活性成分の注射可能な持続放出処方剤、およびその調製方法
ヒトまたは動物の身体内に注射し得る油中水（Ｗ／Ｏ）型のエマルジョン形態で脂肪相（Ｏ）および水相（Ｗ）を含み、前記水相（Ｗ）は少なくとも一つの医薬的または獣医学的な水溶性の活性成分を含んでなる、ヒトまたは動物の身体に対して治療方法を実施するための組成物であって：前記脂肪相（Ｏ）は、ソルビトールもしくはマンニトールの脂肪酸エステル、またはソルビタンもしくはマンニタンの脂肪酸エステル、（ポリ）アルコキシ化脂肪酸トリグリセリド、脂肪酸の（ポリ）アルコキシ化ポリグリセロールエステルから選択される全体のＨＬＢ値が３〜８の間である１以上の表面活性剤を含んでなり、また前記組成物は、速度３０ｒｍｐまたは６０ｒｐｍで回転するＮｏ．２スピンドルを備えたブルックフィールドＬＶＴ粘度計を使用して、直径約７ｃｍの２５０ｃｍ３のビーカー中において２５℃で測定した１０ ２０００ｍＰａｓ、好ましくは２００ｍＰａｓ未満の粘度を有することを特徴とする組成物。
【発明の詳細な説明】
【発明の背景】
【０００１】
本発明は、医薬的もしくは獣医学的な活性成分のヒトもしくは動物の身体内での経時的な持続的放出を促進するための、前記活性成分の新規な処方剤に関する。
【０００２】
医薬の持続放出は、活性成分の治療効果を経時的に持続させて、その副作用を低減し、患者において毒性閾値を一時的に越えることに付随するリスクを最小化するための方法である。医薬の経口的、局所的または注射可能な持続放出のための多くの処方が、文献中に記載されてきた。これらの処方剤の中で、固形の注射可能な形態および液体の注射可能な形態は区別される。
【０００３】
固形の注射可能な形態は、平均直径０．０１μｍ〜１００μｍのマイクロビーズもしくはナノビーズの等張水溶液中における懸濁液である。このような懸濁液は沈殿する傾向があり、従って保存に際して比較的不安定で、医薬の均一性が常に保証されるわけではないので、患者に対して正確な投与量の活性成分の投与を保証することに関する問題を提示することがある。これら懸濁液のマイクロビーズまたはナノビーズは、一般的には、２００５／０４８１１５Ａの番号で公開された米国特許出願に記載の乳酸および／またはグリコール酸共重合体のような生分解性ポリマーからなっている。これらのマイクロビーズもしくはナノビーズの使用における主な欠点には、それを調製するための、人の健康に有害な揮発性有機溶媒の使用が含まれ、また最終処方剤中での毒性モノマーの残留が含まれる。他の著者等は、注射可能な活性成分のベクターとして、ＷＯ９４／２６２５２で公開された国際特許出願に記載されているような、室温で固体の脂肪酸のマイクロビーズを記載している。この場合の欠点は、当該懸濁液は、これを流体および注射可能なままにするためにマイクロビーズ（従って活性成分）を僅かだけ充填できるに過ぎないという事実にある。更に、冷却保存の際に、結晶形態の脂肪物質における変化が観察されており、これは活性成分の不十分な放出プロファイルを導くこともまた記載されている。最後に、このようなマイクロビーズは、親油性の活性成分と共に使用できるに過ぎない。
【０００４】
注射可能な投与のためには、安定で均一な流動性液体の注射可能な形態が好ましい。特に有用な一つの形態は、表面活性剤で安定化された、水相および液状脂質相の混合物であるエマルジョンである。脂質相が水相中に分散されるときには、Ｏ／Ｗと書かれる「水中油」型のエマルジョンが得られる。このようなエマルジョンは、非経口摂食のために長期間使用されてきており、また親油性活性成分の注射のためにも、ヒトの身体におけるその持続放出を保証するために提案されてきた。しかし、このようなエマルジョンは植物油または中鎖トリグリセリドのような脂肪相を使用し、これは溶媒能力が低く、注意深く選択された小量の医薬を溶解することを可能にするに過ぎない。
【０００５】
大部分の活性成分は水溶性なので、Ｗ／Ｏと書かれる「油中水」型のエマルジョンを使用することが試みられてきており、この場合は、人体の生物学的液体から医薬を単離して、その漸進的な経時的放出を可能にするための障壁または膜として働く脂質相の中に水相が分散される。しかし、「油中水」型のエマルジョンは屡々粘度が高すぎて、シリンジで注射するのが困難である；それらを注射するときは、それらは連続相の粘度および油性に起因して、注射部位において局部的反応を生じる；最後に、それらは経時的な安定性に乏しい。
【０００６】
ＷＯ・０２／０６７８９９で公開された国際特許出願は、ワクチンのための油中水（Ｗ／Ｏ）形態の組成物であって、好ましくは１００ｍＰａｓ未満の粘度を有し、その乳化剤が、例えばＡｒｃａｃｅｌTMＰ１３５［ポリ（１２−ヒドロキシステアリン酸）型のポリエステル乳化剤］である組成物を開示している。
【０００７】
ＷＯ・９６／４００５７の番号で公開された国際特許出願は、油中水型の低粘度逆エマルジョン形態の医薬であって、その脂肪相はフッ化炭化水素系のオイルを含んでなり、且つその水相が少なくとも一つの活性成分を含んでなる医薬を開示している。
【０００８】
これは、本発明が、上記で概説した欠点を持たない活性成分の油中水エマルジョンを開発することを目的とした理由である。
【発明の開示】
【０００９】
第一の側面に従えば、本発明の主題は、ヒトまたは動物の身体内に注射し得る油中水（Ｗ／Ｏ）型のエマルジョン形態で脂肪相（Ｏ）および水相（Ｗ）を含み、前記水相（Ｗ）は少なくとも一つの医薬的または獣医学的な水溶性の活性成分を含んでなる、ヒトまたは動物の身体に対して治療方法を実施するための組成物であって：前記脂肪相（Ｏ）は、ソルビトールもしくはマンニトールの脂肪酸エステル、またはソルビタンもしくはマンニタンの脂肪酸エステル、（ポリ）アルコキシ化脂肪酸トリグリセリド、脂肪酸の（ポリ）アルコキシ化ポリグリセロールエステルから選択される全体のＨＬＢ値が３〜８の間である１以上の表面活性剤を含んでなり、また前記組成物は、速度３０ｒｍｐまたは６０ｒｐｍで回転するＮｏ．２スピンドルを備えたブルックフィールドＬＶＴ粘度計を使用して、直径約７ｃｍの２５０ｃｍ３のビーカー中において２５℃で測定した２００ｍＰａｓ以下の粘度を有することを特徴とする組成物である。
【００１０】
本発明の目的において、脂肪酸エステル族の表面活性剤のＨＬＢ値は、式：ＨＬＢ＝２０（１−Ｉｓ／Ｉａ）によって計算され、ここでのＩｓは前記表面活性剤の鹸化数であり、Ｉａは酸数である。これら二つの数、即ち、鹸化数および酸数は、ヨーロッパ薬局方に記載された方法によって決定される。もう一つの化学族の一部を形成する表面活性剤のＨＬＢ値は、一般式：ＨＬＢ＝５Ｅ／Ｍによって計算され、ここでのＥは表面活性剤の親水性部分の分子量を表し、Ｍは前記表面活性剤の合計分子量を表す。表面活性剤の混合物の場合、全体のＨＬＢ値は各表面活性剤のＨＬＢ値の加重合計（weight sum）である。
【００１１】
４℃で液体でなければならない本発明の主題である該組成物の連続的な脂肪相は、一般には、鉱物起源、植物起源もしくは動物起源の油、前記油のアルキルエステル、脂肪酸のアルキルエステル、または脂肪アルコールのアルキルエーテル、脂肪酸とポリオールとのエステル、および脂肪アルコールとポリオールとのエーテルから選択される１以上の化合物を含んでいる。
【００１２】
鉱物起源の油の例には、石油起源の油、例えばＭａｒｃｏｌTM５２、ＭａｒｃｏｌTM８２またはＤｒａｋｅｏｌTM６ＶＲのような白色ミネラル油が含まれる。植物起源の油の例には、落花生油、オリーブ油、ゴマ油、大豆油、小麦麦芽油、ブドウ種油（grapeseed oil）、向日葵油、ひまし油、亜麻仁油、大豆油、トウモロコシ油、ココナツ油、椰子油、胡桃油、シバミ油および菜種油、或いはオリーブスクワランもしくはスクワレンが含まれる。動物起源の油の例には、鯨蝋油、獣脂油、鮫肝臓から抽出されたスクワランもしくはスクワレン、および魚油が含まれる。
【００１３】
油のアルキルエステルの例には、前記油のメチルエステル、エチルエステル、直鎖もしくは分岐鎖のプロピルエステル、および直鎖もしくは分岐鎖のブチルエステルが含まれる。
【００１４】
上記で述べたエステルを調製するために適した脂肪酸には、特に、１２〜２２の炭素原子を含むもの、例えばミリスチン酸、パルミチン酸、オレイン酸、リシノール酸、またはイソステアリン酸が含まれ、また有利には、２０℃において液体である脂肪酸が含まれる。
【００１５】
脂肪酸エステルまたは脂肪アルコールエステルの例には、脂肪酸のアルキルエステル、例えばオレイン酸エチル、オレイン酸メチル、ミリスチン酸イソプロピル、またはパルミチン酸オクチル；脂肪酸およびポリオールのエステルまたは脂肪アルコールおよびポリオールのエーテル、例えば脂肪酸モノグリセリド、脂肪酸ジグリセリド、脂肪酸トリグリセリド、脂肪酸とポリグリセロールとのエステル、またはプロピレングリコールの脂肪酸エステル、特に、脂肪酸とヘキソール、例えばソルビトールもしくはマンニトールとのエステル、および脂肪酸とヘキソール無水物、例えばソルビタンもしくはマンニタンとのエステルが含まれる。
【００１６】
本発明の関連において、脂肪相は、上記で述べた化合物の一つだけ、または上記で述べた化合物の幾つかの混合物を含んでいる。
【００１７】
本発明の第一の特別の側面に従えば、医薬組成物の連続的な脂肪相（Ｏ）は、白色ミネラル油、流動液体パラフィン、スクワラン、スクワレン、およびオレイン酸エチル、またはこれら油の混合物から選択される。
【００１８】
該脂肪相は、その重量１００％当り、約１重量％〜１５重量％、好ましくは３重量％〜１０重量％の表面活性剤を含んでいる。
【００１９】
本発明の主題は、特に、前記表面活性剤または表面活性剤の混合物が５以上かつ８未満の全体のＨＬＢ値を有する、先に定義した組成物である。
【００２０】
使用される表面活性剤は、一般には修飾された脂肪物質から選択される。本発明に関連して使用される修飾された脂肪物質は、鉱物起源、植物起源または動物起源のものであってよい。鉱物起源の修飾された脂肪物質には、石油起源の油が含まれる。植物起源の修飾された脂肪物質には、修飾された植物油、例えば修飾された落花生油、オリーブ油、ゴマ油、大豆油、小麦麦芽油、ブドウ種油、向日葵油、ひまし油、亜麻仁油、大豆油、トウモロコシ油、ココナツ油、椰子油、胡桃油、シバミ油および菜種油が含まれる。動物起源の修飾された脂肪物質には、例えば、修飾されたスクワラン、修飾されたスクワレン、修飾された鯨蝋油、修飾された獣脂油が含まれる。「修飾された脂肪物質」の用語は、特に、脂肪物質のカルボキシ誘導体、サルフェート誘導体、ホスフェート誘導体、またはアルコキシ誘導体を意味し、特に、油の（ポリ）アルコキシ化誘導体または油のアルキルエステルの（ポリ）アルコキシ化誘導体、並びに、特に油の（ポリ）エトキシ化および／または（ポリ）プロポキシ化誘導体、或いは、前記油のメチルエステル、エチルエステル、直鎖もしくは分岐鎖のプロピルまたは直鎖もしくは分岐鎖のブチルエステルの（ポリ）エトキシ化および／または（ポリ）プロポキシ化誘導体を意味する。
【００２１】
本発明の主題は、更に詳細には、先に定義した組成物であって、前記修飾された脂肪物質が１〜１０の平均エトキシ化度（１〜１０のＥＯ数とも言う）を備えた油のエトキシ化誘導体から選択される、先に定義した組成物である。「修飾された脂肪物質」の用語はまた、脂肪酸とポリオールとのエステル、または脂肪アルコールとポリオールとのエーテル、特に、脂肪酸とヘキソール、例えばソルビトールもしくはマンニトールとのエステル、または脂肪酸とヘキソール無水物、例えばソルビタンもしくはマンニタンとのエステル、脂肪酸とポリオールとのエステルの（ポリ）アルコキシ化誘導体 、または脂肪アルコールとポリオールとのエステルの（ポリ）アルコキシ化誘導体、例えば（ポリ）アルコキシ化脂肪酸トリグリセリド、脂肪酸とポリグリセロールとの（ポリ）アルコキシ化エステル、特に、脂肪酸とヘキソール、例えばソルビトールもしくはマンニトールとの（ポリ）アルコキシ化エステル、または脂肪酸とヘキソール無水物、例えばソルビタンもしくはマンニタンとの（ポリ）アルコキシ化エステルであって、１〜４０の平均エトキシ化度（１〜４０のＥＯ数とも言う）、好ましくは５〜２０の平均エトキシ化度を有するものを言う。
【００２２】
本発明の関連において、「脂肪酸とポリオールとのエステル」の用語は、ポリオールの脂肪酸モノエステル、またはポリオールの脂肪酸ポリエステル、例えばポリオールの脂肪酸ジエステルもしくはポリオールの脂肪酸トリエステルを意味する。前記エステルの（ポリ）アルコキシ化誘導体についても、同様に同じことが言える。
【００２３】
本発明の関連において、「脂肪アルコールとポリオールとのエーテル」の用語は、脂肪アルコールとポリオールとのモノエーテル、または脂肪アルコールとポリオールとのポリエーテル、例えば、脂肪アルコールとポリオールとのジエステル、または脂肪アルコールとポリオールとのトリエーテルを意味する。前記エーテルの（ポリ）アルコキシ化誘導体についても、同様に同じことが言える。
【００２４】
本発明の主題は、特に、前記修飾された脂肪物質が、脂肪酸とポリオールのエステルの（ポリ）エトキシ化誘導体、または脂肪アルコールとポリオールのエステルの（ポリ）エトキシ化誘導体、特に、脂肪酸とグリセロールまたはヘキソール、例えばソルビトールまたはマンニトールとの（ポリ）エトキシ化エステル、または脂肪酸とヘキソール無水物、たとえばソルビタンもしくはマンニタンとの（ポリ）エトキシ化エステルであって、５〜１０の平均エトキシ化度（５〜１０のＥＯ数とも言う）を有するものを言う。
【００２５】
上記の修飾された脂肪物質を調製するのに適した脂肪酸には、平均１２〜２２の炭素原子を含むもの、例えば１６〜１８の炭素原子を含むもの、例えばオレイン酸、リシノール酸、ヒドロキシステアリン酸、またはイソステアリン酸、有利には２０℃において液体である脂肪酸が含まれる。上記で定義した組成物は、特に、オレイン酸から誘導された上記の１以上の修飾された脂肪物質を含んでいる。
【００２６】
本発明のもう一つの側面に従えば、脂肪相中に存在する前記表面活性剤または表面活性剤の混合物は、実質的に、マンニタンエステル、ソルビタンエステル、（ポリ）アルコキシ化マンニタンエステル、および（ポリ）アルコキシ化ソルビタンエステルから選択される１以上のエステルからなっている。特に、脂肪相中に存在する表面活性剤は、オレイン酸マンニタンおよび（ポリ）エトキシ化マンニタンの混合物、オレイン酸ソルビタンおよびオレイン酸（ポリ）エトキシ化ソルビタンの混合物、オレイン酸ソルビタンおよび（ポリ）エトキシ化マンニタンの混合物、またはオレイン酸マンニタンおよび（ポリ）エトキシ化ソルビタンの混合物からなり、前記混合物は３以上かつ８未満の全体のＨＬＢ値を有している。
【００２７】
本発明のもう一つの特別な側面に従えば、脂肪相中に存在する表面活性剤または表面活性剤の混合物は、レシチン、例えば大豆レシチン、卵レシチン、水素化レシチン、リン脂質およびスフィンゴ脂質から選択される１以上の化合物から実質的になっている。
【００２８】
上記で定義した組成物は、その重量１００％当り、一般には５０重量％の水相を含んでおり、該水相は、注射すべき親水性の活性成分を補充した水または生体利用可能な水性溶媒、例えばリン酸緩衝液で緩衝された水からなっている。
【００２９】
好ましくは、先に定義した組成物は、治癒的治療方法に使用される。このような注射製剤のために適した親水性の活性成分には、例えば、水溶性の抗癌活性成分、ホルモン、抗生物質、抗ウイルス剤、鎮痛活性剤、血管拡張剤、抗糖尿病活性剤、麻酔薬、鎮静剤、造影剤、免疫調節剤、抗血友病因子、神経遮断剤、栄養学低活性剤、ステロイド、血栓溶解剤、および生物医薬活性剤、例えば組換えタンパク質が含まれる。
【００３０】
もう一つの側面に従えば、本発明の主題は、先に定義した組成物を調製するための方法であって：
・親水性成分を、水または薬理学的に許容可能な水性溶媒中に溶解させる工程（ａ）と；
・工程（ａ）で調製された水相を、表面活性剤または表面活性剤の混合物を含有する脂肪相と混合する工程（ｂ）
を含んでなることを特徴とする方法である。
【００３１】
最後の側面に従えば、本発明の主題は、ヒトまたは動物の身体における活性成分の持続放出のための方法であって、前記活性成分が、先に定義した油中水エマルジョンの形態で注射によって投与されることを特徴とする方法である。
【実施例】
【００３２】
以下の例は、本発明を例示するものであるが、本発明を限定するものではない
実施例１ - カフェインＷ／Ｏエマルジョンの調製
カフェインを、生理学的水の中に所望の濃度、特に１ｍｇ／ｍＬ、より一般的には０．１〜１０ｍｇ／ｍＬで予め溶解し、必要な量の油および必要な表面活性剤を均一な混合物が得られるまで撹拌する。
【００３３】
記載する全ての例において、脂肪相（油プラス表面活性剤）とカフェイン水溶液の比率は、７０重量％の脂肪相および３０重量％の水相に維持する。エマルジョンを調製するために、水相を油相の中に投入し、該混合物を、ＳｉｌｖｅｒｓｏｎTM・Ｌ４Ｒ型の実験室用回転固定子スターラーを使用して３分間撹拌する。親水性活性成分としてのカフェイン、および以下の表に示す成分を用いて、Ｗ／Ｏエマルジョンの６つのサンプルを調製した。
【００３４】
使用した表面活性剤の混合物は、以下の表に示したそれらの物理化学的明細によって特徴付けられる。
【表１】
【００３５】
得られたカフェインエマルジョンは以下の特性を有している。
【表２】
【００３６】
実施例２ - 活性成分の持続放出能力に関するエマルジョンのインビトロ評価
評価すべきエマルジョンのサンプルは、ＥｒｗｅｋａTM・ＤＴ６００溶解機の容器に収容された「受け」水相上に堆積させる；全体を混合し、そこから受け相の中に放出された活性剤を検定するために、この相のサンプルを規則的に採取する（ｔ＝０、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間）。得られた結果を、放出されたカフェインのパーセンテージで下記の表に示す：
【表３】
【００３７】
実施例３ - 活性成分の持続放出能力に関する、本発明に従うエマルジョンのインビボ評価
カフェインの薬物動態学を、エマルジョンＮｏ．１およびＮｏ．２の皮下注射、生理学的カフェイン溶液の皮下注射（ＳＣ溶液）および生理学的カフェイン溶液の静脈注射（ＩＶ溶液）によって、４匹の動物からなる４群で評価した。これらの４群について、注射されたカフェインの投与量は４０ｍｇ／ｋｇラットである。
【００３８】
血液中のカフェイン濃度（μｇ／ｍＬの血液）を周期的に決定し、以下の結果が得られる。
【表４】
【００３９】
これらの結果は、以下の薬物動態学的データを与える。
【表５】
【００４０】
ＡＵＣ：曲線下の面積、即ち、Ｘ軸上に時間（時で）を取り、Ｙ軸上に血液中の濃度をμｇ／ｍＬで取ることによりプロットした曲線下の面積の測定
この結果は、同じ方法で注射された水溶液と比較したときに、カフェインは血液中に徐々に通過する一方、曲線下の面積は、静脈注射に対応するものと同等に維持されることを示している。
【００４１】
エマルジョン形態中のカフェインの吸収相は３倍遅く、最大血漿濃度に達する時間は１時間遅れる。本発明のエマルジョンを用いて得られる最大血漿濃度は、カフェイン溶液を用いて得られるよりも２０％〜３５％低い。
【発明の背景】
【０００１】
本発明は、医薬的もしくは獣医学的な活性成分のヒトもしくは動物の身体内での経時的な持続的放出を促進するための、前記活性成分の新規な処方剤に関する。
【０００２】
医薬の持続放出は、活性成分の治療効果を経時的に持続させて、その副作用を低減し、患者において毒性閾値を一時的に越えることに付随するリスクを最小化するための方法である。医薬の経口的、局所的または注射可能な持続放出のための多くの処方が、文献中に記載されてきた。これらの処方剤の中で、固形の注射可能な形態および液体の注射可能な形態は区別される。
【０００３】
固形の注射可能な形態は、平均直径０．０１μｍ〜１００μｍのマイクロビーズもしくはナノビーズの等張水溶液中における懸濁液である。このような懸濁液は沈殿する傾向があり、従って保存に際して比較的不安定で、医薬の均一性が常に保証されるわけではないので、患者に対して正確な投与量の活性成分の投与を保証することに関する問題を提示することがある。これら懸濁液のマイクロビーズまたはナノビーズは、一般的には、２００５／０４８１１５Ａの番号で公開された米国特許出願に記載の乳酸および／またはグリコール酸共重合体のような生分解性ポリマーからなっている。これらのマイクロビーズもしくはナノビーズの使用における主な欠点には、それを調製するための、人の健康に有害な揮発性有機溶媒の使用が含まれ、また最終処方剤中での毒性モノマーの残留が含まれる。他の著者等は、注射可能な活性成分のベクターとして、ＷＯ９４／２６２５２で公開された国際特許出願に記載されているような、室温で固体の脂肪酸のマイクロビーズを記載している。この場合の欠点は、当該懸濁液は、これを流体および注射可能なままにするためにマイクロビーズ（従って活性成分）を僅かだけ充填できるに過ぎないという事実にある。更に、冷却保存の際に、結晶形態の脂肪物質における変化が観察されており、これは活性成分の不十分な放出プロファイルを導くこともまた記載されている。最後に、このようなマイクロビーズは、親油性の活性成分と共に使用できるに過ぎない。
【０００４】
注射可能な投与のためには、安定で均一な流動性液体の注射可能な形態が好ましい。特に有用な一つの形態は、表面活性剤で安定化された、水相および液状脂質相の混合物であるエマルジョンである。脂質相が水相中に分散されるときには、Ｏ／Ｗと書かれる「水中油」型のエマルジョンが得られる。このようなエマルジョンは、非経口摂食のために長期間使用されてきており、また親油性活性成分の注射のためにも、ヒトの身体におけるその持続放出を保証するために提案されてきた。しかし、このようなエマルジョンは植物油または中鎖トリグリセリドのような脂肪相を使用し、これは溶媒能力が低く、注意深く選択された小量の医薬を溶解することを可能にするに過ぎない。
【０００５】
大部分の活性成分は水溶性なので、Ｗ／Ｏと書かれる「油中水」型のエマルジョンを使用することが試みられてきており、この場合は、人体の生物学的液体から医薬を単離して、その漸進的な経時的放出を可能にするための障壁または膜として働く脂質相の中に水相が分散される。しかし、「油中水」型のエマルジョンは屡々粘度が高すぎて、シリンジで注射するのが困難である；それらを注射するときは、それらは連続相の粘度および油性に起因して、注射部位において局部的反応を生じる；最後に、それらは経時的な安定性に乏しい。
【０００６】
ＷＯ・０２／０６７８９９で公開された国際特許出願は、ワクチンのための油中水（Ｗ／Ｏ）形態の組成物であって、好ましくは１００ｍＰａｓ未満の粘度を有し、その乳化剤が、例えばＡｒｃａｃｅｌTMＰ１３５［ポリ（１２−ヒドロキシステアリン酸）型のポリエステル乳化剤］である組成物を開示している。
【０００７】
ＷＯ・９６／４００５７の番号で公開された国際特許出願は、油中水型の低粘度逆エマルジョン形態の医薬であって、その脂肪相はフッ化炭化水素系のオイルを含んでなり、且つその水相が少なくとも一つの活性成分を含んでなる医薬を開示している。
【０００８】
これは、本発明が、上記で概説した欠点を持たない活性成分の油中水エマルジョンを開発することを目的とした理由である。
【発明の開示】
【０００９】
第一の側面に従えば、本発明の主題は、ヒトまたは動物の身体内に注射し得る油中水（Ｗ／Ｏ）型のエマルジョン形態で脂肪相（Ｏ）および水相（Ｗ）を含み、前記水相（Ｗ）は少なくとも一つの医薬的または獣医学的な水溶性の活性成分を含んでなる、ヒトまたは動物の身体に対して治療方法を実施するための組成物であって：前記脂肪相（Ｏ）は、ソルビトールもしくはマンニトールの脂肪酸エステル、またはソルビタンもしくはマンニタンの脂肪酸エステル、（ポリ）アルコキシ化脂肪酸トリグリセリド、脂肪酸の（ポリ）アルコキシ化ポリグリセロールエステルから選択される全体のＨＬＢ値が３〜８の間である１以上の表面活性剤を含んでなり、また前記組成物は、速度３０ｒｍｐまたは６０ｒｐｍで回転するＮｏ．２スピンドルを備えたブルックフィールドＬＶＴ粘度計を使用して、直径約７ｃｍの２５０ｃｍ３のビーカー中において２５℃で測定した２００ｍＰａｓ以下の粘度を有することを特徴とする組成物である。
【００１０】
本発明の目的において、脂肪酸エステル族の表面活性剤のＨＬＢ値は、式：ＨＬＢ＝２０（１−Ｉｓ／Ｉａ）によって計算され、ここでのＩｓは前記表面活性剤の鹸化数であり、Ｉａは酸数である。これら二つの数、即ち、鹸化数および酸数は、ヨーロッパ薬局方に記載された方法によって決定される。もう一つの化学族の一部を形成する表面活性剤のＨＬＢ値は、一般式：ＨＬＢ＝５Ｅ／Ｍによって計算され、ここでのＥは表面活性剤の親水性部分の分子量を表し、Ｍは前記表面活性剤の合計分子量を表す。表面活性剤の混合物の場合、全体のＨＬＢ値は各表面活性剤のＨＬＢ値の加重合計（weight sum）である。
【００１１】
４℃で液体でなければならない本発明の主題である該組成物の連続的な脂肪相は、一般には、鉱物起源、植物起源もしくは動物起源の油、前記油のアルキルエステル、脂肪酸のアルキルエステル、または脂肪アルコールのアルキルエーテル、脂肪酸とポリオールとのエステル、および脂肪アルコールとポリオールとのエーテルから選択される１以上の化合物を含んでいる。
【００１２】
鉱物起源の油の例には、石油起源の油、例えばＭａｒｃｏｌTM５２、ＭａｒｃｏｌTM８２またはＤｒａｋｅｏｌTM６ＶＲのような白色ミネラル油が含まれる。植物起源の油の例には、落花生油、オリーブ油、ゴマ油、大豆油、小麦麦芽油、ブドウ種油（grapeseed oil）、向日葵油、ひまし油、亜麻仁油、大豆油、トウモロコシ油、ココナツ油、椰子油、胡桃油、シバミ油および菜種油、或いはオリーブスクワランもしくはスクワレンが含まれる。動物起源の油の例には、鯨蝋油、獣脂油、鮫肝臓から抽出されたスクワランもしくはスクワレン、および魚油が含まれる。
【００１３】
油のアルキルエステルの例には、前記油のメチルエステル、エチルエステル、直鎖もしくは分岐鎖のプロピルエステル、および直鎖もしくは分岐鎖のブチルエステルが含まれる。
【００１４】
上記で述べたエステルを調製するために適した脂肪酸には、特に、１２〜２２の炭素原子を含むもの、例えばミリスチン酸、パルミチン酸、オレイン酸、リシノール酸、またはイソステアリン酸が含まれ、また有利には、２０℃において液体である脂肪酸が含まれる。
【００１５】
脂肪酸エステルまたは脂肪アルコールエステルの例には、脂肪酸のアルキルエステル、例えばオレイン酸エチル、オレイン酸メチル、ミリスチン酸イソプロピル、またはパルミチン酸オクチル；脂肪酸およびポリオールのエステルまたは脂肪アルコールおよびポリオールのエーテル、例えば脂肪酸モノグリセリド、脂肪酸ジグリセリド、脂肪酸トリグリセリド、脂肪酸とポリグリセロールとのエステル、またはプロピレングリコールの脂肪酸エステル、特に、脂肪酸とヘキソール、例えばソルビトールもしくはマンニトールとのエステル、および脂肪酸とヘキソール無水物、例えばソルビタンもしくはマンニタンとのエステルが含まれる。
【００１６】
本発明の関連において、脂肪相は、上記で述べた化合物の一つだけ、または上記で述べた化合物の幾つかの混合物を含んでいる。
【００１７】
本発明の第一の特別の側面に従えば、医薬組成物の連続的な脂肪相（Ｏ）は、白色ミネラル油、流動液体パラフィン、スクワラン、スクワレン、およびオレイン酸エチル、またはこれら油の混合物から選択される。
【００１８】
該脂肪相は、その重量１００％当り、約１重量％〜１５重量％、好ましくは３重量％〜１０重量％の表面活性剤を含んでいる。
【００１９】
本発明の主題は、特に、前記表面活性剤または表面活性剤の混合物が５以上かつ８未満の全体のＨＬＢ値を有する、先に定義した組成物である。
【００２０】
使用される表面活性剤は、一般には修飾された脂肪物質から選択される。本発明に関連して使用される修飾された脂肪物質は、鉱物起源、植物起源または動物起源のものであってよい。鉱物起源の修飾された脂肪物質には、石油起源の油が含まれる。植物起源の修飾された脂肪物質には、修飾された植物油、例えば修飾された落花生油、オリーブ油、ゴマ油、大豆油、小麦麦芽油、ブドウ種油、向日葵油、ひまし油、亜麻仁油、大豆油、トウモロコシ油、ココナツ油、椰子油、胡桃油、シバミ油および菜種油が含まれる。動物起源の修飾された脂肪物質には、例えば、修飾されたスクワラン、修飾されたスクワレン、修飾された鯨蝋油、修飾された獣脂油が含まれる。「修飾された脂肪物質」の用語は、特に、脂肪物質のカルボキシ誘導体、サルフェート誘導体、ホスフェート誘導体、またはアルコキシ誘導体を意味し、特に、油の（ポリ）アルコキシ化誘導体または油のアルキルエステルの（ポリ）アルコキシ化誘導体、並びに、特に油の（ポリ）エトキシ化および／または（ポリ）プロポキシ化誘導体、或いは、前記油のメチルエステル、エチルエステル、直鎖もしくは分岐鎖のプロピルまたは直鎖もしくは分岐鎖のブチルエステルの（ポリ）エトキシ化および／または（ポリ）プロポキシ化誘導体を意味する。
【００２１】
本発明の主題は、更に詳細には、先に定義した組成物であって、前記修飾された脂肪物質が１〜１０の平均エトキシ化度（１〜１０のＥＯ数とも言う）を備えた油のエトキシ化誘導体から選択される、先に定義した組成物である。「修飾された脂肪物質」の用語はまた、脂肪酸とポリオールとのエステル、または脂肪アルコールとポリオールとのエーテル、特に、脂肪酸とヘキソール、例えばソルビトールもしくはマンニトールとのエステル、または脂肪酸とヘキソール無水物、例えばソルビタンもしくはマンニタンとのエステル、脂肪酸とポリオールとのエステルの（ポリ）アルコキシ化誘導体 、または脂肪アルコールとポリオールとのエステルの（ポリ）アルコキシ化誘導体、例えば（ポリ）アルコキシ化脂肪酸トリグリセリド、脂肪酸とポリグリセロールとの（ポリ）アルコキシ化エステル、特に、脂肪酸とヘキソール、例えばソルビトールもしくはマンニトールとの（ポリ）アルコキシ化エステル、または脂肪酸とヘキソール無水物、例えばソルビタンもしくはマンニタンとの（ポリ）アルコキシ化エステルであって、１〜４０の平均エトキシ化度（１〜４０のＥＯ数とも言う）、好ましくは５〜２０の平均エトキシ化度を有するものを言う。
【００２２】
本発明の関連において、「脂肪酸とポリオールとのエステル」の用語は、ポリオールの脂肪酸モノエステル、またはポリオールの脂肪酸ポリエステル、例えばポリオールの脂肪酸ジエステルもしくはポリオールの脂肪酸トリエステルを意味する。前記エステルの（ポリ）アルコキシ化誘導体についても、同様に同じことが言える。
【００２３】
本発明の関連において、「脂肪アルコールとポリオールとのエーテル」の用語は、脂肪アルコールとポリオールとのモノエーテル、または脂肪アルコールとポリオールとのポリエーテル、例えば、脂肪アルコールとポリオールとのジエステル、または脂肪アルコールとポリオールとのトリエーテルを意味する。前記エーテルの（ポリ）アルコキシ化誘導体についても、同様に同じことが言える。
【００２４】
本発明の主題は、特に、前記修飾された脂肪物質が、脂肪酸とポリオールのエステルの（ポリ）エトキシ化誘導体、または脂肪アルコールとポリオールのエステルの（ポリ）エトキシ化誘導体、特に、脂肪酸とグリセロールまたはヘキソール、例えばソルビトールまたはマンニトールとの（ポリ）エトキシ化エステル、または脂肪酸とヘキソール無水物、たとえばソルビタンもしくはマンニタンとの（ポリ）エトキシ化エステルであって、５〜１０の平均エトキシ化度（５〜１０のＥＯ数とも言う）を有するものを言う。
【００２５】
上記の修飾された脂肪物質を調製するのに適した脂肪酸には、平均１２〜２２の炭素原子を含むもの、例えば１６〜１８の炭素原子を含むもの、例えばオレイン酸、リシノール酸、ヒドロキシステアリン酸、またはイソステアリン酸、有利には２０℃において液体である脂肪酸が含まれる。上記で定義した組成物は、特に、オレイン酸から誘導された上記の１以上の修飾された脂肪物質を含んでいる。
【００２６】
本発明のもう一つの側面に従えば、脂肪相中に存在する前記表面活性剤または表面活性剤の混合物は、実質的に、マンニタンエステル、ソルビタンエステル、（ポリ）アルコキシ化マンニタンエステル、および（ポリ）アルコキシ化ソルビタンエステルから選択される１以上のエステルからなっている。特に、脂肪相中に存在する表面活性剤は、オレイン酸マンニタンおよび（ポリ）エトキシ化マンニタンの混合物、オレイン酸ソルビタンおよびオレイン酸（ポリ）エトキシ化ソルビタンの混合物、オレイン酸ソルビタンおよび（ポリ）エトキシ化マンニタンの混合物、またはオレイン酸マンニタンおよび（ポリ）エトキシ化ソルビタンの混合物からなり、前記混合物は３以上かつ８未満の全体のＨＬＢ値を有している。
【００２７】
本発明のもう一つの特別な側面に従えば、脂肪相中に存在する表面活性剤または表面活性剤の混合物は、レシチン、例えば大豆レシチン、卵レシチン、水素化レシチン、リン脂質およびスフィンゴ脂質から選択される１以上の化合物から実質的になっている。
【００２８】
上記で定義した組成物は、その重量１００％当り、一般には５０重量％の水相を含んでおり、該水相は、注射すべき親水性の活性成分を補充した水または生体利用可能な水性溶媒、例えばリン酸緩衝液で緩衝された水からなっている。
【００２９】
好ましくは、先に定義した組成物は、治癒的治療方法に使用される。このような注射製剤のために適した親水性の活性成分には、例えば、水溶性の抗癌活性成分、ホルモン、抗生物質、抗ウイルス剤、鎮痛活性剤、血管拡張剤、抗糖尿病活性剤、麻酔薬、鎮静剤、造影剤、免疫調節剤、抗血友病因子、神経遮断剤、栄養学低活性剤、ステロイド、血栓溶解剤、および生物医薬活性剤、例えば組換えタンパク質が含まれる。
【００３０】
もう一つの側面に従えば、本発明の主題は、先に定義した組成物を調製するための方法であって：
・親水性成分を、水または薬理学的に許容可能な水性溶媒中に溶解させる工程（ａ）と；
・工程（ａ）で調製された水相を、表面活性剤または表面活性剤の混合物を含有する脂肪相と混合する工程（ｂ）
を含んでなることを特徴とする方法である。
【００３１】
最後の側面に従えば、本発明の主題は、ヒトまたは動物の身体における活性成分の持続放出のための方法であって、前記活性成分が、先に定義した油中水エマルジョンの形態で注射によって投与されることを特徴とする方法である。
【実施例】
【００３２】
以下の例は、本発明を例示するものであるが、本発明を限定するものではない
実施例１ - カフェインＷ／Ｏエマルジョンの調製
カフェインを、生理学的水の中に所望の濃度、特に１ｍｇ／ｍＬ、より一般的には０．１〜１０ｍｇ／ｍＬで予め溶解し、必要な量の油および必要な表面活性剤を均一な混合物が得られるまで撹拌する。
【００３３】
記載する全ての例において、脂肪相（油プラス表面活性剤）とカフェイン水溶液の比率は、７０重量％の脂肪相および３０重量％の水相に維持する。エマルジョンを調製するために、水相を油相の中に投入し、該混合物を、ＳｉｌｖｅｒｓｏｎTM・Ｌ４Ｒ型の実験室用回転固定子スターラーを使用して３分間撹拌する。親水性活性成分としてのカフェイン、および以下の表に示す成分を用いて、Ｗ／Ｏエマルジョンの６つのサンプルを調製した。
【００３４】
使用した表面活性剤の混合物は、以下の表に示したそれらの物理化学的明細によって特徴付けられる。
【表１】
【００３５】
得られたカフェインエマルジョンは以下の特性を有している。
【表２】
【００３６】
実施例２ - 活性成分の持続放出能力に関するエマルジョンのインビトロ評価
評価すべきエマルジョンのサンプルは、ＥｒｗｅｋａTM・ＤＴ６００溶解機の容器に収容された「受け」水相上に堆積させる；全体を混合し、そこから受け相の中に放出された活性剤を検定するために、この相のサンプルを規則的に採取する（ｔ＝０、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間）。得られた結果を、放出されたカフェインのパーセンテージで下記の表に示す：
【表３】
【００３７】
実施例３ - 活性成分の持続放出能力に関する、本発明に従うエマルジョンのインビボ評価
カフェインの薬物動態学を、エマルジョンＮｏ．１およびＮｏ．２の皮下注射、生理学的カフェイン溶液の皮下注射（ＳＣ溶液）および生理学的カフェイン溶液の静脈注射（ＩＶ溶液）によって、４匹の動物からなる４群で評価した。これらの４群について、注射されたカフェインの投与量は４０ｍｇ／ｋｇラットである。
【００３８】
血液中のカフェイン濃度（μｇ／ｍＬの血液）を周期的に決定し、以下の結果が得られる。
【表４】
【００３９】
これらの結果は、以下の薬物動態学的データを与える。
【表５】
【００４０】
ＡＵＣ：曲線下の面積、即ち、Ｘ軸上に時間（時で）を取り、Ｙ軸上に血液中の濃度をμｇ／ｍＬで取ることによりプロットした曲線下の面積の測定
この結果は、同じ方法で注射された水溶液と比較したときに、カフェインは血液中に徐々に通過する一方、曲線下の面積は、静脈注射に対応するものと同等に維持されることを示している。
【００４１】
エマルジョン形態中のカフェインの吸収相は３倍遅く、最大血漿濃度に達する時間は１時間遅れる。本発明のエマルジョンを用いて得られる最大血漿濃度は、カフェイン溶液を用いて得られるよりも２０％〜３５％低い。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトまたは動物の身体内に注射し得る油中水（Ｗ／Ｏ）型のエマルジョン形態で脂肪相（Ｏ）および水相（Ｗ）を含み、前記水相（Ｗ）は少なくとも一つの医薬的または獣医学的な水溶性の活性成分を含んでなる、ヒトまたは動物の身体に対して治療方法を実施するための組成物であって：前記脂肪相（Ｏ）は、ソルビトールもしくはマンニトールの脂肪酸エステル、またはソルビタンもしくはマンニタンの脂肪酸エステル、（ポリ）アルコキシ化脂肪酸トリグリセリド、脂肪酸の（ポリ）アルコキシ化ポリグリセロールエステルから選択される全体のＨＬＢ値が３〜８の間である１以上の表面活性剤を含んでなり、また前記組成物は、速度３０ｒｍｐまたは６０ｒｐｍで回転するＮｏ．２スピンドルを備えたブルックフィールドＬＶＴ粘度計を使用して、直径約７ｃｍの２５０ｃｍ３のビーカー中において２５℃で測定した２００ｍＰａｓ以下の粘度を有することを特徴とする組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の組成物であって、前記脂肪相（Ｏ）は、白色鉱油、液体流動パラフィン、スクワラン、スクワレン、オレイン酸エチル、およびこれら油の混合物から選択される組成物。
【請求項３】
請求項１または２に記載の組成物であって、前記脂肪相（Ｏ）は、その重量１００％当たり１〜１５重量％、好ましくは３〜１０重量％の表面活性剤を含んでなる組成物。
【請求項４】
請求項３に記載の組成物であって、前記表面活性剤は、脂肪酸とポリオールとのエステル、特に脂肪酸とグリセロール、ソルビトールもしくはマンニトールとの（ポリ）アルコキシ化エステル、または脂肪酸とソルビタンもしくはマンニタンとの（ポリ）アルコキシ化エステルから選択され、平均エトキシ化度が１〜４０、好ましくは５〜１０である組成物。
【請求項５】
請求項４に記載の組成物であって、前記表面活性剤は、オレイン酸マンニタンとオレイン酸ポリエトキシ化マンニタンの混合物、オレイン酸ソルビタンとオレイン酸（ポリ）エトキシ化ソルビタンの混合物、オレイン酸ソルビタンとオレイン酸ポリエトキシ化マンニタンの混合物、またはオレイン酸マンニタンとオレイン酸（ポリ）エトキシ化ソルビタンとの混合物から選択され、前記混合物は３以上８未満の全体のＨＬＢ値を有する組成物。
【請求項６】
請求項３に記載の組成物であって、前記方面活性剤はレシチン、例えば大豆レシチンもしくは卵レシチン、水素化レシチン、リン脂質およびスフィンゴ脂質から選択される組成物。
【請求項７】
請求項１〜６の何れか１項に記載の組成物であって、その重量１００％当たり、少なくとも３０重量％の水相を含んでなる組成物。
【請求項８】
請求項１〜７の何れか１項に記載の組成物であって、前記水溶性活性成分が抗癌活性成分、ホルモン、免疫調節剤、抗血友病因子、神経遮断剤、栄養学的活性剤、ステロイド、血栓溶解剤、医薬活性剤、例えば組換えタンパク質から選択されることを特徴とする組成物。
【請求項９】
請求項１〜８の何れか１項に記載の組成物を調製するための方法であって：
前記親水性成分を、水または医薬的に許容可能な水性溶媒中に溶解させる工程（ａ）と；
工程（ａ）で調整した前記水相を、表面活性剤もしくは表面活性剤の混合物を含有する脂肪相と混合する工程（ｂ）
の連続的工程を含んでなることを特徴とする方法。
【請求項１】
ヒトまたは動物の身体内に注射し得る油中水（Ｗ／Ｏ）型のエマルジョン形態で脂肪相（Ｏ）および水相（Ｗ）を含み、前記水相（Ｗ）は少なくとも一つの医薬的または獣医学的な水溶性の活性成分を含んでなる、ヒトまたは動物の身体に対して治療方法を実施するための組成物であって：前記脂肪相（Ｏ）は、ソルビトールもしくはマンニトールの脂肪酸エステル、またはソルビタンもしくはマンニタンの脂肪酸エステル、（ポリ）アルコキシ化脂肪酸トリグリセリド、脂肪酸の（ポリ）アルコキシ化ポリグリセロールエステルから選択される全体のＨＬＢ値が３〜８の間である１以上の表面活性剤を含んでなり、また前記組成物は、速度３０ｒｍｐまたは６０ｒｐｍで回転するＮｏ．２スピンドルを備えたブルックフィールドＬＶＴ粘度計を使用して、直径約７ｃｍの２５０ｃｍ３のビーカー中において２５℃で測定した２００ｍＰａｓ以下の粘度を有することを特徴とする組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の組成物であって、前記脂肪相（Ｏ）は、白色鉱油、液体流動パラフィン、スクワラン、スクワレン、オレイン酸エチル、およびこれら油の混合物から選択される組成物。
【請求項３】
請求項１または２に記載の組成物であって、前記脂肪相（Ｏ）は、その重量１００％当たり１〜１５重量％、好ましくは３〜１０重量％の表面活性剤を含んでなる組成物。
【請求項４】
請求項３に記載の組成物であって、前記表面活性剤は、脂肪酸とポリオールとのエステル、特に脂肪酸とグリセロール、ソルビトールもしくはマンニトールとの（ポリ）アルコキシ化エステル、または脂肪酸とソルビタンもしくはマンニタンとの（ポリ）アルコキシ化エステルから選択され、平均エトキシ化度が１〜４０、好ましくは５〜１０である組成物。
【請求項５】
請求項４に記載の組成物であって、前記表面活性剤は、オレイン酸マンニタンとオレイン酸ポリエトキシ化マンニタンの混合物、オレイン酸ソルビタンとオレイン酸（ポリ）エトキシ化ソルビタンの混合物、オレイン酸ソルビタンとオレイン酸ポリエトキシ化マンニタンの混合物、またはオレイン酸マンニタンとオレイン酸（ポリ）エトキシ化ソルビタンとの混合物から選択され、前記混合物は３以上８未満の全体のＨＬＢ値を有する組成物。
【請求項６】
請求項３に記載の組成物であって、前記方面活性剤はレシチン、例えば大豆レシチンもしくは卵レシチン、水素化レシチン、リン脂質およびスフィンゴ脂質から選択される組成物。
【請求項７】
請求項１〜６の何れか１項に記載の組成物であって、その重量１００％当たり、少なくとも３０重量％の水相を含んでなる組成物。
【請求項８】
請求項１〜７の何れか１項に記載の組成物であって、前記水溶性活性成分が抗癌活性成分、ホルモン、免疫調節剤、抗血友病因子、神経遮断剤、栄養学的活性剤、ステロイド、血栓溶解剤、医薬活性剤、例えば組換えタンパク質から選択されることを特徴とする組成物。
【請求項９】
請求項１〜８の何れか１項に記載の組成物を調製するための方法であって：
前記親水性成分を、水または医薬的に許容可能な水性溶媒中に溶解させる工程（ａ）と；
工程（ａ）で調整した前記水相を、表面活性剤もしくは表面活性剤の混合物を含有する脂肪相と混合する工程（ｂ）
の連続的工程を含んでなることを特徴とする方法。
【公表番号】特表２００９−５４２７８２（Ｐ２００９−５４２７８２Ａ）
【公表日】平成２１年１２月３日（２００９．１２．３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５１８９３０（Ｐ２００９−５１８９３０）
【出願日】平成１９年７月３日（２００７．７．３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＦＲ２００７／０５１５８４
【国際公開番号】ＷＯ２００８／００７００１
【国際公開日】平成２０年１月１７日（２００８．１．１７）
【出願人】（３９８０５７２９３）ソシエテ・デクスプロワタシオン・デ・プロデュイ・プール・レ・アンデュストリー・シミック・セピック (27)
【氏名又は名称原語表記】ＳＯＣＩＥＴＥ Ｄ’ＥＸＰＬＯＩＴＡＴＩＯＮ ＤＥ ＰＲＯＤＵＩＴＳ ＰＯＵＲ ＬＥＳ ＩＮＤＵＳＴＲＩＥＳ ＣＨＩＭＩＱＵＥＳ ＳＥＰＰＩＣ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年１２月３日（２００９．１２．３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年７月３日（２００７．７．３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＦＲ２００７／０５１５８４
【国際公開番号】ＷＯ２００８／００７００１
【国際公開日】平成２０年１月１７日（２００８．１．１７）
【出願人】（３９８０５７２９３）ソシエテ・デクスプロワタシオン・デ・プロデュイ・プール・レ・アンデュストリー・シミック・セピック (27)
【氏名又は名称原語表記】ＳＯＣＩＥＴＥ Ｄ’ＥＸＰＬＯＩＴＡＴＩＯＮ ＤＥ ＰＲＯＤＵＩＴＳ ＰＯＵＲ ＬＥＳ ＩＮＤＵＳＴＲＩＥＳ ＣＨＩＭＩＱＵＥＳ ＳＥＰＰＩＣ
【Ｆターム（参考）】
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