本発明は、ポア形成修飾タンパク質（ＭＰＰ）を用いてＢＰＨを治療する方法を提供する。これらのＭＰＰは、細胞膜内にポアまたはチャネルを形成することによって細胞を殺し、細胞死をもたらす、天然起源の細胞毒性タンパク質（ｎＰＰ）に由来する。ＭＰＰは、正常前立腺細胞においてそれらが選択的に活性化されることができるように、ｎＰＰの修飾によって作られる。そのような修飾には、前立腺特異的プロテアーゼ切断部位の活性化配列への付加、および／または前立腺細胞の選択的な標的を可能にするための前立腺特異的標的領域の付加が含まれてもよい。これらのＭＰＰは正常前立腺細胞をｉｎ ｖｉｖｏで選択的に標的として殺すことができる。ＭＰＰは、単独またはＢＰＨの治療のための他の療法との併用のいずれかで使用されてもよい。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象の前立腺の大きさを縮小する際に使用されるポア形成修飾タンパク質であって、前記ポア形成修飾タンパク質は、天然起源のポア形成タンパク質に由来し、前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列から選択された一つ以上の前立腺選択的修飾と、選択的に前立腺細胞を標的とすることができる、一つ以上の前立腺特異的標的領域とを含み、前記ポア形成修飾タンパク質は、選択的に前立腺細胞を殺すことができる、ポア形成修飾タンパク質。
【請求項２】
良性前立腺肥大症（ＢＰＨ）の治療に使用されるポア形成修飾タンパク質であって、前記ポア形成修飾タンパク質は、天然起源のポア形成タンパク質に由来し、前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列から選択された一つ以上の前立腺選択的修飾と、選択的に前立腺細胞を標的とすることができる、一つ以上の前立腺特異的標的領域とを含み、前記ポア形成修飾タンパク質は、選択的に前立腺細胞を殺すことができる、ポア形成修飾タンパク質。
【請求項３】
前記ポア形成修飾タンパク質が、良性前立腺肥大症のための一つ以上の他の治療法と併用して使用される、請求項２に記載の前記ポア形成修飾タンパク質。
【請求項４】
前記天然起源のポア形成タンパク質がプロアエロリジンまたはα毒素である、請求項１〜３のいずれか一項に記載のポア形成修飾タンパク質。
【請求項５】
前記ポア形成修飾タンパク質が、前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列を含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載のポア形成修飾タンパク質。
【請求項６】
前記ポア形成修飾タンパク質が前立腺特異的標的領域を含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載のポア形成修飾タンパク質。
【請求項７】
前記ポア形成修飾タンパク質が、前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列と、一つ以上の前立腺特異的標的領域を含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載のポア形成修飾タンパク質。
【請求項８】
前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な前記活性化配列が、前記天然起源のポア形成タンパク質の天然の活性化配列を機能的に置換する、請求項１、２、３、４、５、または７のいずれか一項に記載のポア形成修飾タンパク質。
【請求項９】
前記前立腺特異的プロテアーゼが、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、またはヒト腺性カリクレイン２（ｈＫ２）である、請求項１、２、３、４、５、または７のいずれか一項に記載のポア形成修飾タンパク質。
【請求項１０】
前記前立腺特異的プロテアーゼが、前立腺特異抗原である、請求項１、２、３、４、５、または７のいずれか一項に記載のポア形成修飾タンパク質。
【請求項１１】
前記前立腺特異的標的領域が、黄体形成ホルモン放出ホルモン、または前立腺特異的膜抗原に対する抗体である、請求項１、２、３、４、６、または７のいずれか一項に記載のポア形成修飾タンパク質。
【請求項１２】
前記ポア形成修飾タンパク質が、前記天然起源のポア形成タンパク質の結合領域に一つ以上の変異をさらに含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載のポア形成修飾タンパク質。
【請求項１３】
前記ポア形成修飾タンパク質が親和性標識をさらに含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載のポア形成修飾タンパク質。
【請求項１４】
前記ポア形成修飾タンパク質が前立腺内投与用に調製される、請求項１〜１３のいずれか一項に記載のポア形成修飾タンパク質。
【請求項１５】
前記ポア形成修飾タンパク質が静脈内投与用に調製される、請求項１〜１３のいずれか一項に記載のポア形成修飾タンパク質。
【請求項１６】
前記天然起源のポア形成タンパク質がアエロモナス・ハイドロフィラ（Aeromonas hydrophila）のプロアエロリジンである、請求項１または２に記載の前記ポア形成修飾タンパク質。
【請求項１７】
前記ポア形成修飾タンパク質が前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列を含む、請求項１６に記載の前記ポア形成修飾タンパク質。
【請求項１８】
前記ポア形成修飾タンパク質が、プロアエロリジンの結合領域中に一つ以上の変異をさらに含む、請求項１６に記載の前記ポア形成修飾タンパク質。
【請求項１９】
前記ポア形成修飾タンパク質が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４に記載のアミノ酸配列を含む、請求項１６に記載の前記ポア形成修飾タンパク質。
【請求項２０】
前記ポア形成修飾タンパク質が親和性標識を含む、請求項１６に記載の前記ポア形成修飾タンパク質。
【請求項２１】
前記ポア形成修飾タンパク質が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１に記載のアミノ酸配列を含む、請求項１６に記載の前記ポア形成修飾タンパク質。
【請求項２２】
前記一つ以上の変異が、Ｙ１６２の位置の変異、Ｗ３２４の位置の変異、Ｒ３２３の位置の変異、Ｒ３３６の位置の変異、およびＷ１２７の位置の変異から選択される、請求項１８に記載の前記ポア形成修飾タンパク質。
【請求項２３】
少なくとも一つの変異がＲ３３６Ａである、請求項１８に記載の前記ポア形成修飾タンパク質。
【請求項２４】
対象の前立腺の大きさを縮小するための薬物の調製におけるポア形成修飾タンパク質の使用であって、前記ポア形成修飾タンパク質は、天然起源のポア形成タンパク質に由来し、前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列から選択された一つ以上の前立腺選択的修飾と、選択的に前立腺細胞を標的とすることができる、一つ以上の前立腺特異的標的領域とを含み、前記ポア形成修飾タンパク質は選択的に前立腺細胞を殺すことができる、ポア形成修飾タンパク質の使用。
【請求項２５】
良性前立腺肥大症（ＢＰＨ）の治療のための薬物の調製におけるポア形成修飾タンパク質の使用であって、前記ポア形成修飾タンパク質は天然起源のポア形成タンパク質に由来し、前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列から選択された一つ以上の前立腺選択的修飾と、選択的に前立腺細胞を標的とすることができる、一つ以上の前立腺特異的標的領域とを含み、前記ポア形成修飾タンパク質は選択的に前立腺細胞を殺すことができる、ポア形成修飾タンパク質の使用。
【請求項２６】
前記ポア形成修飾タンパク質が、良性前立腺肥大症のための一つ以上の他の治療法と併用して使用される、請求項２５に記載の使用。
【請求項２７】
天然起源のポア形成タンパク質がプロアエロリジンまたはα毒素である、請求項２４〜２６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２８】
前記ポア形成修飾タンパク質が、前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列を含む、請求項２４〜２７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２９】
前記ポア形成修飾タンパク質が前立腺特異的標的領域を含む、請求項２４〜２７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３０】
前記ポア形成修飾タンパク質が、前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列と、一つ以上の前立腺特異的標的領域を含む、請求項２４〜２７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３１】
前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な前記活性化配列が、前記天然起源のポア形成タンパク質の天然の活性化配列を機能的に置換する、請求項２４、２５、２６、２７、２８、または３０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３２】
前記前立腺特異的プロテアーゼが、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、またはヒト腺性カリクレイン２（ｈＫ２）である、請求項２４、２５、２６、２７、２８、または３０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３３】
前記前立腺特異的プロテアーゼが前立腺特異抗原である、請求項２４、２５、２６、２７、２８、または３０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３４】
前記前立腺特異的標的領域が、黄体形成ホルモン放出ホルモン、または前立腺特異的膜抗原に対する抗体である、請求項２４、２５、２６、２７、２９、または３０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３５】
前記ポア形成修飾タンパク質が、前記天然起源のポア形成タンパク質の結合領域に一つ以上の変異をさらに含む、請求項２４〜３４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３６】
前記ポア形成修飾タンパク質が親和性標識をさらに含む、請求項２４〜３５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３７】
前記ポア形成修飾タンパク質が前立腺内投与用に調製される、請求項２４〜３５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３８】
前記ポア形成修飾タンパク質が静脈内投与用に調製される、請求項２４〜３６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３９】
前記天然起源のポア形成タンパク質がアエロモナス・ハイドロフィラのプロアエロリジンである、請求項２４または２５に記載の使用。
【請求項４０】
前記ポア形成修飾タンパク質が前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列を含む、請求項３９に記載の使用。
【請求項４１】
前記ポア形成修飾タンパク質が、プロアエロリジンの結合領域中に一つ以上の変異をさらに含む、請求項３９に記載の使用。
【請求項４２】
前記ポア形成修飾タンパク質が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４に記載のアミノ酸配列を含む、請求項３９に記載の使用。
【請求項４３】
前記ポア形成修飾タンパク質が親和性標識を含む、請求項３９に記載の使用。
【請求項４４】
前記ポア形成修飾タンパク質が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１に記載のアミノ酸配列を含む、請求項３９に記載の使用。
【請求項４５】
前記一つ以上の変異が、Ｙ１６２の位置の変異、Ｗ３２４の位置の変異、Ｒ３２３の位置の変異、Ｒ３３６の位置の変異、およびＷ１２７の位置の変異から選択される、請求項４１に記載の使用。
【請求項４６】
少なくとも一つの変異がＲ３３６Ａである、請求項４１に記載の使用。
【請求項４７】
効果的な量のポア形成修飾タンパク質を対象に投与するステップを含む、対象の前立腺の大きさを縮小する方法であって、前記ポア形成修飾タンパク質は、天然起源のポア形成タンパク質に由来し、前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列から選択された一つ以上の前立腺選択的修飾と、選択的に前立腺細胞を標的とすることができる、一つ以上の前立腺特異的標的領域とを含み、前記ポア形成修飾タンパク質は、選択的に前立腺細胞を殺すことができる、対象の前立腺の大きさを縮小する方法。
【請求項４８】
効果的な量のポア形成修飾タンパク質を対象に投与するステップを含む、対象の良性前立腺肥大症（ＢＰＨ）を治療する方法であって、前記ポア形成修飾タンパク質は、天然起源のポア形成タンパク質に由来し、前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列から選択された一つ以上の前立腺選択的修飾と、選択的に前立腺細胞を標的とすることができる、一つ以上の前立腺特異的標的領域とを含み、前記ポア形成修飾タンパク質は選択的に前立腺細胞を殺すことができる、対象の良性前立腺肥大症（ＢＰＨ）を治療する方法。
【請求項４９】
前記ポア形成修飾タンパク質が、良性前立腺肥大症のための一つ以上の他の治療法と併用して投与される、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
天然起源のポア形成タンパク質がプロアエロリジンまたはα毒素である、請求項４７〜４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５１】
前記ポア形成修飾タンパク質が、前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列を含む、請求項４７〜５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５２】
前記ポア形成修飾タンパク質が前立腺特異的標的領域を含む、請求項４７〜５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５３】
前記ポア形成修飾タンパク質が、前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列と、一つ以上の前立腺特異的標的領域を含む、請求項４７もしくは５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５４】
前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列が、前記天然起源のポア形成タンパク質の天然の活性化配列を機能的に置換する、請求項４７、４８、４９、５０、５１、および５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５５】
前記前立腺特異的プロテアーゼが、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、またはヒト腺性カリクレイン２（ｈＫ２）である、請求項４７、４８、４９、５０、５１、および５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
前記前立腺特異的プロテアーゼが前立腺特異抗原である、請求項４７、４８、４９、５０、５１、および５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５７】
前記前立腺特異的標的領域が、黄体形成ホルモン放出ホルモン、または前立腺特異的膜抗原に対する抗体である、請求項４７、４８、４９、５０、５２、および５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５８】
前記ポア形成修飾タンパク質が、前記天然起源のポア形成タンパク質の結合領域に一つ以上の変異をさらに含む、請求項４７〜５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５９】
前記ポア形成修飾タンパク質が親和性標識をさらに含む、請求項４７〜５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６０】
前記ポア形成修飾タンパク質が前立腺内投与用に調製される、請求項４７〜５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６１】
前記ポア形成修飾タンパク質が静脈内投与用に調製される、請求項４７〜５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６２】
前記天然起源のポア形成タンパク質がアエロモナス・ハイドロフィラのプロアエロリジンである、請求項４７または４８に記載の方法。
【請求項６３】
前記ポア形成修飾タンパク質が、前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列を含む、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
前記ポア形成修飾タンパク質が、プロアエロリジンの結合領域中に一つ以上の変異をさらに含む、請求項６２に記載の方法。
【請求項６５】
前記ポア形成修飾タンパク質が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４に記載のアミノ酸配列を含む、請求項６２に記載の方法。
【請求項６６】
前記ポア形成修飾タンパク質が親和性標識を含む、請求項６２に記載の方法。
【請求項６７】
前記ポア形成修飾タンパク質が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１に記載のアミノ酸配列を含む、請求項６２に記載の方法。
【請求項６８】
前記一つ以上の変異が、Ｙ１６２の位置の変異、Ｗ３２４の位置の変異、Ｒ３２３の位置の変異、Ｒ３３６の位置の変異、およびＷ１２７の位置の変異から選択される、請求項６４に記載の方法。
【請求項６９】
少なくとも一つの変異がＲ３３６Ａである、請求項６４に記載の方法。
【請求項７０】
ラージローブ結合領域に一つ以上の変異と、前立腺細胞と前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列を選択的に標的とすることができる、前立腺特異的標的領域から選択される一つ以上の前立腺特異的修飾を含む、修飾プロアエロリジンタンパク質であって、前記修飾プロアエロリジンが選択的に前立腺細胞を殺すことができる、修飾プロアエロリジンタンパク質。
【請求項７１】
前記修飾プロアエロリジンタンパク質がアエロモナス・ハイドロフィラの修飾プロアエロリジンである、請求項７０に記載の修飾プロアエロリジンタンパク質。
【請求項７２】
前記ラージローブ結合領域が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２の８４〜４２６番目のアミノ酸として定義される、請求項７１に記載の修飾プロアエロリジンタンパク質。
【請求項７３】
ラージローブ結合領域中の前記一つ以上の変異が、Ｙ１６２の位置の変異、Ｗ３２４の位置の変異、Ｒ３２３の位置の変異、Ｒ３３６の位置の変異、およびＷ１２７の位置の変異から選択される、請求項７２に記載の修飾プロアエロリジンタンパク質。
【請求項７４】
前記修飾プロアエロリジンタンパク質が前立腺特異的標的領域を含む、請求項７０〜７３のいずれか一項に記載の修飾プロアエロリジンタンパク質。
【請求項７５】
前記修飾プロアエロリジンタンパク質が、前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列を含む、請求項７０〜７３のいずれか一項に記載の修飾プロアエロリジンタンパク質。
【請求項７６】
前記修飾プロアエロリジンタンパク質が、前立腺特異的標的領域と前立腺特異的プロテアーゼによって切断可能な活性化配列とを含む、請求項７０〜７３のいずれか一項に記載の修飾プロアエロリジンタンパク質。
【請求項７７】
前記前立腺特異的標的領域が、黄体形成ホルモン放出ホルモン、または前立腺特異的膜抗原に対する抗体である、請求項７０、７１、７２、７３、７４、または７６のいずれかに記載の修飾プロアエロリジンタンパク質。
【請求項７８】
前記前立腺特異的プロテアーゼが前立腺特異抗原、前立腺特異的膜抗原、またはヒト腺性カリクレイン２である、請求項７０、７１、７２、７３、７５、または７６のいずれかに記載の修飾プロアエロリジンタンパク質。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７−１】

【図７−２】

【図８−１】

【図８−２】

【図９−１】

【図９−２】

【図１０−１】

【図１０−２】

【図１１】

【図１２−１】

【図１２−２】

【図１２−３】

【図１３−１】

【図１３−２】

【図１４】

【図１５−１】

【図１５−２】

【図１６−１】

【図１６−２】

【図１７】

【図１８−１】

【図１８−２】

【図１９−１】

【図１９−２】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０−１】

【図３０−２】

【図３１−１】

【図３１−２】

【図３２Ａ】

【図３２Ｂ】

【図３２Ｃ】

【図３２Ｄ】

【図３２Ｅ】

【図３２Ｆ】

【図３２Ｇ】

【図３２Ｈ】

【図３３Ａ】

【図３３Ｂ】

【図３３Ｃ】

【図３３Ｄ】

【図３３Ｅ】

【図３３Ｆ】

【図３３Ｇ】

【図３３Ｈ】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７】

【図３８】

【図３９】

【図４０】

【図４１】

【公表番号】特表２００８−５４６６５０（Ｐ２００８−５４６６５０Ａ）
【公表日】平成２０年１２月２５日（２００８．１２．２５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５１６０８８（Ｐ２００８−５１６０８８）
【出願日】平成１８年６月１４日（２００６．６．１４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＣＡ２００６／０００９７１
【国際公開番号】ＷＯ２００６／１３３５５３
【国際公開日】平成１８年１２月２１日（２００６．１２．２１）
【出願人】（５０７４０８１３２）プロトクス　セラピューティックス　インコーポレイティッド (1)
【Ｆターム（参考）】