コンパニオンアニマルにおいて体重に関連する障害を処置および予防するための組成物および方法
本発明はコンパニオンアニマルにおいて障害を処置および／または予防するための組成物および方法を含み、ここでその組成物および方法は、そのコンパニオンアニマルにリポ酸またはその塩を含む組成物を与えることを含む。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
[001] 本発明は、コンパニオンアニマルにおいて体重に関連する障害を処置および／または予防するための組成物および方法を含み、ここでその組成物および方法は、そのコンパニオンアニマルにリポ酸またはその塩を含む組成物を与えることを含む。
【背景技術】
【０００２】
[002] 動物の健康の重要な指標は、その動物の体組成である。不健康な食事および／または不健康な生活習慣は、結果として特に体内の赤身の筋肉（ｌｅａｎ ｍｕｓｃｌｅ）に関して不健康な体脂肪の比率を有する動物をもたらし得る。３０重量％を超える体脂肪の量は、特に体脂肪の量が３５重量％を超えている場合、その動物が不健康であることを示していると考えられる。
【０００３】
[003] 本発明は、現在市場に出されている健康な体組成を維持または促進するためのコンパニオン用フード製品を超える、増大した療法的および予防的効能を有する、コンパニオンアニマルのためのペットフード組成物を含む。
【発明の概要】
【０００４】
[004] 発明者は、動物における障害を処置または予防するためのフード組成物およびその組成物を用いる方法を開発した。
[005] 本発明は、健康な体組成の維持または促進、例えばコンパニオンアニマルにおける体重または体脂肪の減少、赤身の筋肉量の百分率の増大のための方法を含み、それはその動物に健康な体組成を促進または維持するのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む組成物を与えることを含む。
【発明を実施するための形態】
【０００５】
全般的な記述
[006] 本発明は、それを必要とするコンパニオンアニマルにおいて障害を予防または処置するために有効な量のリポ酸またはその塩を含むフード組成物を含む。
【０００６】
[007] １態様は、コンパニオンアニマルにおいて健康な体組成を維持または促進するための方法を含み、それはその動物に健康な体組成を維持または促進するのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む組成物を与えることを含む。
【０００７】
[008] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約２５ｐｐｍである。
[009] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約５０ｐｐｍである。
[0010] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約１００ｐｐｍである。
【０００８】
[0011] 特定の態様において、その有効量は約１００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである。
[0012] 特定の態様において、その有効量は約１００ｐｐｍ〜約２００ｐｐｍである。
[0013] 特定の態様において、そのコンパニオンアニマルはイヌである。
【０００９】
[0014] 特定の態様において、そのコンパニオンアニマルはネコである。
[0015] 特定の態様において、その組成物はさらにタンパク質、脂肪、炭水化物、繊維、およびそれらの組み合わせを含む。
【００１０】
[0016] 特定の態様において、その組成物はドッグフードである。
[0017] 特定の態様において、その組成物はキャットフードである。
[0018] 特定の態様において、その組成物はフード、栄養食、サプリメント、動物用トリーツ、または玩具である。
【００１１】
[0019] 特定の態様において、その組成物は含水フードの形である。
[0020] 特定の態様において、その組成物は乾燥フードの形である。
[0021] 別の態様は、コンパニオンアニマルにおいて体重の減少を誘導するための方法を含み、それはその動物に体重の減少を誘導するのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む組成物を与えることを含む。
【００１２】
[0022] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約２５ｐｐｍである。
[0023] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約５０ｐｐｍである。
[0024] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約１００ｐｐｍである。
【００１３】
[0025] 特定の態様において、その有効量は約１００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである。
[0026] 特定の態様において、その有効量は約１００ｐｐｍ〜約２００ｐｐｍである。
[0027] 特定の態様において、その組成物はさらにタンパク質、脂肪、炭水化物、繊維、およびそれらの組み合わせを含む。
【００１４】
[0028] 特定の態様において、その組成物はドッグフードである。
[0029] 特定の態様において、その組成物はキャットフードである。
[0030] 特定の態様において、その組成物はフード、栄養食、サプリメント、動物用トリーツ、または玩具である。
【００１５】
[0031] 特定の態様において、その組成物は含水フードの形である。
[0032] 特定の態様において、その組成物は乾燥フードの形である。
[0033] 特定の態様において、そのコンパニオンアニマルはイヌである。
【００１６】
[0034] 特定の態様において、そのコンパニオンアニマルはネコである。
[0035] 本発明の別の態様は、コンパニオンアニマルにおいて体脂肪の減少を誘導するための方法を含み、それはその動物に体脂肪の減少を誘導するのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む本発明の組成物を与えることを含む。
【００１７】
[0036] 特定の態様において、リポ酸の有効量は少なくとも約２５ｐｐｍである。
[0037] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約５０ｐｐｍである。
[0038] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約１００ｐｐｍである。
【００１８】
[0039] 特定の態様において、その有効量は約１００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである。
[0040] 特定の態様において、その有効量は約１００ｐｐｍ〜約２００ｐｐｍである。
[0041] 特定の態様において、その組成物はさらにタンパク質、脂肪、炭水化物、繊維、およびそれらの組み合わせを含む。
【００１９】
[0042] 特定の態様において、その組成物はドッグフードである。
[0043] 特定の態様において、その組成物はキャットフードである。
[0044] 特定の態様において、その組成物はフード、栄養食、サプリメント、動物用トリーツ、または玩具である。
【００２０】
[0045] 特定の態様において、その組成物は含水フードの形である。
[0046] 特定の態様において、その組成物は乾燥フードの形である。
[0047] 特定の態様において、そのコンパニオンアニマルはイヌである。
【００２１】
[0048] 特定の態様において、そのコンパニオンアニマルはネコである。
[0049] 本発明の別の態様は、コンパニオンアニマルにおいて赤身の筋肉量の百分率を増大させるための方法を含み、それはその動物に赤身の筋肉量の百分率を増大させるのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む本発明の組成物を与えることを含んでいた。
【００２２】
[0050] 特定の態様において、リポ酸の有効量は少なくとも約２５ｐｐｍである。
[0051] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約５０ｐｐｍである。
[0052] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約１００ｐｐｍである。
【００２３】
[0053] 特定の態様において、その有効量は約１００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである。
[0054] 特定の態様において、その有効量は約１００ｐｐｍ〜約２００ｐｐｍである。
[0055] 特定の態様において、その組成物はさらにタンパク質、脂肪、炭水化物、繊維、およびそれらの組み合わせを含む。
【００２４】
[0056] 特定の態様において、その組成物はドッグフードである。
[0057] 特定の態様において、その組成物はキャットフードである。
[0058] 特定の態様において、その組成物はフード、栄養食、サプリメント、動物用トリーツ、または玩具である。
【００２５】
[0059] 特定の態様において、その組成物は含水フードの形である。
[0060] 特定の態様において、その組成物は乾燥フードの形である。
[0061] 特定の態様において、そのコンパニオンアニマルはイヌである。
【００２６】
[0062] 特定の態様において、そのコンパニオンアニマルはネコである。
[0063] 本発明において用いられる用語“コンパニオンアニマル”は、イヌ、ネコ、およびげっ歯類を含む、ヒトによりペットとして維持されるのに適したあらゆる非ヒト動物を含む。本発明の全ての観点は、好ましくはネコおよび／またはイヌの処置に関するものである。
【００２７】
[0064] 用語“イヌ”には、コンパニオンアニマル、例えばカニスファミリアス（Ｃａｎｉｓ ｆａｍｉｌｉａｒｉｓ）、作業犬（ｗｏｒｋｉｎｇ ｄｏｇｓ）、および同様のものであるイヌが含まれる。イヌという用語はイヌ科の動物という用語と同意語である。
【００２８】
[0065] 用語“ネコ”には、飼い猫または家猫として知られるコンパニオンアニマルであるネコが含まれる。
[0066] 用語“げっ歯類”には、ハムスター、マウス、ラット、モルモット、アレチネズミ、ウサギ、ハリネズミ、フェレット、チンチラ等が含まれるが、それらに限定されない。
【００２９】
[0067] 本明細書で示される全ての百分率は、別途明記しない限り、乾燥物質に基づく、組成物の重量によるものである。
本発明の組成物
[0068] 本発明の１態様は、有効量のリポ酸またはその塩を含む、コンパニオンアニマルのための組成物を含む。
【００３０】
[0069] 本明細書において用いられる用語“リポ酸またはその塩”には、例えばアルファ−リポ酸、リポ酸類のラセミ混合物、リポ酸塩、エステル、アミドまたはそれらの誘導体、例えば米国特許第５，６２１，１１７号において記述されているようなものが含まれるが、それらに限定されない。様々な態様において、そのリポ酸は湿潤または乾燥フード組成物を含む組成物において投与することができ、それは含水フード、乾燥フード、サプリメントまたはトリーツの形であってよい。そのリポ酸はその中に、もしくはあらゆるフード組成物の表面上において、例えばその上への吹付けもしくは沈殿により組み込まれてよく、またはその飼料にスナック、サプリメント、トリーツとして、もしくはその飼料の液体部分、例えば水もしくは別の液体中で添加されてよい。そのリポ酸は、粉末、固体として、またはゲルを含む液体として投与されてよい。重要な観点は、その動物がプラスの効果をもたらすのに有効な量のリポ酸を与えられることである。典型的には、リポ酸の源はその組成物中に、その動物にとって非毒性であるままである量までの量で存在する。
【００３１】
[0070] アルファ−リポ酸の量は、少なくとも約２５ｐｐｍ、約５０ｐｐｍ、約１００ｐｐｍ、約２００ｐｐｍ、約３００ｐｐｍ、約５００ｐｐｍ、約７００ｐｐｍ、約９００ｐｐｍ、約１１００ｐｐｍ、約１２００ｐｐｍ、約１４００ｐｐｍ、約１６００ｐｐｍ、約１８００ｐｐｍ、約２０００ｐｐｍ、約２２００ｐｐｍ、約２４００ｐｐｍ、約２６００ｐｐｍ、約２８００ｐｐｍ、約３０００ｐｐｍ、または約３５００ｐｐｍから様々であることができる。様々な態様において、イヌに投与することができるリポ酸の範囲は、約１５０ｐｐｍ〜約４５００ｐｐｍである。様々な態様において、ネコに投与することができるリポ酸の範囲は、約６５ｐｐｍ〜約２６００ｐｐｍである。特定の説明的な態様において、量は約１００ｐｐｍからそのペットにとって非毒性であるままである量まで様々であることができる。他の態様において、範囲は約１００ｐｐｍから約２００ｐｐｍまでである。
【００３２】
[0071] 様々な態様において、リポ酸を含むフード組成物は、意図される受容動物に実質的に栄養上完全な飼料を提供する。“栄養上完全な飼料”は、その飼料において健康な動物の正常な健康の維持に十分な栄養を含む飼料である。
【００３３】
[0072] そのリポ酸またはその塩は、意図される動物の健康に有害ではない濃度で存在する。従って、例えば、そのリポ酸またはその塩は、望ましくない、または毒性の作用を引き起こさない濃度で存在する。
【００３４】
[0073] その組成物は液体または固体のフードであることができる。その組成物が液体である場合、そのリポ酸またはその塩は他の構成要素と混合されることができる。その組成物が固体である場合、そのリポ酸はその組成物上にコートされていて、その組成物の中に組み込まれていて、または両方であってよい。
【００３５】
[0074] 様々な態様において、そのリポ酸またはその塩は動物のフードに添加されてよい。様々な態様において、そのリポ酸またはその塩は動物のフードに、配合業者または製造業者により現場で、または動物の介護者（ｃａｒｅｇｉｖｅｒ）によりその動物に餌を与える前に添加されてよい。様々な態様において、そのリポ酸またはその塩は動物のフードの加工の間、例えばその組成物の他の構成要素の混合の間および／または後に添加されてよく、次いでそれが包装され、消費者に入手可能になる。その加工には、押し出し、缶詰め、ベーキング、および同様のこと、または当技術で既知であるペットフードを製造するあらゆる他の方法もしくはプロセスが含まれてよい。様々な態様において、そのリポ酸もしくはその塩は動物もしくは植物構成要素のような天然源により寄与されてよく、またはそのリポ酸もしくはその塩は合成に由来する源により寄与されてよく、またはそのリポ酸もしくはその塩は天然および合成的な源の混合物により寄与されてよい。
【００３６】
[0075] その組成物は、リポ酸またはその塩に加えて、コンパニオンアニマルによる消費に適した少なくとも１種類の構成要素を含み、それには脂肪、炭水化物、タンパク質、繊維、栄養調整剤（ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ ｂａｌａｎｃｉｎｇ ａｇｅｎｔｓ）、例えばビタミン類、鉱質、および微量元素、ならびにそれらの混合物が含まれるが、それらに限定されない。当業者は、典型的なフードに関するフード成分の量およびタイプを、その動物の食事要求量に基づいて、例えばその動物の種、年齢、大きさ、体重、健康、および機能に基づいて選択することができる。
【００３７】
[0076] そのフード組成物のフード成分部分は、約１００％までのあらゆる個々のフード成分を含むことができ、またはフード成分の様々な比率での混合物を含むことができる。特定の態様において、そのフード組成物は次の量でのフード成分の組み合わせを含む：約０重量％〜約５０重量％の脂肪、約０重量％〜約７５重量％の炭水化物、約０重量％〜約９５重量％のタンパク質、約０重量％〜約４０重量％の食物繊維、および約０重量％〜約１５重量％の１種類以上の栄養調整剤。
【００３８】
[0077] 特定の態様において、その脂肪および炭水化物フード成分は様々な源、例えば動物脂肪、魚油、植物油、肉、肉の副産物、穀物、他の動物または植物源、およびそれらの混合物から得られる。穀物には小麦、トウモロコシ、大麦、および米が含まれる。
【００３９】
[0078] 特定の態様において、そのタンパク質フード成分は様々な源、例えば植物、動物、または両方から得られる。動物性タンパク質には、肉、肉の副産物、牛乳系のもの（ｄａｉｒｙ）、および卵が含まれる。肉には家禽、魚、および動物、例えばウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、および同様のものからの肉が含まれ、肉の副産物には肺、腎臓、脳、肝臓、胃、および腸が含まれる。そのタンパク質フード成分は、遊離のアミノ酸および／またはペプチドであってもよい。好ましくは、そのタンパク質フード成分には肉、肉の副産物、乳製品、または卵が含まれる。
【００４０】
[0079] 特定の態様において、その繊維フード成分は様々な源、例えば植物繊維源、例えばセルロース、テンサイパルプ、落花生殻および大豆繊維から得られる。
[0080] 特定の態様において、その栄養調整剤は、当業者に既知の様々な源、例えばビタミンおよび鉱質サプリメントならびにフード成分から得られる。ビタミン類および鉱質は、欠乏を避け健康を維持するのに必要な量で含まれることができる。これらの量は当技術においてすぐに入手可能である。国家研究会議（ＮＲＣ）は、家畜に関するそのような栄養素の推奨量を提供している。例えば、Nutrient Requirements of Swine (第１０改訂版、Nat’l Academy Press、ワシントンD.C.、1998)、Nutrient Requirements of Poultry (第９改訂版、Nat’l Academy Press、ワシントンD.C.、1994)、Nutrient Requirements of Horses (第５改訂版、Nat’l Academy Press、ワシントンD.C.、1989)を参照。米国飼料検査官協会（ＡＡＦＣＯ）は、イヌおよびネコに関するそのような栄養素の推奨量を提供している。米国飼料検査官協会公式刊行物pp. 129-137 (2004)を参照。一般に食品添加物として有用であるビタミン類には、ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＤ、ビオチン、ビタミンＫ、葉酸、イノシトール、ナイアシン、およびパントテン酸が含まれる。食品添加物として有用である鉱質および微量元素には、カルシウム、リン、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、銅、亜鉛、塩素、鉄、セレン、ヨウ素、および鉄が含まれる。
【００４１】
[0081] 特定の態様において、そのフード組成物は当業者に既知の追加の成分、例えばビタミン類、鉱質、充填剤、美味性増進剤、結合剤、香味、安定剤、乳化剤、甘味剤、着色剤、緩衝剤、塩類、コーティング、および同様のものを含んでいてよい。安定剤には、その組成物の貯蔵寿命を増大させる傾向がある物質、例えば保存剤、相乗剤および隔離剤、包装用ガス（ｐａｃｋａｇｉｎｇ ｇａｓｅｓ）、安定剤、乳化剤、シックナー、ゲル化剤、および湿潤剤が含まれる。乳化剤および／または増粘剤の例には、ゼラチン、セルロースエーテル類、デンプン、デンプンエステル類、デンプンエーテル類、および修飾されたデンプン類が含まれる。それぞれの組成物の構成要素、フード成分、および他の成分に関する具体的な量は、様々な要素、例えばその組成物に含まれる個々の構成要素および成分；その動物の種；その動物の年齢、体重、全身の健康状態、性別、および食事；その動物の摂食速度；処置される疾患または病気のタイプ；および同様のことに依存するであろう。従って、その構成要素および成分の量は広く異なっていてよく、本明細書で記述される好ましい比率から逸脱してよい。
【００４２】
[0082] １つの説明的な態様において、その組成物は、例えばリポ酸またはその塩に加えて次のものの少なくとも１つを含んでいてもよい：
（ａ）約０％〜約７５％の炭水化物、
（ｂ）約２％〜約５０％の脂肪、
（ｃ）約０％〜約４０％の食物繊維、および
（ｄ）約０％〜約１５％の１種類以上の栄養調整剤。
【００４３】
[0083] 成体のコンパニオンペット、例えばイヌ科の動物およびネコ科の動物に与えられる飼料は、その年齢の動物に与えられる標準的な通常の飼料である。下表は１〜６歳のイヌ科の動物に関する典型的な飼料である。
【００４４】
表１：実例となるコンパニオンアニマル用ペットフード組成物
【００４５】
【表１】
【００４６】
[0084] その組成物は、その動物の健康を維持する、または向上させることを意図した追加の成分、例えばサプリメント、薬剤、ハーブ、全身用の薬物および組成物、ならびに同様のものを含むことができる。
【００４７】
[0085] 本発明の組成物は、１種類以上の疾患または病気を予防または処置するための１種類以上の追加の成分を含んでいてよい。
[0086] これを成し遂げる飼料中の構成要素は、抗酸化剤またはその混合物である。抗酸化剤はフリーラジカルを抑える（ｑｕｅｎｃｈｅｓ）物質である。そのような物質の例には、イチョウ、柑橘類の果肉、ブドウの絞りかす、トマトの絞りかす、ニンジンおよびホウレンソウのようなフード（全て好ましくは乾燥させたものである）、ならびに様々な他の物質、例えばベータ−カロテン、セレン、補酵素Ｑ１０（ユビキノン）、ルテイン、トコトリエノール類、大豆イソフラボン類、Ｓ−アデノシルメチオニン、グルタチオン、タウリン、Ｎ−アセチルシステイン、ビタミンＥ、ビタミンＣ、アルファ−リポ酸、ｌ−カルニチンおよび同様のものが含まれる。ビタミンＥはトコフェロールまたはトコフェロール類の混合物およびその様々な誘導体、例えばビタミンＥアセテート、スクシネート、パルミテートのようなエステル類および同様のものとして投与することができる。そのアルファ型が好ましいが、ベータ、ガンマ、およびデルタ型が含まれ得る。そのｄ型が好ましいが、ラセミ混合物が許容可能である。その型および誘導体は、ペットによる消化の後にビタミンＥ様の活性で機能するであろう。ビタミンＣは、この飼料において、アスコルビン酸ならびにペットによる消化の後にビタミンＣ様の活性で機能するであろうその様々な誘導体、例えばリン酸カルシウム塩類、コレステリル（ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｙｌ）塩、２−モノホスフェート、および同様のものとして投与することができる。それらは液体、半固体、固体および熱安定性の形のようなあらゆる形であることができる。アルファ−リポ酸は飼料中にアルファリポ酸として、または米国特許第５，６２１，１１７号におけるようなリポエート誘導体、ラセミ混合物、それらの塩類、エステル類もしくはアミド類として投与することができる。Ｌ−カルニチンは飼料中に投与することができ、カルニチンの様々な誘導体、例えばその塩類、例えば塩酸塩、フマル酸塩およびコハク酸塩類、ならびにアセチル化カルニチン、ならびに同様のものを用いることができる。
【００４８】
[0087] 飼料中で投与される量は、全てその飼料の重量％（乾燥物質基準）として、有効物質として計算され、それ自体は、それは遊離の物質として測定される。用いられる最大量は、毒性を引き起こすべきでない。少なくとも約１００ｐｐｍまたは少なくとも約１５０ｐｐｍのビタミンＥを用いることができる。約５００〜約１，０００ｐｐｍの好ましい範囲を用いることができる。必ずしもそうとは限らないが、約２０００ｐｐｍまたは約１５００ｐｐｍの最大値は一般には超過されない。ビタミンＣに関しては、少なくとも約５０ｐｐｍ、望ましくは少なくとも約７５ｐｐｍおよびより望ましくは少なくとも約１００ｐｐｍが用いられる。非毒性の最大値を用いることができる。アルファ−リポ酸の量は、少なくとも約２５、望ましくは少なくとも約５０ｐｐｍ、より望ましくは約１００ｐｐｍから様々であることができる。最大量は、約１００ｐｐｍからそのペットにとって非毒性であるままである量まで様々であることができる。好ましい範囲は、約１００ｐｐｍから約２００ｐｐｍまでである。ｌ−カルニチンに関しては、イヌ科の動物に関して約５０ｐｐｍ、望ましくは約２００ｐｐｍ、より望ましくは約３００ｐｐｍが有用な最小値である。ネコ科の動物に関しては、ｌ−カルニチンのわずかに高い最小値、例えば約１００ｐｐｍ、約２００ｐｐｍ、および約５００ｐｐｍを用いることができる。非毒性の最大量を用いることができ、それは例えば約５，０００ｐｐｍ未満である。イヌ科の動物に関して、より低い量を用いることができ、それは例えば約５，０００ｐｐｍ未満である。イヌ科の動物に関して、好ましい範囲は約２００ｐｐｍ〜約４００ｐｐｍである。ネコ科の動物に関して、好ましい範囲は約４００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである。約１〜１５ｐｐｍにおけるベータ−カロテンを用いることができる。約０．１〜約５ｐｐｍまでにおけるセレンを用いることができる。少なくとも５ｐｐｍのルテインを用いることができる。少なくとも約２５ｐｐｍのトコトリエノール類を用いることができる。少なくとも約２５ｐｐｍの補酵素Ｑ１０を用いることができる。少なくとも約５０ｐｐｍのＳ−アデノシルメチオニンを用いることができる。少なくとも約１０００ｐｐｍのタウリンを用いることができる。少なくとも約２５ｐｐｍの大豆イソフラボン類を用いることができる。少なくとも約５０ｐｐｍのＮ−アセチルシステインを用いることができる。少なくとも約５０ｐｐｍのグルタチオンを用いることができる。少なくとも５０ｐｐｍのイチョウの抽出物を用いることができる。
【００４９】
[0088] 次のものは、ＯＲＡＣ（酸素ラジカル吸収能力）含有量が高い生の成分である：ホウレンソウの搾りかす、トマトの搾りかす、柑橘類の果肉、ブドウの絞りかす、ニンジン顆粒、ブロッコリー、緑茶、イチョウおよびコーングルテンミール。
【００５０】
[0089] １％含有としてその飼料に添加された場合（トウモロコシのような低ＯＲＡＣ成分との合計５％の置き換えのため）、それらはその飼料全体のＯＲＡＣ含有量を増大させ、これらの構成要素を含む飼料を食べた動物の血漿のＯＲＡＣ含有量を増大させた。好ましくは、その飼料への合計５％の添加のために４種類の他の１％の成分との組み合わせで１％で添加される場合、乾燥物質のグラム当たり２５μモルのトロロックス当量を超えるＯＲＡＣ含有量を有するあらゆる成分を用いることができるであろう。特定の態様において、その組成物はさらに有効量の、グルコサミン、コンドロイチン、コンドロイチン硫酸、メチルスルホニルメタン（“ＭＳＭ”）、クレアチン、抗酸化剤、ペルナカナリキュラタ（Ｐｅｒｎａ ｃａｎａｌｉｃｕｌａｔａ）、オメガ−３脂肪酸類、オメガ−６脂肪酸類およびそれらの混合物からなるグループから選択される、少なくとも１種類の物質を含む。
【００５１】
[0090] 様々な態様において、有効量のリポ酸またはその塩を含むサプリメントは、さらに有効量の、アスピリン、抗炎症剤、例えばイブプロフェン、ＣＯＸ−２阻害剤、ならびに他の薬用および医薬組成物ならびにそれらの組み合わせを含む、少なくとも１種類の物質を含む。サプリメントには全体の栄養バランスまたは性能を向上させるために別の飼料と共に用いられる飼料が含まれるが、それに限定されない。サプリメントには、他の飼料に対してサプリメントとして希釈されずに供給される、別々に入手可能である動物のレーションの他の部分と共に自由選択で提供される、または動物の標準の飼料で希釈され、それと混合されて完全な試料を生成する組成物が含まれる。ＡＡＦＣＯは例えば米国飼料検査官協会公式刊行物p. 220 (2003)においてサプリメントに関する論考を提供している。サプリメントは、例えば粉末、液体、シロップ、丸剤、および封入された組成物を含む様々な形であってよい。
【００５２】
[0091] 特定の態様において、その組成物はトリーツであることができる。トリーツには、動物を食事時間ではない間に食べるように誘うために動物に与えられる組成物、例えばイヌ科の動物のためのドッグボーンが含まれる。トリーツはその組成が１種類以上の栄養素を含む栄養性のものであってよく、フード様の組成を有していてよい。非栄養性のトリーツには、非毒性であるあらゆる他のトリーツが含まれる。その組成物または構成要素はそのトリーツの上にコートされていて、そのトリーツの中に組み込まれていて、または両方であってよい。本発明のトリーツは、乾燥フードに関して用いられるプロセスに類似した押し出しまたはベーキングプロセスにより調製することができる。組成物を既存のトリーツの形の外側の上にコートする、または組成物を既存のトリーツの形の中に注入するために、他のプロセスを用いてもよい。
【００５３】
[0092] 特定の態様において、その組成物は玩具であることができる。玩具には、人工の骨のような噛むことができる玩具が含まれる。リポ酸またはその塩は、その玩具の表面上、もしくはその玩具の構成要素の表面上のコーティングを形成している、その玩具全体にわたって部分的にもしくは完全に組み込まれている、または両方であることができる。１態様において、そのリポ酸またはその塩は意図される使用者により口に入れられることが可能である。現在市場に出されている広い範囲の適切な玩具が存在し、それは例えば米国特許第５，３３９，７７１号、米国特許第５，４１９，２８３号、およびそれらにおいて開示されている参考文献である。この発明は、部分的に消費可能である玩具、例えばプラスチックの構成要素を含む玩具、ならびに完全に消費可能である玩具、例えば生皮および様々な人工の骨の両方を提供する。本発明は好ましくはイヌまたはネコによる使用のための玩具を提供する。
【００５４】
本発明の組成物の調製
[0093] 本発明の組成物は、当業者に既知の一般に用いられるフード調製プロセスを用いて、缶詰めされた、または湿潤した形で調製されてよい。典型的には、挽いた動物のタンパク質性組織を、他の成分、例えば魚油、穀物粒、釣り合いを取る成分、特別な目的での添加物（例えば、ビタミンおよび鉱質の混合物、無機塩類、セルロースおよびテンサイパルプ、充填剤、ならびに同様のもの）および水と、加工に十分な量で混合する。これらの成分は、構成要素の混合の間に加熱するのに適した容器中で混合される。その混合物の加熱はあらゆる適切な方法、例えば直接蒸気噴射を用いて、または熱交換器を備えた容器を用いて達成される。最後の成分の添加の後、その混合物を約５０°Ｆ〜約２１２°Ｆの温度に加熱する。この範囲外の温度は許容できるが、他の加工助剤の使用無しでは商業的に実用的で無い可能性がある。適切な温度まで加熱した際、その物質は典型的には濃厚な液体の形であろう。その濃厚な液体を缶の中に充填する。蓋を取り付け、容器を密閉して密封する。次いでその密封された缶を、一般に用いられる、内容物を滅菌するように設計された設備の中に置く。滅菌は通常約２３０°Ｆより高い温度に、用いられる温度、組成、および同様の要素に依存する適切な時間加熱することにより達成される。本発明の組成物は、調製の前、間、または後にフード組成物に添加することができる。
【００５５】
[0094] フード組成物は、当業者に既知の一般に用いられるプロセスを用いて乾燥した形で調製されてよい。典型的には、乾燥した成分、例えば動物性タンパク質、植物性タンパク質、穀物、および同様のものを挽いて一緒に混合する。次いで脂肪、油、動物性タンパク質、水、および同様のものを含む湿潤した、または液体の成分を、その乾燥混合物に添加してそれと混合する。次いでその混合物をキブル（ｋｉｂｂｌｅｓ）または同様の乾燥した断片に加工する。キブルはしばしば、乾燥および湿潤成分の混合物に高い圧力および温度での機械的仕事を施し、小さな開口部を押し通し、回転するナイフにより切り落としてキブルにする、押し出しプロセスを用いて形成される。次いでその湿潤したキブルを乾燥させ、場合により１種類以上の局所的コーティング、例えば香味、脂肪、油、粉末、および同様のものでコートする。キブルは押し出しではなくベーキングプロセスを用いて練った生地（ｄｏｕｇｈ）から作ることもでき、ここでその練った生地を型の中に置いた後乾燥−加熱加工を行う。そのフード組成物は、米国特許第５，３３９，７７１号および第５，４１９，２８３号において開示されているプロセスのような、乾燥フードまたは玩具に関して上記で記述したプロセスに類似した押し出しまたはベーキングプロセスを用いたトリーツの形であることもできる。本発明の組成物は、調製の前、間、または後にフード組成物に添加することができる。
【００５６】
本発明の組成物を用いて障害を処置または予防する方法
[0095] 本発明は、有効量のリポ酸またはその塩を含む組成物をそれを必要とするコンパニオンアニマルに投与することにより特定の障害を処置または予防する方法も含む。
【００５７】
[0096] ある量の抗酸化剤またはその混合物をコンパニオンアニマル用ペット飼料に添加することは、ペット、例えば成体のペットにおいて健康な体組成を維持または促進する、例えば体重または体脂肪の減少、および赤身の筋肉量の百分率を増大させることができる。成体という用語は一般に、少なくも１〜６歳のイヌ科の動物および少なくも１〜６歳のネコ科の動物を意味することを意図する。老齢のイヌまたはネコは７歳以上である。
【００５８】
[0097] 発明者は、健康な体組成を維持または促進すること、例えば体重もしくは体脂肪の減少、または赤身の筋肉量の百分率の増大を達成することに成功した。
[0098] 本発明は、本明細書で記述されている特定の方法論、プロトコル、および試薬に、それらは様々であってよいため、限定されない。さらに、本明細書で用いられる用語法は特定の態様のみを記述するためのものであって、本発明の範囲を限定することを意図するものでは無い。本明細書において、および添付された特許請求の範囲において用いられる単数形“ａ，”“ａｎ，”および“ｔｈｅ”は、文脈が明確にそうではないと指示しない限り複数への言及を含む。同様に、“含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）”、“含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）”、および“含んでいる”という語は、排他的にではなく包括的に解釈されるべきである。別途定義されない限り、本明細書で用いられる全ての技術的および科学的な用語ならびにあらゆる頭字語は、本発明の分野における当業者により一般的に理解されているのと同じ意味を有する。本明細書で記述されている組成物、方法、製造物、または他の手段もしくは材料に類似した、または均等なあらゆる組成物、方法、製造物、または他の手段もしくは材料を本発明の実施において用いることができるが、好ましい組成物、方法、製造物、または他の手段もしくは材料は本明細書で記述されている。
【実施例】
【００５９】
[0099] この発明は下記のその好ましい態様の実施例によりさらに説明することができるが、これらの実施例は単に説明のためだけに含まれているのであり、別途明確に示さない限り本発明の範囲を限定することを意図するものでは無いことは理解されるであろう。
【００６０】
実施例１
[00100] ３０匹の成体の無作為な出所のイヌをこの試験のために利用した。イヌは試験の開始前に少なくとも１０月齢であり、妊娠しておらず、授乳しておらず、適当な体重であった。動物を食事処置のために、５個のグループにそれぞれのグループあたり３匹のオスおよび３匹のメスで無作為抽出した。
【００６１】
[00101] ２週間の前給餌期間（ｐｒｅｆｅｅｄｉｎｇ ｐｅｒｉｏｄ）の間、全てのイヌに、米国飼料検査官協会により提案された栄養素に関する全ての推奨（ＡＡＦＣＯ ２０００）を満たす、または超える対照フード（０ｐｐｍのｄｌ−アルファ−リポ酸を添加した）を与えた（表２）。その前給餌期間の後、イヌを次のｄｌ−アルファ−リポ酸目標含有量（乾燥物質基準）の１つを有する５個の処置グループに無作為抽出した：０ｐｐｍ、１５０ｐｐｍ、１５００ｐｐｍ、３０００ｐｐｍ、４５００ｐｐｍ。全ての飼料（対照およびアルファリポ酸）において、ビタミンＥを添加し、それは６００〜１０００国際単位のレベルで存在し、ビタミンＣを１００〜２００ｐｐｍのレベルで添加した。
【００６２】
[00102] 試験フードは、水以外で唯一の栄養源であった。新鮮な水を適宜供給した。イヌを選択し、最初の体重を得た後、フードの用量をそれぞれのイヌに関してそのフードの予想されるＭＥに基づいて計算した。最初のフード用量の計算は、通常の活動を説明するための因子により修正された、そのイヌに関する維持エネルギー必要量（ＭＥＲ）に基づいており、次の式により計算された：
ＭＥＲ（ｋｃａｌ／ｄａｙ）＝１．６×ＲＥＲ（安静時エネルギー必要量）
ここで：ＲＥＲ（ｋｃａｌ／ｄａｙ）＝７０×体重（ｋｇ）０．７５。
【００６３】
[00103] イヌの体重を毎週量り、それらの最適体重を維持するのに十分なフードを与えるため、必要に応じてフードの用量を調節した。最適体重は、５点スケール上の３であるように決定された。フードの用量の調節の後にイヌが最初の体重の−１０％の範囲内の体重を維持しなかった場合、それは試験から外された。全ての体重およびフード摂取量の測定値を記録した。
【００６４】
[00104] 試料をすり潰し、０．１００＋／−０．００１ｇの試料を５．０ｍＬのリン酸緩衝液（１０ｍＭ Ｎａ２ＨＰＯ４、２ｍＭエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、０．９％ ＮａＣｌ、ｐＨ ７．４）の中に２回抽出した。２５０μＬの抽出物を、Ｔｅｆｌｏｎで裏打ちされたキャップを有する５ｍＬガラス遠心チューブの中に入れた。１５μＬのＥＤＴＡ溶液（約１Ｍ ＮａＯＨでｐＨ ７．８に調節した１００ｍＭ ＥＤＴＡ）および５０μＬの新しく調製した５ｍＭジチオエリトリトール（ＤＴＥ）を添加した。その溶液をボルテックスし、室温で５分間保温した。次いで１０μＬの１Ｍ Ｈ３ＰＯ４および２．０ｍＬのジエチルエーテルを添加した。チューブにキャップを付け、ボルテックスし、１５００×ｇで３分間室温で遠心分離した。エーテル層を別の５ｍＬのガラス遠心チューブに移し、一方で水層を１．５ｍＬのエーテルでさらに２回抽出した。同じ試料からの全ての抽出物を合わせた。次いでその抽出物を室温において水浴中で窒素エバポレーター中で乾燥させる。この時点で、試料にキャップを付け、一夜凍結させた。
【００６５】
[00105] 次いで乾燥させた抽出物を解かし、７０μＬのＳＤＳ／ＥＤＴＡ溶液（０．１１％ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、１５ｍＭ ＥＤＴＡ、０．９％ＮａＣｌ）および５μＬの新しく調製した１ｍＭ ＤＴＥで再構成した。次いで５０μＬの新しく調製したＮａＢＨ４をそれぞれのチューブに添加した。そのチューブをボルテックスし、室温で１０分間保温した。１０分後、その試料を−７０℃で凍結した。その溶液を解かす前に、２０μＬの２Ｍ ＨＣｌを添加した。その溶液を解かした後に、８００μＬの１００ｍＭ ＮＨ４ＣＯ３を添加した。その溶液をボルテックスし、５μＬのアセトニトリル中１００ｍＭモノブロモジアマン（ｍｏｎｏｂｒｏｍｏｄｉａｍａｎｅ）溶液（ｍＢＢｒ）を添加した。次いでその溶液を室温において暗所で９０分間保温した。
【００６６】
[00106] １．５ｍＬのジクロロメタンを用いた抽出により、保温後の試料から過剰なｍＢＢｒおよびＤＴＥ誘導体を除去した。その水層をＨＰＬＣ上に置いた。約２Ｍ ＮＨ４ＯＨを用いてｐＨ ３．９５に調節した、３０％アセトニトリル、１％酢酸で構成され、１．０ｍＬ／分の流速でポンプで流された（ｐｕｍｐｅｄ）移動相を用いて、注入あたり１５分間の均一溶媒での溶離でリポ酸を分離した。この調製は、押し出されたフードの密度が１ｇ／ｍＬに等しいと仮定した。
【００６７】
[00107] 全血球計数および血液の生化学分析のために、試験の開始の２週間前に、ならびに０、２８、５６、８４、１１２、１４０および１６８日目に再度、血液を無菌的に集めた。加えて、食事介入の０、２８および８４日目に、白血球の単離のために１５ｍｌの全血を集めた。
【００６８】
[00108] ヘパリン処理した（Ｈｅｐａｒｉｎｚｅｄ）全血を、５０ｍｌ Ａｃｃｕｓｐｉｎコニカル遠心チューブ（Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ）上に層状に入れ（ｌａｙｅｒｅｄ）、等体積のリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を添加した。試料を７００ｇで３０分間、ブレーキ無しで遠心分離した。単球の層を回収し、１５ｍｌコニカル遠心チューブに移し、１〜３ｍｌのＰＢ中で再懸濁し、前回のように遠心分離した（第１洗浄）。第２洗浄を第１洗浄のように行った。最後に、細胞を回収し、過塩素酸（１０％ ｗ／ｖ）中で懸濁し、分析まで−７０℃で冷凍した。
【００６９】
[00109] 試料を−７０℃の冷凍庫からその中にドライアイスを有する冷却器の中に移した。バイアルを冷却遠心機中で１２，０００ｒｐｍで５分間遠心分離した。グルタチオン（ＧＳＨ）分析のため、上清の部分量（ａｌｉｑｕｏｔ）をコニカル試験チューブに移した。
【００７０】
[00110] 酸に可溶性の抽出物の誘導体化は、Ｊｏｎｅｓにより修正された（Ｊｏｎｅｓら）、Ｒｅｅｄおよび共同研究者ら（Ｆａｒｉｓｓら）の方法によった。
[00111] 手短には、１５０μＬの抽出物または外部標準を１．５ｍｌエッペンドルフチューブの中に入れ、続いて２０μγ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ内部標準を添加し、５０μＬのＩＡＡを添加し、続いて混合した。その溶液を、ＫＯＨ−ＫＨＣＯ３の使用溶液を用いることによりｐＨ約１０（紫色）に調節した。溶液を暗所において室温下で１時間保温した。サンガー試薬を総体積と同じ体積で添加し、その溶液を暗所において室温で一夜（２０時間）保温した。
【００７１】
[00112] 保温の後、溶液を１２０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、上清を別の１．５ｍｌエッペンドルフチューブの中に移した。２００μＬの上清を３００μＬの注入口を有する琥珀色のオートバイアルの中に入れ、その上端にＨＰＬＣ分析のためのクリンパを取り付けた。
【００７２】
[00113] 溶媒および分離条件は記述されている通りであった（Ｆａｒｉｓｓ， Ｊｏｎｅｓ）。ＧＳＨおよびＧＳＳＧのレベルを、信頼できる標準物質と比較して定量した。ガンマ−グルタミル−グルタメートを内部標準として用いて誘導体化の効率を評価した。
【００７３】
[00114] 臨床化学、血液学および体重に関する値のベースラインに対する比較を、ウィンドウズ版ＳＡＳ上での対応t検定として、有意性をＰ＜０．０５で設定して分析した。それぞれの測定された時点における値の平均を、一元配置ＡＮＯＶＡにより、有意性をＰ＜０．０５で設定して分離した。ＧＳＨ：ＧＳＳＧにおける、８４日目およびベースラインの間の差を、ウィンドウズ版ＳＡＳにより、一元配置ＡＮＯＶＡで有意性をＰ＜０．０５で設定してグループ間で分析した。
【００７４】
結果
[00115] ７回の連続するアッセイ（０、２８、５６、８４、１１２、１４０、１６８日目）を経て決定されたフード中のリポ酸の濃度（ｐｐｍ）は、予想されるアッセイ感度および我々の設備で典型的に生じる生成パラメーターの範囲内であった(表２）。
【００７５】
[00116] そのフード摂取データに目立つ点は無かった。全てのグループ中のほとんどの動物は、６ヶ月目の時点で、平均して、試験開始の時点よりも多くのフードを摂取した。体重のデータは、４５００ｐｐｍ含有グループにおいて最初にいくらかの体重の減少が起きたが、その変化は６ヶ月目の時点までに反転したようであったことを除いて目立つ点は無かった。体調の点数は、この軽度の体重減少に影響を受けなかったようであった。
【００７６】
[00117] 日常的な身体検査は、栄養に関連する異常またはｄｌ−アルファ−リポ酸の毒性の証拠を何も示さなかった。試験母集団中のすべての動物は、試験の経過全体の間、正常なままであった。試験の経過の間で数匹の動物において時々嘔吐が観察された；しかし、その嘔吐をリポ酸に起因し得る可能性があるという結論が導かれるであろう傾向は観察されなかった。最も高い含有グループ中の１匹の動物を、体重減少および白血球増加症のため、２１日目に試験から外した。この動物における白血球増加症は試験の終了までに解決せず、これはいくつかの他の疾患プロセスに起因し得ると思われる。
【００７７】
[00118] ２８、５６、８４、１１２、１４０および１６８日目に関する血清の生化学的値をイヌの同じグループに関する最初の値と比較した際に、いくつかの統計的な差が認められたが、これらの値は実験室での基準範囲（ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｒａｎｇｅ）内であるかそれに非常に近く、数ヶ月にわたる一貫した傾向が認められたので、これらのいずれも生物学的に有意であるとはみなされなかった。それぞれの期間における対照および他の処置グループの間の比較もいくつかの統計的な差を示したが、これらの値は臨床検査室での基準範囲内であるかそれに非常に近く、傾向が存在しなかったので、これらのいずれも生物学的に有意であるとはみなされなかった。
【００７８】
[00119] ２８、５６、８４、１１２、１４０および１６８日目に関する血液学的値をイヌの同じグループに関する最初の値と比較した際に、いくつかの統計的な差が認められた；しかし、これらの値は実験室での基準範囲内であるかそれに非常に近く、傾向が存在しなかったので、これらのいずれも生物学的に有意であるとはみなされなかった。それぞれの期間における対照および他の処置グループの間の比較はいくつかの統計的な差を示した；しかし、これらの値は臨床検査室での基準範囲内であるかそれに非常に近く、傾向が存在しなかったので、これらのいずれも生物学的に有意であるとはみなされなかった。
【００７９】
ＧＳＨ：ＧＳＳＧ比
[00120] ８４日間の給餌にわたるＧＳＨ：ＧＳＳＧ比の変化は試料の有意な全体的な効果を示し（Ｐ＝０．０２４）、すべての補われたグループでその比が増大した（表３）。ＡＮＯＶＡは、最も低い、および最も高い含有に関して基礎フードと比較して有意な差を示したが、最も大きな数値の増加は最も低い含有レベルにおいてであった。すなわち、最も高い、および最も低い含有に関するＧＳＨ：ＧＳＳＧ比の変化は、この同じ期間にわたって基礎フードで観察された変化と有意に異なっていた。８４日目における４点に関する比は、これらの試料の全て（１匹の対照、３匹の処置グループ）でＧＳＳＧが検出できなかったため、決定することができなかった。従って、補われたグループに関する値は、そのアッセイが８４日目における低レベルのＧＳＳＧを検出するのに十分に高感度であったならば、さらに高いＧＳＨ：ＧＳＳＧの比を示していた可能性がある。
【００８０】
表２
【００８１】
【表２】
【００８２】
表３
【００８３】
【表３】
【００８４】
*対照および４，５００ｐｐｍグループでは１匹のイヌが８４日目において検出可能なＧＳＳＧを有しておらず、一方で３，０００ｐｐｍグループでは２匹のイヌが８４日目において検出可能なＧＳＳＧを有していなかった。
【００８５】
[00121] アルファ−リポ酸に関して、さらなる観察を適用可能である。飼料中のアルファ−リポ酸の長期にわたる給餌は、安全かつ有効である。それは還元型グルタチオン（ＧＳＨ）対酸化型グルタチオン（ＧＳＳＧ）の比を向上させる。飼料中のアルファ−リポ酸の長期にわたる投与は、最低１、２、３、４、５または６カ月の期間から、１、２、３、４、５年の期間、またはその動物の一生涯を含むさらに長い期間を通してまでであることができる。そのアルファ−リポ酸は飼料中でカプセル封入のような特別な保護無しで機能し、医薬において用いられる単位剤形、例えば錠剤、丸剤、カプセルおよび同様のもののような単位剤形で飼料中に存在する必要がない。そのリポ酸は、飼料中で飼料の最低約２５、５０、７５または１００ｐｐｍで提供される。最高範囲はその毒性レベルのすぐ下であり、飼料の約４００、３００または２００ｐｐｍに至るまでと幅広い。一般に、１日あたり約６または７ｍｇ／動物のｋｇ体重を超えることはなく、より一般には約５ｍｇ／動物のｋｇ体重より上ではない。アルファ−リポ酸は抗酸化防御能力を向上させ、さらにその動物の酸化的傷害に耐える能力を向上させる。この全ては、適量存在する他の抗酸化剤、例えばビタミンＥおよびビタミンＣと共になされる。これは、アルファ−リポ酸の作用がビタミンＣおよび／またはビタミンＥの作用を超えていることを実証している。
【００８６】
実施例２
材料および方法：
[00122] ３０匹のイヌを用いて、ＡＡＦＣＯ対照フードまたは魚油を含む試験フードと比較した際のリポ酸の効果を決定した。
【００８７】
[00123] ＡＡＦＣＯ対照フード、魚油を含むフード、およびリポ酸を含むフードの間で差次的遺伝子発現プロフィールを試験した。ｄ３０において、最小で１．３倍の変化で、ＡＡＦＣＯ対照と比較して１２１２個の遺伝子のリストを生成し、魚油を含むフードと比較して１８９６個の遺伝子のリストを生成した。
【００８８】
[00124] ＲＮＡ抽出：全ＲＮＡを全血試料からＰＡＸｇｅｎｅ ＲＮＡ単離キットを用いて単離した。全ての測定は、ｃａｎｉｎｅ ２ Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ ｇｅｎｅｃｈｉｐを用いて行った。統計分析のため、全ての測定値をＲＭＡを用いて標準化した。全ての分析はＰａｒｔｅｋを用いて行った。対象および試験フードの間で差次的に発現している遺伝子に関してＡＮＯＶＡ ｔ−検定を行い、それはｐ−値カットオフ０．１、倍率変化＞＋／−１．３に基づいて選択された。
【００８９】
[00125] 遺伝子発現：１５０ｐｐｍのリポ酸を含む試験フードを与えられたイヌにおいて、ＡＡＦＣＯ対照フードを与えられたイヌと比較した際に１２１２個の遺伝子の発現が変化していることが分かった。加えて、リポ酸を含む試験フードを与えられたイヌにおいて、魚油を含む試験フードと比較して１８９６個の遺伝子の発現が変化していることが分かった。表７は、機能によりグループ分けした遺伝子および対照フードまたは魚油を含むフードのどちらかを与えられたそれらと比較した発現の方向を示す。
【００９０】
[00126] メタボロミクス：血漿代謝産物を分析し、対象を与えられたイヌと比較した倍率変化として比較した。
[00127] バイオマーカーの測定：ＥＬＩＳＡに基づくキットを用いて血清軟骨マーカーを測定し、軟骨マーカーの濃度を決定した。０日目を分析における共変数として用いて、ベースラインの値に関して調整した。
【００９１】
[00128] 結果：リポ酸のフードへの添加は、結果として、ＩＩ型コラーゲンＣ−プロペプチドおよびＩＩ型コラーゲンのカルボキシ末端に架橋されたテロペプチド断片における、リポ酸無しの類似のフードよりも大きな減少をもたらした。これらの２種類のマーカーは骨関節炎を有するイヌにおいて増加することが知られている。加えて、リポ酸を含むフードを与えられたイヌは脂肪を失い、これはエネルギーのための脂肪の利用（脂肪酸化）の増大およびより健康な体重維持のためのグルコースの産生の減少を示唆している。言い換えれば、リポ酸を与えられたイヌは利用可能なグルコースをより効率的に利用し、エネルギーの使用に関してそれらの代謝を脂肪の動員に移行させた。加えて、代謝産物であるヒドロキシプロリンが血漿中で減少しており、この代謝産物はほとんど排他的に軟骨から生じるため、これは低減した軟骨破壊を示唆している。さらに、血清白血球から決定された遺伝子発現の変化はその証拠を支持し、軟骨構成要素の合成の増大および軟骨を分解する酵素の発現の減少による軟骨の保護の増大を示唆している。最後に、遺伝子発現の変化は、グルコースからのピルベートの形成を阻害し、エネルギーに関して代謝をアセチル−ＣｏＡの往復（ｓｈｕｔｔｌｉｎｇ）に移行させるＰＤＫ４の増加およびグルコース輸送体の上方制御による向上した脂肪利用を示唆している。リポ酸を与えられたイヌは、対照のフードを与えられたイヌと比較してゲノム的により引き締まっている（ｌｅａｎｅｒ）ようにも見えた。
【００９２】
[00129] 表は、リポ酸を用いた処置に関する、脂肪および体重ならびに軟骨マーカーにおける違いを示している。
[00130] 表４は、魚油を加えた対照およびリポ酸を加えた対照を与えられたイヌと比較した、対照飼料を与えられたイヌの体組成の変化を図説している。表４において図説されているように、リポ酸を加えた対照を与えられたイヌは９０日の処置期間にわたって最も大きい体重の変化を示した。
【００９３】
【表４】
【００９４】
[00131] 表５は、魚油を加えた対照およびリポ酸を加えた対照を与えられたイヌと比較した、対照飼料を与えられたイヌにおけるピルベートの血中レベルの変化を図説している。表５において図説されているように、リポ酸を加えた対照を与えられたイヌは３０日の処置期間にわたって最も大きいピルベートの血中レベルの変化を示した。
【００９５】
【表５】
【００９６】
ａ．０日目の値を分析における共変数として用いた。
[00132] 表６は、魚油を加えた対照およびリポ酸を加えた対照を３０日間与えられたイヌと比較した、対照飼料を与えられた後にゲノム的に太っていると分類されたイヌの百分率を図説している。表６において図説されているように、リポ酸を加えた対照を与えられたイヌは、３０日の処置期間の後に、身体的に太ったイヌとゲノム的に似ていなかった。
【００９７】
【表６】
【００９８】
表７．対照または上質（ｕｐｇｒａｄｅ）フード（上質は魚油を含む）と比較した、リポ酸により変化した軟骨およびエネルギー代謝に関連する遺伝子
【００９９】
【表７−１】
【０１００】
【表７−２】
【０１０１】
[00133] 表８は、本発明の説明的なペットフード組成物中の成分を図説する。
表８．組成物を作るために用いられる成分
【０１０２】
【表８】
【０１０３】
[00134] 表９は、リポ酸を含むペットフードを９０日間与えられたイヌと比較した、対照飼料を与えられた後のイヌに関する二重エネルギーＸ線吸収測定（ＤＥＸＡ）による測定結果を図説する。ＤＥＸＡを用いた体脂肪の測定は、健康の評価に関して体重よりも正確である。イヌは多くの筋肉を有する可能性があるが、多くの高さ／体重チャートにより“体重過多”とみなされる可能性がある。逆もまた真である可能性がある−イヌは多くの脂肪およびわずかな筋肉を有する可能性があり、“太り過ぎ”であるが体重過多ではない可能性がある。
【０１０４】
【表９】
【０１０５】
[00135] 表１０は１８０日目における体組成を図説し、５種類の異なるペットフードを１８０日間与えられたイヌに関して最初の共変数を用いて処置の効果を決定する。
【０１０６】
【表１０】
【０１０７】
[00136] 表１１は、リポ酸を含むペットフードを３０日間与えられたイヌと比較した、対照飼料を与えられた後のイヌに関する血液試料中で測定された代謝産物の変化を図説する。表１１において図説されているように、リポ酸を加えた対照を与えられたイヌは３０日後に腎臓のマーカーの減少を示した。
【０１０８】
【表１１】
【０１０９】
[00137] 本発明は、本発明の少数の観点の説明として意図されている実施例において開示されている特定の態様により範囲を限定されず、機能的に均等であるあらゆる態様はこの発明の範囲内である。実際、本明細書において示され、記述されているそれらに加えて、本発明の様々な修正が当業者に明らかになると考えられ、それは添付された特許請求の範囲の範囲内に入ることを意図する。
【０１１０】
[00138] 本明細書において引用されている、または参照されている全ての特許、特許出願、刊行物、および他の参考文献を、法により許される程度まで本明細書に援用する。それらの参考文献の論考は、単にその中でなされた主張を要約することだけを意図している。あらゆるそのような特許、特許出願、刊行物または参考文献、またはそれらのあらゆる部分が本発明に関連する先行技術であることを自認せず、そのような特許、特許出願、刊行物および他の参考文献の正確さおよび妥当性に挑戦する権利は明確に残されている。
【技術分野】
【０００１】
[001] 本発明は、コンパニオンアニマルにおいて体重に関連する障害を処置および／または予防するための組成物および方法を含み、ここでその組成物および方法は、そのコンパニオンアニマルにリポ酸またはその塩を含む組成物を与えることを含む。
【背景技術】
【０００２】
[002] 動物の健康の重要な指標は、その動物の体組成である。不健康な食事および／または不健康な生活習慣は、結果として特に体内の赤身の筋肉（ｌｅａｎ ｍｕｓｃｌｅ）に関して不健康な体脂肪の比率を有する動物をもたらし得る。３０重量％を超える体脂肪の量は、特に体脂肪の量が３５重量％を超えている場合、その動物が不健康であることを示していると考えられる。
【０００３】
[003] 本発明は、現在市場に出されている健康な体組成を維持または促進するためのコンパニオン用フード製品を超える、増大した療法的および予防的効能を有する、コンパニオンアニマルのためのペットフード組成物を含む。
【発明の概要】
【０００４】
[004] 発明者は、動物における障害を処置または予防するためのフード組成物およびその組成物を用いる方法を開発した。
[005] 本発明は、健康な体組成の維持または促進、例えばコンパニオンアニマルにおける体重または体脂肪の減少、赤身の筋肉量の百分率の増大のための方法を含み、それはその動物に健康な体組成を促進または維持するのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む組成物を与えることを含む。
【発明を実施するための形態】
【０００５】
全般的な記述
[006] 本発明は、それを必要とするコンパニオンアニマルにおいて障害を予防または処置するために有効な量のリポ酸またはその塩を含むフード組成物を含む。
【０００６】
[007] １態様は、コンパニオンアニマルにおいて健康な体組成を維持または促進するための方法を含み、それはその動物に健康な体組成を維持または促進するのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む組成物を与えることを含む。
【０００７】
[008] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約２５ｐｐｍである。
[009] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約５０ｐｐｍである。
[0010] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約１００ｐｐｍである。
【０００８】
[0011] 特定の態様において、その有効量は約１００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである。
[0012] 特定の態様において、その有効量は約１００ｐｐｍ〜約２００ｐｐｍである。
[0013] 特定の態様において、そのコンパニオンアニマルはイヌである。
【０００９】
[0014] 特定の態様において、そのコンパニオンアニマルはネコである。
[0015] 特定の態様において、その組成物はさらにタンパク質、脂肪、炭水化物、繊維、およびそれらの組み合わせを含む。
【００１０】
[0016] 特定の態様において、その組成物はドッグフードである。
[0017] 特定の態様において、その組成物はキャットフードである。
[0018] 特定の態様において、その組成物はフード、栄養食、サプリメント、動物用トリーツ、または玩具である。
【００１１】
[0019] 特定の態様において、その組成物は含水フードの形である。
[0020] 特定の態様において、その組成物は乾燥フードの形である。
[0021] 別の態様は、コンパニオンアニマルにおいて体重の減少を誘導するための方法を含み、それはその動物に体重の減少を誘導するのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む組成物を与えることを含む。
【００１２】
[0022] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約２５ｐｐｍである。
[0023] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約５０ｐｐｍである。
[0024] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約１００ｐｐｍである。
【００１３】
[0025] 特定の態様において、その有効量は約１００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである。
[0026] 特定の態様において、その有効量は約１００ｐｐｍ〜約２００ｐｐｍである。
[0027] 特定の態様において、その組成物はさらにタンパク質、脂肪、炭水化物、繊維、およびそれらの組み合わせを含む。
【００１４】
[0028] 特定の態様において、その組成物はドッグフードである。
[0029] 特定の態様において、その組成物はキャットフードである。
[0030] 特定の態様において、その組成物はフード、栄養食、サプリメント、動物用トリーツ、または玩具である。
【００１５】
[0031] 特定の態様において、その組成物は含水フードの形である。
[0032] 特定の態様において、その組成物は乾燥フードの形である。
[0033] 特定の態様において、そのコンパニオンアニマルはイヌである。
【００１６】
[0034] 特定の態様において、そのコンパニオンアニマルはネコである。
[0035] 本発明の別の態様は、コンパニオンアニマルにおいて体脂肪の減少を誘導するための方法を含み、それはその動物に体脂肪の減少を誘導するのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む本発明の組成物を与えることを含む。
【００１７】
[0036] 特定の態様において、リポ酸の有効量は少なくとも約２５ｐｐｍである。
[0037] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約５０ｐｐｍである。
[0038] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約１００ｐｐｍである。
【００１８】
[0039] 特定の態様において、その有効量は約１００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである。
[0040] 特定の態様において、その有効量は約１００ｐｐｍ〜約２００ｐｐｍである。
[0041] 特定の態様において、その組成物はさらにタンパク質、脂肪、炭水化物、繊維、およびそれらの組み合わせを含む。
【００１９】
[0042] 特定の態様において、その組成物はドッグフードである。
[0043] 特定の態様において、その組成物はキャットフードである。
[0044] 特定の態様において、その組成物はフード、栄養食、サプリメント、動物用トリーツ、または玩具である。
【００２０】
[0045] 特定の態様において、その組成物は含水フードの形である。
[0046] 特定の態様において、その組成物は乾燥フードの形である。
[0047] 特定の態様において、そのコンパニオンアニマルはイヌである。
【００２１】
[0048] 特定の態様において、そのコンパニオンアニマルはネコである。
[0049] 本発明の別の態様は、コンパニオンアニマルにおいて赤身の筋肉量の百分率を増大させるための方法を含み、それはその動物に赤身の筋肉量の百分率を増大させるのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む本発明の組成物を与えることを含んでいた。
【００２２】
[0050] 特定の態様において、リポ酸の有効量は少なくとも約２５ｐｐｍである。
[0051] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約５０ｐｐｍである。
[0052] 特定の態様において、その有効量は少なくとも約１００ｐｐｍである。
【００２３】
[0053] 特定の態様において、その有効量は約１００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである。
[0054] 特定の態様において、その有効量は約１００ｐｐｍ〜約２００ｐｐｍである。
[0055] 特定の態様において、その組成物はさらにタンパク質、脂肪、炭水化物、繊維、およびそれらの組み合わせを含む。
【００２４】
[0056] 特定の態様において、その組成物はドッグフードである。
[0057] 特定の態様において、その組成物はキャットフードである。
[0058] 特定の態様において、その組成物はフード、栄養食、サプリメント、動物用トリーツ、または玩具である。
【００２５】
[0059] 特定の態様において、その組成物は含水フードの形である。
[0060] 特定の態様において、その組成物は乾燥フードの形である。
[0061] 特定の態様において、そのコンパニオンアニマルはイヌである。
【００２６】
[0062] 特定の態様において、そのコンパニオンアニマルはネコである。
[0063] 本発明において用いられる用語“コンパニオンアニマル”は、イヌ、ネコ、およびげっ歯類を含む、ヒトによりペットとして維持されるのに適したあらゆる非ヒト動物を含む。本発明の全ての観点は、好ましくはネコおよび／またはイヌの処置に関するものである。
【００２７】
[0064] 用語“イヌ”には、コンパニオンアニマル、例えばカニスファミリアス（Ｃａｎｉｓ ｆａｍｉｌｉａｒｉｓ）、作業犬（ｗｏｒｋｉｎｇ ｄｏｇｓ）、および同様のものであるイヌが含まれる。イヌという用語はイヌ科の動物という用語と同意語である。
【００２８】
[0065] 用語“ネコ”には、飼い猫または家猫として知られるコンパニオンアニマルであるネコが含まれる。
[0066] 用語“げっ歯類”には、ハムスター、マウス、ラット、モルモット、アレチネズミ、ウサギ、ハリネズミ、フェレット、チンチラ等が含まれるが、それらに限定されない。
【００２９】
[0067] 本明細書で示される全ての百分率は、別途明記しない限り、乾燥物質に基づく、組成物の重量によるものである。
本発明の組成物
[0068] 本発明の１態様は、有効量のリポ酸またはその塩を含む、コンパニオンアニマルのための組成物を含む。
【００３０】
[0069] 本明細書において用いられる用語“リポ酸またはその塩”には、例えばアルファ−リポ酸、リポ酸類のラセミ混合物、リポ酸塩、エステル、アミドまたはそれらの誘導体、例えば米国特許第５，６２１，１１７号において記述されているようなものが含まれるが、それらに限定されない。様々な態様において、そのリポ酸は湿潤または乾燥フード組成物を含む組成物において投与することができ、それは含水フード、乾燥フード、サプリメントまたはトリーツの形であってよい。そのリポ酸はその中に、もしくはあらゆるフード組成物の表面上において、例えばその上への吹付けもしくは沈殿により組み込まれてよく、またはその飼料にスナック、サプリメント、トリーツとして、もしくはその飼料の液体部分、例えば水もしくは別の液体中で添加されてよい。そのリポ酸は、粉末、固体として、またはゲルを含む液体として投与されてよい。重要な観点は、その動物がプラスの効果をもたらすのに有効な量のリポ酸を与えられることである。典型的には、リポ酸の源はその組成物中に、その動物にとって非毒性であるままである量までの量で存在する。
【００３１】
[0070] アルファ−リポ酸の量は、少なくとも約２５ｐｐｍ、約５０ｐｐｍ、約１００ｐｐｍ、約２００ｐｐｍ、約３００ｐｐｍ、約５００ｐｐｍ、約７００ｐｐｍ、約９００ｐｐｍ、約１１００ｐｐｍ、約１２００ｐｐｍ、約１４００ｐｐｍ、約１６００ｐｐｍ、約１８００ｐｐｍ、約２０００ｐｐｍ、約２２００ｐｐｍ、約２４００ｐｐｍ、約２６００ｐｐｍ、約２８００ｐｐｍ、約３０００ｐｐｍ、または約３５００ｐｐｍから様々であることができる。様々な態様において、イヌに投与することができるリポ酸の範囲は、約１５０ｐｐｍ〜約４５００ｐｐｍである。様々な態様において、ネコに投与することができるリポ酸の範囲は、約６５ｐｐｍ〜約２６００ｐｐｍである。特定の説明的な態様において、量は約１００ｐｐｍからそのペットにとって非毒性であるままである量まで様々であることができる。他の態様において、範囲は約１００ｐｐｍから約２００ｐｐｍまでである。
【００３２】
[0071] 様々な態様において、リポ酸を含むフード組成物は、意図される受容動物に実質的に栄養上完全な飼料を提供する。“栄養上完全な飼料”は、その飼料において健康な動物の正常な健康の維持に十分な栄養を含む飼料である。
【００３３】
[0072] そのリポ酸またはその塩は、意図される動物の健康に有害ではない濃度で存在する。従って、例えば、そのリポ酸またはその塩は、望ましくない、または毒性の作用を引き起こさない濃度で存在する。
【００３４】
[0073] その組成物は液体または固体のフードであることができる。その組成物が液体である場合、そのリポ酸またはその塩は他の構成要素と混合されることができる。その組成物が固体である場合、そのリポ酸はその組成物上にコートされていて、その組成物の中に組み込まれていて、または両方であってよい。
【００３５】
[0074] 様々な態様において、そのリポ酸またはその塩は動物のフードに添加されてよい。様々な態様において、そのリポ酸またはその塩は動物のフードに、配合業者または製造業者により現場で、または動物の介護者（ｃａｒｅｇｉｖｅｒ）によりその動物に餌を与える前に添加されてよい。様々な態様において、そのリポ酸またはその塩は動物のフードの加工の間、例えばその組成物の他の構成要素の混合の間および／または後に添加されてよく、次いでそれが包装され、消費者に入手可能になる。その加工には、押し出し、缶詰め、ベーキング、および同様のこと、または当技術で既知であるペットフードを製造するあらゆる他の方法もしくはプロセスが含まれてよい。様々な態様において、そのリポ酸もしくはその塩は動物もしくは植物構成要素のような天然源により寄与されてよく、またはそのリポ酸もしくはその塩は合成に由来する源により寄与されてよく、またはそのリポ酸もしくはその塩は天然および合成的な源の混合物により寄与されてよい。
【００３６】
[0075] その組成物は、リポ酸またはその塩に加えて、コンパニオンアニマルによる消費に適した少なくとも１種類の構成要素を含み、それには脂肪、炭水化物、タンパク質、繊維、栄養調整剤（ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ ｂａｌａｎｃｉｎｇ ａｇｅｎｔｓ）、例えばビタミン類、鉱質、および微量元素、ならびにそれらの混合物が含まれるが、それらに限定されない。当業者は、典型的なフードに関するフード成分の量およびタイプを、その動物の食事要求量に基づいて、例えばその動物の種、年齢、大きさ、体重、健康、および機能に基づいて選択することができる。
【００３７】
[0076] そのフード組成物のフード成分部分は、約１００％までのあらゆる個々のフード成分を含むことができ、またはフード成分の様々な比率での混合物を含むことができる。特定の態様において、そのフード組成物は次の量でのフード成分の組み合わせを含む：約０重量％〜約５０重量％の脂肪、約０重量％〜約７５重量％の炭水化物、約０重量％〜約９５重量％のタンパク質、約０重量％〜約４０重量％の食物繊維、および約０重量％〜約１５重量％の１種類以上の栄養調整剤。
【００３８】
[0077] 特定の態様において、その脂肪および炭水化物フード成分は様々な源、例えば動物脂肪、魚油、植物油、肉、肉の副産物、穀物、他の動物または植物源、およびそれらの混合物から得られる。穀物には小麦、トウモロコシ、大麦、および米が含まれる。
【００３９】
[0078] 特定の態様において、そのタンパク質フード成分は様々な源、例えば植物、動物、または両方から得られる。動物性タンパク質には、肉、肉の副産物、牛乳系のもの（ｄａｉｒｙ）、および卵が含まれる。肉には家禽、魚、および動物、例えばウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、および同様のものからの肉が含まれ、肉の副産物には肺、腎臓、脳、肝臓、胃、および腸が含まれる。そのタンパク質フード成分は、遊離のアミノ酸および／またはペプチドであってもよい。好ましくは、そのタンパク質フード成分には肉、肉の副産物、乳製品、または卵が含まれる。
【００４０】
[0079] 特定の態様において、その繊維フード成分は様々な源、例えば植物繊維源、例えばセルロース、テンサイパルプ、落花生殻および大豆繊維から得られる。
[0080] 特定の態様において、その栄養調整剤は、当業者に既知の様々な源、例えばビタミンおよび鉱質サプリメントならびにフード成分から得られる。ビタミン類および鉱質は、欠乏を避け健康を維持するのに必要な量で含まれることができる。これらの量は当技術においてすぐに入手可能である。国家研究会議（ＮＲＣ）は、家畜に関するそのような栄養素の推奨量を提供している。例えば、Nutrient Requirements of Swine (第１０改訂版、Nat’l Academy Press、ワシントンD.C.、1998)、Nutrient Requirements of Poultry (第９改訂版、Nat’l Academy Press、ワシントンD.C.、1994)、Nutrient Requirements of Horses (第５改訂版、Nat’l Academy Press、ワシントンD.C.、1989)を参照。米国飼料検査官協会（ＡＡＦＣＯ）は、イヌおよびネコに関するそのような栄養素の推奨量を提供している。米国飼料検査官協会公式刊行物pp. 129-137 (2004)を参照。一般に食品添加物として有用であるビタミン類には、ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＤ、ビオチン、ビタミンＫ、葉酸、イノシトール、ナイアシン、およびパントテン酸が含まれる。食品添加物として有用である鉱質および微量元素には、カルシウム、リン、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、銅、亜鉛、塩素、鉄、セレン、ヨウ素、および鉄が含まれる。
【００４１】
[0081] 特定の態様において、そのフード組成物は当業者に既知の追加の成分、例えばビタミン類、鉱質、充填剤、美味性増進剤、結合剤、香味、安定剤、乳化剤、甘味剤、着色剤、緩衝剤、塩類、コーティング、および同様のものを含んでいてよい。安定剤には、その組成物の貯蔵寿命を増大させる傾向がある物質、例えば保存剤、相乗剤および隔離剤、包装用ガス（ｐａｃｋａｇｉｎｇ ｇａｓｅｓ）、安定剤、乳化剤、シックナー、ゲル化剤、および湿潤剤が含まれる。乳化剤および／または増粘剤の例には、ゼラチン、セルロースエーテル類、デンプン、デンプンエステル類、デンプンエーテル類、および修飾されたデンプン類が含まれる。それぞれの組成物の構成要素、フード成分、および他の成分に関する具体的な量は、様々な要素、例えばその組成物に含まれる個々の構成要素および成分；その動物の種；その動物の年齢、体重、全身の健康状態、性別、および食事；その動物の摂食速度；処置される疾患または病気のタイプ；および同様のことに依存するであろう。従って、その構成要素および成分の量は広く異なっていてよく、本明細書で記述される好ましい比率から逸脱してよい。
【００４２】
[0082] １つの説明的な態様において、その組成物は、例えばリポ酸またはその塩に加えて次のものの少なくとも１つを含んでいてもよい：
（ａ）約０％〜約７５％の炭水化物、
（ｂ）約２％〜約５０％の脂肪、
（ｃ）約０％〜約４０％の食物繊維、および
（ｄ）約０％〜約１５％の１種類以上の栄養調整剤。
【００４３】
[0083] 成体のコンパニオンペット、例えばイヌ科の動物およびネコ科の動物に与えられる飼料は、その年齢の動物に与えられる標準的な通常の飼料である。下表は１〜６歳のイヌ科の動物に関する典型的な飼料である。
【００４４】
表１：実例となるコンパニオンアニマル用ペットフード組成物
【００４５】
【表１】
【００４６】
[0084] その組成物は、その動物の健康を維持する、または向上させることを意図した追加の成分、例えばサプリメント、薬剤、ハーブ、全身用の薬物および組成物、ならびに同様のものを含むことができる。
【００４７】
[0085] 本発明の組成物は、１種類以上の疾患または病気を予防または処置するための１種類以上の追加の成分を含んでいてよい。
[0086] これを成し遂げる飼料中の構成要素は、抗酸化剤またはその混合物である。抗酸化剤はフリーラジカルを抑える（ｑｕｅｎｃｈｅｓ）物質である。そのような物質の例には、イチョウ、柑橘類の果肉、ブドウの絞りかす、トマトの絞りかす、ニンジンおよびホウレンソウのようなフード（全て好ましくは乾燥させたものである）、ならびに様々な他の物質、例えばベータ−カロテン、セレン、補酵素Ｑ１０（ユビキノン）、ルテイン、トコトリエノール類、大豆イソフラボン類、Ｓ−アデノシルメチオニン、グルタチオン、タウリン、Ｎ−アセチルシステイン、ビタミンＥ、ビタミンＣ、アルファ−リポ酸、ｌ−カルニチンおよび同様のものが含まれる。ビタミンＥはトコフェロールまたはトコフェロール類の混合物およびその様々な誘導体、例えばビタミンＥアセテート、スクシネート、パルミテートのようなエステル類および同様のものとして投与することができる。そのアルファ型が好ましいが、ベータ、ガンマ、およびデルタ型が含まれ得る。そのｄ型が好ましいが、ラセミ混合物が許容可能である。その型および誘導体は、ペットによる消化の後にビタミンＥ様の活性で機能するであろう。ビタミンＣは、この飼料において、アスコルビン酸ならびにペットによる消化の後にビタミンＣ様の活性で機能するであろうその様々な誘導体、例えばリン酸カルシウム塩類、コレステリル（ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｙｌ）塩、２−モノホスフェート、および同様のものとして投与することができる。それらは液体、半固体、固体および熱安定性の形のようなあらゆる形であることができる。アルファ−リポ酸は飼料中にアルファリポ酸として、または米国特許第５，６２１，１１７号におけるようなリポエート誘導体、ラセミ混合物、それらの塩類、エステル類もしくはアミド類として投与することができる。Ｌ−カルニチンは飼料中に投与することができ、カルニチンの様々な誘導体、例えばその塩類、例えば塩酸塩、フマル酸塩およびコハク酸塩類、ならびにアセチル化カルニチン、ならびに同様のものを用いることができる。
【００４８】
[0087] 飼料中で投与される量は、全てその飼料の重量％（乾燥物質基準）として、有効物質として計算され、それ自体は、それは遊離の物質として測定される。用いられる最大量は、毒性を引き起こすべきでない。少なくとも約１００ｐｐｍまたは少なくとも約１５０ｐｐｍのビタミンＥを用いることができる。約５００〜約１，０００ｐｐｍの好ましい範囲を用いることができる。必ずしもそうとは限らないが、約２０００ｐｐｍまたは約１５００ｐｐｍの最大値は一般には超過されない。ビタミンＣに関しては、少なくとも約５０ｐｐｍ、望ましくは少なくとも約７５ｐｐｍおよびより望ましくは少なくとも約１００ｐｐｍが用いられる。非毒性の最大値を用いることができる。アルファ−リポ酸の量は、少なくとも約２５、望ましくは少なくとも約５０ｐｐｍ、より望ましくは約１００ｐｐｍから様々であることができる。最大量は、約１００ｐｐｍからそのペットにとって非毒性であるままである量まで様々であることができる。好ましい範囲は、約１００ｐｐｍから約２００ｐｐｍまでである。ｌ−カルニチンに関しては、イヌ科の動物に関して約５０ｐｐｍ、望ましくは約２００ｐｐｍ、より望ましくは約３００ｐｐｍが有用な最小値である。ネコ科の動物に関しては、ｌ−カルニチンのわずかに高い最小値、例えば約１００ｐｐｍ、約２００ｐｐｍ、および約５００ｐｐｍを用いることができる。非毒性の最大量を用いることができ、それは例えば約５，０００ｐｐｍ未満である。イヌ科の動物に関して、より低い量を用いることができ、それは例えば約５，０００ｐｐｍ未満である。イヌ科の動物に関して、好ましい範囲は約２００ｐｐｍ〜約４００ｐｐｍである。ネコ科の動物に関して、好ましい範囲は約４００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである。約１〜１５ｐｐｍにおけるベータ−カロテンを用いることができる。約０．１〜約５ｐｐｍまでにおけるセレンを用いることができる。少なくとも５ｐｐｍのルテインを用いることができる。少なくとも約２５ｐｐｍのトコトリエノール類を用いることができる。少なくとも約２５ｐｐｍの補酵素Ｑ１０を用いることができる。少なくとも約５０ｐｐｍのＳ−アデノシルメチオニンを用いることができる。少なくとも約１０００ｐｐｍのタウリンを用いることができる。少なくとも約２５ｐｐｍの大豆イソフラボン類を用いることができる。少なくとも約５０ｐｐｍのＮ−アセチルシステインを用いることができる。少なくとも約５０ｐｐｍのグルタチオンを用いることができる。少なくとも５０ｐｐｍのイチョウの抽出物を用いることができる。
【００４９】
[0088] 次のものは、ＯＲＡＣ（酸素ラジカル吸収能力）含有量が高い生の成分である：ホウレンソウの搾りかす、トマトの搾りかす、柑橘類の果肉、ブドウの絞りかす、ニンジン顆粒、ブロッコリー、緑茶、イチョウおよびコーングルテンミール。
【００５０】
[0089] １％含有としてその飼料に添加された場合（トウモロコシのような低ＯＲＡＣ成分との合計５％の置き換えのため）、それらはその飼料全体のＯＲＡＣ含有量を増大させ、これらの構成要素を含む飼料を食べた動物の血漿のＯＲＡＣ含有量を増大させた。好ましくは、その飼料への合計５％の添加のために４種類の他の１％の成分との組み合わせで１％で添加される場合、乾燥物質のグラム当たり２５μモルのトロロックス当量を超えるＯＲＡＣ含有量を有するあらゆる成分を用いることができるであろう。特定の態様において、その組成物はさらに有効量の、グルコサミン、コンドロイチン、コンドロイチン硫酸、メチルスルホニルメタン（“ＭＳＭ”）、クレアチン、抗酸化剤、ペルナカナリキュラタ（Ｐｅｒｎａ ｃａｎａｌｉｃｕｌａｔａ）、オメガ−３脂肪酸類、オメガ−６脂肪酸類およびそれらの混合物からなるグループから選択される、少なくとも１種類の物質を含む。
【００５１】
[0090] 様々な態様において、有効量のリポ酸またはその塩を含むサプリメントは、さらに有効量の、アスピリン、抗炎症剤、例えばイブプロフェン、ＣＯＸ−２阻害剤、ならびに他の薬用および医薬組成物ならびにそれらの組み合わせを含む、少なくとも１種類の物質を含む。サプリメントには全体の栄養バランスまたは性能を向上させるために別の飼料と共に用いられる飼料が含まれるが、それに限定されない。サプリメントには、他の飼料に対してサプリメントとして希釈されずに供給される、別々に入手可能である動物のレーションの他の部分と共に自由選択で提供される、または動物の標準の飼料で希釈され、それと混合されて完全な試料を生成する組成物が含まれる。ＡＡＦＣＯは例えば米国飼料検査官協会公式刊行物p. 220 (2003)においてサプリメントに関する論考を提供している。サプリメントは、例えば粉末、液体、シロップ、丸剤、および封入された組成物を含む様々な形であってよい。
【００５２】
[0091] 特定の態様において、その組成物はトリーツであることができる。トリーツには、動物を食事時間ではない間に食べるように誘うために動物に与えられる組成物、例えばイヌ科の動物のためのドッグボーンが含まれる。トリーツはその組成が１種類以上の栄養素を含む栄養性のものであってよく、フード様の組成を有していてよい。非栄養性のトリーツには、非毒性であるあらゆる他のトリーツが含まれる。その組成物または構成要素はそのトリーツの上にコートされていて、そのトリーツの中に組み込まれていて、または両方であってよい。本発明のトリーツは、乾燥フードに関して用いられるプロセスに類似した押し出しまたはベーキングプロセスにより調製することができる。組成物を既存のトリーツの形の外側の上にコートする、または組成物を既存のトリーツの形の中に注入するために、他のプロセスを用いてもよい。
【００５３】
[0092] 特定の態様において、その組成物は玩具であることができる。玩具には、人工の骨のような噛むことができる玩具が含まれる。リポ酸またはその塩は、その玩具の表面上、もしくはその玩具の構成要素の表面上のコーティングを形成している、その玩具全体にわたって部分的にもしくは完全に組み込まれている、または両方であることができる。１態様において、そのリポ酸またはその塩は意図される使用者により口に入れられることが可能である。現在市場に出されている広い範囲の適切な玩具が存在し、それは例えば米国特許第５，３３９，７７１号、米国特許第５，４１９，２８３号、およびそれらにおいて開示されている参考文献である。この発明は、部分的に消費可能である玩具、例えばプラスチックの構成要素を含む玩具、ならびに完全に消費可能である玩具、例えば生皮および様々な人工の骨の両方を提供する。本発明は好ましくはイヌまたはネコによる使用のための玩具を提供する。
【００５４】
本発明の組成物の調製
[0093] 本発明の組成物は、当業者に既知の一般に用いられるフード調製プロセスを用いて、缶詰めされた、または湿潤した形で調製されてよい。典型的には、挽いた動物のタンパク質性組織を、他の成分、例えば魚油、穀物粒、釣り合いを取る成分、特別な目的での添加物（例えば、ビタミンおよび鉱質の混合物、無機塩類、セルロースおよびテンサイパルプ、充填剤、ならびに同様のもの）および水と、加工に十分な量で混合する。これらの成分は、構成要素の混合の間に加熱するのに適した容器中で混合される。その混合物の加熱はあらゆる適切な方法、例えば直接蒸気噴射を用いて、または熱交換器を備えた容器を用いて達成される。最後の成分の添加の後、その混合物を約５０°Ｆ〜約２１２°Ｆの温度に加熱する。この範囲外の温度は許容できるが、他の加工助剤の使用無しでは商業的に実用的で無い可能性がある。適切な温度まで加熱した際、その物質は典型的には濃厚な液体の形であろう。その濃厚な液体を缶の中に充填する。蓋を取り付け、容器を密閉して密封する。次いでその密封された缶を、一般に用いられる、内容物を滅菌するように設計された設備の中に置く。滅菌は通常約２３０°Ｆより高い温度に、用いられる温度、組成、および同様の要素に依存する適切な時間加熱することにより達成される。本発明の組成物は、調製の前、間、または後にフード組成物に添加することができる。
【００５５】
[0094] フード組成物は、当業者に既知の一般に用いられるプロセスを用いて乾燥した形で調製されてよい。典型的には、乾燥した成分、例えば動物性タンパク質、植物性タンパク質、穀物、および同様のものを挽いて一緒に混合する。次いで脂肪、油、動物性タンパク質、水、および同様のものを含む湿潤した、または液体の成分を、その乾燥混合物に添加してそれと混合する。次いでその混合物をキブル（ｋｉｂｂｌｅｓ）または同様の乾燥した断片に加工する。キブルはしばしば、乾燥および湿潤成分の混合物に高い圧力および温度での機械的仕事を施し、小さな開口部を押し通し、回転するナイフにより切り落としてキブルにする、押し出しプロセスを用いて形成される。次いでその湿潤したキブルを乾燥させ、場合により１種類以上の局所的コーティング、例えば香味、脂肪、油、粉末、および同様のものでコートする。キブルは押し出しではなくベーキングプロセスを用いて練った生地（ｄｏｕｇｈ）から作ることもでき、ここでその練った生地を型の中に置いた後乾燥−加熱加工を行う。そのフード組成物は、米国特許第５，３３９，７７１号および第５，４１９，２８３号において開示されているプロセスのような、乾燥フードまたは玩具に関して上記で記述したプロセスに類似した押し出しまたはベーキングプロセスを用いたトリーツの形であることもできる。本発明の組成物は、調製の前、間、または後にフード組成物に添加することができる。
【００５６】
本発明の組成物を用いて障害を処置または予防する方法
[0095] 本発明は、有効量のリポ酸またはその塩を含む組成物をそれを必要とするコンパニオンアニマルに投与することにより特定の障害を処置または予防する方法も含む。
【００５７】
[0096] ある量の抗酸化剤またはその混合物をコンパニオンアニマル用ペット飼料に添加することは、ペット、例えば成体のペットにおいて健康な体組成を維持または促進する、例えば体重または体脂肪の減少、および赤身の筋肉量の百分率を増大させることができる。成体という用語は一般に、少なくも１〜６歳のイヌ科の動物および少なくも１〜６歳のネコ科の動物を意味することを意図する。老齢のイヌまたはネコは７歳以上である。
【００５８】
[0097] 発明者は、健康な体組成を維持または促進すること、例えば体重もしくは体脂肪の減少、または赤身の筋肉量の百分率の増大を達成することに成功した。
[0098] 本発明は、本明細書で記述されている特定の方法論、プロトコル、および試薬に、それらは様々であってよいため、限定されない。さらに、本明細書で用いられる用語法は特定の態様のみを記述するためのものであって、本発明の範囲を限定することを意図するものでは無い。本明細書において、および添付された特許請求の範囲において用いられる単数形“ａ，”“ａｎ，”および“ｔｈｅ”は、文脈が明確にそうではないと指示しない限り複数への言及を含む。同様に、“含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）”、“含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）”、および“含んでいる”という語は、排他的にではなく包括的に解釈されるべきである。別途定義されない限り、本明細書で用いられる全ての技術的および科学的な用語ならびにあらゆる頭字語は、本発明の分野における当業者により一般的に理解されているのと同じ意味を有する。本明細書で記述されている組成物、方法、製造物、または他の手段もしくは材料に類似した、または均等なあらゆる組成物、方法、製造物、または他の手段もしくは材料を本発明の実施において用いることができるが、好ましい組成物、方法、製造物、または他の手段もしくは材料は本明細書で記述されている。
【実施例】
【００５９】
[0099] この発明は下記のその好ましい態様の実施例によりさらに説明することができるが、これらの実施例は単に説明のためだけに含まれているのであり、別途明確に示さない限り本発明の範囲を限定することを意図するものでは無いことは理解されるであろう。
【００６０】
実施例１
[00100] ３０匹の成体の無作為な出所のイヌをこの試験のために利用した。イヌは試験の開始前に少なくとも１０月齢であり、妊娠しておらず、授乳しておらず、適当な体重であった。動物を食事処置のために、５個のグループにそれぞれのグループあたり３匹のオスおよび３匹のメスで無作為抽出した。
【００６１】
[00101] ２週間の前給餌期間（ｐｒｅｆｅｅｄｉｎｇ ｐｅｒｉｏｄ）の間、全てのイヌに、米国飼料検査官協会により提案された栄養素に関する全ての推奨（ＡＡＦＣＯ ２０００）を満たす、または超える対照フード（０ｐｐｍのｄｌ−アルファ−リポ酸を添加した）を与えた（表２）。その前給餌期間の後、イヌを次のｄｌ−アルファ−リポ酸目標含有量（乾燥物質基準）の１つを有する５個の処置グループに無作為抽出した：０ｐｐｍ、１５０ｐｐｍ、１５００ｐｐｍ、３０００ｐｐｍ、４５００ｐｐｍ。全ての飼料（対照およびアルファリポ酸）において、ビタミンＥを添加し、それは６００〜１０００国際単位のレベルで存在し、ビタミンＣを１００〜２００ｐｐｍのレベルで添加した。
【００６２】
[00102] 試験フードは、水以外で唯一の栄養源であった。新鮮な水を適宜供給した。イヌを選択し、最初の体重を得た後、フードの用量をそれぞれのイヌに関してそのフードの予想されるＭＥに基づいて計算した。最初のフード用量の計算は、通常の活動を説明するための因子により修正された、そのイヌに関する維持エネルギー必要量（ＭＥＲ）に基づいており、次の式により計算された：
ＭＥＲ（ｋｃａｌ／ｄａｙ）＝１．６×ＲＥＲ（安静時エネルギー必要量）
ここで：ＲＥＲ（ｋｃａｌ／ｄａｙ）＝７０×体重（ｋｇ）０．７５。
【００６３】
[00103] イヌの体重を毎週量り、それらの最適体重を維持するのに十分なフードを与えるため、必要に応じてフードの用量を調節した。最適体重は、５点スケール上の３であるように決定された。フードの用量の調節の後にイヌが最初の体重の−１０％の範囲内の体重を維持しなかった場合、それは試験から外された。全ての体重およびフード摂取量の測定値を記録した。
【００６４】
[00104] 試料をすり潰し、０．１００＋／−０．００１ｇの試料を５．０ｍＬのリン酸緩衝液（１０ｍＭ Ｎａ２ＨＰＯ４、２ｍＭエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、０．９％ ＮａＣｌ、ｐＨ ７．４）の中に２回抽出した。２５０μＬの抽出物を、Ｔｅｆｌｏｎで裏打ちされたキャップを有する５ｍＬガラス遠心チューブの中に入れた。１５μＬのＥＤＴＡ溶液（約１Ｍ ＮａＯＨでｐＨ ７．８に調節した１００ｍＭ ＥＤＴＡ）および５０μＬの新しく調製した５ｍＭジチオエリトリトール（ＤＴＥ）を添加した。その溶液をボルテックスし、室温で５分間保温した。次いで１０μＬの１Ｍ Ｈ３ＰＯ４および２．０ｍＬのジエチルエーテルを添加した。チューブにキャップを付け、ボルテックスし、１５００×ｇで３分間室温で遠心分離した。エーテル層を別の５ｍＬのガラス遠心チューブに移し、一方で水層を１．５ｍＬのエーテルでさらに２回抽出した。同じ試料からの全ての抽出物を合わせた。次いでその抽出物を室温において水浴中で窒素エバポレーター中で乾燥させる。この時点で、試料にキャップを付け、一夜凍結させた。
【００６５】
[00105] 次いで乾燥させた抽出物を解かし、７０μＬのＳＤＳ／ＥＤＴＡ溶液（０．１１％ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、１５ｍＭ ＥＤＴＡ、０．９％ＮａＣｌ）および５μＬの新しく調製した１ｍＭ ＤＴＥで再構成した。次いで５０μＬの新しく調製したＮａＢＨ４をそれぞれのチューブに添加した。そのチューブをボルテックスし、室温で１０分間保温した。１０分後、その試料を−７０℃で凍結した。その溶液を解かす前に、２０μＬの２Ｍ ＨＣｌを添加した。その溶液を解かした後に、８００μＬの１００ｍＭ ＮＨ４ＣＯ３を添加した。その溶液をボルテックスし、５μＬのアセトニトリル中１００ｍＭモノブロモジアマン（ｍｏｎｏｂｒｏｍｏｄｉａｍａｎｅ）溶液（ｍＢＢｒ）を添加した。次いでその溶液を室温において暗所で９０分間保温した。
【００６６】
[00106] １．５ｍＬのジクロロメタンを用いた抽出により、保温後の試料から過剰なｍＢＢｒおよびＤＴＥ誘導体を除去した。その水層をＨＰＬＣ上に置いた。約２Ｍ ＮＨ４ＯＨを用いてｐＨ ３．９５に調節した、３０％アセトニトリル、１％酢酸で構成され、１．０ｍＬ／分の流速でポンプで流された（ｐｕｍｐｅｄ）移動相を用いて、注入あたり１５分間の均一溶媒での溶離でリポ酸を分離した。この調製は、押し出されたフードの密度が１ｇ／ｍＬに等しいと仮定した。
【００６７】
[00107] 全血球計数および血液の生化学分析のために、試験の開始の２週間前に、ならびに０、２８、５６、８４、１１２、１４０および１６８日目に再度、血液を無菌的に集めた。加えて、食事介入の０、２８および８４日目に、白血球の単離のために１５ｍｌの全血を集めた。
【００６８】
[00108] ヘパリン処理した（Ｈｅｐａｒｉｎｚｅｄ）全血を、５０ｍｌ Ａｃｃｕｓｐｉｎコニカル遠心チューブ（Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ）上に層状に入れ（ｌａｙｅｒｅｄ）、等体積のリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を添加した。試料を７００ｇで３０分間、ブレーキ無しで遠心分離した。単球の層を回収し、１５ｍｌコニカル遠心チューブに移し、１〜３ｍｌのＰＢ中で再懸濁し、前回のように遠心分離した（第１洗浄）。第２洗浄を第１洗浄のように行った。最後に、細胞を回収し、過塩素酸（１０％ ｗ／ｖ）中で懸濁し、分析まで−７０℃で冷凍した。
【００６９】
[00109] 試料を−７０℃の冷凍庫からその中にドライアイスを有する冷却器の中に移した。バイアルを冷却遠心機中で１２，０００ｒｐｍで５分間遠心分離した。グルタチオン（ＧＳＨ）分析のため、上清の部分量（ａｌｉｑｕｏｔ）をコニカル試験チューブに移した。
【００７０】
[00110] 酸に可溶性の抽出物の誘導体化は、Ｊｏｎｅｓにより修正された（Ｊｏｎｅｓら）、Ｒｅｅｄおよび共同研究者ら（Ｆａｒｉｓｓら）の方法によった。
[00111] 手短には、１５０μＬの抽出物または外部標準を１．５ｍｌエッペンドルフチューブの中に入れ、続いて２０μγ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ内部標準を添加し、５０μＬのＩＡＡを添加し、続いて混合した。その溶液を、ＫＯＨ−ＫＨＣＯ３の使用溶液を用いることによりｐＨ約１０（紫色）に調節した。溶液を暗所において室温下で１時間保温した。サンガー試薬を総体積と同じ体積で添加し、その溶液を暗所において室温で一夜（２０時間）保温した。
【００７１】
[00112] 保温の後、溶液を１２０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、上清を別の１．５ｍｌエッペンドルフチューブの中に移した。２００μＬの上清を３００μＬの注入口を有する琥珀色のオートバイアルの中に入れ、その上端にＨＰＬＣ分析のためのクリンパを取り付けた。
【００７２】
[00113] 溶媒および分離条件は記述されている通りであった（Ｆａｒｉｓｓ， Ｊｏｎｅｓ）。ＧＳＨおよびＧＳＳＧのレベルを、信頼できる標準物質と比較して定量した。ガンマ−グルタミル−グルタメートを内部標準として用いて誘導体化の効率を評価した。
【００７３】
[00114] 臨床化学、血液学および体重に関する値のベースラインに対する比較を、ウィンドウズ版ＳＡＳ上での対応t検定として、有意性をＰ＜０．０５で設定して分析した。それぞれの測定された時点における値の平均を、一元配置ＡＮＯＶＡにより、有意性をＰ＜０．０５で設定して分離した。ＧＳＨ：ＧＳＳＧにおける、８４日目およびベースラインの間の差を、ウィンドウズ版ＳＡＳにより、一元配置ＡＮＯＶＡで有意性をＰ＜０．０５で設定してグループ間で分析した。
【００７４】
結果
[00115] ７回の連続するアッセイ（０、２８、５６、８４、１１２、１４０、１６８日目）を経て決定されたフード中のリポ酸の濃度（ｐｐｍ）は、予想されるアッセイ感度および我々の設備で典型的に生じる生成パラメーターの範囲内であった(表２）。
【００７５】
[00116] そのフード摂取データに目立つ点は無かった。全てのグループ中のほとんどの動物は、６ヶ月目の時点で、平均して、試験開始の時点よりも多くのフードを摂取した。体重のデータは、４５００ｐｐｍ含有グループにおいて最初にいくらかの体重の減少が起きたが、その変化は６ヶ月目の時点までに反転したようであったことを除いて目立つ点は無かった。体調の点数は、この軽度の体重減少に影響を受けなかったようであった。
【００７６】
[00117] 日常的な身体検査は、栄養に関連する異常またはｄｌ−アルファ−リポ酸の毒性の証拠を何も示さなかった。試験母集団中のすべての動物は、試験の経過全体の間、正常なままであった。試験の経過の間で数匹の動物において時々嘔吐が観察された；しかし、その嘔吐をリポ酸に起因し得る可能性があるという結論が導かれるであろう傾向は観察されなかった。最も高い含有グループ中の１匹の動物を、体重減少および白血球増加症のため、２１日目に試験から外した。この動物における白血球増加症は試験の終了までに解決せず、これはいくつかの他の疾患プロセスに起因し得ると思われる。
【００７７】
[00118] ２８、５６、８４、１１２、１４０および１６８日目に関する血清の生化学的値をイヌの同じグループに関する最初の値と比較した際に、いくつかの統計的な差が認められたが、これらの値は実験室での基準範囲（ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｒａｎｇｅ）内であるかそれに非常に近く、数ヶ月にわたる一貫した傾向が認められたので、これらのいずれも生物学的に有意であるとはみなされなかった。それぞれの期間における対照および他の処置グループの間の比較もいくつかの統計的な差を示したが、これらの値は臨床検査室での基準範囲内であるかそれに非常に近く、傾向が存在しなかったので、これらのいずれも生物学的に有意であるとはみなされなかった。
【００７８】
[00119] ２８、５６、８４、１１２、１４０および１６８日目に関する血液学的値をイヌの同じグループに関する最初の値と比較した際に、いくつかの統計的な差が認められた；しかし、これらの値は実験室での基準範囲内であるかそれに非常に近く、傾向が存在しなかったので、これらのいずれも生物学的に有意であるとはみなされなかった。それぞれの期間における対照および他の処置グループの間の比較はいくつかの統計的な差を示した；しかし、これらの値は臨床検査室での基準範囲内であるかそれに非常に近く、傾向が存在しなかったので、これらのいずれも生物学的に有意であるとはみなされなかった。
【００７９】
ＧＳＨ：ＧＳＳＧ比
[00120] ８４日間の給餌にわたるＧＳＨ：ＧＳＳＧ比の変化は試料の有意な全体的な効果を示し（Ｐ＝０．０２４）、すべての補われたグループでその比が増大した（表３）。ＡＮＯＶＡは、最も低い、および最も高い含有に関して基礎フードと比較して有意な差を示したが、最も大きな数値の増加は最も低い含有レベルにおいてであった。すなわち、最も高い、および最も低い含有に関するＧＳＨ：ＧＳＳＧ比の変化は、この同じ期間にわたって基礎フードで観察された変化と有意に異なっていた。８４日目における４点に関する比は、これらの試料の全て（１匹の対照、３匹の処置グループ）でＧＳＳＧが検出できなかったため、決定することができなかった。従って、補われたグループに関する値は、そのアッセイが８４日目における低レベルのＧＳＳＧを検出するのに十分に高感度であったならば、さらに高いＧＳＨ：ＧＳＳＧの比を示していた可能性がある。
【００８０】
表２
【００８１】
【表２】
【００８２】
表３
【００８３】
【表３】
【００８４】
*対照および４，５００ｐｐｍグループでは１匹のイヌが８４日目において検出可能なＧＳＳＧを有しておらず、一方で３，０００ｐｐｍグループでは２匹のイヌが８４日目において検出可能なＧＳＳＧを有していなかった。
【００８５】
[00121] アルファ−リポ酸に関して、さらなる観察を適用可能である。飼料中のアルファ−リポ酸の長期にわたる給餌は、安全かつ有効である。それは還元型グルタチオン（ＧＳＨ）対酸化型グルタチオン（ＧＳＳＧ）の比を向上させる。飼料中のアルファ−リポ酸の長期にわたる投与は、最低１、２、３、４、５または６カ月の期間から、１、２、３、４、５年の期間、またはその動物の一生涯を含むさらに長い期間を通してまでであることができる。そのアルファ−リポ酸は飼料中でカプセル封入のような特別な保護無しで機能し、医薬において用いられる単位剤形、例えば錠剤、丸剤、カプセルおよび同様のもののような単位剤形で飼料中に存在する必要がない。そのリポ酸は、飼料中で飼料の最低約２５、５０、７５または１００ｐｐｍで提供される。最高範囲はその毒性レベルのすぐ下であり、飼料の約４００、３００または２００ｐｐｍに至るまでと幅広い。一般に、１日あたり約６または７ｍｇ／動物のｋｇ体重を超えることはなく、より一般には約５ｍｇ／動物のｋｇ体重より上ではない。アルファ−リポ酸は抗酸化防御能力を向上させ、さらにその動物の酸化的傷害に耐える能力を向上させる。この全ては、適量存在する他の抗酸化剤、例えばビタミンＥおよびビタミンＣと共になされる。これは、アルファ−リポ酸の作用がビタミンＣおよび／またはビタミンＥの作用を超えていることを実証している。
【００８６】
実施例２
材料および方法：
[00122] ３０匹のイヌを用いて、ＡＡＦＣＯ対照フードまたは魚油を含む試験フードと比較した際のリポ酸の効果を決定した。
【００８７】
[00123] ＡＡＦＣＯ対照フード、魚油を含むフード、およびリポ酸を含むフードの間で差次的遺伝子発現プロフィールを試験した。ｄ３０において、最小で１．３倍の変化で、ＡＡＦＣＯ対照と比較して１２１２個の遺伝子のリストを生成し、魚油を含むフードと比較して１８９６個の遺伝子のリストを生成した。
【００８８】
[00124] ＲＮＡ抽出：全ＲＮＡを全血試料からＰＡＸｇｅｎｅ ＲＮＡ単離キットを用いて単離した。全ての測定は、ｃａｎｉｎｅ ２ Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ ｇｅｎｅｃｈｉｐを用いて行った。統計分析のため、全ての測定値をＲＭＡを用いて標準化した。全ての分析はＰａｒｔｅｋを用いて行った。対象および試験フードの間で差次的に発現している遺伝子に関してＡＮＯＶＡ ｔ−検定を行い、それはｐ−値カットオフ０．１、倍率変化＞＋／−１．３に基づいて選択された。
【００８９】
[00125] 遺伝子発現：１５０ｐｐｍのリポ酸を含む試験フードを与えられたイヌにおいて、ＡＡＦＣＯ対照フードを与えられたイヌと比較した際に１２１２個の遺伝子の発現が変化していることが分かった。加えて、リポ酸を含む試験フードを与えられたイヌにおいて、魚油を含む試験フードと比較して１８９６個の遺伝子の発現が変化していることが分かった。表７は、機能によりグループ分けした遺伝子および対照フードまたは魚油を含むフードのどちらかを与えられたそれらと比較した発現の方向を示す。
【００９０】
[00126] メタボロミクス：血漿代謝産物を分析し、対象を与えられたイヌと比較した倍率変化として比較した。
[00127] バイオマーカーの測定：ＥＬＩＳＡに基づくキットを用いて血清軟骨マーカーを測定し、軟骨マーカーの濃度を決定した。０日目を分析における共変数として用いて、ベースラインの値に関して調整した。
【００９１】
[00128] 結果：リポ酸のフードへの添加は、結果として、ＩＩ型コラーゲンＣ−プロペプチドおよびＩＩ型コラーゲンのカルボキシ末端に架橋されたテロペプチド断片における、リポ酸無しの類似のフードよりも大きな減少をもたらした。これらの２種類のマーカーは骨関節炎を有するイヌにおいて増加することが知られている。加えて、リポ酸を含むフードを与えられたイヌは脂肪を失い、これはエネルギーのための脂肪の利用（脂肪酸化）の増大およびより健康な体重維持のためのグルコースの産生の減少を示唆している。言い換えれば、リポ酸を与えられたイヌは利用可能なグルコースをより効率的に利用し、エネルギーの使用に関してそれらの代謝を脂肪の動員に移行させた。加えて、代謝産物であるヒドロキシプロリンが血漿中で減少しており、この代謝産物はほとんど排他的に軟骨から生じるため、これは低減した軟骨破壊を示唆している。さらに、血清白血球から決定された遺伝子発現の変化はその証拠を支持し、軟骨構成要素の合成の増大および軟骨を分解する酵素の発現の減少による軟骨の保護の増大を示唆している。最後に、遺伝子発現の変化は、グルコースからのピルベートの形成を阻害し、エネルギーに関して代謝をアセチル−ＣｏＡの往復（ｓｈｕｔｔｌｉｎｇ）に移行させるＰＤＫ４の増加およびグルコース輸送体の上方制御による向上した脂肪利用を示唆している。リポ酸を与えられたイヌは、対照のフードを与えられたイヌと比較してゲノム的により引き締まっている（ｌｅａｎｅｒ）ようにも見えた。
【００９２】
[00129] 表は、リポ酸を用いた処置に関する、脂肪および体重ならびに軟骨マーカーにおける違いを示している。
[00130] 表４は、魚油を加えた対照およびリポ酸を加えた対照を与えられたイヌと比較した、対照飼料を与えられたイヌの体組成の変化を図説している。表４において図説されているように、リポ酸を加えた対照を与えられたイヌは９０日の処置期間にわたって最も大きい体重の変化を示した。
【００９３】
【表４】
【００９４】
[00131] 表５は、魚油を加えた対照およびリポ酸を加えた対照を与えられたイヌと比較した、対照飼料を与えられたイヌにおけるピルベートの血中レベルの変化を図説している。表５において図説されているように、リポ酸を加えた対照を与えられたイヌは３０日の処置期間にわたって最も大きいピルベートの血中レベルの変化を示した。
【００９５】
【表５】
【００９６】
ａ．０日目の値を分析における共変数として用いた。
[00132] 表６は、魚油を加えた対照およびリポ酸を加えた対照を３０日間与えられたイヌと比較した、対照飼料を与えられた後にゲノム的に太っていると分類されたイヌの百分率を図説している。表６において図説されているように、リポ酸を加えた対照を与えられたイヌは、３０日の処置期間の後に、身体的に太ったイヌとゲノム的に似ていなかった。
【００９７】
【表６】
【００９８】
表７．対照または上質（ｕｐｇｒａｄｅ）フード（上質は魚油を含む）と比較した、リポ酸により変化した軟骨およびエネルギー代謝に関連する遺伝子
【００９９】
【表７−１】
【０１００】
【表７−２】
【０１０１】
[00133] 表８は、本発明の説明的なペットフード組成物中の成分を図説する。
表８．組成物を作るために用いられる成分
【０１０２】
【表８】
【０１０３】
[00134] 表９は、リポ酸を含むペットフードを９０日間与えられたイヌと比較した、対照飼料を与えられた後のイヌに関する二重エネルギーＸ線吸収測定（ＤＥＸＡ）による測定結果を図説する。ＤＥＸＡを用いた体脂肪の測定は、健康の評価に関して体重よりも正確である。イヌは多くの筋肉を有する可能性があるが、多くの高さ／体重チャートにより“体重過多”とみなされる可能性がある。逆もまた真である可能性がある−イヌは多くの脂肪およびわずかな筋肉を有する可能性があり、“太り過ぎ”であるが体重過多ではない可能性がある。
【０１０４】
【表９】
【０１０５】
[00135] 表１０は１８０日目における体組成を図説し、５種類の異なるペットフードを１８０日間与えられたイヌに関して最初の共変数を用いて処置の効果を決定する。
【０１０６】
【表１０】
【０１０７】
[00136] 表１１は、リポ酸を含むペットフードを３０日間与えられたイヌと比較した、対照飼料を与えられた後のイヌに関する血液試料中で測定された代謝産物の変化を図説する。表１１において図説されているように、リポ酸を加えた対照を与えられたイヌは３０日後に腎臓のマーカーの減少を示した。
【０１０８】
【表１１】
【０１０９】
[00137] 本発明は、本発明の少数の観点の説明として意図されている実施例において開示されている特定の態様により範囲を限定されず、機能的に均等であるあらゆる態様はこの発明の範囲内である。実際、本明細書において示され、記述されているそれらに加えて、本発明の様々な修正が当業者に明らかになると考えられ、それは添付された特許請求の範囲の範囲内に入ることを意図する。
【０１１０】
[00138] 本明細書において引用されている、または参照されている全ての特許、特許出願、刊行物、および他の参考文献を、法により許される程度まで本明細書に援用する。それらの参考文献の論考は、単にその中でなされた主張を要約することだけを意図している。あらゆるそのような特許、特許出願、刊行物または参考文献、またはそれらのあらゆる部分が本発明に関連する先行技術であることを自認せず、そのような特許、特許出願、刊行物および他の参考文献の正確さおよび妥当性に挑戦する権利は明確に残されている。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
それを必要とするコンパニオンアニマルにおいて健康な体組成を維持または促進するための方法であって、そのコンパニオンアニマルに健康な体組成を維持または促進するのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む組成物を与えることを含む方法。
【請求項２】
その有効量が少なくとも約５０ｐｐｍである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
その有効量が少なくとも約１００ｐｐｍである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
その有効量が約１００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
その有効量が約１００ｐｐｍ〜約２００ｐｐｍである、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
そのコンパニオンアニマルがイヌである、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
そのコンパニオンアニマルがネコである、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも１５日間投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも３０日間投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも４５日間投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が毎日投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
それを必要とするコンパニオンアニマルにおいて体重の減少を誘導するための方法であって、そのコンパニオンアニマルに体重の減少を誘導するのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む組成物を与えることを含む方法。
【請求項１３】
その有効量が少なくとも約５０ｐｐｍである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
その有効量が少なくとも約１００ｐｐｍである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
その有効量が約１００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
その有効量が約１００ｐｐｍ〜約２００ｐｐｍである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】
そのコンパニオンアニマルがイヌである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１８】
そのコンパニオンアニマルがネコである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１９】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも１５日間投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項２０】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも３０日間投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項２１】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも４５日間投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項２２】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が毎日投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項２３】
それを必要とするコンパニオンアニマルにおいて体脂肪の減少を誘導するための方法であって、そのコンパニオンアニマルに体脂肪の減少を誘導するのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む組成物を与えることを含む方法。
【請求項２４】
その有効量が少なくとも約５０ｐｐｍである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
その有効量が少なくとも約１００ｐｐｍである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
その有効量が約１００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２７】
その有効量が約１００ｐｐｍ〜約２００ｐｐｍである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２８】
そのコンパニオンアニマルがイヌである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２９】
そのコンパニオンアニマルがネコである、請求項２３に記載の方法。
【請求項３０】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも１５日間投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項３１】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも３０日間投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項３２】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも４５日間投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項３３】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が毎日投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項３４】
それを必要とするコンパニオンアニマルにおいて赤身の筋肉量の百分率を増大させるための方法であって、そのコンパニオンアニマルに赤身の筋肉量の百分率を増大させるのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む組成物を与えることを含む方法。
【請求項３５】
その有効量が少なくとも約５０ｐｐｍである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
その有効量が少なくとも約１００ｐｐｍである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
その有効量が約１００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３８】
その有効量が約１００ｐｐｍ〜約２００ｐｐｍである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３９】
そのコンパニオンアニマルがイヌである、請求項３４に記載の方法。
【請求項４０】
そのコンパニオンアニマルがネコである、請求項３４に記載の方法。
【請求項４１】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも１５日間投与される、請求項３４に記載の方法。
【請求項４２】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも３０日間投与される、請求項３４に記載の方法。
【請求項４３】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも４５日間投与される、請求項３４に記載の方法。
【請求項４４】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が毎日投与される、請求項３４に記載の方法。
【請求項１】
それを必要とするコンパニオンアニマルにおいて健康な体組成を維持または促進するための方法であって、そのコンパニオンアニマルに健康な体組成を維持または促進するのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む組成物を与えることを含む方法。
【請求項２】
その有効量が少なくとも約５０ｐｐｍである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
その有効量が少なくとも約１００ｐｐｍである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
その有効量が約１００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
その有効量が約１００ｐｐｍ〜約２００ｐｐｍである、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
そのコンパニオンアニマルがイヌである、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
そのコンパニオンアニマルがネコである、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも１５日間投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも３０日間投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも４５日間投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が毎日投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
それを必要とするコンパニオンアニマルにおいて体重の減少を誘導するための方法であって、そのコンパニオンアニマルに体重の減少を誘導するのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む組成物を与えることを含む方法。
【請求項１３】
その有効量が少なくとも約５０ｐｐｍである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
その有効量が少なくとも約１００ｐｐｍである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
その有効量が約１００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
その有効量が約１００ｐｐｍ〜約２００ｐｐｍである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】
そのコンパニオンアニマルがイヌである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１８】
そのコンパニオンアニマルがネコである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１９】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも１５日間投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項２０】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも３０日間投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項２１】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも４５日間投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項２２】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が毎日投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項２３】
それを必要とするコンパニオンアニマルにおいて体脂肪の減少を誘導するための方法であって、そのコンパニオンアニマルに体脂肪の減少を誘導するのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む組成物を与えることを含む方法。
【請求項２４】
その有効量が少なくとも約５０ｐｐｍである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
その有効量が少なくとも約１００ｐｐｍである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
その有効量が約１００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２７】
その有効量が約１００ｐｐｍ〜約２００ｐｐｍである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２８】
そのコンパニオンアニマルがイヌである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２９】
そのコンパニオンアニマルがネコである、請求項２３に記載の方法。
【請求項３０】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも１５日間投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項３１】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも３０日間投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項３２】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも４５日間投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項３３】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が毎日投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項３４】
それを必要とするコンパニオンアニマルにおいて赤身の筋肉量の百分率を増大させるための方法であって、そのコンパニオンアニマルに赤身の筋肉量の百分率を増大させるのに有効な量のリポ酸またはその塩を含む組成物を与えることを含む方法。
【請求項３５】
その有効量が少なくとも約５０ｐｐｍである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
その有効量が少なくとも約１００ｐｐｍである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
その有効量が約１００ｐｐｍ〜約６００ｐｐｍである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３８】
その有効量が約１００ｐｐｍ〜約２００ｐｐｍである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３９】
そのコンパニオンアニマルがイヌである、請求項３４に記載の方法。
【請求項４０】
そのコンパニオンアニマルがネコである、請求項３４に記載の方法。
【請求項４１】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも１５日間投与される、請求項３４に記載の方法。
【請求項４２】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも３０日間投与される、請求項３４に記載の方法。
【請求項４３】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が少なくとも４５日間投与される、請求項３４に記載の方法。
【請求項４４】
そのリポ酸を含むペットフード組成物が毎日投与される、請求項３４に記載の方法。
【公表番号】特表２０１２−５１３７６４（Ｐ２０１２−５１３７６４Ａ）
【公表日】平成２４年６月２１日（２０１２．６．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５４４５７６（Ｐ２０１１−５４４５７６）
【出願日】平成２１年１２月２９日（２００９．１２．２９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０６９６５４
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０７８３０１
【国際公開日】平成２２年７月８日（２０１０．７．８）
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＥＦＬＯＮ
２．ウィンドウズ
【出願人】（５０２３２９２２３）ヒルズ・ペット・ニュートリシャン・インコーポレーテッド (138)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年６月２１日（２０１２．６．２１）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１２月２９日（２００９．１２．２９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０６９６５４
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０７８３０１
【国際公開日】平成２２年７月８日（２０１０．７．８）
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＥＦＬＯＮ
２．ウィンドウズ
【出願人】（５０２３２９２２３）ヒルズ・ペット・ニュートリシャン・インコーポレーテッド (138)
【Ｆターム（参考）】
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