新規４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体
【課題】新規な化学修飾４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物を提供すること。
【解決手段】以下の構造Ｐを有する４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物
（式中、Ｒ8は水素であり、Ｒ9はニトロである。）
【解決手段】以下の構造Ｐを有する４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物
（式中、Ｒ8は水素であり、Ｒ9はニトロである。）
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本件出願は、米国仮出願第６０／１０８，９４８号（１９９８年１１月１８日出願）の一部継続出願である。前記出願は参照することにより本明細書に組み込まれる。
発明の属する技術分野
本発明は、新規な４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体、前記誘導体の製造方法及び前記誘導体の使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来技術
化合物テトラサイクリンは以下の一般構造を示す。
【化１】
環核の付番方式は以下の通りである。
【化２】
テトラサイクリンは５−ＯＨ（テラマイシン）及び７−Ｃｌ（オーレオマイシン）誘導体と同様に天然に存在する周知の抗生物質である。天然テトラサイクリンは、その抗菌特性を失うことなしに修飾することができるだろう。ただし、構造の特定要素は維持されなければならない。基本のテトラサイクリン構造にされてもよく又はされていなくてもよい修飾は、Mitscher(The Chemistry of Tetracyclines, Chapter 6, Marcel Dekker, Publishers, New York (1978))により検討されている。前記Mitscherの文献によると、テトラサイクリン環系の部位５〜９における置換基は、抗菌特性の完全な喪失なしに修飾されてもよい。しかしながら、基本の環系に対する変化又は部位１〜４及び１０〜１２における置換基の置換は、一般的に、抗菌活性が実質的に喪失した又は有効でない抗菌活性を有する合成テトラサイクリンを導く。化学的に修飾された非抗菌性テトラサイクリン（以下、ＣＭＴという）の例は４−デジメチルアミノテトラサイクリンである。
いくつかの４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体が米国特許第３，０２９，２８４号及び第５，１２２，５１９号明細書に開示されている。これらの誘導体には、Ｄ環のＣ７及びＣ９部位に水素及びその他の置換基を有する６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン及び５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンが含まれる。これらの置換基には、アミノ、ニトロ、ジ（低級アルキル）アミノ及びモノ（低級アルキル）アミノ又はハロゲンが含まれる。６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体及び５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体は、抗菌剤として有用であるといわれている。
【０００３】
Ａ環のＣ４部位にオキシム基を有するその他の４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体は、米国特許第３，６２２，６２７号及び第３，８２４，２８５号明細書に開示されている。これらのオキシム誘導体はＣ７部位に置換基として水素及びハロゲンを有しており、７−ハロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン及び７−ハロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリンが含まれる。
アルキルアミノ（ＮＨ−アルキル）及びアルキルヒドラゾン（Ｎ−ＮＨ−アルキル）基は、４−デジメチルアミノテトラサイクリンのＡ環のＣ４部位において置換されている。これらの化合物はその抗菌特性について知られている。米国特許第３，３４５，３７０号、第３，６０９，１８８号、第３，６２２，６２７号、第３，８２４，２８５号、第３，６２２，６２７号、第３，５０２，６６０号、第３，５０９，１８４号、第３，５０２，６９６号、第３，５１５，７３１号、第３，２６５，７３２号、第５，１１２，５１９号、第３，８４９，４９３号、第３，７７２，３６３号及び第３，８２９，４５３号明細書を参照のこと。
抗菌特性に加えて、テトラサイクリンはその多数の用途を有することが開示されている。例えば、テトラサイクリンはコラーゲン分解酵素、例えばマトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）（コラゲナーゼ（ＭＭＰ−１）、ゼラチナーゼ（ＭＭＰ−２）及びストロメライシン（ＭＭＰ−３）を含む）の活性を阻害することが知られている(Golubら、J. Periodont. Res. 20: 12-23 (1985); Golubら、Crit. Revs. Oral Biol. Med. 2: 297-322 (1991); 米国特許第4,666,897号、第4,704,383号、第4,935,411号及び第4,935,412号明細書)。更にテトラサイクリンは、哺乳類の骨格筋における消耗（wasting）及びタンパク質分解を阻害すること（米国特許第５，０４５，５３８号）及び哺乳類細胞におけるＩＬ−１０生産を増強することが知られている。
更に、テトラサイクリンは骨タンパク質合成を増強し（米国特許第Ｒｅ．３４，６５６号明細書）、臓器培養において骨吸収を減少させる（米国特許第４，７０４，３８３号明細書）ことが示されている。
同様に、米国特許第５，５３２，２２７号明細書（Golubら）は、テトラサイクリンがタンパク質の過剰なグリコシル化を緩和することができることを開示している。特にテトラサイクリンは、糖尿病におけるコラーゲンの過剰なグリコシル化により生ずる過剰なコラーゲン架橋を阻害する。
【０００４】
テトラサイクリンは、米国特許第５，５３２，２２７号明細書に開示されるように、炎症状態、例えば乾癬などに関連する過剰なホスホリパーゼＡ2活性を阻害することが知られている。更に、テトラサイクリンはシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ２）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、一酸化窒素及びＩＬ−１（インターロイキン−１）を阻害することが知られている。
これらの特性は、テトラサイクリンを多数の疾患の治療において有用なものとする。例えば、非抗菌性テトラサイクリンを含むテトラサイクリンが関節炎の治療に有効であるとする提案が多数存在する。例えば、Greenwaldら "Tetracyclines Suppress Metalloproteinase Activity in Adjuvant Arthritis and, in Combination with Flurbiprofen, Ameliorate Bone Damage," Journal of Rheumatology 19: 927-938 (1992); Greenwaldら, "Treatment of Destructive Arthritic Disorders with MMP Inhibitors: Potential Role of Tetracyclines in Inhibition of Matrix Metalloproteinases: Therapeutic Potential," Annals of the New York Academy of Sciences 732: 181-198 (1994); Kloppenburgら "Minocycline in Active Rheumatoid Arthritis." Arthritis Rheum 37: 629-636 (1994) ;Ryanら, "Potential of Tetracycline to Modify Cartilage Breakdown in Osteoarthritis," Current Opinion in Rheumatology 8: 238-247 (1996) ; O'Dellら, "Treatment of Early Rheumatoid Arthritis with Minocycline or Placebo," Arthritis Rheum 40: 842-848 (1997)を参照のこと。
テトラサイクリンは、皮膚病の治療における使用が提案されている。例えば、Whiteら(Lancet. Apr. 29. p.966 (1989))は、テトラサイクリンであるミノサイクリンは、過剰量のコラゲナーゼに関連すると考えられている生命を危うくする皮膚状態である栄養障害性表皮水疱症の治療に有効であることを報告している。
更に研究は、テトラサイクリン及びメタロプロテイナーゼ阻害剤は腫瘍の進行(DeClerckら, Annals N. Y. Acad. Sci., 732: 222-232 (1994))、骨吸収(Rifkinら, Annals N. Y. Acad. Sci.,732: 165-180 (1994))、血管形成(Maragoudakisら, Br. J. Pharmacol., 111: 894-902 (1994))を阻害すること、更に抗炎症特性を有すること(Ramamurthyら, Annals N.Y. Acad. Sci., 732.427-430 (1994))を示唆している。
【０００５】
前記の記載に基づくと、テトラサイクリンは異なる治療法において有効であることが見いだされている。しかしながら、新規な４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体、前記誘導体の製造方法及び前記誘導体の異なる種類の疾患又は状態の治療のための使用に対するニーズが存在する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
発明の要約
下記式のテトラサイクリン化合物並びにその医薬的に許容しうる塩及び許容しない塩により、前記及びその他の本発明の目的を達成することができることが発見された。
【化３】
（式中、
Ｒ7は水素、アミノ、ニトロ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ、エトキシチオカルボニルチオ、アジド、アシルアミノ、ジアゾニウム、シアノ及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ6-aは水素及びメチルからなる群より選ばれ、
Ｒ6及びＲ5は水素及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ8は水素及びハロゲンからなる群より選ばれ、
Ｒ9は水素、アミノ、アジド、ニトロ、アシルアミノ、ヒドロキシ、エトキシチオカルボニルチオ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジアゾニウム、ジ（低級アルキル）アミノ及びＲＣＨ（ＮＨ2）ＣＯ（式中、Ｒは水素又は低級アルキルである）からなる群より選ばれ、
【０００７】
但し、Ｒ7及びＲ9のいずれかが水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であり、かつＲ7が水素、アミノ、ニトロ、ハロゲン、ジメチルアミノ又はジエチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6及びＲ9が共に水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、かつＲ7が水素、アミノ、ニトロ、ハロゲン又はジエチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシルであり、Ｒ5、Ｒ7及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-a、Ｒ6及びＲ5が共に水素であり、Ｒ9がメチルアミノであり、かつＲ7がジメチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6が水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、Ｒ9がメチルアミノであり、かつＲ7がジメチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6、Ｒ5、Ｒ9が共に水素であり、Ｒ7がシアノであるとき、Ｒ8はハロゲンである。）
【０００８】
別の態様において、本発明は下記式のテトラサイクリン化合物並びにその医薬的に許容しうる塩及び許容しない塩を提供する。
【化４】
（式中、
Ｒ7は水素、アミノ、ニトロ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ、エトキシチオカルボニルチオ、アジド、アシルアミノ、ジアゾニウム、シアノ及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ6-aは水素及びメチルからなる群より選ばれ、
Ｒ6及びＲ5は水素及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ4はＮＯＨ、Ｎ−ＮＨ−Ａ及びＮＨ−Ａ（式中、Ａは低級アルキル基である）からなる群より選ばれ、
Ｒ8は水素及びハロゲンからなる群より選ばれ、
Ｒ9は水素、アミノ、アジド、ニトロ、アシルアミノ．ヒドロキシ、エトキシチオカルボニルチオ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ及びＲＣＨ（ＮＨ2）ＣＯ（式中、Ｒは水素又は低級アルキルである）からなる群より選ばれ、
【０００９】
但し、Ｒ4がＮＯＨ、Ｎ−ＮＨ−アルキル又はＮＨ−アルキルであり、かつＲ7、Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＯＨであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6が水素又はヒドロキシルであり、Ｒ7がハロゲンであり、かつＲ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮ−ＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシルであり、かつＲ7、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であり、かつＲ7が水素、アミノ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ又はヒドロキシルであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6及びＲ9が共に水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、かつＲ7がモノ（低級アルキル）アミノ又はジ（低級アルキル）アミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシ又は水素であり、Ｒ7、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンである。）
【００１０】
更に別の態様において、本発明は、以下の一般式（Ｉ）〜（ＩＶ）を有する４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物並びにその医薬的に許容しうる塩及び許容しない塩を提供する。
一般式（Ｉ）
【化５】
（式中、それぞれの場合において、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は一緒になって下記の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
アジド 水素 水素
ジメチルアミノ 水素 アジド
水素 水素 アミノ
水素 水素 アジド
水素 水素 ニトロ
ジメチルアミノ 水素 アミノ
アシルアミノ 水素 水素
水素 水素 アシルアミノ
アミノ 水素 ニトロ
水素 水素 （Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ
アミノ 水素 アミノ
水素 水素 エトキシチオカルボニルチオ
ジメチルアミノ 水素 アシルアミノ
ジメチルアミノ 水素 ジアゾニウム
ジメチルアミノ クロロ アミノ
水素 クロロ アミノ
アミノ クロロ アミノ
アシルアミノ クロロ アシルアミノ
アミノ クロロ 水素
アシルアミノ クロロ 水素
モノアルキルアミノ クロロ アミノ
ニトロ クロロ アミノ
ジメチルアミノ クロロ アシルアミノ
ジメチルアミノ クロロ ジメチルアミノ
ジメチルアミノ 水素 水素
水素 水素 ジメチルアミノ）及び、
【００１１】
一般式（ＩＩ）
【化６】
【化７】
（式中、それぞれの場合において、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は一緒になって下記の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
アジド 水素 水素
ジメチルアミノ 水素 アジド
水素 水素 アミノ
水素 水素 アジド
水素 水素 ニトロ
ジメチルアミノ 水素 アミノ
アシルアミノ 水素 水素
水素 水素 アシルアミノ
アミノ 水素 ニトロ
水素 水素 （Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ
アミノ 水素 アミノ
水素 水素 エトキシチオカルボニルチオ
ジメチルアミノ 水素 アシルアミノ
水素 水素 ジアゾニウム
水素 水素 ジメチルアミノ
ジアゾニウム 水素 水素
エトキシチオカルボニルチオ 水素 水素
ジメチルアミノ クロロ アミノ
アミノ クロロ アミノ
アシルアミノ クロロ アシルアミノ
水素 クロロ アミノ
アミノ クロロ 水素
アシルアミノ クロロ 水素
モノアルキルアミノ クロロ アミノ
ニトロ クロロ アミノ）及び、
【００１２】
一般式（ＩＩＩ）
【化８】
（式中、Ｒ8は水素又はハロゲンであり、Ｒ9はニトロ、（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ及びエトキシチオカルボニルチオからなる群より選ばれる。）及び、
一般式（ＩＶ）
【化９】
（式中、それぞれの場合において、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は一緒になって下記の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
アミノ 水素 水素
ニトロ 水素 水素
アジド 水素 水素
ジメチルアミノ 水素 アジド
水素 水素 アミノ
水素 水素 アジド
水素 水素 ニトロ
ブロモ 水素 水素
ジメチルアミノ 水素 アミノ
アシルアミノ 水素 水素
水素 水素 アシルアミノ
アミノ 水素 ニトロ
水素 水素 （Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ
アミノ 水素 アミノ
ジエチルアミノ 水素 水素
水素 水素 エトキシチオカルボニルチオ
ジメチルアミノ 水素 メチルアミノ
ジメチルアミノ 水素 アシルアミノ
ジメチルアミノ クロロ アミノ
アミノ クロロ アミノ
アシルアミノ クロロ アシルアミノ
水素 クロロ アミノ
アミノ クロロ 水素
アシルアミノ クロロ 水素
モノアルキルアミノ クロロ アミノ
ニトロ クロロ アミノ）
【００１３】
更に別の態様において、本発明は下記の式を有するテトラサイクリン化合物並びにその医薬的に許容しうる塩及び許容しない塩を提供する。
【化１０】
【化１１】
【化１２】
（式中、
Ｒ7は水素、アミノ、ニトロ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ、エトキシチオカルボニルチオ、アジド、アシルアミノ、ジアゾニウム、シアノ及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ6-aは水素及びメチルからなる群より選ばれ、
Ｒ6及びＲ5は水素及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ8は水素及びハロゲンからなる群より選ばれ、
Ｒ9は水素、アミノ、アジド、ニトロ、アシルアミノ、ヒドロキシ、エトキシチオカルボニルチオ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジアゾニウム、ジ（低級アルキル）アミノ及びＲＣＨ（ＮＨ2）ＣＯ（式中、Ｒは水素又は低級アルキルである）からなる群より選ばれ、
Ｒa及びＲbは水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル及び１−メチルエチルからなる群より選ばれ、
【００１４】
但し、Ｒa及びＲbは共に水素ではなく、
Ｒc及びＲdは独立して（ＣＨ2）nＣＨＲe（式中、ｎは０又は１であり、Ｒeは水素、アルキル、ヒドロキシ、低級（Ｃ1〜Ｃ3）アルコキシ、アミノ及びニトロからなる群より選ばれる）であり、
Ｗは（ＣＨＲe）m（式中、ｍは０〜３であり、Ｒeは前記と同様である。）、ＮＨ、Ｎ（Ｃ1〜Ｃ3）の直鎖又は分岐したアルキル、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｃ1〜Ｃ4）の直鎖又は分岐したアルコキシからなる群より選ばれる。）
【００１５】
本発明は、テトラサイクリン化合物の非抗菌的投与量からの利益を得る状態を患う哺乳類を治療する方法を含んでいる。前記の状態の例には、過剰なコラーゲンの分解、過剰なＭＭＰ酵素活性、過剰なＴＮＦ活性、過剰な一酸化窒素活性、過剰なＩＬ−１活性、過剰なエラスターゼ活性、骨密度の過剰な減少、過剰なタンパク質分解、過剰な筋肉の消耗、コラーゲンの過剰なグリコシル化、過剰なＣＯＸ−２活性、不十分な骨タンパク質合成、不十分なインターロイキン１０生産又は過剰なホスホリパーゼＡ2活性により特徴付けられる状態が含まれる。本発明の治療方法は、本発明のテトラサイクリン化合物の有効量を哺乳類に投与する工程を含んでいる。
本発明のこれら及びその他の利点は、本明細書に示される詳細な説明及び実施例から理解されるだろう。詳細な説明及び実施例は本発明の理解を高めるものであり、本発明の範囲を制限することを意図するものではない。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
発明の詳細な説明
本発明の特に好ましい化合物は、４−デジメチルアミノテトラサイクリン分子の７及び／又は９位にＤ環置換基を有している。これらの化合物には、７−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−ニトロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−アミノ−９−ニトロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７、９−ジアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−エトキシチオカルボニルチオ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−ニトロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アミノ−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−アミノ−９−ニトロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７、９−ジアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−エトキシチオカルボニルチオ、５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アミノ−８−クロロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−ニトロ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アセトアミド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン及び９−エトキシチオカルボニルチオ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンが含まれる。
【００１７】
更に、Ｄ環をＣ８部位においてハロゲン化して、８−ハロデジメチルアミノテトラサイクリン誘導体を提供してもよい。本明細書で使用するとき、ハロゲンは塩素、フッ素、臭素及びヨウ素であることができる。８−ハロ−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体の例は、９−アミノ−８−クロロ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アミノ−８−クロロ−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン及び９−アミノ−８−クロロ−６−デジメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンである。
本発明の１つの態様において、４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体は、Ｃ４部位においてオキシム、ＮＨ−アルキル又はＮ−ＮＨ−アルキル基により置換されている。これらの化合物並びにその医薬的に許容しうる塩及び許容しない塩は以下の式を有する。
【化１３】
【化１４】
（式中、Ｒ7は水素、アミノ、ニトロ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ、エトキシチオカルボニルチオ、アジド、アシルアミノ、ジアゾニウム、シアノ及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ6-aは水素及びメチルからなる群より選ばれ、
Ｒ6及びＲ5は水素及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ4はＮＯＨ、Ｎ−ＮＨ−Ａ及びＮＨ−Ａ（式中、Ａは低級アルキル基である）からなる群より選ばれ、
Ｒ8は水素及びハロゲンからなる群より選ばれ、
Ｒ9は水素、アミノ、アジド、ニトロ、アシルアミノ、ヒドロキシ、エトキシチオカルボニルチオ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ及びＲＣＨ（ＮＨ2）ＣＯ（式中、Ｒは水素又は低級アルキルである）からなる群より選ばれ、
【００１８】
但し、Ｒ4がＮＯＨ、Ｎ−ＮＨ−アルキル又はＮＨ−アルキルであり、かつＲ7、Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＯＨであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6が水素又はヒドロキシルであり、Ｒ7がハロゲンであり、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮ−ＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシルであり、かつＲ7、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であり、かつＲ7が水素、アミノ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ又はヒドロキシルであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6及びＲ9が共に水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、かつＲ7がモノ（低級アルキル）アミノ又はジ（低級アルキル）アミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシ又は水素であり、かつＲ7、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンである。）
【００１９】
新規な４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体の環Ａ〜Ｄ上の置換基の立体化学が特定されていない場合、両方のエピマーが含まれることが意図されることが理解されるだろう。
本明細書で使用するとき、ＮＨ−アルキル、Ｎ−ＮＨ−アルキル、アルコキシ及びアルキル基は、炭素数１〜２６の直鎖又は分岐した、飽和又は不飽和のアルキル炭素鎖を含んでいる。例えば、アルキル基には１０〜２６の炭素原子を含む脂肪族アルキルが含まれる。飽和脂肪族アルキル基の例には、ラウリル、ミリスチル、パルミチル、ステアリルなどが含まれる。不飽和脂肪族アルキル基の例には、パルミトレイル、オレイル、リノレイル、リノレニルなどが含まれる。
更にアルキル基は低級アルキル基を含み、低級アルキル基には炭素数１〜６の直鎖又は分岐した、飽和又は不飽和の炭素鎖が含まれる。低級アルキル基の例には、メチル、エチル、プロピル、ブチル、イソブチル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル及びベンジルが含まれる。アシル基のアルキル部分は前記と同様である。アシル基の例には、アセチル、プロピオニル、ブチリル及び前記の脂肪酸を含むアシル基が含まれる。
【００２０】
好ましいオキシム化合物には、７−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−ニトロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−アミノ−９−ニトロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７、９−ジアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−エトキシチオカルボニルチオ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノ−テトラサイクリン、９−アミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−ニトロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アミノ−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−アミノ−９−ニトロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン（９−ジメチルアミノアセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリンとしても知られる）、７，９−ジアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−エトキシチオカルボニルチオ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アミノ−８−クロロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−ニトロ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アセトアミド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノ−テトラサイクリン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノ−テトラサイクリン及び９−エトキシチオカルボニルチオ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリンが含まれる。
【００２１】
更にＤ環をＣ８部位においてハロゲン化して、８−ハロ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン化合物を提供してもよい。例としては、９−アミノ−８−クロロ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アミノ−８−クロロ−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン及び９−アミノ−８−クロロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリンが含まれる。
好ましいヒドラゾン化合物には、７−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−ジメチルアミノ−９−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−ニトロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−アミノ−９−ニトロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７，９−ジアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−エトキシチオカルボニルチオ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−ジメチルアミノ−９−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−ジメチルアミノ−９−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−ニトロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アミノ−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−アミノ−９−ニトロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７，９−ジアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−ジメチルアミノ−９−アミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−エトキシチオカルボニルチオ、５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−ジメチルアミノ−９−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アミノ−８−クロロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−ニトロ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アセトアミド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン及び９−エトキシチオカルボニルチオ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾンが含まれる。
【００２２】
Ｄ環をＣ８部位においてハロゲン化して、８−ハロ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−ヒドラゾン化合物を提供してもよい。例としては、９−アミノ−８−クロロ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アミノ−８−クロロ−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン及び９−アミノ−８−クロロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾンが含まれる。
本発明の新規な４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体には、Ａ環のＣ４部位にＮＨ−アルキル（アルキルアミノ）置換基を有する化合物も含まれる。これらの化合物は前記と同様にＣ５、Ｃ６、Ｃ６ａ、Ｃ７、Ｃ８及び／又はＣ９部位に置換基を有している。例は９−アジド−８−クロロ−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンである。
更に、ヘキサノイルアミノ基を本発明の全ての化合物のＤ環のＣ９部位に追加することができる。例として４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ヘキサノイルアミノテトラサイクリンが含まれるが、これに限定されるものではない。
本発明の別の態様において、４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体は前記化合物のマンニッヒ（Mannich）誘導体である。前記誘導体には、例えば下記一般式を有する化合物並びにその医薬的に許容しうる塩及び許容しない塩が含まれる。
【化１５】
【化１６】
【化１７】
（式中、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は前記と同様であり、
Ｒa及びＲbは水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル及び１−メチルエチルからなる群より選ばれ、
【００２３】
但し、Ｒa及びＲbは共に水素ではなく、Ｒc及びＲdは独立して（ＣＨ2）nＣＨＲe（式中、ｎは０又は１であり、Ｒeは水素、アルキル、ヒドロキシ、低級（Ｃ1〜Ｃ3）アルコキシ、アミノ及びニトロからなる群より選ばれる）であり、
Ｗは（ＣＨＲe）m（式中、ｍは０〜３であり、Ｒeは前記と同様である）、ＮＨ、Ｎ（Ｃ1〜Ｃ3）の直鎖又は分岐したアルキル、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｃ1〜Ｃ4）の直鎖又は分岐したアルコキシからなる群より選ばれる。）
【００２４】
例えば、ｍが０のとき、Ｒc及びＲdは３〜５員環、例えばピロリジノ又は置換ピロリジノ環、モルホリノ又は置換モルホリノ環又はピペラジノ又は置換ピペラジノ環において互いに結合している。
これらのマンニッヒ誘導体には、例えばＣ２部位にピペラジン−１−イル、４−メチルピペラジン−１−イル、モルホリン−１−イル又はピロリジン−１−イルピロリジン置換基を有する化合物が含まれる。これらの化合物は前記と同様にＣ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ６ａ、Ｃ７、Ｃ８及び／又はＣ９部位に置換基を有している。前記化合物の例にはＮ−モルホリン−１−イルメチル−４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリン、Ｎ−ピロリジン−１−イルメチル−４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリン、Ｎ−モルホリン−１−イルメチル−４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ヘキサノイルアミノテトラサイクリン、Ｎ−ピロリジン−１−イルメチル−４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ヘキサノイルアミノテトラサイクリンが含まれるがこれらに限定されるものではない。
【００２５】
本発明の新規な４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物又はその塩は、当該技術分野において既知の方法により容易に調製又は購入することができる開始反応を用いてＣ７、Ｃ８及び／又はＣ９部位におけるＤ環の置換により製造されるだろう。例えば、Mitscher, L. A., The Chemistry of the Tetracycline Antibiotics, Marcel Dekker, New York (1978), Ch. 6, Hlavka, J. and J. H. Boothe, The Tetracyclines, Springer-Verlag, Berlin-Heidelberg, page 18 (1985)及び米国特許第４，７０４，３８３号、第３，２２６，４３６号、第３，０４７，６２６号、第３，５１８，３０６号及び第５，５３２，２２７号を参照のこと。
例えば、７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを既知の出発反応物を用い、前記化合物を強酸及び金属硝酸塩と反応させることにより、Ｄ環のＣ９部位のニトロ化を行い、新規な９−ニトロ化合物を製造してもよい。本発明に適切な強酸の例は、硫酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸又は過塩素酸である。適切な金属硝酸塩は、例えば硝酸カルシウム、硝酸カリウム又は硝酸ナトリウムである。Ｄ環のＣ９部位はニトロ化されて、対応の９−ニトロ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−ニトロ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物を形成する。
【００２６】
Ｄ環のＣ９部位のアミノ化は、９−ニトロ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、例えば９−ニトロ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−ニトロ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを、適切に担持された触媒、例えばラネーニッケル、酸化白金又は炭素担持パラジウムの存在下、水素で処理することにより達成されるだろう。次いで、これを濾過し、有機溶媒、例えばエーテルで洗浄する。Ｃ９置換基を還元して、対応の９−アミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−アミノ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物を形成する。
Ｄ環のＣ９部位におけるアミノ基をアシルアミド基、好ましくはスルホンアミド基に変換してもよい。例えば、９−アミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−アミノ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物を、溶媒に分散した適切な酸スカベンジャーの存在下、塩化アシル、無水アシル、混合無水スルホニル、塩化スルホニル又は無水スルホニルで処理する。酸スカベンジャーは、炭酸水素ナトリウム、酢酸ナトリウム、ピリミジン、トリエチルアミン、Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド、Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）トリフルオロアセトアミド又は塩基性イオン交換樹脂から適切に選択される。アシル化反応に適切な溶媒には、水、水−テトラヒドロフラン、Ｎ−メチルピロリドン、１，３−ジメチル−２−イミダゾリジオン、ヘキサメチルホスホラミド、１，３−ジメチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−２（１Ｈ）−ピリミジノン又は１，２−ジメトキシエタンが含まれる。Ｃ９アミノ基をアセトアミドに変換して、例えば対応の９−アセトアミド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−アセトアミド−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを形成してもよい。
ジアゾニウム基をＤ環のＣ９部位において置換することもできる。典型的には、９−アミノ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体、例えば９−アミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−アミノ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを、０．１Ｎ ＨＣｌのメタノール溶液中、ｎ−ブチル硝酸塩で処理して、対応の９−ジアゾニウム誘導体、例えば９−ジアゾニウム−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−ジアゾニウム−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを形成する。
【００２７】
９−ジアゾニウム−４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体、例えば９−ジアゾニウム−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−ジアゾニウム−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを、メタノール性塩酸＋トリアゾ化合物、例えばアジ化ナトリウムで処理して、９−アジド誘導体、例えば９−アジド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−アジド−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを形成することができる。
代替として、エトキシチオカルボニルチオ基を、Ｄ環のＣ９部位で置換することができる。例えば、９−ジアゾニウム−４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体、例えば９−ジアゾニウム−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−ジアゾニウム−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを酸金属塩、例えばキサントゲン酸エチルカリウム（potassium ethyl xanthate）で処理して、対応の９−エトキシチオカルボニルチオ誘導体、例えば９−エトキシチオカルボニルチオ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ又は９−エトキシチオカルボニルチオ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを形成する。
前記の反応は、４−デジメチルアミノテトラサイクリン分子のＣ９部位における置換について言及している。出発反応物及び使用する条件に依存して、Ｃ７部位における置換が更に存在し、７−置換−４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体、例えば７−ジアゾニウム−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は７−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを誘導してもよい。７−置換誘導体を９−置換誘導体から分離し、以下のようにして精製することもできる。
【００２８】
本発明の新規な７又は９−アジド−４−デジメチルアミノ誘導体を、７又は９−アジド−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを強酸、例えばハロゲン化水素、ハロゲン化水素で飽和した硫酸又はハロゲン化水素で飽和したメタンスルホン酸で処理することによりＣ８部位でハロゲン化することができる。ハロゲン化水素が塩化水素であるとき、単離される生成物は８−クロロ（７又は９）アミノ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体である。特に好ましいハロゲン化化合物は９−アセトアミド−８−クロロ−７−ジメチルアミノ−６−デオキシ−６−デメチル−４−デジメチルアミノテトラサイクリンである。
１つの態様において、本発明の４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物は、オキシム（ＮＯＨ）、アルキルアミノ（ＮＨ−アルキル）又はアルキルヒドラゾン（Ｎ−ＮＨ−アルキル）基をＡ環のＣ４部位に有している。これらの化合物は、既知の方法を使用して作成することができる。例えば、４−ヒドロキシテトラシクロキシドを、例えばメタノール又はエタノールなどの溶媒中アルカリ条件下でヒドロキシアミン又はエチルヒドラジンで処理してもよい。Ｃ４部位における置換が起こり、４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン及び４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−アルキルヒドラゾン化合物をアルカリ金属塩として単離することができる。例えば、米国特許第３，６２２．６２７号、第３，１５９，６７５号及び第３，３４５，３７０号明細書を参照のこと。既知の方法（すなわち、ハロゲン化、アミノ化又はニトロ化）を使用したＤ環におけるＣ７、Ｃ８及び／又はＣ９部位の置換は、本発明の新規な４−オキシム、４−ヒドラゾン及び４−アミノアルキル化合物を生じる。
マンニッヒ誘導体は、当該技術分野において既知の方法により作成することができる。例えば、前記のテトラサイクリン誘導体をホルムアルデヒド及び適切なアミンで処理してもよい。
特定の態様の例が、テトラサイクリン誘導体として前記にて記載される。しかしながら、本発明の化合物はテトラサイクリン誘導体に限定されるものではない。本発明は更に前記のテトラサイクリン誘導体と同様にサンサイクリン（sancycline）、ミノサイクリン及びドキシサイクリンの４−デジメチルアミノ誘導体及び４−置換４−デジメチルアミノ誘導体を含むが、これらに限定されるものではない。
【００２９】
本発明は、４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物の酸付加塩及び金属塩を含む塩を含んでいる。前記の塩は、医薬的に許容しうる塩及び許容しえない酸並びに金属を用いて周知の手順により形成される。「医薬的に許容しうる」とは、本発明の化合物の毒性を実質的に増加させない塩形成性の酸及び金属を意味する。
適切な塩の例には、例えば塩酸、ヨウ化水素酸、臭化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸、硫酸などの鉱酸、例えば酒石酸、酢酸、クエン酸、リンゴ酸、安息香酸、グリコール酸、グルコン酸、グロン酸、コハク酸、アリールスルホン酸、例えばｐ−トルエンスルホン酸などの有機酸が含まれる。医薬的に許容しえない酸付加塩は治療には有用ではないが、新規物質の単離及び精製には役立つ。更に、医薬的に許容しない塩は、医薬的に許容しうる塩に製造に有用である。このグループの中で、より一般的な塩にはフッ化水素酸及び過塩素酸を用いて形成された塩が含まれる。ハイドロフルオライド塩は、塩酸中での溶解及び形成したハイドロクロライドの結晶化による医薬的に許容しうる塩、特にハイドロクロライドの製造に特に有用である。過塩素酸塩は新規生成物の精製及び結晶化に有用である。
金属塩も一般的に生成され、種々の目的に対して有用であるが、医薬的に許容しうる金属塩は特に有用である。なぜなら、治療において有用であるからである。医薬的に許容しうる金属には、より一般的にはナトリウム、カリウム、原子番号２０含む番号までのアルカリ土類金属、すなわちマグネシウム及びカルシウム、更にアルミニウム、亜鉛、鉄及びマンガンが含まれる。金属塩には複合塩、すなわちテトラサイクリンの分野において十分に認識されている金属キレートが含まれる。
精製後、本発明の新規化合物は、当該技術分野において既知の標準的方法により都合よく精製することができる。いくつかの適切な例には、適切な溶媒からの結晶化又は分配カラムクロマトグラフィーが含まれる。
【００３０】
本発明の新規４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物は、in vivo、in vitro及びex vivoで、例えば培養組織、器官又は細胞系だけではなく生きている哺乳類において使用することができる。哺乳類には、イヌ及びネコなどの愛玩動物、ラット及びマウスなどの実験動物、ウマ及び雌ウシなどの家畜だけでなく、例えばヒトも含まれる。本明細書で使用するとき、組織とは、一緒になってある特別の機能を発揮する同様に特化した細胞の集合をいう。培養細胞系には、全ての哺乳類細胞、例えば上皮細胞、内皮細胞、赤血球、白血球などが含まれる。より詳細には、ヒト末梢血単球、滑膜繊維芽細胞などである。
本発明は、テトラサイクリン化合物の非抗菌的投与量からの利益を得る状態を患う哺乳類を治療する方法を含んでいる。これらの状態又は疾患は、過剰なコラーゲンの分解、過剰なＭＭＰ酵素活性、過剰なＴＮＦ活性、過剰な一酸化窒素活性、過剰なＩＬ−１活性、過剰なエラスターゼ活性、骨密度の過剰な減少、過剰なタンパク質分解、過剰な筋肉の消耗、コラーゲンの過剰なグリコシル化、過剰なＣＯＸ−２活性、不十分な骨タンパク質合成、不十分なインターロイキン１０生産又は過剰なホスホリパーゼＡ2活性により特徴付けられる。本発明の治療方法は、本発明のテトラサイクリン化合物の有効量を哺乳類に投与する工程を含んでいる。
本明細書で使用する用語「過剰」とは、哺乳類又は哺乳類細胞においてある病理学的問題を導く、通常の活性よりも増加した活性を意味する。
本発明のin vivoでの実施は、医学的及び獣医学的疾患、状態及び症候群の軽減又は緩和における適用を許容する。特に本発明は、有効量のテトラサイクリン化合物を哺乳類へ投与することによる、腹部大動脈瘤、角膜の潰瘍形成、歯周病、糖尿病、真性糖尿病（diabetes mellitus）、強皮病、早老症、肺疾患、癌、移植片対宿主病、抑制された骨髄機能の疾患、血小板減少症、人工関節の緩み（prosthetic joint loosening）、脊椎関節症、骨粗鬆症、パジェット病、自己免疫疾患、全身性エリテマトーデス、急性又は慢性炎症状態、腎疾患又は膠原病を含む状態又は疾患を患う哺乳類の治療方法を含んでいる。
【００３１】
本発明のテトラサイクリン化合物により治療可能な癌性状態には、癌（carcinomas）、芽細胞腫、肉腫、例えばカポジ肉腫、神経膠腫並びに１２大癌：前立腺癌、乳癌、肺癌、結腸直腸癌、膀胱癌、非ホジキンリンパ腫、子宮癌、黒色腫、腎臓癌、白血病、卵巣癌及び膵臓癌が含まれるが、これらに限定されるものではない。
本発明のテトラサイクリン化合物により治療可能な急性又は慢性炎症状態には、例えば炎症性腸疾患、関節炎、骨関節炎、関節リウマチ、膵炎、腎炎、糸球体腎炎、敗血症、敗血性ショック、リポ多糖内毒素性ショック（lipopolysaccharide endotoxin shock）、多臓器不全又は乾癬が含まれる。
本発明により治療可能な肺疾患には、例えばＡＲＤＳ（成人呼吸窮迫症候群）、嚢胞性線維症、肺気腫、毒薬の吸入による急性肺損傷が含まれる。毒薬の例には、酸、化学薬品、産業毒及び軍用毒、煙及びその他の燃焼による有毒生成物である。
本発明の新規テトラサイクリン化合物は、腎疾患の治療に使用することもできる。腎疾患のいくつかの例は、慢性腎不全、急性腎不全、腎炎又は糸球体腎炎である。
本明細書において使用するテトラサイクリン化合物の有効量は、疾患又は状態の治療の特定化された結果を達成するのに有効な量である。好ましくは、テトラサイクリン化合物又はその誘導体は、抗菌活性をほとんど又は全く有しない量で提供される。テトラサイクリン化合物又はその誘導体は、微生物の増殖を有意に阻害しない場合、効率的に抗菌性ではない。したがって、本発明の方法は、テトラサイクリン化合物の抗菌特性を減少又は除去するように化学的に修飾されたテトラサイクリン誘導体を有利に使用することができる。前記の化学的に修飾されたテトラサイクリンの使用は本発明において好ましい。なぜなら、前記の化合物は抗菌性テトラサイクリンよりも高いレベルで使用することができ、一方、前記化合物の抗菌量での使用においてしばしば伴う特定の不利益、例えば有益な微生物の無差別の殺傷や耐性微生物の出現を回避することができるからである。
【００３２】
哺乳類についての最大投与量は、好ましくない又は耐え難い副作用を引き起こさない最大の投与量である。最小投与量は、有効性が最初に観察される最小の投与量である。例えば、テトラサイクリン化合物は、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約３０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは約１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１８ｍｇ／ｋｇ／日の量で投与することができる。いずれにしても、開業医は当該技術分野の技術及び知識によるガイドを受け、本発明は前記の効果を達成するのに有効な量を限定なしに含んでいる。
本発明の方法は、テトラサイクリン誘導体を、哺乳類細胞又は哺乳類における疾患又は状態を治療するのに有効な量で投与又は提供することを含んでいる。テトラサイクリン誘導体の投与は種々の方法により達成されるだろう。培養細胞系（in vitro）において、テトラサイクリン誘導体は、細胞と有効量のテトラサイクリン誘導体とを直接接触させることにより投与することができる。
生きている哺乳類（in vivo）において、本発明のテトラサイクリン誘導体は、制御された送達系を含む非経口及び経腸経路により全身投与することができる。例えば、本発明のテトラサイクリン誘導体を、好ましい送達経路である静脈内投与（例えば、静脈内注射）により容易に投与することができる。静脈内投与は、当該技術分野における開業医により理解されるように、テトラサイクリン誘導体を適切な医薬担体（ビヒクル）又は賦形剤中で混合することにより達成することができる。
経口又は経腸用途も企図され、例えば錠剤、カプセル、丸剤、エリキシル剤、懸濁液、シロップ、ウエハ、チューインガムなどの製剤を用いてテトラサイクリン誘導体を提供することができる。
【００３３】
代替として、テトラサイクリン誘導体の送達は局所適用を含むことができる。したがって担体は、好ましくは局所用途に適したものである。そのような局所用途に適していると考えられる組成物には、ゲル、塗剤、ローション、クリーム軟膏などが含まれる。テトラサイクリン誘導体を、支持基材又はマトリックスなどを用いて組み込んで、皮膚に直接適用することができる、あらかじめ包装された外科用又は尻用（bum）包帯又は絆創膏を提供してもよい。それゆえ、ビヒクル中、約２５％（ｗ／ｗ）までの量のテトラサイクリン誘導体の局所投与は、適応症に依存して適切なものである。より好ましくは、約０．１％〜約１０％のテトラサイクリン誘導体の適用が、疾患又は状態の治療に有効であると考えられる。これらの量は治療対象に有意な毒性を誘導するものではないと考えられる。
例えば、特定のケースにおいて、限定された体内分布のみを有するテトラサイクリン化合物は局在化活性に対して好ましいだろう。これらの非吸収性ＣＭＴの局所投与は、口頭の病変において好ましいだろう。なぜなら、ＣＭＴはたとえ嚥下しても有意な程度では全く吸収されないからである。
テトラサイクリン誘導体の組み合わせた又は同調的な局所投与及び全身投与も本発明の下で企図される。例えば、非吸収性テトラサイクリン化合物は局所投与をすることができ、一方、対象において実質的に吸収され、かつ全身分布に有効であることがきるテトラサイクリン化合物は全身投与をすることができる。
【００３４】
光毒性
１つの態様において、本発明は光毒性が低い化合物のクラスに関する。潜在的に光毒性なテトラサイクリン誘導体を同定するために、３Ｔ３ニュートラルレッド光毒性アッセイを用いた。このアッセイは、Toxicology In Vitro 12: 305-327.1998に記載されている。
要約すると、３Ｔ３細胞を９６ウェルプレートに播き、一晩インキュベートする。培養培地を除去し、ＣＭＴの連続希釈物を含みフェノールレッドを含まないハンクス平衡塩溶液（Hanks' Balanced Salt Solution）（１化合物につき２プレート）で置換する。最初の３７℃で１時間にインキュベートの後、１つのプレートを、太陽シミュレーターからの５ジュール／ｃｍ2 ＵＶＡ／白色光に暴露する。他方は暗中に維持する。次いでプレートをすすぎ、再培養（refed）し、２４時間インキュベートする。細胞の可視性をニュートラルレッドの取り込みにより測定する。光毒性を、頒布されたガイドラインに従い、光暴露を行った投与と行わない投与との間の相対毒性により測定する（基準化合物には、市販のテトラサイクリン、ドキシサイクリン及びミノサイクリンが含まれる）。相対光毒性を光阻害因子（ＰＩＦ）と呼ぶことにする。本アッセイにおける化合物の光毒性応答は、in vivoでの挙動と一致する。
光毒性が低いテトラサイクリン誘導体のクラスは、ミノサイクリンの光毒性の７５％未満、好ましくは７０％未満、より好ましくは６０％未満、特に好ましくは５０％以下の光毒性を有する。最適には、低光毒性テトラサイクリン誘導体のクラスはＰＩＦ値＝１を有する。ＰＩＦ値＝１のとき、化合物は測定可能な光毒性を有しないと考えられる。このクラスのメンバーには、以下の一般式を有するテトラサイクリン化合物が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００３５】
【化１８】
（式中、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は、それぞれの場合において、一緒になって以下の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
水素 水素 アミノ
水素 水素 パルミタミド（palmitamide）
水素 水素 ジメチルアミノ）及び、
【化１９】
（式中、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は、それぞれの場合において、一緒になって以下の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
水素 水素 アセトアミド
水素 水素 ジメチルアミノアセトアミド
水素 水素 ニトロ
水素 水素 アミノ）及び、
【化２０】
（式中、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9はそれぞれ水素、水素及びニトロである。）
【実施例】
【００３６】
実施例
以下の実施例は本発明の更なる認識を提供するのに役立つが、どんな場合であっても本発明の有効な範囲を制限することを意味しない。
実施例１
４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ニトロテトラサイクリンサルフェート
１ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンの２５ｍｌ濃硫酸溶液に、０℃下、１．０５ｍｍｏｌの硝酸カリウムを添加した。得られた溶液を氷浴温度下で１５分間攪拌し、１リットルの攪拌した冷エーテル中へ注いだ。沈殿した固体を落ち着かせ（settle）、大部分の溶媒をデカントした。
残った物質を、焼結ガラス漏斗を通して濾過し、集めた固体を冷エーテルで十分に洗浄した。生成物を真空乾燥機中で一晩乾燥した。
実施例２
９−アミノ−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
実施例１より得た９−ニトロ化合物の３００ｍｇのエタノール溶液３０ｍｌに、５０ｍｇのＰｔＯ2を添加した。水素の理論量が吸収されるまで、混合物を大気圧下で水素化した。この系に窒素を流した。触媒ＰｔＯ2を濾過し、濾液を３００ｍｌのエーテルへ滴下した。分離した生成物を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
【００３７】
実施例３
９−アセトアミド−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
実施例２より得た５００ｍｇの９−アミノ−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンサルフェートの１．３−ジメチル−２−イミダゾリジノンの十分に攪拌した冷溶液２．０ｍｌに、５００ｍｇ炭酸水素ナトリウムを添加し、次いで０．２１ｍｌの塩化アセチルを添加した。混合物を室温下で３０分間攪拌し、濾過し、濾液を５００ｍｌのエーテルへ滴下した。分離した生成物を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例４
４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ジアゾニウムテトラサイクリンサルフェート
実施例２より得た０．５ｇの９−アミノ−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンサルフェートの氷浴中で冷却した０．１Ｎ塩酸のメタノール溶液１０ｍｌに、０．５ｍｌのｎ−ブチルニトレートを添加した。溶液を氷浴温度下で３０分間攪拌し、次いで２５０ｍｌのエーテルに注いだ。分離した生成物を濾過し、エーテルで洗浄し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例５
９−アジド−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
実施例４より得た０．３ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ジアゾニウムテトラサイクリンサルフェートの０．１Ｎメタノール性塩酸溶液１０ｍｌに、０．３３ｍｍｏｌのアジ化ナトリウムを添加した。混合物を室温下で１．５時間攪拌した。次いで反応混合物を２００ｍｌのエーテル中へ注いだ。分離した生成物を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
【００３８】
実施例６
９−アミノ−８−クロロ−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−テトラサイクリンサルフェート
実施例４より得た１ｇの９−アジド−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンハイドロクロライドをＨＣｌで飽和した濃硫酸１０ｍｌ中に０℃下で溶解した。混合物を氷冷温度下で１．５時間攪拌し、次いで５００ｍｌの冷エーテルへゆっくりと滴下した。分離した生成物を濾過し、エーテルで洗浄し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例７
４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−エトキシチオカルボニルチオ−テトラサイクリンサルフェート
実施例４より得た１．０ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ジアゾニウムテトラサイクリンサルフェートの水溶液１５ｍｌを、１．１５ｍｍｏｌのキサントゲン酸エチルカリウム水溶液１５ｍｌへ添加した。
混合物を室温下で１時間攪拌した。生成物を分離し、濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例８Ａ
ニトロ化の一般的手順
１ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンの濃硫酸溶液２５ｍｌに、０℃下、１ｍｍｏｌの硝酸カリウムを攪拌しながら添加した。反応溶液を１５分間攪拌し、次いで１００ｍｌの砕いた氷中へ注いだ。水性溶液を各２０ｍｌのブタノールで５回抽出した。ブタノール抽出物を各１０ｍｌの水で３回洗浄し、真空中で２５ｍｌまで濃縮した。沈殿した明るい黄色の結晶性固体を濾過し、２ｍｌのブタノールで洗浄し、真空下、６０℃で２時間乾燥した。この固体は２つのモノニトロ異性体の混合物であった。
【００３９】
実施例８Ｂ
４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−９−ニトロテトラサイクリン
４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンからのニトロ化生成物（２つの異性体の混合物）９８０ｍｇのメタノール溶液２５ｍｌに、十分な量のトリエチルアミンを添加して固体を溶解した。濾過した溶液（ｐＨ９．０）を濃硫酸でｐＨ５．２に調節した。結晶性の黄色の固体（２３６ｍｇ）を得た（収率２９％）。この時点で物質は極めて純粋であり、少量の７−異性体のみが含まれている。最終の精製を、珪藻土充填カラム及び溶媒系：クロロホルム：ブタノール：０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ２）（１６：１：１０）を用いた液相分配クロマトグラフィーにより達成した。
実施例９
４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−７−ニトロテトラサイクリン
実施例８より得たメタノール濾液を濃硫酸により直ぐにｐＨ１．０に調節した。明るい黄色の結晶性の固体をサルフェート塩として得た。精製した遊離塩基は、サルフェート塩の水性溶液（２５ｍｇ／ｍｌ）を２Ｎ炭酸ナトリウムでｐＨ５．２に調節することにより得た。
実施例１０
９−アミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリン
実施例８で調製した９−ニトロ化合物３００ｍｌのエタノール溶液３０ｍｌに、５０ｍｇのＰｔＯ2を添加した。混合物を、理論量の水素が吸収されるまで大気圧下で水素化した。系に窒素を流した。触媒であるＰｔＯ2を濾過し、濾液を３００ｍｌのエタノール溶液へ滴下した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
【００４０】
実施例１１
９−アセトアミド−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
実施例１０より得た５００ｍｇの９−アミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェートの１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノンの十分に攪拌した冷溶液２．０ｍｌに、５００ｍｌの炭酸水素ナトリウムを添加し、続いて０．２１ｍｌの塩化アセチルを添加した。混合物を室温下で３０分間攪拌し、濾過し、濾液を５００ｍｌのエーテルへ滴下した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例１２
４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−９−ジアゾニウムテトラサイクリンサルフェート
実施例１０で得た０．５ｇの９−アミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェートの、氷浴中で冷却したメタノールの０．１Ｎ塩酸溶液１０ｍｌに、０．５ｍｌのｎ−ブチルニトレートを添加した。溶液を氷浴温度で３０分間攪拌し、２５０ｍｌのエーテルへ注いだ。分離した固体を濾過し、エーテルで洗浄し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例１３
９−アジド−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
実施例１２の４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−９−ジアゾニウムテトラサイクリンサルフェート０．３ｍｍｏｌの、０．１Ｎメタノール性塩酸溶液１０ｍｌに、０．３３ｍｍｏｌのアジ化ナトリウムを添加した。混合物を室温下で１．５時間間攪拌した。反応混合物を２００ｍｌのエーテルに注いだ。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
【００４１】
実施例１４
９−アミノ−８−クロロ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
実施例１３より得た１ｇの９−アジド−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンハイドロクロライドを、ＨＣｌで飽和した濃硫酸１０ｍｌ中に、０℃下で溶解した。混合物を氷浴温度下で１．５時間攪拌し、次いで５００ｍｌの冷エーテルへゆっくりと滴下した。分離した固体を濾過し、洗浄し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例１５
４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−９−エトキシチオカルボニルチオテトラサイクリンサルフェート
実施例１２より得た１．０ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−９−ジアゾニウムテトラサイクリンサルフェートの水溶液１５ｍｌに、１．１５ｍｍｏｌのキサントゲン酸エチルカリウムの水溶液１５ｍｌを添加した。混合物を室温下で１時間攪拌した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例１６
９−ジメチルアミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
実施例１０より得た９−アミノ化合物１００ｍｇのエチレングリコールモノメチルエーテル溶液１０ｍｌに、０．０５ｍｌの濃硫酸、０．４ｍｌの４０％水性ホルムアルデヒド溶液及び１００ｍｇの１０％炭素担持パラジウム触媒を添加した。混合物を大気圧、室温下で２０分間水素化した。触媒を濾過し、濾液を真空下で乾燥するまで蒸発させた。残渣を５ｍｌメタノールに溶解し、この溶液を１００ｍｌのエーテルへ添加した。分離した生成物を濾過し、乾燥した。収量９８ｍｇ。
【００４２】
実施例１７
７−アミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリン
この化合物は手順Ａ又はＢを用いて作成することができる。
手順Ａ：実施例１より得た３００ｍｇの７−ニトロ化合物のエタノール溶液３０ｍｌに、５０ｍｇのＰｔＯ2を添加した。混合物を、理論量の水素が吸収されるまで大気圧下で水素化した。この系に窒素を流した。触媒であるＰｔＯ2を濾過し、濾液を３００ｍｌのエーテルに添加した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
手順Ｂ：１ｇの６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−テトラサイクリンを、７．６ｍｌのＴＨＦ及び１０．４ｍｌのメタンスルホン酸中に−１０℃下で溶解した。混合物を０℃まで暖めた後、０．８６ｇのジベンジルアゾジカルボキシレートを添加し、混合物を０℃で２時間攪拌して、７−［１，２−ビス（カルボベンジルオキシ）ヒドラジノ］−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンを得た。１ｍｍｏｌのこの物質の２−メトキシエタノール溶液７０ｍｌ及び３００ｍｇの１０％Ｐｄ−Ｃを室温下で水素化して、７−アミノ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−テトラサイクリンを得た。
実施例１８
７−アミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン
１ｇの６−デオキシ−５−ヒドロキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン３を、７．６ｍｌのＴＨＦ及び１０．４ｍｌのメタンスルホン酸中、−１０℃下で溶解した。混合物を０℃まで暖めた後、０．８６ｇのジベンジルアゾカルボキシレートのＴＨＦ溶液０．５ｍｌを添加し、混合物を０℃下で２時間攪拌して７−［１，２−ビス（カルボベンジルオキシ）ヒドラジノ］−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリンを得た。１ｍｍｏｌのこの物質の２−メトキシエタノール溶液７０ｍｌ及び３００ｍｇの１０％Ｐｄ−Ｃを室温下で水素化して、７−アミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリンを得た。
【００４３】
実施例１９
７−アセトアミド−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリンサルフェート
実施例１８より得た５００ｍｇの７−アミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリンサルフェートの１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノンの十分に攪拌した冷溶液２ｍｌに、５００ｍｌの炭酸水素ナトリウムを添加し、続いて０．２１ｍｌの塩化アセチルを添加した。混合物を室温下で３０分間攪拌し、濾過し、濾液を５００ｍｌのエーテルへ滴下した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例２０
４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシ−７−ジアゾニウムテトラサイクリンハイドロクロライド
実施例２０で得た０．５ｇの７−アミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリンサルフェートの０．１Ｎ塩酸の氷浴中で冷却したメタノール溶液１０ｍｌに、０．５ｍｌのｎ−ブチルニトレートを添加した。溶液を氷浴温度で３０分間攪拌し、２５０ｍｌのエーテルへ注いだ。分離した固体を濾過し、エーテルで洗浄し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例２１
７−アジド−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリン
実施例２０より得た０．３ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシ−７−ジアゾニウムテトラサイクリンハイドロクロライドの、０．１Ｎメタノール性塩酸溶液１０ｍｌに、０．３３ｍｍｏｌのアジ化ナトリウムを添加した。混合物を室温下で１．５時間間攪拌した。反応混合物を２００ｍｌのエーテルに注いだ。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
【００４４】
実施例２２
７−アミノ−８−クロロ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリンサルフェート
実施例２１より得た１ｇの７−アジド−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリンサルフェートを、（既に塩化水素で飽和した）濃硫酸１０ｍｌ中に、０℃下で溶解した。混合物を氷浴温度下で１．５時間攪拌し、次いで５００ｍｌの冷エーテルへゆっくりと滴下した。分離した固体を濾過し、エーテルで洗浄し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例２３
４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシ−７−エトキシチオカルボニルチオテトラサイクリン
実施例２０より得た１．０ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシ−７−ジアゾニウムテトラサイクリンハイドロクロライドの水溶液１５ｍｌに、１．１５ｍｍｏｌのキサントゲン酸エチルカリウムの水溶液１５ｍｌを添加した。混合物を室温下で１時間攪拌した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例２４
７−ジメチルアミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリンサルフェート
７−アミノ化合物１００ｍｇのエチレングリコールモノメチルエーテル溶液１０ｍｌに、０．０５ｍｌの濃硫酸、０．４ｍｌの４０％水性ホルムアルデヒド溶液及び１００ｍｇの１０％炭素担持パラジウム触媒を添加した。混合物を大気圧、室温下で２０分間、水素で還元した。触媒を濾過し、濾液を真空下で乾燥するまで蒸発させた。残渣を５ｍｌのメタノールに溶解し、この溶液を１００ｍｌのエーテルへ添加した。分離した生成物を濾過し、乾燥した。収量７８ｍｇ。
【００４５】
実施例２５
７−ジエチルアミノ−４−デジメチルアミノ−５−ヒドロキシテトラサイクリンサルフェート
７−アミノ化合物１００ｍｇのエチレングリコールモノメチルエーテル溶液１０ｍｌに、０．０５ｍｌの濃硫酸、０．４ｍｌのアセトアルデヒド及び１００ｍｇの１０％炭素担持パラジウム触媒を添加した。混合物を大気圧、室温下で２０分間水素化した。触媒を濾過し、濾液を真空下で乾燥するまで蒸発させた。残渣を５ｍｌのメタノールに溶解し、この溶液を１００ｍｌのエーテルへ添加した。
分離した生成物を濾過し、乾燥した。
実施例２６
４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−７−ジアゾニウムテトラサイクリンハイドロクロライド
実施例１７で得た０．５ｇの７−アミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェートの０．１Ｎ塩酸の氷浴中で冷却したメタノール溶液１０ｍｌに、０．５ｍｌのｎ−ブチルニトレートを添加した。溶液を氷浴温度で３０分間攪拌し、２５０ｍｌのエーテルへ注いだ。分離した固体を濾過し、エーテルで洗浄し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例２７
７−アジド−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリン
実施例２６より得た０．３ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−７−ジアゾニウムテトラサイクリンの０．１Ｎメタノール性塩酸溶液１０ｍｌに、０．３３ｍｍｏｌのアジ化ナトリウムを添加した。混合物を室温下で１．５時間間攪拌した。反応混合物を２００ｍｌのエーテルに注いだ。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
【００４６】
実施例２８
７−アミノ−８−クロロ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
１ｇの７−アジド−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６デオキシテトラサイクリンサルフェートを、（既に塩化水素で飽和した）濃硫酸１０ｍｌ中に、０℃下で溶解した。混合物を氷浴温度下で１．５時間攪拌し、次いで５００ｍｌの冷エーテルへゆっくりと滴下した。分離した固体を濾過し、洗浄し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例２９
４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−７−エトキシチオカルボニルチオテトラサイクリン
実施例２６より得た１．０ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−７ジアゾニウムテトラサイクリンハイドロクロライドの水溶液１５ｍｌに、１．１５ｍｍｏｌのキサントゲン酸エチルカリウムの水溶液１５ｍｌを添加した。混合物を室温下で１時間攪拌した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例３０
７−ジメチルアミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
実施例２６より得た７−アミノ化合物１００ｍｇのエチレングリコールモノメチルエーテル溶液１０ｍｌに、０．０５ｍｌの濃硫酸、０．４ｍｌの４０％水性ホルムアルデヒド溶液及び１００ｍｇの１０％炭素担持パラジウム触媒を添加した。混合物を大気圧、室温下で２０分間、水素を用いて還元した。触媒を濾過し、濾液を真空下で乾燥するまで蒸発させた。残渣を５ｍｌのメタノールに溶解し、この溶液を１００ｍｌのエーテルへ添加した。分離した生成物を濾過し、乾燥した。
【００４７】
実施例３１
９−アセトアミド−８−クロロ−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デオキシ−６−デメチルテトラサイクリン
実施例６より得た５００ｍｇの９−アミノ−８−クロロ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−６−デメチル−７−ジメチルアミノテトラサイクリンサルフェートの１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノンの十分に攪拌した冷溶液２ｍｌに、５００ｍｌの炭酸水素ナトリウムを添加し、続いて０．２１ｍｌの塩化アセチルを添加した。混合物を室温下で３０分間攪拌し、濾過し、濾液を５００ｍｌのエーテルへ滴下した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例３２
８−クロロ−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デオキシ−６−デメチル−９−エトキシチオカルボニルチオテトラサイクリン
１．０ｍｍｏｌの８−クロロ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−６デメチル−７−ジメチルアミノ−９−ジアゾニウムテトラサイクリンハイドロクロライドの水溶液１５ｍｌに、１．１５ｍｍｏｌのキサントゲン酸エチルカリウムの水溶液１５ｍｌを添加した。混合物を室温下で１時間攪拌した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例３３
８−クロロ−９−ジメチルアミノ−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デオキシ−６−デメチルテトラサイクリンサルフェート
実施例６より得た９−アミノ化合物１０ｍｇのエチレングリコールモノメチルエーテル溶液１０ｍｌに、０．０５ｍｌの濃硫酸、０．４ｍｌのアセトアルデヒド及び１００ｍｇの１０％炭素担持パラジウム触媒を添加した。混合物を大気圧、室温下で２０分間、水素で還元した。触媒を濾過し、濾液を真空下で乾燥するまで蒸発させた。残渣を５ｍｌのメタノールに溶解し、溶液を１００ｍｌのエーテルへ添加した。分離した生成物を濾過し、乾燥した。
【００４８】
実施例３４
Ｎ−（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル−４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリン
５８ｍｇ（３７％）ホルムアルデヒド（０．７２ｍｍｏｌ）の水溶液を、２０３ｍｇ（０．４９ｍｍｏｌ）の４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンのエチレングリコールジメチルエーテル溶液５．０ｍｌへ添加した。混合物を室温下で０．５時間攪拌した。５６ｍｇ（０．５６ｍｍｏｌ）の１−メチルピペラジンを添加し、得られた混合物を一晩攪拌し、２０分間還流した。次いで混合物を冷却し、固体生成物を濾過により集めた。次いで固体生成物を溶媒で洗浄し、真空濾過により乾燥した。
実施例３５
Ｎ−（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル−４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ヘキサノイルアミノテトラサイクリン
４９ｍｇの３７％ホルムアルデヒド（０．６０ｍｍｏｌ）の水溶液を、１４６ｍｇ（０．３０ｍｍｏｌ）の４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ヘキサノイルアミノテトラサイクリンのエチレングリコールジメチルエーテル溶液５．０ｍｌに添加した。混合物を室温下で０．５時間攪拌した。次いで６０ｍｇ（０．６０ｍｍｏｌ）の１−メチルピペラジンを添加し、得られた混合物を一晩攪拌し、２０分間還流した。次いで混合物を冷却し、固体生成物を濾過により集めた。次いで固体生成物を溶媒で洗浄し、真空濾過により乾燥した。
実施例３６
４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ヘキサノイルアミノテトラサイクリン
１．５４g（７．２ｍｍｏｌ）の無水ヘキサン酸及び１５０ｍｇの１０％Ｐｄ／Ｃ触媒を、６ｍｌの１，４−ジオキサン及び６．０ｍｌのメタノール中の３００ｍｇ（０．７２ｍｍｏｌ）の４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンへ添加した。混合物を室温下で一晩水素化した。触媒を濾過により除去し、濾液を真空下で濃縮した。残渣を７ｍｌの酢酸エチル中に溶解し、５０ｍｌのヘキサンで摩砕して固体生成物を生成した。固体生成物を濾過し、真空濾過により乾燥した。
【００４９】
本発明の好ましい態様であると現在考えられるものが記載されたが、当業者はその他の態様及び更なる態様を本発明の精神から離れることなしに行うことができることを認識するだろう。またそのような修飾及び改変は全て請求の範囲の真の範囲内に含まれることが意図される。
実施例３７
光毒性の決定
ＢＡＬＢ／ｃ ３Ｔ３（ＣＣＬ−１６３）細胞をＡＴＣＣより入手し、Ｌ−グルタミン（４ｍＭ）及び１０％新生仔ウシ血清を補充した、抗生物質を含まないダルベッコ最小基本培地（４．５ｇ／ｌグルコース）（ＤＭＥＭ）中で培養した。作業用の細胞バンクを調製したところ、マイコプラズマを含んでいないことが見いだされた。細胞を９６ウェルプレート中、試験品で処理した後、ストレプトマイシンサルフェート（１００μｇ／ｍｌ）及びペニシリン（１００ＩＵ／ｍｌ）を培地に添加した。
テトラサイクリン誘導体の連続希釈を、ＤＭＳＯ中、１００×〜最終試験濃度の濃度で調製した。次いでＤＭＳＯ中のＣＭＴ希釈物を、細胞への適用のためにハンクス緩衝塩溶液（ＨＢＳＳ）中に溶解した。最終のＤＭＳＯ濃度は、処理培養及び対照培養において１％であった。投与量範囲を見いだすアッセイのために、８つの連続希釈が１／２対数刻みで１００〜０．０３ｍｇ／ｍｌの範囲をカバーした。一方、決定用アッセイ（definitive assay）では、予想される５０％毒性のポイントを中心に１／４対数刻み調製した６〜８の投与量を使用した。多くの場合において、ＵＶ光なしの処理に対する投与量範囲はＵＶ光を用いて選択された投与量範囲とは異なっていた。１００ｐｇ／ｍｌが、投与溶液によるＵＶ吸収により引き起こされる擬陰性の結果を防ぐために推奨される最高の投与量である。
【００５０】
対照：各アッセイは負（溶媒）及び正の対照の両方を含んでいた。負の対照の１２ウェルを各９６ウェルプレートにおいて使用した。クロルプロマジン（Sigma）を正の対照として用い、ＣＭＴと同様に調製して投与した。
太陽シミュレーター：ＵＶＡ Ｈ１フィルター（３２０〜４００ｎｍ）を備えたDermalight ＳＯＬ３太陽シミュレーターを適切な高さに調節した。９６ウェルマイクロタイタープレートのふた（lid）を通過するエネルギーの測定は、較正したＵＶラジオメーターＵＶＡセンサーを使用して行った。シミュレーターの高さを、１．７±０．１ｍ／Ｗｃｍ2のＵＶＡエネルギー（得られる線量は１Ｊ／ｃｍ2／１０分間）を送達するように調節した。
【００５１】
光毒性アッセイ：処理２４時間前に１μｌの完全培地に１０4の３Ｔ３細胞を播くことにより、各試験物質についての二つ組のプレートを調製した。処理の前に培地を除去し、細胞を１２５μｌのあらかじめ暖めたＨＢＳＳで１回洗浄した。５０μｌ試験品希釈物を適切なウェルに添加し、プレートを約１時間インキュベーターへ戻した。１時間のインキュベート後、光刺激アッセイ用に指定したプレートを、室温下、１．７±０．１ｍ／Ｗｃｍ2のＵＶＡ光に５０±２分間（ふたをつけたまま）暴露し、５Ｊ／ｃｍ2の照射線量を得た。細胞毒性アッセイに指定した二つ組のプレートを、暗中、室温下で５０±２分間維持した。５０分間の暴露期間後、試験品希釈物プレートからデカントし、細胞を１２５μｌのＨＢＳＳで１回洗浄した。１００μｌの培地を全てのウェルに添加し、細胞を前記と同様にして２４±１時間インキュベートした。
２４時間のインキュベート後、培地をデカントし、培地を含む１００μｌのニュートラルレッドを各ウェルに添加した。プレートをインキュベーターに戻し、約３時間インキュベートした。３時間後、培地をデカントし、各ウェルを２５０μｌのＨＢＳＳで１回すすいだ。プレートをブロットしてＨＢＳＳを除去し、１００μｌのニュートラルレッド溶媒を各ウェルに添加した。室温下、２０分間（振盪しながら）最小のインキュベートし、５５０ｎｍにおける吸光度を、リファレンスとしてブランクの外側セルを用いたプレートリーダーにより測定した。相対的な生存は、同一のプレートにおいて、試験品及び正の対照処理グループにより採取されたニュートラルレッドの量と、負の対照処理グループにより採取されたニュートラルレッドの量とを比較することにより得た。ＵＶＡ暴露及び非暴露についてのＩＣ50値は可能なときにいつでも決定した。１つの投与量範囲の知見及び少なくとも２つの決定的な痕跡（definitive trail）を各ＣＭＴについて行った。
【００５２】
光毒性の決定：テトラサイクリン誘導体の光毒性は、光阻害因子（ＰＩＦ）により測定することができる。ＰＩＦは、ＵＶＡなしのＩＣ50［ＩＣ50（−ＵＶＡ）］とＵＶＡありのＩＣ50［ＩＣ50（＋ＵＶＡ）］とを比較することにより決定した。
ＰＩＦ＝ＩＣ50（−ＵＶＡ）／ＩＣ50（＋ＵＶＡ）
両方のＩＣ50値を決定することができる場合、光毒薬及び非光毒薬とを区別する因子の境界値は５である。５よりも大きい因子は、試験化合物の光毒性の性質を示している。
化学薬品が＋ＵＶＡでのみ細胞毒性であり、−ＵＶＡで試験したときは細胞毒性ではない場合、因子を計算することができない。ただし、あるレベルの光毒性の可能性を示すはっきりとした結果を有するだろう。この場合、「＞ＰＩＦ」を計算することができ、最高の試験可能な投与量（−ＵＶＡ）を「＞ＰＩＦ」の計算に使用するだろう。
＞ＰＩＦ＝最大投与量（−ＵＶＡ）／ＩＣ50（＋ＵＶＡ）
化学品が試験した最高の投与量までに細胞毒性（生存度の５０％の減少）を示さないため、ＩＣ50値（−ＵＶＡ）及びＩＣ50（＋ＵＶＡ）の両方を計算することができない場合、このことは光毒性の可能性の欠如を示すだろう。
【００５３】
構造のインデックス
【化２１】
【化２２】
【化２３】
【化２４】
【化２５】
【００５４】
本発明の態様の例は以下の通りである。
（１）以下の式を有するテトラサイクリン化合物、その医薬的に容しうる塩及び許容しない塩。
【化２６】
（式中、
Ｒ7は水素、アミノ、ニトロ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ、エトキシチオカルボニルチオ、アジド、アシルアミノ、ジアゾニウム、シアノ及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ6-aは水素及びメチルからなる群より選ばれ、
Ｒ6及びＲ5は水素及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ8は水素及びハロゲンからなる群より選ばれ、
Ｒ9は水素、アミノ、アジド、ニトロ、アシルアミノ、ヒドロキシ、エトキシチオカルボニルチオ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジアゾニウム、ジ（低級アルキル）アミノ及びＲＣＨ（ＮＨ2）ＣＯ（式中、Ｒは水素又は低級アルキルである）からなる群より選ばれ、
但し、Ｒ7及びＲ9のいずれかが水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であり、かつＲ7が水素、アミノ、ニトロ、ハロゲン、ジメチルアミノ又はジエチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6及びＲ9が共に水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、かつＲ7が水素、アミノ、ニトロ、ハロゲン又はジエチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシルであり、Ｒ5、Ｒ7及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-a、Ｒ6及びＲ5が共に水素であり、Ｒ9がメチルアミノであり、かつＲ7がジメチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6が水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、Ｒ9がメチルアミノであり、かつＲ7がジメチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6、Ｒ5、Ｒ9が共に水素であり、Ｒ7がシアノであるとき、Ｒ8はハロゲンである。）
（２）以下の式を有するテトラサイクリン化合物、その医薬的に容しうる塩及び許容しない塩。
【化２７】
（式中、
Ｒ7は水素、アミノ、ニトロ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ、エトキシチオカルボニルチオ、アジド、アシルアミノ、ジアゾニウム、シアノ及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ6-aは水素及びメチルからなる群より選ばれ、
Ｒ6及びＲ5は水素及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ4はＮＯＨ、Ｎ−ＮＨ−Ａ及びＮＨ−Ａ（式中、Ａは低級アルキル基である）からなる群より選ばれ、
Ｒ8は水素及びハロゲンからなる群より選ばれ、
Ｒ9は水素、アミノ、アジド、ニトロ、アシルアミノ．ヒドロキシ、エトキシチオカルボニルチオ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ及びＲＣＨ（ＮＨ2）ＣＯ（式中、Ｒは水素又は低級アルキルである）からなる群より選ばれ、
但し、Ｒ4がＮＯＨ、Ｎ−ＮＨ−アルキル又はＮＨ−アルキルであり、かつＲ7、Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＯＨであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6が水素又はヒドロキシルであり、Ｒ7がハロゲンであり、かつＲ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮ−ＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシルであり、かつＲ7、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であり、かつＲ7が水素、アミノ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ又はヒドロキシルであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6及びＲ9が共に水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、かつＲ7がモノ（低級アルキル）アミノ又はジ（低級アルキル）アミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシ又は水素であり、Ｒ7、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンである。）
（３）以下の式から選ばれる４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物、その医薬的に許容しうる塩及び許容しない塩。
【化２８】
（式中、それぞれの場合において、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は一緒になって下記の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
アジド 水素 水素
ジメチルアミノ 水素 アジド
水素 水素 アミノ
水素 水素 アジド
水素 水素 ニトロ
ジメチルアミノ 水素 アミノ
アシルアミノ 水素 水素
水素 水素 アシルアミノ
アミノ 水素 ニトロ
水素 水素 （Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ
アミノ 水素 アミノ
水素 水素 エトキシチオカルボニルチオ
ジメチルアミノ 水素 アシルアミノ
ジメチルアミノ 水素 ジアゾニウム
ジメチルアミノ クロロ アミノ
水素 クロロ アミノ
アミノ クロロ アミノ
アシルアミノ クロロ アシルアミノ
アミノ クロロ 水素
アシルアミノ クロロ 水素
モノアルキルアミノ クロロ アミノ
ニトロ クロロ アミノ
ジメチルアミノ クロロ アシルアミノ
ジメチルアミノ クロロ ジメチルアミノ
ジメチルアミノ 水素 水素
水素 水素 ジメチルアミノ）及び、
【化２９】
（式中、それぞれの場合において、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は一緒になって下記の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
アジド 水素 水素
ジメチルアミノ 水素 アジド
水素 水素 アミノ
水素 水素 アジド
水素 水素 ニトロ
ジメチルアミノ 水素 アミノ
アシルアミノ 水素 水素
水素 水素 アシルアミノ
アミノ 水素 ニトロ
水素 水素 （Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ
アミノ 水素 アミノ
水素 水素 エトキシチオカルボニルチオ
ジメチルアミノ 水素 アシルアミノ
水素 水素 ジアゾニウム
水素 水素 ジメチルアミノ
ジアゾニウム 水素 水素
エトキシチオカルボニルチオ 水素 水素
ジメチルアミノ クロロ アミノ
アミノ クロロ アミノ
アシルアミノ クロロ アシルアミノ
水素 クロロ アミノ
アミノ クロロ 水素
アシルアミノ クロロ 水素
モノアルキルアミノ クロロ アミノ
ニトロ クロロ アミノ）及び、
【化３０】
（式中、Ｒ8は水素又はハロゲンであり、Ｒ9はニトロ、（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ及びエトキシチオカルボニルチオからなる群より選ばれる。）及び、
【化３１】
（式中、それぞれの場合において、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は一緒になって下記の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
アミノ 水素 水素
ニトロ 水素 水素
アジド 水素 水素
ジメチルアミノ 水素 アジド
水素 水素 アミノ
水素 水素 アジド
水素 水素 ニトロ
ブロモ 水素 水素
ジメチルアミノ 水素 アミノ
アシルアミノ 水素 水素
水素 水素 アシルアミノ
アミノ 水素 ニトロ
水素 水素 （Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ
アミノ 水素 アミノ
ジエチルアミノ 水素 水素
水素 水素 エトキシチオカルボニルチオ
ジメチルアミノ 水素 メチルアミノ
ジメチルアミノ 水素 アシルアミノ
ジメチルアミノ クロロ アミノ
アミノ クロロ アミノ
アシルアミノ クロロ アシルアミノ
水素 クロロ アミノ
アミノ クロロ 水素
アシルアミノ クロロ 水素
モノアルキルアミノ クロロ アミノ
ニトロ クロロ アミノ）
（４）以下の式で示されるテトラサイクリン化合物、その医薬的に許容しうる塩、許容しない塩。
【化３２】
【化３３】
【化３４】
（式中、
Ｒ7は水素、アミノ、ニトロ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ、エトキシチオカルボニルチオ、アジド、アシルアミノ、ジアゾニウム、シアノ及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ6-aは水素及びメチルからなる群より選ばれ、
Ｒ6及びＲ5は水素及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ8は水素及びハロゲンからなる群より選ばれ、
Ｒ9は水素、アミノ、アジド、ニトロ、アシルアミノ、ヒドロキシ、エトキシチオカルボニルチオ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジアゾニウム、ジ（低級アルキル）アミノ及びＲＣＨ（ＮＨ2）ＣＯ（式中、Ｒは水素又は低級アルキルである）からなる群より選ばれ、
Ｒa及びＲbは水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル及び１−メチルエチルからなる群より選ばれ、
但し、Ｒa及びＲbは共に水素ではなく、
Ｒc及びＲdは独立して（ＣＨ2）nＣＨＲe（式中、ｎは０又は１であり、Ｒeは水素、アルキル、ヒドロキシ、低級（Ｃ1〜Ｃ3）アルコキシ、アミノ及びニトロからなる群より選ばれる）であり、
Ｗは（ＣＨＲe）m（式中、ｍは０〜３であり、Ｒeは前記と同様である。）、ＮＨ、Ｎ（Ｃ1〜Ｃ3）の直鎖又は分岐したアルキル、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｃ1〜Ｃ4）の直鎖又は分岐したアルコキシからなる群より選ばれる。）
（５）以下の条件：
Ｒ7及びＲ9のいずれかが水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であり、かつＲ7が水素、アミノ、ニトロ、ハロゲン、ジメチルアミノ又はジエチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6及びＲ9が共に水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、かつＲ7が水素、アミノ、ニトロ、ハロゲン又はジエチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシルであり、Ｒ5、Ｒ7及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-a、Ｒ6及びＲ5が共に水素であり、Ｒ9がメチルアミノであり、かつＲ7がジメチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6が水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、Ｒ9がメチルアミノであり、かつＲ7がジメチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6、Ｒ5、Ｒ9が共に水素であり、Ｒ7がシアノであるとき、Ｒ8はハロゲンである、
を有する、前記（４）記載の方法。
（６）ＰＩＦが約１である、前記（１）記載のテトラサイクリン化合物。
（７）以下の化合物からなる群より選ばれる、前記（６）記載のテトラサイクリン化合物。
【化３５】
（式中、それぞれの場合において、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は一緒になって下記の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
水素 水素 アミノ
水素 水素 パルミタミド）及び、
【化３６】
（式中、それぞれの場合において、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は一緒になって下記の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
水素 水素 アセトアミド
水素 水素 ジメチルアミノアセトアミド
水素 水素 ニトロ
水素 水素 アミノ）及び、
【化３７】
（式中、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9はそれぞれ水素、水素及びニトロである。）
（８）ＰＩＦが１〜２の間の値である、前記（１）に記載のテトラサイクリン化合物。
（９）以下の一般式を有する、前記（８）に記載のテトラサイクリン化合物。
【化３８】
（式中、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9はそれぞれ水素、水素及びジメチルアミノである。）
（１０）テトラサイクリン化合物の非抗菌的投与量からの利益を得る状態を患う哺乳類を治療する方法であって、
前記（１）、（２）、（３）又は（４）に記載のテトラサイクリン化合物の有効量を該哺乳類へ投与する工程を含み、
該状態が、過剰なコラーゲンの分解、過剰なＭＭＰ酵素活性、過剰なＴＮＦ活性、過剰な一酸化窒素活性、過剰なＩＬ−１活性、過剰なエラスターゼ活性、骨密度の過剰な減少、過剰なタンパク質分解、過剰な筋肉の消耗、コラーゲンの過剰なグリコシル化、過剰なＣＯＸ−２活性、不十分な骨タンパク質合成、不十分なインターロイキン１０生産又は過剰なホスホリパーゼＡ2活性により特徴付けられる、
ことを特徴とする方法。
（１１）前記の状態が、腹部大動脈瘤、角膜の潰瘍形成、歯周病、糖尿病、真性糖尿病、強皮病、早老症、肺疾患、癌、移植片対宿主病、抑制された骨髄機能の疾患、血小板減少症、人工関節の緩み、脊椎関節症、骨粗鬆症、パジェット病、自己免疫疾患、全身性エリテマトーデス、急性又は慢性炎症状態、腎疾患又は膠原病である、前記（１０）に記載の方法。
（１２）前記急性又は慢性炎症状態には、例えば炎症性腸疾患、関節炎、骨関節炎、関節リウマチ、膵炎、腎炎、糸球体腎炎、敗血症、敗血性ショック、リポ多糖内毒素性ショック、多臓器不全又は乾癬である、前記（１１）に記載の方法。
（１３）前記肺疾患が、ＡＲＤＳ、嚢胞性線維症、肺気腫又は毒薬の吸入による急性肺損傷である、前記（１１）に記載の方法。
（１４）前記腎疾患が、慢性腎不全、急性腎不全、腎炎又は糸球体腎炎である、前記（１１）に記載の方法。
【技術分野】
【０００１】
本件出願は、米国仮出願第６０／１０８，９４８号（１９９８年１１月１８日出願）の一部継続出願である。前記出願は参照することにより本明細書に組み込まれる。
発明の属する技術分野
本発明は、新規な４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体、前記誘導体の製造方法及び前記誘導体の使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来技術
化合物テトラサイクリンは以下の一般構造を示す。
【化１】
環核の付番方式は以下の通りである。
【化２】
テトラサイクリンは５−ＯＨ（テラマイシン）及び７−Ｃｌ（オーレオマイシン）誘導体と同様に天然に存在する周知の抗生物質である。天然テトラサイクリンは、その抗菌特性を失うことなしに修飾することができるだろう。ただし、構造の特定要素は維持されなければならない。基本のテトラサイクリン構造にされてもよく又はされていなくてもよい修飾は、Mitscher(The Chemistry of Tetracyclines, Chapter 6, Marcel Dekker, Publishers, New York (1978))により検討されている。前記Mitscherの文献によると、テトラサイクリン環系の部位５〜９における置換基は、抗菌特性の完全な喪失なしに修飾されてもよい。しかしながら、基本の環系に対する変化又は部位１〜４及び１０〜１２における置換基の置換は、一般的に、抗菌活性が実質的に喪失した又は有効でない抗菌活性を有する合成テトラサイクリンを導く。化学的に修飾された非抗菌性テトラサイクリン（以下、ＣＭＴという）の例は４−デジメチルアミノテトラサイクリンである。
いくつかの４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体が米国特許第３，０２９，２８４号及び第５，１２２，５１９号明細書に開示されている。これらの誘導体には、Ｄ環のＣ７及びＣ９部位に水素及びその他の置換基を有する６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン及び５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンが含まれる。これらの置換基には、アミノ、ニトロ、ジ（低級アルキル）アミノ及びモノ（低級アルキル）アミノ又はハロゲンが含まれる。６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体及び５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体は、抗菌剤として有用であるといわれている。
【０００３】
Ａ環のＣ４部位にオキシム基を有するその他の４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体は、米国特許第３，６２２，６２７号及び第３，８２４，２８５号明細書に開示されている。これらのオキシム誘導体はＣ７部位に置換基として水素及びハロゲンを有しており、７−ハロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン及び７−ハロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリンが含まれる。
アルキルアミノ（ＮＨ−アルキル）及びアルキルヒドラゾン（Ｎ−ＮＨ−アルキル）基は、４−デジメチルアミノテトラサイクリンのＡ環のＣ４部位において置換されている。これらの化合物はその抗菌特性について知られている。米国特許第３，３４５，３７０号、第３，６０９，１８８号、第３，６２２，６２７号、第３，８２４，２８５号、第３，６２２，６２７号、第３，５０２，６６０号、第３，５０９，１８４号、第３，５０２，６９６号、第３，５１５，７３１号、第３，２６５，７３２号、第５，１１２，５１９号、第３，８４９，４９３号、第３，７７２，３６３号及び第３，８２９，４５３号明細書を参照のこと。
抗菌特性に加えて、テトラサイクリンはその多数の用途を有することが開示されている。例えば、テトラサイクリンはコラーゲン分解酵素、例えばマトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）（コラゲナーゼ（ＭＭＰ−１）、ゼラチナーゼ（ＭＭＰ−２）及びストロメライシン（ＭＭＰ−３）を含む）の活性を阻害することが知られている(Golubら、J. Periodont. Res. 20: 12-23 (1985); Golubら、Crit. Revs. Oral Biol. Med. 2: 297-322 (1991); 米国特許第4,666,897号、第4,704,383号、第4,935,411号及び第4,935,412号明細書)。更にテトラサイクリンは、哺乳類の骨格筋における消耗（wasting）及びタンパク質分解を阻害すること（米国特許第５，０４５，５３８号）及び哺乳類細胞におけるＩＬ−１０生産を増強することが知られている。
更に、テトラサイクリンは骨タンパク質合成を増強し（米国特許第Ｒｅ．３４，６５６号明細書）、臓器培養において骨吸収を減少させる（米国特許第４，７０４，３８３号明細書）ことが示されている。
同様に、米国特許第５，５３２，２２７号明細書（Golubら）は、テトラサイクリンがタンパク質の過剰なグリコシル化を緩和することができることを開示している。特にテトラサイクリンは、糖尿病におけるコラーゲンの過剰なグリコシル化により生ずる過剰なコラーゲン架橋を阻害する。
【０００４】
テトラサイクリンは、米国特許第５，５３２，２２７号明細書に開示されるように、炎症状態、例えば乾癬などに関連する過剰なホスホリパーゼＡ2活性を阻害することが知られている。更に、テトラサイクリンはシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ２）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、一酸化窒素及びＩＬ−１（インターロイキン−１）を阻害することが知られている。
これらの特性は、テトラサイクリンを多数の疾患の治療において有用なものとする。例えば、非抗菌性テトラサイクリンを含むテトラサイクリンが関節炎の治療に有効であるとする提案が多数存在する。例えば、Greenwaldら "Tetracyclines Suppress Metalloproteinase Activity in Adjuvant Arthritis and, in Combination with Flurbiprofen, Ameliorate Bone Damage," Journal of Rheumatology 19: 927-938 (1992); Greenwaldら, "Treatment of Destructive Arthritic Disorders with MMP Inhibitors: Potential Role of Tetracyclines in Inhibition of Matrix Metalloproteinases: Therapeutic Potential," Annals of the New York Academy of Sciences 732: 181-198 (1994); Kloppenburgら "Minocycline in Active Rheumatoid Arthritis." Arthritis Rheum 37: 629-636 (1994) ;Ryanら, "Potential of Tetracycline to Modify Cartilage Breakdown in Osteoarthritis," Current Opinion in Rheumatology 8: 238-247 (1996) ; O'Dellら, "Treatment of Early Rheumatoid Arthritis with Minocycline or Placebo," Arthritis Rheum 40: 842-848 (1997)を参照のこと。
テトラサイクリンは、皮膚病の治療における使用が提案されている。例えば、Whiteら(Lancet. Apr. 29. p.966 (1989))は、テトラサイクリンであるミノサイクリンは、過剰量のコラゲナーゼに関連すると考えられている生命を危うくする皮膚状態である栄養障害性表皮水疱症の治療に有効であることを報告している。
更に研究は、テトラサイクリン及びメタロプロテイナーゼ阻害剤は腫瘍の進行(DeClerckら, Annals N. Y. Acad. Sci., 732: 222-232 (1994))、骨吸収(Rifkinら, Annals N. Y. Acad. Sci.,732: 165-180 (1994))、血管形成(Maragoudakisら, Br. J. Pharmacol., 111: 894-902 (1994))を阻害すること、更に抗炎症特性を有すること(Ramamurthyら, Annals N.Y. Acad. Sci., 732.427-430 (1994))を示唆している。
【０００５】
前記の記載に基づくと、テトラサイクリンは異なる治療法において有効であることが見いだされている。しかしながら、新規な４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体、前記誘導体の製造方法及び前記誘導体の異なる種類の疾患又は状態の治療のための使用に対するニーズが存在する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
発明の要約
下記式のテトラサイクリン化合物並びにその医薬的に許容しうる塩及び許容しない塩により、前記及びその他の本発明の目的を達成することができることが発見された。
【化３】
（式中、
Ｒ7は水素、アミノ、ニトロ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ、エトキシチオカルボニルチオ、アジド、アシルアミノ、ジアゾニウム、シアノ及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ6-aは水素及びメチルからなる群より選ばれ、
Ｒ6及びＲ5は水素及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ8は水素及びハロゲンからなる群より選ばれ、
Ｒ9は水素、アミノ、アジド、ニトロ、アシルアミノ、ヒドロキシ、エトキシチオカルボニルチオ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジアゾニウム、ジ（低級アルキル）アミノ及びＲＣＨ（ＮＨ2）ＣＯ（式中、Ｒは水素又は低級アルキルである）からなる群より選ばれ、
【０００７】
但し、Ｒ7及びＲ9のいずれかが水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であり、かつＲ7が水素、アミノ、ニトロ、ハロゲン、ジメチルアミノ又はジエチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6及びＲ9が共に水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、かつＲ7が水素、アミノ、ニトロ、ハロゲン又はジエチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシルであり、Ｒ5、Ｒ7及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-a、Ｒ6及びＲ5が共に水素であり、Ｒ9がメチルアミノであり、かつＲ7がジメチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6が水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、Ｒ9がメチルアミノであり、かつＲ7がジメチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6、Ｒ5、Ｒ9が共に水素であり、Ｒ7がシアノであるとき、Ｒ8はハロゲンである。）
【０００８】
別の態様において、本発明は下記式のテトラサイクリン化合物並びにその医薬的に許容しうる塩及び許容しない塩を提供する。
【化４】
（式中、
Ｒ7は水素、アミノ、ニトロ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ、エトキシチオカルボニルチオ、アジド、アシルアミノ、ジアゾニウム、シアノ及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ6-aは水素及びメチルからなる群より選ばれ、
Ｒ6及びＲ5は水素及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ4はＮＯＨ、Ｎ−ＮＨ−Ａ及びＮＨ−Ａ（式中、Ａは低級アルキル基である）からなる群より選ばれ、
Ｒ8は水素及びハロゲンからなる群より選ばれ、
Ｒ9は水素、アミノ、アジド、ニトロ、アシルアミノ．ヒドロキシ、エトキシチオカルボニルチオ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ及びＲＣＨ（ＮＨ2）ＣＯ（式中、Ｒは水素又は低級アルキルである）からなる群より選ばれ、
【０００９】
但し、Ｒ4がＮＯＨ、Ｎ−ＮＨ−アルキル又はＮＨ−アルキルであり、かつＲ7、Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＯＨであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6が水素又はヒドロキシルであり、Ｒ7がハロゲンであり、かつＲ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮ−ＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシルであり、かつＲ7、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であり、かつＲ7が水素、アミノ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ又はヒドロキシルであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6及びＲ9が共に水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、かつＲ7がモノ（低級アルキル）アミノ又はジ（低級アルキル）アミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシ又は水素であり、Ｒ7、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンである。）
【００１０】
更に別の態様において、本発明は、以下の一般式（Ｉ）〜（ＩＶ）を有する４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物並びにその医薬的に許容しうる塩及び許容しない塩を提供する。
一般式（Ｉ）
【化５】
（式中、それぞれの場合において、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は一緒になって下記の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
アジド 水素 水素
ジメチルアミノ 水素 アジド
水素 水素 アミノ
水素 水素 アジド
水素 水素 ニトロ
ジメチルアミノ 水素 アミノ
アシルアミノ 水素 水素
水素 水素 アシルアミノ
アミノ 水素 ニトロ
水素 水素 （Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ
アミノ 水素 アミノ
水素 水素 エトキシチオカルボニルチオ
ジメチルアミノ 水素 アシルアミノ
ジメチルアミノ 水素 ジアゾニウム
ジメチルアミノ クロロ アミノ
水素 クロロ アミノ
アミノ クロロ アミノ
アシルアミノ クロロ アシルアミノ
アミノ クロロ 水素
アシルアミノ クロロ 水素
モノアルキルアミノ クロロ アミノ
ニトロ クロロ アミノ
ジメチルアミノ クロロ アシルアミノ
ジメチルアミノ クロロ ジメチルアミノ
ジメチルアミノ 水素 水素
水素 水素 ジメチルアミノ）及び、
【００１１】
一般式（ＩＩ）
【化６】
【化７】
（式中、それぞれの場合において、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は一緒になって下記の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
アジド 水素 水素
ジメチルアミノ 水素 アジド
水素 水素 アミノ
水素 水素 アジド
水素 水素 ニトロ
ジメチルアミノ 水素 アミノ
アシルアミノ 水素 水素
水素 水素 アシルアミノ
アミノ 水素 ニトロ
水素 水素 （Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ
アミノ 水素 アミノ
水素 水素 エトキシチオカルボニルチオ
ジメチルアミノ 水素 アシルアミノ
水素 水素 ジアゾニウム
水素 水素 ジメチルアミノ
ジアゾニウム 水素 水素
エトキシチオカルボニルチオ 水素 水素
ジメチルアミノ クロロ アミノ
アミノ クロロ アミノ
アシルアミノ クロロ アシルアミノ
水素 クロロ アミノ
アミノ クロロ 水素
アシルアミノ クロロ 水素
モノアルキルアミノ クロロ アミノ
ニトロ クロロ アミノ）及び、
【００１２】
一般式（ＩＩＩ）
【化８】
（式中、Ｒ8は水素又はハロゲンであり、Ｒ9はニトロ、（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ及びエトキシチオカルボニルチオからなる群より選ばれる。）及び、
一般式（ＩＶ）
【化９】
（式中、それぞれの場合において、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は一緒になって下記の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
アミノ 水素 水素
ニトロ 水素 水素
アジド 水素 水素
ジメチルアミノ 水素 アジド
水素 水素 アミノ
水素 水素 アジド
水素 水素 ニトロ
ブロモ 水素 水素
ジメチルアミノ 水素 アミノ
アシルアミノ 水素 水素
水素 水素 アシルアミノ
アミノ 水素 ニトロ
水素 水素 （Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ
アミノ 水素 アミノ
ジエチルアミノ 水素 水素
水素 水素 エトキシチオカルボニルチオ
ジメチルアミノ 水素 メチルアミノ
ジメチルアミノ 水素 アシルアミノ
ジメチルアミノ クロロ アミノ
アミノ クロロ アミノ
アシルアミノ クロロ アシルアミノ
水素 クロロ アミノ
アミノ クロロ 水素
アシルアミノ クロロ 水素
モノアルキルアミノ クロロ アミノ
ニトロ クロロ アミノ）
【００１３】
更に別の態様において、本発明は下記の式を有するテトラサイクリン化合物並びにその医薬的に許容しうる塩及び許容しない塩を提供する。
【化１０】
【化１１】
【化１２】
（式中、
Ｒ7は水素、アミノ、ニトロ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ、エトキシチオカルボニルチオ、アジド、アシルアミノ、ジアゾニウム、シアノ及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ6-aは水素及びメチルからなる群より選ばれ、
Ｒ6及びＲ5は水素及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ8は水素及びハロゲンからなる群より選ばれ、
Ｒ9は水素、アミノ、アジド、ニトロ、アシルアミノ、ヒドロキシ、エトキシチオカルボニルチオ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジアゾニウム、ジ（低級アルキル）アミノ及びＲＣＨ（ＮＨ2）ＣＯ（式中、Ｒは水素又は低級アルキルである）からなる群より選ばれ、
Ｒa及びＲbは水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル及び１−メチルエチルからなる群より選ばれ、
【００１４】
但し、Ｒa及びＲbは共に水素ではなく、
Ｒc及びＲdは独立して（ＣＨ2）nＣＨＲe（式中、ｎは０又は１であり、Ｒeは水素、アルキル、ヒドロキシ、低級（Ｃ1〜Ｃ3）アルコキシ、アミノ及びニトロからなる群より選ばれる）であり、
Ｗは（ＣＨＲe）m（式中、ｍは０〜３であり、Ｒeは前記と同様である。）、ＮＨ、Ｎ（Ｃ1〜Ｃ3）の直鎖又は分岐したアルキル、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｃ1〜Ｃ4）の直鎖又は分岐したアルコキシからなる群より選ばれる。）
【００１５】
本発明は、テトラサイクリン化合物の非抗菌的投与量からの利益を得る状態を患う哺乳類を治療する方法を含んでいる。前記の状態の例には、過剰なコラーゲンの分解、過剰なＭＭＰ酵素活性、過剰なＴＮＦ活性、過剰な一酸化窒素活性、過剰なＩＬ−１活性、過剰なエラスターゼ活性、骨密度の過剰な減少、過剰なタンパク質分解、過剰な筋肉の消耗、コラーゲンの過剰なグリコシル化、過剰なＣＯＸ−２活性、不十分な骨タンパク質合成、不十分なインターロイキン１０生産又は過剰なホスホリパーゼＡ2活性により特徴付けられる状態が含まれる。本発明の治療方法は、本発明のテトラサイクリン化合物の有効量を哺乳類に投与する工程を含んでいる。
本発明のこれら及びその他の利点は、本明細書に示される詳細な説明及び実施例から理解されるだろう。詳細な説明及び実施例は本発明の理解を高めるものであり、本発明の範囲を制限することを意図するものではない。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
発明の詳細な説明
本発明の特に好ましい化合物は、４−デジメチルアミノテトラサイクリン分子の７及び／又は９位にＤ環置換基を有している。これらの化合物には、７−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−ニトロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−アミノ−９−ニトロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７、９−ジアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−エトキシチオカルボニルチオ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−ニトロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アミノ−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−アミノ−９−ニトロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７、９−ジアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−エトキシチオカルボニルチオ、５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アミノ−８−クロロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−ニトロ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アセトアミド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン及び９−エトキシチオカルボニルチオ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンが含まれる。
【００１７】
更に、Ｄ環をＣ８部位においてハロゲン化して、８−ハロデジメチルアミノテトラサイクリン誘導体を提供してもよい。本明細書で使用するとき、ハロゲンは塩素、フッ素、臭素及びヨウ素であることができる。８−ハロ−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体の例は、９−アミノ−８−クロロ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、９−アミノ−８−クロロ−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン及び９−アミノ−８−クロロ−６−デジメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンである。
本発明の１つの態様において、４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体は、Ｃ４部位においてオキシム、ＮＨ−アルキル又はＮ−ＮＨ−アルキル基により置換されている。これらの化合物並びにその医薬的に許容しうる塩及び許容しない塩は以下の式を有する。
【化１３】
【化１４】
（式中、Ｒ7は水素、アミノ、ニトロ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ、エトキシチオカルボニルチオ、アジド、アシルアミノ、ジアゾニウム、シアノ及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ6-aは水素及びメチルからなる群より選ばれ、
Ｒ6及びＲ5は水素及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ4はＮＯＨ、Ｎ−ＮＨ−Ａ及びＮＨ−Ａ（式中、Ａは低級アルキル基である）からなる群より選ばれ、
Ｒ8は水素及びハロゲンからなる群より選ばれ、
Ｒ9は水素、アミノ、アジド、ニトロ、アシルアミノ、ヒドロキシ、エトキシチオカルボニルチオ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ及びＲＣＨ（ＮＨ2）ＣＯ（式中、Ｒは水素又は低級アルキルである）からなる群より選ばれ、
【００１８】
但し、Ｒ4がＮＯＨ、Ｎ−ＮＨ−アルキル又はＮＨ−アルキルであり、かつＲ7、Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＯＨであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6が水素又はヒドロキシルであり、Ｒ7がハロゲンであり、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮ−ＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシルであり、かつＲ7、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であり、かつＲ7が水素、アミノ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ又はヒドロキシルであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6及びＲ9が共に水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、かつＲ7がモノ（低級アルキル）アミノ又はジ（低級アルキル）アミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシ又は水素であり、かつＲ7、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンである。）
【００１９】
新規な４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体の環Ａ〜Ｄ上の置換基の立体化学が特定されていない場合、両方のエピマーが含まれることが意図されることが理解されるだろう。
本明細書で使用するとき、ＮＨ−アルキル、Ｎ−ＮＨ−アルキル、アルコキシ及びアルキル基は、炭素数１〜２６の直鎖又は分岐した、飽和又は不飽和のアルキル炭素鎖を含んでいる。例えば、アルキル基には１０〜２６の炭素原子を含む脂肪族アルキルが含まれる。飽和脂肪族アルキル基の例には、ラウリル、ミリスチル、パルミチル、ステアリルなどが含まれる。不飽和脂肪族アルキル基の例には、パルミトレイル、オレイル、リノレイル、リノレニルなどが含まれる。
更にアルキル基は低級アルキル基を含み、低級アルキル基には炭素数１〜６の直鎖又は分岐した、飽和又は不飽和の炭素鎖が含まれる。低級アルキル基の例には、メチル、エチル、プロピル、ブチル、イソブチル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル及びベンジルが含まれる。アシル基のアルキル部分は前記と同様である。アシル基の例には、アセチル、プロピオニル、ブチリル及び前記の脂肪酸を含むアシル基が含まれる。
【００２０】
好ましいオキシム化合物には、７−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−ニトロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−アミノ−９−ニトロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７、９−ジアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−エトキシチオカルボニルチオ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノ−テトラサイクリン、９−アミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−ニトロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アミノ−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−アミノ−９−ニトロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン（９−ジメチルアミノアセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリンとしても知られる）、７，９−ジアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−エトキシチオカルボニルチオ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、７−ジメチルアミノ−９−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アミノ−８−クロロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−ニトロ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アセトアミド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノ−テトラサイクリン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノ−テトラサイクリン及び９−エトキシチオカルボニルチオ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリンが含まれる。
【００２１】
更にＤ環をＣ８部位においてハロゲン化して、８−ハロ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン化合物を提供してもよい。例としては、９−アミノ−８−クロロ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン、９−アミノ−８−クロロ−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン及び９−アミノ−８−クロロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリンが含まれる。
好ましいヒドラゾン化合物には、７−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−ジメチルアミノ−９−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−ニトロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−アミノ−９−ニトロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７，９−ジアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−エトキシチオカルボニルチオ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−ジメチルアミノ−９−アセトアミド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−ジメチルアミノ−９−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アジド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−ニトロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アミノ−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−アミノ−９−ニトロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７，９−ジアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−ジメチルアミノ−９−アミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−エトキシチオカルボニルチオ、５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、７−ジメチルアミノ−９−アセトアミド−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アジド−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アミノ−８−クロロ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−ニトロ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アセトアミド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン及び９−エトキシチオカルボニルチオ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾンが含まれる。
【００２２】
Ｄ環をＣ８部位においてハロゲン化して、８−ハロ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−ヒドラゾン化合物を提供してもよい。例としては、９−アミノ−８−クロロ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン、９−アミノ−８−クロロ−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾン及び９−アミノ−８−クロロ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−メチル又はエチルヒドラゾンが含まれる。
本発明の新規な４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体には、Ａ環のＣ４部位にＮＨ−アルキル（アルキルアミノ）置換基を有する化合物も含まれる。これらの化合物は前記と同様にＣ５、Ｃ６、Ｃ６ａ、Ｃ７、Ｃ８及び／又はＣ９部位に置換基を有している。例は９−アジド−８−クロロ−７−ジメチルアミノ−５−ヒドロキシ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンである。
更に、ヘキサノイルアミノ基を本発明の全ての化合物のＤ環のＣ９部位に追加することができる。例として４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ヘキサノイルアミノテトラサイクリンが含まれるが、これに限定されるものではない。
本発明の別の態様において、４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体は前記化合物のマンニッヒ（Mannich）誘導体である。前記誘導体には、例えば下記一般式を有する化合物並びにその医薬的に許容しうる塩及び許容しない塩が含まれる。
【化１５】
【化１６】
【化１７】
（式中、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は前記と同様であり、
Ｒa及びＲbは水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル及び１−メチルエチルからなる群より選ばれ、
【００２３】
但し、Ｒa及びＲbは共に水素ではなく、Ｒc及びＲdは独立して（ＣＨ2）nＣＨＲe（式中、ｎは０又は１であり、Ｒeは水素、アルキル、ヒドロキシ、低級（Ｃ1〜Ｃ3）アルコキシ、アミノ及びニトロからなる群より選ばれる）であり、
Ｗは（ＣＨＲe）m（式中、ｍは０〜３であり、Ｒeは前記と同様である）、ＮＨ、Ｎ（Ｃ1〜Ｃ3）の直鎖又は分岐したアルキル、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｃ1〜Ｃ4）の直鎖又は分岐したアルコキシからなる群より選ばれる。）
【００２４】
例えば、ｍが０のとき、Ｒc及びＲdは３〜５員環、例えばピロリジノ又は置換ピロリジノ環、モルホリノ又は置換モルホリノ環又はピペラジノ又は置換ピペラジノ環において互いに結合している。
これらのマンニッヒ誘導体には、例えばＣ２部位にピペラジン−１−イル、４−メチルピペラジン−１−イル、モルホリン−１−イル又はピロリジン−１−イルピロリジン置換基を有する化合物が含まれる。これらの化合物は前記と同様にＣ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ６ａ、Ｃ７、Ｃ８及び／又はＣ９部位に置換基を有している。前記化合物の例にはＮ−モルホリン−１−イルメチル−４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリン、Ｎ−ピロリジン−１−イルメチル−４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリン、Ｎ−モルホリン−１−イルメチル−４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ヘキサノイルアミノテトラサイクリン、Ｎ−ピロリジン−１−イルメチル−４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ヘキサノイルアミノテトラサイクリンが含まれるがこれらに限定されるものではない。
【００２５】
本発明の新規な４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物又はその塩は、当該技術分野において既知の方法により容易に調製又は購入することができる開始反応を用いてＣ７、Ｃ８及び／又はＣ９部位におけるＤ環の置換により製造されるだろう。例えば、Mitscher, L. A., The Chemistry of the Tetracycline Antibiotics, Marcel Dekker, New York (1978), Ch. 6, Hlavka, J. and J. H. Boothe, The Tetracyclines, Springer-Verlag, Berlin-Heidelberg, page 18 (1985)及び米国特許第４，７０４，３８３号、第３，２２６，４３６号、第３，０４７，６２６号、第３，５１８，３０６号及び第５，５３２，２２７号を参照のこと。
例えば、７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを既知の出発反応物を用い、前記化合物を強酸及び金属硝酸塩と反応させることにより、Ｄ環のＣ９部位のニトロ化を行い、新規な９−ニトロ化合物を製造してもよい。本発明に適切な強酸の例は、硫酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸又は過塩素酸である。適切な金属硝酸塩は、例えば硝酸カルシウム、硝酸カリウム又は硝酸ナトリウムである。Ｄ環のＣ９部位はニトロ化されて、対応の９−ニトロ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−ニトロ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物を形成する。
【００２６】
Ｄ環のＣ９部位のアミノ化は、９−ニトロ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、例えば９−ニトロ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−ニトロ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを、適切に担持された触媒、例えばラネーニッケル、酸化白金又は炭素担持パラジウムの存在下、水素で処理することにより達成されるだろう。次いで、これを濾過し、有機溶媒、例えばエーテルで洗浄する。Ｃ９置換基を還元して、対応の９−アミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−アミノ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物を形成する。
Ｄ環のＣ９部位におけるアミノ基をアシルアミド基、好ましくはスルホンアミド基に変換してもよい。例えば、９−アミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−アミノ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物を、溶媒に分散した適切な酸スカベンジャーの存在下、塩化アシル、無水アシル、混合無水スルホニル、塩化スルホニル又は無水スルホニルで処理する。酸スカベンジャーは、炭酸水素ナトリウム、酢酸ナトリウム、ピリミジン、トリエチルアミン、Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド、Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）トリフルオロアセトアミド又は塩基性イオン交換樹脂から適切に選択される。アシル化反応に適切な溶媒には、水、水−テトラヒドロフラン、Ｎ−メチルピロリドン、１，３−ジメチル−２−イミダゾリジオン、ヘキサメチルホスホラミド、１，３−ジメチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−２（１Ｈ）−ピリミジノン又は１，２−ジメトキシエタンが含まれる。Ｃ９アミノ基をアセトアミドに変換して、例えば対応の９−アセトアミド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−アセトアミド−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを形成してもよい。
ジアゾニウム基をＤ環のＣ９部位において置換することもできる。典型的には、９−アミノ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体、例えば９−アミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−アミノ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを、０．１Ｎ ＨＣｌのメタノール溶液中、ｎ−ブチル硝酸塩で処理して、対応の９−ジアゾニウム誘導体、例えば９−ジアゾニウム−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−ジアゾニウム−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを形成する。
【００２７】
９−ジアゾニウム−４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体、例えば９−ジアゾニウム−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−ジアゾニウム−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを、メタノール性塩酸＋トリアゾ化合物、例えばアジ化ナトリウムで処理して、９−アジド誘導体、例えば９−アジド−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−アジド−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを形成することができる。
代替として、エトキシチオカルボニルチオ基を、Ｄ環のＣ９部位で置換することができる。例えば、９−ジアゾニウム−４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体、例えば９−ジアゾニウム−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は９−ジアゾニウム−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを酸金属塩、例えばキサントゲン酸エチルカリウム（potassium ethyl xanthate）で処理して、対応の９−エトキシチオカルボニルチオ誘導体、例えば９−エトキシチオカルボニルチオ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ又は９−エトキシチオカルボニルチオ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを形成する。
前記の反応は、４−デジメチルアミノテトラサイクリン分子のＣ９部位における置換について言及している。出発反応物及び使用する条件に依存して、Ｃ７部位における置換が更に存在し、７−置換−４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体、例えば７−ジアゾニウム−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン又は７−アジド−６−デメチル−６−デオキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを誘導してもよい。７−置換誘導体を９−置換誘導体から分離し、以下のようにして精製することもできる。
【００２８】
本発明の新規な７又は９−アジド−４−デジメチルアミノ誘導体を、７又は９−アジド−４−デジメチルアミノテトラサイクリンを強酸、例えばハロゲン化水素、ハロゲン化水素で飽和した硫酸又はハロゲン化水素で飽和したメタンスルホン酸で処理することによりＣ８部位でハロゲン化することができる。ハロゲン化水素が塩化水素であるとき、単離される生成物は８−クロロ（７又は９）アミノ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン誘導体である。特に好ましいハロゲン化化合物は９−アセトアミド−８−クロロ−７−ジメチルアミノ−６−デオキシ−６−デメチル−４−デジメチルアミノテトラサイクリンである。
１つの態様において、本発明の４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物は、オキシム（ＮＯＨ）、アルキルアミノ（ＮＨ−アルキル）又はアルキルヒドラゾン（Ｎ−ＮＨ−アルキル）基をＡ環のＣ４部位に有している。これらの化合物は、既知の方法を使用して作成することができる。例えば、４−ヒドロキシテトラシクロキシドを、例えばメタノール又はエタノールなどの溶媒中アルカリ条件下でヒドロキシアミン又はエチルヒドラジンで処理してもよい。Ｃ４部位における置換が起こり、４−デジメチルアミノ−４−オキシミノテトラサイクリン及び４−デジメチルアミノテトラサイクリン−４−アルキルヒドラゾン化合物をアルカリ金属塩として単離することができる。例えば、米国特許第３，６２２．６２７号、第３，１５９，６７５号及び第３，３４５，３７０号明細書を参照のこと。既知の方法（すなわち、ハロゲン化、アミノ化又はニトロ化）を使用したＤ環におけるＣ７、Ｃ８及び／又はＣ９部位の置換は、本発明の新規な４−オキシム、４−ヒドラゾン及び４−アミノアルキル化合物を生じる。
マンニッヒ誘導体は、当該技術分野において既知の方法により作成することができる。例えば、前記のテトラサイクリン誘導体をホルムアルデヒド及び適切なアミンで処理してもよい。
特定の態様の例が、テトラサイクリン誘導体として前記にて記載される。しかしながら、本発明の化合物はテトラサイクリン誘導体に限定されるものではない。本発明は更に前記のテトラサイクリン誘導体と同様にサンサイクリン（sancycline）、ミノサイクリン及びドキシサイクリンの４−デジメチルアミノ誘導体及び４−置換４−デジメチルアミノ誘導体を含むが、これらに限定されるものではない。
【００２９】
本発明は、４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物の酸付加塩及び金属塩を含む塩を含んでいる。前記の塩は、医薬的に許容しうる塩及び許容しえない酸並びに金属を用いて周知の手順により形成される。「医薬的に許容しうる」とは、本発明の化合物の毒性を実質的に増加させない塩形成性の酸及び金属を意味する。
適切な塩の例には、例えば塩酸、ヨウ化水素酸、臭化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸、硫酸などの鉱酸、例えば酒石酸、酢酸、クエン酸、リンゴ酸、安息香酸、グリコール酸、グルコン酸、グロン酸、コハク酸、アリールスルホン酸、例えばｐ−トルエンスルホン酸などの有機酸が含まれる。医薬的に許容しえない酸付加塩は治療には有用ではないが、新規物質の単離及び精製には役立つ。更に、医薬的に許容しない塩は、医薬的に許容しうる塩に製造に有用である。このグループの中で、より一般的な塩にはフッ化水素酸及び過塩素酸を用いて形成された塩が含まれる。ハイドロフルオライド塩は、塩酸中での溶解及び形成したハイドロクロライドの結晶化による医薬的に許容しうる塩、特にハイドロクロライドの製造に特に有用である。過塩素酸塩は新規生成物の精製及び結晶化に有用である。
金属塩も一般的に生成され、種々の目的に対して有用であるが、医薬的に許容しうる金属塩は特に有用である。なぜなら、治療において有用であるからである。医薬的に許容しうる金属には、より一般的にはナトリウム、カリウム、原子番号２０含む番号までのアルカリ土類金属、すなわちマグネシウム及びカルシウム、更にアルミニウム、亜鉛、鉄及びマンガンが含まれる。金属塩には複合塩、すなわちテトラサイクリンの分野において十分に認識されている金属キレートが含まれる。
精製後、本発明の新規化合物は、当該技術分野において既知の標準的方法により都合よく精製することができる。いくつかの適切な例には、適切な溶媒からの結晶化又は分配カラムクロマトグラフィーが含まれる。
【００３０】
本発明の新規４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物は、in vivo、in vitro及びex vivoで、例えば培養組織、器官又は細胞系だけではなく生きている哺乳類において使用することができる。哺乳類には、イヌ及びネコなどの愛玩動物、ラット及びマウスなどの実験動物、ウマ及び雌ウシなどの家畜だけでなく、例えばヒトも含まれる。本明細書で使用するとき、組織とは、一緒になってある特別の機能を発揮する同様に特化した細胞の集合をいう。培養細胞系には、全ての哺乳類細胞、例えば上皮細胞、内皮細胞、赤血球、白血球などが含まれる。より詳細には、ヒト末梢血単球、滑膜繊維芽細胞などである。
本発明は、テトラサイクリン化合物の非抗菌的投与量からの利益を得る状態を患う哺乳類を治療する方法を含んでいる。これらの状態又は疾患は、過剰なコラーゲンの分解、過剰なＭＭＰ酵素活性、過剰なＴＮＦ活性、過剰な一酸化窒素活性、過剰なＩＬ−１活性、過剰なエラスターゼ活性、骨密度の過剰な減少、過剰なタンパク質分解、過剰な筋肉の消耗、コラーゲンの過剰なグリコシル化、過剰なＣＯＸ−２活性、不十分な骨タンパク質合成、不十分なインターロイキン１０生産又は過剰なホスホリパーゼＡ2活性により特徴付けられる。本発明の治療方法は、本発明のテトラサイクリン化合物の有効量を哺乳類に投与する工程を含んでいる。
本明細書で使用する用語「過剰」とは、哺乳類又は哺乳類細胞においてある病理学的問題を導く、通常の活性よりも増加した活性を意味する。
本発明のin vivoでの実施は、医学的及び獣医学的疾患、状態及び症候群の軽減又は緩和における適用を許容する。特に本発明は、有効量のテトラサイクリン化合物を哺乳類へ投与することによる、腹部大動脈瘤、角膜の潰瘍形成、歯周病、糖尿病、真性糖尿病（diabetes mellitus）、強皮病、早老症、肺疾患、癌、移植片対宿主病、抑制された骨髄機能の疾患、血小板減少症、人工関節の緩み（prosthetic joint loosening）、脊椎関節症、骨粗鬆症、パジェット病、自己免疫疾患、全身性エリテマトーデス、急性又は慢性炎症状態、腎疾患又は膠原病を含む状態又は疾患を患う哺乳類の治療方法を含んでいる。
【００３１】
本発明のテトラサイクリン化合物により治療可能な癌性状態には、癌（carcinomas）、芽細胞腫、肉腫、例えばカポジ肉腫、神経膠腫並びに１２大癌：前立腺癌、乳癌、肺癌、結腸直腸癌、膀胱癌、非ホジキンリンパ腫、子宮癌、黒色腫、腎臓癌、白血病、卵巣癌及び膵臓癌が含まれるが、これらに限定されるものではない。
本発明のテトラサイクリン化合物により治療可能な急性又は慢性炎症状態には、例えば炎症性腸疾患、関節炎、骨関節炎、関節リウマチ、膵炎、腎炎、糸球体腎炎、敗血症、敗血性ショック、リポ多糖内毒素性ショック（lipopolysaccharide endotoxin shock）、多臓器不全又は乾癬が含まれる。
本発明により治療可能な肺疾患には、例えばＡＲＤＳ（成人呼吸窮迫症候群）、嚢胞性線維症、肺気腫、毒薬の吸入による急性肺損傷が含まれる。毒薬の例には、酸、化学薬品、産業毒及び軍用毒、煙及びその他の燃焼による有毒生成物である。
本発明の新規テトラサイクリン化合物は、腎疾患の治療に使用することもできる。腎疾患のいくつかの例は、慢性腎不全、急性腎不全、腎炎又は糸球体腎炎である。
本明細書において使用するテトラサイクリン化合物の有効量は、疾患又は状態の治療の特定化された結果を達成するのに有効な量である。好ましくは、テトラサイクリン化合物又はその誘導体は、抗菌活性をほとんど又は全く有しない量で提供される。テトラサイクリン化合物又はその誘導体は、微生物の増殖を有意に阻害しない場合、効率的に抗菌性ではない。したがって、本発明の方法は、テトラサイクリン化合物の抗菌特性を減少又は除去するように化学的に修飾されたテトラサイクリン誘導体を有利に使用することができる。前記の化学的に修飾されたテトラサイクリンの使用は本発明において好ましい。なぜなら、前記の化合物は抗菌性テトラサイクリンよりも高いレベルで使用することができ、一方、前記化合物の抗菌量での使用においてしばしば伴う特定の不利益、例えば有益な微生物の無差別の殺傷や耐性微生物の出現を回避することができるからである。
【００３２】
哺乳類についての最大投与量は、好ましくない又は耐え難い副作用を引き起こさない最大の投与量である。最小投与量は、有効性が最初に観察される最小の投与量である。例えば、テトラサイクリン化合物は、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約３０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは約１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１８ｍｇ／ｋｇ／日の量で投与することができる。いずれにしても、開業医は当該技術分野の技術及び知識によるガイドを受け、本発明は前記の効果を達成するのに有効な量を限定なしに含んでいる。
本発明の方法は、テトラサイクリン誘導体を、哺乳類細胞又は哺乳類における疾患又は状態を治療するのに有効な量で投与又は提供することを含んでいる。テトラサイクリン誘導体の投与は種々の方法により達成されるだろう。培養細胞系（in vitro）において、テトラサイクリン誘導体は、細胞と有効量のテトラサイクリン誘導体とを直接接触させることにより投与することができる。
生きている哺乳類（in vivo）において、本発明のテトラサイクリン誘導体は、制御された送達系を含む非経口及び経腸経路により全身投与することができる。例えば、本発明のテトラサイクリン誘導体を、好ましい送達経路である静脈内投与（例えば、静脈内注射）により容易に投与することができる。静脈内投与は、当該技術分野における開業医により理解されるように、テトラサイクリン誘導体を適切な医薬担体（ビヒクル）又は賦形剤中で混合することにより達成することができる。
経口又は経腸用途も企図され、例えば錠剤、カプセル、丸剤、エリキシル剤、懸濁液、シロップ、ウエハ、チューインガムなどの製剤を用いてテトラサイクリン誘導体を提供することができる。
【００３３】
代替として、テトラサイクリン誘導体の送達は局所適用を含むことができる。したがって担体は、好ましくは局所用途に適したものである。そのような局所用途に適していると考えられる組成物には、ゲル、塗剤、ローション、クリーム軟膏などが含まれる。テトラサイクリン誘導体を、支持基材又はマトリックスなどを用いて組み込んで、皮膚に直接適用することができる、あらかじめ包装された外科用又は尻用（bum）包帯又は絆創膏を提供してもよい。それゆえ、ビヒクル中、約２５％（ｗ／ｗ）までの量のテトラサイクリン誘導体の局所投与は、適応症に依存して適切なものである。より好ましくは、約０．１％〜約１０％のテトラサイクリン誘導体の適用が、疾患又は状態の治療に有効であると考えられる。これらの量は治療対象に有意な毒性を誘導するものではないと考えられる。
例えば、特定のケースにおいて、限定された体内分布のみを有するテトラサイクリン化合物は局在化活性に対して好ましいだろう。これらの非吸収性ＣＭＴの局所投与は、口頭の病変において好ましいだろう。なぜなら、ＣＭＴはたとえ嚥下しても有意な程度では全く吸収されないからである。
テトラサイクリン誘導体の組み合わせた又は同調的な局所投与及び全身投与も本発明の下で企図される。例えば、非吸収性テトラサイクリン化合物は局所投与をすることができ、一方、対象において実質的に吸収され、かつ全身分布に有効であることがきるテトラサイクリン化合物は全身投与をすることができる。
【００３４】
光毒性
１つの態様において、本発明は光毒性が低い化合物のクラスに関する。潜在的に光毒性なテトラサイクリン誘導体を同定するために、３Ｔ３ニュートラルレッド光毒性アッセイを用いた。このアッセイは、Toxicology In Vitro 12: 305-327.1998に記載されている。
要約すると、３Ｔ３細胞を９６ウェルプレートに播き、一晩インキュベートする。培養培地を除去し、ＣＭＴの連続希釈物を含みフェノールレッドを含まないハンクス平衡塩溶液（Hanks' Balanced Salt Solution）（１化合物につき２プレート）で置換する。最初の３７℃で１時間にインキュベートの後、１つのプレートを、太陽シミュレーターからの５ジュール／ｃｍ2 ＵＶＡ／白色光に暴露する。他方は暗中に維持する。次いでプレートをすすぎ、再培養（refed）し、２４時間インキュベートする。細胞の可視性をニュートラルレッドの取り込みにより測定する。光毒性を、頒布されたガイドラインに従い、光暴露を行った投与と行わない投与との間の相対毒性により測定する（基準化合物には、市販のテトラサイクリン、ドキシサイクリン及びミノサイクリンが含まれる）。相対光毒性を光阻害因子（ＰＩＦ）と呼ぶことにする。本アッセイにおける化合物の光毒性応答は、in vivoでの挙動と一致する。
光毒性が低いテトラサイクリン誘導体のクラスは、ミノサイクリンの光毒性の７５％未満、好ましくは７０％未満、より好ましくは６０％未満、特に好ましくは５０％以下の光毒性を有する。最適には、低光毒性テトラサイクリン誘導体のクラスはＰＩＦ値＝１を有する。ＰＩＦ値＝１のとき、化合物は測定可能な光毒性を有しないと考えられる。このクラスのメンバーには、以下の一般式を有するテトラサイクリン化合物が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００３５】
【化１８】
（式中、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は、それぞれの場合において、一緒になって以下の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
水素 水素 アミノ
水素 水素 パルミタミド（palmitamide）
水素 水素 ジメチルアミノ）及び、
【化１９】
（式中、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は、それぞれの場合において、一緒になって以下の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
水素 水素 アセトアミド
水素 水素 ジメチルアミノアセトアミド
水素 水素 ニトロ
水素 水素 アミノ）及び、
【化２０】
（式中、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9はそれぞれ水素、水素及びニトロである。）
【実施例】
【００３６】
実施例
以下の実施例は本発明の更なる認識を提供するのに役立つが、どんな場合であっても本発明の有効な範囲を制限することを意味しない。
実施例１
４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ニトロテトラサイクリンサルフェート
１ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンの２５ｍｌ濃硫酸溶液に、０℃下、１．０５ｍｍｏｌの硝酸カリウムを添加した。得られた溶液を氷浴温度下で１５分間攪拌し、１リットルの攪拌した冷エーテル中へ注いだ。沈殿した固体を落ち着かせ（settle）、大部分の溶媒をデカントした。
残った物質を、焼結ガラス漏斗を通して濾過し、集めた固体を冷エーテルで十分に洗浄した。生成物を真空乾燥機中で一晩乾燥した。
実施例２
９−アミノ−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
実施例１より得た９−ニトロ化合物の３００ｍｇのエタノール溶液３０ｍｌに、５０ｍｇのＰｔＯ2を添加した。水素の理論量が吸収されるまで、混合物を大気圧下で水素化した。この系に窒素を流した。触媒ＰｔＯ2を濾過し、濾液を３００ｍｌのエーテルへ滴下した。分離した生成物を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
【００３７】
実施例３
９−アセトアミド−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
実施例２より得た５００ｍｇの９−アミノ−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンサルフェートの１．３−ジメチル−２−イミダゾリジノンの十分に攪拌した冷溶液２．０ｍｌに、５００ｍｇ炭酸水素ナトリウムを添加し、次いで０．２１ｍｌの塩化アセチルを添加した。混合物を室温下で３０分間攪拌し、濾過し、濾液を５００ｍｌのエーテルへ滴下した。分離した生成物を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例４
４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ジアゾニウムテトラサイクリンサルフェート
実施例２より得た０．５ｇの９−アミノ−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンサルフェートの氷浴中で冷却した０．１Ｎ塩酸のメタノール溶液１０ｍｌに、０．５ｍｌのｎ−ブチルニトレートを添加した。溶液を氷浴温度下で３０分間攪拌し、次いで２５０ｍｌのエーテルに注いだ。分離した生成物を濾過し、エーテルで洗浄し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例５
９−アジド−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
実施例４より得た０．３ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ジアゾニウムテトラサイクリンサルフェートの０．１Ｎメタノール性塩酸溶液１０ｍｌに、０．３３ｍｍｏｌのアジ化ナトリウムを添加した。混合物を室温下で１．５時間攪拌した。次いで反応混合物を２００ｍｌのエーテル中へ注いだ。分離した生成物を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
【００３８】
実施例６
９−アミノ−８−クロロ−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−テトラサイクリンサルフェート
実施例４より得た１ｇの９−アジド−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンハイドロクロライドをＨＣｌで飽和した濃硫酸１０ｍｌ中に０℃下で溶解した。混合物を氷冷温度下で１．５時間攪拌し、次いで５００ｍｌの冷エーテルへゆっくりと滴下した。分離した生成物を濾過し、エーテルで洗浄し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例７
４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−エトキシチオカルボニルチオ−テトラサイクリンサルフェート
実施例４より得た１．０ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ジアゾニウムテトラサイクリンサルフェートの水溶液１５ｍｌを、１．１５ｍｍｏｌのキサントゲン酸エチルカリウム水溶液１５ｍｌへ添加した。
混合物を室温下で１時間攪拌した。生成物を分離し、濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例８Ａ
ニトロ化の一般的手順
１ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンの濃硫酸溶液２５ｍｌに、０℃下、１ｍｍｏｌの硝酸カリウムを攪拌しながら添加した。反応溶液を１５分間攪拌し、次いで１００ｍｌの砕いた氷中へ注いだ。水性溶液を各２０ｍｌのブタノールで５回抽出した。ブタノール抽出物を各１０ｍｌの水で３回洗浄し、真空中で２５ｍｌまで濃縮した。沈殿した明るい黄色の結晶性固体を濾過し、２ｍｌのブタノールで洗浄し、真空下、６０℃で２時間乾燥した。この固体は２つのモノニトロ異性体の混合物であった。
【００３９】
実施例８Ｂ
４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−９−ニトロテトラサイクリン
４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンからのニトロ化生成物（２つの異性体の混合物）９８０ｍｇのメタノール溶液２５ｍｌに、十分な量のトリエチルアミンを添加して固体を溶解した。濾過した溶液（ｐＨ９．０）を濃硫酸でｐＨ５．２に調節した。結晶性の黄色の固体（２３６ｍｇ）を得た（収率２９％）。この時点で物質は極めて純粋であり、少量の７−異性体のみが含まれている。最終の精製を、珪藻土充填カラム及び溶媒系：クロロホルム：ブタノール：０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ２）（１６：１：１０）を用いた液相分配クロマトグラフィーにより達成した。
実施例９
４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−７−ニトロテトラサイクリン
実施例８より得たメタノール濾液を濃硫酸により直ぐにｐＨ１．０に調節した。明るい黄色の結晶性の固体をサルフェート塩として得た。精製した遊離塩基は、サルフェート塩の水性溶液（２５ｍｇ／ｍｌ）を２Ｎ炭酸ナトリウムでｐＨ５．２に調節することにより得た。
実施例１０
９−アミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリン
実施例８で調製した９−ニトロ化合物３００ｍｌのエタノール溶液３０ｍｌに、５０ｍｇのＰｔＯ2を添加した。混合物を、理論量の水素が吸収されるまで大気圧下で水素化した。系に窒素を流した。触媒であるＰｔＯ2を濾過し、濾液を３００ｍｌのエタノール溶液へ滴下した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
【００４０】
実施例１１
９−アセトアミド−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
実施例１０より得た５００ｍｇの９−アミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェートの１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノンの十分に攪拌した冷溶液２．０ｍｌに、５００ｍｌの炭酸水素ナトリウムを添加し、続いて０．２１ｍｌの塩化アセチルを添加した。混合物を室温下で３０分間攪拌し、濾過し、濾液を５００ｍｌのエーテルへ滴下した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例１２
４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−９−ジアゾニウムテトラサイクリンサルフェート
実施例１０で得た０．５ｇの９−アミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェートの、氷浴中で冷却したメタノールの０．１Ｎ塩酸溶液１０ｍｌに、０．５ｍｌのｎ−ブチルニトレートを添加した。溶液を氷浴温度で３０分間攪拌し、２５０ｍｌのエーテルへ注いだ。分離した固体を濾過し、エーテルで洗浄し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例１３
９−アジド−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
実施例１２の４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−９−ジアゾニウムテトラサイクリンサルフェート０．３ｍｍｏｌの、０．１Ｎメタノール性塩酸溶液１０ｍｌに、０．３３ｍｍｏｌのアジ化ナトリウムを添加した。混合物を室温下で１．５時間間攪拌した。反応混合物を２００ｍｌのエーテルに注いだ。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
【００４１】
実施例１４
９−アミノ−８−クロロ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
実施例１３より得た１ｇの９−アジド−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンハイドロクロライドを、ＨＣｌで飽和した濃硫酸１０ｍｌ中に、０℃下で溶解した。混合物を氷浴温度下で１．５時間攪拌し、次いで５００ｍｌの冷エーテルへゆっくりと滴下した。分離した固体を濾過し、洗浄し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例１５
４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−９−エトキシチオカルボニルチオテトラサイクリンサルフェート
実施例１２より得た１．０ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−９−ジアゾニウムテトラサイクリンサルフェートの水溶液１５ｍｌに、１．１５ｍｍｏｌのキサントゲン酸エチルカリウムの水溶液１５ｍｌを添加した。混合物を室温下で１時間攪拌した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例１６
９−ジメチルアミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
実施例１０より得た９−アミノ化合物１００ｍｇのエチレングリコールモノメチルエーテル溶液１０ｍｌに、０．０５ｍｌの濃硫酸、０．４ｍｌの４０％水性ホルムアルデヒド溶液及び１００ｍｇの１０％炭素担持パラジウム触媒を添加した。混合物を大気圧、室温下で２０分間水素化した。触媒を濾過し、濾液を真空下で乾燥するまで蒸発させた。残渣を５ｍｌメタノールに溶解し、この溶液を１００ｍｌのエーテルへ添加した。分離した生成物を濾過し、乾燥した。収量９８ｍｇ。
【００４２】
実施例１７
７−アミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリン
この化合物は手順Ａ又はＢを用いて作成することができる。
手順Ａ：実施例１より得た３００ｍｇの７−ニトロ化合物のエタノール溶液３０ｍｌに、５０ｍｇのＰｔＯ2を添加した。混合物を、理論量の水素が吸収されるまで大気圧下で水素化した。この系に窒素を流した。触媒であるＰｔＯ2を濾過し、濾液を３００ｍｌのエーテルに添加した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
手順Ｂ：１ｇの６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−テトラサイクリンを、７．６ｍｌのＴＨＦ及び１０．４ｍｌのメタンスルホン酸中に−１０℃下で溶解した。混合物を０℃まで暖めた後、０．８６ｇのジベンジルアゾジカルボキシレートを添加し、混合物を０℃で２時間攪拌して、７−［１，２−ビス（カルボベンジルオキシ）ヒドラジノ］−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンを得た。１ｍｍｏｌのこの物質の２−メトキシエタノール溶液７０ｍｌ及び３００ｍｇの１０％Ｐｄ−Ｃを室温下で水素化して、７−アミノ−６−デオキシ−４−デジメチルアミノ−テトラサイクリンを得た。
実施例１８
７−アミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン
１ｇの６−デオキシ−５−ヒドロキシ−４−デジメチルアミノテトラサイクリン３を、７．６ｍｌのＴＨＦ及び１０．４ｍｌのメタンスルホン酸中、−１０℃下で溶解した。混合物を０℃まで暖めた後、０．８６ｇのジベンジルアゾカルボキシレートのＴＨＦ溶液０．５ｍｌを添加し、混合物を０℃下で２時間攪拌して７−［１，２−ビス（カルボベンジルオキシ）ヒドラジノ］−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリンを得た。１ｍｍｏｌのこの物質の２−メトキシエタノール溶液７０ｍｌ及び３００ｍｇの１０％Ｐｄ−Ｃを室温下で水素化して、７−アミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリンを得た。
【００４３】
実施例１９
７−アセトアミド−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリンサルフェート
実施例１８より得た５００ｍｇの７−アミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリンサルフェートの１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノンの十分に攪拌した冷溶液２ｍｌに、５００ｍｌの炭酸水素ナトリウムを添加し、続いて０．２１ｍｌの塩化アセチルを添加した。混合物を室温下で３０分間攪拌し、濾過し、濾液を５００ｍｌのエーテルへ滴下した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例２０
４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシ−７−ジアゾニウムテトラサイクリンハイドロクロライド
実施例２０で得た０．５ｇの７−アミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリンサルフェートの０．１Ｎ塩酸の氷浴中で冷却したメタノール溶液１０ｍｌに、０．５ｍｌのｎ−ブチルニトレートを添加した。溶液を氷浴温度で３０分間攪拌し、２５０ｍｌのエーテルへ注いだ。分離した固体を濾過し、エーテルで洗浄し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例２１
７−アジド−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリン
実施例２０より得た０．３ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシ−７−ジアゾニウムテトラサイクリンハイドロクロライドの、０．１Ｎメタノール性塩酸溶液１０ｍｌに、０．３３ｍｍｏｌのアジ化ナトリウムを添加した。混合物を室温下で１．５時間間攪拌した。反応混合物を２００ｍｌのエーテルに注いだ。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
【００４４】
実施例２２
７−アミノ−８−クロロ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリンサルフェート
実施例２１より得た１ｇの７−アジド−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリンサルフェートを、（既に塩化水素で飽和した）濃硫酸１０ｍｌ中に、０℃下で溶解した。混合物を氷浴温度下で１．５時間攪拌し、次いで５００ｍｌの冷エーテルへゆっくりと滴下した。分離した固体を濾過し、エーテルで洗浄し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例２３
４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシ−７−エトキシチオカルボニルチオテトラサイクリン
実施例２０より得た１．０ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシ−７−ジアゾニウムテトラサイクリンハイドロクロライドの水溶液１５ｍｌに、１．１５ｍｍｏｌのキサントゲン酸エチルカリウムの水溶液１５ｍｌを添加した。混合物を室温下で１時間攪拌した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例２４
７−ジメチルアミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−５−ヒドロキシテトラサイクリンサルフェート
７−アミノ化合物１００ｍｇのエチレングリコールモノメチルエーテル溶液１０ｍｌに、０．０５ｍｌの濃硫酸、０．４ｍｌの４０％水性ホルムアルデヒド溶液及び１００ｍｇの１０％炭素担持パラジウム触媒を添加した。混合物を大気圧、室温下で２０分間、水素で還元した。触媒を濾過し、濾液を真空下で乾燥するまで蒸発させた。残渣を５ｍｌのメタノールに溶解し、この溶液を１００ｍｌのエーテルへ添加した。分離した生成物を濾過し、乾燥した。収量７８ｍｇ。
【００４５】
実施例２５
７−ジエチルアミノ−４−デジメチルアミノ−５−ヒドロキシテトラサイクリンサルフェート
７−アミノ化合物１００ｍｇのエチレングリコールモノメチルエーテル溶液１０ｍｌに、０．０５ｍｌの濃硫酸、０．４ｍｌのアセトアルデヒド及び１００ｍｇの１０％炭素担持パラジウム触媒を添加した。混合物を大気圧、室温下で２０分間水素化した。触媒を濾過し、濾液を真空下で乾燥するまで蒸発させた。残渣を５ｍｌのメタノールに溶解し、この溶液を１００ｍｌのエーテルへ添加した。
分離した生成物を濾過し、乾燥した。
実施例２６
４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−７−ジアゾニウムテトラサイクリンハイドロクロライド
実施例１７で得た０．５ｇの７−アミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェートの０．１Ｎ塩酸の氷浴中で冷却したメタノール溶液１０ｍｌに、０．５ｍｌのｎ−ブチルニトレートを添加した。溶液を氷浴温度で３０分間攪拌し、２５０ｍｌのエーテルへ注いだ。分離した固体を濾過し、エーテルで洗浄し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例２７
７−アジド−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリン
実施例２６より得た０．３ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−７−ジアゾニウムテトラサイクリンの０．１Ｎメタノール性塩酸溶液１０ｍｌに、０．３３ｍｍｏｌのアジ化ナトリウムを添加した。混合物を室温下で１．５時間間攪拌した。反応混合物を２００ｍｌのエーテルに注いだ。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
【００４６】
実施例２８
７−アミノ−８−クロロ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
１ｇの７−アジド−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６デオキシテトラサイクリンサルフェートを、（既に塩化水素で飽和した）濃硫酸１０ｍｌ中に、０℃下で溶解した。混合物を氷浴温度下で１．５時間攪拌し、次いで５００ｍｌの冷エーテルへゆっくりと滴下した。分離した固体を濾過し、洗浄し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例２９
４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−７−エトキシチオカルボニルチオテトラサイクリン
実施例２６より得た１．０ｍｍｏｌの４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−７ジアゾニウムテトラサイクリンハイドロクロライドの水溶液１５ｍｌに、１．１５ｍｍｏｌのキサントゲン酸エチルカリウムの水溶液１５ｍｌを添加した。混合物を室温下で１時間攪拌した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例３０
７−ジメチルアミノ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシテトラサイクリンサルフェート
実施例２６より得た７−アミノ化合物１００ｍｇのエチレングリコールモノメチルエーテル溶液１０ｍｌに、０．０５ｍｌの濃硫酸、０．４ｍｌの４０％水性ホルムアルデヒド溶液及び１００ｍｇの１０％炭素担持パラジウム触媒を添加した。混合物を大気圧、室温下で２０分間、水素を用いて還元した。触媒を濾過し、濾液を真空下で乾燥するまで蒸発させた。残渣を５ｍｌのメタノールに溶解し、この溶液を１００ｍｌのエーテルへ添加した。分離した生成物を濾過し、乾燥した。
【００４７】
実施例３１
９−アセトアミド−８−クロロ−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デオキシ−６−デメチルテトラサイクリン
実施例６より得た５００ｍｇの９−アミノ−８−クロロ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−６−デメチル−７−ジメチルアミノテトラサイクリンサルフェートの１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノンの十分に攪拌した冷溶液２ｍｌに、５００ｍｌの炭酸水素ナトリウムを添加し、続いて０．２１ｍｌの塩化アセチルを添加した。混合物を室温下で３０分間攪拌し、濾過し、濾液を５００ｍｌのエーテルへ滴下した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例３２
８−クロロ−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デオキシ−６−デメチル−９−エトキシチオカルボニルチオテトラサイクリン
１．０ｍｍｏｌの８−クロロ−４−デジメチルアミノ−６−デオキシ−６デメチル−７−ジメチルアミノ−９−ジアゾニウムテトラサイクリンハイドロクロライドの水溶液１５ｍｌに、１．１５ｍｍｏｌのキサントゲン酸エチルカリウムの水溶液１５ｍｌを添加した。混合物を室温下で１時間攪拌した。分離した固体を濾過し、真空乾燥機中で乾燥した。
実施例３３
８−クロロ−９−ジメチルアミノ−４−デジメチルアミノ−７−ジメチルアミノ−６−デオキシ−６−デメチルテトラサイクリンサルフェート
実施例６より得た９−アミノ化合物１０ｍｇのエチレングリコールモノメチルエーテル溶液１０ｍｌに、０．０５ｍｌの濃硫酸、０．４ｍｌのアセトアルデヒド及び１００ｍｇの１０％炭素担持パラジウム触媒を添加した。混合物を大気圧、室温下で２０分間、水素で還元した。触媒を濾過し、濾液を真空下で乾燥するまで蒸発させた。残渣を５ｍｌのメタノールに溶解し、溶液を１００ｍｌのエーテルへ添加した。分離した生成物を濾過し、乾燥した。
【００４８】
実施例３４
Ｎ−（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル−４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリン
５８ｍｇ（３７％）ホルムアルデヒド（０．７２ｍｍｏｌ）の水溶液を、２０３ｍｇ（０．４９ｍｍｏｌ）の４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンのエチレングリコールジメチルエーテル溶液５．０ｍｌへ添加した。混合物を室温下で０．５時間攪拌した。５６ｍｇ（０．５６ｍｍｏｌ）の１−メチルピペラジンを添加し、得られた混合物を一晩攪拌し、２０分間還流した。次いで混合物を冷却し、固体生成物を濾過により集めた。次いで固体生成物を溶媒で洗浄し、真空濾過により乾燥した。
実施例３５
Ｎ−（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル−４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ヘキサノイルアミノテトラサイクリン
４９ｍｇの３７％ホルムアルデヒド（０．６０ｍｍｏｌ）の水溶液を、１４６ｍｇ（０．３０ｍｍｏｌ）の４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ヘキサノイルアミノテトラサイクリンのエチレングリコールジメチルエーテル溶液５．０ｍｌに添加した。混合物を室温下で０．５時間攪拌した。次いで６０ｍｇ（０．６０ｍｍｏｌ）の１−メチルピペラジンを添加し、得られた混合物を一晩攪拌し、２０分間還流した。次いで混合物を冷却し、固体生成物を濾過により集めた。次いで固体生成物を溶媒で洗浄し、真空濾過により乾燥した。
実施例３６
４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシ−９−ヘキサノイルアミノテトラサイクリン
１．５４g（７．２ｍｍｏｌ）の無水ヘキサン酸及び１５０ｍｇの１０％Ｐｄ／Ｃ触媒を、６ｍｌの１，４−ジオキサン及び６．０ｍｌのメタノール中の３００ｍｇ（０．７２ｍｍｏｌ）の４−デジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンへ添加した。混合物を室温下で一晩水素化した。触媒を濾過により除去し、濾液を真空下で濃縮した。残渣を７ｍｌの酢酸エチル中に溶解し、５０ｍｌのヘキサンで摩砕して固体生成物を生成した。固体生成物を濾過し、真空濾過により乾燥した。
【００４９】
本発明の好ましい態様であると現在考えられるものが記載されたが、当業者はその他の態様及び更なる態様を本発明の精神から離れることなしに行うことができることを認識するだろう。またそのような修飾及び改変は全て請求の範囲の真の範囲内に含まれることが意図される。
実施例３７
光毒性の決定
ＢＡＬＢ／ｃ ３Ｔ３（ＣＣＬ−１６３）細胞をＡＴＣＣより入手し、Ｌ−グルタミン（４ｍＭ）及び１０％新生仔ウシ血清を補充した、抗生物質を含まないダルベッコ最小基本培地（４．５ｇ／ｌグルコース）（ＤＭＥＭ）中で培養した。作業用の細胞バンクを調製したところ、マイコプラズマを含んでいないことが見いだされた。細胞を９６ウェルプレート中、試験品で処理した後、ストレプトマイシンサルフェート（１００μｇ／ｍｌ）及びペニシリン（１００ＩＵ／ｍｌ）を培地に添加した。
テトラサイクリン誘導体の連続希釈を、ＤＭＳＯ中、１００×〜最終試験濃度の濃度で調製した。次いでＤＭＳＯ中のＣＭＴ希釈物を、細胞への適用のためにハンクス緩衝塩溶液（ＨＢＳＳ）中に溶解した。最終のＤＭＳＯ濃度は、処理培養及び対照培養において１％であった。投与量範囲を見いだすアッセイのために、８つの連続希釈が１／２対数刻みで１００〜０．０３ｍｇ／ｍｌの範囲をカバーした。一方、決定用アッセイ（definitive assay）では、予想される５０％毒性のポイントを中心に１／４対数刻み調製した６〜８の投与量を使用した。多くの場合において、ＵＶ光なしの処理に対する投与量範囲はＵＶ光を用いて選択された投与量範囲とは異なっていた。１００ｐｇ／ｍｌが、投与溶液によるＵＶ吸収により引き起こされる擬陰性の結果を防ぐために推奨される最高の投与量である。
【００５０】
対照：各アッセイは負（溶媒）及び正の対照の両方を含んでいた。負の対照の１２ウェルを各９６ウェルプレートにおいて使用した。クロルプロマジン（Sigma）を正の対照として用い、ＣＭＴと同様に調製して投与した。
太陽シミュレーター：ＵＶＡ Ｈ１フィルター（３２０〜４００ｎｍ）を備えたDermalight ＳＯＬ３太陽シミュレーターを適切な高さに調節した。９６ウェルマイクロタイタープレートのふた（lid）を通過するエネルギーの測定は、較正したＵＶラジオメーターＵＶＡセンサーを使用して行った。シミュレーターの高さを、１．７±０．１ｍ／Ｗｃｍ2のＵＶＡエネルギー（得られる線量は１Ｊ／ｃｍ2／１０分間）を送達するように調節した。
【００５１】
光毒性アッセイ：処理２４時間前に１μｌの完全培地に１０4の３Ｔ３細胞を播くことにより、各試験物質についての二つ組のプレートを調製した。処理の前に培地を除去し、細胞を１２５μｌのあらかじめ暖めたＨＢＳＳで１回洗浄した。５０μｌ試験品希釈物を適切なウェルに添加し、プレートを約１時間インキュベーターへ戻した。１時間のインキュベート後、光刺激アッセイ用に指定したプレートを、室温下、１．７±０．１ｍ／Ｗｃｍ2のＵＶＡ光に５０±２分間（ふたをつけたまま）暴露し、５Ｊ／ｃｍ2の照射線量を得た。細胞毒性アッセイに指定した二つ組のプレートを、暗中、室温下で５０±２分間維持した。５０分間の暴露期間後、試験品希釈物プレートからデカントし、細胞を１２５μｌのＨＢＳＳで１回洗浄した。１００μｌの培地を全てのウェルに添加し、細胞を前記と同様にして２４±１時間インキュベートした。
２４時間のインキュベート後、培地をデカントし、培地を含む１００μｌのニュートラルレッドを各ウェルに添加した。プレートをインキュベーターに戻し、約３時間インキュベートした。３時間後、培地をデカントし、各ウェルを２５０μｌのＨＢＳＳで１回すすいだ。プレートをブロットしてＨＢＳＳを除去し、１００μｌのニュートラルレッド溶媒を各ウェルに添加した。室温下、２０分間（振盪しながら）最小のインキュベートし、５５０ｎｍにおける吸光度を、リファレンスとしてブランクの外側セルを用いたプレートリーダーにより測定した。相対的な生存は、同一のプレートにおいて、試験品及び正の対照処理グループにより採取されたニュートラルレッドの量と、負の対照処理グループにより採取されたニュートラルレッドの量とを比較することにより得た。ＵＶＡ暴露及び非暴露についてのＩＣ50値は可能なときにいつでも決定した。１つの投与量範囲の知見及び少なくとも２つの決定的な痕跡（definitive trail）を各ＣＭＴについて行った。
【００５２】
光毒性の決定：テトラサイクリン誘導体の光毒性は、光阻害因子（ＰＩＦ）により測定することができる。ＰＩＦは、ＵＶＡなしのＩＣ50［ＩＣ50（−ＵＶＡ）］とＵＶＡありのＩＣ50［ＩＣ50（＋ＵＶＡ）］とを比較することにより決定した。
ＰＩＦ＝ＩＣ50（−ＵＶＡ）／ＩＣ50（＋ＵＶＡ）
両方のＩＣ50値を決定することができる場合、光毒薬及び非光毒薬とを区別する因子の境界値は５である。５よりも大きい因子は、試験化合物の光毒性の性質を示している。
化学薬品が＋ＵＶＡでのみ細胞毒性であり、−ＵＶＡで試験したときは細胞毒性ではない場合、因子を計算することができない。ただし、あるレベルの光毒性の可能性を示すはっきりとした結果を有するだろう。この場合、「＞ＰＩＦ」を計算することができ、最高の試験可能な投与量（−ＵＶＡ）を「＞ＰＩＦ」の計算に使用するだろう。
＞ＰＩＦ＝最大投与量（−ＵＶＡ）／ＩＣ50（＋ＵＶＡ）
化学品が試験した最高の投与量までに細胞毒性（生存度の５０％の減少）を示さないため、ＩＣ50値（−ＵＶＡ）及びＩＣ50（＋ＵＶＡ）の両方を計算することができない場合、このことは光毒性の可能性の欠如を示すだろう。
【００５３】
構造のインデックス
【化２１】
【化２２】
【化２３】
【化２４】
【化２５】
【００５４】
本発明の態様の例は以下の通りである。
（１）以下の式を有するテトラサイクリン化合物、その医薬的に容しうる塩及び許容しない塩。
【化２６】
（式中、
Ｒ7は水素、アミノ、ニトロ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ、エトキシチオカルボニルチオ、アジド、アシルアミノ、ジアゾニウム、シアノ及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ6-aは水素及びメチルからなる群より選ばれ、
Ｒ6及びＲ5は水素及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ8は水素及びハロゲンからなる群より選ばれ、
Ｒ9は水素、アミノ、アジド、ニトロ、アシルアミノ、ヒドロキシ、エトキシチオカルボニルチオ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジアゾニウム、ジ（低級アルキル）アミノ及びＲＣＨ（ＮＨ2）ＣＯ（式中、Ｒは水素又は低級アルキルである）からなる群より選ばれ、
但し、Ｒ7及びＲ9のいずれかが水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であり、かつＲ7が水素、アミノ、ニトロ、ハロゲン、ジメチルアミノ又はジエチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6及びＲ9が共に水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、かつＲ7が水素、アミノ、ニトロ、ハロゲン又はジエチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシルであり、Ｒ5、Ｒ7及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-a、Ｒ6及びＲ5が共に水素であり、Ｒ9がメチルアミノであり、かつＲ7がジメチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6が水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、Ｒ9がメチルアミノであり、かつＲ7がジメチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6、Ｒ5、Ｒ9が共に水素であり、Ｒ7がシアノであるとき、Ｒ8はハロゲンである。）
（２）以下の式を有するテトラサイクリン化合物、その医薬的に容しうる塩及び許容しない塩。
【化２７】
（式中、
Ｒ7は水素、アミノ、ニトロ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ、エトキシチオカルボニルチオ、アジド、アシルアミノ、ジアゾニウム、シアノ及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ6-aは水素及びメチルからなる群より選ばれ、
Ｒ6及びＲ5は水素及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ4はＮＯＨ、Ｎ−ＮＨ−Ａ及びＮＨ−Ａ（式中、Ａは低級アルキル基である）からなる群より選ばれ、
Ｒ8は水素及びハロゲンからなる群より選ばれ、
Ｒ9は水素、アミノ、アジド、ニトロ、アシルアミノ．ヒドロキシ、エトキシチオカルボニルチオ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ及びＲＣＨ（ＮＨ2）ＣＯ（式中、Ｒは水素又は低級アルキルである）からなる群より選ばれ、
但し、Ｒ4がＮＯＨ、Ｎ−ＮＨ−アルキル又はＮＨ−アルキルであり、かつＲ7、Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＯＨであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6が水素又はヒドロキシルであり、Ｒ7がハロゲンであり、かつＲ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮ−ＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシルであり、かつＲ7、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であり、かつＲ7が水素、アミノ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ又はヒドロキシルであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6及びＲ9が共に水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、かつＲ7がモノ（低級アルキル）アミノ又はジ（低級アルキル）アミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ4がＮＨ−アルキルであり、Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシ又は水素であり、Ｒ7、Ｒ5及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンである。）
（３）以下の式から選ばれる４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物、その医薬的に許容しうる塩及び許容しない塩。
【化２８】
（式中、それぞれの場合において、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は一緒になって下記の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
アジド 水素 水素
ジメチルアミノ 水素 アジド
水素 水素 アミノ
水素 水素 アジド
水素 水素 ニトロ
ジメチルアミノ 水素 アミノ
アシルアミノ 水素 水素
水素 水素 アシルアミノ
アミノ 水素 ニトロ
水素 水素 （Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ
アミノ 水素 アミノ
水素 水素 エトキシチオカルボニルチオ
ジメチルアミノ 水素 アシルアミノ
ジメチルアミノ 水素 ジアゾニウム
ジメチルアミノ クロロ アミノ
水素 クロロ アミノ
アミノ クロロ アミノ
アシルアミノ クロロ アシルアミノ
アミノ クロロ 水素
アシルアミノ クロロ 水素
モノアルキルアミノ クロロ アミノ
ニトロ クロロ アミノ
ジメチルアミノ クロロ アシルアミノ
ジメチルアミノ クロロ ジメチルアミノ
ジメチルアミノ 水素 水素
水素 水素 ジメチルアミノ）及び、
【化２９】
（式中、それぞれの場合において、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は一緒になって下記の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
アジド 水素 水素
ジメチルアミノ 水素 アジド
水素 水素 アミノ
水素 水素 アジド
水素 水素 ニトロ
ジメチルアミノ 水素 アミノ
アシルアミノ 水素 水素
水素 水素 アシルアミノ
アミノ 水素 ニトロ
水素 水素 （Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ
アミノ 水素 アミノ
水素 水素 エトキシチオカルボニルチオ
ジメチルアミノ 水素 アシルアミノ
水素 水素 ジアゾニウム
水素 水素 ジメチルアミノ
ジアゾニウム 水素 水素
エトキシチオカルボニルチオ 水素 水素
ジメチルアミノ クロロ アミノ
アミノ クロロ アミノ
アシルアミノ クロロ アシルアミノ
水素 クロロ アミノ
アミノ クロロ 水素
アシルアミノ クロロ 水素
モノアルキルアミノ クロロ アミノ
ニトロ クロロ アミノ）及び、
【化３０】
（式中、Ｒ8は水素又はハロゲンであり、Ｒ9はニトロ、（Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ及びエトキシチオカルボニルチオからなる群より選ばれる。）及び、
【化３１】
（式中、それぞれの場合において、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は一緒になって下記の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
アミノ 水素 水素
ニトロ 水素 水素
アジド 水素 水素
ジメチルアミノ 水素 アジド
水素 水素 アミノ
水素 水素 アジド
水素 水素 ニトロ
ブロモ 水素 水素
ジメチルアミノ 水素 アミノ
アシルアミノ 水素 水素
水素 水素 アシルアミノ
アミノ 水素 ニトロ
水素 水素 （Ｎ，Ｎ−ジメチル）グリシルアミノ
アミノ 水素 アミノ
ジエチルアミノ 水素 水素
水素 水素 エトキシチオカルボニルチオ
ジメチルアミノ 水素 メチルアミノ
ジメチルアミノ 水素 アシルアミノ
ジメチルアミノ クロロ アミノ
アミノ クロロ アミノ
アシルアミノ クロロ アシルアミノ
水素 クロロ アミノ
アミノ クロロ 水素
アシルアミノ クロロ 水素
モノアルキルアミノ クロロ アミノ
ニトロ クロロ アミノ）
（４）以下の式で示されるテトラサイクリン化合物、その医薬的に許容しうる塩、許容しない塩。
【化３２】
【化３３】
【化３４】
（式中、
Ｒ7は水素、アミノ、ニトロ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジ（低級アルキル）アミノ、エトキシチオカルボニルチオ、アジド、アシルアミノ、ジアゾニウム、シアノ及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ6-aは水素及びメチルからなる群より選ばれ、
Ｒ6及びＲ5は水素及びヒドロキシルからなる群より選ばれ、
Ｒ8は水素及びハロゲンからなる群より選ばれ、
Ｒ9は水素、アミノ、アジド、ニトロ、アシルアミノ、ヒドロキシ、エトキシチオカルボニルチオ、モノ（低級アルキル）アミノ、ハロゲン、ジアゾニウム、ジ（低級アルキル）アミノ及びＲＣＨ（ＮＨ2）ＣＯ（式中、Ｒは水素又は低級アルキルである）からなる群より選ばれ、
Ｒa及びＲbは水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル及び１−メチルエチルからなる群より選ばれ、
但し、Ｒa及びＲbは共に水素ではなく、
Ｒc及びＲdは独立して（ＣＨ2）nＣＨＲe（式中、ｎは０又は１であり、Ｒeは水素、アルキル、ヒドロキシ、低級（Ｃ1〜Ｃ3）アルコキシ、アミノ及びニトロからなる群より選ばれる）であり、
Ｗは（ＣＨＲe）m（式中、ｍは０〜３であり、Ｒeは前記と同様である。）、ＮＨ、Ｎ（Ｃ1〜Ｃ3）の直鎖又は分岐したアルキル、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｃ1〜Ｃ4）の直鎖又は分岐したアルコキシからなる群より選ばれる。）
（５）以下の条件：
Ｒ7及びＲ9のいずれかが水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-a、Ｒ6、Ｒ5及びＲ9が共に水素であり、かつＲ7が水素、アミノ、ニトロ、ハロゲン、ジメチルアミノ又はジエチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6及びＲ9が共に水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、かつＲ7が水素、アミノ、ニトロ、ハロゲン又はジエチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6がヒドロキシルであり、Ｒ5、Ｒ7及びＲ9が共に水素であるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-a、Ｒ6及びＲ5が共に水素であり、Ｒ9がメチルアミノであり、かつＲ7がジメチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6が水素であり、Ｒ5がヒドロキシルであり、Ｒ9がメチルアミノであり、かつＲ7がジメチルアミノであるとき、Ｒ8はハロゲンであり、
Ｒ6-aがメチルであり、Ｒ6、Ｒ5、Ｒ9が共に水素であり、Ｒ7がシアノであるとき、Ｒ8はハロゲンである、
を有する、前記（４）記載の方法。
（６）ＰＩＦが約１である、前記（１）記載のテトラサイクリン化合物。
（７）以下の化合物からなる群より選ばれる、前記（６）記載のテトラサイクリン化合物。
【化３５】
（式中、それぞれの場合において、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は一緒になって下記の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
水素 水素 アミノ
水素 水素 パルミタミド）及び、
【化３６】
（式中、それぞれの場合において、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は一緒になって下記の意味を有する。
Ｒ7 Ｒ8 Ｒ9
水素 水素 アセトアミド
水素 水素 ジメチルアミノアセトアミド
水素 水素 ニトロ
水素 水素 アミノ）及び、
【化３７】
（式中、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9はそれぞれ水素、水素及びニトロである。）
（８）ＰＩＦが１〜２の間の値である、前記（１）に記載のテトラサイクリン化合物。
（９）以下の一般式を有する、前記（８）に記載のテトラサイクリン化合物。
【化３８】
（式中、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9はそれぞれ水素、水素及びジメチルアミノである。）
（１０）テトラサイクリン化合物の非抗菌的投与量からの利益を得る状態を患う哺乳類を治療する方法であって、
前記（１）、（２）、（３）又は（４）に記載のテトラサイクリン化合物の有効量を該哺乳類へ投与する工程を含み、
該状態が、過剰なコラーゲンの分解、過剰なＭＭＰ酵素活性、過剰なＴＮＦ活性、過剰な一酸化窒素活性、過剰なＩＬ−１活性、過剰なエラスターゼ活性、骨密度の過剰な減少、過剰なタンパク質分解、過剰な筋肉の消耗、コラーゲンの過剰なグリコシル化、過剰なＣＯＸ−２活性、不十分な骨タンパク質合成、不十分なインターロイキン１０生産又は過剰なホスホリパーゼＡ2活性により特徴付けられる、
ことを特徴とする方法。
（１１）前記の状態が、腹部大動脈瘤、角膜の潰瘍形成、歯周病、糖尿病、真性糖尿病、強皮病、早老症、肺疾患、癌、移植片対宿主病、抑制された骨髄機能の疾患、血小板減少症、人工関節の緩み、脊椎関節症、骨粗鬆症、パジェット病、自己免疫疾患、全身性エリテマトーデス、急性又は慢性炎症状態、腎疾患又は膠原病である、前記（１０）に記載の方法。
（１２）前記急性又は慢性炎症状態には、例えば炎症性腸疾患、関節炎、骨関節炎、関節リウマチ、膵炎、腎炎、糸球体腎炎、敗血症、敗血性ショック、リポ多糖内毒素性ショック、多臓器不全又は乾癬である、前記（１１）に記載の方法。
（１３）前記肺疾患が、ＡＲＤＳ、嚢胞性線維症、肺気腫又は毒薬の吸入による急性肺損傷である、前記（１１）に記載の方法。
（１４）前記腎疾患が、慢性腎不全、急性腎不全、腎炎又は糸球体腎炎である、前記（１１）に記載の方法。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の構造Ｐを有する４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物。
（式中、Ｒ8は水素であり、Ｒ9はニトロである。）
【請求項１】
以下の構造Ｐを有する４−デジメチルアミノテトラサイクリン化合物。
（式中、Ｒ8は水素であり、Ｒ9はニトロである。）
【公開番号】特開２０１１−２１０３２（Ｐ２０１１−２１０３２Ａ）
【公開日】平成２３年２月３日（２０１１．２．３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−２３８５９１（Ｐ２０１０−２３８５９１）
【出願日】平成２２年１０月２５日（２０１０．１０．２５）
【分割の表示】特願２０００−５８２０３１（Ｐ２０００−５８２０３１）の分割
【原出願日】平成１１年１１月１８日（１９９９．１１．１８）
【出願人】（５０００５６８５１）コッラジェネックス ファーマシューチカルス インコーポレイテッド (7)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年２月３日（２０１１．２．３）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年１０月２５日（２０１０．１０．２５）
【分割の表示】特願２０００−５８２０３１（Ｐ２０００−５８２０３１）の分割
【原出願日】平成１１年１１月１８日（１９９９．１１．１８）
【出願人】（５０００５６８５１）コッラジェネックス ファーマシューチカルス インコーポレイテッド (7)
【Ｆターム（参考）】
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