不活性化人工抗原提示細胞（ａＡＰＣ）および選択された抗原性ペプチドに対する特異性を持つ人工抗原提示細胞の処理法（それらの生成および活性化細胞傷害性Ｔ細胞を含んでなる細胞治療組成物における使用を含む）が記載される。不活性化されたａＡＰＣはソラレン誘導体およびＵＶＡ照射が関与する光反応を介するような架橋を介して有利に生成される。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者に投与するための活性化Ｔリンパ球を生体外で作成する方法であって：
人工抗原提示細胞（ａＡＰＣ）を核酸架橋剤で不活性化し；
疾患または障害が診断された患者から単離したＴリンパ球を該不活性化された人工抗原提示細胞と接触させ；そして
患者に戻し投与するためにＴリンパ球を集める、
工程を含んでなる上記方法。
【請求項２】
架橋剤がソラレン誘導体であり、そして上記の不活性化工程がソラレン誘導体で処理した人工抗原提示細胞を光活性化用量のＵＶＡ照射に暴露することを含んでなる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
上記ソラレン誘導体がソラレン、８−メトキシソラレン（８−ＭＯＰＳ）、４’−（アミノメチル）−４，５’，８−ソラレン（ＡＭＴ）またはアモトサレン（Ｓ５９）である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
架橋剤がソラレン誘導体であり、そして上記不活性化工程が１〜１００μｇ／ｍｌ濃度のソラレン誘導体で処理した人工抗原提示細胞を、１〜１００ジュール／ｃｍ^２用量のＵＶＡ照射に１〜６０分の期間、暴露することを含んでなる、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
上記疾患または障害がガンであり、そしてさらに上記接触工程の前またはそれと同時に；
人工抗原提示細胞に少なくとも１つのガン関連ペプチド抗原を負荷する、
工程を含んでなる請求項１に記載の方法。
【請求項６】
上記活性化Ｔリンパ球がペプチドを発現している標的細胞に対して細胞傷害性であり、そしてペプチドが黒色腫関連ペプチド抗原、卵巣ガン関連ペプチド抗原、乳癌関連ペプチド抗原、肺ガン関連ペプチド抗原、白血病−、多発性骨髄腫−およびリンパ腫−関連ペプチド抗原および前立腺ガン関連ペプチド抗原からなる群より選択される請求項５に記載の方法。
【請求項７】
上記ペプチドが、ＭＡＲＴ−１、チロシナーゼ、ｇｐ１００、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＭＵＣ−１、ＣＡ−１２５、Ｈｅｒ−２、サーバイビン、テロメラーゼ、ＣＡＭＥＬ、ＣＥＡ、リビン、ＳＡＲＴ−１、ＳＣＰ−１、ＳＳＸ−２、ＰＲＡＭＥ、Ｃ−レクチン、Ｐｅｃ６０、ＡＥＳ、ＭＡＧＥ−３、Ｇ２５０、ＦＢＰ、ＳＳＸ−４、ＳＰ１７、ｈＴＲＴ、ＭＵＣ−１６、ＭＡＧＥ−１、トポイソメラーゼＩＩ、インテグリンβ８サブユニット前駆体、ＭＵＣ−１、ＭＡＧＥ−Ｂ２、ＳＴＡＴ１、γ−カテニンまたはＨ−ＲＹＫのアミノ酸配列の少なくとも８個の連続する抗原性アミノを含んでなる、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
上記ペプチドが：ＳＩＬＳＬＫＥＡＳＴ（配列番号：１），ＫＭＡＳＲＳＭＲＬ（配列番号：２），ＡＬＡＬＡＡＬＬＶＶ（配列番号：３），ＡＬＬＶＶＤＲＥＶ（配列番号：４），ＹＭＮＧＴＭＳＱＶ（（配列番号：５），ＹＭＤＧＴＭＳＱＶ（配列番号：６），ＩＴＤＱＶＰＦＳＶ（配列番号：７），ＹＬＥＰＧＰＶＴＡ（配列番号：８），ＡＡＧＩＧＩＬＴＶ（配列番号：９），ＥＬＡＧＩＧＩＬＴＶ（配列番号：１０），ＣＬＴＳＴＶＱＬＶ（配列番号：１１），ＨＬＹＱＧＣＱＶＶ（配列番号：１２），ＫＩＦＧＳＬＡＦＬ（配列番号：１３），ＩＩＳＡＶＶＧＩＬ（配列番号：１４），ＰＬＴＳＩＩＳＡＶ（配列番号：１５），ＶＭＡＧＶＧＳＰＹＶ（配列番号：１６），ＶＬＶＫＳＰＮＨＶ（配列番号：１７），ＥＬＶＳＥＦＳＲＭ（配列番号：１８），ＹＬＳＧＡＮＬＮＬ（配列番号：１９），ＧＰＬＴＰＬＰＶ（配列番号：２０），ＳＬＬＭＷＩＴＱＣ（配列番号：２
１），ＫＡＬＦＡＧＰＰＶ（配列番号：２２），ＹＬＥＴＦＲＥＱＶ（配列番号：２３），ＧＬＱＳＰＫＳＰＬ（配列番号：２４），ＶＬＬＫＬＲＲＰＶ（配列番号：２５），ＥＬＹＩＰＳＶＤＬ（配列番号：２６），ＳＬＬＭＷＩＴＱＶ（配列番号：２７），ＩＬＡＫＦＬＨＷＬ（配列番号：２８），ＳＴＡＰＰＶＨＮＶ（配列番号：２９），ＦＬＷＧＰＲＡＬＶ（配列番号：３０），ＦＭＷＧＮＬＴＬＡ（配列番号：３１），ＲＬＶＤＤＦＬＬＶ（配列番号：３２），ＨＬＳＴＡＦＡＲＶ（配列番号：３３），ＱＬＳＬＬＭＷＩＴ（配列番号：３４），ＥＬＷＴＨＳＹＫＶ（配列番号：３５），ＫＶＡＥＬＶＨＦＬ（配列番号：３６），ＹＩＦＡＴＣＬＧＬ（配列番号：３７），ＨＬＹＩＦＡＴＣＬ（配列番号：３８），ＭＬＭＡＱＥＡＬＡＦＬ（配列番号：３９），ＳＴＬＥＫＩＮＫＴ（配列番号：４０），ＫＡＳＥＫＩＦＹＶ（配列番号：４１），ＳＬＬＭＷＩＴＱＣＦＬ（配列番号：４２），ＥＬＴＬＧＥＦＬＫＬ（配列番号：４３），ＬＴＬＧＥＦＬＫＬ（配列番号：４４），ＳＬＬＥＫＲＥＫＴ（配列番号：４５），ＴＬＧＥＤＤＰＷＬ（配列番号：４６），ＫＬＧＬＫＰＬＥＶ（配列番号：４７），ＹＬＷＴＳＡＫＮＴ（配列番号：４８），ＳＴＡＰＰＡＨＧＶ（配列番号：４９），ＧＭＧＳＥＥＬＲＬ（配列番号５０），ＳＬＧＳＰＶＬＧＬ（配列番号：５１），ＹＬＦＦＹＲＫＳＶ（配列番号：５２），ＣＱＱＥＥＴＦＬＬ（配列番号：５３），ＴＬＡＫＦＳＰＹＬ（配列番号：５４），ＮＬＴＨＶＬＹＰＶ（配列番号：５５），ＳＴＦＫＮＷＰＦＬ（配列番号：５６），ＳＬＬＱＨＬＩＧＬ（配列番号：５７），ＦＬＤＱＲＶＦＦＶ（配列番号：５８），ＦＬＤＱＲＶＦＶＶ（配列番号：５９），ＦＬＤＱＶＡＦＶＶ（配列番号：６０），ＧＬＤＲＥＱＬＹＬ（配列番号：６１），ＶＭＱＨＬＬＳＰＬ（配列番号：６２），ＱＱＴＨＧＩＴＲＬ（配列番号：６３），ＬＱＰＬＳＧＰＧＬ（配列番号：６４），ＴＬＤＲＤＳＬＹＶ（配列番号：６５），ＱＬＹＬＥＬＳＱＬ（配列番号：６６），ＫＶＬＥＹＶＩＫＶ（配列番号：６７），ＫＶＡＤＬＶＧＦＬ（配列番号：６８），ＫＴＷＧＱＹＷＱＶ（配列番号：７０）およびＶＬＤＧＬＤＶＬＬ（配列番号：７１）からなる群より選択されるアミノ酸配列を含んでなる、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
上記少なくとも１つのペプチドがペプチドの混合物であり、混合物が：ＹＭＮＧＴＭＳＱＶ（配列番号：５），ＩＴＤＱＶＰＦＳＶ（配列番号：７），ＡＡＧＩＧＩＬＴＶ（配列番号：９），ＥＬＡＧＩＧＩＬＴＶ（配列番号：１０），ＳＬＬＭＷＩＴＱＶ（配列番号：２７），ＦＬＷＧＰＲＡＬＶ（配列番号：３０），ＴＬＡＫＦＳＰＹＬ（ＰＲＡＭＥ；配列番号：５４）およびＶＬＤＧＬＤＶＬＬ（配列番号：７１）を含んでなる、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
さらに：
上記接触工程に使用するために、患者からのフェレーシスサンプルからＴ細胞を単離し、そして、
該回収工程で集めた有効量のＴリンパ球を個体に投与する、
ことを含んでなる請求項２に記載の方法。
【請求項１１】
さらに上記活性化Ｔリンパ球を上記投与工程を行う前に再刺激することを含んでなり、該再刺激手順が：
活性化Ｔリンパ球を少なくとも１つのサイトカインと接触させ、これにより活性化Ｔ細胞の増殖を促進させ；そして
活性化Ｔ細胞を、照射した自己非−ＣＤ８＋細胞、接着非ＣＤ８^＋細胞またはソラレン／ＵＶＡ処理人工抗原提示細胞（ａＡＰＣ）とインキュベーションし、これにより再刺激された活性化Ｔリンパ球を生成する、
請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
上記少なくとも１つのサイトカインがＩＬ−２，ＩＬ−４，ＩＬ−７，ＩＬ−１２，ＩＬ−１５，ＩＬ−１７，ＩＬ−２１，ＩＦＮ−γおよびＴＮＦ−αからなる群より選択さ
れ、そして上記活性化Ｔリンパ球が活性化細胞傷害性Ｔリンパ球を含んでなる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
さらに上記活性化Ｔリンパ球を、上記生成工程を行う前に少なくとも１回の再刺激手順の反復に供することを含んでなり、該再刺激手順が：
活性化Ｔリンパ球を、ＩＬ−２および：ＩＬ−７，ＩＬ−１５もしくはＩＬ−２１からなる群より選択される少なくとも１つの他のサイトカインとの組み合わせと接触させ、これにより活性化Ｔ細胞の成長、増殖または分化を促進させ；そして
活性化Ｔ細胞を、照射した自己非−ＣＤ８＋細胞または接着非ＣＤ８^＋細胞またはソラレン／ＵＶＡで処理したａＡＰＣとインキュベーションして再刺激されたＴリンパ球を生成する、
ことを含んでなる請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
上記再刺激手順が、活性化Ｔリンパ球をショウジョウバエのａＡＰＣと１〜１００Ｕ／ｍｌの濃度のＩＬ−２；１〜１００Ｕ／ｍｌのＩＬ−７、１〜１００ｎｇ／ｍｌのＩＬ−１５および１〜１００ｎｇ／ｍｌのＩＬ−２１の存在下で接触させることを含んでなる、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
上記照射した自己接着非ＣＤ８^＋細胞が、照射した自己接着ＣＤ１４＋細胞を含んでなる請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
上記照射した自己非ＣＤ８＋細胞が、照射した自己ＣＤ４＋Ｔ細胞を含んでなる請求項１３に記載の方法。
【請求項１７】
さらに：
上記人工抗原提示細胞を、上記不活性化工程の前、その後またはそれと同時に、しかも上記接触工程前に凍結および解凍することを含んでなる請求項２に記載の方法。
【請求項１８】
上記の不活性化された人工抗原提示細胞が、増殖できず、そして本質的に混入物を含まない請求項２に記載の方法。
【請求項１９】
上記人工抗原提示細胞がヒト白血球ＭＨＣ抗原分子、β−２ミクログロブリン、ならびにヒトＣＤ８０（Ｂ７−１），ＬＦＡ−３（ＣＤ５８），ＣＤ８３，ＣＤ８６（Ｂ７−２）からなる群より選択される共刺激分子、またはＣＤ７０，ＴＮＦα，ＬＴ，４−１ＢＢＬおよびＯＸ４０Ｌからなる群より選択されるＴＮＦファミリーのメンバー、またはＩＣＡＭ−１，ＩＣＡＭ−２，ＩＣＡＭ−３およびＬＦＡ−３からなる群より選択される接着分子を含んでなる補助する分子を発現する、請求項２に記載の方法。
【請求項２０】
上記人工抗原提示細胞がヒトＨＬＡクラスＩＭＨＣ抗原分子ＨＬＡ２．１を発現する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
クラスＩＭＨＣ分子がＨＬＡ−Ａ２．１であり、そして補助する分子がＢ７−１（ＣＤ８０），ＬＦＡ−３（ＣＤ５８），ＣＤ７０およびＩＣＡＭ−１（ＣＤ５４）である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
上記ソラレン／ＵＶＡ処理ａＡＰＣが、ＨＬＡ分子および共刺激分子でトランスフェクトしたショウジョウバエの細胞を含んでなる、請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
該疾患、障害または医学的状態が、悪性黒色種、多発性骨髄腫、前立腺ガン、リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性リン
パ球性白血病、慢性骨髄性白血病、バーキットリンパ腫、甲状腺ガン、子宮ガン、腎臓ガン、卵巣ガン、肺ガン、乳癌、肝臓ガン、膵臓ガン、前立腺ガン、結腸ガン、皮膚ガン、胃ガン、子宮頚ガン、頭頸部ガン、神経膠腫および脳のガンからなる群より選択されるガンである請求項１に記載の方法。
【請求項２４】
ＨＬＡ−Ａ２．１，Ｂ７−１（ＣＤ８０），ＬＦＡ−３（ＣＤ５８），ＣＤ７０およびＩＣＡＭ−１（ＣＤ５４）細胞表面タンパク質を発現し、そして以下のペプチドＹＭＮＧＴＭＳＱＶ（配列番号：５），ＩＴＤＱＶＰＦＳＶ（配列番号：７），ＡＡＧＩＧＩＬＴＶ（配列番号：９），ＥＬＡＧＩＧＩＬＴＶ（配列番号：１０），ＳＬＬＭＷＩＴＱＶ（配列番号：２７），ＦＬＷＧＰＲＡＬＶ（配列番号：３０），ＴＬＡＫＦＳＰＹＬ（ＰＲＡＭＥ；配列番号：５４）およびＶＬＤＧＬＤＶＬＬ（配列番号：７１）を提示するソラレンで不活性化された人工抗原提示細胞。

【図１】

【図２】

【図４Ｃ】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８Ａ】

【図８Ｂ】

【図９Ａ】

【図９Ｂ】

【図９Ｃ】

【図９Ｄ】

【図９Ｅ】

【図９Ｆ】

【図１０】

【図１１Ａ】

【図１１Ｂ】

【図１１Ｃ】

【図１１Ｄ】

【図１２】

【図１４】

【図３】

【図４Ａ】

【図４Ｂ】

【図１３】

【公表番号】特表２０１０−５０５８４５（Ｐ２０１０−５０５８４５Ａ）
【公表日】平成２２年２月２５日（２０１０．２．２５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５３１４５２（Ｐ２００９−５３１４５２）
【出願日】平成１９年１０月４日（２００７．１０．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０２１３２６
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０４５２８６
【国際公開日】平成２０年４月１７日（２００８．４．１７）
【出願人】（３９００３３００８）ジヤンセン・フアーマシユーチカ・ナームローゼ・フエンノートシヤツプ (616)
【氏名又は名称原語表記】ＪＡＮＳＳＥＮ　ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡ　ＮＡＡＭＬＯＺＥ　ＶＥＮＮＯＯＴＳＣＨＡＰ
【Ｆターム（参考）】