説明

脂肪アルデヒドを生産するための方法および組成物

脂肪アルデヒドを生産するための方法および組成物(ヌクレオチド配列、アミノ酸配列、および宿主細胞を含む)が記載されている。


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【特許請求の範囲】
【請求項1】
脂肪アルデヒドを生産する方法であって、配列番号18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、114、116、118、120、または122のアミノ酸配列に対して少なくとも約80%の配列同一性を持つアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする遺伝子を宿主細胞内で発現させること、および脂肪アルデヒドを宿主細胞から単離することを含む方法。
【請求項2】
宿主細胞における脂肪酸シンターゼをコードする遺伝子の発現を修飾することをさらに含む、請求項1に記載の方法。
【請求項3】
脂肪酸シンターゼの発現を修飾することが、チオエステラーゼをコードする遺伝子を宿主細胞内で発現させることを含む、請求項2に記載の方法。
【請求項4】
宿主細胞が、野生型宿主細胞と比較して減弱したレベルの脂肪酸分解酵素を発現するように遺伝子改変されている、請求項1に記載の方法。
【請求項5】
脂肪アルデヒドを生産する方法であって、(i)配列番号16のアミノ酸配列に対して少なくとも約80%の配列同一性を持つアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする遺伝子と、(ii)組換え脂肪酸シンターゼをコードする遺伝子とを、宿主細胞内で発現させること;および脂肪アルデヒドを宿主細胞から単離することを含む方法。
【請求項6】
脂肪アルデヒドを生産する方法であって、配列番号16のアミノ酸を含むポリペプチドまたはその変異体をコードする遺伝子を宿主細胞内で発現させること、および脂肪アルデヒドを宿主細胞から単離することを含み、宿主細胞が、野生型宿主細胞と比較して減弱したレベルの脂肪酸分解酵素を発現するように遺伝子改変されている方法。
【請求項7】
脂肪アルデヒドを生産する方法であって、配列番号17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、113、115、117、119、または121のヌクレオチド配列に対して少なくとも約80%の配列同一性を持つヌクレオチド配列を含む組換えベクターを宿主細胞内で発現させること、および脂肪アルデヒドを宿主細胞から単離することを含む方法。
【請求項8】
宿主細胞における脂肪酸シンターゼをコードする遺伝子の発現を修飾することをさらに含む、請求項7に記載の方法。
【請求項9】
脂肪酸シンターゼの発現を修飾することが、チオエステラーゼをコードする遺伝子を宿主細胞内で発現させることを含む、請求項8に記載の方法。
【請求項10】
宿主細胞が、野生型宿主細胞と比較して減弱したレベルの脂肪酸分解酵素を発現する遺伝子改変宿主細胞である、請求項7に記載の方法。
【請求項11】
脂肪アルデヒドを生産する方法であって、(i)配列番号15のヌクレオチド配列に対して少なくとも約80%の配列同一性を持つヌクレオチド配列を含む組換えベクターと、(ii)組換え脂肪酸シンターゼとを、宿主細胞内で発現させること;および脂肪アルデヒドを宿主細胞から単離することを含む方法。
【請求項12】
脂肪アルデヒドを生産する方法であって、配列番号15のヌクレオチド配列に対して少なくとも約80%の配列同一性を持つヌクレオチド配列を含む組換えベクターを宿主細胞内で発現させること、および脂肪アルデヒドを宿主細胞から単離することを含み、宿主細胞が、野生型宿主細胞と比較して減弱したレベルの脂肪酸分解酵素を発現する方法。
【請求項13】
宿主細胞が、哺乳動物細胞、植物細胞、昆虫細胞、酵母細胞、真菌細胞、糸状菌細胞、および細菌細胞からなる群より選択される、請求項1に記載の方法。
【請求項14】
脂肪アルデヒドが宿主細胞の細胞外環境から単離される、請求項13に記載の方法。
【請求項15】
脂肪アルデヒドがC6〜C26脂肪アルデヒドを含む、請求項13に記載の方法。
【請求項16】
脂肪アルデヒドが、デカナール、ドデカナール、ミリスタール、またはヘキサデカールである、請求項15に記載の方法。
【請求項17】
脂肪アルデヒドが不飽和脂肪アルデヒドである、請求項13に記載の方法。
【請求項18】
脂肪アルデヒドが飽和脂肪アルデヒドである、請求項13に記載の方法。
【請求項19】
該ポリペプチドの、または該ヌクレオチド配列によってコードされるポリペプチドの、少なくとも一つの生物学的基質の存在下で宿主細胞を培養することをさらに含む、請求項1に記載の方法。
【請求項20】
基質が脂肪酸である、請求項19に記載の方法。
【請求項21】
脂肪酸がC6〜C26脂肪酸を含む、請求項20に記載の方法。
【請求項22】
脂肪酸が、デカン酸、ドデカン酸、ミリスチン酸、またはパルミチン酸である、請求項21に記載の方法。
【請求項23】
脂肪酸が不飽和脂肪酸である、請求項20に記載の方法。
【請求項24】
脂肪酸が飽和脂肪酸である、請求項20に記載の方法。
【請求項25】
遺伝子改変微生物であって、その微生物のゲノムDNA中、配列番号17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、113、115、117、119、または121のヌクレオチド配列に対して少なくとも約70%の配列同一性を持つヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドの上流に、安定に組み込まれた外因性制御配列を含み、野生型微生物と比較して増加したレベルの脂肪アルデヒドを生産する、遺伝子改変微生物。
【請求項26】
請求項1に記載の方法によって生産される脂肪アルデヒド。
【請求項27】
約-15.4以上のδ13Cを持つ、請求項26に記載の脂肪アルデヒド。
【請求項28】
少なくとも約1.003のfM14Cを持つ、請求項26に記載の脂肪アルデヒド。

【図1】
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【図2−1】
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【図2−2】
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【図2−3】
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【図3−1】
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【図3−2】
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【図4−1】
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【図4−2】
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【図4−3】
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【図4−4】
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【図4−5】
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【図4−6】
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【図4−7】
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【図4−8】
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【図4−9】
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【図4−10】
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【図4−11】
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【図4−12】
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【図4−13】
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【図4−14】
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【図4−15】
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【図4−16】
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【図4−17】
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【図4−18】
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【図4−19】
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【図4−20】
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【図4−21】
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【図4−22】
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【図4−23】
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【図4−24】
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【図4−25】
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【図4−26】
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【図4−27】
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【図4−28】
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【図4−29】
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【図4−30】
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【図4−31】
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【図4−32】
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【図4−33】
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【図4−34】
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【図4−35】
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【図4−36】
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【図4−37】
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【図4−38】
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【図4−39】
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【図4−40】
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【図4−41】
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【図4−42】
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【図4−44】
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【図4−45】
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【図4−46】
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【図4−61】
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【図4−66】
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【図4−67】
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【図4−68】
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【図4−70】
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【図4−74】
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【図4−91】
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【図4−92】
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【図4−94】
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【図4−95】
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【図4−96】
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【図4−97】
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【図4−98】
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【図4−99】
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【図4−100】
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【図4−101】
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【図4−102】
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【図4−103】
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【図4−104】
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【図4−105】
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【図4−106】
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【図4−107】
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【図4−108】
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【図4−109】
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【図4−110】
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【図5−1】
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【図5−2】
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【図5−3】
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【図5−4】
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【図5−5】
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【図5−6】
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【図5−7】
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【図5−8】
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【図5−9】
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【図5−10】
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【図5−11】
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【図5−12】
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【図5−13】
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【図5−14】
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【図5−15】
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【図5−16】
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【図5−17】
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【図5−18】
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【図5−19】
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【図5−20】
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【図5−21】
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【図6−1】
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【図6−2】
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【図6−3】
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【図6−4】
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【図6−6】
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【図7−1】
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【図7−17】
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【図7−18】
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【図7−19】
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【図7−20】
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【図7−21】
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【公表番号】特表2012−504963(P2012−504963A)
【公表日】平成24年3月1日(2012.3.1)
【国際特許分類】
【出願番号】特願2011−531157(P2011−531157)
【出願日】平成21年10月7日(2009.10.7)
【国際出願番号】PCT/US2009/059904
【国際公開番号】WO2010/042664
【国際公開日】平成22年4月15日(2010.4.15)
【出願人】(508343205)エルエス9・インコーポレイテッド (7)
【氏名又は名称原語表記】LS9, Inc.
【Fターム(参考)】