本発明は、細胞毒性化合物の優先的移入によって癌細胞を死滅させるかその成長を阻害するための方法及び材料を開示する。細胞毒性化合物の優先的移入は、アズリンのｐ１８及びｐ２８切断型等のクプレドキシンに由来するタンパク質形質導入ドメインを使用することで達成される。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌細胞を細胞毒性クプレドキシンに接触させることで前記癌細胞を死滅させることを含む方法であって、前記細胞毒性クプレドキシンが１又は複数のエンドサイトーシス経路を介して前記癌細胞に優先的に移入し、前記細胞毒性クプレドキシンがアズリンの切断型であり、前記アズリンの切断型が配列番号２のＣ末端のアミノ酸を含む、方法。
【請求項２】
前記アズリンの切断型が緑膿菌に由来する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記アズリンの切断型が配列番号２を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記アズリンの切断型が配列番号２からなる、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記細胞毒性クプレドキシンがカベオラ介在性エンドサイトーシスを介して前記癌細胞に優先的に移入する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記癌細胞への前記細胞毒性クプレドキシンの移入が、ゴルジ装置に仲介される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記細胞毒性クプレドキシンが、前記癌細胞の状態に関係なく前記癌細胞の細胞膜に接触できるアミノ酸を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記細胞毒性クプレドキシンが前記癌細胞の細胞膜上のアミノ酸に接触する、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記細胞毒性クプレドキシンが前記癌細胞の細胞膜上の細胞表面ペプチドに接触する、請求項７に記載の方法
【請求項１０】
前記細胞毒性クプレドキシンが前記癌細胞の細胞膜上の受容体に接触する、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
前記細胞毒性クプレドキシンが、配列番号１の６９、７０、７５、７６、及び８５位に位置するアミノ酸のそれぞれを含む、請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
前記細胞毒性クプレドキシンが、配列番号３５、配列番号３６、及び配列番号３７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項１３】
前記細胞毒性クプレドキシンが、配列番号３５、配列番号３６、及び配列番号３７からなる群から選択されるアミノ酸配列からなる、請求項７に記載の方法。
【請求項１４】
癌細胞の細胞膜に接触することができ、カベオラ介在性エンドサイトーシスを介して前記癌細胞に移入することができ、前記癌細胞を死滅させることができ、配列番号２のＣ末端のアミノ酸を含む、単離されたペプチド。
【請求項１５】
前記単離されたペプチドが、前記癌細胞の細胞膜上のアミノ酸に接触する、請求項１４に記載の単離されたペプチド。
【請求項１６】
前記単離されたペプチドが、前記癌細胞の細胞膜上の細胞表面ペプチドに接触する、請求項１４に記載の単離されたペプチド。
【請求項１７】
前記単離されたペプチドが、前記癌細胞の細胞膜上の受容体に接触する、請求項１４に記載の単離されたペプチド。
【請求項１８】
前記癌細胞中への前記単離されたペプチドの移入がゴルジ装置に仲介される、請求項１４に記載の単離されたペプチド。
【請求項１９】
前記単離されたペプチドが緑膿菌（Ｐｓｕｅｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）に由来する、請求項１４に記載の単離されたペプチド。
【請求項２０】
前記単離されたペプチドが配列番号２を含む、請求項１４に記載の単離されたペプチド。
【請求項２１】
前記単離されたペプチドが配列番号２からなる、請求項１４に記載の単離されたペプチド。
【請求項２２】
前記単離されたペプチドが、配列番号３５、配列番号３６、及び配列番号３７配列番号３６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１４に記載の単離されたペプチド。
【請求項２３】
前記単離されたペプチドが、配列番号３５、配列番号３６、及び配列番号３７配列番号３６からなる群から選択されるアミノ酸配列からなる、請求項１４に記載の単離されたペプチド。
【請求項２４】
癌細胞の細胞膜に接触することができ、カベオラ介在性エンドサイトーシスを介して前記癌細胞に移入することができ、前記癌細胞を死滅させることができ、配列番号１の６９、７０、７５、７６、及び８５位に見られるアミノ酸の１又は複数を含む、単離されたペプチド。
【請求項２５】
前記単離されたペプチドが、配列番号１の６９、７０、７５、７６、及び８５位に位置するアミノ酸のそれぞれを含む、請求項２４に記載の単離されたペプチド。
【請求項２６】
前記単離されたペプチドが、前記癌細胞の細胞膜上のアミノ酸に接触する、請求項２４に記載の単離されたペプチド。
【請求項２７】
前記単離されたペプチドが、前記癌細胞の細胞膜上の細胞表面ペプチドに接触する、請求項２４に記載の単離されたペプチド。
【請求項２８】
前記単離されたペプチドが、前記癌細胞の細胞膜上の受容体に接触する、請求項２４に記載の単離されたペプチド。
【請求項２９】
請求項１４に記載の単離されたペプチドを含む医薬組成物。
【請求項３０】
薬学的に許容されるキャリアを更に含む、請求項２９に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
前記薬学的に許容されるキャリアが静脈内投与に適したものである、請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
治療有効量の請求項２９に記載の医薬組成物を哺乳動物患者に投与することによって前記患者を処置することを含む方法。
【請求項３３】
前記患者がヒトである、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記患者が、一般集団よりも癌を発達させるリスクが高い患者である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記癌が、メラノーマ、乳癌、膵臓癌、膠芽腫、アストロサイトーマ、肺癌、結腸直腸癌、頭頸部癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、及び子宮頚癌から選択される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記患者が少なくとも１つの高リスク特性を有する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３７】
前記患者が前悪性病変を有する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３８】
前記患者が癌又は前悪性病変の治療歴を有する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３９】
前記医薬組成物が、静脈内注射、筋肉注射、皮下注射、吸入、局所投与、経皮パッチ、坐剤、硝子体内注射、及び経口からなる群から選択される形態で投与される、請求項３２に記載の方法。
【請求項４０】
前記投与形態が静脈内注射である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
バイアル中に請求項２９に記載の組成物を含むキット。
【請求項４２】
請求項２４に記載の単離されたペプチドを含む医薬組成物。
【請求項４３】
薬学的に許容されるキャリアを更に含む、請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
前記薬学的に許容されるキャリアが静脈内投与に適したものである、請求項４３に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
治療有効量の請求項４２に記載の組成物を哺乳動物患者に投与することで前記患者を処置することを含む方法。
【請求項４６】
前記患者がヒトである、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記患者が、一般集団よりも癌を発達させるリスクが高い患者である、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記癌が、メラノーマ、乳癌、膵臓癌、膠芽腫、アストロサイトーマ、肺癌、結腸直腸癌、頭頸部癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、及び子宮頸癌から選択される、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記患者が少なくとも１つの高リスク特性を有する、請求項４６に記載の方法。
【請求項５０】
前記患者が前悪性病変を有する、請求項４６に記載の方法。
【請求項５１】
前記患者が癌又は前悪性病変の治療歴を有する、請求項４６に記載の方法。
【請求項５２】
前記医薬組成物が、静脈内注射、筋肉注射、皮下注射、吸入、局所投与、経皮パッチ、坐剤、硝子体内注射、及び経口からなる群から選択される形態で投与される、請求項４５に記載の方法。
【請求項５３】
前記投与形態が静脈内注射である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
バイアル中に請求項４２に記載の組成物を含むキット。
【請求項５５】
請求項１４に記載の単離されたペプチド及びカーゴ化合物を含む医薬組成物。
【請求項５６】
前記単離されたペプチドが前記カーゴ化合物に連結されている、請求項５５に記載の医薬組成物。
【請求項５７】
前記カーゴ化合物がタモキシフェンである、請求項５６に記載の医薬組成物。
【請求項５８】
前記カーゴ化合物が、タンパク質、リポタンパク質、ポリペプチド、ペプチド、多糖、核酸、色素、微粒子、ナノ粒子、トキシン、及び薬物からなる群から選択される、請求項５５に記載の医薬組成物。
【請求項５９】
前記カーゴ化合物が検出可能な物質である、請求項５５に記載の医薬組成物。
【請求項６０】
前記カーゴ化合物が、Ｘ線ＣＴによって検出可能なＸ線造影剤である、請求項５９に記載の医薬組成物。
【請求項６１】
前記カーゴ化合物がＭＲＩによって検出可能な磁気共鳴画像法の造影剤である、請求項５９に記載の医薬組成物。
【請求項６２】
前記カーゴ化合物が、超音波造影剤であり、超音波によって検出可能である、請求項５９に記載の医薬組成物。
【請求項６３】
薬学的に好適なキャリアを更に含む、請求項５５に記載の医薬組成物。
【請求項６４】
細胞を請求項５５に記載の医薬組成物と接触させることでカーゴ化合物を前記細胞中に送達することを含む方法。
【請求項６５】
請求項５９に記載の医薬組成物を患者に投与することで癌を診断することを含む方法。
【請求項６６】
請求項２４に記載の単離されたペプチド及びカーゴ化合物を含む医薬組成物。
【請求項６７】
前記単離されたペプチドが前記カーゴ化合物に連結されている、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項６８】
前記カーゴ化合物がタモキシフェンである、請求項６７に記載の医薬組成物。
【請求項６９】
前記カーゴ化合物が、タンパク質、リポタンパク質、ポリペプチド、ペプチド、多糖、核酸、色素、微粒子、ナノ粒子、毒素、及び薬物からなる群から選択される、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項７０】
前記カーゴ化合物が検出可能な物質である、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項７１】
前記カーゴ化合物がＸ線ＣＴによって検出可能なＸ線造影剤である、請求項７０に記載の医薬組成物。
【請求項７２】
前記カーゴ化合物がＭＲＩによって検出可能な磁気共鳴画像法の造影剤である、請求項７０に記載の医薬組成物。
【請求項７３】
前記カーゴ化合物が、超音波造影剤であり、超音波によって検出可能である、請求項７０に記載の医薬組成物。
【請求項７４】
薬学的に好適なキャリアを更に含む、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項７５】
細胞を請求項６６に記載の医薬組成物と接触させることでカーゴ化合物を前記細胞中に送達することを含む方法。
【請求項７６】
請求項７０に記載の医薬組成物を患者に投与することで癌を診断することを含む方法。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図１Ｃ】

【図１Ｄ】

【図１Ｅ】

【図１Ｆ】

【図１Ｇ】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０−１】

【図１０−２】


【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４Ａ】

【図１４Ｂ】

【図１４Ｃ】

【図１４Ｄ】

【図１５】

【図１６Ａ】

【図１６Ｂ】

【図１６Ｃ】

【図１６Ｄ】

【図１６Ｅ】

【図１６Ｆ】

【図１６Ｇ】

【図１６Ｈ】

【図１７】

【図１８Ａ】

【図１８Ｂ】

【図１８Ｃ】

【図１９Ａ】

【図１９Ｂ】

【図１９Ｃ】

【図２０】

【図２１】

【図２１Ｂ】

【図２２Ａ】

【図２２Ｂ】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【図３５Ａ】

【図３５Ｂ】

【図３６】

【図３７Ａ】

【図３７Ｂ】

【図３８Ａ】

【図３８Ｂ】

【図３９】

【図４０Ａ】

【図４０Ｂ】

【図４１】

【図４２】

【図４３】

【図４４】

【図４５Ａ】

【図４５Ｂ】

【図４５Ｃ】

【図４５Ｄ】

【図４６】

【図４７Ａ】

【図４７Ｂ】

【図４７Ｃ】

【図４８Ａ】

【図４８Ｂ】

【図４９】

【図５０】

【図５１】

【図５２】

【図５３】

【図５４Ａ】

【図５４Ｂ】

【図５４Ｃ】

【図５５】

【図５６】

【図５７−１】

【図５７−２】

【図５８Ａ】

【図５８Ｂ】

【図５８Ｃ】

【公表番号】特表２０１２−５１２８９２（Ｐ２０１２−５１２８９２Ａ）
【公表日】平成２４年６月７日（２０１２．６．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５４２４４２（Ｐ２０１１−５４２４４２）
【出願日】平成２１年１２月１７日（２００９．１２．１７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０６８５０１
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０８０５０６
【国際公開日】平成２２年７月１５日（２０１０．７．１５）
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．フロッピー
【出願人】（５１１１４８７５４）シーディージー　セラピューティクス，インコーポレイテッド (5)
【Ｆターム（参考）】