哺乳類のサイトカイン；関連試薬の使用
サイトカインおよびサイトカインアゴニストおよびサイトカインアンタゴニストを使用する免疫系の活性を調節する方法が提供される。免疫障害および増殖性障害の処置の方法もまた提供される。本発明は、インターフェロンγ（ＩＦＮγ）の発現またはレベルを細胞によって調節する方法を提供し、この方法は、細胞を有効量のサイトカインＩＬ−２７のアゴニストまたはアンタゴニストを用いて処理する工程を包含する。別の実施形態においては、本発明は、インターフェロンγ（ＩＦＮγ）の発現またはレベルを細胞によって調節する方法を提供し、この方法は、細胞を有効量のＩＬ−２７のアゴニストおよびＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、もしくはＩＬ−２３のアゴニスト；またはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いて処理する工程を包含する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、種々の免疫障害の処置においてＩＦＮγ生成を増強するか、または阻害する方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
哺乳類の免疫応答は、「免疫ネットワーク」と呼ばれる一連の複合細胞相互作用に基づく。最近の研究は、このネットワークの内部作用（ｗｏｒｋｉｎｇ）の新しい見識を提供する。実際に、この応答の多くが、リンパ球、マクロファージ、顆粒球、および他の細胞のネットワーク様相互作用を中心に展開することは、明らかなままであるが、現在、免疫学者は、一般的に、サイトカインとして公知の可溶タンパク質が、これらの細胞相互作用を制御することにおいて重要な役割を果たすという意見を持っている。従って、細胞調節因子の単離、特徴付け、および作用機構、多数の医学的異常（例えば、免疫系障害）の診断および治療において、何が重要な進歩をもたらすかの理解に、かなりの関心がある。これらの因子のいくつかは、造血成長因子および／または造血分化因子である（例えば、幹細胞因子（ＳＣＦ）またはＩＬ−１２（例えば、Ｍｉｒｅ−ＳｌｕｉｓおよびＴｈｏｒｐｅ（１９９８）Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ；Ｔｈｏｍｓｏｎ（編）（１９９８）Ｔｈｅ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｈａｎｄｂｏｏｋ（第３編）Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ；ＭｅｔｃａｌｆおよびＮｉｃｏｌａ（１９９５）Ｔｈｅ Ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ Ｃｏｌｏｎｙ Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ Ｆａｃｔｏｒｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｕｎｉｖ．Ｐｒｅｓｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＵＫ；ならびにＡｇｇａｒｗａｌおよびＧｕｔｔｅｒｍａｎ（１９９１）Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ，Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ，Ｍａｌｄｅｎ，ＭＡを参照のこと）。
【０００３】
サイトカインは、種々の方法において細胞の活性を媒介する。サイトカインは、複合免疫系を作り上げる多様な細胞系統を含む多数の前駆体内への多能性造血幹細胞の増殖、成長、および分化を支持することが示されている。細胞構成要素間の適切かつ均衡を保っている相互作用は、健康な免疫応答に必須である。サイトカインが他の薬剤とともに投与される場合、異なった細胞系統は、しばしば異なった様式で反応する。
【０００４】
免疫応答で特に重要な細胞系統として、免疫グロブリン（異物を認識しかつ結合して、その除去をもたらす能力を有するタンパク質）を産生し、かつ分泌し得るＢ細胞、サイトカインを分泌し、Ｂ細胞および種々の他の細胞（他のＴ細胞を含む）が免疫ネットワークを作り上げることを誘導するか、または抑制するＴ細胞の種々の部分集合、感染性物質および腫瘍細胞に応答するサイトカイン産生を担うＮＫ細胞、および抗原提示細胞（例えば、樹状細胞および他の骨髄由来細胞）が挙げられる。
【０００５】
本発明は、ＩＬ−１２と関連するサイトカインであるＩＬ−２７を用いる方法を提供する。ＩＬ−１２は、細胞媒介性免疫において重要な役割を果たす。その活性は、ＩＬ−１２Ｒβ１およびＩＬ−１２Ｒβ２の２つのサブユニットを含む高親和性レセプター複合体を通じて引き起こされる。ＩＬ−１２のｐ３５サブユニットは、ＥＢＩ３と呼ばれる第二の可溶性タンパク質に対して結合し得る。そして、ｐ３５およびＥＢＩ３は、分泌されるヘテロダイマーを形成することが示唆されたが、このヘテロダイマーの機能は明らかではない。ＥＢＩ３はまた、別のタンパク質ｐ２８に対しても結合し、現在、ＩＬ−２７と呼ばれるｐ２８およびＥＢＩ３を含む可溶性のヘテロダイマーを形成する。このｐ２８サブユニットは、ＩＬ−８０またはＩＬ−Ｄ８０としてもまた公知である。ヒトｐ３５サブユニットおよびマウスｐ３５サブユニットをコードするｃＤＮＡは、ＵＳ２００２０１６４６０９およびＷＯ ０２／０６８５９６において記載されており、それらの両方ともが参考として援用される（例えば、Ｄｅｖｅｒｇｎｅら（１９９７）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９４：１２０４１−１２０４６；Ｃｈｕａら（１９９５）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５：４２８６：４２９４；Ｐｒｅｓｋｙら（１９９８）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６０：２１７４−２１７９；Ｇａｔｅｌｙら（１９９８）Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６：４９５−５２１；Ｐｒｅｓｋｙら（１９９６）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９３：１４００２−１４００７；Ｔｒｉｎｃｈｉｅｒｉ（１９９８）Ａｄｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７０：８３−２４３；Ｔｒｉｎｃｈｉｅｒｉ（１９９８）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｓ．１７：２６９−２７８；Ｔｒｉｎｃｈｉｅｒｉ（１９９５）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：２５１−２７６を参照のこと）。
【０００６】
本発明は、細菌および寄生虫（例えば、細胞内細菌および細胞内寄生虫）に対する免疫防御ならびにウイルス、ガン、および腫瘍に対する免疫防御を刺激する目的のためにインターフェロンγ（ＩＦＮγ）の発現を調節するための方法を提供する。ＩＦＮγは、細胞内細菌に対する免疫応答を媒介し得、この一般的な細胞内細菌種としては、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｓｐ．、Ｓｈｉｇｅｌｌａ ｓｐ．、Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｓｐ．、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ ｓｐ．、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａ ｓｐ．（ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ；ｌｅｐｒｏｓｙ）、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｓｐ．、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｓｐ．、Ｏｒｉｅｎｔａ ｓｐ．、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｓｐ．、Ａｎａｐｌａｓｍａ ｓｐ．、Ｎｅｏｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｓｐ．、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｓｐ．、およびＣｏｘｉｅｌｌａ ｓｐ．が挙げられる。さらに、ＩＦＮγは、寄生虫に対する応答を媒介する（例えば、Ｐｌａｓｍｏｄｉａ ｓｐ．（マラリア）、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｓｐ．、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ ｓｐ．、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｓｐ．、およびＣｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ ｓｐ．）。さらに、ＩＦＮγは、ウイルス（例えば、ＨＩＶ、痘瘡ウイルスおよびワクシニアウイルス（天然痘）などのオルトポックスウイルス、およびアルファヘルペスウイルス（例えば、単純疱疹ウイルス）およびベータヘルペスウイルス（例えば、サイトメガロウイルス）を含むヘルペスウイルス）に対する免疫防御を媒介する。ＩＦＮγ発現を減少させるか、または阻害する方法もまた提供される。それは、例えば、慢性炎症性障害（例えば、クローン病）の処置のためである（例えば、Ｋｅｎｔら（２０００）Ｖａｃｃｉｎｅ １８：２２５０−２２５６；Ｉｓｍａｉｌら（２００２）ＦＥＭＳ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｌｅｔｔ．２０７：１１１−１２０；Ｋａｕｆｍａｎｎ（２００１）Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｓ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：２０−３０；ＧｏｅｂｅｌおよびＧｒｏｓｓ（２００１）ＴＲＥＮＤＳ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．９：２６７−２７３；Ｈｅｕｓｓｌｅｒら（２００１）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．３１：１１６６−１１７６；Ｌｕｄｅｒら（２００１）Ｃａｒｓｔｅｎら（２００１）ＴＲＥＮＤＳ Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．１７：４８０−４８６；Ｒｏｏｋら（２００１）Ｅｕｒ．Ｒｅｓｐ．Ｊ．１７：５３７−５５７；ＳｔｅｎｇｅｒおよびＲｏｌｌｉｎｇｈｏｆｆ（２００１）Ａｎｎ．Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ．６０：ｉｉｉ４３−ｉｉｉ４６；Ｈａａｓら（２００２）Ａｍ．Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｐａｔｈｏｌ．２４：３１９−３２３；ＤｏｒｍａｎおよびＨｏｌｌａｎｄ（２０００）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｖｓ．１１：３２１−３３３；Ｓｍｉｔｈら（２００２）Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．８３（Ｐｔ．１２）２９１５−２９３１；ＣｏｈｒｓおよびＧｉｌｄｅｎ（２００１）Ｂｒａｉｎ Ｐａｔｈｏｌ．１１：４６５−４７４；ＴａｎｎｅｎｂａｕｍおよびＨａｍｉｌｔｏｎ（２００２）Ｓｅｍ．Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｌ．１０：１１３−１２３；Ｉｋｅｄａら（２００２）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｖｓ．１３：９５−１０９；Ｋｌｉｍｐら（２００２）Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｏｎｃｏｌ．Ｈｅｍａｔｏｌ．４４：１４３−１６１；Ｆｒｕｃｈｔら（２００１）ＴＲＥＮＤＳ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２：５５６−５６０を参照のこと）。
【０００７】
上記から、サイトカインおよびサイトカインレセプターと関連する（例えば、ＩＬ−２７、ＩＬ−１２およびそれらのレセプターと関連する）新しい機能および方法の発見が、広い範囲の変性状態または異常状態（例えば、感染症またはガン）についての新しい治療に寄与し得、ここでこの治療は、免疫系細胞および／または造血細胞に直接的または間接的に関与する。特に、公知のサイトカインの有益な活性を増強するか、または可能にする、サイトカインの発見および発展は、非常に有利である。本発明は、Ｌ−２７を用いてＩＦＮγ産生を増強する方法を提供する。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
（発明の要旨）
本発明は、ＩＬ−２７がインターフェロンγ（ＩＦＮγ）の生成を増強するという発見に、部分的に基づいている。
【０００９】
本発明は、インターフェロンγ（ＩＦＮγ）の発現またはレベルを細胞によって調節する方法を提供し、この方法は、細胞を有効量のサイトカインＩＬ−２７のアゴニストまたはアンタゴニストを用いて処理する工程を包含する。
【００１０】
別の実施形態においては、本発明は、インターフェロンγ（ＩＦＮγ）の発現またはレベルを細胞によって調節する方法を提供し、この方法は、細胞を有効量のＩＬ−２７のアゴニストおよびＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、もしくはＩＬ−２３のアゴニスト；またはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いて処理する工程を包含する。
【００１１】
上記方法であって、調節を増大させ、かつＩＬ−２７のアゴニストを用いて処置する方法；または調節を減少させ、かつＩＬ−２７のアンタゴニストを用いて処置する方法；上記方法であって、アゴニストがＩＬ−２７改変体またはＩＬ−２７誘導体であって、かつＩＬ−２７改変体またはＩＬ−２７誘導体が、少なくとも１つのＩＬ−２７の生物学的特性を有する方法；および上記方法であって、ＩＬ−２７改変体またはＩＬ−２７誘導体がＩＬ−２７ハイパーカイン（ｈｙｐｅｒｋｉｎｅ）を含む方法、ならびに、さらに上記方法であって、増大が、有効量のＩＬ−２７またはＩＬ−２７改変体もしくはＩＬ−２７誘導体の非存在下における発現レベル、または生成レベルよりも約２倍、約５倍、約１０倍、約２０倍、または約５０倍を超える方法もまた、提供される。
【００１２】
別の局面においては、本発明は、上記方法であって、アゴニストを用いた処置が、さらなるサイトカインのアゴニストを用いて処置する工程をさらに含有する方法；またはアンタゴニストを用いた処置が、さらなるサイトカインのアンタゴニストを用いて処置する工程をさらに包含する方法；および上記方法であって、さらなるサイトカインが、ＩＬ−２；ＩＬ−１５；ＩＬ−１２；ＩＬ−２３；またはＩＬ−１８である方法を提供する。
【００１３】
本発明の別の実施形態は、上記方法であって、アゴニストを用いた処置が、２つのさらなるサイトカインのアゴニストを用いて処置する工程をさらに包含する方法；またはアンタゴニストを用いた処置が、２つのさらなるサイトカインのアンタゴニストを用いて処置する工程をさらに包含する方法；および上記方法であって、２つのさらなるサイトカインが、ＩＬ−２およびＩＬ−１２；ＩＬ−２およびＩＬ−２３；ＩＬ−１５およびＩＬ−１２；ＩＬ−１５およびＩＬ−２３；またはＩＬ−１８およびＩＬ−２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１２、もしくはＩＬ−２３である方法を含む。
【００１４】
さらに別の局面においては、本発明は、上記方法で、細胞を処理するアゴニストが、３つのさらなるサイトカインのアゴニストを用いて処理される方法；または細胞を処理するアンタゴニストが、３つのさらなるサイトカインのアンタゴニストを用いて処理される方法；および上記方法で、３つのさらなるサイトカインが、ＩＬ−１８およびＩＬ−２およびＩＬ−１５；またはＩＬ−１８およびＩＬ−１２およびＩＬ−２３である方法を提供する。
【００１５】
別の実施形態において、本発明は、上記方法であって、細胞が、Ｔ細胞；またはＮＫ細胞である方法；上記方法であって、細胞は、被験体の中に位置し、そしてＩＬ−２７アゴニストまたはＩＬ−２７アンタゴニストが、被験体に対して投与される方法；および上記方法であって、被験体は、被験体中のＩＦＮγレベルを調節することにより処置し得るか、もしくは改善し得る障害または病理学的な状態を有するか、または有することが疑われる被験体である方法を提供する。
【００１６】
本発明のさらに別の局面は、上記方法であって、処置が、ＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置であり、かつ障害または状態が、ガン、新生物、または腫瘍；細胞内病原体；または炎症性状態もしくは自己免疫状態を含む方法；上記方法であって、処置が、ＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置であり、かつ細胞内病原体が、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ ｓｐ．；Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ．；Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｓｐ．；Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｓｐ．；ヘルペスウイルス；サイトメガロウイルス；またはヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）を含む方法；上記方法であって、処置が、ＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置であり、かつ炎症性状態または自己免疫状態が、慢性関節リウマチ；またはぜん息もしくはアレルギーを含む方法；および上記方法であって、処置が、ＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置であり、かつ障害または状態が、ＴＨ１状態もしくはＴＨ１障害；多発性硬化症；乾癬；クローン病；Ｉ型糖尿病または全身性エリテマトーデスを含む方法を提供する。
【００１７】
本発明はまた、被験体中のＩＦＮγの発現もしくはレベルを調節することにより、被験体の障害状態もしくは病理学的状態を処置するか、または改善する方法であって、サイトカインＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストの有効量を投与する工程を包含する方法を提供する。上記方法であって、被験体がヒト被験体；または動物被験体である方法；および上記方法で、調節が増大し、かつ処置がＩＬ−２７のアゴニストを用いる処置であるか；または調節が減少し、かつ処置がＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置である方法、およびさらに、上記方法であって、アゴニストがＩＬ−２７改変体またはＩＬ−２７誘導体であり、そしてＬ−２７改変体またはＩＬ−２７誘導体は、少なくとも１つのＩＬ−２７の生物学的特性を有する方法；および上記方法であって、ＩＬ−２７改変体またはＩＬ−２７誘導体がＩＬ−２７ハイパーカインを含む方法、および上記方法で、増大が、有効量のＩＬ−２７またはＩＬ−２７改変体もしくはＩＬ−２７誘導体の投与の非存在下における発現レベル、または生成レベルよりも約２倍、約５倍、約１０倍、約２０倍、または約５０倍を超える方法もまた、含まれる。
【００１８】
さらに、本発明は、被験体中のＩＦＮγの発現もしくはレベルを調節することにより、被験体の障害状態もしくは病理学的状態を処置するか、または改善する方法であって、サイトカインＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストの有効量を投与する工程を包含する方法であって；アゴニスト処置される被験体が、１つのさらなるサイトカインのアゴニストを用いて処置される方法；またはアンタゴニスト処置される被験体が、１つのさらなるサイトカインのアンタゴニストを用いて処置される方法をもまた、提供する。上記方法で、さらなるサイトカインが、ＩＬ−２；ＩＬ−１５；ＩＬ−１２；ＩＬ−２３；またはＩＬ−１８である方法；および上記方法で、被験体を処置するアゴニストが、２つのさらなるサイトカインのアゴニストを用いて処置されるか；または被験体を処置するアンタゴニストが、２つのさらなるサイトカインのアンタゴニストを用いて処置される方法；および上記方法で、２つのさらなるサイトカインが、ＩＬ−２およびＩＬ−１２；ＩＬ−２およびＩＬ−２３；ＩＬ−１５およびＩＬ−１２；ＩＬ−１５およびＩＬ−２３；またはＩＬ−１８およびＩＬ−２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１２、もしくはＩＬ−２３である方法もまた、提供される。
【００１９】
本発明のさらに別の実施形態は、上記方法であって、アゴニスト処理される細胞が、３つのさらなるサイトカインのアゴニストを用いて処理されるか；またはアンタゴニスト処理される細胞が、３つのさらなるサイトカインのアンタゴニストを用いて処理される方法；および上記方法であって、３つのさらなるサイトカインが、ＩＬ−１８およびＩＬ−２またはＩＬ−１５；ならびにＩＬ−１２またはＩＬ−２３である方法；および上記方法で、被験体は、被験体中のＩＦＮγレベルを調節することにより処置され得るか、もしくは改善され得る障害または状態を有するか、または有することが疑われる被験体である方法、およびさらに、上記方法であって、処置が、ＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置であり、かつ障害または状態が、ガン、新生物、または腫瘍；細胞内病原体；または炎症性状態もしくは自己免疫状態を含む方法を提供する。
【００２０】
さらに、本発明は、上記方法であって、処置が、ＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置であり、かつ細胞内病原体が、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ ｓｐ．；Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ．；Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｓｐ．；Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｓｐ．；ヘルペスウイルス；サイトメガロウイルス；またはヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）を含む方法；上記方法であって、処置が、ＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置であり、かつ炎症性状態または自己免疫状態が、慢性関節リウマチ；またはぜん息もしくはアレルギーを含む方法；および上記方法で、処置が、ＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置であり、かつ炎症性状態または自己免疫状態が、ＴＨ１状態もしくはＴＨ１障害；多発性硬化症；乾癬；クローン病；Ｉ型糖尿病または全身性エリテマトーデスを含む方法；および上記方法であって、アンタゴニストが抗体の抗原結合部位；または核酸に由来する方法を提供する。
【００２１】
本発明は、上記方法であって、２つのさらなるサイトカインが、ＩＬ−２およびＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、またはＩＬ−２３；ＩＬ−１２およびＩＬ−２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、またはＩＬ−２３；ＩＬ−１５およびＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１８、またはＩＬ−２３；ＩＬ−１８およびＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、またはＩＬ−２３；ならびにＩＬ−２３およびＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、またはＩＬ−１８である方法を提供する。上記の方法であって、３つのさらなるサイトカインが、インターロイキン２、１２、および１５；インターロイキン２、１２、および１８；インターロイキン２、１２、および２３；インターロイキン２、１５、および１８；インターロイキン２、１５、および２３；インターロイキン２、１８、および２３；インターロイキン１２、１５、および１８；インターロイキン１２、１５、および２３；インターロイキン１２、１８、およびインターロイキン２３；インターロイキン１５、１８、および２３である方法もまた、提供される。
【００２２】
（参照される実施形態の詳細な説明）
本明細書中に引用されるすべての参照は、本明細書において参照として援用され、各個々の刊行物または特許出願が特異的かつ個別に参考として援用されたことを示すのと同じ範囲まで援用される。
【００２３】
本明細書（添付の特許請求の範囲を含む）で用いられる場合、単語の単数形態（例えば、「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」）は、文脈が明らかに他のものを指示しない限り、それらの対応する複数形の参照を含む。
【００２４】
（Ｉ．定義）
ＩＬ−２７の特に有用な適用は、ＩＦＮγ産生を増強するＩＬ−２７の能力に関連する。本発明のこの局面を詳細に説明する前に、次の用語が定義される。本明細書で用いられる場合、他に指示のないかぎり、これらの用語は次の意味を有する。
【００２５】
分子が少なくとも１つの「ＩＬ−２７生物学的活性」または「ＩＬ−２７アゴニスト活性」を有するのは、その分子が、ネイティブなＩＬ−２７タンパク質に対して惹起された抗体によって認識され得る場合；またはその分子が、ネイティブなＩＬ−２７タンパク質の刺激（ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ）活性、阻害活性、または結合活性のいずれかを有する場合である。例えば、その分子は、免疫細胞がＩＦＮγを生成することを増強し得、またはその分子は、ＩＬ−２７レセプターに対して結合し得る。その分子は、好ましくは、ＷＳＸ−１／ＴＣＣＲに対して結合し、より好ましくは、ＩＦＮγ産生を増強することが可能である。
【００２６】
「投与」および「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」が、ヒト、動物（ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ）、動物（ａｎｉｍａｌ）、実験被験体、細胞、組織、器官、または生物学的流体に適用される場合、それらは、動物、ヒト、被験体、細胞、組織、器官、または生物学的流体と外因性の薬剤、治療剤、診断剤、または組成物との接触をいう。「投与」および「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」はまた、例えば、治療方法、薬物動態学的方法、診断方法、研究方法、および実験方法を言及し得る。細胞の処理（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）は、細胞に対する試薬の接触、および流動体（この流動体は、細胞と接触している）への試薬の接触を包含する。細胞の処理は、試薬が、ヒトまたは動物における生物学的流動体と接触するが、その試薬は、その細胞と接触することが証明されていないという状況を含む。処理は、投与された試薬または細胞が、代謝、分解により、または貯蔵の状態により改変される状況をさらに包含する。
【００２７】
細胞により「増強された」ＩＦＮγ産生は、その細胞により生成されるＩＦＮγのレベルが増大することをいう。ＩＦＮγのレベルは、当該分野で確立されたいずれの方法（例えば、ＥＬＩＳＡまたは細胞増殖アッセイ）によっても決定され得る。５倍まで増強されたＩＦＮγ産生は、新規のものであって、ＩＦＮγの増大したレベルがもとのＩＦＮγレベルの５倍であることを意味する。同様に、１０倍まで増強されたＩＦＮγ産生は、ＩＦＮγの増大したレベルがもとのＩＦＮγレベルの１０倍であることを意味する。以下同様である。
【００２８】
ＩＬ−２７のポリペプチドおよび核酸の保存的に改変された改変体、誘導体、およびムテインを使用する方法が、提供される。「保存的に改変された改変体」は、アミノ酸配列および核酸配列の両方に適用される。特定の核酸に関して、保存的に改変された改変体は、同一または本質的に同一なアミノ酸配列をコードする核酸であるか、核酸はアミノ酸配列をコードしない場合、本質的に同一な核酸配列をいう。遺伝暗号の縮重のために、機能的に同一な核酸の多くは、任意の所定のタンパク質をコードし得る。
【００２９】
アミノ酸配列に関して、当業者は、核酸、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質配列に対する個々の置換であって、保存された１つのアミノ酸についてのコード配列において、１つのアミノ酸またはアミノ酸の低いパーセンテージが置換されたものは、「保存的に改変された改変体」であることを認識している。機能的に類似するアミノ酸が提供される保存的な置換の表は、当該分野で周知である。保存的な置換の１つの例は、次の群の１つのアミノ酸における同じ群の別のアミノ酸への交換である（米国特許第５，７６７，０６３号（Ｌｅｅらにより公表）；ＫｙｔｅおよびＤｏｏｌｉｔｔｌｅ（１９８２）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５７：１０５−１３２）。
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｃｙｓ、またはＭｅｔ；
（２）中性疎水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖の配位に影響する残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香性：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ；
（７）小アミノ酸：Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ
「有効量」は、意図された目的を達成するために十分な治療剤の量である。例えば、ＩＦＮγ産生を増強する方法のための組成物の有効量は、組成物が存在しないときの生成物のレベルと比較して、増大したＩＦＮγ産生をもたらすために十分な組成物の量である。障害、疾患、および医学的状態を処置するか、または改善するための有効量は、障害、疾患、および医学的状態の症候の減少、または完全な除去をもたらすために十分な量である。所定の治療剤の有効量は、因子（例えば、薬剤の性質、投与の経路、治療剤を受ける動物のサイズおよび種、および投与の目的）により異なる。各個々の場合において有効量は、当該分野で確立された方法に従って、当業者によって実験的に決定され得る。
【００３０】
細胞を物質に「曝露する」とは、その物質を細胞に対して直接的または間接的に提供することをいう。その物質は間接的に提供され得、例えば、その物質に変換されることが公知である、その物質の前駆体を提供することが挙げられる。例えば、標的細胞をＩＬ−２７に曝露することは、ＩＬ−２７タンパク質を含む組成物を、標的細胞に提供することによって、またはＩＬ−２７をコードする遺伝子（単数または複数）を標的細胞に導入することによって達成され得る。あるいは、標的細胞をＩＬ−２７に曝露することは、ＩＬ−２７をコードする遺伝子（単数または複数）を第二の細胞に導入し、標的細胞を第二の細胞と混合することによってもまた、達成され得る。
【００３１】
「発現」は、核酸（例えば、ｍＲＮＡ）の生合成、またはポリペプチドの生合成、および高分子の区分化における変化（例えば、核から細胞質への横断（ｔｒａｖｅｒｓａｌ）、形質膜への挿入、脱顆粒、または分泌）を包含する。細胞による高分子の発現または生成は、細胞において見出される量のみ（例えば、所定の時間ポイントにおける細胞ホモジネート）を含み得る。概して、この定義は、非分泌分子の発現に適用される。あるいは、細胞による高分子の発現または生成は、細胞において見出される量に加えて、例えば、細胞培地、または生物学的区分において分泌された量および蓄積された量を含む。概して、この定義は、分泌タンパク質または脱顆粒タンパク質（例えば、サイトカイン）に適用される。「レベル」は、生物学的区分を含む区分における濃度、例えば、所定の容量の例えば、血漿、血清、血液、間質液、脳脊髄液、または尿における濃度、器官全体または器官のフラグメントにおける濃度、器官の中の画分（例えば、赤脾臓、白脾臓、またはランゲルハンス島）における濃度、または特異的な細胞もしくは細胞群（例えば、マクロファージ）における濃度をいう。
【００３２】
「ハイパーカイン」は、操作されたヘテロ二量体サイトカイン、ホモ二量体サイトカイン、または多量体サイトカインであって、サイトカインの少なくとも２つのサイトカインポリペプチドサブユニットが共有結合で１つに結合している（Ｐｆｌａｎｚら（２００２）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １６：７７９−７９０）。
【００３３】
「免疫細胞」は、免疫系の細胞（例えば、Ｂ細胞、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、単球、マクロファージ、肥満細胞、好酸球、もしくは抗原提示細胞（ＡＰＣ）、または樹状細胞）である。文脈に依存して、免疫細胞は、免疫の媒介物を発現する任意の細胞でもあり得、文脈に依存して、サイトカインを発現する上皮細胞でもあり得る。
【００３４】
「細胞内微小器官」は、生細胞を占める単細胞器官または多細胞器官（例えば、ライフサイクルの一部または全体の間の宿主の生細胞）を含む。
【００３５】
「自己免疫」の障害、医学的状態、または疾患は、ヒトまたは動物の自身の免疫系による自己抗原の認識により特徴付けられる。自己免疫疾患としては、多発性硬化症、乾癬、グレーヴズ病、インスリン依存性Ｉ型糖尿病、悪性貧血、慢性関節リウマチ、甲状腺炎、糸状体腎炎、エリテマトーデス、シェーグレン症候群、アディソン病、慢性活動性肝炎、重症筋無力症、多発性筋炎／皮膚真菌症、原発性胆汁性肝硬変、強皮症、ブドウ膜炎および白斑が挙げられるが、これに限定されない。
【００３６】
障害、疾患、もしくは医学的状態を「有することが疑われる」ヒト被験体または動物被験体は、障害、疾患、または医学的状態を有するとまだ診断されていないが、１つ以上の障害の症候を示し、その障害についての遺伝的性質を有するか、またはその障害が再発しやすい場合、以前に障害について処置された被験体である。
【００３７】
「新生物」または「腫瘍」は、概して、顕著な質量を形成する異常な組織増殖であり、細胞増殖によって、正常の細胞増殖よりも早く増殖する。新生物は、正常組織との構造的組織化および機能的協調の部分的または全体的な欠如を示し得る。本明細書で用いられるとき、新生物は、造血性新生物および固形新生物を包含することが意図される。新生物は、良性（良性腫瘍）または悪性（悪性腫瘍またはガン）であり得る。悪性腫瘍は、大まかに、３つの主要な型に分類され得る。上皮組織から生じる悪性新生物は、癌腫と呼ばれ、結合組織（例えば、筋肉、軟骨、脂肪、または骨）が起源である悪性新生物は、肉腫と呼ばれ、そして免疫系の構成要素を含む造血組織（血球の形成に関する組織）に影響する悪性腫瘍は、白血病およびリンパ種と呼ばれる。他の新生物としては、神経線維腫症が挙げられるが、これに限定されない。
【００３８】
「核酸」は、一本鎖核酸ならびに一本鎖核酸およびその相補鎖の複合体からなる二本鎖核酸を包含する。本発明は、核酸を用いる方法を包含する（例えば、ＩＬ−２７のみ；ＩＬ−２のみ；ＩＬ−１２のみ；ＩＬ−１５のみ；ＩＬ−１８のみ；ＩＬ−２３のみ；ＩＬ−２７およびＩＬ−２；ＩＬ−２７およびＩＬ−１５；ＩＬ−２７およびＩＬ−１２；ＩＬ−２７およびＩＬ−２３；ＩＬ−２７およびＩＬ−１８；ＩＬ−２７、ＩＬ−２およびＩＬ−１８；ＩＬ−２７、ＩＬ−１５およびＩＬ−１８；ＩＬ−２７、ＩＬ−１２およびＩＬ−１８；ならびにＩＬ−２７、ＩＬ−２３、およびＩＬ−１８をコードする核酸を含有する発現ベクターに存在する）。本発明は、上の核酸で、ＩＬ−１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、またはＩＬ−２３の１つ以上もまたコードする核酸を用いる方法も、また提供する。上のサイトカインのすべてをコードする核酸を用いる方法もまた、含まれる。
【００３９】
本発明は、例えば、上の核酸のすべてが１つのベクターによってコードされる場合；１つの核酸が第一のベクターによってコードされる場合およびその残りの核酸が第二のベクターによってコードされる場合；ならびに、各核酸が分離したそれぞれのベクターおよび種々のそれらの組み合わせによってコードされる場合の問題を企図する。上のサイトカインを提供する方法であって、１つ以上のサイトカインがベクターによって提供される場合、および１つ以上のサイトカインがサイトカインポリペプチドによって直接的に提供される場合（例えば、ベクターおよびポリペプチドを含む組成物での処置）の方法もまた、企図される。企図された方法のベクターは、例えば、第一の核酸と作動可能に連結している第一のプロモーター；第二の核酸と作動可能に連結している第二のプロモーター；第三の核酸と作動可能に連結している第三のプロモーターなど、ならびに、第一および第二の核酸と作動可能に連結している第一のプロモーター、第一、第二、および第三の核酸と作動可能に連結している第一のプロモーターなどが挙げられる。
【００４０】
「処置または改善（ａｍｅｌｉｏｒａｔｉｎｇ）」は、障害、疾患、もしくは医学的状態の症状の減少または完全な除去を意味する。
【００４１】
（ＩＩ．概要）
本発明は、ＩＬ−２７を用いることによる免疫細胞由来のＩＦＮγ産生の増強の方法を提供する。従って、下に記載の通り、Ｔ細胞およびＮＫ細胞は、サイトカインによるＩＦＮγ産出のために刺激され得る。ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８およびＩＬ−２３は、単独または組み合わせで、ＩＦＮγ産生の刺激において最も効果的であることが、以前に示されている。細胞がＩＬ−２７に曝露される場合もまた、ＩＦＮγの産生は、相乗的に増強され、ＩＬ−２７が存在しない産生レベルと比較して１００倍に達する。従って、本発明は、効果的なＩＦＮγ産生の方法を提供する。
【００４２】
本方法は、インビトロまたはインビボで適用され得る。インビボでのＩＦＮγの産生を促進するために、ＩＬ−２７は、免疫細胞培養物に対して加えられ得、ＩＦＮγの収量を増加させる。好ましくは、少なくとも１つのさらなるサイトカイン（詳細には、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８および／またはＩＬ−２３）もまた、培養物に加えられる。このサイトカインは、好ましくはＩＬ−２７に加えて、ＩＬ−２（またはＩＬ−１５）のＩＬ−１２（またはＩＬ−２３またはＩＬ−１８）との組み合わせである。ＩＬ−２７は、ＩＬ−２（またはＩＬ−１５）、ＩＬ−１２（またはＩＬ−２３）およびＩＬ−１８の組み合わせに対して加えられ得る。ＩＬ−２７への応答において、ＩＦＮγ産生は、ＩＬ−２７なしのＩＦＮγのレベルを何倍も超えるまで増加することが予想され、好ましくは、少なくとも約５倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、７５倍、１００倍、２００倍、５００倍、７５０倍または１０００倍まで増加する。
【００４３】
本発明は、エキソビボにおいてＩＬ−２７を用いて細胞を処理する方法、またはＩＬ−２７および１種、２種、３種以上のサイトカインを用いて細胞を処理し、その後に被験体への処理細胞の導入が続く方法を提供する。例えば、細胞は、エキソビボにおいてＩＬ−２７、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、およびＩＬ−１８を用いて処理され得、その後にヒト被験体または動物被験体への細胞の導入が続く。
【００４４】
本発明はまた、細胞が、エキソビボにおいて、１種、２種、３種以上のサイトカインを用いて処理される方法、および被験体が、同じまたは異なった１種、２種、３種以上のサイトカインを用いて処置される方法もまた、提供する。例えば、本発明は、細胞が、エキソビボにおいてＩＬ−２７およびＩＬ−２を用いて処理され、そして被験体が、ＩＬ−１８を用いて処置される方法を提供する。あるいは、例えば、細胞が、エキソビボにおいてＩＬ−１８を用いて処理され、そして被験体がＩＬ−２７およびＩＬ−２を用いて処置される。
【００４５】
本方法は、動物（特に哺乳動物（例えば、ヒト、サル、類人猿、げっ歯動物、または農業用哺乳動物、または獣医学の被験体））においてＩＦＮγ産生を増強するために用いられ得る。従って、ＩＬ−２７は、当業者に公知の任意の方法（例えば、静脈内方法、皮下方法、筋肉方法、大脳方法、皮膚方法、眼方法、直腸方法、またはウイルスベクター方法）によって、動物に対して投与され得る。好ましくは、ＩＬ−２７は、少なくとも１つのさらなるサイトカイン、および薬学的に受容可能な賦形剤／キャリアもまた含有する薬学的組成物において投与される。このさらなるサイトカインは、好ましくは、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８および／またはＩＬ−２３、より好ましくは、ＩＬ−２（またはＩＬ−１５）のＩＬ−１２（またはＩＬ−２３またはＩＬ−１８）との組み合わせ、そして最も好ましくは、ＩＬ−２（またはＩＬ−１５）、ＩＬ−１２（またはＩＬ−２３）およびＩＬ−１８の組み合わせである。この組成物は、好ましくは、動物の血液ＩＦＮγレベルを少なくとも約５倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、７５倍、１００倍、２００倍、５００倍、７５０倍または１０００倍まで増強する。
【００４６】
ＩＦＮγは、主要なマクロファージ活性化サイトカインであり、先天免疫および特異的な細胞媒介性免疫において重要な機能を果たす。ＩＦＮγの放出によって、Ｔ細胞およびＮＫ細胞は、マクロファージを活性化し、食菌された微生物を殺傷する。従って、ＩＦＮγは、細菌感染（特に、細胞内微生物による感染）に対する防御において重要な役割を果たす。ＩＦＮγはまた、新生物細胞のＩ型ＭＨＣ発現を増加させ、それにより、新生物細胞の細胞傷害性Ｔ細胞による溶解に対する感受性を増加させる。さらに、ＩＦＮγは、ヘルパーＴ細胞のＴｈ１サブセットのサイン（ｓｉｇｎａｔｕｒｅ）サイトカインであり、Ｔｈ２応答よりむしろＴｈ１応答をもたらし、それによってＩｇＥ依存性アレルギー反応を阻害する。
【００４７】
本発明の研究は、ＩＬ−２７がＩＦＮγ産生を増強することを示し、ＩＬ−２７のためのレセプターであるＷＳＸ−１／ＴＣＣＲの破壊が、ＩＦＮγのより低い発現をもたらすことは公知である。従って、ＩＬ−２７のアンタゴニストは、インビボまたはインビトロにおいてＩＦＮγ産生を減少させるために用いられ得る。このアンタゴニストは、ＩＬ−２７、ｐ２８、またはＥＢＩ３に対する抗体またはそれらのフラグメントであり得る。さらに、アンタゴニストは、ＩＬ−２７の構造改変体もしくはムテイン、またはＩＬ−２７レセプターの改変体もしくはムテイン（例えば、可溶レセプター）を含み得、ＩＦＮγ発現を減少させ得る。
【００４８】
このアンタゴニストはまた、ＩＬ−２７ ｍＲＮＡに対して相補的なアンチセンス核酸（すなわち、ｐ２８またはＥＢＩ３に対するｍＲＮＡ）、またはＩＬ−２７Ｒ ｍＲＮＡに対して相補的なアンチセンス核酸、またはＲＮＡ核酸の干渉でもあり得る。
【００４９】
本発明はさらに、ＩＬ−２７アゴニストまたはＩＬ−２７アンタゴニストのためのスクリーニングの方法を提供する。アンタゴニストは、ＩＬ−２７のＩＦＮγ産生を増強する活性を阻害する能力に基づいて、スクリーニングされ得る。例えば、アッセイ系は、ＮＫ細胞がＩＬ−２７と接触し、ＩＦＮγ産生レベルを増加させる場合に確立され得る。次いで、試験化合物は、アッセイおよび測定されたＩＦＮγレベルに対して加えられる。ＩＦＮγ産生におけるＩＬ−２７の効果を、ＩＬ−２７の非存在下における基線ＩＦＮγ産生に影響することなく無効にする試験化合物は、おそらく特異的なＩＬ−２７アンタゴニストである。同様に、ＩＬ−２７のＩＦＮγ産生を増強する能力は、ＩＬ−２７アゴニストのためのアッセイ系において用いられ得る。
【００５０】
（ＩＩＩ．アンタゴニストおよびアゴニスト）
ＩＬ−２７の活性の遮断は、ＩＬ−２７アンタゴニスト（例えば、リガンドＩＬ−２７に対する抗体）、リガンドのサブユニットに対する抗体（例えば、抗ｐ２８抗体または抗ＥＢＩ３抗体）、ｐ２８およびＥＢＩ３の両方に対して結合する抗体、レセプターに対する抗体（例えば、ＷＳＸ−１、または可溶ＷＳＸ−１レセプタータンパク質）によって達成され得る。リガンド―レセプター相互作用を用いた干渉は、アンタゴニストの開発のための効果的な戦略であることを証明した。
【００５１】
リガンドによって媒介される活性をアンタゴナイズするための種々の方法（例えば、抗体を用いてリガンドを遮断すること、または抗体を用いてレセプターを遮断すること）が存在する。種々のエピトープが、各表面に存在し、それらの相互作用を遮断する（例えば、相互作用を遮断する立体障害を引き起こす）。抗体のリガンドに対して結合する能力、または抗体のレセプターに対して結合する能力は、必ずしも抗体がシグナル伝達をもまた遮断することを意味しない。すなわち、抗体は、シグナル伝達に関して検出可能な効果を有さなくてもよいか、または抗体は、アゴニストの抗体であり得る。別の方法は、リガンドムテインまたはレセプター結合活性を保持した改変体を用いることであるが、レセプターシグナル伝達を誘導しない。このムテインは、シグナル伝達リガンドの競合的インヒビターであり得る。
【００５２】
あるいは、低分子ライブラリーは、同定されたリガンド―レセプター対によって媒介される相互作用またはシグナル伝達を遮断し得る化合物について、スクリーニングされ得る。
【００５３】
本発明は、抗体または特定化されたサイトカインリガンド（好ましくは、哺乳動物（例えば、霊長類、ヒト、ネコ、イヌ、ラット、またはマウス））に対して特異的に結合する結合組成物の使用を提供する。抗体は、種々のサイトカインタンパク質に対して惹起され得、これらのサイトカインタンパク質としては、それらの天然に存在する（全長）形態またはそれらの組み換え形態の両方の形態の、個体改変体、多型改変体、対立遺伝子改変体、株改変体、または種改変体、およびそれらのフラグメントを含む。さらに、抗体は、それらの天然の（もしくは活性の）形態またはそれらの不活性の（例えば、変性した）形態の両方のレセプタータンパク質に対して惹起され得る。抗イディオタイプ抗体もまた、用いられ得る。
【００５４】
多くの免疫原は、リガンドまたはレセプタータンパク質と特異的に反応性である抗体を産生するために、選択され得る。組み換えタンパク質は、モノクローナルまたはポリクローナル抗体の産生についての好ましい免疫原である。適切な源（例えば、霊長類、げっ歯動物など）に由来する天然に存在するタンパク質はまた、純粋形態または不純形態のどちらかで用いられ得る。適切なタンパク質配列を用いて作製される合成ペプチドはまた、抗体の産生のための免疫原としても用いられ得る。組み換えタンパク質は、例えば、Ｃｏｌｉｇａｎら（編）（１９９５および定期的な補遺）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ；ならびにＡｕｓｕｂｅｌら（編）（１９８７および定期的な補遺）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｇｒｅｅｎｅ／Ｗｉｌｅｙ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹに記載されるように、真核細胞または原核細胞において発現され得、精製され得る。天然に折りたたまれた材料または変性した材料は、同様に抗体を産生するために用いられ得る。モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体のどちらかは、例えば、タンパク質を測定するためのイムノアッセイにおける後の使用のため、または免疫精製（ｉｍｍｕｎｏｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ）方法のために作成され得る。
【００５５】
ポリクローナル抗体を産生する方法は、当業者に周知である。代表的には、免疫原（好ましくは、精製タンパク質）は、アジュバントと混合され、動物はその混合物で免疫される。免疫原調製に対する動物の免疫応答は、試験出血を採取し、目的タンパク質に対する反応性の力価を決定することによりモニタリングされる。例えば、その免疫原に対して適切に高い力価の抗体が得られる場合、通常は繰り返し免疫の後に、動物から血液が収集され、抗血清が調製される。所望の場合、そのタンパク質に反応性の抗体を濃縮するために、さらなる抗血清の分画が、行われ得る。例えば、ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ；またはＣｏｌｉｇａｎを参照のこと。免疫はまた、他の方法（例えば、ＤＮＡベクター免疫）を介しても行われ得る。例えば、Ｗａｎｇら（１９９７）Ｖｉｒｏｌｏｇｙ ２２８：２７８−２８４を参照のこと。
【００５６】
モノクローナル抗体は、当業者によく知られた種々の手法により得られ得る。代表的には、所望される抗原で免疫された動物由来の脾臓細胞が、一般的にはミエローマ細胞を用いた融合により不死化される。ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ（１９７６）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６：５１１−５１９を参照のこと。不死化の代替方法としては、エプスタインバーウイルスを用いた形質転換、ガン遺伝子、もしくはレトロウイルス、または当該分野で公知の他の方法が挙げられる。例えば、Ｄｏｙｌｅら（編）（１９９４および定期的な補遺）Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ：Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹを参照のこと。単一の不死化細胞から生じたコロニーは、抗原に対する所望される特異性および親和性の抗体の産生についてスクリーニングされる。そのような細胞によって産生されるモノクローナル抗体の収量は、種々の手法により増強され得、その手法は、脊椎動物宿主の腹膜腔への注射を含む。あるいは、モノクローナル抗体またはそれらの結合フラグメントをコードするＤＮＡ配列を、例えば、Ｈｕｓｅら、（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４６：１２７５−１２８１によって概説された一般的プロトコルに従って、ヒトＢ細胞由来のＤＮＡライブラリーをスクリーニングすることにより単離し得る。
【００５７】
抗体または結合組成物は、リガンドまたはレセプタータンパク質の所定のフラグメントに対する結合フラグメントおよび単鎖版を含み、これらは、キャリアタンパク質を含むフラグメントの接合体を用いた動物の免疫によって惹起され得る。モノクローナル抗体は、所望の抗体を分泌する細胞から調製される。これらの抗体は、正常タンパク質または欠損タンパク質に対する結合についてスクリーニングされ得る。抗体または結合組成物は、通常は、少なくとも約１０−３ＭのＫＤで結合し、より通常には少なくとも１０−６Ｍ、代表的には少なくとも１０−７Ｍ、より代表的には少なくとも１０−８Ｍ、好ましくは少なくとも１０−９Ｍ、およびより好ましくは少なくとも１０−１０Ｍ、および最も好ましくは少なくとも１０−１１Ｍである（例えば、Ｐｒｅｓｔａら，（２００１）Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔ．８５：３７９−３８９；Ｙａｎｇら，（２００１）Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｏｎｃｏｌ．Ｈｅｍａｔｏｌ．３８：１７−２３；Ｃａｒｎａｈａｎら，（２００３）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．（補遺）９：３９８２ｓ−３９９０ｓを参照のこと）。
【００５８】
いくつかの例において、種々の哺乳動物宿主（例えば、マウス、げっ歯動物、霊長類、ヒトなど）からモノクローナル抗体（ｍＡｂ）を調製することが望ましい。このようなモノクローナル抗体を調製するための技術の説明は、例えば、Ｓｔｉｔｅｓら（編）Ｂａｓｉｃ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（第４版）Ｌａｎｇｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｌｏｓ Ａｌｔｏｓ、ＣＡ、およびそこに引用される参照；ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，ＣＳＨ Ｐｒｅｓｓ；Ｇｏｄｉｎｇ（１９８６）Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ（第２版）Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ；ならびに特に、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ（１９７５）Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５−４９７（これは、モノクローナル抗体を作成する１つの方法を考察する）において見出され得る。手短に要約すると、この方法は、免疫原を動物に注射することに関与する。次いで、その動物は屠殺され、その動物の脾臓から細胞が採取される。次いで、それらの細胞は、ミエローマと融合される。この結果は、インビトロでの再生が可能なハイブリッド細胞または「ハイブリドーマ」である。次いで、ハイブリドーマの集団はスクリーニングされ、各々が免疫原に対する単一の抗体種を分泌する別個のクローンを単離する。このように、得られた別個の抗体種は、不死化してクローニングされた単一のＢ細胞の生成物であり、それは、免疫原物質上で認識される特異的部位に対する反応において作成された免疫動物に由来する。
【００５９】
本発明のポリペプチドおよび抗体は、改変と共にか、または改変なしに用いられ得、キメラ抗体またはヒト化抗体を含む。多くの場合、そのポリペプチドおよび抗体は、検出可能なシグナルを提供する物質を、共有結合または非共有結合のどちらかで連結することによって標識される。多種多様のラベルおよび接合技術は、公知であり、科学文献および特許文献の両方において広く報告されている。適切なラベルとしては、放射性核種、酵素、基質、補因子、インヒビター、蛍光成分、化学発光成分、磁気粒子などが挙げられる。このような標識の使用を教示する特許としては、米国特許第３，８１７，８３７号；同第３，８５０，７５２号；同第３，９３９，３５０号；同第３，９９６，３４５号；同第４，２７７，４３７号；同第４，２７５，１４９号；および同第４，３６６，２４１号が挙げられる。組み換え免疫グロブリンもまた、生成され得る（Ｃａｂｉｌｌｙ，米国特許第４，８１６，５６７号；およびＱｕｅｅｎら，（１９８９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：１００２９−１００３３を参照のこと）；また、トランスジェニックマウスにおいても作製され得る（Ｍｅｎｄｅｚら，（１９９７）Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ １５：１４６−１５６を参照のこと）；Ａｂｇｅｎｉｘ ａｎｄ Ｍｅｄａｒｅｘ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓもまた、参照のこと。
【００６０】
概して、モノクローナル抗体は、ヒト供給源ではなくて非ヒト供給源に由来する（ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ，ｐｐ．１３９−２４３）。非ヒト供給源の使用は、モノクローナル抗体の治療有効性を制限し得る。マウスまたは他の非ヒト供給源に由来する抗体は、免疫応答、エフェクター機能の弱い漸増、および血流からの迅速なクリアランスを誘発する所望されない性質を有し得る（Ｂａｃａら，（１９９７）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８−１０６８４）。これらの理由のために、ヒト化により治療抗体を調製することが所望され得る。
【００６１】
「ヒト化抗体」とは、非ヒト起源（例えば、げっ歯動物）の抗原結合領域、およびヒト起源の免疫グロブリンの少なくとも一部（例えば、ヒトフレームワーク領域、ヒト定常領域、またはそれらの一部分）を含む抗体を意味する（例えば、米国特許第６，３５２，８３２号を参照のこと）。
【００６２】
ヒト化抗体は、親のマウス抗体の６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）由来のアミノ酸配列を含み、それはヒト抗体フレームワークに融合されている。ヒト化抗体における非ヒト配列の含有量は、好ましくは低く、すなわち約５％である（Ｂａｃａら，（１９９７）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８−１０６８４）。最適な結合を達成するために、ヒト化抗体は、繊細な調節を必要とし得、それは、通常はＣＤＲの立体構造の支持に関連する特定のフレームワークアミノ酸を、親のマウス抗体において見出されるもとの対応するアミノ酸に変更することによる。概してもとの親のアミノ酸に変更されるフレームワークアミノ酸は、ＣＤＲループの立体構造の支持に関連するアミノ酸である（Ｃｈｏｔｈｉａら，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３４２：８７７−８８３；ＦｏｏｔｅおよびＷｉｎｔｅｒ（１９９２）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２４：４８７−４９９）。抗原結合に最も多くの場合影響するフレームワーク残基は、比較的に小さく、１１残基と同じくらい小さくあり得る（Ｂａｃａら，（１９９７）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８−１０６８４）。
【００６３】
ヒト化抗体は、すべての型の定常領域を有する抗体を含み、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＡおよびＩｇＥ、ならびに任意のアイソタイプが挙げられ、それとしては、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４が挙げられる。ヒト化抗体が細胞障害活性を示すことが所望される場合、その定常ドメインは、通常は補体固定定常ドメインであり、そのクラスは、代表的にはＩｇＧ１である。そのような細胞障害活性が所望されない場合、定常ドメインはＩｇＧ２クラスの定常ドメインであり得る。そのヒト化抗体は、１つのクラスまたはアイソタイプより多くからの配列を含み得る（Ｖａｓｑｕｅｚらに発行された、米国特許第６，３２９，５１１号）。ファージディスプレー技術は、高い結合親和性を有する抗体をスクリーニングし、選択するために用いられ得る（ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＣｈａｍｅｓ（２０００）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ ２１：３７１−３７７；Ｂａｒｂａｓら，（２００１）Ｐｈａｇｅ Ｄｉｓｐｌａｙ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ；Ｋａｙら，（１９９６）Ｐｈａｇｅ Ｄｉｓｐｌａｙ ｏｆ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）。
【００６４】
抗体はまた、ファージディスプレー方法またはトランスジェニックマウス中に含まれるヒト抗体ライブラリーを用いて、調製され得るか、または設計され得る（例えば、ｄｅ Ｂｒｕｉｎら，（１９９９）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １７：３９７−３９９；Ｖａｕｇｈａｎら，（１９９６）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １４：３０９−３１４；Ｂａｒｂａｓ（１９９５）Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １：８３７−８３９；Ｍｅｎｄｅｚら，（１９９７）Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ １５：１４６−１５６；Ｈｕｓｅら，（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４６：１２７５−１２８１；Ｗａｒｄら，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４−５４６を参照のこと）。
【００６５】
抗体は、単なる特異的結合組成物の一形態に過ぎない。他の結合組成物は、多くの場合類似の用途を有し、リガンドまたはレセプターに対して特異的に結合する分子を含む（例えば、結合パートナー−結合パートナー様式、抗体−抗原相互作用において、または共有結合か非共有結合のどちらかでの天然の生理学的関連のタンパク質−タンパク質相互作用（例えば、所望のタンパク質と特異的に関係するタンパク質）において）。この分子は、ポリマーであり得るか、または化学試薬であり得る。機能的アナログは、構造改変を有するタンパク質であり得るか、または構造的に無関係の分子（例えば、適切な結合決定基と相互作用する分子形状を有する分子）であり得る。本発明の抗体結合化合物は、結合フラグメントを含み、重要な診断価値または治療価値を有し得る。それらは、非中和結合化合物として有用であり得、毒素または放射性核種に対して結合し得、従って、結合化合物が抗原に対して結合する場合、例えば、細胞の表面で抗原を発現する細胞を殺傷する。さらに、これらの結合化合物は、直接的にか、もしくはリンカーによって間接的に、薬物または他の治療剤と接合し得、そして薬物の標的化に影響し得る。
【００６６】
アゴニストとしては、ＩＬ−２７、保存的に改変された改変体またはそれらのムテイン、それらのフラグメント、およびキメラアナログが挙げられる。これらのポリペプチドは、レセプターシグナル伝達を誘導するために用いられ得る。
【００６７】
（ＩＶ．治療組成物；診断組成物；方法）
本発明は、ＩＬ−２７ならびにＩＬ−１２、ＩＬ−２、ＩＬ−２３、ＩＬ−１５、およびＩＬ−１８から選択される少なくとも１つの他のサイトカインのアゴニストを用いて、例えば、感染（細胞内病原体を含む）、ガンおよび腫瘍、細胞増殖、ウイルス感染、炎症障害、または自己免疫障害を処置するための方法を提供する。
【００６８】
ＩＬ−２７ならびにＩＬ−１２、ＩＬ−２、ＩＬ−２３、ＩＬ−１５、およびＩＬ−１８から選択される少なくとも１つのサイトカインのアゴニストのアンタゴニストを用いて、例えば、感染（細胞内病原体を含む）、ガンおよび腫瘍、細胞増殖、ウイルス感染、炎症障害、または自己免疫障害を処置するための方法もまた、提供される。
【００６９】
アゴニストを用いる上の方法は、ＩＦＮγ発現の刺激または増強について（例えば、腫瘍のような、ＩＦＮγによって処置可能な障害について）企図される。
【００７０】
アンタゴニストを用いる上の方法は、ＩＦＮγ発現または濃度の阻害または減少について企図される。それは、例えば、ＴＨ１型障害または増大するＩＦＮγ産生と関連する障害（例えば、乾癬、ブドウ膜網膜炎、多発性硬化症、クローン病、全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、橋本甲状腺炎、およびグレーヴス病）を処置するためである（例えば、Ｓｔｅｉｎｍａｎ（２００１）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：５９７−６００；Ｍｉｚｕｇｕｃｈｉら，（２００２）Ａｒｃｈ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｈｅｒ．Ｅｘｐ．（Ｗａｒｓｚ）５０：２４３−２５４；Ｒｏｔｏｎｄｉら，（２００３）Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｉｎｖｅｓｔ．２６：１７７−１８０；Ａｓａｄｕｌｌａｈら，（１９９９）Ｄｒｕｇｓ Ｔｏｄａｙ （Ｂａｒｃ）３５：９１３−９２４；Ｇｈｏｒｅｓｃｈｉら，（２００３）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．８１：４７１−４８０；ＢｏｕｍａおよびＳｔｒｏｂｅｒ（２００３）Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｓ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３：５２１−５３３；Ｔｏｍｉｔａら，（２００１）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｒｅｓ．６４：２６−３３；Ｒｉｃｈａｒｄｓら，（２００１）Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ．６０：２１７３−２１８０を参照のこと）。
【００７１】
上のアゴニストまたはアンタゴニストを用いて、自己免疫障害および炎症障害（例えば、多発性硬化症、繊維症、慢性関節リウマチ、甲状腺炎、狼瘡、乾癬、糖尿病、および炎症性腸疾患（ＩＢＤ）（クローン病、潰瘍性大腸炎およびスプルーを含む））を処置するための方法もまた、提供される。
【００７２】
ここで留意すべきは、増大したレベルのＩＦＮγは、コラーゲン誘導関節炎（ＣＩＡ）および実験的自己免疫脳炎（ＥＡＥ）において、保護または改善と関連する一方、減少したレベルは、実験的狼瘡および実験的糖尿病において、保護または改善と関連するということ、ならびにクローン病は、ＴＨ１型疾患であり、増大したＩＦＮγと関連する一方、潰瘍性大腸炎は、ＴＨ２型疾患であるということである。
【００７３】
上のアゴニストまたはアンタゴニストを用いて、肺の炎症または免疫障害（例えば、ぜん息、アレルギー、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）および特発性肺線維症）を処置するための方法が、提供される（例えば、Ｉｋｅｄａら，（２００２）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ａｎｄ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｖｓ．１３：９５−１０９；Ｍａｔｔｈｙｓら，（２０００）Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ Ｂｉｏｌ．６８：４４７−４５４；ＹｏｕｎｅｓおよびＡｍｓｄｅｎ（２００２）Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉ．９１：２−１７；Ｆｒｕｃｈｔら，（２００１）ＴＲＥＮＤＳ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２：５５６−５６０；Ｂｏｕｍａ，（前出）；Ｋｌｉｍｐら，（２００２）Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｏｎｃｏｌ．Ｈｅｍａｔｏｌ．４４：１４３−１６１；ＡｇｇａｒｗａｌおよびＢｅｈｅｒａ（２０００）Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．１：１４２３−１４２７；ＤｏｒｍａｎおよびＨｏｌｌａｎｄ（２０００）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｖｓ．１１：３２１−３３３；ＢｕｓｓｅおよびＲｏｓｅｎｗａｓｓｅｒ（２００３）Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１１：Ｓ７９９−Ｓ８０４；ＳｋｕｒｋｏｖｉｃｈおよびＳｋｕｒｋｏｖｉｃｈ（２００３）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．５：５２−５７を参照のこと）。
【００７４】
本発明は、例えば、Ｔ細胞、単球／マクロファージ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞、抗原提示細胞（ＡＰＣ）（樹状細胞、Ｂ細胞、好中球、および血管内皮細胞を含む内皮細胞を含む）の活性化、発生、または増殖を調節するための方法を提供する。ＭＨＣクラスＩおよびＭＨＣクラスＩＩの発現を調節する方法、ＴＨ１反応、ＴＨ２反応を調製する方法、ならびにＩｇＥ発現を調節する方法もまた、提供される。
【００７５】
本発明のアンタゴニストおよび／もしくはアゴニストは、単独、または別のこれらもしくは付随的な経路のインヒビターもしくはアゴニスト；または症候の処置のために用いられる他の化合物（例えば、アンタゴニスト、もしくは糖質コルチコイドのようなステロイド）と組み合わせて投与され得る。診断方法としては、予後の予測；特定の治療経過に対して反応するか、または反応しない患者の部分集合の定義付け；障害またはこれらの障害のサブタイプと関連する免疫もしくはガンの診断；または治療に対する評価反応のような局面が挙げられる。
【００７６】
処置、治療、または診断は、アゴニストもしくはアンタゴニストの直接投与によって、またはアゴニストもしくはアンタゴニストをコードする核酸の投与によって達成され得る。このアゴニストまたはアンタゴニストは、抗体から生じた結合組成物、抗体、またはＩＬ−２７もしくはＩＬ−２７Ｒを特異的に結合する抗体フラグメント、ＩＬ−２７ムテインもしくは改変体、アンチセンス核酸、干渉ＲＮＡ、またはアゴニストもしくはアンタゴニストをコードする核酸を発現するベクターを含む（例えば、ＡｒｅｎｚおよびＳｃｈｅｐｅｒｓ（２００３）Ｎａｔｕｒｗｉｓｓｅｎｓｃｈａｆｔｅｎ ９０：３４５−３５９；ＳａｚａｎｉおよびＫｏｌｅ（２００３）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１２：４８１−４８６；Ｐｉｒｏｌｌｏら，（２００３）Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ９９：５５−７７；Ｗａｎｇら，（２００３）Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌ．１３：１６９−１８９を参照のこと）。
【００７７】
抗体、それらの結合組成物、サイトカインアゴニスト、もしくは低分子アンタゴニストを含む薬学的組成物または無菌組成物を調製するために、その構成要素は、薬学的に受容可能なキャリアまたは賦形剤（好ましくは、不活性）と混合される。このような薬学的組成物の調製は、当該分野に公知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ａｎｄ Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｒｎａｃｏｐｅｉａ：Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ（１９８４）を参照のこと。
【００７８】
抗体、結合組成物、またはサイトカインは、通常は非経口で、好ましくは静脈内に投与される。そのようなタンパク質またはペプチドは、免疫原になり得るので、それらは、好ましくはゆっくりと、従来のＩＶ投与セットまたは皮下蓄積のどちらかで、例えば、Ｔｏｍａｓｉら，米国特許第４，７３２，８６３号に教示されるように投与される。免疫反応を最小限にする方法が、適用され得る。低分子構成要素は、経口で活性であり得る。
【００７９】
非経口で投与される場合、その生物製剤は、薬学的に受容可能な非経口ビヒクルとの関連において単位投薬量の注射用形態（溶液、懸濁液、エマルジョン）に処方される。そのような溶媒は、代表的には、本質的に無毒性であり、非治療性である。治療は、水、生理食塩水のような水溶性ビヒクル中で、または種々の添加剤および／もしくは希釈剤を含むか、または含まない緩衝化ビヒクル中で投与され得る。あるいは、懸濁液（例えば、亜鉛懸濁液）は、ペプチドを含むように調製され得る。そのような懸濁剤は、皮下（ＳＱ）注射または筋肉内（ＩＭ）注射のために有用であり得る。生物製剤と添付剤との比率は、両方が有効量中に存在する限りは、広い範囲にわたって変動し得る。
好ましくはこの抗体は、凝集物、他のタンパク質、内毒素を実質的に含まない精製された形態で、約５〜３０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは１０〜２０ｍｇ／ｍｌの濃度で処方される。好ましくは、内毒素のレベルは、２．５ＥＵ／ｍｌ未満である。例えば、Ａｖｉｓら、（編）（１９９３）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ、第二版、Ｄｅｋｋｅｒ、ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら（編）（１９９０）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｔａｂｌｅｔｓ，第二版、Ｄｅｋｋｅｒ、ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら（編）（１９９０）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｄｉｓｐｅｒｓｅ Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｄｅｋｋｅｒ、ＮＹ；Ｆｏｄｏｒら（１９９１）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５１：７６７−７７３、Ｃｏｌｉｇａｎ（編）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ；Ｈｏｏｄら（１９８４）Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｐｅａｒｓｏｎ、Ｕｐｐｅｒ Ｓａｄｄｌｅ Ｒｉｖｅｒ、ＮＹ；Ｐａｕｌ（編）（１９９９）Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、第四版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａ．、ＰＡ；Ｐａｒｃｅら（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４６：２４３−２４７；Ｏｗｉｃｋｉら（１９９０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８７：４００７−４０１１；ならびにＢｌｕｎｄｅｌｌおよびＪｏｈｎｓｏｎ（１９７６）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒａｐｈｙ、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照のこと。
【００８０】
治療のための投与レジメの選択は、いくつかの要因（構成要素の血清のターンオーバー速度または組織のターンオーバー速度）、症状のレベル、構成要素の免疫原性、および標的細胞の接近可能性、投与の時期などに依存する。好ましくは、投与レジメは、患者へ送達される治療剤の量を最大にし、この容量は副作用の受容可能なレベルと一致する。従って、生物学的に送達される用量は、特定の構成要素および処置される状態の重篤度一部依存する。適切な抗体用量の選択における手引きは、例えば、ＢａｃｈらＦｅｒｒｏｎｅら、（編）（１９８５）Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、Ｎｏｇｅｓ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｐａｒｋ Ｒｉｄｇｅ、ＮＪ中の２２章、；およびＨａｂｅｒら（編）（１９７７）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｉｎ Ｈｕｍａｎ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ、Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ（Ｒｕｓｓｅｌｌ、ページ３０３−３５７、ならびにＳｍｉｔｈら、ページ３６５−３８９）に見出される。あるいは、サイトカインおよび低分子の用量は、標準的な方法論を使用して決定される。
【００８１】
適切な用量の決定は、臨床医により、例えば、処置に影響を及ぼすかまたは処置に影響を及ぼすと予測される当該分野において公知のもしくは推測されるパラメーターまたは因子を使用してなされる。一般に、この用量は、最適の用量よりもいくらか少ない量で始め、その後任意の負の副作用に対して所望される効果または最適な効果が得られるまで、小さな増加率で増加させられる。重要な診断測定としては、症状（例えば、炎症または産生された炎症性サイトカインのレベル）の測定が挙げられる。好ましくは、使用される生物学製剤は、処置の標的とされる動物と同一の種に由来し、このためこの試薬に対する体液性応答を最小化する。
【００８２】
リガンドまたはレセプターに特異的に結合する抗体またはそのフラグメントについての１週間の総用量の範囲は、体重１ｋｇあたり一般に約１０μｇから、より一般に約１００μｇから、代表的に約５００μｇから、より代表的に約１０００μｇから、好ましくは約５ｍｇから、およびより好ましくは約１０ｍｇからの範囲である。一般にこの範囲は、体重１ｋｇあたり１００ｍｇより少なく、好ましくは約５０ｍｇより少なく、およびより好ましくは約２５ｍｇより少ない。アゴニスト治療剤または低分子治療剤は、同様のモル濃度で使用され得る。
【００８３】
サイトカインレセプター媒介性シグナルのアンタゴニスト（例えば、抗体または結合フラグメント）の１週間の用量範囲は、体重１ｋｇあたり約１μｇから、好ましくは少なくとも約５μｇから、およびより好ましくは少なくとも約１０μｇからの範囲である。一般に、この範囲は、体重１ｋｇあたり約１０００μｇより少なく、好ましくは約５００μｇより少なく、そしてより好ましくは約１００μｇより少ない。投薬は、望まれる処置に影響を及ぼしかつより短期間またはより長期間の周期的なものであり得るスケジュール通りである。一般に、範囲は、体重１ｋｇあたり少なくとも約１０μｇ〜約５０ｍｇ、好ましくは約１００μｇ〜約１０ｍｇである。サイトカインアゴニスト治療剤または低分子治療剤は代表的に同様のモル濃度の用量で使用されるが、これらはより小さい分子量を有するようであるので、より小さい重量の用量を有する。
【００８４】
本発明はまた、公知の治療法（例えば、ワクチン、ステロイド（特にグルココルチコイド、これは症状（例えば、炎症に関連する）を緩和する）、または抗体、または抗感染薬）との組合せにおける生物製剤の投与を提供する。グルココルチコイドについての１日の投薬量は、１日あたり少なくとも約１ｍｇから、一般に少なくとも約２ｍｇ、そして好ましくは少なくとも約５ｍｇの範囲である。一般に、この投薬量は、１日あたり約１００ｍｇより少なく、代表的に約５０ｍｇより少なく、好ましくは約２０ｍｇより少なく、およびより好ましくは少なくとも約１０ｍｇである。一般に、この範囲は、１日あたり少なくとも約１ｍｇ〜約１００ｍｇ、好ましくは約２ｍｇ〜５０ｍｇである。用語「有効量」は、病状の症状または徴候を改善させるのに充分な量を意味する。代表的な哺乳動物宿主としては、マウス、ラット、ネコ、イヌ、およびヒトを含む霊長類が挙げられる。特定の患者のための有効量は、例えば処置されるべき状態、患者の総合的な健康状態、投与の方法経路および用量ならびに副作用の重篤度などの要因に依存して変動し得る。組合せにおける場合、有効量は、成分の組合せに対する比率であり、そしてこの効果は、個々の成分のみに限定されない。
【００８５】
治療的有効量は、代表的に少なくとも約１０％まで；通常は少なくとも約２０％まで；好ましくは少なくとも約３０％；またはより好ましくは少なくとも約５０％症状を減少させる。本発明は、試薬を提供し、この試薬は、本明細書中の他のところで記載したように（例えば、上記の徴候に関連する障害の処置についての概説的な説明において）、治療用途における使用法を見出す（Ｂｅｒｋｏｗ（編）Ｔｈｅ Ｍｅｒｃｋ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏ．，Ｒａｈｗａｙ、Ｎ．Ｊ．；Ｂｒａｕｗａｌｄら、（編）（２００１）Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，第１５版，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，ＮＹ；Ｇｉｌｍａｎら、（編）（１９９０）Ｇｏｏｄｍａｎ ａｎｄ Ｇｉｌｍａｎ’ｓ：Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｅｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第８版、Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１７版（１９９０）、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐｅｎｎ；Ｌａｎｇｅｒ（１９９０）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７−１５３３；Ｍｅｒｃｋ Ｉｎｄｅｘ、Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏ．、Ｒａｔｈｗａｙ、Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ；およびＰｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ Ｄｅｓｋ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ（ＰＤＲ）；Ｃｏｔｒａｎら、（編）、前述；およびＤａｌｅおよびＦｅｄｅｒｍａｎ（編）（２０００）Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈｅａｌｔｈｅｏｎ／ＷｅｂＭＤ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ）。
【００８６】
本発明の広範な範囲は、以下の実施例に関連して最も理解され、この実施例は、本発明を特定の実施形態に限定することを意図しない。
【実施例】
【００８７】
（実施例）
（Ｉ．一般的な方法）
多数の以下の標準的な方法を記載し、参照する（例えば、Ｍａｎｉａｔｉｓら、（１９８２）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ、Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｐｒｅｓｓ、ＮＹ；Ｓａｍｂｒｏｏｋら（１９８９）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（第二版）１−３巻、ＣＳＨ Ｐｒｅｓｓ、ＮＹ；Ａｕｓｕｂｅｌら、Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ、Ｂｒｏｏｋｌｙｎ、ＮＹ；またはＡｕｓｕｂｅｌら（１９８７および補遺）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｗｉｌｅｙ／Ｇｒｅｅｎｅ、ＮＹ；Ｉｎｎｉｓら（編）（１９９０）ＰＣＲ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：Ａ Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、ＮＹ）。タンパク質精製のための方法としては、硫安塩析精製、カラムクロマトグラフィー、電気泳動、遠心分離、結晶化などが挙げられる。例えば、Ａｕｓｂｅｌら（１９８７および定期的な補遺）；Ｄｅｕｔｓｃｈｅｒ（１９９０）「Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ」Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、１８２巻およびこのシリーズの他の巻；Ｃｏｌｉｇａｎら（１９９５および補遺）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ；Ｐ．Ｍａｔｓｕｄａｉｒａ（編）（１９９３）Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｍｉｃｒｏｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ；ならびにタンパク質精製生成物の使用における製造者（例えば、Ｐｈａｒｍａｃｉａ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ、またはＢｉｏ−Ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｈｅｒｃｕｌｅｓ、ＣＡ）の指示書を参照のこと。組換え技術との組み合わせは、適切なセグメント（エピトープタグ）（例えば、ＦＬＡＧ配列、または例えばプロテアーゼ除去可能配列を介して融合し得る等価物）に対して融合することを可能にする。例えば、Ｈｏｃｈｕｌｉ（１９８９）Ｃｈｅｍｉｓｃｈｅ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅ １２：６９−７０；Ｓｅｔｌｏｗ（編）Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ １２：８７−９８、Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ、ＮＹ、中のＨｏｃｈｕｌｉ（１９９０）「Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｗｉｔｈ Ｍｅｔａｌ Ｃｈｅｌａｔｅ Ａｂｓｏｒｂｅｎｔ」；およびＣｒｏｗｅら（１９９２）ＱＩＡｅｘｐｒｅｓｓ：Ｔｈｅ Ｈｉｇｈ Ｌｅｖｅｌ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ＆ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ、ＱＩＡＧＥＮ，Ｉｎｃ．，Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ、ＣＡ．を参照のこと。
【００８８】
標準的な免疫学的技術は、例えば、Ｈｅｒｔｚｅｎｂｅｒｇら（編）（１９９６）Ｗｅｉｒ’ｓ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １−４巻、Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ、Ｍａｌｄｅｎ、ＭＡ；Ｃｏｌｉｇａｎ（１９９１）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｗｉｌｅｙ／Ｇｒｅｅｎｅ、ＮＹ；ならびにＭｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ ７０巻、７３巻、７４巻、８４巻、９２巻、９３巻、１０８巻、１１６巻、１２１巻、１３２巻、１５０巻、１６２巻、および１６３巻中に記載される）。サイトカインアッセイは、例えば、Ｔｈｏｍｓｏｎ（編）（１９９８）Ｔｈｅ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｈａｎｄｂｏｏｋ（第三版）Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ；Ｍｉｒｅ−ＳｌｕｉｓおよびＴｈｏｒｐｅ（１９９８）Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ；ＭｅｔｃａｌｆおよびＮｉｃｏｌａ（１９９５）Ｔｈｅ Ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ Ｃｏｌｏｎｙ Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ Ｆａｃｔｏｒｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｕｎｉｖ．Ｐｒｅｓｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＵＫ；ならびにＡｇｇａｒｗａｌおよびＧｕｔｔｅｒｍａｎ（１９９１）Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ、Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ、Ｍａｌｄｅｎ、ＭＡ中に記載される。
【００８９】
血管の生物学的活性についてのアッセイは、当該分野で周知である。これらは、腫瘍組織または他の組織における脈管形成活性および脈管形成阻害（ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｃ）活性（例えば、動脈性平滑筋の増殖（例えば、Ｋｏｙａｍａら（１９９６）Ｃｅｌｌ ８７：１０６９−１０７８を参照のこと）、血管上皮に付着する単核細胞（例えば、ＭｃＥｖｏｙら（１９９７）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８５：２０６９−２０７７；Ｒｏｓｓ（１９９３）Ｎａｔｕｒｅ ３６２：８０１−８０９；ＲｅｋｈｔｅｒおよびＧｏｒｄｏｎ（１９９５）Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１４７：６６８−６７７；Ｔｈｙｂｅｒｇら（１９９０）Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ １０：９６６−９９０；Ｇｕｍｂｉｎｅｒ（１９９６）Ｃｅｌｌ ８４：３４５−３５７を参照のこと）を含む。
【００９０】
神経細胞の生物学的な活性についてのアッセイは、例えば、Ｗｏｕｔｅｒｌｏｏｄ（編集、１９９５）Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ Ｍｏｄｕｌｅｓ １０，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ；Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ；およびＮｅｕｒｏｍｅｔｈｏｄｓ Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ、ＮＪ．中に記載される。発生学的な系の方法論は、例えば、Ｍｅｉｓａｍｉ（編）Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ；およびＣｈｒｉｓｐｅｅｌｓ（編）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｉｎ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ中に記載される。
【００９１】
ＦＡＣＳ分析は、Ｍｅｌａｍｅｄら（１９９０）Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ａｎｄ Ｓｏｒｔｉｎｇ，Ｗｉｌｅｙ−Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ；Ｓｈａｐｉｒｏ（１９９８）Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｒｙ，Ｌｉｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ；およびＲｏｂｉｎｓｏｎら（１９９３）Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ Ｍｅｔｈｏｄｓ、Ｗｉｌｅｙ−Ｌｉｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ．中に記載される。
【００９２】
（ＩＩ．ＩＦＮγの誘導）
中和化抗ＩＬ−２ ｍＡｂの存在下でＩＦＮγの産生を誘導するヒトＩＬ−２７およびマウスＩＬ−２７の能力を、抗ＣＤ３を介した同時刺激により、または抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８を用いた同時刺激により測定した。細胞を、ＩＬ−１２の非存在下および存在下で処理した。
【００９３】
ヒトＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＡ Ｔ細胞の試験において、ｈＩＬ−２７およびｈＩＬ−１２のそれ自体でＩＦＮγ産生を誘導しなかった。ここで細胞をまた、抗ＣＤ３または抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８により処理した。ＩＬ−２７およびＩＬ−１２の両方の存在下においてのみ検出可能なＩＦＮγ産生が存在し、これはＩＬ−２７とＩＬ−１２との間の強い相乗効果を示している。
【００９４】
選別したマウスＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＢ高未処理Ｔ細胞の試験もまた、ＩＬ−２７とＩＬ−１２との間の相乗効果を示した。選別したマウスＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＢ高未処理Ｔ細胞を、４日間、抗ＣＤ３ｍＡｂのみを用いて、または抗ＣＤ３ｍＡｂ／抗ＣＤ２８ｍＡｂならびに飽和量のＩＬ−２７および／もしくはＩＬ−１２を用いて刺激した。抗ＣＤ３のみ（抗ＣＤ２８刺激無し）を用いることにより、それ自体によるＩＬ−２７およびＩＬ−１２のいずれも、相当量のＩＦＮγを誘導し得なかった。しかし、ＩＬ−２７およびＩＬ−１２の組み合わせは、ＩＦＮγを約３００ｎｇ／ｍｌまで誘導した。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８同時刺激を用いることにより、ＩＬ−２７のみおよびＩＬ−１２のみは、ＩＦＮγ産生を誘導し得た。ＩＬ−２７とＩＬ−１２との両方の組合せは、約５５０ｎｇ／ｍｌまでのレベルでＩＦＮγ産生を伴う相加的な効果を導いた。
【００９５】
本発明の研究は、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞によるＩＦＮγの産生へのＩＬ−２７の効果を調べた。抗ＣＤ５６でコーティングしたマイクロビーズ（Ｍｉｌｔｅｎｙｅ， Ａｕｂｕｒｎ，ＣＡ）を用いたポジティブ接着選択を使用し、その後ＣＤ５６＋ＣＤ３−細胞のポジティブ選別により、ヒトＣＤ５６ポジティブＮＫ細胞を、正常な健康体の提供者の末梢血単核細胞から単離した。次いで、このように単離したＮＫ細胞を、サイトカインまたはサイトカインの組合せの存在下において、３７℃で７２時間培養した。細胞培養の上清を回収し、そしてこの上清中のＩＦＮγの量をＥＬＩＳＡにより定量した。さらに、ＲＮＡを、細胞ペッレトから単離し、そしてＩＦＮγｍＲＮＡの発現について分析した。
【００９６】
結果の代表的なセットを示す（表１）。
【００９７】
【表１】
各実験に使用したＩＬ−２７の濃度（ｎｇ／ｍｌ）を示す（表１、左端の列）。このデータは、産生されたＩＦＮγの量（ｎｇ）を示す。従って、ＩＬ−１２のみが、低レベル（１ｎｇ／ｍｌより少ない）の、精製したＮＫ細胞によるＩＦＮγ産生を誘導した。ＩＬ−２７のみが、検出可能なＩＦＮγ産生を誘導しなかった（データ示さず）。しかし、ＩＬ−１２へのＩＬ−２７の添加は、１０〜２０倍（すなわち、約３．０ｎｇ／ｍｌ）ＩＦＮγの産生を高めた。従って、ＩＬ−２７は、ＩＬ−１２と共に相乗的に作用して、ＩＦＮγ産生を高めた。
【００９８】
ＩＬ−２７はまた、他のサイトカインまたはサイトカインの組合せに相乗効果を有する。ＩＬ−２７の非存在下において、ＩＬ−１２とＩＬ−２との組み合わせは、ＩＬ−１２のみと比較して、増加したＩＦＮγの産生を生じた。さらに、ＩＬ−２とＩＬ−１２との組み合わせへのＩＬ−２７の添加は、ＩＦＮγレベルの用量依存性の増加（５０〜１００ｎｇ／ｍｌまで）を導いた。ＩＬ−２、ＩＬ−１２およびＩＬ−１８をＩＬ−２７と組み合わせた場合、最も著しい相乗効果を観察した。ＩＬ−２７の非存在下において、三つの組合せは、５０〜１００ｎｇ／ｍｌのＩＦＮγ産生レベルを生じた。この三つの組合せへのＩＬ−２７の添加は、約２０００ｎｇ／ｍｌまでＩＦＮγの用量依存性の相乗的な産生を生じた（表１）。同様の研究において、ＩＬ−１５を、ＩＬ−２の代わりに使用し得、一方ＩＬ−２３を、ＩＬ−１２の代わりに使用し得ることを示した。
【００９９】
興味深いことに、リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応を使用するｍＲＮＡの分析は、ＩＬ−２７と他のサイトカインとの相乗効果は、ＩＦＮγ ｍＲＮＡの量の増加により反映されないことを示唆する（表２）。従って、この産生の増加は、おそらく翻訳レベルまたは翻訳後レベルで影響を与えるようである。
【０１００】
この結果は、飽和量の予め特徴付けられたサイトカインの組合せは、ＩＬ−２７の添加により達成し得るＩＦＮγ産生のレベルを引き起こさないことを示す。従って、ＩＦＮγのこの完全な潜在能力に対するＩＦＮγの産生は、サイトカインの選択したセットの存在に依存し、そしてそれらのうちの一つを取り除くことは、律速効果を引き起こし得る。
【０１０１】
【表２】
（ＩＩＩ．ＩＬ−２７は、未処理Ｔ細胞のＴｈ２の局在化を駆動しない）
選別したマウスＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＢ高Ｔ細胞を、ＩＬ−４およびＩＬ−２７の存在下において抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８を結合したプレートを用いて培養した。培養中にＩＬ−２７を含有する場合、ＩＬ−４の非存在下および存在下の両方において、ＩＬ−１３の産生の減少を導く。従って、強いＴｈ１応答を誘導するが、ＩＬ−２７は、Ｔｈ２の極性化を促進しないようである。
【０１０２】
（ＩＶ．ＩＬ−２７は、ＷＳＸ−１／ＴＣＣＲに結合する）
ＩＬ−２７ファミリーとＩＬ−６／ＩＬ−１２ファミリーとの間の関係のため、シグナルレセプターについての検索をこのファミリーに集中した。このファミリーのメンバーを、ＢａＦ３細胞へ導入し、そしてＩＬ−２７への結合について試験した。試験したレセプターのうちオーファンサイトカインレセプターＷＳＸ−１／ＴＣＣＲを発現するＢａ／Ｆ３細胞のみが、標識したＩＬ−２７への結合を示した（例えば、Ｓｐｒｅｃｈｅｒら（１９９８）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ、Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．２４６：８２−９０；Ｃｈｅｎら（２０００）Ｎａｔｕｒｅ ４０７：９１６−９２０を参照のこと）。Ｆ−標識ヒトＷＳＸ−１ｃＤＮＡまたはＦ−標識マウスＷＳＸ−１ｃＤＮＡ（Ｆ−ｈＷＳＸ−またはＦ−ｍＷＳＸ−１）のいずれかを発現するレトロウィルス構築物を用いて感染させたＢａＦ３細胞は、抗Ｆｌａｇ ｍＡｂを使用して細胞染色を示した。次いでＦ−ｈＷＳＸ−１を発現する細胞を、いずれかのｈＥＢＩ３−Ｉｇのみか、またはｈｐ２８−ＥとＥＢＩ３−Ｉｇとの同時発現と共に、２時間インキュベートした。ヘテロダイマーのｐ２８／ＥＢＩ３は、ＷＳＸ−１に結合するが、ＥＢＩ３−Ｉｇ自体は検出可能な結合を示さなかった。同様に、ｍｐ２８−ＥとｍＥＢＩ３−Ｉｇとの組合せのみが、ｍＷＳＸ−１−発現ＢａＦ３細胞との検出可能な相互作用を提供したが、この二つの個々のタンパク質は、このような相互作用を提供し得なかった。Ｆ−ｍＷＳＸ−１発現ＢａＦ３細胞と共に独立に発現されるｍｐ２８−ＥおよびｍＥＢＩ３−Ｉｇのインキュベーションもまた、細胞の染色を導く。感染していないコントロール細胞は、ｐ２８／ＥＢＩ３により染色されず、これは観察された相互作用の特異性を示した。
【０１０３】
これらの結果は、Ｃ−末端ＲＳＧＨ６−タグ（Ｒ）を伴うｈＷＳＸ−１の可溶性細胞外形態を使用して免疫共沈降実験により確認された。Ｆ−ｈＥＢＩ３または同時発現されたｈｐ２８−Ｅ／Ｆ−ｈＥＢＩ３を含有する一過的にトランスフェクトされたＨＥＫ２９３Ｔ細胞の上清に由来するタンパク質を、Ｆｌａｇ Ｍ２−アガロース、ｐｒｏｔｅｉｎ Ｇ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標）結合体化抗ｅｔａｇ ｍＡｂまたはｐｒｏｔｅｉｎ Ｇ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標）結合体化抗Ｈ５ｍＡｂのいずれかを使用して免疫沈降した。最初の沈殿物を、洗浄し、そして次いでｓｈＷＳＸ−１−Ｒを含有するＨＥＫ２９３Ｔ細胞の上清と共にインキュベートした。第二の沈殿物を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分離し、そしてウエスタンブロットに供した。沈殿したタンパク質を、ＥＣＬにより、それぞれのタンパク質タグに対する抗体を使用して可視化した。３つの全てのタンパク質（ｈ−ｐ２８−Ｅ，Ｆ−ｈＥＢＩ３およびｓｈＷＳＸ−１−Ｒ）が、存在する場合のみ、一つのタンパク質の免疫沈降が、使用した免疫沈降させる抗体の他の成分も両方とも独立に沈降させた。それぞれのマウスのオルソログ（ｏｒｔｈｏｌｏｇｕｅ）を使用する同一の免疫共沈降実験は、同様の結果を得た。
【０１０４】
ＷＳＸ−１が、ＩＬ−２７シグナル伝達を媒介するのに十分であるか否かという問題に取り組むためにヒトＷＳＸ−１またはマウスＷＳＸ−１を発現するＢａＦ３細胞の増殖を試験した。これらの細胞は、ＩＬ−３に応答して増殖したが、ＩＬ−２７に応答して増殖しなかった。従って、ＷＳＸ−１は、ＩＬ−２７媒介性シグナル伝達を必要とするが、十分ではないようである。さらなるＩＬ−２７シグナル伝達レセプターのサブユニットの同定が、現在進行中である。
【０１０５】
本明細書中に引用した全ての参考文献は、個々の出版物、特許または特許出願の各々が、全ての目的のためにその全体が参考として援用されることが具体的にかつ別々に示され、同一の範囲まで本明細書中に参考として援用される。
【０１０６】
本発明の多数の改変体および変更物が、当業者に明らかなように、本発明の精神および範囲から逸脱することなく作製され得る。本明細書中に記載される特定の実施形態は、実施例のみの方法により提供され、そして本発明は、権利化する特許請求の範囲の等価物の全範囲とともに、添付する特許請求の範囲の用語によってのみ限定されるべきものである。
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、種々の免疫障害の処置においてＩＦＮγ生成を増強するか、または阻害する方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
哺乳類の免疫応答は、「免疫ネットワーク」と呼ばれる一連の複合細胞相互作用に基づく。最近の研究は、このネットワークの内部作用（ｗｏｒｋｉｎｇ）の新しい見識を提供する。実際に、この応答の多くが、リンパ球、マクロファージ、顆粒球、および他の細胞のネットワーク様相互作用を中心に展開することは、明らかなままであるが、現在、免疫学者は、一般的に、サイトカインとして公知の可溶タンパク質が、これらの細胞相互作用を制御することにおいて重要な役割を果たすという意見を持っている。従って、細胞調節因子の単離、特徴付け、および作用機構、多数の医学的異常（例えば、免疫系障害）の診断および治療において、何が重要な進歩をもたらすかの理解に、かなりの関心がある。これらの因子のいくつかは、造血成長因子および／または造血分化因子である（例えば、幹細胞因子（ＳＣＦ）またはＩＬ−１２（例えば、Ｍｉｒｅ−ＳｌｕｉｓおよびＴｈｏｒｐｅ（１９９８）Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ；Ｔｈｏｍｓｏｎ（編）（１９９８）Ｔｈｅ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｈａｎｄｂｏｏｋ（第３編）Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ；ＭｅｔｃａｌｆおよびＮｉｃｏｌａ（１９９５）Ｔｈｅ Ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ Ｃｏｌｏｎｙ Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ Ｆａｃｔｏｒｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｕｎｉｖ．Ｐｒｅｓｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＵＫ；ならびにＡｇｇａｒｗａｌおよびＧｕｔｔｅｒｍａｎ（１９９１）Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ，Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ，Ｍａｌｄｅｎ，ＭＡを参照のこと）。
【０００３】
サイトカインは、種々の方法において細胞の活性を媒介する。サイトカインは、複合免疫系を作り上げる多様な細胞系統を含む多数の前駆体内への多能性造血幹細胞の増殖、成長、および分化を支持することが示されている。細胞構成要素間の適切かつ均衡を保っている相互作用は、健康な免疫応答に必須である。サイトカインが他の薬剤とともに投与される場合、異なった細胞系統は、しばしば異なった様式で反応する。
【０００４】
免疫応答で特に重要な細胞系統として、免疫グロブリン（異物を認識しかつ結合して、その除去をもたらす能力を有するタンパク質）を産生し、かつ分泌し得るＢ細胞、サイトカインを分泌し、Ｂ細胞および種々の他の細胞（他のＴ細胞を含む）が免疫ネットワークを作り上げることを誘導するか、または抑制するＴ細胞の種々の部分集合、感染性物質および腫瘍細胞に応答するサイトカイン産生を担うＮＫ細胞、および抗原提示細胞（例えば、樹状細胞および他の骨髄由来細胞）が挙げられる。
【０００５】
本発明は、ＩＬ−１２と関連するサイトカインであるＩＬ−２７を用いる方法を提供する。ＩＬ−１２は、細胞媒介性免疫において重要な役割を果たす。その活性は、ＩＬ−１２Ｒβ１およびＩＬ−１２Ｒβ２の２つのサブユニットを含む高親和性レセプター複合体を通じて引き起こされる。ＩＬ−１２のｐ３５サブユニットは、ＥＢＩ３と呼ばれる第二の可溶性タンパク質に対して結合し得る。そして、ｐ３５およびＥＢＩ３は、分泌されるヘテロダイマーを形成することが示唆されたが、このヘテロダイマーの機能は明らかではない。ＥＢＩ３はまた、別のタンパク質ｐ２８に対しても結合し、現在、ＩＬ−２７と呼ばれるｐ２８およびＥＢＩ３を含む可溶性のヘテロダイマーを形成する。このｐ２８サブユニットは、ＩＬ−８０またはＩＬ−Ｄ８０としてもまた公知である。ヒトｐ３５サブユニットおよびマウスｐ３５サブユニットをコードするｃＤＮＡは、ＵＳ２００２０１６４６０９およびＷＯ ０２／０６８５９６において記載されており、それらの両方ともが参考として援用される（例えば、Ｄｅｖｅｒｇｎｅら（１９９７）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９４：１２０４１−１２０４６；Ｃｈｕａら（１９９５）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５：４２８６：４２９４；Ｐｒｅｓｋｙら（１９９８）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６０：２１７４−２１７９；Ｇａｔｅｌｙら（１９９８）Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６：４９５−５２１；Ｐｒｅｓｋｙら（１９９６）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９３：１４００２−１４００７；Ｔｒｉｎｃｈｉｅｒｉ（１９９８）Ａｄｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７０：８３−２４３；Ｔｒｉｎｃｈｉｅｒｉ（１９９８）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｓ．１７：２６９−２７８；Ｔｒｉｎｃｈｉｅｒｉ（１９９５）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：２５１−２７６を参照のこと）。
【０００６】
本発明は、細菌および寄生虫（例えば、細胞内細菌および細胞内寄生虫）に対する免疫防御ならびにウイルス、ガン、および腫瘍に対する免疫防御を刺激する目的のためにインターフェロンγ（ＩＦＮγ）の発現を調節するための方法を提供する。ＩＦＮγは、細胞内細菌に対する免疫応答を媒介し得、この一般的な細胞内細菌種としては、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｓｐ．、Ｓｈｉｇｅｌｌａ ｓｐ．、Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｓｐ．、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ ｓｐ．、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａ ｓｐ．（ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ；ｌｅｐｒｏｓｙ）、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｓｐ．、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｓｐ．、Ｏｒｉｅｎｔａ ｓｐ．、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｓｐ．、Ａｎａｐｌａｓｍａ ｓｐ．、Ｎｅｏｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｓｐ．、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｓｐ．、およびＣｏｘｉｅｌｌａ ｓｐ．が挙げられる。さらに、ＩＦＮγは、寄生虫に対する応答を媒介する（例えば、Ｐｌａｓｍｏｄｉａ ｓｐ．（マラリア）、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｓｐ．、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ ｓｐ．、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｓｐ．、およびＣｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ ｓｐ．）。さらに、ＩＦＮγは、ウイルス（例えば、ＨＩＶ、痘瘡ウイルスおよびワクシニアウイルス（天然痘）などのオルトポックスウイルス、およびアルファヘルペスウイルス（例えば、単純疱疹ウイルス）およびベータヘルペスウイルス（例えば、サイトメガロウイルス）を含むヘルペスウイルス）に対する免疫防御を媒介する。ＩＦＮγ発現を減少させるか、または阻害する方法もまた提供される。それは、例えば、慢性炎症性障害（例えば、クローン病）の処置のためである（例えば、Ｋｅｎｔら（２０００）Ｖａｃｃｉｎｅ １８：２２５０−２２５６；Ｉｓｍａｉｌら（２００２）ＦＥＭＳ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｌｅｔｔ．２０７：１１１−１２０；Ｋａｕｆｍａｎｎ（２００１）Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｓ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：２０−３０；ＧｏｅｂｅｌおよびＧｒｏｓｓ（２００１）ＴＲＥＮＤＳ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．９：２６７−２７３；Ｈｅｕｓｓｌｅｒら（２００１）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．３１：１１６６−１１７６；Ｌｕｄｅｒら（２００１）Ｃａｒｓｔｅｎら（２００１）ＴＲＥＮＤＳ Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．１７：４８０−４８６；Ｒｏｏｋら（２００１）Ｅｕｒ．Ｒｅｓｐ．Ｊ．１７：５３７−５５７；ＳｔｅｎｇｅｒおよびＲｏｌｌｉｎｇｈｏｆｆ（２００１）Ａｎｎ．Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ．６０：ｉｉｉ４３−ｉｉｉ４６；Ｈａａｓら（２００２）Ａｍ．Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｐａｔｈｏｌ．２４：３１９−３２３；ＤｏｒｍａｎおよびＨｏｌｌａｎｄ（２０００）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｖｓ．１１：３２１−３３３；Ｓｍｉｔｈら（２００２）Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．８３（Ｐｔ．１２）２９１５−２９３１；ＣｏｈｒｓおよびＧｉｌｄｅｎ（２００１）Ｂｒａｉｎ Ｐａｔｈｏｌ．１１：４６５−４７４；ＴａｎｎｅｎｂａｕｍおよびＨａｍｉｌｔｏｎ（２００２）Ｓｅｍ．Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｌ．１０：１１３−１２３；Ｉｋｅｄａら（２００２）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｖｓ．１３：９５−１０９；Ｋｌｉｍｐら（２００２）Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｏｎｃｏｌ．Ｈｅｍａｔｏｌ．４４：１４３−１６１；Ｆｒｕｃｈｔら（２００１）ＴＲＥＮＤＳ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２：５５６−５６０を参照のこと）。
【０００７】
上記から、サイトカインおよびサイトカインレセプターと関連する（例えば、ＩＬ−２７、ＩＬ−１２およびそれらのレセプターと関連する）新しい機能および方法の発見が、広い範囲の変性状態または異常状態（例えば、感染症またはガン）についての新しい治療に寄与し得、ここでこの治療は、免疫系細胞および／または造血細胞に直接的または間接的に関与する。特に、公知のサイトカインの有益な活性を増強するか、または可能にする、サイトカインの発見および発展は、非常に有利である。本発明は、Ｌ−２７を用いてＩＦＮγ産生を増強する方法を提供する。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
（発明の要旨）
本発明は、ＩＬ−２７がインターフェロンγ（ＩＦＮγ）の生成を増強するという発見に、部分的に基づいている。
【０００９】
本発明は、インターフェロンγ（ＩＦＮγ）の発現またはレベルを細胞によって調節する方法を提供し、この方法は、細胞を有効量のサイトカインＩＬ−２７のアゴニストまたはアンタゴニストを用いて処理する工程を包含する。
【００１０】
別の実施形態においては、本発明は、インターフェロンγ（ＩＦＮγ）の発現またはレベルを細胞によって調節する方法を提供し、この方法は、細胞を有効量のＩＬ−２７のアゴニストおよびＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、もしくはＩＬ−２３のアゴニスト；またはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いて処理する工程を包含する。
【００１１】
上記方法であって、調節を増大させ、かつＩＬ−２７のアゴニストを用いて処置する方法；または調節を減少させ、かつＩＬ−２７のアンタゴニストを用いて処置する方法；上記方法であって、アゴニストがＩＬ−２７改変体またはＩＬ−２７誘導体であって、かつＩＬ−２７改変体またはＩＬ−２７誘導体が、少なくとも１つのＩＬ−２７の生物学的特性を有する方法；および上記方法であって、ＩＬ−２７改変体またはＩＬ−２７誘導体がＩＬ−２７ハイパーカイン（ｈｙｐｅｒｋｉｎｅ）を含む方法、ならびに、さらに上記方法であって、増大が、有効量のＩＬ−２７またはＩＬ−２７改変体もしくはＩＬ−２７誘導体の非存在下における発現レベル、または生成レベルよりも約２倍、約５倍、約１０倍、約２０倍、または約５０倍を超える方法もまた、提供される。
【００１２】
別の局面においては、本発明は、上記方法であって、アゴニストを用いた処置が、さらなるサイトカインのアゴニストを用いて処置する工程をさらに含有する方法；またはアンタゴニストを用いた処置が、さらなるサイトカインのアンタゴニストを用いて処置する工程をさらに包含する方法；および上記方法であって、さらなるサイトカインが、ＩＬ−２；ＩＬ−１５；ＩＬ−１２；ＩＬ−２３；またはＩＬ−１８である方法を提供する。
【００１３】
本発明の別の実施形態は、上記方法であって、アゴニストを用いた処置が、２つのさらなるサイトカインのアゴニストを用いて処置する工程をさらに包含する方法；またはアンタゴニストを用いた処置が、２つのさらなるサイトカインのアンタゴニストを用いて処置する工程をさらに包含する方法；および上記方法であって、２つのさらなるサイトカインが、ＩＬ−２およびＩＬ−１２；ＩＬ−２およびＩＬ−２３；ＩＬ−１５およびＩＬ−１２；ＩＬ−１５およびＩＬ−２３；またはＩＬ−１８およびＩＬ−２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１２、もしくはＩＬ−２３である方法を含む。
【００１４】
さらに別の局面においては、本発明は、上記方法で、細胞を処理するアゴニストが、３つのさらなるサイトカインのアゴニストを用いて処理される方法；または細胞を処理するアンタゴニストが、３つのさらなるサイトカインのアンタゴニストを用いて処理される方法；および上記方法で、３つのさらなるサイトカインが、ＩＬ−１８およびＩＬ−２およびＩＬ−１５；またはＩＬ−１８およびＩＬ−１２およびＩＬ−２３である方法を提供する。
【００１５】
別の実施形態において、本発明は、上記方法であって、細胞が、Ｔ細胞；またはＮＫ細胞である方法；上記方法であって、細胞は、被験体の中に位置し、そしてＩＬ−２７アゴニストまたはＩＬ−２７アンタゴニストが、被験体に対して投与される方法；および上記方法であって、被験体は、被験体中のＩＦＮγレベルを調節することにより処置し得るか、もしくは改善し得る障害または病理学的な状態を有するか、または有することが疑われる被験体である方法を提供する。
【００１６】
本発明のさらに別の局面は、上記方法であって、処置が、ＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置であり、かつ障害または状態が、ガン、新生物、または腫瘍；細胞内病原体；または炎症性状態もしくは自己免疫状態を含む方法；上記方法であって、処置が、ＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置であり、かつ細胞内病原体が、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ ｓｐ．；Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ．；Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｓｐ．；Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｓｐ．；ヘルペスウイルス；サイトメガロウイルス；またはヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）を含む方法；上記方法であって、処置が、ＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置であり、かつ炎症性状態または自己免疫状態が、慢性関節リウマチ；またはぜん息もしくはアレルギーを含む方法；および上記方法であって、処置が、ＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置であり、かつ障害または状態が、ＴＨ１状態もしくはＴＨ１障害；多発性硬化症；乾癬；クローン病；Ｉ型糖尿病または全身性エリテマトーデスを含む方法を提供する。
【００１７】
本発明はまた、被験体中のＩＦＮγの発現もしくはレベルを調節することにより、被験体の障害状態もしくは病理学的状態を処置するか、または改善する方法であって、サイトカインＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストの有効量を投与する工程を包含する方法を提供する。上記方法であって、被験体がヒト被験体；または動物被験体である方法；および上記方法で、調節が増大し、かつ処置がＩＬ−２７のアゴニストを用いる処置であるか；または調節が減少し、かつ処置がＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置である方法、およびさらに、上記方法であって、アゴニストがＩＬ−２７改変体またはＩＬ−２７誘導体であり、そしてＬ−２７改変体またはＩＬ−２７誘導体は、少なくとも１つのＩＬ−２７の生物学的特性を有する方法；および上記方法であって、ＩＬ−２７改変体またはＩＬ−２７誘導体がＩＬ−２７ハイパーカインを含む方法、および上記方法で、増大が、有効量のＩＬ−２７またはＩＬ−２７改変体もしくはＩＬ−２７誘導体の投与の非存在下における発現レベル、または生成レベルよりも約２倍、約５倍、約１０倍、約２０倍、または約５０倍を超える方法もまた、含まれる。
【００１８】
さらに、本発明は、被験体中のＩＦＮγの発現もしくはレベルを調節することにより、被験体の障害状態もしくは病理学的状態を処置するか、または改善する方法であって、サイトカインＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストの有効量を投与する工程を包含する方法であって；アゴニスト処置される被験体が、１つのさらなるサイトカインのアゴニストを用いて処置される方法；またはアンタゴニスト処置される被験体が、１つのさらなるサイトカインのアンタゴニストを用いて処置される方法をもまた、提供する。上記方法で、さらなるサイトカインが、ＩＬ−２；ＩＬ−１５；ＩＬ−１２；ＩＬ−２３；またはＩＬ−１８である方法；および上記方法で、被験体を処置するアゴニストが、２つのさらなるサイトカインのアゴニストを用いて処置されるか；または被験体を処置するアンタゴニストが、２つのさらなるサイトカインのアンタゴニストを用いて処置される方法；および上記方法で、２つのさらなるサイトカインが、ＩＬ−２およびＩＬ−１２；ＩＬ−２およびＩＬ−２３；ＩＬ−１５およびＩＬ−１２；ＩＬ−１５およびＩＬ−２３；またはＩＬ−１８およびＩＬ−２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１２、もしくはＩＬ−２３である方法もまた、提供される。
【００１９】
本発明のさらに別の実施形態は、上記方法であって、アゴニスト処理される細胞が、３つのさらなるサイトカインのアゴニストを用いて処理されるか；またはアンタゴニスト処理される細胞が、３つのさらなるサイトカインのアンタゴニストを用いて処理される方法；および上記方法であって、３つのさらなるサイトカインが、ＩＬ−１８およびＩＬ−２またはＩＬ−１５；ならびにＩＬ−１２またはＩＬ−２３である方法；および上記方法で、被験体は、被験体中のＩＦＮγレベルを調節することにより処置され得るか、もしくは改善され得る障害または状態を有するか、または有することが疑われる被験体である方法、およびさらに、上記方法であって、処置が、ＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置であり、かつ障害または状態が、ガン、新生物、または腫瘍；細胞内病原体；または炎症性状態もしくは自己免疫状態を含む方法を提供する。
【００２０】
さらに、本発明は、上記方法であって、処置が、ＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置であり、かつ細胞内病原体が、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ ｓｐ．；Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ．；Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｓｐ．；Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｓｐ．；ヘルペスウイルス；サイトメガロウイルス；またはヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）を含む方法；上記方法であって、処置が、ＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置であり、かつ炎症性状態または自己免疫状態が、慢性関節リウマチ；またはぜん息もしくはアレルギーを含む方法；および上記方法で、処置が、ＩＬ−２７のアゴニストまたはＩＬ−２７のアンタゴニストを用いた処置であり、かつ炎症性状態または自己免疫状態が、ＴＨ１状態もしくはＴＨ１障害；多発性硬化症；乾癬；クローン病；Ｉ型糖尿病または全身性エリテマトーデスを含む方法；および上記方法であって、アンタゴニストが抗体の抗原結合部位；または核酸に由来する方法を提供する。
【００２１】
本発明は、上記方法であって、２つのさらなるサイトカインが、ＩＬ−２およびＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、またはＩＬ−２３；ＩＬ−１２およびＩＬ−２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、またはＩＬ−２３；ＩＬ−１５およびＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１８、またはＩＬ−２３；ＩＬ−１８およびＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、またはＩＬ−２３；ならびにＩＬ−２３およびＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、またはＩＬ−１８である方法を提供する。上記の方法であって、３つのさらなるサイトカインが、インターロイキン２、１２、および１５；インターロイキン２、１２、および１８；インターロイキン２、１２、および２３；インターロイキン２、１５、および１８；インターロイキン２、１５、および２３；インターロイキン２、１８、および２３；インターロイキン１２、１５、および１８；インターロイキン１２、１５、および２３；インターロイキン１２、１８、およびインターロイキン２３；インターロイキン１５、１８、および２３である方法もまた、提供される。
【００２２】
（参照される実施形態の詳細な説明）
本明細書中に引用されるすべての参照は、本明細書において参照として援用され、各個々の刊行物または特許出願が特異的かつ個別に参考として援用されたことを示すのと同じ範囲まで援用される。
【００２３】
本明細書（添付の特許請求の範囲を含む）で用いられる場合、単語の単数形態（例えば、「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」）は、文脈が明らかに他のものを指示しない限り、それらの対応する複数形の参照を含む。
【００２４】
（Ｉ．定義）
ＩＬ−２７の特に有用な適用は、ＩＦＮγ産生を増強するＩＬ−２７の能力に関連する。本発明のこの局面を詳細に説明する前に、次の用語が定義される。本明細書で用いられる場合、他に指示のないかぎり、これらの用語は次の意味を有する。
【００２５】
分子が少なくとも１つの「ＩＬ−２７生物学的活性」または「ＩＬ−２７アゴニスト活性」を有するのは、その分子が、ネイティブなＩＬ−２７タンパク質に対して惹起された抗体によって認識され得る場合；またはその分子が、ネイティブなＩＬ−２７タンパク質の刺激（ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ）活性、阻害活性、または結合活性のいずれかを有する場合である。例えば、その分子は、免疫細胞がＩＦＮγを生成することを増強し得、またはその分子は、ＩＬ−２７レセプターに対して結合し得る。その分子は、好ましくは、ＷＳＸ−１／ＴＣＣＲに対して結合し、より好ましくは、ＩＦＮγ産生を増強することが可能である。
【００２６】
「投与」および「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」が、ヒト、動物（ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ）、動物（ａｎｉｍａｌ）、実験被験体、細胞、組織、器官、または生物学的流体に適用される場合、それらは、動物、ヒト、被験体、細胞、組織、器官、または生物学的流体と外因性の薬剤、治療剤、診断剤、または組成物との接触をいう。「投与」および「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」はまた、例えば、治療方法、薬物動態学的方法、診断方法、研究方法、および実験方法を言及し得る。細胞の処理（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）は、細胞に対する試薬の接触、および流動体（この流動体は、細胞と接触している）への試薬の接触を包含する。細胞の処理は、試薬が、ヒトまたは動物における生物学的流動体と接触するが、その試薬は、その細胞と接触することが証明されていないという状況を含む。処理は、投与された試薬または細胞が、代謝、分解により、または貯蔵の状態により改変される状況をさらに包含する。
【００２７】
細胞により「増強された」ＩＦＮγ産生は、その細胞により生成されるＩＦＮγのレベルが増大することをいう。ＩＦＮγのレベルは、当該分野で確立されたいずれの方法（例えば、ＥＬＩＳＡまたは細胞増殖アッセイ）によっても決定され得る。５倍まで増強されたＩＦＮγ産生は、新規のものであって、ＩＦＮγの増大したレベルがもとのＩＦＮγレベルの５倍であることを意味する。同様に、１０倍まで増強されたＩＦＮγ産生は、ＩＦＮγの増大したレベルがもとのＩＦＮγレベルの１０倍であることを意味する。以下同様である。
【００２８】
ＩＬ−２７のポリペプチドおよび核酸の保存的に改変された改変体、誘導体、およびムテインを使用する方法が、提供される。「保存的に改変された改変体」は、アミノ酸配列および核酸配列の両方に適用される。特定の核酸に関して、保存的に改変された改変体は、同一または本質的に同一なアミノ酸配列をコードする核酸であるか、核酸はアミノ酸配列をコードしない場合、本質的に同一な核酸配列をいう。遺伝暗号の縮重のために、機能的に同一な核酸の多くは、任意の所定のタンパク質をコードし得る。
【００２９】
アミノ酸配列に関して、当業者は、核酸、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質配列に対する個々の置換であって、保存された１つのアミノ酸についてのコード配列において、１つのアミノ酸またはアミノ酸の低いパーセンテージが置換されたものは、「保存的に改変された改変体」であることを認識している。機能的に類似するアミノ酸が提供される保存的な置換の表は、当該分野で周知である。保存的な置換の１つの例は、次の群の１つのアミノ酸における同じ群の別のアミノ酸への交換である（米国特許第５，７６７，０６３号（Ｌｅｅらにより公表）；ＫｙｔｅおよびＤｏｏｌｉｔｔｌｅ（１９８２）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５７：１０５−１３２）。
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｃｙｓ、またはＭｅｔ；
（２）中性疎水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖の配位に影響する残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香性：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ；
（７）小アミノ酸：Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ
「有効量」は、意図された目的を達成するために十分な治療剤の量である。例えば、ＩＦＮγ産生を増強する方法のための組成物の有効量は、組成物が存在しないときの生成物のレベルと比較して、増大したＩＦＮγ産生をもたらすために十分な組成物の量である。障害、疾患、および医学的状態を処置するか、または改善するための有効量は、障害、疾患、および医学的状態の症候の減少、または完全な除去をもたらすために十分な量である。所定の治療剤の有効量は、因子（例えば、薬剤の性質、投与の経路、治療剤を受ける動物のサイズおよび種、および投与の目的）により異なる。各個々の場合において有効量は、当該分野で確立された方法に従って、当業者によって実験的に決定され得る。
【００３０】
細胞を物質に「曝露する」とは、その物質を細胞に対して直接的または間接的に提供することをいう。その物質は間接的に提供され得、例えば、その物質に変換されることが公知である、その物質の前駆体を提供することが挙げられる。例えば、標的細胞をＩＬ−２７に曝露することは、ＩＬ−２７タンパク質を含む組成物を、標的細胞に提供することによって、またはＩＬ−２７をコードする遺伝子（単数または複数）を標的細胞に導入することによって達成され得る。あるいは、標的細胞をＩＬ−２７に曝露することは、ＩＬ−２７をコードする遺伝子（単数または複数）を第二の細胞に導入し、標的細胞を第二の細胞と混合することによってもまた、達成され得る。
【００３１】
「発現」は、核酸（例えば、ｍＲＮＡ）の生合成、またはポリペプチドの生合成、および高分子の区分化における変化（例えば、核から細胞質への横断（ｔｒａｖｅｒｓａｌ）、形質膜への挿入、脱顆粒、または分泌）を包含する。細胞による高分子の発現または生成は、細胞において見出される量のみ（例えば、所定の時間ポイントにおける細胞ホモジネート）を含み得る。概して、この定義は、非分泌分子の発現に適用される。あるいは、細胞による高分子の発現または生成は、細胞において見出される量に加えて、例えば、細胞培地、または生物学的区分において分泌された量および蓄積された量を含む。概して、この定義は、分泌タンパク質または脱顆粒タンパク質（例えば、サイトカイン）に適用される。「レベル」は、生物学的区分を含む区分における濃度、例えば、所定の容量の例えば、血漿、血清、血液、間質液、脳脊髄液、または尿における濃度、器官全体または器官のフラグメントにおける濃度、器官の中の画分（例えば、赤脾臓、白脾臓、またはランゲルハンス島）における濃度、または特異的な細胞もしくは細胞群（例えば、マクロファージ）における濃度をいう。
【００３２】
「ハイパーカイン」は、操作されたヘテロ二量体サイトカイン、ホモ二量体サイトカイン、または多量体サイトカインであって、サイトカインの少なくとも２つのサイトカインポリペプチドサブユニットが共有結合で１つに結合している（Ｐｆｌａｎｚら（２００２）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １６：７７９−７９０）。
【００３３】
「免疫細胞」は、免疫系の細胞（例えば、Ｂ細胞、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、単球、マクロファージ、肥満細胞、好酸球、もしくは抗原提示細胞（ＡＰＣ）、または樹状細胞）である。文脈に依存して、免疫細胞は、免疫の媒介物を発現する任意の細胞でもあり得、文脈に依存して、サイトカインを発現する上皮細胞でもあり得る。
【００３４】
「細胞内微小器官」は、生細胞を占める単細胞器官または多細胞器官（例えば、ライフサイクルの一部または全体の間の宿主の生細胞）を含む。
【００３５】
「自己免疫」の障害、医学的状態、または疾患は、ヒトまたは動物の自身の免疫系による自己抗原の認識により特徴付けられる。自己免疫疾患としては、多発性硬化症、乾癬、グレーヴズ病、インスリン依存性Ｉ型糖尿病、悪性貧血、慢性関節リウマチ、甲状腺炎、糸状体腎炎、エリテマトーデス、シェーグレン症候群、アディソン病、慢性活動性肝炎、重症筋無力症、多発性筋炎／皮膚真菌症、原発性胆汁性肝硬変、強皮症、ブドウ膜炎および白斑が挙げられるが、これに限定されない。
【００３６】
障害、疾患、もしくは医学的状態を「有することが疑われる」ヒト被験体または動物被験体は、障害、疾患、または医学的状態を有するとまだ診断されていないが、１つ以上の障害の症候を示し、その障害についての遺伝的性質を有するか、またはその障害が再発しやすい場合、以前に障害について処置された被験体である。
【００３７】
「新生物」または「腫瘍」は、概して、顕著な質量を形成する異常な組織増殖であり、細胞増殖によって、正常の細胞増殖よりも早く増殖する。新生物は、正常組織との構造的組織化および機能的協調の部分的または全体的な欠如を示し得る。本明細書で用いられるとき、新生物は、造血性新生物および固形新生物を包含することが意図される。新生物は、良性（良性腫瘍）または悪性（悪性腫瘍またはガン）であり得る。悪性腫瘍は、大まかに、３つの主要な型に分類され得る。上皮組織から生じる悪性新生物は、癌腫と呼ばれ、結合組織（例えば、筋肉、軟骨、脂肪、または骨）が起源である悪性新生物は、肉腫と呼ばれ、そして免疫系の構成要素を含む造血組織（血球の形成に関する組織）に影響する悪性腫瘍は、白血病およびリンパ種と呼ばれる。他の新生物としては、神経線維腫症が挙げられるが、これに限定されない。
【００３８】
「核酸」は、一本鎖核酸ならびに一本鎖核酸およびその相補鎖の複合体からなる二本鎖核酸を包含する。本発明は、核酸を用いる方法を包含する（例えば、ＩＬ−２７のみ；ＩＬ−２のみ；ＩＬ−１２のみ；ＩＬ−１５のみ；ＩＬ−１８のみ；ＩＬ−２３のみ；ＩＬ−２７およびＩＬ−２；ＩＬ−２７およびＩＬ−１５；ＩＬ−２７およびＩＬ−１２；ＩＬ−２７およびＩＬ−２３；ＩＬ−２７およびＩＬ−１８；ＩＬ−２７、ＩＬ−２およびＩＬ−１８；ＩＬ−２７、ＩＬ−１５およびＩＬ−１８；ＩＬ−２７、ＩＬ−１２およびＩＬ−１８；ならびにＩＬ−２７、ＩＬ−２３、およびＩＬ−１８をコードする核酸を含有する発現ベクターに存在する）。本発明は、上の核酸で、ＩＬ−１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、またはＩＬ−２３の１つ以上もまたコードする核酸を用いる方法も、また提供する。上のサイトカインのすべてをコードする核酸を用いる方法もまた、含まれる。
【００３９】
本発明は、例えば、上の核酸のすべてが１つのベクターによってコードされる場合；１つの核酸が第一のベクターによってコードされる場合およびその残りの核酸が第二のベクターによってコードされる場合；ならびに、各核酸が分離したそれぞれのベクターおよび種々のそれらの組み合わせによってコードされる場合の問題を企図する。上のサイトカインを提供する方法であって、１つ以上のサイトカインがベクターによって提供される場合、および１つ以上のサイトカインがサイトカインポリペプチドによって直接的に提供される場合（例えば、ベクターおよびポリペプチドを含む組成物での処置）の方法もまた、企図される。企図された方法のベクターは、例えば、第一の核酸と作動可能に連結している第一のプロモーター；第二の核酸と作動可能に連結している第二のプロモーター；第三の核酸と作動可能に連結している第三のプロモーターなど、ならびに、第一および第二の核酸と作動可能に連結している第一のプロモーター、第一、第二、および第三の核酸と作動可能に連結している第一のプロモーターなどが挙げられる。
【００４０】
「処置または改善（ａｍｅｌｉｏｒａｔｉｎｇ）」は、障害、疾患、もしくは医学的状態の症状の減少または完全な除去を意味する。
【００４１】
（ＩＩ．概要）
本発明は、ＩＬ−２７を用いることによる免疫細胞由来のＩＦＮγ産生の増強の方法を提供する。従って、下に記載の通り、Ｔ細胞およびＮＫ細胞は、サイトカインによるＩＦＮγ産出のために刺激され得る。ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８およびＩＬ−２３は、単独または組み合わせで、ＩＦＮγ産生の刺激において最も効果的であることが、以前に示されている。細胞がＩＬ−２７に曝露される場合もまた、ＩＦＮγの産生は、相乗的に増強され、ＩＬ−２７が存在しない産生レベルと比較して１００倍に達する。従って、本発明は、効果的なＩＦＮγ産生の方法を提供する。
【００４２】
本方法は、インビトロまたはインビボで適用され得る。インビボでのＩＦＮγの産生を促進するために、ＩＬ−２７は、免疫細胞培養物に対して加えられ得、ＩＦＮγの収量を増加させる。好ましくは、少なくとも１つのさらなるサイトカイン（詳細には、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８および／またはＩＬ−２３）もまた、培養物に加えられる。このサイトカインは、好ましくはＩＬ−２７に加えて、ＩＬ−２（またはＩＬ−１５）のＩＬ−１２（またはＩＬ−２３またはＩＬ−１８）との組み合わせである。ＩＬ−２７は、ＩＬ−２（またはＩＬ−１５）、ＩＬ−１２（またはＩＬ−２３）およびＩＬ−１８の組み合わせに対して加えられ得る。ＩＬ−２７への応答において、ＩＦＮγ産生は、ＩＬ−２７なしのＩＦＮγのレベルを何倍も超えるまで増加することが予想され、好ましくは、少なくとも約５倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、７５倍、１００倍、２００倍、５００倍、７５０倍または１０００倍まで増加する。
【００４３】
本発明は、エキソビボにおいてＩＬ−２７を用いて細胞を処理する方法、またはＩＬ−２７および１種、２種、３種以上のサイトカインを用いて細胞を処理し、その後に被験体への処理細胞の導入が続く方法を提供する。例えば、細胞は、エキソビボにおいてＩＬ−２７、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、およびＩＬ−１８を用いて処理され得、その後にヒト被験体または動物被験体への細胞の導入が続く。
【００４４】
本発明はまた、細胞が、エキソビボにおいて、１種、２種、３種以上のサイトカインを用いて処理される方法、および被験体が、同じまたは異なった１種、２種、３種以上のサイトカインを用いて処置される方法もまた、提供する。例えば、本発明は、細胞が、エキソビボにおいてＩＬ−２７およびＩＬ−２を用いて処理され、そして被験体が、ＩＬ−１８を用いて処置される方法を提供する。あるいは、例えば、細胞が、エキソビボにおいてＩＬ−１８を用いて処理され、そして被験体がＩＬ−２７およびＩＬ−２を用いて処置される。
【００４５】
本方法は、動物（特に哺乳動物（例えば、ヒト、サル、類人猿、げっ歯動物、または農業用哺乳動物、または獣医学の被験体））においてＩＦＮγ産生を増強するために用いられ得る。従って、ＩＬ−２７は、当業者に公知の任意の方法（例えば、静脈内方法、皮下方法、筋肉方法、大脳方法、皮膚方法、眼方法、直腸方法、またはウイルスベクター方法）によって、動物に対して投与され得る。好ましくは、ＩＬ−２７は、少なくとも１つのさらなるサイトカイン、および薬学的に受容可能な賦形剤／キャリアもまた含有する薬学的組成物において投与される。このさらなるサイトカインは、好ましくは、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８および／またはＩＬ−２３、より好ましくは、ＩＬ−２（またはＩＬ−１５）のＩＬ−１２（またはＩＬ−２３またはＩＬ−１８）との組み合わせ、そして最も好ましくは、ＩＬ−２（またはＩＬ−１５）、ＩＬ−１２（またはＩＬ−２３）およびＩＬ−１８の組み合わせである。この組成物は、好ましくは、動物の血液ＩＦＮγレベルを少なくとも約５倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、７５倍、１００倍、２００倍、５００倍、７５０倍または１０００倍まで増強する。
【００４６】
ＩＦＮγは、主要なマクロファージ活性化サイトカインであり、先天免疫および特異的な細胞媒介性免疫において重要な機能を果たす。ＩＦＮγの放出によって、Ｔ細胞およびＮＫ細胞は、マクロファージを活性化し、食菌された微生物を殺傷する。従って、ＩＦＮγは、細菌感染（特に、細胞内微生物による感染）に対する防御において重要な役割を果たす。ＩＦＮγはまた、新生物細胞のＩ型ＭＨＣ発現を増加させ、それにより、新生物細胞の細胞傷害性Ｔ細胞による溶解に対する感受性を増加させる。さらに、ＩＦＮγは、ヘルパーＴ細胞のＴｈ１サブセットのサイン（ｓｉｇｎａｔｕｒｅ）サイトカインであり、Ｔｈ２応答よりむしろＴｈ１応答をもたらし、それによってＩｇＥ依存性アレルギー反応を阻害する。
【００４７】
本発明の研究は、ＩＬ−２７がＩＦＮγ産生を増強することを示し、ＩＬ−２７のためのレセプターであるＷＳＸ−１／ＴＣＣＲの破壊が、ＩＦＮγのより低い発現をもたらすことは公知である。従って、ＩＬ−２７のアンタゴニストは、インビボまたはインビトロにおいてＩＦＮγ産生を減少させるために用いられ得る。このアンタゴニストは、ＩＬ−２７、ｐ２８、またはＥＢＩ３に対する抗体またはそれらのフラグメントであり得る。さらに、アンタゴニストは、ＩＬ−２７の構造改変体もしくはムテイン、またはＩＬ−２７レセプターの改変体もしくはムテイン（例えば、可溶レセプター）を含み得、ＩＦＮγ発現を減少させ得る。
【００４８】
このアンタゴニストはまた、ＩＬ−２７ ｍＲＮＡに対して相補的なアンチセンス核酸（すなわち、ｐ２８またはＥＢＩ３に対するｍＲＮＡ）、またはＩＬ−２７Ｒ ｍＲＮＡに対して相補的なアンチセンス核酸、またはＲＮＡ核酸の干渉でもあり得る。
【００４９】
本発明はさらに、ＩＬ−２７アゴニストまたはＩＬ−２７アンタゴニストのためのスクリーニングの方法を提供する。アンタゴニストは、ＩＬ−２７のＩＦＮγ産生を増強する活性を阻害する能力に基づいて、スクリーニングされ得る。例えば、アッセイ系は、ＮＫ細胞がＩＬ−２７と接触し、ＩＦＮγ産生レベルを増加させる場合に確立され得る。次いで、試験化合物は、アッセイおよび測定されたＩＦＮγレベルに対して加えられる。ＩＦＮγ産生におけるＩＬ−２７の効果を、ＩＬ−２７の非存在下における基線ＩＦＮγ産生に影響することなく無効にする試験化合物は、おそらく特異的なＩＬ−２７アンタゴニストである。同様に、ＩＬ−２７のＩＦＮγ産生を増強する能力は、ＩＬ−２７アゴニストのためのアッセイ系において用いられ得る。
【００５０】
（ＩＩＩ．アンタゴニストおよびアゴニスト）
ＩＬ−２７の活性の遮断は、ＩＬ−２７アンタゴニスト（例えば、リガンドＩＬ−２７に対する抗体）、リガンドのサブユニットに対する抗体（例えば、抗ｐ２８抗体または抗ＥＢＩ３抗体）、ｐ２８およびＥＢＩ３の両方に対して結合する抗体、レセプターに対する抗体（例えば、ＷＳＸ−１、または可溶ＷＳＸ−１レセプタータンパク質）によって達成され得る。リガンド―レセプター相互作用を用いた干渉は、アンタゴニストの開発のための効果的な戦略であることを証明した。
【００５１】
リガンドによって媒介される活性をアンタゴナイズするための種々の方法（例えば、抗体を用いてリガンドを遮断すること、または抗体を用いてレセプターを遮断すること）が存在する。種々のエピトープが、各表面に存在し、それらの相互作用を遮断する（例えば、相互作用を遮断する立体障害を引き起こす）。抗体のリガンドに対して結合する能力、または抗体のレセプターに対して結合する能力は、必ずしも抗体がシグナル伝達をもまた遮断することを意味しない。すなわち、抗体は、シグナル伝達に関して検出可能な効果を有さなくてもよいか、または抗体は、アゴニストの抗体であり得る。別の方法は、リガンドムテインまたはレセプター結合活性を保持した改変体を用いることであるが、レセプターシグナル伝達を誘導しない。このムテインは、シグナル伝達リガンドの競合的インヒビターであり得る。
【００５２】
あるいは、低分子ライブラリーは、同定されたリガンド―レセプター対によって媒介される相互作用またはシグナル伝達を遮断し得る化合物について、スクリーニングされ得る。
【００５３】
本発明は、抗体または特定化されたサイトカインリガンド（好ましくは、哺乳動物（例えば、霊長類、ヒト、ネコ、イヌ、ラット、またはマウス））に対して特異的に結合する結合組成物の使用を提供する。抗体は、種々のサイトカインタンパク質に対して惹起され得、これらのサイトカインタンパク質としては、それらの天然に存在する（全長）形態またはそれらの組み換え形態の両方の形態の、個体改変体、多型改変体、対立遺伝子改変体、株改変体、または種改変体、およびそれらのフラグメントを含む。さらに、抗体は、それらの天然の（もしくは活性の）形態またはそれらの不活性の（例えば、変性した）形態の両方のレセプタータンパク質に対して惹起され得る。抗イディオタイプ抗体もまた、用いられ得る。
【００５４】
多くの免疫原は、リガンドまたはレセプタータンパク質と特異的に反応性である抗体を産生するために、選択され得る。組み換えタンパク質は、モノクローナルまたはポリクローナル抗体の産生についての好ましい免疫原である。適切な源（例えば、霊長類、げっ歯動物など）に由来する天然に存在するタンパク質はまた、純粋形態または不純形態のどちらかで用いられ得る。適切なタンパク質配列を用いて作製される合成ペプチドはまた、抗体の産生のための免疫原としても用いられ得る。組み換えタンパク質は、例えば、Ｃｏｌｉｇａｎら（編）（１９９５および定期的な補遺）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ；ならびにＡｕｓｕｂｅｌら（編）（１９８７および定期的な補遺）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｇｒｅｅｎｅ／Ｗｉｌｅｙ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹに記載されるように、真核細胞または原核細胞において発現され得、精製され得る。天然に折りたたまれた材料または変性した材料は、同様に抗体を産生するために用いられ得る。モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体のどちらかは、例えば、タンパク質を測定するためのイムノアッセイにおける後の使用のため、または免疫精製（ｉｍｍｕｎｏｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ）方法のために作成され得る。
【００５５】
ポリクローナル抗体を産生する方法は、当業者に周知である。代表的には、免疫原（好ましくは、精製タンパク質）は、アジュバントと混合され、動物はその混合物で免疫される。免疫原調製に対する動物の免疫応答は、試験出血を採取し、目的タンパク質に対する反応性の力価を決定することによりモニタリングされる。例えば、その免疫原に対して適切に高い力価の抗体が得られる場合、通常は繰り返し免疫の後に、動物から血液が収集され、抗血清が調製される。所望の場合、そのタンパク質に反応性の抗体を濃縮するために、さらなる抗血清の分画が、行われ得る。例えば、ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ；またはＣｏｌｉｇａｎを参照のこと。免疫はまた、他の方法（例えば、ＤＮＡベクター免疫）を介しても行われ得る。例えば、Ｗａｎｇら（１９９７）Ｖｉｒｏｌｏｇｙ ２２８：２７８−２８４を参照のこと。
【００５６】
モノクローナル抗体は、当業者によく知られた種々の手法により得られ得る。代表的には、所望される抗原で免疫された動物由来の脾臓細胞が、一般的にはミエローマ細胞を用いた融合により不死化される。ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ（１９７６）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６：５１１−５１９を参照のこと。不死化の代替方法としては、エプスタインバーウイルスを用いた形質転換、ガン遺伝子、もしくはレトロウイルス、または当該分野で公知の他の方法が挙げられる。例えば、Ｄｏｙｌｅら（編）（１９９４および定期的な補遺）Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ：Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹを参照のこと。単一の不死化細胞から生じたコロニーは、抗原に対する所望される特異性および親和性の抗体の産生についてスクリーニングされる。そのような細胞によって産生されるモノクローナル抗体の収量は、種々の手法により増強され得、その手法は、脊椎動物宿主の腹膜腔への注射を含む。あるいは、モノクローナル抗体またはそれらの結合フラグメントをコードするＤＮＡ配列を、例えば、Ｈｕｓｅら、（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４６：１２７５−１２８１によって概説された一般的プロトコルに従って、ヒトＢ細胞由来のＤＮＡライブラリーをスクリーニングすることにより単離し得る。
【００５７】
抗体または結合組成物は、リガンドまたはレセプタータンパク質の所定のフラグメントに対する結合フラグメントおよび単鎖版を含み、これらは、キャリアタンパク質を含むフラグメントの接合体を用いた動物の免疫によって惹起され得る。モノクローナル抗体は、所望の抗体を分泌する細胞から調製される。これらの抗体は、正常タンパク質または欠損タンパク質に対する結合についてスクリーニングされ得る。抗体または結合組成物は、通常は、少なくとも約１０−３ＭのＫＤで結合し、より通常には少なくとも１０−６Ｍ、代表的には少なくとも１０−７Ｍ、より代表的には少なくとも１０−８Ｍ、好ましくは少なくとも１０−９Ｍ、およびより好ましくは少なくとも１０−１０Ｍ、および最も好ましくは少なくとも１０−１１Ｍである（例えば、Ｐｒｅｓｔａら，（２００１）Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔ．８５：３７９−３８９；Ｙａｎｇら，（２００１）Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｏｎｃｏｌ．Ｈｅｍａｔｏｌ．３８：１７−２３；Ｃａｒｎａｈａｎら，（２００３）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．（補遺）９：３９８２ｓ−３９９０ｓを参照のこと）。
【００５８】
いくつかの例において、種々の哺乳動物宿主（例えば、マウス、げっ歯動物、霊長類、ヒトなど）からモノクローナル抗体（ｍＡｂ）を調製することが望ましい。このようなモノクローナル抗体を調製するための技術の説明は、例えば、Ｓｔｉｔｅｓら（編）Ｂａｓｉｃ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（第４版）Ｌａｎｇｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｌｏｓ Ａｌｔｏｓ、ＣＡ、およびそこに引用される参照；ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，ＣＳＨ Ｐｒｅｓｓ；Ｇｏｄｉｎｇ（１９８６）Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ（第２版）Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ；ならびに特に、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ（１９７５）Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５−４９７（これは、モノクローナル抗体を作成する１つの方法を考察する）において見出され得る。手短に要約すると、この方法は、免疫原を動物に注射することに関与する。次いで、その動物は屠殺され、その動物の脾臓から細胞が採取される。次いで、それらの細胞は、ミエローマと融合される。この結果は、インビトロでの再生が可能なハイブリッド細胞または「ハイブリドーマ」である。次いで、ハイブリドーマの集団はスクリーニングされ、各々が免疫原に対する単一の抗体種を分泌する別個のクローンを単離する。このように、得られた別個の抗体種は、不死化してクローニングされた単一のＢ細胞の生成物であり、それは、免疫原物質上で認識される特異的部位に対する反応において作成された免疫動物に由来する。
【００５９】
本発明のポリペプチドおよび抗体は、改変と共にか、または改変なしに用いられ得、キメラ抗体またはヒト化抗体を含む。多くの場合、そのポリペプチドおよび抗体は、検出可能なシグナルを提供する物質を、共有結合または非共有結合のどちらかで連結することによって標識される。多種多様のラベルおよび接合技術は、公知であり、科学文献および特許文献の両方において広く報告されている。適切なラベルとしては、放射性核種、酵素、基質、補因子、インヒビター、蛍光成分、化学発光成分、磁気粒子などが挙げられる。このような標識の使用を教示する特許としては、米国特許第３，８１７，８３７号；同第３，８５０，７５２号；同第３，９３９，３５０号；同第３，９９６，３４５号；同第４，２７７，４３７号；同第４，２７５，１４９号；および同第４，３６６，２４１号が挙げられる。組み換え免疫グロブリンもまた、生成され得る（Ｃａｂｉｌｌｙ，米国特許第４，８１６，５６７号；およびＱｕｅｅｎら，（１９８９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：１００２９−１００３３を参照のこと）；また、トランスジェニックマウスにおいても作製され得る（Ｍｅｎｄｅｚら，（１９９７）Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ １５：１４６−１５６を参照のこと）；Ａｂｇｅｎｉｘ ａｎｄ Ｍｅｄａｒｅｘ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓもまた、参照のこと。
【００６０】
概して、モノクローナル抗体は、ヒト供給源ではなくて非ヒト供給源に由来する（ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ，ｐｐ．１３９−２４３）。非ヒト供給源の使用は、モノクローナル抗体の治療有効性を制限し得る。マウスまたは他の非ヒト供給源に由来する抗体は、免疫応答、エフェクター機能の弱い漸増、および血流からの迅速なクリアランスを誘発する所望されない性質を有し得る（Ｂａｃａら，（１９９７）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８−１０６８４）。これらの理由のために、ヒト化により治療抗体を調製することが所望され得る。
【００６１】
「ヒト化抗体」とは、非ヒト起源（例えば、げっ歯動物）の抗原結合領域、およびヒト起源の免疫グロブリンの少なくとも一部（例えば、ヒトフレームワーク領域、ヒト定常領域、またはそれらの一部分）を含む抗体を意味する（例えば、米国特許第６，３５２，８３２号を参照のこと）。
【００６２】
ヒト化抗体は、親のマウス抗体の６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）由来のアミノ酸配列を含み、それはヒト抗体フレームワークに融合されている。ヒト化抗体における非ヒト配列の含有量は、好ましくは低く、すなわち約５％である（Ｂａｃａら，（１９９７）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８−１０６８４）。最適な結合を達成するために、ヒト化抗体は、繊細な調節を必要とし得、それは、通常はＣＤＲの立体構造の支持に関連する特定のフレームワークアミノ酸を、親のマウス抗体において見出されるもとの対応するアミノ酸に変更することによる。概してもとの親のアミノ酸に変更されるフレームワークアミノ酸は、ＣＤＲループの立体構造の支持に関連するアミノ酸である（Ｃｈｏｔｈｉａら，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３４２：８７７−８８３；ＦｏｏｔｅおよびＷｉｎｔｅｒ（１９９２）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２４：４８７−４９９）。抗原結合に最も多くの場合影響するフレームワーク残基は、比較的に小さく、１１残基と同じくらい小さくあり得る（Ｂａｃａら，（１９９７）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８−１０６８４）。
【００６３】
ヒト化抗体は、すべての型の定常領域を有する抗体を含み、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＡおよびＩｇＥ、ならびに任意のアイソタイプが挙げられ、それとしては、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４が挙げられる。ヒト化抗体が細胞障害活性を示すことが所望される場合、その定常ドメインは、通常は補体固定定常ドメインであり、そのクラスは、代表的にはＩｇＧ１である。そのような細胞障害活性が所望されない場合、定常ドメインはＩｇＧ２クラスの定常ドメインであり得る。そのヒト化抗体は、１つのクラスまたはアイソタイプより多くからの配列を含み得る（Ｖａｓｑｕｅｚらに発行された、米国特許第６，３２９，５１１号）。ファージディスプレー技術は、高い結合親和性を有する抗体をスクリーニングし、選択するために用いられ得る（ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＣｈａｍｅｓ（２０００）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ ２１：３７１−３７７；Ｂａｒｂａｓら，（２００１）Ｐｈａｇｅ Ｄｉｓｐｌａｙ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ；Ｋａｙら，（１９９６）Ｐｈａｇｅ Ｄｉｓｐｌａｙ ｏｆ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）。
【００６４】
抗体はまた、ファージディスプレー方法またはトランスジェニックマウス中に含まれるヒト抗体ライブラリーを用いて、調製され得るか、または設計され得る（例えば、ｄｅ Ｂｒｕｉｎら，（１９９９）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １７：３９７−３９９；Ｖａｕｇｈａｎら，（１９９６）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １４：３０９−３１４；Ｂａｒｂａｓ（１９９５）Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １：８３７−８３９；Ｍｅｎｄｅｚら，（１９９７）Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ １５：１４６−１５６；Ｈｕｓｅら，（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４６：１２７５−１２８１；Ｗａｒｄら，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４−５４６を参照のこと）。
【００６５】
抗体は、単なる特異的結合組成物の一形態に過ぎない。他の結合組成物は、多くの場合類似の用途を有し、リガンドまたはレセプターに対して特異的に結合する分子を含む（例えば、結合パートナー−結合パートナー様式、抗体−抗原相互作用において、または共有結合か非共有結合のどちらかでの天然の生理学的関連のタンパク質−タンパク質相互作用（例えば、所望のタンパク質と特異的に関係するタンパク質）において）。この分子は、ポリマーであり得るか、または化学試薬であり得る。機能的アナログは、構造改変を有するタンパク質であり得るか、または構造的に無関係の分子（例えば、適切な結合決定基と相互作用する分子形状を有する分子）であり得る。本発明の抗体結合化合物は、結合フラグメントを含み、重要な診断価値または治療価値を有し得る。それらは、非中和結合化合物として有用であり得、毒素または放射性核種に対して結合し得、従って、結合化合物が抗原に対して結合する場合、例えば、細胞の表面で抗原を発現する細胞を殺傷する。さらに、これらの結合化合物は、直接的にか、もしくはリンカーによって間接的に、薬物または他の治療剤と接合し得、そして薬物の標的化に影響し得る。
【００６６】
アゴニストとしては、ＩＬ−２７、保存的に改変された改変体またはそれらのムテイン、それらのフラグメント、およびキメラアナログが挙げられる。これらのポリペプチドは、レセプターシグナル伝達を誘導するために用いられ得る。
【００６７】
（ＩＶ．治療組成物；診断組成物；方法）
本発明は、ＩＬ−２７ならびにＩＬ−１２、ＩＬ−２、ＩＬ−２３、ＩＬ−１５、およびＩＬ−１８から選択される少なくとも１つの他のサイトカインのアゴニストを用いて、例えば、感染（細胞内病原体を含む）、ガンおよび腫瘍、細胞増殖、ウイルス感染、炎症障害、または自己免疫障害を処置するための方法を提供する。
【００６８】
ＩＬ−２７ならびにＩＬ−１２、ＩＬ−２、ＩＬ−２３、ＩＬ−１５、およびＩＬ−１８から選択される少なくとも１つのサイトカインのアゴニストのアンタゴニストを用いて、例えば、感染（細胞内病原体を含む）、ガンおよび腫瘍、細胞増殖、ウイルス感染、炎症障害、または自己免疫障害を処置するための方法もまた、提供される。
【００６９】
アゴニストを用いる上の方法は、ＩＦＮγ発現の刺激または増強について（例えば、腫瘍のような、ＩＦＮγによって処置可能な障害について）企図される。
【００７０】
アンタゴニストを用いる上の方法は、ＩＦＮγ発現または濃度の阻害または減少について企図される。それは、例えば、ＴＨ１型障害または増大するＩＦＮγ産生と関連する障害（例えば、乾癬、ブドウ膜網膜炎、多発性硬化症、クローン病、全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、橋本甲状腺炎、およびグレーヴス病）を処置するためである（例えば、Ｓｔｅｉｎｍａｎ（２００１）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：５９７−６００；Ｍｉｚｕｇｕｃｈｉら，（２００２）Ａｒｃｈ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｈｅｒ．Ｅｘｐ．（Ｗａｒｓｚ）５０：２４３−２５４；Ｒｏｔｏｎｄｉら，（２００３）Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｉｎｖｅｓｔ．２６：１７７−１８０；Ａｓａｄｕｌｌａｈら，（１９９９）Ｄｒｕｇｓ Ｔｏｄａｙ （Ｂａｒｃ）３５：９１３−９２４；Ｇｈｏｒｅｓｃｈｉら，（２００３）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．８１：４７１−４８０；ＢｏｕｍａおよびＳｔｒｏｂｅｒ（２００３）Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｓ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３：５２１−５３３；Ｔｏｍｉｔａら，（２００１）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｒｅｓ．６４：２６−３３；Ｒｉｃｈａｒｄｓら，（２００１）Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ．６０：２１７３−２１８０を参照のこと）。
【００７１】
上のアゴニストまたはアンタゴニストを用いて、自己免疫障害および炎症障害（例えば、多発性硬化症、繊維症、慢性関節リウマチ、甲状腺炎、狼瘡、乾癬、糖尿病、および炎症性腸疾患（ＩＢＤ）（クローン病、潰瘍性大腸炎およびスプルーを含む））を処置するための方法もまた、提供される。
【００７２】
ここで留意すべきは、増大したレベルのＩＦＮγは、コラーゲン誘導関節炎（ＣＩＡ）および実験的自己免疫脳炎（ＥＡＥ）において、保護または改善と関連する一方、減少したレベルは、実験的狼瘡および実験的糖尿病において、保護または改善と関連するということ、ならびにクローン病は、ＴＨ１型疾患であり、増大したＩＦＮγと関連する一方、潰瘍性大腸炎は、ＴＨ２型疾患であるということである。
【００７３】
上のアゴニストまたはアンタゴニストを用いて、肺の炎症または免疫障害（例えば、ぜん息、アレルギー、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）および特発性肺線維症）を処置するための方法が、提供される（例えば、Ｉｋｅｄａら，（２００２）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ａｎｄ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｖｓ．１３：９５−１０９；Ｍａｔｔｈｙｓら，（２０００）Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ Ｂｉｏｌ．６８：４４７−４５４；ＹｏｕｎｅｓおよびＡｍｓｄｅｎ（２００２）Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉ．９１：２−１７；Ｆｒｕｃｈｔら，（２００１）ＴＲＥＮＤＳ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２：５５６−５６０；Ｂｏｕｍａ，（前出）；Ｋｌｉｍｐら，（２００２）Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｏｎｃｏｌ．Ｈｅｍａｔｏｌ．４４：１４３−１６１；ＡｇｇａｒｗａｌおよびＢｅｈｅｒａ（２０００）Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．１：１４２３−１４２７；ＤｏｒｍａｎおよびＨｏｌｌａｎｄ（２０００）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｖｓ．１１：３２１−３３３；ＢｕｓｓｅおよびＲｏｓｅｎｗａｓｓｅｒ（２００３）Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１１：Ｓ７９９−Ｓ８０４；ＳｋｕｒｋｏｖｉｃｈおよびＳｋｕｒｋｏｖｉｃｈ（２００３）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．５：５２−５７を参照のこと）。
【００７４】
本発明は、例えば、Ｔ細胞、単球／マクロファージ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞、抗原提示細胞（ＡＰＣ）（樹状細胞、Ｂ細胞、好中球、および血管内皮細胞を含む内皮細胞を含む）の活性化、発生、または増殖を調節するための方法を提供する。ＭＨＣクラスＩおよびＭＨＣクラスＩＩの発現を調節する方法、ＴＨ１反応、ＴＨ２反応を調製する方法、ならびにＩｇＥ発現を調節する方法もまた、提供される。
【００７５】
本発明のアンタゴニストおよび／もしくはアゴニストは、単独、または別のこれらもしくは付随的な経路のインヒビターもしくはアゴニスト；または症候の処置のために用いられる他の化合物（例えば、アンタゴニスト、もしくは糖質コルチコイドのようなステロイド）と組み合わせて投与され得る。診断方法としては、予後の予測；特定の治療経過に対して反応するか、または反応しない患者の部分集合の定義付け；障害またはこれらの障害のサブタイプと関連する免疫もしくはガンの診断；または治療に対する評価反応のような局面が挙げられる。
【００７６】
処置、治療、または診断は、アゴニストもしくはアンタゴニストの直接投与によって、またはアゴニストもしくはアンタゴニストをコードする核酸の投与によって達成され得る。このアゴニストまたはアンタゴニストは、抗体から生じた結合組成物、抗体、またはＩＬ−２７もしくはＩＬ−２７Ｒを特異的に結合する抗体フラグメント、ＩＬ−２７ムテインもしくは改変体、アンチセンス核酸、干渉ＲＮＡ、またはアゴニストもしくはアンタゴニストをコードする核酸を発現するベクターを含む（例えば、ＡｒｅｎｚおよびＳｃｈｅｐｅｒｓ（２００３）Ｎａｔｕｒｗｉｓｓｅｎｓｃｈａｆｔｅｎ ９０：３４５−３５９；ＳａｚａｎｉおよびＫｏｌｅ（２００３）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１２：４８１−４８６；Ｐｉｒｏｌｌｏら，（２００３）Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ９９：５５−７７；Ｗａｎｇら，（２００３）Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌ．１３：１６９−１８９を参照のこと）。
【００７７】
抗体、それらの結合組成物、サイトカインアゴニスト、もしくは低分子アンタゴニストを含む薬学的組成物または無菌組成物を調製するために、その構成要素は、薬学的に受容可能なキャリアまたは賦形剤（好ましくは、不活性）と混合される。このような薬学的組成物の調製は、当該分野に公知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ａｎｄ Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｒｎａｃｏｐｅｉａ：Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ（１９８４）を参照のこと。
【００７８】
抗体、結合組成物、またはサイトカインは、通常は非経口で、好ましくは静脈内に投与される。そのようなタンパク質またはペプチドは、免疫原になり得るので、それらは、好ましくはゆっくりと、従来のＩＶ投与セットまたは皮下蓄積のどちらかで、例えば、Ｔｏｍａｓｉら，米国特許第４，７３２，８６３号に教示されるように投与される。免疫反応を最小限にする方法が、適用され得る。低分子構成要素は、経口で活性であり得る。
【００７９】
非経口で投与される場合、その生物製剤は、薬学的に受容可能な非経口ビヒクルとの関連において単位投薬量の注射用形態（溶液、懸濁液、エマルジョン）に処方される。そのような溶媒は、代表的には、本質的に無毒性であり、非治療性である。治療は、水、生理食塩水のような水溶性ビヒクル中で、または種々の添加剤および／もしくは希釈剤を含むか、または含まない緩衝化ビヒクル中で投与され得る。あるいは、懸濁液（例えば、亜鉛懸濁液）は、ペプチドを含むように調製され得る。そのような懸濁剤は、皮下（ＳＱ）注射または筋肉内（ＩＭ）注射のために有用であり得る。生物製剤と添付剤との比率は、両方が有効量中に存在する限りは、広い範囲にわたって変動し得る。
好ましくはこの抗体は、凝集物、他のタンパク質、内毒素を実質的に含まない精製された形態で、約５〜３０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは１０〜２０ｍｇ／ｍｌの濃度で処方される。好ましくは、内毒素のレベルは、２．５ＥＵ／ｍｌ未満である。例えば、Ａｖｉｓら、（編）（１９９３）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ、第二版、Ｄｅｋｋｅｒ、ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら（編）（１９９０）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｔａｂｌｅｔｓ，第二版、Ｄｅｋｋｅｒ、ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら（編）（１９９０）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｄｉｓｐｅｒｓｅ Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｄｅｋｋｅｒ、ＮＹ；Ｆｏｄｏｒら（１９９１）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５１：７６７−７７３、Ｃｏｌｉｇａｎ（編）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ；Ｈｏｏｄら（１９８４）Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｐｅａｒｓｏｎ、Ｕｐｐｅｒ Ｓａｄｄｌｅ Ｒｉｖｅｒ、ＮＹ；Ｐａｕｌ（編）（１９９９）Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、第四版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａ．、ＰＡ；Ｐａｒｃｅら（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４６：２４３−２４７；Ｏｗｉｃｋｉら（１９９０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８７：４００７−４０１１；ならびにＢｌｕｎｄｅｌｌおよびＪｏｈｎｓｏｎ（１９７６）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒａｐｈｙ、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照のこと。
【００８０】
治療のための投与レジメの選択は、いくつかの要因（構成要素の血清のターンオーバー速度または組織のターンオーバー速度）、症状のレベル、構成要素の免疫原性、および標的細胞の接近可能性、投与の時期などに依存する。好ましくは、投与レジメは、患者へ送達される治療剤の量を最大にし、この容量は副作用の受容可能なレベルと一致する。従って、生物学的に送達される用量は、特定の構成要素および処置される状態の重篤度一部依存する。適切な抗体用量の選択における手引きは、例えば、ＢａｃｈらＦｅｒｒｏｎｅら、（編）（１９８５）Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、Ｎｏｇｅｓ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｐａｒｋ Ｒｉｄｇｅ、ＮＪ中の２２章、；およびＨａｂｅｒら（編）（１９７７）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｉｎ Ｈｕｍａｎ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ、Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ（Ｒｕｓｓｅｌｌ、ページ３０３−３５７、ならびにＳｍｉｔｈら、ページ３６５−３８９）に見出される。あるいは、サイトカインおよび低分子の用量は、標準的な方法論を使用して決定される。
【００８１】
適切な用量の決定は、臨床医により、例えば、処置に影響を及ぼすかまたは処置に影響を及ぼすと予測される当該分野において公知のもしくは推測されるパラメーターまたは因子を使用してなされる。一般に、この用量は、最適の用量よりもいくらか少ない量で始め、その後任意の負の副作用に対して所望される効果または最適な効果が得られるまで、小さな増加率で増加させられる。重要な診断測定としては、症状（例えば、炎症または産生された炎症性サイトカインのレベル）の測定が挙げられる。好ましくは、使用される生物学製剤は、処置の標的とされる動物と同一の種に由来し、このためこの試薬に対する体液性応答を最小化する。
【００８２】
リガンドまたはレセプターに特異的に結合する抗体またはそのフラグメントについての１週間の総用量の範囲は、体重１ｋｇあたり一般に約１０μｇから、より一般に約１００μｇから、代表的に約５００μｇから、より代表的に約１０００μｇから、好ましくは約５ｍｇから、およびより好ましくは約１０ｍｇからの範囲である。一般にこの範囲は、体重１ｋｇあたり１００ｍｇより少なく、好ましくは約５０ｍｇより少なく、およびより好ましくは約２５ｍｇより少ない。アゴニスト治療剤または低分子治療剤は、同様のモル濃度で使用され得る。
【００８３】
サイトカインレセプター媒介性シグナルのアンタゴニスト（例えば、抗体または結合フラグメント）の１週間の用量範囲は、体重１ｋｇあたり約１μｇから、好ましくは少なくとも約５μｇから、およびより好ましくは少なくとも約１０μｇからの範囲である。一般に、この範囲は、体重１ｋｇあたり約１０００μｇより少なく、好ましくは約５００μｇより少なく、そしてより好ましくは約１００μｇより少ない。投薬は、望まれる処置に影響を及ぼしかつより短期間またはより長期間の周期的なものであり得るスケジュール通りである。一般に、範囲は、体重１ｋｇあたり少なくとも約１０μｇ〜約５０ｍｇ、好ましくは約１００μｇ〜約１０ｍｇである。サイトカインアゴニスト治療剤または低分子治療剤は代表的に同様のモル濃度の用量で使用されるが、これらはより小さい分子量を有するようであるので、より小さい重量の用量を有する。
【００８４】
本発明はまた、公知の治療法（例えば、ワクチン、ステロイド（特にグルココルチコイド、これは症状（例えば、炎症に関連する）を緩和する）、または抗体、または抗感染薬）との組合せにおける生物製剤の投与を提供する。グルココルチコイドについての１日の投薬量は、１日あたり少なくとも約１ｍｇから、一般に少なくとも約２ｍｇ、そして好ましくは少なくとも約５ｍｇの範囲である。一般に、この投薬量は、１日あたり約１００ｍｇより少なく、代表的に約５０ｍｇより少なく、好ましくは約２０ｍｇより少なく、およびより好ましくは少なくとも約１０ｍｇである。一般に、この範囲は、１日あたり少なくとも約１ｍｇ〜約１００ｍｇ、好ましくは約２ｍｇ〜５０ｍｇである。用語「有効量」は、病状の症状または徴候を改善させるのに充分な量を意味する。代表的な哺乳動物宿主としては、マウス、ラット、ネコ、イヌ、およびヒトを含む霊長類が挙げられる。特定の患者のための有効量は、例えば処置されるべき状態、患者の総合的な健康状態、投与の方法経路および用量ならびに副作用の重篤度などの要因に依存して変動し得る。組合せにおける場合、有効量は、成分の組合せに対する比率であり、そしてこの効果は、個々の成分のみに限定されない。
【００８５】
治療的有効量は、代表的に少なくとも約１０％まで；通常は少なくとも約２０％まで；好ましくは少なくとも約３０％；またはより好ましくは少なくとも約５０％症状を減少させる。本発明は、試薬を提供し、この試薬は、本明細書中の他のところで記載したように（例えば、上記の徴候に関連する障害の処置についての概説的な説明において）、治療用途における使用法を見出す（Ｂｅｒｋｏｗ（編）Ｔｈｅ Ｍｅｒｃｋ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏ．，Ｒａｈｗａｙ、Ｎ．Ｊ．；Ｂｒａｕｗａｌｄら、（編）（２００１）Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，第１５版，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，ＮＹ；Ｇｉｌｍａｎら、（編）（１９９０）Ｇｏｏｄｍａｎ ａｎｄ Ｇｉｌｍａｎ’ｓ：Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｅｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第８版、Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１７版（１９９０）、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐｅｎｎ；Ｌａｎｇｅｒ（１９９０）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７−１５３３；Ｍｅｒｃｋ Ｉｎｄｅｘ、Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏ．、Ｒａｔｈｗａｙ、Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ；およびＰｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ Ｄｅｓｋ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ（ＰＤＲ）；Ｃｏｔｒａｎら、（編）、前述；およびＤａｌｅおよびＦｅｄｅｒｍａｎ（編）（２０００）Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈｅａｌｔｈｅｏｎ／ＷｅｂＭＤ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ）。
【００８６】
本発明の広範な範囲は、以下の実施例に関連して最も理解され、この実施例は、本発明を特定の実施形態に限定することを意図しない。
【実施例】
【００８７】
（実施例）
（Ｉ．一般的な方法）
多数の以下の標準的な方法を記載し、参照する（例えば、Ｍａｎｉａｔｉｓら、（１９８２）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ、Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｐｒｅｓｓ、ＮＹ；Ｓａｍｂｒｏｏｋら（１９８９）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（第二版）１−３巻、ＣＳＨ Ｐｒｅｓｓ、ＮＹ；Ａｕｓｕｂｅｌら、Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ、Ｂｒｏｏｋｌｙｎ、ＮＹ；またはＡｕｓｕｂｅｌら（１９８７および補遺）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｗｉｌｅｙ／Ｇｒｅｅｎｅ、ＮＹ；Ｉｎｎｉｓら（編）（１９９０）ＰＣＲ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：Ａ Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、ＮＹ）。タンパク質精製のための方法としては、硫安塩析精製、カラムクロマトグラフィー、電気泳動、遠心分離、結晶化などが挙げられる。例えば、Ａｕｓｂｅｌら（１９８７および定期的な補遺）；Ｄｅｕｔｓｃｈｅｒ（１９９０）「Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ」Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、１８２巻およびこのシリーズの他の巻；Ｃｏｌｉｇａｎら（１９９５および補遺）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ；Ｐ．Ｍａｔｓｕｄａｉｒａ（編）（１９９３）Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｍｉｃｒｏｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ；ならびにタンパク質精製生成物の使用における製造者（例えば、Ｐｈａｒｍａｃｉａ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ、またはＢｉｏ−Ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｈｅｒｃｕｌｅｓ、ＣＡ）の指示書を参照のこと。組換え技術との組み合わせは、適切なセグメント（エピトープタグ）（例えば、ＦＬＡＧ配列、または例えばプロテアーゼ除去可能配列を介して融合し得る等価物）に対して融合することを可能にする。例えば、Ｈｏｃｈｕｌｉ（１９８９）Ｃｈｅｍｉｓｃｈｅ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅ １２：６９−７０；Ｓｅｔｌｏｗ（編）Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ １２：８７−９８、Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ、ＮＹ、中のＨｏｃｈｕｌｉ（１９９０）「Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｗｉｔｈ Ｍｅｔａｌ Ｃｈｅｌａｔｅ Ａｂｓｏｒｂｅｎｔ」；およびＣｒｏｗｅら（１９９２）ＱＩＡｅｘｐｒｅｓｓ：Ｔｈｅ Ｈｉｇｈ Ｌｅｖｅｌ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ＆ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ、ＱＩＡＧＥＮ，Ｉｎｃ．，Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ、ＣＡ．を参照のこと。
【００８８】
標準的な免疫学的技術は、例えば、Ｈｅｒｔｚｅｎｂｅｒｇら（編）（１９９６）Ｗｅｉｒ’ｓ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １−４巻、Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ、Ｍａｌｄｅｎ、ＭＡ；Ｃｏｌｉｇａｎ（１９９１）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｗｉｌｅｙ／Ｇｒｅｅｎｅ、ＮＹ；ならびにＭｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ ７０巻、７３巻、７４巻、８４巻、９２巻、９３巻、１０８巻、１１６巻、１２１巻、１３２巻、１５０巻、１６２巻、および１６３巻中に記載される）。サイトカインアッセイは、例えば、Ｔｈｏｍｓｏｎ（編）（１９９８）Ｔｈｅ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｈａｎｄｂｏｏｋ（第三版）Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ；Ｍｉｒｅ−ＳｌｕｉｓおよびＴｈｏｒｐｅ（１９９８）Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ；ＭｅｔｃａｌｆおよびＮｉｃｏｌａ（１９９５）Ｔｈｅ Ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ Ｃｏｌｏｎｙ Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ Ｆａｃｔｏｒｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｕｎｉｖ．Ｐｒｅｓｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＵＫ；ならびにＡｇｇａｒｗａｌおよびＧｕｔｔｅｒｍａｎ（１９９１）Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ、Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ、Ｍａｌｄｅｎ、ＭＡ中に記載される。
【００８９】
血管の生物学的活性についてのアッセイは、当該分野で周知である。これらは、腫瘍組織または他の組織における脈管形成活性および脈管形成阻害（ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｃ）活性（例えば、動脈性平滑筋の増殖（例えば、Ｋｏｙａｍａら（１９９６）Ｃｅｌｌ ８７：１０６９−１０７８を参照のこと）、血管上皮に付着する単核細胞（例えば、ＭｃＥｖｏｙら（１９９７）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８５：２０６９−２０７７；Ｒｏｓｓ（１９９３）Ｎａｔｕｒｅ ３６２：８０１−８０９；ＲｅｋｈｔｅｒおよびＧｏｒｄｏｎ（１９９５）Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１４７：６６８−６７７；Ｔｈｙｂｅｒｇら（１９９０）Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ １０：９６６−９９０；Ｇｕｍｂｉｎｅｒ（１９９６）Ｃｅｌｌ ８４：３４５−３５７を参照のこと）を含む。
【００９０】
神経細胞の生物学的な活性についてのアッセイは、例えば、Ｗｏｕｔｅｒｌｏｏｄ（編集、１９９５）Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ Ｍｏｄｕｌｅｓ １０，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ；Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ；およびＮｅｕｒｏｍｅｔｈｏｄｓ Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ、ＮＪ．中に記載される。発生学的な系の方法論は、例えば、Ｍｅｉｓａｍｉ（編）Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ；およびＣｈｒｉｓｐｅｅｌｓ（編）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｉｎ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ中に記載される。
【００９１】
ＦＡＣＳ分析は、Ｍｅｌａｍｅｄら（１９９０）Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ａｎｄ Ｓｏｒｔｉｎｇ，Ｗｉｌｅｙ−Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ；Ｓｈａｐｉｒｏ（１９９８）Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｒｙ，Ｌｉｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ；およびＲｏｂｉｎｓｏｎら（１９９３）Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ Ｍｅｔｈｏｄｓ、Ｗｉｌｅｙ−Ｌｉｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ．中に記載される。
【００９２】
（ＩＩ．ＩＦＮγの誘導）
中和化抗ＩＬ−２ ｍＡｂの存在下でＩＦＮγの産生を誘導するヒトＩＬ−２７およびマウスＩＬ−２７の能力を、抗ＣＤ３を介した同時刺激により、または抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８を用いた同時刺激により測定した。細胞を、ＩＬ−１２の非存在下および存在下で処理した。
【００９３】
ヒトＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＡ Ｔ細胞の試験において、ｈＩＬ−２７およびｈＩＬ−１２のそれ自体でＩＦＮγ産生を誘導しなかった。ここで細胞をまた、抗ＣＤ３または抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８により処理した。ＩＬ−２７およびＩＬ−１２の両方の存在下においてのみ検出可能なＩＦＮγ産生が存在し、これはＩＬ−２７とＩＬ−１２との間の強い相乗効果を示している。
【００９４】
選別したマウスＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＢ高未処理Ｔ細胞の試験もまた、ＩＬ−２７とＩＬ−１２との間の相乗効果を示した。選別したマウスＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＢ高未処理Ｔ細胞を、４日間、抗ＣＤ３ｍＡｂのみを用いて、または抗ＣＤ３ｍＡｂ／抗ＣＤ２８ｍＡｂならびに飽和量のＩＬ−２７および／もしくはＩＬ−１２を用いて刺激した。抗ＣＤ３のみ（抗ＣＤ２８刺激無し）を用いることにより、それ自体によるＩＬ−２７およびＩＬ−１２のいずれも、相当量のＩＦＮγを誘導し得なかった。しかし、ＩＬ−２７およびＩＬ−１２の組み合わせは、ＩＦＮγを約３００ｎｇ／ｍｌまで誘導した。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８同時刺激を用いることにより、ＩＬ−２７のみおよびＩＬ−１２のみは、ＩＦＮγ産生を誘導し得た。ＩＬ−２７とＩＬ−１２との両方の組合せは、約５５０ｎｇ／ｍｌまでのレベルでＩＦＮγ産生を伴う相加的な効果を導いた。
【００９５】
本発明の研究は、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞によるＩＦＮγの産生へのＩＬ−２７の効果を調べた。抗ＣＤ５６でコーティングしたマイクロビーズ（Ｍｉｌｔｅｎｙｅ， Ａｕｂｕｒｎ，ＣＡ）を用いたポジティブ接着選択を使用し、その後ＣＤ５６＋ＣＤ３−細胞のポジティブ選別により、ヒトＣＤ５６ポジティブＮＫ細胞を、正常な健康体の提供者の末梢血単核細胞から単離した。次いで、このように単離したＮＫ細胞を、サイトカインまたはサイトカインの組合せの存在下において、３７℃で７２時間培養した。細胞培養の上清を回収し、そしてこの上清中のＩＦＮγの量をＥＬＩＳＡにより定量した。さらに、ＲＮＡを、細胞ペッレトから単離し、そしてＩＦＮγｍＲＮＡの発現について分析した。
【００９６】
結果の代表的なセットを示す（表１）。
【００９７】
【表１】
各実験に使用したＩＬ−２７の濃度（ｎｇ／ｍｌ）を示す（表１、左端の列）。このデータは、産生されたＩＦＮγの量（ｎｇ）を示す。従って、ＩＬ−１２のみが、低レベル（１ｎｇ／ｍｌより少ない）の、精製したＮＫ細胞によるＩＦＮγ産生を誘導した。ＩＬ−２７のみが、検出可能なＩＦＮγ産生を誘導しなかった（データ示さず）。しかし、ＩＬ−１２へのＩＬ−２７の添加は、１０〜２０倍（すなわち、約３．０ｎｇ／ｍｌ）ＩＦＮγの産生を高めた。従って、ＩＬ−２７は、ＩＬ−１２と共に相乗的に作用して、ＩＦＮγ産生を高めた。
【００９８】
ＩＬ−２７はまた、他のサイトカインまたはサイトカインの組合せに相乗効果を有する。ＩＬ−２７の非存在下において、ＩＬ−１２とＩＬ−２との組み合わせは、ＩＬ−１２のみと比較して、増加したＩＦＮγの産生を生じた。さらに、ＩＬ−２とＩＬ−１２との組み合わせへのＩＬ−２７の添加は、ＩＦＮγレベルの用量依存性の増加（５０〜１００ｎｇ／ｍｌまで）を導いた。ＩＬ−２、ＩＬ−１２およびＩＬ−１８をＩＬ−２７と組み合わせた場合、最も著しい相乗効果を観察した。ＩＬ−２７の非存在下において、三つの組合せは、５０〜１００ｎｇ／ｍｌのＩＦＮγ産生レベルを生じた。この三つの組合せへのＩＬ−２７の添加は、約２０００ｎｇ／ｍｌまでＩＦＮγの用量依存性の相乗的な産生を生じた（表１）。同様の研究において、ＩＬ−１５を、ＩＬ−２の代わりに使用し得、一方ＩＬ−２３を、ＩＬ−１２の代わりに使用し得ることを示した。
【００９９】
興味深いことに、リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応を使用するｍＲＮＡの分析は、ＩＬ−２７と他のサイトカインとの相乗効果は、ＩＦＮγ ｍＲＮＡの量の増加により反映されないことを示唆する（表２）。従って、この産生の増加は、おそらく翻訳レベルまたは翻訳後レベルで影響を与えるようである。
【０１００】
この結果は、飽和量の予め特徴付けられたサイトカインの組合せは、ＩＬ−２７の添加により達成し得るＩＦＮγ産生のレベルを引き起こさないことを示す。従って、ＩＦＮγのこの完全な潜在能力に対するＩＦＮγの産生は、サイトカインの選択したセットの存在に依存し、そしてそれらのうちの一つを取り除くことは、律速効果を引き起こし得る。
【０１０１】
【表２】
（ＩＩＩ．ＩＬ−２７は、未処理Ｔ細胞のＴｈ２の局在化を駆動しない）
選別したマウスＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＢ高Ｔ細胞を、ＩＬ−４およびＩＬ−２７の存在下において抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８を結合したプレートを用いて培養した。培養中にＩＬ−２７を含有する場合、ＩＬ−４の非存在下および存在下の両方において、ＩＬ−１３の産生の減少を導く。従って、強いＴｈ１応答を誘導するが、ＩＬ−２７は、Ｔｈ２の極性化を促進しないようである。
【０１０２】
（ＩＶ．ＩＬ−２７は、ＷＳＸ−１／ＴＣＣＲに結合する）
ＩＬ−２７ファミリーとＩＬ−６／ＩＬ−１２ファミリーとの間の関係のため、シグナルレセプターについての検索をこのファミリーに集中した。このファミリーのメンバーを、ＢａＦ３細胞へ導入し、そしてＩＬ−２７への結合について試験した。試験したレセプターのうちオーファンサイトカインレセプターＷＳＸ−１／ＴＣＣＲを発現するＢａ／Ｆ３細胞のみが、標識したＩＬ−２７への結合を示した（例えば、Ｓｐｒｅｃｈｅｒら（１９９８）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ、Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．２４６：８２−９０；Ｃｈｅｎら（２０００）Ｎａｔｕｒｅ ４０７：９１６−９２０を参照のこと）。Ｆ−標識ヒトＷＳＸ−１ｃＤＮＡまたはＦ−標識マウスＷＳＸ−１ｃＤＮＡ（Ｆ−ｈＷＳＸ−またはＦ−ｍＷＳＸ−１）のいずれかを発現するレトロウィルス構築物を用いて感染させたＢａＦ３細胞は、抗Ｆｌａｇ ｍＡｂを使用して細胞染色を示した。次いでＦ−ｈＷＳＸ−１を発現する細胞を、いずれかのｈＥＢＩ３−Ｉｇのみか、またはｈｐ２８−ＥとＥＢＩ３−Ｉｇとの同時発現と共に、２時間インキュベートした。ヘテロダイマーのｐ２８／ＥＢＩ３は、ＷＳＸ−１に結合するが、ＥＢＩ３−Ｉｇ自体は検出可能な結合を示さなかった。同様に、ｍｐ２８−ＥとｍＥＢＩ３−Ｉｇとの組合せのみが、ｍＷＳＸ−１−発現ＢａＦ３細胞との検出可能な相互作用を提供したが、この二つの個々のタンパク質は、このような相互作用を提供し得なかった。Ｆ−ｍＷＳＸ−１発現ＢａＦ３細胞と共に独立に発現されるｍｐ２８−ＥおよびｍＥＢＩ３−Ｉｇのインキュベーションもまた、細胞の染色を導く。感染していないコントロール細胞は、ｐ２８／ＥＢＩ３により染色されず、これは観察された相互作用の特異性を示した。
【０１０３】
これらの結果は、Ｃ−末端ＲＳＧＨ６−タグ（Ｒ）を伴うｈＷＳＸ−１の可溶性細胞外形態を使用して免疫共沈降実験により確認された。Ｆ−ｈＥＢＩ３または同時発現されたｈｐ２８−Ｅ／Ｆ−ｈＥＢＩ３を含有する一過的にトランスフェクトされたＨＥＫ２９３Ｔ細胞の上清に由来するタンパク質を、Ｆｌａｇ Ｍ２−アガロース、ｐｒｏｔｅｉｎ Ｇ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標）結合体化抗ｅｔａｇ ｍＡｂまたはｐｒｏｔｅｉｎ Ｇ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標）結合体化抗Ｈ５ｍＡｂのいずれかを使用して免疫沈降した。最初の沈殿物を、洗浄し、そして次いでｓｈＷＳＸ−１−Ｒを含有するＨＥＫ２９３Ｔ細胞の上清と共にインキュベートした。第二の沈殿物を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分離し、そしてウエスタンブロットに供した。沈殿したタンパク質を、ＥＣＬにより、それぞれのタンパク質タグに対する抗体を使用して可視化した。３つの全てのタンパク質（ｈ−ｐ２８−Ｅ，Ｆ−ｈＥＢＩ３およびｓｈＷＳＸ−１−Ｒ）が、存在する場合のみ、一つのタンパク質の免疫沈降が、使用した免疫沈降させる抗体の他の成分も両方とも独立に沈降させた。それぞれのマウスのオルソログ（ｏｒｔｈｏｌｏｇｕｅ）を使用する同一の免疫共沈降実験は、同様の結果を得た。
【０１０４】
ＷＳＸ−１が、ＩＬ−２７シグナル伝達を媒介するのに十分であるか否かという問題に取り組むためにヒトＷＳＸ−１またはマウスＷＳＸ−１を発現するＢａＦ３細胞の増殖を試験した。これらの細胞は、ＩＬ−３に応答して増殖したが、ＩＬ−２７に応答して増殖しなかった。従って、ＷＳＸ−１は、ＩＬ−２７媒介性シグナル伝達を必要とするが、十分ではないようである。さらなるＩＬ−２７シグナル伝達レセプターのサブユニットの同定が、現在進行中である。
【０１０５】
本明細書中に引用した全ての参考文献は、個々の出版物、特許または特許出願の各々が、全ての目的のためにその全体が参考として援用されることが具体的にかつ別々に示され、同一の範囲まで本明細書中に参考として援用される。
【０１０６】
本発明の多数の改変体および変更物が、当業者に明らかなように、本発明の精神および範囲から逸脱することなく作製され得る。本明細書中に記載される特定の実施形態は、実施例のみの方法により提供され、そして本発明は、権利化する特許請求の範囲の等価物の全範囲とともに、添付する特許請求の範囲の用語によってのみ限定されるべきものである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞によるインターフェロンγ（ＩＦＮγ）産生を調節する方法であって、該方法は、有効量の以下：
ａ）ＩＬ−２７アゴニストおよび第一サイトカインアゴニストであって、該サイトカインは、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８およびＩＬ−２３からなる群より選択される、サイトカインアゴニスト；または
ｂ）ＩＬ−２７アンタゴニストおよび第一サイトカインアンタゴニストであって、該サイトカインは、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８およびＩＬ−２３からなる群より選択される、サイトカインアンタゴニスト
で、該細胞を処理する工程を包含する、方法。
【請求項２】
前記ＩＬ−２７アゴニストがＩＬ−２７改変体またはＩＬ−２７誘導体であって、該ＩＬ−２７改変体または該ＩＬ−２７誘導体は、少なくとも一つのＩＬ−２７生物学的特性を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ＩＬ−２７改変体または前記ＩＬ−２７誘導体が、ＩＬ−２７ハイパーカインを含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記調節工程が、
ａ）増加させる工程であって、前記処理する工程は、前記ＩＬ−２７アゴニストおよび前記第一サイトカインアゴニストを用いる工程；または
ｂ）減少させる工程であって、前記処理する工程は、前記ＩＬ−２７アンタゴニストおよび前記第一サイトカインアンタゴニストを用いる工程；
である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記調節工程が、増加させる工程であって、有効量の前記ＩＬ−２７アゴニストおよび前記第一サイトカインアゴニストの非存在下での発現レベルまたは生成レベルより、約２倍、約５倍、約１０倍、約２０倍または約５０倍高い、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記調節工程が、増加させる工程であって、前記処理する工程がさらに、第一サイトカインアゴニストとは異なる第二サイトカインアゴニストで処理する工程を包含する、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記第二サイトカインアゴニストが、以下：
ａ）ＩＬ−２；
ｂ）ＩＬ−１５；
ｃ）ＩＬ−１２；
ｄ）ＩＬ−２３；または
ｅ）ＩＬ−１８；
である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記第一サイトカインアゴニストおよび前記第二サイトカインアゴニストが、以下：
ａ）ＩＬ−２３およびＩＬ−２；
ｂ）ＩＬ−１５およびＩＬ−１２；
ｃ）ＩＬ−１５およびＩＬ−２３；または
ｄ）ＩＬ−１８、およびＩＬ−２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１２もしくはＩＬ−２３のいずれか一つ；
である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記第一サイトカインアゴニストおよび前記第二サイトカインアゴニストとは異なる第三サイトカインアゴニストで処理する工程をさらに包含する、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
前記第一サイトカインアゴニストがＩＬ−１８であって、前記第二サイトカインアゴニストおよび前記第三サイトカインアゴニストが、以下：
ａ）ＩＬ−２およびＩＬ−１５；または
ｂ）ＩＬ−１２およびＩＬ−２３；
である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記調節工程が、減少させる工程であって、前記処理する工程がさらに、第一サイトカインアンタゴニストとは異なる第二サイトカインアンタゴニストで処理する工程を包含する、請求項４に記載の方法。
【請求項１２】
前記第二サイトカインが、以下：
ａ）ＩＬ−２；
ｂ）ＩＬ−１５；
ｃ）ＩＬ−１２；
ｄ）ＩＬ−２３；または
ｅ）ＩＬ−１８；
である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記第一サイトカインおよび前記第二サイトカインが、以下：
ａ）ＩＬ−２３およびＩＬ−２；
ｂ）ＩＬ−１５およびＩＬ−１２；
ｃ）ＩＬ−１５およびＩＬ−２３；または
ｄ）ＩＬ−１８およびＩＬ−２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１２もしくはＩＬ−２３のいずれか一つ；
である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記第一サイトカインアンタゴニストおよび前記第二サイトカインアンタゴニストとは異なる第三サイトカインアンタゴニストで処理する工程をさらに包含する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記第一サイトカインがＩＬ−１８であり、前記第二サイトカインおよび前記第三サイトカインが、以下：
ａ）ＩＬ−２およびＩＬ−１５；または
ｂ）ＩＬ−１２およびＩＬ−２３；
である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記細胞が、以下：
ａ）Ｔ細胞；または
ｂ）ＮＫ細胞；
である、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記細胞が、被験体内に位置し、前記アゴニストまたは前記アンタゴニストが、該被験体に投与される、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記被験体が、該被験体内のＩＦＮγレベルを調節することによって、処置され得るかまたは改善され得る障害または病理学的な状態を有するか、または有する疑いがある、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記被験体が：
ａ）ヒト被験体；または
ｂ）獣医学的被験体；
である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記障害または状態が、以下：
ａ）癌、新生物、もしくは腫瘍；
ｂ）細胞内病原体；または
ｃ）炎症性状態もしくは自己免疫状態
を含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記ＩＬ−２７アゴニストおよび第一サイトカインアゴニストが、前記被験体に投与され、ここで、前記細胞内病原体が以下：
ａ）Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ ｓｐ．；
ｂ）Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ．；
ｃ）Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｓｐ．；
ｄ）Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｓｐ．；
ｅ）ヘルペスウイルス；
ｆ）サイトメガロウイルス；または
ｇ）ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）；
を含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記ＩＬ−２７アゴニストおよび前記第一サイトカインアゴニストが、前記被験体に投与され、ここで、前記炎症性状態または自己免疫状態が、以下：
ａ）慢性関節リウマチ；または
ｂ）喘息もしくはアレルギー
を含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
第二サイトカインアゴニストを投与する工程をさらに包含する、請求項２１または請求項２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
第三サイトカインアゴニストを投与する工程をさらに包含する、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記ＩＬ−２７アンタゴニストおよび第一サイトカインアンタゴニストが、前記被験体に投与され、そして、前記障害または状態は、以下：
ａ）ＴＨ１状態またはＴＨ１障害；
ｂ）多発性硬化症；
ｃ）乾癬；
ｄ）クローン病；
ｃ）Ｉ型糖尿病；または
ｄ）全身性エリテマトーデス；
を含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２６】
第二サイトカインアンタゴニストを投与する工程をさらに包含する、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
第三サイトカインアンタゴニストを投与する工程をさらに包含する、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
被験体中のＩＦＮγの発現またはレベルを調節する工程によって、該被験体の障害または病理学的な状態を処置または改善する方法であって、該方法は、以下：
ａ）ＩＬ−２７サイトカインおよび第一サイトカインアゴニストである場合、アゴニストであって、該サイトカインは、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８およびＩＬ−２３からなる群より選択される、アゴニスト；または
ｂ）ＩＬ−２７アンタゴニストおよび第一サイトカインアンタゴニストであって、該サイトカインが、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８およびＩＬ−２３からなる群より選択される、アンタゴニスト；
を投与する工程を包含する、方法。
【請求項２９】
前記調節工程が、以下：
ａ）増加させる工程であって、前記処理する工程は、前記ＩＬ−２７アゴニストおよび前記第一サイトカインアゴニストを用いる工程；または
ｂ）減少させる工程であって、前記処理する工程は、前記ＩＬ−２７アンタゴニストおよび前記第一サイトカインアンタゴニストを用いる工程；
である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記ＩＬ−２７アゴニストが、ＩＬ−２７改変体またはＩＬ−２７誘導体であり、該ＩＬ−２７改変体または該ＩＬ−２７誘導体は、少なくとも一つのＩＬ−２７生物学的特性を有する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記ＩＬ−２７改変体または前記ＩＬ−２７誘導体が、ＩＬ−２７ハイパーカインを含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記調節工程が、増加させる工程であって、有効量の前記ＩＬ−２７アゴニストおよび前記第一サイトカインアゴニストの非存在下での発現レベルまたは生成レベルより、約２倍、約５倍、約１０倍、約２０倍または約５０倍高い、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
前記調節工程が、増加させる工程であって、前記処理する工程がさらに、第一サイトカインアゴニストとは異なる第二サイトカインアゴニストで処理する工程を包含する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３４】
前記第二サイトカインアゴニストが、以下：
ａ）ＩＬ−２；
ｂ）ＩＬ−１５；
ｃ）ＩＬ−１２；
ｄ）ＩＬ−２３；または
ｅ）ＩＬ−１８；
である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記第一サイトカインアゴニストおよび前記第二サイトカインアゴニストが、以下：
ａ）ＩＬ−２３およびＩＬ−２；
ｂ）ＩＬ−１５およびＩＬ−１２；
ｃ）ＩＬ−１５およびＩＬ−２３；または
ｄ）ＩＬ−１８、およびＩＬ−２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１２もしくはＩＬ−２３のいずれか一つ；
である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記第一サイトカインアゴニストおよび前記第二サイトカインアゴニストとは異なる第三サイトカインアゴニストで処理する工程をさらに包含する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３７】
前記第一サイトカインアゴニストがＩＬ−１８であって、前記第二サイトカインアゴニストおよび前記第三サイトカインアゴニストが、以下：
ａ）ＩＬ−２およびＩＬ−１５；または
ｂ）ＩＬ−１２およびＩＬ−２３；
である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記調節工程が、減少させる工程であって、前記処理する工程がさらに、第一サイトカインアンタゴニストとは異なる第二サイトカインアンタゴニストで処理する工程を包含する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３９】
前記第二サイトカインが、以下：
ａ）ＩＬ−２；
ｂ）ＩＬ−１５；
ｃ）ＩＬ−１２；
ｄ）ＩＬ−２３；または
ｅ）ＩＬ−１８；
である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記第一サイトカインおよび前記第二サイトカインが、以下：
ａ）ＩＬ−２３およびＩＬ−２；
ｂ）ＩＬ−１５およびＩＬ−１２；
ｃ）ＩＬ−１５およびＩＬ−２３；または
ｄ）ＩＬ−１８およびＩＬ−２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１２もしくはＩＬ−２３のいずれか一つ；
である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記第一サイトカインアンタゴニストおよび前記第二サイトカインアンタゴニストとは異なる第三サイトカインアンタゴニストで処理する工程をさらに包含する、請求項３８に記載の方法。
【請求項４２】
前記第一サイトカインがＩＬ−１８であり、前記第二サイトカインおよび前記第三サイトカインが、以下：
ａ）ＩＬ−２およびＩＬ−１５；または
ｂ）ＩＬ−１２およびＩＬ−２３；
である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記障害または状態が、以下：
ａ）癌、新生物、もしくは腫瘍；
ｂ）細胞内病原体；または
ｃ）炎症性状態もしくは自己免疫状態
を含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項４４】
前記処置が、ＩＬ−２７アゴニストおよび第一サイトカインアゴニストを用い、そして、前記細胞内病原体が以下：
ａ）Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ ｓｐ．；
ｂ）Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ．；
ｃ）Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｓｐ．；
ｄ）Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｓｐ．；
ｅ）ヘルペスウイルス；
ｆ）サイトメガロウイルス；または
ｇ）ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）；
を含む、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記処置が、ＩＬ−２７アンタゴニストおよび第一サイトカインアゴニストを用い、そして、前記炎症性状態または自己免疫状態が、以下：
ａ）慢性関節リウマチ；または
ｂ）喘息もしくはアレルギー
を含む、請求項４３に記載の方法。
【請求項４６】
前記処置が、ＩＬ−２７アンタゴニストおよび第一サイトカインアンタゴニストを用い、そして、前記障害または状態は、以下：
ａ）ＴＨ１状態またはＴＨ１障害；
ｂ）多発性硬化症；
ｃ）乾癬；
ｄ）クローン病；
ｃ）Ｉ型糖尿病；または
ｄ）全身性エリテマトーデス；
を含む、請求項４３に記載の方法。
【請求項４７】
前記ＩＬ−２７アンタゴニストが、以下：
ａ）抗体の抗原結合部位由来であるか；または
ｂ）核酸；
である、請求項２８に記載の方法。
【請求項１】
細胞によるインターフェロンγ（ＩＦＮγ）産生を調節する方法であって、該方法は、有効量の以下：
ａ）ＩＬ−２７アゴニストおよび第一サイトカインアゴニストであって、該サイトカインは、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８およびＩＬ−２３からなる群より選択される、サイトカインアゴニスト；または
ｂ）ＩＬ−２７アンタゴニストおよび第一サイトカインアンタゴニストであって、該サイトカインは、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８およびＩＬ−２３からなる群より選択される、サイトカインアンタゴニスト
で、該細胞を処理する工程を包含する、方法。
【請求項２】
前記ＩＬ−２７アゴニストがＩＬ−２７改変体またはＩＬ−２７誘導体であって、該ＩＬ−２７改変体または該ＩＬ−２７誘導体は、少なくとも一つのＩＬ−２７生物学的特性を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ＩＬ−２７改変体または前記ＩＬ−２７誘導体が、ＩＬ−２７ハイパーカインを含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記調節工程が、
ａ）増加させる工程であって、前記処理する工程は、前記ＩＬ−２７アゴニストおよび前記第一サイトカインアゴニストを用いる工程；または
ｂ）減少させる工程であって、前記処理する工程は、前記ＩＬ−２７アンタゴニストおよび前記第一サイトカインアンタゴニストを用いる工程；
である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記調節工程が、増加させる工程であって、有効量の前記ＩＬ−２７アゴニストおよび前記第一サイトカインアゴニストの非存在下での発現レベルまたは生成レベルより、約２倍、約５倍、約１０倍、約２０倍または約５０倍高い、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記調節工程が、増加させる工程であって、前記処理する工程がさらに、第一サイトカインアゴニストとは異なる第二サイトカインアゴニストで処理する工程を包含する、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記第二サイトカインアゴニストが、以下：
ａ）ＩＬ−２；
ｂ）ＩＬ−１５；
ｃ）ＩＬ−１２；
ｄ）ＩＬ−２３；または
ｅ）ＩＬ−１８；
である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記第一サイトカインアゴニストおよび前記第二サイトカインアゴニストが、以下：
ａ）ＩＬ−２３およびＩＬ−２；
ｂ）ＩＬ−１５およびＩＬ−１２；
ｃ）ＩＬ−１５およびＩＬ−２３；または
ｄ）ＩＬ−１８、およびＩＬ−２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１２もしくはＩＬ−２３のいずれか一つ；
である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記第一サイトカインアゴニストおよび前記第二サイトカインアゴニストとは異なる第三サイトカインアゴニストで処理する工程をさらに包含する、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
前記第一サイトカインアゴニストがＩＬ−１８であって、前記第二サイトカインアゴニストおよび前記第三サイトカインアゴニストが、以下：
ａ）ＩＬ−２およびＩＬ−１５；または
ｂ）ＩＬ−１２およびＩＬ−２３；
である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記調節工程が、減少させる工程であって、前記処理する工程がさらに、第一サイトカインアンタゴニストとは異なる第二サイトカインアンタゴニストで処理する工程を包含する、請求項４に記載の方法。
【請求項１２】
前記第二サイトカインが、以下：
ａ）ＩＬ−２；
ｂ）ＩＬ−１５；
ｃ）ＩＬ−１２；
ｄ）ＩＬ−２３；または
ｅ）ＩＬ−１８；
である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記第一サイトカインおよび前記第二サイトカインが、以下：
ａ）ＩＬ−２３およびＩＬ−２；
ｂ）ＩＬ−１５およびＩＬ−１２；
ｃ）ＩＬ−１５およびＩＬ−２３；または
ｄ）ＩＬ−１８およびＩＬ−２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１２もしくはＩＬ−２３のいずれか一つ；
である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記第一サイトカインアンタゴニストおよび前記第二サイトカインアンタゴニストとは異なる第三サイトカインアンタゴニストで処理する工程をさらに包含する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記第一サイトカインがＩＬ−１８であり、前記第二サイトカインおよび前記第三サイトカインが、以下：
ａ）ＩＬ−２およびＩＬ−１５；または
ｂ）ＩＬ−１２およびＩＬ−２３；
である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記細胞が、以下：
ａ）Ｔ細胞；または
ｂ）ＮＫ細胞；
である、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記細胞が、被験体内に位置し、前記アゴニストまたは前記アンタゴニストが、該被験体に投与される、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記被験体が、該被験体内のＩＦＮγレベルを調節することによって、処置され得るかまたは改善され得る障害または病理学的な状態を有するか、または有する疑いがある、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記被験体が：
ａ）ヒト被験体；または
ｂ）獣医学的被験体；
である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記障害または状態が、以下：
ａ）癌、新生物、もしくは腫瘍；
ｂ）細胞内病原体；または
ｃ）炎症性状態もしくは自己免疫状態
を含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記ＩＬ−２７アゴニストおよび第一サイトカインアゴニストが、前記被験体に投与され、ここで、前記細胞内病原体が以下：
ａ）Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ ｓｐ．；
ｂ）Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ．；
ｃ）Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｓｐ．；
ｄ）Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｓｐ．；
ｅ）ヘルペスウイルス；
ｆ）サイトメガロウイルス；または
ｇ）ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）；
を含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記ＩＬ−２７アゴニストおよび前記第一サイトカインアゴニストが、前記被験体に投与され、ここで、前記炎症性状態または自己免疫状態が、以下：
ａ）慢性関節リウマチ；または
ｂ）喘息もしくはアレルギー
を含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
第二サイトカインアゴニストを投与する工程をさらに包含する、請求項２１または請求項２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
第三サイトカインアゴニストを投与する工程をさらに包含する、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記ＩＬ−２７アンタゴニストおよび第一サイトカインアンタゴニストが、前記被験体に投与され、そして、前記障害または状態は、以下：
ａ）ＴＨ１状態またはＴＨ１障害；
ｂ）多発性硬化症；
ｃ）乾癬；
ｄ）クローン病；
ｃ）Ｉ型糖尿病；または
ｄ）全身性エリテマトーデス；
を含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２６】
第二サイトカインアンタゴニストを投与する工程をさらに包含する、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
第三サイトカインアンタゴニストを投与する工程をさらに包含する、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
被験体中のＩＦＮγの発現またはレベルを調節する工程によって、該被験体の障害または病理学的な状態を処置または改善する方法であって、該方法は、以下：
ａ）ＩＬ−２７サイトカインおよび第一サイトカインアゴニストである場合、アゴニストであって、該サイトカインは、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８およびＩＬ−２３からなる群より選択される、アゴニスト；または
ｂ）ＩＬ−２７アンタゴニストおよび第一サイトカインアンタゴニストであって、該サイトカインが、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８およびＩＬ−２３からなる群より選択される、アンタゴニスト；
を投与する工程を包含する、方法。
【請求項２９】
前記調節工程が、以下：
ａ）増加させる工程であって、前記処理する工程は、前記ＩＬ−２７アゴニストおよび前記第一サイトカインアゴニストを用いる工程；または
ｂ）減少させる工程であって、前記処理する工程は、前記ＩＬ−２７アンタゴニストおよび前記第一サイトカインアンタゴニストを用いる工程；
である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記ＩＬ−２７アゴニストが、ＩＬ−２７改変体またはＩＬ−２７誘導体であり、該ＩＬ−２７改変体または該ＩＬ−２７誘導体は、少なくとも一つのＩＬ−２７生物学的特性を有する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記ＩＬ−２７改変体または前記ＩＬ−２７誘導体が、ＩＬ−２７ハイパーカインを含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記調節工程が、増加させる工程であって、有効量の前記ＩＬ−２７アゴニストおよび前記第一サイトカインアゴニストの非存在下での発現レベルまたは生成レベルより、約２倍、約５倍、約１０倍、約２０倍または約５０倍高い、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
前記調節工程が、増加させる工程であって、前記処理する工程がさらに、第一サイトカインアゴニストとは異なる第二サイトカインアゴニストで処理する工程を包含する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３４】
前記第二サイトカインアゴニストが、以下：
ａ）ＩＬ−２；
ｂ）ＩＬ−１５；
ｃ）ＩＬ−１２；
ｄ）ＩＬ−２３；または
ｅ）ＩＬ−１８；
である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記第一サイトカインアゴニストおよび前記第二サイトカインアゴニストが、以下：
ａ）ＩＬ−２３およびＩＬ−２；
ｂ）ＩＬ−１５およびＩＬ−１２；
ｃ）ＩＬ−１５およびＩＬ−２３；または
ｄ）ＩＬ−１８、およびＩＬ−２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１２もしくはＩＬ−２３のいずれか一つ；
である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記第一サイトカインアゴニストおよび前記第二サイトカインアゴニストとは異なる第三サイトカインアゴニストで処理する工程をさらに包含する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３７】
前記第一サイトカインアゴニストがＩＬ−１８であって、前記第二サイトカインアゴニストおよび前記第三サイトカインアゴニストが、以下：
ａ）ＩＬ−２およびＩＬ−１５；または
ｂ）ＩＬ−１２およびＩＬ−２３；
である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記調節工程が、減少させる工程であって、前記処理する工程がさらに、第一サイトカインアンタゴニストとは異なる第二サイトカインアンタゴニストで処理する工程を包含する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３９】
前記第二サイトカインが、以下：
ａ）ＩＬ−２；
ｂ）ＩＬ−１５；
ｃ）ＩＬ−１２；
ｄ）ＩＬ−２３；または
ｅ）ＩＬ−１８；
である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記第一サイトカインおよび前記第二サイトカインが、以下：
ａ）ＩＬ−２３およびＩＬ−２；
ｂ）ＩＬ−１５およびＩＬ−１２；
ｃ）ＩＬ−１５およびＩＬ−２３；または
ｄ）ＩＬ−１８およびＩＬ−２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１２もしくはＩＬ−２３のいずれか一つ；
である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記第一サイトカインアンタゴニストおよび前記第二サイトカインアンタゴニストとは異なる第三サイトカインアンタゴニストで処理する工程をさらに包含する、請求項３８に記載の方法。
【請求項４２】
前記第一サイトカインがＩＬ−１８であり、前記第二サイトカインおよび前記第三サイトカインが、以下：
ａ）ＩＬ−２およびＩＬ−１５；または
ｂ）ＩＬ−１２およびＩＬ−２３；
である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記障害または状態が、以下：
ａ）癌、新生物、もしくは腫瘍；
ｂ）細胞内病原体；または
ｃ）炎症性状態もしくは自己免疫状態
を含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項４４】
前記処置が、ＩＬ−２７アゴニストおよび第一サイトカインアゴニストを用い、そして、前記細胞内病原体が以下：
ａ）Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ ｓｐ．；
ｂ）Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ．；
ｃ）Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｓｐ．；
ｄ）Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｓｐ．；
ｅ）ヘルペスウイルス；
ｆ）サイトメガロウイルス；または
ｇ）ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）；
を含む、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記処置が、ＩＬ−２７アンタゴニストおよび第一サイトカインアゴニストを用い、そして、前記炎症性状態または自己免疫状態が、以下：
ａ）慢性関節リウマチ；または
ｂ）喘息もしくはアレルギー
を含む、請求項４３に記載の方法。
【請求項４６】
前記処置が、ＩＬ−２７アンタゴニストおよび第一サイトカインアンタゴニストを用い、そして、前記障害または状態は、以下：
ａ）ＴＨ１状態またはＴＨ１障害；
ｂ）多発性硬化症；
ｃ）乾癬；
ｄ）クローン病；
ｃ）Ｉ型糖尿病；または
ｄ）全身性エリテマトーデス；
を含む、請求項４３に記載の方法。
【請求項４７】
前記ＩＬ−２７アンタゴニストが、以下：
ａ）抗体の抗原結合部位由来であるか；または
ｂ）核酸；
である、請求項２８に記載の方法。
【公表番号】特表２００６−５１４０５７（Ｐ２００６−５１４０５７Ａ）
【公表日】平成１８年４月２７日（２００６．４．２７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００４−５６５５９２（Ｐ２００４−５６５５９２）
【出願日】平成１５年１２月１８日（２００３．１２．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００３／０４０５６９
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０６０２９１
【国際公開日】平成１６年７月２２日（２００４．７．２２）
【出願人】（５９６１２９２１５）シェーリング コーポレイション (785)
【氏名又は名称原語表記】Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１８年４月２７日（２００６．４．２７）
【国際特許分類】
【出願日】平成１５年１２月１８日（２００３．１２．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００３／０４０５６９
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０６０２９１
【国際公開日】平成１６年７月２２日（２００４．７．２２）
【出願人】（５９６１２９２１５）シェーリング コーポレイション (785)
【氏名又は名称原語表記】Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ
【Ｆターム（参考）】
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