分子のグリコシル化
改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲット分子を生産するために有用な方法および遺伝子操作細胞を本明細書に記載する。代謝異常などの様々な疾患の治療に有用な、改変Ｎ−グリコシル化を伴う方法および分子も開示する。本発明は、Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ細胞における単一遺伝子欠失（外鎖伸長部（ＯＣＨ１）欠失）が、Ｍａｎ５ＧｌｃＮＡｃ２（構造式ＩＶ；図１）骨格上にα−１，２−結合マンノース残基を有するグリコシル化タンパク質の実質的に均一な生産を生じさせたという知見などに基づく。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作されたＹａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａまたはＡｒｘｕｌａ ａｄｅｎｉｎｉｖｏｒａｎｓ細胞を提供すること；および
ターゲットタンパク質をコードする核酸を該細胞に導入すること
を含み、
該細胞が、該ターゲットタンパク質を改変Ｎ−グリコシル化形態で生産する、
改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質を生産する方法。
【請求項２】
前記改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質を単離することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ターゲットタンパク質が、外因性タンパク質である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記ターゲットタンパク質が、内因性タンパク質である、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記ターゲットタンパク質が、哺乳動物タンパク質である、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記ターゲットタンパク質が、ヒトタンパク質である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記ターゲットタンパク質が、病原性タンパク質、リソソームタンパク質、成長因子、サイトカイン、ケモカイン、抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質である、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記融合タンパク質が、病原性タンパク質、リソソームタンパク質、成長因子、サイトカインまたはケモカインと抗体またはその抗原結合フラグメントとの融合体である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記ターゲットタンパク質が、リソソーム貯蔵障害（ＬＳＤ）に関連したタンパク質である、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
前記ターゲットタンパク質が、グルコセレブロシダーゼまたはガラクトセレブロシダーゼである、請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
前記ターゲットタンパク質が、アルファ−Ｌ−イズロニダーゼ、ベータ−Ｄ−ガラクトシダーゼ、ベータ−グルコシダーゼ、ベータ−ヘキソサミニダーゼ、ベータ−Ｄ−マンノシダーゼ、アルファ−Ｌ−フコシダーゼ、アリールスルファターゼＢ、アリールスルファターゼＡ、アルファ−Ｎ−アセチルガラクトサミニダーゼ、アスパルチルグルコサミニダーゼ、イズロネート−２−スルファターゼ、アルファ−グルコサミニド−Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ、ベータ−Ｄ−グルコロニダーゼ、ヒアルロニダーゼ、アルファ−Ｌ−マンノシダーゼ、アルファ−ノイラミニダーゼ、ホスホトランスフェラーゼ、酸リパーゼ、酸セラミダーゼ、スフィンゴミエリナーゼ、チオエステラーゼ、カテプシンＫ、およびリポタンパク質リパーゼからなる群より選択される、請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
前記改変Ｎ−グリコシル化形態が、１つ以上のＮ−グリカン構造を含む、請求項１〜１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
前記１つ以上のＮ−グリカンが、Ｍａｎ５ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記１つ以上のＮ−グリカンが、Ｍａｎ８ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記１つ以上のＮ−グリカンが、Ｍａｎ９ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
前記１つ以上のＮ−グリカンが、Ｍａｎ３ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】
前記１つ以上のＮ−グリカンが、Ｇｌｃ１Ｍａｎ５ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１８】
前記１つ以上のＮ−グリカンが、Ｇｌｃ２Ｍａｎ５ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１９】
前記改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質が、均一である、請求項１２〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２０】
前記改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質が、実質的に均一である、請求項１２〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２１】
前記改変グリコシル化を含有する改変ターゲット分子の画分が、少なくとも約２０％である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記改変グリコシル化を含有する改変ターゲット分子の画分が、少なくとも約３０％である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記改変グリコシル化を含有する改変ターゲット分子の画分が、少なくとも約４０％である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
前記改変グリコシル化が、Ｍａｎ５ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１９〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項２５】
前記改変グリコシル化が、Ｍａｎ８ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１９〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項２６】
前記改変グリコシル化が、Ｍａｎ９ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１９〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】
前記改変グリコシル化が、Ｍａｎ３ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１９〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項２８】
前記改変グリコシル化が、Ｇｌｃ１Ｍａｎ５ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１９〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
前記改変グリコシル化が、Ｇｌｃ２Ｍａｎ５ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１９〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】
前記細胞が、少なくとも１つのＮ−グリコシル化活性が欠損するように遺伝子操作される、請求項１〜２９のいずれかに記載の方法。
【請求項３１】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、ＡＬＧ３活性である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、ＯＣＨ１活性である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、ＭＮＳ１活性である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３４】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、ＭＮＮ９活性である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３５】
前記少なくとも１つの修飾が、前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質をコードする遺伝子の欠失を含む、請求項１〜３４のいずれかに記載の方法。
【請求項３６】
前記少なくとも１つの修飾が、前記Ｎ−グリコシル化活性を有する突然変異形態のタンパク質の発現を含む、請求項１〜３５のいずれかに記載の方法。
【請求項３７】
前記少なくとも１つの修飾が、前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質の機能的発現に干渉するＲＮＡ分子の導入または発現を含む、請求項１〜３６のいずれかに記載の方法。
【請求項３８】
前記少なくとも１つの修飾が、Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質の発現を含む、請求項１〜３７のいずれかに記載の方法。
【請求項３９】
発現されるタンパク質が、前記細胞内の外因性核酸によってコードされたタンパク質である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、グルコシルトランスフェラーゼ活性である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４１】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、ＡＬＧ６である、請求項３８〜４０のいずれかに記載の方法。
【請求項４２】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、アルファ−マンノシダーゼである、請求項３８に記載の方法。
【請求項４３】
前記アルファ−マンノシダーゼが、小胞体にターゲッティングされる、請求項３８に記載の方法。
【請求項４４】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、アルファ−マンノシダーゼポリペプチドおよびＨＤＥＬ小胞体貯留ペプチドを含む融合タンパク質である、請求項４２または４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記アルファ−マンノシダーゼが、５．１未満の最適ｐＨを有する、請求項４２に記載の方法。
【請求項４６】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、Ｍａｎ５ＧｌｃＮＡｃ２からグルコース残基を除去することができるタンパク質である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４７】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、アルファ−１，３−グルコシダーゼ活性を有するタンパク質である、請求項３８または４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記タンパク質が、グルコシダーゼＩＩである、請求項４６または４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記タンパク質が、グルコシダーゼＩＩのアルファおよびベータサブユニットの一方または両方を含む、請求項４６〜４８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５０】
前記タンパク質が、ムタナーゼである、請求項４６に記載の方法。
【請求項５１】
前記細胞が、少なくとも２つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作される、請求項１に記載の方法。
【請求項５２】
前記少なくとも２つの修飾Ｎ−グリコシル化活性が、ＡＬＧ３活性の欠損および高レベルのＡＬＧ６活性を含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記細胞が、少なくとも３つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作される、請求項１に記載の方法。
【請求項５４】
前記少なくとも３つの修飾Ｎ−グリコシル化活性が、ＡＬＧ３活性の欠損；高レベルのＡＬＧ６活性；および高レベルのグルコシダーゼＩＩ活性を含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５５】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、外因性タンパク質である、請求項３８〜５４のいずれかに記載の方法。
【請求項５６】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、哺乳動物タンパク質である、請求項３８〜５４のいずれかに記載の方法。
【請求項５７】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、ヒトタンパク質である、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、下等真核生物タンパク質である、請求項３８〜５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５９】
前記下等真核生物が、真菌、トリパノソーマ属、または原生動物である、請求項４５に記載の方法。
【請求項６０】
前記下等真核生物が、Ｔｙｐａｎｏｓｏｍａ ｂｒｕｃｅｉ、Ｔｒｉｃｏｄｅｒｍａ ｈａｒｚｉａｎｕｍ、およびＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓからなる群より選択される、請求項５８に記載の方法。
【請求項６１】
前記修飾が、前記ターゲットタンパク質のマンノシルリン酸化を果たすことができるタンパク質またはその生物活性変異体の発現を含む、請求項１〜６０のいずれかに記載の方法。
【請求項６２】
前記マンノシルリン酸化を果たすことができるタンパク質またはその生物活性変異体が、ＭＮＮ４である、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記マンノシルリン酸化を果たすことができるタンパク質またはその生物活性変異体が、ＰＮＯ１である、請求項６１に記載の方法。
【請求項６４】
前記マンノシルリン酸化を果たすことができるタンパク質またはその生物活性変体が、ＭＮＮ６である、請求項６１に記載の方法。
【請求項６５】
糖タンパク質のマンノシル残基の少なくとも約３０％が、リン酸化される、請求項６１〜６４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６６】
前記細胞が、ＯＣＨ１活性が欠損するように遺伝子操作されない、請求項１〜６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６７】
前記糖タンパク質の追加のプロセッシングをさらに含む、請求項１〜６６のいずれかに記載の方法。
【請求項６８】
前記追加のプロセッシングが、インビトロで行われる、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
前記追加のプロセッシングが、インビボで行われる、請求項６７に記載の方法。
【請求項７０】
前記追加のプロセッシングが、前記修飾糖タンパク質への異種部分の付加を含む、請求項６７〜６９のいずれかに記載の方法。
【請求項７１】
前記異種部分が、ポリマーまたは担体である、請求項５５に記載の方法。
【請求項７２】
前記追加のプロセッシングが、前記改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質の酵素的または化学的処理を含む、請求項６７〜７１のいずれかに記載の方法。
【請求項７３】
前記追加のプロセッシングが、マンノシダーゼ、マンナナーゼ、ホスホジエステラーゼ、グルコシダーゼまたはグリコシルトランスフェラーゼでの前記改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質の処理を含む、請求項６７に記載の方法。
【請求項７４】
前記追加のプロセッシングが、フッ化水素酸での前記改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質の処理を含む、請求項７２に記載の方法。
【請求項７５】
前記追加のプロセッシングが、前記改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質のリン酸化を含む、請求項６７〜７４のいずれかに記載の方法。
【請求項７６】
請求項１〜７５のいずれかに記載の方法によって生産される、改変Ｎ−グリコシル化を有する単離されたタンパク質。
【請求項７７】
少なくとも１つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作された、単離されたＹａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａまたはＡｒｘｕｌａ ａｄｅｎｉｎｉｖｏｒａｎｓ細胞。
【請求項７８】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、ＡＬＧ３活性である、請求項７７に記載の単離された細胞。
【請求項７９】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、ＯＣＨ１活性である、請求項７７または７８に記載の単離された細胞。
【請求項８０】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、ＭＮＳ１活性である、請求項７７〜７９に記載の単離された細胞。
【請求項８１】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、ＭＮＮ９活性である、請求項７７〜７９に記載の単離された細胞。
【請求項８２】
前記修飾が、前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質をコードする遺伝子の欠失を含む、請求項７７〜７９に記載の単離された細胞。
【請求項８３】
前記修飾が、前記Ｎ−グリコシル化活性を有する突然変異形態のタンパク質の発現を含む、請求項７７〜７９に記載の単離された細胞。
【請求項８４】
前記修飾が、前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質の機能的発現に干渉するＲＮＡ分子の導入または発現を含む、請求項７７〜８３に記載の単離された細胞。
【請求項８５】
前記修飾が、Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質の発現を含む、請求項７７〜８３に記載の単離された細胞。
【請求項８６】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、グルコシルトランスフェラーゼ活性である、請求項８５に記載の単離された細胞。
【請求項８７】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、ＡＬＧ６である、請求項８５または８６に記載の単離された細胞。
【請求項８８】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、アルファ−マンノシダーゼである、請求項８５に記載の単離された細胞。
【請求項８９】
前記アルファ−マンノシダーゼが、小胞体にターゲッティングされる、請求項８８に記載の単離された細胞。
【請求項９０】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、アルファ−マンノシダーゼポリペプチドおよびＨＤＥＬ小胞体貯留ペプチドを含む融合タンパク質である、請求項８８または８９に記載の単離された細胞。
【請求項９１】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、Ｍａｎ５ＧｌｃＮＡｃ２からグルコース残基を除去することができるタンパク質である、請求項８５に記載の単離された細胞。
【請求項９２】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、アルファ−１，３−グルコシダーゼ活性を有するタンパク質である、請求項８５または９１に記載の単離された細胞。
【請求項９３】
前記タンパク質が、グルコシダーゼＩＩである、請求項９１または９２に記載の単離された細胞。
【請求項９４】
前記タンパク質が、グルコシダーゼＩＩのアルファおよびベータサブユニットの一方または両方を含む、請求項９１〜９３のいずれか一項に記載の単離された細胞。
【請求項９５】
前記タンパク質が、ムタナーゼである、請求項９１に記載の単離された細胞。
【請求項９６】
前記細胞が、少なくとも２つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作される、請求項７７〜９５のいずれか一項に記載の単離された細胞。
【請求項９７】
前記少なくとも２つの修飾Ｎ−グリコシル化活性が、ＡＬＧ３活性の欠損および高レベルのＡＬＧ６活性を含む、請求項９６に記載の単離された細胞。
【請求項９８】
前記細胞が、少なくとも３つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作される、請求項７７〜９７のいずれか一項に記載の単離された細胞。
【請求項９９】
前記少なくとも３つの修飾Ｎ−グリコシル化活性が、ＡＬＧ３活性の欠損；高レベルのＡＬＧ６活性；および高レベルのａグルコシダーゼＩＩ活性を含む、請求項９８に記載の単離された細胞。
【請求項１００】
前記細胞が、ＯＣＨ１活性が欠損するように遺伝子操作されない、請求項７７〜９９のいずれか一項に記載の単離された細胞。
【請求項１０１】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、ヒトタンパク質である、請求項８５〜１００のいずれか一項に記載の単離された細胞。
【請求項１０２】
前記修飾が、前記修飾糖タンパク質のマンノシルリン酸化を促進することができるタンパク質またはその生物活性変異体の発現を含む、請求項７７〜１０１のいずれかに記載の単離された細胞。
【請求項１０３】
前記マンノシルリン酸化を果たすタンパク質またはその生物活性変異体が、ＭＮＮ４である、請求項１０２に記載の単離された細胞。
【請求項１０４】
前記マンノシルリン酸化を果たすタンパク質またはその生物活性変異体が、ＰＮＯ１である、請求項１０３に記載の単離された細胞。
【請求項１０５】
改変Ｎ−グリコシル化を有するタンパク質の投与によって治療することができる疾患を有するまたは有することが疑われる対象に請求項７６に記載のタンパク質を投与することを含む、改変Ｎ−グリコシル化を有するタンパク質の投与によって治療することができる障害を治療する方法。
【請求項１０６】
前記疾患が、代謝異常である、請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０７】
前記代謝異常が、リソソーム貯蔵障害（ＬＳＤ）である、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１０８】
前記リソソーム貯蔵障害が、ゴーシェ病、テイ−サックス病、ポンペ病、ニーマン−ピック病、またはファブリ病である、請求項１０７に記載の方法。
【請求項１０９】
前記タンパク質が、ＬＳＤに関連したものである、請求項１０５〜１０８のいずれかに記載の方法。
【請求項１１０】
前記タンパク質が、グルコセレブロシダーゼまたはアルファ−ガラクトシダーゼである、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１１】
前記タンパク質が、アルファ−Ｌ−イズロニダーゼ、ベータ−Ｄ−ガラクトシダーゼ、ベータ−グルコシダーゼ、ベータ−ヘキソサミニダーゼ、ベータ−Ｄ−マンノシダーゼ、アルファ−Ｌ−フコシダーゼ、アリールスルファターゼＢ、アリールスルファターゼＡ、アルファ−Ｎ−アセチルガラクトサミニダーゼ、アスパルチルグルコサミニダーゼ、イズロネート−２−スルファターゼ、アルファ−グルコサミニド−Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ、ベータ−Ｄ−グルコロニダーゼ、ヒアルロニダーゼ、アルファ−Ｌ−マンノシダーゼ、アルファ−ノイラミニダーゼ、ホスホトランスフェラーゼ、酸リパーゼ、酸セラミダーゼ、スフィンゴミエリナーゼ、チオエステラーゼ、カテプシンＫ、およびリポタンパク質リパーゼからなる群より選択される、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１２】
前記対象が、改変Ｎ−グリコシル化を有するタンパク質の投与によって治療することができる疾病を有するかどうかを判定することをさらに含む、請求項１０５〜１１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１１３】
前記対象がヒトである、請求項１０５〜１１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１１４】
少なくとも１つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作されたＹａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａまたはＡｒｘｕｌａ ａｄｅｎｉｎｉｖｏｒａｎｓ細胞から調製された細胞溶解産物とターゲットタンパク質を接触させることを含み、該細胞溶解産物とターゲットタンパク質の接触が、結果として、改変されたＮ−グリコシル化形態の該ターゲットタンパク質を生じさせる、改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質を生産する方法。
【請求項１１５】
Ｎ−グリコシル化活性を有する１つ以上のタンパク質とターゲットタンパク質を接触させることを含み、該Ｎ−グリコシル化活性を有する１つ以上のタンパク質が、少なくとも１つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作されたＹａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａまたはＡｒｘｕｌａ ａｄｅｎｉｎｉｖｏｒａｎｓ細胞から得られ、および該Ｎ−グリコシル化活性を有する１つ以上のタンパク質とターゲット分子の接触が、結果として、改変されたＮ−グリコシル化形態の該ターゲットタンパク質を生じさせる、改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質を生産する方法。
【請求項１１６】
Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａまたはＡｒｘｕｌａ ａｄｅｎｉｎｉｖｏｒａｎｓ細胞の実質的に純粋な培養物であって、これらのうちの実質的な数が少なくとも１つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作される、培養物。
【請求項１１７】
細胞の１つ以上の亜集団を含有し、それぞれの亜集団が、異なる修飾グリコシル化活性を含む、請求項８７に記載の細胞の実質的に純粋な培養物。
【請求項１１８】
配列番号１または配列番号２を含む、単離されたヌクレオチド配列。
【請求項１１９】
配列番号１または配列番号２と少なくとも８０％同一である配列を含む、単離されたヌクレオチド配列。
【請求項１２０】
請求項１１８または１１９に記載の単離されたヌクレオチド配列によってコードされたポリペプチド。
【請求項１２１】
（ａ）配列番号１もしくは配列番号２の相補体に高ストリンジェント条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列；または
（ｂ）該ヌクレオチド配列の相補体
を含む、単離された核酸。
【請求項１２２】
請求項１１８〜１２１のいずれかに記載の核酸配列を含むベクター。
【請求項１２３】
請求項１１８〜１２１のいずれかに記載の核酸配列を含む発現ベクター。
【請求項１２４】
前記ポリペプチドを発現する、請求項１２３に記載の発現ベクターを含む培養細胞または該細胞の子孫。
【請求項１２５】
前記ポリペプチドの発現を可能にする条件下で請求項１２４に記載の細胞を培養することを含む、タンパク質の生産方法。
【請求項１２６】
前記細胞を培養した後、該細胞または該細胞を培養した培地から前記ポリペプチドを単離することをさらに含む、請求項１２５に記載の方法。
【請求項１】
少なくとも１つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作されたＹａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａまたはＡｒｘｕｌａ ａｄｅｎｉｎｉｖｏｒａｎｓ細胞を提供すること；および
ターゲットタンパク質をコードする核酸を該細胞に導入すること
を含み、
該細胞が、該ターゲットタンパク質を改変Ｎ−グリコシル化形態で生産する、
改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質を生産する方法。
【請求項２】
前記改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質を単離することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ターゲットタンパク質が、外因性タンパク質である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記ターゲットタンパク質が、内因性タンパク質である、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記ターゲットタンパク質が、哺乳動物タンパク質である、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記ターゲットタンパク質が、ヒトタンパク質である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記ターゲットタンパク質が、病原性タンパク質、リソソームタンパク質、成長因子、サイトカイン、ケモカイン、抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質である、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記融合タンパク質が、病原性タンパク質、リソソームタンパク質、成長因子、サイトカインまたはケモカインと抗体またはその抗原結合フラグメントとの融合体である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記ターゲットタンパク質が、リソソーム貯蔵障害（ＬＳＤ）に関連したタンパク質である、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
前記ターゲットタンパク質が、グルコセレブロシダーゼまたはガラクトセレブロシダーゼである、請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
前記ターゲットタンパク質が、アルファ−Ｌ−イズロニダーゼ、ベータ−Ｄ−ガラクトシダーゼ、ベータ−グルコシダーゼ、ベータ−ヘキソサミニダーゼ、ベータ−Ｄ−マンノシダーゼ、アルファ−Ｌ−フコシダーゼ、アリールスルファターゼＢ、アリールスルファターゼＡ、アルファ−Ｎ−アセチルガラクトサミニダーゼ、アスパルチルグルコサミニダーゼ、イズロネート−２−スルファターゼ、アルファ−グルコサミニド−Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ、ベータ−Ｄ−グルコロニダーゼ、ヒアルロニダーゼ、アルファ−Ｌ−マンノシダーゼ、アルファ−ノイラミニダーゼ、ホスホトランスフェラーゼ、酸リパーゼ、酸セラミダーゼ、スフィンゴミエリナーゼ、チオエステラーゼ、カテプシンＫ、およびリポタンパク質リパーゼからなる群より選択される、請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
前記改変Ｎ−グリコシル化形態が、１つ以上のＮ−グリカン構造を含む、請求項１〜１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
前記１つ以上のＮ−グリカンが、Ｍａｎ５ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記１つ以上のＮ−グリカンが、Ｍａｎ８ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記１つ以上のＮ−グリカンが、Ｍａｎ９ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
前記１つ以上のＮ−グリカンが、Ｍａｎ３ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】
前記１つ以上のＮ−グリカンが、Ｇｌｃ１Ｍａｎ５ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１８】
前記１つ以上のＮ−グリカンが、Ｇｌｃ２Ｍａｎ５ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１９】
前記改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質が、均一である、請求項１２〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２０】
前記改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質が、実質的に均一である、請求項１２〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２１】
前記改変グリコシル化を含有する改変ターゲット分子の画分が、少なくとも約２０％である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記改変グリコシル化を含有する改変ターゲット分子の画分が、少なくとも約３０％である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記改変グリコシル化を含有する改変ターゲット分子の画分が、少なくとも約４０％である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
前記改変グリコシル化が、Ｍａｎ５ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１９〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項２５】
前記改変グリコシル化が、Ｍａｎ８ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１９〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項２６】
前記改変グリコシル化が、Ｍａｎ９ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１９〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】
前記改変グリコシル化が、Ｍａｎ３ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１９〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項２８】
前記改変グリコシル化が、Ｇｌｃ１Ｍａｎ５ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１９〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
前記改変グリコシル化が、Ｇｌｃ２Ｍａｎ５ＧｌｃＮＡｃ２である、請求項１９〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】
前記細胞が、少なくとも１つのＮ−グリコシル化活性が欠損するように遺伝子操作される、請求項１〜２９のいずれかに記載の方法。
【請求項３１】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、ＡＬＧ３活性である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、ＯＣＨ１活性である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、ＭＮＳ１活性である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３４】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、ＭＮＮ９活性である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３５】
前記少なくとも１つの修飾が、前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質をコードする遺伝子の欠失を含む、請求項１〜３４のいずれかに記載の方法。
【請求項３６】
前記少なくとも１つの修飾が、前記Ｎ−グリコシル化活性を有する突然変異形態のタンパク質の発現を含む、請求項１〜３５のいずれかに記載の方法。
【請求項３７】
前記少なくとも１つの修飾が、前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質の機能的発現に干渉するＲＮＡ分子の導入または発現を含む、請求項１〜３６のいずれかに記載の方法。
【請求項３８】
前記少なくとも１つの修飾が、Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質の発現を含む、請求項１〜３７のいずれかに記載の方法。
【請求項３９】
発現されるタンパク質が、前記細胞内の外因性核酸によってコードされたタンパク質である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、グルコシルトランスフェラーゼ活性である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４１】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、ＡＬＧ６である、請求項３８〜４０のいずれかに記載の方法。
【請求項４２】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、アルファ−マンノシダーゼである、請求項３８に記載の方法。
【請求項４３】
前記アルファ−マンノシダーゼが、小胞体にターゲッティングされる、請求項３８に記載の方法。
【請求項４４】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、アルファ−マンノシダーゼポリペプチドおよびＨＤＥＬ小胞体貯留ペプチドを含む融合タンパク質である、請求項４２または４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記アルファ−マンノシダーゼが、５．１未満の最適ｐＨを有する、請求項４２に記載の方法。
【請求項４６】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、Ｍａｎ５ＧｌｃＮＡｃ２からグルコース残基を除去することができるタンパク質である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４７】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、アルファ−１，３−グルコシダーゼ活性を有するタンパク質である、請求項３８または４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記タンパク質が、グルコシダーゼＩＩである、請求項４６または４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記タンパク質が、グルコシダーゼＩＩのアルファおよびベータサブユニットの一方または両方を含む、請求項４６〜４８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５０】
前記タンパク質が、ムタナーゼである、請求項４６に記載の方法。
【請求項５１】
前記細胞が、少なくとも２つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作される、請求項１に記載の方法。
【請求項５２】
前記少なくとも２つの修飾Ｎ−グリコシル化活性が、ＡＬＧ３活性の欠損および高レベルのＡＬＧ６活性を含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記細胞が、少なくとも３つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作される、請求項１に記載の方法。
【請求項５４】
前記少なくとも３つの修飾Ｎ−グリコシル化活性が、ＡＬＧ３活性の欠損；高レベルのＡＬＧ６活性；および高レベルのグルコシダーゼＩＩ活性を含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５５】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、外因性タンパク質である、請求項３８〜５４のいずれかに記載の方法。
【請求項５６】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、哺乳動物タンパク質である、請求項３８〜５４のいずれかに記載の方法。
【請求項５７】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、ヒトタンパク質である、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、下等真核生物タンパク質である、請求項３８〜５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５９】
前記下等真核生物が、真菌、トリパノソーマ属、または原生動物である、請求項４５に記載の方法。
【請求項６０】
前記下等真核生物が、Ｔｙｐａｎｏｓｏｍａ ｂｒｕｃｅｉ、Ｔｒｉｃｏｄｅｒｍａ ｈａｒｚｉａｎｕｍ、およびＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓからなる群より選択される、請求項５８に記載の方法。
【請求項６１】
前記修飾が、前記ターゲットタンパク質のマンノシルリン酸化を果たすことができるタンパク質またはその生物活性変異体の発現を含む、請求項１〜６０のいずれかに記載の方法。
【請求項６２】
前記マンノシルリン酸化を果たすことができるタンパク質またはその生物活性変異体が、ＭＮＮ４である、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記マンノシルリン酸化を果たすことができるタンパク質またはその生物活性変異体が、ＰＮＯ１である、請求項６１に記載の方法。
【請求項６４】
前記マンノシルリン酸化を果たすことができるタンパク質またはその生物活性変体が、ＭＮＮ６である、請求項６１に記載の方法。
【請求項６５】
糖タンパク質のマンノシル残基の少なくとも約３０％が、リン酸化される、請求項６１〜６４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６６】
前記細胞が、ＯＣＨ１活性が欠損するように遺伝子操作されない、請求項１〜６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６７】
前記糖タンパク質の追加のプロセッシングをさらに含む、請求項１〜６６のいずれかに記載の方法。
【請求項６８】
前記追加のプロセッシングが、インビトロで行われる、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
前記追加のプロセッシングが、インビボで行われる、請求項６７に記載の方法。
【請求項７０】
前記追加のプロセッシングが、前記修飾糖タンパク質への異種部分の付加を含む、請求項６７〜６９のいずれかに記載の方法。
【請求項７１】
前記異種部分が、ポリマーまたは担体である、請求項５５に記載の方法。
【請求項７２】
前記追加のプロセッシングが、前記改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質の酵素的または化学的処理を含む、請求項６７〜７１のいずれかに記載の方法。
【請求項７３】
前記追加のプロセッシングが、マンノシダーゼ、マンナナーゼ、ホスホジエステラーゼ、グルコシダーゼまたはグリコシルトランスフェラーゼでの前記改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質の処理を含む、請求項６７に記載の方法。
【請求項７４】
前記追加のプロセッシングが、フッ化水素酸での前記改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質の処理を含む、請求項７２に記載の方法。
【請求項７５】
前記追加のプロセッシングが、前記改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質のリン酸化を含む、請求項６７〜７４のいずれかに記載の方法。
【請求項７６】
請求項１〜７５のいずれかに記載の方法によって生産される、改変Ｎ−グリコシル化を有する単離されたタンパク質。
【請求項７７】
少なくとも１つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作された、単離されたＹａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａまたはＡｒｘｕｌａ ａｄｅｎｉｎｉｖｏｒａｎｓ細胞。
【請求項７８】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、ＡＬＧ３活性である、請求項７７に記載の単離された細胞。
【請求項７９】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、ＯＣＨ１活性である、請求項７７または７８に記載の単離された細胞。
【請求項８０】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、ＭＮＳ１活性である、請求項７７〜７９に記載の単離された細胞。
【請求項８１】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、ＭＮＮ９活性である、請求項７７〜７９に記載の単離された細胞。
【請求項８２】
前記修飾が、前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質をコードする遺伝子の欠失を含む、請求項７７〜７９に記載の単離された細胞。
【請求項８３】
前記修飾が、前記Ｎ−グリコシル化活性を有する突然変異形態のタンパク質の発現を含む、請求項７７〜７９に記載の単離された細胞。
【請求項８４】
前記修飾が、前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質の機能的発現に干渉するＲＮＡ分子の導入または発現を含む、請求項７７〜８３に記載の単離された細胞。
【請求項８５】
前記修飾が、Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質の発現を含む、請求項７７〜８３に記載の単離された細胞。
【請求項８６】
前記Ｎ−グリコシル化活性が、グルコシルトランスフェラーゼ活性である、請求項８５に記載の単離された細胞。
【請求項８７】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、ＡＬＧ６である、請求項８５または８６に記載の単離された細胞。
【請求項８８】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、アルファ−マンノシダーゼである、請求項８５に記載の単離された細胞。
【請求項８９】
前記アルファ−マンノシダーゼが、小胞体にターゲッティングされる、請求項８８に記載の単離された細胞。
【請求項９０】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、アルファ−マンノシダーゼポリペプチドおよびＨＤＥＬ小胞体貯留ペプチドを含む融合タンパク質である、請求項８８または８９に記載の単離された細胞。
【請求項９１】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、Ｍａｎ５ＧｌｃＮＡｃ２からグルコース残基を除去することができるタンパク質である、請求項８５に記載の単離された細胞。
【請求項９２】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、アルファ−１，３−グルコシダーゼ活性を有するタンパク質である、請求項８５または９１に記載の単離された細胞。
【請求項９３】
前記タンパク質が、グルコシダーゼＩＩである、請求項９１または９２に記載の単離された細胞。
【請求項９４】
前記タンパク質が、グルコシダーゼＩＩのアルファおよびベータサブユニットの一方または両方を含む、請求項９１〜９３のいずれか一項に記載の単離された細胞。
【請求項９５】
前記タンパク質が、ムタナーゼである、請求項９１に記載の単離された細胞。
【請求項９６】
前記細胞が、少なくとも２つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作される、請求項７７〜９５のいずれか一項に記載の単離された細胞。
【請求項９７】
前記少なくとも２つの修飾Ｎ−グリコシル化活性が、ＡＬＧ３活性の欠損および高レベルのＡＬＧ６活性を含む、請求項９６に記載の単離された細胞。
【請求項９８】
前記細胞が、少なくとも３つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作される、請求項７７〜９７のいずれか一項に記載の単離された細胞。
【請求項９９】
前記少なくとも３つの修飾Ｎ−グリコシル化活性が、ＡＬＧ３活性の欠損；高レベルのＡＬＧ６活性；および高レベルのａグルコシダーゼＩＩ活性を含む、請求項９８に記載の単離された細胞。
【請求項１００】
前記細胞が、ＯＣＨ１活性が欠損するように遺伝子操作されない、請求項７７〜９９のいずれか一項に記載の単離された細胞。
【請求項１０１】
前記Ｎ−グリコシル化活性を有するタンパク質が、ヒトタンパク質である、請求項８５〜１００のいずれか一項に記載の単離された細胞。
【請求項１０２】
前記修飾が、前記修飾糖タンパク質のマンノシルリン酸化を促進することができるタンパク質またはその生物活性変異体の発現を含む、請求項７７〜１０１のいずれかに記載の単離された細胞。
【請求項１０３】
前記マンノシルリン酸化を果たすタンパク質またはその生物活性変異体が、ＭＮＮ４である、請求項１０２に記載の単離された細胞。
【請求項１０４】
前記マンノシルリン酸化を果たすタンパク質またはその生物活性変異体が、ＰＮＯ１である、請求項１０３に記載の単離された細胞。
【請求項１０５】
改変Ｎ−グリコシル化を有するタンパク質の投与によって治療することができる疾患を有するまたは有することが疑われる対象に請求項７６に記載のタンパク質を投与することを含む、改変Ｎ−グリコシル化を有するタンパク質の投与によって治療することができる障害を治療する方法。
【請求項１０６】
前記疾患が、代謝異常である、請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０７】
前記代謝異常が、リソソーム貯蔵障害（ＬＳＤ）である、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１０８】
前記リソソーム貯蔵障害が、ゴーシェ病、テイ−サックス病、ポンペ病、ニーマン−ピック病、またはファブリ病である、請求項１０７に記載の方法。
【請求項１０９】
前記タンパク質が、ＬＳＤに関連したものである、請求項１０５〜１０８のいずれかに記載の方法。
【請求項１１０】
前記タンパク質が、グルコセレブロシダーゼまたはアルファ−ガラクトシダーゼである、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１１】
前記タンパク質が、アルファ−Ｌ−イズロニダーゼ、ベータ−Ｄ−ガラクトシダーゼ、ベータ−グルコシダーゼ、ベータ−ヘキソサミニダーゼ、ベータ−Ｄ−マンノシダーゼ、アルファ−Ｌ−フコシダーゼ、アリールスルファターゼＢ、アリールスルファターゼＡ、アルファ−Ｎ−アセチルガラクトサミニダーゼ、アスパルチルグルコサミニダーゼ、イズロネート−２−スルファターゼ、アルファ−グルコサミニド−Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ、ベータ−Ｄ−グルコロニダーゼ、ヒアルロニダーゼ、アルファ−Ｌ−マンノシダーゼ、アルファ−ノイラミニダーゼ、ホスホトランスフェラーゼ、酸リパーゼ、酸セラミダーゼ、スフィンゴミエリナーゼ、チオエステラーゼ、カテプシンＫ、およびリポタンパク質リパーゼからなる群より選択される、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１２】
前記対象が、改変Ｎ−グリコシル化を有するタンパク質の投与によって治療することができる疾病を有するかどうかを判定することをさらに含む、請求項１０５〜１１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１１３】
前記対象がヒトである、請求項１０５〜１１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１１４】
少なくとも１つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作されたＹａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａまたはＡｒｘｕｌａ ａｄｅｎｉｎｉｖｏｒａｎｓ細胞から調製された細胞溶解産物とターゲットタンパク質を接触させることを含み、該細胞溶解産物とターゲットタンパク質の接触が、結果として、改変されたＮ−グリコシル化形態の該ターゲットタンパク質を生じさせる、改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質を生産する方法。
【請求項１１５】
Ｎ−グリコシル化活性を有する１つ以上のタンパク質とターゲットタンパク質を接触させることを含み、該Ｎ−グリコシル化活性を有する１つ以上のタンパク質が、少なくとも１つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作されたＹａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａまたはＡｒｘｕｌａ ａｄｅｎｉｎｉｖｏｒａｎｓ細胞から得られ、および該Ｎ−グリコシル化活性を有する１つ以上のタンパク質とターゲット分子の接触が、結果として、改変されたＮ−グリコシル化形態の該ターゲットタンパク質を生じさせる、改変Ｎ−グリコシル化形態のターゲットタンパク質を生産する方法。
【請求項１１６】
Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａまたはＡｒｘｕｌａ ａｄｅｎｉｎｉｖｏｒａｎｓ細胞の実質的に純粋な培養物であって、これらのうちの実質的な数が少なくとも１つの修飾Ｎ−グリコシル化活性を含むように遺伝子操作される、培養物。
【請求項１１７】
細胞の１つ以上の亜集団を含有し、それぞれの亜集団が、異なる修飾グリコシル化活性を含む、請求項８７に記載の細胞の実質的に純粋な培養物。
【請求項１１８】
配列番号１または配列番号２を含む、単離されたヌクレオチド配列。
【請求項１１９】
配列番号１または配列番号２と少なくとも８０％同一である配列を含む、単離されたヌクレオチド配列。
【請求項１２０】
請求項１１８または１１９に記載の単離されたヌクレオチド配列によってコードされたポリペプチド。
【請求項１２１】
（ａ）配列番号１もしくは配列番号２の相補体に高ストリンジェント条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列；または
（ｂ）該ヌクレオチド配列の相補体
を含む、単離された核酸。
【請求項１２２】
請求項１１８〜１２１のいずれかに記載の核酸配列を含むベクター。
【請求項１２３】
請求項１１８〜１２１のいずれかに記載の核酸配列を含む発現ベクター。
【請求項１２４】
前記ポリペプチドを発現する、請求項１２３に記載の発現ベクターを含む培養細胞または該細胞の子孫。
【請求項１２５】
前記ポリペプチドの発現を可能にする条件下で請求項１２４に記載の細胞を培養することを含む、タンパク質の生産方法。
【請求項１２６】
前記細胞を培養した後、該細胞または該細胞を培養した培地から前記ポリペプチドを単離することをさらに含む、請求項１２５に記載の方法。
【図１８】
【図２７Ａ】
【図２７Ｂ】
【図３０】
【図３１】
【図３６Ａ】
【図３６Ｂ】
【図３７】
【図４２】
【図４３】
【図４４Ａ】
【図４４Ｂ】
【図４４Ｃ】
【図４５Ａ】
【図４５Ｂ】
【図４５Ｃ】
【図４６Ａ】
【図４６Ｂ】
【図４６Ｃ】
【図４７Ａ】
【図４７Ｂ】
【図４７Ｃ】
【図４９】
【図５０】
【図５１】
【図５２】
【図５３】
【図５５】
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２８】
【図２９】
【図３２】
【図３３】
【図３４】
【図３５】
【図３８】
【図３９】
【図４０】
【図４１】
【図４８】
【図５４】
【図２７Ａ】
【図２７Ｂ】
【図３０】
【図３１】
【図３６Ａ】
【図３６Ｂ】
【図３７】
【図４２】
【図４３】
【図４４Ａ】
【図４４Ｂ】
【図４４Ｃ】
【図４５Ａ】
【図４５Ｂ】
【図４５Ｃ】
【図４６Ａ】
【図４６Ｂ】
【図４６Ｃ】
【図４７Ａ】
【図４７Ｂ】
【図４７Ｃ】
【図４９】
【図５０】
【図５１】
【図５２】
【図５３】
【図５５】
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２８】
【図２９】
【図３２】
【図３３】
【図３４】
【図３５】
【図３８】
【図３９】
【図４０】
【図４１】
【図４８】
【図５４】
【公表番号】特表２０１０−５２３１０２（Ｐ２０１０−５２３１０２Ａ）
【公表日】平成２２年７月１５日（２０１０．７．１５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５０１６１７（Ｐ２０１０−５０１６１７）
【出願日】平成２０年４月３日（２００８．４．３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００８／００１８１４
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１２０１０７
【国際公開日】平成２０年１０月９日（２００８．１０．９）
【出願人】（５０９２７５５０７）オキシレイン （ユーケー） リミテッド (4)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年７月１５日（２０１０．７．１５）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年４月３日（２００８．４．３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００８／００１８１４
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１２０１０７
【国際公開日】平成２０年１０月９日（２００８．１０．９）
【出願人】（５０９２７５５０７）オキシレイン （ユーケー） リミテッド (4)
【Ｆターム（参考）】
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