治療用細胞の体内分布の把握方法。
【課題】細胞療法において、その治療効果の有効性を確認及び検証するための、適切な方法を提供する。
【解決手段】治療前の患者に１８フルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）を含有させることにより標識された医薬品を投与し、当該患部の位置を特定するためにＰＥＴ−ＣＴを用いて前記医薬品の体内分布を画像化したものを画像情報Ａとして保存し、治療用細胞にＦＤＧを含有させることにより標識し、この標識された治療用細胞を前記患者本人の体内に戻すことにより当該患部を治療せしめ、その治療効果を推定するためにＰＥＴ−ＣＴを用いて治療用細胞の体内分布を画像化したものを画像情報Ｂとして保存し、前記画像情報Ａと前記画像情報Ｂを同一縮尺及び同一方向に重ね合わせ、前記画像情報Ａに表示されている当該患部の位置と前記画像情報Ｂに表示されている治療用細胞の体内分布位置との一致量が多いほど治療効果が大であると判定することにより治療効果を推定する。
【解決手段】治療前の患者に１８フルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）を含有させることにより標識された医薬品を投与し、当該患部の位置を特定するためにＰＥＴ−ＣＴを用いて前記医薬品の体内分布を画像化したものを画像情報Ａとして保存し、治療用細胞にＦＤＧを含有させることにより標識し、この標識された治療用細胞を前記患者本人の体内に戻すことにより当該患部を治療せしめ、その治療効果を推定するためにＰＥＴ−ＣＴを用いて治療用細胞の体内分布を画像化したものを画像情報Ｂとして保存し、前記画像情報Ａと前記画像情報Ｂを同一縮尺及び同一方向に重ね合わせ、前記画像情報Ａに表示されている当該患部の位置と前記画像情報Ｂに表示されている治療用細胞の体内分布位置との一致量が多いほど治療効果が大であると判定することにより治療効果を推定する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、がん等の治療方法において、細胞を体外に取り出し、培養・加工したうえで体内に戻す「細胞療法」が用いられた場合に、その治療効果を推定するための、治療用細胞の体内分布の把握方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、いろいろな種類の細胞を増殖させる因子などが、遺伝子工学で大量に作られるようになったことや、細胞培養の技術が進歩したことなどにより、体から取り出した細胞を体外で培養し、いろいろな性質を与えた上で体に戻すことによって、病気の治療を行うという細胞療法が試みられている。
【０００３】
大別して患者自身の細胞を使うものと、他人の細胞を使うものとがあるが、自己細胞を使うものは、他人の細胞を使うものに比べて、ウイルス感染などを持ち込む危険もなく、有害な免疫反応が起こることもなく、格段に安全なため、新たな治療法として期待が大きい。
【０００４】
細胞療法の種類としては、患者自身のリンパ球を培養・加工して治療に用いる免疫細胞療法（活性化自己リンパ球療法）の他、皮膚の細胞を培養して火傷の治療などに使うものや、軟骨の細胞を培養して関節の病気の治療などに使うものなどの再生医療と呼ばれる分野のものもある。さらに、胚性幹細胞を培養して、肝臓の細胞や神経細胞など種々の細胞に分化させて用いる試みなども研究されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、上記治療方法においては、治療効果の有効性を確認及び検証するための、適切な方法に乏しいという理由によって、決して高い評価を得てきたわけではなかった。
【０００６】
具体的には、第一に、これまで細胞療法は、医師や患者の治療法の選択肢の中に殆ど入っておらず、従って、他の治療法がすべて効かない状態になって初めて、細胞療法が試みられる場合が多く、これでは、どの治療方法の有効性が高いかの判断が困難であり、問題である。
【０００７】
第二に、現在、細胞療法の有効性の評価基準は、化学療法と同じ評価基準によって評価されており、その評価基準では、治療によってがんが縮小し、それが一定期間続けば有効とされる。しかし、がんは、あまり縮小しないが患者は長期間高いＣＩＯＬ（ＣＩＵＡＬＩＴＹ ＯＦ ＬＩＦＥ：患者の生活の質）を保って生存するような場合が、細胞療法では多く認められているが、このような場合には無効と判断されてしまう等の問題が発生することになる。
【０００８】
本発明は、このような問題点に鑑みて為されたものであり、その目的は、細胞療法において、その治療効果の有効性を確認及び検証するための、適切な方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明による請求項１は、上記の目的を達成するために、患者の体外に摘出された細胞に当該患部治療能力を備えさせる処置を施し治療用細胞とし、前記治療用細胞を前記患者本人の体内に戻すことにより当該患部を治療せしめ、その治療効果を推定するための治療用細胞の体内分布の把握方法において、治療前の患者に１８フルオロデオキシグルコース（１８ＦＵＬＯＲＯ ＤＥＯＸＹＧＬＵＣＯＳＥ：以下ＦＤＧと略す。）を含有させることにより標識された医薬品を投与し、当該患部の位置を特定するためにＰＥＴ−ＣＴ（ＰＯＳＩＴＲＯＮ ＥＭＩＳＳＩＯＮ ＴＯＭＯＧＲＡＰＨＹ：陽電子放射断層撮影）を用いて前記医薬品の体内分布を画像化したものを画像情報Ａとして保存し、前記治療用細胞にＦＤＧを含有させることにより標識し、この標識された治療用細胞を前記患者本人の体内に戻すことにより当該患部を治療せしめ、その治療効果を推定するためにＰＥＴ−ＣＴを用いて治療用細胞の体内分布を画像化したものを画像情報Ｂとして保存し、前記画像情報Ａと前記画像情報Ｂを同一縮尺及び同一方向に重ね合わせ、前記画像情報Ａに表示されている当該患部の位置と前記画像情報Ｂに表示されている治療用細胞の体内分布位置との一致量が多いほど治療効果が大であると判定することにより治療効果を推定することを特徴としている。
【００１０】
また請求項２は、請求項１において、前記治療用細胞にＦＤＧを含有させることにより標識する方法が、被標識治療用細胞を遠心分離して上清を除去し、沈殿した治療用細胞を回収する処置と、前記で得られた治療用細胞にＦＤＧを混入して良く攪拌する処置と、前記で得られた治療用細胞を、空気に対してＣＯ２が５％濃度の雰囲気中で、３７℃で所定時間培養する処置と、前記で得られた治療用細胞に４℃に冷却されている生理食塩水を混合し、良く攪拌してから遠心分離して上清を除去し、沈殿した治療用細胞を回収する処置と、前記で得られた治療用細胞に４℃に冷却されている生理食塩水を混合し、４℃で所定時間保つ処置と、前記で得られた治療用細胞を遠心分離して上清を除去し、沈殿した治療用細胞を回収し、これを生理食塩水に浮遊させる処置を有することを特徴としている。
【００１１】
また請求項３は、請求項１及び請求項２において、前記標識された治療用細胞を患者本人の体内に戻す時の前記治療用細胞に含有するＦＤＧの総放射線量をＶ（ｍＣｉミリキュリー）とし、前記標識された治療用細胞を患者本人の体内に戻してからＰＥＴ−ＣＴを用いて治療用細胞の体内分布の画像化を開始するまでの待機時間をＴ（分）とし、前記治療用細胞に含有するＦＤＧの総放射線量の観測を開始するために必要な前記ＰＥＴ−ＣＴの前記総放射線量の感知限界量をＬ（ｍＣｉ）としたとき、前記Ｖ、Ｌ、Ｔの関係を
Ｖ≧Ｌ／｛０．５の（Ｔ／１１０）乗｝
であって、且つ
４５≦Ｔ≦６０
とすることを特徴としている。
【発明の効果】
【００１２】
上記構成において、まず、治療前の患者に、ＦＤＧで標識された医薬品を投与し、当該患部の位置をＰＥＴ−ＣＴを用いて画像化した画像情報Ａと、患者の治療用細胞をＦＤＧにより標識し、これを患者本人の体内に戻すことにより当該患部を治療し、前記治療用細胞の治療中の体内分布をＰＥＴ−ＣＴを用いて画像化した画像情報Ｂとを重ね合わせ、前記画像情報Ａに表示されている当該患部の位置と、前記画像情報Ｂに表示されている治療用細胞の体内分布位置との一致量により、治療効果を推定するので、その治療効果を早期に確認及び検証することが可能となり、加えて、画像情報Ａには、がん細胞の位置、即ち、病巣の位置を特定する情報が含まれており、患者の現状の容態の把握や、治療方法及び治療方針を決定するためにも供され、また、画像情報Ｂには、治療中の治療用細胞の体内分布位置を特定する情報が含まれているが、これを解析することにより、患者の治療中の容態の把握や、治療方法及び治療方針の妥当性を検証するためにも供される。
【００１３】
さらに、画像情報Ａと画像情報Ｂとはデーター化されているので、数値に置換えることができ、前記一致量も数値で表すことができるので、人の判断による、あいまいさを排除し、判定の正確さを増すことに寄与する治療用細胞の体内分布の把握方法を提供することができる。
【００１４】
さらに加えて、本発明は、患者の体内に戻す時の治療用細胞に含有するＦＤＧの総放射線量Ｖを、ＰＥＴ−ＣＴがＦＤＧの観測を開始するために必要な感知限界量Ｌと、ＦＤＧが患者の体内に注入されてからＰＥＴ−ＣＴにより画像化が開始されるまでの待機時間Ｔを用いた数式により、明確に規定しているので、患者の事情に合わせたＶを、容易且つ適切に選定することを可能とし、患者に対する不必要な放射線被爆を防止することのできる、人体に安全な治療用細胞の体内分布の把握方法を提供することを可能としている。
【００１５】
よって本発明は、従来の問題点を解消し、細胞療法において、その治療効果の有効性を確認及び検証するための適切な、治療用細胞の体内分布の把握方法であり、医療的価値はきわめて大きい。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
以下、本発明の実施の形態について説明する。本発明は図１のフローチャートに示すように、まず、治療前の患者に、ＦＤＧを含有させることにより標識された医薬品を、注射等の医療方法を用いて投与する（Ｓ１）。ここで、ＦＤＧは、我が国において体内への投与が認可されている放射性同位元素である１８Ｆを含むグルコース（ブドウ糖）であるが、このＦＤＧを、例えば、生理食塩水に混合することにより医薬品としたものが既に製品化されている。
【００１７】
ところで、がん細胞は、正常な細胞よりも増殖が盛んに行われるため、細胞のエネルギー源であるグルコース（前記ＦＤＧを含む）を多量に必要とし、その必要量は正常細胞のそれに比較して約１０倍にも達する。従って、前記患者に投与された医薬品に含まれるＦＤＧは、がん細胞に集中することが、既に医学的に知られており、前記ＦＤＧの体内分布を観測することにより、がん細胞の位置、即ち、病巣の位置を特定することができ、これにより治療方法や治療方針の決定に大きく貢献することは明白である。
【００１８】
ＦＤＧは、ごく微量の放射線を放出するが、前記ＦＤＧの体内分布を観測することは、前記放射線を観測することと等価である。前記ＦＤＧが放出する放射線を観測する装置としてＰＥＴ−ＣＴが開発及び実用化されている。ＰＥＴ−ＣＴは、がん細胞そのものの活動を、体外から撮影する医療機器であり、腫瘍の活動性や脳などの働きを断層画像としてとらえ、病気の原因や病状を的確に診断する装置である。また、ＰＥＴ−ＣＴは、短時間で全身を検査し、数ミリ程度の小さながんを見つけだすことも可能であり、がんの発見率は旧検査方法に比べ、格段に高くなっている。
【００１９】
次に、このＰＥＴ−ＣＴを用いて、前記投与されたＦＤＧの体内分布を観測し、画像化したものを画像情報Ａとして保存する（Ｓ２及びＳ６）。既述の如く、前記画像情報Ａは、がん細胞の位置、即ち、病巣の位置を特定する情報が含まれており、患者の現状の容態の把握や、治療方法及び治療方針を決定するためにも供される。
【００２０】
もちろん、画像情報Ａは、診断の正確性を増すため、複数枚生成するのが好ましく、後に述べる画像情報Ｂとの対応が取れるよう配慮されていれば良い。また、画像情報Ａという呼称はこれに拘らず、画像情報Ｂとの区別がつくよう配慮し任意に選定すると良い。また、画像情報Ａの保存方法は、例えば、印刷物や電子化データー等の従来技術による各種保存方法を用いれば良く、画像情報Ｂとの正確な比較検討が可能なよう配慮し、任意に選定すると良い。
【００２１】
さらに、患者の体外に摘出された細胞に当該患部治療能力を備えさせる処置を施し治療用細胞とする（Ｓ３）。ここで、前記細胞に当該患部治療能力を備えさせる処置としては、得られる細胞の形態や病気の種類によってそれぞれ異なるが、具体的には例えば、患者の血液のみが入手可能な場合は、「ＣＤ３−ＬＡＫ法」が用いられることが多く、この方法は、リンパ球画分を抗ＣＤ３抗体、インターロイキン−２（ＩＬ−２）などによる刺激を与えつつ培養して活性化させると同時に増殖させる方法である。
【００２２】
また例えば他の方法として、手術時に患者から、がん細胞や所属リンパ節細胞が得られる場合は、「ＣＴＬ法」が用いられることが多く、この方法は、培養初期の刺激として、自分のがん細胞だけで刺激を与えて培養した後、ＩＬ−２と抗ＣＤ３抗体を同様に用いて培養を行う方法であるが、このようにして得られた培養リンパ球は、患者自身のがん細胞に対する特異性を持った細胞障害性Ｔ細胞（ＣＹＴＯＴＯＸＩＣ Ｔ ＬＹＭＰＨＯＣＹＴＥ：ＣＴＬ）を多く含む。特に、手術時に患者から摘出したがん組織の所属リンパ節が得られる場合には、血液リンパ球の代りにリンパ節細胞を用いた方が、生体内でがんによって刺激を受けたリンパ球が多いため、より有効な活性化リンパ球を得ることが出来る。
【００２３】
またさらに、例えば他の方法として、樹状細胞を用いる方法「ＤＣ療法，ＤＣ−ＬＡＫ法，ＤＣ−ＣＴＬ法」があり、この方法は、Ｔ細胞に対する抗原提示を専門に行う樹状細胞（ＤＥＮＤＲＩＴＩＣ ＣＥＬＬ：ＤＣ）に、がん細胞から抽出した蛋白質を貪食させると、取り込まれたがん抗原蛋白質が、細胞内で分断されて異常ペプチドを生じ、これが抗原として樹状細胞表面に提示される性質を使用したものである。
【００２４】
さて、以上のようにして得られた各治療用細胞に、ＦＤＧを含有させることにより標識し、この標識された治療用細胞を患者本人の体内に戻すことにより当該患部の治療を開始する（Ｓ４）。ここで、前記治療用細胞にＦＤＧを含有させる方法として、本発明による具体的な一例としては、次のようにすると良い。即ち、
▲１▼、標識したい治療用細胞を遠心分離して、上清を吸引して１ｍｌのみ残し、沈殿した治療用細胞を回収する。
▲２▼、▲１▼で得られた治療用細胞に１８ｍＣｉのＦＤＧを、混入して良く攪拌する。
▲３▼、▲２▼で得られた治療用細胞を、空気に対してＣＯ２が５％濃度の雰囲気中で、３７℃で約２時間培養する。
▲４▼、▲３▼で得られた治療用細胞に、４℃に冷却されている５ｍｌの生理食塩水を混合し、良く攪拌してから遠心分離し、上清を吸引して、沈殿した治療用細胞を回収する。
▲５▼、▲４▼で得られた治療用細胞に、４℃に冷却されている生理食塩水を５ｍｌ混合し、４℃で約１５分間保つ。
▲６▼、▲５▼で得られた治療用細胞を再び遠心分離し、上清を吸引して、沈殿した治療用細胞を回収し、これを生理食塩水に浮遊させ、標識された治療用細胞とする。
以上の方法を用いると、治療用細胞にＦＤＧを効果的に含有させることが可能となる。
【００２５】
またここで、前記標識された治療用細胞を患者本人の体内に戻す方法として、例えば、一般的には前記標識された治療用細胞を１００ｍｌの点滴用生理食塩水に浮遊させ、点滴により静脈から投与するが、いかにして、がんの部位に治療用細胞を集中させるかが、重要な問題であり、がんが体表面から容易に接近できる部位にある場合には、がんに直接注入する場合もある。また症例によっては、がんに血液を供給している動脈からの投与や、胸腔内や腹腔内投与を行う場合もあり、それぞれの場合に応じて適切に選択すると良い。
【００２６】
ところで、ＦＤＧは既述の如く、微量の放射線を放射するが、放射線は人体にとって有害なことは周知の事実であり、それ故、前記治療用細胞に含有するＦＤＧの放射線の総量は、極力少なくするのが好ましいことは言うまでもない。しかし、後述する、ＰＥＴ−ＣＴを用いて体内に戻された後の治療用細胞の体内分布を画像化する際に、前記ＰＥＴ−ＣＴが前記ＦＤＧの放射する放射線を観測するに十分な量の放射線量、即ち、使用されるＰＥＴ−ＣＴの放射線の感知限界量以上の放射線量を、前記ＦＤＧが有している必要があるのも、また、当然のことである。
【００２７】
加えて、前記ＦＤＧが患者の体内に注入されてから、体内を血液等を媒介として患部付近にまで移動し、治療が開始されたと判断され、従って、ＰＥＴ−ＣＴにより、前記治療用細胞の体内分布の画像化が開始されるまでに、所定の時間、待機する必要があることも、また、容易に理解される。
【００２８】
さらに、前記ＦＤＧの放射線発生源であるＦ１８（フッ素の同位元素）の半減期は１１０分であることが既に知られており、このことは、前述の所定の待機時間｛以下、Ｔ（分）と称する｝の間に、前記ＦＤＧの放射線量が減少することを意味している。
【００２９】
従って、前記標識された治療用細胞を患者本人の体内に戻す時の前記治療用細胞に含有するＦＤＧの総放射線量｛以下、Ｖ（ｍＣｉ）と称する｝を、前記ＰＥＴ−ＣＴが前記治療用細胞に含有するＦＤＧの総放射線量の観測を開始するために必要な前記総放射線量の感知限界量｛以下、Ｌ（ｍＣｉ）と称する｝と前記Ｔとを考慮して決定することが、非常に重要であり、本発明の根幹に関わるものである。
【００３０】
これらを、一言で簡略に述べると、Ａは、人体の安全のため、できるだけ小さくしなければならないが、しかし、良質な画像Ｂを得るためには、Ｔを考慮して、Ｌを下回らないよう、Ａを十分に大きくしておかなければならないという困難な関係を、成立及び満足させる必要があるということである。
【００３１】
従来、前記Ｖ、Ｌ、Ｔの関係は明確にされていなかったが、本発明では、これらを数式により明確に規定することを可能とした。即ち、
Ｖ≧Ｌ／｛０．５の（Ｔ／１１０）乗｝・・・・・（１）式
であって、且つ
４５≦Ｔ≦６０・・・・・（２）式
とすることにより、前記困難な関係を満たし、人体に安全な治療用細胞の体内分布の把握方法を提供することを可能としている。
【００３２】
以下、前記（１）式、（２）式について説明する。まず、（１）式について説明する。（１）式右辺の｛０．５の（Ｔ／１１０）乗｝の項は、Ｆ１８の半減期が１１０分であることから、ＦＤＧが体内に注入されてからＴを経た後の放射線量の、初期値に対する減少割合を示しているが、この値はまた、ＰＥＴ−ＣＴが観測を開始するために必要な放射線の最低量の割合でもある。故に、この値の逆数に感知限界値Ｌを乗ずることにより、患者の体内に戻す時の治療用細胞に含有するＦＤＧの総放射線量の最低量、即ちＶの最低量を逆算出することが可能となり、これが、（１）式の右辺である。従って（１）式が意味するところは、前記（１）式の右辺によって算出された値以上のＶを選択せよということである。
【００３３】
もちろん、前記Ｖの値は、（１）式を満たしさえすれば、自由に選択することは可能であるが、既述の如く、人体の安全のため、Ｖを必要以上に大きくすることは好ましいことではない。感知限界値Ｌが正確でありさえすれば、（１）式の右辺により得られた値を、そのままＶとして使用することが推奨される。
【００３４】
次に、（２）式について説明する。（２）式の意味するところは、前記待機時間Ｔを４５分以上で且つ６０分以下に選択することを規定したものである。即ち、本発明者の研究結果によると、Ｔを４５分未満に選択すると、患者の個人差や治療細胞の形態や病気の種類等の影響により、本発明による治療用細胞の体内分布の把握方法の信頼性に問題が発生することが、明らかとなった。従って、これを解消するために本発明では、前記Ｔを４５分以上に選択することを既定しているのである。
【００３５】
また、前記Ｔの値に上限が生じるのは明らかである。なぜならば、（１）式において、Ｔの値を大きくすることは、Ｖの値も大きくすることであり、これは、決して好ましいことではない。また、臨床的には、前記治療用細胞が患者の体内に戻された後、患者は、前記Ｔと、ＰＥＴ−ＣＴによって画像情報Ｂが得られるまでの間の加算時間の間、床上で安静にしている必要があるが、これは、患者にとって苦痛を伴うものであり、極力、短時間であることが要求される。これについて、本発明者は、患者に対する聞き取り調査の結果や、ＰＥＴ−ＣＴの稼動効率等の調査結果を総合的に判断して、Ｔを６０分以下に選択する必要があるとの結論を得た。よって（２）式が得られ、これにより、患者の身体及び精神的負担を極力軽減することができ、また、ＰＥＴ−ＣＴの稼動効率を向上させることができるので、結局、医療コスト低減にも効果のある、治療用細胞の体内分布の把握方法を提供することが可能となった。
【００３６】
ここで前記（１）式、（２）式に具体的な数値を用いて、〈表１〉を参照しながらＶの計算例を示す。なお〈表１〉の左列は、待機時間Ｔを１分間隔で表示してあり、説明に必要な４５分から６０分の間のみを表示し、その他の時間は省略してある。また右列は、左列の待機時間Ｔに対応する、（１）式右辺の｛０．５の（Ｔ／１１０）乗｝の項の逆数値を表示してある。
【００３７】
【００３８】
まず、患者Ｋ１の例について説明する。患者Ｋ１は、細胞治療を受けるのは今回が初めてであり、また、これまで他の放射線治療を受けたことがないことも判明している。従って、今回は初回診断であり、治療方法及び治療方針の妥当性を、より確実に検証する必要があることを考慮して、Ｔを５８分と長めに選定し、また、Ｌを誤差範囲内の大きいほうの値に選定することにした。
【００３９】
即ち、今回使用する、ＰＥＴ−ＣＴは、ＧＥ ＩＭＡＧＩＮＡＴＩＯＮ ＡＴ ＷＯＲＫ社製のＤＩＳＣＯＶＥＲＹ ＳＴであるが、この装置の感知限界値Ｌは、２ｍＣｉ〜３ｍＣｉであることが判っている。このように、Ｌに誤差範囲が存在する理由は、装置内外の環境の日常的な変化や使用頻度、製造部品性能のばらつき等、多くの要因が挙げられるが、このような誤差を皆無にすることは、技術的に困難な場合が多く、極力小さくする努力が、日夜なされている。重要なことは、これらの誤差の存在を十分に理解して、各装置を使用することである。
【００４０】
よって、患者Ｋ１の例は、Ｌの値として、誤差範囲内の大きいほうの値である３ｍＣｉを選択する。さて、前述のように、Ｔ＝５８、Ｌ＝３が選択されたが、〈表１〉において、左列のＴ＝５８に対応する右列の値は、１．４４２であるので、これに前記Ｌである、３を乗じると、４．３２６ｍＣｉとなり、これが、患者Ｋ１に注入されるＶの推奨値である。
【００４１】
ところで、治療用細胞にＦＤＧを含有させる方法として、本発明による具体的な一例を既に説明してあるが、例えば、本発明によって得られた治療用細胞１００ｍｌ中に、仮に７ｍＣｉのＦＤＧが含有していたとすると、これを患者Ｋ１に注入するための必要量は、１００ｘ（４．３２６／７）＝６１．８ｍｌと算出される。
【００４２】
次に、患者Ｋ２の例について説明する。患者Ｋ２は、既に細胞治療を５回受けており、今回が６回目である。当然のことながら、本治療の初回診断でＦＤＧを体内に注入しており、また、これまで他の放射線治療を２回受けたことが判明している。患者Ｋ２の容体は、本治療を開始してから安定しており、今回は治療の経過を確認することが目的であり、診断の正確性はそれほど重要ではなく、むしろ患者の放射線被爆に対する安全性を優先すべきと判断される。従って、Ｔを４６分と短めに選定し、また、Ｌを誤差範囲内の小さいほうの値である、２ｍＣｉに選定することにした。
【００４３】
よって、患者Ｋ２の例は、前述のように、Ｔ＝４６、Ｌ＝２が選択されたが、〈表１〉において、左列のＴ＝４６に対応する右列の値は、１．３３７であるので、これに前記Ｌである、２を乗じると、２．６４７ｍＣｉとなり、これが、患者Ｋ２に注入されるＶの推奨値である。
【００４４】
ところで、例えば、本発明によって得られた治療用細胞１００ｍｌ中に、仮に７ｍＣｉのＦＤＧが含有していたとすると、これを患者Ｋ２に注入するための必要量は、１００ｘ（２．６４７／７）＝３７．８ｍｌと算出される。
【００４５】
ここで注目されるのは、患者Ｋ１と、患者Ｋ２に注入されるＶの値が、ほぼ４割も異なるということである。これは本発明が、患者の事情に合わせたＶを、容易且つ適切に選定することを可能とし、患者に対する不必要な放射線被爆を防止することのできる、安全な、治療用細胞の体内分布の把握方法であることを証明するものである。
【００４６】
以上のようにして前記Ｖが選定され、体内に戻された治療用細胞により、治療が開始されるが、その治療効果を早期に確認及び検証することが好ましいのは言うまでもない。従来は、治療効果を早期に確認及び検証することは困難であったが、本発明を用いることにより、これを可能とすることができる。
【００４７】
即ち、ＰＥＴ−ＣＴを用いて前記体内に戻された後の治療用細胞の体内分布を画像化したものを画像情報Ｂとして保存する（Ｓ５及びＳ８）。ここで、前記治療用細胞は、本発明によって、既にＦＤＧにより標識されているので、ＰＥＴ−ＣＴを用いることにより、治療用細胞の体内分布位置を特定することが可能となる。既述の如く、前記画像情報Ｂは、治療中の治療用細胞の体内分布位置を特定する情報が含まれているが、これを解析することにより、患者の治療中の容態の把握や、治療方法及び治療方針の妥当性を検証するためにも供される。
【００４８】
もちろん、画像情報Ｂは、診断の正確性を増すため、複数枚生成するのが好ましく、既に述べた画像情報Ａとの対応が取れるよう配慮されていれば良い。また、画像情報Ｂという呼称はこれに拘らず、画像情報Ａとの区別がつくよう配慮し、任意に選定すると良い。また、画像情報Ｂの保存方法は、例えば、印刷物や電子化データー等の従来技術による各種保存方法を用いれば良く、画像情報Ａとの正確な比較検討が可能なよう配慮し、任意に選定すると良い。
【００４９】
次に、治療作用が進行していると判断される適当な時期に、前記画像情報Ａと前記画像情報Ｂを同一縮尺及び同一方向に重ね合わせ（Ｓ７）、前記画像情報Ａに表示されている当該患部の位置と前記画像情報Ｂに表示されている治療用細胞の体内分布位置との一致量が多いほど治療効果が大であると判定することにより治療効果を推定する（Ｓ９、Ｓ１０、Ｓ１１、Ｓ１２）。
【００５０】
ここで、前記画像情報Ｂには、治療中の治療用細胞の体内分布位置を特定する情報が含まれているが、もし、治療用細胞が有効に治療効果を発揮しているならば、前記治療用細胞は当該患部の位置、即ち、病巣の位置そのもの、あるいはその付近に集中していると考えるのが妥当であり、故に、画像情報Ａと画像情報Ｂとが、一致、あるいは近似していると考えるのは、さらに妥当である。従って、画像情報Ａと画像情報Ｂを重ね合わせ、その一致量を、治療効果を推定するための判定基準として使用することが可能なことは明白である。
【００５１】
もちろん、画像情報Ａと画像情報Ｂを重ね合わせる際に、双方を、同一縮尺及び同一方向に重ね合わせることが、判定の正確さを期すために不可欠なことは言うまでもない。また、画像情報Ａと画像情報Ｂとはデーター化されているので、数値に置換えることができ、前記一致量も数値で表すことができる。このことは、人の判断による、あいまいさを排除し、判定の正確さを増すことに寄与する。
【００５２】
以上の説明により明らかなように、本発明の治療用細胞の体内分布の把握方法は、治療前の患者に、ＦＤＧで標識された医薬品を投与し、当該患部の位置をＰＥＴ−ＣＴを用いて画像化した画像情報Ａと、患者の治療用細胞をＦＤＧにより標識し、これを患者本人の体内に戻すことにより当該患部を治療し、前記治療用細胞の治療中の体内分布をＰＥＴ−ＣＴを用いて画像化した画像情報Ｂとを重ね合わせ、前記画像情報Ａに表示されている当該患部の位置と、前記画像情報Ｂに表示されている治療用細胞の体内分布位置との一致量により、治療効果を推定するので、その治療効果を早期に確認及び検証することが可能となり、加えて、画像情報Ａには、がん細胞の位置、即ち、病巣の位置を特定する情報が含まれており、患者の現状の容態の把握や、治療方法及び治療方針を決定するためにも供され、また、画像情報Ｂには、治療中の治療用細胞の体内分布位置を特定する情報が含まれているが、これを解析することにより、患者の治療中の容態の把握や、治療方法及び治療方針の妥当性を検証するためにも供される。
【００５３】
さらに、画像情報Ａと画像情報Ｂとはデーター化されているので、数値に置換えることができ、前記一致量も数値で表すことができるので、人の判断による、あいまいさを排除し、判定の正確さを増すことに寄与する治療用細胞の体内分布の把握方法を提供することができる。
【００５４】
さらに加えて、本発明は、患者の体内に戻す時の治療用細胞に含有するＦＤＧの総放射線量Ｖを、ＰＥＴ−ＣＴがＦＤＧの観測を開始するために必要な感知限界量Ｌと、ＦＤＧが患者の体内に注入されてから、ＰＥＴ−ＣＴにより、画像化が開始されるまでの待機時間Ｔを用いた数式により、明確に規定しているので、患者の事情に合わせたＶを、容易且つ適切に選定することを可能とし、患者に対する不必要な放射線被爆を防止することのできる、人体に安全な治療用細胞の体内分布の把握方法を提供することを可能としている。
【００５５】
よって本発明は、従来の問題点を解消し、細胞療法において、その治療効果の有効性を確認及び検証するための適切な、治療用細胞の体内分布の把握方法であり、医療的価値はきわめて大きい。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】 本発明の一実施例における治療用細胞の体内分布の把握方法を示すフローチャート図である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、がん等の治療方法において、細胞を体外に取り出し、培養・加工したうえで体内に戻す「細胞療法」が用いられた場合に、その治療効果を推定するための、治療用細胞の体内分布の把握方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、いろいろな種類の細胞を増殖させる因子などが、遺伝子工学で大量に作られるようになったことや、細胞培養の技術が進歩したことなどにより、体から取り出した細胞を体外で培養し、いろいろな性質を与えた上で体に戻すことによって、病気の治療を行うという細胞療法が試みられている。
【０００３】
大別して患者自身の細胞を使うものと、他人の細胞を使うものとがあるが、自己細胞を使うものは、他人の細胞を使うものに比べて、ウイルス感染などを持ち込む危険もなく、有害な免疫反応が起こることもなく、格段に安全なため、新たな治療法として期待が大きい。
【０００４】
細胞療法の種類としては、患者自身のリンパ球を培養・加工して治療に用いる免疫細胞療法（活性化自己リンパ球療法）の他、皮膚の細胞を培養して火傷の治療などに使うものや、軟骨の細胞を培養して関節の病気の治療などに使うものなどの再生医療と呼ばれる分野のものもある。さらに、胚性幹細胞を培養して、肝臓の細胞や神経細胞など種々の細胞に分化させて用いる試みなども研究されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、上記治療方法においては、治療効果の有効性を確認及び検証するための、適切な方法に乏しいという理由によって、決して高い評価を得てきたわけではなかった。
【０００６】
具体的には、第一に、これまで細胞療法は、医師や患者の治療法の選択肢の中に殆ど入っておらず、従って、他の治療法がすべて効かない状態になって初めて、細胞療法が試みられる場合が多く、これでは、どの治療方法の有効性が高いかの判断が困難であり、問題である。
【０００７】
第二に、現在、細胞療法の有効性の評価基準は、化学療法と同じ評価基準によって評価されており、その評価基準では、治療によってがんが縮小し、それが一定期間続けば有効とされる。しかし、がんは、あまり縮小しないが患者は長期間高いＣＩＯＬ（ＣＩＵＡＬＩＴＹ ＯＦ ＬＩＦＥ：患者の生活の質）を保って生存するような場合が、細胞療法では多く認められているが、このような場合には無効と判断されてしまう等の問題が発生することになる。
【０００８】
本発明は、このような問題点に鑑みて為されたものであり、その目的は、細胞療法において、その治療効果の有効性を確認及び検証するための、適切な方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明による請求項１は、上記の目的を達成するために、患者の体外に摘出された細胞に当該患部治療能力を備えさせる処置を施し治療用細胞とし、前記治療用細胞を前記患者本人の体内に戻すことにより当該患部を治療せしめ、その治療効果を推定するための治療用細胞の体内分布の把握方法において、治療前の患者に１８フルオロデオキシグルコース（１８ＦＵＬＯＲＯ ＤＥＯＸＹＧＬＵＣＯＳＥ：以下ＦＤＧと略す。）を含有させることにより標識された医薬品を投与し、当該患部の位置を特定するためにＰＥＴ−ＣＴ（ＰＯＳＩＴＲＯＮ ＥＭＩＳＳＩＯＮ ＴＯＭＯＧＲＡＰＨＹ：陽電子放射断層撮影）を用いて前記医薬品の体内分布を画像化したものを画像情報Ａとして保存し、前記治療用細胞にＦＤＧを含有させることにより標識し、この標識された治療用細胞を前記患者本人の体内に戻すことにより当該患部を治療せしめ、その治療効果を推定するためにＰＥＴ−ＣＴを用いて治療用細胞の体内分布を画像化したものを画像情報Ｂとして保存し、前記画像情報Ａと前記画像情報Ｂを同一縮尺及び同一方向に重ね合わせ、前記画像情報Ａに表示されている当該患部の位置と前記画像情報Ｂに表示されている治療用細胞の体内分布位置との一致量が多いほど治療効果が大であると判定することにより治療効果を推定することを特徴としている。
【００１０】
また請求項２は、請求項１において、前記治療用細胞にＦＤＧを含有させることにより標識する方法が、被標識治療用細胞を遠心分離して上清を除去し、沈殿した治療用細胞を回収する処置と、前記で得られた治療用細胞にＦＤＧを混入して良く攪拌する処置と、前記で得られた治療用細胞を、空気に対してＣＯ２が５％濃度の雰囲気中で、３７℃で所定時間培養する処置と、前記で得られた治療用細胞に４℃に冷却されている生理食塩水を混合し、良く攪拌してから遠心分離して上清を除去し、沈殿した治療用細胞を回収する処置と、前記で得られた治療用細胞に４℃に冷却されている生理食塩水を混合し、４℃で所定時間保つ処置と、前記で得られた治療用細胞を遠心分離して上清を除去し、沈殿した治療用細胞を回収し、これを生理食塩水に浮遊させる処置を有することを特徴としている。
【００１１】
また請求項３は、請求項１及び請求項２において、前記標識された治療用細胞を患者本人の体内に戻す時の前記治療用細胞に含有するＦＤＧの総放射線量をＶ（ｍＣｉミリキュリー）とし、前記標識された治療用細胞を患者本人の体内に戻してからＰＥＴ−ＣＴを用いて治療用細胞の体内分布の画像化を開始するまでの待機時間をＴ（分）とし、前記治療用細胞に含有するＦＤＧの総放射線量の観測を開始するために必要な前記ＰＥＴ−ＣＴの前記総放射線量の感知限界量をＬ（ｍＣｉ）としたとき、前記Ｖ、Ｌ、Ｔの関係を
Ｖ≧Ｌ／｛０．５の（Ｔ／１１０）乗｝
であって、且つ
４５≦Ｔ≦６０
とすることを特徴としている。
【発明の効果】
【００１２】
上記構成において、まず、治療前の患者に、ＦＤＧで標識された医薬品を投与し、当該患部の位置をＰＥＴ−ＣＴを用いて画像化した画像情報Ａと、患者の治療用細胞をＦＤＧにより標識し、これを患者本人の体内に戻すことにより当該患部を治療し、前記治療用細胞の治療中の体内分布をＰＥＴ−ＣＴを用いて画像化した画像情報Ｂとを重ね合わせ、前記画像情報Ａに表示されている当該患部の位置と、前記画像情報Ｂに表示されている治療用細胞の体内分布位置との一致量により、治療効果を推定するので、その治療効果を早期に確認及び検証することが可能となり、加えて、画像情報Ａには、がん細胞の位置、即ち、病巣の位置を特定する情報が含まれており、患者の現状の容態の把握や、治療方法及び治療方針を決定するためにも供され、また、画像情報Ｂには、治療中の治療用細胞の体内分布位置を特定する情報が含まれているが、これを解析することにより、患者の治療中の容態の把握や、治療方法及び治療方針の妥当性を検証するためにも供される。
【００１３】
さらに、画像情報Ａと画像情報Ｂとはデーター化されているので、数値に置換えることができ、前記一致量も数値で表すことができるので、人の判断による、あいまいさを排除し、判定の正確さを増すことに寄与する治療用細胞の体内分布の把握方法を提供することができる。
【００１４】
さらに加えて、本発明は、患者の体内に戻す時の治療用細胞に含有するＦＤＧの総放射線量Ｖを、ＰＥＴ−ＣＴがＦＤＧの観測を開始するために必要な感知限界量Ｌと、ＦＤＧが患者の体内に注入されてからＰＥＴ−ＣＴにより画像化が開始されるまでの待機時間Ｔを用いた数式により、明確に規定しているので、患者の事情に合わせたＶを、容易且つ適切に選定することを可能とし、患者に対する不必要な放射線被爆を防止することのできる、人体に安全な治療用細胞の体内分布の把握方法を提供することを可能としている。
【００１５】
よって本発明は、従来の問題点を解消し、細胞療法において、その治療効果の有効性を確認及び検証するための適切な、治療用細胞の体内分布の把握方法であり、医療的価値はきわめて大きい。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
以下、本発明の実施の形態について説明する。本発明は図１のフローチャートに示すように、まず、治療前の患者に、ＦＤＧを含有させることにより標識された医薬品を、注射等の医療方法を用いて投与する（Ｓ１）。ここで、ＦＤＧは、我が国において体内への投与が認可されている放射性同位元素である１８Ｆを含むグルコース（ブドウ糖）であるが、このＦＤＧを、例えば、生理食塩水に混合することにより医薬品としたものが既に製品化されている。
【００１７】
ところで、がん細胞は、正常な細胞よりも増殖が盛んに行われるため、細胞のエネルギー源であるグルコース（前記ＦＤＧを含む）を多量に必要とし、その必要量は正常細胞のそれに比較して約１０倍にも達する。従って、前記患者に投与された医薬品に含まれるＦＤＧは、がん細胞に集中することが、既に医学的に知られており、前記ＦＤＧの体内分布を観測することにより、がん細胞の位置、即ち、病巣の位置を特定することができ、これにより治療方法や治療方針の決定に大きく貢献することは明白である。
【００１８】
ＦＤＧは、ごく微量の放射線を放出するが、前記ＦＤＧの体内分布を観測することは、前記放射線を観測することと等価である。前記ＦＤＧが放出する放射線を観測する装置としてＰＥＴ−ＣＴが開発及び実用化されている。ＰＥＴ−ＣＴは、がん細胞そのものの活動を、体外から撮影する医療機器であり、腫瘍の活動性や脳などの働きを断層画像としてとらえ、病気の原因や病状を的確に診断する装置である。また、ＰＥＴ−ＣＴは、短時間で全身を検査し、数ミリ程度の小さながんを見つけだすことも可能であり、がんの発見率は旧検査方法に比べ、格段に高くなっている。
【００１９】
次に、このＰＥＴ−ＣＴを用いて、前記投与されたＦＤＧの体内分布を観測し、画像化したものを画像情報Ａとして保存する（Ｓ２及びＳ６）。既述の如く、前記画像情報Ａは、がん細胞の位置、即ち、病巣の位置を特定する情報が含まれており、患者の現状の容態の把握や、治療方法及び治療方針を決定するためにも供される。
【００２０】
もちろん、画像情報Ａは、診断の正確性を増すため、複数枚生成するのが好ましく、後に述べる画像情報Ｂとの対応が取れるよう配慮されていれば良い。また、画像情報Ａという呼称はこれに拘らず、画像情報Ｂとの区別がつくよう配慮し任意に選定すると良い。また、画像情報Ａの保存方法は、例えば、印刷物や電子化データー等の従来技術による各種保存方法を用いれば良く、画像情報Ｂとの正確な比較検討が可能なよう配慮し、任意に選定すると良い。
【００２１】
さらに、患者の体外に摘出された細胞に当該患部治療能力を備えさせる処置を施し治療用細胞とする（Ｓ３）。ここで、前記細胞に当該患部治療能力を備えさせる処置としては、得られる細胞の形態や病気の種類によってそれぞれ異なるが、具体的には例えば、患者の血液のみが入手可能な場合は、「ＣＤ３−ＬＡＫ法」が用いられることが多く、この方法は、リンパ球画分を抗ＣＤ３抗体、インターロイキン−２（ＩＬ−２）などによる刺激を与えつつ培養して活性化させると同時に増殖させる方法である。
【００２２】
また例えば他の方法として、手術時に患者から、がん細胞や所属リンパ節細胞が得られる場合は、「ＣＴＬ法」が用いられることが多く、この方法は、培養初期の刺激として、自分のがん細胞だけで刺激を与えて培養した後、ＩＬ−２と抗ＣＤ３抗体を同様に用いて培養を行う方法であるが、このようにして得られた培養リンパ球は、患者自身のがん細胞に対する特異性を持った細胞障害性Ｔ細胞（ＣＹＴＯＴＯＸＩＣ Ｔ ＬＹＭＰＨＯＣＹＴＥ：ＣＴＬ）を多く含む。特に、手術時に患者から摘出したがん組織の所属リンパ節が得られる場合には、血液リンパ球の代りにリンパ節細胞を用いた方が、生体内でがんによって刺激を受けたリンパ球が多いため、より有効な活性化リンパ球を得ることが出来る。
【００２３】
またさらに、例えば他の方法として、樹状細胞を用いる方法「ＤＣ療法，ＤＣ−ＬＡＫ法，ＤＣ−ＣＴＬ法」があり、この方法は、Ｔ細胞に対する抗原提示を専門に行う樹状細胞（ＤＥＮＤＲＩＴＩＣ ＣＥＬＬ：ＤＣ）に、がん細胞から抽出した蛋白質を貪食させると、取り込まれたがん抗原蛋白質が、細胞内で分断されて異常ペプチドを生じ、これが抗原として樹状細胞表面に提示される性質を使用したものである。
【００２４】
さて、以上のようにして得られた各治療用細胞に、ＦＤＧを含有させることにより標識し、この標識された治療用細胞を患者本人の体内に戻すことにより当該患部の治療を開始する（Ｓ４）。ここで、前記治療用細胞にＦＤＧを含有させる方法として、本発明による具体的な一例としては、次のようにすると良い。即ち、
▲１▼、標識したい治療用細胞を遠心分離して、上清を吸引して１ｍｌのみ残し、沈殿した治療用細胞を回収する。
▲２▼、▲１▼で得られた治療用細胞に１８ｍＣｉのＦＤＧを、混入して良く攪拌する。
▲３▼、▲２▼で得られた治療用細胞を、空気に対してＣＯ２が５％濃度の雰囲気中で、３７℃で約２時間培養する。
▲４▼、▲３▼で得られた治療用細胞に、４℃に冷却されている５ｍｌの生理食塩水を混合し、良く攪拌してから遠心分離し、上清を吸引して、沈殿した治療用細胞を回収する。
▲５▼、▲４▼で得られた治療用細胞に、４℃に冷却されている生理食塩水を５ｍｌ混合し、４℃で約１５分間保つ。
▲６▼、▲５▼で得られた治療用細胞を再び遠心分離し、上清を吸引して、沈殿した治療用細胞を回収し、これを生理食塩水に浮遊させ、標識された治療用細胞とする。
以上の方法を用いると、治療用細胞にＦＤＧを効果的に含有させることが可能となる。
【００２５】
またここで、前記標識された治療用細胞を患者本人の体内に戻す方法として、例えば、一般的には前記標識された治療用細胞を１００ｍｌの点滴用生理食塩水に浮遊させ、点滴により静脈から投与するが、いかにして、がんの部位に治療用細胞を集中させるかが、重要な問題であり、がんが体表面から容易に接近できる部位にある場合には、がんに直接注入する場合もある。また症例によっては、がんに血液を供給している動脈からの投与や、胸腔内や腹腔内投与を行う場合もあり、それぞれの場合に応じて適切に選択すると良い。
【００２６】
ところで、ＦＤＧは既述の如く、微量の放射線を放射するが、放射線は人体にとって有害なことは周知の事実であり、それ故、前記治療用細胞に含有するＦＤＧの放射線の総量は、極力少なくするのが好ましいことは言うまでもない。しかし、後述する、ＰＥＴ−ＣＴを用いて体内に戻された後の治療用細胞の体内分布を画像化する際に、前記ＰＥＴ−ＣＴが前記ＦＤＧの放射する放射線を観測するに十分な量の放射線量、即ち、使用されるＰＥＴ−ＣＴの放射線の感知限界量以上の放射線量を、前記ＦＤＧが有している必要があるのも、また、当然のことである。
【００２７】
加えて、前記ＦＤＧが患者の体内に注入されてから、体内を血液等を媒介として患部付近にまで移動し、治療が開始されたと判断され、従って、ＰＥＴ−ＣＴにより、前記治療用細胞の体内分布の画像化が開始されるまでに、所定の時間、待機する必要があることも、また、容易に理解される。
【００２８】
さらに、前記ＦＤＧの放射線発生源であるＦ１８（フッ素の同位元素）の半減期は１１０分であることが既に知られており、このことは、前述の所定の待機時間｛以下、Ｔ（分）と称する｝の間に、前記ＦＤＧの放射線量が減少することを意味している。
【００２９】
従って、前記標識された治療用細胞を患者本人の体内に戻す時の前記治療用細胞に含有するＦＤＧの総放射線量｛以下、Ｖ（ｍＣｉ）と称する｝を、前記ＰＥＴ−ＣＴが前記治療用細胞に含有するＦＤＧの総放射線量の観測を開始するために必要な前記総放射線量の感知限界量｛以下、Ｌ（ｍＣｉ）と称する｝と前記Ｔとを考慮して決定することが、非常に重要であり、本発明の根幹に関わるものである。
【００３０】
これらを、一言で簡略に述べると、Ａは、人体の安全のため、できるだけ小さくしなければならないが、しかし、良質な画像Ｂを得るためには、Ｔを考慮して、Ｌを下回らないよう、Ａを十分に大きくしておかなければならないという困難な関係を、成立及び満足させる必要があるということである。
【００３１】
従来、前記Ｖ、Ｌ、Ｔの関係は明確にされていなかったが、本発明では、これらを数式により明確に規定することを可能とした。即ち、
Ｖ≧Ｌ／｛０．５の（Ｔ／１１０）乗｝・・・・・（１）式
であって、且つ
４５≦Ｔ≦６０・・・・・（２）式
とすることにより、前記困難な関係を満たし、人体に安全な治療用細胞の体内分布の把握方法を提供することを可能としている。
【００３２】
以下、前記（１）式、（２）式について説明する。まず、（１）式について説明する。（１）式右辺の｛０．５の（Ｔ／１１０）乗｝の項は、Ｆ１８の半減期が１１０分であることから、ＦＤＧが体内に注入されてからＴを経た後の放射線量の、初期値に対する減少割合を示しているが、この値はまた、ＰＥＴ−ＣＴが観測を開始するために必要な放射線の最低量の割合でもある。故に、この値の逆数に感知限界値Ｌを乗ずることにより、患者の体内に戻す時の治療用細胞に含有するＦＤＧの総放射線量の最低量、即ちＶの最低量を逆算出することが可能となり、これが、（１）式の右辺である。従って（１）式が意味するところは、前記（１）式の右辺によって算出された値以上のＶを選択せよということである。
【００３３】
もちろん、前記Ｖの値は、（１）式を満たしさえすれば、自由に選択することは可能であるが、既述の如く、人体の安全のため、Ｖを必要以上に大きくすることは好ましいことではない。感知限界値Ｌが正確でありさえすれば、（１）式の右辺により得られた値を、そのままＶとして使用することが推奨される。
【００３４】
次に、（２）式について説明する。（２）式の意味するところは、前記待機時間Ｔを４５分以上で且つ６０分以下に選択することを規定したものである。即ち、本発明者の研究結果によると、Ｔを４５分未満に選択すると、患者の個人差や治療細胞の形態や病気の種類等の影響により、本発明による治療用細胞の体内分布の把握方法の信頼性に問題が発生することが、明らかとなった。従って、これを解消するために本発明では、前記Ｔを４５分以上に選択することを既定しているのである。
【００３５】
また、前記Ｔの値に上限が生じるのは明らかである。なぜならば、（１）式において、Ｔの値を大きくすることは、Ｖの値も大きくすることであり、これは、決して好ましいことではない。また、臨床的には、前記治療用細胞が患者の体内に戻された後、患者は、前記Ｔと、ＰＥＴ−ＣＴによって画像情報Ｂが得られるまでの間の加算時間の間、床上で安静にしている必要があるが、これは、患者にとって苦痛を伴うものであり、極力、短時間であることが要求される。これについて、本発明者は、患者に対する聞き取り調査の結果や、ＰＥＴ−ＣＴの稼動効率等の調査結果を総合的に判断して、Ｔを６０分以下に選択する必要があるとの結論を得た。よって（２）式が得られ、これにより、患者の身体及び精神的負担を極力軽減することができ、また、ＰＥＴ−ＣＴの稼動効率を向上させることができるので、結局、医療コスト低減にも効果のある、治療用細胞の体内分布の把握方法を提供することが可能となった。
【００３６】
ここで前記（１）式、（２）式に具体的な数値を用いて、〈表１〉を参照しながらＶの計算例を示す。なお〈表１〉の左列は、待機時間Ｔを１分間隔で表示してあり、説明に必要な４５分から６０分の間のみを表示し、その他の時間は省略してある。また右列は、左列の待機時間Ｔに対応する、（１）式右辺の｛０．５の（Ｔ／１１０）乗｝の項の逆数値を表示してある。
【００３７】
【００３８】
まず、患者Ｋ１の例について説明する。患者Ｋ１は、細胞治療を受けるのは今回が初めてであり、また、これまで他の放射線治療を受けたことがないことも判明している。従って、今回は初回診断であり、治療方法及び治療方針の妥当性を、より確実に検証する必要があることを考慮して、Ｔを５８分と長めに選定し、また、Ｌを誤差範囲内の大きいほうの値に選定することにした。
【００３９】
即ち、今回使用する、ＰＥＴ−ＣＴは、ＧＥ ＩＭＡＧＩＮＡＴＩＯＮ ＡＴ ＷＯＲＫ社製のＤＩＳＣＯＶＥＲＹ ＳＴであるが、この装置の感知限界値Ｌは、２ｍＣｉ〜３ｍＣｉであることが判っている。このように、Ｌに誤差範囲が存在する理由は、装置内外の環境の日常的な変化や使用頻度、製造部品性能のばらつき等、多くの要因が挙げられるが、このような誤差を皆無にすることは、技術的に困難な場合が多く、極力小さくする努力が、日夜なされている。重要なことは、これらの誤差の存在を十分に理解して、各装置を使用することである。
【００４０】
よって、患者Ｋ１の例は、Ｌの値として、誤差範囲内の大きいほうの値である３ｍＣｉを選択する。さて、前述のように、Ｔ＝５８、Ｌ＝３が選択されたが、〈表１〉において、左列のＴ＝５８に対応する右列の値は、１．４４２であるので、これに前記Ｌである、３を乗じると、４．３２６ｍＣｉとなり、これが、患者Ｋ１に注入されるＶの推奨値である。
【００４１】
ところで、治療用細胞にＦＤＧを含有させる方法として、本発明による具体的な一例を既に説明してあるが、例えば、本発明によって得られた治療用細胞１００ｍｌ中に、仮に７ｍＣｉのＦＤＧが含有していたとすると、これを患者Ｋ１に注入するための必要量は、１００ｘ（４．３２６／７）＝６１．８ｍｌと算出される。
【００４２】
次に、患者Ｋ２の例について説明する。患者Ｋ２は、既に細胞治療を５回受けており、今回が６回目である。当然のことながら、本治療の初回診断でＦＤＧを体内に注入しており、また、これまで他の放射線治療を２回受けたことが判明している。患者Ｋ２の容体は、本治療を開始してから安定しており、今回は治療の経過を確認することが目的であり、診断の正確性はそれほど重要ではなく、むしろ患者の放射線被爆に対する安全性を優先すべきと判断される。従って、Ｔを４６分と短めに選定し、また、Ｌを誤差範囲内の小さいほうの値である、２ｍＣｉに選定することにした。
【００４３】
よって、患者Ｋ２の例は、前述のように、Ｔ＝４６、Ｌ＝２が選択されたが、〈表１〉において、左列のＴ＝４６に対応する右列の値は、１．３３７であるので、これに前記Ｌである、２を乗じると、２．６４７ｍＣｉとなり、これが、患者Ｋ２に注入されるＶの推奨値である。
【００４４】
ところで、例えば、本発明によって得られた治療用細胞１００ｍｌ中に、仮に７ｍＣｉのＦＤＧが含有していたとすると、これを患者Ｋ２に注入するための必要量は、１００ｘ（２．６４７／７）＝３７．８ｍｌと算出される。
【００４５】
ここで注目されるのは、患者Ｋ１と、患者Ｋ２に注入されるＶの値が、ほぼ４割も異なるということである。これは本発明が、患者の事情に合わせたＶを、容易且つ適切に選定することを可能とし、患者に対する不必要な放射線被爆を防止することのできる、安全な、治療用細胞の体内分布の把握方法であることを証明するものである。
【００４６】
以上のようにして前記Ｖが選定され、体内に戻された治療用細胞により、治療が開始されるが、その治療効果を早期に確認及び検証することが好ましいのは言うまでもない。従来は、治療効果を早期に確認及び検証することは困難であったが、本発明を用いることにより、これを可能とすることができる。
【００４７】
即ち、ＰＥＴ−ＣＴを用いて前記体内に戻された後の治療用細胞の体内分布を画像化したものを画像情報Ｂとして保存する（Ｓ５及びＳ８）。ここで、前記治療用細胞は、本発明によって、既にＦＤＧにより標識されているので、ＰＥＴ−ＣＴを用いることにより、治療用細胞の体内分布位置を特定することが可能となる。既述の如く、前記画像情報Ｂは、治療中の治療用細胞の体内分布位置を特定する情報が含まれているが、これを解析することにより、患者の治療中の容態の把握や、治療方法及び治療方針の妥当性を検証するためにも供される。
【００４８】
もちろん、画像情報Ｂは、診断の正確性を増すため、複数枚生成するのが好ましく、既に述べた画像情報Ａとの対応が取れるよう配慮されていれば良い。また、画像情報Ｂという呼称はこれに拘らず、画像情報Ａとの区別がつくよう配慮し、任意に選定すると良い。また、画像情報Ｂの保存方法は、例えば、印刷物や電子化データー等の従来技術による各種保存方法を用いれば良く、画像情報Ａとの正確な比較検討が可能なよう配慮し、任意に選定すると良い。
【００４９】
次に、治療作用が進行していると判断される適当な時期に、前記画像情報Ａと前記画像情報Ｂを同一縮尺及び同一方向に重ね合わせ（Ｓ７）、前記画像情報Ａに表示されている当該患部の位置と前記画像情報Ｂに表示されている治療用細胞の体内分布位置との一致量が多いほど治療効果が大であると判定することにより治療効果を推定する（Ｓ９、Ｓ１０、Ｓ１１、Ｓ１２）。
【００５０】
ここで、前記画像情報Ｂには、治療中の治療用細胞の体内分布位置を特定する情報が含まれているが、もし、治療用細胞が有効に治療効果を発揮しているならば、前記治療用細胞は当該患部の位置、即ち、病巣の位置そのもの、あるいはその付近に集中していると考えるのが妥当であり、故に、画像情報Ａと画像情報Ｂとが、一致、あるいは近似していると考えるのは、さらに妥当である。従って、画像情報Ａと画像情報Ｂを重ね合わせ、その一致量を、治療効果を推定するための判定基準として使用することが可能なことは明白である。
【００５１】
もちろん、画像情報Ａと画像情報Ｂを重ね合わせる際に、双方を、同一縮尺及び同一方向に重ね合わせることが、判定の正確さを期すために不可欠なことは言うまでもない。また、画像情報Ａと画像情報Ｂとはデーター化されているので、数値に置換えることができ、前記一致量も数値で表すことができる。このことは、人の判断による、あいまいさを排除し、判定の正確さを増すことに寄与する。
【００５２】
以上の説明により明らかなように、本発明の治療用細胞の体内分布の把握方法は、治療前の患者に、ＦＤＧで標識された医薬品を投与し、当該患部の位置をＰＥＴ−ＣＴを用いて画像化した画像情報Ａと、患者の治療用細胞をＦＤＧにより標識し、これを患者本人の体内に戻すことにより当該患部を治療し、前記治療用細胞の治療中の体内分布をＰＥＴ−ＣＴを用いて画像化した画像情報Ｂとを重ね合わせ、前記画像情報Ａに表示されている当該患部の位置と、前記画像情報Ｂに表示されている治療用細胞の体内分布位置との一致量により、治療効果を推定するので、その治療効果を早期に確認及び検証することが可能となり、加えて、画像情報Ａには、がん細胞の位置、即ち、病巣の位置を特定する情報が含まれており、患者の現状の容態の把握や、治療方法及び治療方針を決定するためにも供され、また、画像情報Ｂには、治療中の治療用細胞の体内分布位置を特定する情報が含まれているが、これを解析することにより、患者の治療中の容態の把握や、治療方法及び治療方針の妥当性を検証するためにも供される。
【００５３】
さらに、画像情報Ａと画像情報Ｂとはデーター化されているので、数値に置換えることができ、前記一致量も数値で表すことができるので、人の判断による、あいまいさを排除し、判定の正確さを増すことに寄与する治療用細胞の体内分布の把握方法を提供することができる。
【００５４】
さらに加えて、本発明は、患者の体内に戻す時の治療用細胞に含有するＦＤＧの総放射線量Ｖを、ＰＥＴ−ＣＴがＦＤＧの観測を開始するために必要な感知限界量Ｌと、ＦＤＧが患者の体内に注入されてから、ＰＥＴ−ＣＴにより、画像化が開始されるまでの待機時間Ｔを用いた数式により、明確に規定しているので、患者の事情に合わせたＶを、容易且つ適切に選定することを可能とし、患者に対する不必要な放射線被爆を防止することのできる、人体に安全な治療用細胞の体内分布の把握方法を提供することを可能としている。
【００５５】
よって本発明は、従来の問題点を解消し、細胞療法において、その治療効果の有効性を確認及び検証するための適切な、治療用細胞の体内分布の把握方法であり、医療的価値はきわめて大きい。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】 本発明の一実施例における治療用細胞の体内分布の把握方法を示すフローチャート図である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者の体外に摘出された細胞に当該患部治療能力を備えさせる処置を施し治療用細胞とし、前記治療用細胞を前記患者本人の体内に戻すことにより当該患部を治療せしめ、その治療効果を推定するための治療用細胞の体内分布の把握方法において、治療前の患者に１８フルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）を含有させることにより標識された医薬品を投与し、当該患部の位置を特定するためにＰＥＴ−ＣＴを用いて前記医薬品の体内分布を画像化したものを画像情報Ａとして保存し、前記治療用細胞に１８フルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）を含有させることにより標識し、この標識された治療用細胞を前記患者本人の体内に戻すことにより当該患部を治療せしめ、その治療効果を推定するためにＰＥＴ−ＣＴを用いて治療用細胞の体内分布を画像化したものを画像情報Ｂとして保存し、前記画像情報Ａと前記画像情報Ｂを同一縮尺及び同一方向に重ね合わせ、前記画像情報Ａに表示されている当該患部の位置と前記画像情報Ｂに表示されている治療用細胞の体内分布位置との一致量が多いほど治療効果が大であると判定することにより治療効果を推定することを特徴とする治療用細胞の体内分布の把握方法。
【請求項２】
前記治療用細胞に１８フルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）を含有させることにより標識する方法が、被標識治療用細胞を遠心分離して上清を除去し、沈殿した治療用細胞を回収する処置と、前記で得られた治療用細胞に１８フルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）を混入して良く攪拌する処置と、前記で得られた治療用細胞を、空気に対してＣＯ２が５％濃度の雰囲気中で、３７℃で所定時間培養する処置と、前記で得られた治療用細胞に４℃に冷却されている生理食塩水を混合し、良く攪拌してから遠心分離して上清を除去し、沈殿した治療用細胞を回収する処置と、前記で得られた治療用細胞に４℃に冷却されている生理食塩水を混合し、４℃で所定時間保つ処置と、前記で得られた治療用細胞を遠心分離して上清を除去し、沈殿した治療用細胞を回収し、これを生理食塩水に浮遊させる処置とを有することを特徴とする請求項１に記載の治療用細胞の体内分布の把握方法。
【請求項３】
前記標識された治療用細胞を患者本人の体内に戻す時の前記治療用細胞に含有する１８フルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）の総放射線量をＶ（ｍＣｉ）とし、前記標識された治療用細胞を患者本人の体内に戻してからＰＥＴ−ＣＴを用いて治療用細胞の体内分布の画像化を開始するまでの待機時間をＴ（分）とし、前記治療用細胞に含有する１８フルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）の総放射線量の観測を開始するために必要な前記ＰＥＴ−ＣＴの前記総放射線量の感知限界量をＬ（ｍＣｉ）としたとき、前記Ｖ、Ｌ、Ｔの関係を
Ｖ≧Ｌ／｛０．５の（Ｔ／１１０）乗｝
であって、旦つ
４５≦Ｔ≦６０
とすることを特徴とする請求項１及び請求項２に記載の治療用細胞の体内分布の把握方法。
【請求項１】
患者の体外に摘出された細胞に当該患部治療能力を備えさせる処置を施し治療用細胞とし、前記治療用細胞を前記患者本人の体内に戻すことにより当該患部を治療せしめ、その治療効果を推定するための治療用細胞の体内分布の把握方法において、治療前の患者に１８フルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）を含有させることにより標識された医薬品を投与し、当該患部の位置を特定するためにＰＥＴ−ＣＴを用いて前記医薬品の体内分布を画像化したものを画像情報Ａとして保存し、前記治療用細胞に１８フルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）を含有させることにより標識し、この標識された治療用細胞を前記患者本人の体内に戻すことにより当該患部を治療せしめ、その治療効果を推定するためにＰＥＴ−ＣＴを用いて治療用細胞の体内分布を画像化したものを画像情報Ｂとして保存し、前記画像情報Ａと前記画像情報Ｂを同一縮尺及び同一方向に重ね合わせ、前記画像情報Ａに表示されている当該患部の位置と前記画像情報Ｂに表示されている治療用細胞の体内分布位置との一致量が多いほど治療効果が大であると判定することにより治療効果を推定することを特徴とする治療用細胞の体内分布の把握方法。
【請求項２】
前記治療用細胞に１８フルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）を含有させることにより標識する方法が、被標識治療用細胞を遠心分離して上清を除去し、沈殿した治療用細胞を回収する処置と、前記で得られた治療用細胞に１８フルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）を混入して良く攪拌する処置と、前記で得られた治療用細胞を、空気に対してＣＯ２が５％濃度の雰囲気中で、３７℃で所定時間培養する処置と、前記で得られた治療用細胞に４℃に冷却されている生理食塩水を混合し、良く攪拌してから遠心分離して上清を除去し、沈殿した治療用細胞を回収する処置と、前記で得られた治療用細胞に４℃に冷却されている生理食塩水を混合し、４℃で所定時間保つ処置と、前記で得られた治療用細胞を遠心分離して上清を除去し、沈殿した治療用細胞を回収し、これを生理食塩水に浮遊させる処置とを有することを特徴とする請求項１に記載の治療用細胞の体内分布の把握方法。
【請求項３】
前記標識された治療用細胞を患者本人の体内に戻す時の前記治療用細胞に含有する１８フルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）の総放射線量をＶ（ｍＣｉ）とし、前記標識された治療用細胞を患者本人の体内に戻してからＰＥＴ−ＣＴを用いて治療用細胞の体内分布の画像化を開始するまでの待機時間をＴ（分）とし、前記治療用細胞に含有する１８フルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）の総放射線量の観測を開始するために必要な前記ＰＥＴ−ＣＴの前記総放射線量の感知限界量をＬ（ｍＣｉ）としたとき、前記Ｖ、Ｌ、Ｔの関係を
Ｖ≧Ｌ／｛０．５の（Ｔ／１１０）乗｝
であって、旦つ
４５≦Ｔ≦６０
とすることを特徴とする請求項１及び請求項２に記載の治療用細胞の体内分布の把握方法。
【図１】
【公開番号】特開２００６−１３３２０５（Ｐ２００６−１３３２０５Ａ）
【公開日】平成１８年５月２５日（２００６．５．２５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００４−３５１９７９（Ｐ２００４−３５１９７９）
【出願日】平成１６年１１月５日（２００４．１１．５）
【出願人】（５０４４４５９４３）セルジェン株式会社 (1)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１８年５月２５日（２００６．５．２５）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年１１月５日（２００４．１１．５）
【出願人】（５０４４４５９４３）セルジェン株式会社 (1)
【Ｆターム（参考）】
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