等速電気泳動法
【課題】
等速電気泳動法(ITP)により、血液由来試料中の分析物(又はアナログ)及び標識物質等を含む複合体と血液由来試料中の共存物質とを迅速、簡便且つ高精度に分離する方法及び分離された複合体の量又は当該複合体の形成に関与しなかった遊離の標識物質含有分子の量に基づいて当該試料中の分析物を高精度且つ高感度に測定する方法の提供。
【解決手段】
2-(N-モルホリノ)エタンスルホン酸(MES)イオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPにより、血液由来試料中の分析物(又はアナログ)、当該分析物と複合体を形成し得る物質(CFS)、分析物(又はアナログ)の電気泳動移動度を変化させ得る物質及び標識物質を含む複合体と当該複合体の形成に関与しなかった遊離の標識物質含有分子(標識CFS、標識アナログ、分析物-標識CFS複合体)及び当該試料中の共存物質とを分離すると共に、当該複合体を濃縮する。
等速電気泳動法(ITP)により、血液由来試料中の分析物(又はアナログ)及び標識物質等を含む複合体と血液由来試料中の共存物質とを迅速、簡便且つ高精度に分離する方法及び分離された複合体の量又は当該複合体の形成に関与しなかった遊離の標識物質含有分子の量に基づいて当該試料中の分析物を高精度且つ高感度に測定する方法の提供。
【解決手段】
2-(N-モルホリノ)エタンスルホン酸(MES)イオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPにより、血液由来試料中の分析物(又はアナログ)、当該分析物と複合体を形成し得る物質(CFS)、分析物(又はアナログ)の電気泳動移動度を変化させ得る物質及び標識物質を含む複合体と当該複合体の形成に関与しなかった遊離の標識物質含有分子(標識CFS、標識アナログ、分析物-標識CFS複合体)及び当該試料中の共存物質とを分離すると共に、当該複合体を濃縮する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
（A）2-(N-モルホリノ)エタンスルホン酸(MES)イオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、等速電気泳動（ITP）によって、下記[A-1]〜[A-3]の何れかの分離を行うと共に、下記複合体A、下記複合体A'又は下記複合体A''を濃縮する、ことを特徴とする複合体の分離方法、
[A-1] (i)(a)血液由来試料中の分析物、(b)分析物の電気泳動移動度を変化させ得る物質（移動度変化物質）が結合した、１種以上の、当該分析物との複合体を形成し得る物質（CFS）（移動度変化CFS）及び(c)標識物質が結合した、１種以上のCFS（標識CFS）を含む複合体Aと、(ii)当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の標識CFS及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-2] (i)(a')標識物質が結合した、分析物のアナログ（標識アナログ）及び(b)１種以上の移動度変化CFSを含む複合体A'と、(ii)当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の標識アナログ及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-3] (i)(a'')移動度変化物質が結合した分析物のアナログ（移動度変化アナログ）及び(c)１種以上の標識CFSを含む複合体A''と、(ii)当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の標識CFS又は／及び分析物と標識CFSを含む複合体B''、及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離。
【請求項２】
以下の工程(1)及び(2)を含む請求項１に記載の複合体の分離方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-3]の何れかの溶液を導入する工程、
[I-1] (a)血液由来試料中の分析物、(b)１種以上の移動度変化CFS及び(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a)〜(c)を含む複合体A及び当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFSを含有する溶液、
[I-2] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSを接触して得られる、これら(a')及び(b)を含む複合体A'、及び(a)血液由来試料中の分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSを接触して得られる、これら(a)及び(b)を含む複合体B'、及び当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログを含有する溶液、
[I-3] (a'')移動度変化アナログと(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a'')及び(c)を含む複合体A''、(a)血液由来試料中の分析物と(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a)及び(c)を含む複合体B''、及び当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFSを含有する溶液；
および
(2)当該複合体A、当該複合体A'又は当該複合体A''を、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、下記[A-1]〜[A-3]の何れかの分離を行う工程、
[A-1] (i)当該複合体Aと、(ii) 当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-2] (i)当該複合体A'と、(ii) 当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログ及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-3] (i)当該複合体A''と、(ii) 当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS又は／及び当該複合体B''、及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離。
【請求項３】
以下の工程(1)及び(2)を含む請求項１に記載の複合体の分離方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-2]の何れかに記載の組合せからなる複数の溶液を、これらの溶液を予め混合することなく且つそれぞれ別々のゾーンとなるように導入する工程、
[I-1] 1)１種以上の標識CFSを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-2] 1)分析物を含む血液由来試料と１種以上の標識CFSを含有する溶液および2)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液；
および
(2)MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、下記[II-1]又は[II-2]の方法により形成させた下記複合体Aを、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、[A](i)当該複合体Aと、(ii)当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS及び(iii)血液由来試料中の共存物質とを分離する工程、
[II-1] (a)当該分析物、(b)１種以上の移動度変化CFS、及び(c)１種以上の標識CFSを接触させて、これら(a)〜(c)を含む複合体Aを形成させる、
[II-2] (a)当該分析物及び(c)１種以上の標識CFSを含む複合体と、(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)〜(c)を含む複合体Aを形成させる。
【請求項４】
以下の工程(1)及び(2)を含む請求項１に記載の複合体の分離方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-7]の何れかに記載の組合せからなる複数の溶液を、これらの溶液を予め混合することなく且つそれぞれ別々のゾーンとなるように導入する工程、
[I-1] 1)分析物を含む血液由来試料と標識アナログを含有する溶液および2)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-2] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および2)標識アナログと１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-3] 1)標識アナログを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料と１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-4] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液、2)標識アナログを含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-5] 1)標識アナログを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-6] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および2)移動度変化アナログと１種以上の標識CFSを含有する溶液、
[I-7] 1)分析物を含む血液由来試料と１種以上の標識CFSを含有する溶液および2)移動度変化アナログを含有する溶液；
および
(2)MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、下記[II-1]〜[II-7]の何れかの方法により形成させた下記複合体A'または下記複合体A''を、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、下記[A-1]又は[A-2]の何れかの分離を行う工程、
[II-1] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させ、また、(a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-2] (a)当該分析物と、前記[I-2] 2)の溶液中に存在する、(a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとの複合体A'とを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-3] (a')標識アナログと、前記[I-3] 2)の溶液中に存在する、(a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとの複合体B'とを接触させ、又は／及び(a')当該標識アナログと複合体B'の形成に関与しなかった(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させる、
[II-4] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)との複合体A'を形成させ、次いで、(a)当該分析物と当該複合体A'とを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-5] (a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)及び(b)との複合体B'を形成させ、次いで、(a')標識アナログと当該複合体B'とを接触させ、又は／及び(a')標識アナログと複合体B'の形成に関与しなかった(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させる、
[II-6] (a)当該分析物と、前記[I-6] 2)の溶液中に存在する、(a'')移動度変化アナログと(c)１種以上の標識CFSとの複合体A''とを接触させて、これら(a)及び(c)を含む複合体B''を形成させる、
[II-7] (a'')移動度変化アナログと、前記[I-7] 1)の溶液中に存在する、(a)当該分析物と(c)１種以上の標識CFSとの複合体B''とを接触させ、又は／及び(a'')移動度変化アナログと複合体B''の形成に関与しなかった(c)１種以上の標識CFSとを接触させて、これら(a'')及び(c)を含む複合体A''を形成させる、
[A-1] (i)当該複合体A'と、(ii)当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログ及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-2] (i)当該複合体A''と、(ii)当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS又は／及び複合体B''、及び(iii)血液由来試料中の共存物質とを分離。
【請求項５】
MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを、少なくとも、ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に導入する溶液中に存在させる請求項２〜４の何れかに記載の分離方法。
【請求項６】
MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンが、少なくとも、分析物を含む血液由来試料を少なくとも含有する溶液中に含まれる、請求項２〜４の何れかに記載の分離方法。
【請求項７】
MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンが、少なくとも、分析物を含む血液由来試料を含有する溶液中、または分析物を含む血液由来試料と１種以上の標識CFSを含有する溶液中に含まれる、請求項３に記載の複合体の分離方法。
【請求項８】
MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンが、少なくとも、分析物を含む血液由来試料と標識アナログを含有する溶液中、分析物を含む血液由来試料を含有する溶液中、または分析物を含む血液由来試料と移動度変化アナログを含有する溶液中に含まれる、請求項４に記載の複合体の分離方法。
【請求項９】
前記血液由来試料中の共存物質が、ビリルビン、ビリルビンの代謝物、又はビリルビンとタンパク質との複合体である、請求項１記載の方法。
【請求項１０】
前記分析物の電気泳動移動度を変化させ得る物質（移動度変化物質）が、アニオン性分子である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記アニオン性分子が、核酸（ヌクレオチド鎖）、タンパク質、ポリペプチド又はポリアミノ酸である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記アニオン性分子が、DNAである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記アニオン性分子が、二本鎖DNAである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
更に、(B)前記工程(A)の結果分離された、下記[B-1]〜[B-3]の何れかを、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、キャピラリーゾーン電気泳動（CZE）又はキャピラリーゲル電気泳動（CGE）によって、これらを更に分離することを特徴とする請求項１に記載の複合体の分離方法、
[B-1] (i)当該複合体Aと(iii)血液由来試料中の共存物質、
[B-2] (i)当該複合体A'と(iii)血液由来試料中の共存物質、
[B-3] (i)当該複合体A''と(iii)血液由来試料中の共存物質。
【請求項１５】
以下の工程(1)〜(4)を含む請求項１４に記載の複合体の分離方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-3]の何れかの溶液を導入する工程、
[I-1] (a)血液由来試料中の分析物、(b)１種以上の移動度変化CFS及び(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a)〜(c)を含む複合体A及び当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFSを含有する溶液、
[I-2] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSを接触して得られる、これら(a')及び(b)を含む複合体A'、及び(a)血液由来試料中の分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSを接触して得られる、これら(a)及び(b)を含む複合体B'、及び当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログを含有する溶液、
[I-3] (a'')移動度変化アナログと(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a'')及び(c)を含む複合体A''、(a)血液由来試料中の分析物と(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a)及び(c)を含む複合体B''、及び当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFSを含有する溶液；
(2)当該複合体A、当該複合体A'又は当該複合体A''を、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、下記[A-1]〜[A-3]の何れかの分離を行う工程、
[A-1] (i)当該複合体Aと、(ii)当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-2] (i)当該複合体A'と、(ii)当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログ及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-3] (i)当該複合体A''と、(ii)当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS又は／及び当該複合体B''、及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離；
(3)TBゾーンの下流側に位置する、前記工程(2)によって形成された下記[B-1]〜[B-3]の何れかに記載の組合せからなるゾーンを、CZE又はCGEを行わせる細管内の２つのLBゾーンの間に導入する工程、
[B-1] 当該複合体Aを含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン、
[B-2] 当該複合体A'を含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン、
[B-3] 当該複合体A''を含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン；
および
(4)CZE又はCGEによって、当該複合体A、当該複合体A'又は当該複合体A''と血液由来試料中の共存物質とを更に分離する工程。
【請求項１６】
以下の工程(1)〜(4)を含む請求項１４に記載の複合体の分離方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-2]の何れかに記載の組合せからなる複数の溶液を、これらの溶液を予め混合することなく且つそれぞれ別々のゾーンとなるように導入する工程、
[I-1] 1)１種以上の標識CFSを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-2] 1)分析物を含む血液由来試料と１種以上の標識CFSを含有する溶液および2)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液；
(2)MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、下記[II-1]又は[II-2]の方法により形成させた下記複合体Aを、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、[A](i)当該複合体Aと、(ii)当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS及び(iii)血液由来試料中の共存物質とを分離する工程、
[II-1] (a)当該分析物、(b)１種以上の移動度変化CFS、及び(c)１種以上の標識CFSを接触させて、これら(a)〜(c)を含む複合体Aを形成させる、
[II-2] (a)当該分析物及び(c)１種以上の標識CFSを含む複合体と、(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)〜(c)を含む複合体Aを形成させる；
(3)TBゾーンの下流側に位置する、前記工程(2)によって形成された下記[B]に記載の組合せからなるゾーンを、CZE又はCGEを行わせる細管内の２つのLBゾーンの間に導入する工程、
[B] 当該複合体Aを含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン；
および
(4)CZE又はCGEによって、当該複合体Aと血液由来試料中の共存物質とを更に分離する工程。
【請求項１７】
以下の工程(1)〜(4)を含む請求項１４に記載の複合体の分離方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-7]の何れかに記載の組合せからなる複数の溶液を、これらの溶液を予め混合することなく且つそれぞれ別々のゾーンとなるように導入する工程、
[I-1] 1)分析物を含む血液由来試料と標識アナログを含有する溶液および2)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-2] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および2)標識アナログと１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-3] 1)標識アナログを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料と１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-4] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液、2)標識アナログを含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-5] 1)標識アナログを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-6] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および2)移動度変化アナログと１種以上の標識CFSを含有する溶液、
[I-7] 1)分析物を含む血液由来試料と１種以上の標識CFSを含有する溶液および2)移動度変化アナログを含有する溶液；
(2)MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、下記[II-1]〜[II-7]の何れかの方法により形成させた下記複合体A'または下記複合体A''を、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、下記[A-1]又は[A-2]の何れかの分離を行う工程、
[II-1] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させ、また、(a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-2] (a)当該分析物と、前記[I-2] 2)の溶液中に存在する、(a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとの複合体A'とを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-3] (a')標識アナログと、前記[I-3] 2)の溶液中に存在する、(a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとの複合体B'とを接触させ、又は／及び(a')当該標識アナログと複合体B'の形成に関与しなかった(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させる、
[II-4] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)との複合体A'を形成させ、次いで、(a)当該分析物と当該複合体A'とを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-5] (a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)及び(b)との複合体B'を形成させ、次いで、(a')標識アナログと当該複合体B'とを接触させ、又は／及び(a')標識アナログと複合体B'の形成に関与しなかった(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させる、
[II-6] (a)当該分析物と、前記[I-6] 2)の溶液中に存在する、(a'')移動度変化アナログと(c)１種以上の標識CFSとの複合体A''とを接触させて、これら(a)及び(c)を含む複合体B''を形成させる、
[II-7] (a'')移動度変化アナログと、前記[I-7] 1)の溶液中に存在する、(a)当該分析物と(c)１種以上の標識CFSとの複合体B''とを接触させ、又は／及び(a'')移動度変化アナログと複合体B''の形成に関与しなかった(c)１種以上の標識CFSとを接触させて、これら(a'')及び(c)を含む複合体A''を形成させる、
[A-1] (i)当該複合体A'と、(ii)当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログ及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-2] (i)当該複合体A''と、(ii)当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS又は／及び複合体B''、及び(iii)血液由来試料中の共存物質とを分離；
(3)TBゾーンの下流側に位置する、前記工程(2)によって形成された下記[B-1]又は[B-2]の何れかに記載の組合せからなるゾーンを、CZE又はCGEを行わせる細管内の２つのLBゾーンの間に導入する工程、
[B-1] 当該複合体A'を含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン、
[B-2] 当該複合体A''を含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン；
および
(4)CZE又はCGEによって、当該複合体A'又は当該複合体A''と血液由来試料中の共存物質とを更に分離する工程。
【請求項１８】
分離を、負荷電ポリマーの存在下で行う、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
前記負荷電ポリマーが、ポリアニオン性ポリサッカライド又はポリアニオン性合成高分子化合物である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記負荷電ポリマーが、ヘパリン、ヘパラン硫酸、コンドロイチン硫酸、デキストラン硫酸、ポリタングステン酸、ホスホタングステン酸、ヒアルロン酸、デルマタン硫酸、ポリアネトールスルホン酸、またはこれらの塩である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記負荷電ポリマーが、ヘパリンまたはその塩である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記工程(4)を、負荷電ポリマーの存在下で行い、当該負荷電ポリマーが、分析物を含む血液由来試料を含有しない溶液中に含まれる、請求項１５〜１７の何れかに記載の方法。
【請求項２３】
負荷電ポリマーが、LB、TB、１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液および１種以上の標識CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中または、LB、TB及び１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中に含まれる請求項１６に記載の方法。
【請求項２４】
負荷電ポリマーが、LB、TBおよび１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TBおよび標識アナログと１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TBおよび標識アナログを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TB、標識アナログを含有する溶液および１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TB、標識アナログを含有する溶液および１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TBおよび移動度変化アナログと１種以上の標識CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、またはLB、TBおよび移動度変化アナログを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中に含まれる、請求項１７に記載の方法。
【請求項２５】
MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンが、少なくとも、分析物を含む血液由来試料を含有する溶液中、または分析物を含む血液由来試料と１種以上の標識CFSを含有する溶液中に含まれ、負荷電ポリマーが、LB、TB、１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液および１種以上の標識CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、または、LB、TB及び１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中に含まれる請求項１６に記載の方法。
【請求項２６】
MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンが、少なくとも、分析物を含む血液由来試料と標識アナログを含有する溶液中、分析物を含む血液由来試料を含有する溶液中、または分析物を含む血液由来試料と移動度変化アナログを含有する溶液中に含まれ、負荷電ポリマーが、LB、TBおよび１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TBおよび標識アナログと１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TBおよび標識アナログを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TB、標識アナログを含有する溶液および１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TB、標識アナログを含有する溶液および１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TBおよび移動度変化アナログと１種以上の標識CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、またはLB、TBおよび移動度変化アナログを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中に含まれる、請求項１７に記載の方法。
【請求項２７】
前記CFSの少なくとも１種が、分析物又は分析物のアナログに対する抗体、或いは分析物又は分析物のアナログに結合するタンパク質である、請求項１に記載の方法。
【請求項２８】
請求項１の方法によって分離された、[C-1]当該複合体Aの量又は当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の標識CFSの量、[C-2]当該複合体A'の量又は当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の標識アナログの量、或いは[C-3]当該複合体A''の量、又は当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の標識CFSの量又は／及び分析物と標識CFSを含む複合体B''の量、を測定し、その結果に基づいて分析物の量を求めるか、または、請求項１４の方法により分離された、当該複合体Aの量、当該複合体A'の量、または当該複合体A''の量を測定し、その結果に基づいて分析物の量を求めること、を特徴とする分析物の測定方法。
【請求項２９】
以下の工程(1)〜(5)を含む請求項２８に記載の分析物の測定方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-3]の何れかの溶液を導入する工程、
[I-1] (a)血液由来試料中の分析物、(b)１種以上の移動度変化CFS及び(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a)〜(c)を含む複合体A及び当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFSを含有する溶液、
[I-2] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSを接触して得られる、これら(a')及び(b)を含む複合体A'、及び(a)血液由来試料中の分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSを接触して得られる、これら(a)及び(b)を含む複合体B'、及び当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログを含有する溶液、
[I-3] (a'')移動度変化アナログと(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a'')及び(c)を含む複合体A''、(a)血液由来試料中の分析物と(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a)及び(c)を含む複合体B''、及び当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFSを含有する溶液；
(2)当該複合体A、当該複合体A'又は当該複合体A''を、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、下記[A-1]〜[A-3]の何れかの分離を行う工程、
[A-1] (i)当該複合体Aと、(ii)当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-2] (i)当該複合体A'と、(ii)当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログ及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-3] (i)当該複合体A''と、(ii)当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS又は／及び当該複合体B''、及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離；
(3)TBゾーンの下流側に位置する、前記工程(2)によって形成された下記[B-1]〜[B-3]の何れかに記載の組合せからなるゾーンを、CZE又はCGEを行わせる細管内の２つのLBゾーンの間に導入する工程、
[B-1] 当該複合体Aを含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン、
[B-2] 当該複合体A'を含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン、
[B-3] 当該複合体A''を含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン；
(4)CZE又はCGEによって、当該細管に電圧を印加することによって、当該複合体A、当該複合体A'又は当該複合体A''と血液由来試料中の共存物質とを更に分離する工程；
および
(5)分離された複合体Aの量、当該複合体A'の量又は当該複合体A''の量を測定し、その結果に基づいて分析物の量を求める工程。
【請求項３０】
以下の工程(1)〜(5)を含む請求項２８に記載の分析物の測定方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-2]の何れかに記載の組合せからなる複数の溶液を、これらの溶液を予め混合することなく且つそれぞれ別々のゾーンとなるように導入する工程、
[I-1] 1)１種以上の標識CFSを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-2] 1)分析物を含む血液由来試料と１種以上の標識CFSを含有する溶液および2)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液；
(2)MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、下記[II-1]又は[II-2]の方法により形成させた下記複合体Aを、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、[A](i)当該複合体Aと、(ii)当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS及び(iii)血液由来試料中の共存物質とを分離する工程、
[II-1] (a)当該分析物、(b)１種以上の移動度変化CFS、及び(c)１種以上の標識CFSを接触させて、これら(a)〜(c)を含む複合体Aを形成させる、
[II-2] (a)当該分析物及び(c)１種以上の標識CFSを含む複合体と、(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)〜(c)を含む複合体Aを形成させる；
(3)TBゾーンの下流側に位置する、前記工程(2)によって形成された下記[B]に記載の組合せからなるゾーンを、CZE又はCGEを行わせる細管内の２つのLBゾーンの間に導入する工程、
[B] 当該複合体Aを含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン；
(4)CZE又はCGEによって、当該細管に電圧を印加することによって、当該複合体Aと血液由来試料中の共存物質とを更に分離する工程；
および
(5)分離された複合体Aの量を測定し、その結果に基づいて分析物の量を求める工程。
【請求項３１】
以下の工程(1)〜(5)を含む請求項２８に記載の分析物の測定方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-7]の何れかに記載の組合せからなる複数の溶液を、これらの溶液を予め混合することなく且つそれぞれ別々のゾーンとなるように導入する工程、
[I-1] 1)分析物を含む血液由来試料と標識アナログを含有する溶液および2)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-2] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および2)標識アナログと１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-3] 1)標識アナログを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料と１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-4] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液、2)標識アナログを含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-5] 1)標識アナログを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-6] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および2)移動度変化アナログと１種以上の標識CFSを含有する溶液、
[I-7] 1)分析物を含む血液由来試料と１種以上の標識CFSを含有する溶液および2)移動度変化アナログを含有する溶液；
(2)MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、下記[II-1]〜[II-7]の何れかの方法により形成させた下記複合体A'または下記複合体A''を、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、下記[A-1]又は[A-2]の何れかの分離を行う工程、
[II-1] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させ、また、(a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-2] (a)当該分析物と、前記[I-2] 2)の溶液中に存在する、(a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとの複合体A'とを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-3] (a')標識アナログと、前記[I-3] 2)の溶液中に存在する、(a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとの複合体B'とを接触させ、又は／及び(a')当該標識アナログと複合体B'の形成に関与しなかった(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させる、
[II-4] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)との複合体A'を形成させ、次いで、(a)当該分析物と当該複合体A'とを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-5] (a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)及び(b)との複合体B'を形成させ、次いで、(a')標識アナログと当該複合体B'とを接触させ、又は／及び(a')標識アナログと複合体B'の形成に関与しなかった(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させる、
[II-6] (a)当該分析物と、前記[I-6] 2)の溶液中に存在する、(a'')移動度変化アナログと(c)１種以上の標識CFSとの複合体A''とを接触させて、これら(a)及び(c)を含む複合体B''を形成させる、
[II-7] (a'')移動度変化アナログと、前記[I-7] 1)の溶液中に存在する、(a)当該分析物と(c)１種以上の標識CFSとの複合体B''とを接触させ、又は／及び(a'')移動度変化アナログと複合体B''の形成に関与しなかった(c)１種以上の標識CFSとを接触させて、これら(a'')及び(c)を含む複合体A''を形成させる、
[A-1] (i)当該複合体A'と、(ii)当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログ及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-2] (i)当該複合体A''と、(ii)当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS又は／及び複合体B''、及び(iii)血液由来試料中の共存物質とを分離；
(3)TBゾーンの下流側に位置する、前記工程(2)によって形成された下記[B-1]又は[B-2]の何れかに記載の組合せからなるゾーンを、CZE又はCGEを行わせる細管内の２つのLBゾーンの間に導入する工程、
[B-1] 当該複合体A'を含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン、
[B-2] 当該複合体A''を含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン；
(4)CZE又はCGEによって、当該細管に電圧を印加することによって、当該複合体A'又は当該複合体A''と血液由来試料中の共存物質とを更に分離する工程；
および
(5)分離された当該複合体A'の量又は当該複合体A''の量を測定し、その結果に基づいて分析物の量を求める工程。
【請求項１】
（A）2-(N-モルホリノ)エタンスルホン酸(MES)イオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、等速電気泳動（ITP）によって、下記[A-1]〜[A-3]の何れかの分離を行うと共に、下記複合体A、下記複合体A'又は下記複合体A''を濃縮する、ことを特徴とする複合体の分離方法、
[A-1] (i)(a)血液由来試料中の分析物、(b)分析物の電気泳動移動度を変化させ得る物質（移動度変化物質）が結合した、１種以上の、当該分析物との複合体を形成し得る物質（CFS）（移動度変化CFS）及び(c)標識物質が結合した、１種以上のCFS（標識CFS）を含む複合体Aと、(ii)当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の標識CFS及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-2] (i)(a')標識物質が結合した、分析物のアナログ（標識アナログ）及び(b)１種以上の移動度変化CFSを含む複合体A'と、(ii)当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の標識アナログ及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-3] (i)(a'')移動度変化物質が結合した分析物のアナログ（移動度変化アナログ）及び(c)１種以上の標識CFSを含む複合体A''と、(ii)当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の標識CFS又は／及び分析物と標識CFSを含む複合体B''、及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離。
【請求項２】
以下の工程(1)及び(2)を含む請求項１に記載の複合体の分離方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-3]の何れかの溶液を導入する工程、
[I-1] (a)血液由来試料中の分析物、(b)１種以上の移動度変化CFS及び(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a)〜(c)を含む複合体A及び当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFSを含有する溶液、
[I-2] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSを接触して得られる、これら(a')及び(b)を含む複合体A'、及び(a)血液由来試料中の分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSを接触して得られる、これら(a)及び(b)を含む複合体B'、及び当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログを含有する溶液、
[I-3] (a'')移動度変化アナログと(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a'')及び(c)を含む複合体A''、(a)血液由来試料中の分析物と(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a)及び(c)を含む複合体B''、及び当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFSを含有する溶液；
および
(2)当該複合体A、当該複合体A'又は当該複合体A''を、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、下記[A-1]〜[A-3]の何れかの分離を行う工程、
[A-1] (i)当該複合体Aと、(ii) 当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-2] (i)当該複合体A'と、(ii) 当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログ及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-3] (i)当該複合体A''と、(ii) 当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS又は／及び当該複合体B''、及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離。
【請求項３】
以下の工程(1)及び(2)を含む請求項１に記載の複合体の分離方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-2]の何れかに記載の組合せからなる複数の溶液を、これらの溶液を予め混合することなく且つそれぞれ別々のゾーンとなるように導入する工程、
[I-1] 1)１種以上の標識CFSを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-2] 1)分析物を含む血液由来試料と１種以上の標識CFSを含有する溶液および2)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液；
および
(2)MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、下記[II-1]又は[II-2]の方法により形成させた下記複合体Aを、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、[A](i)当該複合体Aと、(ii)当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS及び(iii)血液由来試料中の共存物質とを分離する工程、
[II-1] (a)当該分析物、(b)１種以上の移動度変化CFS、及び(c)１種以上の標識CFSを接触させて、これら(a)〜(c)を含む複合体Aを形成させる、
[II-2] (a)当該分析物及び(c)１種以上の標識CFSを含む複合体と、(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)〜(c)を含む複合体Aを形成させる。
【請求項４】
以下の工程(1)及び(2)を含む請求項１に記載の複合体の分離方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-7]の何れかに記載の組合せからなる複数の溶液を、これらの溶液を予め混合することなく且つそれぞれ別々のゾーンとなるように導入する工程、
[I-1] 1)分析物を含む血液由来試料と標識アナログを含有する溶液および2)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-2] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および2)標識アナログと１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-3] 1)標識アナログを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料と１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-4] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液、2)標識アナログを含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-5] 1)標識アナログを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-6] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および2)移動度変化アナログと１種以上の標識CFSを含有する溶液、
[I-7] 1)分析物を含む血液由来試料と１種以上の標識CFSを含有する溶液および2)移動度変化アナログを含有する溶液；
および
(2)MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、下記[II-1]〜[II-7]の何れかの方法により形成させた下記複合体A'または下記複合体A''を、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、下記[A-1]又は[A-2]の何れかの分離を行う工程、
[II-1] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させ、また、(a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-2] (a)当該分析物と、前記[I-2] 2)の溶液中に存在する、(a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとの複合体A'とを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-3] (a')標識アナログと、前記[I-3] 2)の溶液中に存在する、(a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとの複合体B'とを接触させ、又は／及び(a')当該標識アナログと複合体B'の形成に関与しなかった(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させる、
[II-4] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)との複合体A'を形成させ、次いで、(a)当該分析物と当該複合体A'とを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-5] (a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)及び(b)との複合体B'を形成させ、次いで、(a')標識アナログと当該複合体B'とを接触させ、又は／及び(a')標識アナログと複合体B'の形成に関与しなかった(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させる、
[II-6] (a)当該分析物と、前記[I-6] 2)の溶液中に存在する、(a'')移動度変化アナログと(c)１種以上の標識CFSとの複合体A''とを接触させて、これら(a)及び(c)を含む複合体B''を形成させる、
[II-7] (a'')移動度変化アナログと、前記[I-7] 1)の溶液中に存在する、(a)当該分析物と(c)１種以上の標識CFSとの複合体B''とを接触させ、又は／及び(a'')移動度変化アナログと複合体B''の形成に関与しなかった(c)１種以上の標識CFSとを接触させて、これら(a'')及び(c)を含む複合体A''を形成させる、
[A-1] (i)当該複合体A'と、(ii)当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログ及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-2] (i)当該複合体A''と、(ii)当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS又は／及び複合体B''、及び(iii)血液由来試料中の共存物質とを分離。
【請求項５】
MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを、少なくとも、ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に導入する溶液中に存在させる請求項２〜４の何れかに記載の分離方法。
【請求項６】
MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンが、少なくとも、分析物を含む血液由来試料を少なくとも含有する溶液中に含まれる、請求項２〜４の何れかに記載の分離方法。
【請求項７】
MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンが、少なくとも、分析物を含む血液由来試料を含有する溶液中、または分析物を含む血液由来試料と１種以上の標識CFSを含有する溶液中に含まれる、請求項３に記載の複合体の分離方法。
【請求項８】
MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンが、少なくとも、分析物を含む血液由来試料と標識アナログを含有する溶液中、分析物を含む血液由来試料を含有する溶液中、または分析物を含む血液由来試料と移動度変化アナログを含有する溶液中に含まれる、請求項４に記載の複合体の分離方法。
【請求項９】
前記血液由来試料中の共存物質が、ビリルビン、ビリルビンの代謝物、又はビリルビンとタンパク質との複合体である、請求項１記載の方法。
【請求項１０】
前記分析物の電気泳動移動度を変化させ得る物質（移動度変化物質）が、アニオン性分子である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記アニオン性分子が、核酸（ヌクレオチド鎖）、タンパク質、ポリペプチド又はポリアミノ酸である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記アニオン性分子が、DNAである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記アニオン性分子が、二本鎖DNAである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
更に、(B)前記工程(A)の結果分離された、下記[B-1]〜[B-3]の何れかを、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、キャピラリーゾーン電気泳動（CZE）又はキャピラリーゲル電気泳動（CGE）によって、これらを更に分離することを特徴とする請求項１に記載の複合体の分離方法、
[B-1] (i)当該複合体Aと(iii)血液由来試料中の共存物質、
[B-2] (i)当該複合体A'と(iii)血液由来試料中の共存物質、
[B-3] (i)当該複合体A''と(iii)血液由来試料中の共存物質。
【請求項１５】
以下の工程(1)〜(4)を含む請求項１４に記載の複合体の分離方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-3]の何れかの溶液を導入する工程、
[I-1] (a)血液由来試料中の分析物、(b)１種以上の移動度変化CFS及び(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a)〜(c)を含む複合体A及び当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFSを含有する溶液、
[I-2] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSを接触して得られる、これら(a')及び(b)を含む複合体A'、及び(a)血液由来試料中の分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSを接触して得られる、これら(a)及び(b)を含む複合体B'、及び当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログを含有する溶液、
[I-3] (a'')移動度変化アナログと(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a'')及び(c)を含む複合体A''、(a)血液由来試料中の分析物と(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a)及び(c)を含む複合体B''、及び当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFSを含有する溶液；
(2)当該複合体A、当該複合体A'又は当該複合体A''を、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、下記[A-1]〜[A-3]の何れかの分離を行う工程、
[A-1] (i)当該複合体Aと、(ii)当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-2] (i)当該複合体A'と、(ii)当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログ及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-3] (i)当該複合体A''と、(ii)当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS又は／及び当該複合体B''、及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離；
(3)TBゾーンの下流側に位置する、前記工程(2)によって形成された下記[B-1]〜[B-3]の何れかに記載の組合せからなるゾーンを、CZE又はCGEを行わせる細管内の２つのLBゾーンの間に導入する工程、
[B-1] 当該複合体Aを含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン、
[B-2] 当該複合体A'を含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン、
[B-3] 当該複合体A''を含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン；
および
(4)CZE又はCGEによって、当該複合体A、当該複合体A'又は当該複合体A''と血液由来試料中の共存物質とを更に分離する工程。
【請求項１６】
以下の工程(1)〜(4)を含む請求項１４に記載の複合体の分離方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-2]の何れかに記載の組合せからなる複数の溶液を、これらの溶液を予め混合することなく且つそれぞれ別々のゾーンとなるように導入する工程、
[I-1] 1)１種以上の標識CFSを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-2] 1)分析物を含む血液由来試料と１種以上の標識CFSを含有する溶液および2)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液；
(2)MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、下記[II-1]又は[II-2]の方法により形成させた下記複合体Aを、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、[A](i)当該複合体Aと、(ii)当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS及び(iii)血液由来試料中の共存物質とを分離する工程、
[II-1] (a)当該分析物、(b)１種以上の移動度変化CFS、及び(c)１種以上の標識CFSを接触させて、これら(a)〜(c)を含む複合体Aを形成させる、
[II-2] (a)当該分析物及び(c)１種以上の標識CFSを含む複合体と、(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)〜(c)を含む複合体Aを形成させる；
(3)TBゾーンの下流側に位置する、前記工程(2)によって形成された下記[B]に記載の組合せからなるゾーンを、CZE又はCGEを行わせる細管内の２つのLBゾーンの間に導入する工程、
[B] 当該複合体Aを含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン；
および
(4)CZE又はCGEによって、当該複合体Aと血液由来試料中の共存物質とを更に分離する工程。
【請求項１７】
以下の工程(1)〜(4)を含む請求項１４に記載の複合体の分離方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-7]の何れかに記載の組合せからなる複数の溶液を、これらの溶液を予め混合することなく且つそれぞれ別々のゾーンとなるように導入する工程、
[I-1] 1)分析物を含む血液由来試料と標識アナログを含有する溶液および2)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-2] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および2)標識アナログと１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-3] 1)標識アナログを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料と１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-4] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液、2)標識アナログを含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-5] 1)標識アナログを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-6] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および2)移動度変化アナログと１種以上の標識CFSを含有する溶液、
[I-7] 1)分析物を含む血液由来試料と１種以上の標識CFSを含有する溶液および2)移動度変化アナログを含有する溶液；
(2)MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、下記[II-1]〜[II-7]の何れかの方法により形成させた下記複合体A'または下記複合体A''を、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、下記[A-1]又は[A-2]の何れかの分離を行う工程、
[II-1] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させ、また、(a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-2] (a)当該分析物と、前記[I-2] 2)の溶液中に存在する、(a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとの複合体A'とを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-3] (a')標識アナログと、前記[I-3] 2)の溶液中に存在する、(a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとの複合体B'とを接触させ、又は／及び(a')当該標識アナログと複合体B'の形成に関与しなかった(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させる、
[II-4] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)との複合体A'を形成させ、次いで、(a)当該分析物と当該複合体A'とを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-5] (a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)及び(b)との複合体B'を形成させ、次いで、(a')標識アナログと当該複合体B'とを接触させ、又は／及び(a')標識アナログと複合体B'の形成に関与しなかった(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させる、
[II-6] (a)当該分析物と、前記[I-6] 2)の溶液中に存在する、(a'')移動度変化アナログと(c)１種以上の標識CFSとの複合体A''とを接触させて、これら(a)及び(c)を含む複合体B''を形成させる、
[II-7] (a'')移動度変化アナログと、前記[I-7] 1)の溶液中に存在する、(a)当該分析物と(c)１種以上の標識CFSとの複合体B''とを接触させ、又は／及び(a'')移動度変化アナログと複合体B''の形成に関与しなかった(c)１種以上の標識CFSとを接触させて、これら(a'')及び(c)を含む複合体A''を形成させる、
[A-1] (i)当該複合体A'と、(ii)当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログ及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-2] (i)当該複合体A''と、(ii)当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS又は／及び複合体B''、及び(iii)血液由来試料中の共存物質とを分離；
(3)TBゾーンの下流側に位置する、前記工程(2)によって形成された下記[B-1]又は[B-2]の何れかに記載の組合せからなるゾーンを、CZE又はCGEを行わせる細管内の２つのLBゾーンの間に導入する工程、
[B-1] 当該複合体A'を含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン、
[B-2] 当該複合体A''を含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン；
および
(4)CZE又はCGEによって、当該複合体A'又は当該複合体A''と血液由来試料中の共存物質とを更に分離する工程。
【請求項１８】
分離を、負荷電ポリマーの存在下で行う、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
前記負荷電ポリマーが、ポリアニオン性ポリサッカライド又はポリアニオン性合成高分子化合物である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記負荷電ポリマーが、ヘパリン、ヘパラン硫酸、コンドロイチン硫酸、デキストラン硫酸、ポリタングステン酸、ホスホタングステン酸、ヒアルロン酸、デルマタン硫酸、ポリアネトールスルホン酸、またはこれらの塩である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記負荷電ポリマーが、ヘパリンまたはその塩である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記工程(4)を、負荷電ポリマーの存在下で行い、当該負荷電ポリマーが、分析物を含む血液由来試料を含有しない溶液中に含まれる、請求項１５〜１７の何れかに記載の方法。
【請求項２３】
負荷電ポリマーが、LB、TB、１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液および１種以上の標識CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中または、LB、TB及び１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中に含まれる請求項１６に記載の方法。
【請求項２４】
負荷電ポリマーが、LB、TBおよび１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TBおよび標識アナログと１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TBおよび標識アナログを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TB、標識アナログを含有する溶液および１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TB、標識アナログを含有する溶液および１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TBおよび移動度変化アナログと１種以上の標識CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、またはLB、TBおよび移動度変化アナログを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中に含まれる、請求項１７に記載の方法。
【請求項２５】
MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンが、少なくとも、分析物を含む血液由来試料を含有する溶液中、または分析物を含む血液由来試料と１種以上の標識CFSを含有する溶液中に含まれ、負荷電ポリマーが、LB、TB、１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液および１種以上の標識CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、または、LB、TB及び１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中に含まれる請求項１６に記載の方法。
【請求項２６】
MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンが、少なくとも、分析物を含む血液由来試料と標識アナログを含有する溶液中、分析物を含む血液由来試料を含有する溶液中、または分析物を含む血液由来試料と移動度変化アナログを含有する溶液中に含まれ、負荷電ポリマーが、LB、TBおよび１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TBおよび標識アナログと１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TBおよび標識アナログを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TB、標識アナログを含有する溶液および１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TB、標識アナログを含有する溶液および１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、LB、TBおよび移動度変化アナログと１種以上の標識CFSを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中、またはLB、TBおよび移動度変化アナログを含有する溶液から選ばれる１種以上の溶液中に含まれる、請求項１７に記載の方法。
【請求項２７】
前記CFSの少なくとも１種が、分析物又は分析物のアナログに対する抗体、或いは分析物又は分析物のアナログに結合するタンパク質である、請求項１に記載の方法。
【請求項２８】
請求項１の方法によって分離された、[C-1]当該複合体Aの量又は当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の標識CFSの量、[C-2]当該複合体A'の量又は当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の標識アナログの量、或いは[C-3]当該複合体A''の量、又は当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の標識CFSの量又は／及び分析物と標識CFSを含む複合体B''の量、を測定し、その結果に基づいて分析物の量を求めるか、または、請求項１４の方法により分離された、当該複合体Aの量、当該複合体A'の量、または当該複合体A''の量を測定し、その結果に基づいて分析物の量を求めること、を特徴とする分析物の測定方法。
【請求項２９】
以下の工程(1)〜(5)を含む請求項２８に記載の分析物の測定方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-3]の何れかの溶液を導入する工程、
[I-1] (a)血液由来試料中の分析物、(b)１種以上の移動度変化CFS及び(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a)〜(c)を含む複合体A及び当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFSを含有する溶液、
[I-2] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSを接触して得られる、これら(a')及び(b)を含む複合体A'、及び(a)血液由来試料中の分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSを接触して得られる、これら(a)及び(b)を含む複合体B'、及び当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログを含有する溶液、
[I-3] (a'')移動度変化アナログと(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a'')及び(c)を含む複合体A''、(a)血液由来試料中の分析物と(c)１種以上の標識CFSを接触して得られる、これら(a)及び(c)を含む複合体B''、及び当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFSを含有する溶液；
(2)当該複合体A、当該複合体A'又は当該複合体A''を、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、下記[A-1]〜[A-3]の何れかの分離を行う工程、
[A-1] (i)当該複合体Aと、(ii)当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-2] (i)当該複合体A'と、(ii)当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログ及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-3] (i)当該複合体A''と、(ii)当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS又は／及び当該複合体B''、及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離；
(3)TBゾーンの下流側に位置する、前記工程(2)によって形成された下記[B-1]〜[B-3]の何れかに記載の組合せからなるゾーンを、CZE又はCGEを行わせる細管内の２つのLBゾーンの間に導入する工程、
[B-1] 当該複合体Aを含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン、
[B-2] 当該複合体A'を含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン、
[B-3] 当該複合体A''を含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン；
(4)CZE又はCGEによって、当該細管に電圧を印加することによって、当該複合体A、当該複合体A'又は当該複合体A''と血液由来試料中の共存物質とを更に分離する工程；
および
(5)分離された複合体Aの量、当該複合体A'の量又は当該複合体A''の量を測定し、その結果に基づいて分析物の量を求める工程。
【請求項３０】
以下の工程(1)〜(5)を含む請求項２８に記載の分析物の測定方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-2]の何れかに記載の組合せからなる複数の溶液を、これらの溶液を予め混合することなく且つそれぞれ別々のゾーンとなるように導入する工程、
[I-1] 1)１種以上の標識CFSを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-2] 1)分析物を含む血液由来試料と１種以上の標識CFSを含有する溶液および2)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液；
(2)MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、下記[II-1]又は[II-2]の方法により形成させた下記複合体Aを、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、[A](i)当該複合体Aと、(ii)当該複合体Aの形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS及び(iii)血液由来試料中の共存物質とを分離する工程、
[II-1] (a)当該分析物、(b)１種以上の移動度変化CFS、及び(c)１種以上の標識CFSを接触させて、これら(a)〜(c)を含む複合体Aを形成させる、
[II-2] (a)当該分析物及び(c)１種以上の標識CFSを含む複合体と、(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)〜(c)を含む複合体Aを形成させる；
(3)TBゾーンの下流側に位置する、前記工程(2)によって形成された下記[B]に記載の組合せからなるゾーンを、CZE又はCGEを行わせる細管内の２つのLBゾーンの間に導入する工程、
[B] 当該複合体Aを含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン；
(4)CZE又はCGEによって、当該細管に電圧を印加することによって、当該複合体Aと血液由来試料中の共存物質とを更に分離する工程；
および
(5)分離された複合体Aの量を測定し、その結果に基づいて分析物の量を求める工程。
【請求項３１】
以下の工程(1)〜(5)を含む請求項２８に記載の分析物の測定方法。
(1)ITPを行わせる細管内のLBゾーンとTBゾーンの間に、下記の[I-1]〜[I-7]の何れかに記載の組合せからなる複数の溶液を、これらの溶液を予め混合することなく且つそれぞれ別々のゾーンとなるように導入する工程、
[I-1] 1)分析物を含む血液由来試料と標識アナログを含有する溶液および2)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-2] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および2)標識アナログと１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-3] 1)標識アナログを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料と１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-4] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液、2)標識アナログを含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-5] 1)標識アナログを含有する溶液、2)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および3)１種以上の移動度変化CFSを含有する溶液、
[I-6] 1)分析物を含む血液由来試料を含有する溶液および2)移動度変化アナログと１種以上の標識CFSを含有する溶液、
[I-7] 1)分析物を含む血液由来試料と１種以上の標識CFSを含有する溶液および2)移動度変化アナログを含有する溶液；
(2)MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンの存在下、ITPによって、下記[II-1]〜[II-7]の何れかの方法により形成させた下記複合体A'または下記複合体A''を、TBゾーンの下流側で濃縮すると共に、下記[A-1]又は[A-2]の何れかの分離を行う工程、
[II-1] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させ、また、(a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-2] (a)当該分析物と、前記[I-2] 2)の溶液中に存在する、(a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとの複合体A'とを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-3] (a')標識アナログと、前記[I-3] 2)の溶液中に存在する、(a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとの複合体B'とを接触させ、又は／及び(a')当該標識アナログと複合体B'の形成に関与しなかった(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させる、
[II-4] (a')標識アナログと(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)との複合体A'を形成させ、次いで、(a)当該分析物と当該複合体A'とを接触させて、これら(a)及び(b)を含む複合体B'を形成させる、
[II-5] (a)当該分析物と(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a)及び(b)との複合体B'を形成させ、次いで、(a')標識アナログと当該複合体B'とを接触させ、又は／及び(a')標識アナログと複合体B'の形成に関与しなかった(b)１種以上の移動度変化CFSとを接触させて、これら(a')及び(b)を含む複合体A'を形成させる、
[II-6] (a)当該分析物と、前記[I-6] 2)の溶液中に存在する、(a'')移動度変化アナログと(c)１種以上の標識CFSとの複合体A''とを接触させて、これら(a)及び(c)を含む複合体B''を形成させる、
[II-7] (a'')移動度変化アナログと、前記[I-7] 1)の溶液中に存在する、(a)当該分析物と(c)１種以上の標識CFSとの複合体B''とを接触させ、又は／及び(a'')移動度変化アナログと複合体B''の形成に関与しなかった(c)１種以上の標識CFSとを接触させて、これら(a'')及び(c)を含む複合体A''を形成させる、
[A-1] (i)当該複合体A'と、(ii)当該複合体A'の形成に関与しなかった遊離の(a')標識アナログ及び(iii)血液由来試料中の共存物質との分離、
[A-2] (i)当該複合体A''と、(ii)当該複合体A''の形成に関与しなかった遊離の(c)標識CFS又は／及び複合体B''、及び(iii)血液由来試料中の共存物質とを分離；
(3)TBゾーンの下流側に位置する、前記工程(2)によって形成された下記[B-1]又は[B-2]の何れかに記載の組合せからなるゾーンを、CZE又はCGEを行わせる細管内の２つのLBゾーンの間に導入する工程、
[B-1] 当該複合体A'を含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン、
[B-2] 当該複合体A''を含むゾーン、MESイオン又は／及びグルタミン酸イオンを含むゾーン及び血液由来試料中の共存物質を含むゾーン；
(4)CZE又はCGEによって、当該細管に電圧を印加することによって、当該複合体A'又は当該複合体A''と血液由来試料中の共存物質とを更に分離する工程；
および
(5)分離された当該複合体A'の量又は当該複合体A''の量を測定し、その結果に基づいて分析物の量を求める工程。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【公開番号】特開２０１０−２７６６０１（Ｐ２０１０−２７６６０１Ａ）
【公開日】平成２２年１２月９日（２０１０．１２．９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−９７９２３（Ｐ２０１０−９７９２３）
【出願日】平成２２年４月２１日（２０１０．４．２１）
【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第１項適用申請有り 掲載年月日：平成２１年２月２６日 掲載アドレス： ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｓｃｉｅｎｃｅｄｉｒｅｃｔ．ｃｏｍ／ｓｃｉｅｎｃｅ？＿ｏｂ＝ＡｒｔｉｃｌｅＵＲＬ＆＿ｕｄｉ＝Ｂ６Ｗ９Ｖ−４ＶＰＶ５ＨＭ−６＆＿ｕｓｅｒ＝１０＆＿ｃｏｖｅｒＤａｔｅ＝０２％２Ｆ２７％２Ｆ２００９＆＿ａｌｉｄ＝８８８５８７５１０＆＿ｒｄｏｃ＝１＆＿ｆｍｔ＝ｈｉｇｈ＆＿ｏｒｉｇ＝ｓｅａｒｃｈ＆＿ｃｄｉ＝６６９２＆＿ｓｏｒｔ＝ｄ＆＿ｄｏｃａｎｃｈｏｒ＝＆ｖｉｅｗ＝ｃ＆＿ｃｔ＝１＆＿ａｃｃｔ＝Ｃ００００５０２２１＆＿ｖｅｒｓｉｏｎ＝１＆＿ｕｒｌＶｅｒｓｉｏｎ＝０＆＿ｕｓｅｒｉｄ＝１０＆ｍｄ５＝ｃ５３９ａ２１ｄ８ｅａｆ８０ｆｅ１２ａ８６９４８９０１ｂ７０ａｅ
【出願人】（０００２５２３００）和光純薬工業株式会社 (105)
【公開日】平成２２年１２月９日（２０１０．１２．９）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年４月２１日（２０１０．４．２１）
【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第１項適用申請有り 掲載年月日：平成２１年２月２６日 掲載アドレス： ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｓｃｉｅｎｃｅｄｉｒｅｃｔ．ｃｏｍ／ｓｃｉｅｎｃｅ？＿ｏｂ＝ＡｒｔｉｃｌｅＵＲＬ＆＿ｕｄｉ＝Ｂ６Ｗ９Ｖ−４ＶＰＶ５ＨＭ−６＆＿ｕｓｅｒ＝１０＆＿ｃｏｖｅｒＤａｔｅ＝０２％２Ｆ２７％２Ｆ２００９＆＿ａｌｉｄ＝８８８５８７５１０＆＿ｒｄｏｃ＝１＆＿ｆｍｔ＝ｈｉｇｈ＆＿ｏｒｉｇ＝ｓｅａｒｃｈ＆＿ｃｄｉ＝６６９２＆＿ｓｏｒｔ＝ｄ＆＿ｄｏｃａｎｃｈｏｒ＝＆ｖｉｅｗ＝ｃ＆＿ｃｔ＝１＆＿ａｃｃｔ＝Ｃ００００５０２２１＆＿ｖｅｒｓｉｏｎ＝１＆＿ｕｒｌＶｅｒｓｉｏｎ＝０＆＿ｕｓｅｒｉｄ＝１０＆ｍｄ５＝ｃ５３９ａ２１ｄ８ｅａｆ８０ｆｅ１２ａ８６９４８９０１ｂ７０ａｅ
【出願人】（０００２５２３００）和光純薬工業株式会社 (105)
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