神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷の治療方法または予防の方法あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織の修復方法
被験体における、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法は、そのような治療を必要とする被験体に、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴを含むペプチド剤、その保存的変異体あるいはその組織においてＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴペプチドまたはその保存的変異体の産生を刺激するペプチド剤を含む組成物の有効量を投与する工程を含む。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の背景
関連出願の相互参照
本出願は、２００５年１月１３日に出願された米国仮出願第６０／６４３，３０７号の利益を主張する。
【０００２】
発明の分野
本発明は、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による、組織の変敗、傷害または損傷の治療または予防あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織の修復の分野に関する。
【背景技術】
【０００３】
背景技術の説明
神経変性疾患、筋変性疾患および神経筋変性疾患は、被験体の記憶、脳機能、筋機能および他の生理学的機能を破壊しうる消耗性疾患である。このような疾患は、遺伝性であるか、または被験体が環境や汚染された食料などの因子に曝露されることによって生じうる。このような疾患としては、アルツハイマー病、多発性硬化症（ＭＳ）、ルー・ゲーリッグ病（筋萎縮性側索硬化症（ａｍｙｔｒｏｐｈｉｃ ｌａｔｅｒａｌ ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）またはＡＬＳ）、パーキンソン病、骨髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）、重症筋無力症、自閉症、筋ジストロフィ、ウシ海綿状脳症（ＢＳＥ）を含む伝達性海綿状脳症（ＴＳＥ）などを挙げることができる。
【０００４】
筋ジストロフィは、進行性の筋肉消耗および筋肉における微視的変化から始まる衰弱を特徴とする遺伝性障害である。筋肉が時間とともに変質するにつれて、その患者の筋肉の強度は低下していく。
【０００５】
デュシェンヌ型筋ジストロフィ（ＤＭＤ）は、筋肉の拡張を特徴とする筋ジストロフィの群の１つである。ＤＭＤは、筋ジストロフィの最も一般的なタイプの１つであり、幼年期に起こる、急速に進行する筋肉変性を特徴とする。そのすべてがＸ染色体連鎖であり、主に男性が罹患し、世界中で３５００人に１人の男児が罹患すると推定されている。
【０００６】
Ｘ染色体上に見られる、ＤＭＤについての遺伝子は、大型タンパク質であるジストロフィンをコードする。ジストロフィンは、構造的に支えるために筋細胞の内側に必要であり、内部の細胞骨格の要素を表面膜に固定することによって筋細胞を強化すると考えられている。これがないと細胞膜は透過性になるので、細胞外の成分が細胞に流入し、筋細胞が「破裂」して死滅するまで内圧が増大する。それに続く免疫応答がその損傷に加わり得る。
【０００７】
ベッカー型筋ジストロフィ（ＢＭＤ）は、ＤＭＤの軽度のものである。その発症は、通常１０代であるか、または成人期の初期であり、その経過は遅く、ＤＭＤの場合よりも予測が困難である。
【０００８】
米国では、８４，０００人超の患者が変性筋ジストロフィ疾患に罹患している。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法が当該分野で未だ必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
発明の概要
１つの態様によれば、被験体における、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法は、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による前記組織の変敗、傷害または損傷を阻害するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するために、そのような治療を必要とする被験体に、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴまたはＬＫＫＴＮＴ、その保存的変異体（ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ ｖａｒｉａｎｔ）あるいは前記組織においてＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴペプチドまたはその保存的変異体の産生を刺激する刺激剤を含むペプチド剤を含む組成物の有効量を投与する工程を含む。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
発明の詳細な説明
任意の特定の理論に見られることなく、サイモシンベータ４（Ｔβ４またはＴＢ４）などのアクチン隔離ペプチドおよびアミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴまたはその保存的変異体を含むアクチン隔離ペプチドまたはペプチドフラグメントを含む他の薬剤は、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷の回復または予防を促進する。
【００１２】
サイモシンベータ４は、インビトロにおける内皮細胞の遊走および分化の間にアップレギュレートされるタンパク質として当初は同定された。サイモシンベータ４は、最初に胸腺から単離され、種々の組織で同定されている、４３アミノ酸、４．９ｋＤａの遍在性ポリペプチドである。内皮細胞の分化および遊走、Ｔ細胞の分化、アクチンの隔離、血管新生ならびに創傷治癒における役割を含むいくつかの役割がこのタンパク質の役割とされている。
【００１３】
本発明を適用することができる神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患としては、アルツハイマー病、多発性硬化症、ルー・ゲーリッグ病、パーキンソン病、骨髄性筋萎縮症、重症筋無力症、自閉症、筋ジストロフィ（ＤＭＤおよびＢＭＤを含む）、ＢＳＥを含む伝達性海綿状脳症（ＴＳＥ）などが挙げられるが、これらに限定されない。このような疾患は、炎症性障害に関連しうる。従って、本発明は、炎症に関連した、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患に特に適用することができる。１つの実施形態によれば、本発明は、筋ジストロフィ以外の神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患に適用することができる。
【００１４】
１つの実施形態によれば、本発明は、被験体における、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法であり、そのような治療を必要とする被験体に、ペプチド剤を含む組成物の有効量を投与する工程を含む方法である。そのペプチド剤は、神経変性疾患、筋変性疾患および／または神経筋変性疾患を阻害する活性を有する、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴまたはその保存的変異体を含むポリペプチドであってもよく、好ましくはＫＬＫＫＴＥＴ、ＬＫＫＴＥＴＱ、Ｔβ４のＮ末端変異体、Ｔβ４のＣ末端変異体およびＴβ４のアンタゴニストを含むサイモシンβ４および／またはＴβ４アイソフォーム、類似体もしくは誘導
体を含む。本発明はまた、酸化Ｔβ４を利用してもよい。他の実施形態によれば、抗菌剤は、サイモシンベータ４以外であるか、または酸化Ｔβ４である。
【００１５】
本発明に従って使用されうる組成物としては、ペプチド剤、例えば、サイモシンβ４（Ｔβ４）および／またはＴβ４アイソフォーム、類似体もしくは誘導体（酸化Ｔβ４、Ｔβ４のＮ末端変異体、Ｔβ４のＣ末端変異体およびＴβ４のアンタゴニストを含む）、神経変性疾患、筋変性疾患および／もしくは神経筋変性疾患を阻害する活性を有する、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴまたはその保存的変異体を含むか、または本質的にそれらからなる、ポリペプチドまたはペプチドフラグメントが挙げられる。本明細書中に参考として援用される、国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９９／１７２８２は、本発明に従って有用であり得るＴβ４のアイソフォームならびに本発明とともに利用され得るアミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴおよびその保存的変異体を開示する。本明細書中に参考として援用される、国際出願番号ＰＣＴ／ＧＢ９９／００８３３（ＷＯ９９／４９８８３）は、本発明に従って使用され得る酸化サイモシンβ４を開示する。以降、主にＴβ４およびＴβ４アイソフォームに関して本発明を説明していくが、以下の説明が、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴ、神経変性疾患、筋変性疾患および／もしくは神経筋変性疾患を阻害する活性を有する、ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴ、それらの保存的変異体を含むか、または本質的にそれらからなるペプチドおよびフラグメントおよび／またはＴβ４アイソフォーム、類似体もしくは誘導体（Ｔβ４のＮ末端変異体、Ｔβ４のＣ末端変異体およびＴβ４のアンタゴニストを含む）に等しく適用することができると意図されると理解されるべきである。本発明はまた、酸化Ｔβ４を使用してもよい。
【００１６】
１つの実施形態において、本発明は、被験体において、筋ジストロフィ以外の神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法を提供する。この方法は、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による前記組織の変敗、傷害または損傷を阻害するか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するために、そのような治療を必要とする被験体に、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴ、その保存的変異体または前記組織においてＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴペプチドまたはその保存的変異体の産生を刺激する刺激剤を含むペプチド剤を含む組成物の有効量を投与する工程を含む。別の実施形態において、この疾患は、デュシェンヌ型筋ジストロフィ以外である。
【００１７】
別の実施形態において、本発明は、被験体において、筋ジストロフィを含む疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法を提供する。この方法は、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を阻害するか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するために、そのような治療を必要とする被験体に、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴまたはＬＫＫＴＮＴ、その保存的変異体あるいは前記組織においてＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴペプチドまたはその保存的変異体の産生を刺激する刺激剤を含むＴＢ４以外のペプチド剤を含む組成物の有効量を投与する工程を含む。
【００１８】
１つの実施形態において、本発明は、組織と本明細書中に説明されるようなペプチド剤を含む組成物の有効量とを接触させることによって、被験体において、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法を提供する。非限定的な実施例として、その組織は、前記被験体の神経組織および／または筋組織から選択され得る。接触は、直接的であってもよく、全身的であってもよい。直接投与の例としては、例えば、本明細書中に説明されるようなペプチド剤を含む、
溶液、ローション、軟膏、ゲル、クリーム、ペースト、噴霧液、懸濁液、分散液、ヒドロゲル、軟膏剤または油剤とを組織と直接適用または吸入によって接触されることである。全身性投与としては、例えば、注射用水などの薬学的に許容可能な担体中の本明細書中に説明されるようなペプチド剤を含む組成物の静脈内、腹腔内、筋肉内注射が挙げられる。
【００１９】
本明細書中に説明されるような、本発明における用途のためのペプチド剤は、任意の有効量で投与されてもよい。例えば、本明細書中に説明されるようなペプチド剤は、約０．０００１〜１，０００，０００マイクログラムの範囲内の用量、より好ましくは、約０．１〜５，０００マイクログラムの範囲内の量、最も好ましくは、約１〜３０マイクログラムの範囲内で投与されてもよい。
【００２０】
本発明による組成物は、投与日の１日あたり単回適用または複数回適用（投与日の１日あたり２、３、４または４回以上の適用）で毎日、１日おき、１週間おき、１ヶ月おきなどで投与してもよい。
【００２１】
多くのＴβ４アイソフォームは、同定されており、Ｔβ４の既知のアミノ酸配列に対して約７０％または約７５％または約８０％以上の相同性を有する。このようなアイソフォームとしては、例えば、Ｔβ４ａｌａ、Ｔβ９、Ｔβ１０、Ｔβ１１、Ｔβ１２、Ｔβ１３、Ｔβ１４およびＴβ１５が挙げられる。Ｔβ４と同様に、Ｔβ１０およびＴβ１５アイソフォームは、アクチンを隔離することが示されている。Ｔβ４、Ｔβ１０およびＴβ１５ならびにこれらの他のアイソフォームは、アクチンの隔離または結合の媒介に関連すると見られる、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴを共有する。特定の任意の理論に制約されることを望まれるわけではないが、本明細書中に説明されるようなペプチド剤の活性は、そのような薬剤の抗炎症性活性に少なくとも部分的に起因し得る。また、Ｔβ４は、アクチン重合を調節することができる（例えば、β−サイモシンは、遊離Ｇアクチンを隔離することによってＦアクチンを脱重合すると見られる）。アクチン重合を調節するＴβ４の能力は、ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴ配列を介してアクチンに結合するか、または隔離する能力に起因しうる。従って、Ｔβ４と同様に、抗炎症性であり、アクチンを結合または隔離するか、あるいはアミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴを有するＴβ４アイソフォームを含むアクチン重合を調節する他のタンパク質は、本明細書中で説明されるように、単独か、またはＴβ４と組み合わせて効果的である可能性がある。
【００２２】
本明細書中に説明されるようなペプチド剤は、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（Ｐ１３−Ｋ）／Ａｋｔ（タンパク質キナーゼβ）経路などの代謝性酵素およびシグナル伝達酵素をアップレギュレートすることによって、脳ならびに他の神経血管細胞および組織のアポトーシス性の死（ａｐｏｐｔｉｃ ｄｅａｔｈ）を予防および／または制限することができる。Ｐ１３−Ｋ）／Ａｋｔおよび下流のリン酸化ＢａｄおよびプロリンリッチＡｋｔ生存キナーゼをアップレギュレートすることによって、神経細胞が保護される。さらに、ＩＬ−１８などの炎症性サイトカインおよびＩＬ−８などのケモカインおよび酵素（例えば、カスパーゼ（ｃａｓｐａｃｅ）２、３、８および９）をダウンレギュレートする能力のおかげでＴβ４およびＴβ４アイソフォームまたはＴβ４の酸化型などの本明細書中に説明されるようなペプチド剤は、神経細胞を保護し、神経組織の治癒を促進する。
【００２３】
本明細書中に説明されるようなペプチド剤は、炎症性ケモカイン、サイトカインおよびカスパーゼ（ｃａｐａｓｅ）活性を減少することができる。
【００２４】
本明細書中に説明されるようなペプチド剤は、グルタミン酸が誘導する神経毒性を予防することによって脳および脊髄における神経毒性を予防することができる。興奮性神経伝
達物質であるグルタミン酸の損傷した脳および神経組織からの制御されない放出は、細胞におけるミトコンドリアの機能不全およびエネルギー機構の主な媒介物であり、これによって、いくつかの炎症性応答、栄養性シグナルを変化させる機械的ストレスおよび罹患した神経細胞および組織の死がもたらされる。
【００２５】
従って、Ｔβ４ａｌａ、Ｔβ９、Ｔβ１０、Ｔβ１１、Ｔβ１２、Ｔβ１３、Ｔβ１４およびＴβ１５などのＴβ４アイソフォームならびに未同定のＴβ４アイソフォームを含む、本明細書中に説明されるような既知のＬＫＫＴＥＴペプチドまたはＬＫＫＴＮＴペプチドは、本発明の方法において有用となることが特に企図される。同様に、Ｔβ４アイソフォームを含む、本明細書中に説明されるようなＬＫＫＴＥＴペプチドまたはＬＫＫＴＮＴペプチドは、被験体において実施される方法を含む本発明の方法において有用である。従って、本発明は、Ｔβ４ならびにＴβ４アイソフォームである、Ｔβ４ａｌａ、Ｔβ９、Ｔβ１０、Ｔβ１１、Ｔβ１２、Ｔβ１３、Ｔβ１４およびＴβ１５ならびに医薬的に許容可能な担体を含む、本明細書中に説明されるようなＬＫＫＴＥＴペプチドまたはＬＫＫＴＮＴペプチドを含む医薬組成物をさらに提供する。
【００２６】
さらに、適切な隔離、結合、可動化または重合アッセイにおいて証明されるか、あるいは例えば、ＬＫＫＴＥＴまたはＬＫＫＴＮＴなどのアクチン結合を調節するアミノ酸配列の存在によって同定されるように、抗炎症性活性および／もしくはアクチン隔離能力もしくはアクチン結合能力を有するか、またはアクチンを可動化することができるか、またはアクチン重合を調節することができる他の薬剤またはタンパク質は、同様に本発明の方法において使用され得る。このようなタンパク質としては、例えば、ゲルゾリン、ビタミンＤ結合タンパク質（ＤＢＰ）、プロフィリン、コフィリン、デパクチン（ｄｅｐａｃｔｉｎ）、ディナセル（Ｄｎａｓｅｌ）、ビリン（ｖｉｌｉｎ）、フラグミン、セバリン、キャッピングタンパク質、β−アクチニンおよびアキュメンチンを挙げることができる。このような方法が、被験体において実施される方法を含むので、本発明は、本明細書中で説明されるような、ゲルゾリン、ビタミンＤ結合タンパク質（ＤＢＰ）、プロフィリン、コフィリン、デパクチン、ディナセル（Ｄｎａｓｅｌ）、ビリン、フラグミン、セバリン、キャッピングタンパク質、β−アクチニンおよびアキュメンチンを含む医薬組成物をさらに提供する。従って、本発明は、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴまたはＬＫＫＴＮＴおよびそれらの保存的変異体を含むポリペプチドの使用を含む。
【００２７】
本明細書中で使用されるとき、用語「保存的変異体」またはその文法上の変化形は、アミノ酸残基が、別の生物学的に類似した残基によって置換されていることを示す。保存的改変の例としては、イソロイシン、バリン、ロイシンまたはメチオニンなどの疎水性残基の別の残基への置換、極性残基の別の残基への置換（例えば、アルギニンからリシンへの置換、グルタミン酸からアスパラギン酸への置換またはグルタミンからアスパラギンへの置換）などが挙げられる。
【００２８】
Ｔβ４は、多くの組織および細胞タイプに局在するので、Ｔβ４などのＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴペプチドの産生を刺激する薬剤または本明細書中に説明されるような別のペプチド剤は、組織および／または細胞からのペプチド剤の産生に影響を及ぼす組成物に加えられるか、あるいはそれを含んでもよい。このような刺激剤としては、インスリン様成長因子（ＩＧＦ−１）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）、トランスフォーミング成長因子ベータ（ＴＧＦ−β）、塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）、サイモシンα１（Ｔα１）および血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）などの成長因子のファミリーのメンバーを挙げることができる。より好ましくは、刺激剤は、トランスフォーミング成長因子ベータ（ＴＧＦ−β）またはＴＧＦ−βスーパーファミリーの他のメンバーである。
【００２９】
１つの実施形態によれば、被験体は、本明細書中に説明されるようなペプチド剤の被験体における産生を刺激する刺激剤で治療される。
【００３０】
そのうえ、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷の低減あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織の修復を助ける他の薬剤を、本明細書中に説明されるようなペプチド剤とともに組成物に加えてもよい。限定する目的ではないが、例えば、本明細書中に説明されるようなペプチド剤の単独または併用に、有効量の以下の薬剤：抗生物質、ＶＥＧＦ、ＫＧＦ、ＦＧＦ、ＰＤＧＦ、ＴＧＦβ、ＩＧＦ−１、ＩＧＦ−２、ＩＬ−１、プロサイモシンαおよび／またはサイモシンα１のうちの任意の１つ以上と組み合わせて加えてもよい。
【００３１】
本発明はまた、医薬的に許容可能な担体中に本明細書中に説明されるようなペプチド剤の治療有効量を含む医薬組成物を含む。
【００３２】
治療を提供する実際の用量または試薬、処方物または組成物は、被験体の大きさおよび健康状態を含む多くの因子に依存し得る。しかしながら、当業者は、使用するのに適切な用量を決定するために、ＰＣＴ／ＵＳ９９／１７２８２、前出および本明細書中に引用される参考文献に開示されるような臨床上の用量を決定するための方法および技術を記載する教示を使用することができる。
【００３３】
適当な処方物は、本明細書中に説明されるようなペプチド剤を約０．００１〜５０重量％の範囲内、より好ましくは約０．０１〜０．１重量％、最も好ましくは約０．０５重量％の濃度で含んでもよい。
【００３４】
本明細書中に説明される治療的アプローチは、被験体への任意の従来の投与技術（例えば、これらに限定されないが、直接投与、局所注射、吸入または全身投与）を含む、本明細書中に説明されるようなペプチド剤の様々な投与の経路または送達を含む。本明細書中に説明されるようなペプチド剤を使用するか、またはそれらを含む方法および組成物は、医薬的に許容可能な無毒の賦形剤または担体と混合することによって医薬組成物に処方されてもよい。
【００３５】
本発明は、本明細書中に説明されるようなペプチド剤と相互作用するか、それを促進するか、または阻害する抗体の使用を含む。様々なエピトープの特異性を有する貯蔵されたモノクローナル抗体ならびに異なるモノクローナル抗体調製物から実質的になる抗体が提供される。モノクローナル抗体は、ＰＣＴ／ＵＳ９９／１７２８２、前出に開示されているような当業者に周知の方法によってタンパク質のフラグメントを含む抗原から製造される。本発明において使用されるとき、用語抗体は、モノクローナル抗体およびポリクローナル抗体を含むと意味される。
【００３６】
なおも別の実施形態において、本発明は、遺伝子発現を調節する有効量の刺激剤を投与することによって被験体を治療する方法を提供する。用語「調節する」とは、本明細書中に説明されるようなペプチド剤が過剰発現される場合の発現の阻害または抑制および本明細書中に説明されるようなペプチド剤が過小発現される場合の発現の誘導のことをいう。用語「有効量」とは、本明細書中に説明されるようなペプチド剤の遺伝子発現を調節するのに有効であり、その結果、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷の症状を低減するか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復する、刺激剤の量を意味する。本明細書中に説明されるようなペプチド剤の遺伝子発現を調節する刺激剤は、例えば、ポリヌクレオチドであってもよい。そのポリヌクレオチドは、アンチセンス、３重鎖またはリボザイムであってもよい。例えば、本明細書中に説明されるようなペプチド剤の構造遺伝子領域またはプロモーター領域に特異的であ
るアンチセンスを利用してもよい。本明細書中に説明されるようなペプチド剤の遺伝子発現を調節する刺激剤はまた、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）であってもよい。
【００３７】
別の実施形態において、本発明は、本明細書中に説明されるようなペプチド剤の活性を調節する化合物を利用するための方法を提供する。本明細書中に説明されるようなペプチド剤の活性に影響を及ぼす化合物（例えば、アンタゴニストおよびアゴニスト）としては、ペプチド、ペプチド模倣物、ポリペプチド、化合物、亜鉛などのミネラルおよび生物学的薬剤が挙げられる。
【００３８】
本明細書中に説明されるような刺激剤についてスクリーニングする方法は、神経変性疾患、筋変性疾患および／または神経筋変性疾患を示す組織と候補化合物とを接触させる工程；およびＬＫＫＴＥＴまたはＬＫＫＴＮＴペプチドの前記組織における活性を測定する工程を含み、ここで、前記候補化合物を有しない対応する組織における前記ペプチドの活性のレベルと比較して前記組織における前記ペプチドの活性が増加しているとき、前記化合物が前記刺激剤を誘導することができると示唆される。
【技術分野】
【０００１】
発明の背景
関連出願の相互参照
本出願は、２００５年１月１３日に出願された米国仮出願第６０／６４３，３０７号の利益を主張する。
【０００２】
発明の分野
本発明は、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による、組織の変敗、傷害または損傷の治療または予防あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織の修復の分野に関する。
【背景技術】
【０００３】
背景技術の説明
神経変性疾患、筋変性疾患および神経筋変性疾患は、被験体の記憶、脳機能、筋機能および他の生理学的機能を破壊しうる消耗性疾患である。このような疾患は、遺伝性であるか、または被験体が環境や汚染された食料などの因子に曝露されることによって生じうる。このような疾患としては、アルツハイマー病、多発性硬化症（ＭＳ）、ルー・ゲーリッグ病（筋萎縮性側索硬化症（ａｍｙｔｒｏｐｈｉｃ ｌａｔｅｒａｌ ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）またはＡＬＳ）、パーキンソン病、骨髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）、重症筋無力症、自閉症、筋ジストロフィ、ウシ海綿状脳症（ＢＳＥ）を含む伝達性海綿状脳症（ＴＳＥ）などを挙げることができる。
【０００４】
筋ジストロフィは、進行性の筋肉消耗および筋肉における微視的変化から始まる衰弱を特徴とする遺伝性障害である。筋肉が時間とともに変質するにつれて、その患者の筋肉の強度は低下していく。
【０００５】
デュシェンヌ型筋ジストロフィ（ＤＭＤ）は、筋肉の拡張を特徴とする筋ジストロフィの群の１つである。ＤＭＤは、筋ジストロフィの最も一般的なタイプの１つであり、幼年期に起こる、急速に進行する筋肉変性を特徴とする。そのすべてがＸ染色体連鎖であり、主に男性が罹患し、世界中で３５００人に１人の男児が罹患すると推定されている。
【０００６】
Ｘ染色体上に見られる、ＤＭＤについての遺伝子は、大型タンパク質であるジストロフィンをコードする。ジストロフィンは、構造的に支えるために筋細胞の内側に必要であり、内部の細胞骨格の要素を表面膜に固定することによって筋細胞を強化すると考えられている。これがないと細胞膜は透過性になるので、細胞外の成分が細胞に流入し、筋細胞が「破裂」して死滅するまで内圧が増大する。それに続く免疫応答がその損傷に加わり得る。
【０００７】
ベッカー型筋ジストロフィ（ＢＭＤ）は、ＤＭＤの軽度のものである。その発症は、通常１０代であるか、または成人期の初期であり、その経過は遅く、ＤＭＤの場合よりも予測が困難である。
【０００８】
米国では、８４，０００人超の患者が変性筋ジストロフィ疾患に罹患している。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法が当該分野で未だ必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
発明の概要
１つの態様によれば、被験体における、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法は、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による前記組織の変敗、傷害または損傷を阻害するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するために、そのような治療を必要とする被験体に、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴまたはＬＫＫＴＮＴ、その保存的変異体（ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ ｖａｒｉａｎｔ）あるいは前記組織においてＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴペプチドまたはその保存的変異体の産生を刺激する刺激剤を含むペプチド剤を含む組成物の有効量を投与する工程を含む。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
発明の詳細な説明
任意の特定の理論に見られることなく、サイモシンベータ４（Ｔβ４またはＴＢ４）などのアクチン隔離ペプチドおよびアミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴまたはその保存的変異体を含むアクチン隔離ペプチドまたはペプチドフラグメントを含む他の薬剤は、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷の回復または予防を促進する。
【００１２】
サイモシンベータ４は、インビトロにおける内皮細胞の遊走および分化の間にアップレギュレートされるタンパク質として当初は同定された。サイモシンベータ４は、最初に胸腺から単離され、種々の組織で同定されている、４３アミノ酸、４．９ｋＤａの遍在性ポリペプチドである。内皮細胞の分化および遊走、Ｔ細胞の分化、アクチンの隔離、血管新生ならびに創傷治癒における役割を含むいくつかの役割がこのタンパク質の役割とされている。
【００１３】
本発明を適用することができる神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患としては、アルツハイマー病、多発性硬化症、ルー・ゲーリッグ病、パーキンソン病、骨髄性筋萎縮症、重症筋無力症、自閉症、筋ジストロフィ（ＤＭＤおよびＢＭＤを含む）、ＢＳＥを含む伝達性海綿状脳症（ＴＳＥ）などが挙げられるが、これらに限定されない。このような疾患は、炎症性障害に関連しうる。従って、本発明は、炎症に関連した、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患に特に適用することができる。１つの実施形態によれば、本発明は、筋ジストロフィ以外の神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患に適用することができる。
【００１４】
１つの実施形態によれば、本発明は、被験体における、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法であり、そのような治療を必要とする被験体に、ペプチド剤を含む組成物の有効量を投与する工程を含む方法である。そのペプチド剤は、神経変性疾患、筋変性疾患および／または神経筋変性疾患を阻害する活性を有する、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴまたはその保存的変異体を含むポリペプチドであってもよく、好ましくはＫＬＫＫＴＥＴ、ＬＫＫＴＥＴＱ、Ｔβ４のＮ末端変異体、Ｔβ４のＣ末端変異体およびＴβ４のアンタゴニストを含むサイモシンβ４および／またはＴβ４アイソフォーム、類似体もしくは誘導
体を含む。本発明はまた、酸化Ｔβ４を利用してもよい。他の実施形態によれば、抗菌剤は、サイモシンベータ４以外であるか、または酸化Ｔβ４である。
【００１５】
本発明に従って使用されうる組成物としては、ペプチド剤、例えば、サイモシンβ４（Ｔβ４）および／またはＴβ４アイソフォーム、類似体もしくは誘導体（酸化Ｔβ４、Ｔβ４のＮ末端変異体、Ｔβ４のＣ末端変異体およびＴβ４のアンタゴニストを含む）、神経変性疾患、筋変性疾患および／もしくは神経筋変性疾患を阻害する活性を有する、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴまたはその保存的変異体を含むか、または本質的にそれらからなる、ポリペプチドまたはペプチドフラグメントが挙げられる。本明細書中に参考として援用される、国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９９／１７２８２は、本発明に従って有用であり得るＴβ４のアイソフォームならびに本発明とともに利用され得るアミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴおよびその保存的変異体を開示する。本明細書中に参考として援用される、国際出願番号ＰＣＴ／ＧＢ９９／００８３３（ＷＯ９９／４９８８３）は、本発明に従って使用され得る酸化サイモシンβ４を開示する。以降、主にＴβ４およびＴβ４アイソフォームに関して本発明を説明していくが、以下の説明が、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴ、神経変性疾患、筋変性疾患および／もしくは神経筋変性疾患を阻害する活性を有する、ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴ、それらの保存的変異体を含むか、または本質的にそれらからなるペプチドおよびフラグメントおよび／またはＴβ４アイソフォーム、類似体もしくは誘導体（Ｔβ４のＮ末端変異体、Ｔβ４のＣ末端変異体およびＴβ４のアンタゴニストを含む）に等しく適用することができると意図されると理解されるべきである。本発明はまた、酸化Ｔβ４を使用してもよい。
【００１６】
１つの実施形態において、本発明は、被験体において、筋ジストロフィ以外の神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法を提供する。この方法は、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による前記組織の変敗、傷害または損傷を阻害するか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するために、そのような治療を必要とする被験体に、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴ、その保存的変異体または前記組織においてＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴペプチドまたはその保存的変異体の産生を刺激する刺激剤を含むペプチド剤を含む組成物の有効量を投与する工程を含む。別の実施形態において、この疾患は、デュシェンヌ型筋ジストロフィ以外である。
【００１７】
別の実施形態において、本発明は、被験体において、筋ジストロフィを含む疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法を提供する。この方法は、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を阻害するか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するために、そのような治療を必要とする被験体に、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴまたはＬＫＫＴＮＴ、その保存的変異体あるいは前記組織においてＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴペプチドまたはその保存的変異体の産生を刺激する刺激剤を含むＴＢ４以外のペプチド剤を含む組成物の有効量を投与する工程を含む。
【００１８】
１つの実施形態において、本発明は、組織と本明細書中に説明されるようなペプチド剤を含む組成物の有効量とを接触させることによって、被験体において、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法を提供する。非限定的な実施例として、その組織は、前記被験体の神経組織および／または筋組織から選択され得る。接触は、直接的であってもよく、全身的であってもよい。直接投与の例としては、例えば、本明細書中に説明されるようなペプチド剤を含む、
溶液、ローション、軟膏、ゲル、クリーム、ペースト、噴霧液、懸濁液、分散液、ヒドロゲル、軟膏剤または油剤とを組織と直接適用または吸入によって接触されることである。全身性投与としては、例えば、注射用水などの薬学的に許容可能な担体中の本明細書中に説明されるようなペプチド剤を含む組成物の静脈内、腹腔内、筋肉内注射が挙げられる。
【００１９】
本明細書中に説明されるような、本発明における用途のためのペプチド剤は、任意の有効量で投与されてもよい。例えば、本明細書中に説明されるようなペプチド剤は、約０．０００１〜１，０００，０００マイクログラムの範囲内の用量、より好ましくは、約０．１〜５，０００マイクログラムの範囲内の量、最も好ましくは、約１〜３０マイクログラムの範囲内で投与されてもよい。
【００２０】
本発明による組成物は、投与日の１日あたり単回適用または複数回適用（投与日の１日あたり２、３、４または４回以上の適用）で毎日、１日おき、１週間おき、１ヶ月おきなどで投与してもよい。
【００２１】
多くのＴβ４アイソフォームは、同定されており、Ｔβ４の既知のアミノ酸配列に対して約７０％または約７５％または約８０％以上の相同性を有する。このようなアイソフォームとしては、例えば、Ｔβ４ａｌａ、Ｔβ９、Ｔβ１０、Ｔβ１１、Ｔβ１２、Ｔβ１３、Ｔβ１４およびＴβ１５が挙げられる。Ｔβ４と同様に、Ｔβ１０およびＴβ１５アイソフォームは、アクチンを隔離することが示されている。Ｔβ４、Ｔβ１０およびＴβ１５ならびにこれらの他のアイソフォームは、アクチンの隔離または結合の媒介に関連すると見られる、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴを共有する。特定の任意の理論に制約されることを望まれるわけではないが、本明細書中に説明されるようなペプチド剤の活性は、そのような薬剤の抗炎症性活性に少なくとも部分的に起因し得る。また、Ｔβ４は、アクチン重合を調節することができる（例えば、β−サイモシンは、遊離Ｇアクチンを隔離することによってＦアクチンを脱重合すると見られる）。アクチン重合を調節するＴβ４の能力は、ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴ配列を介してアクチンに結合するか、または隔離する能力に起因しうる。従って、Ｔβ４と同様に、抗炎症性であり、アクチンを結合または隔離するか、あるいはアミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴを有するＴβ４アイソフォームを含むアクチン重合を調節する他のタンパク質は、本明細書中で説明されるように、単独か、またはＴβ４と組み合わせて効果的である可能性がある。
【００２２】
本明細書中に説明されるようなペプチド剤は、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（Ｐ１３−Ｋ）／Ａｋｔ（タンパク質キナーゼβ）経路などの代謝性酵素およびシグナル伝達酵素をアップレギュレートすることによって、脳ならびに他の神経血管細胞および組織のアポトーシス性の死（ａｐｏｐｔｉｃ ｄｅａｔｈ）を予防および／または制限することができる。Ｐ１３−Ｋ）／Ａｋｔおよび下流のリン酸化ＢａｄおよびプロリンリッチＡｋｔ生存キナーゼをアップレギュレートすることによって、神経細胞が保護される。さらに、ＩＬ−１８などの炎症性サイトカインおよびＩＬ−８などのケモカインおよび酵素（例えば、カスパーゼ（ｃａｓｐａｃｅ）２、３、８および９）をダウンレギュレートする能力のおかげでＴβ４およびＴβ４アイソフォームまたはＴβ４の酸化型などの本明細書中に説明されるようなペプチド剤は、神経細胞を保護し、神経組織の治癒を促進する。
【００２３】
本明細書中に説明されるようなペプチド剤は、炎症性ケモカイン、サイトカインおよびカスパーゼ（ｃａｐａｓｅ）活性を減少することができる。
【００２４】
本明細書中に説明されるようなペプチド剤は、グルタミン酸が誘導する神経毒性を予防することによって脳および脊髄における神経毒性を予防することができる。興奮性神経伝
達物質であるグルタミン酸の損傷した脳および神経組織からの制御されない放出は、細胞におけるミトコンドリアの機能不全およびエネルギー機構の主な媒介物であり、これによって、いくつかの炎症性応答、栄養性シグナルを変化させる機械的ストレスおよび罹患した神経細胞および組織の死がもたらされる。
【００２５】
従って、Ｔβ４ａｌａ、Ｔβ９、Ｔβ１０、Ｔβ１１、Ｔβ１２、Ｔβ１３、Ｔβ１４およびＴβ１５などのＴβ４アイソフォームならびに未同定のＴβ４アイソフォームを含む、本明細書中に説明されるような既知のＬＫＫＴＥＴペプチドまたはＬＫＫＴＮＴペプチドは、本発明の方法において有用となることが特に企図される。同様に、Ｔβ４アイソフォームを含む、本明細書中に説明されるようなＬＫＫＴＥＴペプチドまたはＬＫＫＴＮＴペプチドは、被験体において実施される方法を含む本発明の方法において有用である。従って、本発明は、Ｔβ４ならびにＴβ４アイソフォームである、Ｔβ４ａｌａ、Ｔβ９、Ｔβ１０、Ｔβ１１、Ｔβ１２、Ｔβ１３、Ｔβ１４およびＴβ１５ならびに医薬的に許容可能な担体を含む、本明細書中に説明されるようなＬＫＫＴＥＴペプチドまたはＬＫＫＴＮＴペプチドを含む医薬組成物をさらに提供する。
【００２６】
さらに、適切な隔離、結合、可動化または重合アッセイにおいて証明されるか、あるいは例えば、ＬＫＫＴＥＴまたはＬＫＫＴＮＴなどのアクチン結合を調節するアミノ酸配列の存在によって同定されるように、抗炎症性活性および／もしくはアクチン隔離能力もしくはアクチン結合能力を有するか、またはアクチンを可動化することができるか、またはアクチン重合を調節することができる他の薬剤またはタンパク質は、同様に本発明の方法において使用され得る。このようなタンパク質としては、例えば、ゲルゾリン、ビタミンＤ結合タンパク質（ＤＢＰ）、プロフィリン、コフィリン、デパクチン（ｄｅｐａｃｔｉｎ）、ディナセル（Ｄｎａｓｅｌ）、ビリン（ｖｉｌｉｎ）、フラグミン、セバリン、キャッピングタンパク質、β−アクチニンおよびアキュメンチンを挙げることができる。このような方法が、被験体において実施される方法を含むので、本発明は、本明細書中で説明されるような、ゲルゾリン、ビタミンＤ結合タンパク質（ＤＢＰ）、プロフィリン、コフィリン、デパクチン、ディナセル（Ｄｎａｓｅｌ）、ビリン、フラグミン、セバリン、キャッピングタンパク質、β−アクチニンおよびアキュメンチンを含む医薬組成物をさらに提供する。従って、本発明は、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴまたはＬＫＫＴＮＴおよびそれらの保存的変異体を含むポリペプチドの使用を含む。
【００２７】
本明細書中で使用されるとき、用語「保存的変異体」またはその文法上の変化形は、アミノ酸残基が、別の生物学的に類似した残基によって置換されていることを示す。保存的改変の例としては、イソロイシン、バリン、ロイシンまたはメチオニンなどの疎水性残基の別の残基への置換、極性残基の別の残基への置換（例えば、アルギニンからリシンへの置換、グルタミン酸からアスパラギン酸への置換またはグルタミンからアスパラギンへの置換）などが挙げられる。
【００２８】
Ｔβ４は、多くの組織および細胞タイプに局在するので、Ｔβ４などのＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴペプチドの産生を刺激する薬剤または本明細書中に説明されるような別のペプチド剤は、組織および／または細胞からのペプチド剤の産生に影響を及ぼす組成物に加えられるか、あるいはそれを含んでもよい。このような刺激剤としては、インスリン様成長因子（ＩＧＦ−１）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）、トランスフォーミング成長因子ベータ（ＴＧＦ−β）、塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）、サイモシンα１（Ｔα１）および血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）などの成長因子のファミリーのメンバーを挙げることができる。より好ましくは、刺激剤は、トランスフォーミング成長因子ベータ（ＴＧＦ−β）またはＴＧＦ−βスーパーファミリーの他のメンバーである。
【００２９】
１つの実施形態によれば、被験体は、本明細書中に説明されるようなペプチド剤の被験体における産生を刺激する刺激剤で治療される。
【００３０】
そのうえ、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷の低減あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織の修復を助ける他の薬剤を、本明細書中に説明されるようなペプチド剤とともに組成物に加えてもよい。限定する目的ではないが、例えば、本明細書中に説明されるようなペプチド剤の単独または併用に、有効量の以下の薬剤：抗生物質、ＶＥＧＦ、ＫＧＦ、ＦＧＦ、ＰＤＧＦ、ＴＧＦβ、ＩＧＦ−１、ＩＧＦ−２、ＩＬ−１、プロサイモシンαおよび／またはサイモシンα１のうちの任意の１つ以上と組み合わせて加えてもよい。
【００３１】
本発明はまた、医薬的に許容可能な担体中に本明細書中に説明されるようなペプチド剤の治療有効量を含む医薬組成物を含む。
【００３２】
治療を提供する実際の用量または試薬、処方物または組成物は、被験体の大きさおよび健康状態を含む多くの因子に依存し得る。しかしながら、当業者は、使用するのに適切な用量を決定するために、ＰＣＴ／ＵＳ９９／１７２８２、前出および本明細書中に引用される参考文献に開示されるような臨床上の用量を決定するための方法および技術を記載する教示を使用することができる。
【００３３】
適当な処方物は、本明細書中に説明されるようなペプチド剤を約０．００１〜５０重量％の範囲内、より好ましくは約０．０１〜０．１重量％、最も好ましくは約０．０５重量％の濃度で含んでもよい。
【００３４】
本明細書中に説明される治療的アプローチは、被験体への任意の従来の投与技術（例えば、これらに限定されないが、直接投与、局所注射、吸入または全身投与）を含む、本明細書中に説明されるようなペプチド剤の様々な投与の経路または送達を含む。本明細書中に説明されるようなペプチド剤を使用するか、またはそれらを含む方法および組成物は、医薬的に許容可能な無毒の賦形剤または担体と混合することによって医薬組成物に処方されてもよい。
【００３５】
本発明は、本明細書中に説明されるようなペプチド剤と相互作用するか、それを促進するか、または阻害する抗体の使用を含む。様々なエピトープの特異性を有する貯蔵されたモノクローナル抗体ならびに異なるモノクローナル抗体調製物から実質的になる抗体が提供される。モノクローナル抗体は、ＰＣＴ／ＵＳ９９／１７２８２、前出に開示されているような当業者に周知の方法によってタンパク質のフラグメントを含む抗原から製造される。本発明において使用されるとき、用語抗体は、モノクローナル抗体およびポリクローナル抗体を含むと意味される。
【００３６】
なおも別の実施形態において、本発明は、遺伝子発現を調節する有効量の刺激剤を投与することによって被験体を治療する方法を提供する。用語「調節する」とは、本明細書中に説明されるようなペプチド剤が過剰発現される場合の発現の阻害または抑制および本明細書中に説明されるようなペプチド剤が過小発現される場合の発現の誘導のことをいう。用語「有効量」とは、本明細書中に説明されるようなペプチド剤の遺伝子発現を調節するのに有効であり、その結果、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷の症状を低減するか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復する、刺激剤の量を意味する。本明細書中に説明されるようなペプチド剤の遺伝子発現を調節する刺激剤は、例えば、ポリヌクレオチドであってもよい。そのポリヌクレオチドは、アンチセンス、３重鎖またはリボザイムであってもよい。例えば、本明細書中に説明されるようなペプチド剤の構造遺伝子領域またはプロモーター領域に特異的であ
るアンチセンスを利用してもよい。本明細書中に説明されるようなペプチド剤の遺伝子発現を調節する刺激剤はまた、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）であってもよい。
【００３７】
別の実施形態において、本発明は、本明細書中に説明されるようなペプチド剤の活性を調節する化合物を利用するための方法を提供する。本明細書中に説明されるようなペプチド剤の活性に影響を及ぼす化合物（例えば、アンタゴニストおよびアゴニスト）としては、ペプチド、ペプチド模倣物、ポリペプチド、化合物、亜鉛などのミネラルおよび生物学的薬剤が挙げられる。
【００３８】
本明細書中に説明されるような刺激剤についてスクリーニングする方法は、神経変性疾患、筋変性疾患および／または神経筋変性疾患を示す組織と候補化合物とを接触させる工程；およびＬＫＫＴＥＴまたはＬＫＫＴＮＴペプチドの前記組織における活性を測定する工程を含み、ここで、前記候補化合物を有しない対応する組織における前記ペプチドの活性のレベルと比較して前記組織における前記ペプチドの活性が増加しているとき、前記化合物が前記刺激剤を誘導することができると示唆される。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験体において、デュシェンヌ型筋ジストロフィ以外の神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法であって、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による前記組織の変敗、傷害または損傷を阻害するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するために、そのような治療を必要とする被験体に、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴ、その保存的変異体（ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ ｖａｒｉａｎｔ）あるいは前記組織においてＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴペプチドまたはその保存的変異体の産生を刺激する刺激剤を含むペプチド剤を含む組成物の有効量を投与する工程を含む、方法。
【請求項２】
前記疾患が、前記被験体における炎症性障害に関連する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記疾患が、前記被験体における炎症性障害を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ペプチド剤が、抗炎症剤である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記ペプチド剤が、サイモシンベータ４（Ｔβ４）である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記ペプチド剤が、Ｔβ４以外であり、他の酸化Ｔβ４である、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記ペプチド剤が、アミノ酸配列ＫＬＫＫＴＥＴ、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴＱおよびＴβ４のＮ末端変異体、Ｔβ４のＣ末端変異体またはＴβ４のアイソフォームを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記ペプチド剤を、前記被験体に約１〜３０マイクログラムの範囲内の用量で投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記薬剤を、前記組織に直接投与によって投与するか、または前記被験体に静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、吸入、経皮的または経口投与によって投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記組成物を全身的に投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記組成物を直接的に投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記組成物が、溶液、ゲル、クリーム、ペースト、ローション、噴霧液、懸濁液、分散液、軟膏、ヒドロゲルまたは軟膏剤の処方物の形態である、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ペプチド剤が、組換えペプチドまたは合成ペプチドである、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記疾患が、アルツハイマー病、多発性硬化症（ＭＳ）、ルー・ゲーリッグ病（筋萎縮性側索硬化症またはＡＬＳ）、パーキンソン病、骨髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）、重症筋無力症、伝達性海綿状脳症（ＴＳＥ）またはウシ海綿状脳症（ＢＳＥ）のうちの少なくとも１つである、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記疾患が、神経変性疾患である、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記疾患が、筋変性疾患である、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記疾患が、神経筋変性疾患である、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
請求項１において定義されるような刺激剤についてスクリーニングするための方法であって、神経変性疾患、筋変性疾患および／または神経筋変性疾患を示す組織と候補化合物とを接触させる工程、ならびに前記組織におけるＬＫＫＴＥＴまたはＬＫＫＴＮＴペプチドの活性を測定する工程を含み、前記候補化合物を有しない対応する組織における前記ペプチドの活性レベルと比べて前記組織における前記ペプチドの活性が高いことは、前記化合物が、前記刺激剤を誘導することができることを示唆する、方法。
【請求項１８】
前記ペプチドが、サイモシンベータ４である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
被験体において、筋ジストロフィを含む神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法であって、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による前記組織の変敗、傷害または損傷を阻害するか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するために、そのような治療を必要とする被験体に、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴ、その保存的変異体あるいは前記組織においてＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴペプチドまたはその保存的変異体の産生を刺激する刺激剤を含む、Ｔβ４以外のペプチド剤を含む組成物の有効量を投与する工程を含む、方法。
【請求項２０】
前記ペプチド剤が、抗炎症剤である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記ペプチド剤が、アミノ酸配列ＫＬＫＫＴＥＴ、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴＱおよびＴβ４のＮ末端変異体、Ｔβ４のＣ末端変異体またはＴβ４のアイソフォームを含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
前記ペプチド剤を、約１〜３０マイクログラムの範囲内の用量で前記被験体に投与する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
前記薬剤を、前記組織に直接投与によって投与するか、または前記被験体に静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、吸入、経皮的または経口投与によって投与する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２４】
前記組成物を全身的に投与する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２５】
前記組成物を直接的に投与する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２６】
前記組成物が、溶液、ゲル、クリーム、ペースト、ローション、噴霧液、懸濁液、分散液、軟膏、ヒドロゲルまたは軟膏剤の処方物の形態である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２７】
前記ペプチド剤が、組換えペプチドまたは合成ペプチドである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２８】
前記薬剤が、抗体である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２９】
前記疾患が、ベッカー型筋ジストロフィである、請求項１９に記載の方法。
【請求項３０】
被験体において、筋ジストロフィ以外の神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法であって、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による前記組織の変敗、傷害または損傷を阻害するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するために、そのような治療を必要とする被験体に、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴ、その保存的変異体あるいは前記組織においてＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴペプチドまたはその保存的変異体の産生を刺激する刺激剤を含むペプチド剤を含む組成物の有効量を投与する工程を含む、方法。
【請求項１】
被験体において、デュシェンヌ型筋ジストロフィ以外の神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法であって、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による前記組織の変敗、傷害または損傷を阻害するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するために、そのような治療を必要とする被験体に、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴ、その保存的変異体（ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ ｖａｒｉａｎｔ）あるいは前記組織においてＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴペプチドまたはその保存的変異体の産生を刺激する刺激剤を含むペプチド剤を含む組成物の有効量を投与する工程を含む、方法。
【請求項２】
前記疾患が、前記被験体における炎症性障害に関連する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記疾患が、前記被験体における炎症性障害を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ペプチド剤が、抗炎症剤である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記ペプチド剤が、サイモシンベータ４（Ｔβ４）である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記ペプチド剤が、Ｔβ４以外であり、他の酸化Ｔβ４である、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記ペプチド剤が、アミノ酸配列ＫＬＫＫＴＥＴ、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴＱおよびＴβ４のＮ末端変異体、Ｔβ４のＣ末端変異体またはＴβ４のアイソフォームを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記ペプチド剤を、前記被験体に約１〜３０マイクログラムの範囲内の用量で投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記薬剤を、前記組織に直接投与によって投与するか、または前記被験体に静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、吸入、経皮的または経口投与によって投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記組成物を全身的に投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記組成物を直接的に投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記組成物が、溶液、ゲル、クリーム、ペースト、ローション、噴霧液、懸濁液、分散液、軟膏、ヒドロゲルまたは軟膏剤の処方物の形態である、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ペプチド剤が、組換えペプチドまたは合成ペプチドである、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記疾患が、アルツハイマー病、多発性硬化症（ＭＳ）、ルー・ゲーリッグ病（筋萎縮性側索硬化症またはＡＬＳ）、パーキンソン病、骨髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）、重症筋無力症、伝達性海綿状脳症（ＴＳＥ）またはウシ海綿状脳症（ＢＳＥ）のうちの少なくとも１つである、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記疾患が、神経変性疾患である、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記疾患が、筋変性疾患である、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記疾患が、神経筋変性疾患である、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
請求項１において定義されるような刺激剤についてスクリーニングするための方法であって、神経変性疾患、筋変性疾患および／または神経筋変性疾患を示す組織と候補化合物とを接触させる工程、ならびに前記組織におけるＬＫＫＴＥＴまたはＬＫＫＴＮＴペプチドの活性を測定する工程を含み、前記候補化合物を有しない対応する組織における前記ペプチドの活性レベルと比べて前記組織における前記ペプチドの活性が高いことは、前記化合物が、前記刺激剤を誘導することができることを示唆する、方法。
【請求項１８】
前記ペプチドが、サイモシンベータ４である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
被験体において、筋ジストロフィを含む神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法であって、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による前記組織の変敗、傷害または損傷を阻害するか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するために、そのような治療を必要とする被験体に、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴ、その保存的変異体あるいは前記組織においてＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴペプチドまたはその保存的変異体の産生を刺激する刺激剤を含む、Ｔβ４以外のペプチド剤を含む組成物の有効量を投与する工程を含む、方法。
【請求項２０】
前記ペプチド剤が、抗炎症剤である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記ペプチド剤が、アミノ酸配列ＫＬＫＫＴＥＴ、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴＱおよびＴβ４のＮ末端変異体、Ｔβ４のＣ末端変異体またはＴβ４のアイソフォームを含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
前記ペプチド剤を、約１〜３０マイクログラムの範囲内の用量で前記被験体に投与する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
前記薬剤を、前記組織に直接投与によって投与するか、または前記被験体に静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、吸入、経皮的または経口投与によって投与する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２４】
前記組成物を全身的に投与する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２５】
前記組成物を直接的に投与する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２６】
前記組成物が、溶液、ゲル、クリーム、ペースト、ローション、噴霧液、懸濁液、分散液、軟膏、ヒドロゲルまたは軟膏剤の処方物の形態である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２７】
前記ペプチド剤が、組換えペプチドまたは合成ペプチドである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２８】
前記薬剤が、抗体である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２９】
前記疾患が、ベッカー型筋ジストロフィである、請求項１９に記載の方法。
【請求項３０】
被験体において、筋ジストロフィ以外の神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による組織の変敗、傷害または損傷を治療、予防、阻害または低減するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するための治療方法であって、神経変性疾患、筋変性疾患または神経筋変性疾患による前記組織の変敗、傷害または損傷を阻害するためか、あるいは前記疾患によって悪影響を受ける組織を修復するために、そのような治療を必要とする被験体に、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴ、その保存的変異体あるいは前記組織においてＬＫＫＴＥＴもしくはＬＫＫＴＮＴペプチドまたはその保存的変異体の産生を刺激する刺激剤を含むペプチド剤を含む組成物の有効量を投与する工程を含む、方法。
【公表番号】特表２００８−５２６９８６（Ｐ２００８−５２６９８６Ａ）
【公表日】平成２０年７月２４日（２００８．７．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５５１４０７（Ｐ２００７−５５１４０７）
【出願日】平成１８年１月１３日（２００６．１．１３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／００１２５５
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０７６５８８
【国際公開日】平成１８年７月２０日（２００６．７．２０）
【出願人】（５０３３３４７６９）リジェナークス・バイオファーマスーティカルズ・インコーポレイテッド (16)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２０年７月２４日（２００８．７．２４）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１月１３日（２００６．１．１３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／００１２５５
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０７６５８８
【国際公開日】平成１８年７月２０日（２００６．７．２０）
【出願人】（５０３３３４７６９）リジェナークス・バイオファーマスーティカルズ・インコーポレイテッド (16)
【Ｆターム（参考）】
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