フザリウム菌株を用いた植物病害防除剤およびそれを用いた防除方法
【課題】 灰色かび病、斑点細菌病、褐斑病及びイネばか苗病を含む植物病害の防除剤及び防除方法を提供することを目的とする。
【解決手段】 フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を含有する溶液で植物体を処理することにより、植物の灰色かび病、斑点細菌病又は褐斑病を防除する。フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）は、好ましくは、ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）を用いる。
【解決手段】 フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を含有する溶液で植物体を処理することにより、植物の灰色かび病、斑点細菌病又は褐斑病を防除する。フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）は、好ましくは、ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）を用いる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物病害の防除剤、及びそれを利用した植物病害の防除方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
これまで、農作物の生産における植物病害の防除には化学農薬が多く利用されている。しかし、化学農薬による病害防除では、耐性菌の出現により防除効果が低下する場合が多いため、新たな化学農薬の開発が必要となる場合がある。また、近年では、食物の安全性や環境保護などの面から、化学農薬に代わるべき、または化学農薬と併用すべき手段として、年々環境に影響の少ない微生物資材を利用した病害防除（いわゆる生物農薬）に期待が高まっている。
【０００３】
農園芸作物の病害防除に用いられてきた微生物、特に灰色かび病防除に用いられてきた微生物としては、バチルス属に属する細菌、トリコデルマ属、ペニシリウム属、グリオクラディウム属に属する糸状菌が挙げられる（例えば、特許文献１、特許文献２参照）。しかし、灰色かび病防除にフザリウム属菌が使用された例はない。
【０００４】
また、イネばか苗病防除に用いられてきた細菌としては、シュードモナス・グラディオリ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｇｌａｄｉｏｌｉ）、シュードモナス属の一種（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ.）が挙げられる。イネばか苗病防除に用いられてきた糸状菌としては、トリコデルマ属、非病原性フザリウム属に属する微生物が挙げられ、これまでにこれらの微生物を含有する農園芸用殺菌剤も数多く研究されてきている（例えば、特許文献３、特許文献４参照）。
【０００５】
しかしながら、斑点細菌病防除や褐斑病防除のための、微生物を使用した農園芸用殺菌剤についての例はこれまでに報告されていない。
【０００６】
一方、フザリウム属菌を用いた植物病害防除については、非病原性フザリウム属菌を利用したサツマイモつる割病、トマト萎凋病など、これらの病害に対する防除法の報告はいくつか知られている。
【０００７】
フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）のうち、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）はシンビジウム病害の発病抑制に有効性があり、植物に弱病原性であるとして同定された（特許文献５参照）。この菌株は、シンビジウム黄斑病、腐敗病などのシンビジウム病害全般に効果があることは確認されているが、他の植物病害に効果があるかどうかは不明であった。
【０００８】
また、フザリウム属菌を用いてイネ種子に対する伝染性病害を防除する方法は、いくつか知られている（特許文献６〜８参照）が、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を用いた例はない。
【特許文献１】特開昭６３−２７３４７０号公報
【特許文献２】特開平２−２２２９９号公報
【特許文献３】特開平１１−２５３１５１号公報
【特許文献４】特開２００１−２３３７２１号公報
【特許文献５】特開２００２−２９１４６３号公報
【特許文献６】特開２００１−２３３７２１号公報
【特許文献７】特開平１１−８９５６２号公報
【特許文献８】特開平５−６５２０９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
上記の通り、環境負荷の少ない、微生物を用いた生物農薬に対する需要は高まっているが、斑点細菌病防除や褐斑病防除のための、微生物を使用した農園芸用殺菌剤についての例はこれまでに報告されていない。また、上記の病害を含む、広い病害防除スペクトラムを有し、植物に対して弱病原性のフザリウム属菌は未だ見いだされていない。
そこで、本発明は、灰色かび病、斑点細菌病、褐斑病及びイネばか苗病を含む植物病害の防除方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記の目的を達成するため、本発明者らは、弱病原性フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）の植物の茎葉部病害への有用性を検討した。その結果、当該菌株は、灰色かび病、褐斑病および斑点細菌病に活性を示すことを見出した。また、イネ種子伝染性病害への有用性を検討したところ、糸状菌性病害であるイネばか苗病に活性を示すことを見出し、本発明を完成した。
【００１１】
すなわち、本発明は、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を有効成分として含有する、植物の灰色かび病、斑点細菌病又は褐斑病の防除剤を提供する。ここで、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）は、植物に対して弱病原性であることが確認されていることから、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）を用いるのが望ましい。また、本発明の防除剤を使用する植物として、果菜を含む野菜を挙げることができる。
【００１２】
また、本発明は、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を有効成分として含有する、イネばか苗病の防除剤を提供する。ここで、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）は、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）が望ましい。
【００１３】
さらに、本発明は、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を含有する溶液により植物体を処理することによる、植物の灰色かび病、斑点細菌病又は褐斑病の防除方法を提供する。ここで、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）は、植物に対して弱病原性であることが確認されていることから、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）を用いるのが望ましい。本発明の防除方法は、果菜を含む野菜に適用可能である。
【００１４】
さらに、本発明は、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を含有する溶液により種子を処理することによる、イネばか苗病の防除方法を提供する。ここで、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）は、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）が望ましい。
【発明の効果】
【００１５】
本発明のフザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を含む植物病害の防除剤は、灰色かび病、斑点細菌病、褐斑病を含む病害に対して発病を強く抑制する作用がある。また、イネの育苗時に発生する糸状菌性病害であるイネばか苗病に対しても、発病抑制効果が強い。本発明の防除剤は、これらの病害に対して現在使用されている化学農薬と同等またはそれ以上の防除効果が期待でき、化学農薬の代替として、または化学農薬と併用して使用できるものである。また、自然界に存在する微生物を使用するため、環境に対する負荷も少なく、化学農薬を使用した場合に比べて耐性菌が出現しにくいと考えられる点でも有効である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
本発明では、フザリウム・サブグルチナンスの任意の菌株を使用できるが、植物に対する弱病原性が確認されていることから、菌株ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）を用いるのが望ましい。本菌株は、産業技術総合研究所生命工業技術研究所（現在、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター）に平成１３年３月１９日付けで寄託されたものである。
表１にフザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の形態的特徴を示す。
【００１７】
【表１】
【００１８】
コロニー形状は、ポテトデキストロース寒天平板培地で２５℃、２週間培養後に観察した。形態的特徴は、ＢＬＢ照射下においてＳＮＡ培地で２５℃、５８日で培養したものを光学顕微鏡下で観察した。その結果、本菌は、コロニー形態および菌の形態的特徴からＦｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ（Ｎｅｌｓｏｎら、１９８３）と同定されている。
【００１９】
本発明の植物病害防除剤組成物の培養には、特別な方法を用いる必要はなく、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ-１を液体培養あるいは固体培養等の公知の手段で増殖させた菌体を用いることができる。培養に用いる培地としては、微生物が生育可能な炭素源、窒素源および無機物および必要な生育促進物質を適当に含有する培地であれば、天然培地、合成培地いずれも利用できる。具体的な培地を例示すると、液体培養の場合、ポテトデキストロース液体培地、Ｃｚａｐｅｋ Ｄｏｘ液体培地などを、固体培養の場合、ポテトデキストロース寒天培地、Ｃｚａｐｅｋ Ｄｏｘ寒天培地、フスマ培地などを挙げることができる。なお、液体培養では、胞子又は芽胞状菌体が生産され、固体培養では小型分生子又は大型分生子が生産される。
培養に際しては、培養温度を１５〜３５℃、好ましくは２５〜３０℃、培養日数は１〜３０日、液体培養では好ましくは３〜７日、固体培養では７〜２０日間培養することが望ましい。
【００２０】
本発明では、灰色かび病害、斑点細菌病害および褐斑病害防除法は、フザリウム・サブグルチナンスを有効成分とする防除剤により処理することにより行う。この処理は、通常、茎葉散布することによる。また、イネばか苗病害防除法は、本菌株菌体を有効成分とする防除剤でイネ種子を消毒することにより行う。
【００２１】
本発明における防除剤として用いる場合には、本菌株の菌体または培養液を単独で用いてもよいが、微生物の保存法（根井外喜男編、東京大学出版会、１９７７）で示されているような凍結菌体を用いてもよい。すなわち、遠心分離等の操作で濃縮した菌体を、サッカロースなどの保護剤に懸濁し、予備凍結した後、凍結乾燥機により乾燥菌体を作成する。さらに乾燥菌体を粉砕し、粉砕菌体を担体または補助剤等と配合して常法により、例えば、粉剤、粒剤、水和剤などの形態にして使用すると更に好ましい。好適な担体としては、例えば、鉱物質粉末（カオリン、ベントナイト、クレー、タルク、ゼオライト、ケイソウ土、バーミキュライト、炭酸カルシウム、ホワイトカーボン、消石灰など）、植物質粉末(大豆粉、小麦粉、でんぷんなど)等の固体担体が挙げられる。また、補助剤としては、例えば、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ゼラチン、アルギン酸ナトリウム等が挙げられる。
【００２２】
使用量としては、製剤の剤型、適用方法、適用場所、適用すべき病害の種類などに応じて適宜選択可能である。水和剤の場合、フザリウム・サブグルチナンスの菌体濃度は、１０4〜１０9細胞／ｍｌ程度、好ましくは１０6〜１０8細胞／ｍｌ程度の範囲で使用することができる。菌体は、芽胞状菌体、小型分生子、大型分生子またはそれら混合物のいずれをも使用可能である。
【００２３】
本発明の防除剤及び防除方法は、任意の植物に適用でき、果菜を含む野菜のような農業用植物、果樹、園芸植物等に使用できる。
【００２４】
以下に実施例を挙げて、本発明をさらに詳細に説明するが、本実施例により本発明を制限または限定することを意図するものではない。
〔実施例〕
【００２５】
＜調製例１：フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１芽胞状菌体の調製＞
２００ｍｌのポテトデキストロース液体培地を含む、５本の５００ｍｌコルベン（計１０００ｍｌ）を、１２１℃で２０分間オートクレーブ滅菌した。滅菌後の培地に、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の菌体を接種し、２７℃で４日間振とう培養した。培養終了後、培養物を３重のガーゼで濾過し、遠心分離することにより、１×１０9〜３×１０9細胞／ｍｌ程度に濃縮された芽胞状菌体を得た。
【００２６】
＜調製例２：フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ-１芽胞状菌体の調製＞
２００ｍｌの半合成培地（脱イオン水１リットルあたり、２０.０ｇのＳｏｌｕｂｌｅ Ｓｔａｒｃｈ、５．０ｇのグルコース、２.０ｇのポリペプトン、３.０ｇの乾燥酵母抽出物、１．０ｇのＫＨ2ＰＯ4、０．５ｇのＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ、０.５ｇのＫＣｌを含む）を含む、５本の５００ｍｌコルベン（計１０００ｍｌ）を、１２１℃で２０分間オートクレーブ滅菌した。滅菌後の培地に、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の菌体を接種し、２７℃で４日間振とう培養した。培養終了後、培養物を３重のガーゼで濾過し、遠心分離することにより、１×１０9〜３×１０9細胞／ｍｌ程度に濃縮された芽胞状菌体を得た。
【００２７】
＜調製例３：フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ-１小型分生子の調製＞
１５ｍｌのＳＮ培地（脱イオン水１リットルあたり、１.０ｇのＫＨ2ＰＯ4、１.０ｇのＫＮＯ3、０．５ｇのＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ、０．５ｇのＫＣｌ、０．２ｇのグルコース、０．２ｇのスクロースを含む）と２０ｇのフスマとを含む２００ｍｌコルベンを、１２１℃で２０分間オートクレーブ滅菌した。滅菌後の培地に、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の菌体を接種し、２５℃で９日間静置培養した。培養物を３重のガーゼで濾過し、小型分生子を調製した。
【００２８】
＜調製例４：フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ-１芽胞状菌体の水和剤調製＞
調製例２で得られた芽胞状菌体を遠心分離することにより、２．５×１０10胞子／ｍｌに濃縮した芽胞状菌体２０部を、ゼオライト８０部と均一に混合することにより水和剤を調製した。
〔実施例１〕
【００２９】
＜インゲン灰色かび病に対する発病抑制効果１＞
調製例１で調製したフザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１芽胞状菌液を、インゲン（品種：姫手芒）の初生葉に散布した。散布濃度は、１×１０6細胞／ｍｌ、１×１０7細胞／ｍｌ又は１×１０8細胞／ｍｌとした。その後、２４℃下で管理し、３日後に灰色かび病の病原菌であるボトリシス・シネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）の分生子懸濁液（２．０×１０6胞子／ｍｌ）を散布した。散布処理後、２０℃で５日間インキュベートした後、初生葉の病斑面積率を調査し、式１により防除価を算出した。また、灰色かび病に対する化学農薬であるセイビアーフロアブル２０を１０００倍希釈したものを散布し、本発明の防除剤と比較した。なお、試験は３反復で行った。
【００３０】
防除価＝（１−処理区の平均病斑面積率÷無処理区の病斑面積率）×１００…式１
【００３１】
結果を表２に示す。フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の芽胞状菌液を処理した区は、インゲン灰色かび病に対して高い発病抑制効果を示した。
【００３２】
【表２】
〔実施例２〕
【００３３】
＜インゲン灰色かび病に対する発病抑制効果２＞
調製例３で調製したフザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の小型分生子の菌液を、インゲン（品種：姫手芒）の初生葉に散布した。散布濃度は、１×１０7細胞／ｍｌ又は１×１０8細胞／ｍｌとした。その後、２４℃下で管理し、３日後灰色かび病の病原菌であるボトリシス・シネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）の分生子懸濁液（２．０×１０6胞子／ｍｌ）を散布した。散布処理後、２０℃で５日間インキュベートした後、初生葉の病斑面積率を調査し、式１により防除価を算出した。また、灰色かび病に対する化学農薬であるセイビアーフロアブル２０を１０００倍希釈したものを散布し、本発明の防除剤と比較した。なお、試験は３反復で行った。
【００３４】
結果を表３に示す。フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の小型分生子を処理した区は、インゲン灰色かび病に対して高い発病抑制効果を示した。
【００３５】
【表３】
〔実施例３〕
【００３６】
＜インゲン灰色かび病に対する発病抑制効果３＞
調製例２及び調製例４で調製したフザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の芽胞状菌液又はその水和剤を、インゲン（品種：姫手芒）の初生葉に散布した。散布濃度は、調製例２で調製した菌液は１×１０7細胞／ｍｌ及び１×１０8細胞／ｍｌ、調製例４で調製した水和剤は５００倍希釈とした。その後、２４℃下で管理し、３日後灰色かび病の病原菌であるボトリシス・シネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）の分生子懸濁液（２．０×１０6胞子／ｍｌ）を散布した。散布処理後、２０℃で５日間インキュベートした後、初生葉の病斑面積率を調査し、式１により防除価を算出した。また、灰色かび病に対する化学農薬であるセイビアーフロアブル２０を１０００倍希釈したものを散布し、本発明の防除剤と比較した。なお、試験は３反復で行った。
【００３７】
結果を表４に示す。フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の芽胞状菌体及びその水和剤を処理した区は、インゲン灰色かび病に対して高い発病抑制効果を示した。
【００３８】
【表４】
〔実施例４〕
【００３９】
＜キュウリ斑点細菌病に対する発病抑制効果＞
調製例１で調製したフザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１芽胞状菌液を、キュウリ（品種：四葉）のポットに散布した。散布濃度は、１×１０7細胞／ｍｌ又は１×１０8細胞／ｍｌとした。その後、２４℃下で管理し、３日後に斑点細菌病の病原菌であるシュードモナス・シリンゲ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ）の懸濁液（１．０×１０8ＣＦＵ／ｍｌ）を散布した。散布処理後、２４℃で１０日間インキュベートした後、第２本葉および第３本葉の病斑数を調査し、式２により防除価を算出した。また、斑点細菌病に対する化学農薬であるカスミンボルドーを１０００倍希釈したものを散布し、本発明の防除剤と比較した。なお、試験は３反復で行った。
【００４０】
防除価＝（１−処理区の平均病斑数÷無処理区の病斑数）×１００…式２
【００４１】
結果を表５に示す。フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１芽胞状菌液を処理した区は、キュウリ斑点細菌病に対して高い発病抑制効果を示した。
【００４２】
【表５】
〔実施例５〕
【００４３】
＜キュウリ褐斑病に対する発病抑制効果＞
調製例１で調製したフザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の芽胞状菌液を、キュウリ（品種：相模半白）のポットに散布した。散布濃度は、１×１０7細胞／ｍｌ又は１×１０8細胞／ｍｌとした。その後、２４℃下で管理し、３日後に褐斑病の病原菌であるコリネスポーラ・キャシコーラ（Ｃｏｒｙｎｅｓｐｏｒａ ｃａｓｓｉｉｃｏｌａ）の分生子懸濁液（２．０×１０5胞子／ｍｌ）を散布した。散布処理後、２４℃で８日間インキュベートした後、第１本葉の病斑数を調査し、式２により防除価を算出した。また、褐斑病等に対する化学農薬であるダコニール１０００を１０００倍希釈したものを散布し、本発明の防除剤と比較した。なお、試験は３反復で行った。
【００４４】
結果を表６に示す。フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の芽胞状菌液を処理した区は、キュウリ褐斑病に対して高い発病抑制効果を示した。
【００４５】
【表６】
〔実施例６〕
【００４６】
＜イネばか苗病に対する発病抑制効果（自然感染籾）＞
調製例１で調製したフザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の芽胞状菌液（１×１０8細胞／ｍｌ）内に、イネばか苗病罹病籾（品種：新潟早生、自然感染籾）を、１５℃、浸種前２４時間浸漬処理（浸漬液量比＝１：１）した後、１５℃で５日間浸種（浸種液量比＝１：２）した。なお、浸種３日後に水交換を１回行った。その後、水を捨て３２℃の催芽器内に１７時間保って催芽させた。育苗培土（くみあい合成培土３号）を充填した育苗箱に催芽種子を播種し、播種後２日間、３２℃の育苗庫内に静置し出芽処理を行った。次に、出芽処理した苗を温室内で２１日間管理した後、全苗について発病の有無（徒長苗および枯死苗）を調査し、式３により発病苗率（％）を、また式４により防除価を算出した。また、イネばか苗病に対する化学農薬であるモミガードＣ水和剤を２００倍希釈したもので１５℃、浸種前２４時間浸漬処理し、本発明の防除剤と比較した。なお、試験は３反復で行った。
【００４７】
発病苗率（％）＝（徒長苗＋枯死苗）／全調査苗数×１００…式３
【００４８】
防除価＝（１−処理区の発病苗率÷無処理区の発病苗率）×１００…式４
【００４９】
結果を表７に示す。フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の芽胞状菌液を処理した区は、イネばか苗病に対して高い発病抑制効果を示した。
【００５０】
【表７】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物病害の防除剤、及びそれを利用した植物病害の防除方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
これまで、農作物の生産における植物病害の防除には化学農薬が多く利用されている。しかし、化学農薬による病害防除では、耐性菌の出現により防除効果が低下する場合が多いため、新たな化学農薬の開発が必要となる場合がある。また、近年では、食物の安全性や環境保護などの面から、化学農薬に代わるべき、または化学農薬と併用すべき手段として、年々環境に影響の少ない微生物資材を利用した病害防除（いわゆる生物農薬）に期待が高まっている。
【０００３】
農園芸作物の病害防除に用いられてきた微生物、特に灰色かび病防除に用いられてきた微生物としては、バチルス属に属する細菌、トリコデルマ属、ペニシリウム属、グリオクラディウム属に属する糸状菌が挙げられる（例えば、特許文献１、特許文献２参照）。しかし、灰色かび病防除にフザリウム属菌が使用された例はない。
【０００４】
また、イネばか苗病防除に用いられてきた細菌としては、シュードモナス・グラディオリ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｇｌａｄｉｏｌｉ）、シュードモナス属の一種（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ.）が挙げられる。イネばか苗病防除に用いられてきた糸状菌としては、トリコデルマ属、非病原性フザリウム属に属する微生物が挙げられ、これまでにこれらの微生物を含有する農園芸用殺菌剤も数多く研究されてきている（例えば、特許文献３、特許文献４参照）。
【０００５】
しかしながら、斑点細菌病防除や褐斑病防除のための、微生物を使用した農園芸用殺菌剤についての例はこれまでに報告されていない。
【０００６】
一方、フザリウム属菌を用いた植物病害防除については、非病原性フザリウム属菌を利用したサツマイモつる割病、トマト萎凋病など、これらの病害に対する防除法の報告はいくつか知られている。
【０００７】
フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）のうち、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）はシンビジウム病害の発病抑制に有効性があり、植物に弱病原性であるとして同定された（特許文献５参照）。この菌株は、シンビジウム黄斑病、腐敗病などのシンビジウム病害全般に効果があることは確認されているが、他の植物病害に効果があるかどうかは不明であった。
【０００８】
また、フザリウム属菌を用いてイネ種子に対する伝染性病害を防除する方法は、いくつか知られている（特許文献６〜８参照）が、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を用いた例はない。
【特許文献１】特開昭６３−２７３４７０号公報
【特許文献２】特開平２−２２２９９号公報
【特許文献３】特開平１１−２５３１５１号公報
【特許文献４】特開２００１−２３３７２１号公報
【特許文献５】特開２００２−２９１４６３号公報
【特許文献６】特開２００１−２３３７２１号公報
【特許文献７】特開平１１−８９５６２号公報
【特許文献８】特開平５−６５２０９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
上記の通り、環境負荷の少ない、微生物を用いた生物農薬に対する需要は高まっているが、斑点細菌病防除や褐斑病防除のための、微生物を使用した農園芸用殺菌剤についての例はこれまでに報告されていない。また、上記の病害を含む、広い病害防除スペクトラムを有し、植物に対して弱病原性のフザリウム属菌は未だ見いだされていない。
そこで、本発明は、灰色かび病、斑点細菌病、褐斑病及びイネばか苗病を含む植物病害の防除方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記の目的を達成するため、本発明者らは、弱病原性フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）の植物の茎葉部病害への有用性を検討した。その結果、当該菌株は、灰色かび病、褐斑病および斑点細菌病に活性を示すことを見出した。また、イネ種子伝染性病害への有用性を検討したところ、糸状菌性病害であるイネばか苗病に活性を示すことを見出し、本発明を完成した。
【００１１】
すなわち、本発明は、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を有効成分として含有する、植物の灰色かび病、斑点細菌病又は褐斑病の防除剤を提供する。ここで、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）は、植物に対して弱病原性であることが確認されていることから、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）を用いるのが望ましい。また、本発明の防除剤を使用する植物として、果菜を含む野菜を挙げることができる。
【００１２】
また、本発明は、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を有効成分として含有する、イネばか苗病の防除剤を提供する。ここで、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）は、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）が望ましい。
【００１３】
さらに、本発明は、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を含有する溶液により植物体を処理することによる、植物の灰色かび病、斑点細菌病又は褐斑病の防除方法を提供する。ここで、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）は、植物に対して弱病原性であることが確認されていることから、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）を用いるのが望ましい。本発明の防除方法は、果菜を含む野菜に適用可能である。
【００１４】
さらに、本発明は、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を含有する溶液により種子を処理することによる、イネばか苗病の防除方法を提供する。ここで、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）は、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）が望ましい。
【発明の効果】
【００１５】
本発明のフザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を含む植物病害の防除剤は、灰色かび病、斑点細菌病、褐斑病を含む病害に対して発病を強く抑制する作用がある。また、イネの育苗時に発生する糸状菌性病害であるイネばか苗病に対しても、発病抑制効果が強い。本発明の防除剤は、これらの病害に対して現在使用されている化学農薬と同等またはそれ以上の防除効果が期待でき、化学農薬の代替として、または化学農薬と併用して使用できるものである。また、自然界に存在する微生物を使用するため、環境に対する負荷も少なく、化学農薬を使用した場合に比べて耐性菌が出現しにくいと考えられる点でも有効である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
本発明では、フザリウム・サブグルチナンスの任意の菌株を使用できるが、植物に対する弱病原性が確認されていることから、菌株ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）を用いるのが望ましい。本菌株は、産業技術総合研究所生命工業技術研究所（現在、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター）に平成１３年３月１９日付けで寄託されたものである。
表１にフザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の形態的特徴を示す。
【００１７】
【表１】
【００１８】
コロニー形状は、ポテトデキストロース寒天平板培地で２５℃、２週間培養後に観察した。形態的特徴は、ＢＬＢ照射下においてＳＮＡ培地で２５℃、５８日で培養したものを光学顕微鏡下で観察した。その結果、本菌は、コロニー形態および菌の形態的特徴からＦｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ（Ｎｅｌｓｏｎら、１９８３）と同定されている。
【００１９】
本発明の植物病害防除剤組成物の培養には、特別な方法を用いる必要はなく、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ-１を液体培養あるいは固体培養等の公知の手段で増殖させた菌体を用いることができる。培養に用いる培地としては、微生物が生育可能な炭素源、窒素源および無機物および必要な生育促進物質を適当に含有する培地であれば、天然培地、合成培地いずれも利用できる。具体的な培地を例示すると、液体培養の場合、ポテトデキストロース液体培地、Ｃｚａｐｅｋ Ｄｏｘ液体培地などを、固体培養の場合、ポテトデキストロース寒天培地、Ｃｚａｐｅｋ Ｄｏｘ寒天培地、フスマ培地などを挙げることができる。なお、液体培養では、胞子又は芽胞状菌体が生産され、固体培養では小型分生子又は大型分生子が生産される。
培養に際しては、培養温度を１５〜３５℃、好ましくは２５〜３０℃、培養日数は１〜３０日、液体培養では好ましくは３〜７日、固体培養では７〜２０日間培養することが望ましい。
【００２０】
本発明では、灰色かび病害、斑点細菌病害および褐斑病害防除法は、フザリウム・サブグルチナンスを有効成分とする防除剤により処理することにより行う。この処理は、通常、茎葉散布することによる。また、イネばか苗病害防除法は、本菌株菌体を有効成分とする防除剤でイネ種子を消毒することにより行う。
【００２１】
本発明における防除剤として用いる場合には、本菌株の菌体または培養液を単独で用いてもよいが、微生物の保存法（根井外喜男編、東京大学出版会、１９７７）で示されているような凍結菌体を用いてもよい。すなわち、遠心分離等の操作で濃縮した菌体を、サッカロースなどの保護剤に懸濁し、予備凍結した後、凍結乾燥機により乾燥菌体を作成する。さらに乾燥菌体を粉砕し、粉砕菌体を担体または補助剤等と配合して常法により、例えば、粉剤、粒剤、水和剤などの形態にして使用すると更に好ましい。好適な担体としては、例えば、鉱物質粉末（カオリン、ベントナイト、クレー、タルク、ゼオライト、ケイソウ土、バーミキュライト、炭酸カルシウム、ホワイトカーボン、消石灰など）、植物質粉末(大豆粉、小麦粉、でんぷんなど)等の固体担体が挙げられる。また、補助剤としては、例えば、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ゼラチン、アルギン酸ナトリウム等が挙げられる。
【００２２】
使用量としては、製剤の剤型、適用方法、適用場所、適用すべき病害の種類などに応じて適宜選択可能である。水和剤の場合、フザリウム・サブグルチナンスの菌体濃度は、１０4〜１０9細胞／ｍｌ程度、好ましくは１０6〜１０8細胞／ｍｌ程度の範囲で使用することができる。菌体は、芽胞状菌体、小型分生子、大型分生子またはそれら混合物のいずれをも使用可能である。
【００２３】
本発明の防除剤及び防除方法は、任意の植物に適用でき、果菜を含む野菜のような農業用植物、果樹、園芸植物等に使用できる。
【００２４】
以下に実施例を挙げて、本発明をさらに詳細に説明するが、本実施例により本発明を制限または限定することを意図するものではない。
〔実施例〕
【００２５】
＜調製例１：フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１芽胞状菌体の調製＞
２００ｍｌのポテトデキストロース液体培地を含む、５本の５００ｍｌコルベン（計１０００ｍｌ）を、１２１℃で２０分間オートクレーブ滅菌した。滅菌後の培地に、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の菌体を接種し、２７℃で４日間振とう培養した。培養終了後、培養物を３重のガーゼで濾過し、遠心分離することにより、１×１０9〜３×１０9細胞／ｍｌ程度に濃縮された芽胞状菌体を得た。
【００２６】
＜調製例２：フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ-１芽胞状菌体の調製＞
２００ｍｌの半合成培地（脱イオン水１リットルあたり、２０.０ｇのＳｏｌｕｂｌｅ Ｓｔａｒｃｈ、５．０ｇのグルコース、２.０ｇのポリペプトン、３.０ｇの乾燥酵母抽出物、１．０ｇのＫＨ2ＰＯ4、０．５ｇのＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ、０.５ｇのＫＣｌを含む）を含む、５本の５００ｍｌコルベン（計１０００ｍｌ）を、１２１℃で２０分間オートクレーブ滅菌した。滅菌後の培地に、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の菌体を接種し、２７℃で４日間振とう培養した。培養終了後、培養物を３重のガーゼで濾過し、遠心分離することにより、１×１０9〜３×１０9細胞／ｍｌ程度に濃縮された芽胞状菌体を得た。
【００２７】
＜調製例３：フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ-１小型分生子の調製＞
１５ｍｌのＳＮ培地（脱イオン水１リットルあたり、１.０ｇのＫＨ2ＰＯ4、１.０ｇのＫＮＯ3、０．５ｇのＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ、０．５ｇのＫＣｌ、０．２ｇのグルコース、０．２ｇのスクロースを含む）と２０ｇのフスマとを含む２００ｍｌコルベンを、１２１℃で２０分間オートクレーブ滅菌した。滅菌後の培地に、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の菌体を接種し、２５℃で９日間静置培養した。培養物を３重のガーゼで濾過し、小型分生子を調製した。
【００２８】
＜調製例４：フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ-１芽胞状菌体の水和剤調製＞
調製例２で得られた芽胞状菌体を遠心分離することにより、２．５×１０10胞子／ｍｌに濃縮した芽胞状菌体２０部を、ゼオライト８０部と均一に混合することにより水和剤を調製した。
〔実施例１〕
【００２９】
＜インゲン灰色かび病に対する発病抑制効果１＞
調製例１で調製したフザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１芽胞状菌液を、インゲン（品種：姫手芒）の初生葉に散布した。散布濃度は、１×１０6細胞／ｍｌ、１×１０7細胞／ｍｌ又は１×１０8細胞／ｍｌとした。その後、２４℃下で管理し、３日後に灰色かび病の病原菌であるボトリシス・シネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）の分生子懸濁液（２．０×１０6胞子／ｍｌ）を散布した。散布処理後、２０℃で５日間インキュベートした後、初生葉の病斑面積率を調査し、式１により防除価を算出した。また、灰色かび病に対する化学農薬であるセイビアーフロアブル２０を１０００倍希釈したものを散布し、本発明の防除剤と比較した。なお、試験は３反復で行った。
【００３０】
防除価＝（１−処理区の平均病斑面積率÷無処理区の病斑面積率）×１００…式１
【００３１】
結果を表２に示す。フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の芽胞状菌液を処理した区は、インゲン灰色かび病に対して高い発病抑制効果を示した。
【００３２】
【表２】
〔実施例２〕
【００３３】
＜インゲン灰色かび病に対する発病抑制効果２＞
調製例３で調製したフザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の小型分生子の菌液を、インゲン（品種：姫手芒）の初生葉に散布した。散布濃度は、１×１０7細胞／ｍｌ又は１×１０8細胞／ｍｌとした。その後、２４℃下で管理し、３日後灰色かび病の病原菌であるボトリシス・シネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）の分生子懸濁液（２．０×１０6胞子／ｍｌ）を散布した。散布処理後、２０℃で５日間インキュベートした後、初生葉の病斑面積率を調査し、式１により防除価を算出した。また、灰色かび病に対する化学農薬であるセイビアーフロアブル２０を１０００倍希釈したものを散布し、本発明の防除剤と比較した。なお、試験は３反復で行った。
【００３４】
結果を表３に示す。フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の小型分生子を処理した区は、インゲン灰色かび病に対して高い発病抑制効果を示した。
【００３５】
【表３】
〔実施例３〕
【００３６】
＜インゲン灰色かび病に対する発病抑制効果３＞
調製例２及び調製例４で調製したフザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の芽胞状菌液又はその水和剤を、インゲン（品種：姫手芒）の初生葉に散布した。散布濃度は、調製例２で調製した菌液は１×１０7細胞／ｍｌ及び１×１０8細胞／ｍｌ、調製例４で調製した水和剤は５００倍希釈とした。その後、２４℃下で管理し、３日後灰色かび病の病原菌であるボトリシス・シネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）の分生子懸濁液（２．０×１０6胞子／ｍｌ）を散布した。散布処理後、２０℃で５日間インキュベートした後、初生葉の病斑面積率を調査し、式１により防除価を算出した。また、灰色かび病に対する化学農薬であるセイビアーフロアブル２０を１０００倍希釈したものを散布し、本発明の防除剤と比較した。なお、試験は３反復で行った。
【００３７】
結果を表４に示す。フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の芽胞状菌体及びその水和剤を処理した区は、インゲン灰色かび病に対して高い発病抑制効果を示した。
【００３８】
【表４】
〔実施例４〕
【００３９】
＜キュウリ斑点細菌病に対する発病抑制効果＞
調製例１で調製したフザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１芽胞状菌液を、キュウリ（品種：四葉）のポットに散布した。散布濃度は、１×１０7細胞／ｍｌ又は１×１０8細胞／ｍｌとした。その後、２４℃下で管理し、３日後に斑点細菌病の病原菌であるシュードモナス・シリンゲ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ）の懸濁液（１．０×１０8ＣＦＵ／ｍｌ）を散布した。散布処理後、２４℃で１０日間インキュベートした後、第２本葉および第３本葉の病斑数を調査し、式２により防除価を算出した。また、斑点細菌病に対する化学農薬であるカスミンボルドーを１０００倍希釈したものを散布し、本発明の防除剤と比較した。なお、試験は３反復で行った。
【００４０】
防除価＝（１−処理区の平均病斑数÷無処理区の病斑数）×１００…式２
【００４１】
結果を表５に示す。フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１芽胞状菌液を処理した区は、キュウリ斑点細菌病に対して高い発病抑制効果を示した。
【００４２】
【表５】
〔実施例５〕
【００４３】
＜キュウリ褐斑病に対する発病抑制効果＞
調製例１で調製したフザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の芽胞状菌液を、キュウリ（品種：相模半白）のポットに散布した。散布濃度は、１×１０7細胞／ｍｌ又は１×１０8細胞／ｍｌとした。その後、２４℃下で管理し、３日後に褐斑病の病原菌であるコリネスポーラ・キャシコーラ（Ｃｏｒｙｎｅｓｐｏｒａ ｃａｓｓｉｉｃｏｌａ）の分生子懸濁液（２．０×１０5胞子／ｍｌ）を散布した。散布処理後、２４℃で８日間インキュベートした後、第１本葉の病斑数を調査し、式２により防除価を算出した。また、褐斑病等に対する化学農薬であるダコニール１０００を１０００倍希釈したものを散布し、本発明の防除剤と比較した。なお、試験は３反復で行った。
【００４４】
結果を表６に示す。フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の芽胞状菌液を処理した区は、キュウリ褐斑病に対して高い発病抑制効果を示した。
【００４５】
【表６】
〔実施例６〕
【００４６】
＜イネばか苗病に対する発病抑制効果（自然感染籾）＞
調製例１で調製したフザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の芽胞状菌液（１×１０8細胞／ｍｌ）内に、イネばか苗病罹病籾（品種：新潟早生、自然感染籾）を、１５℃、浸種前２４時間浸漬処理（浸漬液量比＝１：１）した後、１５℃で５日間浸種（浸種液量比＝１：２）した。なお、浸種３日後に水交換を１回行った。その後、水を捨て３２℃の催芽器内に１７時間保って催芽させた。育苗培土（くみあい合成培土３号）を充填した育苗箱に催芽種子を播種し、播種後２日間、３２℃の育苗庫内に静置し出芽処理を行った。次に、出芽処理した苗を温室内で２１日間管理した後、全苗について発病の有無（徒長苗および枯死苗）を調査し、式３により発病苗率（％）を、また式４により防除価を算出した。また、イネばか苗病に対する化学農薬であるモミガードＣ水和剤を２００倍希釈したもので１５℃、浸種前２４時間浸漬処理し、本発明の防除剤と比較した。なお、試験は３反復で行った。
【００４７】
発病苗率（％）＝（徒長苗＋枯死苗）／全調査苗数×１００…式３
【００４８】
防除価＝（１−処理区の発病苗率÷無処理区の発病苗率）×１００…式４
【００４９】
結果を表７に示す。フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１の芽胞状菌液を処理した区は、イネばか苗病に対して高い発病抑制効果を示した。
【００５０】
【表７】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を有効成分として含有する、植物の灰色かび病、斑点細菌病又は褐斑病の防除剤。
【請求項２】
フザリウム・サブグルチナンスが、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）である請求項１に記載の防除剤。
【請求項３】
植物が、果菜を含む野菜である請求項１又は２に記載の防除剤。
【請求項４】
フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を有効成分として含有する、イネばか苗病の防除剤。
【請求項５】
フザリウム・サブグルチナンスが、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）である請求項４に記載の防除剤。
【請求項６】
フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を含有する溶液により植物体を処理することによる、植物の灰色かび病、斑点細菌病又は褐斑病の防除方法。
【請求項７】
フザリウム・サブグルチナンスが、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）である請求項６に記載の防除方法。
【請求項８】
植物が、果菜を含む野菜である請求項６又は７に記載の防除方法。
【請求項９】
フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を含有する溶液により種子を処理することによる、イネばか苗病の防除方法。
【請求項１０】
フザリウム・サブグルチナンスが、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）である請求項９に記載の防除方法。
【請求項１】
フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を有効成分として含有する、植物の灰色かび病、斑点細菌病又は褐斑病の防除剤。
【請求項２】
フザリウム・サブグルチナンスが、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）である請求項１に記載の防除剤。
【請求項３】
植物が、果菜を含む野菜である請求項１又は２に記載の防除剤。
【請求項４】
フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を有効成分として含有する、イネばか苗病の防除剤。
【請求項５】
フザリウム・サブグルチナンスが、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）である請求項４に記載の防除剤。
【請求項６】
フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を含有する溶液により植物体を処理することによる、植物の灰色かび病、斑点細菌病又は褐斑病の防除方法。
【請求項７】
フザリウム・サブグルチナンスが、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）である請求項６に記載の防除方法。
【請求項８】
植物が、果菜を含む野菜である請求項６又は７に記載の防除方法。
【請求項９】
フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）を含有する溶液により種子を処理することによる、イネばか苗病の防除方法。
【請求項１０】
フザリウム・サブグルチナンスが、フザリウム・サブグルチナンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ）ＨＰＦ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２６６）である請求項９に記載の防除方法。
【公開番号】特開２００６−２４１１１７（Ｐ２００６−２４１１１７Ａ）
【公開日】平成１８年９月１４日（２００６．９．１４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−６２１７６（Ｐ２００５−６２１７６）
【出願日】平成１７年３月７日（２００５．３．７）
【出願人】（０００２４２００２）北興化学工業株式会社 (182)
【出願人】（３９１０１７８４９）山梨県 (19)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１８年９月１４日（２００６．９．１４）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年３月７日（２００５．３．７）
【出願人】（０００２４２００２）北興化学工業株式会社 (182)
【出願人】（３９１０１７８４９）山梨県 (19)
【Ｆターム（参考）】
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