卵殻質改善用飼料
【課題】家禽の卵殻質等を改善すること。
【解決手段】リュウキュウヤナギの葉を飼料中に所定量添加した飼料を家禽に給与すること。
【解決手段】リュウキュウヤナギの葉を飼料中に所定量添加した飼料を家禽に給与すること。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は家禽用飼料及び卵殻質の改善方法に関する、さらに詳述すれば、リュウキュウヤナギの葉を配合した家禽用配合飼料およびその飼料を給与して卵殻質を改善する方法を提供するものである。
【背景技術】
【０００２】
卵殻の破損は、鶏卵の商品化率を低下させ、収益性を落とすことから発生率を減少させることが急務となっている。国内における卵殻の破損卵による損失については十分明らかでないが、Roland(Poult.Sci,67:1801,1988)がアメリカにおいて8,100万羽を対象に実施した破損卵の調査結果を基に、アメリカと同一比率で破損卵が国内で発生すると仮定すれば、約310億円/年の損失となる（坂井田1998、高品質卵の生産技術と流通（2））。飼料内容を見直すことによって破損卵を減少させる方法として、カルシウム・リンの含量、カキガラ等のカルシウム源、ビタミン剤、重炭酸ナトリウム、ゼオライト、木酢液、生菌剤等が検討されている。しかし、完全に有効な方法が見出されているとは言い難く、卵殻を改善することによって破損卵を減少させる配合飼料又は混合飼料が望まれている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明は、活性型ビタミンＤ3様因子を含有するリュウキュウヤナギの葉のビタミンＤ3活性値を算出し、リュウキュウヤナギの葉を産卵鶏に給与することによって加齢によって低下する卵殻質を改善する家禽用配合飼料を提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明者等は、リュウキュウヤナギの葉には、鶏においてビタミンＤ3として乾物1 kg当たり30万IU程度の活性があることを見出し、これを産卵鶏の老鶏に給与することにより卵殻が著しく改善されることを見出した。
【０００５】
ビタミンＤ3は、小腸からのカルシウムの促進や骨からのカルシウムの血中への放出等、産卵鶏のカルシウムの代謝に重要な役割を果たしているビタミンであり、欠乏すると卵殻質と産卵成績を悪化させる。ビタミンＤ3は、肝臓で２５位(25-OH-D3)、次いで腎臓で１α位が水酸化されて活性型（１α-25(OH) 2-D3；以下、活性型ビタミンＤ3と略）に代謝されて初めて生体内で効果を発揮する。従って、ビタミンＤ3そのものでなく、活性型ビタミンＤ3に代謝されないと生体内で効果が無く、ビタミンＤ3を大量に投与してもそれほど効果を発揮しないことが知られている(Garlich and Waytt,Poult.Sci.,50:950.1971、Berg et,al, Poult.Sci.,30:799.1951)。一方、25-OH-D3から活性型ビタミンＤ3に代謝する役割を果たす腎臓中の１α水酸化酵素活性は、加齢に伴い著しく減少し、その結果、特に老齢鶏において小腸、皮質骨及び骨髄骨中の活性型ビタミンＤ3濃度が著しく減少する。従って、加齢に伴う卵殻質の低下は、１α水酸化酵素活性の低下により活性型ビタミンＤ3が標的臓器に充分供給できないことが一つの要因となっており(Abe,et,al,J.Nutr.,112:436.1982、阿部ら,骨代謝,15:93.1982)、血漿中の活性型ビタミンＤ3濃度が高くなると卵殻重が増加する(Soares et,al, Poult.Sci.,59:1663.1980)。
【０００６】
しかし、活性型ビタミンＤ3は、合成品であるとともに使用量が適切でないと弊害を誘発する。また、人が食する鶏卵を生産するための飼料としては、安全性が強く望まれており、飼料に用いる原料等については、天然物であることが望ましい。リュウキュウヤナギは、ブラジル南部及びウルグアイ原産で、観賞のため栽培される常緑低木であり、江戸時代の末期に琉球へ持ち込まれたことにより日本名をリュウキュウヤナギと言う。天然物であるリュウキュウヤナギの葉には、活性型ビタミンＤ3様因子が含有されていることが報告されている（Wasserman et,al, J.Nutr.106:457,1976）が、家禽に対する生物的効果と卵殻に対する効果についての報告例はない。
【実施例１】
【０００７】
AOAC法(Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists,1995)による雛を用いたビタミンＤ3のバイオアッセイに準拠してリュウキュウヤナギの葉のビタミンＤ3活性の測定を実施した。試験には、ハイラインマリアの初生雛６４羽を用い、各区に８羽ずつ供試した。試験飼料は、ビタミンＤ3無添加基礎飼料及びビタミンＤ3無添加基礎飼料にビタミンＤ3又はリュウキュウヤナギの葉を添加した飼料とし、これを３週間給与した。リュウキュウヤナギの葉は、凍結乾燥したものを用い、添加量は乾物当たりとした。測定項目は、体重、飼料摂取量、育成率、足指灰分重量、脛骨灰分重量及び血清中活性型ビタミンＤ3濃度とした。尚、処理区は以下のように設定しまた、ビタミンＤ3無添加の基礎飼料である１区の配合率は表１に、そして成分値（設計値）は表２に示した。
処理
１区 ビタミンＤ3無添加基礎飼料(0 IU/kg)
２区 ビタミンＤ3 (50 IU/kg)添加
３区 ビタミンＤ3(200 IU/kg)添加
４区 ビタミンＤ3(800 IU/kg)添加
５区 ビタミンＤ3(1400 IU/kg)添加
６区 リュウキュウヤナギの葉を0.17%添加
７区 リュウキュウヤナギの葉を0.67%添加
８区 リュウキュウヤナギの葉を2.67%添加
【表１】
【表２】
【実施例２】
【０００８】
表３に飼育成績の結果を示した。
ビタミンＤ3含量を０〜1400 IU/kgまで増加させた１区から５区(スタンダード)では、ビタミンＤ3含量を高めるに伴い、増体重が増加することが認められ、ビタミンＤ3含量の増加と増体重の改善との間に用量反応（Dose-response）が認められた（Ｙ＝71.608＋0.078744Ｘ−0.000033401Ｘ2（Ｒ2＝0.936）、X；飼料中のビタミンＤ3含量(IU/kg)、Y；増体重(g)）。飼料摂取量は、ビタミンＤ3を800IU添加した４区、1400IU添加した５区においてビタミンＤ3無添加の１区に比べて、それぞれ17、18％増加した。飼料要求率は、ビタミンＤ3含量を高めるに伴い減少した。
一方、リュウキュウヤナギの葉を0.17％添加した６区の増体重は、３区と４区の間、即ち、ビタミンＤ3含量として、200〜800 IU/kgの間にあること、0.67％添加した7区では、1400 IU/kg添加した５区と同等であることが示された。2.67％添加した8区では、逆に、３区(200 IU/kg)程度の増体重であった。
【表３】
【実施例３】
【０００９】
表４、表５に足指灰分の測定結果を示した。尚、足指灰分の測定は、AOACに準拠して実施した。即ち、左足の中央の趾骨の第２と第３関節の間で切り離したものを足指とし、これを100℃で8時間乾燥した後、600℃で4時間灰化しものの重量を灰分重量とした。
ビタミンＤ3含量を０〜1400 IU/kgまで増加させた１区から５区(スタンダード)では、乾燥重量、灰分重量及び灰分割合のいずれにおいてもビタミンＤ3含量を高めるに伴い増加した。灰分割合も200 IU/kg添加した３区を除き、ビタミンＤ3含量を高めるに伴い増加し、800 IU/kg で平行となった。一方、リュウキュウヤナギの葉を0.17％添加した６区の灰分割合は、増体重は、３区と４区の間、即ち、ビタミンＤ3含量として、200〜800 IU/kgの間にあること、0.67％添加した7区では、800 IU/kg 添加した４区或いは1400 IU/kg添加した５区と同等であることが示された。2.67％添加した8区では、逆に、３区(200 IU/kg)と同程度の灰分割合であった。
【表４】
【表５】
【実施例４】
【００１０】
表６、表７に脛骨灰分の測定結果を示した。尚、脛骨灰分の測定は、AOACに準拠して実施した。即ち、脛骨（左足）を２分間蒸留水でボイルし、付着組織を除去した後、破砕し、100％アルコール中で脱脂後、100℃で8時間乾燥し、更に600℃で２時間灰化したものの重量を灰分重量とした。
脛骨灰分は、ビタミンＤ3含量を０〜1400 IU/kgまで増加させた１区から５区(スタンダード)では、ビタミンＤ3含量を高めるに伴い増加し、800 IU/kg で平行となった。また、リュウキュウヤナギの葉を添加した６〜８区では、1400 IU/kg添加した５区とほぼ同程度の測定結果であった。
【表６】
【表７】
【実施例５】
【００１１】
表８に試験終了時における血漿中の活性型ビタミンＤ3濃度の測定結果を示した。
その結果、飼料へのリュウキュウヤナギの葉の添加により、飼料中のビタミンＤ3含量を高めるに伴い血漿中活性型ビタミンＤ3 濃度が増加したが、1400 IU/kg 添加した５区では逆に減少した。一方、リュウキュウヤナギの葉を添加した６〜８区では、血漿中活性型ビタミンＤ3 濃度は、 スタンダードにおいて測定値が最大となった４区の1.3〜3.12倍となった（表９）。
【表８】
【表９】
【実施例６】
【００１２】
雛を用いた飼育試験の結果から、リュウキュウヤナギの葉の添加によりビタミンＤ3を添加した場合と同様な発育が示されたこと、足指と脛骨灰分割合を測定したいずれの結果においてもビタミンＤ3を添加した場合と同様な灰分割合の増加が示された。また、血漿中活性型ビタミンＤ3濃度を測定した結果においても、2.67％リュウキュウヤナギの葉を添加した場合において、ビタミンＤ3を1400 IU/kg 添加した５区の約３倍を越える血漿中活性型ビタミンＤ3濃度の増加が示されたことから、リュウキュウヤナギの葉は、強い活性型ビタミンＤ3活性を有しているものと考えられた。
一方、血漿中活性型ビタミンＤ3濃度が最も高かった８区では、飼育成績と脛骨灰分割合の減少が示されたことから、雛の発育に対するリュウキュウヤナギの葉の最適な添加量は、0.17〜0.67％であることが分かった。
AOAC法に準拠し、足指灰分の測定結果から、リュウキュウヤナギの葉のビタミンＤ3活性の算出を行った。飼料中のビタミンＤ3含量と足指灰分の測定結果から、次の回帰式が算出された。
0 IU/kg ＜ビタミンＤ3＜1400 IU/kgの場合
Ｙ＝9.7464＋0.0078087Ｘ−0.0000036835Ｘ2（Ｒ2＝0.962）
X:飼料中のビタミンＤ3含量(IU/kg)、Y:足指灰分割合(%)
上記回帰式から算出したリュウキュウヤナギの葉のビタミンＤ3活性を表10に示した。
リュウキュウヤナギの葉のビタミンＤ3活性は、0.17％添加した６区では31.9万IU/kg、0.67％添加した7区では9.9万IU/kg程度となった。これに対して、2.67％添加した８区では、0.66万IU/kgとなり、リュウキュウヤナギの葉の過剰給与による影響が示された。また、７区では、６区に比べてリュウキュウヤナギの葉のビタミンＤ3活性は、約1/3程度であった。リュウキュウヤナギの葉を0.17％添加した６区より算出されたビタミンＤ3活性を用いて７区と８区のリュウキュウヤナギの葉のビタミンＤ3活性を算出すると、７区で、2172 IU/kg、８区で8528 IU/kgとなる。一般に、雛におけるビタミンＤ3含量の最大許容水準は、要求量(200 IU/kg)の４〜10倍(800〜2000 IU/kg)であり、６区に比べて７区においてもビタミンＤ3活性が減少したことは、８区と同様にビタミンＤ3の過剰給与による影響が強いものと考えられた。
以上の結果、リュウキュウヤナギの葉には、ビタミンＤ3として、30万IU/kg以上の強い生物活性が明らかとなった。
【表１０】
【実施例７】
【００１３】
本試験では、老齢の産卵鶏を用いて、卵殻質に対する影響について検討した。試験には、60週齢のデカルブTX35 60羽を用い、1群に10羽ずつ供試した。試験飼料は、ビタミンＤ3無添加基礎飼料及びビタミンＤ3無添加基礎飼料にビタミンＤ3又はリュウキュウヤナギの葉を添加した飼料を４週間給与した。リュウキュウヤナギの葉は、実施例１と同様に凍結乾燥したものを用い、添加量は乾物当たりとした。測定項目は、産卵率、卵重、飼料摂取量、生存率、卵殻強度、卵殻重、卵殻厚及び卵殻の単位表面積当たりの卵殻重とした。
単位表面積当たり卵殻重（SWUSA；Shell weight per unit surface area）
（mg/cm2）＝（卵殻重(g)×1000）/卵殻の表面積（cm2）×100
卵殻の表面積（cm2）＝3.9782×EW0.7056 （EW；卵重(g)）
尚、処理区の設定を以下に、ビタミンＤ3無添加の基礎飼料である１区の配合率を表11に、および成分値（設計値）を表12に示した。
処理
１区 ビタミンＤ3無添加基礎飼料
２区 基礎飼料にビタミンＤ3 (350IU/kg添加)
３区 基礎飼料にビタミンＤ3 (700IU/kg添加)
４区 基礎飼料にビタミンＤ3 (1400IU/kg添加)
５区 基礎飼料にリュウキュウヤナギ(225IU/kg相当量； 0.075%添加)
６区 基礎飼料にリュウキュウヤナギ(450IU/kg相当量； 0.15%添加)
７区 基礎飼料にリュウキュウヤナギ(900IU/kg相当量； 0.30%添加)
８区 基礎飼料にリュウキュウヤナギ(1800IU/kg相当量；0.60%添加)
注）リュウキュウヤナギの葉（凍結乾燥品）の活性は、
300,000IU/kg(ビタミンＤ3として)として添加量を推定した。
【表１１】
【表１２】
【実施例８】
【００１４】
表13に色々な含量でビタミンＤ3を含む飼料を給与した場合の産卵成績の結果を、表14にビタミンＤ3を含まない飼料にリュウキュウヤナギの葉を添加した場合の結果を示した。
色々な含量でビタミンＤ3を含む飼料を給与した場合、産卵率は、ビタミンＤ3含量を低下させるに伴い減少し、減少の程度は、ビタミンＤ3を含まない１区の場合が最も顕著であった。卵重と飼料摂取量の差は僅かであったため、飼料要求率は、ビタミンＤ3無添加の１区のみ悪化した。従って、飼料中のビタミンＤ3含量が350IU/kg以下となると産卵成績が顕著に減少することが示された。
【表１３】
一方、ビタミンＤ3を含まない飼料にリュウキュウヤナギの葉を添加した場合では、産卵率は、リュウキュウヤナギの葉を0.15％添加した６区が他の処理区に比べて最も優れたが、それ以外の処理区では殆ど差がなかった。しかし、リュウキュウヤナギの葉を添加した何れの処理区においてもビタミンＤ3無添加の１区に比べて産卵率は高かった。卵重は、リュウキュウヤナギの葉を0.30％添加した７区がリュウキュウヤナギの葉を添加したそれ以外の処理区に比べて減少する傾向であった。飼料摂取量は、産卵率が高かった６区と８区が５区と７区よりも増加したが、飼料要求率には、処理区間の差は殆ど認められなかった。
従って、リュウキュウヤナギの葉を飼料中に0.15％以上添加すれば産卵成績には殆ど問題がないものと考えられた。
【表１４】
【実施例９】
【００１５】
表15にビタミンＤ3を、表16にリュウキュウヤナギの葉を添加した場合の試験終了時における卵殻質測定結果を示した。
その結果、ビタミンＤ3を添加した場合、卵殻強度は、ビタミンＤ3添加量を高めるに伴い増加し、ビタミンＤ3を700 IU/kg添加した３区でプラトーとなった。一方、卵殻厚、卵殻割合及び表面積当たりの卵殻重は、ビタミンＤ3を350 IU/kg添加した２区でプラトーとなった。一方、リュウキュウヤナギの葉を添加した場合の卵殻強度は、0.15〜0.30％添加した場合にビタミンＤ3を350 IU/kg添加した２区を上回ったが、添加量を0.60％まで高めると逆に悪化することが認められた。卵殻厚、卵殻割合及び卵殻の単位表面積当たりの卵殻重は、リュウキュウヤナギの葉の添加量を高めると増加したが、0.30％以上添加しても効果がないことが認められた。
卵殻強度は、リュウキュウヤナギの葉を0.60％添加した場合に悪化したこと、卵殻厚、卵殻割合及び表面積当たりの卵殻重は、0.30％以上添加しても増加しなかったことから、リュウキュウヤナギの葉の最適な添加量は、0.15〜0.30％であることが分かった。
【表１５】
【表１６】
【技術分野】
【０００１】
本発明は家禽用飼料及び卵殻質の改善方法に関する、さらに詳述すれば、リュウキュウヤナギの葉を配合した家禽用配合飼料およびその飼料を給与して卵殻質を改善する方法を提供するものである。
【背景技術】
【０００２】
卵殻の破損は、鶏卵の商品化率を低下させ、収益性を落とすことから発生率を減少させることが急務となっている。国内における卵殻の破損卵による損失については十分明らかでないが、Roland(Poult.Sci,67:1801,1988)がアメリカにおいて8,100万羽を対象に実施した破損卵の調査結果を基に、アメリカと同一比率で破損卵が国内で発生すると仮定すれば、約310億円/年の損失となる（坂井田1998、高品質卵の生産技術と流通（2））。飼料内容を見直すことによって破損卵を減少させる方法として、カルシウム・リンの含量、カキガラ等のカルシウム源、ビタミン剤、重炭酸ナトリウム、ゼオライト、木酢液、生菌剤等が検討されている。しかし、完全に有効な方法が見出されているとは言い難く、卵殻を改善することによって破損卵を減少させる配合飼料又は混合飼料が望まれている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明は、活性型ビタミンＤ3様因子を含有するリュウキュウヤナギの葉のビタミンＤ3活性値を算出し、リュウキュウヤナギの葉を産卵鶏に給与することによって加齢によって低下する卵殻質を改善する家禽用配合飼料を提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明者等は、リュウキュウヤナギの葉には、鶏においてビタミンＤ3として乾物1 kg当たり30万IU程度の活性があることを見出し、これを産卵鶏の老鶏に給与することにより卵殻が著しく改善されることを見出した。
【０００５】
ビタミンＤ3は、小腸からのカルシウムの促進や骨からのカルシウムの血中への放出等、産卵鶏のカルシウムの代謝に重要な役割を果たしているビタミンであり、欠乏すると卵殻質と産卵成績を悪化させる。ビタミンＤ3は、肝臓で２５位(25-OH-D3)、次いで腎臓で１α位が水酸化されて活性型（１α-25(OH) 2-D3；以下、活性型ビタミンＤ3と略）に代謝されて初めて生体内で効果を発揮する。従って、ビタミンＤ3そのものでなく、活性型ビタミンＤ3に代謝されないと生体内で効果が無く、ビタミンＤ3を大量に投与してもそれほど効果を発揮しないことが知られている(Garlich and Waytt,Poult.Sci.,50:950.1971、Berg et,al, Poult.Sci.,30:799.1951)。一方、25-OH-D3から活性型ビタミンＤ3に代謝する役割を果たす腎臓中の１α水酸化酵素活性は、加齢に伴い著しく減少し、その結果、特に老齢鶏において小腸、皮質骨及び骨髄骨中の活性型ビタミンＤ3濃度が著しく減少する。従って、加齢に伴う卵殻質の低下は、１α水酸化酵素活性の低下により活性型ビタミンＤ3が標的臓器に充分供給できないことが一つの要因となっており(Abe,et,al,J.Nutr.,112:436.1982、阿部ら,骨代謝,15:93.1982)、血漿中の活性型ビタミンＤ3濃度が高くなると卵殻重が増加する(Soares et,al, Poult.Sci.,59:1663.1980)。
【０００６】
しかし、活性型ビタミンＤ3は、合成品であるとともに使用量が適切でないと弊害を誘発する。また、人が食する鶏卵を生産するための飼料としては、安全性が強く望まれており、飼料に用いる原料等については、天然物であることが望ましい。リュウキュウヤナギは、ブラジル南部及びウルグアイ原産で、観賞のため栽培される常緑低木であり、江戸時代の末期に琉球へ持ち込まれたことにより日本名をリュウキュウヤナギと言う。天然物であるリュウキュウヤナギの葉には、活性型ビタミンＤ3様因子が含有されていることが報告されている（Wasserman et,al, J.Nutr.106:457,1976）が、家禽に対する生物的効果と卵殻に対する効果についての報告例はない。
【実施例１】
【０００７】
AOAC法(Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists,1995)による雛を用いたビタミンＤ3のバイオアッセイに準拠してリュウキュウヤナギの葉のビタミンＤ3活性の測定を実施した。試験には、ハイラインマリアの初生雛６４羽を用い、各区に８羽ずつ供試した。試験飼料は、ビタミンＤ3無添加基礎飼料及びビタミンＤ3無添加基礎飼料にビタミンＤ3又はリュウキュウヤナギの葉を添加した飼料とし、これを３週間給与した。リュウキュウヤナギの葉は、凍結乾燥したものを用い、添加量は乾物当たりとした。測定項目は、体重、飼料摂取量、育成率、足指灰分重量、脛骨灰分重量及び血清中活性型ビタミンＤ3濃度とした。尚、処理区は以下のように設定しまた、ビタミンＤ3無添加の基礎飼料である１区の配合率は表１に、そして成分値（設計値）は表２に示した。
処理
１区 ビタミンＤ3無添加基礎飼料(0 IU/kg)
２区 ビタミンＤ3 (50 IU/kg)添加
３区 ビタミンＤ3(200 IU/kg)添加
４区 ビタミンＤ3(800 IU/kg)添加
５区 ビタミンＤ3(1400 IU/kg)添加
６区 リュウキュウヤナギの葉を0.17%添加
７区 リュウキュウヤナギの葉を0.67%添加
８区 リュウキュウヤナギの葉を2.67%添加
【表１】
【表２】
【実施例２】
【０００８】
表３に飼育成績の結果を示した。
ビタミンＤ3含量を０〜1400 IU/kgまで増加させた１区から５区(スタンダード)では、ビタミンＤ3含量を高めるに伴い、増体重が増加することが認められ、ビタミンＤ3含量の増加と増体重の改善との間に用量反応（Dose-response）が認められた（Ｙ＝71.608＋0.078744Ｘ−0.000033401Ｘ2（Ｒ2＝0.936）、X；飼料中のビタミンＤ3含量(IU/kg)、Y；増体重(g)）。飼料摂取量は、ビタミンＤ3を800IU添加した４区、1400IU添加した５区においてビタミンＤ3無添加の１区に比べて、それぞれ17、18％増加した。飼料要求率は、ビタミンＤ3含量を高めるに伴い減少した。
一方、リュウキュウヤナギの葉を0.17％添加した６区の増体重は、３区と４区の間、即ち、ビタミンＤ3含量として、200〜800 IU/kgの間にあること、0.67％添加した7区では、1400 IU/kg添加した５区と同等であることが示された。2.67％添加した8区では、逆に、３区(200 IU/kg)程度の増体重であった。
【表３】
【実施例３】
【０００９】
表４、表５に足指灰分の測定結果を示した。尚、足指灰分の測定は、AOACに準拠して実施した。即ち、左足の中央の趾骨の第２と第３関節の間で切り離したものを足指とし、これを100℃で8時間乾燥した後、600℃で4時間灰化しものの重量を灰分重量とした。
ビタミンＤ3含量を０〜1400 IU/kgまで増加させた１区から５区(スタンダード)では、乾燥重量、灰分重量及び灰分割合のいずれにおいてもビタミンＤ3含量を高めるに伴い増加した。灰分割合も200 IU/kg添加した３区を除き、ビタミンＤ3含量を高めるに伴い増加し、800 IU/kg で平行となった。一方、リュウキュウヤナギの葉を0.17％添加した６区の灰分割合は、増体重は、３区と４区の間、即ち、ビタミンＤ3含量として、200〜800 IU/kgの間にあること、0.67％添加した7区では、800 IU/kg 添加した４区或いは1400 IU/kg添加した５区と同等であることが示された。2.67％添加した8区では、逆に、３区(200 IU/kg)と同程度の灰分割合であった。
【表４】
【表５】
【実施例４】
【００１０】
表６、表７に脛骨灰分の測定結果を示した。尚、脛骨灰分の測定は、AOACに準拠して実施した。即ち、脛骨（左足）を２分間蒸留水でボイルし、付着組織を除去した後、破砕し、100％アルコール中で脱脂後、100℃で8時間乾燥し、更に600℃で２時間灰化したものの重量を灰分重量とした。
脛骨灰分は、ビタミンＤ3含量を０〜1400 IU/kgまで増加させた１区から５区(スタンダード)では、ビタミンＤ3含量を高めるに伴い増加し、800 IU/kg で平行となった。また、リュウキュウヤナギの葉を添加した６〜８区では、1400 IU/kg添加した５区とほぼ同程度の測定結果であった。
【表６】
【表７】
【実施例５】
【００１１】
表８に試験終了時における血漿中の活性型ビタミンＤ3濃度の測定結果を示した。
その結果、飼料へのリュウキュウヤナギの葉の添加により、飼料中のビタミンＤ3含量を高めるに伴い血漿中活性型ビタミンＤ3 濃度が増加したが、1400 IU/kg 添加した５区では逆に減少した。一方、リュウキュウヤナギの葉を添加した６〜８区では、血漿中活性型ビタミンＤ3 濃度は、 スタンダードにおいて測定値が最大となった４区の1.3〜3.12倍となった（表９）。
【表８】
【表９】
【実施例６】
【００１２】
雛を用いた飼育試験の結果から、リュウキュウヤナギの葉の添加によりビタミンＤ3を添加した場合と同様な発育が示されたこと、足指と脛骨灰分割合を測定したいずれの結果においてもビタミンＤ3を添加した場合と同様な灰分割合の増加が示された。また、血漿中活性型ビタミンＤ3濃度を測定した結果においても、2.67％リュウキュウヤナギの葉を添加した場合において、ビタミンＤ3を1400 IU/kg 添加した５区の約３倍を越える血漿中活性型ビタミンＤ3濃度の増加が示されたことから、リュウキュウヤナギの葉は、強い活性型ビタミンＤ3活性を有しているものと考えられた。
一方、血漿中活性型ビタミンＤ3濃度が最も高かった８区では、飼育成績と脛骨灰分割合の減少が示されたことから、雛の発育に対するリュウキュウヤナギの葉の最適な添加量は、0.17〜0.67％であることが分かった。
AOAC法に準拠し、足指灰分の測定結果から、リュウキュウヤナギの葉のビタミンＤ3活性の算出を行った。飼料中のビタミンＤ3含量と足指灰分の測定結果から、次の回帰式が算出された。
0 IU/kg ＜ビタミンＤ3＜1400 IU/kgの場合
Ｙ＝9.7464＋0.0078087Ｘ−0.0000036835Ｘ2（Ｒ2＝0.962）
X:飼料中のビタミンＤ3含量(IU/kg)、Y:足指灰分割合(%)
上記回帰式から算出したリュウキュウヤナギの葉のビタミンＤ3活性を表10に示した。
リュウキュウヤナギの葉のビタミンＤ3活性は、0.17％添加した６区では31.9万IU/kg、0.67％添加した7区では9.9万IU/kg程度となった。これに対して、2.67％添加した８区では、0.66万IU/kgとなり、リュウキュウヤナギの葉の過剰給与による影響が示された。また、７区では、６区に比べてリュウキュウヤナギの葉のビタミンＤ3活性は、約1/3程度であった。リュウキュウヤナギの葉を0.17％添加した６区より算出されたビタミンＤ3活性を用いて７区と８区のリュウキュウヤナギの葉のビタミンＤ3活性を算出すると、７区で、2172 IU/kg、８区で8528 IU/kgとなる。一般に、雛におけるビタミンＤ3含量の最大許容水準は、要求量(200 IU/kg)の４〜10倍(800〜2000 IU/kg)であり、６区に比べて７区においてもビタミンＤ3活性が減少したことは、８区と同様にビタミンＤ3の過剰給与による影響が強いものと考えられた。
以上の結果、リュウキュウヤナギの葉には、ビタミンＤ3として、30万IU/kg以上の強い生物活性が明らかとなった。
【表１０】
【実施例７】
【００１３】
本試験では、老齢の産卵鶏を用いて、卵殻質に対する影響について検討した。試験には、60週齢のデカルブTX35 60羽を用い、1群に10羽ずつ供試した。試験飼料は、ビタミンＤ3無添加基礎飼料及びビタミンＤ3無添加基礎飼料にビタミンＤ3又はリュウキュウヤナギの葉を添加した飼料を４週間給与した。リュウキュウヤナギの葉は、実施例１と同様に凍結乾燥したものを用い、添加量は乾物当たりとした。測定項目は、産卵率、卵重、飼料摂取量、生存率、卵殻強度、卵殻重、卵殻厚及び卵殻の単位表面積当たりの卵殻重とした。
単位表面積当たり卵殻重（SWUSA；Shell weight per unit surface area）
（mg/cm2）＝（卵殻重(g)×1000）/卵殻の表面積（cm2）×100
卵殻の表面積（cm2）＝3.9782×EW0.7056 （EW；卵重(g)）
尚、処理区の設定を以下に、ビタミンＤ3無添加の基礎飼料である１区の配合率を表11に、および成分値（設計値）を表12に示した。
処理
１区 ビタミンＤ3無添加基礎飼料
２区 基礎飼料にビタミンＤ3 (350IU/kg添加)
３区 基礎飼料にビタミンＤ3 (700IU/kg添加)
４区 基礎飼料にビタミンＤ3 (1400IU/kg添加)
５区 基礎飼料にリュウキュウヤナギ(225IU/kg相当量； 0.075%添加)
６区 基礎飼料にリュウキュウヤナギ(450IU/kg相当量； 0.15%添加)
７区 基礎飼料にリュウキュウヤナギ(900IU/kg相当量； 0.30%添加)
８区 基礎飼料にリュウキュウヤナギ(1800IU/kg相当量；0.60%添加)
注）リュウキュウヤナギの葉（凍結乾燥品）の活性は、
300,000IU/kg(ビタミンＤ3として)として添加量を推定した。
【表１１】
【表１２】
【実施例８】
【００１４】
表13に色々な含量でビタミンＤ3を含む飼料を給与した場合の産卵成績の結果を、表14にビタミンＤ3を含まない飼料にリュウキュウヤナギの葉を添加した場合の結果を示した。
色々な含量でビタミンＤ3を含む飼料を給与した場合、産卵率は、ビタミンＤ3含量を低下させるに伴い減少し、減少の程度は、ビタミンＤ3を含まない１区の場合が最も顕著であった。卵重と飼料摂取量の差は僅かであったため、飼料要求率は、ビタミンＤ3無添加の１区のみ悪化した。従って、飼料中のビタミンＤ3含量が350IU/kg以下となると産卵成績が顕著に減少することが示された。
【表１３】
一方、ビタミンＤ3を含まない飼料にリュウキュウヤナギの葉を添加した場合では、産卵率は、リュウキュウヤナギの葉を0.15％添加した６区が他の処理区に比べて最も優れたが、それ以外の処理区では殆ど差がなかった。しかし、リュウキュウヤナギの葉を添加した何れの処理区においてもビタミンＤ3無添加の１区に比べて産卵率は高かった。卵重は、リュウキュウヤナギの葉を0.30％添加した７区がリュウキュウヤナギの葉を添加したそれ以外の処理区に比べて減少する傾向であった。飼料摂取量は、産卵率が高かった６区と８区が５区と７区よりも増加したが、飼料要求率には、処理区間の差は殆ど認められなかった。
従って、リュウキュウヤナギの葉を飼料中に0.15％以上添加すれば産卵成績には殆ど問題がないものと考えられた。
【表１４】
【実施例９】
【００１５】
表15にビタミンＤ3を、表16にリュウキュウヤナギの葉を添加した場合の試験終了時における卵殻質測定結果を示した。
その結果、ビタミンＤ3を添加した場合、卵殻強度は、ビタミンＤ3添加量を高めるに伴い増加し、ビタミンＤ3を700 IU/kg添加した３区でプラトーとなった。一方、卵殻厚、卵殻割合及び表面積当たりの卵殻重は、ビタミンＤ3を350 IU/kg添加した２区でプラトーとなった。一方、リュウキュウヤナギの葉を添加した場合の卵殻強度は、0.15〜0.30％添加した場合にビタミンＤ3を350 IU/kg添加した２区を上回ったが、添加量を0.60％まで高めると逆に悪化することが認められた。卵殻厚、卵殻割合及び卵殻の単位表面積当たりの卵殻重は、リュウキュウヤナギの葉の添加量を高めると増加したが、0.30％以上添加しても効果がないことが認められた。
卵殻強度は、リュウキュウヤナギの葉を0.60％添加した場合に悪化したこと、卵殻厚、卵殻割合及び表面積当たりの卵殻重は、0.30％以上添加しても増加しなかったことから、リュウキュウヤナギの葉の最適な添加量は、0.15〜0.30％であることが分かった。
【表１５】
【表１６】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
リュウキュウヤナギ（Solanum glaucophyllum）の葉を飼料中にビタミンＤ３相当量として225 IU/kg〜900 IU/kg含有する、家禽用飼料。
【請求項２】
リュウキュウヤナギ（Solanum glaucophyllum）の葉を飼料中にビタミンＤ３相当量として450 IU/kg〜900 IU/kg含有する、請求項１に記載の家禽用飼料。
【請求項３】
卵殻質を改善するための請求項１又は２に記載の家禽用飼料。
【請求項４】
日卵量（ｇ／羽）を改善するための請求項１〜３の何れか１項に記載の家禽用飼料。
【請求項５】
飼料摂取量を改善するための請求項１〜４の何れか１項に記載の家禽用飼料。
【請求項６】
リュウキュウヤナギ（Solanum glaucophyllum）の葉を飼料中にビタミンＤ３相当量として225 IU/kg〜450 IU/kg含有する、卵重（ｇ／羽）を改善するための、請求項１に記載の家禽用飼料。
【請求項７】
リュウキュウヤナギ（Solanum glaucophyllum）の葉を飼料中にビタミンＤ３相当量として510 IU/kg〜8010 IU/kg含有する、家禽の体重を増加させるための飼料。
【請求項８】
前記家禽が、鶏、あひる又は鶉である、請求項１から７の何れか１項に記載の飼料。
【請求項９】
リュウキュウヤナギの葉を飼料中にビタミンＤ３相当量として225 IU/kg〜900 IU/kg添加した飼料を家禽に給与する、家禽の飼育方法。
【請求項１０】
リュウキュウヤナギ（Solanum glaucophyllum）の葉を飼料中にビタミンＤ３相当量として450 IU/kg〜900 IU/kg添加する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
卵殻質を改善するための、請求項９又は１０に記載の方法。
【請求項１２】
日卵量（ｇ／羽）を改善するための請求項９〜１１の何れか１項に記載の方法。
【請求項１３】
飼料摂取量を改善するための請求項９〜１２の何れか１項に記載の方法。
【請求項１４】
リュウキュウヤナギ（Solanum glaucophyllum）の葉を飼料中にビタミンＤ３相当量として225 IU/kg〜450 IU/kg含有する、卵重（ｇ／羽）を改善するための、請求項９に記載の方法。
【請求項１５】
リュウキュウヤナギ（Solanum glaucophyllum）の葉を飼料中にビタミンＤ３相当量として510 IU/kg〜8010 IU/kg添加した飼料を家禽に給与する、家禽の体重を増加させるための飼育方法。
【請求項１６】
前記家禽が、鶏、あひる又は鶉である、請求項９から１５の何れか１項に記載の方法。
【請求項１】
リュウキュウヤナギ（Solanum glaucophyllum）の葉を飼料中にビタミンＤ３相当量として225 IU/kg〜900 IU/kg含有する、家禽用飼料。
【請求項２】
リュウキュウヤナギ（Solanum glaucophyllum）の葉を飼料中にビタミンＤ３相当量として450 IU/kg〜900 IU/kg含有する、請求項１に記載の家禽用飼料。
【請求項３】
卵殻質を改善するための請求項１又は２に記載の家禽用飼料。
【請求項４】
日卵量（ｇ／羽）を改善するための請求項１〜３の何れか１項に記載の家禽用飼料。
【請求項５】
飼料摂取量を改善するための請求項１〜４の何れか１項に記載の家禽用飼料。
【請求項６】
リュウキュウヤナギ（Solanum glaucophyllum）の葉を飼料中にビタミンＤ３相当量として225 IU/kg〜450 IU/kg含有する、卵重（ｇ／羽）を改善するための、請求項１に記載の家禽用飼料。
【請求項７】
リュウキュウヤナギ（Solanum glaucophyllum）の葉を飼料中にビタミンＤ３相当量として510 IU/kg〜8010 IU/kg含有する、家禽の体重を増加させるための飼料。
【請求項８】
前記家禽が、鶏、あひる又は鶉である、請求項１から７の何れか１項に記載の飼料。
【請求項９】
リュウキュウヤナギの葉を飼料中にビタミンＤ３相当量として225 IU/kg〜900 IU/kg添加した飼料を家禽に給与する、家禽の飼育方法。
【請求項１０】
リュウキュウヤナギ（Solanum glaucophyllum）の葉を飼料中にビタミンＤ３相当量として450 IU/kg〜900 IU/kg添加する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
卵殻質を改善するための、請求項９又は１０に記載の方法。
【請求項１２】
日卵量（ｇ／羽）を改善するための請求項９〜１１の何れか１項に記載の方法。
【請求項１３】
飼料摂取量を改善するための請求項９〜１２の何れか１項に記載の方法。
【請求項１４】
リュウキュウヤナギ（Solanum glaucophyllum）の葉を飼料中にビタミンＤ３相当量として225 IU/kg〜450 IU/kg含有する、卵重（ｇ／羽）を改善するための、請求項９に記載の方法。
【請求項１５】
リュウキュウヤナギ（Solanum glaucophyllum）の葉を飼料中にビタミンＤ３相当量として510 IU/kg〜8010 IU/kg添加した飼料を家禽に給与する、家禽の体重を増加させるための飼育方法。
【請求項１６】
前記家禽が、鶏、あひる又は鶉である、請求項９から１５の何れか１項に記載の方法。
【公開番号】特開２０１０−６８８１２（Ｐ２０１０−６８８１２Ａ）
【公開日】平成２２年４月２日（２０１０．４．２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−２９８３５６（Ｐ２００９−２９８３５６）
【出願日】平成２１年１２月２８日（２００９．１２．２８）
【分割の表示】特願２０００−１３８５１０（Ｐ２０００−１３８５１０）の分割
【原出願日】平成１２年５月１１日（２０００．５．１１）
【出願人】（５９１０１０５０５）日本配合飼料株式会社 (10)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年４月２日（２０１０．４．２）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１２月２８日（２００９．１２．２８）
【分割の表示】特願２０００−１３８５１０（Ｐ２０００−１３８５１０）の分割
【原出願日】平成１２年５月１１日（２０００．５．１１）
【出願人】（５９１０１０５０５）日本配合飼料株式会社 (10)
【Ｆターム（参考）】
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