ドーパミン輸送体レベルを造影するための方法
対象の中枢神経系の選択領域中のドーパミン輸送体レベルをＳＰＥＣＴ造影により評価する方法であって、標識されたドーパミン輸送体リガンドの注射を、ＳＰＥＣＴ造影のために対象を位置付けたおよその時点で投与するステップと、標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与から約１５分後に始まる約３０分の持続期間にわたるＳＰＥＣＴ取得を開始するステップと、ドーパミン輸送体に結合する標識されたドーパミン輸送体リガンドの量を前記ＳＰＥＣＴ取得に基づいて評価するステップとを含む方法が提供される。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連する出願の情報）
本願は、２００７年１０月３１日に出願された米国特許出願第１１／９３１，９７９号の利益を主張する。米国特許出願第１１／９３１，９７９号の教示は、その全体が本明細書中に参照として援用される。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、ドーパミン輸送体部位を造影すること、より詳細には、神経障害を診断およびモニターすることに関する。
【背景技術】
【０００３】
神経障害のための診断方法の改善が必要とされている。ドーパミン輸送タンパク質（ドーパミン輸送体）を選択的に標的とし、セロトニン輸送体として知られる別のタンパク質と区別できる、神経障害を診断する方法がとりわけ必要である。正常な脳組織では、ドーパミン輸送体：セロトニン輸送体の密度比はおよそ１０：１である。パーキンソン病など特定の神経変性障害では、ドーパミンを産生する（および、その上にドーパミン輸送体が位置する）神経細胞が激しい欠乏を起こすが、セロトニン神経細胞が受ける影響はそれより少ない。ドーパミン輸送体：セロトニン輸送体の比率は、パーキンソン病においては２：１に低下することがある。
【０００４】
別の神経変性障害は、レヴィー小体認知症、別名、レヴィー小体を伴う認知症（ＤＬＢ）である。ＤＬＢは、アルツハイマー病に次いで、高齢者における変性認知症の２番目に多い原因である。ＤＬＢは、黒質中のドーパミン産生ニューロンの喪失（パーキンソン病において見られる喪失に似ている）と、マイネルト基底核およびそれ以外の場所におけるアセチルコリン産生ニューロンの喪失との両方を特徴とする。この側面は、アルツハイマー病において見られるものと類似している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、対象の中枢神経系中のドーパミン輸送体レベルを評価する方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の一態様では、対象の中枢神経系中のドーパミン輸送体レベルを評価する方法は、ａ）対象を造影台上に位置付けるステップと、ｂ）該対象を造影台上に位置付けた後で、標識されたドーパミン輸送体リガンドの注射を該対象に行うステップと、ｃ）標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与から約１５分後に始まる約３０分の持続期間にわたる単独のＳＰＥＣＴ取得を開始するステップと、ｄ）該対象について、対象の中枢神経系の少なくとも１つの領域中のドーパミン輸送体に結合する標識されたドーパミン輸送体リガンドの量を評価するステップとを含む。ボーラス注入または急速注入による標識されたドーパミン輸送体リガンドの注射は、有用な選択肢として注目される。
【０００７】
別の態様では、本発明は、対象の中枢神経系中のドーパミン輸送体レベルを評価するステップを含む、対象における神経障害を診断またはモニターする方法を提供する。一実施形態では、この神経障害は、レヴィー小体を伴う認知症である。別の実施形態では、この神経障害はパーキンソン病である。
【０００８】
本発明は、対象の中枢神経系の選択領域中のドーパミン輸送体レベルをＳＰＥＣＴ造影により評価する方法であって、造影に有効な持続期間（ある場合には約１０から約４５分、とりわけ約２０から約３０分、特に約３０分）にわたる前記選択領域の少なくとも１回のＳＰＥＣＴ取得を開始するステップであって、前記持続期間が、標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与後の永続平衡の開始期間内にあるステップと、前記選択領域中のドーパミン輸送体に結合する標識されたドーパミン輸送体リガンドの量を、前記ＳＰＥＣＴ取得に少なくとも部分的に基づいて評価するステップとを含む方法をさらに含む。場合により、この方法では、標識されたドーパミン輸送体リガンドは、［１２３Ｉ］−２β−カルボメトキシ−３β−（４−フルロフェニル）−Ｎ−（３−ヨード−Ｅ−アリル）ノルトロパン、別名１２３Ｉアルトロパン（Ａｌｔｒｏｐａｎｅ）である。特定の場合においては、この標識されたドーパミン輸送体リガンドは、約８ｍＣｉの用量で投与される。特に、この方法では、選択領域は、脳の部分、とりわけ線条体を含む。この方法の一実施形態では、永続平衡期間は、標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与から約１５分後に始まり、約４５分後に終了する。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】１２３Ｉアルトロパンのボーラス注射を受け、６０分にわたり造影された健康対照対象についての動的な時間−活性データのグラフ表示である。
【図１Ａ】特徴的な線条体取込みおよび皮質の均質なバックグラウンドを示す画像である。
【図２】１２３Ｉアルトロパンのボーラス注射後に、６０分にわたり造影されたＰＤ対象についての動的な時間−活性データのグラフ表示である。
【図２Ａ】図２のデータに対応する画像である。
【図３】１２３Ｉアルトロパンのボーラス注射後のＰＤ対象および対照対象についての動的な線条体結合比のグラフ表示である。
【図４】ＰＤ対象および対照対象についてのピークの線条体結合比（ＳＢＲ）の、年齢に対するグラフ表示である。
【図５】ＰＤ対象の１回目および２回目（再試験）の試験ならびに対照対象についてのピークの線条体結合比（ＳＢＲ）のグラフ表示である。
【図６】再構成用に３個、２個および１個の造影ヘッド（複数可）を用いた場合のＰＤ対象における横断ＳＰＥＣＴ画像の図表示である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明の一態様では、脳、とりわけ線条体など、対象の中枢神経系中のドーパミン輸送体レベルを評価する方法は、好ましくは対象を造影台上に位置付けた後で、標識されたドーパミン輸送体リガンド（場合により１２３Ｉアルトロパン）の注射を対象に行うステップと、標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与から約１５分後に始まる、造影に有効な持続期間、とりわけ約３０分の持続期間にわたる単独のＳＰＥＣＴ取得を開始するステップと、次いで、該対象の中枢神経系の少なくとも１つの領域中のドーパミン輸送体に結合する標識されたドーパミン輸送体リガンドの量を評価するステップとを含む。
【００１１】
ＳＰＥＣＴ画像は、１個または複数のヘッドを備えるＳＰＥＣＴ断層撮影機を用いて取得できる。一実施形態では、ＳＰＥＣＴの取得は、ヘッドを１個付けたＳＰＥＣＴ断層撮影機を用いて実施する。別の実施形態では、ＳＰＥＣＴの取得は、ヘッドを２個付けたＳＰＥＣＴ断層撮影機を用いて実施する。別の実施形態では、ＳＰＥＣＴの取得は、ヘッドを３個付けたＳＰＥＣＴ断層撮影機を用いて実施する。造影に有効な持続期間は、ヘッドの数および各ヘッドの感度、造影剤の投与量および放出量により、ならびに、収集する画像またはデータの所望の詳細により影響されよう。これらのパラメーターは、当業者には周知である。
【００１２】
一実施形態では、標識されたドーパミン輸送体リガンドは、約１ｍＣｉから約１０ｍＣｉの範囲の用量で投与される。別の実施形態では、標識されたドーパミン輸送体リガンドは、約５ｍＣｉから約８ｍＣｉの範囲の用量で投与される。別の実施形態では、標識されたドーパミン輸送体リガンドは、約８ｍＣｉの用量で投与される。
【００１３】
別の態様では、本発明は、対象の中枢神経系中のドーパミン輸送体レベルを評価するステップを含む、対象における神経障害を診断またはモニターする方法を提供する。一実施形態では、この神経障害は、レヴィー小体を伴う認知症である。別の実施形態では、この神経障害はパーキンソン病である。
【００１４】
本明細書中で使用する場合、用語「ドーパミン輸送体リガンド」は、ドーパミン輸送体に結合する化合物を意味する。一実施形態では、化合物は、セロトニン輸送体より優先的にドーパミン輸送体に選択的に結合する。
【００１５】
用語「対象」は、治療、診断および予防のステップおよび手順が含まれると広く理解されている治療を必要とする患者を意味する。一実施形態では、対象は、哺乳動物、とりわけヒトである。
【００１６】
用語「選択領域」は、脳、とりわけ脳の線条体など、対象の中枢神経系を意味する。
【００１７】
一態様では、標識されたドーパミン輸送体リガンドは、ＳＰＥＣＴ造影のために対象を位置付けたおよその時点で対象に投与する。用語「およその時点」は、ＳＰＥＣＴ造影のために対象を位置付ける前後約６０分、とりわけ約３０分、さらにはとりわけ約１５分から実質的な直前直後までを指す。一実施形態では、対象を造影台上にまず位置付けてから、次いでドーパミン輸送体リガンドを投与する。別の実施形態では、対象にドーパミン輸送体リガンドをまず投与し、続いて造影台上に対象を位置付ける。
【００１８】
走査時間については、ドーパミン輸送体リガンドのＳＰＥＣＴ走査のシグナル−ノイズ（Ｓ／Ｎ）比はドーパミン輸送体リガンドの注射後約１５分から約４５分の時点の間で最適であることが見出されている。
【００１９】
画像の取得についてはいくつかの選択肢が使用可能である。一実施形態では、ＳＰＥＣＴ走査は、連続的な１回の走査またはより短い一連の走査である。別の実施形態では、ＳＰＥＣＴ走査は、１回または複数回の一連の２分間走査を含む。別の実施形態では、ＳＰＥＣＴ走査は、１回または複数回の一連の１０分間走査を含む。特定の一実施形態では、ＳＰＥＣＴ画像は、連続的な１回の３０分間走査を用いて生成する。別の特定の実施形態では、ＳＰＥＣＴ画像は、６０分の期間にわたる一連の２分間走査を用いて生成する。別の特定の実施形態では、ＳＰＥＣＴ画像は、４０分の期間にわたる一連の４分間走査を用いて生成する。
【００２０】
ドーパミン輸送体レベルの評価は、診断調査の過程におけるのと同様に、ドーパミン輸送体の利用能を測定することにより実施できる。測定は、陽電子放射型断層撮影法（「ＰＥＴ」）または単一光子放射型コンピュータ断層撮影法（「ＳＰＥＣＴ」）などの装置を用いて行うことができる。ドーパミン輸送体の利用能を測定するには、この輸送体を標的とする標識されたプローブを脳中に（例えば静脈内に）導入し、ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴを実施する。ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴのデータおよび画像から、ドーパミン輸送体の密度を定量化する。一実施形態では、定量化は、結合能をコンピュータで計算することにより決定するが、この場合の結合能は、結合部位の最大数Ｂｍａｘを解離定数Ｋｄで割ったものと定義される。結合能は、約１５分の時点で開始する連続的な走査から計算する。関心領域を同定し、その領域中の計数を決定する。適切なモデル化を用いて結合能についての数値が計算でき、これらの値を、同等の治療および走査のプロトコールを受けている対象間で比較できる。１２３Ｉ−アルトロパンの線条体結合能（ｋ３／ｋ４）は、Ｆａｒｄｅら（Ｆａｒｄｅら、１９８９年、Ｊ． Ｃｅｒｅｂ．、Ｂｌｏｏｄ Ｆｌｏｗ Ｍｅｔａｂ、９巻、６９６〜７０８頁）により記載されたような基準領域法により計算する。
【００２１】
ドーパミン輸送体を標的とする造影剤としては、（１１Ｃ）アルトロパン、（１１Ｃまたは１８Ｆ）ＷＩＮ３５，４２８（（１１Ｃ）ＣＦＴ）、１２３Ｉアルトロパン、（９９ｍＴｃ）Ｏ−１５０５、９９ｍＴｃ−テクネピン（ｔｅｃｈｎｅｐｉｎｅ）および同様の化合物が挙げられる。特定の理論になんら拘束されるものではないが、このような薬剤は、さまざまな親和性のドーパミン輸送体を結合させ、それにより、複数の異なる評価を実施することが可能になると考えられる。前述の薬剤のうちいくつかの構造、合成および／または供給源については、Ｆｉｓｃｈｍａｎら、１９９８年、Ｓｙｎａｐｓｅ、２９巻、１２５〜４１頁（（１２３Ｉ） Ａｌｔｒｏｐａｎｅ）；Ｍａｄｒａｓら、１９９６年、Ｓｙｎａｐｓｅ、２２巻、２３９〜４６頁；Ｍｅｌｔｚｅｒら、１９９３年、Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．、３６巻、８５５〜６２頁；およびＭｉｌｉｕｓら、１９９０年、Ｊ． Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍ．、３４巻、１７２８〜３１頁に記載があり、そのそれぞれは、すべての参考文献が本明細書中に引用されているのと同様に、参照によりその全体が本明細書中に組み込まれる。別の有用な化合物としては、１２３Ｉ−イオフルパン（ＤａｔＳＣＡＮ（商標）、（Ｎｙｃｏｍｅｄ−Ａｍｅｒｓｈａｍ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）が挙げられる。
【００２２】
適当なリガンドの例としては、（１１Ｃ）ＣＦＴ（（１１Ｃ）ＷＩＮ３５，４２８）、（１２３Ｉ）アルトロパン（登録商標）および（１８Ｆ）ＣＦＴが挙げられる。ＰＥＴにおける使用にとりわけ適したリガンドとしては、（１１Ｃ）アルトロパンが挙げられるが、これに限定されない。ＳＰＥＣＴにおける使用に適したリガンドとしては、（９９ｍＴｃ）テクネピン、Ｏ−１５０５および同様の化合物などテクネチウム標識されたフェニルトロパンのプローブが挙げられるが、これらに限定されない。本発明の方法において有用な化合物の他の例は、米国特許第５，４９３，０２６号、同第５，５０６，３５９号、同第５，７７０，１８０号、同第５，８５３，６９６号、同第５，９４８，９３３号、同第６，１７１，５７６号、同第６，５４８，０４１号および同第７，０８１，２３８号に記載があり、その開示内容は参照により本明細書に組み込まれる。評価のための対象の中枢神経系の部分は、好ましくはヒトの脳の部分、例えば線条体である。
【００２３】
一態様では、本発明は、神経障害を区別するために、とりわけ２β−カルボメトキシ−３β−（４’−フルロフェニル）−Ｎ−（３−ヨード−Ｅ−アリル）ノルトロパン（ＡＬＴＲＯＰＡＮＥ（登録商標）、Ａｌｓｅｒｅｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．、Ｈｏｐｋｉｎｔｏｎ、ＭＡ）に関連して、米国特許第５，４９３，０２６号中で開示されたような１２３Ｉ化合物を採用する。これらの同じ機能について、本発明は、米国特許第６，１７１，５７６号および同第６，５４８，０４１号中で開示されているような放射標識として、テクネチウム（９９ｍＴｃ）を組み込むトロパンも採用する。
【００２４】
米国特許第６，５４８，０４１号中に記載の化合物には、テクネチウムまたはレニウムの放射性核種を複合体化してドーパミン輸送体に選択的に結合する中性の標識複合体を生成する能力のある、８位の窒素原子を介してキレート化リガンドに結合されたトロパン化合物がある。このトロパン化合物は、ドーパミン輸送体に結合すると考えられる。
【実施例】
【００２５】
以下の実施例は、本発明の特定の有用な実施形態および態様を例証するのに役立つものであり、その範囲を限定するものではないと解釈されたい。代替的な材料および方法を利用して、同様の結果を得ることができる。
【００２６】
（実施例１）
パーキンソン病対象および対照対象におけるＡＬＴＲＯＰＡＮＥ（登録商標）のＳＰＥＣＴ造影
以下の実施例は、１２３ＩアルトロパンのＳＰＥＣＴ造影試験に参加するパーキンソン病の調査参加者および健康対照についての単一光子放射型コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）による画像取得、分析方法および結果をまとめるものである。この実験は、パーキンソンの対象および同じくらいの年齢の健康対照対象において、時間的解像度の良好な動的ＳＰＥＣＴを用いた１２３Ｉアルトロパンの注射後最初の１時間にわたる時間−活性曲線および線条体のドーパミン輸送体占有率を評価するオープンラベル試験である。加えて、ＰＤ対象につき、２回目の注射および走査を別々の試験日において各対象について実施して、視覚的分析および定量的分析両方についての試験／再試験再現性データを評価する。
【００２７】
Ａ．対象および薬物投与
試験への登録についての地域広告および口頭伝達により、１５名の突発性パーキンソン病対象を募集する。造影は、Ｎｅｗ Ｈａｖｅｎ、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ、ＵＳＡ所在のＭｏｌｅｃｕｌａｒ ＮｅｕｒｏＩｍａｇｉｎｇ，ＬＬＣで実施する。１２３Ｉアルトロパンを、ＭＤＳ Ｎｏｒｄｉｏｎ，Ｉｎｃ（Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ、ＢＣ、カナダ）により提供された被験物質を用い、医師主導ＩＮＤ番号７６，０２４、主導医師Ｊ． Ｓｅｉｂｙｌ博士の指揮下で試験する。すべての対象は、一切の試験手順に先立ち、インフォームドコンセントを受ける。１５名の対象は全員、分割注射を２回、および、およそ２９６ｍＢｑ（８ｍＣｉ）の１２３Ｉアルトロパンを用いたＳＰＥＣＴ走査セッションを完了した。対象は、運動障害の専門医により投与される抗パーキンソン病薬を投薬しない一晩の期間の後に、統合パーキンソン病評価尺度（スケール）（ＵＰＤＲＳ）を用いて運動評価を受ける。
【００２８】
ＰＤ（パーキンソン病）対象として、同一のＳＰＥＣＴ画像取得プロトコールを用い、１２３Ｉアルトロパンを用いた単独の走査セッションへの参加のために、１２名の健康対照対象を募集する。健康対象は、運動障害の専門医により評価して、神経疾患に罹患していないことを確認する。
【００２９】
Ｂ．ＳＰＥＣＴ造影および分析
２９６ｍＢｑ（８．０ｍＣｉ）の１２３Ｉアルトロパンを用いた静脈内注射に続く６０分間、ＳＰＥＣＴ走査画像を取得する。一連の動的なＳＰＥＣＴ走査画像は、１取得当たり６分で５枚の走査画像として、次いで、１取得当たり１０分で３枚の走査画像として得る。対象は、取得の持続期間中はカメラの中に留まる。ファンビームコリメーターを取り付けたＰｈｉｌｉｐｓ ＰＲＩＳＭ ３０００ＸＰの、ヘッドを３個付けたＳＰＥＣＴカメラ（Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ、Ｏｈｉｏ、ＵＳＡ）を用いて各ＳＰＥＣＴ試験を取得する。各ヘッドは３６０度回転し、１ヘッド当たり３度毎に合計１２０枚の生の投影画像をサンプリングする。投影データは、１５９ｋＥｖ（±１０％）の中心にある対称のエネルギー窓内の１２８×１２８マトリックス中で収集した。この取得プロトコールにより、１個、２個または３個すべてのヘッドからの情報を用いて各時点での造影データの事後分析が、ひいてはそれぞれ２．７、５．３および８．０ｍＣｉでの異なる注射用量の１２３Ｉアルトロパンの影響をモデル化することが可能になる。
【００３０】
フィルター逆投影および単純なランプフィルターの後に事後用の（３Ｄ）標準化されたローパスフィルターを使用して、データを再構成する。標準または特注の自動化ソフトウェアパッケージを用いてＣｈａｎｇ ０補正および０．１１ｃｍ−１のｍｕを適用することで減弱補正を実施した。左右の尾状核および被殻ならびに後頭部のバックグラウンド領域について個々の関心領域（ＲＯＩ）サンプリングを行い、３個ヘッドのデータ中にＲＯＩを設定する。次に、注射セッション（合計２４＝８時点×３通りのヘッド条件（１、１および２、１および２および３）におけるすべての画像にＲＯＩを適用した。各ＳＰＥＣＴ走査に先立ち、各走査セッション内のヘッドの動きを確認するために、１μＣｉの１２３Ｉを含有する５個の外部皮膚基準マーカーを、外眼角外耳道線に沿って設置した（右側２個、左側３個）。線条体領域中の計数密度（１分当たりのボクセル当たり計数）を後頭部のバックグラウンド領域中の計数密度で割ったものとして定義される線条体取込み比（ＳＢＲ）を定量するために、ＲＯＩ内総計数、総体積および計数密度（計数／ボクセル）を各走査から抽出してから、データスプレッドシートにログインした。左右の尾状核および被殻のＳＢＲ評点の平均値として、平均の線条体ＳＢＲ評点を計算した。線条体小領域中のサンプリングは同一サイズのＲＯＩを使用したので、左右の尾状核および被殻から平均ＳＢＲへは、同等の寄与があった。
【００３１】
注射後の６０分のサンプリング期間中に取得した８画像のそれぞれについての平均の線条体計数密度および後頭部のバックグラウンドについての時間−活性データをプロットして、ＰＤ対象および対照対象における１２３Ｉアルトロパンの取込みおよびウォッシュアウトの特徴を視覚的に調べることができるようにした。さらに、注射後の８時点で得られた各ＳＢＲ率をプロットした。１個、２個および３個のヘッドの造影データを用いて取得したデータにつき、各対象についてピークのＳＢＲを評価した。
【００３２】
各ＰＤ対象について、各注射の走査（図６にまとめる）について複合ＳＢＲ率を決定したが、これは、注射後１３〜４０分にわたり（合計時間２７分）収集したデータに対応する。これらの時点は、画像取得の６０分にわたるＳＢＲのピークおよび持続性の検討、ならびに、線条体の構造の最適同定のための走査画像を視覚的に調べた結果に基づいて選択した。次に、以下の式：
（１回目の注射の複合ＳＢＲ−２回目の注射の複合ＳＢＲ）／（１回目の注射の複合ＳＢＲ）
を用いて、この複合ＳＢＲを各対象の１回目および２回目の１２３Ｉアルトロパン注射日の中で比較して、ＳＢＲの再現性を検討した。
【００３３】
図３は、１２３Ｉアルトロパンのボーラス注射後の、ＰＤ対象および対照対象についての動的な線条体結合比のプロット図である。注射後約１５分までに結合率は比較的安定していることに注意されたい。このことから、１２３Ｉアルトロパン注射の１５分後に画像取得を開始すると、最適なシグナル：ノイズ情報が得られることが示唆される。
【００３４】
図４は、ＰＤ対象および対照対象についてのピークの線条体結合比（ＳＢＲ）の、年齢に対するプロット図である。ＳＢＲは、最大取込みを示す注射後の単独の走査として決定する。この結果尺度は、ドーパミン輸送体密度を評価するための正確な定量的尺度ではないが、とはいえ、特徴のはっきりしたこのＰＤ対象群と健康対照との間を非常によく区別する。
【００３５】
Ｃ．結果
登録された１５名のＰＤ対象全員が、ベースラインおよび再試験の１２３ＩアルトロパンのＳＰＥＣＴ試験を用いた試行を完了し、１２名の健康対照全員が１２３Ｉアルトロパンを用いた単独の試験についてのすべての造影評価を完了した。すべての造影データは、生の投影データセットにおける妥当な計数統計を有する良好な技術的品質のものであり、分析に組み入れた。いずれの走査も、技術的理由（例えば、ヘッドの動き、注射用量の低さ、または、準最適な品質についての他の理由）を理由に排除する必要はなかった。対象の人口統計的データを表１にまとめる。
【００３６】
【表１】
【００３７】
【表２】
ＰＤにおける１２３Ｉアルトロパンについての動的な時間−活性データ
対照およびＰＤ対象における１２３Ｉアルトロパンの注射に続き、注射から１０分後のピークの線条体計数密度に注目する。（図１および２）。大部分の対象は、脳からのアルトロパンの急速な消失を呈することが認められる。図１は、１２３Ｉアルトロパンのボーラス注射を受け、６０分にわたり造影された健康対照対象についての動的な時間−活性データのグラフ表示である。線条体についてのピークの取込みは１０分までに生じるが、バックグラウンド取込みは１回目の取得時にピークに達する。線条体および後頭部のバックグラウンド領域は両方とも急速なウォッシュアウトを示す。図１ａは、特徴的な線条体取込みおよび皮質の均一なバックグラウンドを示す画像である。図２は、１２３Ｉアルトロパンのボーラス注射に続き、６０分にわたり造影されたＰＤ対象についての動的な時間−活性データのグラフ表示である。線条体についてのピークの取込みおよびバックグラウンド取込みは、１回目の取得時に生じる。図２ａは、ＰＤにおけるドーパミン輸送体喪失の公知のパターンと一致し図１および１ａにおける対照対象とは視覚的に異なる、被殻中で最も顕著な線条体取込みの減少を示す。
【００３８】
線条体構造中の取込みの局在性は、試験におけるすべての対象において十分実証され、対照においては特徴的な「カンマ」形状の外見の線条体の取込みが、また、ＰＤにおけるアルトロパンおよび他のＳＰＥＣＴ試験を用いた他のドーパミン輸送体試験と一致したＰＤ対象においてはより非対称性の高い取込み（左右の非対称、および、尾状核＞被殻という非対称）が見られた。１２３Ｉアルトロパンの注射後２０〜３０分までは、線条体および後頭部のバックグラウンド領域からのウォッシュアウト速度は類似しており、線条体結合比は安定していると結論される。
【００３９】
結合比は、造影ヘッド３個の投影データから造影ヘッド２個の投影データに移るとき、さらには、ＳＰＥＣＴ再構成において１個のみの造影ヘッドを使用するとき、わずかに低下する。ＳＢＲ曲線の形状には影響がなく、ピークのＳＢＲは１個および２個のヘッドの場合は両方について注射後１５分から生じ、このことから、結合率が最高の時点でのシグナル対ノイズ比から見た最適な走査プロトコールが示唆される。表３は、ＰＤ対象および対照対象についてのピークのＳＢＲを示しており（単独の走査に基づく）、より少ない数の造影ヘッドを再構成中に組み込むと、ピークのＳＢＲが少し低下することが示される。
【００４０】
【表３】
半定量的なピークのＳＢＲを調べると、ＰＤ対象と健康対照との間の差が示される（図４、５）。図４は、ＰＤ対象および対照対象のピークの線条体結合比（ＳＢＲ）の、年齢に対するグラフ表示である。ＳＢＲは、注射後の単独の走査として定量したものであり、最大取込みを示す。この尺度により、特徴のはっきりしたこのＰＤ対象群と健康対照との間が非常によく区別される。図５は、ＰＤの１回目および２回目（再試験）の試験ならびに対照対象についてのピークの線条体結合比（ＳＢＲ）のグラフ表示である。図６は、再構成に３個、２個および１個の造影ヘッド（複数可）を使用した、ＰＤ対象における横断ＳＰＥＣＴ画像のグラフ表示である。図６は、総合的な走査画像として処理した、１個、２個および３個の造影ヘッドのデータについてのＰＤ対象における画像を示すものである。８ｍＣｉの１２３Ｉアルトロパン注射後に単一のヘッドから取得したデータについては、こうした画像の視覚的な質は低下している。
【００４１】
ＰＤにおける１２３Ｉアルトロパン注射の試験−再試験の再現性
１２３Ｉアルトロパンのボーラス注射の約１５分後に始まるおよそ３０分の造影に相当する走査番号３から６の平均として得た平均総結合率を用いて、１５名のＰＤ対象全員におけるＳＰＥＣＴ造影の試験−再試験の再現性を評価した。この尺度については、試験／再試験の再現率（％）は、以下のように表される：（試験の比率−再試験の比率）／（試験の比率）、単位は比率（％）。３個、２個および１個の造影ヘッドのデータ再構成の条件下におけるすべてのＰＤ対象についての結果を表４に記載する。
【００４２】
【表４−１】
【００４３】
【表４−２】
１２３Ｉアルトロパン注射の１５分後に始まるおよそ３０分に相当する時点の間に得られる総合的な線条体結合により、試験した１５名のＰＤ対象における強い再現性が実証される。再構成に関連する計数の減少は、この分析において用いる再現性の尺度に対し顕著な影響を一切及ぼさなかった。
【００４４】
手順を効率化するには、以下が好ましい：
ａ）対象を造影台上に位置付けた後、８ｍＣｉの１２３Ｉアルトロパンの単回の急速注射またはボーラス注射を投与する、
ｂ）１２３Ｉアルトロパンの投与から１５分後に始まる３０分間の単独のＳＰＥＣＴ取得を開始する、
ｃ）２個および３個のヘッドを付けたＳＰＥＣＴ断層撮影機を用いて走査を実施する。
【００４５】
代替的な実施形態では、多様な低用量および高用量の範囲で、または、単独のヘッドを付けたカメラ装置において多様な再構成およびフィルター処理戦略を利用することにより、１２３Ｉアルトロパンを投与する。例えば、これらのデータの反復的な再構成を採用すれば、画像のシグナル対ノイズ特性を高めることになろう。一実施形態では、２Ｄまたは３Ｄのデータセットにおいて１つまたは複数のフィルターを使用する。
【００４６】
このデータセットからの知見は一般化可能である。一実施形態では、１２３Ｉアルトロパン造影データの再構成およびフィルター処理は、典型的な臨床用核医学装置において遭遇する可能性のある一般に入手可能で標準的なアルゴリズムを使用する。
【００４７】
参照による組込み
本明細書中において参照される特許および科学文献は、当業者に入手可能な知識を確立するものである。本明細書中で引用する、交付された特許、特許出願、公開された外国出願および刊行された参考文献はすべて、参照によりその全体が組み込まれるとそれぞれが具体的かつ個々に示された場合と同程度に、参照により本明細書に組み込まれる。
【００４８】
等価物
当業者であれば、慣例的な実験法だけを用いて、本明細書中に具体的に記載した特定の実施形態との多数の等価物を認識するか、または、確認できるであろう。そのような等価物は、特許請求の範囲に記載の範囲内に包含されることを意図するものである。
【００４９】
参考文献
【００５０】
【化１】
【００５１】
【化２】
【００５２】
【化３】
【技術分野】
【０００１】
（関連する出願の情報）
本願は、２００７年１０月３１日に出願された米国特許出願第１１／９３１，９７９号の利益を主張する。米国特許出願第１１／９３１，９７９号の教示は、その全体が本明細書中に参照として援用される。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、ドーパミン輸送体部位を造影すること、より詳細には、神経障害を診断およびモニターすることに関する。
【背景技術】
【０００３】
神経障害のための診断方法の改善が必要とされている。ドーパミン輸送タンパク質（ドーパミン輸送体）を選択的に標的とし、セロトニン輸送体として知られる別のタンパク質と区別できる、神経障害を診断する方法がとりわけ必要である。正常な脳組織では、ドーパミン輸送体：セロトニン輸送体の密度比はおよそ１０：１である。パーキンソン病など特定の神経変性障害では、ドーパミンを産生する（および、その上にドーパミン輸送体が位置する）神経細胞が激しい欠乏を起こすが、セロトニン神経細胞が受ける影響はそれより少ない。ドーパミン輸送体：セロトニン輸送体の比率は、パーキンソン病においては２：１に低下することがある。
【０００４】
別の神経変性障害は、レヴィー小体認知症、別名、レヴィー小体を伴う認知症（ＤＬＢ）である。ＤＬＢは、アルツハイマー病に次いで、高齢者における変性認知症の２番目に多い原因である。ＤＬＢは、黒質中のドーパミン産生ニューロンの喪失（パーキンソン病において見られる喪失に似ている）と、マイネルト基底核およびそれ以外の場所におけるアセチルコリン産生ニューロンの喪失との両方を特徴とする。この側面は、アルツハイマー病において見られるものと類似している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、対象の中枢神経系中のドーパミン輸送体レベルを評価する方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の一態様では、対象の中枢神経系中のドーパミン輸送体レベルを評価する方法は、ａ）対象を造影台上に位置付けるステップと、ｂ）該対象を造影台上に位置付けた後で、標識されたドーパミン輸送体リガンドの注射を該対象に行うステップと、ｃ）標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与から約１５分後に始まる約３０分の持続期間にわたる単独のＳＰＥＣＴ取得を開始するステップと、ｄ）該対象について、対象の中枢神経系の少なくとも１つの領域中のドーパミン輸送体に結合する標識されたドーパミン輸送体リガンドの量を評価するステップとを含む。ボーラス注入または急速注入による標識されたドーパミン輸送体リガンドの注射は、有用な選択肢として注目される。
【０００７】
別の態様では、本発明は、対象の中枢神経系中のドーパミン輸送体レベルを評価するステップを含む、対象における神経障害を診断またはモニターする方法を提供する。一実施形態では、この神経障害は、レヴィー小体を伴う認知症である。別の実施形態では、この神経障害はパーキンソン病である。
【０００８】
本発明は、対象の中枢神経系の選択領域中のドーパミン輸送体レベルをＳＰＥＣＴ造影により評価する方法であって、造影に有効な持続期間（ある場合には約１０から約４５分、とりわけ約２０から約３０分、特に約３０分）にわたる前記選択領域の少なくとも１回のＳＰＥＣＴ取得を開始するステップであって、前記持続期間が、標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与後の永続平衡の開始期間内にあるステップと、前記選択領域中のドーパミン輸送体に結合する標識されたドーパミン輸送体リガンドの量を、前記ＳＰＥＣＴ取得に少なくとも部分的に基づいて評価するステップとを含む方法をさらに含む。場合により、この方法では、標識されたドーパミン輸送体リガンドは、［１２３Ｉ］−２β−カルボメトキシ−３β−（４−フルロフェニル）−Ｎ−（３−ヨード−Ｅ−アリル）ノルトロパン、別名１２３Ｉアルトロパン（Ａｌｔｒｏｐａｎｅ）である。特定の場合においては、この標識されたドーパミン輸送体リガンドは、約８ｍＣｉの用量で投与される。特に、この方法では、選択領域は、脳の部分、とりわけ線条体を含む。この方法の一実施形態では、永続平衡期間は、標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与から約１５分後に始まり、約４５分後に終了する。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】１２３Ｉアルトロパンのボーラス注射を受け、６０分にわたり造影された健康対照対象についての動的な時間−活性データのグラフ表示である。
【図１Ａ】特徴的な線条体取込みおよび皮質の均質なバックグラウンドを示す画像である。
【図２】１２３Ｉアルトロパンのボーラス注射後に、６０分にわたり造影されたＰＤ対象についての動的な時間−活性データのグラフ表示である。
【図２Ａ】図２のデータに対応する画像である。
【図３】１２３Ｉアルトロパンのボーラス注射後のＰＤ対象および対照対象についての動的な線条体結合比のグラフ表示である。
【図４】ＰＤ対象および対照対象についてのピークの線条体結合比（ＳＢＲ）の、年齢に対するグラフ表示である。
【図５】ＰＤ対象の１回目および２回目（再試験）の試験ならびに対照対象についてのピークの線条体結合比（ＳＢＲ）のグラフ表示である。
【図６】再構成用に３個、２個および１個の造影ヘッド（複数可）を用いた場合のＰＤ対象における横断ＳＰＥＣＴ画像の図表示である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明の一態様では、脳、とりわけ線条体など、対象の中枢神経系中のドーパミン輸送体レベルを評価する方法は、好ましくは対象を造影台上に位置付けた後で、標識されたドーパミン輸送体リガンド（場合により１２３Ｉアルトロパン）の注射を対象に行うステップと、標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与から約１５分後に始まる、造影に有効な持続期間、とりわけ約３０分の持続期間にわたる単独のＳＰＥＣＴ取得を開始するステップと、次いで、該対象の中枢神経系の少なくとも１つの領域中のドーパミン輸送体に結合する標識されたドーパミン輸送体リガンドの量を評価するステップとを含む。
【００１１】
ＳＰＥＣＴ画像は、１個または複数のヘッドを備えるＳＰＥＣＴ断層撮影機を用いて取得できる。一実施形態では、ＳＰＥＣＴの取得は、ヘッドを１個付けたＳＰＥＣＴ断層撮影機を用いて実施する。別の実施形態では、ＳＰＥＣＴの取得は、ヘッドを２個付けたＳＰＥＣＴ断層撮影機を用いて実施する。別の実施形態では、ＳＰＥＣＴの取得は、ヘッドを３個付けたＳＰＥＣＴ断層撮影機を用いて実施する。造影に有効な持続期間は、ヘッドの数および各ヘッドの感度、造影剤の投与量および放出量により、ならびに、収集する画像またはデータの所望の詳細により影響されよう。これらのパラメーターは、当業者には周知である。
【００１２】
一実施形態では、標識されたドーパミン輸送体リガンドは、約１ｍＣｉから約１０ｍＣｉの範囲の用量で投与される。別の実施形態では、標識されたドーパミン輸送体リガンドは、約５ｍＣｉから約８ｍＣｉの範囲の用量で投与される。別の実施形態では、標識されたドーパミン輸送体リガンドは、約８ｍＣｉの用量で投与される。
【００１３】
別の態様では、本発明は、対象の中枢神経系中のドーパミン輸送体レベルを評価するステップを含む、対象における神経障害を診断またはモニターする方法を提供する。一実施形態では、この神経障害は、レヴィー小体を伴う認知症である。別の実施形態では、この神経障害はパーキンソン病である。
【００１４】
本明細書中で使用する場合、用語「ドーパミン輸送体リガンド」は、ドーパミン輸送体に結合する化合物を意味する。一実施形態では、化合物は、セロトニン輸送体より優先的にドーパミン輸送体に選択的に結合する。
【００１５】
用語「対象」は、治療、診断および予防のステップおよび手順が含まれると広く理解されている治療を必要とする患者を意味する。一実施形態では、対象は、哺乳動物、とりわけヒトである。
【００１６】
用語「選択領域」は、脳、とりわけ脳の線条体など、対象の中枢神経系を意味する。
【００１７】
一態様では、標識されたドーパミン輸送体リガンドは、ＳＰＥＣＴ造影のために対象を位置付けたおよその時点で対象に投与する。用語「およその時点」は、ＳＰＥＣＴ造影のために対象を位置付ける前後約６０分、とりわけ約３０分、さらにはとりわけ約１５分から実質的な直前直後までを指す。一実施形態では、対象を造影台上にまず位置付けてから、次いでドーパミン輸送体リガンドを投与する。別の実施形態では、対象にドーパミン輸送体リガンドをまず投与し、続いて造影台上に対象を位置付ける。
【００１８】
走査時間については、ドーパミン輸送体リガンドのＳＰＥＣＴ走査のシグナル−ノイズ（Ｓ／Ｎ）比はドーパミン輸送体リガンドの注射後約１５分から約４５分の時点の間で最適であることが見出されている。
【００１９】
画像の取得についてはいくつかの選択肢が使用可能である。一実施形態では、ＳＰＥＣＴ走査は、連続的な１回の走査またはより短い一連の走査である。別の実施形態では、ＳＰＥＣＴ走査は、１回または複数回の一連の２分間走査を含む。別の実施形態では、ＳＰＥＣＴ走査は、１回または複数回の一連の１０分間走査を含む。特定の一実施形態では、ＳＰＥＣＴ画像は、連続的な１回の３０分間走査を用いて生成する。別の特定の実施形態では、ＳＰＥＣＴ画像は、６０分の期間にわたる一連の２分間走査を用いて生成する。別の特定の実施形態では、ＳＰＥＣＴ画像は、４０分の期間にわたる一連の４分間走査を用いて生成する。
【００２０】
ドーパミン輸送体レベルの評価は、診断調査の過程におけるのと同様に、ドーパミン輸送体の利用能を測定することにより実施できる。測定は、陽電子放射型断層撮影法（「ＰＥＴ」）または単一光子放射型コンピュータ断層撮影法（「ＳＰＥＣＴ」）などの装置を用いて行うことができる。ドーパミン輸送体の利用能を測定するには、この輸送体を標的とする標識されたプローブを脳中に（例えば静脈内に）導入し、ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴを実施する。ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴのデータおよび画像から、ドーパミン輸送体の密度を定量化する。一実施形態では、定量化は、結合能をコンピュータで計算することにより決定するが、この場合の結合能は、結合部位の最大数Ｂｍａｘを解離定数Ｋｄで割ったものと定義される。結合能は、約１５分の時点で開始する連続的な走査から計算する。関心領域を同定し、その領域中の計数を決定する。適切なモデル化を用いて結合能についての数値が計算でき、これらの値を、同等の治療および走査のプロトコールを受けている対象間で比較できる。１２３Ｉ−アルトロパンの線条体結合能（ｋ３／ｋ４）は、Ｆａｒｄｅら（Ｆａｒｄｅら、１９８９年、Ｊ． Ｃｅｒｅｂ．、Ｂｌｏｏｄ Ｆｌｏｗ Ｍｅｔａｂ、９巻、６９６〜７０８頁）により記載されたような基準領域法により計算する。
【００２１】
ドーパミン輸送体を標的とする造影剤としては、（１１Ｃ）アルトロパン、（１１Ｃまたは１８Ｆ）ＷＩＮ３５，４２８（（１１Ｃ）ＣＦＴ）、１２３Ｉアルトロパン、（９９ｍＴｃ）Ｏ−１５０５、９９ｍＴｃ−テクネピン（ｔｅｃｈｎｅｐｉｎｅ）および同様の化合物が挙げられる。特定の理論になんら拘束されるものではないが、このような薬剤は、さまざまな親和性のドーパミン輸送体を結合させ、それにより、複数の異なる評価を実施することが可能になると考えられる。前述の薬剤のうちいくつかの構造、合成および／または供給源については、Ｆｉｓｃｈｍａｎら、１９９８年、Ｓｙｎａｐｓｅ、２９巻、１２５〜４１頁（（１２３Ｉ） Ａｌｔｒｏｐａｎｅ）；Ｍａｄｒａｓら、１９９６年、Ｓｙｎａｐｓｅ、２２巻、２３９〜４６頁；Ｍｅｌｔｚｅｒら、１９９３年、Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．、３６巻、８５５〜６２頁；およびＭｉｌｉｕｓら、１９９０年、Ｊ． Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍ．、３４巻、１７２８〜３１頁に記載があり、そのそれぞれは、すべての参考文献が本明細書中に引用されているのと同様に、参照によりその全体が本明細書中に組み込まれる。別の有用な化合物としては、１２３Ｉ−イオフルパン（ＤａｔＳＣＡＮ（商標）、（Ｎｙｃｏｍｅｄ−Ａｍｅｒｓｈａｍ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）が挙げられる。
【００２２】
適当なリガンドの例としては、（１１Ｃ）ＣＦＴ（（１１Ｃ）ＷＩＮ３５，４２８）、（１２３Ｉ）アルトロパン（登録商標）および（１８Ｆ）ＣＦＴが挙げられる。ＰＥＴにおける使用にとりわけ適したリガンドとしては、（１１Ｃ）アルトロパンが挙げられるが、これに限定されない。ＳＰＥＣＴにおける使用に適したリガンドとしては、（９９ｍＴｃ）テクネピン、Ｏ−１５０５および同様の化合物などテクネチウム標識されたフェニルトロパンのプローブが挙げられるが、これらに限定されない。本発明の方法において有用な化合物の他の例は、米国特許第５，４９３，０２６号、同第５，５０６，３５９号、同第５，７７０，１８０号、同第５，８５３，６９６号、同第５，９４８，９３３号、同第６，１７１，５７６号、同第６，５４８，０４１号および同第７，０８１，２３８号に記載があり、その開示内容は参照により本明細書に組み込まれる。評価のための対象の中枢神経系の部分は、好ましくはヒトの脳の部分、例えば線条体である。
【００２３】
一態様では、本発明は、神経障害を区別するために、とりわけ２β−カルボメトキシ−３β−（４’−フルロフェニル）−Ｎ−（３−ヨード−Ｅ−アリル）ノルトロパン（ＡＬＴＲＯＰＡＮＥ（登録商標）、Ａｌｓｅｒｅｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．、Ｈｏｐｋｉｎｔｏｎ、ＭＡ）に関連して、米国特許第５，４９３，０２６号中で開示されたような１２３Ｉ化合物を採用する。これらの同じ機能について、本発明は、米国特許第６，１７１，５７６号および同第６，５４８，０４１号中で開示されているような放射標識として、テクネチウム（９９ｍＴｃ）を組み込むトロパンも採用する。
【００２４】
米国特許第６，５４８，０４１号中に記載の化合物には、テクネチウムまたはレニウムの放射性核種を複合体化してドーパミン輸送体に選択的に結合する中性の標識複合体を生成する能力のある、８位の窒素原子を介してキレート化リガンドに結合されたトロパン化合物がある。このトロパン化合物は、ドーパミン輸送体に結合すると考えられる。
【実施例】
【００２５】
以下の実施例は、本発明の特定の有用な実施形態および態様を例証するのに役立つものであり、その範囲を限定するものではないと解釈されたい。代替的な材料および方法を利用して、同様の結果を得ることができる。
【００２６】
（実施例１）
パーキンソン病対象および対照対象におけるＡＬＴＲＯＰＡＮＥ（登録商標）のＳＰＥＣＴ造影
以下の実施例は、１２３ＩアルトロパンのＳＰＥＣＴ造影試験に参加するパーキンソン病の調査参加者および健康対照についての単一光子放射型コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）による画像取得、分析方法および結果をまとめるものである。この実験は、パーキンソンの対象および同じくらいの年齢の健康対照対象において、時間的解像度の良好な動的ＳＰＥＣＴを用いた１２３Ｉアルトロパンの注射後最初の１時間にわたる時間−活性曲線および線条体のドーパミン輸送体占有率を評価するオープンラベル試験である。加えて、ＰＤ対象につき、２回目の注射および走査を別々の試験日において各対象について実施して、視覚的分析および定量的分析両方についての試験／再試験再現性データを評価する。
【００２７】
Ａ．対象および薬物投与
試験への登録についての地域広告および口頭伝達により、１５名の突発性パーキンソン病対象を募集する。造影は、Ｎｅｗ Ｈａｖｅｎ、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ、ＵＳＡ所在のＭｏｌｅｃｕｌａｒ ＮｅｕｒｏＩｍａｇｉｎｇ，ＬＬＣで実施する。１２３Ｉアルトロパンを、ＭＤＳ Ｎｏｒｄｉｏｎ，Ｉｎｃ（Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ、ＢＣ、カナダ）により提供された被験物質を用い、医師主導ＩＮＤ番号７６，０２４、主導医師Ｊ． Ｓｅｉｂｙｌ博士の指揮下で試験する。すべての対象は、一切の試験手順に先立ち、インフォームドコンセントを受ける。１５名の対象は全員、分割注射を２回、および、およそ２９６ｍＢｑ（８ｍＣｉ）の１２３Ｉアルトロパンを用いたＳＰＥＣＴ走査セッションを完了した。対象は、運動障害の専門医により投与される抗パーキンソン病薬を投薬しない一晩の期間の後に、統合パーキンソン病評価尺度（スケール）（ＵＰＤＲＳ）を用いて運動評価を受ける。
【００２８】
ＰＤ（パーキンソン病）対象として、同一のＳＰＥＣＴ画像取得プロトコールを用い、１２３Ｉアルトロパンを用いた単独の走査セッションへの参加のために、１２名の健康対照対象を募集する。健康対象は、運動障害の専門医により評価して、神経疾患に罹患していないことを確認する。
【００２９】
Ｂ．ＳＰＥＣＴ造影および分析
２９６ｍＢｑ（８．０ｍＣｉ）の１２３Ｉアルトロパンを用いた静脈内注射に続く６０分間、ＳＰＥＣＴ走査画像を取得する。一連の動的なＳＰＥＣＴ走査画像は、１取得当たり６分で５枚の走査画像として、次いで、１取得当たり１０分で３枚の走査画像として得る。対象は、取得の持続期間中はカメラの中に留まる。ファンビームコリメーターを取り付けたＰｈｉｌｉｐｓ ＰＲＩＳＭ ３０００ＸＰの、ヘッドを３個付けたＳＰＥＣＴカメラ（Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ、Ｏｈｉｏ、ＵＳＡ）を用いて各ＳＰＥＣＴ試験を取得する。各ヘッドは３６０度回転し、１ヘッド当たり３度毎に合計１２０枚の生の投影画像をサンプリングする。投影データは、１５９ｋＥｖ（±１０％）の中心にある対称のエネルギー窓内の１２８×１２８マトリックス中で収集した。この取得プロトコールにより、１個、２個または３個すべてのヘッドからの情報を用いて各時点での造影データの事後分析が、ひいてはそれぞれ２．７、５．３および８．０ｍＣｉでの異なる注射用量の１２３Ｉアルトロパンの影響をモデル化することが可能になる。
【００３０】
フィルター逆投影および単純なランプフィルターの後に事後用の（３Ｄ）標準化されたローパスフィルターを使用して、データを再構成する。標準または特注の自動化ソフトウェアパッケージを用いてＣｈａｎｇ ０補正および０．１１ｃｍ−１のｍｕを適用することで減弱補正を実施した。左右の尾状核および被殻ならびに後頭部のバックグラウンド領域について個々の関心領域（ＲＯＩ）サンプリングを行い、３個ヘッドのデータ中にＲＯＩを設定する。次に、注射セッション（合計２４＝８時点×３通りのヘッド条件（１、１および２、１および２および３）におけるすべての画像にＲＯＩを適用した。各ＳＰＥＣＴ走査に先立ち、各走査セッション内のヘッドの動きを確認するために、１μＣｉの１２３Ｉを含有する５個の外部皮膚基準マーカーを、外眼角外耳道線に沿って設置した（右側２個、左側３個）。線条体領域中の計数密度（１分当たりのボクセル当たり計数）を後頭部のバックグラウンド領域中の計数密度で割ったものとして定義される線条体取込み比（ＳＢＲ）を定量するために、ＲＯＩ内総計数、総体積および計数密度（計数／ボクセル）を各走査から抽出してから、データスプレッドシートにログインした。左右の尾状核および被殻のＳＢＲ評点の平均値として、平均の線条体ＳＢＲ評点を計算した。線条体小領域中のサンプリングは同一サイズのＲＯＩを使用したので、左右の尾状核および被殻から平均ＳＢＲへは、同等の寄与があった。
【００３１】
注射後の６０分のサンプリング期間中に取得した８画像のそれぞれについての平均の線条体計数密度および後頭部のバックグラウンドについての時間−活性データをプロットして、ＰＤ対象および対照対象における１２３Ｉアルトロパンの取込みおよびウォッシュアウトの特徴を視覚的に調べることができるようにした。さらに、注射後の８時点で得られた各ＳＢＲ率をプロットした。１個、２個および３個のヘッドの造影データを用いて取得したデータにつき、各対象についてピークのＳＢＲを評価した。
【００３２】
各ＰＤ対象について、各注射の走査（図６にまとめる）について複合ＳＢＲ率を決定したが、これは、注射後１３〜４０分にわたり（合計時間２７分）収集したデータに対応する。これらの時点は、画像取得の６０分にわたるＳＢＲのピークおよび持続性の検討、ならびに、線条体の構造の最適同定のための走査画像を視覚的に調べた結果に基づいて選択した。次に、以下の式：
（１回目の注射の複合ＳＢＲ−２回目の注射の複合ＳＢＲ）／（１回目の注射の複合ＳＢＲ）
を用いて、この複合ＳＢＲを各対象の１回目および２回目の１２３Ｉアルトロパン注射日の中で比較して、ＳＢＲの再現性を検討した。
【００３３】
図３は、１２３Ｉアルトロパンのボーラス注射後の、ＰＤ対象および対照対象についての動的な線条体結合比のプロット図である。注射後約１５分までに結合率は比較的安定していることに注意されたい。このことから、１２３Ｉアルトロパン注射の１５分後に画像取得を開始すると、最適なシグナル：ノイズ情報が得られることが示唆される。
【００３４】
図４は、ＰＤ対象および対照対象についてのピークの線条体結合比（ＳＢＲ）の、年齢に対するプロット図である。ＳＢＲは、最大取込みを示す注射後の単独の走査として決定する。この結果尺度は、ドーパミン輸送体密度を評価するための正確な定量的尺度ではないが、とはいえ、特徴のはっきりしたこのＰＤ対象群と健康対照との間を非常によく区別する。
【００３５】
Ｃ．結果
登録された１５名のＰＤ対象全員が、ベースラインおよび再試験の１２３ＩアルトロパンのＳＰＥＣＴ試験を用いた試行を完了し、１２名の健康対照全員が１２３Ｉアルトロパンを用いた単独の試験についてのすべての造影評価を完了した。すべての造影データは、生の投影データセットにおける妥当な計数統計を有する良好な技術的品質のものであり、分析に組み入れた。いずれの走査も、技術的理由（例えば、ヘッドの動き、注射用量の低さ、または、準最適な品質についての他の理由）を理由に排除する必要はなかった。対象の人口統計的データを表１にまとめる。
【００３６】
【表１】
【００３７】
【表２】
ＰＤにおける１２３Ｉアルトロパンについての動的な時間−活性データ
対照およびＰＤ対象における１２３Ｉアルトロパンの注射に続き、注射から１０分後のピークの線条体計数密度に注目する。（図１および２）。大部分の対象は、脳からのアルトロパンの急速な消失を呈することが認められる。図１は、１２３Ｉアルトロパンのボーラス注射を受け、６０分にわたり造影された健康対照対象についての動的な時間−活性データのグラフ表示である。線条体についてのピークの取込みは１０分までに生じるが、バックグラウンド取込みは１回目の取得時にピークに達する。線条体および後頭部のバックグラウンド領域は両方とも急速なウォッシュアウトを示す。図１ａは、特徴的な線条体取込みおよび皮質の均一なバックグラウンドを示す画像である。図２は、１２３Ｉアルトロパンのボーラス注射に続き、６０分にわたり造影されたＰＤ対象についての動的な時間−活性データのグラフ表示である。線条体についてのピークの取込みおよびバックグラウンド取込みは、１回目の取得時に生じる。図２ａは、ＰＤにおけるドーパミン輸送体喪失の公知のパターンと一致し図１および１ａにおける対照対象とは視覚的に異なる、被殻中で最も顕著な線条体取込みの減少を示す。
【００３８】
線条体構造中の取込みの局在性は、試験におけるすべての対象において十分実証され、対照においては特徴的な「カンマ」形状の外見の線条体の取込みが、また、ＰＤにおけるアルトロパンおよび他のＳＰＥＣＴ試験を用いた他のドーパミン輸送体試験と一致したＰＤ対象においてはより非対称性の高い取込み（左右の非対称、および、尾状核＞被殻という非対称）が見られた。１２３Ｉアルトロパンの注射後２０〜３０分までは、線条体および後頭部のバックグラウンド領域からのウォッシュアウト速度は類似しており、線条体結合比は安定していると結論される。
【００３９】
結合比は、造影ヘッド３個の投影データから造影ヘッド２個の投影データに移るとき、さらには、ＳＰＥＣＴ再構成において１個のみの造影ヘッドを使用するとき、わずかに低下する。ＳＢＲ曲線の形状には影響がなく、ピークのＳＢＲは１個および２個のヘッドの場合は両方について注射後１５分から生じ、このことから、結合率が最高の時点でのシグナル対ノイズ比から見た最適な走査プロトコールが示唆される。表３は、ＰＤ対象および対照対象についてのピークのＳＢＲを示しており（単独の走査に基づく）、より少ない数の造影ヘッドを再構成中に組み込むと、ピークのＳＢＲが少し低下することが示される。
【００４０】
【表３】
半定量的なピークのＳＢＲを調べると、ＰＤ対象と健康対照との間の差が示される（図４、５）。図４は、ＰＤ対象および対照対象のピークの線条体結合比（ＳＢＲ）の、年齢に対するグラフ表示である。ＳＢＲは、注射後の単独の走査として定量したものであり、最大取込みを示す。この尺度により、特徴のはっきりしたこのＰＤ対象群と健康対照との間が非常によく区別される。図５は、ＰＤの１回目および２回目（再試験）の試験ならびに対照対象についてのピークの線条体結合比（ＳＢＲ）のグラフ表示である。図６は、再構成に３個、２個および１個の造影ヘッド（複数可）を使用した、ＰＤ対象における横断ＳＰＥＣＴ画像のグラフ表示である。図６は、総合的な走査画像として処理した、１個、２個および３個の造影ヘッドのデータについてのＰＤ対象における画像を示すものである。８ｍＣｉの１２３Ｉアルトロパン注射後に単一のヘッドから取得したデータについては、こうした画像の視覚的な質は低下している。
【００４１】
ＰＤにおける１２３Ｉアルトロパン注射の試験−再試験の再現性
１２３Ｉアルトロパンのボーラス注射の約１５分後に始まるおよそ３０分の造影に相当する走査番号３から６の平均として得た平均総結合率を用いて、１５名のＰＤ対象全員におけるＳＰＥＣＴ造影の試験−再試験の再現性を評価した。この尺度については、試験／再試験の再現率（％）は、以下のように表される：（試験の比率−再試験の比率）／（試験の比率）、単位は比率（％）。３個、２個および１個の造影ヘッドのデータ再構成の条件下におけるすべてのＰＤ対象についての結果を表４に記載する。
【００４２】
【表４−１】
【００４３】
【表４−２】
１２３Ｉアルトロパン注射の１５分後に始まるおよそ３０分に相当する時点の間に得られる総合的な線条体結合により、試験した１５名のＰＤ対象における強い再現性が実証される。再構成に関連する計数の減少は、この分析において用いる再現性の尺度に対し顕著な影響を一切及ぼさなかった。
【００４４】
手順を効率化するには、以下が好ましい：
ａ）対象を造影台上に位置付けた後、８ｍＣｉの１２３Ｉアルトロパンの単回の急速注射またはボーラス注射を投与する、
ｂ）１２３Ｉアルトロパンの投与から１５分後に始まる３０分間の単独のＳＰＥＣＴ取得を開始する、
ｃ）２個および３個のヘッドを付けたＳＰＥＣＴ断層撮影機を用いて走査を実施する。
【００４５】
代替的な実施形態では、多様な低用量および高用量の範囲で、または、単独のヘッドを付けたカメラ装置において多様な再構成およびフィルター処理戦略を利用することにより、１２３Ｉアルトロパンを投与する。例えば、これらのデータの反復的な再構成を採用すれば、画像のシグナル対ノイズ特性を高めることになろう。一実施形態では、２Ｄまたは３Ｄのデータセットにおいて１つまたは複数のフィルターを使用する。
【００４６】
このデータセットからの知見は一般化可能である。一実施形態では、１２３Ｉアルトロパン造影データの再構成およびフィルター処理は、典型的な臨床用核医学装置において遭遇する可能性のある一般に入手可能で標準的なアルゴリズムを使用する。
【００４７】
参照による組込み
本明細書中において参照される特許および科学文献は、当業者に入手可能な知識を確立するものである。本明細書中で引用する、交付された特許、特許出願、公開された外国出願および刊行された参考文献はすべて、参照によりその全体が組み込まれるとそれぞれが具体的かつ個々に示された場合と同程度に、参照により本明細書に組み込まれる。
【００４８】
等価物
当業者であれば、慣例的な実験法だけを用いて、本明細書中に具体的に記載した特定の実施形態との多数の等価物を認識するか、または、確認できるであろう。そのような等価物は、特許請求の範囲に記載の範囲内に包含されることを意図するものである。
【００４９】
参考文献
【００５０】
【化１】
【００５１】
【化２】
【００５２】
【化３】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象の中枢神経系の選択領域中のドーパミン輸送体レベルをＳＰＥＣＴ造影により評価する方法であって、
ａ）標識されたドーパミン輸送体リガンドを、ＳＰＥＣＴ造影のために前記対象を位置付けたおよその時点で前記対象に投与するステップと、
ｂ）前記標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与から約１５分後に始まる約３０分の持続期間にわたる前記選択領域の少なくとも１回のＳＰＥＣＴ取得を開始するステップと、
ｃ）前記選択領域中のドーパミン輸送体に結合する前記標識されたドーパミン輸送体リガンドの量を、前記ＳＰＥＣＴ取得に少なくとも部分的に基づいて評価するステップと
を含む方法。
【請求項２】
前記標識されたドーパミン輸送体リガンドが１２３Ｉアルトロパンである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記標識されたドーパミン輸送体リガンドが、約８ｍＣｉの用量で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記選択領域が脳の部分を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記脳の部分が線条体を含む、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
対象におけるアルトロパンの配置をＳＰＥＣＴ造影により評価する方法であって、
ａ）標識されたドーパミン輸送体リガンドを、ＳＰＥＣＴ造影のために前記対象を位置付けたおよその時点で前記対象に投与するステップと、
ｂ）前記標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与から約１５分後に始まる約３０分の持続期間にわたる選択領域の少なくとも１回のＳＰＥＣＴ取得を開始するステップと、
ｃ）前記選択領域中のドーパミン輸送体に結合する標識されたドーパミン輸送体リガンドの量を、前記ＳＰＥＣＴ取得に少なくとも部分的に基づいて評価するステップと
を含む方法。
【請求項７】
対象の中枢神経系の選択領域中のドーパミン輸送体レベルをＳＰＥＣＴ造影により評価する方法であって、
ａ）造影に有効な持続期間にわたる前記選択領域の少なくとも１回のＳＰＥＣＴ取得を開始するステップであって、前記持続期間が、前記標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与後の永続平衡の開始期間内にあるステップと、
ｂ）前記選択領域中のドーパミン輸送体に結合する前記標識されたドーパミン輸送体リガンドの量を、前記ＳＰＥＣＴ取得に少なくとも部分的に基づいて評価するステップと
を含む方法。
【請求項８】
前記標識されたドーパミン輸送体リガンドが１２３Ｉアルトロパンである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記標識されたドーパミン輸送体リガンドが約８ｍＣｉの用量で投与される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記選択領域が脳の部分を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
前記脳の部分が線条体を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記造影に有効な持続期間が約３０分であり、前記永続平衡期間が、前記標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与から約１５分後に始まる、請求項７に記載の方法。
【請求項１３】
前記永続平衡期間が、前記標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与から約４５分後に終了する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１】
対象の中枢神経系の選択領域中のドーパミン輸送体レベルをＳＰＥＣＴ造影により評価する方法であって、
ａ）標識されたドーパミン輸送体リガンドを、ＳＰＥＣＴ造影のために前記対象を位置付けたおよその時点で前記対象に投与するステップと、
ｂ）前記標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与から約１５分後に始まる約３０分の持続期間にわたる前記選択領域の少なくとも１回のＳＰＥＣＴ取得を開始するステップと、
ｃ）前記選択領域中のドーパミン輸送体に結合する前記標識されたドーパミン輸送体リガンドの量を、前記ＳＰＥＣＴ取得に少なくとも部分的に基づいて評価するステップと
を含む方法。
【請求項２】
前記標識されたドーパミン輸送体リガンドが１２３Ｉアルトロパンである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記標識されたドーパミン輸送体リガンドが、約８ｍＣｉの用量で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記選択領域が脳の部分を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記脳の部分が線条体を含む、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
対象におけるアルトロパンの配置をＳＰＥＣＴ造影により評価する方法であって、
ａ）標識されたドーパミン輸送体リガンドを、ＳＰＥＣＴ造影のために前記対象を位置付けたおよその時点で前記対象に投与するステップと、
ｂ）前記標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与から約１５分後に始まる約３０分の持続期間にわたる選択領域の少なくとも１回のＳＰＥＣＴ取得を開始するステップと、
ｃ）前記選択領域中のドーパミン輸送体に結合する標識されたドーパミン輸送体リガンドの量を、前記ＳＰＥＣＴ取得に少なくとも部分的に基づいて評価するステップと
を含む方法。
【請求項７】
対象の中枢神経系の選択領域中のドーパミン輸送体レベルをＳＰＥＣＴ造影により評価する方法であって、
ａ）造影に有効な持続期間にわたる前記選択領域の少なくとも１回のＳＰＥＣＴ取得を開始するステップであって、前記持続期間が、前記標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与後の永続平衡の開始期間内にあるステップと、
ｂ）前記選択領域中のドーパミン輸送体に結合する前記標識されたドーパミン輸送体リガンドの量を、前記ＳＰＥＣＴ取得に少なくとも部分的に基づいて評価するステップと
を含む方法。
【請求項８】
前記標識されたドーパミン輸送体リガンドが１２３Ｉアルトロパンである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記標識されたドーパミン輸送体リガンドが約８ｍＣｉの用量で投与される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記選択領域が脳の部分を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
前記脳の部分が線条体を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記造影に有効な持続期間が約３０分であり、前記永続平衡期間が、前記標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与から約１５分後に始まる、請求項７に記載の方法。
【請求項１３】
前記永続平衡期間が、前記標識されたドーパミン輸送体リガンドの投与から約４５分後に終了する、請求項１２に記載の方法。
【図１】
【図１Ａ】
【図２】
【図２Ａ】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図１Ａ】
【図２】
【図２Ａ】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【公表番号】特表２０１１−５０２１３０（Ｐ２０１１−５０２１３０Ａ）
【公表日】平成２３年１月２０日（２０１１．１．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５３１３２４（Ｐ２０１０−５３１３２４）
【出願日】平成２０年１０月２８日（２００８．１０．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０８１４１９
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０５８７５４
【国際公開日】平成２１年５月７日（２００９．５．７）
【出願人】（５１００９８３２０）アルセレス ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド (2)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２３年１月２０日（２０１１．１．２０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年１０月２８日（２００８．１０．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０８１４１９
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０５８７５４
【国際公開日】平成２１年５月７日（２００９．５．７）
【出願人】（５１００９８３２０）アルセレス ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド (2)
【Ｆターム（参考）】
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