増殖が抑えられるように核酸が改変された遺伝子突然変異を含む自由生活微生物、および／または核酸を修復する能力を低下させる遺伝子突然変異を含む自由生活微生物が提供される。また、抗原提示細胞に与え、抗原提示細胞を活性化および／または成熟化するための、改変された微生物を使用する方法も提供される。改変された微生物および／または抗原提示細胞を含むワクチン組成物、ならびにワクチンを用いる方法も提供される。微生物は、さらに、癌または感染症に対するワクチンとして用いるために、腫瘍抗原または感染症抗原のような異種抗原を含むように改変することができる。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
プロ抗原提示細胞を含むワクチンであって、該抗原提示細胞は、自由生活微生物を含み、該自由生活微生物は、核酸と直接的に反応する核酸標的化化合物との反応によって改変されている核酸を含み、その結果、該微生物の増殖が抑えられる、ワクチン。
【請求項２】
前記プロ抗原提示細胞が、樹状細胞である、請求項１に記載のワクチン。
【請求項３】
前記核酸標的化化合物が、核酸アルキル化剤である、請求項１に記載のワクチン。
【請求項４】
前記核酸アルキル化剤が、β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルである、請求項３に記載のワクチン。
【請求項５】
前記核酸標的化化合物が照射によって活性化される、請求項１に記載のワクチン。
【請求項６】
前記核酸標的化化合物が、ＵＶＡ照射によって活性化されたソラレン化合物である、請求項５に記載のワクチン。
【請求項７】
前記核酸標的化化合物が、４’−（４−アミノ−２−オキサ）ブチル−４，５’，８−トリメチルソラレンである、請求項６に記載のワクチン。
【請求項８】
前記微生物が、改変されている核酸を修復する微生物の能力を低下させる遺伝子突然変異を含む、請求項１に記載のワクチン。
【請求項９】
前記微生物が、ＤＮＡ修復酵素を欠損している、請求項８に記載のワクチン。
【請求項１０】
前記微生物が、ＵｖｒＡおよびＵｖｒＢの両方、またはＵｖｒＡおよびＵｖｒＢの機能的等価物を欠損している、請求項９に記載のワクチン。
【請求項１１】
前記微生物が、ＵｖｒＣ、またはＵｖｒＣの機能的等価物を欠損している、請求項９に記載のワクチン。
【請求項１２】
前記微生物が、ＲｅｃＡまたはＲｅｃＡの機能的等価物を欠損している、請求項９に記載のワクチン。
【請求項１３】
前記遺伝子突然変異が、ｐｈｒＢ、ｕｖｒＡ、ｕｖｒＢ、ｕｖｒＣ、ｕｖｒＤおよびｒｅｃＡからなる群から選択される１以上の遺伝子にあるか、またはｐｈｒＢ、ｕｖｒＡ、ｕｖｒＢ、ｕｖｒＣ、ｕｖｒＤおよびｒｅｃＡからなる群から選択される１以上の遺伝子の機能的等価物にある、請求項８に記載のワクチン。
【請求項１４】
前記微生物が、ｕｖｒＡおよびｕｖｒＢの両方における遺伝子突然変異か、またはｕｖｒＡおよびｕｖｒＢ両方の機能的等価物における遺伝子突然変異を含む、請求項１３に記載のワクチン。
【請求項１５】
前記微生物が、ｕｖｒＣにおける遺伝子突然変異を含む、請求項１３に記載のワクチン。
【請求項１６】
前記微生物が、ｒｅｃＡにおける遺伝子突然変異を含む１３に記載のワクチン。
【請求項１７】
前記微生物が細菌である、請求項１に記載のワクチン。
【請求項１８】
前記細菌が、少なくとも１つのＤＮＡ修復酵素を欠損している、請求項１７に記載のワクチン。
【請求項１９】
前記微生物が、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓである、請求項１７に記載のワクチン。
【請求項２０】
前記微生物が、Ｌｉｓｔｅｒｉａである、請求項１７に記載のワクチン。
【請求項２１】
前記微生物が、Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓである、請求項１７に記載のワクチン。
【請求項２２】
前記細菌が、ＤＮＡ修復酵素を欠損している、請求項２１に記載のワクチン。
【請求項２３】
前記細菌が、ＵｖｒＡおよびＵｖｒＢの両方を欠損している、請求項２２に記載のワクチン。
【請求項２４】
前記微生物が、ＵｖｒＣを欠損している、請求項２２に記載のワクチン。
【請求項２５】
前記微生物が、ＲｅｃＡを欠損している、請求項２２に記載のワクチン。
【請求項２６】
前記微生物が、抗原を含むタンパク質をコードするポリヌクレオチド配列を含む異種性発現カセットを含む、請求項１に記載のワクチン。
【請求項２７】
前記ポリヌクレオチド配列が、前記微生物内で発現するためにコドンを最適化している、請求項２６に記載のワクチン。
【請求項２８】
前記タンパク質が、シグナルペプチドをさらに含み、かつ前記ポリヌクレオチドが、前記微生物内で発現するためにコドンを最適化している、請求項２６に記載のワクチン。
【請求項２９】
薬学的に受容可能なキャリアまたはアジュバントをさらに含む、請求項１に記載のワクチン。
【請求項３０】
宿主において疾患を予防または処置する方法であって、有効量の請求項１に記載のワクチンを該宿主に投与する工程を包含する、方法。
【請求項３１】
前記抗原提示細胞が、前記宿主に対して自家性である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
宿主において抗原に対する免疫応答を誘導する方法であって、有効量の請求項１に記載のワクチンを該宿主に投与する工程を包含し、ここで前記微生物が該抗原を発現する、方法。
【請求項３３】
前記抗原が、前記微生物に対して異種性である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記抗原提示細胞が、前記宿主に対して自家性である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３５】
宿主において疾患を予防または処置するための方法であって、以下の工程：
（ａ）抗原をコードする核酸配列を含む自由生活微生物と、該細胞とを接触させることにより、プロ抗原提示細胞に抗原を与える工程であって、ここで、該微生物の該核酸は、該核酸と直接的に反応する核酸標的化化合物と反応することにより改変され、その結果、該微生物の増殖が抑えられる、工程；および、
（ｂ）該与えられたプロ抗原提示細胞を含む、有効量の薬学的組成物を該宿主に投与する工程、
を包含する、方法。
【請求項３６】
前記抗原が、前記微生物に対して異種性である、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記抗原提示細胞が、前記宿主に対して自家性である、請求項３５に記載の方法。
【請求項３８】
宿主において、疾患を予防、または処置するための方法であって、以下の工程：
（ａ）プロ抗原提示細胞を、自由生活微生物に感染させる工程であって、ここで、該微生物の該核酸は、該核酸と直接的に反応する酸標的化化合物と反応することにより改変され、その結果、該微生物の増殖が抑えられる、工程；そして、
（ｂ）感染したプロ抗原提示細胞を含む有効量の薬学的組成物を該宿主に投与する工程、
を包含する、方法。
【請求項３９】
前記抗原提示細胞が、前記宿主に対して自家性である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
プロ抗原提示細胞を含むワクチンであって、ここで、該抗原提示細胞は、微生物の核酸の改変を修復する能力を低下させる遺伝子突然変異を含む自由生活細胞を含む、ワクチン。
【請求項４１】
前記プロ抗原提示細胞が樹状細胞である、請求項４０に記載のワクチン。
【請求項４２】
前記微生物が、少なくとも１つのＤＮＡ修復酵素を欠損している、請求項４０に記載のワクチン。
【請求項４３】
前記微生物が、ＵｖｒＡおよびＵｖｒＢの両方、またはＵｖｒＡおよびＵｖｒＢの機能的等価物を欠損している、請求項４２に記載のワクチン。
【請求項４４】
前記微生物が、ＵｖｒＣ、またはＵｖｒＣの機能的等価物を欠損している、請求項４２に記載のワクチン。
【請求項４５】
前記微生物が、ＲｅｃＡ、またはＲｅｃＡの機能的等価物を欠損している、請求項４２に記載のワクチン。
【請求項４６】
前記遺伝子突然変異が、ｐｈｒＢ、ｕｖｒＡ、ｕｖｒＢ、ｕｖｒＣ、ｕｖｒＤ、およびｒｅｃＡからなる群より選択される１つ以上の遺伝子におけるものであるか、あるいはｐｈｒＢ、ｕｖｒＡ、ｕｖｒＢ、ｕｖｒＣ、ｕｖｒＤ、およびｒｅｃＡからなる群より選択される１つ以上の遺伝子の機能的等価物におけるものである、請求項４０に記載のワクチン。
【請求項４７】
前記微生物が、ＵｖｒＡおよびＵｖｒＢの両方、またはＵｖｒＡおよびＵｖｒＢの機能的等価物において遺伝子突然変異を含む、請求項４６に記載のワクチン。
【請求項４８】
前記微生物が、ｕｖｒＣ、またはｕｖｒＣの機能的等価物において遺伝子突然変異を含む、請求項４６に記載のワクチン。
【請求項４９】
前記微生物が、ｒｅｃＡ、またはｒｅｃＡの機能的等価物において遺伝子突然変異を含む請求項４６に記載のワクチン。
【請求項５０】
前記微生物が細菌である、請求項４０に記載のワクチン。
【請求項５１】
前記微生物が、Ｌｉｓｔｅｒｉａである、請求項５０に記載のワクチン。
【請求項５２】
前記微生物が、Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓである、請求項５１に記載のワクチン。
【請求項５３】
前記微生物が、ｕｖｒＡおよびｕｖｒＢ両方を欠損している、請求項５２に記載のワクチン。
【請求項５４】
前記微生物が、ＵｖｒＣを欠損している、請求項５２に記載のワクチン。
【請求項５５】
前記微生物が、ＲｅｃＡを欠損している、請求項５２に記載のワクチン。
【請求項５６】
前記微生物が、抗原を含むタンパク質をコードするポリヌクレオチド配列を含む異種性発現カセットを含む、請求項４０に記載のワクチン。
【請求項５７】
前記ポリヌクレオチドが、微生物における発現のためにコドンを最適化されている、請求項５６に記載のワクチン
【請求項５８】
前記タンパク質がさらにシグナルペプチドを含み、そして前記ポリヌクレオチド配列が微生物における発現のためにコドンを最適化されている、請求項５６に記載のワクチン。
【請求項５９】
薬学的に受容可能なキャリアまたはアジュバントをさらに含む、請求項４０に記載のワクチン。
【請求項６０】
宿主において疾患を予防または処置する方法であって、該宿主に有効量の請求項４０のワクチンを投与する工程を包含する、方法。
【請求項６１】
前記抗原提示細胞が、前記宿主に対して自家性である、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
宿主において抗原に対する免疫応答を誘導する方法であって、有効量の請求項４０に記載のワクチンを該宿主に投与する工程を包含し、ここで、微生物は該抗原を発現する、方法。
【請求項６３】
前記抗原は、前記微生物に対して異種性である、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
前記抗原提示細胞が、宿主に対して自家性である、請求項６２に記載の方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図７】

【図８Ａ】

【図８Ｂ】

【図９−１】

【図９−２】

【図１０】

【図１１Ａ】

【図１１Ｂ】

【図１２Ａ】

【図１２Ｂ】

【図１２Ｃ】

【図１３Ａ】

【図１３Ｂ】

【図１４Ａ】

【図１４Ｂ】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８Ａ】

【図１８Ｂ】

【図１９Ａ】

【図１９Ｂ】

【図１９Ｃ】

【図２０Ａ】

【図２０Ｂ】

【図２０Ｃ】

【図２０Ｄ】

【図２１Ａ】

【図２１Ｂ】

【図２２】

【図２３Ａ】

【図２３Ｂ】

【図２３Ｃ】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９Ａ】

【図２９Ｂ】

【図２９Ｃ】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７】

【図３８】

【図３９】

【図４０】

【図４１】

【図４２】

【公表番号】特表２００７−５２３８７９（Ｐ２００７−５２３８７９Ａ）
【公表日】平成１９年８月２３日（２００７．８．２３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５２１２８７（Ｐ２００６−５２１２８７）
【出願日】平成１６年７月２３日（２００４．７．２３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２３８８１
【国際公開番号】ＷＯ２００５／００９４６３
【国際公開日】平成１７年２月３日（２００５．２．３）
【出願人】（５０５２９７０２４）シーラス　コーポレイション (10)
【Ｆターム（参考）】