薄層クロマトグラフィ用プレート、その製造方法及びその使用方法
【課題】品質の安定性が得られるクリプトフィックス2.2.2検出用の薄層クロマトグラフィを提供する。
【解決手段】薄層クロマトグラフィは、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液１００質量部に対して、塩酸が１質量部以下（塩酸１％以下）になるように加えた使用液を、シリカゲルが塗布された薄層プレートに浸漬させてなる。薄層クロマトグラフィ表面の退色原因として、塗布されたヨウ化白金錯体からのヨウ素イオンの遊離が考えられる。加える濃塩酸の濃度を１％以下とすることで、ヨウ化白金錯体からのヨウ素の遊離を遅らせることができる。
【解決手段】薄層クロマトグラフィは、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液１００質量部に対して、塩酸が１質量部以下（塩酸１％以下）になるように加えた使用液を、シリカゲルが塗布された薄層プレートに浸漬させてなる。薄層クロマトグラフィ表面の退色原因として、塗布されたヨウ化白金錯体からのヨウ素イオンの遊離が考えられる。加える濃塩酸の濃度を１％以下とすることで、ヨウ化白金錯体からのヨウ素の遊離を遅らせることができる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、クリプトフィックス2.2.2を検出するための薄層クロマトグラフィ用プレートに関する。
【背景技術】
【０００２】
医療分野において、人体内部を画像によって観察・診断する方法の一つとして、近年、陽子を放出する物質を用いたＰＥＴシステム（ポジトロン［陽子］・エミッション［放出］・トモグラフィ［断層写真法］システム）による画像診断法が注目されている。ＰＥＴシステムによる画像診断法によれば、ガンなどの疾患の形態画像のみならず、体内における血液や酸素の動きなどの機能画像を得ることができ、脳障害や心臓病などの診断に大きな威力が発揮される。
【０００３】
ＰＥＴシステムは、短半減期の放射性同位元素で標識化したグルコースを人体内に投与し、エネルギを消費する腫瘍等に集まる放射性同位元素が崩壊するときのγ線を検知して、腫瘍等を動態的に検知する等に用いられる画像診断システムである。ＰＥＴシステムの概略は次の通りである。
（１）サイクロトロンにおいてイオンを高エネルギに加速する。
（２）加速されたイオンを、反応容器であるターゲットボックスにおいて、ターゲットと呼ばれる材料に照射することにより、放射性核種を生成する。
（３）上記放射性核種を原料とし、標識化合物合成装置において、人体に投与できる放射性同位元素で標識された化合物を調製する。
（４）このようにして調製された標識化合物を人体内に投与し、そして、スキャナによって人体内に取り込まれた上記標識化合物の分布を検出し、検出結果をコンピュータにより画像化する。
【０００４】
ＰＥＴシステムで採用される一般的な標識化合物は、18Ｆ-ＦＤＧ（2-18Ｆ-フルオロ-2-デオキシ-D-グルコース）である。18Ｆ-ＦＤＧは、グルコースの一部を陽電子放出核種の18Ｆ（半減期１１９．７分）に置き換えた標識化合物である。２００２年に18Ｆ-ＦＤＧが薬価収載されて以来、18Ｆ-ＦＤＧを臨床使用する施設が増加している。
【０００５】
18Ｆ-ＦＤＧの合成で最も広く用いられている方法では、トリフレート（1,3,4,6-テトラ-O-アセチル-2-O-トリフルオロメタンスルホニル-β-D-マンノピラノース）の18Ｆフッ素化合物求核置換を促進するために、クリプトフィックス2.2.2（アミノポリエーテル4,7,13,16,21,24-ヘキサオキソ-1,10-ジアザビシクロ［8.8.8］-ヘキサコサノール）を、相間移動触媒として利用している。
【０００６】
クリプトフィックス2.2.2には毒性［IVratＬＤ50＝35mg/kg］があるため、18Ｆ-ＦＤＧ中にクリプトフィックス2.2.2が無いことを証明する必要がある。それゆえ、クリプトフィックス2.2.2を触媒として用いた合成法による18Ｆ-ＦＤＧ注射液は、患者に投与する前に品質検定され、当該注射液中に残存するクリプトフィックス2.2.2が基準値以下であることが確認される。
【０００７】
従来、18Ｆ-ＦＤＧの品質検定項目中の残留クリプトフィックス2.2.2の確認試験には、クリプトフィックス2.2.2を滴下した薄層クロマトグラフィを展開し、ヨウ素で発色させる方法が用いられてきたが、判定時間が２０分程度かかってしまう。18Ｆ-ＦＤＧは半減期が１１９．７分という短寿命の標識化合物であるから、迅速な品質検定が求められる。
【０００８】
より時間がかからず且つ簡便な方法として、非特許文献１には、発色試薬を塗布した薄層クロマトグラフィに、合成された18Ｆ-ＦＤＧと陽性コントロールのクリプトフィックス2.2.2溶液（４０ｐｐｍ）を滴下するだけで、18Ｆ-ＦＤＧ中に規定量以上のクリプトフィックス2.2.2が含まれているか否かを視覚的に５分以下で判定できる「カラースポットテスト」が提案されている。
【０００９】
この非特許文献１には、薄層クロマトグラフィは、発色試薬としてヨウ化白金試薬を調合し、その後、シリカゲルが塗布されたプレート（プラスチックで裏打ちされたシリカゲル６０の薄層クロマトグラフィ）をヨウ化白金試薬の水溶液に浸漬することで製造されることが記載されている。そして、ヨウ化白金試薬の調合について、「ヨウ化白金試薬の原液は、５％塩化白金酸溶液５mLと１０％ヨウ化カリウム溶液４５mLとを混合することにより、調合された。酸性のヨウ化白金試薬は、塩酸１とカラー試薬の原液１０（ヨウ化白金試薬の原液１０ 注：出願人追加）とを、又は塩酸１とカラー試薬の原液４（ヨウ化白金試薬の原液４ 注：出願人追加）とを混合することにより、調合された」（非特許文献１、193頁右欄第３段落）と記載されている。
【００１０】
【非特許文献１】Nuclear Medicine & Biology, Vol.24, 193-195, 1997
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
発色試薬は、塩化白金(II):Ｈ2[ＰｔＣｌ6]・６Ｈ2Ｏ水溶液にヨウ化カリウム（ＫＩ）水溶液を加えて調製されたヨウ化白金錯体であり、その錯体構造は[ＰｔＩ4Ｃｌ2]2-，[ＰｔＩ2Ｃｌ4]2-または両者が混在していると推測される。錯体試薬の性質として薄層クロマトグラフィの調製後、時間の経過とともに薄層クロマトグラフィ表面の色が変化するが、その性質は製品の低い安定性と短い有効期間の原因となる。色の変化はさまざまであり、調製直後のピンクがかった色から紫色または黄土色、そして白色へと退色していく。また、発色試薬の塩酸濃度が高く、かなり低いｐＨ値であるため、自動品質管理装置で行うｐＨ試験に影響を及ぼす可能性がある。
【００１２】
日常の品質検定試験に薄層クロマトグラフィを使用するためには、その品質の安定性が必要である。そこで本発明は、品質の安定性が得られる薄層クロマトグラフィを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
塩化白金(II):Ｈ2[ＰｔＣｌ6]・6Ｈ2Ｏ水溶液にＫＩ水溶液を加えることにより、[ＰｔＣｌ6]2-は[ＰｔＩ4Ｃｌ2]2-，[ＰｔＩ2Ｃｌ4]2-などのようなヨウ化錯体となり、その退色原因として、塗布されたヨウ化白金錯体からのヨウ素イオンの遊離が考えられる。そこで今回、ヨウ化白金錯体からのヨウ素の遊離を遅らせる方法を検討した。非特許文献１に記載の方法によると、薄層クロマトグラフィの作成時に反応を敏感にするために１０％の濃塩酸を加えているが、作成された薄層クロマトグラフィは強酸性になり、ヨウ化白金錯体からヨウ素を遊離させる要因となり、また自動品質管理装置で行うｐＨ試験に影響を及ぼす可能性がある。そこで、加える濃塩酸の濃度を０％〜１％としたプレートを作成し、クリプトフィックス2.2.2の半定量試験を行ったところ、４週間後でも問題なく判定を行うことができ、また自動品質管理装置で行うｐＨ試験に影響を及ぼさなかった。
【００１４】
すなわち請求項１に記載の発明は、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液１００質量部に対して、塩酸が０質量部を超えて１質量部以下になるように加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬させてなることを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートにより、上述した課題を解決する。
【００１５】
請求項２に記載の発明は、請求項１に記載の薄層クロマトグラフィ用プレートにおいて、シリカゲルが塗布された前記薄層プレートの裏面支持体は、アルミ、ガラス又は紙からなることを特徴とする。
【００１６】
請求項３に記載の発明は、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液１００質量部に対して、塩酸が０質量部を超えて１質量部以下になるように加えた使用液を得る工程と、前記使用液にシリカゲルが塗布されたプレートを浸漬させる工程と、を備えることを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの製造方法である。
【００１７】
請求項４に記載の発明は、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートを、デシケータで除湿しながら保存することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの保存方法である。ここで、デシケータには、デシケータ内の湿度をコントロールする装置が装備されたデシケータが用いられても良いし、容器の中にシリカゲル等の乾燥剤が入っているだけのデシケータが用いられてもよい。
【００１８】
請求項５に記載の発明は、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートを、光を遮断しながら保存することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの保存方法である。
【００１９】
請求項６に記載の発明は、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートを、冷蔵しながら保存することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの保存方法である。
【００２０】
請求項７に記載の発明は、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートを、コルクなどの緩衝材に載せて輸送することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの輸送方法である。
【００２１】
請求項８に記載の発明は、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートが、劣化して退色した後に、前記薄層クロマトグラフィ用プレートにヨウ化カリウム溶液を塗布することにより復活させることを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの復活方法である。
【００２２】
請求項９に記載の発明は、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートに、18Ｆ-ＦＤＧ（2-18Ｆ-フルオロ-2-デオキシ-D-グルコース）試料、及びクリプトフィックス2.2.2（アミノポリエーテル4,7,13,16,21,24-ヘキサオキソ-1,10-ジアザビシクロ[8.8.8]-ヘキサコサノール）標準液を滴下し、同一の薄層クロマトグラフィ用プレートに滴下した前記18Ｆ-ＦＤＧ試料及び前記クリプトフィックス2.2.2標準液の発色状況を撮像装置で撮像し、前記18Ｆ-ＦＤＧ試料及び前記クリプトフィックス2.2.2標準液の発色画像を比較することにより、前記18Ｆ-ＦＤＧ試料のクリプトフィックス2.2.2濃度を判定し、得られた前記発色画像を記録として保存することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの使用方法である。
【００２３】
請求項１０に記載の発明は、請求項１又は２に記載の薄層クロマトグラフィ用プレートを、クリプトフィックス2.2.2（アミノポリエーテル4,7,13,16,21,24-ヘキサオキソ-1,10-ジアザビシクロ[8.8.8]-ヘキサコサノール）又は第３級アミンの検出に用いることを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの使用方法である。
【発明の効果】
【００２４】
請求項１に記載の発明によれば、長期間保存しても脱色し難い薄層クロマトグラフィが得られる。
【００２５】
請求項２に記載の発明によれば、薄層プレートの裏面支持体にガラスを用いることにより、滴下時のばらつきをなくして判定を一定にできる。また自動検査装置への保持も安定し、自動滴下のばらつきもなくすことができる。ガラスだけでなく、アルミシート、紙などの扱い易い柔らかな材質も保持方法によっては使用できる。
【００２６】
請求項３に記載の発明によれば、長期間保存しても脱色し難い薄層クロマトグラフィが得られる。
【００２７】
請求項４に記載の発明によれば、デシケータで除湿することにより、長期間薄層クロマトグラフィの品質を安定化させることができる。
【００２８】
請求項５に記載の発明によれば、薄層クロマトグラフィを遮光されたケース内に保存して光を遮断することで、薄層クロマトグラフィの品質を安定化させることができる。この場合、ケースはプラスチックに限らず、木製などの光を遮断する構造になっていればよい。
【００２９】
請求項６に記載の発明によれば、薄層クロマトグラフィを冷蔵保存することで、薄層クロマトグラフィの品質を長期間安定化させることができる。温度を下げると活性が下がるので、ヨウ素イオンの遊離が押さえられるからである。蓋付きガラス容器（目張りはしていない）に入れて薄層クロマトグラフィを冷蔵保存した場合、３ヶ月後でも全く問題なく使用できることが確認されている。
【００３０】
請求項７に記載の発明によれば、薄層クロマトグラフィ用プレートをコルクなどの緩衝材に載せて輸送することで、薄層クロマトグラフィ用プレートの破損を防止できる。ただし、コルクは、その性質として２〜６％の水分を保つため強塩酸を残留させる可能性があり、安定した保管の妨げになると考えられる。しかし、デシケータ内に輸送箱の蓋を開けて保管、又はコルクをはがして蓋を閉じて保管した場合、一ヶ月間保色している。すなわち、緩衝材としてコルクを使用した場合、強塩酸の残留というマイナス要因があるものの、上のような保管方法をとれば実用上問題なく、かつ、安全な輸送を確保できる。
【００３１】
請求項８に記載の発明によれば、劣化して脱色した薄層クロマトグラフィ用プレートを復活させることができる。
【００３２】
請求項９に記載の発明によれば、同一プレートに滴下された18Ｆ-ＦＤＧ試料とクリプトフィックス2.2.2標準液の発色画像を撮像装置で同時に撮像し、その画像を比較することにより試料の濃度の判定を容易にすると同時に、記録として保存することができる。
【００３３】
請求項１０に記載の発明のように、作成された薄層クロマトグラフィ用プレートは、クリプトフィックス2.2.2以外にも第３級アミンとも反応するので、第３級アミンの検出にも用いることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３４】
以下に本発明の一実施形態における薄層クロマトグラフィの製造方法について説明する。
１．発色試薬の調製
(1)購入試薬、購入薄層プレート
試薬として、塩化白金酸六水和物、ヨウ化カリウム、塩酸、クリプトフィックス2.2.2を購入し、薄層プレートとして、シリカゲルが塗布された薄層プレートを購入する。薄層プレートの大きさは２ｃｍ×５ｃｍのものを用意する。ここで、薄層プレートに２０ｃｍ×２０ｃｍの大きなものを用意し、使用液を塗布した後に２ｃｍ×５ｃｍの大きさに切断してもよい。
【００３５】
上記非特許文献１では、薄層プレートの裏面支持体にプラスチックを用いていたが、本実施形態ではガラスを用いる。ガラスを用いることにより、滴下時のばらつきをなくして判定を一定にできるという効果がある。また、自動品質管理装置への保持も安定でき、自動滴下でのばらつきもなくすことができる。ただし、ガラスの他にアルミシート又は紙を用いてもよい。
【００３６】
(2)原液、使用液の調製
５％塩化白金酸溶液５ｍｌ、１０％ヨウ化カリウム溶液４５ｍｌ、水１００ｍｌを混合することにより、原液を調合する。そして、原液１００質量部に対して塩酸を０質量部を超えて１質量部以下添加して、塩酸０％を超えて１％以下の使用液を調合する。塩酸は１％以下であるが０％ということはない。
【００３７】
つまり、原液の組成は以下の表１のようになり、使用液の組成は表２のようになる。
【表１】
【表２】
【００３８】
２．薄層クロマトグラフィの作成
調製した使用液をプラスチックケースに入れ、２ｃｍ×５ｃｍのＴＬＣ（Thin-layer chromatography:薄層クロマトグラフィ）プレートを並べたかごを使用液に浸漬させる。その後、かごからＴＬＣプレートを注意深く取り出し、Blottingペーパ（キムワイプ等）の上に載せて室内で一晩放置乾燥、またはクリーンベンチで１．５時間乾燥させる。
この他にも、２０ｃｍ×２０ｃｍの薄層プレートのシリカゲルの表面に、噴霧器を用いて使用液を３〜５回、均一にコートするように噴霧し、乾燥後、２ｃｍ×５ｃｍの大きさにカットしてもよい。
以上により、薄層クロマトグラフィが作成される。
【００３９】
３．薄層クロマトグラフィを用いたカラースポットテスト
(1)カラースポットテストの測定手順
18Ｆ-ＦＤＧ試料液及び陽性コントロール（クリプトフィックス2.2.2の濃度４０ｐｐｍ）された標準液のそれぞれ５〜１０μｌ程度を、マイクロピペット又はマイクロシリンジで薄層クロマトグラフィに滴下する。そして、下記の判定基準に従い定量する。
【００４０】
(2)カラースポットテストの判定手順（図１参照）
陽性（＞４０ｐｐｍ） 試料が滴下されると未反応の試薬は水溶液で周辺部（環）に洗い流され、結果としてシリカゲルの白色円の桃色環状となる。クリプトフィックス2.2.2のスポットは中央に小さな暗黒環として現れる。スポットの直径は白色環の約１／３である。
陰性（＜４０ｐｐｍ） 低クリプトフィックス2.2.2濃度（例えば２０ｐｐｍ）の場合、中央のスポットは桃色で青黒環のはっきりとした縁が見られる。
陰性（０ｐｐｍ） クリプトフィックス2.2.2が存在しない場合は、中央にわずかな緑色スポットは残るが、はっきりした縁が見られない。
【００４１】
(3)カラースポットテストの長所・短所
ヨウ化白金酸試薬はクリプトフィックス2.2.2に特異的ではなく、第３級アミンとも反応する。それゆえ擬陽性の反応（スポット）が出る可能性がある。すなわち、陽性反応の場合、18Ｆ-ＦＤＧ試料液にクリプトフィックス2.2.2が存在していることの証明にならない。しかし陰性反応の場合、クリプトフィックス2.2.2が存在しないことの証明になる。
【００４２】
(4)従来の展開方法との比較
カラースポットテストは、通常のＴＬＣのような試料滴下→乾燥→展開→乾燥→発色などの作業工程が短縮でき、試料を滴下するだけで測定できる。したがって被曝を低減できる。
従来のＴＬＣでは結果判定まで１５〜２０分ほどかかるが、本法ではその場で判定が可能になる。したがって時間が短縮できる。
ＴＬＣ作業熟練者でなくても操作が簡便なため、正確に結果判定が可能になる。したがって操作ミスを低減できる。
従来のＴＬＣのような展開層、展開試薬、着色試薬、着色層、放射線遮蔽設備などが必要ない。
従来のＴＬＣのようにヨウ素発色の場合の退色がなく、結果判定がし易く、またＣＣＤカメラ等での画像保存が容易になる。したがって品質検定結果を保存することができる。
【実施例】
【００４３】
日常の品質検定試験にカラースポット薄層クロマトグラフィ（以下「カラースポットテスト」という。）を使用するためには、その品質の安定性が必要である。そこで今回、発色試薬に加える塩酸量を少なくすることによりカラースポットテストの安定性が得られるかを検討した。またカラースポットテストの安定性に影響を与えるであろうと推測される要因として、光、乾燥、湿度、輸送箱内のコルク等についても検討し、品質の安定性と長期保存の可能性について検討した。
【００４４】
カラースポットテストは上記に記載の製造方法で作成した。カラースポットテストのｐＨの測定には、複合電極のものを用いた。カラースポットテストの保管試験に使用したデシケータはオートドライデシケータで、除湿に固体高分子電解質膜を使用しており、その除湿原理は湿気を水素イオン（Ｈ−）と酸素（Ｏ2）に分解し、水素イオンを固体高分子電解質膜を通して庫外に排出する方法で除湿している。
【００４５】
作成したカラースポットテストの色調変化を経時的に測色記録した。測色方法は目測法で測定し、変色の程度を視覚的に判定するため、色見本として大日本インキ社のColor Chartを用いた。昼白色の照明光源をカラースポットテストの真上方向から当て、４５度の方向から視覚的に色調を観察した。観察するカラースポットテストは平面状に並ぶように隣接配置した。作業背景として、測色するカラースポットテストを並べる部分は白色の紙で覆った。また、デジタルカメラによりその色を記録した。撮影は一定条件で行った。カラースポットテストの品質を検査するために１週間毎にマイクロピペットを用いてクリプトフィックス2.2.2の４０ｐｐｍ，２０ｐｐｍ及び18Ｆ-ＦＤＧをカラースポットテストに滴下し、暗黒色のbull’s-eye生成の有無により、カラースポットテストが品質検定に使用できる状態であるかを確認した。
【００４６】
カラースポットテストの保管方法として、(1)本発明の一実施形態である輸送箱（図２参照。薄層クロマトグラフィ用プレート１を、コルク２などの緩衝材に載せて輸送。ケース３には蓋４がついている。そして遮光のため輸送箱は黒色）にカラースポットテストを入れ、箱の蓋を開けたままデシケータ内で保管、(2)デシケータ内に直接カラースポットテストを並べ、キムタオル（紙タオルの一種）をかけて保管、(3)プラスチックケースにカラースポットテストを入れ、箱のふたをして保管、(4) プラスチックケースにカラースポットテストとシリカゲルを入れ、箱のふたをして保管、(5)輸送箱のコルクをはがしてカラースポットテストを入れ、箱のふたを閉じて保管の方法を検討した。
【００４７】
１％の塩酸濃度で作成した発色試薬はｐＨ０．９５であり、この発色試薬で作成したカラースポットテストは保管方法に係らず、１ヶ月間保色していた（図３ないし図５参照）。そのうち、最も色の変化が少なかったのはオートドライデシケータ内での保管であった。実験を行った室内の温度は２４℃〜２６℃に保たれていたが湿度は２３〜４９％の幅があった。オートドライデシケータ内の温度は約２５℃、湿度は２５％に保たれていた。また、カラースポットテストの乾燥方法に関しては、クリーンベンチで長時間カラースポットテストを乾燥させると、強風のためにガラス切断面からシリカゲルがはがれる現象が見られた（図６参照）。
【００４８】
塩化白金(II):Ｈ2[ＰｔＣｌ6]・6Ｈ2Ｏ水溶液にＫＩ水溶液を加えることにより、[ＰｔＣｌ6]2-は[ＰｔＩ4Ｃｌ2]2-，[ＰｔＩ2Ｃｌ4]2-などのようなヨウ化白金錯体となり、その退色原因として、塗布されたヨウ化白金錯体からのヨウ素イオンの遊離が考えられる。その確認のために、白色に脱色して４０ｐｐｍのクリプトフィックス2.2.2に反応しなくなった薄層クロマトグラフィに再びＫＩ水溶液を塗布すると再使用が可能になった。また、保管に使用したプラスチックケースの色が透明から黄色へ変化したことからもヨウ素の遊離が推察できる。そこで今回、ヨウ化白金錯体からのヨウ素の遊離を遅らせる方法を検討した。非特許文献１に記載の方法によると、薄層クロマトグラフィの作成時に３級アミンとの反応を敏感にするために１０％の濃塩酸を加えているが、作成された薄層クロマトグラフィは強酸性になり、ヨウ化白金錯体からヨウ素を遊離させる要因となり、また自動品質管理装置で行うｐＨ試験に影響を及ぼす可能性がある。そこで、加える濃塩酸の濃度を１％以下として薄層クロマトグラフィを作成し、クリプトフィックス2.2.2の半定量試験を行ったところ、４週間後でも問題なく判定を行うことができ、また自動品質管理装置で行うｐＨ試験に影響を及ぼさなかった。保管方法に関してはカラースポットテストの納品に用いている輸送箱は緩衝材として箱の内側にコルクが貼られているが、その性質として２〜６％の水分を保つため、カラースポットテストに使用された強塩酸を輸送箱中に残留させる可能性が考えられた。そこで、コルクの有無についても検討した。また、光の影響については透明プラスチックケースを使用することにより確認した。
【００４９】
今回の実験で保管に最も適した条件は輸送箱から取り出してオートドライデシケータ内に並べ、その上にキムタオルをかぶせた保管方法であった。オートドライデシケータ内での保管がカラースポットテストの色を保った理由として、庫内が一定の条件に保たれていることが考えられる。オートドライデシケータは除湿に固体高分子電解質膜を使用しており、その除湿の原因として湿気を水素イオン（Ｈ−）と酸素（Ｏ2）に分解し、分解された水素イオンは固体高分子電解質膜を通して庫外に排出されるが分解された酸素は庫内に残る。ゆえに庫内の酸素濃度は庫外よりも高濃度となる。濃塩酸を加えて作成したカラースポットテストからはＩ−が遊離する。遊離したＩ−はデシケータ内のＯ2によりＩ2になる。そのため、庫内のＩ2濃度は庫外よりも高い濃度に保たれると考えられ、このことがオートドライデシケータ中でのカラースポットテストの保管が最も良い結果を示したと考察される。また、オートドライデシケータ内に輸送箱のまま保管した場合、コルクがその性質として２〜６％の水分を保ち、強塩酸を残留させる可能性があるので、安定した保管の妨げになると考えられた。しかし、オートドライデシケータ内に輸送箱の蓋を開けて保管、又はコルクをはがして蓋を閉じて保管した場合、一ヶ月間保色していた。すなわち、緩衝材としてコルクを使用した場合、強塩酸の残留というマイナス要因があるものの、上のような保管方法をとれば実用上問題なく、かつ、安全な輸送を確保できる。
【００５０】
なお本発明は上記実施形態の限られることなく、本発明の要旨を変更しない範囲で種々変更可能である。例えば、上記実施形態では、薄層クロマトグラフィ用プレートを、18Ｆ-ＦＤＧ試料中のクリプトフィックス2.2.2の検出に用いているが、第３級アミンの検出に用いても良い。
【００５１】
またＦ−ＭＩＳＯ（フッ素１８標識ミソニダゾール）、Ｆ−ＦＬＴ（フッ素１８標識チミジン）、Ｆ−タイロシン（フッ素１８標識チロシン）などのクリプトフィックス2.2.2を使用して合成された放射性薬剤中のクリプトフィックス2.2.2の検出に用いてもよい。
【００５２】
薄層クロマトグラフィ用プレートは、フッ素−１８（半減期１１９．７分）以外の放射性核種（例えば炭素―１１（半減期２０．３８分），窒素−１３（半減期９．９６分），酸素−１５（半減期１２２秒）他）のみならず、放射性各種全般に応用でき、その核種で標識された標識化合物に使用してもよい。
【００５３】
薄層プレートの裏面支持体にはガラスを用いているが、ガラス以外にアルミシート、紙、プラスチックを用いることもできる。
【図面の簡単な説明】
【００５４】
【図１】カラースポットテストの判定方法を示す図
【図２】輸送箱を示す斜視図
【図３】プレートの５種類の保管方法について１週間毎の色の変化を示すカラーチャート（色は藍（Ｃ）と紅（Ｍ）と黄（Ｙ）と墨（ＢＬ）が刷り重ねられて構成されており、右端の数値はアミ点濃度（％），「クリプトフィックス試験」はこれらプレートの２８日たったものでの検出試験結果）
【図４】図３の結果のデジタル写真
【図５】プレートの４種類の保管方法について６週〜１５週後の色の変化を示すカラーチャート（色は藍（Ｃ）と紅（Ｍ）と黄（Ｙ）と墨（ＢＬ）が刷り重ねられて構成されており、右端の数値はアミ点濃度（％））
【図６】クリーンベンチで乾燥させた薄層クロマトグラフィを示す写真
【符号の説明】
【００５５】
１…薄層クロマトグラフィ用プレート
２…コルク
３…ケース
４…蓋
【技術分野】
【０００１】
本発明は、クリプトフィックス2.2.2を検出するための薄層クロマトグラフィ用プレートに関する。
【背景技術】
【０００２】
医療分野において、人体内部を画像によって観察・診断する方法の一つとして、近年、陽子を放出する物質を用いたＰＥＴシステム（ポジトロン［陽子］・エミッション［放出］・トモグラフィ［断層写真法］システム）による画像診断法が注目されている。ＰＥＴシステムによる画像診断法によれば、ガンなどの疾患の形態画像のみならず、体内における血液や酸素の動きなどの機能画像を得ることができ、脳障害や心臓病などの診断に大きな威力が発揮される。
【０００３】
ＰＥＴシステムは、短半減期の放射性同位元素で標識化したグルコースを人体内に投与し、エネルギを消費する腫瘍等に集まる放射性同位元素が崩壊するときのγ線を検知して、腫瘍等を動態的に検知する等に用いられる画像診断システムである。ＰＥＴシステムの概略は次の通りである。
（１）サイクロトロンにおいてイオンを高エネルギに加速する。
（２）加速されたイオンを、反応容器であるターゲットボックスにおいて、ターゲットと呼ばれる材料に照射することにより、放射性核種を生成する。
（３）上記放射性核種を原料とし、標識化合物合成装置において、人体に投与できる放射性同位元素で標識された化合物を調製する。
（４）このようにして調製された標識化合物を人体内に投与し、そして、スキャナによって人体内に取り込まれた上記標識化合物の分布を検出し、検出結果をコンピュータにより画像化する。
【０００４】
ＰＥＴシステムで採用される一般的な標識化合物は、18Ｆ-ＦＤＧ（2-18Ｆ-フルオロ-2-デオキシ-D-グルコース）である。18Ｆ-ＦＤＧは、グルコースの一部を陽電子放出核種の18Ｆ（半減期１１９．７分）に置き換えた標識化合物である。２００２年に18Ｆ-ＦＤＧが薬価収載されて以来、18Ｆ-ＦＤＧを臨床使用する施設が増加している。
【０００５】
18Ｆ-ＦＤＧの合成で最も広く用いられている方法では、トリフレート（1,3,4,6-テトラ-O-アセチル-2-O-トリフルオロメタンスルホニル-β-D-マンノピラノース）の18Ｆフッ素化合物求核置換を促進するために、クリプトフィックス2.2.2（アミノポリエーテル4,7,13,16,21,24-ヘキサオキソ-1,10-ジアザビシクロ［8.8.8］-ヘキサコサノール）を、相間移動触媒として利用している。
【０００６】
クリプトフィックス2.2.2には毒性［IVratＬＤ50＝35mg/kg］があるため、18Ｆ-ＦＤＧ中にクリプトフィックス2.2.2が無いことを証明する必要がある。それゆえ、クリプトフィックス2.2.2を触媒として用いた合成法による18Ｆ-ＦＤＧ注射液は、患者に投与する前に品質検定され、当該注射液中に残存するクリプトフィックス2.2.2が基準値以下であることが確認される。
【０００７】
従来、18Ｆ-ＦＤＧの品質検定項目中の残留クリプトフィックス2.2.2の確認試験には、クリプトフィックス2.2.2を滴下した薄層クロマトグラフィを展開し、ヨウ素で発色させる方法が用いられてきたが、判定時間が２０分程度かかってしまう。18Ｆ-ＦＤＧは半減期が１１９．７分という短寿命の標識化合物であるから、迅速な品質検定が求められる。
【０００８】
より時間がかからず且つ簡便な方法として、非特許文献１には、発色試薬を塗布した薄層クロマトグラフィに、合成された18Ｆ-ＦＤＧと陽性コントロールのクリプトフィックス2.2.2溶液（４０ｐｐｍ）を滴下するだけで、18Ｆ-ＦＤＧ中に規定量以上のクリプトフィックス2.2.2が含まれているか否かを視覚的に５分以下で判定できる「カラースポットテスト」が提案されている。
【０００９】
この非特許文献１には、薄層クロマトグラフィは、発色試薬としてヨウ化白金試薬を調合し、その後、シリカゲルが塗布されたプレート（プラスチックで裏打ちされたシリカゲル６０の薄層クロマトグラフィ）をヨウ化白金試薬の水溶液に浸漬することで製造されることが記載されている。そして、ヨウ化白金試薬の調合について、「ヨウ化白金試薬の原液は、５％塩化白金酸溶液５mLと１０％ヨウ化カリウム溶液４５mLとを混合することにより、調合された。酸性のヨウ化白金試薬は、塩酸１とカラー試薬の原液１０（ヨウ化白金試薬の原液１０ 注：出願人追加）とを、又は塩酸１とカラー試薬の原液４（ヨウ化白金試薬の原液４ 注：出願人追加）とを混合することにより、調合された」（非特許文献１、193頁右欄第３段落）と記載されている。
【００１０】
【非特許文献１】Nuclear Medicine & Biology, Vol.24, 193-195, 1997
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
発色試薬は、塩化白金(II):Ｈ2[ＰｔＣｌ6]・６Ｈ2Ｏ水溶液にヨウ化カリウム（ＫＩ）水溶液を加えて調製されたヨウ化白金錯体であり、その錯体構造は[ＰｔＩ4Ｃｌ2]2-，[ＰｔＩ2Ｃｌ4]2-または両者が混在していると推測される。錯体試薬の性質として薄層クロマトグラフィの調製後、時間の経過とともに薄層クロマトグラフィ表面の色が変化するが、その性質は製品の低い安定性と短い有効期間の原因となる。色の変化はさまざまであり、調製直後のピンクがかった色から紫色または黄土色、そして白色へと退色していく。また、発色試薬の塩酸濃度が高く、かなり低いｐＨ値であるため、自動品質管理装置で行うｐＨ試験に影響を及ぼす可能性がある。
【００１２】
日常の品質検定試験に薄層クロマトグラフィを使用するためには、その品質の安定性が必要である。そこで本発明は、品質の安定性が得られる薄層クロマトグラフィを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
塩化白金(II):Ｈ2[ＰｔＣｌ6]・6Ｈ2Ｏ水溶液にＫＩ水溶液を加えることにより、[ＰｔＣｌ6]2-は[ＰｔＩ4Ｃｌ2]2-，[ＰｔＩ2Ｃｌ4]2-などのようなヨウ化錯体となり、その退色原因として、塗布されたヨウ化白金錯体からのヨウ素イオンの遊離が考えられる。そこで今回、ヨウ化白金錯体からのヨウ素の遊離を遅らせる方法を検討した。非特許文献１に記載の方法によると、薄層クロマトグラフィの作成時に反応を敏感にするために１０％の濃塩酸を加えているが、作成された薄層クロマトグラフィは強酸性になり、ヨウ化白金錯体からヨウ素を遊離させる要因となり、また自動品質管理装置で行うｐＨ試験に影響を及ぼす可能性がある。そこで、加える濃塩酸の濃度を０％〜１％としたプレートを作成し、クリプトフィックス2.2.2の半定量試験を行ったところ、４週間後でも問題なく判定を行うことができ、また自動品質管理装置で行うｐＨ試験に影響を及ぼさなかった。
【００１４】
すなわち請求項１に記載の発明は、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液１００質量部に対して、塩酸が０質量部を超えて１質量部以下になるように加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬させてなることを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートにより、上述した課題を解決する。
【００１５】
請求項２に記載の発明は、請求項１に記載の薄層クロマトグラフィ用プレートにおいて、シリカゲルが塗布された前記薄層プレートの裏面支持体は、アルミ、ガラス又は紙からなることを特徴とする。
【００１６】
請求項３に記載の発明は、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液１００質量部に対して、塩酸が０質量部を超えて１質量部以下になるように加えた使用液を得る工程と、前記使用液にシリカゲルが塗布されたプレートを浸漬させる工程と、を備えることを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの製造方法である。
【００１７】
請求項４に記載の発明は、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートを、デシケータで除湿しながら保存することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの保存方法である。ここで、デシケータには、デシケータ内の湿度をコントロールする装置が装備されたデシケータが用いられても良いし、容器の中にシリカゲル等の乾燥剤が入っているだけのデシケータが用いられてもよい。
【００１８】
請求項５に記載の発明は、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートを、光を遮断しながら保存することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの保存方法である。
【００１９】
請求項６に記載の発明は、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートを、冷蔵しながら保存することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの保存方法である。
【００２０】
請求項７に記載の発明は、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートを、コルクなどの緩衝材に載せて輸送することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの輸送方法である。
【００２１】
請求項８に記載の発明は、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートが、劣化して退色した後に、前記薄層クロマトグラフィ用プレートにヨウ化カリウム溶液を塗布することにより復活させることを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの復活方法である。
【００２２】
請求項９に記載の発明は、塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートに、18Ｆ-ＦＤＧ（2-18Ｆ-フルオロ-2-デオキシ-D-グルコース）試料、及びクリプトフィックス2.2.2（アミノポリエーテル4,7,13,16,21,24-ヘキサオキソ-1,10-ジアザビシクロ[8.8.8]-ヘキサコサノール）標準液を滴下し、同一の薄層クロマトグラフィ用プレートに滴下した前記18Ｆ-ＦＤＧ試料及び前記クリプトフィックス2.2.2標準液の発色状況を撮像装置で撮像し、前記18Ｆ-ＦＤＧ試料及び前記クリプトフィックス2.2.2標準液の発色画像を比較することにより、前記18Ｆ-ＦＤＧ試料のクリプトフィックス2.2.2濃度を判定し、得られた前記発色画像を記録として保存することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの使用方法である。
【００２３】
請求項１０に記載の発明は、請求項１又は２に記載の薄層クロマトグラフィ用プレートを、クリプトフィックス2.2.2（アミノポリエーテル4,7,13,16,21,24-ヘキサオキソ-1,10-ジアザビシクロ[8.8.8]-ヘキサコサノール）又は第３級アミンの検出に用いることを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの使用方法である。
【発明の効果】
【００２４】
請求項１に記載の発明によれば、長期間保存しても脱色し難い薄層クロマトグラフィが得られる。
【００２５】
請求項２に記載の発明によれば、薄層プレートの裏面支持体にガラスを用いることにより、滴下時のばらつきをなくして判定を一定にできる。また自動検査装置への保持も安定し、自動滴下のばらつきもなくすことができる。ガラスだけでなく、アルミシート、紙などの扱い易い柔らかな材質も保持方法によっては使用できる。
【００２６】
請求項３に記載の発明によれば、長期間保存しても脱色し難い薄層クロマトグラフィが得られる。
【００２７】
請求項４に記載の発明によれば、デシケータで除湿することにより、長期間薄層クロマトグラフィの品質を安定化させることができる。
【００２８】
請求項５に記載の発明によれば、薄層クロマトグラフィを遮光されたケース内に保存して光を遮断することで、薄層クロマトグラフィの品質を安定化させることができる。この場合、ケースはプラスチックに限らず、木製などの光を遮断する構造になっていればよい。
【００２９】
請求項６に記載の発明によれば、薄層クロマトグラフィを冷蔵保存することで、薄層クロマトグラフィの品質を長期間安定化させることができる。温度を下げると活性が下がるので、ヨウ素イオンの遊離が押さえられるからである。蓋付きガラス容器（目張りはしていない）に入れて薄層クロマトグラフィを冷蔵保存した場合、３ヶ月後でも全く問題なく使用できることが確認されている。
【００３０】
請求項７に記載の発明によれば、薄層クロマトグラフィ用プレートをコルクなどの緩衝材に載せて輸送することで、薄層クロマトグラフィ用プレートの破損を防止できる。ただし、コルクは、その性質として２〜６％の水分を保つため強塩酸を残留させる可能性があり、安定した保管の妨げになると考えられる。しかし、デシケータ内に輸送箱の蓋を開けて保管、又はコルクをはがして蓋を閉じて保管した場合、一ヶ月間保色している。すなわち、緩衝材としてコルクを使用した場合、強塩酸の残留というマイナス要因があるものの、上のような保管方法をとれば実用上問題なく、かつ、安全な輸送を確保できる。
【００３１】
請求項８に記載の発明によれば、劣化して脱色した薄層クロマトグラフィ用プレートを復活させることができる。
【００３２】
請求項９に記載の発明によれば、同一プレートに滴下された18Ｆ-ＦＤＧ試料とクリプトフィックス2.2.2標準液の発色画像を撮像装置で同時に撮像し、その画像を比較することにより試料の濃度の判定を容易にすると同時に、記録として保存することができる。
【００３３】
請求項１０に記載の発明のように、作成された薄層クロマトグラフィ用プレートは、クリプトフィックス2.2.2以外にも第３級アミンとも反応するので、第３級アミンの検出にも用いることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３４】
以下に本発明の一実施形態における薄層クロマトグラフィの製造方法について説明する。
１．発色試薬の調製
(1)購入試薬、購入薄層プレート
試薬として、塩化白金酸六水和物、ヨウ化カリウム、塩酸、クリプトフィックス2.2.2を購入し、薄層プレートとして、シリカゲルが塗布された薄層プレートを購入する。薄層プレートの大きさは２ｃｍ×５ｃｍのものを用意する。ここで、薄層プレートに２０ｃｍ×２０ｃｍの大きなものを用意し、使用液を塗布した後に２ｃｍ×５ｃｍの大きさに切断してもよい。
【００３５】
上記非特許文献１では、薄層プレートの裏面支持体にプラスチックを用いていたが、本実施形態ではガラスを用いる。ガラスを用いることにより、滴下時のばらつきをなくして判定を一定にできるという効果がある。また、自動品質管理装置への保持も安定でき、自動滴下でのばらつきもなくすことができる。ただし、ガラスの他にアルミシート又は紙を用いてもよい。
【００３６】
(2)原液、使用液の調製
５％塩化白金酸溶液５ｍｌ、１０％ヨウ化カリウム溶液４５ｍｌ、水１００ｍｌを混合することにより、原液を調合する。そして、原液１００質量部に対して塩酸を０質量部を超えて１質量部以下添加して、塩酸０％を超えて１％以下の使用液を調合する。塩酸は１％以下であるが０％ということはない。
【００３７】
つまり、原液の組成は以下の表１のようになり、使用液の組成は表２のようになる。
【表１】
【表２】
【００３８】
２．薄層クロマトグラフィの作成
調製した使用液をプラスチックケースに入れ、２ｃｍ×５ｃｍのＴＬＣ（Thin-layer chromatography:薄層クロマトグラフィ）プレートを並べたかごを使用液に浸漬させる。その後、かごからＴＬＣプレートを注意深く取り出し、Blottingペーパ（キムワイプ等）の上に載せて室内で一晩放置乾燥、またはクリーンベンチで１．５時間乾燥させる。
この他にも、２０ｃｍ×２０ｃｍの薄層プレートのシリカゲルの表面に、噴霧器を用いて使用液を３〜５回、均一にコートするように噴霧し、乾燥後、２ｃｍ×５ｃｍの大きさにカットしてもよい。
以上により、薄層クロマトグラフィが作成される。
【００３９】
３．薄層クロマトグラフィを用いたカラースポットテスト
(1)カラースポットテストの測定手順
18Ｆ-ＦＤＧ試料液及び陽性コントロール（クリプトフィックス2.2.2の濃度４０ｐｐｍ）された標準液のそれぞれ５〜１０μｌ程度を、マイクロピペット又はマイクロシリンジで薄層クロマトグラフィに滴下する。そして、下記の判定基準に従い定量する。
【００４０】
(2)カラースポットテストの判定手順（図１参照）
陽性（＞４０ｐｐｍ） 試料が滴下されると未反応の試薬は水溶液で周辺部（環）に洗い流され、結果としてシリカゲルの白色円の桃色環状となる。クリプトフィックス2.2.2のスポットは中央に小さな暗黒環として現れる。スポットの直径は白色環の約１／３である。
陰性（＜４０ｐｐｍ） 低クリプトフィックス2.2.2濃度（例えば２０ｐｐｍ）の場合、中央のスポットは桃色で青黒環のはっきりとした縁が見られる。
陰性（０ｐｐｍ） クリプトフィックス2.2.2が存在しない場合は、中央にわずかな緑色スポットは残るが、はっきりした縁が見られない。
【００４１】
(3)カラースポットテストの長所・短所
ヨウ化白金酸試薬はクリプトフィックス2.2.2に特異的ではなく、第３級アミンとも反応する。それゆえ擬陽性の反応（スポット）が出る可能性がある。すなわち、陽性反応の場合、18Ｆ-ＦＤＧ試料液にクリプトフィックス2.2.2が存在していることの証明にならない。しかし陰性反応の場合、クリプトフィックス2.2.2が存在しないことの証明になる。
【００４２】
(4)従来の展開方法との比較
カラースポットテストは、通常のＴＬＣのような試料滴下→乾燥→展開→乾燥→発色などの作業工程が短縮でき、試料を滴下するだけで測定できる。したがって被曝を低減できる。
従来のＴＬＣでは結果判定まで１５〜２０分ほどかかるが、本法ではその場で判定が可能になる。したがって時間が短縮できる。
ＴＬＣ作業熟練者でなくても操作が簡便なため、正確に結果判定が可能になる。したがって操作ミスを低減できる。
従来のＴＬＣのような展開層、展開試薬、着色試薬、着色層、放射線遮蔽設備などが必要ない。
従来のＴＬＣのようにヨウ素発色の場合の退色がなく、結果判定がし易く、またＣＣＤカメラ等での画像保存が容易になる。したがって品質検定結果を保存することができる。
【実施例】
【００４３】
日常の品質検定試験にカラースポット薄層クロマトグラフィ（以下「カラースポットテスト」という。）を使用するためには、その品質の安定性が必要である。そこで今回、発色試薬に加える塩酸量を少なくすることによりカラースポットテストの安定性が得られるかを検討した。またカラースポットテストの安定性に影響を与えるであろうと推測される要因として、光、乾燥、湿度、輸送箱内のコルク等についても検討し、品質の安定性と長期保存の可能性について検討した。
【００４４】
カラースポットテストは上記に記載の製造方法で作成した。カラースポットテストのｐＨの測定には、複合電極のものを用いた。カラースポットテストの保管試験に使用したデシケータはオートドライデシケータで、除湿に固体高分子電解質膜を使用しており、その除湿原理は湿気を水素イオン（Ｈ−）と酸素（Ｏ2）に分解し、水素イオンを固体高分子電解質膜を通して庫外に排出する方法で除湿している。
【００４５】
作成したカラースポットテストの色調変化を経時的に測色記録した。測色方法は目測法で測定し、変色の程度を視覚的に判定するため、色見本として大日本インキ社のColor Chartを用いた。昼白色の照明光源をカラースポットテストの真上方向から当て、４５度の方向から視覚的に色調を観察した。観察するカラースポットテストは平面状に並ぶように隣接配置した。作業背景として、測色するカラースポットテストを並べる部分は白色の紙で覆った。また、デジタルカメラによりその色を記録した。撮影は一定条件で行った。カラースポットテストの品質を検査するために１週間毎にマイクロピペットを用いてクリプトフィックス2.2.2の４０ｐｐｍ，２０ｐｐｍ及び18Ｆ-ＦＤＧをカラースポットテストに滴下し、暗黒色のbull’s-eye生成の有無により、カラースポットテストが品質検定に使用できる状態であるかを確認した。
【００４６】
カラースポットテストの保管方法として、(1)本発明の一実施形態である輸送箱（図２参照。薄層クロマトグラフィ用プレート１を、コルク２などの緩衝材に載せて輸送。ケース３には蓋４がついている。そして遮光のため輸送箱は黒色）にカラースポットテストを入れ、箱の蓋を開けたままデシケータ内で保管、(2)デシケータ内に直接カラースポットテストを並べ、キムタオル（紙タオルの一種）をかけて保管、(3)プラスチックケースにカラースポットテストを入れ、箱のふたをして保管、(4) プラスチックケースにカラースポットテストとシリカゲルを入れ、箱のふたをして保管、(5)輸送箱のコルクをはがしてカラースポットテストを入れ、箱のふたを閉じて保管の方法を検討した。
【００４７】
１％の塩酸濃度で作成した発色試薬はｐＨ０．９５であり、この発色試薬で作成したカラースポットテストは保管方法に係らず、１ヶ月間保色していた（図３ないし図５参照）。そのうち、最も色の変化が少なかったのはオートドライデシケータ内での保管であった。実験を行った室内の温度は２４℃〜２６℃に保たれていたが湿度は２３〜４９％の幅があった。オートドライデシケータ内の温度は約２５℃、湿度は２５％に保たれていた。また、カラースポットテストの乾燥方法に関しては、クリーンベンチで長時間カラースポットテストを乾燥させると、強風のためにガラス切断面からシリカゲルがはがれる現象が見られた（図６参照）。
【００４８】
塩化白金(II):Ｈ2[ＰｔＣｌ6]・6Ｈ2Ｏ水溶液にＫＩ水溶液を加えることにより、[ＰｔＣｌ6]2-は[ＰｔＩ4Ｃｌ2]2-，[ＰｔＩ2Ｃｌ4]2-などのようなヨウ化白金錯体となり、その退色原因として、塗布されたヨウ化白金錯体からのヨウ素イオンの遊離が考えられる。その確認のために、白色に脱色して４０ｐｐｍのクリプトフィックス2.2.2に反応しなくなった薄層クロマトグラフィに再びＫＩ水溶液を塗布すると再使用が可能になった。また、保管に使用したプラスチックケースの色が透明から黄色へ変化したことからもヨウ素の遊離が推察できる。そこで今回、ヨウ化白金錯体からのヨウ素の遊離を遅らせる方法を検討した。非特許文献１に記載の方法によると、薄層クロマトグラフィの作成時に３級アミンとの反応を敏感にするために１０％の濃塩酸を加えているが、作成された薄層クロマトグラフィは強酸性になり、ヨウ化白金錯体からヨウ素を遊離させる要因となり、また自動品質管理装置で行うｐＨ試験に影響を及ぼす可能性がある。そこで、加える濃塩酸の濃度を１％以下として薄層クロマトグラフィを作成し、クリプトフィックス2.2.2の半定量試験を行ったところ、４週間後でも問題なく判定を行うことができ、また自動品質管理装置で行うｐＨ試験に影響を及ぼさなかった。保管方法に関してはカラースポットテストの納品に用いている輸送箱は緩衝材として箱の内側にコルクが貼られているが、その性質として２〜６％の水分を保つため、カラースポットテストに使用された強塩酸を輸送箱中に残留させる可能性が考えられた。そこで、コルクの有無についても検討した。また、光の影響については透明プラスチックケースを使用することにより確認した。
【００４９】
今回の実験で保管に最も適した条件は輸送箱から取り出してオートドライデシケータ内に並べ、その上にキムタオルをかぶせた保管方法であった。オートドライデシケータ内での保管がカラースポットテストの色を保った理由として、庫内が一定の条件に保たれていることが考えられる。オートドライデシケータは除湿に固体高分子電解質膜を使用しており、その除湿の原因として湿気を水素イオン（Ｈ−）と酸素（Ｏ2）に分解し、分解された水素イオンは固体高分子電解質膜を通して庫外に排出されるが分解された酸素は庫内に残る。ゆえに庫内の酸素濃度は庫外よりも高濃度となる。濃塩酸を加えて作成したカラースポットテストからはＩ−が遊離する。遊離したＩ−はデシケータ内のＯ2によりＩ2になる。そのため、庫内のＩ2濃度は庫外よりも高い濃度に保たれると考えられ、このことがオートドライデシケータ中でのカラースポットテストの保管が最も良い結果を示したと考察される。また、オートドライデシケータ内に輸送箱のまま保管した場合、コルクがその性質として２〜６％の水分を保ち、強塩酸を残留させる可能性があるので、安定した保管の妨げになると考えられた。しかし、オートドライデシケータ内に輸送箱の蓋を開けて保管、又はコルクをはがして蓋を閉じて保管した場合、一ヶ月間保色していた。すなわち、緩衝材としてコルクを使用した場合、強塩酸の残留というマイナス要因があるものの、上のような保管方法をとれば実用上問題なく、かつ、安全な輸送を確保できる。
【００５０】
なお本発明は上記実施形態の限られることなく、本発明の要旨を変更しない範囲で種々変更可能である。例えば、上記実施形態では、薄層クロマトグラフィ用プレートを、18Ｆ-ＦＤＧ試料中のクリプトフィックス2.2.2の検出に用いているが、第３級アミンの検出に用いても良い。
【００５１】
またＦ−ＭＩＳＯ（フッ素１８標識ミソニダゾール）、Ｆ−ＦＬＴ（フッ素１８標識チミジン）、Ｆ−タイロシン（フッ素１８標識チロシン）などのクリプトフィックス2.2.2を使用して合成された放射性薬剤中のクリプトフィックス2.2.2の検出に用いてもよい。
【００５２】
薄層クロマトグラフィ用プレートは、フッ素−１８（半減期１１９．７分）以外の放射性核種（例えば炭素―１１（半減期２０．３８分），窒素−１３（半減期９．９６分），酸素−１５（半減期１２２秒）他）のみならず、放射性各種全般に応用でき、その核種で標識された標識化合物に使用してもよい。
【００５３】
薄層プレートの裏面支持体にはガラスを用いているが、ガラス以外にアルミシート、紙、プラスチックを用いることもできる。
【図面の簡単な説明】
【００５４】
【図１】カラースポットテストの判定方法を示す図
【図２】輸送箱を示す斜視図
【図３】プレートの５種類の保管方法について１週間毎の色の変化を示すカラーチャート（色は藍（Ｃ）と紅（Ｍ）と黄（Ｙ）と墨（ＢＬ）が刷り重ねられて構成されており、右端の数値はアミ点濃度（％），「クリプトフィックス試験」はこれらプレートの２８日たったものでの検出試験結果）
【図４】図３の結果のデジタル写真
【図５】プレートの４種類の保管方法について６週〜１５週後の色の変化を示すカラーチャート（色は藍（Ｃ）と紅（Ｍ）と黄（Ｙ）と墨（ＢＬ）が刷り重ねられて構成されており、右端の数値はアミ点濃度（％））
【図６】クリーンベンチで乾燥させた薄層クロマトグラフィを示す写真
【符号の説明】
【００５５】
１…薄層クロマトグラフィ用プレート
２…コルク
３…ケース
４…蓋
【特許請求の範囲】
【請求項１】
塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液１００質量部に対して、塩酸が０質量部を超えて１質量部以下になるように加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬させてなることを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレート。
【請求項２】
シリカゲルが塗布された前記薄層プレートの裏面支持体は、アルミ、ガラス又は紙からなることを特徴とする請求項１に記載の薄層クロマトグラフィ用プレート。
【請求項３】
塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液１００質量部に対して、塩酸が０質量部を超えて１質量部以下になるように加えた使用液を得る工程と、
前記使用液にシリカゲルが塗布されたプレートを浸漬させる工程と、を備えることを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの製造方法。
【請求項４】
塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートを、デシケータで除湿しながら保存することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの保存方法。
【請求項５】
塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートを、遮光されたケース内に収納し、光を遮断しながら保存することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの保存方法。
【請求項６】
塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートを、冷蔵しながら保存することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの保存方法。
【請求項７】
塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートを、コルクなどの緩衝材に載せて輸送することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの輸送方法。
【請求項８】
塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートが、劣化して退色した後に、前記薄層クロマトグラフィ用プレートにヨウ化カリウム溶液を塗布することにより復活させることを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの復活方法。
【請求項９】
塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートに、18Ｆ-ＦＤＧ（2-18Ｆ-フルオロ-2-デオキシ-D-グルコース）試料、及びクリプトフィックス2.2.2（アミノポリエーテル4,7,13,16,21,24-ヘキサオキソ-1,10-ジアザビシクロ[8.8.8]-ヘキサコサノール）標準液を滴下し、
同一の薄層クロマトグラフィ用プレートに滴下した前記18Ｆ-ＦＤＧ試料及び前記クリプトフィックス2.2.2標準液の発色状況を撮像装置で撮像し、
前記18Ｆ-ＦＤＧ試料及び前記クリプトフィックス2.2.2標準液の発色画像を比較することにより、前記18Ｆ-ＦＤＧ試料のクリプトフィックス2.2.2濃度を判定し、
得られた前記発色画像を記録として保存することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの使用方法。
【請求項１０】
請求項１又は２に記載の薄層クロマトグラフィ用プレートを、クリプトフィックス2.2.2（アミノポリエーテル4,7,13,16,21,24-ヘキサオキソ-1,10-ジアザビシクロ[8.8.8]-ヘキサコサノール）又は第３級アミンの検出に用いることを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの使用方法。
【請求項１】
塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液１００質量部に対して、塩酸が０質量部を超えて１質量部以下になるように加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬させてなることを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレート。
【請求項２】
シリカゲルが塗布された前記薄層プレートの裏面支持体は、アルミ、ガラス又は紙からなることを特徴とする請求項１に記載の薄層クロマトグラフィ用プレート。
【請求項３】
塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液１００質量部に対して、塩酸が０質量部を超えて１質量部以下になるように加えた使用液を得る工程と、
前記使用液にシリカゲルが塗布されたプレートを浸漬させる工程と、を備えることを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの製造方法。
【請求項４】
塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートを、デシケータで除湿しながら保存することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの保存方法。
【請求項５】
塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートを、遮光されたケース内に収納し、光を遮断しながら保存することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの保存方法。
【請求項６】
塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートを、冷蔵しながら保存することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの保存方法。
【請求項７】
塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートを、コルクなどの緩衝材に載せて輸送することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの輸送方法。
【請求項８】
塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートが、劣化して退色した後に、前記薄層クロマトグラフィ用プレートにヨウ化カリウム溶液を塗布することにより復活させることを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの復活方法。
【請求項９】
塩化白金酸溶液及びヨウ化カリウム溶液を混合した原液に塩酸を加えた使用液に、シリカゲルが塗布された薄層プレートを浸漬してなる薄層クロマトグラフィ用プレートに、18Ｆ-ＦＤＧ（2-18Ｆ-フルオロ-2-デオキシ-D-グルコース）試料、及びクリプトフィックス2.2.2（アミノポリエーテル4,7,13,16,21,24-ヘキサオキソ-1,10-ジアザビシクロ[8.8.8]-ヘキサコサノール）標準液を滴下し、
同一の薄層クロマトグラフィ用プレートに滴下した前記18Ｆ-ＦＤＧ試料及び前記クリプトフィックス2.2.2標準液の発色状況を撮像装置で撮像し、
前記18Ｆ-ＦＤＧ試料及び前記クリプトフィックス2.2.2標準液の発色画像を比較することにより、前記18Ｆ-ＦＤＧ試料のクリプトフィックス2.2.2濃度を判定し、
得られた前記発色画像を記録として保存することを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの使用方法。
【請求項１０】
請求項１又は２に記載の薄層クロマトグラフィ用プレートを、クリプトフィックス2.2.2（アミノポリエーテル4,7,13,16,21,24-ヘキサオキソ-1,10-ジアザビシクロ[8.8.8]-ヘキサコサノール）又は第３級アミンの検出に用いることを特徴とする薄層クロマトグラフィ用プレートの使用方法。
【図２】
【図１】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図１】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【公開番号】特開２００７−１２７４７９（Ｐ２００７−１２７４７９Ａ）
【公開日】平成１９年５月２４日（２００７．５．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−３１９３９３（Ｐ２００５−３１９３９３）
【出願日】平成１７年１１月２日（２００５．１１．２）
【出願人】（５９３１４１４８１）ＪＦＥ環境ソリューションズ株式会社 (47)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１９年５月２４日（２００７．５．２４）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年１１月２日（２００５．１１．２）
【出願人】（５９３１４１４８１）ＪＦＥ環境ソリューションズ株式会社 (47)
【Ｆターム（参考）】
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