水不溶性セルロース誘導体を用いる、トランス脂肪酸の吸収を低減する方法
１食当たり少なくとも０．５ｇのトランス脂肪酸および食品を摂取する哺乳動物によるトランス脂肪酸の吸収を低減するのに十分な量の１種以上の水不溶性セルロース誘導体を含む食品、トランス脂肪酸を摂取した哺乳動物に対するトランス脂肪酸の弊害を改善する方法、ならびにトランス脂肪酸含有食品を摂取する哺乳動物に吸収される能力を有するトランス脂肪酸の量を低減する方法を提供する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本件は、米国仮出願第６１／１０６，１６６号（２００８年１０月１７日出願）の利益を主張する。
【０００２】
分野
本発明は哺乳動物の健康および栄養摂取に関する。
【０００３】
連邦委託研究に関する記載
本発明は、米国農務省との共同研究開発契約（第５８−３Ｋ９５−５−１０７２号）の下でなされたものである。
【背景技術】
【０００４】
背景
他の食物脂肪と異なり、トランス脂肪酸は生物学的機能に必須ではなく、これらは健康的にも良くない。混乱を避けるため、天然由来のトランス脂肪共役リノール酸は健康効果を与える場合があり、よって「トランス脂肪酸」は典型的には、共役系ではない１つ以上のトランス結合を含有する脂肪酸を意味する。
【０００５】
トランス脂肪酸は、部分水素化植物油中のこれらの形態の長所による食品へのこれらの関与を見出すのみである。トランス脂肪酸は、植物油の部分水素化（これらの安定性および品質保持期間を増大させるために行う）の副生成物である。
【０００６】
これらの脂肪に基づくカロリーの寄与は別として、食物中のトランス脂肪酸は具体的に強い批判がなされてきた。トランス脂肪酸は、人体中の低密度リポタンパクＬＤＬ（悪玉）コレステロールレベルを増大させ、そして高密度リポタンパクＨＤＬ（善玉）コレステロールレベルを低下させ、心臓疾患のリスクを増大させるからである。検討はまた、トランス脂肪酸を脳卒中および２型糖尿病と結び付ける。保健機関は、トランス脂肪酸を避けることを推奨し、そして幾つかの国および米国の少なくとも１つの州は、地元生産の食物中のトランス脂肪酸を禁止することを試みてきた。米国食品医薬品局（ＦＤＡ）は異なる取組みを採り、生産者が制度外食物の栄養成分表パネル上にトランス脂肪を列挙すること（１食当たり０．５ｇ以上存在する場合）を求め、よって消費者はトランス脂肪酸を避ける選択が可能である。これは常に実用的なわけではない。部分水素化植物油（従ってトランス脂肪酸）はしばしばファーストフードおよびスナックにおいて見出され、これは最も情報通の消費者に対してさえも高度に望ましいからである。
【０００７】
よって、求められるのは哺乳類によるトランス脂肪酸の吸収を低減する方法である。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
要約
一態様において、本発明は、１食当たり少なくとも０．５ｇのトランス脂肪酸、および食品を摂取する哺乳動物によるトランス脂肪酸の吸収を低減するのに十分な量の１種以上の水不溶性セルロース誘導体、を含む食品を提供する。
【０００９】
別の態様において、本発明は、トランス脂肪酸を摂取した哺乳動物に対するトランス脂肪酸の弊害を改善する方法であって、１種以上の水不溶性セルロース誘導体を哺乳動物に投与することを含む方法を提供する。
【００１０】
別の態様において、本発明は、トランス脂肪酸含有食品を摂取する哺乳動物に吸収される能力を有するトランス脂肪酸の量を低減する方法であって、１種以上の水不溶性セルロース誘導体を食品に組入れるステップ、または１種以上の水不溶性セルロース誘導体を食品の摂取の前、間もしくは後に哺乳動物に投与するステップ、の少なくとも１つを含む方法を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
詳細な説明
一態様において、本発明は、１食当たり少なくとも０．５ｇのトランス脂肪酸、および食品を摂取する哺乳動物によるトランス脂肪酸の吸収を低減するのに十分な量の１種以上の水不溶性セルロース誘導体、を含む食品を提供する。
【００１２】
用語「トランス脂肪酸」は、共役系ではない１つ以上のトランス結合を含有する脂肪酸を意味する。上記のように、トランス脂肪酸は、部分水素化植物油の不所望の副生成物である。エライジン酸は一般的なトランス脂肪酸である。
【００１３】
トランス脂肪酸を食物中に組入れるための２つの主要な手段は、マーガリンまたは植物性ショートニングの食物への添加または部分水素化油中での食物のフライを含む。この用途の目的のために、食品は、典型的には部分水素化植物油で調理された任意の調理済食品であることができる。このような食物の例としては、焼いたもの（クッキー、クラッカー、ケーキ、パイ、マフィン、ドーナツ、および特定のパン（例えばハンバーガーバンズ）が挙げられる）、揚げ物および揚げる前の食物（ドーナツ、フレンチフライ、フライドチキン、チキンナゲット、フィッシュスティック、およびタコス皮が挙げられる）、スナック食（ポテトチップ、コーンチップ、トルティーヤチップ、ピーナツバター、ホイップトッピング、インスタントマッシュポテト、キャンディ、およびポップコーンが挙げられる）、ならびにプレパッケージミックス（ケーキミックス、パンケーキミックス、ビスケットミックス、コーンブレッドミックス、フロスティングミックス、チョコレートドリンクミックス、特定の冷凍食品、ピザ生地、焼くだけのベーカリー製品、トースターペストリー、ワッフル、パンケーキが挙げられる）が挙げられる。歴史的に、ファーストフードレストランは、その予め調理された食物および比較的低コストの揚げ油の使用に起因してトランス脂肪酸と関わってきた。
【００１４】
トランス脂肪酸を回避するための以前の方策は、部分水素化植物油をよりコスト高の代替物に置き換えてきたが、今や水不溶性セルロース誘導体を哺乳動物の食餌に組入れることが、食物の摂取によって哺乳動物によって吸収されるトランス脂肪酸の量を低減することによって有利な効果を有することを見出した。これは「バルク繊維効果」ではないと考えられる。水不溶性セルロース誘導体が微結晶セルロースよりも有効であることが見出されたからである。
【００１５】
本発明の食品は、食品の総質量基準で２〜１０質量％、より好ましくは２〜６質量％の水不溶性セルロース誘導体を含む。食品中の水不溶性セルロース誘導体の最も好ましいパーセントは、主として栄養学的および官能的な検討によって決定される種々の要因に左右される。
【００１６】
一態様において、本発明において有用なセルロース誘導体は水不溶性である。用語「セルロース誘導体」は、修飾されていないセルロース自体は包含しない。本明細書で用いる用語「水不溶性」は、セルロース誘導体の水中の溶解性が、１００グラムの蒸留水中、２５℃および１気圧で２グラム未満、好ましくは１グラム未満であることを意味する。
【００１７】
好ましい水不溶性セルロースエーテルは、エチルセルロース、プロピルセルロースまたはブチルセルロースである。他の有用な水不溶性セルロース誘導体は、化学的（好ましくは疎水的）に修飾されて水不溶性が付与されたセルロース誘導体である。化学的な修飾は、疎水性長鎖の分岐または非分岐のアルキル基、アリールアルキル基またはアルキルアリール基で実現できる。「長鎖」は、典型的には、少なくとも５個、より典型的には少なくとも１０個、特に少なくとも１２個の炭素原子を意味する。他の型の水不溶性セルロースは、架橋セルロース（種々の架橋剤を用いる場合）である。化学的に修飾された（例えば疎水的に修飾された）水不溶性セルロース誘導体は当該分野で公知である。これらは、１００グラムの蒸留水中、２５℃および１気圧で２グラム未満、好ましくは１グラム未満の水中の溶解性を有することを条件に有用である。最も好ましいセルロース誘導体はエチルセルロースである。エチルセルロースは好ましくは４０〜５５パーセント、より好ましくは４３〜５３パーセント、最も好ましくは４４〜５１パーセントのエトキシル置換を有する。エトキシル置換パーセントは、置換生成物の質量基準であり、そして、ＡＳＴＭ Ｄ４７９４−９４（２００３）に記載されるＺｅｉｓｅｌガスクロマトグラフィー法に従って評価する。エチルセルロースの分子量は、２５℃にて８０体積パーセントのトルエンと２０体積パーセントのエタノールとの混合物中で測定される、エチルセルロースの５質量パーセント溶液の粘度で表される。エチルセルロース濃度は、トルエン、エタノールおよびエチルセルロースの総質量基準である。粘度は、ＡＳＴＭ Ｄ９１４−００にて概説され、そしてＡＳＴＭ Ｄ４４６−０４（これはＡＳＴＭ Ｄ９１４−００において引用されている）にて更に詳述されるようにウベローデ管を用いて測定する。エチルセルロースは、一般的に、上記のように測定される粘度が４００ｍＰａ・ｓ以下、好ましくは３００ｍＰａ・ｓ以下、より好ましくは１００ｍＰａ・ｓ以下である。好ましいエチルセルロースは、プレミアムグレードＥＴＨＯＣＥＬエチルセルロース（Ｔｈｅ Ｄｏｗ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｍｉｄｌａｎｄ，Ｍｉｃｈｉｇａｎから市販で入手可能）である。２種以上の水不溶性セルロース誘導体の組合せもまた有用である。
【００１８】
好ましくは、水不溶性セルロース誘導体は平均粒子サイズが０．１ミリメートル未満、より好ましくは０．０５ミリメートル未満、最も好ましくは０．０２ミリメートル未満である。
【００１９】
更に別の態様において、本発明は、トランス脂肪酸を摂取した哺乳動物に対するトランス脂肪酸の弊害を改善する方法であって、１種以上の水不溶性セルロース誘導体を哺乳動物に投与することを含む方法を提供する。
【００２０】
更に別の態様において、本発明は、トランス脂肪酸含有食品を摂取する哺乳動物に吸収される能力を有するトランス脂肪酸の量を低減する方法であって、１種以上の水不溶性セルロース誘導体を食品に組入れるステップ、または１種以上の水不溶性セルロース誘導体を、食品の摂取の前、間もしくは後に哺乳動物に投与するステップ、の少なくとも１つを含む方法を提供する。
【００２１】
食品中の１種以上の水不溶性セルロース誘導体の存在、または１種以上の水不溶性セルロース誘導体の食品との組合せでの投与は、特に有効である。水不溶性セルロース誘導体は、好ましくは、水不溶性セルロース誘導体の１日用量が一般的に哺乳動物の体重１キログラム当たり１日２０〜７００ミリグラムの水不溶性セルロース誘導体となるような量で、食品中に組入れ、または食品の摂取の前、間または後に投与する。好ましくは約２〜３０ｇ、より好ましくは約３〜２５ｇの水不溶性セルロース誘導体が、大型哺乳動物（例えば人間）によって摂取される。水不溶性セルロース誘導体の最も好ましい量は種々の要因（例えば食餌の脂肪含有量）に左右される。
【００２２】
水不溶性セルロース誘導体を食品と別に投与する場合、これは、例えば、粉末化、逆腸溶性コートまたはマイクロカプセル化されたセルロースエーテルであって香味付けされたドリンク配合物中に懸濁されたものの形状で、タブレット、カプセル、小袋またはカプレットとして、投与できる。水不溶性セルロース誘導体を食品と別に投与する場合、食品とともに適切な時間枠内で、好ましくは食品の摂取の前または後約３０分間以内に、より好ましくは食品の摂取の前または後約１５分間以内に摂取するのがよい。
【００２３】
例
以下の例は例示のみの目的であり、本発明の範囲の限定を意図しない。全てのパーセントは特記がない限り質量基準である。
【００２４】
例１
オスのシリアンゴールデンハムスター（開始時体重が８０〜９０グラムの間である）（ＬＶＧ ｓｔｒａｉｎ，Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｗｉｌｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）に標準ラボ飼料（ラボ「ｃｈｏｗ」）を７日間与えて順応させた。
【００２５】
順応させたハムスターを次いで表１中に記載する６つの群の１つに割り当てた：
【００２６】
【表１】
【００２７】
成分はグラム単位で列挙し、更なる詳細は以下の通りである：
スーパーサイズ−ハンバーガー／フレンチフライ食（フリーズドライおよび粉末化したもの）。エネルギー摂取量は約３３．６２％であり、そしてトランス脂肪含有量は約１．３％であった。
【００２８】
パウンドケーキ−フリーズドライおよび粉末化したパウンドケーキ。エネルギー摂取量は約３２．８％であり、そしてトランス脂肪含有量は約０．７％であった。
【００２９】
ピザ−フリーズドライおよび粉末化したピザ。エネルギー摂取量は約２６．５％であり、そしてトランス脂肪含有量は約０．３％であった。
【００３０】
ビタミンミックス−１．０ｇ／Ｋｇ ビタミンＡパルミテート（５００，０００ ＩＵ／ｇ），０．６ｇ／Ｋｇ ビタミンＤ３（４００，０００ ＩＵ／ｇ），１０．０ｇ／Ｋｇ ビタミンＥアセテート（５００ ＩＵ／ｇ），１０．０ｇ／Ｋｇ イノシトール，０．４ｇ／Ｋｇ メナジオン硫酸水素ナトリウム，９．０ｇ／Ｋｇ ナイアシン，１．５ｇ／Ｋｇ リボフラビン，２．０ｇ／Ｋｇ チアミンＨＣｌ，０．７ｇ／Ｋｇ ピリドキシンＨＣｌ，４．０ｇ／Ｋｇ パントテン酸カルシウム、０．０６ｇ／Ｋｇ ビオチン，０．２ｇ／Ｋｇ 葉酸，１．０ｇ／Ｋｇ ビタミンＢ１２（０．１％），および９５９．５４ｇ／Ｋｇ スクロース。［ＮＲＣ Ｎｕｔｒｉｅｎｔ Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ，３rd Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９７８．Ｄｙｅｔｓ，Ｉｎｃ．，Ｄｒ．Ｈ．Ｌ．Ｙｏｗｅｌｌによる推奨］
【００３１】
ミネラルミックス−３８８．２ｇ／Ｋｇ リン酸カリウム，二塩基，８５．６ｇ／Ｋｇ リン酸カルシウム，二塩基，３６３．９ｇ／Ｋｇ 炭酸カルシウム，１０９．０ｇ／Ｋｇ 塩化ナトリウム，２８．５６ｇ／Ｋｇ 酸化マグネシウム，２２．９４ｇ／Ｋｇ クエン酸第二鉄，Ｕ．Ｓ．Ｐ．，０．０６ｇ／Ｋｇ 炭酸コバルト，０．２９ｇ／Ｋｇ 炭酸第二銅，０．０１ｇ／Ｋｇ フッ化ナトリウム，０．０６ｇ／Ｋｇ ヨウ化カリウム，０．２２ｇ／Ｋｇ 炭酸マンガン，１．１１ｇ／Ｋｇ 炭酸亜鉛，０．０４ｇ／Ｋｇ 酢酸クロム，０．０１ｇ／Ｋｇ 亜セレン酸ナトリウム。［ＮＲＣ Ｎｕｔｒｉｅｎｔ Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ，３rd Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９７８．Ｄｙｅｔｓ，Ｉｎｃ．，Ｄｒ．Ｈ．Ｌ．Ｙｏｗｅｌｌによる推奨］
【００３２】
ＥＣ−Ｓｔａｎｄａｒｄ １０Ｆ Ｐｒｅｍｉｕｍ ＦＰグレードのエチルセルロース（ＥＣ）（Ｔｈｅ Ｄｏｗ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙより）。存在する場合、用量は約４％（ｗｔ／ｗｔ）であった。
【００３３】
ＭＣＣ−微結晶セルロース（ＭＣＣ）。存在する場合、用量は約４％（ｗｔ／ｗｔ）であった。
【００３４】
検討は、Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｒｅｇｉｏｎａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ，ＵＳＤＡ，Ａｌｂａｎｙ，ＣＡによって承認されたものであり、実験動物のケアおよび使用のための全てのガイドラインに従った。動物に表１による飼料（これらに２０日間割り当てられるもの）を与え、１０日および２０日で糞便を回収した。各回収時間にて糞便をフリーズドライした。
【００３５】
糞便の脂肪含有量分析のために、糞便を１０分間ＳＰＥＸ ８０００または８００００のミキサーミルで、２つのタングステンカーバイドボールをタングステンカーバイドシリンダー内で用いて粉砕した。約０．１５ｇの粉砕した糞便をＤＩＯＮＥＸ １１ｍＬ Ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ Ｓｏｌｖｅｎｔ Ｅｘｔｒａｃｔｏｒ（ＡＳＥ）セルに計り入れ、そして約３．５ｇの珪藻土（砂）と大まかに撹拌しながら組合せた。１００μＬの、グリセリルトリエルケートのテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中５００μｇ／ｍＬ溶液をセルに添加し、そして混合物を２つのセルロースフィルター間に挟んだ。
【００３６】
セル内容物を、６００ｍＬのヘキサン、４００ｍＬの２−プロパノール、および２０ｍＬの酢酸を含有する抽出溶媒で、ＤＩＯＮＥＸ ＡＳＥシステムで以下の条件で抽出した：予熱１分、圧力２１７５ｐｓｉ、加熱５分、温度６０℃、静止１０分、フラッシュ６０％、パージ１２０秒、サイクル＝２。これにより２０ｍＬのサンプル抽出回収物が得られた。
【００３７】
混合後、９．０ｍＬの抽出物を風袋計量した１６×１２５ｍｍねじ蓋式培養管内に入れた。抽出物を４５℃水浴中で窒素パージにて送風乾燥した。４ｍＬアリコートのアセトニトリルを添加し、そして混合物を再度送風乾燥した。
【００３８】
サンプルを、以下の手順を用いて誘導体化した：
１．３００μＬアリコートの０．５Ｎ ＮａＯＨ（ＭｅＯＨ（メタノール）中）を、培養管内の各サンプルに添加した。
２．管に蓋をし、ボルテックスし、そして１００℃にて５分間、加熱ブロック内に入れた。
３．サンプルを約１分間冷やした。
４．サンプルの蓋を開け、そして３５０μＬの１４％の三フッ化ホウ素（ＭｅＯＨ中）を添加した。
５．サンプルに蓋をし、ボルテックスし、そして１００℃にて５分間、加熱ブロック内に入れた。
６．サンプルを約１分間冷やした。
７．バイアルの蓋を開け、そして２ｍＬのヘプタン（０．２００ｍｇ／ｍＬノナデカン（ヘプタン中））を添加した。
８．バイアルに再度蓋をし、ボルテックスし、そして１００℃にて５分間、加熱ブロック内に戻し入れた。
９．サンプルを約１分間冷やした。
１０．バイアルの蓋を開け、そして１ｍＬの塩飽和Ｈ2Ｏ溶液を添加した。
１１．これらに再度蓋をして５分間ロッカー上に置いた。
１２．これらを次いで１５００ｒｐｍにて１０分間遠心分離した。
１３．パスツールピペットを用い、約１ｍＬの有機（上部）層をガスクロマトグラフィ（ＧＣ）バイアル内に移した。
【００３９】
誘導体化サンプルはガスクロマトグラフィによって以下の条件に従って分析した：
クロマトグラフ：Ａｇｉｌｅｎｔ ６８９０シリーズＧＣ
カラム：６０ｍ×０．２５ｍｍ（Ｌ×ＩＤ），０．２５μｍ ｄｆ，
検出器：ＦＩＤ（フレームイオン化検出器）
温度：
オーブン：２００℃（５分），２５０℃まで５℃／分にて５分間，最終保持時間
インジェクター：２５０℃
検出器：２６０℃
キャリア：３ｍＬ／分，２００℃（６２．５ｐｓｉ）にて
スプリット：２５ｍＬ／分
構成：ヘリウム２７ｍＬ／分
エア：４００ｍＬ／分
水素：３０ｍＬ／分
サンプルサイズ：２μＬ
データシステム：ＥＺＣｈｒｏｍ Ｅｌｉｔｅ Ｖｅｒｓｉｏｎ ３．２．１
【００４０】
較正のために、０．２００ｍｇ／ｍＬノナデカンおよび０．１０ｍｇ／ｍＬエルカ酸メチル（ヘプタン中）を含有するようにスパイク標準を準備した。較正溶液は、１０ｍｇのＮｕＣｈｅｃｋ Ｓｔａｎｄａｒｄ １Ａを１．０ｍＬの容量フラスコ内に計り出すことによって調製した。このフラスコに、１１０μＬのスパイク標準を添加した。フラスコを、０．２００ｍｇ／ｍＬのノナデカンを含有するヘプタンで容量希釈した。ＮｕＣｈｅｃｋ Ｓｔａｎｄａｒｄ １Ａは、２０％のパルミチン酸メチル（Ｃ１６：０），ステアリン酸メチル（Ｃ１８：０），オレイン酸メチル（Ｃ１８：１），リノール酸メチル（Ｃ１８：２）およびリノレン酸メチル（Ｃ１８：３）の各々を含有していた。よって、較正溶液は、２０００μｇ／ｍＬのこれらの５つの成分、更に２００μｇ／ｍＬのノナデカンおよび１１μｇ／ｍＬのエルカ酸メチルを含有していた。
【００４１】
トランス脂肪酸は、モノ不飽和トランス脂肪酸Ｃ１６：１，Ｃ１８：１，Ｃ１８：２およびＣ２０：１の合計によって評価した。トランス脂肪酸は、スパイク実験によって、そしてＧＣカラム製造元による文献において与えられる溶出順序によって同定した。結果を表２に列挙する。
【００４２】
【表２】
【００４３】
結果はｍｇ／ｇ単位で報告する。処置群（４％ＥＣを与えたもの）は、対照群に対して、トランス脂肪酸の排泄の顕著な増大を有した。よって、ＥＣは、動物の身体によって吸収されるトランス脂肪酸の低減に寄与した。アスタリスクを付して示したデータは、９５％信頼区間で顕著であった。
【００４４】
例２
オスのシリアンゴールデンハムスター（開始時体重が８０〜９０グラムの間である）（ＬＶＧ ｓｔｒａｉｎ，Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｗｉｌｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）に標準ラボ飼料（ラボ「ｃｈｏｗ」）を７日間与えて順応させた。
【００４５】
順応させたハムスターを次いで表３中に記載する群の１つに割り当てた：
【００４６】
【表３】
【００４７】
成分はグラム単位で列挙し、更なる詳細は以下の通りである：
ボローニャ−フリーズドライおよび粉末化したボローニャであり、トランス脂肪含有量約１．０％を有した。
【００４８】
チーズ−フリーズドライおよび粉末化したチーズであり、トランス脂肪含有量約０．４％を有した。
【００４９】
ポテトチップ−フリーズドライおよび粉末化したポテトチップであり、トランス脂肪含有量約０．３％を有した。
【００５０】
ビタミンミックス−１．０ｇ／Ｋｇ ビタミンＡパルミテート（５００，０００ ＩＵ／ｇ），０．６ｇ／Ｋｇ ビタミンＤ３（４００，０００ ＩＵ／ｇ），１０．０ｇ／Ｋｇ ビタミンＥアセテート（５００ ＩＵ／ｇ），１０．０ｇ／Ｋｇ イノシトール，０．４ｇ／Ｋｇ メナジオン硫酸水素ナトリウム，９．０ｇ／Ｋｇ ナイアシン，１．５ｇ／Ｋｇ リボフラビン，２．０ｇ／Ｋｇ チアミンＨＣｌ，０．７ｇ／Ｋｇ ピリドキシンＨＣｌ，４．０ｇ／Ｋｇ パントテン酸カルシウム、０．０６ｇ／Ｋｇ ビオチン，０．２ｇ／Ｋｇ 葉酸，１．０ｇ／Ｋｇ ビタミンＢ１２（０．１％），および９５９．５４ｇ／Ｋｇ スクロース。［ＮＲＣ Ｎｕｔｒｉｅｎｔ Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ，３rd Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９７８．Ｄｙｅｔｓ，Ｉｎｃ．，Ｄｒ．Ｈ．Ｌ．Ｙｏｗｅｌｌによる推奨］
【００５１】
ミネラルミックス−３８８．２ｇ／Ｋｇ リン酸カリウム，二塩基，８５．６ｇ／Ｋｇ リン酸カルシウム，二塩基，３６３．９ｇ／Ｋｇ 炭酸カルシウム，１０９．０ｇ／Ｋｇ 塩化ナトリウム，２８．５６ｇ／Ｋｇ 酸化マグネシウム，２２．９４ｇ／Ｋｇ クエン酸第二鉄，Ｕ．Ｓ．Ｐ．，０．０６ｇ／Ｋｇ 炭酸コバルト，０．２９ｇ／Ｋｇ 炭酸第二銅，０．０１ｇ／Ｋｇ フッ化ナトリウム，０．０６ｇ／Ｋｇ ヨウ化カリウム，０．２２ｇ／Ｋｇ 炭酸マンガン，１．１１ｇ／Ｋｇ 炭酸亜鉛，０．０４ｇ／Ｋｇ 酢酸クロム，０．０１ｇ／Ｋｇ 亜セレン酸ナトリウム。［ＮＲＣ Ｎｕｔｒｉｅｎｔ Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ，３rd Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９７８．Ｄｙｅｔｓ，Ｉｎｃ．，Ｄｒ．Ｈ．Ｌ．Ｙｏｗｅｌｌによる推奨］
【００５２】
ＥＣ−Ｓｔａｎｄａｒｄ １０Ｆ Ｐｒｅｍｉｕｍ ＦＰグレードのエチルセルロース（ＥＣ）（Ｔｈｅ Ｄｏｗ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙより）。存在する場合、用量は約４％（ｗｔ／ｗｔ）であった。
【００５３】
ＭＣＣ−微結晶セルロース（ＭＣＣ）。存在する場合、用量は約４％（ｗｔ／ｗｔ）であった。
【００５４】
検討は、Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｒｅｇｉｏｎａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ，ＵＳＤＡ，Ａｌｂａｎｙ，ＣＡによって承認されたものであり、実験動物のケアおよび使用のための全てのガイドラインに従った。動物に表３による飼料（これらに割り当てられるもの）を与え、６日で糞便を回収した。
【００５５】
糞便中のトランス脂肪酸含有量を例１で記載したようにして分析した。結果を表４に列挙する。
【００５６】
【表４】
【００５７】
結果はｍｇ／ｇ単位で報告する。処置群（４％ＥＣを与えたもの）は、ボローニャ飼料を除き、対照群に対して、トランス脂肪酸の排泄の顕著な増大を有した。よって、ＥＣは、動物の身体によって吸収されるトランス脂肪酸の低減に寄与した。アスタリスクを付して示したデータは、９５％信頼区間で顕著であった。
【００５８】
本発明は、本明細書において具体的に開示および例示された態様に限定されないことが理解される。発明の種々の改変が当業者に明らかとなろう。このような変化および改変は特許請求の範囲の範囲から逸脱することなくなされることができる。
【００５９】
更に、各々の列挙される範囲は、範囲の全ての組合せおよび下位組合せ、更にこれに含まれる具体的な数値を包含する。加えて、本明細書において列挙または記載される各々の特許、特許出願および公開公報の開示は参照によりその全部を本明細書に組入れる。
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本件は、米国仮出願第６１／１０６，１６６号（２００８年１０月１７日出願）の利益を主張する。
【０００２】
分野
本発明は哺乳動物の健康および栄養摂取に関する。
【０００３】
連邦委託研究に関する記載
本発明は、米国農務省との共同研究開発契約（第５８−３Ｋ９５−５−１０７２号）の下でなされたものである。
【背景技術】
【０００４】
背景
他の食物脂肪と異なり、トランス脂肪酸は生物学的機能に必須ではなく、これらは健康的にも良くない。混乱を避けるため、天然由来のトランス脂肪共役リノール酸は健康効果を与える場合があり、よって「トランス脂肪酸」は典型的には、共役系ではない１つ以上のトランス結合を含有する脂肪酸を意味する。
【０００５】
トランス脂肪酸は、部分水素化植物油中のこれらの形態の長所による食品へのこれらの関与を見出すのみである。トランス脂肪酸は、植物油の部分水素化（これらの安定性および品質保持期間を増大させるために行う）の副生成物である。
【０００６】
これらの脂肪に基づくカロリーの寄与は別として、食物中のトランス脂肪酸は具体的に強い批判がなされてきた。トランス脂肪酸は、人体中の低密度リポタンパクＬＤＬ（悪玉）コレステロールレベルを増大させ、そして高密度リポタンパクＨＤＬ（善玉）コレステロールレベルを低下させ、心臓疾患のリスクを増大させるからである。検討はまた、トランス脂肪酸を脳卒中および２型糖尿病と結び付ける。保健機関は、トランス脂肪酸を避けることを推奨し、そして幾つかの国および米国の少なくとも１つの州は、地元生産の食物中のトランス脂肪酸を禁止することを試みてきた。米国食品医薬品局（ＦＤＡ）は異なる取組みを採り、生産者が制度外食物の栄養成分表パネル上にトランス脂肪を列挙すること（１食当たり０．５ｇ以上存在する場合）を求め、よって消費者はトランス脂肪酸を避ける選択が可能である。これは常に実用的なわけではない。部分水素化植物油（従ってトランス脂肪酸）はしばしばファーストフードおよびスナックにおいて見出され、これは最も情報通の消費者に対してさえも高度に望ましいからである。
【０００７】
よって、求められるのは哺乳類によるトランス脂肪酸の吸収を低減する方法である。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
要約
一態様において、本発明は、１食当たり少なくとも０．５ｇのトランス脂肪酸、および食品を摂取する哺乳動物によるトランス脂肪酸の吸収を低減するのに十分な量の１種以上の水不溶性セルロース誘導体、を含む食品を提供する。
【０００９】
別の態様において、本発明は、トランス脂肪酸を摂取した哺乳動物に対するトランス脂肪酸の弊害を改善する方法であって、１種以上の水不溶性セルロース誘導体を哺乳動物に投与することを含む方法を提供する。
【００１０】
別の態様において、本発明は、トランス脂肪酸含有食品を摂取する哺乳動物に吸収される能力を有するトランス脂肪酸の量を低減する方法であって、１種以上の水不溶性セルロース誘導体を食品に組入れるステップ、または１種以上の水不溶性セルロース誘導体を食品の摂取の前、間もしくは後に哺乳動物に投与するステップ、の少なくとも１つを含む方法を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
詳細な説明
一態様において、本発明は、１食当たり少なくとも０．５ｇのトランス脂肪酸、および食品を摂取する哺乳動物によるトランス脂肪酸の吸収を低減するのに十分な量の１種以上の水不溶性セルロース誘導体、を含む食品を提供する。
【００１２】
用語「トランス脂肪酸」は、共役系ではない１つ以上のトランス結合を含有する脂肪酸を意味する。上記のように、トランス脂肪酸は、部分水素化植物油の不所望の副生成物である。エライジン酸は一般的なトランス脂肪酸である。
【００１３】
トランス脂肪酸を食物中に組入れるための２つの主要な手段は、マーガリンまたは植物性ショートニングの食物への添加または部分水素化油中での食物のフライを含む。この用途の目的のために、食品は、典型的には部分水素化植物油で調理された任意の調理済食品であることができる。このような食物の例としては、焼いたもの（クッキー、クラッカー、ケーキ、パイ、マフィン、ドーナツ、および特定のパン（例えばハンバーガーバンズ）が挙げられる）、揚げ物および揚げる前の食物（ドーナツ、フレンチフライ、フライドチキン、チキンナゲット、フィッシュスティック、およびタコス皮が挙げられる）、スナック食（ポテトチップ、コーンチップ、トルティーヤチップ、ピーナツバター、ホイップトッピング、インスタントマッシュポテト、キャンディ、およびポップコーンが挙げられる）、ならびにプレパッケージミックス（ケーキミックス、パンケーキミックス、ビスケットミックス、コーンブレッドミックス、フロスティングミックス、チョコレートドリンクミックス、特定の冷凍食品、ピザ生地、焼くだけのベーカリー製品、トースターペストリー、ワッフル、パンケーキが挙げられる）が挙げられる。歴史的に、ファーストフードレストランは、その予め調理された食物および比較的低コストの揚げ油の使用に起因してトランス脂肪酸と関わってきた。
【００１４】
トランス脂肪酸を回避するための以前の方策は、部分水素化植物油をよりコスト高の代替物に置き換えてきたが、今や水不溶性セルロース誘導体を哺乳動物の食餌に組入れることが、食物の摂取によって哺乳動物によって吸収されるトランス脂肪酸の量を低減することによって有利な効果を有することを見出した。これは「バルク繊維効果」ではないと考えられる。水不溶性セルロース誘導体が微結晶セルロースよりも有効であることが見出されたからである。
【００１５】
本発明の食品は、食品の総質量基準で２〜１０質量％、より好ましくは２〜６質量％の水不溶性セルロース誘導体を含む。食品中の水不溶性セルロース誘導体の最も好ましいパーセントは、主として栄養学的および官能的な検討によって決定される種々の要因に左右される。
【００１６】
一態様において、本発明において有用なセルロース誘導体は水不溶性である。用語「セルロース誘導体」は、修飾されていないセルロース自体は包含しない。本明細書で用いる用語「水不溶性」は、セルロース誘導体の水中の溶解性が、１００グラムの蒸留水中、２５℃および１気圧で２グラム未満、好ましくは１グラム未満であることを意味する。
【００１７】
好ましい水不溶性セルロースエーテルは、エチルセルロース、プロピルセルロースまたはブチルセルロースである。他の有用な水不溶性セルロース誘導体は、化学的（好ましくは疎水的）に修飾されて水不溶性が付与されたセルロース誘導体である。化学的な修飾は、疎水性長鎖の分岐または非分岐のアルキル基、アリールアルキル基またはアルキルアリール基で実現できる。「長鎖」は、典型的には、少なくとも５個、より典型的には少なくとも１０個、特に少なくとも１２個の炭素原子を意味する。他の型の水不溶性セルロースは、架橋セルロース（種々の架橋剤を用いる場合）である。化学的に修飾された（例えば疎水的に修飾された）水不溶性セルロース誘導体は当該分野で公知である。これらは、１００グラムの蒸留水中、２５℃および１気圧で２グラム未満、好ましくは１グラム未満の水中の溶解性を有することを条件に有用である。最も好ましいセルロース誘導体はエチルセルロースである。エチルセルロースは好ましくは４０〜５５パーセント、より好ましくは４３〜５３パーセント、最も好ましくは４４〜５１パーセントのエトキシル置換を有する。エトキシル置換パーセントは、置換生成物の質量基準であり、そして、ＡＳＴＭ Ｄ４７９４−９４（２００３）に記載されるＺｅｉｓｅｌガスクロマトグラフィー法に従って評価する。エチルセルロースの分子量は、２５℃にて８０体積パーセントのトルエンと２０体積パーセントのエタノールとの混合物中で測定される、エチルセルロースの５質量パーセント溶液の粘度で表される。エチルセルロース濃度は、トルエン、エタノールおよびエチルセルロースの総質量基準である。粘度は、ＡＳＴＭ Ｄ９１４−００にて概説され、そしてＡＳＴＭ Ｄ４４６−０４（これはＡＳＴＭ Ｄ９１４−００において引用されている）にて更に詳述されるようにウベローデ管を用いて測定する。エチルセルロースは、一般的に、上記のように測定される粘度が４００ｍＰａ・ｓ以下、好ましくは３００ｍＰａ・ｓ以下、より好ましくは１００ｍＰａ・ｓ以下である。好ましいエチルセルロースは、プレミアムグレードＥＴＨＯＣＥＬエチルセルロース（Ｔｈｅ Ｄｏｗ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｍｉｄｌａｎｄ，Ｍｉｃｈｉｇａｎから市販で入手可能）である。２種以上の水不溶性セルロース誘導体の組合せもまた有用である。
【００１８】
好ましくは、水不溶性セルロース誘導体は平均粒子サイズが０．１ミリメートル未満、より好ましくは０．０５ミリメートル未満、最も好ましくは０．０２ミリメートル未満である。
【００１９】
更に別の態様において、本発明は、トランス脂肪酸を摂取した哺乳動物に対するトランス脂肪酸の弊害を改善する方法であって、１種以上の水不溶性セルロース誘導体を哺乳動物に投与することを含む方法を提供する。
【００２０】
更に別の態様において、本発明は、トランス脂肪酸含有食品を摂取する哺乳動物に吸収される能力を有するトランス脂肪酸の量を低減する方法であって、１種以上の水不溶性セルロース誘導体を食品に組入れるステップ、または１種以上の水不溶性セルロース誘導体を、食品の摂取の前、間もしくは後に哺乳動物に投与するステップ、の少なくとも１つを含む方法を提供する。
【００２１】
食品中の１種以上の水不溶性セルロース誘導体の存在、または１種以上の水不溶性セルロース誘導体の食品との組合せでの投与は、特に有効である。水不溶性セルロース誘導体は、好ましくは、水不溶性セルロース誘導体の１日用量が一般的に哺乳動物の体重１キログラム当たり１日２０〜７００ミリグラムの水不溶性セルロース誘導体となるような量で、食品中に組入れ、または食品の摂取の前、間または後に投与する。好ましくは約２〜３０ｇ、より好ましくは約３〜２５ｇの水不溶性セルロース誘導体が、大型哺乳動物（例えば人間）によって摂取される。水不溶性セルロース誘導体の最も好ましい量は種々の要因（例えば食餌の脂肪含有量）に左右される。
【００２２】
水不溶性セルロース誘導体を食品と別に投与する場合、これは、例えば、粉末化、逆腸溶性コートまたはマイクロカプセル化されたセルロースエーテルであって香味付けされたドリンク配合物中に懸濁されたものの形状で、タブレット、カプセル、小袋またはカプレットとして、投与できる。水不溶性セルロース誘導体を食品と別に投与する場合、食品とともに適切な時間枠内で、好ましくは食品の摂取の前または後約３０分間以内に、より好ましくは食品の摂取の前または後約１５分間以内に摂取するのがよい。
【００２３】
例
以下の例は例示のみの目的であり、本発明の範囲の限定を意図しない。全てのパーセントは特記がない限り質量基準である。
【００２４】
例１
オスのシリアンゴールデンハムスター（開始時体重が８０〜９０グラムの間である）（ＬＶＧ ｓｔｒａｉｎ，Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｗｉｌｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）に標準ラボ飼料（ラボ「ｃｈｏｗ」）を７日間与えて順応させた。
【００２５】
順応させたハムスターを次いで表１中に記載する６つの群の１つに割り当てた：
【００２６】
【表１】
【００２７】
成分はグラム単位で列挙し、更なる詳細は以下の通りである：
スーパーサイズ−ハンバーガー／フレンチフライ食（フリーズドライおよび粉末化したもの）。エネルギー摂取量は約３３．６２％であり、そしてトランス脂肪含有量は約１．３％であった。
【００２８】
パウンドケーキ−フリーズドライおよび粉末化したパウンドケーキ。エネルギー摂取量は約３２．８％であり、そしてトランス脂肪含有量は約０．７％であった。
【００２９】
ピザ−フリーズドライおよび粉末化したピザ。エネルギー摂取量は約２６．５％であり、そしてトランス脂肪含有量は約０．３％であった。
【００３０】
ビタミンミックス−１．０ｇ／Ｋｇ ビタミンＡパルミテート（５００，０００ ＩＵ／ｇ），０．６ｇ／Ｋｇ ビタミンＤ３（４００，０００ ＩＵ／ｇ），１０．０ｇ／Ｋｇ ビタミンＥアセテート（５００ ＩＵ／ｇ），１０．０ｇ／Ｋｇ イノシトール，０．４ｇ／Ｋｇ メナジオン硫酸水素ナトリウム，９．０ｇ／Ｋｇ ナイアシン，１．５ｇ／Ｋｇ リボフラビン，２．０ｇ／Ｋｇ チアミンＨＣｌ，０．７ｇ／Ｋｇ ピリドキシンＨＣｌ，４．０ｇ／Ｋｇ パントテン酸カルシウム、０．０６ｇ／Ｋｇ ビオチン，０．２ｇ／Ｋｇ 葉酸，１．０ｇ／Ｋｇ ビタミンＢ１２（０．１％），および９５９．５４ｇ／Ｋｇ スクロース。［ＮＲＣ Ｎｕｔｒｉｅｎｔ Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ，３rd Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９７８．Ｄｙｅｔｓ，Ｉｎｃ．，Ｄｒ．Ｈ．Ｌ．Ｙｏｗｅｌｌによる推奨］
【００３１】
ミネラルミックス−３８８．２ｇ／Ｋｇ リン酸カリウム，二塩基，８５．６ｇ／Ｋｇ リン酸カルシウム，二塩基，３６３．９ｇ／Ｋｇ 炭酸カルシウム，１０９．０ｇ／Ｋｇ 塩化ナトリウム，２８．５６ｇ／Ｋｇ 酸化マグネシウム，２２．９４ｇ／Ｋｇ クエン酸第二鉄，Ｕ．Ｓ．Ｐ．，０．０６ｇ／Ｋｇ 炭酸コバルト，０．２９ｇ／Ｋｇ 炭酸第二銅，０．０１ｇ／Ｋｇ フッ化ナトリウム，０．０６ｇ／Ｋｇ ヨウ化カリウム，０．２２ｇ／Ｋｇ 炭酸マンガン，１．１１ｇ／Ｋｇ 炭酸亜鉛，０．０４ｇ／Ｋｇ 酢酸クロム，０．０１ｇ／Ｋｇ 亜セレン酸ナトリウム。［ＮＲＣ Ｎｕｔｒｉｅｎｔ Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ，３rd Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９７８．Ｄｙｅｔｓ，Ｉｎｃ．，Ｄｒ．Ｈ．Ｌ．Ｙｏｗｅｌｌによる推奨］
【００３２】
ＥＣ−Ｓｔａｎｄａｒｄ １０Ｆ Ｐｒｅｍｉｕｍ ＦＰグレードのエチルセルロース（ＥＣ）（Ｔｈｅ Ｄｏｗ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙより）。存在する場合、用量は約４％（ｗｔ／ｗｔ）であった。
【００３３】
ＭＣＣ−微結晶セルロース（ＭＣＣ）。存在する場合、用量は約４％（ｗｔ／ｗｔ）であった。
【００３４】
検討は、Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｒｅｇｉｏｎａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ，ＵＳＤＡ，Ａｌｂａｎｙ，ＣＡによって承認されたものであり、実験動物のケアおよび使用のための全てのガイドラインに従った。動物に表１による飼料（これらに２０日間割り当てられるもの）を与え、１０日および２０日で糞便を回収した。各回収時間にて糞便をフリーズドライした。
【００３５】
糞便の脂肪含有量分析のために、糞便を１０分間ＳＰＥＸ ８０００または８００００のミキサーミルで、２つのタングステンカーバイドボールをタングステンカーバイドシリンダー内で用いて粉砕した。約０．１５ｇの粉砕した糞便をＤＩＯＮＥＸ １１ｍＬ Ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ Ｓｏｌｖｅｎｔ Ｅｘｔｒａｃｔｏｒ（ＡＳＥ）セルに計り入れ、そして約３．５ｇの珪藻土（砂）と大まかに撹拌しながら組合せた。１００μＬの、グリセリルトリエルケートのテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中５００μｇ／ｍＬ溶液をセルに添加し、そして混合物を２つのセルロースフィルター間に挟んだ。
【００３６】
セル内容物を、６００ｍＬのヘキサン、４００ｍＬの２−プロパノール、および２０ｍＬの酢酸を含有する抽出溶媒で、ＤＩＯＮＥＸ ＡＳＥシステムで以下の条件で抽出した：予熱１分、圧力２１７５ｐｓｉ、加熱５分、温度６０℃、静止１０分、フラッシュ６０％、パージ１２０秒、サイクル＝２。これにより２０ｍＬのサンプル抽出回収物が得られた。
【００３７】
混合後、９．０ｍＬの抽出物を風袋計量した１６×１２５ｍｍねじ蓋式培養管内に入れた。抽出物を４５℃水浴中で窒素パージにて送風乾燥した。４ｍＬアリコートのアセトニトリルを添加し、そして混合物を再度送風乾燥した。
【００３８】
サンプルを、以下の手順を用いて誘導体化した：
１．３００μＬアリコートの０．５Ｎ ＮａＯＨ（ＭｅＯＨ（メタノール）中）を、培養管内の各サンプルに添加した。
２．管に蓋をし、ボルテックスし、そして１００℃にて５分間、加熱ブロック内に入れた。
３．サンプルを約１分間冷やした。
４．サンプルの蓋を開け、そして３５０μＬの１４％の三フッ化ホウ素（ＭｅＯＨ中）を添加した。
５．サンプルに蓋をし、ボルテックスし、そして１００℃にて５分間、加熱ブロック内に入れた。
６．サンプルを約１分間冷やした。
７．バイアルの蓋を開け、そして２ｍＬのヘプタン（０．２００ｍｇ／ｍＬノナデカン（ヘプタン中））を添加した。
８．バイアルに再度蓋をし、ボルテックスし、そして１００℃にて５分間、加熱ブロック内に戻し入れた。
９．サンプルを約１分間冷やした。
１０．バイアルの蓋を開け、そして１ｍＬの塩飽和Ｈ2Ｏ溶液を添加した。
１１．これらに再度蓋をして５分間ロッカー上に置いた。
１２．これらを次いで１５００ｒｐｍにて１０分間遠心分離した。
１３．パスツールピペットを用い、約１ｍＬの有機（上部）層をガスクロマトグラフィ（ＧＣ）バイアル内に移した。
【００３９】
誘導体化サンプルはガスクロマトグラフィによって以下の条件に従って分析した：
クロマトグラフ：Ａｇｉｌｅｎｔ ６８９０シリーズＧＣ
カラム：６０ｍ×０．２５ｍｍ（Ｌ×ＩＤ），０．２５μｍ ｄｆ，
検出器：ＦＩＤ（フレームイオン化検出器）
温度：
オーブン：２００℃（５分），２５０℃まで５℃／分にて５分間，最終保持時間
インジェクター：２５０℃
検出器：２６０℃
キャリア：３ｍＬ／分，２００℃（６２．５ｐｓｉ）にて
スプリット：２５ｍＬ／分
構成：ヘリウム２７ｍＬ／分
エア：４００ｍＬ／分
水素：３０ｍＬ／分
サンプルサイズ：２μＬ
データシステム：ＥＺＣｈｒｏｍ Ｅｌｉｔｅ Ｖｅｒｓｉｏｎ ３．２．１
【００４０】
較正のために、０．２００ｍｇ／ｍＬノナデカンおよび０．１０ｍｇ／ｍＬエルカ酸メチル（ヘプタン中）を含有するようにスパイク標準を準備した。較正溶液は、１０ｍｇのＮｕＣｈｅｃｋ Ｓｔａｎｄａｒｄ １Ａを１．０ｍＬの容量フラスコ内に計り出すことによって調製した。このフラスコに、１１０μＬのスパイク標準を添加した。フラスコを、０．２００ｍｇ／ｍＬのノナデカンを含有するヘプタンで容量希釈した。ＮｕＣｈｅｃｋ Ｓｔａｎｄａｒｄ １Ａは、２０％のパルミチン酸メチル（Ｃ１６：０），ステアリン酸メチル（Ｃ１８：０），オレイン酸メチル（Ｃ１８：１），リノール酸メチル（Ｃ１８：２）およびリノレン酸メチル（Ｃ１８：３）の各々を含有していた。よって、較正溶液は、２０００μｇ／ｍＬのこれらの５つの成分、更に２００μｇ／ｍＬのノナデカンおよび１１μｇ／ｍＬのエルカ酸メチルを含有していた。
【００４１】
トランス脂肪酸は、モノ不飽和トランス脂肪酸Ｃ１６：１，Ｃ１８：１，Ｃ１８：２およびＣ２０：１の合計によって評価した。トランス脂肪酸は、スパイク実験によって、そしてＧＣカラム製造元による文献において与えられる溶出順序によって同定した。結果を表２に列挙する。
【００４２】
【表２】
【００４３】
結果はｍｇ／ｇ単位で報告する。処置群（４％ＥＣを与えたもの）は、対照群に対して、トランス脂肪酸の排泄の顕著な増大を有した。よって、ＥＣは、動物の身体によって吸収されるトランス脂肪酸の低減に寄与した。アスタリスクを付して示したデータは、９５％信頼区間で顕著であった。
【００４４】
例２
オスのシリアンゴールデンハムスター（開始時体重が８０〜９０グラムの間である）（ＬＶＧ ｓｔｒａｉｎ，Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｗｉｌｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）に標準ラボ飼料（ラボ「ｃｈｏｗ」）を７日間与えて順応させた。
【００４５】
順応させたハムスターを次いで表３中に記載する群の１つに割り当てた：
【００４６】
【表３】
【００４７】
成分はグラム単位で列挙し、更なる詳細は以下の通りである：
ボローニャ−フリーズドライおよび粉末化したボローニャであり、トランス脂肪含有量約１．０％を有した。
【００４８】
チーズ−フリーズドライおよび粉末化したチーズであり、トランス脂肪含有量約０．４％を有した。
【００４９】
ポテトチップ−フリーズドライおよび粉末化したポテトチップであり、トランス脂肪含有量約０．３％を有した。
【００５０】
ビタミンミックス−１．０ｇ／Ｋｇ ビタミンＡパルミテート（５００，０００ ＩＵ／ｇ），０．６ｇ／Ｋｇ ビタミンＤ３（４００，０００ ＩＵ／ｇ），１０．０ｇ／Ｋｇ ビタミンＥアセテート（５００ ＩＵ／ｇ），１０．０ｇ／Ｋｇ イノシトール，０．４ｇ／Ｋｇ メナジオン硫酸水素ナトリウム，９．０ｇ／Ｋｇ ナイアシン，１．５ｇ／Ｋｇ リボフラビン，２．０ｇ／Ｋｇ チアミンＨＣｌ，０．７ｇ／Ｋｇ ピリドキシンＨＣｌ，４．０ｇ／Ｋｇ パントテン酸カルシウム、０．０６ｇ／Ｋｇ ビオチン，０．２ｇ／Ｋｇ 葉酸，１．０ｇ／Ｋｇ ビタミンＢ１２（０．１％），および９５９．５４ｇ／Ｋｇ スクロース。［ＮＲＣ Ｎｕｔｒｉｅｎｔ Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ，３rd Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９７８．Ｄｙｅｔｓ，Ｉｎｃ．，Ｄｒ．Ｈ．Ｌ．Ｙｏｗｅｌｌによる推奨］
【００５１】
ミネラルミックス−３８８．２ｇ／Ｋｇ リン酸カリウム，二塩基，８５．６ｇ／Ｋｇ リン酸カルシウム，二塩基，３６３．９ｇ／Ｋｇ 炭酸カルシウム，１０９．０ｇ／Ｋｇ 塩化ナトリウム，２８．５６ｇ／Ｋｇ 酸化マグネシウム，２２．９４ｇ／Ｋｇ クエン酸第二鉄，Ｕ．Ｓ．Ｐ．，０．０６ｇ／Ｋｇ 炭酸コバルト，０．２９ｇ／Ｋｇ 炭酸第二銅，０．０１ｇ／Ｋｇ フッ化ナトリウム，０．０６ｇ／Ｋｇ ヨウ化カリウム，０．２２ｇ／Ｋｇ 炭酸マンガン，１．１１ｇ／Ｋｇ 炭酸亜鉛，０．０４ｇ／Ｋｇ 酢酸クロム，０．０１ｇ／Ｋｇ 亜セレン酸ナトリウム。［ＮＲＣ Ｎｕｔｒｉｅｎｔ Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ，３rd Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９７８．Ｄｙｅｔｓ，Ｉｎｃ．，Ｄｒ．Ｈ．Ｌ．Ｙｏｗｅｌｌによる推奨］
【００５２】
ＥＣ−Ｓｔａｎｄａｒｄ １０Ｆ Ｐｒｅｍｉｕｍ ＦＰグレードのエチルセルロース（ＥＣ）（Ｔｈｅ Ｄｏｗ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙより）。存在する場合、用量は約４％（ｗｔ／ｗｔ）であった。
【００５３】
ＭＣＣ−微結晶セルロース（ＭＣＣ）。存在する場合、用量は約４％（ｗｔ／ｗｔ）であった。
【００５４】
検討は、Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｒｅｇｉｏｎａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ，ＵＳＤＡ，Ａｌｂａｎｙ，ＣＡによって承認されたものであり、実験動物のケアおよび使用のための全てのガイドラインに従った。動物に表３による飼料（これらに割り当てられるもの）を与え、６日で糞便を回収した。
【００５５】
糞便中のトランス脂肪酸含有量を例１で記載したようにして分析した。結果を表４に列挙する。
【００５６】
【表４】
【００５７】
結果はｍｇ／ｇ単位で報告する。処置群（４％ＥＣを与えたもの）は、ボローニャ飼料を除き、対照群に対して、トランス脂肪酸の排泄の顕著な増大を有した。よって、ＥＣは、動物の身体によって吸収されるトランス脂肪酸の低減に寄与した。アスタリスクを付して示したデータは、９５％信頼区間で顕著であった。
【００５８】
本発明は、本明細書において具体的に開示および例示された態様に限定されないことが理解される。発明の種々の改変が当業者に明らかとなろう。このような変化および改変は特許請求の範囲の範囲から逸脱することなくなされることができる。
【００５９】
更に、各々の列挙される範囲は、範囲の全ての組合せおよび下位組合せ、更にこれに含まれる具体的な数値を包含する。加えて、本明細書において列挙または記載される各々の特許、特許出願および公開公報の開示は参照によりその全部を本明細書に組入れる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１食当たり少なくとも０．５ｇのトランス脂肪酸；および
食品を摂取する哺乳動物によるトランス脂肪酸の吸収を低減するのに十分な量の、１種以上の水不溶性セルロース誘導体；
を含む、食品。
【請求項２】
水不溶性セルロース誘導体が、エチルセルロースである、請求項１に記載の食品。
【請求項３】
水不溶性セルロース誘導体が、食品の総質量基準で２〜１０質量％、より好ましくは２〜６質量％存在する、請求項１に記載の食品。
【請求項４】
食品が部分水素化植物油で調理されている、請求項１に記載の食品。
【請求項５】
トランス脂肪酸を摂取した哺乳動物に対するトランス脂肪酸の弊害を改善する方法であって、：
１種以上の水不溶性セルロース誘導体を哺乳動物に投与すること
を含む、方法。
【請求項６】
水不溶性セルロース誘導体が、エチルセルロースである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
哺乳動物が人間であり、そして水不溶性セルロース誘導体を、約２〜３０ｇ、より好ましくは約３〜２５ｇの量で投与する、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
トランス脂肪酸含有食品を摂取する哺乳動物に吸収される能力を有するトランス脂肪酸の量を低減する方法であって：
１種以上の水不溶性セルロース誘導体を食品に組入れるステップ；または
１種以上の水不溶性セルロース誘導体を、食品の摂取の前、間もしくは後に哺乳動物に投与するステップ；
を含む、方法。
【請求項９】
水不溶性セルロース誘導体が、エチルセルロースである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
水不溶性セルロース誘導体が、食品の総質量基準で２〜１０質量％、より好ましくは２〜６質量％存在する、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
食品が、部分水素化植物油で調理されている、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
哺乳動物が人間であり、そして水不溶性セルロース誘導体を、約２〜３０ｇ、より好ましくは約３〜２５ｇの量で投与する、請求項８に記載の方法。
【請求項１】
１食当たり少なくとも０．５ｇのトランス脂肪酸；および
食品を摂取する哺乳動物によるトランス脂肪酸の吸収を低減するのに十分な量の、１種以上の水不溶性セルロース誘導体；
を含む、食品。
【請求項２】
水不溶性セルロース誘導体が、エチルセルロースである、請求項１に記載の食品。
【請求項３】
水不溶性セルロース誘導体が、食品の総質量基準で２〜１０質量％、より好ましくは２〜６質量％存在する、請求項１に記載の食品。
【請求項４】
食品が部分水素化植物油で調理されている、請求項１に記載の食品。
【請求項５】
トランス脂肪酸を摂取した哺乳動物に対するトランス脂肪酸の弊害を改善する方法であって、：
１種以上の水不溶性セルロース誘導体を哺乳動物に投与すること
を含む、方法。
【請求項６】
水不溶性セルロース誘導体が、エチルセルロースである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
哺乳動物が人間であり、そして水不溶性セルロース誘導体を、約２〜３０ｇ、より好ましくは約３〜２５ｇの量で投与する、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
トランス脂肪酸含有食品を摂取する哺乳動物に吸収される能力を有するトランス脂肪酸の量を低減する方法であって：
１種以上の水不溶性セルロース誘導体を食品に組入れるステップ；または
１種以上の水不溶性セルロース誘導体を、食品の摂取の前、間もしくは後に哺乳動物に投与するステップ；
を含む、方法。
【請求項９】
水不溶性セルロース誘導体が、エチルセルロースである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
水不溶性セルロース誘導体が、食品の総質量基準で２〜１０質量％、より好ましくは２〜６質量％存在する、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
食品が、部分水素化植物油で調理されている、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
哺乳動物が人間であり、そして水不溶性セルロース誘導体を、約２〜３０ｇ、より好ましくは約３〜２５ｇの量で投与する、請求項８に記載の方法。
【公表番号】特表２０１２−５０５６６１（Ｐ２０１２−５０５６６１Ａ）
【公表日】平成２４年３月８日（２０１２．３．８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５３２２７３（Ｐ２０１１−５３２２７３）
【出願日】平成２１年１０月１６日（２００９．１０．１６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０６０９６４
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０４５５３２
【国際公開日】平成２２年４月２２日（２０１０．４．２２）
【出願人】（５０２１４１０５０）ダウ グローバル テクノロジーズ エルエルシー (1,383)
【出願人】（５０９１１０７６９）
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年３月８日（２０１２．３．８）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１０月１６日（２００９．１０．１６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０６０９６４
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０４５５３２
【国際公開日】平成２２年４月２２日（２０１０．４．２２）
【出願人】（５０２１４１０５０）ダウ グローバル テクノロジーズ エルエルシー (1,383)
【出願人】（５０９１１０７６９）
【Ｆターム（参考）】
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