ｃ−ＭＥＴに結合する単量体ドメイン又はその一部を含むポリペプチドを提供する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｃ−Ｍｅｔに結合する単量体ドメインを含むポリペプチドであって、
前記単量体ドメインは、３０〜５０個のアミノ酸を含む非天然型の単量体ドメインでありおよび少なくとも１個のジスルフィド結合を含む、前記ポリペプチド。
【請求項２】
前記単量体ドメインがＬＤＬ受容体クラスＡ単量体ドメインである、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
前記単量体ドメインが以下の配列：
ＥＦＸＣＸＮＧＸＣＩＰＸＸＷＸＣＤＧＸＤＤＣＧＤＸＳＤＥ
（式中、Ｘは任意のアミノ酸である。）
を含むＬＤＬ受容体クラスＡ単量体ドメインである、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４】
前記ポリペプチドがｃ−ＭＥＴと結合する少なくとも１個の、及び６個以下の単量体ドメインを含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項５】
前記ポリペプチドがｃ−ＭＥＴと結合する少なくとも２個の単量体ドメインを含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項６】
前記ポリペプチドがさらに第２の単量体ドメインを含み、第２の単量体が血中因子への結合特異性を有し、それによって動物へのポリペプチド注入時に、血中因子に結合する単量体ドメインを欠くポリペプチドの血中半減期と比較して、ポリペプチドの血中半減期が延長される、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項７】
前記血中因子が血清アルブミン、免疫グロブリン又は赤血球である、請求項６に記載のポリペプチド。
【請求項８】
第２の単量体ドメインが免疫グロブリン（ＩｇＧ）に結合し、第２の単量体ドメインが以下：
ＣＸＳＳＧＲＣＩＰＸＸＷＶＣＤＧＸＸＤＣＲＤＸＳＤＥ 及び
ＣＸＳＳＧＲＣＩＰＸＸＷＬＣＤＧＸＸＤＣＲＤＸＳＤＥ
（式中、Ｘは任意のアミノ酸である。）
から選択される配列を含むＬＤＬ受容体クラスＡ単量体ドメインである、請求項６に記載のポリペプチド。
【請求項９】
第２の単量体ドメインが免疫グロブリン（ＩｇＧ）に結合し、第２の単量体ドメインが以下の配列：
［ＥＱ］ＦＸＣＲＸ［ＳＴ］ＸＲＣ［ＩＶ］ＸＸＸＷ［ＩＬＶ］ＣＤＧＸＸＤＣＸＤ［ＤＮ］ＳＤＥ
（式中、Ｘは任意のアミノ酸であり、かつ括弧内のアミノ酸が単一位置での代替アミノ酸である。）
を含むＬＤＬ受容体クラスＡの単量体ドメインである、請求項６に記載のポリペプチド。
【請求項１０】
第２の単量体ドメインがＣＨＰＴＧＱＦＲＣＲＳＳＧＲＣＶＳＰＴＷＶＣＤＧＤＮＤＣＧＤＮＳＤＥＥＮＣを含む、請求項６に記載のポリペプチド。
【請求項１１】
各単量体ドメインが３５〜４５個のアミノ酸である、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１２】
各単量体ドメインが３個のジスルフィド結合を含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１３】
前記単量体ドメインが非天然型のＬＤＬ受容体クラスＡドメインである、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１４】
前記単量体が、
配列中のアミノ酸の少なくとも１０％がシステインである、および／または
アミノ酸の少なくとも２５％が非天然型のアミノ酸である、
アミノ酸配列を含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１５】
ｃ−ＭＥＴに結合するポリペプチドを特定する方法であって、
ｃ−ＭＥＴへの親和性についてポリペプチドライブラリーをスクリーニングすること及び
ｃ−ＭＥＴに結合する少なくとも１個の単量体ドメインを含むポリペプチドを選択すること、
を含み、前記単量体ドメインは、
３０〜１００個のアミノ酸を有し、
非天然型の単量体ドメインであり、
少なくとも１個のジスルフィド結合を含む、
前記方法。
【請求項１６】
前記選択段階が、ＨＧＦが介在する細胞の増殖および／または移動を低減するポリペプチドの選択を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
動物において腫瘍増殖を阻害するポリペプチドの選択を更に含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記単量体が、
配列中のアミノ酸の少なくとも１０％がシステインである、および／または
アミノ酸の少なくとも２５％が非天然型のアミノ酸である、
アミノ酸配列を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１９】
選択されたポリペプチド中の単量体ドメインを第２の単量体ドメインに結合させて、各多量体が少なくとも２個の単量体ドメインを含む多量体のライブラリーを形成すること、
ｃ−ＭＥＴへの結合能について多量体ライブラリーをスクリーニングすること、及び
ｃ−ＭＥＴと結合する多量体を選択すること、
を更に含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項２０】
選択されたポリペプチド中の単量体ドメインを第２の単量体ドメインに結合させて、各多量体が少なくとも２個の単量体ドメインを含む多量体のライブラリーを形成すること、
ｃ−ＭＥＴ以外の標的分子への結合能について多量体ライブラリーをスクリーニングすること、及び
標的分子に結合する多量体を選択すること、
を更に含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項２１】
少なくとも１個の単量体ドメインを変異させ、それによって変異単量体ドメインを含むライブラリーを提供する段階を更に含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項２２】
単量体ドメインライブラリーを、ファージディスプレイ、リボソームディスプレイ又は細胞表面ディスプレイとして発現させる、請求項１５に記載の方法。
【請求項２３】
前記ポリペプチドが少なくとも２個の単量体ドメインを含み、前記単量体ドメインがリンカーによって連結されている、請求項１５に記載の方法。
【請求項２４】
各単量体ドメインが３５〜４５個のアミノ酸である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２５】
各単量体ドメインが３個のジスルフィド結合を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項２６】
前記単量体ドメインのうちの少なくとも１個がＬＤＬ受容体クラスＡドメインである、請求項１５に記載の方法。
【請求項２７】
前記単量体ドメインが、
配列中のアミノ酸の少なくとも１０％がシステインであり、および／または
アミノ酸の少なくとも２５％が非天然型のアミノ酸である、
アミノ酸配列を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項２８】
請求項１に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。
【請求項２９】
免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）に結合する単量体ドメインを含むポリペプチドであって、前記単量体ドメインは以下
ＣＸＳＳＧＲＣＩＰＸＸＷＶＣＤＧＸＸＤＣＲＤＸＳＤＥ、
ＣＸＳＳＧＲＣＩＰＸＸＷＬＣＤＧＸＸＤＣＲＤＸＳＤＥ、及び
［ＥＱ］ＦＸＣＲＸ［ＳＴ］ＸＲＣ［ＩＶ］ＸＸＸＷ［ＩＬＶ］ＣＤＧＸＸＤＣＸＤ［ＤＮ］ＳＤＥ、
（式中、Ｘは任意のアミノ酸であり、および括弧内のアミノ酸は単一位置での代替アミノ酸である。）
から選択される配列を含むＬＤＬ受容体クラスＡ単量体ドメインであり、動物への前記ポリペプチドの注入時に、ＩｇＧに結合する単量体ドメインを欠くポリペプチドの血中半減期と比較して、増加した血中半減期を有する、前記ポリペプチド。
【請求項３０】
前記単量体ドメインがＣＨＰＴＧＱＦＲＣＲＳＳＧＲＣＶＳＰＴＷＶＣＤＧＤＮＤＣＧＤＮＳＤＥＥＮＣＳＡＰＡＳＥＰＰＧＳＬを含む、請求項２９に記載のポリペプチド。
【請求項３１】
第２の単量体ドメインが、
３０〜１００個のアミノ酸を有し、
非天然型の単量体ドメインであり、
少なくとも１個のジスルフィド結合を含む、
ＩｇＧ以外の分子に対する結合特異性を有する第２単量体ドメインを更に含む、請求項２９に記載のポリペプチド。
【請求項３２】
第２の単量体ドメインが非天然型のＬＤＬ受容体クラスＡドメインである、請求項３１に記載のポリペプチド。
【請求項３３】
請求項２９に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図６Ｃ】

【図６Ｄ】

【図６Ｅ】

【図６Ｆ】

【図６Ｇ】

【図６Ｈ】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【公表番号】特表２００８−５０３２１６（Ｐ２００８−５０３２１６Ａ）
【公表日】平成２０年２月７日（２００８．２．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５１６８００（Ｐ２００７−５１６８００）
【出願日】平成１７年６月１７日（２００５．６．１７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００５／０２１５５８
【国際公開番号】ＷＯ２００６／００９８８８
【国際公開日】平成１８年１月２６日（２００６．１．２６）
【出願人】（５０６４１７０９４）アムジエン・マウンテン・ビユー・インコーポレイテツド (1)
【Ｆターム（参考）】