植物において導入遺伝子を発現するための方法および組成物
【課題】トウモロコシを含めた単子葉植物における導入遺伝子の発現のための方法および組成物を提供する。
【解決手段】遺伝子サイレンシングは、形質転換のための属Ｃｏｉｘの植物からの単子葉植物−相同配列の使用によって回避される。これらの導入遺伝子配列に含まれるものはＣｏｉｘプロモーター、エンハンサー、コーディング配列およびターミネータである。トウモロコシ−由来導入遺伝子に対する適当な代替物は相同性−ベースの遺伝子サイレンシングが導入遺伝子発現を制限しまたは効果的に排除することができる点で、発現に望ましい。
【解決手段】遺伝子サイレンシングは、形質転換のための属Ｃｏｉｘの植物からの単子葉植物−相同配列の使用によって回避される。これらの導入遺伝子配列に含まれるものはＣｏｉｘプロモーター、エンハンサー、コーディング配列およびターミネータである。トウモロコシ−由来導入遺伝子に対する適当な代替物は相同性−ベースの遺伝子サイレンシングが導入遺伝子発現を制限しまたは効果的に排除することができる点で、発現に望ましい。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）選択された遺伝子を準備するステップと、
（ｂ）Ｃｏｉｘプロモーターに作動可能に連結した該遺伝子を含む構築物を調製するステップと、
（ｃ）Ｃｏｉｘ以外の単子葉植物からの受容細胞を該構築物により形質転換するステップと、
（ｄ）該受容細胞から該遺伝子を発現する単子葉植物を再生するステップとを含むことを特徴とする選択された遺伝子を発現するＣｏｉｘ以外の単子葉植物を作成する方法。
【請求項２】
該単子葉植物が、イネ、コムギ、オートムギ、オオムギ、ライムギ、ソルガムおよびトウモロコシよりなる群から選択される請求項１記載の方法。
【請求項３】
該単子葉植物が、トウモロコシである請求項２記載の方法。
【請求項４】
形質転換の該ステップが、微粒子銃法、プロトプラストのＰＥＧ媒介形質転換、エレクトロポレーション、炭化ケイ素繊維媒介形質転換またはアグロバクテリウム媒介形質転換である請求項１記載の方法。
【請求項５】
該微粒子銃法が、微粒子を該構築物を含むＤＮＡ荷よりコートすることと、該受容細胞を該微粒子と接触させることとを含む請求項４記載の方法。
【請求項６】
該選択された遺伝子が、昆虫抵抗性遺伝子、真菌病抵抗性遺伝子、ウイルス病抵抗性遺伝子、細菌病抵抗性遺伝子、除草剤抵抗性遺伝子、穀類の組成または品質に影響を与える遺伝子、栄養素利用遺伝子、マイコトキシン減少遺伝子、雄性不稔遺伝子、選択マーカー遺伝子、スクリーニング可能なマーカー遺伝子、ネガティブ選択マーカー遺伝子、植物農学的特性に影響を与える遺伝子、環境抵抗性遺伝子、およびストレス抵抗性遺伝子よりなる群から選択される遺伝子を含む請求項１記載の方法。
【請求項７】
該Ｃｏｉｘプロモーターが、ガンマゼイン、オレオシンｏｌｅ１６、グロブリン１、アクチン１、アクチンｃ１、スクロースシンテターゼ、ＩＮＯＰＳ、ＥＭＢ５、グロブリン２、ｂ−３２、ＡＤＰＧ−ピロホスホリラーゼ、Ｌｔｐ１、Ｌｔｐ２、オレオシンｏｌｅ１７、オレオシンｏｌｅ１８、アクチン２、花粉特異的タンパク質、花粉特異的ペクテートリアーゼ、葯特異的タンパク質、葯特異的遺伝子ＲＴＳ２、花粉特異的遺伝子、タペータム特異的遺伝子、タペータム特異的遺伝子ＲＡＢ２４、アンスラニレートシンターゼアルファサブユニット、アルファゼイン、アンスラニレートシンターゼベータサブユニット
、ジヒドロジピコリネートシンターゼ、Ｔｈｉ１、アルコールデヒドロゲナーゼ、ｃａｂ結合タンパク質、Ｈ３Ｃ４、ＲＵＢＩＳＣＯ ＳＳ澱粉分岐酵素、ＡＣＣａｓｅ、アクチン３、アクチン７、調節タンパク質ＧＦ’１４−１２、リボソームタンパク質Ｌ９、セルロース生合成酵素、Ｓ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインヒドロラーゼ、スーパーオキシドジスムターゼ、Ｃキナーゼ受容体、ホスホグリセレートムターゼ、根特異的ＲＣｃ３ ｍＲＮＡ、グルコース−６リン酸イソメラーゼ、ピロホスフェート−フラクトース６−リン酸ホスホトランスフェラーゼ、ユビキチン、ベータ−ケトアシル−ＡＣＰシンターゼ、３３ｋＤａ光系ＩＩ、酸素発生タンパク質、６９ｋＤａ空胞ＡＴＰａｓｅサブユニット、メタロチオネイン様タンパク質、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、Ａ
ＢＡおよび成熟誘導様タンパク質、フェニルアラントインアンモニアリアーゼ、アデノシントリホスファターゼＳ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインヒドロラーゼ、αチューブリン、ｃａｂ、ＰＥＰＣａｓｅ、Ｒ、レクチン、集光性複合体、熱ショックタンパク質、カルコンシンターゼ、ゼイン、グロブリン１、ＡＢＡ、オーキシン結合タンパク質、ＵＤＰグルコースフラボノイドグリコシル−トランスフェラーゼ遺伝子、ＭＰＩ、アクチン、オペク２、ｂ７０、およびオレオシンよりなる群から選択される遺伝子に相同なＣｏｉｘ遺伝子からのプロモーターである請求項１記載の方法。
【請求項８】
該Ｃｏｉｘプロモーターが、ガンマコイキシンプロモーターである請求項１記載の方法。
【請求項９】
（ａ）請求項１記載の単子葉植物を作成するステップと、
（ｂ）該植物を第２の植物または該植物自体と交雑させるステップとを含むことを特徴とする子孫植物の生産方法。
【請求項１０】
（ａ）請求項９記載の方法による子孫植物を得るステップと、
（ｂ）該植物を該植物自体または第２の植物と交雑させるステップと
を含むことを特徴とする植物育種の方法。
【請求項１１】
（ａ）Ｃｏｉｘプロモーターを準備するステップと、
（ｂ）選択された遺伝子に作動可能に連結された該Ｃｏｉｘプロモーターを含む構築物を調製するステップと、
（ｄ）Ｃｏｉｘ以外の単子葉植物からの受容細胞を該構築物により形質転換するステップと、
（ｅ）該受容細胞からの該遺伝子を発現する植物を再生するステップであって、それにより、該植物が遺伝子サイレンシングを呈しないステップと
を含むことを特徴とするＣｏｉｘ以外の単子葉植物において遺伝子サイレンシン
グを防止する方法。
【請求項１２】
該単子葉植物が、コメ、コムギ、オオムギ、ライムギ、オートムギ、ソルガムおよびトウモロコシよりなる群から選択される請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
該単子葉植物が、トウモロコシである請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
形質転換の該ステップが、微粒子銃法、プロトプラストのＰＥＧ媒介形質転換、エレクトロポレーション、炭化ケイ素繊維媒介形質転換またはアグロバクテリウム媒介形質転換である請求項１１記載の方法。
【請求項１５】
該微粒子銃法が、微粒子を該構築物を含むＤＮＡによりコートすることと、該受容細胞を該微粒子と接触させることとを含む請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
該選択された遺伝子が、昆虫抵抗性遺伝子、真菌病抵抗性遺伝子、ウイルス病抵抗性遺伝子、細菌病抵抗性遺伝子、除草剤抵抗性遺伝子、穀類の組成または品質に影響する遺伝子、栄養素利用遺伝子、マイコトキシン減少遺伝子、雄性不稔遺伝子、選択マーカー遺伝子、スクリーニング可能なマーカー遺伝子、ネガティブ選択マーカー遺伝子、植物農学的特性に影響を与える遺伝子、環境抵抗性遺伝子、およびストレス抵抗性遺伝子よりなる群から選択される遺伝子を含む請求項１１記載の方法。
【請求項１７】
該Ｃｏｉｘプロモーターが、ガンマゼイン、オレオシンｏｌｅ１６、グロブリン１、アクチン１、アクチンｃ１、スクロースシンテターゼ、ＩＮＯＰＳ、ＥＭＢ５、グロブリン２、ｂ−３２、ＡＤＰＧ−ピロホスホリラーゼ、Ｌｔｐ１、Ｌｔｐ２、オレオシンｏｌｅ１７、オレオシンｏｌｅ１８、アクチン２、花粉特異的タンパク質、花粉特異的ペクテートリアーゼ、葯特異的タンパク質、葯特異的遺伝子ＲＴＳ２、花粉特異的遺伝子、タペータム特異的遺伝子、タペータム特異的遺伝子ＲＡＢ２４、アンスラニレートシンターゼアルファサブユニット、アルファゼイン、アンスラニレートシンターゼベータサブユニッ
ト、ジヒドロジピコリネートシンターゼ、Ｔｈｉ１、アルコールデヒドロゲナーゼ、ｃａｂ結合タンパク質、Ｈ３Ｃ４、ＲＵＢＩＳＣＯ ＳＳ澱粉分岐酵素、ＡＣＣａｓｅ、アクチン３、アクチン７、調節タンパク質ＧＦ’１４−１２、リボソームタンパク質Ｌ９、セルロース生合成酵素、Ｓ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインヒドロラーゼ、スーパーオキシドジスムターゼ、Ｃキナーゼ受容体、ホスホグリセレートムターゼ、根特異的ＲＣｃ３ ｍＲＮＡ、グルコース−６リン酸イソメラーゼ、ピロホスフェート−フラクトース６−リン酸ホスホトランスフェラーゼ、ユビキチン、ベータ−ケトアシル−ＡＣＰシンターゼ、３３ｋＤａ光系ＩＩ、酸素発生タンパク質、６９ｋＤａ空胞ＡＴＰａｓｅサブユニット、メタロチオネイン様タンパク質、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、ＡＢＡおよび成熟誘導様タンパク質、フェニルアラントインアンモニアリアーゼ、アデノシントリホスファターゼＳ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインヒドロラーゼ、αチューブリン、ｃａｂ、ＰＥＰＣａｓｅ、Ｒ、レクチン、集光性複合体、熱ショックタンパク質、カルコンシンターゼ、ゼイン、グロブリン１、ＡＢＡ、オーキシン結合タンパク質、ＵＤＰグルコースフラボノイドグリコシル−トランスフェラーゼ遺伝子、ＭＰＩ、アクチン、オペク２、ｂ７０、およびオレオシンよりなる群から選択されるＣｏｉｘ以外の単子葉植物からの遺伝子に相同なＣｏｉｘ遺伝子からのプロモーターである請求項１１記載の方法。
【請求項１８】
該準備するステップが、Ｃｏｉｘ以外の単子葉植物種の遺伝子からのＤＮＡまたはそのフランキング配列を、ＣｏｉｘからのＤＮＡにハイブリダイゼーションさせることを含む請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
Ｃｏｉｘ以外の該単子葉植物種およびＣｏｉｘ以外の該単子葉植物が、同一種のメンバーである請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
Ｃｏｉｘからの該ＤＮＡが、ゲノムＤＮＡクローンのライブラリーを含む請求項１８記載の方法。
【請求項２１】
Ｃｏｉｘプロモーターを準備するステップがＰＣＲTMを含む請求項１１記載の方法。
【請求項２２】
（ａ）請求項１１記載の方法による植物を作成するステップと、
（ｂ）該植物を第２の植物または該植物自体と交雑させるステップとを含むことを特徴とする子孫の生産方法。
【請求項２３】
（ａ）請求項２２記載の方法により該構築物を含む子孫植物を得るステップと、
（ｂ）該植物を該植物自体または第２の植物と交雑させるステップとを含むことを特徴とする植物育種の方法。
【請求項２４】
（ａ）望ましい発現プロフィールを有するＣｏｉｘ以外の単子葉植物から第１のプロモーターを同定するステップと、
（ｂ）該第１のプロモーターに相同なＣｏｉｘプロモーターを単離するステップと、
（ｃ）選択された遺伝子に作動可能に連結した該Ｃｏｉｘプロモーターを含む発現ベクターを構築するステップと
を含むことを特徴とする単子葉植物発現ベクターを調製する方法。
【請求項２５】
該単子葉植物が、イネ、コムギ、オオムギ、ライムギ、ソルガム、オートムギおよびトウモロコシよりなる群から選択される請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
該単子葉植物が、トウモロコシである請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
該選択された遺伝子が、昆虫抵抗性遺伝子、真菌病抵抗性遺伝子、ウイルス病抵抗性遺伝子、細菌病抵抗性遺伝子、除草剤抵抗性遺伝子、穀類の組成または品質に影響する遺伝子、栄養素利用遺伝子、マイコトキシン減少遺伝子、雄性不稔遺伝子、選択マーカー遺伝子、スクリーニング可能なマーカー遺伝子、ネガティブ選択マーカー遺伝子、植物農学特性に影響を与える遺伝子、環境抵抗性遺伝子、およびストレス抵抗性遺伝子よりなる群から選択される特性をコードする請求項２４記載の方法。
【請求項２８】
該単子葉プロモーターが、ガンマゼイン、オレオシンｏｌｅ１６、グロブリン１、アクチン１、アクチンｃ１、スクロースシンテターゼ、ＩＮＯＰＳ、ＥＭＢ５、グロブリン２、ｂ−３２、ＡＤＰＧ−ピロホスホリラーゼ、Ｌｔｐ１、Ｌｔｐ２、オレオシンｏｌｅ１７、オレオシンｏｌｅ１８、アクチン２、花粉特異的タンパク質、花粉特異的ペクテートリアーゼ、葯特異的タンパク質、葯特異的遺伝子ＲＴＳ２、花粉特異的遺伝子、タペータム特異的遺伝子、タペータム特異的遺伝子ＲＡＢ２４、アンスラニレートシンターゼアルファサブユニット、アルファゼイン、アンスラニレートシンターゼベータサブユニット
、ジヒドロジピコリネートシンターゼ、Ｔｈｉ１、アルコールデヒドロゲナーゼ、ｃａｂ結合タンパク質、Ｈ３Ｃ４、ＲＵＢＩＳＣＯ ＳＳ澱粉分岐酵素、ＡＣＣａｓｅ、アクチン３、アクチン７、調節タンパク質ＧＦ’１４−１２、リボソームタンパク質Ｌ９、セルロース生合成酵素、Ｓ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインヒドロラーゼ、スーパーオキシドジスムターゼ、Ｃキナーゼ受容体、ホスホグリセレートムターゼ、根特異的ＲＣｃ３ ｍＲＮＡ、グルコース−６リン酸イソメラーゼ、ピロホスフェート−フラクトース６−リン酸ホスホトランスフェラーゼ、ユビキチン、ベータ−ケトアシル−ＡＣＰシンターゼ、３３ｋＤａ光系ＩＩ、酸素発生タンパク質、６９ｋＤａ空胞ＡＴＰａｓｅサブユニット、メタロチオネイン様タンパク質、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、Ａ
ＢＡおよび成熟誘導様タンパク質、フェニルアラントインアンモニアリアーゼ、アデノシントリホスファターゼＳ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインヒドロラーゼ、αチューブリン、ｃａｂ、ＰＥＰＣａｓｅ、Ｒ、レクチン、集光性複合体、熱ショックタンパク質、カルコンシンターゼ、ゼイン、グロブリン１、ＡＢＡ、オーキシン−結合タンパク質、ＵＤＰグルコースフラボノイドグリコシル−トランスフェラーゼ遺伝子、ＭＰＩ、アクチン、オペク２、ｂ７０、およびオレオシンよりなる群から選択される遺伝子である請求項２４記載の方法。
【請求項２９】
該同定するステップが、該単子葉植物遺伝子からのＤＮＡまたはそのフランキング配列を、ＣｏｉｘからのＤＮＡにハイブリダイゼーションさせることを含む請求項２８記載の方法。
【請求項３０】
Ｃｏｉｘからの該ＤＮＡが、ゲノムＤＮＡクローンのライブラリーを含む請求項２９記載の方法。
【請求項３１】
Ｃｏｉｘプロモーターを同定する該ステップが、ＰＣＲTMを含む請求項２８記載の方法。
【請求項３２】
配列番号８の核酸配列から単離可能な単離されたガンマコイキシンプロモーター。
【請求項３３】
配列番号８の約８０ないし約８９４の連続ヌクレオチドを含む単離された核酸配列。
【請求項３４】
配列番号８の約２２２ないし約８９４の連結ヌクレオチドを含む請求項３３記載の単離された核酸配列。
【請求項３５】
配列番号１８の核酸配列を含む請求項３４記載の単離された核酸配列。
【請求項３６】
配列番号８の核酸配列の約４１２ないし約８９４の連続ヌクレオチドを含む請求項３５記載の単離された核酸配列。
【請求項３７】
配列番号１９の核酸配列を含む請求項３６記載の単離された核酸配列。
【請求項３８】
配列番号１１の核酸配列から単離可能な単離されたガンマコイキシンターミネーター。
【請求項３９】
配列番号１１の核酸配列の約８０ないし約４１２の連続ヌクレオチドを含む核酸配列。
【請求項４０】
配列番号１１の核酸配列の約２００ないし約４１２の連続ヌクレオチドを含む請求項３９記載の核酸配列。
【請求項４１】
配列番号１１の約３２５ないし約４１２の連続ヌクレオチドを含む請求項４０記載の核酸配列。
【請求項４２】
配列番号１１の核酸配列を含む請求項４１記載の核酸配列。
【請求項４３】
配列番号１７の核酸配列から単離可能なＣｏｉｘオレオシン３ターミネーター。
【請求項４４】
配列番号１７の核酸配列の約５０ないし約３７７の連続ヌクレオチドを含む単離された核酸配列。
【請求項４５】
核酸配列配列番号１７の約１２０ないし約３７７の連続ヌクレオチドを含む請求項４４記載の単離された核酸配列。
【請求項４６】
核酸配列配列番号１７の約２２０ないし約３７７の連続ヌクレオチドを含む請求項４５記載の単離された核酸配列。
【請求項４７】
核酸配列配列番号１７の約３００ないし約３７７の連続ヌクレオチドを含む請求項４６記載の単離された核酸配列。
【請求項４８】
核酸配列配列番号１７を含む請求項４７記載の単離された核酸配列。
【請求項４９】
ガンマコイキシンプロモーターを含む選択されたＤＮＡを含む稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項５０】
該プロモーターが、請求項３２記載の核酸配列、請求項３３記載の核酸配列、請求項３４記載の核酸配列、請求項３５記載の核酸配列、請求項３６記載の核酸配列を含む請求項４９記載の植物。
【請求項５１】
該プロモーターが、昆虫抵抗性遺伝子、細菌病抵抗性遺伝子、除草剤抵抗性遺伝子、穀類の組成または品質に影響する遺伝子、栄養素利用遺伝子、マイコトキシン減少遺伝子、雄性不稔遺伝子、選択マーカー遺伝子、スクリーニング可能なマーカー遺伝子、ネガティブ選択マーカー遺伝子、植物農学特性に影響を与える遺伝子、環境抵抗性遺伝子、およびストレス抵抗性遺伝子よりなる群から選択される外因性遺伝子に作動可能に連結した請求項５０記載の植物。
【請求項５２】
該ガンマコイキシン遺伝子に対して天然でないプロモーターに作動可能に連結したガンマコイキシンをコードする遺伝子を含む選択されたＤＮＡを含む稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項５３】
ガンマコイキシンをコードする該遺伝子が、配列番号１６の核酸配列によってコードされたポリペプチドをコードする請求項５２記載の稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項５４】
ガンマコイキシンターミネーターを含む選択されたＤＮＡを含む稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項５５】
該ガンマコイキシンターミネーターが、請求項３９記載の核酸配列、請求項４０記載の核酸配列、請求項４１記載の核酸配列、および請求項４２記載の核酸配列よりなる群から選択される核酸配列を含む請求項５４記載の稔性トランスジェニック植物。
【請求項５６】
Ｃｏｉｘオレオシン３ターミネーターを含む選択されたＤＮＡを含む稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項５７】
該Ｃｏｉｘオレオシン３ターミネーターが、請求項４４記載の核酸配列、請求項４５記載の核酸配列、請求項４６記載の核酸配列、請求項４７記載の核酸配列および請求項４８記載の核酸配列よりなる群から選択される核酸配列を含む請求項５６記載の稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項５８】
該子孫植物が、該選択されたＤＮＡを含む請求項４９、５２、５４または５６記載の植物のいずれかの世代の子孫植物。
【請求項５９】
該植物が、イネ、コムギ、オオムギ、ライムギ、ソルガムおよびトウモロコシよりなる群から選択される単子葉植物である請求項４９、５２、５４または５６記載の稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項６０】
該単子葉植物が、トウモロコシである請求項５９記載の稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項６１】
該植物が、タバコ、トマト、ジャガイモ、大豆および綿よりなる群から選択される双子葉植物である請求項４９、５２、５４または５６記載の稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項６２】
請求項４９、５２、５４または５６記載の稔性を有するトランスジェニック植物またはそのトランスジェニック子孫植物を、その植物自体または第２の植物と交雑させることを特徴とする植物育種の方法。
【請求項６３】
オレオシンｏｌｅ１６、グロブリン１、アクチン１、アクチンｃ１、スクロースシンテターゼ、ＩＮＯＰＳ、ＥＭＢ５、グロブリン２、ｂ−３２、ＡＤＰＧ−ピロホスホリラーゼ、Ｌｔｐ１、Ｌｔｐ２、オレオシンｏｌｅ１７、オレオシンｏｌｅ１８、アクチン２、花粉特異的タンパク質、花粉特異的ペクテートリアーゼ、葯特異的タンパク質、葯特異的遺伝子ＲＴＳ２、花粉特異的遺伝子、タペータム特異的遺伝子、タペータム特異的遺伝子ＲＡＢ２４、アンスラニレートシンターゼアルファサブユニット、アルファゼイン、アンスラニレートシンターゼベータサブユニット、ジヒドロジピコリネートシンターゼ、Ｔｈｉ１、アルコールデヒドロゲナーゼ、ｃａｂ結合タンパク質、Ｈ３Ｃ４、ＲＵＢＩＳＣＯ ＳＳ澱粉分岐酵素、ＡＣＣａｓｅ、アクチン３、アクチン７、調節タンパク質ＧＦ’１４−１２、リボソームタンパク質Ｌ９、セルロース生合成酵素、Ｓ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインヒドロラーゼ、スーパーオキシドジスムターゼ、Ｃキナーゼ受容体、ホスホグリセレートムターゼ、根特異的ＲＣｃ３ ｍＲＮＡ、グルコース−６リン酸イソメラーゼ、ピロホスフェート−フラクトース６−リン酸ホスホトランスフェラーゼ、ユビキチン、ベータ−ケトアシル−ＡＣＰシンターゼ、３３ｋＤａ光系ＩＩ、酸素発生タンパク質、６９ｋＤａ空胞ＡＴＰａｓｅサブユニット、メタロチオネイン様タンパク質、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、ＡＢＡおよび成熟誘導様タンパク質、フェニルアラントインアンモニアリアーゼ、アデノシントリホスファターゼＳ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインヒドロラーゼ、αチューブリン、ｃａｂ、ＰＥＰＣａｓｅ、Ｒ、レクチン、集光性複合体、熱ショックタンパク質、カルコンシンター
ゼ、ゼイン、グロブリン１、ＡＢＡ、オーキシン−結合タンパク質、ＵＤＰグルコースフラボノイドグリコシル−トランスフェラーゼ遺伝子、ＭＰＩ、オレオシン、アクチン、オペク２およびｂ７０よりなる群から選択されるＣｏｉｘ遺伝子をコードする単離された核酸配列。
【請求項１】
（ａ）選択された遺伝子を準備するステップと、
（ｂ）Ｃｏｉｘプロモーターに作動可能に連結した該遺伝子を含む構築物を調製するステップと、
（ｃ）Ｃｏｉｘ以外の単子葉植物からの受容細胞を該構築物により形質転換するステップと、
（ｄ）該受容細胞から該遺伝子を発現する単子葉植物を再生するステップとを含むことを特徴とする選択された遺伝子を発現するＣｏｉｘ以外の単子葉植物を作成する方法。
【請求項２】
該単子葉植物が、イネ、コムギ、オートムギ、オオムギ、ライムギ、ソルガムおよびトウモロコシよりなる群から選択される請求項１記載の方法。
【請求項３】
該単子葉植物が、トウモロコシである請求項２記載の方法。
【請求項４】
形質転換の該ステップが、微粒子銃法、プロトプラストのＰＥＧ媒介形質転換、エレクトロポレーション、炭化ケイ素繊維媒介形質転換またはアグロバクテリウム媒介形質転換である請求項１記載の方法。
【請求項５】
該微粒子銃法が、微粒子を該構築物を含むＤＮＡ荷よりコートすることと、該受容細胞を該微粒子と接触させることとを含む請求項４記載の方法。
【請求項６】
該選択された遺伝子が、昆虫抵抗性遺伝子、真菌病抵抗性遺伝子、ウイルス病抵抗性遺伝子、細菌病抵抗性遺伝子、除草剤抵抗性遺伝子、穀類の組成または品質に影響を与える遺伝子、栄養素利用遺伝子、マイコトキシン減少遺伝子、雄性不稔遺伝子、選択マーカー遺伝子、スクリーニング可能なマーカー遺伝子、ネガティブ選択マーカー遺伝子、植物農学的特性に影響を与える遺伝子、環境抵抗性遺伝子、およびストレス抵抗性遺伝子よりなる群から選択される遺伝子を含む請求項１記載の方法。
【請求項７】
該Ｃｏｉｘプロモーターが、ガンマゼイン、オレオシンｏｌｅ１６、グロブリン１、アクチン１、アクチンｃ１、スクロースシンテターゼ、ＩＮＯＰＳ、ＥＭＢ５、グロブリン２、ｂ−３２、ＡＤＰＧ−ピロホスホリラーゼ、Ｌｔｐ１、Ｌｔｐ２、オレオシンｏｌｅ１７、オレオシンｏｌｅ１８、アクチン２、花粉特異的タンパク質、花粉特異的ペクテートリアーゼ、葯特異的タンパク質、葯特異的遺伝子ＲＴＳ２、花粉特異的遺伝子、タペータム特異的遺伝子、タペータム特異的遺伝子ＲＡＢ２４、アンスラニレートシンターゼアルファサブユニット、アルファゼイン、アンスラニレートシンターゼベータサブユニット
、ジヒドロジピコリネートシンターゼ、Ｔｈｉ１、アルコールデヒドロゲナーゼ、ｃａｂ結合タンパク質、Ｈ３Ｃ４、ＲＵＢＩＳＣＯ ＳＳ澱粉分岐酵素、ＡＣＣａｓｅ、アクチン３、アクチン７、調節タンパク質ＧＦ’１４−１２、リボソームタンパク質Ｌ９、セルロース生合成酵素、Ｓ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインヒドロラーゼ、スーパーオキシドジスムターゼ、Ｃキナーゼ受容体、ホスホグリセレートムターゼ、根特異的ＲＣｃ３ ｍＲＮＡ、グルコース−６リン酸イソメラーゼ、ピロホスフェート−フラクトース６−リン酸ホスホトランスフェラーゼ、ユビキチン、ベータ−ケトアシル−ＡＣＰシンターゼ、３３ｋＤａ光系ＩＩ、酸素発生タンパク質、６９ｋＤａ空胞ＡＴＰａｓｅサブユニット、メタロチオネイン様タンパク質、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、Ａ
ＢＡおよび成熟誘導様タンパク質、フェニルアラントインアンモニアリアーゼ、アデノシントリホスファターゼＳ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインヒドロラーゼ、αチューブリン、ｃａｂ、ＰＥＰＣａｓｅ、Ｒ、レクチン、集光性複合体、熱ショックタンパク質、カルコンシンターゼ、ゼイン、グロブリン１、ＡＢＡ、オーキシン結合タンパク質、ＵＤＰグルコースフラボノイドグリコシル−トランスフェラーゼ遺伝子、ＭＰＩ、アクチン、オペク２、ｂ７０、およびオレオシンよりなる群から選択される遺伝子に相同なＣｏｉｘ遺伝子からのプロモーターである請求項１記載の方法。
【請求項８】
該Ｃｏｉｘプロモーターが、ガンマコイキシンプロモーターである請求項１記載の方法。
【請求項９】
（ａ）請求項１記載の単子葉植物を作成するステップと、
（ｂ）該植物を第２の植物または該植物自体と交雑させるステップとを含むことを特徴とする子孫植物の生産方法。
【請求項１０】
（ａ）請求項９記載の方法による子孫植物を得るステップと、
（ｂ）該植物を該植物自体または第２の植物と交雑させるステップと
を含むことを特徴とする植物育種の方法。
【請求項１１】
（ａ）Ｃｏｉｘプロモーターを準備するステップと、
（ｂ）選択された遺伝子に作動可能に連結された該Ｃｏｉｘプロモーターを含む構築物を調製するステップと、
（ｄ）Ｃｏｉｘ以外の単子葉植物からの受容細胞を該構築物により形質転換するステップと、
（ｅ）該受容細胞からの該遺伝子を発現する植物を再生するステップであって、それにより、該植物が遺伝子サイレンシングを呈しないステップと
を含むことを特徴とするＣｏｉｘ以外の単子葉植物において遺伝子サイレンシン
グを防止する方法。
【請求項１２】
該単子葉植物が、コメ、コムギ、オオムギ、ライムギ、オートムギ、ソルガムおよびトウモロコシよりなる群から選択される請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
該単子葉植物が、トウモロコシである請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
形質転換の該ステップが、微粒子銃法、プロトプラストのＰＥＧ媒介形質転換、エレクトロポレーション、炭化ケイ素繊維媒介形質転換またはアグロバクテリウム媒介形質転換である請求項１１記載の方法。
【請求項１５】
該微粒子銃法が、微粒子を該構築物を含むＤＮＡによりコートすることと、該受容細胞を該微粒子と接触させることとを含む請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
該選択された遺伝子が、昆虫抵抗性遺伝子、真菌病抵抗性遺伝子、ウイルス病抵抗性遺伝子、細菌病抵抗性遺伝子、除草剤抵抗性遺伝子、穀類の組成または品質に影響する遺伝子、栄養素利用遺伝子、マイコトキシン減少遺伝子、雄性不稔遺伝子、選択マーカー遺伝子、スクリーニング可能なマーカー遺伝子、ネガティブ選択マーカー遺伝子、植物農学的特性に影響を与える遺伝子、環境抵抗性遺伝子、およびストレス抵抗性遺伝子よりなる群から選択される遺伝子を含む請求項１１記載の方法。
【請求項１７】
該Ｃｏｉｘプロモーターが、ガンマゼイン、オレオシンｏｌｅ１６、グロブリン１、アクチン１、アクチンｃ１、スクロースシンテターゼ、ＩＮＯＰＳ、ＥＭＢ５、グロブリン２、ｂ−３２、ＡＤＰＧ−ピロホスホリラーゼ、Ｌｔｐ１、Ｌｔｐ２、オレオシンｏｌｅ１７、オレオシンｏｌｅ１８、アクチン２、花粉特異的タンパク質、花粉特異的ペクテートリアーゼ、葯特異的タンパク質、葯特異的遺伝子ＲＴＳ２、花粉特異的遺伝子、タペータム特異的遺伝子、タペータム特異的遺伝子ＲＡＢ２４、アンスラニレートシンターゼアルファサブユニット、アルファゼイン、アンスラニレートシンターゼベータサブユニッ
ト、ジヒドロジピコリネートシンターゼ、Ｔｈｉ１、アルコールデヒドロゲナーゼ、ｃａｂ結合タンパク質、Ｈ３Ｃ４、ＲＵＢＩＳＣＯ ＳＳ澱粉分岐酵素、ＡＣＣａｓｅ、アクチン３、アクチン７、調節タンパク質ＧＦ’１４−１２、リボソームタンパク質Ｌ９、セルロース生合成酵素、Ｓ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインヒドロラーゼ、スーパーオキシドジスムターゼ、Ｃキナーゼ受容体、ホスホグリセレートムターゼ、根特異的ＲＣｃ３ ｍＲＮＡ、グルコース−６リン酸イソメラーゼ、ピロホスフェート−フラクトース６−リン酸ホスホトランスフェラーゼ、ユビキチン、ベータ−ケトアシル−ＡＣＰシンターゼ、３３ｋＤａ光系ＩＩ、酸素発生タンパク質、６９ｋＤａ空胞ＡＴＰａｓｅサブユニット、メタロチオネイン様タンパク質、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、ＡＢＡおよび成熟誘導様タンパク質、フェニルアラントインアンモニアリアーゼ、アデノシントリホスファターゼＳ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインヒドロラーゼ、αチューブリン、ｃａｂ、ＰＥＰＣａｓｅ、Ｒ、レクチン、集光性複合体、熱ショックタンパク質、カルコンシンターゼ、ゼイン、グロブリン１、ＡＢＡ、オーキシン結合タンパク質、ＵＤＰグルコースフラボノイドグリコシル−トランスフェラーゼ遺伝子、ＭＰＩ、アクチン、オペク２、ｂ７０、およびオレオシンよりなる群から選択されるＣｏｉｘ以外の単子葉植物からの遺伝子に相同なＣｏｉｘ遺伝子からのプロモーターである請求項１１記載の方法。
【請求項１８】
該準備するステップが、Ｃｏｉｘ以外の単子葉植物種の遺伝子からのＤＮＡまたはそのフランキング配列を、ＣｏｉｘからのＤＮＡにハイブリダイゼーションさせることを含む請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
Ｃｏｉｘ以外の該単子葉植物種およびＣｏｉｘ以外の該単子葉植物が、同一種のメンバーである請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
Ｃｏｉｘからの該ＤＮＡが、ゲノムＤＮＡクローンのライブラリーを含む請求項１８記載の方法。
【請求項２１】
Ｃｏｉｘプロモーターを準備するステップがＰＣＲTMを含む請求項１１記載の方法。
【請求項２２】
（ａ）請求項１１記載の方法による植物を作成するステップと、
（ｂ）該植物を第２の植物または該植物自体と交雑させるステップとを含むことを特徴とする子孫の生産方法。
【請求項２３】
（ａ）請求項２２記載の方法により該構築物を含む子孫植物を得るステップと、
（ｂ）該植物を該植物自体または第２の植物と交雑させるステップとを含むことを特徴とする植物育種の方法。
【請求項２４】
（ａ）望ましい発現プロフィールを有するＣｏｉｘ以外の単子葉植物から第１のプロモーターを同定するステップと、
（ｂ）該第１のプロモーターに相同なＣｏｉｘプロモーターを単離するステップと、
（ｃ）選択された遺伝子に作動可能に連結した該Ｃｏｉｘプロモーターを含む発現ベクターを構築するステップと
を含むことを特徴とする単子葉植物発現ベクターを調製する方法。
【請求項２５】
該単子葉植物が、イネ、コムギ、オオムギ、ライムギ、ソルガム、オートムギおよびトウモロコシよりなる群から選択される請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
該単子葉植物が、トウモロコシである請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
該選択された遺伝子が、昆虫抵抗性遺伝子、真菌病抵抗性遺伝子、ウイルス病抵抗性遺伝子、細菌病抵抗性遺伝子、除草剤抵抗性遺伝子、穀類の組成または品質に影響する遺伝子、栄養素利用遺伝子、マイコトキシン減少遺伝子、雄性不稔遺伝子、選択マーカー遺伝子、スクリーニング可能なマーカー遺伝子、ネガティブ選択マーカー遺伝子、植物農学特性に影響を与える遺伝子、環境抵抗性遺伝子、およびストレス抵抗性遺伝子よりなる群から選択される特性をコードする請求項２４記載の方法。
【請求項２８】
該単子葉プロモーターが、ガンマゼイン、オレオシンｏｌｅ１６、グロブリン１、アクチン１、アクチンｃ１、スクロースシンテターゼ、ＩＮＯＰＳ、ＥＭＢ５、グロブリン２、ｂ−３２、ＡＤＰＧ−ピロホスホリラーゼ、Ｌｔｐ１、Ｌｔｐ２、オレオシンｏｌｅ１７、オレオシンｏｌｅ１８、アクチン２、花粉特異的タンパク質、花粉特異的ペクテートリアーゼ、葯特異的タンパク質、葯特異的遺伝子ＲＴＳ２、花粉特異的遺伝子、タペータム特異的遺伝子、タペータム特異的遺伝子ＲＡＢ２４、アンスラニレートシンターゼアルファサブユニット、アルファゼイン、アンスラニレートシンターゼベータサブユニット
、ジヒドロジピコリネートシンターゼ、Ｔｈｉ１、アルコールデヒドロゲナーゼ、ｃａｂ結合タンパク質、Ｈ３Ｃ４、ＲＵＢＩＳＣＯ ＳＳ澱粉分岐酵素、ＡＣＣａｓｅ、アクチン３、アクチン７、調節タンパク質ＧＦ’１４−１２、リボソームタンパク質Ｌ９、セルロース生合成酵素、Ｓ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインヒドロラーゼ、スーパーオキシドジスムターゼ、Ｃキナーゼ受容体、ホスホグリセレートムターゼ、根特異的ＲＣｃ３ ｍＲＮＡ、グルコース−６リン酸イソメラーゼ、ピロホスフェート−フラクトース６−リン酸ホスホトランスフェラーゼ、ユビキチン、ベータ−ケトアシル−ＡＣＰシンターゼ、３３ｋＤａ光系ＩＩ、酸素発生タンパク質、６９ｋＤａ空胞ＡＴＰａｓｅサブユニット、メタロチオネイン様タンパク質、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、Ａ
ＢＡおよび成熟誘導様タンパク質、フェニルアラントインアンモニアリアーゼ、アデノシントリホスファターゼＳ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインヒドロラーゼ、αチューブリン、ｃａｂ、ＰＥＰＣａｓｅ、Ｒ、レクチン、集光性複合体、熱ショックタンパク質、カルコンシンターゼ、ゼイン、グロブリン１、ＡＢＡ、オーキシン−結合タンパク質、ＵＤＰグルコースフラボノイドグリコシル−トランスフェラーゼ遺伝子、ＭＰＩ、アクチン、オペク２、ｂ７０、およびオレオシンよりなる群から選択される遺伝子である請求項２４記載の方法。
【請求項２９】
該同定するステップが、該単子葉植物遺伝子からのＤＮＡまたはそのフランキング配列を、ＣｏｉｘからのＤＮＡにハイブリダイゼーションさせることを含む請求項２８記載の方法。
【請求項３０】
Ｃｏｉｘからの該ＤＮＡが、ゲノムＤＮＡクローンのライブラリーを含む請求項２９記載の方法。
【請求項３１】
Ｃｏｉｘプロモーターを同定する該ステップが、ＰＣＲTMを含む請求項２８記載の方法。
【請求項３２】
配列番号８の核酸配列から単離可能な単離されたガンマコイキシンプロモーター。
【請求項３３】
配列番号８の約８０ないし約８９４の連続ヌクレオチドを含む単離された核酸配列。
【請求項３４】
配列番号８の約２２２ないし約８９４の連結ヌクレオチドを含む請求項３３記載の単離された核酸配列。
【請求項３５】
配列番号１８の核酸配列を含む請求項３４記載の単離された核酸配列。
【請求項３６】
配列番号８の核酸配列の約４１２ないし約８９４の連続ヌクレオチドを含む請求項３５記載の単離された核酸配列。
【請求項３７】
配列番号１９の核酸配列を含む請求項３６記載の単離された核酸配列。
【請求項３８】
配列番号１１の核酸配列から単離可能な単離されたガンマコイキシンターミネーター。
【請求項３９】
配列番号１１の核酸配列の約８０ないし約４１２の連続ヌクレオチドを含む核酸配列。
【請求項４０】
配列番号１１の核酸配列の約２００ないし約４１２の連続ヌクレオチドを含む請求項３９記載の核酸配列。
【請求項４１】
配列番号１１の約３２５ないし約４１２の連続ヌクレオチドを含む請求項４０記載の核酸配列。
【請求項４２】
配列番号１１の核酸配列を含む請求項４１記載の核酸配列。
【請求項４３】
配列番号１７の核酸配列から単離可能なＣｏｉｘオレオシン３ターミネーター。
【請求項４４】
配列番号１７の核酸配列の約５０ないし約３７７の連続ヌクレオチドを含む単離された核酸配列。
【請求項４５】
核酸配列配列番号１７の約１２０ないし約３７７の連続ヌクレオチドを含む請求項４４記載の単離された核酸配列。
【請求項４６】
核酸配列配列番号１７の約２２０ないし約３７７の連続ヌクレオチドを含む請求項４５記載の単離された核酸配列。
【請求項４７】
核酸配列配列番号１７の約３００ないし約３７７の連続ヌクレオチドを含む請求項４６記載の単離された核酸配列。
【請求項４８】
核酸配列配列番号１７を含む請求項４７記載の単離された核酸配列。
【請求項４９】
ガンマコイキシンプロモーターを含む選択されたＤＮＡを含む稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項５０】
該プロモーターが、請求項３２記載の核酸配列、請求項３３記載の核酸配列、請求項３４記載の核酸配列、請求項３５記載の核酸配列、請求項３６記載の核酸配列を含む請求項４９記載の植物。
【請求項５１】
該プロモーターが、昆虫抵抗性遺伝子、細菌病抵抗性遺伝子、除草剤抵抗性遺伝子、穀類の組成または品質に影響する遺伝子、栄養素利用遺伝子、マイコトキシン減少遺伝子、雄性不稔遺伝子、選択マーカー遺伝子、スクリーニング可能なマーカー遺伝子、ネガティブ選択マーカー遺伝子、植物農学特性に影響を与える遺伝子、環境抵抗性遺伝子、およびストレス抵抗性遺伝子よりなる群から選択される外因性遺伝子に作動可能に連結した請求項５０記載の植物。
【請求項５２】
該ガンマコイキシン遺伝子に対して天然でないプロモーターに作動可能に連結したガンマコイキシンをコードする遺伝子を含む選択されたＤＮＡを含む稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項５３】
ガンマコイキシンをコードする該遺伝子が、配列番号１６の核酸配列によってコードされたポリペプチドをコードする請求項５２記載の稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項５４】
ガンマコイキシンターミネーターを含む選択されたＤＮＡを含む稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項５５】
該ガンマコイキシンターミネーターが、請求項３９記載の核酸配列、請求項４０記載の核酸配列、請求項４１記載の核酸配列、および請求項４２記載の核酸配列よりなる群から選択される核酸配列を含む請求項５４記載の稔性トランスジェニック植物。
【請求項５６】
Ｃｏｉｘオレオシン３ターミネーターを含む選択されたＤＮＡを含む稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項５７】
該Ｃｏｉｘオレオシン３ターミネーターが、請求項４４記載の核酸配列、請求項４５記載の核酸配列、請求項４６記載の核酸配列、請求項４７記載の核酸配列および請求項４８記載の核酸配列よりなる群から選択される核酸配列を含む請求項５６記載の稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項５８】
該子孫植物が、該選択されたＤＮＡを含む請求項４９、５２、５４または５６記載の植物のいずれかの世代の子孫植物。
【請求項５９】
該植物が、イネ、コムギ、オオムギ、ライムギ、ソルガムおよびトウモロコシよりなる群から選択される単子葉植物である請求項４９、５２、５４または５６記載の稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項６０】
該単子葉植物が、トウモロコシである請求項５９記載の稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項６１】
該植物が、タバコ、トマト、ジャガイモ、大豆および綿よりなる群から選択される双子葉植物である請求項４９、５２、５４または５６記載の稔性を有するトランスジェニック植物。
【請求項６２】
請求項４９、５２、５４または５６記載の稔性を有するトランスジェニック植物またはそのトランスジェニック子孫植物を、その植物自体または第２の植物と交雑させることを特徴とする植物育種の方法。
【請求項６３】
オレオシンｏｌｅ１６、グロブリン１、アクチン１、アクチンｃ１、スクロースシンテターゼ、ＩＮＯＰＳ、ＥＭＢ５、グロブリン２、ｂ−３２、ＡＤＰＧ−ピロホスホリラーゼ、Ｌｔｐ１、Ｌｔｐ２、オレオシンｏｌｅ１７、オレオシンｏｌｅ１８、アクチン２、花粉特異的タンパク質、花粉特異的ペクテートリアーゼ、葯特異的タンパク質、葯特異的遺伝子ＲＴＳ２、花粉特異的遺伝子、タペータム特異的遺伝子、タペータム特異的遺伝子ＲＡＢ２４、アンスラニレートシンターゼアルファサブユニット、アルファゼイン、アンスラニレートシンターゼベータサブユニット、ジヒドロジピコリネートシンターゼ、Ｔｈｉ１、アルコールデヒドロゲナーゼ、ｃａｂ結合タンパク質、Ｈ３Ｃ４、ＲＵＢＩＳＣＯ ＳＳ澱粉分岐酵素、ＡＣＣａｓｅ、アクチン３、アクチン７、調節タンパク質ＧＦ’１４−１２、リボソームタンパク質Ｌ９、セルロース生合成酵素、Ｓ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインヒドロラーゼ、スーパーオキシドジスムターゼ、Ｃキナーゼ受容体、ホスホグリセレートムターゼ、根特異的ＲＣｃ３ ｍＲＮＡ、グルコース−６リン酸イソメラーゼ、ピロホスフェート−フラクトース６−リン酸ホスホトランスフェラーゼ、ユビキチン、ベータ−ケトアシル−ＡＣＰシンターゼ、３３ｋＤａ光系ＩＩ、酸素発生タンパク質、６９ｋＤａ空胞ＡＴＰａｓｅサブユニット、メタロチオネイン様タンパク質、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、ＡＢＡおよび成熟誘導様タンパク質、フェニルアラントインアンモニアリアーゼ、アデノシントリホスファターゼＳ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインヒドロラーゼ、αチューブリン、ｃａｂ、ＰＥＰＣａｓｅ、Ｒ、レクチン、集光性複合体、熱ショックタンパク質、カルコンシンター
ゼ、ゼイン、グロブリン１、ＡＢＡ、オーキシン−結合タンパク質、ＵＤＰグルコースフラボノイドグリコシル−トランスフェラーゼ遺伝子、ＭＰＩ、オレオシン、アクチン、オペク２およびｂ７０よりなる群から選択されるＣｏｉｘ遺伝子をコードする単離された核酸配列。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８−１】
【図８−２】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８−１】
【図８−２】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【公開番号】特開２０１１−１０１６５３（Ｐ２０１１−１０１６５３Ａ）
【公開日】平成２３年５月２６日（２０１１．５．２６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−２９１３３５（Ｐ２０１０−２９１３３５）
【出願日】平成２２年１２月２７日（２０１０．１２．２７）
【分割の表示】特願２０００−５４８４５０（Ｐ２０００−５４８４５０）の分割
【原出願日】平成１１年５月１４日（１９９９．５．１４）
【出願人】（３９８０６１６２５）デカルブ・ジェネティクス・コーポレイション (1)
【氏名又は名称原語表記】ＤＥＫＡＬＢ ＧＥＮＥＴＩＣＳ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年５月２６日（２０１１．５．２６）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年１２月２７日（２０１０．１２．２７）
【分割の表示】特願２０００−５４８４５０（Ｐ２０００−５４８４５０）の分割
【原出願日】平成１１年５月１４日（１９９９．５．１４）
【出願人】（３９８０６１６２５）デカルブ・ジェネティクス・コーポレイション (1)
【氏名又は名称原語表記】ＤＥＫＡＬＢ ＧＥＮＥＴＩＣＳ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ
【Ｆターム（参考）】
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