本発明は、線状ｓｓＤＮＡの改善された鋳型非依存性分子内ライゲーション（環状化）用のライゲーション反応混合物、方法、及びキットを提供するものであり、この線状ｓｓＤＮＡは、変性ｇＤＮＡ断片又は熱変性ＲＮＡリガーゼなどを用いてＲＮＡを逆転写して生成した第１鎖ｃＤＮＡを含む。改善されたライゲーション反応混合物および方法を用いて得た環状ｓｓＤＮＡ分子を、逆ＰＣＲ、ローリングサークル複製、転写、又は超並列ＤＮＡシーケンシングによる増幅するための鋳型などとして使用することができる。本発明は、例えば、ｑＰＣＲによる遺伝子発現分析又はマイクロアレイを用いたｇＤＮＡのコピー数変化の分析、及びリサーチ、スクリーニング、医学診断、セラノスティクス、個人の医学的治療又はブリーディング、ヒトや動物の医薬、法医学、又は農業などの目的で特定の核酸配列の検出又は定量化に適用することができる。 （もっと読む）

本発明は、トランスポザーゼ及びトランスポゾン末端を用いて二本鎖標的ＤＮＡをインビトロで広範に断片化及び５’タグ化し、次いで、ＤＮＡポリメラーゼを用いて、ＰＣＲ増幅反応を行わずに５’及び３’がタグ化された一本鎖ＤＮＡ断片を作製する、方法、組成物、及びキットであって、５’末端の第１のタグが転移トランスポゾン末端の配列及び必要に応じて更なる任意配列を示し、３’末端の第２のタグが第１のタグが示す配列とは異なる配列を示す、方法、組成物、及びキットを提供する。方法は、環境試料中のＤＮＡのメタゲノム分析、ＤＮＡのコピー数変化（ＣＮＶ）分析、及び大規模並列ＤＮＡシークエンシング（いわゆる「次世代シークエンシング）等の比較ゲノムシークエンシング（ＣＧＳ）のプロセスを初めとする種々のプロセスで使用するための５’及び３’タグ化ＤＮＡ断片の作製に有用である。 （もっと読む）