陸上養殖褐藻類の生産方法
【課題】 遊走子や雌雄配偶体から出荷対象個体までの育成を新しい手法で行うことにより、褐藻類を安定して周年生産することができ、かつ規格の調整にも優れるうえ、他の海洋資源の養殖廃水も活用することができ、限られたスペースを有効活用することができる陸上養殖褐藻類の生産方法を提供する。
【解決手段】 所定の低水温の滅菌人工海水などで褐藻類の成熟した胞子体１から放出された遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を種苗糸基質２に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸２１を作製する工程と、遊走子・配偶体付着種苗糸２１を流水に対して略垂直となるように養殖槽３に固定して海水を流水するととともに所望によりエアレーションをして遊走子・配偶体付着種苗糸２１における遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６、幼胞子体１７を出荷対象個体１８に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程とを有する。
【解決手段】 所定の低水温の滅菌人工海水などで褐藻類の成熟した胞子体１から放出された遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を種苗糸基質２に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸２１を作製する工程と、遊走子・配偶体付着種苗糸２１を流水に対して略垂直となるように養殖槽３に固定して海水を流水するととともに所望によりエアレーションをして遊走子・配偶体付着種苗糸２１における遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６、幼胞子体１７を出荷対象個体１８に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程とを有する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、陸上養殖褐藻類の生産方法に関し、より詳細には、遊走子・配偶体付着種苗糸を作製する工程と出荷対象固体に生長するまで育成する工程とを有する陸上養殖褐藻類の生産方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
褐藻類（褐藻綱；Ｐｈａｅｏｐｈｙｃｅａｅ）は、主に海産多細胞藻類からなる生物群である。褐色をしているのが特徴であり、糸状、葉状、あるいは樹枝状などさまざまな構造のものが存在し、生殖器や分裂組織などが分化するものも存在する。海藻の中では最も発達した藻体を有し、大きくなるものでは数十メートルにも達する。日常生活に最も近い褐藻は、コンブやワカメなどの食用の海藻である。
【０００３】
従来、食用や飼料用の目的で、褐藻類の種苗や大量培養などの養殖事業が海中において試みられており、現在では採苗から栽培、取り入れまでを約４〜１０ヶ月程度で行う促成栽培技術が開発されている。例えば、コンブでは、天然母藻から遊走子を取り出して種苗糸基質に付着させ、次いで滅菌海水あるいはろ過海水にリン酸や窒素などの栄養源を添加した培養液中にこれを入れ、葉長が１ｃｍ弱の幼体になるまで室内培養し、その後海中で培養を行うという促成栽培がなされている。通常、促成栽培では、母藻となる天然葉体が成熟する８月下旬〜９月上旬に採苗し、４５〜６０日間程度で幼体まで室内培養し、１０月中旬頃に沖出し、７〜１０日仮植えして苗に仕上げている。
【０００４】
しかしながら、従来の海中における褐藻類の促成栽培では、周年連続的に養殖することができないばかりか、仮植えは海中に設置された筏から垂下して、本養成は数トンの重量を有するコンクリートブロックを設置して行わなければならず、金銭的、労力的な投資が必要となり、養殖事業者にとって大きな負担となっている。
【０００５】
そこで、海洋深層水とタンクとを用いた褐藻類の陸上養殖が試みられている（非特許文献１）。この方法では、胞子集塊化法を用いてあらかじめ培養室内で育成した種苗を成熟誘導し、海洋深層水が連続注水されているタンク内で浮遊させ、生長させるという方法である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】岡直広、Ｂｕｌｌ．Ｍａｒ．Ｓｃｉ．Ｆｉｓｈ．，Ｋｏｃｈｉ Ｕｎｉｖ．第２４巻、第１１−４７頁、２００６年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、非特許文献１に開示されている海洋深層水とタンクとを用いた褐藻類の陸上養殖では、種苗の熟成誘導において胞子集塊化法が用いられているため、熟成誘導された種苗は、附着根の部位で数個体が連結して花弁のような形状を有し、その結果、生産された褐藻類は、塊から葉が多分岐したような形態を有することから（非特許文献１の図４６参照）、食用としての規格を満たし難く、商業用出荷が困難である。そもそもこの方法は、アワビの餌となる褐藻類を養殖するための方法であるため、この方法により生産された褐藻類は、食用としての規格や品質が要求されない。にもかかわらず、この方法はコストパフォーマンスが悪いなどの理由から、実用化には至っていない。
【０００８】
本発明は、上述の問題点を解決するためになされたものであって、遊走子や雌雄配偶体から出荷対象個体までの育成を新しい手法で行うことにより、褐藻類を安定して周年生産することができ、かつ規格の調整にも優れるうえ、他の海洋資源の養殖廃水も活用することができ、限られたスペースを有効活用することができる陸上養殖褐藻類の生産方法を提供し、さらに、従来の海中養殖の褐藻類にない柔らかさやシャキシャキした食感を有し、その乾燥物もまた、従来にない口溶けの良い食感を有する陸上養殖褐藻類を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、鋭意研究の結果、所定の低水温の滅菌人工海水や滅菌濾過海水などに褐藻類の成熟した胞子体（母藻）から遊走子を放出させ、所定の低水温を維持しつつ種苗糸基質にその遊走子や遊走子から生長した雌雄配偶体を付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸を作製した後、海水流水に対して略垂直となるよう遊走子・配偶体付着種苗糸を養殖槽に固定し、漸次生長する褐藻類に新鮮な空気あるいは溶存酸素が豊富な海水を送るため、あるいは海水流水になびかせるためなど、必要に応じてエアレーションを施すなどすることにより、褐藻類を陸上で養殖することに成功し、この方法により養殖生産された褐藻類が、従来の海中養殖が有するコリコリした食感ではなく、シャクッと崩れる感じの食感、シャキシャキ感を有した、お刺身として食用することもできること、その乾燥物もまた、従来にない口溶けの良い食感を有することを見出し、下記の各発明を完成した。
【００１０】
（１）所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水中で褐藻類の成熟した胞子体から放出された遊走子および／または前記遊走子から生長した配偶体を種苗糸基質に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸を作製する遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程と、前記遊走子・配偶体付着種苗糸を流水に対して略垂直となるように養殖槽に固定して海水を流水するととともに所望によりエアレーションをして前記遊走子・配偶体付着種苗糸における遊走子、配偶体ならびに前記遊走子および／または前記配偶体から生長した幼胞子体の少なくともいずれかを出荷対象個体に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程とを有する陸上養殖褐藻類の生産方法。
【００１１】
（２）前記出荷対象個体育成工程における海水が所定の高水温の海水である場合に、所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水に遊走子・配偶体付着種苗糸を投入し、前記所定の低水温を維持するとともにインキュベーションおよび／またはエアレーションをして前記遊走子・配偶体付着種苗糸における遊走子および／または配偶体を前記出荷対象個体育成工程に耐えることができる幼胞子体に生長するまで育成して幼胞子体付着種苗糸を作製する幼胞子体付着種苗糸作製工程を有する、（１）に記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【００１２】
（３）前記遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程において作製した遊走子・配偶体付着種苗糸を、所定の低水温を維持するとともに赤色光を照光して、ならびに／もしくは所定の低水温を維持するとともに鉄分を含まない滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水を用いて保存する遊走子・配偶体付着種苗糸保存工程を有する、（１）または（２）に記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【００１３】
（４）前記出荷対象個体育成工程において育成された出荷対象個体を、葉状部基部を含む生長部位が残るように刈り取ることにより収穫する出荷対象個体収穫工程を有する、（１）から（３）のいずれかに記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【００１４】
（５）所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水中で褐藻類の成熟した胞子体から放出された遊走子を配偶体に生長するまで育成する配偶体育成工程と、養殖槽において海水を流水するとともに所望によりエアレーションをして配偶体および／または前記配偶体から生長した幼胞子体を出荷対象個体に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程とを有する陸上養殖褐藻類の生産方法。
【００１５】
（６）前記出荷対象個体育成工程における海水が所定の高水温の海水である場合に、所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水に配偶体を投入し、前記所定の低水温を維持するとともにインキュベーションおよび／またはエアレーションをして前記配偶体を前記出荷対象個体育成工程に耐えることができる幼胞子体に生長するまで育成する幼胞子体育成工程を有する、（５）に記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【００１６】
（７）褐藻類がコンブ科植物である、（１）から（６）のいずれかに記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【発明の効果】
【００１７】
本発明によれば、規格の調整が可能な褐藻類を周年生産することができ、生産された褐藻類は、磯焼けした海洋地域への種苗として供給することができるほか、従来の海中養殖の褐藻類にない柔らかさやシャキシャキした食感を有する食用の褐藻類として、その乾燥物もまた、従来にない口溶けの良い食感を有する食用の褐藻類の加工食品として、市場に供給することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法を表した模式図である。
【図２】出荷対象個体育成工程における海水が所定の高水温の海水である場合の、本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法を表した模式図である。
【図３】遊走子・配偶体付着種苗糸２１を示す写真図である。
【図４】遊走子・配偶体付着種苗糸２１が海水流水に対して略垂直となるよう養殖槽３に固定される様子を示す写真図である。
【図５】養殖槽３において生長したホソメコンブが海水流水になびくよう、エアレーションが施されている様子を示す写真図である。
【図６】陸上養殖褐藻類の生産が行われる陸上養殖施設４の模式図である。
【図７】インキュベーターにおける幼胞子体付着種苗糸作製工程の様子を示す写真図である。
【図８】屋内水槽における幼胞子体付着種苗糸作製工程の様子を示す写真図である。
【図９】本発明における出荷対象個体育成工程を示す写真図である。
【図１０】本発明に係る生産方法により得られた各種データを示す図表である。
【図１１】本発明に係る生産方法を用いて生産された褐藻類の様子を示す写真図である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
以下、本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法について、図１および図２を用いて詳細に説明する。本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法の第１実施形態は、図１の上段に示すように、所定の低水温の滅菌人工海水や滅菌濾過海水などの海水中で褐藻類の成熟した胞子体１から遊走子１４を放出させ、その遊走子１４やその遊走子１４から生長した雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を種苗糸基質２に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸２１を作製した後、図１の中下段に示すように、流水（矢印）に対して略垂直となるように遊走子・配偶体付着種苗糸２１を養殖槽３に固定し、海水を流水し、所望によりエアレーションをすることにより種苗糸基質２に付着した遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６、これらから生長した幼胞子体１７を出荷対象個体１８に生長するまで育成する陸上養殖褐藻類の生産方法である。
【００２０】
すなわち、本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法の第１実施形態は、
（ｉ）所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水中で褐藻類の成熟した胞子体１から放出された遊走子１４、遊走子１４から生長した雄性配偶体１５および雌性配偶体１６の少なくともいずれかを種苗糸基質２に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸２１を作製する遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程、
（ｉｉ）遊走子・配偶体付着種苗糸２１を流水に対して略垂直となるように養殖槽３に固定して海水を流水するととともに所望によりエアレーションをして遊走子・配偶体付着種苗糸２１における遊走子１４、雄性配偶体１５、雌性配偶体１６およびこれらから生長した幼胞子体１７の少なくともいずれかを出荷対象個体１８に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程。
以上、（ｉ）および（ｉｉ）の工程を有する。
【００２１】
本第１実施形態における（ｉ）遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程は、図１の上段に示すように、所定の低水温の滅菌人工海水や滅菌濾過海水などの海水中で褐藻類の成熟した胞子体１から遊走子１４を放出させ、その遊走子１４や遊走子１４から生長した雄性配偶体１５、雌性配偶体１６の少なくともいずれかを種苗糸基質２に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸２１を作製する工程である。
【００２２】
本発明において、所定の低水温とは、１〜１１℃程度をいうが、２〜１１℃が好ましく、３〜１１℃がより好ましく、４〜１１℃がさらに好ましく、４〜１０℃がよりさらに好ましい。
【００２３】
本発明において、使用することのできる人工海水や濾過海水は滅菌されたものであれば特に限定されないが、人工海水については、例えば、ＡＳＰ１２やＥＳ ｂｙ Ｐｒｏｖａｓｏｌｉ、これらのＦｅフリーのものを使用することができるが、Ｆｅフリーのものを使用するのが好ましい。また、濾過海水としては、例えば、レジンなどを充填したカラムに通水して濾過した海水を挙げることができる。さらに、人工海水と濾過海水とを組み合わせて使用することができ、例えば、濾過海水と人工海水ＥＳ ｂｙ ＰｒｏｖａｓｏｌｉのＦｅフリーのものとを混合して得られるＰＥＳ培養液などを使用することができる。
【００２４】
本発明において、「滅菌人工海水」や「滅菌濾過海水」とは、一旦滅菌した人工海水や濾過海水をいい、すなわち、菌や微生物をまったく含まない場合のみならず、多少の菌や微生物を含有する人工海水や濾過海水が含まれる。また、人工海水や濾過海水を滅菌する方法は、公知か否かを問わず、当業者が適宜選択可能な方法を用いることができる。そのような方法であって公知の方法としては、例えば、蒸気滅菌法、濾過滅菌法、遠心分離滅菌法、γ線などの放射線やエチレンオキサイドガス、プラズマ、紫外線などを用いた滅菌方法などを挙げることができる。
【００２５】
種苗糸基質２は、遊走子１４や遊走子１４から生長した雄性配偶体１５や雌性配偶体１６、これらから生長した幼胞子体１７などが付着して生長することができるものであれば、当業者により選択可能な種苗糸基質２を使用することができるが、そのような種苗糸基質２としては、例えば、糸、紐、ロープ、テープなどを挙げることができ、糸が好ましく、クレモナ糸がより好ましい。また、種苗糸基質２は、表面を毛羽立たせるなどして付着性を向上させてから使用してもよく、ゲルなどの付着性を高める物質を表面に塗布して使用してもよい。
【００２６】
遊走子１４は、所定の低水温の滅菌人工海水または滅菌濾過海水にそのまま放出させてもよく、所定の低水温の滅菌人工海水と滅菌濾過海水とを混合して所定の低水温に調整したものに放出させてもよく、これらに海水や不足養分などを混合して所定の低水温に調整したものに放出させてもよい。また、図１の上段に示すように、遊走子１４を放出させた後、そこへ種苗糸基質２を投入することで遊走子１４を種苗糸基質２に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸２１を作製してもよく、放出させた遊走子１４を保存した後、または放出させた遊走子１４を雄性配偶体１５や雌性配偶体１６に生長させた後、これらを種苗糸基質２に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸２１を作製してもよい。
【００２７】
本第１実施形態における（ｉｉ）出荷対象個体育成工程は、図１の中段に示すように、流水（矢印）に対して略垂直となるように遊走子・配偶体付着種苗糸２１を養殖槽３に固定し、海水を流水し、所望によりエアレーションをすることにより種苗糸基質２に付着した遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を出荷対象個体１８に生長するまで育成する工程である。
【００２８】
養殖槽３は、遊走子・配偶体付着種苗糸２１を流水に対して略垂直となるように固定できて海水を流水するととともに所望によりエアレーションをすることができるものであれば特に限定されないが、例えば、直方体状を含む角柱状の槽のほか、円柱状、角錐状、円錐状、渦巻き状、波状の槽を挙げることができる。
【００２９】
本発明において、海水の流水は、種苗糸基質２において生長した褐藻類がなびくようにするのが好ましい。そのような流水方法としては、例えば、図１の中段に示すように、取水口３１と排水口３２とが長手方向に向かい合うよう長手方向端部に形成して行う方法や、図５に示すように、海水の噴出口３６を養殖槽３の長手方向側面に配設して噴出口３６から海水を排出することで流水する方法、あるいはその両方の方法を組み合わせた方法などを挙げることができる。また、本第１実施形態における（ｉｉ）出荷対象個体育成工程において、エアレーションは、新鮮な空気あるいは溶存酸素が豊富な海水を送るため、あるいは海水流水になびかせるためなど、種苗糸基質２に付着した遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６の生長に応じて行うことができ、その態様は特に限定されず、例えば、空気を送り込むための通気管３４を養殖槽３の底に設置して通気管３４から空気を噴出させることでエアレーションをすることができる。
【００３０】
また、本第１実施形態に係る陸上養殖褐藻類の生産方法は、例えばアワビやウニなどの養殖廃水などを用いる場合のように、（ｉｉ）出荷対象個体育成工程において用いる海水が所定の高水温の海水である場合、図２に示すように、（ｉ）遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程（図２の１段目）と（ｉｉ）出荷対象個体育成工程（図２の３、４段目）との間に、種苗糸基質２に付着した遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を（ｉｉ）出荷対象個体育成工程に耐えることができる幼胞子体１７に生長するまで育成して幼胞子体付着種苗糸２２を作製する（ｉｉｉ）幼胞子体付着種苗糸作製工程（図２の２段目）を有してもよい。
【００３１】
すなわち、本第１実施形態に係る陸上養殖褐藻類の生産方法は、
（ｉ）所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水中で褐藻類の成熟した胞子体１から放出された遊走子１４、遊走子１４から生長した雄性配偶体１５および雌性配偶体１６の少なくともいずれかを種苗糸基質２に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸２１を作製する遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程、
（ｉｉｉ）所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水に遊走子・配偶体付着種苗糸２１を投入し、前記所定の低水温を維持するとともにインキュベーションおよび／またはエアレーションをして遊走子・配偶体付着種苗糸２１における遊走子１４、雄性配偶体１５および雌性配偶体１６の少なくともいずれかを所定の幼胞子体１７に生長するまで育成して幼胞子体付着種苗糸２２を作製する幼胞子体付着種苗糸作製工程、
（ｉｉ）幼胞子体付着種苗糸２２を流水に対して略垂直となるように養殖槽３に固定して所定の高水温の海水を流水するととともに所望によりエアレーションをして幼胞子体付着種苗糸２２における所定の幼胞子体１７を出荷対象個体１８に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程。
以上、（ｉ）、（ｉｉｉ）および（ｉｉ）の工程を有してもよい。
【００３２】
なお、本発明において、所定の高水温とは、１１〜１８℃程度をいうが、１１〜１７℃が好ましく、１１〜１６℃がより好ましく、１１〜１５℃がさらに好ましい。
【００３３】
（ｉｉｉ）幼胞子体付着種苗糸作製工程は、所定の低水温の滅菌人工海水や滅菌濾過海水などへ遊走子・配偶体付着種苗糸２１を投入し、その所定の低水温を維持するとともにインキュベーションおよびエアレーションの少なくともいずれかを行い、種苗糸基質２に付着した遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を所定の幼胞子体１７、すなわち（ｉｉ）出荷対象個体育成工程に耐えることができる幼胞子体１７、具体的には（ｉｉ）出荷対象個体育成工程において出荷対象個体１８に生長することができるサイズの幼胞子体１７にまで生長させて幼胞子体付着種苗糸２２を作製する工程である。
【００３４】
本第１実施形態の（ｉｉｉ）幼胞子体付着種苗糸作製工程において、インキュベーションは、所定の低水温下で行うほかは、当業者が適宜選択可能な方法により行うことができる。また、エアレーションは、新鮮な空気あるいは溶存酸素が豊富な海水を送る目的で主に行われるが、その態様は特に限定されず、例えば、空気を送り込むための通気管を水槽の底に設置して通気管から空気を噴出させることで行うことができる。
【００３５】
本第１実施形態における（ｉｉｉ）幼胞子体付着種苗糸作製工程において、（ｉｉ）出荷対象個体育成工程に耐えることができる幼胞子体１７とは、（ｉｉ）出荷対象個体育成工程において所定の高水温海水を用いた場合に、出荷対象個体１８まで生長することができる幼胞子体１７をいい、葉長が約０．５〜１０ｃｍの幼胞子体１７が好ましく、葉長が約１〜８ｃｍの幼胞子体１７がより好ましく、葉長が約１．５〜７ｃｍの幼胞子体１７がさらに好ましく、葉長が２〜６ｃｍの幼胞子体１７がよりさらに好ましい。
【００３６】
また、本第１実施形態に係る陸上養殖褐藻類の生産方法は、（ｉ）遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程において作製した遊走子・配偶体付着種苗糸２１を保存する（ｉｖ）遊走子・配偶体付着種苗糸保存工程を有してもよい。
【００３７】
（ｉｖ）遊走子・配偶体付着種苗糸保存工程は、所定の低水温を維持するとともに赤色光を照光して保存するか、所定の低水温を維持するとともに鉄分を含まない滅菌人工海水や滅菌濾過海水を含む海水を用いて保存するか、あるいはその両方を組み合わせて保存する工程である。（ｉｖ）遊走子・配偶体付着種苗糸保存工程における所定の低水温とは、（ｉ）遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程や（ｉｉｉ）幼胞子体付着種苗糸作製工程における所定の低水温と同義である。
【００３８】
赤色光を照光する方法により、および鉄分を含まない滅菌人工海水や滅菌濾過海水などを用いる方法により、遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６の成熟や生長を抑制できることが見出されており、所定の低水温下においてこれらの方法を用いて、あるいは所定の低水温下においてこれらの方法を組み合わせることにより、種苗糸基質２に付着した遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６をそのままの状態で保存することができる。
【００３９】
さらに、本第１実施形態に係る陸上養殖褐藻類の生産方法は、図１の下段右や図２の４段目右にそれぞれ示すように、（ｉｉ）出荷対象個体育成工程において育成された出荷対象個体１８を、葉状部基部を含む生長部位が残るように刈り取ることにより収穫する（ｖ）出荷対象個体収穫工程を有してもよい。（ｖ）出荷対象個体収穫工程後の種苗糸基質２に付着した個体は、本第１実施形態に係る（ｉｉ）出荷対象個体育成工程を繰り返すことにより、出荷対象個体１８に生長させることができる。
【００４０】
次に、本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法の第２実施形態は、図１の上段の左側に示すように、所定の低水温の滅菌人工海水や滅菌濾過海水などの海水中で褐藻類の成熟した胞子体１から遊走子１４を放出させ、遊走子１４を雄性配偶体１５や雌性配偶体１６になるまで育成した後、図１の中段に示すように、養殖用かご３５に入れて養殖槽３に固定して海水を流水し、所望によりエアレーションをすることにより雄性配偶体１５や雌性配偶体１６、これらから生長した幼胞子体１７を出荷対象個体１８に生長するまで育成する陸上養殖褐藻類の生産方法である。
【００４１】
すなわち、本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法の第２実施形態は、
（ａ）所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水中で褐藻類の成熟した胞子体１から放出された遊走子１４を雄性配偶体１５または雌性配偶体１６に生長するまで育成する配偶体育成工程、
（ｂ）養殖槽３において海水を流水するとともに所望によりエアレーションをして雄性配偶体１５、雌性配偶体１６およびこれらから生長した幼胞子体１７の少なくともいずれかを出荷対象個体１８に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程。
以上、（ａ）および（ｂ）の工程を有する。
【００４２】
本第２実施形態における（ａ）配偶体育成工程は、図１の上段左に示すように、所定の低水温の滅菌人工海水や滅菌濾過海水などの海水中で褐藻類の成熟した胞子体１から遊走子１４を放出させ、遊走子１４を雄性配偶体１５や雌性配偶体１６に生長させる工程である。なお、遊走子１４については、第１実施形態における（ｉ）遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程と同様である。
【００４３】
また、本第２実施形態における（ｂ）出荷対象個体育成工程は、図１の中段左に示すように、雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を養殖用かご３５に入れ、養殖槽３に固定して海水を流水（矢印）し、所望によりエアレーションをすることにより雄性配偶体１５や雌性配偶体１６、これらから生長した幼胞子体１７を出荷対象個体１８に生長するまで育成する工程である。
【００４４】
本第２実施形態における（ｂ）出荷対象個体育成工程では、雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を養殖用かご３５に入れ、養殖槽３に固定して海水を流水しているが、本発明においては、この方法に限定されず、養殖槽３において海水を流水して雄性配偶体１５や雌性配偶体１６、これらから生長した幼胞子体１７を出荷対象個体１８に生長させることができる方法を適宜選択することができる。なお、本第２実施形態における（ｂ）出荷対象個体育成工程において用いることができる養殖槽３やエアレーションは、第１実施形態における（ｉｉ）出荷対象個体育成工程と同様である。
【００４５】
また、本第２実施形態に係る陸上養殖褐藻類の生産方法もまた、例えばアワビやウニなどの養殖廃水などを用いる場合のように、（ｂ）出荷対象個体育成工程において用いる海水が所定の高水温の海水である場合、第１実施形態に係る陸上養殖褐藻類の生産方法と同様、図２に示すように、（ａ）配偶体育成工程と（ｂ）出荷対象個体育成工程との間に、（ｃ）幼胞子体育成工程を有してもよい。
【００４６】
すなわち、本第２実施形態に係る陸上養殖褐藻類の生産方法は、
（ａ）所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水中で褐藻類の成熟した胞子体１から放出された遊走子１４を雄性配偶体１５または雌性配偶体１６に生長するまで育成する配偶体育成工程、
（ｃ）所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水に雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を投入し、前記所定の低水温を維持するとともにインキュベーションおよび／またはエアレーションをして雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を所定の幼胞子体１７に生長するまで育成する幼胞子体育成工程、
（ｂ）養殖槽３において所定の高温の海水を流水するとともに所望によりエアレーションをして所定の幼胞子体１７を出荷対象個体１８に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程。
以上、（ａ）、（ｃ）および（ｂ）の工程を有してもよい。
【００４７】
本第２実施形態における（ｃ）幼胞子体育成工程において、インキュベーションおよびエアレーションとは、第１実施形態の（ｉｉｉ）幼胞子体付着種苗糸作製工程の場合と同義である。
【００４８】
本第２実施形態における（ｃ）幼胞子体育成工程において、所定の幼胞子体１７、すなわち（ｂ）出荷対象個体育成工程に耐えることができる幼胞子体１７とは、（ｂ）出荷対象個体育成工程において所定の高水温海水を用いた場合に、出荷対象個体１８まで生長することができる幼胞子体１７をいい、葉長が約０．５〜８ｃｍの幼胞子体１７が好ましく、葉長が約１〜７ｃｍの幼胞子体１７がより好ましく、葉長が約２〜６ｃｍの幼胞子体１７がさらに好ましい。
【００４９】
なお、本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法には、その特徴を損なわない限りにおいて、他の工程を有してもよく、例えば、さらなるインキュベート工程や殺菌工程、洗浄工程などを有してもよい。
【００５０】
以下、本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法について、実施例に基づいて説明する。なお、本発明の技術的範囲は、これらの実施例によって示される特徴に限定されない。
【実施例】
【００５１】
＜実施例１＞ホソメコンブの生産
（１）遊走子・配偶体付着種苗糸の作製
水温が約４〜１１℃の滅菌した濾過海水中に、ホソメコンブの成熟した胞子体１から遊走子１４を放出させ、遊走子１４や遊走子１４から生長した雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を、クレモナ糸を用いた種苗糸基質２に高い密度で付着させることにより、遊走子・配偶体付着種苗糸２１を５本作製した。その工程を図１の上段に、作製した遊走子・配偶体付着種苗糸２１を図３にそれぞれ示す。
【００５２】
（２）種苗糸基質に付着した遊走子や雌雄配偶体の育成
種苗糸基質２に付着したホソメコンブの遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を育成するため、長さ５．０ｍ×幅１．０ｍ×深さ０．５ｍ（水深約０．３〜０．４ｍ）の養殖槽３を用意し、その長辺の縁から固定金具３３をつり下げて、作製した５本の遊走子・配偶体付着種苗糸２１の各両端をその固定金具３３に結びつけた後、水温が約４〜１１℃に維持された海水を、養殖槽３に形成された取水口３１から流入させて排水口３２から排出することにより、養殖槽３の長手方向に海水をかけ流した。その工程を図１の中段に、その様子を図４にそれぞれ示す。
【００５３】
さらに、養殖槽３の長手方向側面に海水の噴出口３６を配設して海水を噴出させるとともに、空気を送り込むための通気管３４を養殖槽３の底に設置してエアレーションをすることで、種苗糸基質２に付着したホソメコンブの遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６に新鮮な空気あるいは溶存酸素が豊富な海水を送り込んで生長を促進させた。その様子を図５に示す。
【００５４】
図５に示すように、種苗糸基質２に付着したホソメコンブの遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６は、成熟した胞子体１すなわち出荷対象個体（収穫対象個体）１８へと生長していることが確認できる。また、遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６の生長に伴い、エアレーションを施すことにより、新鮮な空気あるいは溶存酸素が豊富な海水を送って生長を促進させるという効果のみならず、海水流水になびかせることにより生長を促進させるという効果が得られることが確認できた。さらに、遮光可能な黒色網で養殖槽３を覆うことにより養殖槽３内の光量を調節することが効果的であることが確認でき、その結果、ホソメコンブの出荷対象個体（収穫対象個体）１８を生産することができた。
【００５５】
ホソメコンブの出荷対象個体（収穫対象個体）１８については、図１の下段に示すように、葉状部基部を含む生長部位が残るように刈り取ることにより収穫し、収穫後の種苗糸（出荷対象個体収穫種苗糸）に付着した個体を、同様の方法により養殖槽３で再育成した。その結果、再育成された出荷対象個体収穫種苗糸に付着した収穫後の個体は、出荷対象個体（収穫対象個体）１８に生長した。
【００５６】
（３）種苗糸に付着していない状態の配偶体の育成
水温が約４〜１１℃の滅菌した濾過海水中に、ホソメコンブの成熟した胞子体１から遊走子１４を放出させ、遊走子１４を培養してホソメコンブの雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を育成した。その工程を図１の上段左に示す。
【００５７】
育成した雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を細かい網目状の養殖用かご３５に入れ、長さ５．０ｍ×幅１．０ｍ×深さ０．５ｍ（水深約０．３〜０．４ｍ）の養殖槽３に養殖用かご３５を入れて固定した後、水温が約４〜１１℃に維持された海水を、養殖槽３に形成された取水口３１から流入させて排水口３２から排出することにより、養殖槽３の長手方向に海水をかけ流した。その工程を図１の中段に示す。さらに、遮光可能な黒色網で養殖槽３を覆うことにより養殖槽３内の光量を調節するとともに、空気を送り込むための通気管３４を養殖槽３の底に設置してエアレーションをすることにより、ホソメコンブの雄性配偶体１５や雌性配偶体１６に新鮮な空気あるいは溶存酸素が豊富な海水を送り込み、生長を促進させた。その結果、本実施例（２）と比較してやや小ぶりではあったが、ホソメコンブの出荷対象個体（収穫対象個体）１８を生産することができた。
【００５８】
＜実施例２＞アワビの養殖廃水を用いたホソメコンブの生産
流水海水の安定供給を実現するため、養殖槽３におけるホソメコンブの育成にアワビの養殖廃水を用いることを検討した。その工程を図２に示す。実施例１と同様の方法によりホソメコンブの生産を試みた結果、アワビの養殖廃水は通常の海水温と比較して約１１〜１６℃と高温であるため、ホソメコンブの遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を養殖槽３における育成に耐えることができるサイズの幼胞子体１７にまで生長させる必要があることが確認できた。
【００５９】
そこで、このような工程を含んだ生産方法の確立をすべく、図６に示すような陸上養殖施設４を構築し、実用化を試みた。陸上養殖施設４は、主に、遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程、幼胞子体付着種苗糸作製工程、遊走子・配偶体付着種苗糸保存工程、配偶体育成工程および幼胞子体育成工程を行うための初期工程処理施設４１と、養殖槽３と、アワビ養殖場から養殖廃水を揚水して流水海水を安定供給するための揚水ポンプ４２と、収穫したホソメコンブの梱包や発送などを行う荷捌き場４３と、海水流水を養殖槽３や荷捌き場４３へ配水するための配水管４４とを備えている。
【００６０】
（１）遊走子・配偶体付着種苗糸の作製およびその保存
実施例１（１）と同様の方法でホソメコンブの遊走子・配偶体付着種苗糸２１を大量に作製し（図１の１段目）、約４〜１１℃の水温を維持しながら保存した。滅菌濾過海水を用いる場合は、約４〜１１℃の水温を維持しつつ赤色光を照射して保存し、滅菌人工海水を用いる場合は鉄分を含まない滅菌人工海水を選択して、約４〜１１℃の水温を維持するか、あるいは約４〜１１℃の水温を維持しつつ赤色光を照射して保存した。
【００６１】
滅菌人工海水については、遊走子・配偶体付着種苗糸２１を少量保存する場合には人工海水ＡＳＰ１２（ＰＩＩのＦｅフリーのもの）を滅菌したもの用い、遊走子・配偶体付着種苗糸２１を大量に保存する場合には滅菌した濾過海水１Ｌあたりに人工海水ＥＳ ｂｙ Ｐｒｏｖａｓｏｌｉ（Ｆｅフリーのもの）の滅菌したものを２０ｍＬ混合して得られるＰＥＳ培養液を用いた。以下、ＡＳＰ１２（Ｆｅフリー）とＥＳ ｂｙ Ｐｒｏｖａｓｏｌｉ（Ｆｅフリー）の組成を示す。
【００６２】
［１−１］滅菌人工海水ＡＳＰ１２（Ｆｅフリー）
ｐＨ＝７．８〜８．０
蒸留水 １０００ｍＬ
ＮａＣｌ ２８ｇ
ＭｇＳＯ４−７Ｈ２Ｏ ７ｇ
ＭｇＣｌ２−６Ｈ２Ｏ ４ｇ
ＫＣｌ ０．７ｇ
Ｔｒｉｓ １ｇ
ＮａＮＯ３ ０．１ｇ
グリセロールリン酸ナトリウム １０ｍｇ
ビタミンミックス １ｍＬ
ビタミン１２ ０．２μｇ
ビオチン １μｇ
チアミン １００μｇ
ＰＩＩ １０ｍＬ
Ｓ２ １０ｍＬ
ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ） １００ｍｇ
Ｎａ２ＳｉＯ３−９Ｈ２Ｏ １５０ｍｇ
Ｋ３ＰＯ４ １０ｍｇ
Ｃａ（塩化物として） ０．４ｇ
【００６３】
（上記ＰＩＩの組成；蒸留水１００ｍＬあたり）
Ｎａ２−ＥＤＴＡ １００ｍｇ
Ｂ（Ｈ３ＢＯ３） ２０ｍｇ
Ｍｎ（塩化物として） ４ｍｇ
Ｚｎ（塩化物として） ５００μｇ
Ｃｏ（塩化物として） １００μｇ
【００６４】
（上記Ｓ２の組成）
蒸留水 １００ｍＬ
Ｍｏ（Ｎａ２Ｍｏ４） ５ｍｇ
Ｂｒ（カリウム化合物として） １００ｍｇ
Ｓｒ（塩化物として） ２０ｍｇ
Ｒｂ（塩化物として） ２ｍｇ
Ｌｉ（塩化物として） ２ｍｇ
Ｉ（カリウム化合物として） １００μｇ
Ｖａ（塩化物として） １０μｇ
【００６５】
［１−２］ＥＳ ｂｙ Ｐｒｏｖａｓｏｌｉ（Ｆｅフリー）
ｐＨ＝７．８〜８．０
蒸留水 １０００ｍＬ
ＮａＮＯ３ ３．５ｇ
グリセロールリン酸ナトリウム ５００ｍｇ
ＰＩＩ ２５０ｍＬ
ビタミン１２ １００μｇ
チアミン ５ｍｇ
ビオチン ５０μｇ
Ｔｒｉｓ ５ｇ
※上記ビタミン１２、チアミン、ビオチンの代わりにヨウ化カリウムを１ｍｇ添加してもよい。
【００６６】
（２）遊走子・配偶体付着種苗糸に付着した遊走子や雌雄配偶体の幼胞子体への育成
作製または保存した遊走子・配偶体付着種苗糸２１に付着しているホソメコンブの遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６は、そのままではアワビの養殖廃水を用いて育成することができないため、アワビの養殖廃水を用いた育成に耐えることができるサイズの幼胞子体１７に生長させ、幼胞子体付着種苗糸２２を作製することとした。先ず、図７に示すように、初期工程処理施設４１内に設置したインキュベーターを用いて葉長が約１ｍｍ〜３ｍｍの幼胞子体１７になるまで遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を育成し、次いで、図８に示すように、初期工程処理施設４１内に設置した屋内水槽を用いて葉長が約１．５〜７ｃｍの幼胞子体１７になるまで育成した。その工程を図２の１段目から３段目にかけて示す。なお、初期工程処理施設４１内に設置したインキュベーターおよび屋内水槽の育成条件は次のとおりである。
【００６７】
［２−１］初期工程処理施設４１内に設置したインキュベーターの育成条件
水温：４〜１１℃
照度：２０００Ｌｕｘ
海水：本実施例（１）のＰＥＳ培養液
ｐＨ：７．０〜８．５
静置にて育成
【００６８】
［２−２］初期工程処理施設４１内に設置した屋内水槽の育成条件
水温：４〜１１℃
照度：２０００Ｌｕｘ
海水：滅菌濾過したアワビ養殖廃水（海水）と、本実施例（１）のＰＥＳ培養液１／４〜１／２濃度のものとを混合して得られる培養液
ｐＨ：７．０〜８．５
エアレーションをしながら育成
【００６９】
（３）種苗糸基質に付着していない状態の配偶体の幼胞子体への育成
実施例１（３）および本実施例（１）と同様の方法により、種苗糸基質２に付着していない状態のホソメコンブの雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を育成または保存し（図２の１段目から２段目の左）、育成または保存した雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を細かい網目状の養殖用かご３５に入れ、本実施例（２）と同様、初期工程処理施設４１内に設置したインキュベーターを用いて葉長が約２ｍｍ〜６ｍｍの幼胞子体１７になるまで雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を育成し、次いで、図８に示すように、初期工程処理施設４１内に設置した屋内水槽を用いて葉長が約２〜６ｃｍの幼胞子体１７になるまで育成した。
【００７０】
（４）幼胞子体の育成
本実施例（２）および（３）で育成した幼胞子体１７を育成するため、先ず、幼胞子体付着種苗糸２２については、長さ５．０ｍ×幅１．０ｍ×深さ０．５ｍ（水深約０．３〜０．４ｍ）の養殖槽３の長辺の縁から固定金具３３をつり下げて、幼胞子体付着種苗糸２２の各両端をその固定金具３３に結びつけた後、水温が約１１〜１６℃に維持されたアワビ養殖廃水（海水）を、養殖槽３に形成された取水口３１から流入させて排水口３２から排出することにより、養殖槽３の長手方向にアワビ養殖廃水をかけ流した。その工程を図２の３段目に、その様子を図９にそれぞれ示す。
【００７１】
次に、種苗糸基質２に付着していない状態の幼胞子体１７については、細かい網目状の養殖用かご３５に入った幼胞子体１７を、養殖用かご３５に入れたまま長さ５．０ｍ×幅１．０ｍ×深さ０．５ｍ（水深約０．３〜０．４ｍ）の養殖槽３に入れ、養殖用かご３５を養殖槽３に固定した後、水温が約１１〜１６℃に維持されたアワビ養殖廃水を、養殖槽３に形成された取水口３１から流入させて排水口３２から排出することにより、養殖槽３の長手方向にアワビ養殖廃水をかけ流した。その工程を図２の３段目に示す。
【００７２】
さらに、遮光可能な黒色網で養殖槽３を覆うことにより養殖槽３内の光量を調節するとともに、空気を送り込むための通気管３４を養殖槽３の底に設置してエアレーションをすることにより、ホソメコンブの幼胞子体１７に新鮮な空気あるいは溶存酸素が豊富な海水を送り込んで生長を促進させた。以上の結果、得られた各種データを図１０に、種苗糸基質２に付着した幼胞子体１７から生長した出荷対象個体（収穫対象個体）１８の様子を図２の４段目および図１１にそれぞれ示す。
【００７３】
図１０中、「ロープ（Ａ）」および「ロープ（Ｂ）」とは、養殖槽３につり下げられた幼胞子体付着種苗糸２２の中から任意に選択した２本に付着した幼胞子体１７を示し、「バラ」とは、種苗糸基質２に付着していない状態の幼胞子体１７を示し、「バラ」における長さ（育成した長さ）および幅（育成した幅）の数値は、種苗糸基質２に付着していない状態の幼胞子体１７についての平均値を示す。図１０および図１１に示すように、幼胞子体付着種苗糸２２における幼胞子体１７と種苗糸基質２に付着していない状態の幼胞子体１７とは、いずれも出荷対象個体（収穫対象個体）１８へと順調に生長した。
【００７４】
（１）収穫後の種苗糸（出荷対象個体収穫種苗糸）の再育成
幼胞子体付着種苗糸２２における幼胞子体１７が生長したホソメコンブの出荷対象個体（収穫対象個体）１８については、図２の４段目に示すように、葉状部基部を含む生長部位が残るように刈り取ることにより収穫し、収穫後の種苗糸（出荷対象個体収穫種苗糸）に付着した個体を、本実施例（４）と同様の方法により、養殖槽３で再育成した。その結果、再育成された出荷対象個体収穫種苗糸に付着した収穫後の個体は、出荷対象個体（収穫対象個体）１８に生長した。
【００７５】
また、収穫した陸上養殖ホソメコンブは、従来の海中養殖が有するコリコリした食感ではなく、シャクッと崩れる感じの食感、シャキシャキ感を有しており、お刺身用やしゃぶしゃぶ用として出荷することができた。さらに、収穫した陸上養殖ホソメコンブの乾燥物は、従来にない口溶けの良い食感を有しており、ふりかけとしての検討がなされた。
【符号の説明】
【００７６】
１ 成熟した胞子体
２ 種苗糸基質
３ 養殖槽
４ 陸上養殖施設
１１ 卵
１２ 精子
１３ 受精卵
１４ 遊走子
１５ 雄性配偶体
１６ 雌性配偶体
１７ 幼胞子体
１８ 出荷対象個体（収穫対象個体、成熟した胞子体）
２１ 遊走子・配偶体付着種苗糸
２２ 幼胞子体付着種苗糸
３１ 取水口
３２ 排水口
３３ 固定金具
３４ 通気管
３５ 養殖用かご
３６ 噴出口
４１ 初期工程処理施設
４２ 揚水ポンプ
４３ 荷捌き場
４４ 配水管
【技術分野】
【０００１】
本発明は、陸上養殖褐藻類の生産方法に関し、より詳細には、遊走子・配偶体付着種苗糸を作製する工程と出荷対象固体に生長するまで育成する工程とを有する陸上養殖褐藻類の生産方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
褐藻類（褐藻綱；Ｐｈａｅｏｐｈｙｃｅａｅ）は、主に海産多細胞藻類からなる生物群である。褐色をしているのが特徴であり、糸状、葉状、あるいは樹枝状などさまざまな構造のものが存在し、生殖器や分裂組織などが分化するものも存在する。海藻の中では最も発達した藻体を有し、大きくなるものでは数十メートルにも達する。日常生活に最も近い褐藻は、コンブやワカメなどの食用の海藻である。
【０００３】
従来、食用や飼料用の目的で、褐藻類の種苗や大量培養などの養殖事業が海中において試みられており、現在では採苗から栽培、取り入れまでを約４〜１０ヶ月程度で行う促成栽培技術が開発されている。例えば、コンブでは、天然母藻から遊走子を取り出して種苗糸基質に付着させ、次いで滅菌海水あるいはろ過海水にリン酸や窒素などの栄養源を添加した培養液中にこれを入れ、葉長が１ｃｍ弱の幼体になるまで室内培養し、その後海中で培養を行うという促成栽培がなされている。通常、促成栽培では、母藻となる天然葉体が成熟する８月下旬〜９月上旬に採苗し、４５〜６０日間程度で幼体まで室内培養し、１０月中旬頃に沖出し、７〜１０日仮植えして苗に仕上げている。
【０００４】
しかしながら、従来の海中における褐藻類の促成栽培では、周年連続的に養殖することができないばかりか、仮植えは海中に設置された筏から垂下して、本養成は数トンの重量を有するコンクリートブロックを設置して行わなければならず、金銭的、労力的な投資が必要となり、養殖事業者にとって大きな負担となっている。
【０００５】
そこで、海洋深層水とタンクとを用いた褐藻類の陸上養殖が試みられている（非特許文献１）。この方法では、胞子集塊化法を用いてあらかじめ培養室内で育成した種苗を成熟誘導し、海洋深層水が連続注水されているタンク内で浮遊させ、生長させるという方法である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】岡直広、Ｂｕｌｌ．Ｍａｒ．Ｓｃｉ．Ｆｉｓｈ．，Ｋｏｃｈｉ Ｕｎｉｖ．第２４巻、第１１−４７頁、２００６年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、非特許文献１に開示されている海洋深層水とタンクとを用いた褐藻類の陸上養殖では、種苗の熟成誘導において胞子集塊化法が用いられているため、熟成誘導された種苗は、附着根の部位で数個体が連結して花弁のような形状を有し、その結果、生産された褐藻類は、塊から葉が多分岐したような形態を有することから（非特許文献１の図４６参照）、食用としての規格を満たし難く、商業用出荷が困難である。そもそもこの方法は、アワビの餌となる褐藻類を養殖するための方法であるため、この方法により生産された褐藻類は、食用としての規格や品質が要求されない。にもかかわらず、この方法はコストパフォーマンスが悪いなどの理由から、実用化には至っていない。
【０００８】
本発明は、上述の問題点を解決するためになされたものであって、遊走子や雌雄配偶体から出荷対象個体までの育成を新しい手法で行うことにより、褐藻類を安定して周年生産することができ、かつ規格の調整にも優れるうえ、他の海洋資源の養殖廃水も活用することができ、限られたスペースを有効活用することができる陸上養殖褐藻類の生産方法を提供し、さらに、従来の海中養殖の褐藻類にない柔らかさやシャキシャキした食感を有し、その乾燥物もまた、従来にない口溶けの良い食感を有する陸上養殖褐藻類を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、鋭意研究の結果、所定の低水温の滅菌人工海水や滅菌濾過海水などに褐藻類の成熟した胞子体（母藻）から遊走子を放出させ、所定の低水温を維持しつつ種苗糸基質にその遊走子や遊走子から生長した雌雄配偶体を付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸を作製した後、海水流水に対して略垂直となるよう遊走子・配偶体付着種苗糸を養殖槽に固定し、漸次生長する褐藻類に新鮮な空気あるいは溶存酸素が豊富な海水を送るため、あるいは海水流水になびかせるためなど、必要に応じてエアレーションを施すなどすることにより、褐藻類を陸上で養殖することに成功し、この方法により養殖生産された褐藻類が、従来の海中養殖が有するコリコリした食感ではなく、シャクッと崩れる感じの食感、シャキシャキ感を有した、お刺身として食用することもできること、その乾燥物もまた、従来にない口溶けの良い食感を有することを見出し、下記の各発明を完成した。
【００１０】
（１）所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水中で褐藻類の成熟した胞子体から放出された遊走子および／または前記遊走子から生長した配偶体を種苗糸基質に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸を作製する遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程と、前記遊走子・配偶体付着種苗糸を流水に対して略垂直となるように養殖槽に固定して海水を流水するととともに所望によりエアレーションをして前記遊走子・配偶体付着種苗糸における遊走子、配偶体ならびに前記遊走子および／または前記配偶体から生長した幼胞子体の少なくともいずれかを出荷対象個体に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程とを有する陸上養殖褐藻類の生産方法。
【００１１】
（２）前記出荷対象個体育成工程における海水が所定の高水温の海水である場合に、所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水に遊走子・配偶体付着種苗糸を投入し、前記所定の低水温を維持するとともにインキュベーションおよび／またはエアレーションをして前記遊走子・配偶体付着種苗糸における遊走子および／または配偶体を前記出荷対象個体育成工程に耐えることができる幼胞子体に生長するまで育成して幼胞子体付着種苗糸を作製する幼胞子体付着種苗糸作製工程を有する、（１）に記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【００１２】
（３）前記遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程において作製した遊走子・配偶体付着種苗糸を、所定の低水温を維持するとともに赤色光を照光して、ならびに／もしくは所定の低水温を維持するとともに鉄分を含まない滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水を用いて保存する遊走子・配偶体付着種苗糸保存工程を有する、（１）または（２）に記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【００１３】
（４）前記出荷対象個体育成工程において育成された出荷対象個体を、葉状部基部を含む生長部位が残るように刈り取ることにより収穫する出荷対象個体収穫工程を有する、（１）から（３）のいずれかに記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【００１４】
（５）所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水中で褐藻類の成熟した胞子体から放出された遊走子を配偶体に生長するまで育成する配偶体育成工程と、養殖槽において海水を流水するとともに所望によりエアレーションをして配偶体および／または前記配偶体から生長した幼胞子体を出荷対象個体に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程とを有する陸上養殖褐藻類の生産方法。
【００１５】
（６）前記出荷対象個体育成工程における海水が所定の高水温の海水である場合に、所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水に配偶体を投入し、前記所定の低水温を維持するとともにインキュベーションおよび／またはエアレーションをして前記配偶体を前記出荷対象個体育成工程に耐えることができる幼胞子体に生長するまで育成する幼胞子体育成工程を有する、（５）に記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【００１６】
（７）褐藻類がコンブ科植物である、（１）から（６）のいずれかに記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【発明の効果】
【００１７】
本発明によれば、規格の調整が可能な褐藻類を周年生産することができ、生産された褐藻類は、磯焼けした海洋地域への種苗として供給することができるほか、従来の海中養殖の褐藻類にない柔らかさやシャキシャキした食感を有する食用の褐藻類として、その乾燥物もまた、従来にない口溶けの良い食感を有する食用の褐藻類の加工食品として、市場に供給することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法を表した模式図である。
【図２】出荷対象個体育成工程における海水が所定の高水温の海水である場合の、本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法を表した模式図である。
【図３】遊走子・配偶体付着種苗糸２１を示す写真図である。
【図４】遊走子・配偶体付着種苗糸２１が海水流水に対して略垂直となるよう養殖槽３に固定される様子を示す写真図である。
【図５】養殖槽３において生長したホソメコンブが海水流水になびくよう、エアレーションが施されている様子を示す写真図である。
【図６】陸上養殖褐藻類の生産が行われる陸上養殖施設４の模式図である。
【図７】インキュベーターにおける幼胞子体付着種苗糸作製工程の様子を示す写真図である。
【図８】屋内水槽における幼胞子体付着種苗糸作製工程の様子を示す写真図である。
【図９】本発明における出荷対象個体育成工程を示す写真図である。
【図１０】本発明に係る生産方法により得られた各種データを示す図表である。
【図１１】本発明に係る生産方法を用いて生産された褐藻類の様子を示す写真図である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
以下、本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法について、図１および図２を用いて詳細に説明する。本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法の第１実施形態は、図１の上段に示すように、所定の低水温の滅菌人工海水や滅菌濾過海水などの海水中で褐藻類の成熟した胞子体１から遊走子１４を放出させ、その遊走子１４やその遊走子１４から生長した雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を種苗糸基質２に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸２１を作製した後、図１の中下段に示すように、流水（矢印）に対して略垂直となるように遊走子・配偶体付着種苗糸２１を養殖槽３に固定し、海水を流水し、所望によりエアレーションをすることにより種苗糸基質２に付着した遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６、これらから生長した幼胞子体１７を出荷対象個体１８に生長するまで育成する陸上養殖褐藻類の生産方法である。
【００２０】
すなわち、本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法の第１実施形態は、
（ｉ）所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水中で褐藻類の成熟した胞子体１から放出された遊走子１４、遊走子１４から生長した雄性配偶体１５および雌性配偶体１６の少なくともいずれかを種苗糸基質２に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸２１を作製する遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程、
（ｉｉ）遊走子・配偶体付着種苗糸２１を流水に対して略垂直となるように養殖槽３に固定して海水を流水するととともに所望によりエアレーションをして遊走子・配偶体付着種苗糸２１における遊走子１４、雄性配偶体１５、雌性配偶体１６およびこれらから生長した幼胞子体１７の少なくともいずれかを出荷対象個体１８に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程。
以上、（ｉ）および（ｉｉ）の工程を有する。
【００２１】
本第１実施形態における（ｉ）遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程は、図１の上段に示すように、所定の低水温の滅菌人工海水や滅菌濾過海水などの海水中で褐藻類の成熟した胞子体１から遊走子１４を放出させ、その遊走子１４や遊走子１４から生長した雄性配偶体１５、雌性配偶体１６の少なくともいずれかを種苗糸基質２に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸２１を作製する工程である。
【００２２】
本発明において、所定の低水温とは、１〜１１℃程度をいうが、２〜１１℃が好ましく、３〜１１℃がより好ましく、４〜１１℃がさらに好ましく、４〜１０℃がよりさらに好ましい。
【００２３】
本発明において、使用することのできる人工海水や濾過海水は滅菌されたものであれば特に限定されないが、人工海水については、例えば、ＡＳＰ１２やＥＳ ｂｙ Ｐｒｏｖａｓｏｌｉ、これらのＦｅフリーのものを使用することができるが、Ｆｅフリーのものを使用するのが好ましい。また、濾過海水としては、例えば、レジンなどを充填したカラムに通水して濾過した海水を挙げることができる。さらに、人工海水と濾過海水とを組み合わせて使用することができ、例えば、濾過海水と人工海水ＥＳ ｂｙ ＰｒｏｖａｓｏｌｉのＦｅフリーのものとを混合して得られるＰＥＳ培養液などを使用することができる。
【００２４】
本発明において、「滅菌人工海水」や「滅菌濾過海水」とは、一旦滅菌した人工海水や濾過海水をいい、すなわち、菌や微生物をまったく含まない場合のみならず、多少の菌や微生物を含有する人工海水や濾過海水が含まれる。また、人工海水や濾過海水を滅菌する方法は、公知か否かを問わず、当業者が適宜選択可能な方法を用いることができる。そのような方法であって公知の方法としては、例えば、蒸気滅菌法、濾過滅菌法、遠心分離滅菌法、γ線などの放射線やエチレンオキサイドガス、プラズマ、紫外線などを用いた滅菌方法などを挙げることができる。
【００２５】
種苗糸基質２は、遊走子１４や遊走子１４から生長した雄性配偶体１５や雌性配偶体１６、これらから生長した幼胞子体１７などが付着して生長することができるものであれば、当業者により選択可能な種苗糸基質２を使用することができるが、そのような種苗糸基質２としては、例えば、糸、紐、ロープ、テープなどを挙げることができ、糸が好ましく、クレモナ糸がより好ましい。また、種苗糸基質２は、表面を毛羽立たせるなどして付着性を向上させてから使用してもよく、ゲルなどの付着性を高める物質を表面に塗布して使用してもよい。
【００２６】
遊走子１４は、所定の低水温の滅菌人工海水または滅菌濾過海水にそのまま放出させてもよく、所定の低水温の滅菌人工海水と滅菌濾過海水とを混合して所定の低水温に調整したものに放出させてもよく、これらに海水や不足養分などを混合して所定の低水温に調整したものに放出させてもよい。また、図１の上段に示すように、遊走子１４を放出させた後、そこへ種苗糸基質２を投入することで遊走子１４を種苗糸基質２に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸２１を作製してもよく、放出させた遊走子１４を保存した後、または放出させた遊走子１４を雄性配偶体１５や雌性配偶体１６に生長させた後、これらを種苗糸基質２に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸２１を作製してもよい。
【００２７】
本第１実施形態における（ｉｉ）出荷対象個体育成工程は、図１の中段に示すように、流水（矢印）に対して略垂直となるように遊走子・配偶体付着種苗糸２１を養殖槽３に固定し、海水を流水し、所望によりエアレーションをすることにより種苗糸基質２に付着した遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を出荷対象個体１８に生長するまで育成する工程である。
【００２８】
養殖槽３は、遊走子・配偶体付着種苗糸２１を流水に対して略垂直となるように固定できて海水を流水するととともに所望によりエアレーションをすることができるものであれば特に限定されないが、例えば、直方体状を含む角柱状の槽のほか、円柱状、角錐状、円錐状、渦巻き状、波状の槽を挙げることができる。
【００２９】
本発明において、海水の流水は、種苗糸基質２において生長した褐藻類がなびくようにするのが好ましい。そのような流水方法としては、例えば、図１の中段に示すように、取水口３１と排水口３２とが長手方向に向かい合うよう長手方向端部に形成して行う方法や、図５に示すように、海水の噴出口３６を養殖槽３の長手方向側面に配設して噴出口３６から海水を排出することで流水する方法、あるいはその両方の方法を組み合わせた方法などを挙げることができる。また、本第１実施形態における（ｉｉ）出荷対象個体育成工程において、エアレーションは、新鮮な空気あるいは溶存酸素が豊富な海水を送るため、あるいは海水流水になびかせるためなど、種苗糸基質２に付着した遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６の生長に応じて行うことができ、その態様は特に限定されず、例えば、空気を送り込むための通気管３４を養殖槽３の底に設置して通気管３４から空気を噴出させることでエアレーションをすることができる。
【００３０】
また、本第１実施形態に係る陸上養殖褐藻類の生産方法は、例えばアワビやウニなどの養殖廃水などを用いる場合のように、（ｉｉ）出荷対象個体育成工程において用いる海水が所定の高水温の海水である場合、図２に示すように、（ｉ）遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程（図２の１段目）と（ｉｉ）出荷対象個体育成工程（図２の３、４段目）との間に、種苗糸基質２に付着した遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を（ｉｉ）出荷対象個体育成工程に耐えることができる幼胞子体１７に生長するまで育成して幼胞子体付着種苗糸２２を作製する（ｉｉｉ）幼胞子体付着種苗糸作製工程（図２の２段目）を有してもよい。
【００３１】
すなわち、本第１実施形態に係る陸上養殖褐藻類の生産方法は、
（ｉ）所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水中で褐藻類の成熟した胞子体１から放出された遊走子１４、遊走子１４から生長した雄性配偶体１５および雌性配偶体１６の少なくともいずれかを種苗糸基質２に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸２１を作製する遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程、
（ｉｉｉ）所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水に遊走子・配偶体付着種苗糸２１を投入し、前記所定の低水温を維持するとともにインキュベーションおよび／またはエアレーションをして遊走子・配偶体付着種苗糸２１における遊走子１４、雄性配偶体１５および雌性配偶体１６の少なくともいずれかを所定の幼胞子体１７に生長するまで育成して幼胞子体付着種苗糸２２を作製する幼胞子体付着種苗糸作製工程、
（ｉｉ）幼胞子体付着種苗糸２２を流水に対して略垂直となるように養殖槽３に固定して所定の高水温の海水を流水するととともに所望によりエアレーションをして幼胞子体付着種苗糸２２における所定の幼胞子体１７を出荷対象個体１８に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程。
以上、（ｉ）、（ｉｉｉ）および（ｉｉ）の工程を有してもよい。
【００３２】
なお、本発明において、所定の高水温とは、１１〜１８℃程度をいうが、１１〜１７℃が好ましく、１１〜１６℃がより好ましく、１１〜１５℃がさらに好ましい。
【００３３】
（ｉｉｉ）幼胞子体付着種苗糸作製工程は、所定の低水温の滅菌人工海水や滅菌濾過海水などへ遊走子・配偶体付着種苗糸２１を投入し、その所定の低水温を維持するとともにインキュベーションおよびエアレーションの少なくともいずれかを行い、種苗糸基質２に付着した遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を所定の幼胞子体１７、すなわち（ｉｉ）出荷対象個体育成工程に耐えることができる幼胞子体１７、具体的には（ｉｉ）出荷対象個体育成工程において出荷対象個体１８に生長することができるサイズの幼胞子体１７にまで生長させて幼胞子体付着種苗糸２２を作製する工程である。
【００３４】
本第１実施形態の（ｉｉｉ）幼胞子体付着種苗糸作製工程において、インキュベーションは、所定の低水温下で行うほかは、当業者が適宜選択可能な方法により行うことができる。また、エアレーションは、新鮮な空気あるいは溶存酸素が豊富な海水を送る目的で主に行われるが、その態様は特に限定されず、例えば、空気を送り込むための通気管を水槽の底に設置して通気管から空気を噴出させることで行うことができる。
【００３５】
本第１実施形態における（ｉｉｉ）幼胞子体付着種苗糸作製工程において、（ｉｉ）出荷対象個体育成工程に耐えることができる幼胞子体１７とは、（ｉｉ）出荷対象個体育成工程において所定の高水温海水を用いた場合に、出荷対象個体１８まで生長することができる幼胞子体１７をいい、葉長が約０．５〜１０ｃｍの幼胞子体１７が好ましく、葉長が約１〜８ｃｍの幼胞子体１７がより好ましく、葉長が約１．５〜７ｃｍの幼胞子体１７がさらに好ましく、葉長が２〜６ｃｍの幼胞子体１７がよりさらに好ましい。
【００３６】
また、本第１実施形態に係る陸上養殖褐藻類の生産方法は、（ｉ）遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程において作製した遊走子・配偶体付着種苗糸２１を保存する（ｉｖ）遊走子・配偶体付着種苗糸保存工程を有してもよい。
【００３７】
（ｉｖ）遊走子・配偶体付着種苗糸保存工程は、所定の低水温を維持するとともに赤色光を照光して保存するか、所定の低水温を維持するとともに鉄分を含まない滅菌人工海水や滅菌濾過海水を含む海水を用いて保存するか、あるいはその両方を組み合わせて保存する工程である。（ｉｖ）遊走子・配偶体付着種苗糸保存工程における所定の低水温とは、（ｉ）遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程や（ｉｉｉ）幼胞子体付着種苗糸作製工程における所定の低水温と同義である。
【００３８】
赤色光を照光する方法により、および鉄分を含まない滅菌人工海水や滅菌濾過海水などを用いる方法により、遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６の成熟や生長を抑制できることが見出されており、所定の低水温下においてこれらの方法を用いて、あるいは所定の低水温下においてこれらの方法を組み合わせることにより、種苗糸基質２に付着した遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６をそのままの状態で保存することができる。
【００３９】
さらに、本第１実施形態に係る陸上養殖褐藻類の生産方法は、図１の下段右や図２の４段目右にそれぞれ示すように、（ｉｉ）出荷対象個体育成工程において育成された出荷対象個体１８を、葉状部基部を含む生長部位が残るように刈り取ることにより収穫する（ｖ）出荷対象個体収穫工程を有してもよい。（ｖ）出荷対象個体収穫工程後の種苗糸基質２に付着した個体は、本第１実施形態に係る（ｉｉ）出荷対象個体育成工程を繰り返すことにより、出荷対象個体１８に生長させることができる。
【００４０】
次に、本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法の第２実施形態は、図１の上段の左側に示すように、所定の低水温の滅菌人工海水や滅菌濾過海水などの海水中で褐藻類の成熟した胞子体１から遊走子１４を放出させ、遊走子１４を雄性配偶体１５や雌性配偶体１６になるまで育成した後、図１の中段に示すように、養殖用かご３５に入れて養殖槽３に固定して海水を流水し、所望によりエアレーションをすることにより雄性配偶体１５や雌性配偶体１６、これらから生長した幼胞子体１７を出荷対象個体１８に生長するまで育成する陸上養殖褐藻類の生産方法である。
【００４１】
すなわち、本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法の第２実施形態は、
（ａ）所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水中で褐藻類の成熟した胞子体１から放出された遊走子１４を雄性配偶体１５または雌性配偶体１６に生長するまで育成する配偶体育成工程、
（ｂ）養殖槽３において海水を流水するとともに所望によりエアレーションをして雄性配偶体１５、雌性配偶体１６およびこれらから生長した幼胞子体１７の少なくともいずれかを出荷対象個体１８に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程。
以上、（ａ）および（ｂ）の工程を有する。
【００４２】
本第２実施形態における（ａ）配偶体育成工程は、図１の上段左に示すように、所定の低水温の滅菌人工海水や滅菌濾過海水などの海水中で褐藻類の成熟した胞子体１から遊走子１４を放出させ、遊走子１４を雄性配偶体１５や雌性配偶体１６に生長させる工程である。なお、遊走子１４については、第１実施形態における（ｉ）遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程と同様である。
【００４３】
また、本第２実施形態における（ｂ）出荷対象個体育成工程は、図１の中段左に示すように、雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を養殖用かご３５に入れ、養殖槽３に固定して海水を流水（矢印）し、所望によりエアレーションをすることにより雄性配偶体１５や雌性配偶体１６、これらから生長した幼胞子体１７を出荷対象個体１８に生長するまで育成する工程である。
【００４４】
本第２実施形態における（ｂ）出荷対象個体育成工程では、雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を養殖用かご３５に入れ、養殖槽３に固定して海水を流水しているが、本発明においては、この方法に限定されず、養殖槽３において海水を流水して雄性配偶体１５や雌性配偶体１６、これらから生長した幼胞子体１７を出荷対象個体１８に生長させることができる方法を適宜選択することができる。なお、本第２実施形態における（ｂ）出荷対象個体育成工程において用いることができる養殖槽３やエアレーションは、第１実施形態における（ｉｉ）出荷対象個体育成工程と同様である。
【００４５】
また、本第２実施形態に係る陸上養殖褐藻類の生産方法もまた、例えばアワビやウニなどの養殖廃水などを用いる場合のように、（ｂ）出荷対象個体育成工程において用いる海水が所定の高水温の海水である場合、第１実施形態に係る陸上養殖褐藻類の生産方法と同様、図２に示すように、（ａ）配偶体育成工程と（ｂ）出荷対象個体育成工程との間に、（ｃ）幼胞子体育成工程を有してもよい。
【００４６】
すなわち、本第２実施形態に係る陸上養殖褐藻類の生産方法は、
（ａ）所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水中で褐藻類の成熟した胞子体１から放出された遊走子１４を雄性配偶体１５または雌性配偶体１６に生長するまで育成する配偶体育成工程、
（ｃ）所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水に雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を投入し、前記所定の低水温を維持するとともにインキュベーションおよび／またはエアレーションをして雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を所定の幼胞子体１７に生長するまで育成する幼胞子体育成工程、
（ｂ）養殖槽３において所定の高温の海水を流水するとともに所望によりエアレーションをして所定の幼胞子体１７を出荷対象個体１８に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程。
以上、（ａ）、（ｃ）および（ｂ）の工程を有してもよい。
【００４７】
本第２実施形態における（ｃ）幼胞子体育成工程において、インキュベーションおよびエアレーションとは、第１実施形態の（ｉｉｉ）幼胞子体付着種苗糸作製工程の場合と同義である。
【００４８】
本第２実施形態における（ｃ）幼胞子体育成工程において、所定の幼胞子体１７、すなわち（ｂ）出荷対象個体育成工程に耐えることができる幼胞子体１７とは、（ｂ）出荷対象個体育成工程において所定の高水温海水を用いた場合に、出荷対象個体１８まで生長することができる幼胞子体１７をいい、葉長が約０．５〜８ｃｍの幼胞子体１７が好ましく、葉長が約１〜７ｃｍの幼胞子体１７がより好ましく、葉長が約２〜６ｃｍの幼胞子体１７がさらに好ましい。
【００４９】
なお、本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法には、その特徴を損なわない限りにおいて、他の工程を有してもよく、例えば、さらなるインキュベート工程や殺菌工程、洗浄工程などを有してもよい。
【００５０】
以下、本発明に係る陸上養殖褐藻類の生産方法について、実施例に基づいて説明する。なお、本発明の技術的範囲は、これらの実施例によって示される特徴に限定されない。
【実施例】
【００５１】
＜実施例１＞ホソメコンブの生産
（１）遊走子・配偶体付着種苗糸の作製
水温が約４〜１１℃の滅菌した濾過海水中に、ホソメコンブの成熟した胞子体１から遊走子１４を放出させ、遊走子１４や遊走子１４から生長した雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を、クレモナ糸を用いた種苗糸基質２に高い密度で付着させることにより、遊走子・配偶体付着種苗糸２１を５本作製した。その工程を図１の上段に、作製した遊走子・配偶体付着種苗糸２１を図３にそれぞれ示す。
【００５２】
（２）種苗糸基質に付着した遊走子や雌雄配偶体の育成
種苗糸基質２に付着したホソメコンブの遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を育成するため、長さ５．０ｍ×幅１．０ｍ×深さ０．５ｍ（水深約０．３〜０．４ｍ）の養殖槽３を用意し、その長辺の縁から固定金具３３をつり下げて、作製した５本の遊走子・配偶体付着種苗糸２１の各両端をその固定金具３３に結びつけた後、水温が約４〜１１℃に維持された海水を、養殖槽３に形成された取水口３１から流入させて排水口３２から排出することにより、養殖槽３の長手方向に海水をかけ流した。その工程を図１の中段に、その様子を図４にそれぞれ示す。
【００５３】
さらに、養殖槽３の長手方向側面に海水の噴出口３６を配設して海水を噴出させるとともに、空気を送り込むための通気管３４を養殖槽３の底に設置してエアレーションをすることで、種苗糸基質２に付着したホソメコンブの遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６に新鮮な空気あるいは溶存酸素が豊富な海水を送り込んで生長を促進させた。その様子を図５に示す。
【００５４】
図５に示すように、種苗糸基質２に付着したホソメコンブの遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６は、成熟した胞子体１すなわち出荷対象個体（収穫対象個体）１８へと生長していることが確認できる。また、遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６の生長に伴い、エアレーションを施すことにより、新鮮な空気あるいは溶存酸素が豊富な海水を送って生長を促進させるという効果のみならず、海水流水になびかせることにより生長を促進させるという効果が得られることが確認できた。さらに、遮光可能な黒色網で養殖槽３を覆うことにより養殖槽３内の光量を調節することが効果的であることが確認でき、その結果、ホソメコンブの出荷対象個体（収穫対象個体）１８を生産することができた。
【００５５】
ホソメコンブの出荷対象個体（収穫対象個体）１８については、図１の下段に示すように、葉状部基部を含む生長部位が残るように刈り取ることにより収穫し、収穫後の種苗糸（出荷対象個体収穫種苗糸）に付着した個体を、同様の方法により養殖槽３で再育成した。その結果、再育成された出荷対象個体収穫種苗糸に付着した収穫後の個体は、出荷対象個体（収穫対象個体）１８に生長した。
【００５６】
（３）種苗糸に付着していない状態の配偶体の育成
水温が約４〜１１℃の滅菌した濾過海水中に、ホソメコンブの成熟した胞子体１から遊走子１４を放出させ、遊走子１４を培養してホソメコンブの雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を育成した。その工程を図１の上段左に示す。
【００５７】
育成した雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を細かい網目状の養殖用かご３５に入れ、長さ５．０ｍ×幅１．０ｍ×深さ０．５ｍ（水深約０．３〜０．４ｍ）の養殖槽３に養殖用かご３５を入れて固定した後、水温が約４〜１１℃に維持された海水を、養殖槽３に形成された取水口３１から流入させて排水口３２から排出することにより、養殖槽３の長手方向に海水をかけ流した。その工程を図１の中段に示す。さらに、遮光可能な黒色網で養殖槽３を覆うことにより養殖槽３内の光量を調節するとともに、空気を送り込むための通気管３４を養殖槽３の底に設置してエアレーションをすることにより、ホソメコンブの雄性配偶体１５や雌性配偶体１６に新鮮な空気あるいは溶存酸素が豊富な海水を送り込み、生長を促進させた。その結果、本実施例（２）と比較してやや小ぶりではあったが、ホソメコンブの出荷対象個体（収穫対象個体）１８を生産することができた。
【００５８】
＜実施例２＞アワビの養殖廃水を用いたホソメコンブの生産
流水海水の安定供給を実現するため、養殖槽３におけるホソメコンブの育成にアワビの養殖廃水を用いることを検討した。その工程を図２に示す。実施例１と同様の方法によりホソメコンブの生産を試みた結果、アワビの養殖廃水は通常の海水温と比較して約１１〜１６℃と高温であるため、ホソメコンブの遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を養殖槽３における育成に耐えることができるサイズの幼胞子体１７にまで生長させる必要があることが確認できた。
【００５９】
そこで、このような工程を含んだ生産方法の確立をすべく、図６に示すような陸上養殖施設４を構築し、実用化を試みた。陸上養殖施設４は、主に、遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程、幼胞子体付着種苗糸作製工程、遊走子・配偶体付着種苗糸保存工程、配偶体育成工程および幼胞子体育成工程を行うための初期工程処理施設４１と、養殖槽３と、アワビ養殖場から養殖廃水を揚水して流水海水を安定供給するための揚水ポンプ４２と、収穫したホソメコンブの梱包や発送などを行う荷捌き場４３と、海水流水を養殖槽３や荷捌き場４３へ配水するための配水管４４とを備えている。
【００６０】
（１）遊走子・配偶体付着種苗糸の作製およびその保存
実施例１（１）と同様の方法でホソメコンブの遊走子・配偶体付着種苗糸２１を大量に作製し（図１の１段目）、約４〜１１℃の水温を維持しながら保存した。滅菌濾過海水を用いる場合は、約４〜１１℃の水温を維持しつつ赤色光を照射して保存し、滅菌人工海水を用いる場合は鉄分を含まない滅菌人工海水を選択して、約４〜１１℃の水温を維持するか、あるいは約４〜１１℃の水温を維持しつつ赤色光を照射して保存した。
【００６１】
滅菌人工海水については、遊走子・配偶体付着種苗糸２１を少量保存する場合には人工海水ＡＳＰ１２（ＰＩＩのＦｅフリーのもの）を滅菌したもの用い、遊走子・配偶体付着種苗糸２１を大量に保存する場合には滅菌した濾過海水１Ｌあたりに人工海水ＥＳ ｂｙ Ｐｒｏｖａｓｏｌｉ（Ｆｅフリーのもの）の滅菌したものを２０ｍＬ混合して得られるＰＥＳ培養液を用いた。以下、ＡＳＰ１２（Ｆｅフリー）とＥＳ ｂｙ Ｐｒｏｖａｓｏｌｉ（Ｆｅフリー）の組成を示す。
【００６２】
［１−１］滅菌人工海水ＡＳＰ１２（Ｆｅフリー）
ｐＨ＝７．８〜８．０
蒸留水 １０００ｍＬ
ＮａＣｌ ２８ｇ
ＭｇＳＯ４−７Ｈ２Ｏ ７ｇ
ＭｇＣｌ２−６Ｈ２Ｏ ４ｇ
ＫＣｌ ０．７ｇ
Ｔｒｉｓ １ｇ
ＮａＮＯ３ ０．１ｇ
グリセロールリン酸ナトリウム １０ｍｇ
ビタミンミックス １ｍＬ
ビタミン１２ ０．２μｇ
ビオチン １μｇ
チアミン １００μｇ
ＰＩＩ １０ｍＬ
Ｓ２ １０ｍＬ
ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ） １００ｍｇ
Ｎａ２ＳｉＯ３−９Ｈ２Ｏ １５０ｍｇ
Ｋ３ＰＯ４ １０ｍｇ
Ｃａ（塩化物として） ０．４ｇ
【００６３】
（上記ＰＩＩの組成；蒸留水１００ｍＬあたり）
Ｎａ２−ＥＤＴＡ １００ｍｇ
Ｂ（Ｈ３ＢＯ３） ２０ｍｇ
Ｍｎ（塩化物として） ４ｍｇ
Ｚｎ（塩化物として） ５００μｇ
Ｃｏ（塩化物として） １００μｇ
【００６４】
（上記Ｓ２の組成）
蒸留水 １００ｍＬ
Ｍｏ（Ｎａ２Ｍｏ４） ５ｍｇ
Ｂｒ（カリウム化合物として） １００ｍｇ
Ｓｒ（塩化物として） ２０ｍｇ
Ｒｂ（塩化物として） ２ｍｇ
Ｌｉ（塩化物として） ２ｍｇ
Ｉ（カリウム化合物として） １００μｇ
Ｖａ（塩化物として） １０μｇ
【００６５】
［１−２］ＥＳ ｂｙ Ｐｒｏｖａｓｏｌｉ（Ｆｅフリー）
ｐＨ＝７．８〜８．０
蒸留水 １０００ｍＬ
ＮａＮＯ３ ３．５ｇ
グリセロールリン酸ナトリウム ５００ｍｇ
ＰＩＩ ２５０ｍＬ
ビタミン１２ １００μｇ
チアミン ５ｍｇ
ビオチン ５０μｇ
Ｔｒｉｓ ５ｇ
※上記ビタミン１２、チアミン、ビオチンの代わりにヨウ化カリウムを１ｍｇ添加してもよい。
【００６６】
（２）遊走子・配偶体付着種苗糸に付着した遊走子や雌雄配偶体の幼胞子体への育成
作製または保存した遊走子・配偶体付着種苗糸２１に付着しているホソメコンブの遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６は、そのままではアワビの養殖廃水を用いて育成することができないため、アワビの養殖廃水を用いた育成に耐えることができるサイズの幼胞子体１７に生長させ、幼胞子体付着種苗糸２２を作製することとした。先ず、図７に示すように、初期工程処理施設４１内に設置したインキュベーターを用いて葉長が約１ｍｍ〜３ｍｍの幼胞子体１７になるまで遊走子１４や雄性配偶体１５、雌性配偶体１６を育成し、次いで、図８に示すように、初期工程処理施設４１内に設置した屋内水槽を用いて葉長が約１．５〜７ｃｍの幼胞子体１７になるまで育成した。その工程を図２の１段目から３段目にかけて示す。なお、初期工程処理施設４１内に設置したインキュベーターおよび屋内水槽の育成条件は次のとおりである。
【００６７】
［２−１］初期工程処理施設４１内に設置したインキュベーターの育成条件
水温：４〜１１℃
照度：２０００Ｌｕｘ
海水：本実施例（１）のＰＥＳ培養液
ｐＨ：７．０〜８．５
静置にて育成
【００６８】
［２−２］初期工程処理施設４１内に設置した屋内水槽の育成条件
水温：４〜１１℃
照度：２０００Ｌｕｘ
海水：滅菌濾過したアワビ養殖廃水（海水）と、本実施例（１）のＰＥＳ培養液１／４〜１／２濃度のものとを混合して得られる培養液
ｐＨ：７．０〜８．５
エアレーションをしながら育成
【００６９】
（３）種苗糸基質に付着していない状態の配偶体の幼胞子体への育成
実施例１（３）および本実施例（１）と同様の方法により、種苗糸基質２に付着していない状態のホソメコンブの雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を育成または保存し（図２の１段目から２段目の左）、育成または保存した雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を細かい網目状の養殖用かご３５に入れ、本実施例（２）と同様、初期工程処理施設４１内に設置したインキュベーターを用いて葉長が約２ｍｍ〜６ｍｍの幼胞子体１７になるまで雄性配偶体１５や雌性配偶体１６を育成し、次いで、図８に示すように、初期工程処理施設４１内に設置した屋内水槽を用いて葉長が約２〜６ｃｍの幼胞子体１７になるまで育成した。
【００７０】
（４）幼胞子体の育成
本実施例（２）および（３）で育成した幼胞子体１７を育成するため、先ず、幼胞子体付着種苗糸２２については、長さ５．０ｍ×幅１．０ｍ×深さ０．５ｍ（水深約０．３〜０．４ｍ）の養殖槽３の長辺の縁から固定金具３３をつり下げて、幼胞子体付着種苗糸２２の各両端をその固定金具３３に結びつけた後、水温が約１１〜１６℃に維持されたアワビ養殖廃水（海水）を、養殖槽３に形成された取水口３１から流入させて排水口３２から排出することにより、養殖槽３の長手方向にアワビ養殖廃水をかけ流した。その工程を図２の３段目に、その様子を図９にそれぞれ示す。
【００７１】
次に、種苗糸基質２に付着していない状態の幼胞子体１７については、細かい網目状の養殖用かご３５に入った幼胞子体１７を、養殖用かご３５に入れたまま長さ５．０ｍ×幅１．０ｍ×深さ０．５ｍ（水深約０．３〜０．４ｍ）の養殖槽３に入れ、養殖用かご３５を養殖槽３に固定した後、水温が約１１〜１６℃に維持されたアワビ養殖廃水を、養殖槽３に形成された取水口３１から流入させて排水口３２から排出することにより、養殖槽３の長手方向にアワビ養殖廃水をかけ流した。その工程を図２の３段目に示す。
【００７２】
さらに、遮光可能な黒色網で養殖槽３を覆うことにより養殖槽３内の光量を調節するとともに、空気を送り込むための通気管３４を養殖槽３の底に設置してエアレーションをすることにより、ホソメコンブの幼胞子体１７に新鮮な空気あるいは溶存酸素が豊富な海水を送り込んで生長を促進させた。以上の結果、得られた各種データを図１０に、種苗糸基質２に付着した幼胞子体１７から生長した出荷対象個体（収穫対象個体）１８の様子を図２の４段目および図１１にそれぞれ示す。
【００７３】
図１０中、「ロープ（Ａ）」および「ロープ（Ｂ）」とは、養殖槽３につり下げられた幼胞子体付着種苗糸２２の中から任意に選択した２本に付着した幼胞子体１７を示し、「バラ」とは、種苗糸基質２に付着していない状態の幼胞子体１７を示し、「バラ」における長さ（育成した長さ）および幅（育成した幅）の数値は、種苗糸基質２に付着していない状態の幼胞子体１７についての平均値を示す。図１０および図１１に示すように、幼胞子体付着種苗糸２２における幼胞子体１７と種苗糸基質２に付着していない状態の幼胞子体１７とは、いずれも出荷対象個体（収穫対象個体）１８へと順調に生長した。
【００７４】
（１）収穫後の種苗糸（出荷対象個体収穫種苗糸）の再育成
幼胞子体付着種苗糸２２における幼胞子体１７が生長したホソメコンブの出荷対象個体（収穫対象個体）１８については、図２の４段目に示すように、葉状部基部を含む生長部位が残るように刈り取ることにより収穫し、収穫後の種苗糸（出荷対象個体収穫種苗糸）に付着した個体を、本実施例（４）と同様の方法により、養殖槽３で再育成した。その結果、再育成された出荷対象個体収穫種苗糸に付着した収穫後の個体は、出荷対象個体（収穫対象個体）１８に生長した。
【００７５】
また、収穫した陸上養殖ホソメコンブは、従来の海中養殖が有するコリコリした食感ではなく、シャクッと崩れる感じの食感、シャキシャキ感を有しており、お刺身用やしゃぶしゃぶ用として出荷することができた。さらに、収穫した陸上養殖ホソメコンブの乾燥物は、従来にない口溶けの良い食感を有しており、ふりかけとしての検討がなされた。
【符号の説明】
【００７６】
１ 成熟した胞子体
２ 種苗糸基質
３ 養殖槽
４ 陸上養殖施設
１１ 卵
１２ 精子
１３ 受精卵
１４ 遊走子
１５ 雄性配偶体
１６ 雌性配偶体
１７ 幼胞子体
１８ 出荷対象個体（収穫対象個体、成熟した胞子体）
２１ 遊走子・配偶体付着種苗糸
２２ 幼胞子体付着種苗糸
３１ 取水口
３２ 排水口
３３ 固定金具
３４ 通気管
３５ 養殖用かご
３６ 噴出口
４１ 初期工程処理施設
４２ 揚水ポンプ
４３ 荷捌き場
４４ 配水管
【特許請求の範囲】
【請求項１】
所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水中で褐藻類の成熟した胞子体から放出された遊走子および／または前記遊走子から生長した配偶体を種苗糸基質に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸を作製する遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程と、
前記遊走子・配偶体付着種苗糸を流水に対して略垂直となるように養殖槽に固定して海水を流水するととともに所望によりエアレーションをして前記遊走子・配偶体付着種苗糸における遊走子、配偶体ならびに前記遊走子および／または前記配偶体から生長した幼胞子体の少なくともいずれかを出荷対象個体に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程と
を有する陸上養殖褐藻類の生産方法。
【請求項２】
前記出荷対象個体育成工程における海水が所定の高水温の海水である場合に、所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水に遊走子・配偶体付着種苗糸を投入し、前記所定の低水温を維持するとともにインキュベーションおよび／またはエアレーションをして前記遊走子・配偶体付着種苗糸における遊走子および／または配偶体を前記出荷対象個体育成工程に耐えることができる幼胞子体に生長するまで育成して幼胞子体付着種苗糸を作製する幼胞子体付着種苗糸作製工程を有する、請求項１に記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【請求項３】
前記遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程において作製した遊走子・配偶体付着種苗糸を、所定の低水温を維持するとともに赤色光を照光して、ならびに／もしくは所定の低水温を維持するとともに鉄分を含まない滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水を用いて保存する遊走子・配偶体付着種苗糸保存工程を有する、請求項１または請求項２に記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【請求項４】
前記出荷対象個体育成工程において育成された出荷対象個体を、葉状部基部を含む生長部位が残るように刈り取ることにより収穫する出荷対象個体収穫工程を有する、請求項１から請求項３のいずれかに記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【請求項５】
所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水中で褐藻類の成熟した胞子体から放出された遊走子を配偶体に生長するまで育成する配偶体育成工程と、
養殖槽において海水を流水するとともに所望によりエアレーションをして配偶体および／または前記配偶体から生長した幼胞子体を出荷対象個体に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程と
を有する陸上養殖褐藻類の生産方法。
【請求項６】
前記出荷対象個体育成工程における海水が所定の高水温の海水である場合に、所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水に配偶体を投入し、前記所定の低水温を維持するとともにインキュベーションおよび／またはエアレーションをして前記配偶体を前記出荷対象個体育成工程に耐えることができる幼胞子体に生長するまで育成する幼胞子体育成工程を有する、請求項５に記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【請求項７】
褐藻類がコンブ科植物である、請求項１から請求項６のいずれかに記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【請求項１】
所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水中で褐藻類の成熟した胞子体から放出された遊走子および／または前記遊走子から生長した配偶体を種苗糸基質に付着させて遊走子・配偶体付着種苗糸を作製する遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程と、
前記遊走子・配偶体付着種苗糸を流水に対して略垂直となるように養殖槽に固定して海水を流水するととともに所望によりエアレーションをして前記遊走子・配偶体付着種苗糸における遊走子、配偶体ならびに前記遊走子および／または前記配偶体から生長した幼胞子体の少なくともいずれかを出荷対象個体に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程と
を有する陸上養殖褐藻類の生産方法。
【請求項２】
前記出荷対象個体育成工程における海水が所定の高水温の海水である場合に、所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水に遊走子・配偶体付着種苗糸を投入し、前記所定の低水温を維持するとともにインキュベーションおよび／またはエアレーションをして前記遊走子・配偶体付着種苗糸における遊走子および／または配偶体を前記出荷対象個体育成工程に耐えることができる幼胞子体に生長するまで育成して幼胞子体付着種苗糸を作製する幼胞子体付着種苗糸作製工程を有する、請求項１に記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【請求項３】
前記遊走子・配偶体付着種苗糸作製工程において作製した遊走子・配偶体付着種苗糸を、所定の低水温を維持するとともに赤色光を照光して、ならびに／もしくは所定の低水温を維持するとともに鉄分を含まない滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水を用いて保存する遊走子・配偶体付着種苗糸保存工程を有する、請求項１または請求項２に記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【請求項４】
前記出荷対象個体育成工程において育成された出荷対象個体を、葉状部基部を含む生長部位が残るように刈り取ることにより収穫する出荷対象個体収穫工程を有する、請求項１から請求項３のいずれかに記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【請求項５】
所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水中で褐藻類の成熟した胞子体から放出された遊走子を配偶体に生長するまで育成する配偶体育成工程と、
養殖槽において海水を流水するとともに所望によりエアレーションをして配偶体および／または前記配偶体から生長した幼胞子体を出荷対象個体に生長するまで育成する出荷対象個体育成工程と
を有する陸上養殖褐藻類の生産方法。
【請求項６】
前記出荷対象個体育成工程における海水が所定の高水温の海水である場合に、所定の低水温の滅菌人工海水および／または滅菌濾過海水を含む海水に配偶体を投入し、前記所定の低水温を維持するとともにインキュベーションおよび／またはエアレーションをして前記配偶体を前記出荷対象個体育成工程に耐えることができる幼胞子体に生長するまで育成する幼胞子体育成工程を有する、請求項５に記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【請求項７】
褐藻類がコンブ科植物である、請求項１から請求項６のいずれかに記載の陸上養殖褐藻類の生産方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【公開番号】特開２０１２−８０７９７（Ｐ２０１２−８０７９７Ａ）
【公開日】平成２４年４月２６日（２０１２．４．２６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−２２７９７１（Ｐ２０１０−２２７９７１）
【出願日】平成２２年１０月７日（２０１０．１０．７）
【出願人】（５０４１７３４７１）国立大学法人北海道大学 (971)
【出願人】（５１０１４１５４５）特定非営利活動法人北海道こんぶ研究会 (2)
【出願人】（５１０２６９３００）株式会社三和建設 (1)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年４月２６日（２０１２．４．２６）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年１０月７日（２０１０．１０．７）
【出願人】（５０４１７３４７１）国立大学法人北海道大学 (971)
【出願人】（５１０１４１５４５）特定非営利活動法人北海道こんぶ研究会 (2)
【出願人】（５１０２６９３００）株式会社三和建設 (1)
【Ｆターム（参考）】
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