ａｎｔｉｋｉｎｅ抗体は、ＲＡＮＴＥＳ／ＣＣＬ５、ＭＩＰ−１α／ＣＣＬ３、ＭＩＰ−１β／ＣＣＬ４またはＭＣＰ−１／ＣＣＬ２などの、２種、３種、４種、５種以上のＣＣケモカインと結合する。また、ａｎｔｉｋｉｎｅ抗体の親和性成熟およびヒト化、ならびに連続免疫によるａｎｔｉｋｉｎｅ抗体産生ハイブリドーマ細胞株の生産のための方法も開示される。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも３種の異なるＣＣケモカインと結合する単離された抗体またはその抗原結合フラグメントであって、少なくとも１種のＣＣケモカインがＣＣＬ３／ＭＩＰ−１α、ＣＣＬ４／ＭＩＰ−１βまたはＣＣＬ５／ＲＡＮＴＥＳである、単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項２】
少なくとも４種の異なるＣＣケモカインと結合する、請求項１に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項３】
ＭＣＰ−１、ＭＣＰ−２またはＭＣＰ−３と結合しない、請求項１に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項４】
ＣＣＬ２／ＭＣＰ−１、ＣＣＬ３／ＭＩＰ−１α、ＣＣＬ４／ＭＩＰ−１β、ＣＣＬ５／ＲＡＮＴＥＳ、ＣＣＬ１４／ＨＣＣ−１、ＣＣＬ１５／ＨＣＣ−２、ＣＣＬ１８／ＰＡＲＣおよびＣＣＬ２３／ＭＰＩＦ−１からなる群から選択される少なくとも３種の異なるＣＣケモカインと結合する、請求項１に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項５】
ＣＣＬ２／ＭＣＰ−１、ＣＣＬ３／ＭＩＰ−１α、ＣＣＬ４／ＭＩＰ−１β、ＣＣＬ５／ＲＡＮＴＥＳ、ＣＣＬ１４／ＨＣＣ−１、ＣＣＬ１５／ＨＣＣ−２、ＣＣＬ１８／ＰＡＲＣおよびＣＣＬ２３／ＭＰＩＦ−１の少なくとも１つの決定基と結合し、該決定基が該ＣＣ−ケモカインのＣＣ残基と該ケモカインの最後のＣ残基との間に位置する、請求項１に記載の単離された抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項６】
ＣＣＬ２／ＭＣＰ−１、ＣＣＬ３／ＭＩＰ−１α、ＣＣＬ４／ＭＩＰ−１β、ＣＣＬ５／ＲＡＮＴＥＳ、ＣＣＬ１４／ＨＣＣ−１、ＣＣＬ１５／ＨＣＣ−２、ＣＣＬ１８／ＰＡＲＣおよびＣＣＬ２３／ＭＰＩＦ−１の少なくとも１つの決定基と結合し、該決定基が該ＣＣケモカインのＮループ、３０’ｓループまたは４０’ｓループ中に位置する、請求項１に記載の単離された抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項７】
ＣＣケモカインのＣＣ受容体結合残基内の少なくとも１つの決定基と結合する、請求項１に記載の単離された抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項８】
結合の対象となるＣＣケモカインの走化活性を中和する、請求項１に記載の単離された抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項９】
ハイブリドーマ細胞株３Ｃ１２Ｆ、７Ｄ１Ｇ、７Ｄ１２Ａ、１８Ｖ４Ｆもしくは１８Ｐ７Ｅによって産生されるか、またはハイブリドーマ細胞株３Ｃ１２Ｆ、７Ｄ１Ｇ、７Ｄ１２Ａ、１８Ｖ４Ｆもしくは１８Ｐ７Ｅによって産生される抗体の結合を競合的に遮断する、請求項１に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１０】
ヒト抗体、ヒト化抗体もしくはキメラヒト−マウス抗体、またはその抗原結合フラグメントである、請求項１に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１１】
ＣＣＬ３／ＭＩＰ−１α、ＣＣＬ４／ＭＩＰ−１β、ＣＣＬ５／ＲＡＮＴＥＳ、ＣＣＬ１５／ＨＣＣ−２およびＣＣＬ２３／ＭＰＩＦ−１からなる群から選択される少なくとも５種のＣＣケモカインと結合し、かつＣＣＬ２／ＭＣＰ−１と実質的に結合しない、請求項１に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１２】
前記ＣＣケモカインの少なくとも１種のＮループ、３０’ｓループまたは４０’ｓループ中の決定基と結合する、請求項１１に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１３】
配列番号７１の残基１１〜１５（ＣＣＦＳＹ）、残基１７〜２４（ＳＲＱＩＰＱＮＦ）、残基３４〜３５（ＱＣ）または残基５７〜６７（ＥＷＶＱＫＹＶＳＤＬＥ）内に位置する、ＣＣＬ３／ＭＩＰ−１αの少なくとも１つの抗原決定基と結合し；
配列番号７２の残基１１〜１５（ＣＣＦＳＹ）、残基１７〜２４（ＡＲＫＬＰＨＮＦ）、残基３４〜３５（ＬＣ）または残基５７〜６７（ＳＷＶＱＥＹＶＹＤＬＥ）内に位置する、ＣＣＬ４／ＭＩＰ−１βの少なくとも１つの抗原決定基と結合し；
配列番号７３の残基１０〜１４（ＣＣＦＡＹ）、残基１６〜２３（ＡＲＰＬＰＲＡＨ）、残基３３〜３４（ＫＣ）または残基５６〜６６（ＫＷＶＲＥＹＩＮＳＬＥ）内に位置する、ＣＣＬ５／ＲＡＮＴＥＳの少なくとも１つの抗原決定基と結合する、請求項１１に記載の単離された抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項１４】
配列番号３、４、５、８、９、１０、５３、５４、５５、５８、５９および６０からなる群から選択される、ＭＡｂ ３Ｃ１２Ｆの少なくとも１つのＣＤＲを含んでなる、請求項１１に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１５】
ＭＡｂ ３Ｃ１２Ｆを産生するハイブリドーマ細胞株によって、もしくはその継代培養物によって産生されるか、またはハイブリドーマ細胞株３Ｃ１２Ｆによって産生される抗体の結合を競合的に遮断する、請求項１１に記載の単離された抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項１６】
ヒト抗体、ヒト化抗体もしくはキメラヒト−マウス抗体、またはその抗原結合フラグメントである、請求項１１に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１７】
ＣＣＬ３／ＭＩＰ−１α、ＣＣＬ４／ＭＩＰ−１β、ＣＣＬ５／ＲＡＮＴＥＳ、ＣＣＬ１４／ＨＣＣ−１およびＣＣＬ１８／ＰＡＲＣからなる群から選択される少なくとも４種のＣＣケモカインと結合し、かつＣＣＬ２／ＭＣＰ−１と実質的に結合しない、請求項１に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１８】
前記ＣＣケモカインの少なくとも１種のＮループ、３０’ｓループまたは４０’ｓループ中の決定基と結合する、請求項１７に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１９】
配列番号７１の残基１１〜１５（ＣＣＦＳＹ）、残基１７〜２４（ＳＲＱＩＰＱＮＦ）、残基３４〜３５（ＱＣ）または残基５７〜６７（ＥＷＶＱＫＹＶＳＤＬＥ）内に位置する、ＣＣＬ３／ＭＩＰ−１αの少なくとも１つの抗原決定基と結合し；
配列番号７２の残基１１〜１５（ＣＣＦＳＹ）、残基１７〜２４（ＡＲＫＬＰＨＮＦ）、残基３４〜３５（ＬＣ）または残基５７〜６７（ＳＷＶＱＥＹＶＹＤＬＥ）内に位置する、ＣＣＬ４／ＭＩＰ−１βの少なくとも１つの抗原決定基と結合し；
配列番号７３の残基１０〜１４（ＣＣＦＡＹ）、残基１６〜２３（ＡＲＰＬＰＲＡＨ）、残基３３〜３４（ＫＣ）または残基５６〜６６（ＫＷＶＲＥＹＩＮＳＬＥ）内に位置する、ＣＣＬ５／ＲＡＮＴＥＳの少なくとも１つの抗原決定基と結合する、請求項１７に記載の単離された抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項２０】
配列番号２３、２４、２５、２８、２９または３０からなる群から選択される、ＭＡｂ ７Ｄ１Ｇの少なくとも１つのＣＤＲを含んでなる、請求項１７に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項２１】
ＭＡｂ ７Ｄ１Ｇを産生するハイブリドーマ細胞株によって、もしくはその継代培養物によって産生されるか、またはハイブリドーマ細胞株７Ｄ１Ｇによって産生される抗体の結合を競合的に遮断する、請求項１７に記載の単離された抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項２２】
ヒト抗体、ヒト化抗体もしくはキメラヒト−マウス抗体、またはその抗原結合フラグメントである、請求項１７に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項２３】
ＣＣＬ３／ＭＩＰ−１α、ＣＣＬ４／ＭＩＰ−１β、ＣＣＬ５／ＲＡＮＴＥＳおよびＣＣＬ２３／ＭＰＩＦ−１からなる群から選択される少なくとも４種のＣＣケモカインと結合し、かつＣＣＬ２／ＭＣＰ−１と実質的に結合しない、請求項１に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項２４】
前記ＣＣケモカインの少なくとも１種のＮループ、３０’ｓループまたは４０’ｓループ中の決定基と結合する、請求項２３に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項２５】
配列番号７１の残基１１〜１５（ＣＣＦＳＹ）、残基１７〜２４（ＳＲＱＩＰＱＮＦ）、残基３４〜３５（ＱＣ）または残基５７〜６７（ＥＷＶＱＫＹＶＳＤＬＥ）内に位置する、ＣＣＬ３／ＭＩＰ−１αの少なくとも１つの抗原決定基と結合し；
配列番号７２の残基１１〜１５（ＣＣＦＳＹ）、残基１７〜２４（ＡＲＫＬＰＨＮＦ）、残基３４〜３５（ＬＣ）または残基５７〜６７（ＳＷＶＱＥＹＶＹＤＬＥ）内に位置する、ＣＣＬ４／ＭＩＰ−１βの少なくとも１つの抗原決定基と結合し；
配列番号７３の残基１０〜１４（ＣＣＦＡＹ）、残基１６〜２３（ＡＲＰＬＰＲＡＨ）、残基３３〜３４（ＫＣ）または残基５６〜６６（ＫＷＶＲＥＹＩＮＳＬＥ）内に位置する、ＣＣＬ５／ＲＡＮＴＥＳの少なくとも１つの抗原決定基と結合する、請求項２３に記載の単離された抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項２６】
配列番号１３、１４、１５、１８、１９または２０からなる群から選択される、ＭＡＢ ７Ｄ１２Ａの少なくとも１つのＣＤＲを含んでなる、請求項２３に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項２７】
ＭＡｂ ７Ｄ１２Ａを産生するハイブリドーマ細胞株によって、もしくはその継代培養物によって産生されるか、またはハイブリドーマ細胞株７Ｄ１２Ａによって産生される抗体の結合を競合的に遮断する、請求項２３に記載の単離された抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項２８】
ヒト抗体、ヒト化抗体もしくはキメラヒト−マウス抗体、またはその抗原結合フラグメントである、請求項２３に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項２９】
ＣＣＬ３／ＭＩＰ−１α、ＣＣＬ４／ＭＩＰ−１βおよびＣＣＬ５／ＲＡＮＴＥＳからなる群から選択される３種のＣＣケモカインと結合し、かつＣＣＬ２／ＭＣＰ−１と実質的に結合しない、請求項１に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項３０】
前記ＣＣケモカインの少なくとも１種のＮループ、３０’ｓループまたは４０’ｓループ中の決定基と結合する、請求項２９に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項３１】
配列番号７１の残基１１〜１５（ＣＣＦＳＹ）、残基１７〜２４（ＳＲＱＩＰＱＮＦ）、残基３４〜３５（ＱＣ）または残基５７〜６７（ＥＷＶＱＫＹＶＳＤＬＥ）内に位置する、ＣＣＬ３／ＭＩＰ−１αの少なくとも１つの抗原決定基と結合し；
配列番号７２の残基１１〜１５（ＣＣＦＳＹ）、残基１７〜２４（ＡＲＫＬＰＨＮＦ）、残基３４〜３５（ＬＣ）または残基５７〜６７（ＳＷＶＱＥＹＶＹＤＬＥ）内に位置する、ＣＣＬ４／ＭＩＰ−１βの少なくとも１つの抗原決定基と結合し；
配列番号７３の残基１０〜１４（ＣＣＦＡＹ）、残基１６〜２３（ＡＲＰＬＰＲＡＨ）、残基３３〜３４（ＫＣ）または残基５６〜６６（ＫＷＶＲＥＹＩＮＳＬＥ）内に位置する、ＣＣＬ５／ＲＡＮＴＥＳの少なくとも１つの抗原決定基と結合する、請求項２９に記載の単離された抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項３２】
配列番号３３、３４、３５、３８、３９、４０、６３、６４、６５、６８、６９および７０からなる群から選択される、ＭＡｂ １８Ｖ４Ｆの少なくとも１つのＣＤＲを含んでなる、請求項２９に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項３３】
ＭＡｂ １８Ｖ４Ｆを産生するハイブリドーマ細胞株によって、もしくはその継代培養物によって産生されるか、またはハイブリドーマ細胞株１８Ｖ４Ｆによって産生される抗体の結合を競合的に遮断する、請求項２９に記載の単離された抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項３４】
ヒト抗体、ヒト化抗体もしくはキメラヒト−マウス抗体、またはその抗原結合フラグメントである、請求項２９に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項３５】
ＣＣＬ３／ＭＩＰ−１α、ＣＣＬ４／ＭＩＰ−１βおよびＣＣＬ５／ＲＡＮＴＥＳからなる群から選択される少なくとも３種のＣＣケモカインと結合し、かつＣＣＬ２／ＭＣＰ−１と実質的に結合しない、請求項１に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項３６】
前記ＣＣケモカインの少なくとも１種のＮループ、３０’ｓループまたは４０’ｓループ中の決定基と結合する、請求項３５に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項３７】
配列番号７１の残基１１〜１５（ＣＣＦＳＹ）、残基１７〜２４（ＳＲＱＩＰＱＮＦ）、残基３４〜３５（ＱＣ）または残基５７〜６７（ＥＷＶＱＫＹＶＳＤＬＥ）内に位置する、ＣＣＬ３／ＭＩＰ−１αの少なくとも１つの抗原決定基と結合し；
配列番号７２の残基１１〜１５（ＣＣＦＳＹ）、残基１７〜２４（ＡＲＫＬＰＨＮＦ）、残基３４〜３５（ＬＣ）または残基５７〜６７（ＳＷＶＱＥＹＶＹＤＬＥ）内に位置する、ＣＣＬ４／ＭＩＰ−１βの少なくとも１つの抗原決定基と結合し；
配列番号７３の残基１０〜１４（ＣＣＦＡＹ）、残基１６〜２３（ＡＲＰＬＰＲＡＨ）、残基３３〜３４（ＫＣ）または残基５６〜６６（ＫＷＶＲＥＹＩＮＳＬＥ）内に位置する、ＣＣＬ５／ＲＡＮＴＥＳの少なくとも１つの抗原決定基と結合する、請求項３５に記載の単離された抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項３８】
配列番号４３、４４、４５、４８、４９および５０からなる群から選択される、ＭＡｂ １８Ｐ７Ｅの少なくとも１つのＣＤＲを含んでなる、請求項３５に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項３９】
ＭＡｂ １８Ｐ７Ｅを産生するハイブリドーマ細胞株によって、もしくはその継代培養物によって産生されるか、またはハイブリドーマ細胞株１８Ｐ７Ｅによって産生される抗体の結合を競合的に遮断する、請求項３５に記載の単離された抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項４０】
ヒト抗体、ヒト化抗体もしくはキメラヒト−マウス抗体、またはその抗原結合フラグメントである、請求項３５に記載の単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項４１】
請求項１に記載のモノクローナル抗体を産生する、ハイブリドーマ細胞株。
【請求項４２】
請求項１に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントを、担体、賦形剤またはバッファーと組み合わせて含んでなる、組成物。
【請求項４３】
２種以上のＣＣケモカインと結合するａｎｔｉｋｉｎｅ抗体を産生するハイブリドーマ細胞株を製造するための方法であって、
１種のＣＣケモカインにより哺乳類を連続して免疫すること、
続いて、１種以上の異なるＣＣケモカインにより追加免疫すること、
該哺乳類からハイブリドーマ細胞株を作製すること、および
ａｎｔｉｋｉｎｅ抗体を産生するハイブリドーマ細胞株を単離すること
を含んでなる、方法。
【請求項４４】
１種以上のＣＣケモカインによって媒介される疾患、障害または病態を治療するための方法であって、それを必要とする被験体に、請求項１に記載のａｎｔｉｋｉｎｅ抗体またはその抗原結合フラグメントを投与することを含んでなる、方法。
【請求項４５】
前記疾患、障害または病態が、炎症性疾患、または炎症によって媒介されるかもしくは炎症を伴うものである、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記疾患、障害または病態が自己免疫疾患である、請求項４４に記載の方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【公表番号】特表２０１３−５０３１９２（Ｐ２０１３−５０３１９２Ａ）
【公表日】平成２５年１月３１日（２０１３．１．３１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５２７０３３（Ｐ２０１２−５２７０３３）
【出願日】平成２２年８月２７日（２０１０．８．２７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０４７００４
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０２５９６２
【国際公開日】平成２３年３月３日（２０１１．３．３）
【出願人】（５１２０４８４９１）ブイエルエスティー、コーポレイション (1)
【氏名又は名称原語表記】ＶＬＳＴ　ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ
【Ｆターム（参考）】