光照射装置
【課題】低出力光の照射で皮膚に負担をかけることなく脱毛が可能な光照射装置を提供する。
【解決手段】
４００〜１２００ｎｍの波長の光を、半値幅が６００μｓのパルスとして付与する光源部と、この光源部から付与された光のパルスを、出射面から５ｍｍの距離に０．２〜０．２５Ｊ／ｃｍ2のエネルギー強度で分布させる導光部と、を備える。
【解決手段】
４００〜１２００ｎｍの波長の光を、半値幅が６００μｓのパルスとして付与する光源部と、この光源部から付与された光のパルスを、出射面から５ｍｍの距離に０．２〜０．２５Ｊ／ｃｍ2のエネルギー強度で分布させる導光部と、を備える。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、光によって脱毛や抑毛を行う光照射装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
医療分野において光照射による脱毛や抑毛が知られている。これは、高出力（クラス４）レーザを皮膚に照射して、毛根部及び毛包部の細胞を破壊するネクローシスによる。このようなレーザを用いた脱毛や抑毛は、細胞の破壊を伴うために火傷、シミ等の副作用が起きやすく、皮膚に対する負担が大きいため、専門の医師により施術が行われる。しかし、専門家による施術では経済的及び時間的な負担があることから、家庭で手軽に使用できる脱毛・抑毛機が望まれている。そこで、例えば、低出力の光を照射する家庭用脱毛機が提案されている（特許文献１参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００２−１７２１７９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、これまでの家庭用脱毛機では、十分な脱毛・抑毛効果が得られない。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は上記課題を解決するためになされたものであり、本発明に係る光照射装置は、４００〜１２００ｎｍの波長の光を、半値幅が６００μｓのパルスとして付与する光源部と、この光源部から付与された光のパルスを、出射面から５ｍｍの距離に０．２〜０．２５Ｊ／ｃｍ2のエネルギー強度で分布させる導光部と、を備えることを特徴とする。
【発明の効果】
【０００６】
本発明によれば、低出力光の照射で皮膚に負担をかけることなく脱毛・抑毛が可能な光照射装置を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】（ａ）本発明の実施の形態に係る光照射装置の外観を示す正面図である。（ｂ）本発明の実施の形態に係る光照射装置の外観を示す側面図である。
【図２】光照射装置の配光制御手段とフレームの脱離状態での光照射装置の斜視図である。
【図３】照射ユニットの分解斜視図である。
【図４】（ａ）照射ユニットを示す正面図である。（ｂ）図４（ａ）のＡ−Ａ断面図である。
【図５】照射ユニットのフレームブロックの斜視図である。
【図６】本体及び配光制御手段内に配設された制御回路のブロック図である。
【図７】照射された光の発光の波長分布を示す図である。
【図８】レンズのレンズ幅方向における光量分布を示す図である。
【図９】（ａ）コントロールのマウスの皮膚のＨＥ染色の結果を示す顕微鏡写真である。（ｂ）コントロールのマウスの皮膚の抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｃ）コントロールのマウスの皮膚の抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｄ）照射１０時間後のマウスの皮膚のＨＥ染色の結果を示す顕微鏡写真である。（ｅ）照射１０時間後のマウスの皮膚の抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｆ）照射１０時間後のマウスの皮膚の抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。
【図１０】（ａ）コントロールのマウスの皮膚のＨＥ染色の結果を示す顕微鏡写真である。（ｂ）コントロールのマウスの皮膚の抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｃ）コントロールのマウスの皮膚の抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｄ）照射２４時間後のマウスの皮膚のＨＥ染色の結果を示す顕微鏡写真である。（ｅ）照射２４時間後のマウスの皮膚の抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｆ）照射２４時間後のマウスの皮膚の抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。
【図１１】（ａ）コントロールのマウスの皮膚のＨＥ染色の結果を示す顕微鏡写真である。（ｂ）コントロールのマウスの皮膚の抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｃ）コントロールのマウスの皮膚の抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｄ）照射３日後のマウスの皮膚のＨＥ染色の結果を示す顕微鏡写真である。（ｅ）照射３日後のマウスの皮膚の抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｆ）照射３日後のマウスの皮膚の抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。
【図１２】（ａ）コントロールのマウスの皮膚のＨＥ染色の結果を示す顕微鏡写真である。（ｂ）コントロールのマウスの皮膚の抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｃ）コントロールのマウスの皮膚の抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｄ）照射５日後のマウスの皮膚のＨＥ染色の結果を示す顕微鏡写真である。（ｅ）照射５日後のマウスの皮膚の抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｆ）照射５日後のマウスの皮膚の抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。
【図１３】（ａ）照射２時間後のリアルタイムＰＣＲの結果を示す図である。（ｂ）照射１２時間後のリアルタイムＰＣＲの結果を示す図である。（ｃ）照射１日後のリアルタイムＰＣＲの結果を示す図である。
【図１４】（ａ）照射３日後のリアルタイムＰＣＲの結果を示す図である。（ｂ）照射５日後のリアルタイムＰＣＲの結果を示す図である。（ｃ）照射７日後のリアルタイムＰＣＲの結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
以下、本発明に係る光照射装置について添付図面に示す実施の形態に基づいて説明する。 図１（ａ）は本発明の実施の形態に係る光照射装置１の外観を示す正面図、図１（ｂ）は側面図である。図２は、図１に示す光照射装置１の配光制御手段６とフレーム７の脱離状態での光照射装置１の斜視図である。図３は照射ユニット４の分解斜視図、図４（ａ）は照射ユニットを示す正面図、図４（ｂ）は、図４（ａ）のＡ−Ａ断面図である。図５は、照射ユニット４のフレームブロックの斜視図である。図６は、本体２及び配光制御手段６内に配設された制御回路のブロック図である。
【０００９】
本発明の実施の形態に係る光照射装置１は、生体表面、特に皮膚表面に光照射を行うことにより、生体表面の脱毛を行う光脱毛や、生体表面の毛の再生及び成長を抑制する光抑毛等を行う。本発明の実施の形態に係る光照射装置１は、片手で把持可能な本体２と、本体２の一端に着脱自在に取り付けられ、上部にレンズ５、内部に光源９を有する光照射手段である照射ユニット４と、照射ユニット４の周囲を覆い、かつ照射ユニット４から照射された光を調節する配光制御手段６と、配光制御手段６を保持し、かつ本体２に着脱自在の本体カバー３を備える。
【００１０】
本体２は、光照射を制御する制御手段及び内臓電源とを内部に備えると共に、外装に、本体２の電源のオンオフを行う電源スイッチ２ｂと、本体カバー３の着脱を操作する着脱操作部２ａを備える。本体２の照射ユニット４が取り付けられる側の端部には、照射ユニット４を着脱自在とするユニット装着部３ａと、着脱操作部２ａにより操作され本体カバー３を着脱自在に係止する本体側係止部と、照射ユニット４の光源９を発光させる図示しない発光スイッチとを備える。
【００１１】
本体カバー３は、配光制御手段６をスライド自在で保持する配光制御手段６用の開口を有し、照射ユニット４を覆うカバー部材で形成されている。本体カバー３は、本体２と図示しない係止手段によって保持されている。
【００１２】
照射ユニット４は、光が照射される略長方形状の照射口を一端に有する、前後に２つ割りしたランプケーシング８とその内部に光源９を備え、光照射口に蓋としてレンズ５が嵌め込まれている。照射ユニット４の長手方向の両外側、詳しくはレンズ５の長手方向における両端にユニット装着部３ａに係脱自在な取付用突起８ａが延設されており、照射ユニット４は取付用突起８ａとユニット装着部３ａとが係合することで本体２に着脱自在に取り付けられる。光源９として、例えばキセノン管を用いることができる。更に、照射ユニット４は、光源９からの光を反射して照射口に嵌め込んだレンズ５に向けるリフレクタ１０と、リフレクタ１０を保持する基台１６と、発光スイッチからの信号を受けて光源９を発光させるトリガトランスである回路ユニット１１を備える。回路ユニット１１は、コネクタ１２を搭載した回路Ｐ板１３を有する。リフレクタ１０は、照射口側に照射口と略同じ大きさの開口を有し、かつ反射面を内側に備えた略Ｕ字のカップ形状である。リフレクタ１０の開口と逆の位置であるカップ形状の底部の内側には光源９が位置する。リフレクタ１０とレンズ５は、光源９からの光を均一化する。詳しくは、リフレクタ１０は光源９の発光により生じた光の向きを照射口に直行する向きに揃えると共に、照射口から照射される光量の分布を略一定に揃える。照射ユニット４の光源９は、キセノン管に限られず、一つ又は複数のダイオードとしても良い。光源９はリフレクタ１０と点接触しており、両極にゴムプレート１４を通し、フィクスチャ１５で保持されている。
【００１３】
配光制御手段６は、照射ユニット４と皮膚表面との間に介在し、図５に示すように、光を透過しない不透明部材で筒形状に形成された遮光部６ｂと、遮光部６ｂの筒形状に略長方形状で開口した一端に、光学的部材として、例えばレンズを設けた放出部６ａとを備える。遮光部６ｂは、照射ユニット４の側面を覆い、かつ照射ユニット４が光を照射口から皮膚表面に照射する光照射方向に向かって照射ユニット４を覆う面を延設した筒形状であり、筒の開口と照射ユニット４の照射口とに対向して配置される。延設した側に位置する開口が照射ユニット４からの光を外部に放出する放出口となっており、放出口を形成する遮光部６ｂの端部が光照射の際に皮膚表面に当接する。光照射方向とは、照射口の開口面に直行する方向であり、リフレクタ１０とレンズ５によって光量が均一化されて照射口から光が照射される。なお、光学的部材は、照射ユニット４から入射された光に対して集光する等して光の強度や向きを変化させることなく光量を均一化する形状に形成したものであり、例えば、本発明の実施の形態のように嵌合位置の光量に合わせて格子状に形成したレンズ等があげられる。また、放出部６ａは放出口より光照射方向側に突出しない、詳しくは放出口を形成する遮光部６ｂの内部空間への入り込みを抑制して、皮膚表面が照射ユニット４、特にレンズ５に接触することを防止する。
【００１４】
遮光部６ｂの左右両側にはフック部６ｂ１が設けられ、本体カバー３に嵌合させることで保持されている。遮光部６ｂの開口の長手方向を形成する端辺を有する側面には、開口に直行する光照射方向に沿ってスライドガイド６ｂ２、６ｂ４がそれぞれ設けられている。スライドガイド６ｂ２、６ｂ４は光照射装置１を組み立てた際に配光制御手段６を光照射方向と平行にスライド自在とする。遮光部６ｂの側面のうち、一方の面の放出口と反対側の開口を形成する端辺の略中央には、スイッチ用突起６ｂ３が面に平行して突設されており、スイッチ用突起６ｂ３はスライドガイド６ｂ２、６ｂ４により配光制御手段６がスライドした際に発光スイッチを作動させる。電源スイッチ２ｂがオンの状態で、放出口を形成する部位を生体表面に密着させて光照射方向に押す又は皮膚表面に押し当てることで、光照射方向と反対の方向に配光制御手段６がスライドされる。スライドに伴い、スイッチ用突起６ｂ３が発光スイッチを押圧し、押圧された発光スイッチはユニット回路を介して光源９を発光させる。そして、光照射後に配光制御手段６が光照射方向にスライドすることで、スイッチ用突起６ｂ３が発光スイッチから離れて発光スイッチの押圧が解除される。この光照射動作は一例であり、生体表面に押し当てて発光スイッチを作動させた状態で電源スイッチ２ｂをオンにすることで光照射するのはもちろん、更に他の照射スイッチを備えたものでもかまわない。
【００１５】
配光制御手段６は、図６に示すように本体２及び配光制御手段６内に配設された制御回路によって制御される。制御回路は、マイクロプロセッサユニット（ＭＰＵ）２１と、アダプタ付きＬｉイオンセルとその保護ＩＣとを備えた充電制御部２２と、ストロボコンデンサとその電圧制御ＩＣとを備えるコンデンサチャージ部２３と、光源９のトリガ制御を行うフラッシュ制御部２４と、周辺回路部２５とを備える。制御回路が行う光照射の制御として、例えば、照射ユニット４の連続光照射回数・通算光照射回数の記憶及び回数に応じた光源９の発光量の調節等の長期使用における光量の制御や、照射ユニット４の温度検知あるいは本体カバー３・照射ユニット４の有無検知等の安全管理等を行うことは、適宜設計変更可能である。
【００１６】
例えば、光源９としてキセノンフラッシュランプを用いた場合に、キセノン管両端に６００Ｖ印加（管陰極に−３００Ｖ印加）し、次にキセノン管表面に５ｋＶ印加して、トリガートランスにより３００Ｖを昇圧し、キセノン管内がイオン化され、電流通過（約１１０Ａ、１ｍｓ）により発光させる。図７に、この条件で皮膚表面に照射された光の発光の波長分布（スペクトル分布）７Ｘを示す。図７に示すように、スペクトル分布７Ｘは、波長４００〜５００（ｎｍ）に第１の高エネルギー部７Ｘ１を、波長８００〜１０００（ｎｍ）に第２の高エネルギー部７Ｘ２を有する。レンズ５から照射された光は、配光制御手段６を介して、出射面であるレンズ５の前面から５ｍｍの位置に、図８に示す光量分布８Ｘを有するように光学設計されている。光量分布８Ｘは、図３に示すレンズ５のレンズ幅方向（矢印５Ｘの方向）における光量分布を示しており、極大値８Ｘ１、８Ｘ２、８Ｘ３を有する。
【００１７】
配光制御手段６により、光源９から照射した光を皮膚表面に直接接触させることがなくなる。また、光源９を覆う遮光部６ｂにより照射された光が漏れることを防止すると共に、光学的部材を配置した放出部６ａにより、皮膚表面が光照射装置１に入り込むことを抑えて、光照射手段である光源９に皮膚表面が接触して火傷等が生じるおそれを防止する。更に、放出部６ａが照射した光量を均一化して照射するため、皮膚表面に安定した光量で光を照射することができる。
【００１８】
本発明の実施の形態に係る光照射装置１では、上記した構成により、４００〜１２００ｎｍの波長の光を、半値幅が６００μｓのパルスを、レンズ５の前面から５ｍｍの距離に０．２〜０．２５Ｊ／ｃｍ2のエネルギー強度で分布させる。これらの光は、皮膚表面に火傷、シミ等の副作用を起こすことのない、皮膚表面に対する負担の小さな光である。このため、本発明の実施の形態に係る光照射装置１により、専門の医師による施術によらなくても、家庭で手軽に脱毛・抑毛効果が得られる。
【００１９】
上記した光のパルスを皮膚表面に照射することにより、例えば皮膚表面のＩｌ１ｂの発現を上昇させたり、ｓｈｈ及び／又Ｂｍｐの発現を減少させる。これにより、皮膚表面の毛の発育を抑制する。また、Ｉｌ１ｂの発現の上昇や、ｓｈｈ及び／又Ｂｍｐの発現を減少等により、メラニンを含む細胞においてメラニンの合成が低下し、結果として毛の発育が抑制される。
【実施例】
【００２０】
以下、実施例により本発明の実施の形態に係る光照射装置について更に具体的に説明するが、本発明の範囲はこれらに限定されるものではない。
【００２１】
本発明の実施の形態に係る光照射装置の脱毛・抑毛効果を確認するために、次に説明する評価試験を行った。
【００２２】
Ｃ５７ＢＬ／６マウスの背部皮膚の毛包が成長期ではなく休止期のマウスの背部皮膚にワックス脱毛を行い、毛の成長期を誘導した。脱毛後５日で照射を開始した。照射は１×３ｃｍ、１日に５回連続照射した。照射したマウスに対し、経過観察又は皮膚のサンプリングを行った。皮膚のサンプリングは、照射後、照射２時間後、照射１２時間後、照射１日後、照射３日後、照射７日後に行った。なお、サンプリングするときには増殖細胞にＢｒｄＵを取り込ませるために、サンプリング１時間前にＢｒｄＵ（１００ｕｇ／ｇ ｂｏｄｙｗｅｉｇｈｔ）を腹腔内に注射した。
【００２３】
＜組織切片の作製方法＞
１．採皮するマウスを頚椎脱臼した。
２．マウスの背部皮膚に７０％エタノールをかけ、キムワイプ又はティッシュで拭いて、皮膚表面の皮脂を取り除いた。
３．照射領域にあわせて皮膚を切った。本実験では、照射領域を１×３ｃｍと設定したため、確実に照射されていると考えられる０．７×２ｃｍくらいの領域を切り取った。照射しないコントロールも同様に行った。
４．切り取った皮膚を１×ＰＢＳ（−）につけた。
５．皮膚をさらに０．２×０．５ｃｍの大きさに必要量をメスで切った。
６．必要に応じて皮膚を平らに固定するためにメッシュに挟んだ。
７．リン酸緩衝中性ホルマリンで３時間、又は組織用迅速固定液（ＫＵＲＡＢＯ）で１時間固定した。
８．１×ＰＢＳ（−）で１０分×３回洗った。
９．７０％エタノールにつけた。このまま４℃で数日は保存可能であり、すぐに次のステップに進む場合には室温で３０分ゆっくり振とうさせながら置いた。
１０．このあとは以下の通りに液交換をし、パラフィンに包埋した。
９９．５％エタノール ３０分×２回
１００％エタノール ３０分×２回
キシレン ３０分×３回
キシレン／パラフィン（４５℃） ３０分×１回
パラフィン（６０℃） ３０分×３回
１１．包埋ブロックを滑走式ミクロトームで４〜５μｍの切片にした。
【００２４】
＜免疫染色の方法＞
組織切片を貼り付けたスライドガラスを以下の手順で液につけ、脱パラフィンした。
キシレン １０分×３回
９９．５％エタノール ５分×４回
１×ＰＢＳ（−） ５分程度
サンプルが乾かないようにＤＡＫＯペン（ＤＡＫＯ）でサンプルの周りを囲んだ。
１×ＰＢＳ（−）をのせた。
これ以降は抗体によって異なる処理を行った。
【００２５】
＜ＢｒｄＵ染色＞
１．２Ｎ ＨＣｌをサンプルにのせ、室温で２０分間インキュベートした。
２．１×ＰＢＳ（−）で洗浄した。
３．０．１％トリプシンをサンプルにのせ、３７℃で５分間インキュベートした。
４．１×ＰＢＳ（−）で洗浄した。
５．１％ＢＳＡをサンプルにのせ、室温で３０分間ブロッキングした。
６．ａｎｔｉ−ＢｒｄＵ抗体（ＤＡＫＯ社）を１：２００で希釈し、サンプルにのせた。
７．４℃で一晩、または室温で２時間反応させた。
８．１×ＰＢＳ（−）で５分×３回洗浄した。
９．二次抗体を反応させた。これは、使用抗体：ｄｏｎｋｅｙ ａｎｔｉ−ｍｏｕｓｅ ＩｇＧ Ａｌｅｘａ Ｆｌｏｕｒ ５９４（インビトロジェン） １：２０００〜３０００ 室温で３０分行った。
１０．１×ＰＢＳ（−）で５分×３回洗浄した。
１１．０．５ｍｇ／ｍｌ ＤＡＰＩを１０００倍希釈したものをサンプルに１滴たらし、その後封入した。
【００２６】
＜ｓｓＤＮＡ染色＞
１．０．４〜０．８ｍｇ／ｍｌ ｐｒｏＫをサンプルにのせ、室温で１５分反応させた。
２．１×ＰＢＳ（−）で洗浄した。
３．１％ＢＳＡをサンプルにのせ、室温で３０分間ブロッキングした。
４．ａｎｔｉ−ｓｓＤＮＡ抗体（ＤＡＫＯ社）を１：１００で希釈し、サンプルにのせた。
５．４℃で一晩、または室温で２時間反応させた。
６．１×ＰＢＳ（−）で５分×３回洗浄した。
７．二次抗体を反応させた。これは、使用抗体：ｄｏｎｋｅｙ ａｎｔｉ−ｒａｂｂｉｔ ＩｇＧ Ａｌｅｘａ Ｆｌｏｕｒ ４８８（インビトロジェン） １：１０００〜２０００ 室温で３０分行った。
８．１×ＰＢＳ（−）で５分×３回洗浄した。
９．０．５ｍｇ／ｍｌ ＤＡＰＩを１０００倍希釈したものをサンプルに１滴たらした後封入した。
【００２７】
＜顕微鏡観察＞
顕微鏡としてＯＬＹＭＰＵＳ ＢＸ−５０を使用した。対物レンズは１０倍とし、使用フィルターは、ＷＵ（ＤＡＰＩ染色）、ＷＩＹ（Ａｌｅｘａ５９４）、ＮＩＢＡ（Ａｌｅｘａ４８８）とした。デジタルカメラは、Ｐｉｘｅｒａ ｐｅｎｇｕｉｎ １５０ＣＬＭを用いた。
【００２８】
＜ＲＮＡ抽出〜リアルタイム方法＞
１．皮膚を１．５×０．５ｃｍ程度の大きさに切り取り、アルミ箔に挟んで液体窒素の中に入れた。
２．このまま保存するときは、−８０℃のディープフリーザーに入れた。
３．クライオプレス（マイクロテックニチオン）で皮膚を破砕した。なお、セルはよく液体窒素で冷やして行った。
４．粉砕した皮膚を用いて、ＲＮｅａｓｙ Ｆｉｂｒｏｕｓ Ｔｉｓｓｕｅ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ）でＲＮＡ抽出した。
５．１ｕｇのＲＮＡを用いてＱｕａｎｔｉｔｅｃｔ Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ）でｃＤＮＡを合成した。
６．ＳＹＢＲ試薬はＳＹＢＲ Ｐｒｅｍｉｘ Ｅｘ Ｔａｑ ＩＩ （Ｔａｋａｒａ）、装置はＴｈｅｒｍａｌ Ｃｙｃｌｅｒ Ｄｉｃｅ （Ｔａｋａｒａ）を用いてリアルタイムＰＣＲを行った。プライマーは、次に示すＴａｋａＲａ製の各セットを用いた。
【００２９】
＜プライマー＞
MA082472-F, MA082472-R (Egfr); MA080988-F, MA080988-R (Hgf); MA029052-F, MA029052-R (Ikbkb); MA025939-F, MA025939-R (Il1b); MA081429-F, MA081429-R (Mitf); MA073973-F, MA073973-R (Nfkb1); MA057895-F, MA057895-R (Nfkb2); MA076991-F, MA076991-R (Shh); MA079248-F, MA079248-R (Stat3); MA030397-F, MA030397-R (Tgfb1); MA027420-F, MA027420-R (Tgfb2); MA078455-F, MA078455-R (Map3k5); MA032002-F, MA032002-R (Mapk8); MA050368-F, MA050368-R (Actb)
【００３０】
＜観察結果＞
図９に照射１０時間後の顕微鏡による１０倍での観察結果を示す。図９（ａ）〜（ｃ）は光を照射していないコントロールのマウスの皮膚を観察したものであり、図９（ａ）はＨＥ染色の結果を、図９（ｂ）は抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を、図９（ｃ）は抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す。図９（ｄ）〜（ｅ）は光を照射したマウスの皮膚を観察したものであり、図９（ｄ）はＨＥ染色の結果を、図９（ｅ）は抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を、図９（ｆ）は抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す。図９（ａ）、（ｄ）に示すＨＥ染色の結果より、９ａ、９ｄで示すように皮膚表面に特に目立った変化は起きていない。また、図９（ｂ）、（ｅ）において９ｂ、９ｅで示すように、ＢｒｄＵ陽性細胞の分布領域や数はほとんど差はない。図９（ｃ）、（ｆ）において９ｃ、９ｆで示すように、光を照射した方ではｓｓＤＮＡ陽性の部分（９ｆ）が存在しており、細胞死（アポトーシス）が起きている可能性が示された。
【００３１】
図１０に照射２４時間（１日）後の顕微鏡による１０倍での観察結果を示す。図１０（ａ）〜（ｃ）は光を照射していないコントロールのマウスの皮膚を観察したものであり、図１０（ａ）はＨＥ染色の結果を、図１０（ｂ）は抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を、図１０（ｃ）は抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す。図１０（ｄ）〜（ｅ）は光を照射したマウスの皮膚を観察したものであり、図１０（ｄ）はＨＥ染色の結果を、図１０（ｅ）は抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を、図１０（ｆ）は抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す。図１０（ａ）において１０ａで示すように、コントロールの表皮が少し肥厚化していた。また、図１０（ｂ）において１０ｂで示すように、コントロール側でＢｒｄＵ陽性細胞の数が多く見られ、これはかきむしったり、怪我をしていた可能性が考えられた。また、図１０（ｆ）で示すように、照射側の毛包では、１０時間で細胞死を起こしたメラニンを含むメラノサイトや一部のケラチノサイトが毛母から上方へ押し出されている様子が見られた。
【００３２】
同様に、図１１に照射３日後の顕微鏡による１０倍での観察結果を示す。図１１（ａ）〜（ｃ）は光を照射していないコントロールのマウスの皮膚を観察したものであり、図１１（ａ）はＨＥ染色の結果を、図１１（ｂ）は抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を、図１１（ｃ）は抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す。図１１（ｄ）〜（ｅ）は光を照射したマウスの皮膚を観察したものであり、図１１（ｄ）はＨＥ染色の結果を、図１１（ｅ）は抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を、図１１（ｆ）は抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す。同様に、図１２に照射５日後の顕微鏡による１０倍での観察結果を示す。図１２（ａ）〜（ｃ）は光を照射していないコントロールのマウスの皮膚を観察したものであり、図１２（ａ）はＨＥ染色の結果を、図１２（ｂ）は抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を、図１２（ｃ）は抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す。図１２（ｄ）〜（ｅ）は光を照射したマウスの皮膚を観察したものであり、図１２（ｄ）はＨＥ染色の結果を、図１２（ｅ）は抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を、図１２（ｆ）は抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す。
【００３３】
図９〜１２の結果より、照射して１０時間前後でメラニンを含むメラノサイトと一部のケラチノサイトが細胞死を起こし、その細胞死を起こした細胞は、数日で体外に排出されることがわかった。この結果より、光を照射することで細胞周期が遅くなる等の原因で、結果的に見た目上の成長期が長くなることが考えられた。また、光照射側の毛包がコントロール側に比べて小さくなっており、更に、照射側の毛包には照射３日以降メラニンが確認できなかった。
【００３４】
次に、リアルタイムＰＣＲの結果を示す。図１３（ａ）は照射２時間後の結果であり、図１３（ｂ）は照射１２時間後、図１３（ｃ）は照射１日後の結果、図１４（ａ）は照射３日後の結果、図１４（ｂ）は照射５日後、図１４（ｃ）は照射７日後の結果である。各図において、グラフ左側のＣの付いている側がコントロールであり、右側のＬの付いている側が照射側の結果である。図１３、図１４より、特にＩｌ１ｂ（インターロイキン１β）、ｓｈｈ、Ｂｍｐ４の発現に変化が見られた。Ｉｌ１ｂの発現が照射側で上がっており、炎症が起こっていることが考えられた。また、ｓｈｈ及びＢｍｐ４の発現が照射側で減少していた。特に、図１４（ｃ）で示す、照射７日目で照射側とコントロール側でＰＣＲの結果に差が出ているのは、コントロール側は毛が成長しているのに対して、照射側は抑毛されているからと考えられた。
【００３５】
以上、本実施の形態について説明したが、上記実施の形態の開示の一部をなす論述及び図面はこの発明を限定するものであると理解するべきではない。この開示から当業者には様々な代替実施の形態、実施例及び運用技術が明らかとなろう。
【符号の説明】
【００３６】
１…光照射装置
２…本体
２ａ…着脱操作部
２ｂ…電源スイッチ
３…本体カバー
３ａ…ユニット装着部
４…照射ユニット
５…レンズ
６…配光制御手段
６ａ…放出部
６ｂ…遮光部
７…フレーム
８…ランプケーシング
８ａ…取付用突起
９…光源
１０…リフレクタ
１１…回路ユニット
２２…充電制御部
２３…コンデンサチャージ部
２４…フラッシュ制御部
２５…周辺回路部
【技術分野】
【０００１】
本発明は、光によって脱毛や抑毛を行う光照射装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
医療分野において光照射による脱毛や抑毛が知られている。これは、高出力（クラス４）レーザを皮膚に照射して、毛根部及び毛包部の細胞を破壊するネクローシスによる。このようなレーザを用いた脱毛や抑毛は、細胞の破壊を伴うために火傷、シミ等の副作用が起きやすく、皮膚に対する負担が大きいため、専門の医師により施術が行われる。しかし、専門家による施術では経済的及び時間的な負担があることから、家庭で手軽に使用できる脱毛・抑毛機が望まれている。そこで、例えば、低出力の光を照射する家庭用脱毛機が提案されている（特許文献１参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００２−１７２１７９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、これまでの家庭用脱毛機では、十分な脱毛・抑毛効果が得られない。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は上記課題を解決するためになされたものであり、本発明に係る光照射装置は、４００〜１２００ｎｍの波長の光を、半値幅が６００μｓのパルスとして付与する光源部と、この光源部から付与された光のパルスを、出射面から５ｍｍの距離に０．２〜０．２５Ｊ／ｃｍ2のエネルギー強度で分布させる導光部と、を備えることを特徴とする。
【発明の効果】
【０００６】
本発明によれば、低出力光の照射で皮膚に負担をかけることなく脱毛・抑毛が可能な光照射装置を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】（ａ）本発明の実施の形態に係る光照射装置の外観を示す正面図である。（ｂ）本発明の実施の形態に係る光照射装置の外観を示す側面図である。
【図２】光照射装置の配光制御手段とフレームの脱離状態での光照射装置の斜視図である。
【図３】照射ユニットの分解斜視図である。
【図４】（ａ）照射ユニットを示す正面図である。（ｂ）図４（ａ）のＡ−Ａ断面図である。
【図５】照射ユニットのフレームブロックの斜視図である。
【図６】本体及び配光制御手段内に配設された制御回路のブロック図である。
【図７】照射された光の発光の波長分布を示す図である。
【図８】レンズのレンズ幅方向における光量分布を示す図である。
【図９】（ａ）コントロールのマウスの皮膚のＨＥ染色の結果を示す顕微鏡写真である。（ｂ）コントロールのマウスの皮膚の抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｃ）コントロールのマウスの皮膚の抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｄ）照射１０時間後のマウスの皮膚のＨＥ染色の結果を示す顕微鏡写真である。（ｅ）照射１０時間後のマウスの皮膚の抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｆ）照射１０時間後のマウスの皮膚の抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。
【図１０】（ａ）コントロールのマウスの皮膚のＨＥ染色の結果を示す顕微鏡写真である。（ｂ）コントロールのマウスの皮膚の抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｃ）コントロールのマウスの皮膚の抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｄ）照射２４時間後のマウスの皮膚のＨＥ染色の結果を示す顕微鏡写真である。（ｅ）照射２４時間後のマウスの皮膚の抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｆ）照射２４時間後のマウスの皮膚の抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。
【図１１】（ａ）コントロールのマウスの皮膚のＨＥ染色の結果を示す顕微鏡写真である。（ｂ）コントロールのマウスの皮膚の抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｃ）コントロールのマウスの皮膚の抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｄ）照射３日後のマウスの皮膚のＨＥ染色の結果を示す顕微鏡写真である。（ｅ）照射３日後のマウスの皮膚の抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｆ）照射３日後のマウスの皮膚の抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。
【図１２】（ａ）コントロールのマウスの皮膚のＨＥ染色の結果を示す顕微鏡写真である。（ｂ）コントロールのマウスの皮膚の抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｃ）コントロールのマウスの皮膚の抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｄ）照射５日後のマウスの皮膚のＨＥ染色の結果を示す顕微鏡写真である。（ｅ）照射５日後のマウスの皮膚の抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。（ｆ）照射５日後のマウスの皮膚の抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す顕微鏡写真である。
【図１３】（ａ）照射２時間後のリアルタイムＰＣＲの結果を示す図である。（ｂ）照射１２時間後のリアルタイムＰＣＲの結果を示す図である。（ｃ）照射１日後のリアルタイムＰＣＲの結果を示す図である。
【図１４】（ａ）照射３日後のリアルタイムＰＣＲの結果を示す図である。（ｂ）照射５日後のリアルタイムＰＣＲの結果を示す図である。（ｃ）照射７日後のリアルタイムＰＣＲの結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
以下、本発明に係る光照射装置について添付図面に示す実施の形態に基づいて説明する。 図１（ａ）は本発明の実施の形態に係る光照射装置１の外観を示す正面図、図１（ｂ）は側面図である。図２は、図１に示す光照射装置１の配光制御手段６とフレーム７の脱離状態での光照射装置１の斜視図である。図３は照射ユニット４の分解斜視図、図４（ａ）は照射ユニットを示す正面図、図４（ｂ）は、図４（ａ）のＡ−Ａ断面図である。図５は、照射ユニット４のフレームブロックの斜視図である。図６は、本体２及び配光制御手段６内に配設された制御回路のブロック図である。
【０００９】
本発明の実施の形態に係る光照射装置１は、生体表面、特に皮膚表面に光照射を行うことにより、生体表面の脱毛を行う光脱毛や、生体表面の毛の再生及び成長を抑制する光抑毛等を行う。本発明の実施の形態に係る光照射装置１は、片手で把持可能な本体２と、本体２の一端に着脱自在に取り付けられ、上部にレンズ５、内部に光源９を有する光照射手段である照射ユニット４と、照射ユニット４の周囲を覆い、かつ照射ユニット４から照射された光を調節する配光制御手段６と、配光制御手段６を保持し、かつ本体２に着脱自在の本体カバー３を備える。
【００１０】
本体２は、光照射を制御する制御手段及び内臓電源とを内部に備えると共に、外装に、本体２の電源のオンオフを行う電源スイッチ２ｂと、本体カバー３の着脱を操作する着脱操作部２ａを備える。本体２の照射ユニット４が取り付けられる側の端部には、照射ユニット４を着脱自在とするユニット装着部３ａと、着脱操作部２ａにより操作され本体カバー３を着脱自在に係止する本体側係止部と、照射ユニット４の光源９を発光させる図示しない発光スイッチとを備える。
【００１１】
本体カバー３は、配光制御手段６をスライド自在で保持する配光制御手段６用の開口を有し、照射ユニット４を覆うカバー部材で形成されている。本体カバー３は、本体２と図示しない係止手段によって保持されている。
【００１２】
照射ユニット４は、光が照射される略長方形状の照射口を一端に有する、前後に２つ割りしたランプケーシング８とその内部に光源９を備え、光照射口に蓋としてレンズ５が嵌め込まれている。照射ユニット４の長手方向の両外側、詳しくはレンズ５の長手方向における両端にユニット装着部３ａに係脱自在な取付用突起８ａが延設されており、照射ユニット４は取付用突起８ａとユニット装着部３ａとが係合することで本体２に着脱自在に取り付けられる。光源９として、例えばキセノン管を用いることができる。更に、照射ユニット４は、光源９からの光を反射して照射口に嵌め込んだレンズ５に向けるリフレクタ１０と、リフレクタ１０を保持する基台１６と、発光スイッチからの信号を受けて光源９を発光させるトリガトランスである回路ユニット１１を備える。回路ユニット１１は、コネクタ１２を搭載した回路Ｐ板１３を有する。リフレクタ１０は、照射口側に照射口と略同じ大きさの開口を有し、かつ反射面を内側に備えた略Ｕ字のカップ形状である。リフレクタ１０の開口と逆の位置であるカップ形状の底部の内側には光源９が位置する。リフレクタ１０とレンズ５は、光源９からの光を均一化する。詳しくは、リフレクタ１０は光源９の発光により生じた光の向きを照射口に直行する向きに揃えると共に、照射口から照射される光量の分布を略一定に揃える。照射ユニット４の光源９は、キセノン管に限られず、一つ又は複数のダイオードとしても良い。光源９はリフレクタ１０と点接触しており、両極にゴムプレート１４を通し、フィクスチャ１５で保持されている。
【００１３】
配光制御手段６は、照射ユニット４と皮膚表面との間に介在し、図５に示すように、光を透過しない不透明部材で筒形状に形成された遮光部６ｂと、遮光部６ｂの筒形状に略長方形状で開口した一端に、光学的部材として、例えばレンズを設けた放出部６ａとを備える。遮光部６ｂは、照射ユニット４の側面を覆い、かつ照射ユニット４が光を照射口から皮膚表面に照射する光照射方向に向かって照射ユニット４を覆う面を延設した筒形状であり、筒の開口と照射ユニット４の照射口とに対向して配置される。延設した側に位置する開口が照射ユニット４からの光を外部に放出する放出口となっており、放出口を形成する遮光部６ｂの端部が光照射の際に皮膚表面に当接する。光照射方向とは、照射口の開口面に直行する方向であり、リフレクタ１０とレンズ５によって光量が均一化されて照射口から光が照射される。なお、光学的部材は、照射ユニット４から入射された光に対して集光する等して光の強度や向きを変化させることなく光量を均一化する形状に形成したものであり、例えば、本発明の実施の形態のように嵌合位置の光量に合わせて格子状に形成したレンズ等があげられる。また、放出部６ａは放出口より光照射方向側に突出しない、詳しくは放出口を形成する遮光部６ｂの内部空間への入り込みを抑制して、皮膚表面が照射ユニット４、特にレンズ５に接触することを防止する。
【００１４】
遮光部６ｂの左右両側にはフック部６ｂ１が設けられ、本体カバー３に嵌合させることで保持されている。遮光部６ｂの開口の長手方向を形成する端辺を有する側面には、開口に直行する光照射方向に沿ってスライドガイド６ｂ２、６ｂ４がそれぞれ設けられている。スライドガイド６ｂ２、６ｂ４は光照射装置１を組み立てた際に配光制御手段６を光照射方向と平行にスライド自在とする。遮光部６ｂの側面のうち、一方の面の放出口と反対側の開口を形成する端辺の略中央には、スイッチ用突起６ｂ３が面に平行して突設されており、スイッチ用突起６ｂ３はスライドガイド６ｂ２、６ｂ４により配光制御手段６がスライドした際に発光スイッチを作動させる。電源スイッチ２ｂがオンの状態で、放出口を形成する部位を生体表面に密着させて光照射方向に押す又は皮膚表面に押し当てることで、光照射方向と反対の方向に配光制御手段６がスライドされる。スライドに伴い、スイッチ用突起６ｂ３が発光スイッチを押圧し、押圧された発光スイッチはユニット回路を介して光源９を発光させる。そして、光照射後に配光制御手段６が光照射方向にスライドすることで、スイッチ用突起６ｂ３が発光スイッチから離れて発光スイッチの押圧が解除される。この光照射動作は一例であり、生体表面に押し当てて発光スイッチを作動させた状態で電源スイッチ２ｂをオンにすることで光照射するのはもちろん、更に他の照射スイッチを備えたものでもかまわない。
【００１５】
配光制御手段６は、図６に示すように本体２及び配光制御手段６内に配設された制御回路によって制御される。制御回路は、マイクロプロセッサユニット（ＭＰＵ）２１と、アダプタ付きＬｉイオンセルとその保護ＩＣとを備えた充電制御部２２と、ストロボコンデンサとその電圧制御ＩＣとを備えるコンデンサチャージ部２３と、光源９のトリガ制御を行うフラッシュ制御部２４と、周辺回路部２５とを備える。制御回路が行う光照射の制御として、例えば、照射ユニット４の連続光照射回数・通算光照射回数の記憶及び回数に応じた光源９の発光量の調節等の長期使用における光量の制御や、照射ユニット４の温度検知あるいは本体カバー３・照射ユニット４の有無検知等の安全管理等を行うことは、適宜設計変更可能である。
【００１６】
例えば、光源９としてキセノンフラッシュランプを用いた場合に、キセノン管両端に６００Ｖ印加（管陰極に−３００Ｖ印加）し、次にキセノン管表面に５ｋＶ印加して、トリガートランスにより３００Ｖを昇圧し、キセノン管内がイオン化され、電流通過（約１１０Ａ、１ｍｓ）により発光させる。図７に、この条件で皮膚表面に照射された光の発光の波長分布（スペクトル分布）７Ｘを示す。図７に示すように、スペクトル分布７Ｘは、波長４００〜５００（ｎｍ）に第１の高エネルギー部７Ｘ１を、波長８００〜１０００（ｎｍ）に第２の高エネルギー部７Ｘ２を有する。レンズ５から照射された光は、配光制御手段６を介して、出射面であるレンズ５の前面から５ｍｍの位置に、図８に示す光量分布８Ｘを有するように光学設計されている。光量分布８Ｘは、図３に示すレンズ５のレンズ幅方向（矢印５Ｘの方向）における光量分布を示しており、極大値８Ｘ１、８Ｘ２、８Ｘ３を有する。
【００１７】
配光制御手段６により、光源９から照射した光を皮膚表面に直接接触させることがなくなる。また、光源９を覆う遮光部６ｂにより照射された光が漏れることを防止すると共に、光学的部材を配置した放出部６ａにより、皮膚表面が光照射装置１に入り込むことを抑えて、光照射手段である光源９に皮膚表面が接触して火傷等が生じるおそれを防止する。更に、放出部６ａが照射した光量を均一化して照射するため、皮膚表面に安定した光量で光を照射することができる。
【００１８】
本発明の実施の形態に係る光照射装置１では、上記した構成により、４００〜１２００ｎｍの波長の光を、半値幅が６００μｓのパルスを、レンズ５の前面から５ｍｍの距離に０．２〜０．２５Ｊ／ｃｍ2のエネルギー強度で分布させる。これらの光は、皮膚表面に火傷、シミ等の副作用を起こすことのない、皮膚表面に対する負担の小さな光である。このため、本発明の実施の形態に係る光照射装置１により、専門の医師による施術によらなくても、家庭で手軽に脱毛・抑毛効果が得られる。
【００１９】
上記した光のパルスを皮膚表面に照射することにより、例えば皮膚表面のＩｌ１ｂの発現を上昇させたり、ｓｈｈ及び／又Ｂｍｐの発現を減少させる。これにより、皮膚表面の毛の発育を抑制する。また、Ｉｌ１ｂの発現の上昇や、ｓｈｈ及び／又Ｂｍｐの発現を減少等により、メラニンを含む細胞においてメラニンの合成が低下し、結果として毛の発育が抑制される。
【実施例】
【００２０】
以下、実施例により本発明の実施の形態に係る光照射装置について更に具体的に説明するが、本発明の範囲はこれらに限定されるものではない。
【００２１】
本発明の実施の形態に係る光照射装置の脱毛・抑毛効果を確認するために、次に説明する評価試験を行った。
【００２２】
Ｃ５７ＢＬ／６マウスの背部皮膚の毛包が成長期ではなく休止期のマウスの背部皮膚にワックス脱毛を行い、毛の成長期を誘導した。脱毛後５日で照射を開始した。照射は１×３ｃｍ、１日に５回連続照射した。照射したマウスに対し、経過観察又は皮膚のサンプリングを行った。皮膚のサンプリングは、照射後、照射２時間後、照射１２時間後、照射１日後、照射３日後、照射７日後に行った。なお、サンプリングするときには増殖細胞にＢｒｄＵを取り込ませるために、サンプリング１時間前にＢｒｄＵ（１００ｕｇ／ｇ ｂｏｄｙｗｅｉｇｈｔ）を腹腔内に注射した。
【００２３】
＜組織切片の作製方法＞
１．採皮するマウスを頚椎脱臼した。
２．マウスの背部皮膚に７０％エタノールをかけ、キムワイプ又はティッシュで拭いて、皮膚表面の皮脂を取り除いた。
３．照射領域にあわせて皮膚を切った。本実験では、照射領域を１×３ｃｍと設定したため、確実に照射されていると考えられる０．７×２ｃｍくらいの領域を切り取った。照射しないコントロールも同様に行った。
４．切り取った皮膚を１×ＰＢＳ（−）につけた。
５．皮膚をさらに０．２×０．５ｃｍの大きさに必要量をメスで切った。
６．必要に応じて皮膚を平らに固定するためにメッシュに挟んだ。
７．リン酸緩衝中性ホルマリンで３時間、又は組織用迅速固定液（ＫＵＲＡＢＯ）で１時間固定した。
８．１×ＰＢＳ（−）で１０分×３回洗った。
９．７０％エタノールにつけた。このまま４℃で数日は保存可能であり、すぐに次のステップに進む場合には室温で３０分ゆっくり振とうさせながら置いた。
１０．このあとは以下の通りに液交換をし、パラフィンに包埋した。
９９．５％エタノール ３０分×２回
１００％エタノール ３０分×２回
キシレン ３０分×３回
キシレン／パラフィン（４５℃） ３０分×１回
パラフィン（６０℃） ３０分×３回
１１．包埋ブロックを滑走式ミクロトームで４〜５μｍの切片にした。
【００２４】
＜免疫染色の方法＞
組織切片を貼り付けたスライドガラスを以下の手順で液につけ、脱パラフィンした。
キシレン １０分×３回
９９．５％エタノール ５分×４回
１×ＰＢＳ（−） ５分程度
サンプルが乾かないようにＤＡＫＯペン（ＤＡＫＯ）でサンプルの周りを囲んだ。
１×ＰＢＳ（−）をのせた。
これ以降は抗体によって異なる処理を行った。
【００２５】
＜ＢｒｄＵ染色＞
１．２Ｎ ＨＣｌをサンプルにのせ、室温で２０分間インキュベートした。
２．１×ＰＢＳ（−）で洗浄した。
３．０．１％トリプシンをサンプルにのせ、３７℃で５分間インキュベートした。
４．１×ＰＢＳ（−）で洗浄した。
５．１％ＢＳＡをサンプルにのせ、室温で３０分間ブロッキングした。
６．ａｎｔｉ−ＢｒｄＵ抗体（ＤＡＫＯ社）を１：２００で希釈し、サンプルにのせた。
７．４℃で一晩、または室温で２時間反応させた。
８．１×ＰＢＳ（−）で５分×３回洗浄した。
９．二次抗体を反応させた。これは、使用抗体：ｄｏｎｋｅｙ ａｎｔｉ−ｍｏｕｓｅ ＩｇＧ Ａｌｅｘａ Ｆｌｏｕｒ ５９４（インビトロジェン） １：２０００〜３０００ 室温で３０分行った。
１０．１×ＰＢＳ（−）で５分×３回洗浄した。
１１．０．５ｍｇ／ｍｌ ＤＡＰＩを１０００倍希釈したものをサンプルに１滴たらし、その後封入した。
【００２６】
＜ｓｓＤＮＡ染色＞
１．０．４〜０．８ｍｇ／ｍｌ ｐｒｏＫをサンプルにのせ、室温で１５分反応させた。
２．１×ＰＢＳ（−）で洗浄した。
３．１％ＢＳＡをサンプルにのせ、室温で３０分間ブロッキングした。
４．ａｎｔｉ−ｓｓＤＮＡ抗体（ＤＡＫＯ社）を１：１００で希釈し、サンプルにのせた。
５．４℃で一晩、または室温で２時間反応させた。
６．１×ＰＢＳ（−）で５分×３回洗浄した。
７．二次抗体を反応させた。これは、使用抗体：ｄｏｎｋｅｙ ａｎｔｉ−ｒａｂｂｉｔ ＩｇＧ Ａｌｅｘａ Ｆｌｏｕｒ ４８８（インビトロジェン） １：１０００〜２０００ 室温で３０分行った。
８．１×ＰＢＳ（−）で５分×３回洗浄した。
９．０．５ｍｇ／ｍｌ ＤＡＰＩを１０００倍希釈したものをサンプルに１滴たらした後封入した。
【００２７】
＜顕微鏡観察＞
顕微鏡としてＯＬＹＭＰＵＳ ＢＸ−５０を使用した。対物レンズは１０倍とし、使用フィルターは、ＷＵ（ＤＡＰＩ染色）、ＷＩＹ（Ａｌｅｘａ５９４）、ＮＩＢＡ（Ａｌｅｘａ４８８）とした。デジタルカメラは、Ｐｉｘｅｒａ ｐｅｎｇｕｉｎ １５０ＣＬＭを用いた。
【００２８】
＜ＲＮＡ抽出〜リアルタイム方法＞
１．皮膚を１．５×０．５ｃｍ程度の大きさに切り取り、アルミ箔に挟んで液体窒素の中に入れた。
２．このまま保存するときは、−８０℃のディープフリーザーに入れた。
３．クライオプレス（マイクロテックニチオン）で皮膚を破砕した。なお、セルはよく液体窒素で冷やして行った。
４．粉砕した皮膚を用いて、ＲＮｅａｓｙ Ｆｉｂｒｏｕｓ Ｔｉｓｓｕｅ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ）でＲＮＡ抽出した。
５．１ｕｇのＲＮＡを用いてＱｕａｎｔｉｔｅｃｔ Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ）でｃＤＮＡを合成した。
６．ＳＹＢＲ試薬はＳＹＢＲ Ｐｒｅｍｉｘ Ｅｘ Ｔａｑ ＩＩ （Ｔａｋａｒａ）、装置はＴｈｅｒｍａｌ Ｃｙｃｌｅｒ Ｄｉｃｅ （Ｔａｋａｒａ）を用いてリアルタイムＰＣＲを行った。プライマーは、次に示すＴａｋａＲａ製の各セットを用いた。
【００２９】
＜プライマー＞
MA082472-F, MA082472-R (Egfr); MA080988-F, MA080988-R (Hgf); MA029052-F, MA029052-R (Ikbkb); MA025939-F, MA025939-R (Il1b); MA081429-F, MA081429-R (Mitf); MA073973-F, MA073973-R (Nfkb1); MA057895-F, MA057895-R (Nfkb2); MA076991-F, MA076991-R (Shh); MA079248-F, MA079248-R (Stat3); MA030397-F, MA030397-R (Tgfb1); MA027420-F, MA027420-R (Tgfb2); MA078455-F, MA078455-R (Map3k5); MA032002-F, MA032002-R (Mapk8); MA050368-F, MA050368-R (Actb)
【００３０】
＜観察結果＞
図９に照射１０時間後の顕微鏡による１０倍での観察結果を示す。図９（ａ）〜（ｃ）は光を照射していないコントロールのマウスの皮膚を観察したものであり、図９（ａ）はＨＥ染色の結果を、図９（ｂ）は抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を、図９（ｃ）は抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す。図９（ｄ）〜（ｅ）は光を照射したマウスの皮膚を観察したものであり、図９（ｄ）はＨＥ染色の結果を、図９（ｅ）は抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を、図９（ｆ）は抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す。図９（ａ）、（ｄ）に示すＨＥ染色の結果より、９ａ、９ｄで示すように皮膚表面に特に目立った変化は起きていない。また、図９（ｂ）、（ｅ）において９ｂ、９ｅで示すように、ＢｒｄＵ陽性細胞の分布領域や数はほとんど差はない。図９（ｃ）、（ｆ）において９ｃ、９ｆで示すように、光を照射した方ではｓｓＤＮＡ陽性の部分（９ｆ）が存在しており、細胞死（アポトーシス）が起きている可能性が示された。
【００３１】
図１０に照射２４時間（１日）後の顕微鏡による１０倍での観察結果を示す。図１０（ａ）〜（ｃ）は光を照射していないコントロールのマウスの皮膚を観察したものであり、図１０（ａ）はＨＥ染色の結果を、図１０（ｂ）は抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を、図１０（ｃ）は抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す。図１０（ｄ）〜（ｅ）は光を照射したマウスの皮膚を観察したものであり、図１０（ｄ）はＨＥ染色の結果を、図１０（ｅ）は抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を、図１０（ｆ）は抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す。図１０（ａ）において１０ａで示すように、コントロールの表皮が少し肥厚化していた。また、図１０（ｂ）において１０ｂで示すように、コントロール側でＢｒｄＵ陽性細胞の数が多く見られ、これはかきむしったり、怪我をしていた可能性が考えられた。また、図１０（ｆ）で示すように、照射側の毛包では、１０時間で細胞死を起こしたメラニンを含むメラノサイトや一部のケラチノサイトが毛母から上方へ押し出されている様子が見られた。
【００３２】
同様に、図１１に照射３日後の顕微鏡による１０倍での観察結果を示す。図１１（ａ）〜（ｃ）は光を照射していないコントロールのマウスの皮膚を観察したものであり、図１１（ａ）はＨＥ染色の結果を、図１１（ｂ）は抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を、図１１（ｃ）は抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す。図１１（ｄ）〜（ｅ）は光を照射したマウスの皮膚を観察したものであり、図１１（ｄ）はＨＥ染色の結果を、図１１（ｅ）は抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を、図１１（ｆ）は抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す。同様に、図１２に照射５日後の顕微鏡による１０倍での観察結果を示す。図１２（ａ）〜（ｃ）は光を照射していないコントロールのマウスの皮膚を観察したものであり、図１２（ａ）はＨＥ染色の結果を、図１２（ｂ）は抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を、図１２（ｃ）は抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す。図１２（ｄ）〜（ｅ）は光を照射したマウスの皮膚を観察したものであり、図１２（ｄ）はＨＥ染色の結果を、図１２（ｅ）は抗ＢｒｄＵＨＥ抗体を用いた結果を、図１２（ｆ）は抗ｓｓＤＮＡ抗体を用いた結果を示す。
【００３３】
図９〜１２の結果より、照射して１０時間前後でメラニンを含むメラノサイトと一部のケラチノサイトが細胞死を起こし、その細胞死を起こした細胞は、数日で体外に排出されることがわかった。この結果より、光を照射することで細胞周期が遅くなる等の原因で、結果的に見た目上の成長期が長くなることが考えられた。また、光照射側の毛包がコントロール側に比べて小さくなっており、更に、照射側の毛包には照射３日以降メラニンが確認できなかった。
【００３４】
次に、リアルタイムＰＣＲの結果を示す。図１３（ａ）は照射２時間後の結果であり、図１３（ｂ）は照射１２時間後、図１３（ｃ）は照射１日後の結果、図１４（ａ）は照射３日後の結果、図１４（ｂ）は照射５日後、図１４（ｃ）は照射７日後の結果である。各図において、グラフ左側のＣの付いている側がコントロールであり、右側のＬの付いている側が照射側の結果である。図１３、図１４より、特にＩｌ１ｂ（インターロイキン１β）、ｓｈｈ、Ｂｍｐ４の発現に変化が見られた。Ｉｌ１ｂの発現が照射側で上がっており、炎症が起こっていることが考えられた。また、ｓｈｈ及びＢｍｐ４の発現が照射側で減少していた。特に、図１４（ｃ）で示す、照射７日目で照射側とコントロール側でＰＣＲの結果に差が出ているのは、コントロール側は毛が成長しているのに対して、照射側は抑毛されているからと考えられた。
【００３５】
以上、本実施の形態について説明したが、上記実施の形態の開示の一部をなす論述及び図面はこの発明を限定するものであると理解するべきではない。この開示から当業者には様々な代替実施の形態、実施例及び運用技術が明らかとなろう。
【符号の説明】
【００３６】
１…光照射装置
２…本体
２ａ…着脱操作部
２ｂ…電源スイッチ
３…本体カバー
３ａ…ユニット装着部
４…照射ユニット
５…レンズ
６…配光制御手段
６ａ…放出部
６ｂ…遮光部
７…フレーム
８…ランプケーシング
８ａ…取付用突起
９…光源
１０…リフレクタ
１１…回路ユニット
２２…充電制御部
２３…コンデンサチャージ部
２４…フラッシュ制御部
２５…周辺回路部
【特許請求の範囲】
【請求項１】
４００〜１２００ｎｍの波長の光を、半値幅が６００μｓのパルスとして付与する光源部と、
前記光源部から付与された光のパルスを、出射面から５ｍｍの距離に０．２〜０．２５Ｊ／ｃｍ2のエネルギー強度で分布させる導光部と、
を備えることを特徴とする光照射装置。
【請求項２】
前記光源部から付与された光のパルスは、Ｉｌ１ｂの発現を上昇させて毛の発育を抑制することを特徴とする請求項１に記載の光照射装置。
【請求項３】
前記光源部から付与された光のパルスは、ｓｈｈ及び／又Ｂｍｐの発現を減少させて毛の発育を抑制することを特徴とする請求項１又は請求項２に記載の光照射装置。
【請求項４】
前記光源部から付与された光のパルスは、メラニンを含む細胞に作用して毛の発育を抑制することを特徴とする請求項１乃至請求項３のいずれか一項に記載の光照射装置。
【請求項５】
さらに、前記光源部と前記導光部とを収納する収納部材を備え、前記収納部材は把持部を有することを特徴とする請求項１乃至請求項４のいずれか一項に記載の光照射装置。
【請求項１】
４００〜１２００ｎｍの波長の光を、半値幅が６００μｓのパルスとして付与する光源部と、
前記光源部から付与された光のパルスを、出射面から５ｍｍの距離に０．２〜０．２５Ｊ／ｃｍ2のエネルギー強度で分布させる導光部と、
を備えることを特徴とする光照射装置。
【請求項２】
前記光源部から付与された光のパルスは、Ｉｌ１ｂの発現を上昇させて毛の発育を抑制することを特徴とする請求項１に記載の光照射装置。
【請求項３】
前記光源部から付与された光のパルスは、ｓｈｈ及び／又Ｂｍｐの発現を減少させて毛の発育を抑制することを特徴とする請求項１又は請求項２に記載の光照射装置。
【請求項４】
前記光源部から付与された光のパルスは、メラニンを含む細胞に作用して毛の発育を抑制することを特徴とする請求項１乃至請求項３のいずれか一項に記載の光照射装置。
【請求項５】
さらに、前記光源部と前記導光部とを収納する収納部材を備え、前記収納部材は把持部を有することを特徴とする請求項１乃至請求項４のいずれか一項に記載の光照射装置。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【公開番号】特開２０１１−１９３８８３（Ｐ２０１１−１９３８８３Ａ）
【公開日】平成２３年１０月６日（２０１１．１０．６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−２７６２（Ｐ２００９−２７６２）
【出願日】平成２１年１月８日（２００９．１．８）
【特許番号】特許第４３８０７８５号（Ｐ４３８０７８５）
【特許公報発行日】平成２１年１２月９日（２００９．１２．９）
【出願人】（０００００５８３２）パナソニック電工株式会社 (17,916)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年１０月６日（２０１１．１０．６）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１月８日（２００９．１．８）
【特許番号】特許第４３８０７８５号（Ｐ４３８０７８５）
【特許公報発行日】平成２１年１２月９日（２００９．１２．９）
【出願人】（０００００５８３２）パナソニック電工株式会社 (17,916)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]