トランスアミナーゼ生体触媒
本開示は、トランスアミナーゼ活性を有するポリペプチド、このポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、このポリペプチドを使用する方法に関する。別の態様では、本開示は、操作されたトランスアミナーゼをコードするポリヌクレオチド、または操作されたトランスアミナーゼを発現することができる発現ベクターを含む宿主細胞を提供する。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、Ｅ．ｃｏｌｉなどの細菌性宿主細胞とすることができる。宿主細胞は、本明細書に記載される操作されたトランスアミナーゼ酵素を発現させ、単離するために使用することができ、または代わりに、これらは、ケトアミド基質を生成物に変換するために直接使用することができる。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
４−オキソ−４−［３−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロ［１，２，４］トリアゾロ［４，３−α］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−１−（２，４，５−トリフルオロフェニル）ブタン−２−オン（「ケトアミド基質」）を、（２Ｒ）−４−オキソ−４−［３−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロ［１，２，４］トリアゾロ［４，３−α］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−１−（２，４，５−トリフルオロフェニル）ブタン−２−アミン（「生成物」）に、規定された反応条件下で、アミノ基ドナーであるイソプロピルアミンの存在下で、２１０ｎｍでのΗＰＬＣ−ＵＶによって検出可能な前記生成物のレベルまで変換することができるトランスアミナーゼポリペプチドであって、前記反応条件は、約２ｇ／Ｌのケトアミド基質、約０．５Ｍのイソプロピルアミン、約２２℃、約ｐΗ７．５、約５％のＤＭＳＯ、約１００μＭのリン酸ピリドキサール、および約２０ｍｇ／ｍＬのトランスアミナーゼポリペプチドを含むトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２】
前記ケトアミド基質を前記生成物に、前記規定された反応条件下で、配列番号４のポリペプチドの活性以上である活性を伴って変換することができる、請求項１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３】
前記トランスアミナーゼが、前記ケトアミド基質を、少なくとも９０％の鏡像異性体過剰率で生成物に変換することができる、請求項１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項４】
前記トランスアミナーゼが、前記ケトアミド基質を、少なくとも９９％の鏡像異性体過剰率で生成物に変換することができる、請求項１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項５】
配列番号４と少なくとも８０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項６】
前記アミノ酸配列が、Ｘ６２、Ｘ６９、Ｘ１２２、Ｘ１３６、Ｘ１３７、Ｘ１９５、Ｘ１９９、Ｘ２０８、Ｘ２０９、Ｘ２２３、Ｘ２２５、Ｘ２８２、およびＸ２８４から選択される１つまたは複数の残基位置で、配列番号２と比較した場合に残基差異を含む、請求項５に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項７】
前記残基差異が、Ｘ６９、Ｘ１２２、およびＸ２８４から選択される１つまたは複数の残基位置における残基差異と組み合わせて、Ｘ６２、Ｘ１３６、Ｘ１３７、Ｘ１９５、Ｘ１９９、Ｘ２０８、Ｘ２０９、Ｘ２２３、Ｘ２２５、およびＸ２８２から選択される１つまたは複数の残基位置で発生する、請求項５に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項８】
前記アミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ６９に対応する残基が、システイン（Ｃ）、または非極性残基、極性残基、もしくは脂肪族残基であり；
Ｘ１２２に対応する残基が、拘束性残基、非極性残基、または脂肪族残基であり；
Ｘ２２３に対応する残基が拘束性残基であり；
Ｘ２８４に対応する残基が非極性残基である；
の少なくとも１つまたはそれ以上を含む、請求項６または７に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項９】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
（１）Ｘ６９に対応する残基が、Ｃ、または非極性残基、極性残基、もしくは脂肪族残基であり、かつ／あるいはＸ２８４に対応する残基が非極性残基であり；（２）Ｘ１２２に対応する残基が、拘束性残基、非極性残基、または脂肪族残基であり；（３）Ｘ２２３に対応する残基が拘束性残基である；
を含む、請求項８に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１０】
前記アミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ６９が、Ｃ、または非極性残基、極性残基、もしくは脂肪族残基であり；Ｘ１２２が、拘束性残基、非極性残基、または脂肪族残基であり；Ｘ２２３が拘束性残基である；
を含む、請求項９に記載のトランスアミナーゼポリペプチド：
【請求項１１】
前記アミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ６９が、Ｇ、Ｃ、Ｔ、Ａ、またはＳであり；Ｘ１２２が、Ｍ、Ｉ、Ｖ、またはＨであり、Ｘ２２３がＰである；
を含む、請求項１０に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１２】
前記アミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ１２２が、拘束性残基、非極性残基、または脂肪族残基であり；Ｘ２２３が拘束性残基であり；Ｘ２８４が非極性残基である；
を含む、請求項９に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１３】
前記アミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ１２２が、Ｍ、Ｉ、Ｖ、またはＨであり；Ｘ２２３がＰであり；Ｘ２８４がＧである；
を含む、請求項１２に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１４】
前記アミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ６９が、Ｃ、または非極性残基、極性残基、もしくは脂肪族残基であり；Ｘ１２２が、拘束性残基、非極性残基、または脂肪族残基であり；Ｘ２２３が拘束性残基であり；Ｘ２８４が非極性残基である；
を含む、請求項８に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１５】
前記アミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ６９が、Ｇ、Ｃ、Ｔ、Ａ、またはＳであり；Ｘ１２２が、Ｍ、Ｉ、Ｖ、またはＨであり；Ｘ２２３がＰであり；Ｘ２８４がＧである；
を含む、請求項１４に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１６】
前記アミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ６９がＣまたはＴであり；Ｘ１２２がＭまたはＩであり；Ｘ２２３がＰであり；Ｘ２８４がＧである；
を含む、請求項９に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１７】
前記アミノ酸配列が、配列番号２と比較した場合に、以下の残基位置：Ｘ４；Ｘ５；Ｘ８；Ｘ１８；Ｘ２５；Ｘ２６；Ｘ２７；Ｘ２８；Ｘ３０；Ｘ４１；Ｘ４２；Ｘ４８；Ｘ４９；Ｘ５０；Ｘ５４；Ｘ５５；Ｘ６０；Ｘ６１；Ｘ６２；Ｘ６５；Ｘ８１；Ｘ９４；Ｘ９６；Ｘ１０２；Ｘ１１７；Ｘ１２０；Ｘ１２４；Ｘ１２６；Ｘ１３６；Ｘ１３７；Ｘ１３８；Ｘ１４６；Ｘ１４８；Ｘ１５０；Ｘ１５２；Ｘ１５５；Ｘ１５６；Ｘ１６０；Ｘ１６３；Ｘ１６４；Ｘ１６９；Ｘ１７４；Ｘ１７８；Ｘ１９５；Ｘ１９９；Ｘ２０４；Ｘ２０８；Ｘ２０９；Ｘ２１１；Ｘ２１５；Ｘ２１７；Ｘ２２５；Ｘ２３０；Ｘ２５２；Ｘ２６９；Ｘ２７３；Ｘ２８２、Ｘ２９２；Ｘ２９７；Ｘ３０２；Ｘ３０６；Ｘ３２１；およびＸ３２９の１つまたは複数で残基差異をさらに含む、請求項８から１６のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１８】
前記残基位置における前記アミノ酸残基差異が、以下：
Ｘ４が芳香族残基であり；
Ｘ５が塩基性残基であり；
Ｘ８が拘束性残基であり；
Ｘ１８が、システイン（Ｃ）または脂肪族残基であり；
Ｘ２５が極性残基であり；
Ｘ２６が、芳香族残基または拘束性残基であり；
Ｘ２７が極性残基であり；
Ｘ２８が拘束性残基であり；
Ｘ３０が、極性残基または非極性残基であり；
Ｘ４１が、拘束性残基または極性残基であり；
Ｘ４２が非極性残基であり；
Ｘ４８が、極性残基、酸性残基、脂肪族残基または非極性残基であり；
Ｘ４９が極性残基であり；
Ｘ５０が脂肪族残基であり；
Ｘ５４が拘束性残基であり；
Ｘ５５が脂肪族残基であり；
Ｘ６０が芳香族残基であり；
Ｘ６１が芳香族残基であり；
Ｘ６２が、芳香族残基または極性残基であり；
Ｘ６５が脂肪族残基であり；
Ｘ８１が、非極性残基または小さい残基であり；
Ｘ９４が脂肪族残基であり；
Ｘ９６が脂肪族残基であり；
Ｘ１０２が、脂肪族残基または塩基性残基であり；
Ｘ１１７が非極性残基であり；
Ｘ１２０が芳香族残基であり；
Ｘ１２４が、極性残基または拘束性残基であり；
Ｘ１２６が極性残基であり；
Ｘ１３６が芳香族残基であり；
Ｘ１３７が、極性残基または脂肪族残基であり；
Ｘ１３８が、塩基性残基または拘束性残基であり；
Ｘ１４６が塩基性残基であり；
Ｘ１４８が、脂肪族残基または芳香族残基であり；
Ｘ１５０が、芳香族残基、拘束性残基または極性残基であり；
Ｘ１５２が、Ｃ、または非極性残基、脂肪族残基、もしくは極性残基であり；
Ｘ１５５が、非極性残基または極性残基であり；
Ｘ１５６が極性残基であり；
Ｘ１６０が脂肪族残基であり；
Ｘ１６３が、脂肪族残基または拘束性残基であり；
Ｘ１６４が、脂肪族残基または拘束性残基であり；
Ｘ１６９が脂肪族残基であり；
Ｘ１７４が脂肪族残基であり；
Ｘ１７８が極性残基であり；
Ｘ１９５が、芳香族残基または極性残基であり；
Ｘ１９９が、脂肪族残基または芳香族残基であり；
Ｘ２０４が脂肪族残基であり；
Ｘ２０８が、システイン（Ｃ）、または拘束性残基、非極性残基、芳香族残基、極性残基、もしくは塩基性残基であり；
Ｘ２０９が脂肪族残基であり；
Ｘ２１１が脂肪族残基であり；
Ｘ２１５がシステイン（Ｃ）であり；
Ｘ２１７が極性残基であり；
Ｘ２２５が芳香族残基であり；
Ｘ２３０が脂肪族残基であり；
Ｘ２５２が芳香族残基であり；
Ｘ２６９が拘束性残基であり；
Ｘ２７３が芳香族残基であり；
Ｘ２８２が極性残基であり；
Ｘ２９２が極性残基であり；
Ｘ２９７が極性残基であり；
Ｘ３０２が、脂肪族残基であり；
Ｘ３０６が、脂肪族残基であり；
Ｘ３２１が拘束性残基であり；
Ｘ３２９が、拘束性残基、または芳香族残基である；
から選択される、請求項１７に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１９】
前記残基位置における前記アミノ酸残基差異が、以下：
Ｘ４がＹであり；
Ｘ５がＫであり；
Ｘ８がＰであり；
Ｘ１８が、ＣまたはＩであり；
Ｘ２５がＱであり；
Ｘ２６がＨであり；
Ｘ２７がＴであり；
Ｘ２８がＰであり；
Ｘ３０が、ＱまたはＭであり；
Ｘ４１が、ＨまたはＳであり；
Ｘ４２がＧであり；
Ｘ４８が、Ｑ、Ｄ、Ｖ、Ｇ、またはＡであり；
Ｘ４９がＴであり；
Ｘ５０がＬであり；
Ｘ５４が、ＰまたはＨであり；
Ｘ５５がＶであり；
Ｘ６０がＦであり；
Ｘ６１がＹであり；
Ｘ６２が、Ｔ、ＹまたはＦであり；
Ｘ６５がＡであり；
Ｘ８１がＧであり；
Ｘ９４が、ＩまたはＬであり；
Ｘ９６がＬであり；
Ｘ１０２が、ＬまたはＫであり；
Ｘ１１７がＧであり；
Ｘ１２０がＹであり；
Ｘ１２４が、Ｔ、ＨまたはＮであり；
Ｘ１２６がＴであり；
Ｘ１３６が、ＹまたはＦであり；
Ｘ１３７が、ＴまたはＩであり；
Ｘ１３８が、ＫまたはＰであり；
Ｘ１４６がＲであり；
Ｘ１４８が、ＡまたはＦであり；
Ｘ１５０が、Ｆ、Ｈ、またはＳであり；
Ｘ１５２が、Ｇ、Ｉ、Ｌ、ＳまたはＣであり；
Ｘ１５５が、Ｍ、ＶまたはＴであり；
Ｘ１５６がＱであり；
Ｘ１６０がＬであり；
Ｘ１６３が、ＨまたはＶであり；
Ｘ１６４が、ＶまたはＰであり；
Ｘ１６９がＬであり；
Ｘ１７４がＡであり；
Ｘ１７８がＳであり；
Ｘ１９５が、ＦまたはＱであり；
Ｘ１９９が、ＷまたはＩであり；
Ｘ２０４がＡであり；
Ｘ２０８が、Ｈ、Ｃ、Ｇ、Ｋ、Ｎ、Ｙ、ＤまたはＳであり；
Ｘ２０９がＬであり；
Ｘ２１１がＩであり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２１７がＮであり；
Ｘ２２５がＹであり；
Ｘ２３０がＶであり；
Ｘ２５２がＦであり；
Ｘ２６９がＰであり；
Ｘ２７３がＹであり；
Ｘ２８２がＳであり；
Ｘ２９２がＴであり；
Ｘ２９７がＳであり；
Ｘ３０２がＡであり；
Ｘ３０６がＬであり；
Ｘ３２１がＰであり；
Ｘ３２９がＨである；
から選択される、請求項１８に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２０】
前記アミノ酸配列が、以下：
Ｘ２６が、芳香族残基、または拘束性残基であり；
Ｘ６１が芳香族残基であり；
Ｘ６２が、芳香族残基、または極性残基であり；
Ｘ６５が脂肪族残基であり；
Ｘ９４が脂肪族残基であり；
Ｘ１３６が芳香族残基であり；
Ｘ１３７が、極性残基、または脂肪族残基であり；
Ｘ１９９が、脂肪族残基、または芳香族残基であり；
Ｘ２０９が脂肪族残基であり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２８２が極性残基である；
から選択される１つまたは複数の残基差異をさらに含む、請求項１８に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２１】
前記アミノ酸配列が、以下：
Ｘ８が拘束性残基であり；
Ｘ６０が芳香族残基であり；
Ｘ８１が、非極性残基または小さい残基であり；
Ｘ９６が脂肪族残基であり；
Ｘ１２４が、極性残基または拘束性残基であり；
Ｘ１６９が脂肪族残基であり；
Ｘ２１７が極性残基であり；
Ｘ２６９が拘束性残基であり；
Ｘ２７３が芳香族残基であり；
Ｘ２９７が極性残基であり；
Ｘ３２１が拘束性残基である；
から選択される１つまたは複数の残基差異をさらに含む、請求項２０に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２２】
前記アミノ酸配列が、以下：
Ｘ４が芳香族残基であり；
Ｘ４８が、極性残基、酸性残基、脂肪族残基、または非極性残基であり；
Ｘ１０２が、脂肪族残基または塩基性残基であり；
Ｘ１５０が、芳香族残基、拘束性残基、または極性残基であり；
Ｘ１５２が、Ｃ、または非極性残基、脂肪族残基、もしくは極性残基であり；
Ｘ１６０が脂肪族残基であり；
Ｘ１６３が、脂肪族残基、または拘束性残基であり；
Ｘ１７４が脂肪族残基であり；
Ｘ１７８が極性残基であり；
Ｘ１９５が、芳香族残基または極性残基であり；
Ｘ２０８が、システイン（Ｃ）、または拘束性残基、非極性残基、芳香族残基、極性残基、もしくは塩基性残基であり；
Ｘ２１１が脂肪族残基であり；
Ｘ２２５が芳香族残基であり；
Ｘ２３０が脂肪族残基であり；
Ｘ２５２が芳香族残基であり；
Ｘ２９２が極性残基であり；
Ｘ３０６が脂肪族残基であり；
Ｘ３２９が、拘束性残基または芳香族残基である；
から選択される１つまたは複数の残基差異をさらに含む、請求項２０または２１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２３】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ２６が、芳香族残基、もしくは拘束性残基であり、かつ／またはＸ６２が、芳香族残基、もしくは極性残基であり；
Ｘ６５が脂肪族残基であり；
Ｘ１３６が芳香族残基であり；
Ｘ１９９が、脂肪族残基、または芳香族残基であり；
Ｘ２０９が脂肪族残基である；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２４】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ６１が芳香族残基であり；
Ｘ６２が、芳香族残基または極性残基であり；
Ｘ６５が脂肪族残基であり；
Ｘ９４が脂肪族残基であり；
Ｘ１３６が芳香族残基であり；
Ｘ１９９が、脂肪族残基または芳香族残基であり；
Ｘ２０９が脂肪族残基であり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２８２が極性残基である；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２５】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ８が拘束性残基であり；
Ｘ６１が芳香族残基であり；
Ｘ６２が、芳香族残基または極性残基であり；
Ｘ６５が脂肪族残基であり；
Ｘ８１が、非極性残基または小さい残基であり；
Ｘ９４が脂肪族残基であり；
Ｘ１３６が芳香族残基であり；
Ｘ１９９が、脂肪族残基または芳香族残基であり；
Ｘ２０９が脂肪族残基であり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２１７が極性残基であり；
Ｘ２６９が拘束性残基であり；
Ｘ２８２が極性残基であり；
Ｘ２９７が極性残基であり；
Ｘ３２１が拘束性残基である；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２６】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ８が拘束性残基であり；
Ｘ６０が芳香族残基であり；
Ｘ６１が芳香族残基であり；
Ｘ６２が、芳香族残基または極性残基であり；
Ｘ６５が脂肪族残基であり；
Ｘ８１が、非極性残基または小さい残基であり；
Ｘ９４が脂肪族残基であり；
Ｘ９６が脂肪族残基であり；
Ｘ１２４が、極性残基または拘束性残基であり；
Ｘ１３６が芳香族残基であり；
Ｘ１６９が脂肪族残基であり；
Ｘ１９９が、脂肪族残基または芳香族残基であり；
Ｘ２０９が脂肪族残基であり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２１７が極性残基であり；
Ｘ２６９が拘束性残基であり；
Ｘ２７３が芳香族残基であり；
Ｘ２８２が極性残基であり；
Ｘ２９７が極性残基であり；
Ｘ３２１が拘束性残基である；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２７】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ８が拘束性残基であり；
Ｘ６０が芳香族残基であり；
Ｘ６１が芳香族残基であり；
Ｘ６２が、芳香族残基または極性残基であり；
Ｘ６５が脂肪族残基であり；
Ｘ８１が非極性残基であり；
Ｘ９４が脂肪族残基であり；
Ｘ９６が脂肪族残基であり；
Ｘ１２４が、極性残基または拘束性残基であり；
Ｘ１２６が極性残基であり；
Ｘ１３６が芳香族残基であり；
Ｘ１５０が、芳香族残基、拘束性残基、または極性残基であり；
Ｘ１５２が、システイン（Ｃ）、非極性残基、脂肪族残基、または極性残基であり；
Ｘ１６９が脂肪族残基であり；Ｘ１９９が、脂肪族残基、または芳香族残基であり；
Ｘ２０９が脂肪族残基であり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２１７が極性残基であり；
Ｘ２６９が拘束性残基であり；
Ｘ２７３が芳香族残基であり；
Ｘ２８２が極性残基であり；
Ｘ２９７が極性残基であり；
Ｘ３２１が拘束性残基である；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２８】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ２６がＨであり、かつ／またはＸ６２が、ＴもしくはＦであり；
Ｘ６５がＡであり；
Ｘ１３６がＹまたはＦであり；
Ｘ１９９が、Ｗ、またはＩであり；
Ｘ２０９がＬである；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２９】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ６１がＹであり；
Ｘ６２が、ＴまたはＦであり；
Ｘ６５がＡであり；
Ｘ９４が、ＩまたはＬであり；
Ｘ１３６が、ＹまたはＦであり；
Ｘ１９９が、ＷまたはＩであり；
Ｘ２０９がＬであり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２８２がＳである；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３０】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ８がＰであり；
Ｘ６１がＹであり；
Ｘ６２が、ＴまたはＦであり；
Ｘ６５がＡであり；
Ｘ８１がＧであり；
Ｘ９４が、ＩまたはＬであり；
Ｘ１３６が、ＹまたはＦであり；
Ｘ１９９が、ＷまたはＩであり；
Ｘ２０９がＬであり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２１７がＮであり；
Ｘ２６９がＰであり；
Ｘ２８２がＳであり；
Ｘ２９７がＳであり；
Ｘ３２１がＰである；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３１】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ８がＰであり；
Ｘ６０がＦであり；
Ｘ６１がＹであり；
Ｘ６２が、ＴまたはＦであり；
Ｘ６５がＡであり；
Ｘ８１がＧであり；
Ｘ９４が、ＩまたはＬであり；
Ｘ９６がＬであり；
Ｘ１２４が、Ｔ、ＨまたはＮであり；
Ｘ１３６が、ＹまたはＦであり；
Ｘ１６９がＬであり；
Ｘ１９９が、ＷまたはＩであり；
Ｘ２０９がＬであり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２１７がＮであり；
Ｘ２６９がＰであり；
Ｘ２７３がＹであり；
Ｘ２８２がＳであり；
Ｘ２９７がＳであり；
Ｘ３２１がＰである；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３２】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ８がＰであり；
Ｘ６０がＦであり；
Ｘ６１がＹであり；
Ｘ６２が、ＴまたはＦであり；
Ｘ６５がＡであり；
Ｘ８１がＧであり；
Ｘ９４が、ＩまたはＬであり；
Ｘ９６がＬであり；
Ｘ１２４が、Ｔ、ＨまたはＮであり；
Ｘ１２６がＴであり；
Ｘ１３６が、ＹまたはＦであり；
Ｘ１５０が、Ｆ、Ｈ、またはＳであり；
Ｘ１５２が、Ｇ、Ｉ、Ｌ、ＳまたはＣであり；
Ｘ１６９がＬであり；
Ｘ１９９が、ＷまたはＩであり；
Ｘ２０９がＬであり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２１７がＮであり；
Ｘ２６９がＰであり；
Ｘ２７３がＹであり；
Ｘ２８２がＳであり；
Ｘ２９７がＳであり；
Ｘ３２１がＰである；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３３】
前記アミノ酸配列が、配列番号４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、１４８、１５０、１５２、１５４、１５６、１５８、１６０、１６２、１６４、１６６、または１６８の配列に対応する、請求項１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３４】
前記トランスアミナーゼが、前記ケトアミド基質を生成物に、配列番号４のポリペプチドより少なくとも５０〜１００倍以上の活性を伴って変換することができる、請求項１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３５】
前記アミノ酸配列が、配列番号１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、１４８、１５０、１５２、１５４、１５６、１５８、１６０、１６２、１６４、１６６、または１６８の配列に対応する、請求項３４に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３６】
前記トランスアミナーゼが、前記ケトアミド基質を生成物に、配列番号２２のポリペプチドより少なくとも１．１〜５倍以上の活性を伴って変換することができる、請求項１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３７】
前記アミノ酸配列が、配列番号２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、１４８、１５０、１５２、１５４、１５６、１５８、１６０、１６２、１６４、１６６、または１６８の配列に対応する、請求項３６に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３８】
前記トランスアミナーゼが、前記ケトアミド基質を生成物に、配列番号４８のポリペプチドより少なくとも１．１〜５倍以上の活性を伴って変換することができる、請求項１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３９】
前記アミノ酸配列が、配列番号５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、１４８、１５０、１５２、１５４、１５６、１５８、１６０、１６２、１６４、１６６、または１６８の配列に対応する、請求項３８に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項４０】
前記トランスアミナーゼが、前記ケトアミド基質を生成物に、配列番号５８のポリペプチドより１．１〜５倍以上の活性を伴って変換することができる、請求項１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項４１】
前記アミノ酸配列が、配列番号６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、１４８、１５０、１５２、１５４、１５６、１５８、１６０、１６２、１６４、１６６、または１６８の配列に対応する、請求項４０に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項４２】
請求項１から４１のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。
【請求項４３】
１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０３、１０５、１０７、１０９、１１１、１１３、１１５、１１７、１１９、１２１、１２３、１２５、１２７、１２９、１３１、１３３、１３５、１３７、１３９、１４１、１４３、１４５、１４７、１４９、１５１、１５３、１５５、１５７、１５９、１６１、１６３、１６５、または１６７の配列に対応する、請求項４２に記載のポリヌクレオチド。
【請求項４４】
請求項４２または４３に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
【請求項４５】
制御配列をさらに含む、請求項４４に記載の発現ベクター。
【請求項４６】
前記制御配列がプロモーターを含む、請求項４５に記載の発現ベクター。
【請求項４７】
前記制御配列が分泌シグナルを含む、請求項４５に記載の発現ベクター。
【請求項４８】
請求項４４から４７のいずれか一項に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項４９】
Ｅ．ｃｏｌｉである、請求項４８に記載の宿主細胞。
【請求項５０】
＊で印を付けられた立体中心で、示された立体化学配置を有する構造式（Ｉ）の化合物：
【化２２】
を、反対の鏡像異性体に対して少なくとも７０％の鏡像異性体過剰率で調製するための方法であって、式中、
Ｚは、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ１は、Ｃ１〜８アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリール−Ｃ１〜２アルキル、またはヘテロアリール−Ｃ１〜２アルキルであり；
Ｒ２およびＲ３はそれぞれ独立に、水素、Ｃ１〜８アルキル、アリール、またはアリール−Ｃ１〜２アルキルであり；あるいは
Ｒ２およびＲ３は、これらが結合している窒素原子と一緒に、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、およびＮＣ１〜４アルキルから選択される追加のヘテロ原子を任意選択により含有する、４〜７員の複素環系を形成し、前記複素環は、非置換であるか、またはオキソ、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１〜４アルコキシ、およびＣ１〜４アルキルから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されており、アルキルおよびアルコキシは、非置換であるか、または１〜５個のフッ素で置換されており；前記複素環系は、５〜６員の飽和もしくは芳香族炭素環系、またはＯ、Ｓ、およびＮＣ０〜４アルキルから選択される１〜２個のヘテロ原子を含有する、５〜６員の飽和もしくは芳香族複素環系と任意選択により縮合されており、前記縮合環系は、非置換であるか、またはヒドロキシ、アミノ、フッ素、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、およびトリフルオロメチルから選択される１〜２個の置換基で置換されており；
前記方法は、構造式（ＩＩ）のプロキラルケトン
【化２３】
を、適切な反応条件下で、適切な有機溶媒中で、アミノ基ドナーの存在下で、請求項１から４１のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチドと接触させる工程を含む方法。
【請求項５１】
Ｒ１がベンジルであり、ベンジルのフェニル基が、非置換であるか、またはフッ素、トリフルオロメチル、およびトリフルオロメトキシからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されている、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
ＺがＮＲ２Ｒ３である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５３】
ＮＲ２Ｒ３が構造式（ＶＩＩ）の複素環：
【化２４】
であり、Ｒ４が水素またはＣ１〜４アルキルであり、前記Ｃ１〜４アルキルは、非置換であるか、もしくは１〜５個のフッ素で置換されている、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
＊＊＊で印を付けられた立体中心で、（Ｒ）−配置を有する構造式（１）の化合物：
【化２５】
を、反対の（Ｓ）配置を有する鏡像異性体に対して少なくとも７０％の鏡像異性体過剰率で調製するための方法であって、式中、
Ａｒは、フェニルであり、前記フェニルは、非置換であるか、またはフッ素、トリフルオロメチル、およびトリフルオロメトキシからなる群から独立して選択される１〜５個の置換基で置換されており；
Ｒ４は、水素、またはＣ１〜４アルキルであり、前記Ｃ１〜４アルキルは、非置換であるか、もしくは１〜５個のフッ素で置換され；
前記方法は、構造式（２）のプロキラルケトン：
【化２６】
を、適切な反応条件下で、適切な有機溶媒中で、アミノ基ドナーの存在下で、請求項１から４１のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチドと接触させる工程を含む方法。
【請求項５５】
Ａｒが、２，５−ジフルオロフェニルまたは２，４，５−トリフルオロフェニルであり、Ｒ４がトリフルオロメチルである、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
Ａｒが２，４，５−トリフルオロフェニルである、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
式（１ａ）の化合物：
【化２７】
を調製するための方法であって、式（２ａ）の基質：
【化２８】
を、適切な反応条件下で、適切な有機溶媒中で、アミノ基ドナーの存在下で、請求項１から４１のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチドと接触させる工程を含む方法。
【請求項５８】
式（Ｉ）の前記化合物、式（１）の化合物、または式（１ａ）の前記化合物が、少なくとも９０％の鏡像異性体過剰率で製造される、請求項５０、５４、または５７に記載の方法。
【請求項５９】
式（Ｉ）の前記化合物、式（１）の化合物、または式（１ａ）の前記化合物が、少なくとも９９％の鏡像異性体過剰率で製造される、請求項５０、５４、または５７に記載の方法。
【請求項６０】
前記アミノ基ドナーが、イソプロピルアミン、アラニン、３−アミノ酪酸、またはメチルベンジルアミンから選択される、請求項５０、５４、または５７に記載の方法。
【請求項６１】
前記アミノ基ドナーがイソプロピルアミンである、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
前記反応のカルボニル副生成物を除去する工程をさらに含む、請求項５０、５４、または５７に記載の方法。
【請求項６３】
前記アミノ基ドナーがアミノ酸であり、前記カルボニル副生成物がケト酸である、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
前記カルボニル副生成物が、水より高い蒸気圧を有し、前記カルボニル副生成物の除去が、非反応性ガスを用いたスパージングによるもの、または真空を適用することによるものである、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
前記非反応性ガスが窒素ガスである、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
前記アミノ基ドナーがイソプロピルアミンであり、前記カルボニル副生成物がアセトンである、請求項６４に記載の方法。
【請求項６７】
前記反応条件が、約７．０のｐＨ〜約９．０のｐＨの間である、請求項５０、５４、または５７に記載の方法。
【請求項６８】
前記反応条件が、約８．５のｐＨである、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
前記ｐＨが、イソプロピルアミンを添加することによって維持される、請求項６７に記載の方法。
【請求項７０】
前記反応条件が、約２５℃〜約５０℃の温度である、請求項５０、５４、または５７に記載の方法。
【請求項７１】
前記反応条件が、約４５℃の温度である、請求項７０に記載の方法。
【請求項７２】
前記溶媒がジメチルスルホキシドを含む、請求項５０、５４、または５７に記載の方法。
【請求項７３】
前記ＤＭＳＯが約１０％〜約５０％（ｖ／ｖ）の間である、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
前記ＤＭＳＯが、約３０％ｖ／ｖである、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
前記反応から構造式（Ｉ）の前記化合物、構造式（１）の前記化合物、または構造式（１ａ）の前記化合物を単離する工程をさらに含む、請求項５０、５４、または５７に記載の方法。
【請求項７６】
構造式（１）の前記化合物、または構造式（１ａ）の前記化合物を、適切な反応溶媒中で、薬学的に許容される酸と前記化合物とを接触させることによって、薬学的に許容される塩に変換する工程をさらに含む、請求項５４または５７に記載の方法。
【請求項７７】
前記薬学的に許容される酸がリン酸であり、前記薬学的に許容される塩がリン酸二水素塩である、請求項７６に記載の方法。
【請求項７８】
前記反応溶媒から前記薬学的に許容される塩を結晶化させる工程をさらに含む、請求項７６に記載の方法。
【請求項７９】
（２Ｒ）−４−オキソ−４−［３−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロ［１，２，４］トリアゾロ［４，３−α］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−１−（２，４，５−トリフルオロフェニル）ブタン−２−アミンホスフェート（１：１）一水和物を調製するための方法において、適切な反応条件下で、適切な有機溶媒中で、アミノ基ドナーの存在下で、請求項１から４１のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチドを用いて、式（１ａ）の化合物を式（２ａ）の生成物に変換する工程を含む改善であって、式（１ａ）の前記化合物が、
【化２９】
であり、式（２ａ）の化合物が：
【化３０】
である、改善。
【請求項８０】
前記アミノ基ドナーがイソプロピルアミンである、請求項７９に記載の方法。
【請求項１】
４−オキソ−４−［３−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロ［１，２，４］トリアゾロ［４，３−α］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−１−（２，４，５−トリフルオロフェニル）ブタン−２−オン（「ケトアミド基質」）を、（２Ｒ）−４−オキソ−４−［３−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロ［１，２，４］トリアゾロ［４，３−α］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−１−（２，４，５−トリフルオロフェニル）ブタン−２−アミン（「生成物」）に、規定された反応条件下で、アミノ基ドナーであるイソプロピルアミンの存在下で、２１０ｎｍでのΗＰＬＣ−ＵＶによって検出可能な前記生成物のレベルまで変換することができるトランスアミナーゼポリペプチドであって、前記反応条件は、約２ｇ／Ｌのケトアミド基質、約０．５Ｍのイソプロピルアミン、約２２℃、約ｐΗ７．５、約５％のＤＭＳＯ、約１００μＭのリン酸ピリドキサール、および約２０ｍｇ／ｍＬのトランスアミナーゼポリペプチドを含むトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２】
前記ケトアミド基質を前記生成物に、前記規定された反応条件下で、配列番号４のポリペプチドの活性以上である活性を伴って変換することができる、請求項１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３】
前記トランスアミナーゼが、前記ケトアミド基質を、少なくとも９０％の鏡像異性体過剰率で生成物に変換することができる、請求項１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項４】
前記トランスアミナーゼが、前記ケトアミド基質を、少なくとも９９％の鏡像異性体過剰率で生成物に変換することができる、請求項１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項５】
配列番号４と少なくとも８０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項６】
前記アミノ酸配列が、Ｘ６２、Ｘ６９、Ｘ１２２、Ｘ１３６、Ｘ１３７、Ｘ１９５、Ｘ１９９、Ｘ２０８、Ｘ２０９、Ｘ２２３、Ｘ２２５、Ｘ２８２、およびＸ２８４から選択される１つまたは複数の残基位置で、配列番号２と比較した場合に残基差異を含む、請求項５に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項７】
前記残基差異が、Ｘ６９、Ｘ１２２、およびＸ２８４から選択される１つまたは複数の残基位置における残基差異と組み合わせて、Ｘ６２、Ｘ１３６、Ｘ１３７、Ｘ１９５、Ｘ１９９、Ｘ２０８、Ｘ２０９、Ｘ２２３、Ｘ２２５、およびＸ２８２から選択される１つまたは複数の残基位置で発生する、請求項５に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項８】
前記アミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ６９に対応する残基が、システイン（Ｃ）、または非極性残基、極性残基、もしくは脂肪族残基であり；
Ｘ１２２に対応する残基が、拘束性残基、非極性残基、または脂肪族残基であり；
Ｘ２２３に対応する残基が拘束性残基であり；
Ｘ２８４に対応する残基が非極性残基である；
の少なくとも１つまたはそれ以上を含む、請求項６または７に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項９】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
（１）Ｘ６９に対応する残基が、Ｃ、または非極性残基、極性残基、もしくは脂肪族残基であり、かつ／あるいはＸ２８４に対応する残基が非極性残基であり；（２）Ｘ１２２に対応する残基が、拘束性残基、非極性残基、または脂肪族残基であり；（３）Ｘ２２３に対応する残基が拘束性残基である；
を含む、請求項８に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１０】
前記アミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ６９が、Ｃ、または非極性残基、極性残基、もしくは脂肪族残基であり；Ｘ１２２が、拘束性残基、非極性残基、または脂肪族残基であり；Ｘ２２３が拘束性残基である；
を含む、請求項９に記載のトランスアミナーゼポリペプチド：
【請求項１１】
前記アミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ６９が、Ｇ、Ｃ、Ｔ、Ａ、またはＳであり；Ｘ１２２が、Ｍ、Ｉ、Ｖ、またはＨであり、Ｘ２２３がＰである；
を含む、請求項１０に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１２】
前記アミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ１２２が、拘束性残基、非極性残基、または脂肪族残基であり；Ｘ２２３が拘束性残基であり；Ｘ２８４が非極性残基である；
を含む、請求項９に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１３】
前記アミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ１２２が、Ｍ、Ｉ、Ｖ、またはＨであり；Ｘ２２３がＰであり；Ｘ２８４がＧである；
を含む、請求項１２に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１４】
前記アミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ６９が、Ｃ、または非極性残基、極性残基、もしくは脂肪族残基であり；Ｘ１２２が、拘束性残基、非極性残基、または脂肪族残基であり；Ｘ２２３が拘束性残基であり；Ｘ２８４が非極性残基である；
を含む、請求項８に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１５】
前記アミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ６９が、Ｇ、Ｃ、Ｔ、Ａ、またはＳであり；Ｘ１２２が、Ｍ、Ｉ、Ｖ、またはＨであり；Ｘ２２３がＰであり；Ｘ２８４がＧである；
を含む、請求項１４に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１６】
前記アミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ６９がＣまたはＴであり；Ｘ１２２がＭまたはＩであり；Ｘ２２３がＰであり；Ｘ２８４がＧである；
を含む、請求項９に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１７】
前記アミノ酸配列が、配列番号２と比較した場合に、以下の残基位置：Ｘ４；Ｘ５；Ｘ８；Ｘ１８；Ｘ２５；Ｘ２６；Ｘ２７；Ｘ２８；Ｘ３０；Ｘ４１；Ｘ４２；Ｘ４８；Ｘ４９；Ｘ５０；Ｘ５４；Ｘ５５；Ｘ６０；Ｘ６１；Ｘ６２；Ｘ６５；Ｘ８１；Ｘ９４；Ｘ９６；Ｘ１０２；Ｘ１１７；Ｘ１２０；Ｘ１２４；Ｘ１２６；Ｘ１３６；Ｘ１３７；Ｘ１３８；Ｘ１４６；Ｘ１４８；Ｘ１５０；Ｘ１５２；Ｘ１５５；Ｘ１５６；Ｘ１６０；Ｘ１６３；Ｘ１６４；Ｘ１６９；Ｘ１７４；Ｘ１７８；Ｘ１９５；Ｘ１９９；Ｘ２０４；Ｘ２０８；Ｘ２０９；Ｘ２１１；Ｘ２１５；Ｘ２１７；Ｘ２２５；Ｘ２３０；Ｘ２５２；Ｘ２６９；Ｘ２７３；Ｘ２８２、Ｘ２９２；Ｘ２９７；Ｘ３０２；Ｘ３０６；Ｘ３２１；およびＸ３２９の１つまたは複数で残基差異をさらに含む、請求項８から１６のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１８】
前記残基位置における前記アミノ酸残基差異が、以下：
Ｘ４が芳香族残基であり；
Ｘ５が塩基性残基であり；
Ｘ８が拘束性残基であり；
Ｘ１８が、システイン（Ｃ）または脂肪族残基であり；
Ｘ２５が極性残基であり；
Ｘ２６が、芳香族残基または拘束性残基であり；
Ｘ２７が極性残基であり；
Ｘ２８が拘束性残基であり；
Ｘ３０が、極性残基または非極性残基であり；
Ｘ４１が、拘束性残基または極性残基であり；
Ｘ４２が非極性残基であり；
Ｘ４８が、極性残基、酸性残基、脂肪族残基または非極性残基であり；
Ｘ４９が極性残基であり；
Ｘ５０が脂肪族残基であり；
Ｘ５４が拘束性残基であり；
Ｘ５５が脂肪族残基であり；
Ｘ６０が芳香族残基であり；
Ｘ６１が芳香族残基であり；
Ｘ６２が、芳香族残基または極性残基であり；
Ｘ６５が脂肪族残基であり；
Ｘ８１が、非極性残基または小さい残基であり；
Ｘ９４が脂肪族残基であり；
Ｘ９６が脂肪族残基であり；
Ｘ１０２が、脂肪族残基または塩基性残基であり；
Ｘ１１７が非極性残基であり；
Ｘ１２０が芳香族残基であり；
Ｘ１２４が、極性残基または拘束性残基であり；
Ｘ１２６が極性残基であり；
Ｘ１３６が芳香族残基であり；
Ｘ１３７が、極性残基または脂肪族残基であり；
Ｘ１３８が、塩基性残基または拘束性残基であり；
Ｘ１４６が塩基性残基であり；
Ｘ１４８が、脂肪族残基または芳香族残基であり；
Ｘ１５０が、芳香族残基、拘束性残基または極性残基であり；
Ｘ１５２が、Ｃ、または非極性残基、脂肪族残基、もしくは極性残基であり；
Ｘ１５５が、非極性残基または極性残基であり；
Ｘ１５６が極性残基であり；
Ｘ１６０が脂肪族残基であり；
Ｘ１６３が、脂肪族残基または拘束性残基であり；
Ｘ１６４が、脂肪族残基または拘束性残基であり；
Ｘ１６９が脂肪族残基であり；
Ｘ１７４が脂肪族残基であり；
Ｘ１７８が極性残基であり；
Ｘ１９５が、芳香族残基または極性残基であり；
Ｘ１９９が、脂肪族残基または芳香族残基であり；
Ｘ２０４が脂肪族残基であり；
Ｘ２０８が、システイン（Ｃ）、または拘束性残基、非極性残基、芳香族残基、極性残基、もしくは塩基性残基であり；
Ｘ２０９が脂肪族残基であり；
Ｘ２１１が脂肪族残基であり；
Ｘ２１５がシステイン（Ｃ）であり；
Ｘ２１７が極性残基であり；
Ｘ２２５が芳香族残基であり；
Ｘ２３０が脂肪族残基であり；
Ｘ２５２が芳香族残基であり；
Ｘ２６９が拘束性残基であり；
Ｘ２７３が芳香族残基であり；
Ｘ２８２が極性残基であり；
Ｘ２９２が極性残基であり；
Ｘ２９７が極性残基であり；
Ｘ３０２が、脂肪族残基であり；
Ｘ３０６が、脂肪族残基であり；
Ｘ３２１が拘束性残基であり；
Ｘ３２９が、拘束性残基、または芳香族残基である；
から選択される、請求項１７に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項１９】
前記残基位置における前記アミノ酸残基差異が、以下：
Ｘ４がＹであり；
Ｘ５がＫであり；
Ｘ８がＰであり；
Ｘ１８が、ＣまたはＩであり；
Ｘ２５がＱであり；
Ｘ２６がＨであり；
Ｘ２７がＴであり；
Ｘ２８がＰであり；
Ｘ３０が、ＱまたはＭであり；
Ｘ４１が、ＨまたはＳであり；
Ｘ４２がＧであり；
Ｘ４８が、Ｑ、Ｄ、Ｖ、Ｇ、またはＡであり；
Ｘ４９がＴであり；
Ｘ５０がＬであり；
Ｘ５４が、ＰまたはＨであり；
Ｘ５５がＶであり；
Ｘ６０がＦであり；
Ｘ６１がＹであり；
Ｘ６２が、Ｔ、ＹまたはＦであり；
Ｘ６５がＡであり；
Ｘ８１がＧであり；
Ｘ９４が、ＩまたはＬであり；
Ｘ９６がＬであり；
Ｘ１０２が、ＬまたはＫであり；
Ｘ１１７がＧであり；
Ｘ１２０がＹであり；
Ｘ１２４が、Ｔ、ＨまたはＮであり；
Ｘ１２６がＴであり；
Ｘ１３６が、ＹまたはＦであり；
Ｘ１３７が、ＴまたはＩであり；
Ｘ１３８が、ＫまたはＰであり；
Ｘ１４６がＲであり；
Ｘ１４８が、ＡまたはＦであり；
Ｘ１５０が、Ｆ、Ｈ、またはＳであり；
Ｘ１５２が、Ｇ、Ｉ、Ｌ、ＳまたはＣであり；
Ｘ１５５が、Ｍ、ＶまたはＴであり；
Ｘ１５６がＱであり；
Ｘ１６０がＬであり；
Ｘ１６３が、ＨまたはＶであり；
Ｘ１６４が、ＶまたはＰであり；
Ｘ１６９がＬであり；
Ｘ１７４がＡであり；
Ｘ１７８がＳであり；
Ｘ１９５が、ＦまたはＱであり；
Ｘ１９９が、ＷまたはＩであり；
Ｘ２０４がＡであり；
Ｘ２０８が、Ｈ、Ｃ、Ｇ、Ｋ、Ｎ、Ｙ、ＤまたはＳであり；
Ｘ２０９がＬであり；
Ｘ２１１がＩであり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２１７がＮであり；
Ｘ２２５がＹであり；
Ｘ２３０がＶであり；
Ｘ２５２がＦであり；
Ｘ２６９がＰであり；
Ｘ２７３がＹであり；
Ｘ２８２がＳであり；
Ｘ２９２がＴであり；
Ｘ２９７がＳであり；
Ｘ３０２がＡであり；
Ｘ３０６がＬであり；
Ｘ３２１がＰであり；
Ｘ３２９がＨである；
から選択される、請求項１８に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２０】
前記アミノ酸配列が、以下：
Ｘ２６が、芳香族残基、または拘束性残基であり；
Ｘ６１が芳香族残基であり；
Ｘ６２が、芳香族残基、または極性残基であり；
Ｘ６５が脂肪族残基であり；
Ｘ９４が脂肪族残基であり；
Ｘ１３６が芳香族残基であり；
Ｘ１３７が、極性残基、または脂肪族残基であり；
Ｘ１９９が、脂肪族残基、または芳香族残基であり；
Ｘ２０９が脂肪族残基であり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２８２が極性残基である；
から選択される１つまたは複数の残基差異をさらに含む、請求項１８に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２１】
前記アミノ酸配列が、以下：
Ｘ８が拘束性残基であり；
Ｘ６０が芳香族残基であり；
Ｘ８１が、非極性残基または小さい残基であり；
Ｘ９６が脂肪族残基であり；
Ｘ１２４が、極性残基または拘束性残基であり；
Ｘ１６９が脂肪族残基であり；
Ｘ２１７が極性残基であり；
Ｘ２６９が拘束性残基であり；
Ｘ２７３が芳香族残基であり；
Ｘ２９７が極性残基であり；
Ｘ３２１が拘束性残基である；
から選択される１つまたは複数の残基差異をさらに含む、請求項２０に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２２】
前記アミノ酸配列が、以下：
Ｘ４が芳香族残基であり；
Ｘ４８が、極性残基、酸性残基、脂肪族残基、または非極性残基であり；
Ｘ１０２が、脂肪族残基または塩基性残基であり；
Ｘ１５０が、芳香族残基、拘束性残基、または極性残基であり；
Ｘ１５２が、Ｃ、または非極性残基、脂肪族残基、もしくは極性残基であり；
Ｘ１６０が脂肪族残基であり；
Ｘ１６３が、脂肪族残基、または拘束性残基であり；
Ｘ１７４が脂肪族残基であり；
Ｘ１７８が極性残基であり；
Ｘ１９５が、芳香族残基または極性残基であり；
Ｘ２０８が、システイン（Ｃ）、または拘束性残基、非極性残基、芳香族残基、極性残基、もしくは塩基性残基であり；
Ｘ２１１が脂肪族残基であり；
Ｘ２２５が芳香族残基であり；
Ｘ２３０が脂肪族残基であり；
Ｘ２５２が芳香族残基であり；
Ｘ２９２が極性残基であり；
Ｘ３０６が脂肪族残基であり；
Ｘ３２９が、拘束性残基または芳香族残基である；
から選択される１つまたは複数の残基差異をさらに含む、請求項２０または２１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２３】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ２６が、芳香族残基、もしくは拘束性残基であり、かつ／またはＸ６２が、芳香族残基、もしくは極性残基であり；
Ｘ６５が脂肪族残基であり；
Ｘ１３６が芳香族残基であり；
Ｘ１９９が、脂肪族残基、または芳香族残基であり；
Ｘ２０９が脂肪族残基である；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２４】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ６１が芳香族残基であり；
Ｘ６２が、芳香族残基または極性残基であり；
Ｘ６５が脂肪族残基であり；
Ｘ９４が脂肪族残基であり；
Ｘ１３６が芳香族残基であり；
Ｘ１９９が、脂肪族残基または芳香族残基であり；
Ｘ２０９が脂肪族残基であり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２８２が極性残基である；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２５】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ８が拘束性残基であり；
Ｘ６１が芳香族残基であり；
Ｘ６２が、芳香族残基または極性残基であり；
Ｘ６５が脂肪族残基であり；
Ｘ８１が、非極性残基または小さい残基であり；
Ｘ９４が脂肪族残基であり；
Ｘ１３６が芳香族残基であり；
Ｘ１９９が、脂肪族残基または芳香族残基であり；
Ｘ２０９が脂肪族残基であり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２１７が極性残基であり；
Ｘ２６９が拘束性残基であり；
Ｘ２８２が極性残基であり；
Ｘ２９７が極性残基であり；
Ｘ３２１が拘束性残基である；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２６】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ８が拘束性残基であり；
Ｘ６０が芳香族残基であり；
Ｘ６１が芳香族残基であり；
Ｘ６２が、芳香族残基または極性残基であり；
Ｘ６５が脂肪族残基であり；
Ｘ８１が、非極性残基または小さい残基であり；
Ｘ９４が脂肪族残基であり；
Ｘ９６が脂肪族残基であり；
Ｘ１２４が、極性残基または拘束性残基であり；
Ｘ１３６が芳香族残基であり；
Ｘ１６９が脂肪族残基であり；
Ｘ１９９が、脂肪族残基または芳香族残基であり；
Ｘ２０９が脂肪族残基であり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２１７が極性残基であり；
Ｘ２６９が拘束性残基であり；
Ｘ２７３が芳香族残基であり；
Ｘ２８２が極性残基であり；
Ｘ２９７が極性残基であり；
Ｘ３２１が拘束性残基である；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２７】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ８が拘束性残基であり；
Ｘ６０が芳香族残基であり；
Ｘ６１が芳香族残基であり；
Ｘ６２が、芳香族残基または極性残基であり；
Ｘ６５が脂肪族残基であり；
Ｘ８１が非極性残基であり；
Ｘ９４が脂肪族残基であり；
Ｘ９６が脂肪族残基であり；
Ｘ１２４が、極性残基または拘束性残基であり；
Ｘ１２６が極性残基であり；
Ｘ１３６が芳香族残基であり；
Ｘ１５０が、芳香族残基、拘束性残基、または極性残基であり；
Ｘ１５２が、システイン（Ｃ）、非極性残基、脂肪族残基、または極性残基であり；
Ｘ１６９が脂肪族残基であり；Ｘ１９９が、脂肪族残基、または芳香族残基であり；
Ｘ２０９が脂肪族残基であり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２１７が極性残基であり；
Ｘ２６９が拘束性残基であり；
Ｘ２７３が芳香族残基であり；
Ｘ２８２が極性残基であり；
Ｘ２９７が極性残基であり；
Ｘ３２１が拘束性残基である；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２８】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ２６がＨであり、かつ／またはＸ６２が、ＴもしくはＦであり；
Ｘ６５がＡであり；
Ｘ１３６がＹまたはＦであり；
Ｘ１９９が、Ｗ、またはＩであり；
Ｘ２０９がＬである；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項２９】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ６１がＹであり；
Ｘ６２が、ＴまたはＦであり；
Ｘ６５がＡであり；
Ｘ９４が、ＩまたはＬであり；
Ｘ１３６が、ＹまたはＦであり；
Ｘ１９９が、ＷまたはＩであり；
Ｘ２０９がＬであり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２８２がＳである；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３０】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ８がＰであり；
Ｘ６１がＹであり；
Ｘ６２が、ＴまたはＦであり；
Ｘ６５がＡであり；
Ｘ８１がＧであり；
Ｘ９４が、ＩまたはＬであり；
Ｘ１３６が、ＹまたはＦであり；
Ｘ１９９が、ＷまたはＩであり；
Ｘ２０９がＬであり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２１７がＮであり；
Ｘ２６９がＰであり；
Ｘ２８２がＳであり；
Ｘ２９７がＳであり；
Ｘ３２１がＰである；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３１】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ８がＰであり；
Ｘ６０がＦであり；
Ｘ６１がＹであり；
Ｘ６２が、ＴまたはＦであり；
Ｘ６５がＡであり；
Ｘ８１がＧであり；
Ｘ９４が、ＩまたはＬであり；
Ｘ９６がＬであり；
Ｘ１２４が、Ｔ、ＨまたはＮであり；
Ｘ１３６が、ＹまたはＦであり；
Ｘ１６９がＬであり；
Ｘ１９９が、ＷまたはＩであり；
Ｘ２０９がＬであり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２１７がＮであり；
Ｘ２６９がＰであり；
Ｘ２７３がＹであり；
Ｘ２８２がＳであり；
Ｘ２９７がＳであり；
Ｘ３２１がＰである；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３２】
前記アミノ酸配列が、少なくとも以下の特徴：
Ｘ８がＰであり；
Ｘ６０がＦであり；
Ｘ６１がＹであり；
Ｘ６２が、ＴまたはＦであり；
Ｘ６５がＡであり；
Ｘ８１がＧであり；
Ｘ９４が、ＩまたはＬであり；
Ｘ９６がＬであり；
Ｘ１２４が、Ｔ、ＨまたはＮであり；
Ｘ１２６がＴであり；
Ｘ１３６が、ＹまたはＦであり；
Ｘ１５０が、Ｆ、Ｈ、またはＳであり；
Ｘ１５２が、Ｇ、Ｉ、Ｌ、ＳまたはＣであり；
Ｘ１６９がＬであり；
Ｘ１９９が、ＷまたはＩであり；
Ｘ２０９がＬであり；
Ｘ２１５がＣであり；
Ｘ２１７がＮであり；
Ｘ２６９がＰであり；
Ｘ２７３がＹであり；
Ｘ２８２がＳであり；
Ｘ２９７がＳであり；
Ｘ３２１がＰである；
をさらに含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３３】
前記アミノ酸配列が、配列番号４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、１４８、１５０、１５２、１５４、１５６、１５８、１６０、１６２、１６４、１６６、または１６８の配列に対応する、請求項１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３４】
前記トランスアミナーゼが、前記ケトアミド基質を生成物に、配列番号４のポリペプチドより少なくとも５０〜１００倍以上の活性を伴って変換することができる、請求項１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３５】
前記アミノ酸配列が、配列番号１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、１４８、１５０、１５２、１５４、１５６、１５８、１６０、１６２、１６４、１６６、または１６８の配列に対応する、請求項３４に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３６】
前記トランスアミナーゼが、前記ケトアミド基質を生成物に、配列番号２２のポリペプチドより少なくとも１．１〜５倍以上の活性を伴って変換することができる、請求項１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３７】
前記アミノ酸配列が、配列番号２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、１４８、１５０、１５２、１５４、１５６、１５８、１６０、１６２、１６４、１６６、または１６８の配列に対応する、請求項３６に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３８】
前記トランスアミナーゼが、前記ケトアミド基質を生成物に、配列番号４８のポリペプチドより少なくとも１．１〜５倍以上の活性を伴って変換することができる、請求項１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項３９】
前記アミノ酸配列が、配列番号５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、１４８、１５０、１５２、１５４、１５６、１５８、１６０、１６２、１６４、１６６、または１６８の配列に対応する、請求項３８に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項４０】
前記トランスアミナーゼが、前記ケトアミド基質を生成物に、配列番号５８のポリペプチドより１．１〜５倍以上の活性を伴って変換することができる、請求項１に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項４１】
前記アミノ酸配列が、配列番号６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、１４８、１５０、１５２、１５４、１５６、１５８、１６０、１６２、１６４、１６６、または１６８の配列に対応する、請求項４０に記載のトランスアミナーゼポリペプチド。
【請求項４２】
請求項１から４１のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。
【請求項４３】
１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０３、１０５、１０７、１０９、１１１、１１３、１１５、１１７、１１９、１２１、１２３、１２５、１２７、１２９、１３１、１３３、１３５、１３７、１３９、１４１、１４３、１４５、１４７、１４９、１５１、１５３、１５５、１５７、１５９、１６１、１６３、１６５、または１６７の配列に対応する、請求項４２に記載のポリヌクレオチド。
【請求項４４】
請求項４２または４３に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
【請求項４５】
制御配列をさらに含む、請求項４４に記載の発現ベクター。
【請求項４６】
前記制御配列がプロモーターを含む、請求項４５に記載の発現ベクター。
【請求項４７】
前記制御配列が分泌シグナルを含む、請求項４５に記載の発現ベクター。
【請求項４８】
請求項４４から４７のいずれか一項に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項４９】
Ｅ．ｃｏｌｉである、請求項４８に記載の宿主細胞。
【請求項５０】
＊で印を付けられた立体中心で、示された立体化学配置を有する構造式（Ｉ）の化合物：
【化２２】
を、反対の鏡像異性体に対して少なくとも７０％の鏡像異性体過剰率で調製するための方法であって、式中、
Ｚは、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ１は、Ｃ１〜８アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリール−Ｃ１〜２アルキル、またはヘテロアリール−Ｃ１〜２アルキルであり；
Ｒ２およびＲ３はそれぞれ独立に、水素、Ｃ１〜８アルキル、アリール、またはアリール−Ｃ１〜２アルキルであり；あるいは
Ｒ２およびＲ３は、これらが結合している窒素原子と一緒に、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、およびＮＣ１〜４アルキルから選択される追加のヘテロ原子を任意選択により含有する、４〜７員の複素環系を形成し、前記複素環は、非置換であるか、またはオキソ、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１〜４アルコキシ、およびＣ１〜４アルキルから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されており、アルキルおよびアルコキシは、非置換であるか、または１〜５個のフッ素で置換されており；前記複素環系は、５〜６員の飽和もしくは芳香族炭素環系、またはＯ、Ｓ、およびＮＣ０〜４アルキルから選択される１〜２個のヘテロ原子を含有する、５〜６員の飽和もしくは芳香族複素環系と任意選択により縮合されており、前記縮合環系は、非置換であるか、またはヒドロキシ、アミノ、フッ素、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、およびトリフルオロメチルから選択される１〜２個の置換基で置換されており；
前記方法は、構造式（ＩＩ）のプロキラルケトン
【化２３】
を、適切な反応条件下で、適切な有機溶媒中で、アミノ基ドナーの存在下で、請求項１から４１のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチドと接触させる工程を含む方法。
【請求項５１】
Ｒ１がベンジルであり、ベンジルのフェニル基が、非置換であるか、またはフッ素、トリフルオロメチル、およびトリフルオロメトキシからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されている、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
ＺがＮＲ２Ｒ３である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５３】
ＮＲ２Ｒ３が構造式（ＶＩＩ）の複素環：
【化２４】
であり、Ｒ４が水素またはＣ１〜４アルキルであり、前記Ｃ１〜４アルキルは、非置換であるか、もしくは１〜５個のフッ素で置換されている、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
＊＊＊で印を付けられた立体中心で、（Ｒ）−配置を有する構造式（１）の化合物：
【化２５】
を、反対の（Ｓ）配置を有する鏡像異性体に対して少なくとも７０％の鏡像異性体過剰率で調製するための方法であって、式中、
Ａｒは、フェニルであり、前記フェニルは、非置換であるか、またはフッ素、トリフルオロメチル、およびトリフルオロメトキシからなる群から独立して選択される１〜５個の置換基で置換されており；
Ｒ４は、水素、またはＣ１〜４アルキルであり、前記Ｃ１〜４アルキルは、非置換であるか、もしくは１〜５個のフッ素で置換され；
前記方法は、構造式（２）のプロキラルケトン：
【化２６】
を、適切な反応条件下で、適切な有機溶媒中で、アミノ基ドナーの存在下で、請求項１から４１のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチドと接触させる工程を含む方法。
【請求項５５】
Ａｒが、２，５−ジフルオロフェニルまたは２，４，５−トリフルオロフェニルであり、Ｒ４がトリフルオロメチルである、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
Ａｒが２，４，５−トリフルオロフェニルである、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
式（１ａ）の化合物：
【化２７】
を調製するための方法であって、式（２ａ）の基質：
【化２８】
を、適切な反応条件下で、適切な有機溶媒中で、アミノ基ドナーの存在下で、請求項１から４１のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチドと接触させる工程を含む方法。
【請求項５８】
式（Ｉ）の前記化合物、式（１）の化合物、または式（１ａ）の前記化合物が、少なくとも９０％の鏡像異性体過剰率で製造される、請求項５０、５４、または５７に記載の方法。
【請求項５９】
式（Ｉ）の前記化合物、式（１）の化合物、または式（１ａ）の前記化合物が、少なくとも９９％の鏡像異性体過剰率で製造される、請求項５０、５４、または５７に記載の方法。
【請求項６０】
前記アミノ基ドナーが、イソプロピルアミン、アラニン、３−アミノ酪酸、またはメチルベンジルアミンから選択される、請求項５０、５４、または５７に記載の方法。
【請求項６１】
前記アミノ基ドナーがイソプロピルアミンである、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
前記反応のカルボニル副生成物を除去する工程をさらに含む、請求項５０、５４、または５７に記載の方法。
【請求項６３】
前記アミノ基ドナーがアミノ酸であり、前記カルボニル副生成物がケト酸である、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
前記カルボニル副生成物が、水より高い蒸気圧を有し、前記カルボニル副生成物の除去が、非反応性ガスを用いたスパージングによるもの、または真空を適用することによるものである、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
前記非反応性ガスが窒素ガスである、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
前記アミノ基ドナーがイソプロピルアミンであり、前記カルボニル副生成物がアセトンである、請求項６４に記載の方法。
【請求項６７】
前記反応条件が、約７．０のｐＨ〜約９．０のｐＨの間である、請求項５０、５４、または５７に記載の方法。
【請求項６８】
前記反応条件が、約８．５のｐＨである、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
前記ｐＨが、イソプロピルアミンを添加することによって維持される、請求項６７に記載の方法。
【請求項７０】
前記反応条件が、約２５℃〜約５０℃の温度である、請求項５０、５４、または５７に記載の方法。
【請求項７１】
前記反応条件が、約４５℃の温度である、請求項７０に記載の方法。
【請求項７２】
前記溶媒がジメチルスルホキシドを含む、請求項５０、５４、または５７に記載の方法。
【請求項７３】
前記ＤＭＳＯが約１０％〜約５０％（ｖ／ｖ）の間である、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
前記ＤＭＳＯが、約３０％ｖ／ｖである、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
前記反応から構造式（Ｉ）の前記化合物、構造式（１）の前記化合物、または構造式（１ａ）の前記化合物を単離する工程をさらに含む、請求項５０、５４、または５７に記載の方法。
【請求項７６】
構造式（１）の前記化合物、または構造式（１ａ）の前記化合物を、適切な反応溶媒中で、薬学的に許容される酸と前記化合物とを接触させることによって、薬学的に許容される塩に変換する工程をさらに含む、請求項５４または５７に記載の方法。
【請求項７７】
前記薬学的に許容される酸がリン酸であり、前記薬学的に許容される塩がリン酸二水素塩である、請求項７６に記載の方法。
【請求項７８】
前記反応溶媒から前記薬学的に許容される塩を結晶化させる工程をさらに含む、請求項７６に記載の方法。
【請求項７９】
（２Ｒ）−４−オキソ−４−［３−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロ［１，２，４］トリアゾロ［４，３−α］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−１−（２，４，５−トリフルオロフェニル）ブタン−２−アミンホスフェート（１：１）一水和物を調製するための方法において、適切な反応条件下で、適切な有機溶媒中で、アミノ基ドナーの存在下で、請求項１から４１のいずれか一項に記載のトランスアミナーゼポリペプチドを用いて、式（１ａ）の化合物を式（２ａ）の生成物に変換する工程を含む改善であって、式（１ａ）の前記化合物が、
【化２９】
であり、式（２ａ）の化合物が：
【化３０】
である、改善。
【請求項８０】
前記アミノ基ドナーがイソプロピルアミンである、請求項７９に記載の方法。
【公表番号】特表２０１２−５１９００４（Ｐ２０１２−５１９００４Ａ）
【公表日】平成２４年８月２３日（２０１２．８．２３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５５２２０９（Ｐ２０１１−５５２２０９）
【出願日】平成２２年２月２６日（２０１０．２．２６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０２５６８５
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０９９５０１
【国際公開日】平成２２年９月２日（２０１０．９．２）
【出願人】（５０２４２７９２１）コデクシス， インコーポレイテッド (3)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年８月２３日（２０１２．８．２３）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年２月２６日（２０１０．２．２６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０２５６８５
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０９９５０１
【国際公開日】平成２２年９月２日（２０１０．９．２）
【出願人】（５０２４２７９２１）コデクシス， インコーポレイテッド (3)
【Ｆターム（参考）】
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