等電点電気泳動ゲルチップ及びその使用方法
【課題】二次元目電気泳動ゲルカセットに再現よく、平易に設置可能な等電点電気泳動ゲル及びその使用方法を提供すること。
【解決手段】第一の接着層を介して矩形あるいは折り曲げ可能な基材の表面に等電点電気泳動ゲルを設けた等電点電気泳動ゲルチップであって、等電点電気泳動ゲルチップの前記基材の外形によって、二次元目電気泳動ゲルカセットへの設置位置が定められ、第一の接着層が設けられた前記基材の他方の面に設けられた第二の接着層により前記等電点電気泳動ゲルチップが二次元目電気泳動ゲルカセットに固定される。
【解決手段】第一の接着層を介して矩形あるいは折り曲げ可能な基材の表面に等電点電気泳動ゲルを設けた等電点電気泳動ゲルチップであって、等電点電気泳動ゲルチップの前記基材の外形によって、二次元目電気泳動ゲルカセットへの設置位置が定められ、第一の接着層が設けられた前記基材の他方の面に設けられた第二の接着層により前記等電点電気泳動ゲルチップが二次元目電気泳動ゲルカセットに固定される。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、タンパク質の等電点の違いを利用して分離し、目的タンパク質の等電点測定や分析を行う泳動手法に用いる、等電点電気泳動ゲルチップ、及びその使用方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
動植物の組織や細胞から抽出されたＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質等の生体高分子をサイズ、性状等の違いに基づいて、電気泳動ゲル中に分離する電気泳動技術は、ライフサイエンス分野において非常に重要な技術である。特にタンパク質を電気泳動によって分離する場合、タンパク質の分子量の違いに基づくＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法および等電点の違いに基づく等電点電気泳動法を組み合わせた二次元電気泳動法が広く用いられている。
【０００３】
二次元電気泳動法は、上述のようにタンパク質を荷電並びに分子量に基づいて分離することが可能であるため、分子量のみの分離方法であるＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法では難しい同一の分子量で、かつ、等電点の異なるタンパク質の発現差異を比較することも可能である。
【０００４】
そのため、ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法よりも多くの情報を得ることができるため、いつどこでどのタンパク質がどれだけ発現しているかを系統的、網羅的に解析するプロテオミクス研究において有用である。例えば、健常者と疾患患者のある組織のタンパク質の発現比較を行い、その差異を検出することにより、病理診断への応用が可能になる。そのような研究は広く行われており、将来的には、基礎研究の用途にとどまらず、臨床の場でも利用されることも期待されている。
【０００５】
上述の二次元電気泳動法で用いる等電点電気泳動ゲルとしては、作製後に長期保存が可能な固定化ｐＨ勾配ゲルが知られ、市販されており、広く用いられている。二次元電気泳動において、等電点電気泳動を実施し、平衡化処理を施した等電点電気泳動ゲルを、ピンセット等を用いて二次元目電気泳動ゲル上端部の濃縮ゲル先端部に設置、溶解したアガロース等を注ぎ込むことにより、等電点電気泳動ゲルを固定させてから二次元目の電気泳動が行われる。
【０００６】
しかし、ピンセット等で保持した等電点電気泳動ゲルを、二次元目電気泳動ゲルに設置するためには慎重に行わなければならないこと、また、アガロースを注ぐ際に、気泡を混入させないよう注意を払わなければならず、操作が煩雑である。また、これらの工程において、等電点電気泳動ゲルの二次元目電気泳動ゲルへの設置位置は、必ずしも安定しているとは言えず、微小な位置のずれは生じうる。そのことにより、電気泳動の再現性にも課題が生じうる。
【０００７】
そうした中、全自動での二次元電気泳動装置や、サンプル分離装置の提案がなされており、等電点電気泳動ゲルを二次元目電気泳動ゲルに設置する際の操作に対して改善が行われている。しかしながら、等電点電気泳動ゲルの二次元目電気泳動ゲルへの設置位置の精度は十分とは言えず、操作の簡便性の点においても不十分である。また上記装置を用いる場合、専用の等電点電気泳動ゲル並びに二次元目電気泳動ゲルカセットを使用しなければならず、使用範囲が限定されてしまっている（特許文献１、２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特許第４４４１６５３号公報
【特許文献２】特開２０１０−２８６３９４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、上記の問題点に鑑みてなされたものであり、その目的は、二次元目電気泳動ゲルカセットに再現よく、平易に設置可能な、等電点電気泳動ゲル及びその使用方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記の課題を解決するための手段として、請求項１に記載の発明は、第一の接着層を介して矩形あるいは折り曲げ可能な基材の表面に等電点電気泳動ゲルを設けた等電点電気泳動ゲルチップであって、等電点電気泳動ゲルチップの前記基材の外形によって、二次元目電気泳動ゲルカセットへの設置位置が定められ、第一の接着層が設けられた前記基材の他方の面に設けられた第二の接着層により前記等電点電気泳動ゲルチップが二次元目電気泳動ゲルカセットに固定されることを特徴とする等電点電気泳動ゲルチップである。
【００１１】
また、請求項２に記載の発明は、前記等電点電気泳動ゲルチップの基材に、二次元目電気泳動ゲルカセットの設置位置固定用に設けられた差込孔又は溝に、挿入又ははめ合わせる形状に加工が施されていることを特徴とする請求項１に記載の等電点電気泳動ゲルチップである。
【００１２】
また、請求項３に記載の発明は、前記基材及び接着層に、折り曲げるための切り込みを、接着層と基材にまたがり設けたことを特徴とする請求項１に記載の等電点電気泳動ゲルチップである。
【００１３】
また、請求項４に記載の発明は、請求項１から３のいずれか一項に記載の、等電点電気泳動ゲルチップの等電点電気泳動ゲルを、二次元目電気泳動カセットの二次元目電気泳動ゲルに密着させる工程、接着層を介して等電点電気泳動ゲルチップを二次元目電気泳動カセットに固定させる工程を備えることを特徴とする等電点電気泳動ゲルチップの使用方法である。
【発明の効果】
【００１４】
矩形の支持構造、あるいは可変可能な支持フィルムを有する等電点電気泳動ゲルチップを用いることにより、接着層を介して容易に、且つ再現よく二次元目電気泳動ゲルカセットへ設置することが可能となる。またそのことにより、再現のよい電気泳動像を得ることが可能になる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】本発明の支持構造を有する等電点電気泳動ゲルチップの構成を示す概念図である。
【図２】本発明の支持構造を有する等電点電気泳動ゲルチップの構成を示す概念図である。
【図３】本発明の支持構造を有する等電点電気泳動ゲルチップの、折り曲げるための、基材及び接着層への切り込みの形態を示した概念図である。
【図４】本発明の支持構造を有する等電点電気泳動ゲルチップを、二次元目電気泳動ゲルカセットへの使用方法の一例を示す概念図である。
【図５】本発明の支持構造を有する等電点電気泳動ゲルチップを、二次元目電気泳動ゲルカセットへの使用方法の一例を示す概念図である。
【図６】本発明の支持構造を有する等電点電気泳動ゲルチップを、二次元目電気泳動ゲルカセットへの使用方法の一例を示す概念図である。
【図７】本発明の支持構造を有する等電点電気泳動ゲルチップを、二次元目電気泳動ゲルカセットへの使用方法の一例を示す概念図である。
【図８】本発明の支持構造を有する等電点電気泳動ゲルチップを、二次元目電気泳動ゲルカセットへの使用方法の一例を示す概念図である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下本発明を実施するための形態を、図面を用いて詳細に説明する。図１ａ）に示した等電点電気泳動ゲルチップ１は、等電点電気泳動ゲル１ａの背面に位置する支持フィルム１ｃと支持基材１ｅが、接着層１ｄを介して一体化した構造をなす。また支持基材１ｅにおいて、等電点電気泳動ゲル１ａが接着されている部分の反対側端部に、移動時に運搬するための持ち手１ｈが一体形成されている。さらに、支持基材１ｅは凹部を形成しており、この凹部に二次元目電気泳動ゲルカセット基材を嵌め込む構造をとる。
【００１７】
その際、支持基材１ｅ内壁の一端面、等電点電気泳動ゲル１ａに接着されている基材の対面に設置されている接着層１ｆを介して、二次元目電気泳動ゲルカセット基材に密着させる。なお、等電点電気泳動ゲル表面保護フィルム１ｂは使用直前、すなわち、タンパク質試料導入及び等電点電気泳動ゲル膨潤の工程直前に、接着層保護フィルム１ｇは等電点電気泳動及び等電点電気泳動ゲルの平衡化処理後、二次元目電気泳動ゲルカセットに設置する直前に剥がす。
【００１８】
また、凹部の深い支持基材２ｅを有する等電点電気泳動ゲルチップ２（図１ｂ））を用いてもよい。なお、等電点電気泳動ゲルチップ１あるいは２を用いての二次元目電気泳動ゲルカセットへの設置方法については後で詳しく記載する。
【００１９】
さらに、等電点電気泳動ゲルチップ１とほぼ同一形状の等電点電気泳動ゲルチップ３（図１ｃ））のように、二次元目電気泳動ゲルカセット基材に固定させるための接着層３ｆが、支持基材３ｅがなす凹部の奥、即ち、二次元目電気泳動ゲルカセット基材の先端部が密着する位置に配置されていてもよい。
【００２０】
加えて、図２ａ）に示すような形態の等電点電気泳動ゲルチップを用いてもよい。図２ａ）に示した等電点電気泳動ゲルチップ４では、支持基材４ｅは等電点電気泳動ゲル１ａとほぼ同一の、平板状の構造をなす。平板状の支持基材４ｅの一端面には、垂直方向に可変可能な支持フィルム４ｆが設置されている。この支持フィルムを折り曲げて、支持フィルム４ｆ上に設置されている接着層４ｇを介して二次元目電気泳動ゲルカセット基材に接着、等電点電気泳動ゲルチップを固定させる仕組みをとる。
【００２１】
そして、図２ｂ）に示すような、等電点電気泳動ゲルチップ４における支持基材４ｅと支持フィルム４ｆを一体化した形態の、支持フィルム（５ｅ）を有する等電点電気泳動ゲルチップ５を用いてもよい。
【００２２】
＜等電点電気泳動ゲル＞
本発明に係る等電点電気泳動ゲルチップに用いる等電点電気泳動ゲルとしては、背面に支持基材と接着することが可能な支持フィルムを有する等電点電気泳動ゲルを用いることが可能で、広く市販されている固定化ｐＨ勾配ゲルを用いることができる。
【００２３】
＜支持基材＞
本発明に係る等電点電気泳動ゲルチップに備わる支持基材の材質としては、ポリカーボネート、ポリエチレンテレフタレート、ポリプロピレン、ポリスチレン、アクリル等の材
質のものを使用することが可能であり、特に限定されない。
【００２４】
ここで、本発明に係る等電点電気泳動ゲルチップを構成する支持基材及び接着層について説明する。図２に示した等電点電気泳動ゲルチップ４ないしは５を、二次元目電気泳動ゲルカセット基材に接着層を介して設置させる際、支持フィルムを折り曲げる必要があるが、設置後にフィルム素材の可塑性が働き、支持フィルムが撓むことにより、等電点電気泳動ゲルの設置位置がずれる、あるいは外れてしまう恐れがある。
【００２５】
等電点電気泳動ゲルチップ４を構成する支持フィルム４ｆ及び接着層４ｇ（図３ａ））の拡大図をそれぞれ図３ｂに示す。支持フィルム４ｆの表面に、切り込み４ｊが設置されることにより（図３ｂ））、支持フィルム４ｆの折り曲げが容易になるとともに、撓みの生じる可能性が低減する。あるいは、図３ｃに示すように、接着層と支持フィルムにわたり切り込み４ｋが設置されていてもよく、同様の効果が期待される。なお、等電点電気泳動ゲルチップ５を構成する支持フィルム５ｅ及び接着層５ｆも同一の構造をなす。
【００２６】
＜支持フィルム＞
本発明に係る等電点電気泳動ゲルチップに備えられる支持フィルムは、ポリオレフィン、ポリプロピレン、ポリ塩化ビニル、ポリエステル、ポリエチレンテレフタレート等の材質を適宣選択する。また、ラミネートされたものでもよく、ラミネートすることによりフィルム素材の耐久性も向上する。ただし、二次元目電気泳動ゲルカセットへの等電点電気泳動ゲルチップの固定時に、支持フィルムを折り曲げるため、その際に割れない素材であることが好ましい。
【００２７】
＜接着層＞
本発明に係る等電点電気泳動ゲルチップに用いられる接着層の材質は、公知の一般強粘または強粘の材質のもので差し支えないが、等電点電気泳動ゲル背面支持フィルムと基材との間の接着部分、及び等電点電気泳動ゲルチップの二次元目電気泳動ゲルカセット基材への接着部分いずれもが、二次元目の電気泳動において用いられる電気泳動バッファーにさらされるため、耐水性を有するものが好ましい。なお市販のものも含めて、作製した等電点電気泳動ゲルチップは−２０℃の低温下で保管するため、低温耐性を備えているものがより好ましい。
【００２８】
加えて、二次元目電気泳動ゲルカセットに固定させるための接着層に関しては、上述のものでも差し支えないが、設置位置の正確性並びに安定性を増すために張り直しが可能な、着脱可能な材質のものを用いてもよい。
【００２９】
＜二次元目電気泳動ゲルカセット＞
本発明に用いる二次元目電気泳動用ゲルカセットとしては、市販されているプレキャストゲル、並びにガラス板あるいはアクリル板等で自作したゲルカセットを用いることが可能で、特に限定されない。また、特許文献１に記載の、電気泳動槽を備えた電気泳動用ゲルカセットにのみならず、特許文献２に記載の、等電点電気泳動ゲルチップを固定させるための差込孔又は溝構造が設置された二次元目電気泳動ゲルカセットを用いても差し支えない。
【００３０】
以下、本発明に係る、支持基材ならびに接着層を有する等電点電気泳動ゲルチップを用いた一実施態様について説明する。
【００３１】
本発明の等電点電気泳動ゲルチップを用いた一実施態様を図４に示す。等電点電気泳動ゲルチップ１を、二次元目電気泳動ゲルカセット基材１（６ｂ）に、等電点電気泳動ゲルチップ１の支持基材１ｅがなす凹部に嵌めこむ（図４ａ））。なお、この段階においては
、支持基材１ｅ内壁に設置してある接着層１ｆが二次元目電気泳動ゲルカセット基材１（６ｂ）に接着しないよう注意する。支持基材１ｅがなす凹部の奥と、二次元目電気泳動ゲルカセット基材１（６ｂ）の先端部分が接触したら、二次元目電気泳動ゲルカセット平面に対して垂直方向に等電点電気泳動ゲルチップ１を押し込むことにより（図４ｂ））、支持基材１ｅ内壁に設置してある接着層１ｆを介して、等電点電気泳動ゲルチップ１と二次元目電気泳動ゲルカセット６が密着、固定される（図４ｃ））。
【００３２】
この操作により、等電点電気泳動ゲル１ａの側端面と二次元目電気泳動ゲル（６ａ）が密着されるのと同時に、等電点電気泳動ゲル１ａの表面と二次元目電気泳動ゲルカセット基材２（６ｄ）が密着される。
【００３３】
上述の図４ａ）〜ｃ）においては、縦方向の長さが短い二次元目電気泳動ゲルカセット基材１（６ｂ）に等電点電気泳動ゲルチップ１を設置した態様を示したが、支持基材２ｅがなす凹部の深い等電点電気泳動ゲルチップ２を用いることにより、縦方向の長さが長い二次元目電気泳動ゲルカセット基材２（６ｃ）に、上述の図４ａ）〜ｃ）と同様の工程にて設置させることが可能である。（図４ｄ）〜ｆ））。
【００３４】
上述のように、等電点電気泳動ゲルチップ１を二次元目電気泳動ゲルカセット６に設置した際に、等電点電気泳動ゲル１ａの表面は二次元目電気泳動ゲルカセット基材２（６ｃ）と密着した状態になる。それとは反対に、等電点電気泳動ゲルチップ１を、等電点電気泳動ゲル１ａの接着されている基材側と二次元目電気泳動ゲルカセット基材１を接着、図４ｂ）のような形態で固定させることも可能ではある。
【００３５】
しかしながらそのような設置方法を行った場合、等電点電気泳動ゲル１ａの表面が二次元目の電気泳動を実施する際、電気泳動バッファーにさらされるため、等電点電気泳動により分離されたタンパク質が溶出、結果的に電気泳動を行う際に、二次元目電気泳動ゲルに移動するタンパク質量や電気泳動像の再現性に影響を与える恐れがある。よって、図４ａ）〜ｃ）の工程を行うことが好ましく、これ以降においてもそれに準じた形式で説明する。
【００３６】
図５では、等電点電気泳動ゲルチップ３を用いた場合の一実施態様を示す。二次元目電気泳動用ゲルカセット基材１（６ｂ）に、接着層３ｆにより密着しない位置まで等電点電気泳動ゲルチップ３を設置（図５ａ））、次に、等電点電気泳動ゲル３ａを二次元目電気泳動用ゲルカセット基材３ｃにほぼ密着させる（図５ｂ））。
【００３７】
そして等電点電気泳動ゲルチップ３を二次元目電気泳動ゲル６ｃに向けて移動させることにより（図５ｃ））、等電点電気泳動ゲル３ａの側端面を二次元目電気泳動ゲル６ｃに密着させるのと同時に、支持基材３ｅを、接着層３ｆを介して、二次元目電気泳動ゲルカセット基材１（６ｂ）に固定させる（図５ｄ））。
【００３８】
図６及び図７は、等電点電気泳動ゲルチップ４又は５の使用方法について示したものである。図６は、等電点電気泳動ゲルチップ４あるいは５のいずれかを用いての一実施態様を示す。なお、等電点電気泳動ゲルチップ５を用いる場合には、予め支持フィルム５ｅを直角に折り曲げて等電点電気泳動ゲルチップ４と同様な形態にしておく。
【００３９】
二次元目電気泳動用ゲルカセット基材１（６ｂ）に、接着層４ｇ又は５ｆにより密着しないように等電点電気泳動ゲルチップ４ないしは５を設置（図６ａ））、次に、等電点電気泳動ゲル４ａないしは５ａの表面を、二次元目電気泳動ゲルカセット基材６ｃに接するように、強く密着させないように配置させる（図６ｂ））。
【００４０】
そして、水平方向に向けて等電点電気泳動ゲルチップ４ないしは５を、等電点電気泳動ゲル４ａないしは５ａの側端面が二次元目電気泳動ゲル６ａに接触するように二次元目電気泳動用ゲル６ａに押し付け、同時に支持フィルム４ｆないしは５ｅと二次元目電気泳動用ゲルカセット基材１（６ｂ）の先端部を接着層４ｇ又は５ｆにより固定させる（図６ｃ））。さらに、支持フィルム４ｆないしは５ｅを折り曲げて、二次元目電気泳動用ゲルカセット基材１（６ｂ）表面に接着層４ｇ又は５ｆにより密着させることで（図６ｄ））、等電点電気泳動ゲルチップ４ないしは５の二次元目電気泳動用ゲルカセット６への設置を確実なものとする（図６ｅ））。
【００４１】
図７は、厚い基材を有する二次元目電気泳動ゲルカセット７に、等電点電気泳動ゲルチップ４ないしは５を用いて設置させる場合の一実施態様を示す。二次元目電気泳動ゲルカセット７は二次元目電気泳動ゲルカセット６と比較すると厚い基材を有するが、等電点電気泳動ゲルチップ４ないしは５は可変可能な支持フィルム４ｆないしは５ｅを有するため、上述した図６における工程と同様にして、等電点電気泳動ゲルチップ４あるいは５を二次元目電気泳動用ゲルカセット７に設置することが可能である。
【００４２】
図８は、二次元目電気泳動ゲルカセット６あるいは７と比較して、二次元目電気泳動ゲルの縦方向の長さが短い二次元目電気泳動ゲルカセット８に、等電点電気泳動ゲルチップ５を用いて設置させる場合の一実施態様を示す。等電点電気泳動ゲルチップ５は、等電点電気泳動ゲル表面に対して水平に、かつ、全長にわたり可変可能な支持フィルム５ｅを備えているため、上述の二次元目電気泳動ゲルカセット８にも設置可能である。
【００４３】
上述した図６ないしは図７における手順と同様にして、等電点電気泳動ゲルチップ５を二次元目電気泳動用ゲルカセット７に設置することが可能である。なお、二次元目電気泳動ゲルカセット基材１（８ｂ）の先端部から二次元目電気泳動ゲル８ａの先端部までの距離が明確であれば、図６ないしは図７に示したように、予め支持フィルム５ｅを直角に折り曲げておいても差し支えない。
【００４４】
このように、本発明に係る等電点電気泳動ゲルチップを用いることにより、ピンセット等の器具を使用することなく、また、溶解したアガロース溶液により固定させることなく、容易に二次元目電気泳動ゲルカセットに設置させることが可能となる。また、等電点電気泳動ゲルチップに備える支持基材の矩形の形状、あるいは可変可能な支持フィルムにより、等電点電気泳動ゲルを二次元目電気泳動ゲルカセットに、安定して再現よく設置させることが可能となる。このことは、電気泳動像の再現性の向上に寄与しうる。
【００４５】
本発明は上述した実施形態に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能である。すなわち、請求項に示した範囲で適宜変更した技術的手段を組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。
【産業上の利用可能性】
【００４６】
本発明を用いれば、特にプロテオミクス等において、等電点電気泳動ゲルチップを二次元目電気泳動ゲルカセットへの設置を平易に、再現よく行うことが可能になり、その結果、再現のある電気泳動像を得ることが可能になる。さらに、ＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質等の生体高分子の研究をより発展させることによって、特に医学、生物学、化学分野の産業の発展に貢献し得る。
【符号の説明】
【００４７】
１・・・等電点電気泳動ゲルチップ
１ａ・・・等電点電気泳動ゲル
１ｂ・・・等電点電気泳動ゲル表面保護フィルム
１ｃ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム
１ｄ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム―支持基材間接着層
１ｅ・・・支持基材
１ｆ・・・接着層
１ｇ・・・接着層保護フィルム
１ｈ・・・持ち手
２・・・等電点電気泳動ゲルチップ
２ａ・・・等電点電気泳動ゲル
２ｂ・・・等電点電気泳動ゲル表面保護フィルム
２ｃ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム
２ｄ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム―支持基材間接着層
２ｅ・・・支持基材
２ｆ・・・接着層
２ｇ・・・接着層保護フィルム
２ｈ・・・持ち手
３・・・等電点電気泳動ゲルチップ
３ａ・・・等電点電気泳動ゲル
３ｂ・・・等電点電気泳動ゲル表面保護フィルム
３ｃ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム
３ｄ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム―支持基材間接着層
３ｅ・・・支持基材
３ｆ・・・接着層
３ｇ・・・接着層保護フィルム
３ｈ・・・持ち手
４・・・等電点電気泳動ゲルチップ
４ａ・・・等電点電気泳動ゲル
４ｂ・・・等電点電気泳動ゲル表面保護フィルム
４ｃ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム
４ｄ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム―支持基材間接着層
４ｅ・・・支持基材
４ｆ・・・支持フィルム
４ｇ・・・接着層
４ｈ・・・接着層保護フィルム
４ｉ・・・持ち手
４ｊ・・・支持フィルム切り込み
４ｋ・・・接着層―支持フィルム切り込み
５・・・等電点電気泳動ゲルチップ
５ａ・・・等電点電気泳動ゲル
５ｂ・・・等電点電気泳動ゲル表面保護フィルム
５ｃ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム
５ｄ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム―支持基材間接着層
５ｅ・・・支持フィルム
５ｆ・・・接着層
５ｇ・・・接着層保護フィルム
５ｈ・・・持ち手
５ｉ・・・支持フィルム切り込み
５ｊ・・・接着層―支持フィルム切り込み
６・・・二次元目電気泳動ゲルカセット
６ａ・・・二次元目電気泳動ゲル
６ｂ・・・二次元目電気泳動ゲルカセット基材１
６ｃ・・・二次元目電気泳動ゲルカセット基材２
７・・・二次元目電気泳動ゲルカセット
７ａ・・・二次元目電気泳動ゲル
７ｂ・・・二次元目電気泳動ゲルカセット基材１
７ｃ・・・二次元目電気泳動ゲルカセット基材２
８・・・二次元目電気泳動ゲルカセット
８ａ・・・二次元目電気泳動ゲル
８ｂ・・・二次元目電気泳動ゲルカセット基材１
８ｃ・・・二次元目電気泳動ゲルカセット基材２
【技術分野】
【０００１】
本発明は、タンパク質の等電点の違いを利用して分離し、目的タンパク質の等電点測定や分析を行う泳動手法に用いる、等電点電気泳動ゲルチップ、及びその使用方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
動植物の組織や細胞から抽出されたＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質等の生体高分子をサイズ、性状等の違いに基づいて、電気泳動ゲル中に分離する電気泳動技術は、ライフサイエンス分野において非常に重要な技術である。特にタンパク質を電気泳動によって分離する場合、タンパク質の分子量の違いに基づくＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法および等電点の違いに基づく等電点電気泳動法を組み合わせた二次元電気泳動法が広く用いられている。
【０００３】
二次元電気泳動法は、上述のようにタンパク質を荷電並びに分子量に基づいて分離することが可能であるため、分子量のみの分離方法であるＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法では難しい同一の分子量で、かつ、等電点の異なるタンパク質の発現差異を比較することも可能である。
【０００４】
そのため、ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法よりも多くの情報を得ることができるため、いつどこでどのタンパク質がどれだけ発現しているかを系統的、網羅的に解析するプロテオミクス研究において有用である。例えば、健常者と疾患患者のある組織のタンパク質の発現比較を行い、その差異を検出することにより、病理診断への応用が可能になる。そのような研究は広く行われており、将来的には、基礎研究の用途にとどまらず、臨床の場でも利用されることも期待されている。
【０００５】
上述の二次元電気泳動法で用いる等電点電気泳動ゲルとしては、作製後に長期保存が可能な固定化ｐＨ勾配ゲルが知られ、市販されており、広く用いられている。二次元電気泳動において、等電点電気泳動を実施し、平衡化処理を施した等電点電気泳動ゲルを、ピンセット等を用いて二次元目電気泳動ゲル上端部の濃縮ゲル先端部に設置、溶解したアガロース等を注ぎ込むことにより、等電点電気泳動ゲルを固定させてから二次元目の電気泳動が行われる。
【０００６】
しかし、ピンセット等で保持した等電点電気泳動ゲルを、二次元目電気泳動ゲルに設置するためには慎重に行わなければならないこと、また、アガロースを注ぐ際に、気泡を混入させないよう注意を払わなければならず、操作が煩雑である。また、これらの工程において、等電点電気泳動ゲルの二次元目電気泳動ゲルへの設置位置は、必ずしも安定しているとは言えず、微小な位置のずれは生じうる。そのことにより、電気泳動の再現性にも課題が生じうる。
【０００７】
そうした中、全自動での二次元電気泳動装置や、サンプル分離装置の提案がなされており、等電点電気泳動ゲルを二次元目電気泳動ゲルに設置する際の操作に対して改善が行われている。しかしながら、等電点電気泳動ゲルの二次元目電気泳動ゲルへの設置位置の精度は十分とは言えず、操作の簡便性の点においても不十分である。また上記装置を用いる場合、専用の等電点電気泳動ゲル並びに二次元目電気泳動ゲルカセットを使用しなければならず、使用範囲が限定されてしまっている（特許文献１、２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特許第４４４１６５３号公報
【特許文献２】特開２０１０−２８６３９４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、上記の問題点に鑑みてなされたものであり、その目的は、二次元目電気泳動ゲルカセットに再現よく、平易に設置可能な、等電点電気泳動ゲル及びその使用方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記の課題を解決するための手段として、請求項１に記載の発明は、第一の接着層を介して矩形あるいは折り曲げ可能な基材の表面に等電点電気泳動ゲルを設けた等電点電気泳動ゲルチップであって、等電点電気泳動ゲルチップの前記基材の外形によって、二次元目電気泳動ゲルカセットへの設置位置が定められ、第一の接着層が設けられた前記基材の他方の面に設けられた第二の接着層により前記等電点電気泳動ゲルチップが二次元目電気泳動ゲルカセットに固定されることを特徴とする等電点電気泳動ゲルチップである。
【００１１】
また、請求項２に記載の発明は、前記等電点電気泳動ゲルチップの基材に、二次元目電気泳動ゲルカセットの設置位置固定用に設けられた差込孔又は溝に、挿入又ははめ合わせる形状に加工が施されていることを特徴とする請求項１に記載の等電点電気泳動ゲルチップである。
【００１２】
また、請求項３に記載の発明は、前記基材及び接着層に、折り曲げるための切り込みを、接着層と基材にまたがり設けたことを特徴とする請求項１に記載の等電点電気泳動ゲルチップである。
【００１３】
また、請求項４に記載の発明は、請求項１から３のいずれか一項に記載の、等電点電気泳動ゲルチップの等電点電気泳動ゲルを、二次元目電気泳動カセットの二次元目電気泳動ゲルに密着させる工程、接着層を介して等電点電気泳動ゲルチップを二次元目電気泳動カセットに固定させる工程を備えることを特徴とする等電点電気泳動ゲルチップの使用方法である。
【発明の効果】
【００１４】
矩形の支持構造、あるいは可変可能な支持フィルムを有する等電点電気泳動ゲルチップを用いることにより、接着層を介して容易に、且つ再現よく二次元目電気泳動ゲルカセットへ設置することが可能となる。またそのことにより、再現のよい電気泳動像を得ることが可能になる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】本発明の支持構造を有する等電点電気泳動ゲルチップの構成を示す概念図である。
【図２】本発明の支持構造を有する等電点電気泳動ゲルチップの構成を示す概念図である。
【図３】本発明の支持構造を有する等電点電気泳動ゲルチップの、折り曲げるための、基材及び接着層への切り込みの形態を示した概念図である。
【図４】本発明の支持構造を有する等電点電気泳動ゲルチップを、二次元目電気泳動ゲルカセットへの使用方法の一例を示す概念図である。
【図５】本発明の支持構造を有する等電点電気泳動ゲルチップを、二次元目電気泳動ゲルカセットへの使用方法の一例を示す概念図である。
【図６】本発明の支持構造を有する等電点電気泳動ゲルチップを、二次元目電気泳動ゲルカセットへの使用方法の一例を示す概念図である。
【図７】本発明の支持構造を有する等電点電気泳動ゲルチップを、二次元目電気泳動ゲルカセットへの使用方法の一例を示す概念図である。
【図８】本発明の支持構造を有する等電点電気泳動ゲルチップを、二次元目電気泳動ゲルカセットへの使用方法の一例を示す概念図である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下本発明を実施するための形態を、図面を用いて詳細に説明する。図１ａ）に示した等電点電気泳動ゲルチップ１は、等電点電気泳動ゲル１ａの背面に位置する支持フィルム１ｃと支持基材１ｅが、接着層１ｄを介して一体化した構造をなす。また支持基材１ｅにおいて、等電点電気泳動ゲル１ａが接着されている部分の反対側端部に、移動時に運搬するための持ち手１ｈが一体形成されている。さらに、支持基材１ｅは凹部を形成しており、この凹部に二次元目電気泳動ゲルカセット基材を嵌め込む構造をとる。
【００１７】
その際、支持基材１ｅ内壁の一端面、等電点電気泳動ゲル１ａに接着されている基材の対面に設置されている接着層１ｆを介して、二次元目電気泳動ゲルカセット基材に密着させる。なお、等電点電気泳動ゲル表面保護フィルム１ｂは使用直前、すなわち、タンパク質試料導入及び等電点電気泳動ゲル膨潤の工程直前に、接着層保護フィルム１ｇは等電点電気泳動及び等電点電気泳動ゲルの平衡化処理後、二次元目電気泳動ゲルカセットに設置する直前に剥がす。
【００１８】
また、凹部の深い支持基材２ｅを有する等電点電気泳動ゲルチップ２（図１ｂ））を用いてもよい。なお、等電点電気泳動ゲルチップ１あるいは２を用いての二次元目電気泳動ゲルカセットへの設置方法については後で詳しく記載する。
【００１９】
さらに、等電点電気泳動ゲルチップ１とほぼ同一形状の等電点電気泳動ゲルチップ３（図１ｃ））のように、二次元目電気泳動ゲルカセット基材に固定させるための接着層３ｆが、支持基材３ｅがなす凹部の奥、即ち、二次元目電気泳動ゲルカセット基材の先端部が密着する位置に配置されていてもよい。
【００２０】
加えて、図２ａ）に示すような形態の等電点電気泳動ゲルチップを用いてもよい。図２ａ）に示した等電点電気泳動ゲルチップ４では、支持基材４ｅは等電点電気泳動ゲル１ａとほぼ同一の、平板状の構造をなす。平板状の支持基材４ｅの一端面には、垂直方向に可変可能な支持フィルム４ｆが設置されている。この支持フィルムを折り曲げて、支持フィルム４ｆ上に設置されている接着層４ｇを介して二次元目電気泳動ゲルカセット基材に接着、等電点電気泳動ゲルチップを固定させる仕組みをとる。
【００２１】
そして、図２ｂ）に示すような、等電点電気泳動ゲルチップ４における支持基材４ｅと支持フィルム４ｆを一体化した形態の、支持フィルム（５ｅ）を有する等電点電気泳動ゲルチップ５を用いてもよい。
【００２２】
＜等電点電気泳動ゲル＞
本発明に係る等電点電気泳動ゲルチップに用いる等電点電気泳動ゲルとしては、背面に支持基材と接着することが可能な支持フィルムを有する等電点電気泳動ゲルを用いることが可能で、広く市販されている固定化ｐＨ勾配ゲルを用いることができる。
【００２３】
＜支持基材＞
本発明に係る等電点電気泳動ゲルチップに備わる支持基材の材質としては、ポリカーボネート、ポリエチレンテレフタレート、ポリプロピレン、ポリスチレン、アクリル等の材
質のものを使用することが可能であり、特に限定されない。
【００２４】
ここで、本発明に係る等電点電気泳動ゲルチップを構成する支持基材及び接着層について説明する。図２に示した等電点電気泳動ゲルチップ４ないしは５を、二次元目電気泳動ゲルカセット基材に接着層を介して設置させる際、支持フィルムを折り曲げる必要があるが、設置後にフィルム素材の可塑性が働き、支持フィルムが撓むことにより、等電点電気泳動ゲルの設置位置がずれる、あるいは外れてしまう恐れがある。
【００２５】
等電点電気泳動ゲルチップ４を構成する支持フィルム４ｆ及び接着層４ｇ（図３ａ））の拡大図をそれぞれ図３ｂに示す。支持フィルム４ｆの表面に、切り込み４ｊが設置されることにより（図３ｂ））、支持フィルム４ｆの折り曲げが容易になるとともに、撓みの生じる可能性が低減する。あるいは、図３ｃに示すように、接着層と支持フィルムにわたり切り込み４ｋが設置されていてもよく、同様の効果が期待される。なお、等電点電気泳動ゲルチップ５を構成する支持フィルム５ｅ及び接着層５ｆも同一の構造をなす。
【００２６】
＜支持フィルム＞
本発明に係る等電点電気泳動ゲルチップに備えられる支持フィルムは、ポリオレフィン、ポリプロピレン、ポリ塩化ビニル、ポリエステル、ポリエチレンテレフタレート等の材質を適宣選択する。また、ラミネートされたものでもよく、ラミネートすることによりフィルム素材の耐久性も向上する。ただし、二次元目電気泳動ゲルカセットへの等電点電気泳動ゲルチップの固定時に、支持フィルムを折り曲げるため、その際に割れない素材であることが好ましい。
【００２７】
＜接着層＞
本発明に係る等電点電気泳動ゲルチップに用いられる接着層の材質は、公知の一般強粘または強粘の材質のもので差し支えないが、等電点電気泳動ゲル背面支持フィルムと基材との間の接着部分、及び等電点電気泳動ゲルチップの二次元目電気泳動ゲルカセット基材への接着部分いずれもが、二次元目の電気泳動において用いられる電気泳動バッファーにさらされるため、耐水性を有するものが好ましい。なお市販のものも含めて、作製した等電点電気泳動ゲルチップは−２０℃の低温下で保管するため、低温耐性を備えているものがより好ましい。
【００２８】
加えて、二次元目電気泳動ゲルカセットに固定させるための接着層に関しては、上述のものでも差し支えないが、設置位置の正確性並びに安定性を増すために張り直しが可能な、着脱可能な材質のものを用いてもよい。
【００２９】
＜二次元目電気泳動ゲルカセット＞
本発明に用いる二次元目電気泳動用ゲルカセットとしては、市販されているプレキャストゲル、並びにガラス板あるいはアクリル板等で自作したゲルカセットを用いることが可能で、特に限定されない。また、特許文献１に記載の、電気泳動槽を備えた電気泳動用ゲルカセットにのみならず、特許文献２に記載の、等電点電気泳動ゲルチップを固定させるための差込孔又は溝構造が設置された二次元目電気泳動ゲルカセットを用いても差し支えない。
【００３０】
以下、本発明に係る、支持基材ならびに接着層を有する等電点電気泳動ゲルチップを用いた一実施態様について説明する。
【００３１】
本発明の等電点電気泳動ゲルチップを用いた一実施態様を図４に示す。等電点電気泳動ゲルチップ１を、二次元目電気泳動ゲルカセット基材１（６ｂ）に、等電点電気泳動ゲルチップ１の支持基材１ｅがなす凹部に嵌めこむ（図４ａ））。なお、この段階においては
、支持基材１ｅ内壁に設置してある接着層１ｆが二次元目電気泳動ゲルカセット基材１（６ｂ）に接着しないよう注意する。支持基材１ｅがなす凹部の奥と、二次元目電気泳動ゲルカセット基材１（６ｂ）の先端部分が接触したら、二次元目電気泳動ゲルカセット平面に対して垂直方向に等電点電気泳動ゲルチップ１を押し込むことにより（図４ｂ））、支持基材１ｅ内壁に設置してある接着層１ｆを介して、等電点電気泳動ゲルチップ１と二次元目電気泳動ゲルカセット６が密着、固定される（図４ｃ））。
【００３２】
この操作により、等電点電気泳動ゲル１ａの側端面と二次元目電気泳動ゲル（６ａ）が密着されるのと同時に、等電点電気泳動ゲル１ａの表面と二次元目電気泳動ゲルカセット基材２（６ｄ）が密着される。
【００３３】
上述の図４ａ）〜ｃ）においては、縦方向の長さが短い二次元目電気泳動ゲルカセット基材１（６ｂ）に等電点電気泳動ゲルチップ１を設置した態様を示したが、支持基材２ｅがなす凹部の深い等電点電気泳動ゲルチップ２を用いることにより、縦方向の長さが長い二次元目電気泳動ゲルカセット基材２（６ｃ）に、上述の図４ａ）〜ｃ）と同様の工程にて設置させることが可能である。（図４ｄ）〜ｆ））。
【００３４】
上述のように、等電点電気泳動ゲルチップ１を二次元目電気泳動ゲルカセット６に設置した際に、等電点電気泳動ゲル１ａの表面は二次元目電気泳動ゲルカセット基材２（６ｃ）と密着した状態になる。それとは反対に、等電点電気泳動ゲルチップ１を、等電点電気泳動ゲル１ａの接着されている基材側と二次元目電気泳動ゲルカセット基材１を接着、図４ｂ）のような形態で固定させることも可能ではある。
【００３５】
しかしながらそのような設置方法を行った場合、等電点電気泳動ゲル１ａの表面が二次元目の電気泳動を実施する際、電気泳動バッファーにさらされるため、等電点電気泳動により分離されたタンパク質が溶出、結果的に電気泳動を行う際に、二次元目電気泳動ゲルに移動するタンパク質量や電気泳動像の再現性に影響を与える恐れがある。よって、図４ａ）〜ｃ）の工程を行うことが好ましく、これ以降においてもそれに準じた形式で説明する。
【００３６】
図５では、等電点電気泳動ゲルチップ３を用いた場合の一実施態様を示す。二次元目電気泳動用ゲルカセット基材１（６ｂ）に、接着層３ｆにより密着しない位置まで等電点電気泳動ゲルチップ３を設置（図５ａ））、次に、等電点電気泳動ゲル３ａを二次元目電気泳動用ゲルカセット基材３ｃにほぼ密着させる（図５ｂ））。
【００３７】
そして等電点電気泳動ゲルチップ３を二次元目電気泳動ゲル６ｃに向けて移動させることにより（図５ｃ））、等電点電気泳動ゲル３ａの側端面を二次元目電気泳動ゲル６ｃに密着させるのと同時に、支持基材３ｅを、接着層３ｆを介して、二次元目電気泳動ゲルカセット基材１（６ｂ）に固定させる（図５ｄ））。
【００３８】
図６及び図７は、等電点電気泳動ゲルチップ４又は５の使用方法について示したものである。図６は、等電点電気泳動ゲルチップ４あるいは５のいずれかを用いての一実施態様を示す。なお、等電点電気泳動ゲルチップ５を用いる場合には、予め支持フィルム５ｅを直角に折り曲げて等電点電気泳動ゲルチップ４と同様な形態にしておく。
【００３９】
二次元目電気泳動用ゲルカセット基材１（６ｂ）に、接着層４ｇ又は５ｆにより密着しないように等電点電気泳動ゲルチップ４ないしは５を設置（図６ａ））、次に、等電点電気泳動ゲル４ａないしは５ａの表面を、二次元目電気泳動ゲルカセット基材６ｃに接するように、強く密着させないように配置させる（図６ｂ））。
【００４０】
そして、水平方向に向けて等電点電気泳動ゲルチップ４ないしは５を、等電点電気泳動ゲル４ａないしは５ａの側端面が二次元目電気泳動ゲル６ａに接触するように二次元目電気泳動用ゲル６ａに押し付け、同時に支持フィルム４ｆないしは５ｅと二次元目電気泳動用ゲルカセット基材１（６ｂ）の先端部を接着層４ｇ又は５ｆにより固定させる（図６ｃ））。さらに、支持フィルム４ｆないしは５ｅを折り曲げて、二次元目電気泳動用ゲルカセット基材１（６ｂ）表面に接着層４ｇ又は５ｆにより密着させることで（図６ｄ））、等電点電気泳動ゲルチップ４ないしは５の二次元目電気泳動用ゲルカセット６への設置を確実なものとする（図６ｅ））。
【００４１】
図７は、厚い基材を有する二次元目電気泳動ゲルカセット７に、等電点電気泳動ゲルチップ４ないしは５を用いて設置させる場合の一実施態様を示す。二次元目電気泳動ゲルカセット７は二次元目電気泳動ゲルカセット６と比較すると厚い基材を有するが、等電点電気泳動ゲルチップ４ないしは５は可変可能な支持フィルム４ｆないしは５ｅを有するため、上述した図６における工程と同様にして、等電点電気泳動ゲルチップ４あるいは５を二次元目電気泳動用ゲルカセット７に設置することが可能である。
【００４２】
図８は、二次元目電気泳動ゲルカセット６あるいは７と比較して、二次元目電気泳動ゲルの縦方向の長さが短い二次元目電気泳動ゲルカセット８に、等電点電気泳動ゲルチップ５を用いて設置させる場合の一実施態様を示す。等電点電気泳動ゲルチップ５は、等電点電気泳動ゲル表面に対して水平に、かつ、全長にわたり可変可能な支持フィルム５ｅを備えているため、上述の二次元目電気泳動ゲルカセット８にも設置可能である。
【００４３】
上述した図６ないしは図７における手順と同様にして、等電点電気泳動ゲルチップ５を二次元目電気泳動用ゲルカセット７に設置することが可能である。なお、二次元目電気泳動ゲルカセット基材１（８ｂ）の先端部から二次元目電気泳動ゲル８ａの先端部までの距離が明確であれば、図６ないしは図７に示したように、予め支持フィルム５ｅを直角に折り曲げておいても差し支えない。
【００４４】
このように、本発明に係る等電点電気泳動ゲルチップを用いることにより、ピンセット等の器具を使用することなく、また、溶解したアガロース溶液により固定させることなく、容易に二次元目電気泳動ゲルカセットに設置させることが可能となる。また、等電点電気泳動ゲルチップに備える支持基材の矩形の形状、あるいは可変可能な支持フィルムにより、等電点電気泳動ゲルを二次元目電気泳動ゲルカセットに、安定して再現よく設置させることが可能となる。このことは、電気泳動像の再現性の向上に寄与しうる。
【００４５】
本発明は上述した実施形態に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能である。すなわち、請求項に示した範囲で適宜変更した技術的手段を組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。
【産業上の利用可能性】
【００４６】
本発明を用いれば、特にプロテオミクス等において、等電点電気泳動ゲルチップを二次元目電気泳動ゲルカセットへの設置を平易に、再現よく行うことが可能になり、その結果、再現のある電気泳動像を得ることが可能になる。さらに、ＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質等の生体高分子の研究をより発展させることによって、特に医学、生物学、化学分野の産業の発展に貢献し得る。
【符号の説明】
【００４７】
１・・・等電点電気泳動ゲルチップ
１ａ・・・等電点電気泳動ゲル
１ｂ・・・等電点電気泳動ゲル表面保護フィルム
１ｃ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム
１ｄ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム―支持基材間接着層
１ｅ・・・支持基材
１ｆ・・・接着層
１ｇ・・・接着層保護フィルム
１ｈ・・・持ち手
２・・・等電点電気泳動ゲルチップ
２ａ・・・等電点電気泳動ゲル
２ｂ・・・等電点電気泳動ゲル表面保護フィルム
２ｃ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム
２ｄ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム―支持基材間接着層
２ｅ・・・支持基材
２ｆ・・・接着層
２ｇ・・・接着層保護フィルム
２ｈ・・・持ち手
３・・・等電点電気泳動ゲルチップ
３ａ・・・等電点電気泳動ゲル
３ｂ・・・等電点電気泳動ゲル表面保護フィルム
３ｃ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム
３ｄ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム―支持基材間接着層
３ｅ・・・支持基材
３ｆ・・・接着層
３ｇ・・・接着層保護フィルム
３ｈ・・・持ち手
４・・・等電点電気泳動ゲルチップ
４ａ・・・等電点電気泳動ゲル
４ｂ・・・等電点電気泳動ゲル表面保護フィルム
４ｃ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム
４ｄ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム―支持基材間接着層
４ｅ・・・支持基材
４ｆ・・・支持フィルム
４ｇ・・・接着層
４ｈ・・・接着層保護フィルム
４ｉ・・・持ち手
４ｊ・・・支持フィルム切り込み
４ｋ・・・接着層―支持フィルム切り込み
５・・・等電点電気泳動ゲルチップ
５ａ・・・等電点電気泳動ゲル
５ｂ・・・等電点電気泳動ゲル表面保護フィルム
５ｃ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム
５ｄ・・・等電点電気泳動ゲル背面支持フィルム―支持基材間接着層
５ｅ・・・支持フィルム
５ｆ・・・接着層
５ｇ・・・接着層保護フィルム
５ｈ・・・持ち手
５ｉ・・・支持フィルム切り込み
５ｊ・・・接着層―支持フィルム切り込み
６・・・二次元目電気泳動ゲルカセット
６ａ・・・二次元目電気泳動ゲル
６ｂ・・・二次元目電気泳動ゲルカセット基材１
６ｃ・・・二次元目電気泳動ゲルカセット基材２
７・・・二次元目電気泳動ゲルカセット
７ａ・・・二次元目電気泳動ゲル
７ｂ・・・二次元目電気泳動ゲルカセット基材１
７ｃ・・・二次元目電気泳動ゲルカセット基材２
８・・・二次元目電気泳動ゲルカセット
８ａ・・・二次元目電気泳動ゲル
８ｂ・・・二次元目電気泳動ゲルカセット基材１
８ｃ・・・二次元目電気泳動ゲルカセット基材２
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第一の接着層を介して矩形あるいは折り曲げ可能な基材の表面に等電点電気泳動ゲルを設けた等電点電気泳動ゲルチップであって、等電点電気泳動ゲルチップの前記基材の外形によって、二次元目電気泳動ゲルカセットへの設置位置が定められ、第一の接着層が設けられた前記基材の他方の面に設けられた第二の接着層により前記等電点電気泳動ゲルチップが二次元目電気泳動ゲルカセットに固定されることを特徴とする等電点電気泳動ゲルチップ。
【請求項２】
前記等電点電気泳動ゲルチップの基材に、二次元目電気泳動ゲルカセットの設置位置固定用に設けられた差込孔又は溝に、挿入又ははめ合わせる形状に加工が施されていることを特徴とする請求項１に記載の等電点電気泳動ゲルチップ。
【請求項３】
前記基材及び接着層に、折り曲げるための切り込みを、接着層と基材にまたがり設けたことを特徴とする請求項１に記載の等電点電気泳動ゲルチップ。
【請求項４】
請求項１から３のいずれか一項に記載の、等電点電気泳動ゲルチップの等電点電気泳動ゲルを、二次元目電気泳動カセットの二次元目電気泳動ゲルに密着させる工程、接着層を介して等電点電気泳動ゲルチップを二次元目電気泳動カセットに固定させる工程を備えることを特徴とする等電点電気泳動ゲルチップの使用方法。
【請求項１】
第一の接着層を介して矩形あるいは折り曲げ可能な基材の表面に等電点電気泳動ゲルを設けた等電点電気泳動ゲルチップであって、等電点電気泳動ゲルチップの前記基材の外形によって、二次元目電気泳動ゲルカセットへの設置位置が定められ、第一の接着層が設けられた前記基材の他方の面に設けられた第二の接着層により前記等電点電気泳動ゲルチップが二次元目電気泳動ゲルカセットに固定されることを特徴とする等電点電気泳動ゲルチップ。
【請求項２】
前記等電点電気泳動ゲルチップの基材に、二次元目電気泳動ゲルカセットの設置位置固定用に設けられた差込孔又は溝に、挿入又ははめ合わせる形状に加工が施されていることを特徴とする請求項１に記載の等電点電気泳動ゲルチップ。
【請求項３】
前記基材及び接着層に、折り曲げるための切り込みを、接着層と基材にまたがり設けたことを特徴とする請求項１に記載の等電点電気泳動ゲルチップ。
【請求項４】
請求項１から３のいずれか一項に記載の、等電点電気泳動ゲルチップの等電点電気泳動ゲルを、二次元目電気泳動カセットの二次元目電気泳動ゲルに密着させる工程、接着層を介して等電点電気泳動ゲルチップを二次元目電気泳動カセットに固定させる工程を備えることを特徴とする等電点電気泳動ゲルチップの使用方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【公開番号】特開２０１２−２０２８０９（Ｐ２０１２−２０２８０９Ａ）
【公開日】平成２４年１０月２２日（２０１２．１０．２２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−６７４８９（Ｐ２０１１−６７４８９）
【出願日】平成２３年３月２５日（２０１１．３．２５）
【出願人】（０００００３１９３）凸版印刷株式会社 (10,630)
【公開日】平成２４年１０月２２日（２０１２．１０．２２）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年３月２５日（２０１１．３．２５）
【出願人】（０００００３１９３）凸版印刷株式会社 (10,630)
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