミノ酸の欠失、保存的及び非保存的置換を含む置換、又は挿入からなる群より選択され、前記変化は、レファレンスポリペプチド配列のアミノ末端又はカルボキシ末端位置、又はこれら末端位置間のいずれの位置に生じてもよく、レファレンス配列中のアミノ酸の中に個々に点在してもよく、又はレファレンス配列内の１以上の連続する群に生じてもよい。所与の同一性％についてのアミノ酸の変化の数は、本明細書に記載するポリペプチドレファレンス配列（例えば、配列番号７を参照されたい）によりコードされるポリペプチド配列におけるアミノ酸の総数に、それぞれの同一性パーセントの数値的パーセント（１００で除された数）を乗じ、次いで、本明細書に記載するポリペプチドレファレンス配列（例えば、配列番号７を参照されたい）におけるアミノ酸の総数からその積を減じることにより求められる、すなわち：
ｎａ≦ｘａ−（ｘａ・ｙ）
（式中、ｎａ は、アミノ酸の変化の数であり、ｘａは、本明細書に記載するレファレンスポリペプチド配列（例えば、配列番号７を参照されたい）におけるアミノ酸の総数であり、ｙは、５０％の場合０．５０、６０％の場合０．６０、７０％の場合０．７０、７５％の場合０．７５、８０％の場合０．８０、８５％の場合０．８５、９０％の場合０．９０、９５％の場合０．９５、９８％の場合０．９８、９９％の場合０．９９、又は１００％の場合１．００であり、・は、乗算演算子の記号であり、ｘａ及びｙの積が任意の非整数である場合、ｘａからそれを減じる前に最も近い整数に切り捨てられる）。
【００６５】
同一性％は、配列の長さ全体にわたって求めることができる。
【００６６】
本発明の抗体重鎖は、配列番号７（重鎖Ｈ１）、配列番号８（重鎖Ｈ２）、又は配列番号９（重鎖Ｈ３）に対して７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有し得る。特定の実施形態では、本発明の抗体重鎖は、配列番号７（重鎖１）に対して７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有する。
【００６７】
本発明の抗体軽鎖は、配列番号１０（軽鎖Ｌ１）、配列番号１１（軽鎖Ｌ２）、又は配列番号１２（軽鎖Ｌ３）に対して７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有し得る。特定の実施形態では、本発明の抗体軽鎖は、配列番号１１（軽鎖Ｌ２）に対して７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有する。
【００６８】
本発明の抗体重鎖は、３０、２５、２０、１５、１０、９、８、７、６、５、４、３、２又は１アミノ酸の置換、挿入又は欠失を含有する配列番号７、配列番号８、又は配列番号９の変異体であってよい。１つの実施形態では、抗体重鎖は、配列番号７の変異体である。本発明の抗体軽鎖は、３０、２５、２０、１５、１０、９、８、７、６、５、４、３、２又は１アミノ酸の置換、挿入又は欠失を含有する配列番号１０、配列番号１１、又は配列番号１２の変異体であってよい。１つの実施形態では、抗体軽鎖は、配列番号１１の変異体である。
【００６９】
用語「ペプチド」、「ポリペプチド」及び「タンパク質」は、それぞれ、２以上のアミノ酸残基を含む分子を指す。ペプチドは、モノマーであってもポリマーであってもよい。
【００７０】
特定のアミノ酸置換を「保存的」であるとみなすことは、当技術分野において十分認識されている。アミノ酸は、共通の側鎖特性に基づいてグループ分けされ、抗原結合タンパク質の結合親和性の全て又は実質的に全てを維持するグループ内の置換は、保存的置換であるとみなされる。以下の表２を参照されたい。
【表２】
【００７１】
１つの実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、ＩＬ−１８に特異的に結合し、ＩＬ−１８を中和し、配列番号７の重鎖配列及び配列番号１１の軽鎖配列を含むレファレンス抗体（Ｈ１Ｌ２）のＩＬ−１８に対する結合と拮抗する。
【００７２】
抗原結合タンパク質とレファレンス抗体との間の競合は、競合ＥＬＩＳＡにより測定することができる。競合する抗原結合タンパク質はレファレンス抗体が結合するのと同じエピトープ、重複するエピトープ、又は前記エピトープに近接しているエピトープに結合し得る。
【００７３】
抗原結合タンパク質は、ラット、マウス、霊長類（例えば、カニクイザル、旧世界サル、又は類人猿）又はヒトに由来し得る。抗原結合タンパク質は、ヒト化抗体であっても、キメラ抗体であってよい。抗原結合タンパク質は、ヒト抗体であってもよい。
【００７４】
抗原結合タンパク質は、いずれのアイソタイプ又はサブクラスであってもよい定常領域を含み得る。定常領域は、ＩｇＧアイソタイプ、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、又はこれらの変異体の定常領域であってもよい。１つの実施形態では、抗原結合タンパク質の定常領域は、ＩｇＧ１である。
【００７５】
定常ドメイン領域を含む抗原結合タンパク質は、ＡＤＣＣ及び／又は補体活性化若しくはエフェクター機能を低下させることができる。定常ドメインは、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４アイソタイプの生来不能である定常領域、あるいは突然変異型ＩｇＧ１定常ドメインを含んでもよい。好適な改変の例は、欧州特許第０３０７４３４号明細書に記載されている。一例は、位置２３５及び２３７（ＥＵインデックスの番号付け）におけるアラニン残基の置換を含む。
【００７６】
抗原結合タンパク質は、抗体のエフェクター機能／ＡＤＣＣ及び／又は補体活性化が増強されるように、突然変異型定常領域から選択される１以上の改変を含んでもよい。好適な改変の例は、Ｓｈｉｅｌｄｓら．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ（２００１年）２７６：６５９１−６６０４，Ｌａｚａｒら．ＰＮＡＳ（２００６年）１０３：４００５−４０１０、及び米国特許第６７３７０５６号明細書、国際公開第２００４０６３３５１号パンフレット、及び国際公開第２００４０２９２０７号パンフレットに記載されている。
【００７７】
抗原結合タンパク質のエフェクター機能／ＡＤＣＣ及び／又は補体活性化が増強されるように、抗原結合タンパク質は、グリコシル化プロファイルの変化している定常領域を含んでもよい。グリコシル化プロファイルの変化している抗原結合タンパク質を作製するのに好適な方法の例は、国際公開第２００３／０１１８７８号パンフレット、国際公開第２００６／０１４６７９号パンフレット、及び欧州特許第１２２９１２５号明細書に記載されている。
【００７８】
本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニスト、例えば、抗原結合タンパク質の精製調製物を、本明細書に記載するヒトの疾患、障害、及び病状、特に代謝障害の治療において使用するための医薬組成物に配合してもよい。疾患、障害及び病状という用語は、互換的に使用される。
【００７９】
本発明のＩＬ１８アンタゴニスト、特に抗原結合タンパク質は、代謝障害を治療又は予防するために用いることができる。代謝障害を治療又は予防する薬剤の製造における本発明のＩＬ１８アンタゴニスト、特に抗原結合タンパク質の使用も提供される。
【００８０】
「代謝障害」は、炭水化物、アミノ酸、有機酸、脂肪酸、ミトコンドリア、ステロイドが挙げられるがこれらに限定されない身体中の物質代謝の不均衡により定義される任意の障害である。代謝障害としては、以下の非限定的な例が挙げられる：インスリン抵抗性、２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）、肥満、メタボリック症候群、異脂肪血症、急性膵炎、肝不全、Ｔ２ＤＭに関連する共存症（例えば、アテローム性動脈硬化、心血管疾患）。１つの実施形態では、代謝障害はＴ２ＤＭである。
【００８１】
１つの実施形態では、本発明のＩＬ１８アンタゴニストは、ヒト患者におけるグルコースレベルを低下させる。
【００８２】
本発明のＩＬ−１８アンタゴニストは、低血糖を引き起こすことなく（すなわち、血中グルコースが３ｍｍｏｌ／Ｌ未満になることなく）、末梢インスリン抵抗性を改善し、血糖コントロールを改善し（すなわち、空腹時血糖の標的幅を８．９ｍｍｏｌ／Ｌ未満、特に３．９〜７．２ｍｍｏｌ／Ｌで維持し）、β細胞を保護し、β細胞機能の喪失を防ぎ、膵臓の機能を改善し（セクレチンに対する膵臓の応答を測定することにより評価される）、（全身の代謝の改善を介して）体重を減少させ、心臓血管の健康を改善し（血漿トリグリセリド、脂質、ＣＲＰ、血圧、及びＢＭＩを測定することにより評価される）、及び／又は疾患の進行を遅らせる。
【００８３】
本発明の１つの実施形態では、エキソビボで刺激された健常ボランティアの血液において、ＩＬ−１８によって誘導されるＩＬ−６、ＳＴＡＴ３、ＳＯＣＳ３、ＪＡＫ２、ＭＣＰ−１（ＣＣＬ２）及びＭＣＰ−４（ＣＣＬ１３）のうちの任意の１以上又は全ての遺伝子発現の増加は、本発明のＩＬ−１８アンタゴニスト、例えば、Ｈ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）により回復する又は部分的に回復する。
【００８４】
本発明の１つの実施形態では、エキソビボで刺激された健常ボランティアの血液において、ＩＬ−１８によって誘導されるＩＲＳ２、ＰＰＡＲガンマ、レプチン及びレプチン受容体の遺伝子発現の減少は、本発明のＩＬ−１８アンタゴニスト、例えば、Ｈ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）により回復する又は部分的に回復する。
【００８５】
１つの実施形態では、本発明のＩＬ−１８アンタゴニストは、感知できる量が中枢神経系（ＣＮＳ）に達することはないが、その代わり、末梢で作用することによりその治療効果を発揮する。
【００８６】
医薬調製品は、薬学的に許容しうる担体と組み合わせて、本発明のＩＬ−１８アンタゴニスト、例えば抗原結合タンパク質を含み得る。ＩＬ−１８アンタゴニストは、単独で投与してもよく、医薬組成物の一部として投与してもよい。
【００８７】
典型的に、このような組成物は、公知であり且つ許容し得る薬務により要求される薬学的に許容し得る担体を含む。例えば、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１６版（１９８０年）Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．を参照されたい。このような担体の例としては、生理食塩水、リンゲル液、又はデキストロース溶液等の無菌担体が挙げられ、これら担体は、任意で好適なバッファによりｐＨ５〜８に緩衝される。
【００８８】
医薬組成物は、（例えば、静脈内、腹腔内、皮内、皮下、筋肉内、門脈内に）注射又は持続注入することにより投与することができる。このような組成物は、目に見える粉粒体を含まないことが好ましい。１つの実施形態では、本発明の医薬組成物は、皮下注射を介して投与される。更なる実施形態では、本発明の医薬組成物は、皮内に投与される。このような皮内投与は、パッチ技術（例えば、多数の極微針又は摩耗性表面）又は他の好適な手段を使用して、皮膚から約１５°の角度で挿入される１本の針で注射することを介して達成することができる（マントーの手順）。ＩＬ−１８アンタゴニストがタンパク質である場合、医薬組成物は、０．０１ｍｇ〜１０ｇのタンパク質、例えば、５ｍｇ〜１ｇのタンパク質を含み得る。あるいは、組成物は、５ｍｇ〜５００ｍｇ、例えば、５ｍｇ〜５０ｍｇを含み得る。
【００８９】
このような医薬組成物を調製する方法は、当業者に周知である。医薬組成物は、単位剤形中に１ｍｇ〜１０ｇのタンパク質を含み得、任意で使用説明書を共に含む。医薬組成物は、当業者に周知であるか又は当業者に明らかである方法に従って、投与前に再構成するために凍結乾燥（フリーズドライ）してもよい。ＩＬ−１８アンタゴニストが抗ＩＬ−１８抗体であり且つ前記抗体がＩｇＧ１アイソタイプを有する場合、このアイソタイプの抗体の銅触媒による分解の程度を低下させるために医薬組成物にクエン酸塩（例えば、クエン酸ナトリウム）又はＥＤＴＡ又はヒスチジン等の銅のキレート化剤を添加してもよい。欧州特許第０６１２２５１号明細書を参照されたい。また、医薬組成物は、アルギニン塩基等の可溶化剤、ポリソルベート８０等の界面活性剤／抗凝集剤、及びバイアルのヘッドスペースの酸素を置換するための窒素等の不活性ガスを含み得る。
【００９０】
ＩＬ−１８アンタゴニストを投与するための有効量及び治療レジメンは、一般的に、経験的に決定され、患者の年齢、体重、及び健康状態、並びに治療される疾患又は障害等の要因に依存し得る。このような要因は、主治医の理解の範囲内である。適切な用量の選択における指針は、例えば、Ｓｍｉｔｈら（１９７７年）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｙ，Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋに見出すことができる。
【００９１】
被験体に投与されるＩＬ−１８アンタゴニストの投薬量は、一般的に、被験体の体重１ｋｇ当たり１μｇ〜１５０ｍｇ、０．１ｍｇ〜１００ｍｇ、０．５ｍｇ〜５０ｍｇ、１〜２５ｍｇ、又は１〜１０ｍｇである。例えば、用量は、１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ又は６０ｍｇ／ｋｇであり得る。１つの実施形態では、Ｈ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）は、１〜５ｍｇ／ｋｇの投薬量で被験体に投与される。別の実施形態では、Ｈ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）は、約３ｍｇ／ｋｇの投薬量で被験体に投与される。ＩＬ−１８アンタゴニストは、例えば、皮下、静脈内、又は筋肉内等、非経口的に投与してもよい。
【００９２】
２〜２４時間、例えば、２〜１２時間、又は２〜６時間の期間にわたって低速連続注入により用量を投与してよい。
【００９３】
用量の投与は、必要に応じて１回以上、例えば、１日３回、毎日１回、２日に１回、１週間に１回、２週間に１回、１ヶ月に１回、３ヶ月に１回、６ヶ月に１回、又は１２ヶ月に１回繰り返してもよい。本発明の特定の実施形態では、用量の投与は、１ヶ月に１回である。更なる実施形態では、用量の投与は、６ヶ月に１回である。ＩＬ−１８アンタゴニストは、維持療法により投与してもよく、例えば、６ヶ月以上の期間にわたって１週間に１回投与してもよい。ＩＬ−１８アンタゴニストは、間欠療法により投与してもよく、例えば、１周期において、３〜６ヶ月間ＩＬ−１８アンタゴニストを投与し、次いで、３〜６ヶ月間投与せず、次いで、３〜６ヶ月間再度ＩＬ−１８アンタゴニストを投与してもよい。
【００９４】
ＩＬ−１８アンタゴニストは、特定の部位に対する標的療法を行うように被験体に投与してよい。例えば、皮下又は静脈内にＩＬ−１８アンタゴニストを局所的に注射してもよい。
【００９５】
ＩＬ−１８アンタゴニストは、本明細書に記載する疾患を治療するためのメトホルミン、ロシグリタゾン、フェンテルミン、トピラメート、オルリスタット（Ｘｅｎｉｃａｌ（商標）、Ａｌｌｉ（商標））、ＧＬＰ−１受容体アゴニスト（例えば、エクセナチド（Ｂｙｅｔｔａ（商標））、リラグルチド（Ｖｉｃｔｏｚａ（商標））、アルビグルチド（Ｓｙｎｃｒｉａ（商標））及び／又はＰＹＹ受容体アゴニストを含む１以上の他の治療活性剤と併用してもよい。
【００９６】
他の治療活性剤と組み合わせてＩＬ−１８アンタゴニスト、例えば、抗原結合タンパク質を使用する場合、個々の成分を、一緒に又は別々に、同時に、順次、一斉に、又は連続して、別個の又は複合医薬製剤で、任意の便利な経路により投与してよい。別々に又は順次投与する場合、ＩＬ−１８アンタゴニスト及び治療活性剤は、任意の順序で投与してよい。
【００９７】
上記組合せは、任意で薬学的に許容し得る担体又は賦形剤と共に、上に定義する組合せを含む単一医薬製剤の形態で使用するために提示してもよい。
【００９８】
同じ製剤中で組合せる場合、成分が安定であり且つ互いに及び製剤の他の成分と適合しなくてはならず、投与用に製剤化できることが認識される。別々に製剤化する場合、例えば当技術分野の抗原結合タンパク質について公知のように、任意の便利な製剤で提供してよい。
【００９９】
同じ疾患に対する第２の治療活性剤と組合せる場合、各成分の用量は、ＩＬ−１８アンタゴニストを単独で使用するときと異なってもよい。当業者は適切な用量を容易に認識する。
【０１００】
ＩＬ−１８アンタゴニスト及び治療活性剤は、相乗的に作用する場合もある。言い換えれば、ＩＬ−１８アンタゴニストと治療活性剤とを組合せて投与すると、本明細書に記載する疾患、障害、又は病状に対する効果が、それぞれの単独の効果の合計よりも大きくなる場合がある。
【０１０１】
用語「個体」、「被験者」及び「患者」は、本明細書において互換的に使用される。被験体は、典型的にヒトである。また、被験体は、マウス、ラット又は霊長類（例えばマーモセット又はサル）等の哺乳類であってもよい。被験体は、非ヒト動物であってもよい。また、ＩＬ−１８アンタゴニストは、獣医学的に使用してもよい。治療される被験体は、例えば、雌ウシ又は雄ウシ、ヒツジ、ブタ、雄ウシ、ヤギ又はウマ等の家畜であってもよく、イヌ又はネコ等のペットであってもよい。動物は、任意の年齢であってよく、成熟した成体動物であってもよい。
【０１０２】
治療は、療法的、予防的、又は防止的であってよい。被験体は、それを必要としている被験体である。治療を必要としている被験体は、特定の医学的疾患に既に罹患している個体に加えて、将来その疾患を発現する可能性のある個体を含み得る。
【０１０３】
したがって、本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストは、予防的又は防止的治療に用いることができる。この場合、本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストは、疾患の１以上の局面又は症状の発生を防止するか又は遅らせるために、個体に投与される。被験体は、無症候性であり得る。被験体は、その疾患に対する遺伝性素因を有し得る。このような個体には、予防上有効な量のＩＬ−１８アンタゴニストが投与される。予防上有効な量は、本明細書に記載する疾患の１以上の局面又は症状の発生を防止するか又は遅らせる量である。
【０１０４】
また、本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストを治療の方法で用いてもよい。用語「治療」は、疾患の少なくとも１つの局面又は症状の緩和、低減、又は防止を包含する。例えば、本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストを用いて、本明細書に記載する疾患の１以上の局面又は症状を寛解又は低減することができる。
【０１０５】
本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストは、療法的、予防的、又は防止的治療に有効な量で用いられる。本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストの治療上有効な量は、疾患の１以上の局面又は症状を寛解又は低減するのに有効な量である。また、本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストは、本明細書に記載する疾患を治療、防止、又は治癒させるために用いることができる。
【０１０６】
本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストは、一般的に、被験体の健康に対して有益な効果を有し得、例えば、被験体の予測寿命を延ばすことができる。
【０１０７】
本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストは、実行可能な療法的治療を行うために疾患の全ての症状又は徴候を完全に治癒させる又は根絶する必要がある訳ではない。適切な分野で認識されている通り、治療剤として使用される薬物は、所与の疾患状態の重篤度を低下させることができるが、有用な治療剤であるとみなされるために疾患の全ての徴候を消失させる必要がある訳ではない。同様に、予防的に投与される治療剤は、実行可能な予防剤を構成するために疾患の発症を防止するのに完全に有効である必要はない。単に、（例えばその症状の数又は重篤度を減らすことにより、又は別の治療の有効性を高めることにより、又は別の有益な効果を生じさせることにより）疾患の影響を低下させるか又は（例えば疾患の発症を遅らせることにより）被験体において疾患が生じたり悪化したりする可能性を低下させることで十分である。
【０１０８】
本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストは、本明細書に記載する任意の代謝障害の治療又は予防において用いることができる。
【０１０９】
用語「治療上有効な量」は、治療される疾患を防ぐ、阻害する、停止させる、又は改善するのに十分な物質、例えば、ＩＬ−１８アンタゴニストの量（用量）を指す。
【０１１０】
したがって、本発明は、上記疾患を治療及び／又は予防する方法であって、治療上有効な量のＩＬ−１８アンタゴニスト、例えば、抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質を、それを必要としている患者に投与する工程を含む方法を提供する。
【０１１１】
本明細書中では、本発明は、明確且つ簡潔に説明を記載することができるように、実施形態を参照して記載される。実施形態は、本発明から逸脱することなく様々に組合せたり分離させたりできることを意図しており、またそのように認識されるべきである。
【０１１２】
本明細書に引用する特許及び特許出願が挙げられるがこれらに限定されない全ての刊行物は、全体が記載されているかのように参照することにより本明細書に援用される。
【０１１３】
本開示は、更に、例示目的のためだけに以下の実施例に更に記載される。
【実施例】
【０１１４】
実施例１
ＩＬ−１８誘導性遺伝子発現に対するＨ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）の効果を求めるために、１０人の健常ボランティアドナーから採取した血液をドナー１人当たり４つのアリコートに分割し、以下のいずれかを用いてエキソビボで刺激した：Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ １μｇ／ｍＬ（対照抗ＲＳＶ ＩｇＧ）、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ。各処理群のサンプルを、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ Ｕ１３３＿ｐｌｕｓ＿２．０全ゲノムヒトマイクロアレイにハイブリダイズさせた。以下の比較を行った：
・Ｓｙｎａｇｉｓ ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ対ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ：血液中の遺伝子発現に対するＩＬ−１８の効果を求めるため
・ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ対ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ：ＩＬ−１８誘導性遺伝子発現に対するＨ１Ｌ２の効果を求めるため
・Ｓｙｎａｇｉｓ ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ対Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ：刺激の非存在下における血液中の遺伝子発現に対するＨ１Ｌ２の効果を求めるため
エキソビボでＩＬ−１８により刺激された血液は、ＩＬ−６の発現において９倍の増加（Ｐ＜０．０００１）を示し、Ｈ１Ｌ２の添加は、この効果を中和した（ＩＬ−１８＋Ｈ１Ｌ２のデータをＩＬ−１８のみのデータと比較したとき７倍減少した）。図１にデータを示す。
【０１１５】
更に、ＪＡＫ２、ＳＯＣＳ３及びＳＴＡＴ３は、それぞれ、ＩＬ−１８刺激による発現において３．２倍、３．１倍、及び１．７倍の増加を示した。Ｈ１Ｌ２の添加は、これら効果を部分的に中和した：ＩＬ−１８＋Ｈ１Ｌ２をＩＬ−１８のみと比較したとき、ＪＡＫ２は２．１倍減少し、ＳＯＣＳ３は１．９倍減少し、ＳＴＡＴ３は１．６倍減少した。図２、３及び４にデータを示す。
【０１１６】
更に、ＭＣＰ−１及びＭＣＰ−４は、それぞれ、ＩＬ−１８刺激による発現において４．４倍及び４．１倍の増加を示した。ＩＬ１８＋Ｈ１Ｌ２をＩＬ１８のみと比較したとき、Ｈ１Ｌ２の添加によりこれら増加は部分的に回復し、２．６倍及び２．５倍の減少を示した（図５〜６を参照されたい）。ＰＰＡＲガンマ及びＩＲＳ２は、ＩＬ１８刺激によりそれぞれ２．９倍及び１．５倍の減少を示した。これら効果はＨ１Ｌ２の添加により部分的に回復し（図７〜８を参照されたい）、ＩＬ１８＋Ｈ１Ｌ２をＩＬ１８のみと比較したとき１．７倍及び１．４倍の増加を示した。最後に、レプチン及びレプチン受容体は、両方とも、ＩＬ−１８刺激後に発現が１．５倍の減少を示した。これら効果もＨ１Ｌ２により中和された（図９〜１０を参照されたい）。
【０１１７】
この実験は、マイクロアレイ上のプローブの９０％において１．１倍の変化を検出するために９０％信頼力を用いて行った。
【０１１８】
このデータは、ＩＬ−１８がＩＬ−６及び血液中のその重要なシグナル伝達分子の発現を誘導し、これら効果がＨ１Ｌ２によって中和され得ることを示す。
【０１１９】
実施例２
様々な癌を治療するために注入又は皮下投与された組換え型ヒトＩＬ−１８（ｒｈＩＬ−１８）の有用性について、３つの第Ｉ相試験及び１つの第ＩＩ相試験で調べられている。これら試験から得られた血中グルコース及び臨床検査値異常のデータを再調査して、ｒｈＩＬ−１８の注入と、その後のグルコース代謝の変化との間に何らかの関係が存在する可能性について調査した。全ての第１相試験において、糖尿病等の合併症を有する患者は、治験責任医師によりその疾患が安定しているとみなされ且つ患者が少なくとも６ヶ月間治療を受けている場合に限り、参加資格を有していた。
【０１２０】
これら試験で調査された全ての用量レベルでは、３０〜４０時間かけて患者の血漿中でｒｈＩＬ−１８が超生理学的なレベルに達した。
【０１２１】
これら試験で組換え型ヒトＩＬ−１８（ｒｈＩＬ−１８）の投薬中に遭遇した最も一般的な臨床化学的異常は、過血糖であった。
【０１２２】
現在までに完了している単独療法試験全体で、治療を受けた患者の３８〜６８％が、プロトコールの適格基準（すなわち、糖尿病被験体を除外したかどうか）によって少なくとも等級１（ＣＴＣ基準）の高血糖症ＡＥ（＞ＵＬＮ〜８．９ｍｍｏｌ／Ｌ）を経験した。
【０１２３】
３つの完了し報告されている用量設定試験（ｎ＝７２）全体で、８人（７％）の患者が等級３（＞１３．９〜２７．８ｍｍｏｌ／Ｌ）の高血糖事象を経験し、１人の患者が等級４（＞２７．８ｍｍｏｌ／Ｌ）の高血糖症を経験した。これら患者の９人全てが、ランダム化時点で糖尿病であると診断されていた。
【０１２４】
血漿グルコースレベルとの明らかな用量相関は存在しなかったが、血中グルコースの増加の程度に加えて、投与に対する低血糖症ＡＥのタイミング（注入の５〜１０日後）が一貫していることは、これら事象がｒｈＩＬ−１８の投与と関連していることを示唆する。これらデータは、ＩＬ−１８と血漿グルコースレベルの上昇との間の関連を示し、ひいては、ＩＬ−１８アンタゴニストが、血漿グルコースが増加する代謝障害、例えば、Ｔ２ＤＭ、肥満Ｔ２ＤＭ、及び肥満の有用な治療法であり得ることを示唆する。
【０１２５】
実施例３
ＤＩＯ（食餌誘発性肥満）マウスモデルで様々な用量の本発明のＩＬ−１８アンタゴニストを用いて、グルコースレベル、インスリンレベル、並びに肥満及び糖尿病に関係する他の代謝パラメータに加えて、体重減少に対する影響を調べることができる。
【０１２６】
このモデルでは、Ｃ５７ｂｌ／６雄マウスは、１８〜２０週間４５％脂肪食を給餌したとき、体重が約４０〜４５ｇに達する。次いで、ＩＬ−１８アンタゴニストを１回又は数回投与し、実験が終わるまで毎日マウスの体重を測定した。終末麻酔後のマウスから心臓の血液を回収し、ＡＬＰ、ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＧＬＤＨ、ビリルビン、グルコース、インスリン、尿素、クレアチニン、総タンパク量、アルブミン、カルシウム、コレステロール、トリグリセリド、リン酸塩、ナトリウム、カリウム、塩化物及びケトン（可能な場合にはハイドロキシブチレート及びアセトアセテートの両方）を含むいくつかのマーカーの分析を行う。組織を採取し、安全性評価のために組織病理学的に評価し、免疫組織化学のための脳組織を評価してもよい。
【０１２７】
上記実施例１及び２に示した結果を鑑みて、これらマウスを用いた実験の結果は、体重減少に与える影響と共に、ＩＬ−１８アンタゴニストで処理したマウスにおけるグルコース及びインスリンレベルの減少であると予測される。
【０１２８】
実施例４
健常及び肥満被験体に静脈内注入された単回用量のＨ１Ｌ２の安全性、耐容性、薬物動態について調べるために、ヒトにおいて初めての（ＦＴＩＨ）試験（すなわち、単盲検無作為化プラセボ対照試験）を実施した。また、肥満被験体において、代謝薬動力学も評価した。
【０１２９】
方法論
試験は、２つの部分からなっていた。第１部は、５コホートの健常被験体（１コホート当たりｎ＝５〜１５）からなっており、第２部は、３コホートの肥満被験体（１コホート当たりｎ＝５〜１２）からなっていた；肥満被験体は、ＢＭＩが３０〜４０であるが他の点では健康である被験体として定義した。各コホートは、単回試験セッションに参加した。
【０１３０】
両部とも、単純盲検及びプラセボ対照で実施した。各コホート内では、プラセボ又は動的治療への被験体の割当てを無作為化した。
【０１３１】
第１部の開始用量は０．００８ｍｇ／ｋｇであり、最大用量３．０ｍｇ／ｋｇまで段階的に用量を増加させた。第２部の投与は、第１部に対する１ｍｇ／ｋｇの投与が完了し、予備安全性及びＰＫデータが調査されるまで開始しなかった。
【０１３２】
細胞媒介性炎症に対するＨ１Ｌ２の効果を調べるために、第１部の健常被験体の１ｍｇ／ｋｇ及び３ｍｇ／ｋｇのコホートには遅延型過敏（ＤＴＨ）アプローチが含まれていた。Ｃａｎｄｉｎ（登録商標）は、皮内に投与したときにＤＴＨ炎症反応をトリガーするカンジダアルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）皮膚試験抗原である（Ａｌｌｅｒｍｅｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）。ＤＴＨ応答者であると確認された２７人の健常ボランティア（腕の手掌表面に皮内注入した０．１ｍＬのＣａｎｄｉｎ（登録商標）に応答して＞５ｍｍ硬化した）を、１ｍｇ／ｋｇ（Ｈ１Ｌ２ ｎ＝９、プラセボｎ＝３）及び３ｍｇ／ｋｇ（Ｈ１Ｌ２ ｎ＝９、プラセボｎ＝６）の健常被験体コホートに新規登録した。これらコホートに登録された被験体は、試験の３日目（Ｈ１Ｌ２投与の４８時間後）に２回目のＣａｎｄｉｎ（登録商標）皮内注射を受けた。Ｃａｎｄｉｎ（登録商標）抗原投与の２４時間後及び４８時間後に硬化及び紅斑を評価することに加えて、各被験体から３つの皮膚生検を得た。スクリーニング時（Ｃａｎｄｉｎ（登録商標）抗原投与の４８時間後）における非病変領域、スクリーニング時におけるＤＴＨ硬化の中心、及び反復抗原投与時（Ｃａｎｄｉｎ（登録商標）抗原投与の４８時間後、Ｈ１Ｌ２投与の９６時間後）におけるＤＴＨ硬化の中心から２ｍｍ又は３ｍｍのパンチ生検を採取した。前記生検からＲＮＡを抽出し、標識し、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ Ｕ１３３＿ｐｌｕｓ＿２．０全ゲノムヒトマイクロアレイにハイブリダイズさせた。データを分析して、Ｈ１Ｌ２投与によって調節されるＣａｎｄｉｎ（登録商標）ＤＴＨ抗原投与に応答して発現の変化する遺伝子を同定した。代謝障害において何らかの役割を有していることが既に同定されている炎症遺伝子をこのモデルで評価した。
【０１３３】
第２部には、３コホートの肥満男性ボランティアが含まれていた。開始用量は０．２５ｍｇ／ｋｇであり、最大用量３．０ｍｇ／ｋｇまで段階的に用量を増加させた。これは、１部の最も高い３用量を反映している。
【０１３４】
代謝疾患患者におけるＨ１Ｌ２の潜在的な有用性を鑑みて、この試験では、肥満被験体における代謝薬力学的エンドポイントに対するＨ１Ｌ２の効果についても調べた。この試験に含まれていた健康な肥満被験体は、インスリンレベルが上昇し、これは潜在的なインスリン抵抗性を示す。
【０１３５】
経口グルコース負荷試験（ＯＧＴＴ）を使用して、肥満被験体における様々な用量のＨ１Ｌ２の潜在的な代謝効果を評価した。７５ｇの経口グルコース負荷を摂取した後、インスリン分泌が急速に増加し（第１相応答）、次いで、ホルモンがより持続的に放出された（第２相）。この分泌過程中に、インスリン前駆体分子であるプロインスリンからＣペプチド、すなわち結合ペプチドが分離され、等モル量のインスリンが生成される。血流中において、Ｃペプチドは、インスリンと異なり肝クリアランスに供されないので、長い半減期を有する。ＯＧＴＴ中のＣペプチド及びインスリン動態データをモデル化することにより、インスリン分泌の第１相及び第２相が導き出され得るように、１８０分間かけて血液サンプルを回収した。更に、摂取されたグルコースの出現及び消失速度からインスリン感受性を計算した。
【０１３６】
結果
ＤＴＨを抗原投与された皮膚は、ＩＬ６発現が１１３倍（Ｐ＜０．０００１）増加した（１ｍｇ／ｋｇのコホートでは１２３倍増加（Ｐ＜０．０００１）し、３ｍｇ／ｋｇのコホートでは１０１倍増加（Ｐ＜０．０００１）した）。反復抗原投与前にＨ１Ｌ２ ３ｍｇ／ｋｇで処理すると、ＩＬ−６の発現が３．４倍（Ｐ＜０．０００１）減少した。これは、プラセボよりも１．８倍大きな減少（Ｐ＝０．０５５）であった。この効果は、Ｈ１Ｌ２ １ｍｇ／ｋｇの処理では有意ではなかった（１．６倍減少、Ｐ＝０．０９８）。
【０１３７】
更に、ＳＯＣＳ３及びＳＴＡＴ３は、それぞれ、ＤＴＨにより有意な（Ｐ＜０．０００１）１４倍及び６倍の発現増加を示した。ＳＯＣＳ３のＤＴＨ誘導性発現は、Ｈ１Ｌ２ ３ｍｇ／ｋｇの処理により１．９倍減少した。これは、プラセボよりも１．４倍大きな減少（Ｐ＜０．０５）であった。ＳＴＡＴ３のＤＴＨ誘導性発現は、Ｈ１Ｌ２ ３ｍｇ／ｋｇの処理により１．３倍減少し（Ｐ＜０．０１）た。これは、プラセボよりも１．４倍大きな減少（Ｐ＜０．０１）であった。これら効果は、１ｍｇ／ｋｇのＨ１Ｌ２による処理ではみられなかった。
【０１３８】
更に、ＬＥＰＲは、ＤＴＨ抗原投与により５倍の発現減少（Ｐ＜０．０００１）を示した。ＤＴＨによるＬＥＰＲの減少は、Ｈ１Ｌ２ ３ｍｇ／ｋｇを用いて１．５倍（Ｐ＜０．０１）減少した。これは、プラセボよりも１．４倍大きな減少（Ｐ＝０．０８４）であった。
【０１３９】
予備分析は、Ｈ１Ｌ２も肥満被験体のＯＧＴＴにおいてグルコースレベルを減少させることを示し、これら効果は、正常値の上限を上回るグルコースレベルを有する被験体においてより顕著に現れ、これは、Ｈ１Ｌ２が、Ｔ２ＤＭ患者等のより重篤な集団においてより大きな効果を示し得ることを示唆する。また、インスリンの効果が患者のこのサブセットのグルコースレベルにおいて観察されるものを反映しているというエビデンスが存在していた。
【０１４０】
結論
これらデータは、Ｈ１Ｌ２が細胞媒介性炎症のインビボモデルにおいて、ＩＬ６、ＳＴＡＴ３、ＳＯＣＳ３及びＬＥＰＲの発現の変化を減少させ得ることを示す。更に、前記データは、Ｈ１Ｌ２がグルコース及びインスリンレベルを含む様々な代謝パラメータを調節することを示す。したがって、抗ＩＬ１８アンタゴニスト、特に抗体Ｈ１Ｌ２は、代謝障害の治療において有望である。
【表３】
【０１４１】
配列
配列番号１（ＣＤＲＨ１）
ＧＹＹＦＨ
配列番号２（ＣＤＲＨ２）
ＲＩＤＰＥＤＤＳＴＫＹＡＥＲＦＫＤ
配列番号３（ＣＤＲＨ３）
ＷＲＩＹＲＤＳＳＧＲＰＦＹＶＭＤＡ
配列番号４（ＣＤＲＬ１）
ＬＡＳＥＤＩＹＴＹＬＴ
配列番号５（ＣＤＲＬ２）
ＧＡＮＫＬＱＤ
配列番号６（ＣＤＲＬ３）
ＬＱＧＳＫＦＰＬＴ
【０１４２】
配列番号７（Ｈ１）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＶＳＧＥＩＳＴＧＹＹＦＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＭＧＲＩＤＰＥＤＤＳＴＫＹＡＥＲＦＫＤＲＶＴＭＴＥＤＴＳＴＤＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＴＷＲＩＹＲＤＳＳＧＲＰＦＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
【０１４３】
配列番号８（Ｈ２）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＶＳＧＥＩＳＴＧＹＹＦＨＷＶＲＲＲＰＧＫＧＬＥＷＭＧＲＩＤＰＥＤＤＳＴＫＹＡＥＲＦＫＤＲＶＴＭＴＥＤＴＳＴＤＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＴＷＲＩＹＲＤＳＳＧＲＰＦＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
【０１４４】
配列番号９（Ｈ３）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＶＳＧＥＩＳＴＧＹＹＦＨＦＶＲＲＲＰＧＫＧＬＥＷＭＧＲＩＤＰＥＤＤＳＴＫＹＡＥＲＦＫＤＲＶＴＭＴＡＤＴＳＴＤＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＴＹＦＣＴＴＷＲＩＹＲＤＳＳＧＲＰＦＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
【０１４５】
配列番号１０（Ｌ１）
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＶＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＬＡＳＥＤＩＹＴＹＬＴＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＧＡＮＫＬＱＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＬＱＧＳＫＦＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
【０１４６】
配列番号１１（Ｌ２）
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＶＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＬＡＳＥＤＩＹＴＹＬＴＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＧＡＮＫＬＱＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＬＱＧＳＫＦＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
【０１４７】
配列番号１２（Ｌ３）
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＶＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＬＡＳＥＤＩＹＴＹＬＴＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＱＬＬＩＹＧＡＮＫＬＱＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＥＧＤＹＹＣＬＱＧＳＫＦＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
【０１４８】
配列番号１３（ＩＬ−１８）
ＭＡＡＥＰＶＥＤＮＣＩＮＦＶＡＭＫＦＩＤＮＴＬＹＦＩＡＥＤＤＥＮＬＥＳＤＹＦＧＫＬＥＳＫＬＳＶＩＲＮＬＮＤＱＶＬＦＩＤＱＧＮＲＰＬＦＥＤＭＴＤＳＤＣＲＤＮＡＰＲＴＩＦＩＩＳＭＹＫＤＳＱＰＲＧＭＡＶＴＩＳＶＫＣＥＫＩＳＴＬＳＣＥＮＫＩＩＳＦＫＥＭＮＰＰＤＮＩＫＤＴＫＳＤＩＩＦＦＱＲＳＶＰＧＨＤＮＫＭＱＦＥＳＳＳＹＥＧＹＦＬＡＣＥＫＥＲＤＬＦＫＬＩＬＫＫＥＤＥＬＧＤＲＳＩＭＦＴＶＱＮＥＤ
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＩＩ型糖尿病及び肥満を含む代謝の障害の分野に関する。具体的には、本発明は、ＩＬ−１８アンタゴニスト、特に抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質、特に抗ＩＬ−１８抗体を用いて代謝障害を治療及び／又は予防する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
インターロイキン−１８（ＩＬ−１８）は、ＩＬ−１サイトカインファミリーのメンバーである。ＩＬ１８は、多様な範囲の免疫担当細胞及び間葉系細胞に対して強力な作用を有する多面発現性のサイトカインである（Ｎａｋａｎｉｓｈｅら（２００１年）Ａｎｎ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９：４２３−４２７）。ＩＬ−１８の最も特徴的な生物学的機能は、微生物病原体に対する宿主防御における役割である。ＩＬ−１８は、Ｔｈ１及びＮＫ細胞の活性化及び分化、炎症促進性サイトカインＩＦＮ−γの産生（Ｄｉｎａｒｅｌｌｏ及びＢｏｒａｓｃｈｉ（２００６年）Ｅｕｒ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｎｅｔｗ １７：２２４−５２）、Ｆａｓ及びＦａｓリガンド（ＦａｓＬ）のアップレギュレート、並びに他の炎症促進性メディエーターの増強を通じてウイルス及び他の細胞内病原体に対する先天性免疫及び後天性免疫の両方を刺激する。更に、ＩＬ−１８は、ヒト微小血管内皮細胞の遊走及び管形成についての強力な走化刺激であることが示唆されており（Ｐａｒｋら（２００１年）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６７：１６４４−１６４８）、そして、直接、又は酸化ストレス経路及びマトリックス金属結合タンパク質を通して、内皮機能を変化させるか、あるいは血管平滑筋細胞の遊走及び／又は増殖を誘導することができる。
【０００３】
長さ１９３アミノ酸残基のＩＬ−１８の天然細胞前駆体であるＰｒｏ−ＩＬ−１８は、カスパーゼ−１又はプロテイナーゼ−３によって切断されて、長さ１５６アミノ酸残基の生物学的に活性を有する成熟した１８ｋＤａのタンパク質を生成する（Ｇｈａｙｕｒら（１９９７年）Ｎａｔｕｒｅ ３８６：６１９及びＧｕら（１９９７年）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７５：２０６−２０８）。成熟したＩＬ−１８は、ＩＬ−１８Ｒαサブユニットに結合して、細胞表面上のＩＬ−１８Ｒβを動員する。ＩＬ−１８と異種二量体細胞表面受容体との間の相互作用は、ＴＬＲ及びＩＬ−１受容体等の他のＩＬ−１Ｒファミリーのメンバーと共有されているシグナル伝達経路を誘導する（Ｋａｔｏら（２００３年）Ｎａｔ Ｓｔｒｕｃｔ Ｂｉｏｌ １０：９６６）。ＩＬ−１８は、マクロファージ、樹状細胞、破骨細胞、滑膜線維芽細胞、脂肪細胞及び上皮細胞で発現する。一方、ＩＬ−１８Ｒ受容体は、マクロファージ、リンパ球、好中球、ナチュラルキラー細胞、内皮、上皮及び平滑筋細胞で主に発現する（Ｇｒａｃｉｅ，ら（２００３年）Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ ７３：２１３；Ｎａｋａｎｉｓｈｅら（２００１年）Ａｎｎ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９：４２３−４２７）。インビボにおいて、ＩＬ−１８Ｒ複合体に対するＩＬ−１８の結合は、ＩＬ−１８結合タンパク質（ＩＬ−１８ＢＰ）により調節される。ＩＬ−１８ＢＰは、構成的に発現し、ＩＬ−１８機能の天然阻害剤として作用する。
【０００４】
自己免疫疾患の発現におけるＩＬ−１８の役割についての仮定は、以下の所見によって支持される。ＩＬ−１８は、様々な自己免疫疾患に関連する様々な標的組織で増加し、成人スチル病（ＡＯＳＤ）（血漿及び肝臓）（Ｋａｗａｓｈｉｍａら（２００１年）Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ ４４：５５０−５６０）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）（血漿及び様々な組織）、関節リウマチ（ＲＡ）（血漿及び滑膜）（Ｔａｎａｋａら（２００４年）Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ７４：１６７１−１６７４）、クローン病（血漿及び腸上皮）（Ｐｉｚａｒｒｏら（１９９９年）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６２：６８２９−６８３５）及び乾癬（血漿及び皮膚）（Ｏｈｔａら（２００１年）２９３：３３４−３４２）で最も顕著である。
【０００５】
より最近では、末梢におけるＩＬ−１８レベルが体重及びインスリン抵抗性と相関しており、ＩＬ−１８は、２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）への進行を予測する能力を有することも見出されている（Ｍｕｒｄｏｌｏら（２００８年）Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ Ｍｅｔａｂ ２９５：Ｅ１０９５−Ｅ１１０５；Ｆｉｓｃｈｅｒａら（２００５年）Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １１７：１５２−１６０）。更に、ＩＬ−１８の血中濃度は、肥満及びＴ２ＤＭの多くの共存症の原因として関与していると考えられる。具体的には、ＩＬ−１８の血漿濃度が内膜中膜肥厚と相関し、Ｔ２ＤＭ患者における将来の心血管系イベントを予測することが示されている［Ｙａｍａｇａｍｉら（２００５年）Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ Ｔｈｒｏｍｂ Ｖａｓｃ Ｂｉｏｌ．２５：１４５８−１４６２］。
【０００６】
Ｔ２ＤＭは、例えば、細胞がインスリンに対して適切に応答しない、肝臓のグルコース産生の増加、及びインスリン分泌の減少等の末梢インスリン抵抗性を特徴とする。Ｔ２ＤＭの罹患率は、食習慣の変化（肥満率の上昇）並びにライフスタイルの変化（あまり体を動かさなくなった）ことにより近年著しく上昇しており、流行の域に達している。Ｔ２ＤＭの一次治療は、食事制限、体重管理、及び運動量を増やすことである。しかし、これらのアプローチを用いても血中グルコースレベルを下げることができない場合、患者にメトホルミン等の血糖降下薬を処方したり、インスリン注射が必要になったりする場合もある。Ｔ２ＤＭを制御するために多くの他の治療が用いられており、例えば、ロシグリタゾン等のＰＰＡＲガンマアゴニスト、ＧＬＰ１受容体アゴニスト（例えば、エクセナチド（Ｂｙｅｔｔａ（商標））、リラグルチド（Ｖｉｃｔｏｚａ（商標））及びＰＹＹ受容体アゴニストが挙げられる。
【０００７】
単独であっても又は組合せであっても、市販されているものであっても開発中のものであっても、プラセボと比較して１０％超体重を減少させる抗肥満剤は存在しない。更に、多くの市販薬は、悪心及び嘔吐等の重大な耐容性の問題を抱えている。開発中の小分子及び生物製剤の数は増加している。特に注目すべきことに、フェンテルミンとトピラメートとの組合せであるＱｎｅｘａ（商標）は、プラセボ対照ＰｈＩＩＩ試験において１．６％（４ｌｂ）に対して１１％の体重減少を示したが、依然として著しい副作用を伴っていた。更に、ペプチドの組合せ（グルカゴン／ＧＬＰ−１コアゴニスト、及びＧＬＰ−１／オキシントモジュリンコアゴニスト：Ｍｅｒｃｋ）は、現在、前臨床試験中であり、両方とも有意な体重減少を示すが、依然として副作用を伴う場合がある。
【０００８】
Ｔ２ＤＭとは対照的に、１型糖尿病（Ｔ１ＤＭ）は糖尿病患者の５〜１０％が罹患しており、膵臓のランゲルハンス島におけるβ−細胞が喪失した結果身体がインスリンを産生できなくなることに起因する。Ｔ１ＤＭの患者は、インスリン注射の形態の治療を必要とする。
【０００９】
糖尿病の分野におけるＩＬ−１８アンタゴニストに関する研究は、１型（自己免疫）糖尿病に集中している。例えば、拮抗性のＩＬ−１８結合タンパク質（ＩＬ−１８ＢＰ）は、若年マウスに予防的に投与されたとき、Ｔ１ＤＭの非肥満マウス（ＮＯＤ）モデルにおいて糖尿病の進行を軽減することが示されている。著者らは、β−細胞のアポトーシスに対してＩＬ−１８ＢＰが保護効果を有する可能性について想定している（Ｚａｃｃｏｎｅａ及びＰｈｉｌｌｉｐｓ（２００５年）Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １１５：７４−７９）。更に、ＩＬ−１８ＢＰは、エキソビボのβ−細胞破壊アッセイにおいて、アポトーシスからβ−細胞を保護することが示されている（Ｌｅｗｉｓ及びＤｉｎａｒｅｌｌｏ（２００６年）ＰＮＡＳ １０３：１６８５２−１６８５７）。
【００１０】
ＩＬ−１８は、血清及び末梢組織において著しく増加しており、且つ高脂肪食を与えた肥満マウス（Ｔ２ＤＭモデル）におけるインスリン抵抗性（ＩＲ）の発生と相関していることが示されているが、公開されている文献中にこれらモデルにおけるＩＬ−１８アンタゴニストの影響に関する研究のエビデンスは全く存在しない。
【００１１】
ＩＬ−１８ノックアウトマウスについての研究が行われている。ＩＬ−１８ノックアウトマウスは、食欲が過剰であるので、肥満及びインスリン抵抗性になる。最近のＩＬ−１８ノックアウトマウスの代謝に関する分析では、マウスＩＬ−１８を頭蓋内に投与することによるＩＬ−１８ノックアウトマウスの再構成により、正常な摂食挙動が回復し、次いで、体重が減少し、正常な血糖コントロールが行われるようになることが示されているが、マウスＩＬ−１８を静脈内（ＩＶ）／腹腔内（ＩＰ）に投与してもが認識可能な効果は得られなかった。このデータに照らして、満腹応答の促進におけるＩＬ−１８の作用に関して、直接又は間接的に、標的器官として視床下部が関与する摂食挙動の調節にＩＬ−１８が中心的な役割を果たしていることが示唆されている（Ｚｏｒｉｌｌａら（２００７年）ＰＮＡＳ １０４：１１０９７−１１１０２及びＮａｔｅａ及びＪｏｏｓｔｅｎ（２００６年）Ｎａｔ Ｍｅｄ １２：６５０−６５６）。肥満及びインスリン抵抗性が、これらマウスの摂食亢進の誘導から生じる副次的作用であることが提唱されている。
【００１２】
ＩＬ−１８ノックアウトマウスにおける知見は、ＩＬ−１８レベルの上昇をヒト代謝疾患の重篤度の上昇と関連づけるデータとは逆説的であるので、ヒトにおけるＩＬ−１８の発現増加は代謝疾患の原因ではなく、代償性反応である可能性を示唆することができる。
【００１３】
したがって、ＩＬ−１８の正確な役割、特に代謝疾患に関する役割は、全く明らかになっておらず、代謝疾患のモデル又は病院においてＩＬ−１８についての因果関係は確立されていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】Ｎａｋａｎｉｓｈｅら（２００１年）Ａｎｎ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９：４２３−４２７）
【非特許文献２】Ｄｉｎａｒｅｌｌｏ及びＢｏｒａｓｃｈｉ（２００６年）Ｅｕｒ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｎｅｔｗ １７：２２４−５２
【非特許文献３】Ｐａｒｋら（２００１年）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６７：１６４４−１６４８
【非特許文献４】Ｇｈａｙｕｒら（１９９７年）Ｎａｔｕｒｅ ３８６：６１９
【非特許文献５】Ｇｕら（１９９７年）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７５：２０６−２０８
【非特許文献６】Ｋａｔｏら（２００３年）Ｎａｔ Ｓｔｒｕｃｔ Ｂｉｏｌ １０：９６６
【非特許文献７】Ｇｒａｃｉｅ，ら（２００３年）Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ ７３：２１３
【非特許文献８】Ｋａｗａｓｈｉｍａら（２００１年）Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ ４４：５５０−５６０
【非特許文献９】Ｔａｎａｋａら（２００４年）Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ７４：１６７１−１６７４
【非特許文献１０】Ｐｉｚａｒｒｏら（１９９９年）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６２：６８２９−６８３５
【非特許文献１１】Ｏｈｔａら（２００１年）２９３：３３４−３４２
【非特許文献１２】Ｍｕｒｄｏｌｏら（２００８年）Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ Ｍｅｔａｂ ２９５：Ｅ１０９５−Ｅ１１０５
【非特許文献１３】Ｆｉｓｃｈｅｒａら（２００５年）Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １１７：１５２−１６０
【非特許文献１４】Ｙａｍａｇａｍｉら（２００５年）Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ Ｔｈｒｏｍｂ Ｖａｓｃ Ｂｉｏｌ．２５：１４５８−１４６２
【非特許文献１５】Ｚａｃｃｏｎｅａ及びＰｈｉｌｌｉｐｓ（２００５年）Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １１５：７４−７９
【非特許文献１６】Ｌｅｗｉｓ及びＤｉｎａｒｅｌｌｏ（２００６年）ＰＮＡＳ １０３：１６８５２−１６８５７
【非特許文献１７】Ｚｏｒｉｌｌａら（２００７年）ＰＮＡＳ １０４：１１０９７−１１１０２
【非特許文献１８】Ｎａｔｅａ及びＪｏｏｓｔｅｎ（２００６年）Ｎａｔ Ｍｅｄ １２：６５０−６５６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
これら障害の罹患率を鑑みて、Ｔ２ＤＭ、肥満に関連するＴ２ＤＭ、及び肥満等の代謝疾患の安全且つ改善された治療法及び予防措置が必要とされている。Ｔ２ＤＭに対して有効な薬理学的介入はほとんど存在せず、大部分は、有効性が乏しく且つ重大な耐容性の問題を伴っている。更に、一旦治療を中止すると体重は典型的に再度増加し、多くの場合、既存の治療はβ−細胞の機能低下を防ぐことができず、最終的にはＴ２ＤＭからＴ１ＤＭに切り替わると共にβ−細胞が破壊される。
【００１６】
本発明の目的は、代謝疾患の新規且つ改善された治療法、特に、β−細胞の機能を失わせることなく体重を減少させ、血糖コントロールを改善し、インスリン感受性を高め、結果として疾患の進行を遅らせるＴ２ＤＭの新規治療法を提供することである。本発明の更なる目的は、心臓血管の健康等の他のＴ２ＤＭ共存症を改善することである。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明は、第１の態様では、患者における代謝障害の治療若しくは予防及び／又は患者における血糖コントロールの改善において使用するためのＩＬ１８アンタゴニストを提供する。
【００１８】
本発明は、第２の態様では、治療上有効な量のＩＬ−１８アンタゴニストを代謝障害に罹患している患者に投与することにより、前記患者を治療する方法を提供する。
【００１９】
本発明は、第３の態様では、予防上有効な量のＩＬ−１８アンタゴニストを代謝障害に罹患しやすい患者に投与することにより、このような患者において代謝障害を予防する方法を提供する。
【００２０】
本発明は、第４の態様では、治療上有効な量のＩＬ−１８アンタゴニストを患者に投与することにより、前記患者の血糖コントロールを改善する方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】図１は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＩＬ−６の強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図２】図２は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＪＡＫ２の強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図３】図３は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＳＯＣＳ３の強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図４】図４は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＳＴＡＴ３の強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図５】図５は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＭＣＰ−１（ＣＣＬ２）の強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図６】図６は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＭＣＰ−４（ＣＣＬ１３）の強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図７】図７は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＩＲＳ２の強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図８】図８は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＰＰＡＲガンマの強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図９】図９は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＬＥＰの強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【図１０】図１０は、Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ（抗ＲＳＶ）ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬのいずれかで処理された１０人の健常ドナーから採取したエキソビボ全血サンプルにおけるＬＥＰＲの強度値（対数目盛）を示す。ドナー毎にデータ点に濃淡をつける。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
本発明者らは、インスリン抵抗性が炎症性障害であり、且つ免疫系の細胞並びに脂肪組織により合成される炎症性メディエーターがインスリンの調節に関与していると仮定した。本発明者らは、栄養過剰及び肥満が慢性低炎症性状態を導き、これが、炎症マーカーの発現を増加させ、次いで、脂肪組織へのマクロファージの浸潤を増加させる結果となると仮定した。これらマクロファージは、脂肪細胞におけるインスリンシグナル伝達を低下させ、次いで、脂肪分解を増加させ、そして脂肪酸を血液中に放出させる炎症促進性サイトカインを分泌する。脂肪酸は、肝臓及び骨格筋をインスリン抵抗性にし、糖尿病の発現を導く前糖尿病状態の一因となる。
【００２３】
驚くべきことに、本発明者らは、ＩＬ−１８がヒトの血液中のインターロイキン−６（ＩＬ−６）及びその重要なシグナル伝達分子（例えば、ヤヌスキナーゼ２、ＪＡＫ２）の発現を誘導し、本発明のＩＬ１８アンタゴニスト、すなわちＨ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）によりこれら作用を中和し得ることを見出した。
【００２４】
ＩＬ−６は、慢性炎症の重要なメディエーターであり、肥満、インスリン抵抗性及びＴ２ＤＭに関与している。脂肪組織は、血中ＩＬ−６レベルの最高３５％を産生し得る。慢性的に低レベルのＩＬ−６発現の全身的作用は、シグナル伝達性転写因子３（ＳＴＡＴ３）及びサイトカインシグナル抑制因子３（ＳＯＣＳ３）の発現を通してインスリンの機能を阻害することができる。ＪＡＫ２及びＳＴＡＴ３は、ＳＯＣＳ３の発現を増加させ、これにより、インスリン受容体基質（ＩＲＳ；ＩＬ−１８によっても減少する）によるインスリン受容体（ＩＲ）の活性化を防いで、筋肉及び脂肪による血中グルコースの取り込みを減少させ、そして、グリコーゲンの利用能を低下させることができる（Ｋｉｍら（２００９年）Ｖｉｔａｍｉｎｓ ａｎｄ Ｈｏｒｍｏｎｅｓ ８０：６１３−６３３）。
【００２５】
したがって、本発明者らの所見は、ＩＬ−１８アンタゴニストが、健常個体における正常なレベル又は発現に比べてＩＬ−６レベル又はＩＬ−６発現が増加している障害、例えば、Ｔ２ＤＭ、肥満Ｔ２ＤＭ、及び肥満等の代謝障害の有用な治療法であり得ることを初めて示唆するものである。
【００２６】
更に、本発明者らは、ＩＬ−１８アンタゴニストが単球化学誘引性タンパク質（ＭＣＰ−１及びＭＣＰ−４）を含む他の重要な炎症メディエーターをダウンレギュレートすることを示した。これら走化性タンパク質は、遺伝学的に肥満のマウス及び高脂肪食によって肥満が誘導された健常マウスにおいて増加する。肥満被験体の脂肪組織において低度の炎症反応（マクロファージ浸潤）が誘導されることにより、ＭＣＰ−１及びＭＣＰ−４が肥満及びインスリン抵抗性と関連することが示唆されている。
【００２７】
更に、本発明者らは、ＩＬ−１８がヒト血液におけるＩＲＳ２の発現を減少させ、これら作用が、本発明のＩＬ１８アンタゴニスト、すなわちＨ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）により中和され得ることを見出した。
【００２８】
インスリンシグナル伝達は、インスリン受容体基質ＩＲＳ１−４のチロシンリン酸化による対抗制御的なシグナル伝達と協調し、ＩＲＳ−２が栄養素のホメオスタシスにおいて特に重要である。ＩＲＳ−２は、インスリンの代謝及び成長を促進する効果の主なエフェクターであり、膵臓のβ細胞の機能及び生存、並びに主要な栄養感知を促進する（Ｄｏｎｇら，（２００６年）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１１６（１）：１０１−１０４）。マウスにおけるＩＲＳ−２のコンディショナルノックアウトは、食欲、除脂肪体重及び脂肪体重、並びに線形成長が増加し、最終的に糖尿病に進行する。更に、ＩＲＳ−２ノックダウンでは、空腹時高血糖及び空腹時高インスリン、インスリン抵抗性、耐糖能異常、異脂肪血症、及びメタボリック症候群に一致する他の特徴が生じる（Ｔａｎｉｇｕｃｈｉら，（２００５年）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１５（３）：７１８−７２７）。これらデータは、（エキソビボ血液アッセイにより支持される通り、ＩＬ−１８の増加による）ＩＲＳ−２のダウンレギュレートが、ヒトにおける肥満の発現、及びそれに続くＴ２ＤＭへの進行において重要な役割を果たしている可能性があることを示唆する。抗ＩＬ−１８アンタゴニストによりＩＬ−１８の作用をブロックすると、ＩＲＳ−２機能不全を逆行させることができる。
【００２９】
また、発明者らは、抗ＩＬ−１８アンタゴニストが、脂肪組織で高度に発現するオーファン受容体であるＰＰＡＲガンマをアップレギュレートすることを示した。ロシグリタゾン等のＰＰＡＲガンマアゴニストは、インスリン感受性を改善することが示されているので、Ｔ２ＤＭの治療において使用されている。
【００３０】
また、発明者らは、抗ＩＬ−１８アンタゴニストがレプチン及びレプチン受容体をアップレギュレートすることも示した。食欲抑制ホルモンであるレプチン及びレプチン受容体が低レベルであることと肥満とは、多くの証拠により関連づけられている。レプチン抵抗性が肥満を生じさせる可能性があることが示唆されているので、レプチンは、肥満の治療において使用されている。レプチン及びその受容体のアップレギュレートは、肥満被験体及びＴ２ＤＭ患者における食欲抑制、及びそれに続く体重減少における抗ＩＬ−１８アンタゴニストの役割を補助する。
【００３１】
また、驚くべきことに、本発明者らは、ヒト患者におけるＩＬ−１８レベルと血漿グルコースレベルの上昇とが関連していることが示された。したがって、ＩＬ−１８アンタゴニストは、健常個体における正常レベルと比較して血漿グルコースが増加している障害、例えば、Ｔ２ＤＭ、肥満Ｔ２ＤＭ、及び肥満等の代謝障害の有用な治療であり得る。
【００３２】
実際、本発明者らは、肥満ではあるが、他の点では健康なヒトにおけるグルコース及びインスリンを含む様々な代謝パラメータをＨ１Ｌ２が調節していることを別々の研究で示した。
【００３３】
本発明者らの所見に照らして、本発明者らは、肥満及び／又は糖尿病のヒト患者における末梢のＩＬ−１８の機能をブロックし、次いで、低度の炎症を防ぐことにより、血清及び血漿グルコースレベルが低下し、インスリン抵抗性が弱まると予測する。末梢におけるＩＬ−１８作用をブロックすることによって、体重及び脂肪過多に影響を与えることができるはずである。これは、β−細胞の機能に有害な影響を与えることなく、体重に影響を与え且つ血糖コントロールを改善する可能性がある。実際、ＩＬ−１８アンタゴニストは、アポトーシスを減少させることによりβ−細胞の機能に対して直接的保護効果を発揮し得る。更に、心臓血管の共存症に対する好ましい影響も想定される。
【００３４】
本明細書全体にわたって用いられる「血糖コントロール」とは、健常個体でみられる血中グルコースの正常レベルと比較した、糖尿病患者における血中グルコースの典型的なレベル、及び前記患者がこれらレベルを制御する能力を指す。血糖コントロールが乏しいとは、血中グルコースが持続的に正常レベルを上回る高いレベルであることを指し、完全な血糖コントロールとは、血中グルコースレベルが常に正常範囲内であることを指す。
【００３５】
本明細書で使用する「ＩＬ−１８アンタゴニスト」は、ＩＬ−１８の生物活性をある程度阻害又は拮抗する剤である。ＩＬ−１８アンタゴニストとしては、体内から単離された又は組換え技術により作製された（例えば、Ｔａｄｅｋｉｎｉｇ−α（登録商標））内因性ＩＬ−１８結合タンパク質（ＩＬ−１８ＢＰ）等のＩＬ−１８に結合する剤、並びにＩＬ−１８ＢＰ−Ｆｃ融合タンパク質、又はＩＬ−１８の受容体に結合してＩＬ−１８がその生物活性を発揮するのを妨げるアンタゴニストが挙げられる。具体的には、ＩＬ−１８アンタゴニストは、ＩＬ−１８に対して免疫特異的であり且つＩＬ−１８の活性に拮抗する抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質、例えば抗体であると想定される。ＩＬ−１８アンタゴニストの非限定的な例としては、欧州特許第０７１２９３１号明細書、Ｈ１８−１０８（Ｈａｍａｓａｋｉら、２００５）に記載されているＨ１及びＨ２、並びに国際公開第０１／５８９５６号パンフレット、国際公開第２００５／０４７３０７号パンフレット、及び国際公開第２００７／１３７９８４号パンフレットに記載されている抗体が挙げられ、これらは全て参照することにより全体を本明細書に援用する。１つの実施形態では、ＩＬ−１８アンタゴニストは、例えば、単離された又は組み換え技術により作製されたＩＬ−１８ＢＰ、すなわちＩＬ−１８抗原結合タンパク質等のタンパク質である。更なる実施形態では、ＩＬ−１８アンタゴニストは、抗原結合タンパク質である。１つの実施形態では、ＩＬ−１８アンタゴニストは、新規化学物質（ＮＣＥ）ではない。特定の実施形態では、ＩＬ−１８抗原結合タンパク質は、本明細書に開示される抗体Ｈ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）又はその変異体である。
【００３６】
用語「抗ＩＬ−１８」は、それが本発明の抗原結合タンパク質を指すとき、このような抗体がヒトＩＬ−１８の生物活性を中和できることを意味する。しかし、それは、このような抗体が非ヒト霊長類（例えば、アカゲザル及び／又はカニクイザル）のＩＬ−１８及び／又は他の種に存在するＩＬ−１８の形態も更に中和し得ることを除外するものではない。
【００３７】
本明細書で使用する用語「抗体」は、最も広い意味で、免疫グロブリン様ドメインを有する分子を指し、例えば、モノクローナル抗体、組換え型抗体、ポリクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体及びヘテロコンジュゲート抗体；単一可変ドメイン、ドメイン抗体、抗原結合断片、免疫学的に有効な断片、単鎖Ｆｖ、ダイアボディ、Ｔａｎｄａｂｓ（商標）等が挙げられる（別の「抗体」フォーマットの概要については、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ及びＨｕｄｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００５年，２３巻，９号，１１２６−１１３６を参照されたい）。
【００３８】
語句「単一可変ドメイン」とは、異なる可変領域又はドメインとは独立に、抗原又はエピトープに特異的に結合する抗原結合タンパク質の可変ドメイン（例えば、ＶＨ、ＶＨＨ、ＶＬ）を指す。
【００３９】
「ドメイン抗体」又は「ｄＡｂ」は、抗原に結合することができる「単一可変ドメイン」と同一であると考えてよい。単一可変ドメインは、ヒト抗体可変ドメインであってもよいが、げっ歯類（例えば、国際公開第００／２９００４号パンフレットに開示されている）、テンジクザメ及びラクダ科のＶＨＨ ｄＡｂ等の他の種に由来する単一抗体可変ドメインも含む。ラクダ科のＶＨＨは、ラクダ、ラマ、アルパカ、ヒトコブラクダ及びグアナコを含む種に由来する免疫グロブリン単一可変ドメインポリペプチドであり、天然に軽鎖が欠けている重鎖抗体を産生する。このようなＶＨＨドメインは、当技術分野において利用可能な標準技術に従ってヒト化することができ、このようなドメインは「ドメイン抗体」であるとみなされる。本明細書で使用するＶＨとしては、ラクダ科のＶＨＨドメインが挙げられる。
【００４０】
本明細書で使用する用語「ドメイン」は、タンパク質の残りとは無関係な三次構造を有する折り畳みタンパク質構造を指す。一般的に、ドメインは、タンパク質の個別の機能特性に関与しており、多くの場合、タンパク質及び／又はドメインの残りの機能を失うことなく付加、除去、又は他のタンパク質に転移することができる。「単一可変ドメイン」は、抗体可変ドメインに特徴的な配列を含む折り畳みポリペプチドドメインである。したがって、ドメインは、完全な抗体可変ドメイン及び、例えば、抗体可変ドメインに特徴的ではない配列、あるいは切頭されているか又はＮ末端若しくはＣ末端に伸長を含む抗体可変ドメイン、並びに完全長ドメインの結合活性及び特異性を少なくとも保持する可変ドメインの折り畳み断片によって１以上のループが置換されている改変可変ドメインを含む。ドメインは、異なる可変領域又はドメインとは無関係に抗原又はエピトープに結合することができる。
【００４１】
抗原結合断片は、ドメイン等の非抗体タンパク質スカフォールドに１以上のＣＤＲを配置することにより提供することができる。ドメインはドメイン抗体であってもよく、ＣＴＬＡ−４、リポカリン、ＳｐＡ、アフィボディ、アヴィマー、ＧｒｏＥｌ、トランスフェリン、ＧｒｏＥＳ、及びフィブロネクチン／アドネクチンからなる群より選択されるスカフォールドの誘導体であるドメインであってもよく、これらは、天然リガンド以外のＩＬ−１８等の抗原に結合させるためにタンパク質工学に供されている。
【００４２】
抗原結合断片又は免疫学的に有効な断片は、部分的に重鎖又は軽鎖の可変配列を含み得る。断片の長さは、少なくとも５、６、７、８、９、又は１０アミノ酸である。あるいは、断片の長さは、少なくとも１５、少なくとも２０、少なくとも５０、少なくとも７５、又は少なくとも１００アミノ酸である。
【００４３】
抗原結合タンパク質に関連して用いる用語「特異的に結合する」は、抗原結合タンパク質が、他の（例えば、無関係の）タンパク質には全く又は殆ど結合しないがＩＬ−１８には結合することを意味する。
【００４４】
抗体に関連して用いられる用語「免疫特異的」とは、他のタンパク質には全く又は殆ど結合しないが、標的タンパク質（例えば、ヒトＩＬ−１８）には結合する抗体を意味する。しかし、この用語は、所与の種（例えばヒト）における標的タンパク質に対する抗体が、他の種（例えば、非ヒト霊長類）における標的タンパク質の他の形態と交差反応する可能性があるという事実を除外するものではない。
【００４５】
抗原結合タンパク質とＩＬ−１８との相互作用の平衡解離定数（ＫＤ）は、１ｍＭ以下、１００ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、２ｎＭ以下、又は１ｎＭ以下であり得る。あるいは、ＫＤは、５〜１０ｎＭ；又は１〜２ｎＭであってもよい。ＫＤは、１ｐＭ〜５００ｐＭ；又は５００ｐＭ〜１ｎＭであってもよい。結合親和性は、ＢＩＡｃｏｒｅ（商標）により、例えば、一級アミンカップリングによってＣＭ５チップ上にカップリングされたＩＬ−１８を用いて抗原を捕捉し、この表面上に抗体を捕捉することにより測定できる。あるいは、結合親和性は、ＦＯＲＴＥｂｉｏにより、例えば、一級アミンカップリングによってＣＭ５針にカップリングされたＩＬ−１８を用いて抗原を捕捉し、この表面上に抗体を捕捉することにより測定できる。Ｈ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）は、高い親和性（ＫＤ＝３０．３ｐＭ）でヒトＩＬ−１８に結合する。特定の実施形態では、２５℃で測定したとき、本発明の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質及びヒトＩＬ−１８に関する平衡解離定数は、約３０ｐＭ、又は３０ｐＭ未満である。
【００４６】
本明細書で使用する用語「中和する」とは、インビトロ又はインビボにおいて、抗原結合タンパク質の非存在下におけるＩＬ−１８の活性と比較して、本明細書に記載する抗原結合タンパク質の存在下におけるＩＬ−１８の生物活性が低下することを意味する。中和は、ＩＬ−１８がＩＬ−１８受容体に結合するのをブロックする、循環からＩＬ−１８を取り除く、ＩＬ−１８又はＩＬ−１８受容体をダウンレギュレートする、又はエフェクター機能に影響を与えるのうちの１以上に起因し得る。
【００４７】
ＩＬ−１８活性は、エキソビボで刺激された全血におけるインターフェロン−γ（ＩＦＮ−γ）アッセイを用いて間接的に測定することができる。簡潔に述べると、血液３０ｍＬを収集して標準的なクエン酸塩又はヘパリン抗凝血剤に入れ、以下のプロトコールを使用する。治療剤約３μＬを６ウェルプレートのウェルに直接分注する（治療剤は、５０ｎｇ／ｍＬのＩＬ１８及び適切な対照を含むはずである）。各ウェルに全血３ｍＬを添加し、穏やかに振盪することにより混合する。１５分ごとにシェーカー上で穏やかに混合しながら、４時間ＣＯ２インキュベータ内で３７℃にてプレートをインキュベートする。インキュベートの最後に、２．５ｍＬの血液をＰＡＸ管に移し、前記ＰＡＸ管を８〜１０回反転させ、室温で２時間直立した状態で保存する。中期保存するために前記ＰＡＸ管を−２０℃に移す。ＩＦＮ−γレベルは、製造業者のガイドラインに従ってＴａｑＭａｎ又はＥＬＩＳＡ／ＭＳＤのいずれかを使用して測定することができる。
【００４８】
「キメラ抗体」は、アクセプター抗体由来の軽鎖及び重鎖定常領域に会合しているドナー抗体由来の天然に存在する可変領域（軽鎖及び重鎖）を含有する改変抗体の種類を指す。
【００４９】
「ヒト化抗体」は、非ヒトドナー免疫グロブリン由来のＣＤＲを有し、分子の残りの免疫グロブリン由来部分が１以上のヒト免疫グロブリンに由来する改変抗体の種類を指す。更に、フレームワークサポート残基は、結合親和性を保つように変化させることができる（例えば、Ｑｕｅｅｎら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，８６：１００２９−１００３２（１９８９年）、Ｈｏｄｇｓｏｎら，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，９：４２１（１９９１年）を参照されたい）。好適なヒトアクセプター抗体は、ドナー抗体のヌクレオチド及びアミノ酸の配列に対する相同性によって、従来のデータベース、例えば、ＫＡＢＡＴ（登録商標）データベース、Ｌｏｓ Ａｌａｍｏｓデータベース、及びＳｗｉｓｓ Ｐｒｏｔｅｉｎデータベースから選択される抗体であってもよい。（アミノ酸に基づいて）ドナー抗体のフレームワーク領域に対する相同性により特徴付けられるヒト化抗体は、重鎖定常領域及び／又はドナーＣＤＲを挿入するための重鎖可変フレームワーク領域を提供するのに好適であり得る。軽鎖の定常又は可変フレームワーク領域を供与することができる好適なアクセプター抗体は、同様の方法で選択することができる。アクセプター抗体の重鎖及び軽鎖は、同じアクセプター抗体を起源とする必要はないことに留意すべきである。先行技術には、このようなヒト化抗体を産生する幾つかの方法が記載されている。例えば、欧州特許出願公開第０２３９４００号明細書及び欧州特許出願公開第０５４９５１号明細書を参照されたい。１つの実施形態では、本発明の抗体は、ヒト化抗体である。
【００５０】
用語「ヒト抗体」は、ヒト免疫グロブリン遺伝子配列に由来する抗体を指す。これら完全ヒト抗体は、低免疫原性治療抗体の起源として再改変又は脱免疫されたげっ歯類モノクローナル抗体（例えば、ヒト化抗体）に代わるものを提供し、これらは、通常、ファージディスプレイ又はトランスジェニックマウスプラットフォームのいずれかを用いて作製される。１つの実施形態では、本発明の抗体はヒト抗体である。
【００５１】
用語「ＶＨ」及び「ＶＬ」は、それぞれ、抗原結合タンパク質の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を指すために本明細書で用いられる。
【００５２】
「ＣＤＲ」は、抗原結合タンパク質の相補性決定領域のアミノ酸配列として定義される。これらは、免疫グロブリンの重鎖及び軽鎖の超可変領域である。免疫グロブリンの可変部分には３つの重鎖ＣＤＲ及び３つの軽鎖ＣＤＲ（すなわち、ＣＤＲ領域）が存在する。したがって、本明細書で使用する「ＣＤＲ」は、３つの重鎖ＣＤＲ全て、３つの軽鎖ＣＤＲ全て、重鎖及び軽鎖のＣＤＲの全て、又は少なくとも２つのＣＤＲを指す。
【００５３】
本明細書全体にわたって、可変ドメイン配列及び完全長抗体配列におけるアミノ酸残基は、Ｋａｂａｔの番号付け規則に従って番号付けされる。また、本明細書に開示する特定の配列に関連する用語「ＣＤＲ」、「ＣＤＲＬ１」、「ＣＤＲＬ２」、「ＣＤＲＬ３」、「ＣＤＲＨ１」、「ＣＤＲＨ２」、「ＣＤＲＨ３」もＫａｂａｔの番号付け規則に従う。更なる情報については、Ｋａｂａｔら，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，第４版，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ（１９８７年）を参照されたい。
【００５４】
しかし、本明細書全体にわたって可変ドメイン配列及び完全長抗体配列におけるアミノ酸残基にはＫａｂａｔの番号付け規則が使用されるが、可変ドメイン配列及び完全長抗体配列におけるアミノ酸残基について別の番号付け規則が存在することが当業者には明らかであろう。また、例えば、Ｃｈｏｔｈｉａら．（１９８９年）Ｎａｔｕｒｅ ３４２：８７７−８８３に記載の通り、ＣＤＲ配列についての別の番号付け規則も存在する。抗体の構造及びタンパク質の折り畳みは、他の残基をＣＤＲ配列の一部とみなすことを意味する場合があり、当業者にはそのように理解される。
【００５５】
当業者が利用可能なＣＤＲ配列についての他の番号付け規則としては、「ＡｂＭ」法（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｂａｔｈ）及び「ｃｏｎｔａｃｔ」（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ Ｌｏｎｄｏｎ）法が挙げられる。少なくともＫａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ及びｃｏｎｔａｃｔ法のうちの少なくとも２つを用いる最小重複領域が、「最小結合単位」を提供すると定めることができる。最小結合単位は、ＣＤＲの一部であってもよい。
【００５６】
以下の表１は、各ＣＤＲ又は結合単位について各番号付け規則を用いた１つの定義を表す。可変ドメインのアミノ酸配列を番号付けするために表１ではＫａｂａｔの番号付けスキームを使用する。ＣＤＲの定義のうちの一部は、使用される個々の刊行物によって異なる場合があることに留意するべきである。
【表１】
【００５７】
１つの実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、配列番号７及び／又は配列番号１１内に含有されているＣＤＲを含む。１つの実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、以下のＣＤＲ又はその変異体のうちの任意の１以上を含む：ＣＤＲＨ１（配列番号１）、ＣＤＲＨ２（配列番号２）、ＣＤＲＨ３（配列番号３）、ＣＤＲＬ１（配列番号４）、ＣＤＲＬ２（配列番号５）、ＣＤＲＬ３（配列番号６）。１つの実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、ＣＤＲＨ１（配列番号１）、ＣＤＲＨ２（配列番号２）、ＣＤＲＨ３（配列番号３）、ＣＤＲＬ１（配列番号４）、ＣＤＲＬ２（配列番号５）、及びＣＤＲＬ３（配列番号６）を含む。
【００５８】
本明細書に記載するＣＤＲ又は変異体ＣＤＲのうちの１以上は、例えば、ヒト化又はキメラ可変ドメインとして、ヒトフレームワークの状況において存在してもよい。
【００５９】
「ＣＤＲ変異体」は、少なくとも１つのアミノ酸によって改変されたアミノ酸配列を含み、前記改変は、（例えば、１０以下のアミノ酸による）アミノ酸配列の化学的又は部分的変化であり得、この改変により、変異体が未改変配列の生物学的特徴を保持することが可能になる。例えば、前記変異体は、ＩＬ−１８に結合し、中和する機能的変異体である。ＣＤＲアミノ酸配列の部分的変化は、（例えば、１０以下のアミノ酸による）１つ〜幾つかのアミノ酸の欠失又は置換、あるいは１つ〜幾つかのアミノ酸の付加又は挿入、あるいはこれらの組合せによるものであり得る。ＣＤＲ変異体は、アミノ酸配列で、１、２、３、４、５又は６アミノ酸の置換、付加、又は欠失を任意の組合せで含有し得る。ＣＤＲ変異体又は結合単位変異体は、アミノ酸配列で、１、２、又は３アミノ酸の置換、挿入、付加、又は欠失を任意の組合せで含有し得る。アミノ酸残基における置換は、例えば、ある疎水性アミノ酸を別の疎水性アミノ酸に置換する保存的置換であってよい。例えば、ロイシンは、バリン又はイソロイシンで置換することができる。
【００６０】
１つの実施形態では、抗ＩＬ−１８抗体は、以下からなる群より選択される：Ｈ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）、ＡＢＴ−３２５（Ａｂｂｏｔｔ）及び１２５−２Ｈ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）。
【００６１】
ヌクレオチド及びアミノ酸配列について、用語「同一」又は、「配列同一性」は、最適に整列させ、適切に挿入又は欠失したものと比較したときの、２つの核酸又は２つのアミノ酸配列間の同一性の程度を示す。
【００６２】
２つの配列間の同一性パーセントは、２つの配列を最適に整列させるために導入する必要があるギャップの数及び各ギャップの長さを考慮して、配列が共有している同一位置の数の関数である（すなわち、同一性％＝同一位置の数／位置の総数×１００）。下記の通り、数学アルゴリズムを使用して、配列を比較し、２つの配列間の同一性パーセントを求めることができる。
【００６３】
２つのヌクレオチド配列間の同一性パーセントは、ＧＣＧソフトウェアパッケージにおけるＧＡＰプログラムを使用し、ＮＷＳｇａｐｄｎａ．ＣＭＰマトリックス、並びにギャップ重み付け（ｇａｐ ｗｅｉｇｈｔ）４０、５０、６０、７０、又は８０、及び長さ重み付け（ｌｅｎｇｔｈ ｗｅｉｇｈｔ）１、２、３、４、５、又は６を使用して求めることができる。２つのヌクレオチド又はアミノ酸の配列間の同一性パーセントは、ＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれたＥ．Ｍｅｙｅｒｓ及びＷ．Ｍｉｌｌｅｒ（Ｃｏｍｐｕｔ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．，４：１１−１７（１９８８年））のアルゴリズムを使用し、ＰＡＭ１２０重み付け残基表、ギャップ長ペナルティ１２及びギャップペナルティ４を用いて求めることもできる。更に、ＧＣＧソフトウェア・パッケージにおけるＧＡＰプログラムに組み込まれたＮｅｅｄｌｅｍａｎ及びＷｕｎｓｃｈ（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４４−４５３（１９７０年））のアルゴリズムを使用し、Ｂｌｏｓｓｕｍ ６２マトリックス又はＰＡＭ２５０マトリックスのいずれか、並びにギャップ重み付け１６、１４、１２、１０、８、６又は４、及び長さ重み付け１、２、３、４、５、又は６を使用して、２つのアミノ酸配列間の同一性パーセントを求めることができる。
【００６４】
ポリペプチド配列は、本明細書に記載するレファレンスポリペプチド配列（例えば、配列番号７を参照されたい）と同一である、すなわち、１００％同一であってもよく、同一性％が１００％未満、例えば少なくとも５０、６０、７０、７５、８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８又は９９％同一になるように、レファレンス配列と比べて特定の整数以下のアミノ酸の変化を含んでもよい。このような変化は、少なくとも１つのアミノ酸の欠失、保存的及び非保存的置換を含む置換、又は挿入からなる群より選択され、前記変化は、レファレンスポリペプチド配列のアミノ末端又はカルボキシ末端位置、又はこれら末端位置間のいずれの位置に生じてもよく、レファレンス配列中のアミノ酸の中に個々に点在してもよく、又はレファレンス配列内の１以上の連続する群に生じてもよい。所与の同一性％についてのアミノ酸の変化の数は、本明細書に記載するポリペプチドレファレンス配列（例えば、配列番号７を参照されたい）によりコードされるポリペプチド配列におけるアミノ酸の総数に、それぞれの同一性パーセントの数値的パーセント（１００で除された数）を乗じ、次いで、本明細書に記載するポリペプチドレファレンス配列（例えば、配列番号７を参照されたい）におけるアミノ酸の総数からその積を減じることにより求められる、すなわち：
ｎａ≦ｘａ−（ｘａ・ｙ）
（式中、ｎａ は、アミノ酸の変化の数であり、ｘａは、本明細書に記載するレファレンスポリペプチド配列（例えば、配列番号７を参照されたい）におけるアミノ酸の総数であり、ｙは、５０％の場合０．５０、６０％の場合０．６０、７０％の場合０．７０、７５％の場合０．７５、８０％の場合０．８０、８５％の場合０．８５、９０％の場合０．９０、９５％の場合０．９５、９８％の場合０．９８、９９％の場合０．９９、又は１００％の場合１．００であり、・は、乗算演算子の記号であり、ｘａ及びｙの積が任意の非整数である場合、ｘａからそれを減じる前に最も近い整数に切り捨てられる）。
【００６５】
同一性％は、配列の長さ全体にわたって求めることができる。
【００６６】
本発明の抗体重鎖は、配列番号７（重鎖Ｈ１）、配列番号８（重鎖Ｈ２）、又は配列番号９（重鎖Ｈ３）に対して７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有し得る。特定の実施形態では、本発明の抗体重鎖は、配列番号７（重鎖１）に対して７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有する。
【００６７】
本発明の抗体軽鎖は、配列番号１０（軽鎖Ｌ１）、配列番号１１（軽鎖Ｌ２）、又は配列番号１２（軽鎖Ｌ３）に対して７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有し得る。特定の実施形態では、本発明の抗体軽鎖は、配列番号１１（軽鎖Ｌ２）に対して７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有する。
【００６８】
本発明の抗体重鎖は、３０、２５、２０、１５、１０、９、８、７、６、５、４、３、２又は１アミノ酸の置換、挿入又は欠失を含有する配列番号７、配列番号８、又は配列番号９の変異体であってよい。１つの実施形態では、抗体重鎖は、配列番号７の変異体である。本発明の抗体軽鎖は、３０、２５、２０、１５、１０、９、８、７、６、５、４、３、２又は１アミノ酸の置換、挿入又は欠失を含有する配列番号１０、配列番号１１、又は配列番号１２の変異体であってよい。１つの実施形態では、抗体軽鎖は、配列番号１１の変異体である。
【００６９】
用語「ペプチド」、「ポリペプチド」及び「タンパク質」は、それぞれ、２以上のアミノ酸残基を含む分子を指す。ペプチドは、モノマーであってもポリマーであってもよい。
【００７０】
特定のアミノ酸置換を「保存的」であるとみなすことは、当技術分野において十分認識されている。アミノ酸は、共通の側鎖特性に基づいてグループ分けされ、抗原結合タンパク質の結合親和性の全て又は実質的に全てを維持するグループ内の置換は、保存的置換であるとみなされる。以下の表２を参照されたい。
【表２】
【００７１】
１つの実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、ＩＬ−１８に特異的に結合し、ＩＬ−１８を中和し、配列番号７の重鎖配列及び配列番号１１の軽鎖配列を含むレファレンス抗体（Ｈ１Ｌ２）のＩＬ−１８に対する結合と拮抗する。
【００７２】
抗原結合タンパク質とレファレンス抗体との間の競合は、競合ＥＬＩＳＡにより測定することができる。競合する抗原結合タンパク質はレファレンス抗体が結合するのと同じエピトープ、重複するエピトープ、又は前記エピトープに近接しているエピトープに結合し得る。
【００７３】
抗原結合タンパク質は、ラット、マウス、霊長類（例えば、カニクイザル、旧世界サル、又は類人猿）又はヒトに由来し得る。抗原結合タンパク質は、ヒト化抗体であっても、キメラ抗体であってよい。抗原結合タンパク質は、ヒト抗体であってもよい。
【００７４】
抗原結合タンパク質は、いずれのアイソタイプ又はサブクラスであってもよい定常領域を含み得る。定常領域は、ＩｇＧアイソタイプ、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、又はこれらの変異体の定常領域であってもよい。１つの実施形態では、抗原結合タンパク質の定常領域は、ＩｇＧ１である。
【００７５】
定常ドメイン領域を含む抗原結合タンパク質は、ＡＤＣＣ及び／又は補体活性化若しくはエフェクター機能を低下させることができる。定常ドメインは、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４アイソタイプの生来不能である定常領域、あるいは突然変異型ＩｇＧ１定常ドメインを含んでもよい。好適な改変の例は、欧州特許第０３０７４３４号明細書に記載されている。一例は、位置２３５及び２３７（ＥＵインデックスの番号付け）におけるアラニン残基の置換を含む。
【００７６】
抗原結合タンパク質は、抗体のエフェクター機能／ＡＤＣＣ及び／又は補体活性化が増強されるように、突然変異型定常領域から選択される１以上の改変を含んでもよい。好適な改変の例は、Ｓｈｉｅｌｄｓら．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ（２００１年）２７６：６５９１−６６０４，Ｌａｚａｒら．ＰＮＡＳ（２００６年）１０３：４００５−４０１０、及び米国特許第６７３７０５６号明細書、国際公開第２００４０６３３５１号パンフレット、及び国際公開第２００４０２９２０７号パンフレットに記載されている。
【００７７】
抗原結合タンパク質のエフェクター機能／ＡＤＣＣ及び／又は補体活性化が増強されるように、抗原結合タンパク質は、グリコシル化プロファイルの変化している定常領域を含んでもよい。グリコシル化プロファイルの変化している抗原結合タンパク質を作製するのに好適な方法の例は、国際公開第２００３／０１１８７８号パンフレット、国際公開第２００６／０１４６７９号パンフレット、及び欧州特許第１２２９１２５号明細書に記載されている。
【００７８】
本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニスト、例えば、抗原結合タンパク質の精製調製物を、本明細書に記載するヒトの疾患、障害、及び病状、特に代謝障害の治療において使用するための医薬組成物に配合してもよい。疾患、障害及び病状という用語は、互換的に使用される。
【００７９】
本発明のＩＬ１８アンタゴニスト、特に抗原結合タンパク質は、代謝障害を治療又は予防するために用いることができる。代謝障害を治療又は予防する薬剤の製造における本発明のＩＬ１８アンタゴニスト、特に抗原結合タンパク質の使用も提供される。
【００８０】
「代謝障害」は、炭水化物、アミノ酸、有機酸、脂肪酸、ミトコンドリア、ステロイドが挙げられるがこれらに限定されない身体中の物質代謝の不均衡により定義される任意の障害である。代謝障害としては、以下の非限定的な例が挙げられる：インスリン抵抗性、２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）、肥満、メタボリック症候群、異脂肪血症、急性膵炎、肝不全、Ｔ２ＤＭに関連する共存症（例えば、アテローム性動脈硬化、心血管疾患）。１つの実施形態では、代謝障害はＴ２ＤＭである。
【００８１】
１つの実施形態では、本発明のＩＬ１８アンタゴニストは、ヒト患者におけるグルコースレベルを低下させる。
【００８２】
本発明のＩＬ−１８アンタゴニストは、低血糖を引き起こすことなく（すなわち、血中グルコースが３ｍｍｏｌ／Ｌ未満になることなく）、末梢インスリン抵抗性を改善し、血糖コントロールを改善し（すなわち、空腹時血糖の標的幅を８．９ｍｍｏｌ／Ｌ未満、特に３．９〜７．２ｍｍｏｌ／Ｌで維持し）、β細胞を保護し、β細胞機能の喪失を防ぎ、膵臓の機能を改善し（セクレチンに対する膵臓の応答を測定することにより評価される）、（全身の代謝の改善を介して）体重を減少させ、心臓血管の健康を改善し（血漿トリグリセリド、脂質、ＣＲＰ、血圧、及びＢＭＩを測定することにより評価される）、及び／又は疾患の進行を遅らせる。
【００８３】
本発明の１つの実施形態では、エキソビボで刺激された健常ボランティアの血液において、ＩＬ−１８によって誘導されるＩＬ−６、ＳＴＡＴ３、ＳＯＣＳ３、ＪＡＫ２、ＭＣＰ−１（ＣＣＬ２）及びＭＣＰ−４（ＣＣＬ１３）のうちの任意の１以上又は全ての遺伝子発現の増加は、本発明のＩＬ−１８アンタゴニスト、例えば、Ｈ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）により回復する又は部分的に回復する。
【００８４】
本発明の１つの実施形態では、エキソビボで刺激された健常ボランティアの血液において、ＩＬ−１８によって誘導されるＩＲＳ２、ＰＰＡＲガンマ、レプチン及びレプチン受容体の遺伝子発現の減少は、本発明のＩＬ−１８アンタゴニスト、例えば、Ｈ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）により回復する又は部分的に回復する。
【００８５】
１つの実施形態では、本発明のＩＬ−１８アンタゴニストは、感知できる量が中枢神経系（ＣＮＳ）に達することはないが、その代わり、末梢で作用することによりその治療効果を発揮する。
【００８６】
医薬調製品は、薬学的に許容しうる担体と組み合わせて、本発明のＩＬ−１８アンタゴニスト、例えば抗原結合タンパク質を含み得る。ＩＬ−１８アンタゴニストは、単独で投与してもよく、医薬組成物の一部として投与してもよい。
【００８７】
典型的に、このような組成物は、公知であり且つ許容し得る薬務により要求される薬学的に許容し得る担体を含む。例えば、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１６版（１９８０年）Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．を参照されたい。このような担体の例としては、生理食塩水、リンゲル液、又はデキストロース溶液等の無菌担体が挙げられ、これら担体は、任意で好適なバッファによりｐＨ５〜８に緩衝される。
【００８８】
医薬組成物は、（例えば、静脈内、腹腔内、皮内、皮下、筋肉内、門脈内に）注射又は持続注入することにより投与することができる。このような組成物は、目に見える粉粒体を含まないことが好ましい。１つの実施形態では、本発明の医薬組成物は、皮下注射を介して投与される。更なる実施形態では、本発明の医薬組成物は、皮内に投与される。このような皮内投与は、パッチ技術（例えば、多数の極微針又は摩耗性表面）又は他の好適な手段を使用して、皮膚から約１５°の角度で挿入される１本の針で注射することを介して達成することができる（マントーの手順）。ＩＬ−１８アンタゴニストがタンパク質である場合、医薬組成物は、０．０１ｍｇ〜１０ｇのタンパク質、例えば、５ｍｇ〜１ｇのタンパク質を含み得る。あるいは、組成物は、５ｍｇ〜５００ｍｇ、例えば、５ｍｇ〜５０ｍｇを含み得る。
【００８９】
このような医薬組成物を調製する方法は、当業者に周知である。医薬組成物は、単位剤形中に１ｍｇ〜１０ｇのタンパク質を含み得、任意で使用説明書を共に含む。医薬組成物は、当業者に周知であるか又は当業者に明らかである方法に従って、投与前に再構成するために凍結乾燥（フリーズドライ）してもよい。ＩＬ−１８アンタゴニストが抗ＩＬ−１８抗体であり且つ前記抗体がＩｇＧ１アイソタイプを有する場合、このアイソタイプの抗体の銅触媒による分解の程度を低下させるために医薬組成物にクエン酸塩（例えば、クエン酸ナトリウム）又はＥＤＴＡ又はヒスチジン等の銅のキレート化剤を添加してもよい。欧州特許第０６１２２５１号明細書を参照されたい。また、医薬組成物は、アルギニン塩基等の可溶化剤、ポリソルベート８０等の界面活性剤／抗凝集剤、及びバイアルのヘッドスペースの酸素を置換するための窒素等の不活性ガスを含み得る。
【００９０】
ＩＬ−１８アンタゴニストを投与するための有効量及び治療レジメンは、一般的に、経験的に決定され、患者の年齢、体重、及び健康状態、並びに治療される疾患又は障害等の要因に依存し得る。このような要因は、主治医の理解の範囲内である。適切な用量の選択における指針は、例えば、Ｓｍｉｔｈら（１９７７年）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｙ，Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋに見出すことができる。
【００９１】
被験体に投与されるＩＬ−１８アンタゴニストの投薬量は、一般的に、被験体の体重１ｋｇ当たり１μｇ〜１５０ｍｇ、０．１ｍｇ〜１００ｍｇ、０．５ｍｇ〜５０ｍｇ、１〜２５ｍｇ、又は１〜１０ｍｇである。例えば、用量は、１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ又は６０ｍｇ／ｋｇであり得る。１つの実施形態では、Ｈ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）は、１〜５ｍｇ／ｋｇの投薬量で被験体に投与される。別の実施形態では、Ｈ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）は、約３ｍｇ／ｋｇの投薬量で被験体に投与される。ＩＬ−１８アンタゴニストは、例えば、皮下、静脈内、又は筋肉内等、非経口的に投与してもよい。
【００９２】
２〜２４時間、例えば、２〜１２時間、又は２〜６時間の期間にわたって低速連続注入により用量を投与してよい。
【００９３】
用量の投与は、必要に応じて１回以上、例えば、１日３回、毎日１回、２日に１回、１週間に１回、２週間に１回、１ヶ月に１回、３ヶ月に１回、６ヶ月に１回、又は１２ヶ月に１回繰り返してもよい。本発明の特定の実施形態では、用量の投与は、１ヶ月に１回である。更なる実施形態では、用量の投与は、６ヶ月に１回である。ＩＬ−１８アンタゴニストは、維持療法により投与してもよく、例えば、６ヶ月以上の期間にわたって１週間に１回投与してもよい。ＩＬ−１８アンタゴニストは、間欠療法により投与してもよく、例えば、１周期において、３〜６ヶ月間ＩＬ−１８アンタゴニストを投与し、次いで、３〜６ヶ月間投与せず、次いで、３〜６ヶ月間再度ＩＬ−１８アンタゴニストを投与してもよい。
【００９４】
ＩＬ−１８アンタゴニストは、特定の部位に対する標的療法を行うように被験体に投与してよい。例えば、皮下又は静脈内にＩＬ−１８アンタゴニストを局所的に注射してもよい。
【００９５】
ＩＬ−１８アンタゴニストは、本明細書に記載する疾患を治療するためのメトホルミン、ロシグリタゾン、フェンテルミン、トピラメート、オルリスタット（Ｘｅｎｉｃａｌ（商標）、Ａｌｌｉ（商標））、ＧＬＰ−１受容体アゴニスト（例えば、エクセナチド（Ｂｙｅｔｔａ（商標））、リラグルチド（Ｖｉｃｔｏｚａ（商標））、アルビグルチド（Ｓｙｎｃｒｉａ（商標））及び／又はＰＹＹ受容体アゴニストを含む１以上の他の治療活性剤と併用してもよい。
【００９６】
他の治療活性剤と組み合わせてＩＬ−１８アンタゴニスト、例えば、抗原結合タンパク質を使用する場合、個々の成分を、一緒に又は別々に、同時に、順次、一斉に、又は連続して、別個の又は複合医薬製剤で、任意の便利な経路により投与してよい。別々に又は順次投与する場合、ＩＬ−１８アンタゴニスト及び治療活性剤は、任意の順序で投与してよい。
【００９７】
上記組合せは、任意で薬学的に許容し得る担体又は賦形剤と共に、上に定義する組合せを含む単一医薬製剤の形態で使用するために提示してもよい。
【００９８】
同じ製剤中で組合せる場合、成分が安定であり且つ互いに及び製剤の他の成分と適合しなくてはならず、投与用に製剤化できることが認識される。別々に製剤化する場合、例えば当技術分野の抗原結合タンパク質について公知のように、任意の便利な製剤で提供してよい。
【００９９】
同じ疾患に対する第２の治療活性剤と組合せる場合、各成分の用量は、ＩＬ−１８アンタゴニストを単独で使用するときと異なってもよい。当業者は適切な用量を容易に認識する。
【０１００】
ＩＬ−１８アンタゴニスト及び治療活性剤は、相乗的に作用する場合もある。言い換えれば、ＩＬ−１８アンタゴニストと治療活性剤とを組合せて投与すると、本明細書に記載する疾患、障害、又は病状に対する効果が、それぞれの単独の効果の合計よりも大きくなる場合がある。
【０１０１】
用語「個体」、「被験者」及び「患者」は、本明細書において互換的に使用される。被験体は、典型的にヒトである。また、被験体は、マウス、ラット又は霊長類（例えばマーモセット又はサル）等の哺乳類であってもよい。被験体は、非ヒト動物であってもよい。また、ＩＬ−１８アンタゴニストは、獣医学的に使用してもよい。治療される被験体は、例えば、雌ウシ又は雄ウシ、ヒツジ、ブタ、雄ウシ、ヤギ又はウマ等の家畜であってもよく、イヌ又はネコ等のペットであってもよい。動物は、任意の年齢であってよく、成熟した成体動物であってもよい。
【０１０２】
治療は、療法的、予防的、又は防止的であってよい。被験体は、それを必要としている被験体である。治療を必要としている被験体は、特定の医学的疾患に既に罹患している個体に加えて、将来その疾患を発現する可能性のある個体を含み得る。
【０１０３】
したがって、本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストは、予防的又は防止的治療に用いることができる。この場合、本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストは、疾患の１以上の局面又は症状の発生を防止するか又は遅らせるために、個体に投与される。被験体は、無症候性であり得る。被験体は、その疾患に対する遺伝性素因を有し得る。このような個体には、予防上有効な量のＩＬ−１８アンタゴニストが投与される。予防上有効な量は、本明細書に記載する疾患の１以上の局面又は症状の発生を防止するか又は遅らせる量である。
【０１０４】
また、本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストを治療の方法で用いてもよい。用語「治療」は、疾患の少なくとも１つの局面又は症状の緩和、低減、又は防止を包含する。例えば、本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストを用いて、本明細書に記載する疾患の１以上の局面又は症状を寛解又は低減することができる。
【０１０５】
本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストは、療法的、予防的、又は防止的治療に有効な量で用いられる。本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストの治療上有効な量は、疾患の１以上の局面又は症状を寛解又は低減するのに有効な量である。また、本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストは、本明細書に記載する疾患を治療、防止、又は治癒させるために用いることができる。
【０１０６】
本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストは、一般的に、被験体の健康に対して有益な効果を有し得、例えば、被験体の予測寿命を延ばすことができる。
【０１０７】
本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストは、実行可能な療法的治療を行うために疾患の全ての症状又は徴候を完全に治癒させる又は根絶する必要がある訳ではない。適切な分野で認識されている通り、治療剤として使用される薬物は、所与の疾患状態の重篤度を低下させることができるが、有用な治療剤であるとみなされるために疾患の全ての徴候を消失させる必要がある訳ではない。同様に、予防的に投与される治療剤は、実行可能な予防剤を構成するために疾患の発症を防止するのに完全に有効である必要はない。単に、（例えばその症状の数又は重篤度を減らすことにより、又は別の治療の有効性を高めることにより、又は別の有益な効果を生じさせることにより）疾患の影響を低下させるか又は（例えば疾患の発症を遅らせることにより）被験体において疾患が生じたり悪化したりする可能性を低下させることで十分である。
【０１０８】
本明細書に記載するＩＬ−１８アンタゴニストは、本明細書に記載する任意の代謝障害の治療又は予防において用いることができる。
【０１０９】
用語「治療上有効な量」は、治療される疾患を防ぐ、阻害する、停止させる、又は改善するのに十分な物質、例えば、ＩＬ−１８アンタゴニストの量（用量）を指す。
【０１１０】
したがって、本発明は、上記疾患を治療及び／又は予防する方法であって、治療上有効な量のＩＬ−１８アンタゴニスト、例えば、抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質を、それを必要としている患者に投与する工程を含む方法を提供する。
【０１１１】
本明細書中では、本発明は、明確且つ簡潔に説明を記載することができるように、実施形態を参照して記載される。実施形態は、本発明から逸脱することなく様々に組合せたり分離させたりできることを意図しており、またそのように認識されるべきである。
【０１１２】
本明細書に引用する特許及び特許出願が挙げられるがこれらに限定されない全ての刊行物は、全体が記載されているかのように参照することにより本明細書に援用される。
【０１１３】
本開示は、更に、例示目的のためだけに以下の実施例に更に記載される。
【実施例】
【０１１４】
実施例１
ＩＬ−１８誘導性遺伝子発現に対するＨ１Ｌ２（配列番号７及び配列番号１１）の効果を求めるために、１０人の健常ボランティアドナーから採取した血液をドナー１人当たり４つのアリコートに分割し、以下のいずれかを用いてエキソビボで刺激した：Ａ）Ｓｙｎａｇｉｓ １μｇ／ｍＬ（対照抗ＲＳＶ ＩｇＧ）、Ｂ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ、Ｃ）ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ、又はＤ）Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ。各処理群のサンプルを、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ Ｕ１３３＿ｐｌｕｓ＿２．０全ゲノムヒトマイクロアレイにハイブリダイズさせた。以下の比較を行った：
・Ｓｙｎａｇｉｓ ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ対ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ：血液中の遺伝子発現に対するＩＬ−１８の効果を求めるため
・ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ対ＩＬ−１８ ５０ｎｇ／ｍＬ＋Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ：ＩＬ−１８誘導性遺伝子発現に対するＨ１Ｌ２の効果を求めるため
・Ｓｙｎａｇｉｓ ＩｇＧ １μｇ／ｍＬ対Ｈ１Ｌ２ １μｇ／ｍＬ：刺激の非存在下における血液中の遺伝子発現に対するＨ１Ｌ２の効果を求めるため
エキソビボでＩＬ−１８により刺激された血液は、ＩＬ−６の発現において９倍の増加（Ｐ＜０．０００１）を示し、Ｈ１Ｌ２の添加は、この効果を中和した（ＩＬ−１８＋Ｈ１Ｌ２のデータをＩＬ−１８のみのデータと比較したとき７倍減少した）。図１にデータを示す。
【０１１５】
更に、ＪＡＫ２、ＳＯＣＳ３及びＳＴＡＴ３は、それぞれ、ＩＬ−１８刺激による発現において３．２倍、３．１倍、及び１．７倍の増加を示した。Ｈ１Ｌ２の添加は、これら効果を部分的に中和した：ＩＬ−１８＋Ｈ１Ｌ２をＩＬ−１８のみと比較したとき、ＪＡＫ２は２．１倍減少し、ＳＯＣＳ３は１．９倍減少し、ＳＴＡＴ３は１．６倍減少した。図２、３及び４にデータを示す。
【０１１６】
更に、ＭＣＰ−１及びＭＣＰ−４は、それぞれ、ＩＬ−１８刺激による発現において４．４倍及び４．１倍の増加を示した。ＩＬ１８＋Ｈ１Ｌ２をＩＬ１８のみと比較したとき、Ｈ１Ｌ２の添加によりこれら増加は部分的に回復し、２．６倍及び２．５倍の減少を示した（図５〜６を参照されたい）。ＰＰＡＲガンマ及びＩＲＳ２は、ＩＬ１８刺激によりそれぞれ２．９倍及び１．５倍の減少を示した。これら効果はＨ１Ｌ２の添加により部分的に回復し（図７〜８を参照されたい）、ＩＬ１８＋Ｈ１Ｌ２をＩＬ１８のみと比較したとき１．７倍及び１．４倍の増加を示した。最後に、レプチン及びレプチン受容体は、両方とも、ＩＬ−１８刺激後に発現が１．５倍の減少を示した。これら効果もＨ１Ｌ２により中和された（図９〜１０を参照されたい）。
【０１１７】
この実験は、マイクロアレイ上のプローブの９０％において１．１倍の変化を検出するために９０％信頼力を用いて行った。
【０１１８】
このデータは、ＩＬ−１８がＩＬ−６及び血液中のその重要なシグナル伝達分子の発現を誘導し、これら効果がＨ１Ｌ２によって中和され得ることを示す。
【０１１９】
実施例２
様々な癌を治療するために注入又は皮下投与された組換え型ヒトＩＬ−１８（ｒｈＩＬ−１８）の有用性について、３つの第Ｉ相試験及び１つの第ＩＩ相試験で調べられている。これら試験から得られた血中グルコース及び臨床検査値異常のデータを再調査して、ｒｈＩＬ−１８の注入と、その後のグルコース代謝の変化との間に何らかの関係が存在する可能性について調査した。全ての第１相試験において、糖尿病等の合併症を有する患者は、治験責任医師によりその疾患が安定しているとみなされ且つ患者が少なくとも６ヶ月間治療を受けている場合に限り、参加資格を有していた。
【０１２０】
これら試験で調査された全ての用量レベルでは、３０〜４０時間かけて患者の血漿中でｒｈＩＬ−１８が超生理学的なレベルに達した。
【０１２１】
これら試験で組換え型ヒトＩＬ−１８（ｒｈＩＬ−１８）の投薬中に遭遇した最も一般的な臨床化学的異常は、過血糖であった。
【０１２２】
現在までに完了している単独療法試験全体で、治療を受けた患者の３８〜６８％が、プロトコールの適格基準（すなわち、糖尿病被験体を除外したかどうか）によって少なくとも等級１（ＣＴＣ基準）の高血糖症ＡＥ（＞ＵＬＮ〜８．９ｍｍｏｌ／Ｌ）を経験した。
【０１２３】
３つの完了し報告されている用量設定試験（ｎ＝７２）全体で、８人（７％）の患者が等級３（＞１３．９〜２７．８ｍｍｏｌ／Ｌ）の高血糖事象を経験し、１人の患者が等級４（＞２７．８ｍｍｏｌ／Ｌ）の高血糖症を経験した。これら患者の９人全てが、ランダム化時点で糖尿病であると診断されていた。
【０１２４】
血漿グルコースレベルとの明らかな用量相関は存在しなかったが、血中グルコースの増加の程度に加えて、投与に対する低血糖症ＡＥのタイミング（注入の５〜１０日後）が一貫していることは、これら事象がｒｈＩＬ−１８の投与と関連していることを示唆する。これらデータは、ＩＬ−１８と血漿グルコースレベルの上昇との間の関連を示し、ひいては、ＩＬ−１８アンタゴニストが、血漿グルコースが増加する代謝障害、例えば、Ｔ２ＤＭ、肥満Ｔ２ＤＭ、及び肥満の有用な治療法であり得ることを示唆する。
【０１２５】
実施例３
ＤＩＯ（食餌誘発性肥満）マウスモデルで様々な用量の本発明のＩＬ−１８アンタゴニストを用いて、グルコースレベル、インスリンレベル、並びに肥満及び糖尿病に関係する他の代謝パラメータに加えて、体重減少に対する影響を調べることができる。
【０１２６】
このモデルでは、Ｃ５７ｂｌ／６雄マウスは、１８〜２０週間４５％脂肪食を給餌したとき、体重が約４０〜４５ｇに達する。次いで、ＩＬ−１８アンタゴニストを１回又は数回投与し、実験が終わるまで毎日マウスの体重を測定した。終末麻酔後のマウスから心臓の血液を回収し、ＡＬＰ、ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＧＬＤＨ、ビリルビン、グルコース、インスリン、尿素、クレアチニン、総タンパク量、アルブミン、カルシウム、コレステロール、トリグリセリド、リン酸塩、ナトリウム、カリウム、塩化物及びケトン（可能な場合にはハイドロキシブチレート及びアセトアセテートの両方）を含むいくつかのマーカーの分析を行う。組織を採取し、安全性評価のために組織病理学的に評価し、免疫組織化学のための脳組織を評価してもよい。
【０１２７】
上記実施例１及び２に示した結果を鑑みて、これらマウスを用いた実験の結果は、体重減少に与える影響と共に、ＩＬ−１８アンタゴニストで処理したマウスにおけるグルコース及びインスリンレベルの減少であると予測される。
【０１２８】
実施例４
健常及び肥満被験体に静脈内注入された単回用量のＨ１Ｌ２の安全性、耐容性、薬物動態について調べるために、ヒトにおいて初めての（ＦＴＩＨ）試験（すなわち、単盲検無作為化プラセボ対照試験）を実施した。また、肥満被験体において、代謝薬動力学も評価した。
【０１２９】
方法論
試験は、２つの部分からなっていた。第１部は、５コホートの健常被験体（１コホート当たりｎ＝５〜１５）からなっており、第２部は、３コホートの肥満被験体（１コホート当たりｎ＝５〜１２）からなっていた；肥満被験体は、ＢＭＩが３０〜４０であるが他の点では健康である被験体として定義した。各コホートは、単回試験セッションに参加した。
【０１３０】
両部とも、単純盲検及びプラセボ対照で実施した。各コホート内では、プラセボ又は動的治療への被験体の割当てを無作為化した。
【０１３１】
第１部の開始用量は０．００８ｍｇ／ｋｇであり、最大用量３．０ｍｇ／ｋｇまで段階的に用量を増加させた。第２部の投与は、第１部に対する１ｍｇ／ｋｇの投与が完了し、予備安全性及びＰＫデータが調査されるまで開始しなかった。
【０１３２】
細胞媒介性炎症に対するＨ１Ｌ２の効果を調べるために、第１部の健常被験体の１ｍｇ／ｋｇ及び３ｍｇ／ｋｇのコホートには遅延型過敏（ＤＴＨ）アプローチが含まれていた。Ｃａｎｄｉｎ（登録商標）は、皮内に投与したときにＤＴＨ炎症反応をトリガーするカンジダアルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）皮膚試験抗原である（Ａｌｌｅｒｍｅｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）。ＤＴＨ応答者であると確認された２７人の健常ボランティア（腕の手掌表面に皮内注入した０．１ｍＬのＣａｎｄｉｎ（登録商標）に応答して＞５ｍｍ硬化した）を、１ｍｇ／ｋｇ（Ｈ１Ｌ２ ｎ＝９、プラセボｎ＝３）及び３ｍｇ／ｋｇ（Ｈ１Ｌ２ ｎ＝９、プラセボｎ＝６）の健常被験体コホートに新規登録した。これらコホートに登録された被験体は、試験の３日目（Ｈ１Ｌ２投与の４８時間後）に２回目のＣａｎｄｉｎ（登録商標）皮内注射を受けた。Ｃａｎｄｉｎ（登録商標）抗原投与の２４時間後及び４８時間後に硬化及び紅斑を評価することに加えて、各被験体から３つの皮膚生検を得た。スクリーニング時（Ｃａｎｄｉｎ（登録商標）抗原投与の４８時間後）における非病変領域、スクリーニング時におけるＤＴＨ硬化の中心、及び反復抗原投与時（Ｃａｎｄｉｎ（登録商標）抗原投与の４８時間後、Ｈ１Ｌ２投与の９６時間後）におけるＤＴＨ硬化の中心から２ｍｍ又は３ｍｍのパンチ生検を採取した。前記生検からＲＮＡを抽出し、標識し、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ Ｕ１３３＿ｐｌｕｓ＿２．０全ゲノムヒトマイクロアレイにハイブリダイズさせた。データを分析して、Ｈ１Ｌ２投与によって調節されるＣａｎｄｉｎ（登録商標）ＤＴＨ抗原投与に応答して発現の変化する遺伝子を同定した。代謝障害において何らかの役割を有していることが既に同定されている炎症遺伝子をこのモデルで評価した。
【０１３３】
第２部には、３コホートの肥満男性ボランティアが含まれていた。開始用量は０．２５ｍｇ／ｋｇであり、最大用量３．０ｍｇ／ｋｇまで段階的に用量を増加させた。これは、１部の最も高い３用量を反映している。
【０１３４】
代謝疾患患者におけるＨ１Ｌ２の潜在的な有用性を鑑みて、この試験では、肥満被験体における代謝薬力学的エンドポイントに対するＨ１Ｌ２の効果についても調べた。この試験に含まれていた健康な肥満被験体は、インスリンレベルが上昇し、これは潜在的なインスリン抵抗性を示す。
【０１３５】
経口グルコース負荷試験（ＯＧＴＴ）を使用して、肥満被験体における様々な用量のＨ１Ｌ２の潜在的な代謝効果を評価した。７５ｇの経口グルコース負荷を摂取した後、インスリン分泌が急速に増加し（第１相応答）、次いで、ホルモンがより持続的に放出された（第２相）。この分泌過程中に、インスリン前駆体分子であるプロインスリンからＣペプチド、すなわち結合ペプチドが分離され、等モル量のインスリンが生成される。血流中において、Ｃペプチドは、インスリンと異なり肝クリアランスに供されないので、長い半減期を有する。ＯＧＴＴ中のＣペプチド及びインスリン動態データをモデル化することにより、インスリン分泌の第１相及び第２相が導き出され得るように、１８０分間かけて血液サンプルを回収した。更に、摂取されたグルコースの出現及び消失速度からインスリン感受性を計算した。
【０１３６】
結果
ＤＴＨを抗原投与された皮膚は、ＩＬ６発現が１１３倍（Ｐ＜０．０００１）増加した（１ｍｇ／ｋｇのコホートでは１２３倍増加（Ｐ＜０．０００１）し、３ｍｇ／ｋｇのコホートでは１０１倍増加（Ｐ＜０．０００１）した）。反復抗原投与前にＨ１Ｌ２ ３ｍｇ／ｋｇで処理すると、ＩＬ−６の発現が３．４倍（Ｐ＜０．０００１）減少した。これは、プラセボよりも１．８倍大きな減少（Ｐ＝０．０５５）であった。この効果は、Ｈ１Ｌ２ １ｍｇ／ｋｇの処理では有意ではなかった（１．６倍減少、Ｐ＝０．０９８）。
【０１３７】
更に、ＳＯＣＳ３及びＳＴＡＴ３は、それぞれ、ＤＴＨにより有意な（Ｐ＜０．０００１）１４倍及び６倍の発現増加を示した。ＳＯＣＳ３のＤＴＨ誘導性発現は、Ｈ１Ｌ２ ３ｍｇ／ｋｇの処理により１．９倍減少した。これは、プラセボよりも１．４倍大きな減少（Ｐ＜０．０５）であった。ＳＴＡＴ３のＤＴＨ誘導性発現は、Ｈ１Ｌ２ ３ｍｇ／ｋｇの処理により１．３倍減少し（Ｐ＜０．０１）た。これは、プラセボよりも１．４倍大きな減少（Ｐ＜０．０１）であった。これら効果は、１ｍｇ／ｋｇのＨ１Ｌ２による処理ではみられなかった。
【０１３８】
更に、ＬＥＰＲは、ＤＴＨ抗原投与により５倍の発現減少（Ｐ＜０．０００１）を示した。ＤＴＨによるＬＥＰＲの減少は、Ｈ１Ｌ２ ３ｍｇ／ｋｇを用いて１．５倍（Ｐ＜０．０１）減少した。これは、プラセボよりも１．４倍大きな減少（Ｐ＝０．０８４）であった。
【０１３９】
予備分析は、Ｈ１Ｌ２も肥満被験体のＯＧＴＴにおいてグルコースレベルを減少させることを示し、これら効果は、正常値の上限を上回るグルコースレベルを有する被験体においてより顕著に現れ、これは、Ｈ１Ｌ２が、Ｔ２ＤＭ患者等のより重篤な集団においてより大きな効果を示し得ることを示唆する。また、インスリンの効果が患者のこのサブセットのグルコースレベルにおいて観察されるものを反映しているというエビデンスが存在していた。
【０１４０】
結論
これらデータは、Ｈ１Ｌ２が細胞媒介性炎症のインビボモデルにおいて、ＩＬ６、ＳＴＡＴ３、ＳＯＣＳ３及びＬＥＰＲの発現の変化を減少させ得ることを示す。更に、前記データは、Ｈ１Ｌ２がグルコース及びインスリンレベルを含む様々な代謝パラメータを調節することを示す。したがって、抗ＩＬ１８アンタゴニスト、特に抗体Ｈ１Ｌ２は、代謝障害の治療において有望である。
【表３】
【０１４１】
配列
配列番号１（ＣＤＲＨ１）
ＧＹＹＦＨ
配列番号２（ＣＤＲＨ２）
ＲＩＤＰＥＤＤＳＴＫＹＡＥＲＦＫＤ
配列番号３（ＣＤＲＨ３）
ＷＲＩＹＲＤＳＳＧＲＰＦＹＶＭＤＡ
配列番号４（ＣＤＲＬ１）
ＬＡＳＥＤＩＹＴＹＬＴ
配列番号５（ＣＤＲＬ２）
ＧＡＮＫＬＱＤ
配列番号６（ＣＤＲＬ３）
ＬＱＧＳＫＦＰＬＴ
【０１４２】
配列番号７（Ｈ１）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＶＳＧＥＩＳＴＧＹＹＦＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＭＧＲＩＤＰＥＤＤＳＴＫＹＡＥＲＦＫＤＲＶＴＭＴＥＤＴＳＴＤＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＴＷＲＩＹＲＤＳＳＧＲＰＦＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
【０１４３】
配列番号８（Ｈ２）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＶＳＧＥＩＳＴＧＹＹＦＨＷＶＲＲＲＰＧＫＧＬＥＷＭＧＲＩＤＰＥＤＤＳＴＫＹＡＥＲＦＫＤＲＶＴＭＴＥＤＴＳＴＤＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＴＷＲＩＹＲＤＳＳＧＲＰＦＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
【０１４４】
配列番号９（Ｈ３）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＶＳＧＥＩＳＴＧＹＹＦＨＦＶＲＲＲＰＧＫＧＬＥＷＭＧＲＩＤＰＥＤＤＳＴＫＹＡＥＲＦＫＤＲＶＴＭＴＡＤＴＳＴＤＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＴＹＦＣＴＴＷＲＩＹＲＤＳＳＧＲＰＦＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
【０１４５】
配列番号１０（Ｌ１）
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＶＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＬＡＳＥＤＩＹＴＹＬＴＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＧＡＮＫＬＱＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＬＱＧＳＫＦＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
【０１４６】
配列番号１１（Ｌ２）
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＶＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＬＡＳＥＤＩＹＴＹＬＴＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＧＡＮＫＬＱＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＬＱＧＳＫＦＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
【０１４７】
配列番号１２（Ｌ３）
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＶＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＬＡＳＥＤＩＹＴＹＬＴＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＱＬＬＩＹＧＡＮＫＬＱＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＥＧＤＹＹＣＬＱＧＳＫＦＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
【０１４８】
配列番号１３（ＩＬ−１８）
ＭＡＡＥＰＶＥＤＮＣＩＮＦＶＡＭＫＦＩＤＮＴＬＹＦＩＡＥＤＤＥＮＬＥＳＤＹＦＧＫＬＥＳＫＬＳＶＩＲＮＬＮＤＱＶＬＦＩＤＱＧＮＲＰＬＦＥＤＭＴＤＳＤＣＲＤＮＡＰＲＴＩＦＩＩＳＭＹＫＤＳＱＰＲＧＭＡＶＴＩＳＶＫＣＥＫＩＳＴＬＳＣＥＮＫＩＩＳＦＫＥＭＮＰＰＤＮＩＫＤＴＫＳＤＩＩＦＦＱＲＳＶＰＧＨＤＮＫＭＱＦＥＳＳＳＹＥＧＹＦＬＡＣＥＫＥＲＤＬＦＫＬＩＬＫＫＥＤＥＬＧＤＲＳＩＭＦＴＶＱＮＥＤ
【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者における代謝障害の治療又は予防に用いるためのＩＬ−１８アンタゴニスト。
【請求項２】
前記ＩＬ−１８アンタゴニストがタンパク質である、請求項１に記載のＩＬ−１８アンタゴニスト。
【請求項３】
前記タンパク質が抗原結合タンパク質である、請求項１に記載のＩＬ−１８アンタゴニスト。
【請求項４】
前記抗原結合タンパク質が、重鎖Ｈ１（配列番号７）のＣＤＲのうちの１以上若しくは全て及び／又は軽鎖Ｌ１（配列番号１１）のＣＤＲのうちの１以上若しくは全て、或いはこれらのＣＤＲ変異体を含んでなる、請求項３に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項５】
約１０ｎＭ以下のＫＤを有する、請求項４に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項６】
前記抗原結合タンパク質が、ＣＤＲＨ１（配列番号１）、ＣＤＲＨ２（配列番号２）、ＣＤＲＨ３（配列番号３）、ＣＤＲＬ１（配列番号４）、ＣＤＲＬ２（配列番号５）、及びＣＤＲＬ３（配列番号６）からなる群より選択されるＣＤＲのうちの１以上又は全て、或いはこれらのＣＤＲ変異体を含んでなる、請求項３、４又は５に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項７】
前記抗原結合タンパク質が、ヒト化抗体若しくはヒト抗体又はこれらの機能的断片である、請求項３〜６のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項８】
前記抗原結合タンパク質が、ＩｇＧ１抗体である、請求項４〜７のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項９】
前記抗原結合タンパク質が、ドメイン抗体である、請求項４〜６のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１０】
前記抗原結合タンパク質が、ＩＬ−１８に対する結合について、配列番号７の重鎖配列（Ｈ１）及び配列番号１１の軽鎖配列（Ｌ２）を含んでなる抗体と競合する、請求項４〜９のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１１】
前記抗原結合タンパク質が、配列番号７の重鎖配列（Ｈ１）又はそれに対して９０％の同一性を有する重鎖配列と、配列番号１１の軽鎖配列（Ｌ２）又はそれに対して９０％の同一性を有する軽鎖配列とを有する抗体である、請求項４に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１２】
前記タンパク質が、単離された又は組換え技術により作製されたＩＬ−１８ＢＰである、請求項２に記載のＩＬ−１８アンタゴニスト。
【請求項１３】
前記代謝障害が、２型糖尿病である、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１４】
前記代謝障害が、肥満である、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１５】
前記抗原結合タンパク質が、前記患者の血糖コントロールを高める、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１６】
前記患者が、ヒト患者である、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１７】
前記抗原結合タンパク質が、１ヶ月に１回投与されるものである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１８】
前記抗原結合タンパク質が、６ヶ月に１回投与されるものである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１９】
前記抗原結合タンパク質が、皮下投与されるものである、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項２０】
前記抗原結合タンパク質が、皮内投与されるものである、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項２１】
治療上有効な量のＩＬ−１８アンタゴニストを代謝障害に罹患している患者に投与することにより、前記患者を治療する方法。
【請求項２２】
予防上有効な量のＩＬ−１８アンタゴニストを代謝障害に罹患しやすい患者に投与することにより、前記患者における代謝障害を予防する方法。
【請求項２３】
治療上有効な量のＩＬ−１８アンタゴニストを患者に投与することにより、前記患者の血糖コントロールを改善する方法。
【請求項２４】
患者における代謝障害を予防又は治療する薬剤を製造するための請求項１〜２３のいずれか一項に記載のＩＬ１８アンタゴニストの使用。
【請求項１】
患者における代謝障害の治療又は予防に用いるためのＩＬ−１８アンタゴニスト。
【請求項２】
前記ＩＬ−１８アンタゴニストがタンパク質である、請求項１に記載のＩＬ−１８アンタゴニスト。
【請求項３】
前記タンパク質が抗原結合タンパク質である、請求項１に記載のＩＬ−１８アンタゴニスト。
【請求項４】
前記抗原結合タンパク質が、重鎖Ｈ１（配列番号７）のＣＤＲのうちの１以上若しくは全て及び／又は軽鎖Ｌ１（配列番号１１）のＣＤＲのうちの１以上若しくは全て、或いはこれらのＣＤＲ変異体を含んでなる、請求項３に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項５】
約１０ｎＭ以下のＫＤを有する、請求項４に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項６】
前記抗原結合タンパク質が、ＣＤＲＨ１（配列番号１）、ＣＤＲＨ２（配列番号２）、ＣＤＲＨ３（配列番号３）、ＣＤＲＬ１（配列番号４）、ＣＤＲＬ２（配列番号５）、及びＣＤＲＬ３（配列番号６）からなる群より選択されるＣＤＲのうちの１以上又は全て、或いはこれらのＣＤＲ変異体を含んでなる、請求項３、４又は５に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項７】
前記抗原結合タンパク質が、ヒト化抗体若しくはヒト抗体又はこれらの機能的断片である、請求項３〜６のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項８】
前記抗原結合タンパク質が、ＩｇＧ１抗体である、請求項４〜７のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項９】
前記抗原結合タンパク質が、ドメイン抗体である、請求項４〜６のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１０】
前記抗原結合タンパク質が、ＩＬ−１８に対する結合について、配列番号７の重鎖配列（Ｈ１）及び配列番号１１の軽鎖配列（Ｌ２）を含んでなる抗体と競合する、請求項４〜９のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１１】
前記抗原結合タンパク質が、配列番号７の重鎖配列（Ｈ１）又はそれに対して９０％の同一性を有する重鎖配列と、配列番号１１の軽鎖配列（Ｌ２）又はそれに対して９０％の同一性を有する軽鎖配列とを有する抗体である、請求項４に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１２】
前記タンパク質が、単離された又は組換え技術により作製されたＩＬ−１８ＢＰである、請求項２に記載のＩＬ−１８アンタゴニスト。
【請求項１３】
前記代謝障害が、２型糖尿病である、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１４】
前記代謝障害が、肥満である、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１５】
前記抗原結合タンパク質が、前記患者の血糖コントロールを高める、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１６】
前記患者が、ヒト患者である、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１７】
前記抗原結合タンパク質が、１ヶ月に１回投与されるものである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１８】
前記抗原結合タンパク質が、６ヶ月に１回投与されるものである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項１９】
前記抗原結合タンパク質が、皮下投与されるものである、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項２０】
前記抗原結合タンパク質が、皮内投与されるものである、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１８抗原結合タンパク質。
【請求項２１】
治療上有効な量のＩＬ−１８アンタゴニストを代謝障害に罹患している患者に投与することにより、前記患者を治療する方法。
【請求項２２】
予防上有効な量のＩＬ−１８アンタゴニストを代謝障害に罹患しやすい患者に投与することにより、前記患者における代謝障害を予防する方法。
【請求項２３】
治療上有効な量のＩＬ−１８アンタゴニストを患者に投与することにより、前記患者の血糖コントロールを改善する方法。
【請求項２４】
患者における代謝障害を予防又は治療する薬剤を製造するための請求項１〜２３のいずれか一項に記載のＩＬ１８アンタゴニストの使用。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【公表番号】特表２０１３−５１８８６３（Ｐ２０１３−５１８８６３Ａ）
【公表日】平成２５年５月２３日（２０１３．５．２３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５５１６４６（Ｐ２０１２−５５１６４６）
【出願日】平成２３年２月７日（２０１１．２．７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２０１１／０５１７４９
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０９８４２４
【国際公開日】平成２３年８月１８日（２０１１．８．１８）
【出願人】（３９７００９９３４）グラクソ グループ リミテッド (832)
【氏名又は名称原語表記】ＧＬＡＸＯ ＧＲＯＵＰ ＬＩＭＩＴＥＤ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２５年５月２３日（２０１３．５．２３）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年２月７日（２０１１．２．７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２０１１／０５１７４９
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０９８４２４
【国際公開日】平成２３年８月１８日（２０１１．８．１８）
【出願人】（３９７００９９３４）グラクソ グループ リミテッド (832)
【氏名又は名称原語表記】ＧＬＡＸＯ ＧＲＯＵＰ ＬＩＭＩＴＥＤ
【Ｆターム（参考）】
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