オリゴ―グルロネート及びガラクツロネート組成物
本発明は、高分子薬物と、例えば、５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有するオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートとを含む医薬組成物を提供する。上記組成物は、ヒト又は非ヒト脊椎動物対象における粘膜表面へ当該組成物を投与することを含む治療方法で使用され得る。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、オリゴ―グルロネート及びガラクツロネート組成物、ならびに、特に嚢胞性繊維症（ＣＦ）及び副鼻腔炎の治療における、例えば、上昇した粘膜粘性に対処するため、例えば、とりわけ気道、特に鼻腔及び肺からの粘液クリアランスを増進させるための、オリゴグルロネート類又はオリゴガラクツロネート類によるヒト又はヒト以外の動物、特に哺乳類の治療方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
嚢胞性繊維症は、ヨーロッパ人における最も一般的な致死性の遺伝病である。この病気は、身体における分泌細胞及び他の細胞に存在するクロライドチャネルである嚢胞性線維性膜貫通調節因子（ＣＦＴＲ）をコードする遺伝子における変異により引き起こされる。この病気は、粘性で処置困難な粘液分泌の身体における存在を特徴とし、肺疾患、消化器異常、及び不妊症を引き起こし得る。肺における粘膜毛様体クリアランスの正常パターンでは過度に粘性のある粘液は除去されず、これは微生物によってコロニーを形成され、次に粘液の粘性を増加させ、慢性の肺の炎症及び閉塞を引き起こし得る。肺疾患は、したがって大多数のＣＦ患者にとって最大の健康問題であり、主な死亡原因である。
【０００３】
粘液は、肺を含む気道全体の正常な分泌物である。その主な役割は、肺を清潔にしかつ感染症に対して防御をする粘膜毛様体クリアランス機構の一部である。粘膜毛様体クリアランス機構は、３つの主な構成要素（粘液、繊毛、及び気道表面の液体）を有する。上皮表面はしたがって、粘液を分泌する杯細胞及び繊毛上皮細胞を含み、その上に重なる層となる気道表面の液体及びその上には粘液の層があり、これには繊毛の先端が突出している。粘液は、主に水（約９５重量％）と粘液の物理的性質の原因であるゲル形成分子であるムチンとからなる粘着性のゲル物質である。繊毛は、上皮細胞の表面からの小さな毛様の突出物であり、先端を粘液層に沈めし、水っぽく非粘性の気道表面の液体中で律動的に拍動する。粘液層は、細菌、ウィルス、吸入粒子、環境汚染物質、及び細胞残屑を捕らえる、粘性の覆いを肺表面で形成する。繊毛の拍動は、この粘液の覆い及びその中に捕らえられたものすべてを口の方に及び肺から外に推進させる役目を果たす。正常状態では、粘膜毛様体クリアランス機構は効果的に機能し、肺は清潔にそして感染することなく保たれる。この機構が許容範囲を超えた場合は、第２の防御線、すなわち咳、がある。従って、刺激又は炎症に応じて、例えば、吸入粒子又は感染により、分泌される粘液の量が増加すると、粘液は咳反射により肺から放出される。
【０００４】
ＣＦ患者では、肺における粘液は正常よりも濃くかつ粘性であり、このより濃い粘液は、それほど容易には繊毛によって運搬されない。結果として、粘膜毛様体クリアランス機構が損なわれ、肺は感染に対してより脆弱になる。さらに、ＣＦ患者の肺は、低レベルの炎症が続き、通常は炎症を引き起こす物質に対して増大した応答を伴う過剰な炎症状態にあるようである。これは、炎症に対する応答の一部が粘液の増産であるので問題である。増加した粘液は、濃厚すぎて粘膜毛様体クリアランス機構又は咳によって除去することができない場合は蓄積され、肺活量が減少し、粘膜にわたっての酸素交換が減少する。これはバクテリアのコロニー形成に理想的な環境を提供し、これはまた炎症を引き起こし、かつ免疫反応を活性化させるのでＣＦ患者には重大な問題である。これは、粘液分泌の増加だけでなく、マクロファージ及びリゾチームなどの免疫反応細胞及び免疫反応物質の存在の増加も引き起こす。細菌及びマクロファージが死ぬと、それらの細胞含有物は粘液中へ放出される。細胞含有物はＤＮＡなどの粘性の分子を含む。細菌のいくつか（例えば、バークホルデリア（Burkholdia）属の種、及び緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa））はまた、非常に粘性の多糖類を分泌する（後者の場合ではアルギン酸）。これらの分子は、アルギン酸の場合には見たところ粘液のムチンマトリックスとの相互作用によるが、ＤＮＡの場合には見たところムチンマトリックス内のゾル相の粘性を増加させることにより、粘液の粘性をさらに増加させる。
【発明の概要】
【０００５】
繊毛により運搬され得る形態で粘液を維持することは、したがって、ＣＦの治療の重要な目的である。単にゲル様構造を分解する薬剤は、ＣＦ患者の過粘稠の粘液と同様に運搬され得ない液体を生じることになるであろう。したがって、治療剤はいずれも、糖タンパク質ムチンにより形成されるゲルマトリックスを分解しないことが重要である。
【０００６】
我々は、５〜３０、好ましくは５〜１８の範囲の数平均重合度（ＤＰn）を有するオリゴグルロネート類(oligoguluronates)又はオリゴガラクツロネート類(oligogalacturonates)（好ましくは、オリゴグルロネート類）を用いてこれを達成することができることを見出した。
【０００７】
身体のどこか、例えば、耳、頸部、及びとりわけ気道において、特に鼻腔、とりわけ副鼻腔において、過度に粘性の粘液は問題を呈し得る。上記オリゴグルロネート類及びオリゴガラクツロネート類はまた、これらの問題の解決のために用いられ得る。
【０００８】
子宮頸部の腺により産生される頸管粘液は、月経周期にわたって異なる割合で異なる種類の分泌物を含む不均質の物質である。この分泌は、排卵が起こり受胎が可能な「妊娠可能な時期（fertile window）」中以外は、精子が頸部を通って移動するのに常に障壁となるような性質を有する。これは、病原への不必要な接触から子宮、卵管、及び卵巣を保護するように働く。
【０００９】
妊娠可能な時期中に精子の移動を支援するために、頸管粘液は、適切な生化学的及び生物物理学的特性を有さなければならない。ｐＨ及びオスモル濃度などの生化学的性質は、精子の生存にとって適切な条件の提供に重要である（マリオット（Marriott）ら、「粘液生理学及び病状（Mucus physiology and pathology）」、バイオアドヒシブドラッグデリバリーシステムズ（Bioadhesive Drug Delivery Systems）、ＣＲＣ出版、１９９０年を参照のこと）一方で、流動性及び高分子ネットワーク形態などの生物物理学的性質は、粘液内の精子の運動性に作用する（ルトルラント（Rutllant）ら、リプロダクション・イン・ドメスティックアニマルズ（Reprod. Dom. Anim.）４０：７９〜８６（２００５年）を参照のこと）。
【００１０】
臨床的には、妊娠可能な時期は、排卵前の黄体形成ホルモンの急増及び排卵後の基礎体温の上昇を検出することにより、ならびに頸管粘液の生物物理学的性質、特に、その牽糸性（曳糸性）（これは本質的には粘液にどれほどの伸縮性があるかの尺度であり、それ自体、粘液の流動性と関連する）を検査することにより同定され得る。頸管粘液のシダ状化（すなわち、排卵期の粘液が風乾されると生ずる結晶化パターン）はまた、粘液内での高分子ネットワークの形態と関連することが示されている（メナルゲス（Menarguez）ら、ヒューマンリプロダクション（Human Reproduction）１８：１７８２〜１７８９（２００３年）を参照のこと）。
【００１１】
粘液のシダ状化パターン（ひいては、高分子ネットワークの形態）は、人工授精での妊娠が達成する可能性における重要な要因であることが示され、一部の女性にとっては「問題のある粘液（problem mucus）」は妊娠を達成するための大きな障壁のようである（ボアイエ（Boyers）ら、ヒューマンリプロダクション（Human Reproduction）６：１１０８〜１１１４（１９９１年）を参照のこと）。
【００１２】
したがって、「問題のある粘液」を有する女性のためだけでなく、妊娠の可能性を最大限にしたいすべての女性のため、及び動物の妊娠の可能性を最大限にしたい動物のブリーダーのためにも、至適な精子運動性のための頸管粘液の生物物理的性質の修飾方法が必要とされている。
【００１３】
我々は、５〜３０、好ましくは５〜１８の範囲の数平均重合度（ＤＰn）を有するオリゴグルロネート類又はオリゴガラクツロネート類（好ましくは、オリゴグルロネート類）を用いてこれを達成することができることを見出した。
【００１４】
オリゴグルロネート類及びオリゴガラクツロネート類のこれらの使用は、例えば、国際公開第２００７／０３９７５４号及び国際公開第２００７／０３９７６０号に記載されており、これら文献の内容は参照により本書に援用される。
【００１５】
オリゴグルロネート類及びオリゴガラクツロネート類（以下、「Ｇブロック類」）は、下記に記載されるように天然の多糖類から調製されてもよく、異なる重合度（ＤＰ）の化合物の混合物を含んでもよい。我々は今回、Ｇブロック混合物の高分子量の「尾」を除去することにより、粘液の構造を改変する能力の点で向上した特性を有する物質が得られることが見出した。
【００１６】
本明細書の請求項には、したがって、数平均重合度（ＤＰn）、グルロネート／ガラクツロネート画分（ＦG）、マンヌロネート(mannuronate)画分（ＦM）、及び分子量分布について特に好ましい値が記載されている。
【００１７】
我々は驚くべきことに、高分子薬物（すなわち、２０００Ｄａを超える（好ましくは４０００Ｄａを超える、例えば、５〜２０００ｋＤａ）分子量を有する薬剤）の粘膜表面からの取り込みを促進させるために、Ｇブロック類（とりわけ、オリゴグルロネート類）が、それらが共投与された場合に、有利に使用され得ることを見出した。この効果は、メイディン・ダービー・イヌ腎臓（ＭＤＣＫ）細胞モデルを使用して明確に証明された。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
したがって、一態様から見ると、本発明は、オリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートと高分子薬物とを含む医薬組成物を提供する。
【００１９】
さらなる態様から見ると、本発明は、ヒト又は非ヒト脊椎動物（例えば、哺乳類、鳥類、又は爬虫類、とりわけ哺乳類）対象の治療方法を提供し、この方法は当該対象に有効量の高分子薬物を含む医薬組成物を投与することを含み、当該対象の粘膜表面に当該薬剤を、有効量のオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートと共に、共投与することを含むことを特徴とする。
【００２０】
別の態様から見ると、本発明は、治療方法で用いる高分子薬物をさらに含む薬剤の製造のためのオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの使用を提供し、上記治療方法は、ヒト又は非ヒト脊椎動物対象における粘膜表面へ当該薬剤を投与することを含む。
【００２１】
粘膜表面によって、例えば、鼻、膣、肺、口腔粘膜（例えば、舌下）、又は肛門の内側が意味される。口への投与は、一般的に、スプレーの吸入、又は舌下への配置、又は口中での保持により行われることになる。胃又は腸における薬物の取り込みのための胃腸管への経口投与はさらなる選択肢であるが、そのように投与された場合には高分子薬物はしばしば破壊されやすいので、好ましさが劣る。
【００２２】
適切な高分子薬物の例としては、核酸（例えば、ＤＮＡ又はＲＮＡ）、タンパク質、ペプチド、ホルモン、抗体など、より具体的には、インスリン、抗ＴＮＦ（例えば、エタネルセプト、インフリキシマブ、アダリムマブ（adalinumab）など）、インターフェロン（例えば、インターフェロン・アルファ又はベータ）、第ＶＩＩ因子、第ＶＩＩａ因子、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、卵胞刺激ホルモン、エリスロポエチン、トラスツズマブ、リツキシマブ、顆粒球コロニー刺激因子（及びペグ（ＰＥＧ）化された均等物）、ソマトトロピン及びアポトランスフェリン（無トランスフェリン血症の治療で使用される）などの成長ホルモン、及びベータ・グルコセレブロシダーゼが挙げられる。これらのうちのほとんどは、粘膜表面からの生物学的吸収が非常に低いので、従来は注射により投与され、これは粘膜表面での投与に比べ患者にとっては心地よい投与経路ではない。本発明の方法では、かかる薬剤は、勿論それらの通常の適応症に使用することができる。適切な用量は、取り込まれた量が従来の注射量と同等であるということに基づいて、使用している動物モデルから容易に決定され得る。所望であれば、本発明の組成物は、皮下又は筋肉内投与されてもよいが、これは好ましさが劣り、静注は一般的に望ましくない。
【００２３】
本発明の組成物への組み込みに好適な適切な高分子薬物の例としては、商品名エンブレル及びレミケードとして販売される抗ＴＮＦ薬、商品名リツキサンとして販売される抗ＣＤ２０、商品名プロクリット、エプレックス、アラネスプ、エポジェン（Epogen）、ネオレコルモン（NeoRecormon）、及びエポジンとして販売されるエリスロポエチン、商品名ニューラスタ（Neulasta）として販売されるＧ−ＣＳＦ、商品名ハーセプチンとして販売される抗ＥＧＦＲ、商品名アボネックス、レビフ（Rebif）、ベタセロン、ニューポジェン（Neupogen）、及びペガシスとして販売されるインターフェロン、商品名コージネイトとして販売される第ＶＩＩＩ因子、商品名ノボセブンとして販売される第ＶＩＩ因子、商品名ベネフィックスとして販売される第ＩＸ因子、商品名ジェノトロピン及びニュートロピン（Nutropin）として販売される成長ホルモン、商品名アクティベース（Activase）として販売されるｔＰＡ、商品名フォリスチムとして販売されるＦＳＨ、ならびに商品名セレザイムとして販売されるグルコセレブロシダーゼが挙げられる。製造者のウェブサイトから適応症及び用量の詳細が得られる。
【００２４】
高分子薬物は勿論、遺伝子療法に用いる核酸であってもよい。
【００２５】
高分子薬物は、好ましくは、単に感染、炎症、粘膜の粘性、又は他の肺疾患を減少させるいずれかの効果以上の所望の生理的効果を有するものである。特に、高分子薬物は、好ましくは、核酸切断酵素、ゲルゾリン、デキストラン、ポリＡＳＰ、又はポリＧＬＵ以外のものである。
【００２６】
高分子薬物は、時に水溶液中で凝集体を形成する傾向があり、理論により拘束されることを望まないが、Ｇブロック類の共投与により達成される向上した取り込みの一部は、凝集体形成を減少させるＧブロック類の効果の結果であると考えられる。本発明は、したがって、この凝集する傾向のあるインスリンなどの高分子との使用にとりわけ適している。Ｇブロック類の共投与により達成される向上した取り込みのさらなる部分は、細胞表面上のグリコカリックス構造の通過を促進させるＧブロック類の能力にあると考えられる。これは、高分子薬物による適切な細胞表面受容体へのアクセスを促進させるＧブロック類によって起こる可能性がある。
【００２７】
使用されるＧブロックは、好ましくは、５〜１８（とりわけ、７〜１５）の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０（好ましくは、少なくとも０．８５、とりわけ少なくとも０．９２）のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下（好ましくは、０．１５以下、とりわけ０．０８以下）のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満（好ましくは、１７未満）の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートである。Ｇブロックは、好ましくは、使用する準備ができている場合に、水溶液中で０．１〜５０ｍｇ／ｍＬ、とりわけ０．５〜２５ｍｇ／ｍＬ、特に１〜１０ｍｇ／ｍＬで組成物中に存在する。別な書き方をすれば、Ｇブロック及び高分子薬物は、好ましくは、約０．５：１〜１０：１、特に約１：１の相対的な重量比で存在する。
【００２８】
別の態様から見ると、本発明は、ヒト又は非ヒト脊椎動物（例えば、哺乳類、鳥類、又は爬虫類、とりわけ哺乳類）対象における粘膜表面の粘膜の粘性を減少させるための、及び特に粘膜の過粘稠に対処するための（例えば、漿液性中耳炎、副鼻腔炎、又は嚢胞性繊維症を治療するための、授精又は性交に続く受胎の可能性を増進させるための、粘膜表面にわたるドラッグデリバリーを増進させるための）治療方法を提供し、この方法は、５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを有効量当該粘膜表面に投与することを含む。
【００２９】
オリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートが、気道（すなわち、鼻、鼻腔、及び肺）又は耳の中の粘膜表面に投与される場合、好ましくは、４０〜１４０ｍｇ／ｍＬの濃度（ナトリウム塩形態のオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの重量に基づいて計算される。以下「ナトリウム塩基準」と呼ぶ。）で水溶液中で処方されることになる。肺に投与される場合、ヒトのための１日量は、成人で１００〜２０００ｍｇ／日（ナトリウム塩基準）、好ましくは１２０〜１０００ｍｇ／日、とりわけ１５０〜５００ｍｇ／日となる。小児には、用量は、上記の用量範囲に関して成人の体重を７０ｋｇとして子どもの体重に比例してもよい。この１日量は、好ましくは、時間間隔を置いて２、３又は４回に分けて投与されることとなる。
【００３０】
オリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートが膣中の粘膜表面に投与されるか、又は経直腸的に投与される場合、水溶液以外の形態で提供されてもよい。したがって、例えば、錠剤、被覆錠剤（とりわけ、遅延放出性又は徐放性被覆錠剤）、カプセル剤、坐剤、ペッサリー剤、ゲル剤、乳剤、シロップ剤、分散剤、懸濁剤、乳剤、散剤、クリーム剤、ペースト剤などの形態であってもよい。この目的のために、従来の製剤担体及び賦形剤と共に処方されてもよく、剤形は従来の方法で調製されてもよい。
【００３１】
膣投与に関して、オリゴウロネート（すなわち、オリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネート）は、好ましくは、無菌水性組成物の形態、例えば、液剤、ゲル剤、乳剤、クリーム剤又はペースト剤、あるいは、錠剤、カプセル剤又は膣坐剤として投与される。しかしながら、ゲル剤形態（とりわけ、水性の潤滑性ゲル剤）が好ましい。殺精子剤を含まないかかる組成物は、所望であれば、精子機能を増進させるための（例えば、ｐＨ調節剤及び酸化防止剤）、又は授精を支援するための（例えば、筋弛緩薬、潤滑剤など）さらなる薬剤を含んでもよい。明確には、組成物はまた、膣投与用組成物で通常見られるような生理学的に許容されるさらなる薬物成分又は化粧用成分を含んでもよい（例えば、結合剤、希釈剤、溶解性カプセル殻、芳香剤、抗生物質、ビタミン剤、油剤、乳化剤、坐剤基剤など）。
【００３２】
オリゴウロネートは、好ましくは、成人のヒト女性には、投与単位当たり約０．１〜２．５ｇ、より好ましくは投与単位当たり０．５〜２ｇで存在することになる。他の種についての用量は、平均の身体の大きさを参照して同様に計算され得る（例えば、［（０．１〜２．５）／６０］ｇ／投与単位／ｋｇ体重など）。
【００３３】
組成物は、好ましくは、授精に先立って投与される（例えば、１〜６０時間前、好ましくは、２〜４８時間前、とりわけ、４〜３６、例えば、２０〜５２時間前）。これは、例えば、膣洗浄により、水分解性の錠剤又はカプセル剤の膣挿入により、又はゲル剤又はペースト剤の注入により達成されてもよい。投与の時期は、排卵又は排卵の接近を示す監視パラメータ（例えば、体温）により選択されてもよい。
【００３４】
所望であれば、組成物は、２回以上投与されてもよい（例えば、授精のかなり前と授精の直前（例えば、１時間以内））。
【００３５】
組成物にｐＨ調節剤が含まれている場合、これは、好ましくは、膣のｐＨがわずかに塩基性（例えば、ｐＨ７．１〜７．６、とりわけ、ｐＨ約７．４）になるようにするものである。通常の生理学的に許容される緩衝液がこれに関して使用されてもよい。
【００３６】
本発明の方法に従って治療される女性は、好ましくは、ヒトの女性であり、特に、問題のある粘液による不妊問題を抱えていると診断された女性である。しかしながら、上記方法は、妊娠の可能性を増加させるために、妊娠が可能な年齢の他のヒト女性により使用されてもよい。また、雌牛、馬、犬、猫、羊、山羊、豚などの動物のために獣医及び動物のブリーダー（例えば、農業従事者）により使用されてもよい。
【００３７】
膣投与用の本発明の組成物は、好ましくは、本発明の方法で用いるための指示書と共に、特に好ましくは、投与単位形態で、かつとりわけ好ましくは、アプリケータ（例えば、注入器）と共に包装される。前もって充填された注入器の使用がとりわけ好ましい。あるいは、アプリケータは、凹側に組成物を備えたペッサリー（cervical diaphragm）の形態をとってもよく、ペッサリーの膜が精子透過性又は水溶性の物質でなければ授精前に取り除かれる。かかる注入器及びペッサリーは、本発明のさらなる態様を形成する。
【００３８】
経直腸的な胃腸管への投与に関しては、１日量は、典型的には、０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは、１〜５０ｍｇ／ｋｇ、とりわけ、１．５〜２５ｍｇ／ｋｇ（ナトリウム塩基準）となる。投与は、好ましくは１日に１〜４回である。
【００３９】
耳への投与に関しては、１日量は、典型的には、０．０５〜４ｍｇ／ｋｇ体重（ナトリウム塩基準）、より好ましくは、０．１〜２ｍｇ／ｋｇとなる。投与は、好ましくは１日に１〜４回行われる。
【００４０】
至適用量は、任意で動物モデル（例えば、犬モデル）の予備研究にしたがって、慣例的な用量測定実験により容易に決定され得る。
【００４１】
本発明の組成物は、従来の製剤担体及び賦形剤を使用して製造されてもよい（例えば、無菌溶媒（例えば、水、とりわけ注射用水）、オスモル濃度調節剤、香味剤、ｐＨ調節剤など）。それらは、さらなる活性成分、例えば、粘液のムチンマトリックスに関与しないバイオポリマーを分解する役割を果たす薬剤（例えば、ＤＮアーゼ、特にｒｈＤＮアーゼ）、抗菌剤、麻酔薬、及び抗炎症剤を含んでもよい。かかるさらなる薬剤とオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートとを用いる併用療法（別々の又は一緒の投与でも）は、本発明の方法の特に好ましい実施形態である。かかるさらなる薬剤は、通常の用量、又はより低用量（例えば、通常の用量の５０％）でも使用されてもよい。
【００４２】
本発明に従って使用されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートは、好ましくは、７〜１５、より好ましくは、８〜１２、とりわけ約１０の数平均重合度（ＤＰn）を有する。分子量分布は、好ましくは、重合度（ＤＰ）が１７を超えるものは５モル％以下、より好ましくは、重合度（ＤＰ）が１４を超えるものは５モル％以下、さらにより好ましくは、重合度（ＤＰ）が１２を超えるものは５モル％以下のようなものである（例えば、上記の各場合では、ＤＰは、関連するＤＰnの上限よりも２高い）。同様に、関連するＤＰnの下限よりも２を超えて小さいＤＰを有するものは５モル％以下であることが好ましい。
【００４３】
オリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの対イオンは、任意の生理学的に許容されるカチオンであってもよい（例えば、電荷を有する薬物成分（例えば、ナトリウム、カリウム、メグルミンなど）に一般的に使用される生理学的に許容されるイオンのいずれか）。しかしながら、アルギン酸のゲル化を促進するイオン（例えば、第二族金属）は使用されないことが好ましくは。ナトリウムが一般的に好ましい。
【００４４】
したがって、さらなる態様から見ると、本発明は、５〜１８（好ましくは７〜１５、より好ましくは８〜１２、とりわけ約１０）の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０（好ましくは少なくとも０．８５、より好ましくは少なくとも０．９０、とりわけ少なくとも０．９２、最も具体的には少なくとも０．９５）のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下（好ましくは０．１５以下、より好ましくは０．１０以下、とりわけ０．０８以下、最も具体的には０．０５以下）のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満（好ましくは１７未満、より好ましくは１４未満）の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの水溶液を含む噴霧可能な無菌水性液状組成物を提供し、当該溶液は、４０〜１４０ｍｇ／ｍＬ、好ましくは５０〜１００ｍｇ／ｍＬ、とりわけ５５〜７５ｍｇ／ｍＬ（ナトリウム塩基準）の濃度で当該オリゴグルロネートを含む。
【００４５】
さらなる態様から見ると、本発明は、貯留槽及び飛沫発生器を含む噴霧式アプリケータを提供し、当該貯留槽は、本発明よる無菌水溶液又は組成物を含む。かかる噴霧式アプリケータ、ならびに実際にはオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートは、感冒もしくは他の理由から生じる嚢胞性繊維症、鼻腔もしくは鼻の閉塞、又は鬱血の治療に使用され得る。
【００４６】
肺への吸入が意図される組成物は、望ましくは、さらなる生理学的に許容される粘膜の粘性降下剤、例えば、核酸切断酵素（例えば、ＤＮアーゼＩなどのＤＮアーゼ）、ゲルゾ
リン、チオール還元剤、アセチルシステイン、塩化ナトリウム、非荷電性低分子量多糖類（例えば、デキストラン）、アルギニン（もしくは他の酸化窒素前駆体もしくは合成促進剤）、又はアニオン性ポリアミノ酸（例えば、ポリＡＳＰもしくはポリＧＬＵ）を含む。ＤＮアーゼの使用がとりわけ好ましい。
【００４７】
肺への投与には、オリゴウロネート類は、例えば、約ナノメートルからマイクロメートル（例えば、１０〜５００００ｎｍ）のモード粒径の粉末の形態をしていてもよい。
【００４８】
またさらなる態様から見ると、本発明は、医薬に用いるための、７〜１５（好ましくは８〜１２）の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２（好ましくは少なくとも０．９５）のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下（好ましくは０．０５以下）のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満（好ましくは１４未満）の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート類又はオリゴガラクツロネート類を提供する。
【００４９】
またさらなる態様から見ると、本発明は、例えば、嚢胞性繊維症、漿液性中耳炎、副鼻腔炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ、とりわけその湿式（wet）形態）、気管支炎、気腫、生殖障害の治療において粘膜表面への投与により当該表面での粘膜の粘性を減少させるための、又は粘膜表面にわたってのドラッグデリバリーを増進させるための内科的治療方法で用いる薬剤の製造のための、７〜１５（好ましくは８〜１２）の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２（好ましくは少なくとも０．９５）のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下（好ましくは０．０５以下）のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満（好ましくは１４未満）の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの使用を提供する。
【００５０】
またさらなる態様から見ると、本発明は、例えば、嚢胞性繊維症、漿液性中耳炎、副鼻腔炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ、とりわけその湿式（wet）形態）、気管支炎、気腫、生殖障害の治療において粘膜表面への投与により当該表面での粘膜の粘性を減少させるための、又は粘膜表面にわたってのドラッグデリバリーを増進させるための内科的治療方法で用いる、７〜１５（好ましくは８〜１２）の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８５（好ましくは少なくとも０．９２）のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．１５以下（好ましくは０．０８以下）のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満（好ましくは１４未満）の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを４０〜１４０ｍｇ／ｍＬ（ナトリウム塩基準）の濃度で無菌水溶液中に含む薬剤の製造のための当該オリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの使用を提供する。
【００５１】
いっそうさらなる態様から見ると、本発明は、ヒト又は非ヒト脊椎動物（例えば、哺乳類、鳥類、又は爬虫類、好ましくは哺乳類）対象における粘膜表面の粘膜の粘性を減少させるための当該対象の治療方法を提供し、この方法は、７〜１５（好ましくは８〜１２）の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２（好ましくは少なくとも０．９５）のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下（好ましくは０．０５以下）のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満（好ましくは１４未満）の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを有効量当該表面に投与することを含む。
【００５２】
いっそうさらなる態様から見ると、本発明は、ヒト又は非ヒト脊椎動物（例えば、哺乳類、鳥類、又は爬虫類、好ましくは哺乳類）対象における粘膜表面の粘膜の粘性を減少させるための当該対象の治療方法を提供し、この方法は、７〜１５（好ましくは８〜１２）の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８５（好ましくは少なくとも０．９２）のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．１５以下（好ましくは０．０８以下）のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満（好ましくは１４未満）の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを４０〜１４０ｍｇ／ｍＬ（ナトリウム塩基準）の濃度で含む無菌水溶液を有効量当該表面に投与することを含む。
【００５３】
本発明の方法では、粘膜表面への投与は直接的（例えば、ペッサリーの挿入によって、膣ゲルの注入によって、耳もしくは鼻への液滴の注入又は投与によって、又は鼻もしくは肺へのスプレー飛沫の吸入によって）によって、又は間接的（例えば、胃腸管の遠位端部に達するような坐剤又は浣腸剤の投与によって）であってもよい。
【００５４】
別の態様から見ると、本発明は、ヒト又は非ヒト脊椎動物（例えば、哺乳類、鳥類、又は爬虫類、好ましくは哺乳類）対象の耳、鼻腔、もしくは肺における粘膜の過粘稠に対処するための当該対象の治療方法を提供し、この方法は、５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネート（好ましくは、４０〜１４０ｍｇ／ｍＬ（ナトリウム塩基準）の濃度で無菌水溶液中）を有効量、当該対象の耳、鼻腔、又は肺に投与することを含む。
【００５５】
この方法におけるオリゴウロネートの投与は、患者の耳又は気道（例えば、副鼻腔、又はより好ましくは肺）における粘液を分泌する又は粘液を有する表面までオリゴウロネートを送達する任意の手段によって行ってもよい。導入は、典型的には、例えば、液体飛沫（例えば、エアロゾル）もしくは粉末の吸入、又は鼻もしくは耳への液滴の投与によって行われることになる。
【００５６】
我々はまた、粘膜表面にわたる生理活性剤（以下、「薬物成分」）の取り込みを増進させるために、オリゴグルロネート類及びオリゴガラクツロネート類が使用され得ることを見出した。したがって、さらなる態様から見ると、本発明は、薬物成分と、５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネート（好ましくは、好ましいものとして上記に記載されたオリゴグルロネート類の１種）とを含む医薬組成物を提供する。かかる組成物は、例えば、散剤、錠剤、カプセル剤、液剤、坐剤、分散剤などの任意の従来の形態であってもよく、従来の製剤担体及び賦形剤を用いて従来の様式で製造されてもよい。薬物成分は、好ましくは荷電分子、とりわけ高分子（例えば、２ｋＤａを超える分子量を有する）、例えば、高分子電解質もしくは両性電解質、特に、マイナスに荷電した分子である。したがって、例えば、薬物成分は、糖タンパク質（例えば、トランスフェリン）などの高分子複合体であってもよい。さらなる態様から見ると、本発明は、粘膜表面の通過を介した薬物成分の取り込みのための粘膜表面への投与のための薬物成分をさらに含む薬剤の製造のための、５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネート（好ましくは、好ましいものとして上記に記載されたオリゴグルロネート類の１種）の使用を提供する。またさらなる態様から見ると、本発明は、薬物成分に応答する症状に対処するために有効量の当該薬物成分をヒト又は非ヒト脊椎動物対象における粘膜表面に投与することによる当該対象の治療方法であって、当該薬物成分を、５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネート（好ましくは、好ましいものとして上記に記載されたオリゴグルロネート類の１種）と共に投与することを含むことを特徴とする方法を提供する。投与は、典型的には、経鼻的（吸入による）、経直腸的もしくは経膣的となる。薬物成分は、典型的には、その通常用量の５０〜１１０％で使用されることになる。
【００５７】
オリゴウロネートは、合成物質であってもよいが、好ましくは天然に存在する多糖類の誘導体である。それは、単一化合物であってもよいし、例えば、様々な重合度のオリゴウロネート化合物の混合物であってもよい。
【００５８】
多くの天然の多糖類が、しばしばマンヌロネート残基のブロック（いわゆるＭブロック）と共に、グルロネート残渣のブロック（いわゆるＧブロック）を含むブロック共重合体形態であるので、オリゴウロネート類は天然源から容易に入手可能である。Ｍブロック又はＭ／Ｇブロックは、本発明によるＧブロックの代わりに使用することができるが、しかしながら、これは好ましくない。
【００５９】
本発明に従って使用可能なオリゴウロネート類を製造するための多糖からオリゴ糖への開裂は、酵素消化及び酸加水分解などの従来の多糖類分解技術を使用して行われ得る。しかしながら、酸加水分解の使用が好ましい。次いで、所望のＤＰn及び分子量分布を有するオリゴウロネートは、イオン交換樹脂を用いてクロマトグラフィーにより、分別沈殿もしくは分別可溶化により、又は透析により多糖類分解産物から分離され得る。
【００６０】
適切な多糖類は、例えば、「ハイドロコロイドのハンドブック（Handbook of Hydrocolloids）」、フィリップス（Phillips）及びウィリアムズ（Williams）編、ＣＲＣ、ボカラトン、フロリダ州、米国、２０００年に記載されている。しかしながら、アルギン酸類は、マンヌロネート（Ｍ）及びグルロネート（Ｇ）のブロック共重合体として天然に存在し、Ｇブロックオリゴマーは、容易にアルギン酸源の材料から製造することができるので、アルギン酸類の使用がとりわけ好ましい。
【００６１】
オリゴウロネートの調製のために出発物質としてアルギン酸類が使用される場合、グルロネート含量は、所望であれば、Ａ．ビネランジーからのマンヌロナン（mannouronan）Ｃ−５エピメラーゼによるエピマー化により増加されてもよい。
【００６２】
本発明による使用に適切なオリゴグルロネート類は、コンブ（Laminaria hyperborea）からのアルギン酸の酸加水分解、中性のｐＨでの溶解、鉱酸を加えてｐＨを３．４まで減少させてのオリゴグルロネートの析出、弱酸を用いた洗浄、中性のｐＨでの再懸濁、及び凍結乾燥によって都合よく製造され得る。
【００６３】
本発明を今から、次の非限定的な実施例及び添付の図面を参照してさらに説明する。
【図面の簡単な説明】
【００６４】
【図１】図１ａ及び図１ｂ、図２ａ及び図２ｂ、ならびに図３ａ及び図３ｂは、経時的及び添加されたオリゴウロネートの作用としてのＣＯＰＤ患者からの痰におけるＧ*（上図）及びη*（下図）の変化を示す。
【図２】図１ａ及び図１ｂ、図２ａ及び図２ｂ、ならびに図３ａ及び図３ｂは、経時的及び添加されたオリゴウロネートの作用としてのＣＯＰＤ患者からの痰におけるＧ*（上図）及びη*（下図）の変化を示す。
【図３】図１ａ及び図１ｂ、図２ａ及び図２ｂ、ならびに図３ａ及び図３ｂは、経時的及び添加されたオリゴウロネートの作用としてのＣＯＰＤ患者からの痰におけるＧ*（上図）及びη*（下図）の変化を示す。
【図４】図４は、実施例７で使用されたＤＰnが１０のＧブロック材料及び、比較のための、高分子量の尾部が除去されていないＤＰnが１９の前駆体物質のダイオネクスクロマトグラムである。
【図５】図５は、図４のＧブロック材料の存在下での、モデル粘液の機械的性質の経時的な推移を示す。
【実施例】
【００６５】
実施例１
ＤＰn５〜１８のオリゴグルロネートナトリウムの調製
１．コンブ（Laminaria hyperborea）の茎からのグルロネートに富むアルギン酸（ｐＨ２〜３、１５〜４０乾燥重量％）を、鉱酸又は有機酸（好ましくは、ＨＣｌ）で、７０〜１００℃で２〜１２時間十分に加水分解させる。
２．加水分解後、オリゴ糖混合物のｐＨを３〜４まで増加させ、低イオン強度水で洗浄して、Ｍに富むフラグメント及び低分子量成分を除去する。
３．必要であれば、精製されたオリゴ糖混合物を、工程１及び２でのようにさらに加水分解及び精製する。
４．精製されたオリゴ糖混合物を、次いで、アルカリ（好ましくは、ＮａＯＨ又はＮａ2ＣＯ3）で中和して可溶性のＧブロックを得、そして含量（乾燥重量）を２．５〜２０％に調整する。
５．許容範囲の数平均重合度と分子量分布とを有する生成物を得るために、Ｇブロック溶液を２回ろ過する。まず、約１０００Ｄａのカットオフのフィルターに通してＤＰが５未満のオリゴマーを除去する。次いで、未透過物を約４０００Ｄａのカットオフのフィルターに通してろ過し、ＤＰが約２０を超えるＧブロックフラグメントを除去する。
６．必要であれば、得られた透過物の乾物含量を調整し、溶液を噴霧乾燥する。得られたオフホワイト色から淡黄色の粉末（生成物）は、１５％未満の含水率を有する。
【００６６】
実施例２
ＤＰn７〜１５のオリゴグルロネートナトリウムの調製
調製工程は以下のとおりである。
１．上記の実施例１と同様。
２．上記の実施例１と同様。
３．上記の実施例１と同様。
４．収率及び純度を至適化するために、オリゴ糖混合物の乾物含量を５〜１５％に調整し、オリゴ糖混合物を酢酸緩衝液（５０〜２５０ｍＭ）に溶解して、溶液の最終ｐＨを３．８〜５．０に到達させる。
５．酢酸緩衝液中の溶解したオリゴ糖を、７０〜１００℃で１〜１５時間さらに均一に加水分解して、高分子量フラグメントの含量を低下させ、生理活性Ｇブロックフラグメントを増加させる。
６．上記の実施例１の工程５及び６に記載のように、ろ過（脱塩も含む）及び噴霧乾燥を行う。
【００６７】
オリゴグルロネート類はまた、米国特許第６１２１４４１号及び米国特許第６４０７２２６号に記載のように調製されていてもよく、これら文献の内容は参照により本書に援用される。実際、本明細書における実施例１及び２の生成物は、有利には、出発物質として米国特許第６１２１４４１号に従って製造されたオリゴグルロネートを使用して製造されてもよい。
【００６８】
実施例３
特性解析及び品質管理
実施例１及び２に関して、中間生成物の検査を含んで、以下の技術が使用される。
【００６９】
純度（グルロネート残渣の含量）及び数平均重合度は、グラスダレン（Grasdalen）ら、カーボハイドレートリサーチ（Carbohydr. Res.）６８（１）：２３〜３１（１９７９）によって記載のように、1Ｈ−ＮＭＲ分光法により測定される。
【００７０】
ダイオネックス（Dionex）社により市販される、パルスアンペロメトリック検出と組み合わせた高精度アニオン性クロマトグラフィー（ＨＰＡＥＣ−ＰＡＤ）もまたオリゴマー物質の特性解析に使用される。Ｇブロックの特性解析には、以下の方法が使用される。
１．ＧブロックサンプルをＭＱ水に溶解する、１〜２ｍｇ／ｍｌ。
２．０．１ＭのＮａＯＨ溶液（炭酸塩を含まない）を移動相として使用し、かつ１．０Ｍの酢酸ナトリウムを溶出液として使用する。全ての溶液をヘリウムで脱気し、０．２２マイクロメートルのフィルターに通してろ過する。
３．２０マイクロリットルの試料を注入し、そしてＡＧ４Ａプレカラム及びイオンパック（IonPac）４×２５０ ＡＳ４Ａメインカラムを使用する。
４．カラムを、９０分以内で、０．１ＭのＮａＯＨ中０〜８７．５％の直線濃度勾配の酢酸ナトリウムで溶出する。溶出速度は、６５０〜７５０ｐｓｉの圧力レジームで１ｍｌ／分である。
５．鎖長に応じた応答係数を測定した後、各オリゴマーの濃度を計算することができ、これは数平均及び重量平均分子量のいずれも、そして分子量分布も求めることができることを示す。
【００７１】
行われ得るオリゴ糖のさらなる処理：この考察（つまり、関連するパラメーターが所望の範囲外にある場合）は、生成物の製造収率に関係する。高Ｇ含量のアルギン酸の任意の加水分解産物を必要とされるパラメーター範囲内に適合させることは問題ではないが、収率が低くなる可能性がある。収率を至適化し、なお必要とされるパラメーター範囲内に適合させるため、次の助言を提案することができる。
ａ）過度に低いＦG：さらなる加水分解（ＧＧ結合は酸加水分解に対してより安定している）又は／及びやや高いｐＨ値でのさらなる洗浄（Ｍに富むフラグメントは、Ｇに富むフラグメントより酸可溶性である）。
ｂ）「不適当」なＤＰn：平均ＤＰnが低すぎる場合、１ｋＤａフィルターを通すろ過を行うとロスが増えるので、収率が減少することになる。しかしながら、平均ＤＰnが高すぎると収率は増加し得るので、ここでは、強化された酸加水分解が、所望のパラメーター範囲内により多くの分子をもたらすことになる。
【００７２】
実施例４
投与用溶液
吸入用溶液は、実施例１及び２に従ってそれぞれ調製されたＤＰn５〜１８又は７〜１５のオリゴグルロネートナトリウムを６、８、及び１０重量％の濃度で注射用滅菌水に溶解することにより調製される。
【００７３】
これらのアリコートを、次いで、１〜５ｍＬ、好ましくは２〜３ｍＬの用量で肺投与用の噴霧式アプリケータに充填する。
【００７４】
さらなるアリコートは、スポイド付きのキャップを有するボトルに充填される。液滴は、例えば、片耳又は鼻孔ごとに２〜４滴で、鼻又は耳に投与されてもよい。
【００７５】
実施例５
膣ゲル
実施例１及び２に従って調製されたオリゴグルロネートナトリウムを、５及び１５重量％の濃度で、市販の膣潤滑用ゲル（例えば、Ｋ−Ｙゼリー（ジョンソン・アンド・ジョンソン（Johnson & Johnson）社から）又はアストログライド（バイオフィルム（BioFilm Inc）社から））と混合する。このゲルを、好ましくは授精又は性交の２〜４時間前に、充分に塗布する。
【００７６】
実施例７
ムチンに対する効果
痰の試料を、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）の患者から採取した。試料を、穏やかに撹拌し、少量ずつに分け、−４０℃で凍結及び保存した。
【００７７】
対照試料及び混合試料（痰及びＧブロック）を１分間穏やかに撹拌し、約１０ｍＢａｒで２×１分間脱気し、続いて、５分間冷蔵庫に入れた後、レオメータに移してから試験した。
【００７８】
純粋なＣＯＰＤ痰及び混合されたＣＯＰＤ痰の流動学的測定は、存在するいかなるタンパク質分解酵素の影響も最小限にするために、レオロジカ（Rheologica）社、ストレス−テック（Stress-Tech）汎用レオメータを用いて１０℃でプレート／コーン（４０ｍｍ／１0又は２５ｍｍ／１0、試料の量に応じて決定）に対して行なわれた。
【００７９】
純粋なＣＯＰＤ痰及びＧブロックと混合された痰の流動学的特性解析は、異なる４つの工程において行なわれた。
１．０．０３の一定の歪み及び１Ｈｚの周波数で２分間の振動歪み制御。
２．前せん断（２０ｓ-1のせん断速度で１分間）後に０．０３の一定の歪み及び１Ｈｚの周波数で６０分間の振動歪み制御。
３．０．０３の一定の歪みで、０．０１〜５Ｈｚの範囲で周波数掃引。
４．１Ｈｚで、０．０２〜２０Ｐａの範囲で応力掃引。
【００８０】
処理＃２（前せん断及び１時間の測定）は、示される実験結果の基準を示す。この処理は、０〜２４時間以内に２〜３回繰り返された。
【００８１】
３種類の生体外ＣＯＰＤ痰試料からの結果をここに報告する。試料は、「そのまま」（対照）そしてＧブロックを添加して流動学的に試験された。
・純粋な痰（対照）
・痰＋７５マイクロリットルの１５０ｍｇ／ｍｌ（０．５ｇの痰試料当たり）グルロネートナトリウムオリゴマーＤＰ１０
グルロネートナトリウムオリゴマーＤＰ１０は、次の特性を有していた。
ＦG０．７９、ＦM０．１１、ＦGG０．７６、ＦGM＝ＦMG０．０３、ＦMM０．０７、ＦMGG＝ＦGGM０．０２、ＦMGM０．０１、ＦGGG０．７４、ＦG（ｒｅｄ）０．１０、ＦG（ｔｏｔ）０．８９、ＤＰn１０
図１ａ、図２ａ、及び図３ａは、オリゴウロネートの導入後の、前せん断処理の終了後かつ任意の期間での、ＣＯＰＤ痰試料（オリゴウロネートを含有、及び非含有）の複素弾性率（Ｇ*）の推移を示す。図１ｂ、図２ｂ、及び図３ｂは、図１ａ、図２ａ、及び図３ａと同様の痰試料の複素粘度の推移を示す。
【００８２】
オリゴウロネートの添加は、明らかに、そして経時的に、生体外でのＣＯＰＤ痰の機械的性質を低下させる。複素動的弾性率及び複素動的粘度のいずれもかなり低下される。しかしながら、位相角の変化はＧ*及びη*の程度ほどは生じない（データ含まず）。これは、ムチンネットワークの機械的性質が維持されていることを明確に示すので最も重要である。
【００８３】
実施例８
シダ状化
ムチン組成物は以下のように調製された。
ａ）０．０５ＭのＮａＣｌ水溶液１ｍＬ当たり１８ｍｇのムチン、
ｂ）０．０５ＭのＮａＣｌ水溶液１ｍＬ当たり１８ｍｇのムチン及び１ｍｇのアルギン酸、ならびに
ｃ）０．０５ＭのＮａＣｌ１ｍＬ当たり１８ｍｇのムチン及び０．５ｍｇのグルロネートオリゴマー（ＤＰn＝１０、実施例７と同様）。
【００８４】
組成物を風乾させ、顕微鏡写真を記録した。これら（本明細書には含まず）は、グルロネートオリゴマーがシダ状化を促進することを明確に示した。
【００８５】
実施例９
粘液の機械的性質
２種のモデル粘液物質を調製した。１つ目は、水中の１８ｍｇ／ｍＬのムチン及び０．６ｍｇ／ｍＬのアルギン酸で、２つ目は、１８ｍｇ／ｍＬのムチンのみであった。４ｍｇ／ｍＬのＤＰnが１０であるＧブロック（実施例７と同様）又はＤＰnが１９のものをそれぞれに加え、各試料について経時的な複素動的弾性率Ｇ*の推移を記録した。Ｇ*は粘液の機械的性質を示す。結果を図５に示す。上から、ムチン／アルギン酸、ムチン、ＤＰn１９を有するムチン／アルギン酸、及びＤＰn１０を有するムチン／アルギン酸である。示されるように、高分子量の尾部を有さないＤＰnが１０のＧブロックは、ＤＰnが１９のＧブロックよりも粘液の固体様挙動を低下させる。図４は、使用された２種類のＧブロックのダイオネックスクロマトグラムである。示されるように、ＤＰnが１９の試料は右端に向かって肩（shoulder）を有しており、高分子量の尾部の存在を示している。
【００８６】
実施例１０
エタネルセプト組成物
ＤＰnが１０のＧブロック（実施例７と同様）を４０ｍｇ／ｍＬで５０ｍｇ／ｍＬの注射用エタネルセプト水溶液（アムジェン（Amgen）社、カリフォルニア州、米国、から登録商標エンブレル（Enbrel）として入手可能）に溶解する。
【００８７】
実施例１１
インフリキシマブ組成物
ＤＰnが１０のＧブロック（実施例７と同様）８ｍｇ／ｍＬ及びインフリキシマブ１０ｍｇ／ｍＬ（セントコア（Centocor）社、ペンシルベニア州、米国、から登録商標レミケード（Remicade）として入手可能）を滅菌水に溶解する。
【００８８】
実施例１２
リツキシマブ組成物
ＤＰnが１０のＧブロック（実施例７と同様）を１０ｍｇ／ｍＬで、１０ｍｇ／ｍＬの注射用リツキシマブ水溶液（ジェネンテック（Genentech）社、カリフォルニア州、米国、から登録商標リツキサン（Rituxan）として入手可能）に溶解する。
【００８９】
実施例１３
エリスロポエチン組成物
ＤＰnが１０のＧブロック（実施例７と同様）を８ｍｇ／ｍＬで、４０００Ｕ／ｍＬの注射用エポエチン・アルファ水溶液（アムジェン（Amgen）社、カリフォルニア州、米国、から登録商標エポジェン（Epogen）として入手可能）に溶解する。
【００９０】
実施例１４
Ｇ−ＣＳＦ組成物
ＤＰnが１０のＧブロック（実施例７と同様）を９ｍｇ／ｍＬで、１０ｍｇ／ｍＬの注射用ペグフィルグラスチム水溶液（アムジェン（Amgen）社、カリフォルニア州、米国、から登録商標ニューラスタ（Neulasta）として入手可能）に溶解する。
【００９１】
実施例１５
トラスツズマブ組成物
ＤＰnが１０のＧブロック（実施例７と同様）１５ｍｇ／ｍＬ及びトラスツズマブ（ジェネンテック（Genentech）社、カリフォルニア州、米国、から登録商標ハーセプチン（Herceptin）として入手可能）２２ｍｇ／ｍＬを注射剤静菌水に溶解する。
【００９２】
実施例１６
インターフェロン組成物
ＤＰnが１０のＧブロック（実施例７と同様）を１ｍｇ／ｍＬで、３０μｇ／ｍＬの注射用インターフェロン・ベータ−１ａ水溶液（バイオジェン・アイデック（Biogen Idec）社、ホーフトドルプ、オランダ、からの登録商標アボネックス（Avonex）として入手可能）に溶解する。
【００９３】
実施例１７
インスリン組成物
ＤＰnが１０のＧブロック（実施例７と同様）を１０ｍｇ／ｍＬで、１００Ｕ／ｍＬの注射用インスリン水溶液（イーライリリー（Ely Lilly）社、インディアナ州、米国、から登録商標ヒューマリン（Humulin）として入手可能）に溶解する。
【００９４】
実施例１０〜１７の組成物は、典型的には、経鼻的、経膣的、又は舌下的に、一般的には、これら実施例中で言及された市販の薬剤化合物の供給者によって推奨された規模の用量で投与されてもよい。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、オリゴ―グルロネート及びガラクツロネート組成物、ならびに、特に嚢胞性繊維症（ＣＦ）及び副鼻腔炎の治療における、例えば、上昇した粘膜粘性に対処するため、例えば、とりわけ気道、特に鼻腔及び肺からの粘液クリアランスを増進させるための、オリゴグルロネート類又はオリゴガラクツロネート類によるヒト又はヒト以外の動物、特に哺乳類の治療方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
嚢胞性繊維症は、ヨーロッパ人における最も一般的な致死性の遺伝病である。この病気は、身体における分泌細胞及び他の細胞に存在するクロライドチャネルである嚢胞性線維性膜貫通調節因子（ＣＦＴＲ）をコードする遺伝子における変異により引き起こされる。この病気は、粘性で処置困難な粘液分泌の身体における存在を特徴とし、肺疾患、消化器異常、及び不妊症を引き起こし得る。肺における粘膜毛様体クリアランスの正常パターンでは過度に粘性のある粘液は除去されず、これは微生物によってコロニーを形成され、次に粘液の粘性を増加させ、慢性の肺の炎症及び閉塞を引き起こし得る。肺疾患は、したがって大多数のＣＦ患者にとって最大の健康問題であり、主な死亡原因である。
【０００３】
粘液は、肺を含む気道全体の正常な分泌物である。その主な役割は、肺を清潔にしかつ感染症に対して防御をする粘膜毛様体クリアランス機構の一部である。粘膜毛様体クリアランス機構は、３つの主な構成要素（粘液、繊毛、及び気道表面の液体）を有する。上皮表面はしたがって、粘液を分泌する杯細胞及び繊毛上皮細胞を含み、その上に重なる層となる気道表面の液体及びその上には粘液の層があり、これには繊毛の先端が突出している。粘液は、主に水（約９５重量％）と粘液の物理的性質の原因であるゲル形成分子であるムチンとからなる粘着性のゲル物質である。繊毛は、上皮細胞の表面からの小さな毛様の突出物であり、先端を粘液層に沈めし、水っぽく非粘性の気道表面の液体中で律動的に拍動する。粘液層は、細菌、ウィルス、吸入粒子、環境汚染物質、及び細胞残屑を捕らえる、粘性の覆いを肺表面で形成する。繊毛の拍動は、この粘液の覆い及びその中に捕らえられたものすべてを口の方に及び肺から外に推進させる役目を果たす。正常状態では、粘膜毛様体クリアランス機構は効果的に機能し、肺は清潔にそして感染することなく保たれる。この機構が許容範囲を超えた場合は、第２の防御線、すなわち咳、がある。従って、刺激又は炎症に応じて、例えば、吸入粒子又は感染により、分泌される粘液の量が増加すると、粘液は咳反射により肺から放出される。
【０００４】
ＣＦ患者では、肺における粘液は正常よりも濃くかつ粘性であり、このより濃い粘液は、それほど容易には繊毛によって運搬されない。結果として、粘膜毛様体クリアランス機構が損なわれ、肺は感染に対してより脆弱になる。さらに、ＣＦ患者の肺は、低レベルの炎症が続き、通常は炎症を引き起こす物質に対して増大した応答を伴う過剰な炎症状態にあるようである。これは、炎症に対する応答の一部が粘液の増産であるので問題である。増加した粘液は、濃厚すぎて粘膜毛様体クリアランス機構又は咳によって除去することができない場合は蓄積され、肺活量が減少し、粘膜にわたっての酸素交換が減少する。これはバクテリアのコロニー形成に理想的な環境を提供し、これはまた炎症を引き起こし、かつ免疫反応を活性化させるのでＣＦ患者には重大な問題である。これは、粘液分泌の増加だけでなく、マクロファージ及びリゾチームなどの免疫反応細胞及び免疫反応物質の存在の増加も引き起こす。細菌及びマクロファージが死ぬと、それらの細胞含有物は粘液中へ放出される。細胞含有物はＤＮＡなどの粘性の分子を含む。細菌のいくつか（例えば、バークホルデリア（Burkholdia）属の種、及び緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa））はまた、非常に粘性の多糖類を分泌する（後者の場合ではアルギン酸）。これらの分子は、アルギン酸の場合には見たところ粘液のムチンマトリックスとの相互作用によるが、ＤＮＡの場合には見たところムチンマトリックス内のゾル相の粘性を増加させることにより、粘液の粘性をさらに増加させる。
【発明の概要】
【０００５】
繊毛により運搬され得る形態で粘液を維持することは、したがって、ＣＦの治療の重要な目的である。単にゲル様構造を分解する薬剤は、ＣＦ患者の過粘稠の粘液と同様に運搬され得ない液体を生じることになるであろう。したがって、治療剤はいずれも、糖タンパク質ムチンにより形成されるゲルマトリックスを分解しないことが重要である。
【０００６】
我々は、５〜３０、好ましくは５〜１８の範囲の数平均重合度（ＤＰn）を有するオリゴグルロネート類(oligoguluronates)又はオリゴガラクツロネート類(oligogalacturonates)（好ましくは、オリゴグルロネート類）を用いてこれを達成することができることを見出した。
【０００７】
身体のどこか、例えば、耳、頸部、及びとりわけ気道において、特に鼻腔、とりわけ副鼻腔において、過度に粘性の粘液は問題を呈し得る。上記オリゴグルロネート類及びオリゴガラクツロネート類はまた、これらの問題の解決のために用いられ得る。
【０００８】
子宮頸部の腺により産生される頸管粘液は、月経周期にわたって異なる割合で異なる種類の分泌物を含む不均質の物質である。この分泌は、排卵が起こり受胎が可能な「妊娠可能な時期（fertile window）」中以外は、精子が頸部を通って移動するのに常に障壁となるような性質を有する。これは、病原への不必要な接触から子宮、卵管、及び卵巣を保護するように働く。
【０００９】
妊娠可能な時期中に精子の移動を支援するために、頸管粘液は、適切な生化学的及び生物物理学的特性を有さなければならない。ｐＨ及びオスモル濃度などの生化学的性質は、精子の生存にとって適切な条件の提供に重要である（マリオット（Marriott）ら、「粘液生理学及び病状（Mucus physiology and pathology）」、バイオアドヒシブドラッグデリバリーシステムズ（Bioadhesive Drug Delivery Systems）、ＣＲＣ出版、１９９０年を参照のこと）一方で、流動性及び高分子ネットワーク形態などの生物物理学的性質は、粘液内の精子の運動性に作用する（ルトルラント（Rutllant）ら、リプロダクション・イン・ドメスティックアニマルズ（Reprod. Dom. Anim.）４０：７９〜８６（２００５年）を参照のこと）。
【００１０】
臨床的には、妊娠可能な時期は、排卵前の黄体形成ホルモンの急増及び排卵後の基礎体温の上昇を検出することにより、ならびに頸管粘液の生物物理学的性質、特に、その牽糸性（曳糸性）（これは本質的には粘液にどれほどの伸縮性があるかの尺度であり、それ自体、粘液の流動性と関連する）を検査することにより同定され得る。頸管粘液のシダ状化（すなわち、排卵期の粘液が風乾されると生ずる結晶化パターン）はまた、粘液内での高分子ネットワークの形態と関連することが示されている（メナルゲス（Menarguez）ら、ヒューマンリプロダクション（Human Reproduction）１８：１７８２〜１７８９（２００３年）を参照のこと）。
【００１１】
粘液のシダ状化パターン（ひいては、高分子ネットワークの形態）は、人工授精での妊娠が達成する可能性における重要な要因であることが示され、一部の女性にとっては「問題のある粘液（problem mucus）」は妊娠を達成するための大きな障壁のようである（ボアイエ（Boyers）ら、ヒューマンリプロダクション（Human Reproduction）６：１１０８〜１１１４（１９９１年）を参照のこと）。
【００１２】
したがって、「問題のある粘液」を有する女性のためだけでなく、妊娠の可能性を最大限にしたいすべての女性のため、及び動物の妊娠の可能性を最大限にしたい動物のブリーダーのためにも、至適な精子運動性のための頸管粘液の生物物理的性質の修飾方法が必要とされている。
【００１３】
我々は、５〜３０、好ましくは５〜１８の範囲の数平均重合度（ＤＰn）を有するオリゴグルロネート類又はオリゴガラクツロネート類（好ましくは、オリゴグルロネート類）を用いてこれを達成することができることを見出した。
【００１４】
オリゴグルロネート類及びオリゴガラクツロネート類のこれらの使用は、例えば、国際公開第２００７／０３９７５４号及び国際公開第２００７／０３９７６０号に記載されており、これら文献の内容は参照により本書に援用される。
【００１５】
オリゴグルロネート類及びオリゴガラクツロネート類（以下、「Ｇブロック類」）は、下記に記載されるように天然の多糖類から調製されてもよく、異なる重合度（ＤＰ）の化合物の混合物を含んでもよい。我々は今回、Ｇブロック混合物の高分子量の「尾」を除去することにより、粘液の構造を改変する能力の点で向上した特性を有する物質が得られることが見出した。
【００１６】
本明細書の請求項には、したがって、数平均重合度（ＤＰn）、グルロネート／ガラクツロネート画分（ＦG）、マンヌロネート(mannuronate)画分（ＦM）、及び分子量分布について特に好ましい値が記載されている。
【００１７】
我々は驚くべきことに、高分子薬物（すなわち、２０００Ｄａを超える（好ましくは４０００Ｄａを超える、例えば、５〜２０００ｋＤａ）分子量を有する薬剤）の粘膜表面からの取り込みを促進させるために、Ｇブロック類（とりわけ、オリゴグルロネート類）が、それらが共投与された場合に、有利に使用され得ることを見出した。この効果は、メイディン・ダービー・イヌ腎臓（ＭＤＣＫ）細胞モデルを使用して明確に証明された。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
したがって、一態様から見ると、本発明は、オリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートと高分子薬物とを含む医薬組成物を提供する。
【００１９】
さらなる態様から見ると、本発明は、ヒト又は非ヒト脊椎動物（例えば、哺乳類、鳥類、又は爬虫類、とりわけ哺乳類）対象の治療方法を提供し、この方法は当該対象に有効量の高分子薬物を含む医薬組成物を投与することを含み、当該対象の粘膜表面に当該薬剤を、有効量のオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートと共に、共投与することを含むことを特徴とする。
【００２０】
別の態様から見ると、本発明は、治療方法で用いる高分子薬物をさらに含む薬剤の製造のためのオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの使用を提供し、上記治療方法は、ヒト又は非ヒト脊椎動物対象における粘膜表面へ当該薬剤を投与することを含む。
【００２１】
粘膜表面によって、例えば、鼻、膣、肺、口腔粘膜（例えば、舌下）、又は肛門の内側が意味される。口への投与は、一般的に、スプレーの吸入、又は舌下への配置、又は口中での保持により行われることになる。胃又は腸における薬物の取り込みのための胃腸管への経口投与はさらなる選択肢であるが、そのように投与された場合には高分子薬物はしばしば破壊されやすいので、好ましさが劣る。
【００２２】
適切な高分子薬物の例としては、核酸（例えば、ＤＮＡ又はＲＮＡ）、タンパク質、ペプチド、ホルモン、抗体など、より具体的には、インスリン、抗ＴＮＦ（例えば、エタネルセプト、インフリキシマブ、アダリムマブ（adalinumab）など）、インターフェロン（例えば、インターフェロン・アルファ又はベータ）、第ＶＩＩ因子、第ＶＩＩａ因子、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、卵胞刺激ホルモン、エリスロポエチン、トラスツズマブ、リツキシマブ、顆粒球コロニー刺激因子（及びペグ（ＰＥＧ）化された均等物）、ソマトトロピン及びアポトランスフェリン（無トランスフェリン血症の治療で使用される）などの成長ホルモン、及びベータ・グルコセレブロシダーゼが挙げられる。これらのうちのほとんどは、粘膜表面からの生物学的吸収が非常に低いので、従来は注射により投与され、これは粘膜表面での投与に比べ患者にとっては心地よい投与経路ではない。本発明の方法では、かかる薬剤は、勿論それらの通常の適応症に使用することができる。適切な用量は、取り込まれた量が従来の注射量と同等であるということに基づいて、使用している動物モデルから容易に決定され得る。所望であれば、本発明の組成物は、皮下又は筋肉内投与されてもよいが、これは好ましさが劣り、静注は一般的に望ましくない。
【００２３】
本発明の組成物への組み込みに好適な適切な高分子薬物の例としては、商品名エンブレル及びレミケードとして販売される抗ＴＮＦ薬、商品名リツキサンとして販売される抗ＣＤ２０、商品名プロクリット、エプレックス、アラネスプ、エポジェン（Epogen）、ネオレコルモン（NeoRecormon）、及びエポジンとして販売されるエリスロポエチン、商品名ニューラスタ（Neulasta）として販売されるＧ−ＣＳＦ、商品名ハーセプチンとして販売される抗ＥＧＦＲ、商品名アボネックス、レビフ（Rebif）、ベタセロン、ニューポジェン（Neupogen）、及びペガシスとして販売されるインターフェロン、商品名コージネイトとして販売される第ＶＩＩＩ因子、商品名ノボセブンとして販売される第ＶＩＩ因子、商品名ベネフィックスとして販売される第ＩＸ因子、商品名ジェノトロピン及びニュートロピン（Nutropin）として販売される成長ホルモン、商品名アクティベース（Activase）として販売されるｔＰＡ、商品名フォリスチムとして販売されるＦＳＨ、ならびに商品名セレザイムとして販売されるグルコセレブロシダーゼが挙げられる。製造者のウェブサイトから適応症及び用量の詳細が得られる。
【００２４】
高分子薬物は勿論、遺伝子療法に用いる核酸であってもよい。
【００２５】
高分子薬物は、好ましくは、単に感染、炎症、粘膜の粘性、又は他の肺疾患を減少させるいずれかの効果以上の所望の生理的効果を有するものである。特に、高分子薬物は、好ましくは、核酸切断酵素、ゲルゾリン、デキストラン、ポリＡＳＰ、又はポリＧＬＵ以外のものである。
【００２６】
高分子薬物は、時に水溶液中で凝集体を形成する傾向があり、理論により拘束されることを望まないが、Ｇブロック類の共投与により達成される向上した取り込みの一部は、凝集体形成を減少させるＧブロック類の効果の結果であると考えられる。本発明は、したがって、この凝集する傾向のあるインスリンなどの高分子との使用にとりわけ適している。Ｇブロック類の共投与により達成される向上した取り込みのさらなる部分は、細胞表面上のグリコカリックス構造の通過を促進させるＧブロック類の能力にあると考えられる。これは、高分子薬物による適切な細胞表面受容体へのアクセスを促進させるＧブロック類によって起こる可能性がある。
【００２７】
使用されるＧブロックは、好ましくは、５〜１８（とりわけ、７〜１５）の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０（好ましくは、少なくとも０．８５、とりわけ少なくとも０．９２）のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下（好ましくは、０．１５以下、とりわけ０．０８以下）のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満（好ましくは、１７未満）の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートである。Ｇブロックは、好ましくは、使用する準備ができている場合に、水溶液中で０．１〜５０ｍｇ／ｍＬ、とりわけ０．５〜２５ｍｇ／ｍＬ、特に１〜１０ｍｇ／ｍＬで組成物中に存在する。別な書き方をすれば、Ｇブロック及び高分子薬物は、好ましくは、約０．５：１〜１０：１、特に約１：１の相対的な重量比で存在する。
【００２８】
別の態様から見ると、本発明は、ヒト又は非ヒト脊椎動物（例えば、哺乳類、鳥類、又は爬虫類、とりわけ哺乳類）対象における粘膜表面の粘膜の粘性を減少させるための、及び特に粘膜の過粘稠に対処するための（例えば、漿液性中耳炎、副鼻腔炎、又は嚢胞性繊維症を治療するための、授精又は性交に続く受胎の可能性を増進させるための、粘膜表面にわたるドラッグデリバリーを増進させるための）治療方法を提供し、この方法は、５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを有効量当該粘膜表面に投与することを含む。
【００２９】
オリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートが、気道（すなわち、鼻、鼻腔、及び肺）又は耳の中の粘膜表面に投与される場合、好ましくは、４０〜１４０ｍｇ／ｍＬの濃度（ナトリウム塩形態のオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの重量に基づいて計算される。以下「ナトリウム塩基準」と呼ぶ。）で水溶液中で処方されることになる。肺に投与される場合、ヒトのための１日量は、成人で１００〜２０００ｍｇ／日（ナトリウム塩基準）、好ましくは１２０〜１０００ｍｇ／日、とりわけ１５０〜５００ｍｇ／日となる。小児には、用量は、上記の用量範囲に関して成人の体重を７０ｋｇとして子どもの体重に比例してもよい。この１日量は、好ましくは、時間間隔を置いて２、３又は４回に分けて投与されることとなる。
【００３０】
オリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートが膣中の粘膜表面に投与されるか、又は経直腸的に投与される場合、水溶液以外の形態で提供されてもよい。したがって、例えば、錠剤、被覆錠剤（とりわけ、遅延放出性又は徐放性被覆錠剤）、カプセル剤、坐剤、ペッサリー剤、ゲル剤、乳剤、シロップ剤、分散剤、懸濁剤、乳剤、散剤、クリーム剤、ペースト剤などの形態であってもよい。この目的のために、従来の製剤担体及び賦形剤と共に処方されてもよく、剤形は従来の方法で調製されてもよい。
【００３１】
膣投与に関して、オリゴウロネート（すなわち、オリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネート）は、好ましくは、無菌水性組成物の形態、例えば、液剤、ゲル剤、乳剤、クリーム剤又はペースト剤、あるいは、錠剤、カプセル剤又は膣坐剤として投与される。しかしながら、ゲル剤形態（とりわけ、水性の潤滑性ゲル剤）が好ましい。殺精子剤を含まないかかる組成物は、所望であれば、精子機能を増進させるための（例えば、ｐＨ調節剤及び酸化防止剤）、又は授精を支援するための（例えば、筋弛緩薬、潤滑剤など）さらなる薬剤を含んでもよい。明確には、組成物はまた、膣投与用組成物で通常見られるような生理学的に許容されるさらなる薬物成分又は化粧用成分を含んでもよい（例えば、結合剤、希釈剤、溶解性カプセル殻、芳香剤、抗生物質、ビタミン剤、油剤、乳化剤、坐剤基剤など）。
【００３２】
オリゴウロネートは、好ましくは、成人のヒト女性には、投与単位当たり約０．１〜２．５ｇ、より好ましくは投与単位当たり０．５〜２ｇで存在することになる。他の種についての用量は、平均の身体の大きさを参照して同様に計算され得る（例えば、［（０．１〜２．５）／６０］ｇ／投与単位／ｋｇ体重など）。
【００３３】
組成物は、好ましくは、授精に先立って投与される（例えば、１〜６０時間前、好ましくは、２〜４８時間前、とりわけ、４〜３６、例えば、２０〜５２時間前）。これは、例えば、膣洗浄により、水分解性の錠剤又はカプセル剤の膣挿入により、又はゲル剤又はペースト剤の注入により達成されてもよい。投与の時期は、排卵又は排卵の接近を示す監視パラメータ（例えば、体温）により選択されてもよい。
【００３４】
所望であれば、組成物は、２回以上投与されてもよい（例えば、授精のかなり前と授精の直前（例えば、１時間以内））。
【００３５】
組成物にｐＨ調節剤が含まれている場合、これは、好ましくは、膣のｐＨがわずかに塩基性（例えば、ｐＨ７．１〜７．６、とりわけ、ｐＨ約７．４）になるようにするものである。通常の生理学的に許容される緩衝液がこれに関して使用されてもよい。
【００３６】
本発明の方法に従って治療される女性は、好ましくは、ヒトの女性であり、特に、問題のある粘液による不妊問題を抱えていると診断された女性である。しかしながら、上記方法は、妊娠の可能性を増加させるために、妊娠が可能な年齢の他のヒト女性により使用されてもよい。また、雌牛、馬、犬、猫、羊、山羊、豚などの動物のために獣医及び動物のブリーダー（例えば、農業従事者）により使用されてもよい。
【００３７】
膣投与用の本発明の組成物は、好ましくは、本発明の方法で用いるための指示書と共に、特に好ましくは、投与単位形態で、かつとりわけ好ましくは、アプリケータ（例えば、注入器）と共に包装される。前もって充填された注入器の使用がとりわけ好ましい。あるいは、アプリケータは、凹側に組成物を備えたペッサリー（cervical diaphragm）の形態をとってもよく、ペッサリーの膜が精子透過性又は水溶性の物質でなければ授精前に取り除かれる。かかる注入器及びペッサリーは、本発明のさらなる態様を形成する。
【００３８】
経直腸的な胃腸管への投与に関しては、１日量は、典型的には、０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは、１〜５０ｍｇ／ｋｇ、とりわけ、１．５〜２５ｍｇ／ｋｇ（ナトリウム塩基準）となる。投与は、好ましくは１日に１〜４回である。
【００３９】
耳への投与に関しては、１日量は、典型的には、０．０５〜４ｍｇ／ｋｇ体重（ナトリウム塩基準）、より好ましくは、０．１〜２ｍｇ／ｋｇとなる。投与は、好ましくは１日に１〜４回行われる。
【００４０】
至適用量は、任意で動物モデル（例えば、犬モデル）の予備研究にしたがって、慣例的な用量測定実験により容易に決定され得る。
【００４１】
本発明の組成物は、従来の製剤担体及び賦形剤を使用して製造されてもよい（例えば、無菌溶媒（例えば、水、とりわけ注射用水）、オスモル濃度調節剤、香味剤、ｐＨ調節剤など）。それらは、さらなる活性成分、例えば、粘液のムチンマトリックスに関与しないバイオポリマーを分解する役割を果たす薬剤（例えば、ＤＮアーゼ、特にｒｈＤＮアーゼ）、抗菌剤、麻酔薬、及び抗炎症剤を含んでもよい。かかるさらなる薬剤とオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートとを用いる併用療法（別々の又は一緒の投与でも）は、本発明の方法の特に好ましい実施形態である。かかるさらなる薬剤は、通常の用量、又はより低用量（例えば、通常の用量の５０％）でも使用されてもよい。
【００４２】
本発明に従って使用されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートは、好ましくは、７〜１５、より好ましくは、８〜１２、とりわけ約１０の数平均重合度（ＤＰn）を有する。分子量分布は、好ましくは、重合度（ＤＰ）が１７を超えるものは５モル％以下、より好ましくは、重合度（ＤＰ）が１４を超えるものは５モル％以下、さらにより好ましくは、重合度（ＤＰ）が１２を超えるものは５モル％以下のようなものである（例えば、上記の各場合では、ＤＰは、関連するＤＰnの上限よりも２高い）。同様に、関連するＤＰnの下限よりも２を超えて小さいＤＰを有するものは５モル％以下であることが好ましい。
【００４３】
オリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの対イオンは、任意の生理学的に許容されるカチオンであってもよい（例えば、電荷を有する薬物成分（例えば、ナトリウム、カリウム、メグルミンなど）に一般的に使用される生理学的に許容されるイオンのいずれか）。しかしながら、アルギン酸のゲル化を促進するイオン（例えば、第二族金属）は使用されないことが好ましくは。ナトリウムが一般的に好ましい。
【００４４】
したがって、さらなる態様から見ると、本発明は、５〜１８（好ましくは７〜１５、より好ましくは８〜１２、とりわけ約１０）の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０（好ましくは少なくとも０．８５、より好ましくは少なくとも０．９０、とりわけ少なくとも０．９２、最も具体的には少なくとも０．９５）のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下（好ましくは０．１５以下、より好ましくは０．１０以下、とりわけ０．０８以下、最も具体的には０．０５以下）のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満（好ましくは１７未満、より好ましくは１４未満）の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの水溶液を含む噴霧可能な無菌水性液状組成物を提供し、当該溶液は、４０〜１４０ｍｇ／ｍＬ、好ましくは５０〜１００ｍｇ／ｍＬ、とりわけ５５〜７５ｍｇ／ｍＬ（ナトリウム塩基準）の濃度で当該オリゴグルロネートを含む。
【００４５】
さらなる態様から見ると、本発明は、貯留槽及び飛沫発生器を含む噴霧式アプリケータを提供し、当該貯留槽は、本発明よる無菌水溶液又は組成物を含む。かかる噴霧式アプリケータ、ならびに実際にはオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートは、感冒もしくは他の理由から生じる嚢胞性繊維症、鼻腔もしくは鼻の閉塞、又は鬱血の治療に使用され得る。
【００４６】
肺への吸入が意図される組成物は、望ましくは、さらなる生理学的に許容される粘膜の粘性降下剤、例えば、核酸切断酵素（例えば、ＤＮアーゼＩなどのＤＮアーゼ）、ゲルゾ
リン、チオール還元剤、アセチルシステイン、塩化ナトリウム、非荷電性低分子量多糖類（例えば、デキストラン）、アルギニン（もしくは他の酸化窒素前駆体もしくは合成促進剤）、又はアニオン性ポリアミノ酸（例えば、ポリＡＳＰもしくはポリＧＬＵ）を含む。ＤＮアーゼの使用がとりわけ好ましい。
【００４７】
肺への投与には、オリゴウロネート類は、例えば、約ナノメートルからマイクロメートル（例えば、１０〜５００００ｎｍ）のモード粒径の粉末の形態をしていてもよい。
【００４８】
またさらなる態様から見ると、本発明は、医薬に用いるための、７〜１５（好ましくは８〜１２）の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２（好ましくは少なくとも０．９５）のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下（好ましくは０．０５以下）のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満（好ましくは１４未満）の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート類又はオリゴガラクツロネート類を提供する。
【００４９】
またさらなる態様から見ると、本発明は、例えば、嚢胞性繊維症、漿液性中耳炎、副鼻腔炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ、とりわけその湿式（wet）形態）、気管支炎、気腫、生殖障害の治療において粘膜表面への投与により当該表面での粘膜の粘性を減少させるための、又は粘膜表面にわたってのドラッグデリバリーを増進させるための内科的治療方法で用いる薬剤の製造のための、７〜１５（好ましくは８〜１２）の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２（好ましくは少なくとも０．９５）のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下（好ましくは０．０５以下）のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満（好ましくは１４未満）の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの使用を提供する。
【００５０】
またさらなる態様から見ると、本発明は、例えば、嚢胞性繊維症、漿液性中耳炎、副鼻腔炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ、とりわけその湿式（wet）形態）、気管支炎、気腫、生殖障害の治療において粘膜表面への投与により当該表面での粘膜の粘性を減少させるための、又は粘膜表面にわたってのドラッグデリバリーを増進させるための内科的治療方法で用いる、７〜１５（好ましくは８〜１２）の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８５（好ましくは少なくとも０．９２）のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．１５以下（好ましくは０．０８以下）のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満（好ましくは１４未満）の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを４０〜１４０ｍｇ／ｍＬ（ナトリウム塩基準）の濃度で無菌水溶液中に含む薬剤の製造のための当該オリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの使用を提供する。
【００５１】
いっそうさらなる態様から見ると、本発明は、ヒト又は非ヒト脊椎動物（例えば、哺乳類、鳥類、又は爬虫類、好ましくは哺乳類）対象における粘膜表面の粘膜の粘性を減少させるための当該対象の治療方法を提供し、この方法は、７〜１５（好ましくは８〜１２）の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２（好ましくは少なくとも０．９５）のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下（好ましくは０．０５以下）のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満（好ましくは１４未満）の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを有効量当該表面に投与することを含む。
【００５２】
いっそうさらなる態様から見ると、本発明は、ヒト又は非ヒト脊椎動物（例えば、哺乳類、鳥類、又は爬虫類、好ましくは哺乳類）対象における粘膜表面の粘膜の粘性を減少させるための当該対象の治療方法を提供し、この方法は、７〜１５（好ましくは８〜１２）の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８５（好ましくは少なくとも０．９２）のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．１５以下（好ましくは０．０８以下）のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満（好ましくは１４未満）の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを４０〜１４０ｍｇ／ｍＬ（ナトリウム塩基準）の濃度で含む無菌水溶液を有効量当該表面に投与することを含む。
【００５３】
本発明の方法では、粘膜表面への投与は直接的（例えば、ペッサリーの挿入によって、膣ゲルの注入によって、耳もしくは鼻への液滴の注入又は投与によって、又は鼻もしくは肺へのスプレー飛沫の吸入によって）によって、又は間接的（例えば、胃腸管の遠位端部に達するような坐剤又は浣腸剤の投与によって）であってもよい。
【００５４】
別の態様から見ると、本発明は、ヒト又は非ヒト脊椎動物（例えば、哺乳類、鳥類、又は爬虫類、好ましくは哺乳類）対象の耳、鼻腔、もしくは肺における粘膜の過粘稠に対処するための当該対象の治療方法を提供し、この方法は、５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネート（好ましくは、４０〜１４０ｍｇ／ｍＬ（ナトリウム塩基準）の濃度で無菌水溶液中）を有効量、当該対象の耳、鼻腔、又は肺に投与することを含む。
【００５５】
この方法におけるオリゴウロネートの投与は、患者の耳又は気道（例えば、副鼻腔、又はより好ましくは肺）における粘液を分泌する又は粘液を有する表面までオリゴウロネートを送達する任意の手段によって行ってもよい。導入は、典型的には、例えば、液体飛沫（例えば、エアロゾル）もしくは粉末の吸入、又は鼻もしくは耳への液滴の投与によって行われることになる。
【００５６】
我々はまた、粘膜表面にわたる生理活性剤（以下、「薬物成分」）の取り込みを増進させるために、オリゴグルロネート類及びオリゴガラクツロネート類が使用され得ることを見出した。したがって、さらなる態様から見ると、本発明は、薬物成分と、５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネート（好ましくは、好ましいものとして上記に記載されたオリゴグルロネート類の１種）とを含む医薬組成物を提供する。かかる組成物は、例えば、散剤、錠剤、カプセル剤、液剤、坐剤、分散剤などの任意の従来の形態であってもよく、従来の製剤担体及び賦形剤を用いて従来の様式で製造されてもよい。薬物成分は、好ましくは荷電分子、とりわけ高分子（例えば、２ｋＤａを超える分子量を有する）、例えば、高分子電解質もしくは両性電解質、特に、マイナスに荷電した分子である。したがって、例えば、薬物成分は、糖タンパク質（例えば、トランスフェリン）などの高分子複合体であってもよい。さらなる態様から見ると、本発明は、粘膜表面の通過を介した薬物成分の取り込みのための粘膜表面への投与のための薬物成分をさらに含む薬剤の製造のための、５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネート（好ましくは、好ましいものとして上記に記載されたオリゴグルロネート類の１種）の使用を提供する。またさらなる態様から見ると、本発明は、薬物成分に応答する症状に対処するために有効量の当該薬物成分をヒト又は非ヒト脊椎動物対象における粘膜表面に投与することによる当該対象の治療方法であって、当該薬物成分を、５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネート（好ましくは、好ましいものとして上記に記載されたオリゴグルロネート類の１種）と共に投与することを含むことを特徴とする方法を提供する。投与は、典型的には、経鼻的（吸入による）、経直腸的もしくは経膣的となる。薬物成分は、典型的には、その通常用量の５０〜１１０％で使用されることになる。
【００５７】
オリゴウロネートは、合成物質であってもよいが、好ましくは天然に存在する多糖類の誘導体である。それは、単一化合物であってもよいし、例えば、様々な重合度のオリゴウロネート化合物の混合物であってもよい。
【００５８】
多くの天然の多糖類が、しばしばマンヌロネート残基のブロック（いわゆるＭブロック）と共に、グルロネート残渣のブロック（いわゆるＧブロック）を含むブロック共重合体形態であるので、オリゴウロネート類は天然源から容易に入手可能である。Ｍブロック又はＭ／Ｇブロックは、本発明によるＧブロックの代わりに使用することができるが、しかしながら、これは好ましくない。
【００５９】
本発明に従って使用可能なオリゴウロネート類を製造するための多糖からオリゴ糖への開裂は、酵素消化及び酸加水分解などの従来の多糖類分解技術を使用して行われ得る。しかしながら、酸加水分解の使用が好ましい。次いで、所望のＤＰn及び分子量分布を有するオリゴウロネートは、イオン交換樹脂を用いてクロマトグラフィーにより、分別沈殿もしくは分別可溶化により、又は透析により多糖類分解産物から分離され得る。
【００６０】
適切な多糖類は、例えば、「ハイドロコロイドのハンドブック（Handbook of Hydrocolloids）」、フィリップス（Phillips）及びウィリアムズ（Williams）編、ＣＲＣ、ボカラトン、フロリダ州、米国、２０００年に記載されている。しかしながら、アルギン酸類は、マンヌロネート（Ｍ）及びグルロネート（Ｇ）のブロック共重合体として天然に存在し、Ｇブロックオリゴマーは、容易にアルギン酸源の材料から製造することができるので、アルギン酸類の使用がとりわけ好ましい。
【００６１】
オリゴウロネートの調製のために出発物質としてアルギン酸類が使用される場合、グルロネート含量は、所望であれば、Ａ．ビネランジーからのマンヌロナン（mannouronan）Ｃ−５エピメラーゼによるエピマー化により増加されてもよい。
【００６２】
本発明による使用に適切なオリゴグルロネート類は、コンブ（Laminaria hyperborea）からのアルギン酸の酸加水分解、中性のｐＨでの溶解、鉱酸を加えてｐＨを３．４まで減少させてのオリゴグルロネートの析出、弱酸を用いた洗浄、中性のｐＨでの再懸濁、及び凍結乾燥によって都合よく製造され得る。
【００６３】
本発明を今から、次の非限定的な実施例及び添付の図面を参照してさらに説明する。
【図面の簡単な説明】
【００６４】
【図１】図１ａ及び図１ｂ、図２ａ及び図２ｂ、ならびに図３ａ及び図３ｂは、経時的及び添加されたオリゴウロネートの作用としてのＣＯＰＤ患者からの痰におけるＧ*（上図）及びη*（下図）の変化を示す。
【図２】図１ａ及び図１ｂ、図２ａ及び図２ｂ、ならびに図３ａ及び図３ｂは、経時的及び添加されたオリゴウロネートの作用としてのＣＯＰＤ患者からの痰におけるＧ*（上図）及びη*（下図）の変化を示す。
【図３】図１ａ及び図１ｂ、図２ａ及び図２ｂ、ならびに図３ａ及び図３ｂは、経時的及び添加されたオリゴウロネートの作用としてのＣＯＰＤ患者からの痰におけるＧ*（上図）及びη*（下図）の変化を示す。
【図４】図４は、実施例７で使用されたＤＰnが１０のＧブロック材料及び、比較のための、高分子量の尾部が除去されていないＤＰnが１９の前駆体物質のダイオネクスクロマトグラムである。
【図５】図５は、図４のＧブロック材料の存在下での、モデル粘液の機械的性質の経時的な推移を示す。
【実施例】
【００６５】
実施例１
ＤＰn５〜１８のオリゴグルロネートナトリウムの調製
１．コンブ（Laminaria hyperborea）の茎からのグルロネートに富むアルギン酸（ｐＨ２〜３、１５〜４０乾燥重量％）を、鉱酸又は有機酸（好ましくは、ＨＣｌ）で、７０〜１００℃で２〜１２時間十分に加水分解させる。
２．加水分解後、オリゴ糖混合物のｐＨを３〜４まで増加させ、低イオン強度水で洗浄して、Ｍに富むフラグメント及び低分子量成分を除去する。
３．必要であれば、精製されたオリゴ糖混合物を、工程１及び２でのようにさらに加水分解及び精製する。
４．精製されたオリゴ糖混合物を、次いで、アルカリ（好ましくは、ＮａＯＨ又はＮａ2ＣＯ3）で中和して可溶性のＧブロックを得、そして含量（乾燥重量）を２．５〜２０％に調整する。
５．許容範囲の数平均重合度と分子量分布とを有する生成物を得るために、Ｇブロック溶液を２回ろ過する。まず、約１０００Ｄａのカットオフのフィルターに通してＤＰが５未満のオリゴマーを除去する。次いで、未透過物を約４０００Ｄａのカットオフのフィルターに通してろ過し、ＤＰが約２０を超えるＧブロックフラグメントを除去する。
６．必要であれば、得られた透過物の乾物含量を調整し、溶液を噴霧乾燥する。得られたオフホワイト色から淡黄色の粉末（生成物）は、１５％未満の含水率を有する。
【００６６】
実施例２
ＤＰn７〜１５のオリゴグルロネートナトリウムの調製
調製工程は以下のとおりである。
１．上記の実施例１と同様。
２．上記の実施例１と同様。
３．上記の実施例１と同様。
４．収率及び純度を至適化するために、オリゴ糖混合物の乾物含量を５〜１５％に調整し、オリゴ糖混合物を酢酸緩衝液（５０〜２５０ｍＭ）に溶解して、溶液の最終ｐＨを３．８〜５．０に到達させる。
５．酢酸緩衝液中の溶解したオリゴ糖を、７０〜１００℃で１〜１５時間さらに均一に加水分解して、高分子量フラグメントの含量を低下させ、生理活性Ｇブロックフラグメントを増加させる。
６．上記の実施例１の工程５及び６に記載のように、ろ過（脱塩も含む）及び噴霧乾燥を行う。
【００６７】
オリゴグルロネート類はまた、米国特許第６１２１４４１号及び米国特許第６４０７２２６号に記載のように調製されていてもよく、これら文献の内容は参照により本書に援用される。実際、本明細書における実施例１及び２の生成物は、有利には、出発物質として米国特許第６１２１４４１号に従って製造されたオリゴグルロネートを使用して製造されてもよい。
【００６８】
実施例３
特性解析及び品質管理
実施例１及び２に関して、中間生成物の検査を含んで、以下の技術が使用される。
【００６９】
純度（グルロネート残渣の含量）及び数平均重合度は、グラスダレン（Grasdalen）ら、カーボハイドレートリサーチ（Carbohydr. Res.）６８（１）：２３〜３１（１９７９）によって記載のように、1Ｈ−ＮＭＲ分光法により測定される。
【００７０】
ダイオネックス（Dionex）社により市販される、パルスアンペロメトリック検出と組み合わせた高精度アニオン性クロマトグラフィー（ＨＰＡＥＣ−ＰＡＤ）もまたオリゴマー物質の特性解析に使用される。Ｇブロックの特性解析には、以下の方法が使用される。
１．ＧブロックサンプルをＭＱ水に溶解する、１〜２ｍｇ／ｍｌ。
２．０．１ＭのＮａＯＨ溶液（炭酸塩を含まない）を移動相として使用し、かつ１．０Ｍの酢酸ナトリウムを溶出液として使用する。全ての溶液をヘリウムで脱気し、０．２２マイクロメートルのフィルターに通してろ過する。
３．２０マイクロリットルの試料を注入し、そしてＡＧ４Ａプレカラム及びイオンパック（IonPac）４×２５０ ＡＳ４Ａメインカラムを使用する。
４．カラムを、９０分以内で、０．１ＭのＮａＯＨ中０〜８７．５％の直線濃度勾配の酢酸ナトリウムで溶出する。溶出速度は、６５０〜７５０ｐｓｉの圧力レジームで１ｍｌ／分である。
５．鎖長に応じた応答係数を測定した後、各オリゴマーの濃度を計算することができ、これは数平均及び重量平均分子量のいずれも、そして分子量分布も求めることができることを示す。
【００７１】
行われ得るオリゴ糖のさらなる処理：この考察（つまり、関連するパラメーターが所望の範囲外にある場合）は、生成物の製造収率に関係する。高Ｇ含量のアルギン酸の任意の加水分解産物を必要とされるパラメーター範囲内に適合させることは問題ではないが、収率が低くなる可能性がある。収率を至適化し、なお必要とされるパラメーター範囲内に適合させるため、次の助言を提案することができる。
ａ）過度に低いＦG：さらなる加水分解（ＧＧ結合は酸加水分解に対してより安定している）又は／及びやや高いｐＨ値でのさらなる洗浄（Ｍに富むフラグメントは、Ｇに富むフラグメントより酸可溶性である）。
ｂ）「不適当」なＤＰn：平均ＤＰnが低すぎる場合、１ｋＤａフィルターを通すろ過を行うとロスが増えるので、収率が減少することになる。しかしながら、平均ＤＰnが高すぎると収率は増加し得るので、ここでは、強化された酸加水分解が、所望のパラメーター範囲内により多くの分子をもたらすことになる。
【００７２】
実施例４
投与用溶液
吸入用溶液は、実施例１及び２に従ってそれぞれ調製されたＤＰn５〜１８又は７〜１５のオリゴグルロネートナトリウムを６、８、及び１０重量％の濃度で注射用滅菌水に溶解することにより調製される。
【００７３】
これらのアリコートを、次いで、１〜５ｍＬ、好ましくは２〜３ｍＬの用量で肺投与用の噴霧式アプリケータに充填する。
【００７４】
さらなるアリコートは、スポイド付きのキャップを有するボトルに充填される。液滴は、例えば、片耳又は鼻孔ごとに２〜４滴で、鼻又は耳に投与されてもよい。
【００７５】
実施例５
膣ゲル
実施例１及び２に従って調製されたオリゴグルロネートナトリウムを、５及び１５重量％の濃度で、市販の膣潤滑用ゲル（例えば、Ｋ−Ｙゼリー（ジョンソン・アンド・ジョンソン（Johnson & Johnson）社から）又はアストログライド（バイオフィルム（BioFilm Inc）社から））と混合する。このゲルを、好ましくは授精又は性交の２〜４時間前に、充分に塗布する。
【００７６】
実施例７
ムチンに対する効果
痰の試料を、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）の患者から採取した。試料を、穏やかに撹拌し、少量ずつに分け、−４０℃で凍結及び保存した。
【００７７】
対照試料及び混合試料（痰及びＧブロック）を１分間穏やかに撹拌し、約１０ｍＢａｒで２×１分間脱気し、続いて、５分間冷蔵庫に入れた後、レオメータに移してから試験した。
【００７８】
純粋なＣＯＰＤ痰及び混合されたＣＯＰＤ痰の流動学的測定は、存在するいかなるタンパク質分解酵素の影響も最小限にするために、レオロジカ（Rheologica）社、ストレス−テック（Stress-Tech）汎用レオメータを用いて１０℃でプレート／コーン（４０ｍｍ／１0又は２５ｍｍ／１0、試料の量に応じて決定）に対して行なわれた。
【００７９】
純粋なＣＯＰＤ痰及びＧブロックと混合された痰の流動学的特性解析は、異なる４つの工程において行なわれた。
１．０．０３の一定の歪み及び１Ｈｚの周波数で２分間の振動歪み制御。
２．前せん断（２０ｓ-1のせん断速度で１分間）後に０．０３の一定の歪み及び１Ｈｚの周波数で６０分間の振動歪み制御。
３．０．０３の一定の歪みで、０．０１〜５Ｈｚの範囲で周波数掃引。
４．１Ｈｚで、０．０２〜２０Ｐａの範囲で応力掃引。
【００８０】
処理＃２（前せん断及び１時間の測定）は、示される実験結果の基準を示す。この処理は、０〜２４時間以内に２〜３回繰り返された。
【００８１】
３種類の生体外ＣＯＰＤ痰試料からの結果をここに報告する。試料は、「そのまま」（対照）そしてＧブロックを添加して流動学的に試験された。
・純粋な痰（対照）
・痰＋７５マイクロリットルの１５０ｍｇ／ｍｌ（０．５ｇの痰試料当たり）グルロネートナトリウムオリゴマーＤＰ１０
グルロネートナトリウムオリゴマーＤＰ１０は、次の特性を有していた。
ＦG０．７９、ＦM０．１１、ＦGG０．７６、ＦGM＝ＦMG０．０３、ＦMM０．０７、ＦMGG＝ＦGGM０．０２、ＦMGM０．０１、ＦGGG０．７４、ＦG（ｒｅｄ）０．１０、ＦG（ｔｏｔ）０．８９、ＤＰn１０
図１ａ、図２ａ、及び図３ａは、オリゴウロネートの導入後の、前せん断処理の終了後かつ任意の期間での、ＣＯＰＤ痰試料（オリゴウロネートを含有、及び非含有）の複素弾性率（Ｇ*）の推移を示す。図１ｂ、図２ｂ、及び図３ｂは、図１ａ、図２ａ、及び図３ａと同様の痰試料の複素粘度の推移を示す。
【００８２】
オリゴウロネートの添加は、明らかに、そして経時的に、生体外でのＣＯＰＤ痰の機械的性質を低下させる。複素動的弾性率及び複素動的粘度のいずれもかなり低下される。しかしながら、位相角の変化はＧ*及びη*の程度ほどは生じない（データ含まず）。これは、ムチンネットワークの機械的性質が維持されていることを明確に示すので最も重要である。
【００８３】
実施例８
シダ状化
ムチン組成物は以下のように調製された。
ａ）０．０５ＭのＮａＣｌ水溶液１ｍＬ当たり１８ｍｇのムチン、
ｂ）０．０５ＭのＮａＣｌ水溶液１ｍＬ当たり１８ｍｇのムチン及び１ｍｇのアルギン酸、ならびに
ｃ）０．０５ＭのＮａＣｌ１ｍＬ当たり１８ｍｇのムチン及び０．５ｍｇのグルロネートオリゴマー（ＤＰn＝１０、実施例７と同様）。
【００８４】
組成物を風乾させ、顕微鏡写真を記録した。これら（本明細書には含まず）は、グルロネートオリゴマーがシダ状化を促進することを明確に示した。
【００８５】
実施例９
粘液の機械的性質
２種のモデル粘液物質を調製した。１つ目は、水中の１８ｍｇ／ｍＬのムチン及び０．６ｍｇ／ｍＬのアルギン酸で、２つ目は、１８ｍｇ／ｍＬのムチンのみであった。４ｍｇ／ｍＬのＤＰnが１０であるＧブロック（実施例７と同様）又はＤＰnが１９のものをそれぞれに加え、各試料について経時的な複素動的弾性率Ｇ*の推移を記録した。Ｇ*は粘液の機械的性質を示す。結果を図５に示す。上から、ムチン／アルギン酸、ムチン、ＤＰn１９を有するムチン／アルギン酸、及びＤＰn１０を有するムチン／アルギン酸である。示されるように、高分子量の尾部を有さないＤＰnが１０のＧブロックは、ＤＰnが１９のＧブロックよりも粘液の固体様挙動を低下させる。図４は、使用された２種類のＧブロックのダイオネックスクロマトグラムである。示されるように、ＤＰnが１９の試料は右端に向かって肩（shoulder）を有しており、高分子量の尾部の存在を示している。
【００８６】
実施例１０
エタネルセプト組成物
ＤＰnが１０のＧブロック（実施例７と同様）を４０ｍｇ／ｍＬで５０ｍｇ／ｍＬの注射用エタネルセプト水溶液（アムジェン（Amgen）社、カリフォルニア州、米国、から登録商標エンブレル（Enbrel）として入手可能）に溶解する。
【００８７】
実施例１１
インフリキシマブ組成物
ＤＰnが１０のＧブロック（実施例７と同様）８ｍｇ／ｍＬ及びインフリキシマブ１０ｍｇ／ｍＬ（セントコア（Centocor）社、ペンシルベニア州、米国、から登録商標レミケード（Remicade）として入手可能）を滅菌水に溶解する。
【００８８】
実施例１２
リツキシマブ組成物
ＤＰnが１０のＧブロック（実施例７と同様）を１０ｍｇ／ｍＬで、１０ｍｇ／ｍＬの注射用リツキシマブ水溶液（ジェネンテック（Genentech）社、カリフォルニア州、米国、から登録商標リツキサン（Rituxan）として入手可能）に溶解する。
【００８９】
実施例１３
エリスロポエチン組成物
ＤＰnが１０のＧブロック（実施例７と同様）を８ｍｇ／ｍＬで、４０００Ｕ／ｍＬの注射用エポエチン・アルファ水溶液（アムジェン（Amgen）社、カリフォルニア州、米国、から登録商標エポジェン（Epogen）として入手可能）に溶解する。
【００９０】
実施例１４
Ｇ−ＣＳＦ組成物
ＤＰnが１０のＧブロック（実施例７と同様）を９ｍｇ／ｍＬで、１０ｍｇ／ｍＬの注射用ペグフィルグラスチム水溶液（アムジェン（Amgen）社、カリフォルニア州、米国、から登録商標ニューラスタ（Neulasta）として入手可能）に溶解する。
【００９１】
実施例１５
トラスツズマブ組成物
ＤＰnが１０のＧブロック（実施例７と同様）１５ｍｇ／ｍＬ及びトラスツズマブ（ジェネンテック（Genentech）社、カリフォルニア州、米国、から登録商標ハーセプチン（Herceptin）として入手可能）２２ｍｇ／ｍＬを注射剤静菌水に溶解する。
【００９２】
実施例１６
インターフェロン組成物
ＤＰnが１０のＧブロック（実施例７と同様）を１ｍｇ／ｍＬで、３０μｇ／ｍＬの注射用インターフェロン・ベータ−１ａ水溶液（バイオジェン・アイデック（Biogen Idec）社、ホーフトドルプ、オランダ、からの登録商標アボネックス（Avonex）として入手可能）に溶解する。
【００９３】
実施例１７
インスリン組成物
ＤＰnが１０のＧブロック（実施例７と同様）を１０ｍｇ／ｍＬで、１００Ｕ／ｍＬの注射用インスリン水溶液（イーライリリー（Ely Lilly）社、インディアナ州、米国、から登録商標ヒューマリン（Humulin）として入手可能）に溶解する。
【００９４】
実施例１０〜１７の組成物は、典型的には、経鼻的、経膣的、又は舌下的に、一般的には、これら実施例中で言及された市販の薬剤化合物の供給者によって推奨された規模の用量で投与されてもよい。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートと（ｂ）２０００Ｄａを超える分子量を有する高分子薬物とを含む医薬組成物。
【請求項２】
ヒト又は非ヒト脊椎動物対象における粘膜表面に前記薬剤を投与することを含む治療方法で用いる、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
７〜１５の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８５のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．１５以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを含む、請求項１及び２のいずれかに記載の組成物。
【請求項４】
ヒト又は非ヒト脊椎動物対象における粘膜表面に薬剤を投与することを含む治療方法で用いる、高分子薬物をさらに含む前記薬剤の製造のためのオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの使用。
【請求項５】
ヒト又は非ヒト脊椎動物対象に、有効量の高分子薬物を含む医薬組成物を投与することを含む治療方法であって、前記対象の粘膜表面に前記薬物を有効量のオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートと共に共投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項６】
ヒト又は非ヒト脊椎動物対象における粘膜表面の粘膜の粘性を減少させるための前記対象の治療方法であって、前記方法は、５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを有効量前記粘膜表面に投与することを含む方法。
【請求項７】
５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの水溶液を含む噴霧可能な無菌水性液状組成物であって、前記溶液は前記オリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを４０〜１４０ｍｇ／ｍＬ（ナトリウム塩基準）の濃度で含む、組成物。
【請求項８】
７〜１５の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８５のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．１５以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの請求項７に記載の溶液。
【請求項９】
貯留槽及び飛沫発生器を含む噴霧式アプリケータであって、前記貯留槽は請求項７及び８のいずれかの無菌水溶液又は組成物を含む、噴霧式アプリケータ。
【請求項１０】
医薬に用いるための、７〜１５の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート類又はオリゴガラクツロネート類。
【請求項１１】
粘膜表面への投与により前記表面での粘膜の粘性を減少させるための内科的治療方法で用いる薬剤の製造のための、７〜１５の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの使用。
【請求項１２】
粘膜表面への投与により前記表面での粘膜の粘性を減少させるための内科的治療方法で用いる、７〜１５の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８５のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．１５以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを４０〜１４０ｍｇ／ｍＬ（ナトリウム塩基準）の濃度で無菌水溶液中に含む薬剤の製造のための、前記オリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの使用。
【請求項１３】
ヒト又は非ヒト脊椎動物対象における粘膜表面の粘膜の粘性を減少させるための前記対象の治療方法であって、７〜１５の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを有効量前記表面に投与することを含む方法。
【請求項１４】
ヒト又は非ヒト脊椎動物対象における粘膜表面の粘膜の粘性を減少させるための前記対象の治療方法であって、７〜１５の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８５のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．１５以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを４０〜１４０ｍｇ／ｍＬ（ナトリウム塩基準）の濃度で含む無菌水溶液を有効量前記表面に投与することを含む方法。
【請求項１５】
薬物成分に応答する症状に対処するために、粘膜表面の通過を介した前記薬物成分の取り込みのための粘膜表面への投与のための、前記薬物成分をさらに含む薬剤の製造のための、５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの使用。
【請求項１６】
薬物成分に応答する症状に対処するために、ヒト又は非ヒト脊椎動物対象における粘膜表面に有効量の前記薬物成分を投与することによる前記対象の治療方法であって、前記薬物成分を、５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートと共に投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項１】
（ａ）５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートと（ｂ）２０００Ｄａを超える分子量を有する高分子薬物とを含む医薬組成物。
【請求項２】
ヒト又は非ヒト脊椎動物対象における粘膜表面に前記薬剤を投与することを含む治療方法で用いる、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
７〜１５の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８５のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．１５以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを含む、請求項１及び２のいずれかに記載の組成物。
【請求項４】
ヒト又は非ヒト脊椎動物対象における粘膜表面に薬剤を投与することを含む治療方法で用いる、高分子薬物をさらに含む前記薬剤の製造のためのオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの使用。
【請求項５】
ヒト又は非ヒト脊椎動物対象に、有効量の高分子薬物を含む医薬組成物を投与することを含む治療方法であって、前記対象の粘膜表面に前記薬物を有効量のオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートと共に共投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項６】
ヒト又は非ヒト脊椎動物対象における粘膜表面の粘膜の粘性を減少させるための前記対象の治療方法であって、前記方法は、５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを有効量前記粘膜表面に投与することを含む方法。
【請求項７】
５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの水溶液を含む噴霧可能な無菌水性液状組成物であって、前記溶液は前記オリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを４０〜１４０ｍｇ／ｍＬ（ナトリウム塩基準）の濃度で含む、組成物。
【請求項８】
７〜１５の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８５のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．１５以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの請求項７に記載の溶液。
【請求項９】
貯留槽及び飛沫発生器を含む噴霧式アプリケータであって、前記貯留槽は請求項７及び８のいずれかの無菌水溶液又は組成物を含む、噴霧式アプリケータ。
【請求項１０】
医薬に用いるための、７〜１５の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート類又はオリゴガラクツロネート類。
【請求項１１】
粘膜表面への投与により前記表面での粘膜の粘性を減少させるための内科的治療方法で用いる薬剤の製造のための、７〜１５の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの使用。
【請求項１２】
粘膜表面への投与により前記表面での粘膜の粘性を減少させるための内科的治療方法で用いる、７〜１５の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８５のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．１５以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを４０〜１４０ｍｇ／ｍＬ（ナトリウム塩基準）の濃度で無菌水溶液中に含む薬剤の製造のための、前記オリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの使用。
【請求項１３】
ヒト又は非ヒト脊椎動物対象における粘膜表面の粘膜の粘性を減少させるための前記対象の治療方法であって、７〜１５の範囲の数平均重合度、少なくとも０．９２のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．０８以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを有効量前記表面に投与することを含む方法。
【請求項１４】
ヒト又は非ヒト脊椎動物対象における粘膜表面の粘膜の粘性を減少させるための前記対象の治療方法であって、７〜１５の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８５のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．１５以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が１７未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートを４０〜１４０ｍｇ／ｍＬ（ナトリウム塩基準）の濃度で含む無菌水溶液を有効量前記表面に投与することを含む方法。
【請求項１５】
薬物成分に応答する症状に対処するために、粘膜表面の通過を介した前記薬物成分の取り込みのための粘膜表面への投与のための、前記薬物成分をさらに含む薬剤の製造のための、５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートの使用。
【請求項１６】
薬物成分に応答する症状に対処するために、ヒト又は非ヒト脊椎動物対象における粘膜表面に有効量の前記薬物成分を投与することによる前記対象の治療方法であって、前記薬物成分を、５〜１８の範囲の数平均重合度、少なくとも０．８０のグルロネート（又はガラクツロネート）画分（ＦG）、０．２０以下のマンヌロネート画分（ＦM）を有し、かつ少なくとも９５モル％が２０未満の重合度を有する生理学的に許容されるオリゴグルロネート又はオリゴガラクツロネートと共に投与することを含むことを特徴とする方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【公表番号】特表２０１０−５２３６３６（Ｐ２０１０−５２３６３６Ａ）
【公表日】平成２２年７月１５日（２０１０．７．１５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５０２５７２（Ｐ２０１０−５０２５７２）
【出願日】平成２０年４月１１日（２００８．４．１１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００８／００１２８７
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１２５８２８
【国際公開日】平成２０年１０月２３日（２００８．１０．２３）
【出願人】（５０６１４５０５０）エヌティーエヌユー テクノロジー トランスファー エーエス (8)
【氏名又は名称原語表記】ＮＴＮＵ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ ＴＲＡＮＳＦＥＲ ＡＳ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年７月１５日（２０１０．７．１５）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年４月１１日（２００８．４．１１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００８／００１２８７
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１２５８２８
【国際公開日】平成２０年１０月２３日（２００８．１０．２３）
【出願人】（５０６１４５０５０）エヌティーエヌユー テクノロジー トランスファー エーエス (8)
【氏名又は名称原語表記】ＮＴＮＵ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ ＴＲＡＮＳＦＥＲ ＡＳ
【Ｆターム（参考）】
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