種々のコンピュータによって具体化される方法およびシステムが提供されている。１つのコンピュータによって具体化される方法は、２またはそれを超える数の検出ウインドウ内の単一の事象についてのスペクトルを検出することによって生成される出力信号の間の比を決定する。スペクトルは異なる材料に特有である。スペクトルの少なくとも一部が、２またはそれを超える数の検出ウインドウの少なくとも１つでオーバーラップする。この方法は、異なる材料のいずれが、この比に関連付けされるかを決定することも含む。システムの一例は、２またはそれを超える数の検出ウインドウ内の単一の事象についてのスペクトルを検出するように構成された１ないしは複数の検出器を含む。スペクトルは前述の通りのスペクトルを含む。また１ないしは複数の検出器は、検出されたスペクトルに応答する出力信号の生成も行うように構成される。このシステムはまた、出力信号の間の比を決定し、かつその比に異なる材料のいずれが関連付けされるかを決定するように構成されたプロセッサも含む。
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ミクロスフェア、ミクロスフェアのポピュレーション、およびミクロスフェアを形成する方法が提供される。蛍光特性と磁気特性を示すように構成された１つのミクロスフェアは、コア・ミクロスフェア、およびコア・ミクロスフェアの表面に結合された磁性材料を含む。コア・ミクロスフェアの表面の約５０％以下が、磁性材料によって覆われる。ミクロスフェアはまた、磁性材料とコア・ミクロスフェアを囲むポリマー層をも含む。蛍光特性と磁気特性を示すように構成されたミクロスフェアの１つのポピュレーションは、ミクロスフェアの２つ以上のサブセットを含む。ミクロスフェアの２つ以上のサブセットは、異なる蛍光特性および／または磁気特性を示すように構成される。２つ以上のサブセットの個々のミクロスフェアは、上述されたように構成される。
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蛍光体によって放出される蛍光を増大させるためのシステム、照明サブシステム、方法が提供される。粒子の蛍光を測定するように構成された１つのシステムは非垂直方向に配向した直線偏光、円偏光、または楕円偏光を有する光で粒子を照明するように構成された照明サブシステムを含む。光を偏光させることにより、蛍光体によって放出される蛍光が、主に垂直方向に配向させられた直線偏光光または非偏光光で照明されるときに蛍光体によって放出される蛍光よりも高輝度になる。本システムはまた、蛍光体によって放出される蛍光に応答して出力信号を発生するように構成された検出サブシステムも含む。
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ミクロスフェアを撮影するために位置決めする様々な方法およびシステムが提供される。一システムは、開口部を含む濾材を含む。これら開口部は、濾材の幅方向に実質的に等距離に間隔を置かれる。このシステムはまた、濾材に連結された流れサブシステムを含む。流れサブシステムは、ミクロスフェアが開口部の上に配置されるように、ミクロスフェアに力を作用させるように構成される。ミクロスフェアを撮影するために位置決めする方法は、ミクロスフェアが濾材の開口部の上に配置されるように、濾材を介してミクロスフェアに力を作用させるステップを含む。各開口部は、上述のように間隔を置かれる。
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小さなパイプライン化されたステップにおいてサンプル・データを処理するために、フィールド・プログラマブル・ゲート・アレイ（ＦＰＧＡ）などのハードウェアを用いて、フロー・アナライザ（４２０）からサンプル・データを処理するためのシステムおよび方法。処理は、データの読み取りと書き込みとが同期であり、バッファ・オーバーランまたはデータ損失を回避する循環バッファを含む。このパイプライン処理の方法によって、処理速度を制限することなく、データ取得チャネルまたはさらなる処理ステップを増加させることが可能となる。
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染色されたミクロスフェアを形成させるための各種の方法が提供される。一つの方法には、熱または光を用いて染料にカップリングさせた化学構造を活性化させて、ミクロスフェアの存在下に反応中間体を形成させることを含む。その反応中間体は、ミクロスフェアのポリマーに共有結合的に付加し、それによって、染料をポリマーにカップリングさせて、染色されたミクロスフェアを形成させる。さらなる方法では、分子にカップリングさせた染色されたミクロスフェアを形成させることを提供する。これらの方法には、染色されたミクロスフェアの外側表面上に分子を合成することに加えて、上述のようにミクロスフェアを染色することが含まれる。染色されたミクロスフェアの集合体も提供される。その集合体の染色ミクロスフェアのそれぞれには、化学的な構造によって、染色されたミクロスフェアのそれぞれのポリマーに付加された染料が含まれる。染料が原因の、染色されたミクロスフェアの集合体の染色特性における変動係数は、約１０％未満である。
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染色ミクロスフェアを形成するための種々の方法が提供される。１つの方法は、ミクロスフェアの存在下で熱又は光を用いて色素に連結される化学構造を活性化し、反応中間体を形成する段階を含む。反応中間体は、ミクロスフェアのポリマーに共有結合的に付着し、これによって色素をポリマーに連結して染色ミクロスフェアを形成する。分子に連結された染色ミクロスフェアを形成するための付加的な方法が提供される。これらの方法は、染色ミクロスフェアの外側表面上に分子を合成する段階に加え、上記のようなミクロスフェアを染色する段階を含む。また、染色ミクロスフェアの集団も提供される。集団の染色ミクロスフェアの各々は、化学構造により染色ミクロスフェアの各々のポリマーに付着された色素を含む。色素の属性である染色ミクロスフェアの集団の色素特性の変動係数は、約１０％未満である。
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測定システムの１つ以上のパラメータを変更する方法が提供される。１つの方法には、システムを利用して、試料を分析し、システムの分類チャネルから、試料中の粒子集団に関する値を生成するステップが含まれる。この方法には、その集団に関する値が位置する、分類空間内の領域を識別するステップも含まれる。さらに、この方法は、その領域の１つ以上の特性を利用して、その集団に関する最適化分類領域を決定するステップも含まれる。この最適化分類領域には、所定のパーセンテージの前記集団に関する値が含まれる。最適化分類領域は、追加試料中の粒子の分類に利用される。
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システムのダイナミックレンジの拡大の方法及びシステムを提供する。１つの方法は、粒子によって放射された蛍光を異なる強度を有する多重光路に分割し、多重信号を発生するための種々のチャネルを用いて多重光路内の蛍光を検出し、チャネルのどれがリニア範囲で動作しているかを多重信号に基づいて判定する。本方法は、異なる強度に対して補正するためにリニア範囲で動作中のチャネルによって発生された信号を変更する。別の方法は、異なる強度を有する光で多重照射域の粒子を照射し、多重信号を発生させるための多重照射域に位置している間に粒子によって放射された蛍光を別個に検出する。本方法は、信号のいずれがリニア範囲に位置するかを判定し、異なる強度に対して補正するためにリニア範囲にある信号を変更する。 （もっと読む）

フロー・サイトメータ・タイプ測定システムの１つまたは複数のパラメータを制御するための様々な方法が提供される。一実施形態は、サンプル微小球体の測定中、測定システムのパラメータを監視するステップを含む。前記方法はまた、前記監視を基にしてリアル・タイムでパラメータを変更するステップを含む。別の方法は、測定システムの近傍の温度を監視するステップを含む。このような一方法は、経験的に導出されたデータを使用して前記温度に応答してアバランシェ・フォト・ダイオードのバイアス電圧を変更するステップを含む。異なるこのような方法は、特性曲線を使用して前記温度に応答して光電子増倍管の出力信号を変更するステップを含む。いくつかの方法は、その中にサンプル微小球体が配置されている流体の温度を監視するステップを含む。流体は、フロー・サイトメータ・タイプ測定システムを通って流れる。この方法はまた、その温度での流体の粘性から測定システム内のサンプル微小球体の速度を決定するステップを含む。
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